TEMA 2 - ESPECTROFOTOMETRA UV-VISIBLE

1) Definicin y fundamentos:
La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometra ultravioleta-visible
(UV/VIS) es una espectroscopia (estudio de la interaccin entre la radiacin
electromagntica y la materia) de fotones y una espectrofotometra. Utiliza
radiacin electromagntica (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV)
e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagntico. La radiacin absorbida
por las molculas desde esta regin del espectro provoca transiciones electrnicas
que pueden ser cuantificadas.

Todas las sustancias pueden absorber energa radiante. La absorcin de las

radiaciones UV, visibles e IR depende de la estructura de las molculas, y es
caracterstica para cada sustancia qumica. El color de las sustancias se debe a que
absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y slo
dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida.
Esta espectrofotometra utiliza radiaciones del campo UV de 80 a 400 nm,
principalmente de 200 a 400 nm (UV cercano) y de luz visible de 400 a 800 nm,
por lo que es de gran utilidad para caracterizar las soluciones en la regin
ultravioleta-visible del espectro. Se rige por una ley muy importante: la ecuacin de
Beer-Lambert.

1.1. Fuentes de radiacin:

Lmparas descarga de Deuterio e Hidrgeno. La excitacin elctrica a presin
reducida de estos elementos genera una radiacin continua en la banda espectral
correspondiente al UV
Lmparas de filamentos de Tungsteno. Origina radiacin de la regin visible e
infrarrojo cercano del espectro entre 350-2.500nm
Lmparas de arco de Xenn. La excitacin elctrica de una atmsfera de Xenn
genera una radiacin continua en la banda espectral de 250 a 600 nm

2) Finalidad diagnstica:
La espectrometra UV/Visible se utiliza habitualmente en la determinacin
cuantitativa de soluciones de iones metlicos de transicin y compuestos
orgnicos muy conjugados.

Soluciones de iones metlicos de transicin

Las soluciones de iones metlicos de transicin pueden ser coloreadas (es decir,
absorben la luz visible) debido a que los electrones en los tomos de metal se
pueden excitar desde un estado electrnico a otro. El color de las soluciones de
iones metlicos se ve muy afectado por la presencia de otras especies, como algunos
aniones o ligandos.
Compuestos orgnicos
Los compuestos orgnicos, especialmente aquellos con un alto grado de tambin
absorben luz en las regiones del espectro electromagntico visible o ultravioleta.
Los disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para los
compuestos solubles en agua, o el etanol para compuestos orgnicos solubles. Los
disolventes orgnicos pueden tener una significativa absorcin de UV, por lo que no
todos los disolventes son adecuados para su uso en espectrometra UV. El etanol
absorbe muy dbilmente en la mayora de longitudes de onda. La polaridad y el pH
del disolvente pueden afectar la absorcin del espectro de un compuesto orgnico.
Aunque los complejos de transferencia de carga tambin dan lugar a colores, stos
son a menudo demasiado intensos para ser usados en mediciones cuantitativas.
El espectrofotmetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la
Cromatografa Lquida de Alta Resolucin HPLC. La presencia de un analito da
una respuesta que puede ser proporcional a la concentracin. Para resultados
precisos, la respuesta del instrumento al analito debe compararse con la respuesta a
un estndar, lo que es muy similar al uso de curvas de calibracin. La respuesta
para una concentracin particular se conoce como factor de respuesta.
3) Ventajas e inconvenientes:
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8)

Ventajas:
Rapidez
Uso fcil
Precisin extrema
Versatilidad
Eficiencia en el costo
Sensibilidad
Anlisis de superficies irregulares y materiales duros
Preparacin mnima de la muestra
- Inconvenientes:
1) En aquellas muestras que requieren disolucin es necesario que esta se
lleve a
cabo en el disolvente adecuado; y si estamos utilizando una celda de paso
fijo

es necesario asegurarse que la distancia no vare para anlisis cuantitativo.

2) Los problemas asociados con dichas celdas incluyen la aparicin de
burbujas
que dan lugar a bandas errneas.
3) Suele aparecer la banda del disolvente, pudiendo llegar a interferir.
4) Las ventanas de las clulas no estn completamente paralelas.
5) En slidos, hay problemas a la hora de tomar la misma cantidad de
muestra.