UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICA
ESPECIALIDAD LABORATORIO CLINICO Y
ANATOMIA PATOLOGICA

BIOLOGIA
CELULAR Y MOLECULAR

I CICLO

EPTM LABORATORIO
CLINICO Y
ANATOMIA

PRCTICA DE LABORATORIO
N 1 EL MTODO CIENTFICO

I.

INTRODUCCIN
El mtodo cientfico es un proceso destinado a explicar fenmenos,
establecer relaciones entre los hechos y enunciar leyes que
expliquen los fenmenos fsicos del mundo y permitan obtener, con
estos conocimientos, aplicaciones tiles al hombre. Los cientficos
emplean el mtodo cientfico como una forma planificada de
trabajar. Sus logros son acumulativos y han llevado a la Humanidad al
momento cultural actual.
En las ciencias de la salud, los avances tecnolgicos y la aplicabilidad
del mtodo cientfico han permitido una abundante produccin de
artculos cientficos (entre artculos de investigacin y revisiones
cientficas) que son la evidencia escrita y perenne de la generacin de
conocimiento en este campo.

II.

OBJETIVO
Reconocer los pasos del mtodo cientfico y las partes de un artculo cientfico.
Aprender la aplicabilidad del mtodo cientfico a las diversas ciencias,
identificando los pasos del mtodo cientfico en un artculo cientfico
seleccionado.

III.

MATERIALES
Computadoras con acceso a internet
Proyector multimedia

IV.

PROCEDIMIENTO
Con instrucciones del docente reconocer en un artculo cientfico los
elementos del mtodo cientfico: Observacin, planteamiento de la
hiptesis, experimentacin y conclusiones.

V.

ACTIVIDAD EVALUADA
El alumno debe discernir los elementos del mtodo cientfico en un
artculo de su eleccin.
2

PRCTICA DE LABORATORIO N 2
DETERMINACIN DE pH DE FLUIDOS
BIOLGICOS Y CAPACIDAD TAMPN DEL
PLASMA SANGUNEO
I.

INTRODUCCIN
El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una disolucin. En
disolucin acuosa, la escala de pH vara, tpicamente, de 0 a 14. Son
cidas las disoluciones con pH menores que 7 y alcalinas las de pH
superiores a 7.
Existen varios mtodos diferentes para medir el pH. Uno de estos es
usando un trozo de papel indicador del pH. Cuando se introduce el
papel en una solucin, cambiar de color. Cada color diferente indica un
valor de pH diferente. Este mtodo no es muy preciso y no es apropiado
para determinar valores de pH exactos.

II.

OBJETIVOS

III.

Conocer y entender el concepto de pH.

Conocer, entender y aplicar la tcnica de medicin de pH utilizando tiras
indicadoras.
Realizar mediciones de pH utilizando como muestra fluidos
biolgicos y que pueda determinar la capacidad tampn del plasma
sanguneo.
MATERIALES

Alumno
Orina
Saliva
Plasma sanguneo
Guantes

IV.

Laboratorio
Tubos de ensayo de
13x100mm
Vasos de precipitacin
Pipetas (graduadas y
volumtricas)
Gradilla
Solucin de NaOH al 0.05%
Fenolftalena
Agua destilada

PROCEDIMIENTOS
a. Medicin de pH
1. Homogenizar el fluido, realizando movimientos circulares del
envase, sobre la mesa.
2. Introducir las tiras indicadoras de pH en la muestra biolgica.

3. Tomar nota de las mediciones de pH de cada muestra.

4. Reconocer si la muestra es un cido o base.

b.Capacidad tampn del plasma humano

1. Con la ayuda del personal tcnico de laboratorio obtener
aproximadamente 5 mL de plasma humano citratado.
2. Disponer en una gradilla tres tubos de ensayo de 13x100
mm y seguir las indicaciones de la Tabla 1.
Tabla1: Volmenes de plasma, agua destilada e indicador de pH.
Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Plasma
------1.5 mL
3 mL
Agua destilada 3 mL
1.5 mL
---------Indicador de
2 gotas
2 gotas
2 gotas
pH
El indicador de pH recomendado es Fenolftalena.
3. Con la ayuda de una pipeta de 1mL agregar gota a gota NaOH al
0.05% hasta que se vea un cambio de coloracin en los tubos.
4. Anotar el nmero de gotas por cada tubo, necesarios para producir
el cambio de coloracin.
VI.

ACTIVIDAD EVALUADA
Elaborar un informe con los resultados obtenidos, comparar lo
obtenido en clase con los valores tericos de pH.

PRCTICA DE LABORATORIO N 3
RECONOCIMIENTO DE
CARBOHIDRATOS Y LPIDOS A
PARTIR FUENTES BIOLGICAS
I.

INTRODUCCIN
Las clulas se encuentran organizadas por macromolculas biolgicas
con caractersticas especficas que van a formar estructuras dinmicas
y compartimientos especializados, as tenemos que los lpidos van
formar parte de las membranas celulares, las protenas ensamblan al
citoesqueleto, los azcares forman parte de receptores de
reconocimiento a componente del glicocalix y por ltimo los cidos
nucleicos poseen una funcin altamente especializada que es la de
albergar la informacin gentica de toda clula.
Los carbohidratos son sustancias naturales compuestas de carbono,
hidrgeno y oxgeno. Antiguamente se les conoca como hidratos de
carbono. Estos componentes se clasifican de acuerdo a su grupo
funcional, numero de carbonos y orientacin. La funcin de los
azcares no consiste nicamente en producir o almacenar energa.
Tambin se los utiliza como sostn mecnico. La molcula orgnica
ms abundante en la Tierra la celulosa, forma parte de las paredes
de las clulas vegetales y est compuesta de unidades de glucosa.
Los carbohidratos forman parte de las protenas de membranas,
originando glucoprotenas, que intervienen en el reconocimiento celular.
Los lpidos son un grupo heterogneo de sustancias orgnicas, que se
caracterizan por ser insolubles en agua y solubles en solventes
orgnicos (ter, ter de petrleo, acetona, CHCl3, etc.). Son esenciales
en la estructura celular y constituyen una reserva energtica en los
animales.
Existen muchas pruebas cuantitativas y cualitativas que pueden
identificar la presencia de carbohidratos y lpidos, a continuacin se
ensayaran algunas de ellas.

II. OBJETIVOS
Reconocer la presencia de carbohidratos y lpidos en
elementos biolgicos naturales y/o procesados.
III. MATERIALES

Alumno
Uvas
Una Papa
Una Bebida Light
Una bebida
energizante
Marcador

Laboratorio
Aceite
Solucin de Lugol
Sudam III
cido sulfrico
concentrado
Reactivo de Molish

Bsturi
Hojas de bsturi
Tubos de 13x100
Tubos de 16x150
Pipetas de plstico
Morteros

IV. PROCEDIMIENTOS
4.1 Determinacin General de Glcidos:
Los Glcidos o Hidratos de carbono por accin deshidratante del cido
sulfrico originan compuestos derivados del furfural, los que en
presencia del alfa-naftol presente en el Reactivo de Molish, formarn
un compuesto coloreado.
Preparacin:
Con la ayuda del mortero obtener zumo de uvas
Con un marcador colocar una inicial o dos iniciales a cada tubo de
ensayo de 13x100 mm vaco: A, U, BL o BE.
Colocar en los diferentes tubos marcados: 1 mL de agua destilada, 1 mL
de zumo de uvas, 1 mL de la bebida Light o 1mL de la bebida
energizante.
Adicionar a cada tubo una (1) gota del Reactivo de Molish y agitar los tubos.
Con el tubo inclinado y sobre la mesa de trabajo, agregar lentamente por
la pared del tubo, sin agitar, 1 ml. de cido sulfrico concentrado.
Manteniendo el tubo inclinado esperar 30 segundos.
Con cuidado colocar el tubo en posicin vertical sobre
la gradilla. NO AGITAR LOS TUBOS.
Observar si hay formacin de anillo morado.
4.2 Determinacin de Almidn:
El yodo del Lugol es absorbido por el almidn y forma con l compuestos
complejos de color azul negruzco (yoduro de almidn).
Preparacin:
1.Colocar 2 ml. de zumo de papa en un tubo de 16x150 mm y 2 mL de agua en
otro.
2.Adicionar 3 gotas de Lugol y agitar.
3.Observar la formacin de color (azul negro si es positivo)
4.3 Determinacin de Lpidos: Solubilidad del Sudam III

El Sudam III es un compuesto coloreado que es ms soluble en los lpidos

que en el alcohol, al solubilizarse en los lpidos produce una coloracin
rosada.

Preparacin:
1.Colocar 2 mL. de aceite comestible en un tubo de 16x150 mm.
2.Adicionar 2 ml. de Sudam III
3.Observar la coloracin producida.
4.La formacin de una coloracin rosada indica que la prueba es positiva.
V. ACTIVIDAD EVALUADA
Realizar el informe con los resultados obtenidos dando las
conclusiones respectivas, entregar el informe al docente de prctica.

PRCTICA DE LABORATORIO N4
RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS Y DEMOSTRACIN
EXPERIMENTAL DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA. EXTRACCIN
DE ACIDOS NUCLEICOS

I.

INTRODUCCIN
Las protenas son macromolculas compuestas de aminocidos
unidos por enlaces peptdicos. Estos componentes desempean un
papel fundamental para la vida y osn las biomolculas ms verstiles y
diversas. Realizan funciones diferentes como: estructural,
inmunolgica, enzimtica, contrctil, homeosttica, transduccin de
seales y protectora. A un grupo de las protenas las caracteriza el
participar en reacciones bioqumicas y se les conoce con el nombre de
enzimas. Las enzimas son, en su mayora, protenas catalizadoras que
permiten acelerar reacciones bioqumicas dentro de la clula que por si
solas tardaran muchsimo tiempo en la transformacin de las
macromolculas necesarias
para
los procesos de catabolismo y metabolismo. Se estima que en el
ambiente celular se dan 10 000 reacciones enzimticas diarias que
permiten mantener la homeostasis celular.
El mecanismo de accin enzimtica se basa en los siguientes pasos: (1)
unin de la enzima con sus sustrato, (2) formacin del complejo enzima
sustrato, (3) liberacin de los productos de la reaccin enzimtica.
Una peculiaridad de las reacciones enzimticas radica en que las
enzimas no se modifican, es decir su cantidad es constate al inicio y final
de la reaccin.
Al ser protenas, las enzimas tambin estn sujetas a los fenmenos de
desnaturalizacin por lo que los cambios bruscos de pH y de
temperatura pueden afectar la actividad enzimtica.
Todas las clulas contienen ADN sin embargo esta molcula tan
importante, en eucariotas, se encuentra protegida por membranas
(nuclear y citoplasmtica). Es as, que al intentar extraer ADN
necesitamos romper estas barreras utilizando medios apropiados, como
detergentes, enzimas, homogenizacin o sonicacin.

II.

OBJETIVOS

 Reconocer la presencia de protenas a partir de fuentes

biolgicas siguiendo los protocolos establecidos
Comprobar la actividad enzimtica de fuentes biolgicas
Extraer cidos nucleicos a partir de una muestra biolgica

III. MATERIALES
Alumno
Saliva (tomado en
clase)
Fresas
Un huevo

Laboratorio
Morteros con piln
Tubos de prueba de 16 x150
Gradilla
Pipetas Pasteur
Beaker de 50 ml
Placa de aglutinacin (Placa
excavada)
Gasa
Embudo
Bagueta
Mondadientes
Hidrxido de sodio al 40%
Sulfato de cobre al 1%
Almidn 1%
Lugol
Etanol helado
Solucin de lisis (EDTA 0.1
M, SDS al 10%, NaCl al 1%)

IV. PROCEDIMIENTOS
4.1 Determinacin de protenas: Prueba de Biuret
Los compuestos que contienen dos o ms enlaces peptdicos forman un
complejo con las sales de cobre en un medio fuertemente alcalino,
dando un color prpura o violeta.
Preparacin:
1.Marcar dos tubos de 13 x 100 mm con las letras CH y A, colocar 2 mL
de la solucin de solucin Clara de huevo al 10% o 2 mL de agua
destilada en cada tubo.
2.Agregar 2 ml. de la solucin de Hidrxido de sodio al 40% a cada tubo y mezclar.
3.Aadir 2 gotas de Sulfato de cobre al 1%.
4.Observar la coloracin producida.
4.2 Actividad Enzimtica
1. .Mediante estmulo de masticacin, obtener aproximadamente 3 mL de saliva,
Actividad de la alfa-amilasa salival
1. Colocar en las placas de aglutinacin 8 gotas de almidn en 3 pocillos
2. En un pocillo colocar una gota de agua destilada, en el segundo
una gota de saliva y en el tercero dos gotas

3. Despus de 30 segundos agregar una gota de lugol y evidenciar si

hay formacin de coloracin azul.

4.3 Extraccin de cidos nucleicos

1. Con la ayuda de un mortero y piln, triturar dos fresas grandes
hasta obtener una pasta.
2. En el mismo mortero, agregar 5 ml de solucin de lisis. Esperar 5 minutos.
3. Filtrar la mezcla obtenida a travs de gasa y con la ayuda de un
embudo, hacia dos tubos de ensayo.
4. A cada tubo de ensayo agregarle Etanol fro lentamente y por la pared del tubo.
5. Observar la aparicin de tres fases.
6. Con la ayuda de una bagueta retirar el ADN extrado.
V.

ACTIVIDAD EVALUADA
Elaborar un informe donde se fundamenta los resultados obtenidos y
presentarlo al docente.

VI. ANEXOS

E+SE-SE+P
Figura 1. Esquema de una reaccin
enzimtica.

1
0

PRCTICA DE
LABORATORIO N5
MICROSCOPIA
I.

INTRODUCCIN
En un principio el proceso de la Biologa fue lento debido a la
complejidad del ser viviente y lo limitado de los avances
tecnolgicos. Es en el siglo XVII con el aporte de
A.VAN LEEWENHOOK (1673-1723), quien us por primera vez el
microscopio simple para el estudio de lo que llam animculus,
es que se obtiene un avance decisivo en este campo. Con el
perfeccionamiento del microscopio compuesto y la aplicacin del
microscopio electrnico en nuestros das, es posible la observacin
de la ultraestructura para la compresin de los fenmenos
biolgicos.

II.

OBJETIVOS
Conocer la constitucin y funcionamiento del microscopio compuesto.
Manejar el microscopio y entender la importancia de su uso en la
formacin de su carrera.
Realizar preparaciones para observarlas a travs del microscopio.
Diferenciar las partes pticas y mecnicas del microscopio ptico.

III.

MATERIALES
Alumno
Recorte de peridico
Hebras de lana
de dos colores
encendidos
distintos
Tijera
Colores

IV.

Laboratorio
Microscopio compuesto
Lminas portaobjetos
Lminas cubreobjetos
(laminillas)
Papel lente
Aceite de inmersin (aceite de
cedro)
Goteros

PROCEDIMIENTO
3.1 Reconocimiento del microscopio
1
1

a) Partes Mecnica
- Pie o base
- Brazo
- Tubo ptico: mono
o binoculares

1
2

b) Parte ptica
- Oculares (10X)
- Objetivos (4X, 10X,
40X, 100X)
- Condensador

Revlver
Tornillo
macromtrico
Tornillo
micromtrico.
Platina
Pinzas.

Diafragma
Espejo/ Lmpara

3.2 Preparacin de lminas

a. Con la ayuda de la tijera corte una letra e del recorte periodstico.
b. Tome una lmina portaobjeto por slo por los bordes y lmpiela bien con
un pedazo de papel lente.
c. Con un gotero vierta una gota de agua en el centro de la lmina, luego
coloque la letra e en la gota de agua teniendo presente que quede
en posicin de lectura, ponga la laminilla sobre la muestra. Haga lo
mismo con una hebra de lana.
d. A continuacin las preparaciones sern utilizadas para la
visualizacin a travs del microscopio.

3.3

Enfoque y uso del microscopio

1. Coloque el microscopio sobre la mesa, de tal manera que el o los

lentes oculares queden frente a usted. Limpie los lentes objetivos,
lente del condensador y foco con papel lente.
2. Con mucho cuidado conecte el cable en el tomacorriente de su
respectiva mesa, encienda el interruptor de la lmpara y gire la
perilla de intensidad en tal sentido que vea que la lmpara de luz se
encienda.
3. Con la ayuda del revlver coloque el lente de menor aumento en
posicin frontal al lente del condensador ubicado en el centro de la
platina.
4. Descienda la platina girando el tornillo macromtrico.
5. Observe a travs del ocular y observe que el campo visual este
iluminado y uniforme, antes de colocar la muestra, abra y cierre el
diafragma, cercirese que la platina est descendida.
6. Coloque la lmina previamente preparada sobre la platina,
asegurndola con las pinzas y centre con las mismas de tal manera
que la muestra quede iluminada.
7. Observando a travs del ocular enfoque la muestra con la ayuda del
tornillo macromtrico. Este tornillo permite el desplazamiento de la
platina para la observacin de la muestra en el campo visual.
8. Proceda a afinar la focalizacin de la muestra con ayuda del tornillo
micromtrico

9. Para amplificar la imagen, gire el revlver para ubicar el siguiente

objetivo en posicin, tenga presente que los aumentos son
graduales. El cambio de objetivo o de preparacin exige un nuevo
control del diafragma.

3.4 Aumento del microscopio

Para saber cunto de aumento posee un microscopio, basta multiplicar
el aumento dado por el ocular, por el aumento dado por el objetivo.
Ejemplo: Si el ocular es de 10X; el objetivo 43X,
entonces tendremos: 10 x 43= 430 aumentos
3.5 Cuidados que se deben tener con el microscopio.
a) Mantenga el microscopio limpio y en el lugar adecuado.
b) Transporte el microscopio, con la mano derecha agarrando el brazo y la
mano izquierda debajo de la base, nunca por los tornillos macromtricos
ni por la platina.
c) Para focalizar la preparacin, mueva la platina siempre de abajo hacia arriba.
d) No guarde reactivos voltiles en el mismo lugar donde se guarda el microscopio.
e) No desmonte los lentes oculares ni los objetivos.
f) Para limpiar los oculares y objetivos use siempre el papel lente, no use
pauelos ni otro tipo de papel (higinico o toalla).
V. ACTIVIDAD EVALUADA
Elabore un informe donde estn los dibujos de las muestras del recorte de
peridico, lana y artrpodo a 40X 100X y 400X e incluya la descripcin
realizada en el tem 1.

PRCTICA DE LABORATORIO N 6
RECONOCIMIENTO DE LAS CLULAS PROCARIOTAS Y
EUCARIOTAS
I.

INTRODUCCIN
En 1939, en base a observaciones realizadas por los cientficos alemanes
Schleiden y Schwan, se plasm la teora celular, la cual produjo un
cambio radical en las Ciencias Biolgicas. Esta teora postula que los
cuerpos de todos los animales y vegetales estn formados de clulas
y que solo pueden aparecer nuevas clulas por divisin de las clulas
pre-existentes. De ah que los organismos por muy sencillos que sean
estn constituidos por unidades vivas denominadas clulas. Existen
dos grandes grupos de clulas la procariota y la eucariota.
La principal caracterstica de la clula procariota es que carece de
ncleo celular. Las bacterias, los organismos procariotas ms
representativos, comprenden por una parte, especies de importancia
mdica puesto que producen una serie de infecciones y padecimientos
en el hombre y en los animales pero, por otra parte, una gran
mayora representa beneficios para la agricultura, la industria y la salud
humana y animal.
La clula eucariota es ms compleja que la clula procariota y contiene, a
diferencia de esta ltima, ncleo celular. Los organismos ms simples
(protozoarios) estn constituidos de una sola clula eucariota mientras
que los ms complejos o multicelulares estn formados por un gran
nmero de clulas eucariota que se hallan organizadas en tejidos,
rganos y sistemas.
Sea que se trate de una clula procariota o eucariota estas, a
observacin directa del microscopio, son difciles de observar puesto
que estructuras que dejan pasar la luz por lo que se requiere en empleo
de colorantes que permitan su apreciacin.

II.

OBJETIVOS
Realizar tinciones para la observacin de clulas de procariotas y eucariotas
Diferenciar a la clula procariota y eucariota
Observar y caracterizar a las clulas eucariotas de tipo fngico, animal y
vegetal

III. MATERIALES
Laboratorio
Microscopios
Papel lente
Laminas con muestras
preparadas

Alumno
Una cebolla
Chicha de
jora

de hongos
Mechero de alcohol
Mango de bistur
Hoja de bistur
Palitos mondadientes
Lamina portaobjetos
Lamina cubreobjeto
Depsito para eliminar
lminas y laminillas.
Azul de metileno
Aceite de inmersin
Cristal Violeta
Lugol
Alcohol : acetona (1:1)
Safranina

IV. PROCEDIMIENTO
Observacin de clulas procariotas
Mediante la Coloracin de Gram
1. Colocar una gota de solucin fisiolgica sobre una lmina. Con el
mondadientes obtener una muestra de sarro dental y esparcir en
espiral en la gota de solucin fisiolgica.
2. Secar al mechero y una vez seco cubrir con cristal violeta por 1
minuto. Enjuagar con agua de cao, colocando la lmina inclinada.
3. Cubrir la muestra con lugol por 1 min. Enjuagar con agua de
cao, colocando la lmina inclinada.
4. Cubrir con alcohol-acetona esperar 30 segundos. Enjuagar con agua de
cao.
5. Cubrir la muestra con safranina por 1 min. Enjuagar con agua de cao.
6. Secar la muestra preparada por accin del calor o al medio ambiente.
7. Observar en el microscopio, comenzando con el objetivo de 4X
hasta el lente de 100X. Una vez enfocado con el objetivo de 100X
utilizar aceite de inmersin
Observacin de clulas eucariotas
Clula animal (Epitelio bucal)
1. Con un hisopo limpio extraiga suavemente la mucosidad de la cavidad bucal.
2. Deposite la mucosidad extrada en el centro de una lmina
portaobjetos y extindalo con un frotis.
3. Agregue dos gotas de azul de metileno y espere 5 minutos.
4. Elimine el exceso de colorante utilizando agua destilada y
coloque una laminilla cubreobjetos.

5. Observe con el objetivo de 4X, 10X, 40X y 100X aadiendo

previamente aceite de inmersin.

6. Ajuste el diafragma para incrementar el contraste.

7. Observar y esquematizar. Definir estructuras visibles y las
caractersticas visibles de una clula animal.
Clula vegetal (Catafilo de cebolla: Allium cepa)
1. Separar una de las capas del bulbo de cebolla. Con ayuda de una
pinza desprenda la membrana que cubre la parte interna de la
cebolla (catafilo).
2. Extender la membrana sobre una lmina portaobjetos y agregar
una gota de lugol. Cuidadosamente colocar una laminilla
cubreobjeto.
3. Observe con el objetivo de 4X, 10X y 40X.
4. Ajuste el diafragma para incrementar el contraste.
8. Observar y esquematizar. Definir estructuras visibles y las
caractersticas visibles de una clula vegetal.
Clula fngica (Aspergillus, Penicillum y Saccharomyces cereviseae)
Enfocar las lminas con muestras preparadas hongos y observar con
lente de 10X, 40X y 100X y aceite de inmersin.
Hacer una preparacin con la chicha de jora. Colocar una gota de
chicha de jora en una lmina y cubrir con una laminilla. Observar con el
lente de 10X y 40X.

V.

ACTIVIDAD EVALUADA
Realizar los esquemas de cada uno de las muestras y con la
magnificacin con las cuales fueron observadas indicando: las
muestras, coloracin empleada (si corresponde) y las principales
estructuras visualizadas en cada tipo celular.

PRCTICA DE LABORATORIO N7
OSMOSIS
I.

INTRODUCCIN
El agua es capaz de fluir a travs de la membrana plasmtica por un
proceso que se denomina smosis. La smosis es definida como el
paso de agua a travs de una membrana semipermeable de una
regin con menor concentracin de soluto a una de mayor
concentracin de soluto. Este proceso puede ser evidenciado tanto en
clulas animales como vegetales utilizando el microscopio ptico y
soluciones hipotnicas (con menor concentracin de soluto en
comparacin con la clula), hipertnicas (con mayor concentracin de
soluto en comparacin con la clula) e isotnicas (igual concentracin de
soluto en comparacin con la clula).
A pesar de que agua es levemente permeable a travs de la
membrana celular, muchas clulas son ms permeables al agua de lo
que puede explicarse con la difusin simple a travs de la bicapa
lipdica. Esto se explica con la existencia de unas protenas
transmembranales denominadas acuaporinas, las que permiten el
desplazamiento pasivo del agua de un lado de la membrana
plasmtica al otro. As, las acuaporinas establecen unos orificios en la
membrana plasmticas a travs de los cuales el agua ingresa o sale de la
clula. Las acuaporinas son muy prominentes en clulas como las del
tbulo renal o las races vegetales, donde el paso del agua tiene una
funcin crucial en las actividades fisiolgicas del tejido.

II.

OBJETIVOS
Observar los fenmenos de smosis y su efecto para la clula animal y
vegetal

III. MATERIALES
Laboratorio

Alumno

Microscopio compuesto
Papel lente
Pipetas Pasteur
Lminas portaobjeto
Laminillas cubreobjeto
Mango de bistur
Hoja de bistur
Pinza de metal con punta
roma
Lancetas de puncin
Algodn

Elodea

 Alcohol yodado
Soluciones de NaCl 0.05%, 0.9% y 5%.
IV. PROCEDIMIENTO
smosis en clulas animales y vegetales
Muestra 1: glbulos rojos
1. En tres lminas portaobjetos numeradas coloque:
(1)1 gota de solucin de NaCl 0.05 %
(2)1 gota de solucin de NaCl 0.9%
(3)1 gota de solucin de NaCl 5%
2. Desinfectar el dedo anular con alcohol yodado y algodn y con
una lanceta estril punzar el dedo y dejar caer una gota pequea
de sangre sobre cada gota de solucin colocada en el paso 1.
3. Homogenizar, esperar 2 minutos y cubrir con una laminilla cubreobjeto.
4. Observar al microscopio utilizando los objetivos de 4X, 10 y
40X, y analizar el aspecto y morfologa de los glbulos rojos.
Muestra 2: Elodea sp.
1. Agregar gotas de las respectivas soluciones:
(1)Solucin de NaCl 0.05 %
(2)Solucin de NaCl 0.9%
(3)Solucin de NaCl 5%
2. Con la ayuda de una pinza colocar tres hojas tiernas de Elodea en
las tres lminas portaobjeto e incubar durante 5 minutos.
3. Cubrir las muestras con una laminilla cubreobjeto.
4. Observar al microscopio utilizando los objetivos de 4X, 10X y
40X, y analizar el aspecto y morfologa de las clulas.
V.

ACTIVIDADES EVALUADAS
Realizar un informe
con las grficas correspondiente donde se
expliquen
los fenmenos ocurridos.

EPTM LABORATORIO
CLINICO Y
ANATOMIA

VI. ANEXOS

(a) SOL. ISOTNICA (b) SOL. HIPOTNICA (c)

SOL. HIPERTNICA Figura 2. Efectos del paso de
agua en un glbulo rojo.

PRCTICA DE LABORATORIO N 8
OBSERVACIN DE ORGANELAS
CELULARES

I.

INTRODUCCIN
Los constituyentes subcelulares son compartimientos independientes
que se encuentran en relacin con el citosol, medio interno que les
provee de los sustratos necesarios que se acumulan selectivamente
para transformarse en productos que sern utilizados por la clula
eucaritica en sus actividades celulares.
Los lisosomas son organelas cuya funcin es la digestin celular;
contienen alrededor de 50 enzimas hidrolticas capaces de digerir
protenas lpidos, carbohidratos y nucletidos. Una de sus caractersticas
es el polimorfismo; los primarios tienen un dimetro aproximado de 0,4
m, unimembranosos; los secundarios resultan de la asociacin de los
primarios con las vacuolas conteniendo el material fagocitado,
aumentando sus dimensiones; los autolisosomas constituyen una caso
excepcional, ya que digieren partes celulares.
Las mitocondrias, son organelos granulares o filamentosas, formadas por
dos membranas y dos compartimientos, que constituyen enzimas y
coenzimas que trabajan de manera integrada para producir energa. Son
consideradas como verdaderos sistemas traductores de energa, en las
cuales ingresa acetil-coenzima A proveniente de la degradacin de
nutrientes, requiriendo adems como materia prima ADP, fosfato y
oxgeno; produciendo la salida de ATP, H2O y CO2.
Los cloroplastos, son organelas encontradas primordialmente en las hojas
de los vegetales, en estas, se realizan uno de los procesos ms
importantes para la vida de nuestro planeta: La fotosntesis. Este
proceso es llevado inicialmente en la membrana de los tilacoides
mediante la participacin de complejos proteicos denominados
fotosistemas.

II.

OBJETIVOS
Reconocer a las mitocondrias en el epitelio bucal
Reconocer a los lisosomas en organismos unicelulares
Reconocer a los cloroplastos en muestras vegetales.
2
0

III. MATERIALES
Laboratorio
Microscopios
Papel lente
Mango de bistur

Alumno
Elodea
Hojas de Geranio
Muestras de Agua
estancada

2
0

Hoja de bistur
Pinzas de metal con punta orma
Laminas portaobjeto
Laminillas cubreobjeto
Pipeta Pasteur
Placa Petri
Solucin Verde Janus 1/10,000
Rojo Neutro
Frascos con Lugol
Frasco con Suero Fisiolgico
Aceite de inmersin

IV. PROCEDIMIENTOS
Observacin de mitocondria en epitelio bucal:
1. Con una lmina limpia y mediante un raspado suave obtener
una muestra de la mucosa bucal,
2. Realizar un frotis extendiendo la muestra sobre otra lmina,
3. Dejar secar la lmina con la muestra al medio ambiente,
4. Cubrir la muestra con Verde Janus durante 5 minutos,
5. Eliminar el exceso de colorante y dejar secar al medio ambiente,
6. Observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x.
Observacin de lisosomas en protozoarios:
1. Realizar una preparacin con el agua estancada, colocar una
gota de agua estancada que contenga sedimento sobre una
lmina portaobjetos y cubrir con una laminilla observar hasta el
objetivo de 40X.
2. Una vez confirmada la presencia de protozoarios en el agua
estancada, traspasar con una pipeta 10 mL de agua estancada
de la zona inferior del recipiente hacia una placa Petri, agregar 5
gotas de la solucin rojo neutro por 5 minutos.
3. Ponga una gota de la incubacin en el portaobjetos,
coloque la laminilla y observe a 10X y 40X
4. Localice en el citoplasma grnulos teidos de rojo.
Observacin de cloroplastos en hojas Elodea y Geranio
1. Coja una hoja de Elodea y colquela en un portaobjeto, en la
que previamente se ha colocado una gota de agua.
2. Realice el mismo procedimiento con un filamento de geranio.
3. Cubrir cada preparado con una laminilla.
4. Examine cada uno de los preparados.
5. Identifique los cloroplastos en cada una de las muestras.
2
1

V.

ACTIVIDADES EVALUADAS
Realizar los esquemas correspondientes y describir al detalle en los
aumentos indicados. Explicar el fundamento de las coloraciones
realizadas.

PRCTICA DE LABORATORIO
N09 DEMOSTRACIN DE LA
FERMENTACIN
I.

INTRODUCCIN
La respiracin celular es el proceso mediante el cual se oxidan
molculas energticas (glucosa principalmente), empleando al oxgeno
como aceptor final de electrones, y obteniendo gran cantidad de
energa para la realizacin de las funciones celulares bsicas. Por el
contrario, la fermentacin es un proceso anaerbico que implica la
ruptura de alimentos por un proceso de degradacin qumica que no
requiere oxgeno. Los alimentos no son degradados completamente
hasta CO2 y H2O (como ocurre en la respiracin), sino hasta compuestos
intermedios tales como cido lctico (fermentacin lctica) o alcohol
(fermentacin alcohlica). Esta ruptura incompleta de los alimentos
significa que menos energa es disponible durante la fermentacin que
el liberado durante la respiracin. Ambos procesos pueden llevarse en
simultneo en las clulas, donde adems, los primeros pasos en la
ruptura de la glucosa en la respiracin, son anaerbicos.
Ciertas bacterias y hongos derivan todo o parte de su energa a partir de
la fermentacin y los productos finales son frecuentemente el alcohol
y CO2, el proceso en este caso es denominado fermentacin
alcohlica. Las levaduras y bacterias, las cuales conducen a la
fermentacin son capaces de emplear sus sistemas enzimticos para
liberar
energa
anaerbicamente
a
partir
de
carbohidratos,
particularmente almidn y azcar.

II.

OBJETIVOS
Evidenciar la actividad de fermentacin producida por organismos fngicos.

III. MATERIALES
Laboratorio
Tubos de ensayo (16 x 150 mm)
Pipetas Pasteur
Soluciones de Glucosa 2%,
Fructosa 2%,
Sacarosa 2% y
Almidn 2% Bao de

Alumno
Levadura de pan
Elodea
Plumones
marcadores
Globos #5
Cinta Skotch

IV. PROCEDIMIENTOS
Fermentacin etanlica
- En tubos de ensayo colocar los reactivos segn lo indicado en la tabla 2.

Tabla 2: Volmenes de cada reactivo a ser colocados en cada tubo de ensayo.

Tubo
1
---

Agua
destilada
Glucosa
8 mL
2%
Fructosa
--2%
Sacarosa
--2%
Almidn
--2%
Temperatur 37 C
a

Tubo 2 Tubo 3 Tubo

4
8 mL
-----

Tubo 5 Tubo 6
---

---

---

8 mL

---

---

---

---

---

8 mL

---

---

---

---

---

8 mL

---

---

---

---

---

8 mL

37 C

37 C

37 C

37 C

37 C

- Previamente se tienen que preparar una suspensin al 15% de la

levadura Saccharomyces cerevisae en agua destilada.
- Agregar dicha suspensin a los tubos 2, 3, 4, 5 y 6, cuidando que no
queden burbujas de aire, para conseguir un ambiente de anaerobiosis.
Colocar un globo en la boca de los tubos para que el sistema quede
cerrado hermticamente, sellar con cinta skotch.
- Incubar los tubos a la temperatura indicada por 1 h.
- Anotar la formacin de CO2 para cada tubo (La fermentacin se
evidenciar por la presencia de burbujas en el tubo y el globo
hinchando).
- Con cuidado retira los globos de cada tubo y olerlos. Reportar en que
tubo se evidencia olor a etanol.
V.

ACTIVIDADES EVALUADAS
Observar, graficar, comparar y discutir los resultados de los
experimentos planteados dependiendo de la fuente carbonada
utilizada.

IV.

ANEXOS

Figura 3: Degradacin de la glucosa

PRCTICA DE LABORATORIO N10

MOVIMIENTO CELULAR: POR FLAGELOS, CILIOS Y
PSEUDPODOS

I.

INTRODUCCIN
Los protozoarios son organismos eucariotas unicelulares que, al igual que
las bacterias, nos ayudan y nos perjudican. Ellos son beneficiosos para
la cadena alimentaria, dndole fertilidad al suelo y consumiendo grandes
cantidades de fitoplancton. Sin embargo, algunos protozoos nos causan
molestias: Entamoeba histolytica, provoca disentera; Trichomonas
vaginalis, vaginitis y Trypanosoma brucei, la enfermedad del sueo.
Estos organismos tienen, en su mayora, un desplazamiento
dependiente de estructuras dinmicas especializadas compuestos por
diversos tipos protenas motiles.
Se pueden diferenciar tres grandes grupos de protozoarios: aquellos
que se desplazan mediante flagelos
que pertenecen a la clase
Mastigophora, los que poseen cilios Cilophora y aquellos que se
desplazan por proyeccin de su citoplasma formando los conocidos
pseudpodos pertenecientes a la clase Sarcodina.

II.

OBJETIVOS
Verificar y comprender el movimiento de la clula de vida libre.
Observar y comprobar la existencia de estructuras para el movimiento
celular.

III. MATERIALES
Laboratorio
Microscopios
Placas Petri
Lminas portaobjetos
Laminillas cubreobjetos
Gotero o Pipeta de 1 ml.
Lugol al 4%
Verde de metilo
IV. PROCEDIMIENTOS

Alumnos
Cultivo de protozoarios
(agua estancada)

Movimiento ameboideo por seudpodos: Amoeba proteus (Clase

Sarcodina)
1. Sobre una lmina portaobjetos, con un gotero coloque una gota
del cultivo de protozoarios que contenga Amoeba, cubrirlo luego con
una laminilla cubreobjetos.
2. Dibujar las observaciones realizadas a 10x, 20x y 40x.

Movimiento flagelar por flagelos: Euglena viridis (Clase Mastigophora)

1. Sobre una lmina portaobjetos, colocar una gota de cultivo que
contenga Euglena y cubrir con una laminilla cubreobjetos.
2. Aadir despus de haber observado una gota de verde de metilo o Lugol.
3. Dibujar las observaciones realizadas a 10x, 20x y 40x.
Movimiento ciliar por cilios: Paramecium caudatum (Clase Ciliophora)
1.Sobre una lmina portaobjetos, colocar una gota de cultivo que contenga
Paramecium, y cubrirlo con una laminilla cubreobjeto.
2.Aadir despus de haber observado la muestra anterior, una gota de
verde de metilo o Lugol.
3.Dibujar las observaciones realizadas 10x, 20x y 40x.

V.

ACTIVIDADES EVALUADAS
Realizar los esquemas correspondiente e indicar las protenas que estn
involucrados en el movimiento de los organismos observados.

V.

ANEXOS

Figura 4: Estructuras presentes en Euglena

Figura 5: Estructuras presentes en Paramecium

Figura 6: Estructuras presentes en Amoeba proteus.

PRCTICA DE LABORATORIO
N11 FORMAS DE NCLEO
I.

INTRODUCCIN
La hematopoyesis es el proceso de formacin, desarrollo y maduracin
de los elementos formes de la sangre (eritrocitos, leucocitos y
plaquetas) a partir de un precursor celular comn e indiferenciado
conocido como clula madre hematopoytica multipotente.
En la mdula sea normal, se encuentran todas las clulas de la
sangre, maduras e inmaduras, de las dos estirpes celulares: linfoide y
mieloide. Por otra parte, en la sangre perifrica en condiciones
normales se hallan casi siempre clulas maduras, en tanto que en
situaciones particulares (fisiolgicas o patolgicas) es posible
observar clulas inmaduras, como en la eritroblastosis fetal, o
neoplsicas, como en las leucemias. La mdula sea en el adulto
produce alrededor de 6 billones de clulas/kg/da: 2.5 de glbulos
rojos, 2.5 de plaquetas y 1 de leucocitos.
La "estirpe mieloide", comprende a los eritrocitos, plaquetas, leucocitos
granulares
(neutrfilos, basfilos y eosinfilos) y monocitosmacrfagos. El desarrollo de tales elementos se conoce como
mielopoyesis y parte de una clula madre precursora comn. En
cambio, la "estirpe linfoide", comprende nicamente a los linfocitos,
que pueden ser de dos tipos: linfocitos B y linfocitos T (hay un tercer
tipo, los linfocitos NK). El desarrollo de estas clulas se denomina
linfopoyesis. Despus de la diferenciacin, estas clulas entran en
la sangre para desempear diversas funciones, siendo transportadas
a todo el cuerpo por el plasma, que est formado por agua y
varios elementos qumicos (protenas, hormonas, minerales, vitaminas
y anticuerpos).

II.

OBJETIVOS
Reconocer a los diferentes elementos formes de la sangre.
Conocer las funciones de los elementos formes de la sangre.

III. MATERIALES
Laboratorio
Microscopios
Lminas portaobjetos
limpias y desengrasadas
Laminillas cubreobjetos
Papel lente

Algodn
Lancetas
Alcohol isoproplico
Aceite de inmersin

 Colorantes Wright o Giemsa

Alcohol yodado
Agua destilada
IV. PROCEDIMIENTOS
Observacin de formas de ncleo
1. Desinfectar el dedo anular con alcohol yodado y algodn y con
una lanceta estril punzar el dedo y dejar caer una gota de
sangre sobre un extremo de la lmina portaobjetos.
2. Con ayuda de otra lmina portaobjeto formar un ngulo de 45 y
realizar un frotis, tratando de esparcir homogneamente la gota
de sangre sobre la superficie de la lmina.
3. Dejar secar la preparacin y proceder luego a la coloracin con Wright o
Giemsa.
4. Cubrir el frotis con colorante Wright por 1 minuto.
5. Sin eliminar el colorante agregar agua destilada y dejar actuar por 10
minutos.
6. Eliminar luego el colorante y lavar suavemente con agua de cao.
7. Dejar secar la lmina coloreada.
8. Una vez que la lmina coloreada a secado, observar al microscopio
con el objetivo de 100 X y aceite de inmersin.
V.

ACTIVIDADES EVALUADAS
Realizar un informe con los esquemas de los elementos sanguneos
observados indicando su funcin y caractersticas.

VI. ANEXOS

Figura 7. Elementos formes de la sangre

EPTM LABORATORIO
CLINICO Y
ANATOMIA

PRCTICA DE LABORATORIO
N12 EL CDIGO GENTICO
I.

INTRODUCCIN
El ADN contenido en el ncleo celular almacena toda la informacin
hereditaria bajo la forma de genes. Para que los genes se expresen
deben ser copiados bajo otra forma de cido nucleico, el ARN
mensajero, que sea capaz de llevar la informacin al citoplasma y
conectarse con los ribosomas, donde se efectuara su traduccin en la
respectiva protena. Son estas protenas las que a su vez van a
determinar las caractersticas morfolgicas y fisiolgicas que un
organismo uni o pluricelular presenta.
Teniendo en cuenta que el ADN posee 4 bases nitrogenadas distintas y
que por lo menos existen 20 aminocidos diferentes capaces de ligarse
para formar las protenas, es evidente que la traduccin est regida por
una clave. Por lo tanto, la existencia de caracteres hereditarios no es
sino la expresin de ciertas regiones del ADN regido por el cdigo
gentico, en dicho proceso consideramos los siguientes aspectos
fundamentales: a)
el ARNm (ARN mensajero) tiene los codones o
tripletes de bases, por ejemplo UUU; b) el ARNt (ARN de transferencia)
unido a un aminocido especfico lleva un anticodn que debe ser
complementario al codn, ejemplo AAA; c) el ARNr (ARN ribosomal) que
reconoce el extremo del ARNm, por donde se debe iniciar la sntesis
de protenas; d) en general la ltima letra del codn no es muy
importante para el reconocimiento del anticodn; e) una enzima
especfica une el aminocido a su respectivo ARNt. El ARNt con su
aminocido, reconoce el codn del ARNm. Por ejemplo el ARNt, que
lleva el aminocido Fenilalanina, tiene el anticodn AAA y reconocer el
codn UUU del ARNm; f) los aminocidos se ligan uno a uno a medida
que aparecen los codones formando una cadena de protenas; g) el
proceso de sntesis proteica se realiza en el citoplasma, con la
participacin de los ribosomas y diversos elementos esenciales; h) el
crecimiento de la cadena contina hasta que aparezcan codones que
indiquen terminacin.

II.

OBJETIVOS
Indicar los elementos que intervienen en la sntesis proteica
Describir el mecanismo de la sntesis de protenas
3
0

EPTM LABORATORIO
CLINICO Y
ANATOMIA
proteica.

Explicar cmo se puede interrumpir la sntesis

Explicar el cdigo gentico y como la informacin resulta en una
cadena de naturaleza cida, bsica o neutra, y si se trata de una
protena hidrofbica o hidrofilica, etc.

3
0

III. MATERIALES
Nueve naipes de cada una de las bases nitrogenadas A, G, U, C (36 naipes en
total).
Una tabla de codones con los aminocidos respectivos, que ser
utilizada por el cuarto jugador (Tabla 3).
Una baraja de 20 naipes que contengan: 1 naipe marcado con la
palabra Quimotripsina, 1 naipe marcado con la palabra Tripsina, 1
naipe marcado con la palabra Exopeptidasa, 1 naipe marcado
con la palabra Bromuro de ciangeno, 1 naipe marcado con la
palabra Bromosuccinimida y 15 naipes en blanco.
IV. PROCEDIMIENTOS
1. Vamos a formar cadenas de protenas uniendo aminocidos segn
los codones que aparezcan. El juego se inicia de la siguiente
manera:
2. Cada grupo de 5 alumnos nominar a un compaero en calidad
de Juez y ser el jugador nmero 1: los otros sern los jugadores
2,3,4 y 5. Los jugadores 2, 3 y 4 recibirn 12 naipes al azar (de la
baraja de 36 naipes mezclados al azar).
3. El jugador no. 2 arrojar una carta, el jugador no. 3 arrojar una
carta, el jugador no. 4 arrojar una carta. De esta forma se
obtendr un triplete que corresponde al codn. Por ejemplo, AUG
(codn de iniciacin).
4. El jugador No. 1 anotar en una hoja de papel el nmero de
jugada, el codn, anticodn y el aminocido.
5. El quinto jugador sacar al azar un naipe de su baraja (20 cartas en
total). Si el naipe es blanco, el juego continua, si corresponde a
los compuestos mencionados anteriormente, cumplir lo que
indica el naipe de acuerdo al Tabla 4
6. Si la cadena ha sido cortada, en la siguiente jugada deber
iniciarse otra cadena. Se continuar con la numeracin de la jugada
que prosigue.
7. Se deben realizar un total de 100 jugadas, el juego ser ganado
por el grupo que puede formar la cadena ms larga de protena.

3
1

8. Cada grupo a su vez har el anlisis de la cadena ms larga que

logro formar. (Tabla 5).

3
2

U
Fenilalanin
a
Fenilalanin
a Leucina
Leucina
Leuci
na
Leuci
na
Leuci
Isoleuci
na
Isoleuci
na
Isoleuci
Valin
a
Valin
a
Valin
a
Valin

Tabla 3: Cdigo gentico

C
A
G
Serin
Tirosina
Ciste
a
Tirosina
na
Serin
STOP
Ciste
a
STOP
na
Serin
STOP
Prolin
Histidina
Argini
a
Histidina
na
Prolin
Glutamina Argini
a
Glutamina na
Prolin
Argini
Treonin
Asparagi
Serina
a
na
Serina
Treonin
Asparagi
Argini
a
na Lisina
na
Treonin
Lisina
Argini
Alanin
Ac.
Glicin
a
Asprtico
a
Alanin
Ac.
Glicin
a
Asprtico
a
Alanin
Ac.
Glicin
a
Glutmico a
Alanin
Ac.
Glicin

U
C
A
G
U
C
A
G
U
C
A
G
U
C
A
G

Tabla 4: Accin de diversos agentes sobre la cadena proteica en crecimiento

AGENTE

Tripsina

Quimotripsina

Exopeptidasa
Bromuro de
Ciangeno
Bromo
Succinimi
da

CARACTERSTICA
Enzima proteoltica que
ataca uniones: Arg-X y
Lys-X (siendo X cualquier
aminocido
menos
prolina).
No
ataca
aminocidos terminales y
se requiere que la cadena
tenga
los menosque
5
Enzima porproteoltica
ataca uniones Trp-X, Tyr-X
y
Phe-X
(siendo
X
cualquier
aminocido,
menos prolina). No ataca
aminocidos terminales y
se requiere que la cadena
tenga por lo menos 5
Enzima que ataca al
aminocido terminal y lo
separa de la protena.

ACCION EN EL
JUEGO

Se corta la cadena

Se corta la cadena

Modifica la metionina

Se descuenta un
aminocido y
contina el juego.
Se corta la cadena

Modifica el triptfano

Se corta la cadena

Tabla 5: Algunas caractersticas de los aminocidos

Aminocido
Abreviatura
Peso
Naturaleza
Glicina
Gly,
75
Neutra hidrofilica
Alanina
Ala,
GA
89
Neutra hidrofbica
Valina
Val, V
117
Neutra hidrofbica
Leucina
Leu,
131
Neutra hidrofbica
L I
Isoleucina
Ile,
131
Neutra hidrofbica
Serina
Ser, S
105
Neutra hidrofilica
Treonina
Thr, T
119
Neutra hidrofilica
Cistena
Cys,
121
Neutra hidrofilica
C M
Metionina
Met,
149
Neutra hidrofbica
Ac. Asprtico
Asp,
123
Acida hidrofilica
D
Ac. Glutmico
Glu,
147
Acida hidroflica
E
Arginina
Arg,
174
Bsica hidrofilica
R
Lisina
Lys, K
146
Bsica hidrofilica
Histidina
His,
155
Bsica hidrofilica
H
Fenilalanina
Phe,
165
Neutra hidrofbica
F
Tirosina
Tyr,
181
Neutra hidrofilica
Y
Triptfano
Trp,
204
Neutra hidrofbica
WP
Prolina
Pro,
115
Neutra hidrofbica
Asparagina
Asn,
132
Neutra hidrofilica
N
Glutamina
Gln,
146
Neutra hidrofilica
Q
V. ACTIVIDADES EVALUADAS
1. Haga un resumen de su prctica indicando:
a) Nmero total de cadenas formadas durante la prctica
b) Nmero de aminocidos en cada cadena.
2. Analice y describa las siguientes caractersticas de la protena ms
larga que form e indique:
a) Si se trata de una protena cida, bsica o neutra.
b) Si se trata de una protena hidrofbica o hidroflica.

PRCTICA DE LABORATORIO
N13 MITOSIS VEGETAL
I.

INTRODUCCIN
El ciclo celular establece dos etapas. En la primera la clula se divide
(mitosis o meiosis) originando dos clulas hijas caracterizada por la
divisin del ncleo (cariocinesis), seguida de la divisin del
citoplasma o citocinesis; y en la segunda la clula no tiene
aparentes cambios morfolgicos, comprendiendo el espacio entre
dos divisiones celulares sucesivas y que se denomina interfase celular.
La mitosis es un proceso que controla la transmisin de los rasgos
de herencia de un ncleo a otro durante la divisin celular. Este es
el mecanismo que genera nuevas clulas y reemplaza las clulas
daadas en los organismos multicelulares. La mitosis tiene cuatro
etapas definidas: profase, metafase, anafase y telofase.

II.

OBJETIVOS
Diferenciar las fases de una mitosis vegetal y compararlas con una mitosis
animal
Caracterizar las fases de la mitosis y los procesos que involucran.

III. MATERIALES
Laboratorio
Microscopios
Papel lente
Mango de bistur
Hoja de bistur
Pinza de madera
Pinza de metal con punta
roma
Luna de reloj
Papel toalla
Portaobjetos
Cubreobjetos
Mechero de Alcohol
Orcena actica- clorhdrica
Aceite de inmersin

Alumno
Bulbos de cebolla
pretratados
Lpiz

IV. PROCEDIMIENTOS
1. Cultivar los bulbos de cebolla en vasos pequeos conteniendo
agua corriente, la que deber cambiarse cada 24 horas,
mantener los bulbos en oscuridad a 25C.
2. Despus de 48 a 72 horas, arrancar con ayuda de una pinza 2 a 3
races del bulbo y colocarlas sobre una luna de reloj que
contenga Orcena.
3. Calentar la placa en la llama de un mechero de alcohol hasta
aproximadamente 60C y se observe la emisin de vapores
blancos, evitar la ebullicin del colorante.
4. Dejar enfriar y repetir esta operacin cuatro veces.
5. Colocar la raicilla en la lmina portaobjeto, cortar 2 mm de la
punta, aadir una gota de Orcena fra, cubrir la preparacin con
laminilla.
6. Con la punta de un lpiz golpear suavemente la
preparacin describiendo crculos concntricos para permitir la
extensin del tejido meristemtico.
7. Cubrir la lmina con papel toalla colocando la laminilla en
direccin a la mesa de trabajo.
8. Presionar con el dedo pulgar como si se estuviera colocando una huella
digital.
9. Observar la preparacin a 40X y a mayor aumento con lente de inmersin.
V.

ACTIVIDADES EVALUADAS
Identifique y esquematice las clulas en interfase, profase, metafase,
anafase y telofase. Examine 100 clulas y determine el nmero de
clulas en mitosis e interfase; adems los ndices de fases.
ndice mittico: Porcentaje de clulas proliferativas que se
encuentran en la mitosis. En el caso de clulas de la raz de la cebolla,
se consideran meristemticas a las que tienen el ncleo con un
dimetro superior a la tercera parte del eje mayor de la clula.
ndice interfsico: porcentaje de clulas proliferativas en interfase.
Se calcula restando de 100, el ndice mittico.
ndice de fases: Porcentaje de las clulas mitticas en cada una de las fases.

Figura 8. Clulas de Allium cepa en profase, anafase y telofase.

Figura 9. Clulas de Allium cepa en metafase e interfase.