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Laboratorio de inmunologa general

Fagocitosis de partculas de ltex
12 Noviembre del 2015
Introduccin:

Los fagocitos son clulas presentes en la sangre y otros tejidos animales capaces
de captar microorganismos y restos celulares (en general, toda clase de partculas
intiles o nocivas para el organismo) e introducirlos en su interior con el fin de
eliminarlos, en un proceso conocido como fagocitosis. Su nombre procede del
griego phagein(, 'comer'), y -cito, sufijo utilizado con el significado de 'clula',
procedente del trmino kutos ('cavidad, ').Existen muchos tipos de clulas capaces
de efectuar la fagocitosis; las clulas del sistema inmune que la realizan son de
vital importancia en la defensa del organismo contra las infecciones. Estn
presentes en todos los animales y se encuentran muy desarrollados en los
vertebrados. Un litro de sangre humana contiene alrededor de seis mil millones de
estas clulas. En sentido genrico, suele llamarse fagocitos a las clulas del
sistema inmune con capacidad fagoctica (como los macrfagos). Siendo ms
precisos, no todos los fagocitos son glbulos blancos o clulas inmunitarias: en
humanos y otros animales se clasifican en profesionales y no profesionales,
dependiendo de su efectividad y de si poseen funciones distintas a la fagocitosis.
Los fagocitos profesionales incluyen a los neutrfilos, monocitos, macrfagos,
clulas dendrticas y mastocitos los fagocitos no profesionales incluyen elementos
muy numerosos en el cuerpo humano y distintos a los leucocitos, como las clulas
epiteliales, endoteliales, fibroblastos y clulas del mesnquima.
Objetivo: Realizar la separacin de clulas fagociticas de la muestra de sangre
perifrica extrada y observar la fagocitosis que se dar en partculas de ltex
Materiales y reactivos:
Material
1 caja Petri
2 laminillas

compuesto
borosilicatos
vidrio

3 palillos
4 jeringa

madera
Plstico (poliestireno)

REACTIVO

OBTENCION

USOS

2
Solucin buffer de fosfatos
(PBS)

Solucin de Hanks

. Hay varias maneras de

prepararla, pero la ms
sencilla consiste en usar
tabletas tampn PBS.
Estn formulados para
dar una solucin lista
para usar PBS tras la
disolucin
de
una
cantidad determinada de
agua destilada. Estn
disponibles
en
los
volmenes
estndar:
100, 200, 500 y 1000 ml.
Si se utiliza en el cultivo
de clulas, la solucin se
puede
dispensar
en
alcuotas y se esteriliza
por
tratamiento
en
autoclave

Es uno de los buffers ms

utilizados porque es isotnico y
no txico para las clulas. Se
utiliza para diluir sustancias
utilizadas para el cultivo y para
lavar los recipientes que
contienen clulas.1

Por combinacin de sal

con variaciones
que
contienen
CaCl
2,
MgSO4 7H 2 O, KCl,
KH 2 PO 4, NaHCO3,
NaCl, Na 2 HPO 4 2H 2
O, y D-glucosa

una solucin de sal que

habitualmente se utilizan en
combinacin con sustancias de
origen natural del cuerpo (suero
sanguneo, extractos de tejido)
y / o soluciones ms complejas
definidas
qumicamente
nutritivos para el cultivo de
clulas animales.

El PBS se emplea como

vehculo neutro para clulas, ya
que no modifica el perfil de
expresin y funcionamiento
celular normal. El uso de esta
solucin es muy comn para
lavar clulas a travs de
centrifugacin

Metodologa

1 marcar dos
cubreobjetos uno con
Hanks y el segundo con
Hanks ltex

2 colocar de 1 a 3
gotas de sangre en los
cubreobjetos

3 incubar en cmara
hmeda 20 minutos a

37 c
e
6 montar esmalte

5 teir con Wright 5

4 lavar con PBS IX

2
min

7 contar 100 clulas

(100x)

8 contar las
partculas
fagocitadas

Resultados: 3.35 Nota resultado de otro equipo ya que no nos sali la practica .3

Discusin:
No se logr el resultado esperado debido a que no se pudo cuantificar las
clulas en nuestra laminilla debido a que hubo una mala metodologa posiblemente al
momento de lavar ya que con el palillo al momento de retirar el sobrante se llev todas las
clulas presentes en la laminilla.
Conclusin: ES un mtodo inmunolgico sencillo y rutinariamente usado en el
laboratorio clnico el cual nos puede ayudar a identificar una enfermedad en especfico la
cual es enfermedad cromatomasa crnica es decir la falta de neutrfilos siempre y cuando
el valor total sea igual o menor a 2.4.

Bibliografa:
-Parham Peter. (2006). Inmunologa, 2 da edicin medica panamericana, Buenos Aires
Argentina
Morilla, A., Bautista, C., 1999. Manual de Inmunologa pag. 80 - 82.
John l Ingraham (2005) Introduccin a la microbiologa volumen dos editorial reverte S.A
Barcelona
-.Peter J. DAdamo, Catherine Whitney. (2013 Quimiotaxis B.S.A, Barcelona Espaa.
Gerhard Thews,Ernts Mustschler, Peter Vapuel, antoma y fisiologa y patofisiologia del
hombre, manual para farmacuticos y bilogos. Editorial Reverte S.A. Barcelona.