Ao De la Consolidacion del Mar de

Grau
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA
2016 - 0

TEMA:
ESPECTROFOTOMETRIA
ALUMNA:
ALEJO VEGA KARENLAY ESTHEFANIA
DOCENTE:
Q.F JACK GARCIA CALDERON

ICA PERU
2016

OBJETIVOS
- Poder aprender el manejo del espectrfotometro que asu
vez preparar un espectro de absorcin y ubicarlo en un
grafico estndar.

MARCO TEORICO
La espectrofotometra de absorcin en las regiones ultravioleta y visible
del espectro electromagntico es, posiblemente, la ms utilizada en la
prctica del anlisis cuantitativo de todas las tcnicas espectroscpicas.
Asimismo, puede resultar de utilidad como tcnica auxiliar para la
determinacin de estructuras de especies qumicas.
El espectrofotmetro se basa en la absorcin de radiacin ultravioleta y
visible por el analito, como consecuencia de lo cual se origina un estado

activado que posteriormente elimina su exceso de energa en forma de

calor.
CALCULO DE LA CONCENTRACIN DE UNA SOLUCION PROBLEMA:
- Mtodo de la curva standard o curva de calibracin.
a) CURVA STANDARD.- Este mtodo consiste en utilizar varios
estndares de concentraciones conocidas y progresivas para luego
construir un grfico en un sistema de coordenadas en el que se
colocan las lecturas en las ordenadas (Eje Y) y las concentraciones
en las abscisas (Eje X). En la recta obtenida (Funcin lineal), se
puede extrapolar la absorbancia o densidad ptica de la muestra
problema, hallando la concentracin de la misma en el eje de las
abscisas.
b) FACTOR DE CALIBRACIN.- (Fc), El factor de calibracin es un
trmino que se relaciona con la concentracin de una sustancia
con su absorbancia, es decir la intensidad que absorbe una
sustancia de concentracin conocida (Standard o Patrn).
La regin visible del espectro electromagntico abarca de 380 a 780 nm.
Esta regin del espectro es usada ampliamente en el laboratorio
analtico. La siguiente tabla muestra la divisin de la regin visible del
espectro:
Longitud de onda
(nm)
380
380-435
435-480
480-490

Color absorbido

Color reflejado

Ultravioleta
Violeta
Azul
Azul verduzco

Verde amarillento
Amarillo
Anaranjado

490-500

Verde azuloso

Rojo

500-560
560-580
580-595
595-650
650-780
780

Verde
Verde amarillento
Amarillo
Anaranjado
Rojo
Infrarrojo cercano

Prpura
Violeta
Azul
Azul verduzco
Verde azuloso

Deben tomarse en cuenta los datos anteriores para el trabajo analtico

en el VISIBLE.
La luz que utilizamos para leer, as como la luz del sol es policromtica,
contiene todas las longitudes de onda de la lista anterior. Cuando vemos
un objeto, vemos luz reflejada. La luz reflejada es la que qued de la
iluminacin blanca, despus que el objeto absorbi varias longitudes
de onda.

DESARROLLO EXPERIMENTAL
1.-

TUBO 1:

0.786

TUBO 2:

1.556

TUBO 3:

2.322

TUBO 4:

2.900

TUBO 5:

0.740

Leyenda:
Celeste: Agua Destilada
Amarillo: Bicromato de Potasio

nn
2.9
2.3

1.5
0.78
0.74

10

IMGENES OPCINALES

20

30

40

50

CONCLUSIONES
-

Logramos desarrollar el proceso de colocado de muestra de cada

tubo al espectrofotmetro y asi pudimos observar su absorbancia

CUESTIONARIO
1. Explique el mecanismo de funcionamiento de un
espectrofotmetro.
El funcionamiento de un espectrofotmetro consiste bsicamente
en iluminar la muestra con luz blanca y calcular la cantidad de luz
que refleja dicha muestra en una serie de intervalos de longitudes
de onda.
Lo ms usual es que los datos se recojan en 31 intrvalos de
longitudes de onda. Esto se consigue haciendo pasar la luz a
travs de un dispositivo monocromtico que fracciona la luz en
distintos intrvalos de longitudes de onda.
El instrumento se calibra con una muestra o loseta blanca cuya
reflectancia en cada segmento de longitudes de onda se conoce
en comparacin con una superficie de reflexin difusa perfecta.

2. Qu diferencias existen entre un fotocolormetro y un

espectrofotmetro?.
La diferencia fundamental entre un espectrofotmetro y un
fotmetro o fotocolormetro, consiste en que el fotocolormetro
trabaja nicamente en el espectro de luz visible y selecciona una
longitud de onda determinada mediante filtros fijos. En cambio, un
Espectrofotmetro es capaz de trabajar, no solo con la luz visible
sino

que

en

otras

regiones

del

espectro

electromagntico

(ultravioleta e infrarroja). Adems posee un monocromador para

seleccionar la longitud de onda deseada.

3. Grafique el espectro de luz, tanto en el rango visible como no

visible con sus respectivas longitudes de ondas.

4. Qu relacin matemtica existe entre Absorbancia y

Transmitancia?
Tienen que ser mltiplos puede ser el doble, triple, etc
5. Construya una curva de calibracin con los siguientes valores:

MUESTRA A:
0.025

0.015

0.025

0.125

0.025

0.350

0.015 x 5
3
0.025

MUESTRA B:
0.125 X 5
25
0.025

MUESTRA C:
0.350 x 5
70
0.025