AO DE LA DIVERSIFICACIN PRODUCTIVA Y DEL

FORTALECIMIENTO DE LA EDUCACIN
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERA AMBIENTAL Y DE RECURSOS
NATURALES

INFORME DE MATERIALES DE LABORATORIO

Contreras Reynaga Kevin Irwing
Docente:

Blg. Suyo Loayza Beatriz

Asignatura:

Microbiologa General

Semestre:

2015 - A

Grupo horario:

90 G

Mesa:

N 2

Fecha de entrega: 31 de Agosto del 2015

Bellavista, Agosto del 2015

INFORME DE BIOSEGURIDAD
I. OBJETIVOS:

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Conocer los diferentes materiales utilizados en laboratorio de microbiologa.

Establecer diferencias entre equipos y materiales.
Conocer diferentes microscopios.
II. MARCO TEORICO:
Equipos: Los equipos de laboratorio es un sector tecnolgico nuevo que hemos
incluido en los laboratorios. Slo mediante estos son posibles los experimentos,
controles de procesos y controles de calidad. Medidores electrnicos o aparatos de
vaco son las herramientas de trabajo ms importantes en la tecnologa de
laboratorios. El sector cientfico de los equipos de laboratorio sera impensable sin
estos equipos. Aparatos de anlisis de alta calidad, equipos de investigacin o
dispositivos de laboratorio han sido desarrollados para el uso profesional y
especialmente para la tecnologa de laboratorio. En el desarrollo y la construccin de
todos los equipos de laboratorio se ha tenido en cuenta especialmente la seguridad del
futuro usuario. Los equipos de laboratorio siempre disponen de botones de proteccin,
vlvulas de seguridad, botones de contacto y termostatos, donde tengan sentido.1
Herramienta: Es un objeto elaborado a fin de facilitar la realizacin de una tarea
mecnica que requiere de una aplicacin correcta de energa (siempre y cuando se
hable de herramienta material).
El trmino herramienta, en sentido estricto, se emplea para referirse a utensilios
resistentes (hechos de diferentes materiales, pero inicialmente se materializaban en
hierro como sugiere la etimologa), tiles para realizar trabajos mecnicos que
requieren la aplicacin de una cierta fuerza fsica.
En la actualidad la palabra herramienta abarca una amplia gama de conceptos y
diferentes actividades (desde las herramientas manuales hasta las informticas), pero
siempre bajo la idea de que el trmino herramienta se usa para facilitar la realizacin
de una actividad cualquiera.2
Materiales: Cuando se utiliza el trmino material en plural, es decir, materiales, se
est haciendo referencia por lo general al conjunto de elementos que son necesarios
para actividades o tareas especficas. La nocin de materiales puede aplicarse a
diferentes situaciones y espacios, pero siempre girar en torno a varios elementos que
son importantes y tiles para desempear determinada accin, adems de que son
tambin objetos que deben ser utilizados de manera conjunta.3

1 http://www.pce-iberica.es/instrumentos-de-medida/equiposlaboratorio.htm
2 https://es.wikipedia.org/wiki/Herramienta
3 http://www.definicionabc.com/general/materiales.php
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Los materiales de laboratorio se clasifican de la siguiente forma:

Volumtrico: Dentro de este grupo se encuentran los materiales de vidrio
calibrados a una temperatura dada, permite medir volmenes exactos de
sustancias (matraces, pipetas, buretas, probetas graduadas).
Calentamiento o sostn: son aquellos que sirven para realizar mezclas o
reacciones y que adems pueden ser sometidos a calentamiento (vaso de
precipitado, Erlenmeyer, cristalizador, vidrio de reloj, baln, tubo de ensayo).
Equipos de medicin: es un instrumento que se usa para comparar
magnitudes fsicas mediante un proceso de medicin. Como unidades de
medida se utilizan objetos y sucesos previamente establecidos como
estndares o patrones y de la medicin resulta un nmero que es la relacin
entre el objeto de estudio y la unidad de referencia. Los instrumentos de
medicin son el medio por el que se hace esta conversin. Ejm: balanza,
pHmetro, termmetro.
Equipos especiales: Equipos auxiliares para el trabajo de laboratorio. Ejm:
centrfuga, estufa, bao termosttico, etc.4
Lavado y esterilizacin de materiales
Los microorganismos pueden ser eliminados, inhibidos o muertos por agentes fsicos,
agentes qumicos, o por procesos fsicos y agentes qumicos. Se dispone de una gran
variedad de tcnicas y agentes que actan de maneras diferentes y cada uno tiene su
aplicacin y lmite de uso.
Se utilizan varios trminos especficos para escribir a estos agentes y procesos:
Esterilizacin: El proceso que destruye todas las formas de vida se llama
Esterilizacin: Un objeto estril, en sentido microbiolgico est libre de
microorganismos vivos. Un objeto o una sustancia est estril o no est estril;
no puede estar nunca semiestril o casi estril.
Desinfectante: Un agente, usualmente un producto qumico que mata las
clulas vegetativas pero no necesariamente las formas esporuladas de los
microorganismos productores de enfermedades, se denomina un
desinfectante. El trmino se aplica comnmente a sustancias usadas sobre
objetos inanimados. La desinfeccin es el proceso mediante el cual se
destruyen las clulas vegetativas pero no necesariamente las esporas de los
agentes infecciosos.

4
http://www.ing.unp.edu.ar/asignaturas/quimica/practicos_de_laboratorio_pdf/
lab1.pdf pg. 131
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Antisptico: Una sustancia que se opone a la infeccin (sepsis) o previene

crecimiento o accin de los microorganismos, bien sea destruyendo o bien
inhibiendo su crecimiento o actividad, se denomina un antisptico. El trmino
est usualmente asociado a sustancias aplicadas al cuerpo.
Higienizacin: Un agente que reduce la poblacin microbiana hasta niveles
que se juzgan seguros para las exigencias de la salud pblica se denomina un
higienizante. Usualmente es un agente qumico que mata el 99.9% de las
bacterias en crecimiento. Los higienizantes suelen aplicarse a objetos
inanimados y generalmente se emplean en el cuidado diario de equipos y
utensilios en las plantas lecheras y de preparacin de alimentos, as como para
los vasos, platos y utensilios en los restaurantes.
Germicida (microbicida): Un agente que mata las clulas vegetativas pero no
necesariamente las formas esporuladas de los grmenes se llaman germicida
(microbicida). En la prctica, germicida es casi sinnimo de desinfectante. Pero
un germicida se usa generalmente para toda clase de grmenes microbios y
para cualquier aplicacin.
Bactericida: Un agente que mata las formas vegetativas de las bacterias. Del
mismo modo, los trminos fungicida, viricida y esporocida se refieren a agentes
que matan a los hongos, virus y esporas respectivamente.
Bacteriostasis: Una condicin en la que se previene (se inhibe) el crecimiento
de las bacterias se denomina bacteriostasis (adjetivo: bacteriosttico. Del
mismo modo, fungisttico describe la accin de un agente que detiene el
crecimiento de los hongos. Los agentes que tienen en comn la capacidad de
inhibir los crecimientos de los microorganismos se designan colectivamente,
como agentes microbiostticos.
Agente Antimicrobiano: El trmino de agente antimicrobiano se refiere a un
agente que interfiere con el crecimiento y metabolismo de los microbios. En el
uso comn, el trmino denota inhibicin de crecimiento y cuando se refiere a
grupos especficos de organismos, suelen usarse con frecuencia los trminos
tales como antibacteriano o antifungico. Algunos agentes antimicrobianos se
utilizan especficamente para el tratamiento de infecciones, estos se
denominan agentes teraputicos.5
III. CUESTIONARIO
1. Cul es la utilidad del aceite de inmersin y porque?
Los medios de inmersin para microscopia tienen aproximadamente el mismo ndice
de refraccin que el vidrio. Mediante los aceites de inmersin se elimina casi
5 http://www.etpcba.com.ar/DocumentosDconsulta/ALIMENTOS-PROCESOS
%20Y%20QU%C3%8DMICA/Manual-de-Microbiolog%C3%ADa.pdf pg. 17 18
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completamente la desviacin de los rayos de luz y se aumenta considerablemente la

eficacia de los objetivos de microscopios.

2. Realizar un esquema del microscopio indicando sus partes.

3. Describir 10 tipos de microscopios.

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3.1. El microscopio ptico de campo oscuro

El microscopio de campo oscuro es un microscopio ptico ordinario cuyo sistema
condensador ha sido modificado para dirigir la luz a la preparacin desde los lados de
tal modo que slo la luz difractada por la preparacin pasa al ocular y se hace visible.
A causa de esta disposicin la muestra aparece iluminada sobre un fondo oscuro. La
microscopia de campo oscuro ha posible la
observacin en estado vivo de partculas y clulas que
de otra manera estaran por debajo de los lmites de
resolucin del microscopio ptico, aunque resulten
visibles pocos detalles estructurales. La microscopia
de campo oscuro ha sido ampliamente usada en el
estudio de pequeas clulas mviles tales como
Treponema pallidum, la espiroqueta causante de la
sfilis, que es invisible con la microscopia ptica
ordinaria.
3.2. El microscopio ptico de contraste de fases
El microscopio de contraste de fases hace
posible ver fcilmente pequeas clulas, incluso sin
teir. Las clulas tienen un ndice de refraccin
distinto de su alrededor y esta diferencia puede
utilizarse para crear una imagen de mucho mayor
contraste que la que puede obtenerse con el
microscopio ptico normal.
En este microscopio la fuente de luz es un cono
hueco de luz que pasa a travs de un diafragma
anular al condensador. En el objetivo un anillo de
contraste de fases desplaza la fase de luz que lo
atraviesa en un cuarto de longitud de onda. La luz
que pasa retardada atraviesa el anillo y el ojo la ve
como luz blanca normal. La luz que pasa a travs de
una muestra con ndice de refraccin diferente del
ndice del medio es retardada y tiene un recorrido
ms largo, llegando al ocular fuera de fase.
La interferencia entre la luz retardada y la no retardada produce una imagen de la
muestra. En la mayora de los microscopios de contraste de fases la imagen aparece
clara sobre un fondo oscuro. Puesto que la imagen depende de las diferencias en el
ndice de refraccin de la muestra y del medio circundante, la imagen desaparece si la
muestra es sumergida en un lquido de igual ndice de refraccin.
3.3. El microscopio ptico de fluorescencia
Se utiliza para poner de manifiesto muestras que tienen fluorescencia, bien a
causa de la presencia en su interior de sustancias materiales fluorescentes o que han
sido tratadas con colorantes fluorescentes. La fluorescencia es la propiedad que tienen
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muchas sustancias qumicas de emitir luz de un color despus de excitarlas con luz de
otro color. En el microscopio de fluorescencia la luz de excitacin es eliminada con un
filtro colocado entre el objetivo y el ocular, de modo que slo se ve la luz emitida.
3.4 El microscopio electrnico
Para estudiar la estructura interna de los
microorganismos es esencial el uso del microscopio
electrnico. En este microscopio se utilizan electrones
en vez de rayos de luz, y como lentes funcionan unos
electroimanes. Todo el sistema opera en el vaco.
Cuando los electrones pasan a travs de la
preparacin algunos son difractados creando entonces
una imagen que se hace visible en una pantalla
sensible a los electrones. Mientras que con estructuras
ms pequeas que pueden observarse tienen unos 0.2
m, con el microscopio electrnico pueden verse
fcilmente objetos de 0.001 m (= 1 nm = 10-9 m). Con
el microscopio electrnico es posible ver muchas
sustancias incluso de tamao molecular. Sin embargo,
a causa de la naturaleza de este instrumento slo pueden examinarse objetos muy
delgados. Si se est interesado en ver estructuras internas, incluso una sola bacteria
es demasiado gruesa para ser observada directamente. Por consiguiente, para
preparar muestras para el microscopio electrnico se necesitan tcnicas especiales de
cortes ultrafinos. Para seccionar las clulas primero deben ser fijadas y deshidratadas,
realizndose habitualmente esto ltimo transfiriendo las clulas a un disolvente
orgnico. Despus de la deshidratacin la muestra es incluida en plstico y en este
plstico se cortan secciones finas utilizando un ultramicrtomo, por lo general
equipado con una cuchilla de diamante.
3.5. Un microscopio confocal
Es un microscopio capaz de obtener imgenes tridimensionales de la clula. Se
basa en un principio similar al de un microscopio de fluorescencia, pero se utilizan dos
diafragmas confocales (uno antes de la muestra y otro despus) capaces de enfocar la
iluminacin en un nico punto de la muestra. Se utiliza un lser como fuente luminosa,
y con l se va barriendo la muestra por todo su volumen, plano a plano, creando
muchas imgenes bidimensionales que un ordenador interpreta, generando finalmente
una imagen tridimensional del objeto.
Para observar preparaciones con este microscopio es necesario teirlas con
sustancias fluorescentes o marcarlas con sustancias conjugadas con fluorocromos,
como los anticuerpos.
3.6. Microscopio de luz ultravioleta
La longitud de onda ms corta corresponde al espectro ultravioleta (180-400
nanmetros). Por este motivo y teniendo en cuenta que el poder de resolucin del
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microscopio est en razn inversa a la longitud de onda utilizada, este ser mayor en
una preparacin con radiacin ultravioleta que con radiacin visible.
Esta tcnica es posee la ventaja de que muchas sustancias estudiadas en
biologa tienen bandas de absorcin ultravioleta, con lo que su observacin
microscpica no requerir el uso de una tincin.
3.7. Microscopio de polarizacin
Son microscopios de luz polarizada, que se construyen a partir de un microscopio
ordinario, colocando un polarizador entre la luz y el condensador, y un analizador entre
el objetivo y el ocular.
Se utilizan muchas veces para la observacin de sustancias birrefringentes. Al
hacer rotar el objeto birrefringente con relacin a los filtros cruzados, este se ver
brillante sobre un campo oscuro.
Se utilizan estos microscopios normalmente, en Petrografa y Mineraloga.
Concretamente, esta tcnica es usada para minerales transparentes, los cuales
reciben la luz polarizada desde el lado diametralmente opuesto al observador y suelen
colocarse entre un portaobjetos y un cubreobjetos.
3.8. Microscopio electrnico de barrido
En el microscopio electrnico de barrido o microscopia de exploracin electrnica,
los electrones inciden desde arriba sobre la preparacin, por ello la muestra puede ser
de cualquier grosor o tamao. Este microscopio no tiene la resolucin que se alcanza
con el microscopio electrnico de transmisin, pero su ventaja es una excelente
impresin tridimensional. Se basa en el principio de la amplificacin electrnica de
seales que se generan al irradiar la superficie de las muestras con un haz muy
estrecho de electrones.
3.9. Microscopio electrnico de transmisin
En este tipo de microscopia, el haz de electrones atraviesa al material que se
desea observar. El modo de operar de este tipo de microscopio es similar al del
microscopio ptico, ya que est basado en el hecho de que la manera de actuar de un
campo electromagntico sobre un haz de electrones es anloga a la accin de la lente
de cristal sobre el haz de fotones. La imagen, sin embargo, se forma sobre una
pantalla fluorescente como lo hara en una pantalla de televisor.
3.10. Microscopio confocal de barrido lser
Este tipo de microscopio es sin duda uno de los ltimos avances en microscopia
ya que permite, utilizando la tecnologa lser, la observacin de secciones finsimas
dentro de una espesa muestra fluorescente, as como digitalizar y reconstruir a gran
velocidad las imgenes de alta resolucin en tres dimensiones.
4. Esquematizar y describir otros objetos de laboratorio.

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Imagen

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Nombre

Uso

Destilador

Equipo que permite la

reduccin de la
cantidad del total de
sales disueltas (TSD)

Campana Extractora

Es un dispositivo de
ventilacin local que
est diseado para
limitar la exposicin a
sustancias peligrosas o
nocivas, humos,
vapores o polvos.

Termmetro

Es un instrumento de
medicin de
temperatura

Caja de flujo laminar

Permite trabajar con

microorganismos
aisladamente

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Jeringas

Se utilizan para tomar e

inocular sustancias.

Crisol

Permite realizar
calentamiento de
sustancias a altas
temperaturas.

Embudo de polietileno

Es un embudo que
presenta un dimetro
de 90 mm. Se utiliza
para envasar
sustancias o soluciones

Fiola

Matraz encargada de
medir volumen con alta
precisin