UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA

Escuela Profesional de Ingeniera Qumica

Materiales de laboratorio
y Normas de Seguridad
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Profesor:
Ing. Herrera Snchez Sonia

Integrantes:

Alcntara Jurez, Christian Cesar

Contreras Huaytan, Cinthia Katira
Palomino Santos, Yashin
San Martin Soria, Luzero

INDICE
I.

Introduccin-----------------------------------------------------------------------------------3

II.

Objetivos --------------------------------------------------------------------------------------4

III.

Marco terico---------------------------------------------------------------------------------5
3.1 Normas de seguridad del laboratorio....5
3.2 Uniforme y cuidado personal del estudiante....9
3.3 Materiales y equipos usados en el desarrollo de las prcticas de
laboratorio...10
3.4 Esterilizacin....20
3.4.1 Mtodo de Esterilizacin...20
3.5 Limpieza...23
3.5.1 Desinfeccin......25
3.5.2 Asepsia...28
3.6 Diferencia entre Esterilizacin y Desinfeccin.......30

IV.

Recomendaciones------------------------------------------------------------------------ 31

V.

Conclusiones--------------------------------------------------------------------------------32

VI.

Bibliografa---------------------------------------------------------------------------------- 33

I. INTRODUCCIN

Un laboratorio de microbiologa es un lugar convenientemente habilitado

donde se puede, manejar y examinar microorganismos. Este tipo de trabajo
debe ser llevado a cabo con una buena tcnica asptica y por tanto se
requiere un ambiente limpio y ordenado. Cuando manejamos cualquier tipo
de muestra debemos evitar que microorganismos ajenos a nuestros cultivos
y presentes en el ambiente se introduzcan en ellos contaminndolos, o que
los microorganismos de la muestra nos contaminen a nosotros. Por ello se
debe trabajar en condiciones de estabilidad. En el laboratorio de
microbiologa encontraremos estas condiciones bien en campanas de
seguridad biolgica o bien en la proximidad de la llama de un mechero de
alcohol o de gas. Aunque los microorganismos que se manipulan no se han
considerados patgenos todos los cultivos de todos los microorganismos
deben ser manejados con precaucin por su potencial patogenicidad. En
resumen, nunca debe olvidarse la necesidad de cumplir estos dos requisitos
bsicos:
1.- Restringir la presencia de los microorganismos en estudio a sus
recipientes y medios de cultivo para evitar el riesgo de contaminarse uno
mismo o a un compaero.
2.- Evitar que los microorganismos ambientales (presentes en piel, pelo, aire,
ropa, etc.) contaminen nuestras muestras.
Adems de un ambiente microbiolgico, el laboratorio de microbiologa
requiere una instrumentacin bsica para llevar a cabo estudios elementales

II. OBJETIVOS
1. OBJETIVOS GENERALES

Reconocimiento y utilidad e importancia de los diferentes materiales y

equipos que se utilizan en el laboratorio de microbiologa, uniforme y
cuidado personal del estudiante.

Tener el conocimiento sobre las normas de seguridad para prevenir todo

tipo de accidentes ocasionados en el laboratorio.

2. OBJETIVOS ESPECFICOS

Reconocer el ambiente del laboratorio de microbiologa, equipos y

materiales necesarios a utilizar en el desarrollo de la practica

Poseer un conocimiento general y uso adecuado de los materiales,

equipos utilizados en el laboratorio.

El uso correcto del uniforme durante el desarrollo de la prctica a realizar.

III. MARCO TERICO

3.1. NORMAS DE SEGURIDAD DEL LABORATORIO

Dado que el laboratorio es un lugar donde se manipulan gran cantidad y
variedad de productos peligrosos, con el fin de evitar su contacto, inhalacin o
ingestin, fuente de intoxicaciones o accidentes, se pueden establecer una
serie de normas de tipo general sobre diferentes aspectos aplicables a la
mayora de los laboratorios.
3.1.1 Organizacin
El laboratorio debe disponer de los equipos de proteccin individual (EPIs) y
de las instalaciones de emergencia o elementos de actuacin (duchas,
lavaojos, mantas ignfugas, extintores, etc.) adecuados a los riesgos
existentes.

El laboratorio debe mantenerse ordenado y en elevado estado de

limpieza. Se debe limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes
de comenzar y al finalizar la sesin prctica, al igual que recoger
inmediatamente todos los vertidos que ocurran, por pequeos que
sean.

No deben realizarse experiencias nuevas sin autorizacin expresa del

responsable del laboratorio ni poner en marcha nuevos aparatos e
instalaciones

sin

conocer

previamente

su

funcionamiento,

caractersticas y requerimientos, tanto generales como de seguridad.

3.1.2 Normas de conducta

No deben entrar en el laboratorio familiares ni amigos solo personal

autorizado.

Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros

objetos personales en el lugar que se les indique para tal fin.
5

Como norma higinica bsica, el personal debe lavarse las manos al

entrar y al salir del laboratorio y siempre que haya habido contacto con
algn producto qumico.

Debe llevar en todo momento la bata y ropa de trabajo abrochadas.La

misma que debe permanecer completamente cerrada y no ser sinttica;
y los cabellos recogidos, evitando colgantes o mangas anchas que
pudieran engancharse en los montajes y material del laboratorio. No se
debe trabajar separado de la mesa o la poyata, en la que nunca han de
depositarse objetos personales.

Est prohibido fumar e ingerir alimentos en el laboratorio. Para beber

es preferible la utilizacin de fuentes de agua a emplear vasos y
botellas. Caso de que aquellas no estn disponibles, nunca
Departamento de Qumica Orgnica Normas de seguridad en los
laboratorios qumicosse emplearn recipientes de laboratorio para
contener bebidas o alimentos ni se colocarn productos qumicos en
recipientes de productos alimenticios.

No debe de aplicarse cosmticos ni ponerse o quitarse lentes de

contacto en ningn rea del laboratorio, tampoco se puede colocar
joyas o aretes

3.1.3 Utilizacin de productos y materiales

Antes de proceder a su utilizacin deben comprobarse siempre los productos
y materiales, empleando solamente los que presenten garantas de hallarse
en buen estado.

Debe comprobarse el correcto etiquetado de los productos qumicos

que se reciben en el laboratorio, etiquetar adecuadamente las
soluciones preparadas y no reutilizar los envases para otros productos
sin retirar la etiqueta original.

Antes de comenzar la manipulacin del producto qumico es necesario

leer detenidamente la etiqueta donde se informa sobre su toxicidad y
posibles riesgos. Los mismos que deben manipularse cuidadosamente,
no llevndolos en los bolsillos, ni tocndolos o probndolos y no
pipeteando con la boca, guardando en el laboratorio la mnima cantidad
imprescindible para el trabajo diario.

No introducir en los botes de reactivos pipetas o esptulas que no estn

completamente limpias y secas.

Los productos inflamables no deben estar cerca de fuentes de calor,

como estufas, hornillos,
radiadores, etc.

Cuando se vierta cualquier producto qumico se debe actuar con

rapidez, pero sin precipitacin.

En caso de accidente, avisar inmediatamente al profesor. Algun

derrame de material contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno
puede ser catalogado como menor.

Reducir al mximo la utilizacin de llamas vivas en el laboratorio. Para

el encendido de los mecheros Bnsen emplear preferentemente
encendedores piezoelctricos.

Al preparar cualquier disolucin, se colocar en un frasco limpio y

rotulado convenientemente.

Al finalizar la tarea o una operacin recoger los materiales, reactivos,

etc. para evitar su acumulacin fuera de los lugares especficos para
guardarlos y asegurarse de la desconexin de los aparatos, agua
corriente, gases, etc.

Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero,

etc.), limpios y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez
finalizada la actividad. Reporte cualquier dao de los mismos al
profesor.

3.1.4 Peligrosidad De Productos Quimicos

7

Los productos qumicos, tanto las sustancias qumicas como los preparados, se
considerarn peligrososdebido a sus propiedades fisicoqumicas y toxicolgicas
y tambin a sus efectos especficos, tanto sobre la salud humana como sobre el
medio ambiente.

3.2 UNIFORME Y CUIDADO PERSONAL DEL ESTUDIANTE

a)

VESTIMENTA DURANTE LAS PRCTICAS

La vestimenta deber ser apropiada para trabajar en el laboratorio. NO se

permite dejar al descubierto reas considerables de su piel cuando utiliza
pantalones, faldas o blusas cortas.

MANDIL DE LABORATORIO
Durante todo el tiempo que est llevando a
cabo su ejercicio de laboratorio, debe utilizar
mandil de laboratorio. El mismo que tiene que
estar abrochado para que pueda proteger su
ropa y su piel. Cada estudiante deber
adquirir su propio mandil para desarrollar su
respectiva prctica.

GUANTES DE PROTECCIN

El guante es una prenda cuya finalidad es la

de proteger las manos o el producto que se
vaya a manipular. Conservar la integridad de
las manos es de vital importancia por tal
razn se deber utilizar el tipo de guantes de
acuerdo

la

prctica

de

laboratorio

programada.

COFIA
Es una gorra con vicera y malla; se utiliza
para el manejo de alimentos y algunos
procesos de laboratorio, donde se requiere
cubrir el cabello. Es ms que todo utilizada
por el personal femenino. Si el cabello esta
largo, se recomienda recogerlo con un
gancho para evitar que el cabello se salga
de la cofia y caiga a los alimentos o
contamine los procesos de laboratorio.

MASCARILLA
Las mascarillas quirrgicas estn
principalmente destinadas a prevenir
al

paciente

de

los

agentes

infecciosos procedentes del tracto

respiratorio del personal hospitalario
y a los profesionales mdicos de los
vertidos

lquidos

potencialmente

contaminados.
3.3 MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS EN EL DESARROLLO DE LA
PRACTICA DE LABORATORIO.
PLACA PETRI

Es un recipiente redondo, de cristal o plstico, con una cubierta de la

misma forma que la placa, pero algo ms grande de dimetro, para que se
pueda colocar encima y cerrar el recipiente, aunque no de forma
hermtica. Es parte de la coleccin conocida como material de vidrio.
Tambin puede contener un medio slido.
10

Se utiliza: en Microbiologa para cultivar clulas, observar la germinacin

de las semillas o examinar el comportamiento de pequeos animales.

TUBO DE ENSAYO

Material de vidrio de un laboratorio de qumica. Consiste en un pequeo

tubo cilndrico de vidrio con un extremo abierto (que puede poseer una
tapa) y el otro cerrado y redondeado.
Se utiliza: en los laboratorios para contener pequeas muestras lquidas o
slidas, aunque pueden tener otras fases(lquida y slida), como
realizar reacciones qumicas en pequea escala. Los tubos de ensayo
estn disponibles en una multitud de tamaos, comnmente de 1 a 2 cm
de ancho y de 5 a 20 cm de largo.

CON FASE LQUIDA

11

CON FASE SLIDA

GRADILLA
Es una herramienta que forma parte del material de laboratorio
(principalmente en laboratorios de biologa molecular, gentica y qumica).
Es utilizada para sostener y almacenar gran cantidad de tubos de
ensayo o tubos eppendorf. Su principal funcin es facilitar el manejo de los
tubos de ensayo. Normalmente es utilizado para sostener y almacenar
este material. ste se encuentra hecho de madera, plstico o metal; pero
las ms comunes son las de madera.

PROBETA
Es un instrumento volumtrico que consiste en un cilindro graduado de
vidrio. Est formado por un tubo generalmente transparente de unos
centmetros de dimetro y tiene una graduacin desde 5 ml hasta el
mximo de la probeta, indicando distintos volmenes.

12

En la parte inferior est cerrado y posee una base que sirve de apoyo,
mientras que la superior est abierta (permite introducir el lquido a medir)
y suele tener un pico (permite verter el lquido medido). Generalmente
miden volmenes de 25 o 50 ml, pero existen probetas de distintos
tamaos; incluso algunas que pueden medir un volumen hasta de 2000 ml.
Permite contener lquidos y sirve para medir volmenes de forma
aproximada.

ASA BACTERIOLGICA O ASA DE PLATINO

Es un instrumento de laboratorio tipo pinza que consta de una base que
puede estar hecha de platino, acero, aluminio y un filamento que puede
ser de nicromo, tungsteno o platino que termina o en un arito de 5 mm o
en punta.
Se emplea para transportar o arrastrar o trasvasar inculos (pequeo
volumen que contiene microorganismos en suspensin) desde la solucin
de trabajo tambin llamada solucin madre al medio de cultivo (slido o
lquido) o de un medio a otro (resiembra). Tambin sirve para la realizacin
de frotis.

13

 EL MICROSCOPIO

Es

aquel

especialmente

instrumento
para

poder

diseado
apreciar

elementos muy pequeos que resultan

imperceptibles para la visin humana.
El tipo de microscopio ms comn que se
creo fue el ptico, el cual consiste en una
o varias lentes las cuales permiten obtener
una imagen aumentada del objeto y que
funciona gracias a la refraccin. Algunos
otros tipos son: microscopio simple, compuesto, de fluorescencia, de luz
polarizada, con focal electrnico de transmisin, electrnico de barrido, de
iones de campo, de sonda de barrido, de fuerza atmica, de efecto tnel,
virtual y antimateria.

INCUBADORA
Es un dispositivo que sirve para mantener y hacer crecer cultivos
microbiolgicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene la
temperatura, la humedad y otras condiciones en grado ptimo, tales como
el contenido de dixido de carbono (CO2) y de oxgeno en su atmsfera
interior. Las incubadoras son esenciales para una gran cantidad de
trabajos experimentales en biologa celular, la microbiologa y en biologa
molecular y se utilizan para cultivos celulares, tanto bacterianos como
de clulas eucariotas.

Las incubadoras son tambin utilizadas en la industria de cra de aves de

corral para que acten como un sustituto de las gallinas en el proceso
de incubacin de los huevos fecundados. Esto se traduce a menudo en
tasas de eclosin muy altas debido a la capacidad de controlar la

14

temperatura y la humedad. Varias marcas de incubadoras estn

disponibles en el mercado para los ganaderos.

HORNO DE LABORATORIO
Es un tipo de horno comnmente usado para deshidratar reactivos
de laboratorio o secar instrumentos. El horno aumenta su temperatura
gradualmente conforme pase el tiempo as como tambin sea su
programacin, cuando la temperatura sea la ptima y se estabilice, el
trmico mantendr la temperatura; si esta desciende volver a activar las
resistencias para obtener la temperatura programada; posee un tablero de
control que muestra el punto de regulacin y la temperatura real dentro del
horno, est montada al frente para su fcil lectura, aunque algunos
modelos anteriores no lo tienen, estos cuentan con una perilla graduada
la cual regula temperatura del horno.

15

 BALANZA ANALTICA
Es una clase de balanza de laboratorio diseada
para medir pequeas masas, en un principio de
un rango menor del miligramo (y que hoy da, las
digitales, llegan hasta la diezmilsima de gramo:
0,0001 g o 0,1 mg). Los platillos de medicin de
una balanza analtica estn dentro de una caja
transparente provista de puertas para que no se
acumule el polvo y para evitar que cualquier
corriente de aire en la habitacin afecte al
funcionamiento de la balanza

CONTADOR DE COLONIAS
Es un instrumento utilizado
para

contar

bacterias

colonias
de

de
otros

microorganismos que crecen

en una placa de agar. Los
primeros contadores slo eran
superficies iluminadas sobre
las que se colocaba la placa, con las colonias marcadas con
un rotulador en la superficie externa de la placa mientras el operador
realizaba el recuento manual. Los contadores ms recientes intentan
contar las colonias por va electrnica, mediante la identificacin de reas
individuales de oscuridad y luz, de acuerdo a los umbrales definidos por el
usuario, contando los puntos en los que se aprecia contraste, o de modo
automtico mediante registro electrnico tras presionar con cualquier tipo
de marcador.

16

 BAO MARIA

El bao de Mara es un
equipo que se utiliza en el
laboratorio
pruebas

para

realizar

serolgicas

procedimientos

y
de

incubacin,

aglutinacin,

inactivacin,

biomdicos,

farmacuticos

hasta

industriales. Por lo general, se utilizan con agua, pero tambin permiten

trabajar con aceite. Los rangos de temperatura en los cuales normalmente
son utilizados estn entre la temperatura ambiente y los 60 C. Tambin
se pueden seleccionar temperaturas de 100 C, utilizando una tapa de
caractersticas especiales. Los baos de Mara son fabricados con
cmaras cuya capacidad puede seleccionarse entre los 2 y los 30 litros.
MEDIO DE CULTIVO
El objetivo ltimo del cultivo es variado: antibiograma, identificacin,
multiplicacin. Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin
de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que
crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios
de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo
artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura,
grado de humedad y presin de oxgeno adecuado, as como un grado
correcto de acidez o alcalinidad.

17

Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento

necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
Agua destilada
Desinfectante
Leja >5%
Jabn liquido
Bao mara
AUTOCLAVE DE LABORATORIO
Es un dispositivo que sirve para
esterilizar material de laboratorio,
utilizando vapor de agua a alta
presin y temperatura, evitando
con las altas presiones que el agua
llegue a e bullir a pesar de su alta
temperatura. El fundamento del
autoclave es que coagula las
protenas de los microorganismos
debido a la presin y temperatura, aunque recientemente se ha llegado a
saber de algunas formas a celulares, tal como los priones, que pueden
soportar las temperaturas de autoclave.
Las autoclaves funcionan permitiendo la entrada o generacin de vapor de
agua pero restringiendo su salida, hasta obtener una presin interna de
103 kPa, lo cual provoca que el vapor alcance una temperatura de 121
grados centgrados. Un tiempo tpico de esterilizacin a esta temperatura
y presin es de 15-20 minutos.

18

 MECHERO BUNSEN
Todas las manipulaciones deben realizarse
en un radio de 10-15cm de la llama del
mechero (zona asptica).
En caso de utilizar mechero nunca se debe
coger material por encima de la llama
Antes de comenzar a trabajar se procurar
disponer de todo el material necesario para
el procesamiento de la muestra
Tomar las medidas necesarias para evitar la
contaminacin de las muestras o/ y cultivo por microorganismos
ambientales

FRIGORFICO O CMARAS REFRIGERADAS

Se utilizan para conservar tanto materiales

(medios

de

cultivo,

reactivos)

como

microorganismos.
Generalmente estn a una temperatura fija de 4C.

19

3.4 ESTERILIZACIN
La esterilizacin es un proceso a travs del que se logra la destruccin total de
los microorganismos viables presentes en un determinado material, ya que
existen muchos procesos que requieren la utilizacin de materiales estriles,
como:

El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas, etc.)

que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiologa.

La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con diferentes

propsitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente, anlisis
microbiolgico, etc.)

3.4.1 Mtodos de esterilizacin

Existen varios mtodos de esterilizacin, detallados a continuacin.
MTODOS FSICOS
Los mtodos fsicos son aquellos que no involucran el empleo de sustancias letales
para los microorganismos, sino procedimientos fsicos como la radiacin ionizante,
el calor o la filtracin de soluciones con membranas que impiden el paso de
microorganismos, incluyendo virus. El mtodo ms usado en esta categora es el
calor que mata microorganismos por la desnaturalizacin de las enzimas; el cambio
resultante en la forma tridimensional de las protenas las inactiva. La resistencia al
calor vara entre los diferentes microorganismos; esta diferencia puede ser
expresada como el punto trmico de muerte (PTM) el cual se define como la
temperatura ms baja a la cual todos los microorganismos en una suspensin
lquida sern eliminados en 10 minutos.
Otro factor que debe ser considerado en una esterilizacin es el tiempo requerido.
Este puede expresarse como el tiempo de muerte trmica (TMT), el cual es el tiempo

20

mnimo para que toda bacteria en un cultivo lquido en particular sea exterminada a
una temperatura determinada.
Ambos PTM y TMT son guas tiles que indican la severidad del tratamiento
requerido para matar a una poblacin de bacterias dada. El tiempo de reduccin
decimal (TRD, o valor D) es el tercer concepto relacionado con la resistencia
bacteriana al calor. TRD es el tiempo, en minutos, en el cual el 90 % de una
poblacin bacteriana a cierta temperatura ser eliminada los tratamientos, trmicos
en resumen, son mtodos para conservar los alimentos.
Ejemplos:

Calor hmedo (en autoclave de vapor)

Calor seco (en horno de esterilizacin)

Flama directa

Incineracin

Aire caliente

Pasteurizacin

Ebullicin

Vapor

Tindalizacin

Radiacin

Radiacin ionizante

Radiacin no ionizante: (ej:Radiacin infrarroja y Radiacin ultravioleta)

MTODOS TRMICOS
Los mtodos trmicos suelen englobar todos los procedimientos que tienen entre
sus fines la destruccin de los microorganismos por el calor. Los mtodos son tanto
la pasteurizacin como la esterilizacin, cuya finalidad principal es la destruccin
microbiana, como al escaldado y a la coccin, procesos en los que tambin se

21

consigue una cierta reduccin de la flora microbiana, pero que sus objetivos
principales son la variacin de las propiedades fsicas.
CALOR HMEDO
Las condiciones de temperatura y presin de un proceso de esterilizacin por vapor
de agua en un autoclave van de 121 C a 134 C y 40-50 psi. Para el tratamiento
de residuos hospitalarios se emplean tiempos de operacin entre 20 y 30 minutos.
El mtodo de esterilizacin por autoclave utiliza pruebas microbiolgicas, las cuales
se ingresan dentro del ciclo de operacin y posteriormente por medio de una
incubadora se busca detectar si hay crecimiento de microorganismos. Uno de los
microorganismos utilizados en estas pruebas es el Bacillus stearothermophilus.
CALOR SECO
Las temperaturas de esterilizacin van desde 121 C a 180 C, teniendo en cuenta
los tiempos de esterilizacin para cada caso.
El calor seco es un mtodo trmico de esterilizacin y su efecto en
los

microorganismos

es

equivalente

al

horneado.

El

calor

cambia

las protenas microbianas por las reacciones de oxidacin y crea un medio interno
rido, as quema a los microorganismos lentamente. Una simple analoga es la lenta
carbonizacin

de

papel

dentro

de

un

horno

caliente,

aunque

la temperatura permanezca por debajo del punto de ignicin del papel

ESTERILIZACIN POR CALOR SECO

Temperatura (C) Tiempo (minutos)
121

360

140

180

150

150

160

120

170

60

180

30

22

MTODOS QUMICOS
Los mtodos qumicos de esterilizacin son aquellos que involucran el empleo de
sustancias letales para los microorganismos, tales como el xido de etileno y
el perxido de hidrgeno. El uso de este mtodo es muy limitado para la Industria
Alimentaria pero muy utilizado en otras industrias como la farmacutica.
Ejemplos:

Alcoholes

Etanol

Alcohol isoproplico

Aldehdos

Formol

Glutaraldehdo

Fenoles

Fenol (cido carblico)

Xilenol

xido de etileno

Perxido de hidrgeno

3.5. LIMPIEZA
Es la remocin de todos los materiales extraos (detritus, sangre, protenas, etc.)
que se adhieren a los diferentes objetos. Se realiza con agua, detergentes y
productos enzimticos. Este proceso puede reducir en 3-4 logaritmos la
contaminacin microbiana inicial y es el paso previo a cualquier proceso de
desinfeccin y/o esterilizacin. Si el instrumental no est limpio los procesos de
desinfeccin y esterilizacin no sern totalmente eficaces, ya que la suciedad no
permitir el contacto del agente con la superficie y actuar protegiendo a las
bacterias.

23

Se considera material contaminado al instrumento que estuvo en contacto con

sangre u otros lquidos orgnicos. Debe comenzarse entonces con un paso previo
al lavado: la descontaminacin y as transformarlo en bioseguro.
La misma consiste en sumergir o rociar el material con una solucin de prelavado
(detergente enzimtico). Esto permite la remocin y disminucin de la biocarga
por arrastre.

LAVADO
No cumple una funcin germicida, pero es un paso indispensable previo a la
desinfeccin y/o esterilizacin
Los agentes de limpieza deben cumplir como primera medida con la reduccin de
residuos en la superficie:
Residuos

orgnicos

(aceite,

grasa,

protenas,

glucosa)

Residuos inorgnicos (depsitos minerales, orina)

Estos agentes deben poseer la accin de ser:
Tensio

activo:

favorece

la

superficie

de

contacto.

Emulsificacion: permite que las grasas queden suspendidas en el agua

La temperatura de accin ser elegida segn el material a tratar: agua fra para
protenas y glucosa y agua caliente para minerales y grasas.
Se pueden utilizar para el Lavado:
1. Soluciones alcalinas: que incluyan soda custica, carbonatos. Actan sobre
materia orgnica (en especial grasas)
2. Surfactantes: inhibidores de la tensin superficial. Favorecen el contacto con
la superficie emulsionando la suciedad y favoreciendo su eliminacin por
arrastre.
3. Estabilizantes: evitan la precipitacin del agua dura (ablandadores).
4. Abrasivos: producen un efecto de pulido en la superficie.

24

5. Detergentes enzimticos: sustituyen a los detergentes comunes ya que stos

desintegran

la materia

orgnica.

Estn compuestos por enzimas,

surfactantes y solubles. A pH neutro evitan la corrosin del material, los de

pH cidos remueven incrustaciones, sarro y xido; mientras los pH alcalinos
remueven grasas y aceites.
Modo de accin de un detergente
La molcula de detergente est formada por una parte hidrfila, que atrae el agua y
una parte hidrfoba que atrae la grasa. Este posee la propiedad de bajar la tensin
superficial del agua, de esta manera las molculas pierden tensin entre ellas,
permitiendo el ingreso del producto a todas las partes del material tratado.
Las molculas de detergente se disgregan en dos partes, una con carga positiva y
otra con carga negativa, creando fuerzas elctricas de repulsin que arrancan la
partcula de suciedad formando micelas; stas tienen la misma carga elctrica que
la superficie por lo cual no se depositaran nuevamente, siendo expulsadas en el
enjuague.
Actualmente encontramos en el mercado detergentes enzimticos, con enzimas
proteolticas que destruyen protenas y materia orgnica. Cumplen una funcin
inmediata, son fciles de enjuagar, no rallan ni deterioran el material a tratar.

3.5.1. DESINFECCION

Se le llama desinfeccin al proceso tanto quimico como fisico que mata o

inactiva los agentes patogenos tales como las bacterias protozoos y virus.
En este proceso se eliminan los agntes patogenos reconocidos, pero no
necesariamente todas las formas de vida microbianas. Es un trmino relativo,
donde

existen

diversos

niveles

de

desinfeccin,

desde

numero

de

microorganismos contaminantes. Estos procedimientos se aplican unicamente

a objetos inanimados

25

Teniendo en cuenta la capacidad del agente para destruir microorganismos o

reducirlos, se clasifican en distintos niveles:

Bajo: Reduce microorganismos, no el Bacilo de Koch, ni formas

esporuladas, ni virus no lipdicos. Posee poca efectividad frente a
hongos. Generalmente son de uso antisptico.

Intermedio: Elimina bacterias vegetativas, mata al Bacilo de Koch

(tuberculicida), algunas esporas bacterianas, hongos y virus. Ej. :
Fenoles, hipoclorito de sodio.

Alto: Elimina todos los microorganismos incluyendo esporas, hongos y

virus. Ej. : Glutaraldheido, cido peractico.

METODOS FISICOS:

a) CALOR
La desinfeccin por calor recibe el nombre de Pasteurizacin. Este proceso,
por calentamiento de lquidos se emplea generalmente a temperaturas por
debajo del punto de ebullicin. Destruye microorganismos patgenos
(infecciosos); no incluye esporas.

b) RADIACIN UV
Estas radiaciones poseen un bajo poder de penetracin, se emplea para
disminuir la carga microbiana de superficies. No se considera un mtodo
esterilizante.

26

Mecanismo de accin: mximo de absorcin de los cidos nucleicos es a 265

nm. La luz UV provoca dmeros de pirimidina en el DNA y si no se reparan, la
clula muere.
METODOS QUIMICOS

Generalmente son agentes lquidos que actan bloqueando una funcin celular
del microorganismo producindole la muerte (actan en pared celular o
membrana, grupo enzimtico o protenas).

a) ALDHEIDOS.
Son agentes alquilantes: Actan sobre enzimas celulares incorporando un
grupo alquilo por uno amino.

Actividad microbicida, esporicida, viricida y funguicida.

Ejemplo:

GLUTARALDHEIDO

FORMALDEHDO

b) PEROXIDO DE HIDRGENO
Agente oxidante: acta por la produccin de radicales libres de OH que
ataca los lpidos de la membrana y ADN.

Frmula H2O2 (agua oxigenada). Fuerte accin germicida especialmente

sobre microorganismos anaerbicos.
Forma de uso: Acta por inmersin en solucin al 6% durante 10 minutos.
Uso Antisptico. Comercialmente se encuentra en concentracin del
30% de perxido de hidrgeno (equivale a 100 Vol. de O2).

27

3.5.2 ASEPSIA
Mtodo para prevenir infecciones por la destruccin de agentes patgenos, en
especial por mtodos fsicos.
Cuando se habla de una situacin de asepsia, lo que se est queriendo referir es la
ausencia de microbios o de infeccin. Es decir, cuando se dice que algo o alguien
disponen de asepsia es porque se encuentra libre de microorganismos que desatan
Infecciones.
El trmino puede emplearse indistintamente tanto a situaciones mdicas como a
quirrgicas. Por tanto, normalmente se habla de dos tipos de asepsias, la asepsia
quirrgica, que implica la esterilizacin completa y la ausencia total de bacterias en
un rea determinada de una institucin mdica en la cual se llevan a cabo
intervenciones quirrgicas. Y la asepsia mdica consiste en la proteccin de los
pacientes y del personal que se desempea en un hospital o centro sanitario con el
objetivo de evitar infecciones o en su defecto, de neutralizar la activacin de algunas
ya combatidas, como consecuencia de la transmisin de microorganismos
patgenos que se puede producir entre quienes interactan en un hospital:
enfermos, visitas, mdicos, enfermeros, entre otros.

Antisptico: Agente que controla y reduce la presencia de microorganismos

potencialmente patgenos que se encuentran sobre piel y/o mucosas (slo pueden
aplicarse externamente sobre seres vivos).

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Agente antimicrobiano: Compuesto qumico que inhibe el crecimiento o destruye

a los microorganismos. En cuanto a su espectro de accin un agente puede ser:
antibacteriano (elimina bacterias), anti fngico (elimina hongos) o antivrico (elimina
virus). En cuanto a su actividad, puede ser:

Esttico: Inhibe el crecimiento del microorganismo, pero no los mata.

Cida: Destruye los microorganismos. Ej. Bactericida

Validacin: Procedimiento formal documentado para obtener, registrar e interpretar

los resultados requeridos para demostrar que el proceso, fsico o qumico, garantice
la obtencin de un producto que cumpla con las especificaciones determinadas, en
este caso esterilidad.
3.6 DIFERENCIA ENTRE DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN
La

esterilizacin

garantiza

la

eliminacin de cualquier agente

patgeno

en

determinada.

una
Se

superficie

dice

que

un

elemento es estril cuando est

completamente

libre

de

microorganismos. Es importante
entender

que

no

se

puede

determinar de una manera absoluta

que la esterilizacin de algo sea completa, pero s se puede reducir tanto la
probabilidad de que algo este contaminado hasta el punto de decir que est
esterilizado.
En cambio la desinfeccin se emplea en los contextos donde no es posible la
esterilizacin. Las superficies de ciertos artculos frgiles y de nuestros hogares son
desinfectadas por nosotros, pero no esterilizadas.

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La desinfeccin es un proceso que busca destruir microorganismos, sobre todo, los

productos desinfectantes se enfocan en la eliminacin de aquellos que nos pueden
causar enfermedades.
Diferencias clave entre desinfeccin y esterilizacin

La esterilizacin est dirigida a destruir casi toda la vida microbiana, mientras

que la desinfeccin se refiere al proceso por medio del cual se destruye parte
de la vida microbiana o se inhiben los efectos nocivos de sta en los seres
humanos.

Ejemplos en los que se aplica la desinfeccin: cuando lavamos los platos,

cuando limpiamos el inodoro.

Ejemplos en los que se aplica la esterilizacin: en instrumentos quirrgicos, en

la leche pasteurizada.

Los desinfectantes no matan esporas, pero con la esterilizacin s se pueden

eliminar.

El nivel de limpieza que se alcanza con la desinfeccin se puede calificar de

adecuado, mientras que el grado de limpieza que se logra con la esterilizacin
puede decirse que es extremo.

La esterilizacin lleva ms tiempo que la desinfeccin.

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IV.

RECOMENDACIONES

Mantener en todo momento los guardapolvo abrochados

No llenar los tubos de ensayo mas de dos o tres centmetros

Calentar los tubos de ensayo de lado y utilizando pinzas

Utilizar en todo momento gradillas y soportes

No tocar con las manos no probar los productos qumicos

No efectuar pipeteo con la boca

Si algo nos cae en la piel o en los ojos lavarse con abundante agua

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V. CONCLUSIONES
Se concluye que existe gran variedad de instrumentos, materiales y equipos
de laboratorio, los cuales deben usarse adecuadamente para evitar
accidentes.

Se pudo reconocer la adecuada vestimenta a usar en el laboratorio como por

ejemplo: guantes, cofia, mascarilla, etc.

Tambin se llega a tener conocimiento de la gran diferencia que es un

proceso de desinfeccin a otro de esterilizacin.

Se concluye que podemos conocer todas las medidas de riesgos y

prevenciones en el laboratorio.

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VI. BIBLIOGRAFIA

Qumica Experimental Autor: Luis Carrasco Venegas

http://www.biologia.edu.ar/

http://uni-biologia.blogspot.com/

http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2027.pdf

http://www.shadetattoo.com/pdf/articulo%20web%201.pdf.

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