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Introduccin
Objetivo
Objetivo General
Presentar los materiales de uso en el laboratorio.
Objetivos Especficos
Identificar correctamente el material de goma, plstico, metal porcelana comnmente usad
en el laboratorio de petrleo.
Explicar en forma clara y segura el uso del material usado en el laboratorio.
Aprender a manipular adecuadamente el material de vidrio, goma, plstico, madera, metal
porcelana.
Cumplir cabalmente con las Normas de Higiene y de Seguridad del Laboratorio.
Aprender a realizar lectura de volmenes.
Aprender a manipular la pipeta.
Aprender a realizar la tcnica del trasvasado.
Formar equipos de trabajo.
Al finalizar el taller el alumno es capaz de:
MARCO TERICO
Los equipos de laboratorio clnico en general se utilizan tanto para realizar una manipulacin
o experiencia o para llevar a cabo medidas y recoger datos. El trmino material hace
referencia a aquello que pertenece o que es relativo a la materia. Sin embargo, la nocin
vara de acuerdo al contexto. En este sentido, los materiales tambin pueden ser elementos
agrupados en un conjunto que puede utilizarse con algn fin especfico. Estos elementos
pueden ser tanto reales como virtuales o abstractos. El material de laboratorio permite
nombrar a la amplia variedad de instrumentos o herramientas que se utilizan, como e
concepto lo indica, en un laboratorio. Este material puede estar fabricado con vidrio
plstico, metal, porcelana, madera, goma u otros componentes. El vaso de bohemia, e
matraz de Erlenmeyer, la probeta, la pipeta, el tubo de ensayo, el mortero, la capsula, e
embudo, el cristalizador, el vaso de precipitados, el embudo de decantacin, el encendedor
el cepillo de limpieza, los frascos y los refrigerantes son otros de los elementos que forman
el conjunto de materiales de laboratorio clnico.
Los materiales que se utilizan para medir volmenes en los laboratorios son clasificados
como materiales volumtricos.
La mayora de estos materiales estn constituidos por vidrio, lo que permite la visualizacin
del lquido que se desea medir. En algunos casos, el material volumtrico est fabricado con
plstico transparente, que resulta ms econmico y evita la reaccin entre el lquido y e
vidrio que surge con algunos componentes qumicos.
Los materiales en los que se combinen las sustancias estn fabricados con vidrio ptico
vidrio de gena o vidrio duro.
Materiales de laboratorio
Nombre y dibujo
Funcin
Tipo
material
de
3.- Fiola
de
4.-Frasco de reactivo
Permite:
guardar
sustancias
para
almacenarlas
los
hay
mbar
y
transparentes los de color mbar se
utilizan para guardar sustancias que son Material
alteradas por la accin de la luz del sol, vidrio.
los de color transparente se utilizan para
guardar sustancias que no son afectadas
por la luz solar
de
El espectrofotmetro
Uno de los instrumentos principales del laboratorio de biologa celular es el espectrofotmetro.
instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica (de un largo de
particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha mue
Esto le permite al fisilogo realizar dos funciones:
1.
Las cubetas son unos viales de plstico transparente o cuarzo que dejan pasar la luz. Los me
para trabajos de investigacin son las de cuarzo porque su interferencia al paso de la lu
mnima. Son ms costosas inicialmente pero bien tratadas pueden ser reusables. Las de pl
vienen con distintas caractersticas. Por lo general son desechables, aunque pueden reusars
tipo de cuveta plstica a usar depende del rango de luz en el que se van a analizar las mue
Vienen unas para luz visible, que son las ms econmicas, y otras para el rango de visi
ultravioleta. Estas son ms verstiles.
Ambos tipos de cubetas deben manejarse con cuidado para evitar rallazos sobre la superfici
donde pasa la luz. Si la cuveta est rallada, los rayos de luz que incidan en la zona se difractan
pasan por la muestra, por lo que puede dar lecturas de absorbancia errneas. Est
especialmente crtico cuando queremos determinar concentracin en una muestra. Antes de t
una lectura, debemos observar que la cuveta no tenga rallazos ni est sucia. Si se ven marc
polvo u otro tipo de sucio la cuveta debe limpiarse con papel tis (Kimwipes). Si la cuve
manipula mucho, debemos sostenerla usando papel tis para evitar pegarle los aceites
normalmente tenemos en las manos. No debemos usar ningn otro tipo de papel para limpia
cubetas, puesto que pueden soltar fibras que pudieran caer en la muestra o rallar la superficie.
Las cubetas vienen en distintos volmenes, desde 1 ml hasta 4 ml. El volumen a escoger dep
de la cantidad de muestra disponible. Si la muestra disponible es poca o difcil de consegu
mejor es usar una cuveta de menor volumen para perder la menor cantidad posible de la mue
Por lo general, la muestra utilizada para hacer la lectura se pierde, sobre todo si es una sust
bien sensitiva, como el ADN.
Pipetas y pipeteadores
Usamos las pipetas para medir volmenes de lquidos de forma ms precisa que con una probe
son ms verstiles, sobre todo al manejar volmenes pequeos.
Las pipetas de bulbo son tiles para medir volmenes que no requieren de mucha precisin. A
se usaban pipetas "Pasteur" de cristal a las que se les aditaba un bulbo de goma que se usaba
succionar el lquido. Ahora vienen en plstico desechable de una sola pieza y se consiguen c
sin calibracin.
Las pipetas volumtricas vienen en distintos tamaos, desde 1 ml hasta 200 ml, y con dis
formas, de acuerdo al uso que se les d. Tambin vienen en distintos materiales como borosilic
plstico, desechables o reusables, estriles o sin esterilizar. Algunas pueden ser esterilizada
horno o autoclave. Para llenarlas se pueden usar bulbos de caucho, bombas manuales o elct
o equipos de llenado. Las bombas elctricas y los equipos de llenado son muy tiles si se
trabajando con mltiples muestras, pues minimizan la fatiga del tcnico.
Las micro pipetas son extremadamente tiles en los laboratorios de biotecnologa.
Estas permiten medir con precisin volmenes tan pequeos como 0.1 l hasta 1 ml.
requieren de unos pipeteadores especiales que deben der tratados con mucho cuidado para
que se descalibren. Los pipeteadores vienen de distintos tipos. La mayora pueden servir mue
individuales. Pero vienen los que pueden servir muestras mltiples, por medio de multican
pipetas que sirven 8 o 12 muestras a la vez. Estas son muy tiles al hacer pruebas de EL
donde se practican diluciones seriadas mltiples, o para preparar reacciones de varias mue
distintas a la vez. Se usan en conjunto con platos de fosas mltiples.
Las puntas de micro pipetas vienen con distintas caractersticas de acuerdo al uso que se le
Vienen con punta ancha, estrecha o aplanada, con o sin filtros contra aerosoles, estriles
esterilizar y pueden ser esterilizadas en autoclave.
Aparatos de electroforesis
Estos son unas cmaras que contienen un circuito elctrico expuesto a un lquido electro
llamado amortiguador. El aparato se usa para separar mezclas de molculas grandes de acue
su carga y/o su tamao. La tcnica consiste en inocular la muestra en un medio semislido, la
estacionaria, que se somete a un campo elctrico, en una cmara donde en un extrem
encuentra un filamento que acta como polo positivo, y en el extremo opuesto hay otro filam
formando el polo negativo. Las molculas con cargas netas positivas se movern hacia el
negativo y las de carga negativa se irn hacia el polo positivo. Luego de la muestra ser tra
apropiadamente dependiendo del tipo de electroforesis, las molculas que viajen hacia uno d
polos se separarn por tamao, viajando ms en la fase estacionaria las molculas ms pequ
El tipo y concentracin de la fase estacionaria depender del tipo de molculas que nos inte
correr.
Centrfugas
Son muy tiles para precipitar clulas y molculas. Vienen en distintos tamaos y con dis
capacidades en el manejo de muestras. Este aparato somete la muestra a fuerzas de aceler
que obligan a las molculas a concentrarse en el fondo del envase utilizado, separndola
medio en que se encuentran. Incluso, bajo ciertos mtodos se puede generar un gradien
concentraciones dentro del mismo tubo, separando distintas molculas a distintos niveles o
dentro del tubo. Con ayuda de jeringas, se puede perforar la pared del tubo y extraer del mismo
aquella fase donde se encuentren las molculas de inters.
Entre las centrfugas que usaremos durante el semestre estn la centrfuga refrigerada, que n
a permitir separar clulas de los medios de cultivo. El rotor de esta centrifuga puede sostener
de 50 ml, pero puede ser intercambiado por rotores que sostienen botellas de cultivo.
La micro centrfuga es una versin ms pequea de la descrita anteriormente. Es compact
coloca sobre la mesa y procesa muestras de hasta 2 ml. Es muy til para precipitar ADN y
sustancias que se trabajan en volmenes pequeos .
Equipo de cromatografa
Haremos varias cromatografas al final del semestre. En una cromatografa buscamos separa
o varios tipos de molculas, relativamente pequeas, de una mezcla de sustancias o para pu
muestras. Existen varios tipos de cromatografas. La que se utilice depender del tipo de mol
que buscamos aislar.
La cromatografa de capa fina es ideal para separar muestras pequeas. Presenta
componentes: una fase estacionaria y una fase mvil. La fase estacionaria consiste de una plac
vidrio o celulosa impregnada con polvo de silicato (vidrio molido extremadamente fino).
Las muestras se colocan a un centmetro del borde inferior y se coloca en un tanque de reve
que contiene algn tipo de solvente en el fondo. La placa se coloca de forma que el solven
toque directamente las muestras. La fase mvil consiste del solvente. El solvente a u
depender de las propiedades qumicas de los componentes de la mezcla.
El solvente sube por capilaridad por la superficie impregnada con las muestras. Los compon
de la mezcla comenzarn a migrar, segn el grado de afinidad que tengan por el solvente y/o la
estacionaria. Mientras ms afn sea algn componente a la fase mvil, ms rpido se mover y
lejos llegar en su migracin sobre la fase estacionaria.
En la cromatografa de columna se pueden separar volmenes ms grandes de muestras. Tam
tiene una fase estacionaria que consiste de un tubo conteniendo un material que separa la m
analizada. Los amortiguadores que se usan para lavar la columna constituyen la fase mvil.
El empaque de las columnas puede separar molculas por su tamao, por sus interacciones i
o por interacciones hidrofbicas. El tipo de empaque a usar depender de las propiedades
muestra.
Existen otros tipos de cromatografa ms sofisticados, que se usan en laboratorios de investig
y en procesos de manufactura en varios tipos de industrias. Nosotros nos limitaremos a
descritos anteriormente.
Microscopio
El microscopio
es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vis
simple vista. El tipo ms comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata d
instrumento ptico que contiene dos o ms lentes que permiten obtener una imagen aumentad
objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando
instrumento se llama microscopa.
Etiquetas para colocar a los reactivos
La pureza de los reactivos es fundamental para la exactitud que se obtiene en cualquier anlisi
el laboratorio se dispone de distintos tipos de reactivos (slidos, lquidos o disoluciones prepara
tal y como se comercializan.
Reactivos slidos
Reactivos lquidos
Disoluciones preparadas
En general, las casas comerciales ofrecen un mismo producto con varias calidades. Es impor
que cuando seleccionemos un reactivo su calidad est en concordancia con el uso que se le
dar.
2.1. Clasificacin
En el laboratorio de anlisis se utilizan reactivos de calidad analtica que se prod
comercialmente con un alto grado de pureza. En las etiquetas de los frascos se relac
los lmites mximos de impurezas permitidas por las especificaciones para la calidad del reac
los resultados del anlisis para las distintas impurezas. Dentro de los reactivos analticos pu
distinguirse tres calidades distintas:
Reactivos para anlisis (PA): Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el n
mnimo de sustancias determinables por el mtodo que se utilice.
Reactivos pursimos: Son reactivos con un mayor grado de pureza que los reactivos "para an
.
Reactivos especiales: Son reactivos con calidades especficas para algunas tcnicas anal
como cromatografa lquida (HPLC), espectrofotometra (UV)
Hay reactivos que tienen caractersticas y usos especficos como los reactivos calidad p
primario, que se emplean en las tcnicas volumtricas, o los patrones de referencia.
2.2. Etiquetado de los reactivos
Todo envase de reactivos debe llevar obligatoriamente, de manera legible e indeleble, una etiq
bien visible que contenga las distintas indicaciones que se muestran en las siguientes figuras:
Los pictogramas, las frases R de RIESGO y las frases S de SEGURIDAD aparecen en las etiq
del producto informando sobre la peligrosidad del mismo.
PICTOGRAMAS DE PELIGROSIDAD
Siga las medidas de seguridad necesarias con los equipos, materiales y reactivos
sesin para prevenir accidentes. Esto incluye a los bancos de trabajo; stos d
permanecer colocados bajo las mesas o junto a stas o a las paredes.
Tome slo las cantidades de reactivos necesarios para el trabajo experimental y colq
en material de vidrio limpio y seco. Etiquete y rotule todos los recipientes donde col
reactivos, productos y residuos. Siga las medidas de contingencia y mitigacin en cas
accidente.
Mantenga slo el material requerido para la sesin sobre la mesa de trabajo. Los frasco
reactivos deben permanecer en las campanas. Los dems objetos personales o inneces
deben guardarse o colocarse lejos del rea de trabajo.
No ingiera alimentos ni bebidas en el interior del laboratorio, a menos que lo indiq
protocolo.
No fume en el interior del laboratorio. Todas las fuentes de fuego o calor deben
controladas.
No reciba visitas en el interior del laboratorio. Evite las distracciones. As puede e
accidentes.
Informe al Profesor responsable cuando le sea necesario salir del laboratorio duran
sesin. Reprtese al reincorporarse.
bolsa de plstico exclusiva para este uso. Los filtros del respirador se guardan e
recipiente hermtico. La bata y los guantes deber lavarse al final de cada sesin.
MATERIAL PERSONAL COTIDIANO OBLIGATORIO.
Bata larga (a la rodilla o pantorrilla) de algodn 100% y manga larga, con botones
recomienda que sea blanca.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:
Las reacciones dadas en este Laboratorio, son ejemplos muy claros de casos que pueden pa
diario y que nosotros no analizamos, los pasamos por alto, sabiendo que en ellos pod
aprender mucho sobre conceptos bsicos de qumica. Otra cosa muy importante es que en
laboratorio se practic mucho el buen uso del material de laboratorio, ya que con cualquier sen
nos podemos quemar o hacer dao a nuestro cuerpo o al de nuestros compaeros, y tener mucho cu
con el material que en el laboratorio se maneja para no tener que pagar algunos de estos qu
costosos.
CUESTIONARIO:
1.