MEDIOS DE CULTIVO.

INTRODUCCION
Los medios de cultivo son soluciones estriles que tienen macro y
micronutrientes, sustancias que permiten el crecimiento de organismos.
Un medio de cultivo es un sustrato o una solucin de nutrientes que permite el
desarrollo de
microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se
debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que los
microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias.
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve
afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos
casos, son ajenos por completo al propio medio.
1- Disponibilidad de nutrientes adecuados.
2- Consistencia adecuada del medio.
4- Condiciones adecuadas de humedad.
5- Luz ambiental.
6- pH.
7- Temperatura.
8- Esterilidad del medio.
OBJETIVOS
- Conocer las diferentes formas de elaborar medios de cultivo y su
correcto uso.
- Aprender a elaborar los medios de cultivo ms comunes usados en el
aislamiento de hongos Fito patgenos.
MATERIALES Y METODOS
A. AGAR PAPA DEXTROSA (APD).

Papas peladas y partidas 200g.

Dextrosa 20g.
Agar 17g.
Agua destilada hasta completar 1000ml.

Se cocinan las papas peladas y partidas en 500 ml de agua por 1 hora.

Simultneamente en otro recipiente en bao mara, se disuelve el agar en 500
ml de agua. Se cuela el extracto de papa a travs de varias capas de tela de
gasa, se mezclan ambos lquidos, se agrega la dextrosa y se agita la mezcla.
Se restaura el volumen a 1000 ml con agua. Agregamos el medio en
recipientes apropiados y se esteriliza a 15 libras de presin por 20 minutos.
B. PAPA DEXTROSA (PD)
Es igual al agar papa dextrosa, pero sin agar.
C. AGAR NUTRITIVO.
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Extracto de carne de res 3g.

Peptona 10g.
Agar 20g.
Agua destilada hasta completar 1000 ml.

Se disuelve el agar en 800 ml de agua destilada utilizando un bao mara.

Luego se agrega los otros ingredientes y se ajusta el volumen de los lquidos a
1000 ml. Se dispensa el medio en recipientes apropiados y se esteriliza a 15
libras de presin por 20 minutos.

D. AGAR JUGO V-8.

Jugo V-8 200 ml.

Carbonato de calcio 3 g
Agar 20g
Agua destilada 800 ml.

Se agrega 200 ml de jugo v-8 a 800 ml de agua tibia, luego se agrega el

carbonato de calcio y el agar agitando la mezcla. Se calienta en bao mara
hasta disolver el agar, una vez que el agar se haya disuelto, se lleva el
volumen a 1000 ml con agua destilada. Despus se deposita el medio en
recipientes adecuados y se esteriliza en el autoclave a 15 libras de presin,
durante 20 minutos.
E. AGAR AGUA.

Agar 20g.
Agua destilada hasta completar 1000 ml.

Se disuelve el agar en 800 ml de agua utilizando un bao mara; y una vez

disuelto, se lleva el volumen con agua 1000 ml. Se deposita el medio en
recipientes adecuados y se esteriliza en el autoclave a 15 libras de presin
durante 20 minutos.
F. AGAR FRIJOL LIMA.

Frijol lima molido 100g.

Agar 20g.
Agua destilada hasta completar 1000 ml.

Se remoja en agua los frijoles lima (Phaselous limensis) por 30 minutos. Se

hierve por 30 minutos en bao mara con suficiente agua; se filtra a travs de
tela de grasa, luego se coloca el lquido nuevamente en bao mara, se agrega
el agar y se agita el lquido hasta que el agar se disuelva, se completa el
volumen del lquido a 1000 ml con agua destilada. Se coloca el medio en
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recipientes adecuados y se esteriliza en el autoclave a 15 libras de presin por
20 minutos.
G. AGAR HARINA DE MAIZ.

Harina de maz 20g.

Dextrosa 20g.
Agar 20g.
Agua destilada hasta completar 1000 ml.

Se calienta 500 ml de agua a 70C y se agrega la harina de maz manteniendo

la temperatura alrededor de 60C por 1 hora. Luego se filtra a travs de tela de
gasa. Simultneamente se disuelve el agar en 500 ml de agua en bao mara y
una vez disuelto, se mezcla con el filtrado de harina de maz. Se agrega la
dextrosa y se completa el volumen hasta 1000 ml con agua destilada. Se
coloca el medio en recipientes adecuados y se esteriliza en el autoclave a 15
libras de presin por 20 minutos.
ADVERTENCIAS
Se debe tener sumo cuidado al momento de manipular los materiales y
equipos que estn sometidos a temperaturas altas. Tambin deber conocerse
el medio adecuado para el fitopatgeno que se aislar.
RESULTADOS
El medio de cultivo en si.

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