ISSN 0719-4250 http://jppres.com/jppres Thesis Review | Resea de Tesis
Caracterizacin y actividad antioxidante de aceites de semillas de Citrus
aurantifolia (Christm.) Swingle y Citrus sinensis (L.) Osbeck ecotipos Pica [Characterization and antioxidant activity of seed oils from Citrus aurantifolia (Christm.) Swingle and Citrus sinensis (L.) Osbeck ecotypes Pica] Wai-Houng F. Chou Kam Departamento de Ciencias Farmacuticas. Facultad de Ciencias. Universidad Catlica del Norte. Edificio 3, Av. Angamos 0610, Antofagasta, Chile. * E-mail: wck001@ucn.cl Director: Gabino Garrido Garrido.
Co-Director: Len Goty Vivar.
Fecha: 21 de marzo de 2015.
TRABAJO PRESENTADO EN OPCION AL TTULO DE QUMICO FARMACUTICO.
Esta tesis est vinculada con el rea de la
farmacognosia y el estrs oxidativo. Los conocimientos sobre los aceites presentes en las semillas de diferentes frutos sirvieron de base para que en el Laboratorio de Productos Naturales del Departamento de Ciencias Farmacuticas de la Universidad Catlica del Norte se extrajeran aceites de semillas de Citrus aurantifolia (Christm.) Swingle (limn de Pica) y Citrus sinensis (L.) Osbeck (naranja dulce de Pica). Para ello, se utilizaron las tcnicas de extraccin por Soxhlet, ultrasonido directo y ultrasonido indirecto, obtenindose un mayor rendimiento con el primer mtodo. Adems, fue determinado el perfil de cidos grasos, con composicin mayoritaria de cidos grasos insaturados, como los cidos linoleico y oleico. Tambin, se determinaron la cantidad de fenoles totales presentes y la actividad antioxidante, obteniendo mejores resultados para los aceites derivados de las semillas de naranja dulce de Pica. La tesis est constituida por 131 pginas y su estructura comprende una introduccin, cuatro captulos, referencias bibliogrficas y otras informaciones (anexos). En la Introduccin se aborda en dos pginas, de forma sinttica, tanto el estado del arte del proceso de extraccin de aceites de semillas como de la investigacin y determinacin de la composicin de cidos grasos, cuantificacin de los compuestos fenlicos totales y evaluacin de la actividad antioxidante de dichos aceites. Tambin
se plantean la hiptesis, un objetivo general y
cuatro objetivos especficos de manera clara y precisa, dirigidos al estudio de la extraccin de aceites por tcnicas convencionales y no convencionales, cuantificacin de cidos grasos y compuestos fenlicos totales y evaluacin de la actividad antioxidante. El captulo 1 presenta la Revisin Bibliogrfica (Marco Terico), en la que en 27 pginas, se hace un resumen de la localidad de Pica, ubicada en la Regin de Tarapac, Chile, donde fue obtenida la materia prima utilizada en este trabajo. Luego, se abordan las distintas especies estudiadas, desde su descripcin botnica hasta su produccin industrial, tanto a nivel local como internacional. Adems, se realiza una revisin de los compuestos ms importantes presentes en las semillas, como los cidos grasos y compuestos fenlicos, la descripcinde sus propiedades fisicoqumicas como tambin sus roles a nivel biolgico y sus beneficios en la salud humana. Se explica el funcionamiento de las tcnicas de extraccin por Soxhlet, extracciones directa o indirecta asistidas por ultrasonido, como mtodos extractivos utilizados, como tambin de la tcnica para la identificacin y cuantificacin de cidos grasos (cromatografa de gases). A ello, se le suma la explicacin de las tcnicas de Folin-Ciocalteu y ensayo con el radical 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH), para la cuantificacin de fenoles totales y medicin de la capacidad antioxidante de los aceites, respectivamente.
Chou Kam
Aceites de semillas de Citrus aurantifolia y Citrus sinensis con actividad antioxidante
El captulo 2 aporta los Materiales y Mtodos
en cuyas seis pginas se aborda la metodologa con que se realiz el estudio. Se realiza una descripcin del material de ensayo y la forma en que se obtuvo ste. Se describe la obtencin de la materia prima, desde su recoleccin hasta el posterior procesamiento de sus semillas para los distintos anlisis realizados. Se definieron las tres tcnicas de extraccin utilizadas: extraccin por Soxhlet, extraccin directa como indirecta asistida por ultrasonido, con sus respectivas condiciones, y consecuentemente, la obtencin del porcentaje de rendimiento de cada proceso. Se describe adems que la determinacin del perfil de cidos grasos se llev a cabo mediante la tcnica de cromatografa de gases acoplada a detector de ionizacin por llama, en donde se identificaron los distintos cidos grasos mediante la comparacin del tiempo de retencin frente a un estndar y la cuantificacin se realiz por el mtodo de normalizacin de reas. La cantidad total de compuestos fenlicos se obtuvo mediante la tcnica colorimtrica de Folin-Ciocalteu y la capacidad antioxidante de los aceites, a travs del mtodo DPPH. Todos los ensayos se realizaron por triplicado. Los datos fueron procesados mediante anlisis estadsticos adecuados. El captulo 3 presenta en 45 pginas los Resultados del estudio y la Discusin de dichos resultados en base a las referencias bibliogrficas actualizadas. Este captulo se divide en cuatro subcaptulos: 3.1. Extraccin convencional por Soxhlet y asistida por ultrasonido; 3.2. Perfil de cidos grasos; 3.3. Composicin de fenoles totales; y 3.4. Capacidad antioxidante. Estos resultados demostraron que los porcentajes de rendimiento de la obtencin de aceite por Soxhlet fueron mayores, en comparacin con las tcnicas de ultrasonido. Adems, independiente de la muestra y la tcnica de extraccin existe una mayor composicin de cidos grasos insaturados (cidos linoleico, oleico y -linolnico), que de cidos grasos saturados (predominantes los cidos palmtico y tricoslico). En cuanto a la cuantificacin de compuestos fenlicos totales, no se obtuvieron diferencias significativas entre ambas especies; sin embargo, entre las distintas
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tcnicas de extraccin se obtuvieron diferencias
significativas entre los aceites de naranja obtenidos por Soxhlet y por ultrasonido directo. En la medicin de la capacidad antioxidante el aceite de naranja de Pica, obtenido por Soxhlet, present un mejor comportamiento antioxidante que las dems muestras, corroborado por sus valores de actividad anti-radicalaria y concentracin efectiva 50 frente al radical DPPH. El captulo 4 aporta las Conclusiones y Recomendaciones a las que arriba el estudio. Dentro de las conclusiones se destaca que los aceites de semillas de limn y naranja de Pica presentan cidos grasos y compuestos fenlicos de inters biolgico y con potencial actividad antioxidante. Entre todas las tcnicas de extraccin, la extraccin por Soxhlet fue la ms ptima y otorga un mayor rendimiento del proceso. Los cidos grasos ms abundantes corresponden a los cidos linoleico, palmtico y oleico. Adems, se determin que los aceites de semillas de naranja de Pica presentan un mayor potencial antioxidante que los obtenidos a partir de semillas de limn de Pica. Las Referencias Bibliogrficas del estudio cuentan con 79 citas bibliogrficas; de ellas, 30 (38%) de los ltimos cinco aos y 54 (58%) de los ltimos 10 aos. La tesis cuenta adems, de seis tablas que resumen algunos datos relevantes en la Revisin Bibliogrfica y las condiciones de extraccin y anlisis de cidos grasos en Materiales y Mtodos y ocho figuras en las que se muestran las especies y equipos utilizados, as como algunos fundamentos de las tcnicas en la Revisin Bibliogrfica. Adems, presenta 32 tablas y 49 figuras en las que se exponen los resultados alcanzados. Se ha presentado un trabajo, derivado de esta tesis, en el XXXVI Congreso Anual de la Sociedad de Farmacologa de Chile, realizado del 5 al 7 de noviembre de 2014, en las Termas de Chilln, Chile, obteniendo el premio a la mejor investigacin cientfica expuesta en formato de pster. Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 1130601, por el