Uso Correcto de Micropipetas.

UNIVERSIDAD AUTNOMA BENITO JUREZ DE OAXACA
FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO
LICENCIATURA
PLAN DE ESTUDIOS
QUIMICO
FARMACUTICO
BILOGO
2009
CLAVE DE LA
ASIGNATURA
NOMBRE DE LA ASIGNATURA
Inmunologa
PRCTICA
NMERO
NOMBRE DE LA PRCTICA
FECHA Y
DURACIN
Uso correcto de micropipetas

(aspiracin y dispensacin)
12- Mayo-2016.
2 Horas
INTRODUCCIN
Tanto en el laboratorio de rutina como en la investigacin, la precisin y la funcionalidad deben

ser las caractersticas estndar de las pipetas de mbolo con cojn de aire. La micropipeta es un
instrumento empleado para absorber y transferir pequeos volmenes de lquidos y permitir su
manejo en las distintas tcnicas cientficas. Es de destacar que el uso de micropipetas permite
emplear distintos lquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas
desechables, de plstico, que habitualmente son estriles. Existen varios tipos de puntas para
los diferentes volmenes de pipeteo. Es necesario el cambio de la punta si el lquido es diferente
al ya muestreado o si el volumen establecido es cambiado. Cuando se pipetean lquidos que
tienen una viscosidad y densidad diferentes a la del agua, por ejemplo solventes orgnicos, una
pelcula de lquido se forma sobre las paredes internas de la punta. Esta pelcula puede crear
error. Desde que la pelcula remanentes sea constante en sucesivas pipeteadas con la misma
punta, este error puede ser evitado mediante la formacin de la pelcula antes de transferir la
primera muestra; esto es hacer una aspiracin de la muestra y dispensarla en el mismo vaso,
cuando la pelcula es formada ya todas las muestras siguientes tendrn mejor exactitud y
reproducibilidad. Esta operacin de pre-enjuague deber ser repetida cuando el volumen a ser
aspirado cambia o cuando se usa una nueva punta.

OBJETIVO
El objetivo general de esta prctica es que el alumno conozca y sea capaz de manejar y manipular
diferentes volmenes de micropipetas, trabajando correctamente las micropipetas., obteniendo
como consecuencia resultados confiables y reproducibles.
Objetivos especficos:
No pipetear volmenes que sobrepasen la capacidad de la micropipeta.
Durante el uso y manejo las micropipetas deben permanecer en forma vertical.
Ubicar las pipetas en soportes adecuados o en el embalaje original sin puntas.
Mantener limpias las micropipetas.
Si sus micropipetas son autoclavables y son sometidas a este proceso, estas debern ser
verificadas antes de su uso.
Evite autoclavar las micropipetas si esta caracterstica no se encuentra dentro de las
especificaciones.
Una vez terminado el uso de la micropipeta debe limpiarse el rea de acoplamiento con una
servilleta para evitar contaminacin.
3
FUNDAMENTO
Qu se entiende por pipeteado? El pipeteado es una operacin exacta de aspiracin y expulsin

de lquidos. Las pipetas con cojn de aire se emplean para pipetear lquidos acuosos en el rango
de microlitros a mililitros. Funciona segn el principio de cojn de aire (air interface).

PROCEDIMIENTO
EQUIPO, MATERIAL Y REACTIVOS NECESARIOS
MATERIALES REQUERIDOS
*Micropipetas de diferentes volmenes
*Puntas correspondientes a los diferentes volmenes.
*Agua destilada
*Solucin viscosa (Tween 20)
*2 vasos de precipitados
MATERIAL DE APOYO
* Equipo de bioseguridad

DESARROLLO DE LA PRCTICA
Partes generales de una micropipeta.
Uso correcto de una micropipeta.

Para graduar el volumen de la micropipeta identifique la rueda, control y/o tornillo de
graduacin: Seleccione la micropipeta y las puntas que va a utilizar teniendo en cuenta el
volumen de solucin a pipetear:
Seleccione el volumen por medio de la rueda y/o tornillo de graduacin, de forma firme pero
suavemente de vuelta al tornillo mientras observa el cambio de la numeracin del display.
Teniendo cuidado de exceder los lmites de la micropipeta. Ponga la punta correspondiente,
presione la punta firmemente usando un movimiento de torsin ligero.

Las pipetas multicanales funcionan tambin segn el principio de cojn de aire. Con ellas se
pueden realizar 8 bien 12 pipeteados simultneos.
En el mtodo de microtitulacin se pipetea en placas microtiter de 8 x 12 pocillos (placa
microtiter de 96 pocillos), cuyas distancias estn normadas. Esta tcnica posibilita, por ejemplo,
la determinacin de pequesimas cantidades de protenas (de la gama micro) y slo se puede
aplicar de forma racional con pipetas multicanales. Las pipetas multicanales son especialmente
adecuadas para la transferencia racional de muestras y para diluciones en serie y son ideales
para el lavado de placas microtiter.

CLCULOS Y REPORTE DE RESULTADOS
Detallar cada uno de los pasos de la metodologa con una breve resea acerca de la
funcin que tienen cada uno de los pasos a seguir para adquisicin y expulsin de la
muestra lquida, as como cada uno de los equipos utilizados para esta prctica.
Discutir
INTERPRETACIN Y CONCLUSIONES
De cada uno de los resultados obtenidos discutir acerca de las semejanzas y diferencias
con el resto de los equipos, fundamentar sus conclusiones con una breve discusin acerca
de lo que tenemos actualmente en la bibliografa.

ANEXOS
1. Investigar cuales son los campos de aplicacin y tcnicas de anlisis en los cuales es de gran
utilidad el uso de micropipetas? 2. Mencionar y describir las diferentes tcnicas de calibracin
(por lo menos 2) que son utilizadas comunmente? 3. Discutir acerca de la importancia que
tiene el buen manejo y manipulacin de las micropipetas?
REFERENCIAS
1.- Manual de Laboratorio de Inmunologa Bsica y Clnica 2011 est protegido por los Derechos de
Autor por la Secretara de Educacin Pblica del Instituto Nacional del Derecho de Autor con el N de
Registro 03-2009- 111713215700-14. Se publica en Abril de 2011 como un suplemento de REDVET
Revista electrnica de Veterinaria (http://www.veterinaria.org/revistas/redvet) con n ISSN 1695-7504 por
la editorial Veterinaria Organizacin S.L. http://www.veterinaria.org, Inscrita en el BORME de Espaa
con el nmero 2001/0175466 en el Grupo Servicios, sector Veterinarios. Copyright veterinaria.org 19962011.
2.- Manual de prcticas de laboratorio de Biologa Molecular, Fecha de publicacin:15 de Junio del 2012.
ISBN: 978-607-477-728-4
3.- Lewin, B. Genes IX, Pearson Education, 2007. [Genes VII, Marbn, 2001 (2000)].
4.-Luque, J., y Herrez, . Texto ilustrado de Biologa Molecular e Ingeniera Gentica. Ed. Harcourt, 2001.
5.- Lodish, H., et al. Molecular Cell Biology, 5th ed., W. H. Freeman, 2004. [Biologa celular y molecular (5
ed.). Editorial mdica panamericana, 2005 (2004)].
6.- Alberts, B., et al. Molecular Biology of the Cell, 5th ed., Garland Pub., 2007. [Biologa molecular de la clula
(4 ed.). Omega, 2004 (2002)].
7.- Watson, J.D., et al. Molecular Biology of the Gene, 6th ed., Benjamin Cummings and Cold Spring Harbor
Laboratory Press, 2008. [Biologa molecular del gen (5 ed.) Edit. Mdica Panamericana, 2005 (2004)].
8.- GUA DE MANEJO PARA MICROPIPETAS MANUALES, Fecha de actualizacin: Agosto de 2013.
9.- BRAND GMBH + CO KG P.O. Box 1155 97861 Wertheim Germany Tel.: +49 9342 808-0 Fax:
+49 9342 808-98000 E-Mail: info@brand.de Internet: www.brand.de. (Tomado de
www.brand.de/fileadmin/.../pdf/.../Brochuere_Volumenmessung_ES.pdf) Diciembre2015.

MECANISMO DE EVALUACIN
Puntualidad y asistencia
30 %
Bitcora
20%
Reporte
30%
Conocimientos previos
20%
MEDIDAS DE SEGURIDAD Y SALUD OCUPACIONAL
1.- Considerando que algunas sustancias qumicas son irritantes (slido, lquido y gas) a la piel y
mucosa, los alumnos deben portar correctamente su bata de laboratorio, zapatos antiderrapantes,
cubrebocas, googles as como cumplir con las medidas de seguridad dentro del laboratorio.
2.- Al pesar o medir reactivos evite tirarlo o derramarlos en el sitio donde se encuentre, en caso de
hacerlo limpiar perfectamente el lugar.
3.- No deber regresar a los envases originales, los remanentes de reactivos utilizados, as como
deber tener precaucin de utilizar pipetas o esptulas limpias y secas para manejarlas.
4.- Cuando se transfiera un lquido con pipeta, deber utilizarse perilla de seguridad. Nunca
succionar con la boca.
5.- Tener cuidado cuando se efecta una reaccin qumica en tubo de ensaye, que la boca de este
no se dirija hacia el compaero o hacia s mismo, ya que puede haber proyecciones.
6.-En caso de accidente (por pequeo que este sea) debe comunicarse de inmediato al maestro
responsable del laboratorio.
7.- La gran mayora de los disolventes orgnicos son voltiles e inflamables, al trabajar con ellos
deber hacerse en lugares ventilados nunca cerca de la flama. Los recipientes que las contienen
deben mantenerse cerrados y en lugares frescos y secos.
8.- Cualquier quemadura con cido, base o fuego poner la parte afectada mnimo 15 minutos bajo
el chorro de agua fra, neutralizar y acudir al botiqun si persisten molestias.
10
DISPOSICIN DE DESECHOS QUMICOS, FSICOS Y BIOLGICOS.

1. Los recipientes que tengan residuos de naturaleza lipdica, se limpiarn con papel
absorbente antes de lavarlos en la tarja y estos papeles se tirarn en el bote de basura del
laboratorio.
2. Los residuos de origen orgnico se tiraran en el bote de basura del laboratorio.
3. Los residuos de origen biolgico se desecharn en los contenedores especiales.
4. El material de cristalera de lavar con sanitizante alcalino y enjuagarse perfectamente.

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