IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS
Jos Bravo (28165246), Yuly de la cruz (28165213), Paola Montenegro
(28165226), Omaira Yama (28165230)
FACULTAD DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
UNIVERSIDAD DE NARIO
DOCENTE: Susana Calpa.

RESUMEN

En esta prctica se pudo realizar la identificacin de los diferentes carbohidratos

primero que todo se preparo la solucin a estudiar, en nuestro caso una solucin
problema (miel de abejas) y la muestra biolgica (clara de huevo) en las cuales se
utilizaron diferentes pruebas para su respectivo anlisis, en cada demostracin se
obtuvo resultados positivos y en otros negativos, se tuvo en cuenta algunas
propiedades en este caso algunas coloraciones y segn esto se determina la
reaccin para la determinacin de los carbohidratos. en la prueba de Molisch con
respecto a la solucin problema (miel de abejas) sali positiva ya que se produjo
una coloracin violeta indicando as la presencia de carbohidratos, en si se logro
reconocer los carbohidratos por medio de reacciones coloreadas de carcter
cualitativo y as diferenciar Hexosas de pentosas, aldosas de cetosas e identificar
azucares reductores y no reductores con la respectiva prueba.

Palabras claves: carbohidratos, pruebas, azucares, pentosas, aldosas, muestras

biolgicas.

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
INTROODUCCION
Los carbohidratos tambin llamados
azcares, osas o sacridos, son
polihidrxialdehidos
o
polihidroxicetonas o compuestos
polimricos
que
por
hidrlisis
producen
polihidrxialdehidos
y
polihidroxicetonas.
Segn el nmero de unidades de
azcares sencillos que posean se
clasifican en: monosacridos o
azcares sencillos, que a su vez
pueden ser aldosas cuando contienen
el grupo aldehdo o cetosas cuando
contienen el grupo cetona. Los
monosacridos naturales pertenecen
a la serie D de los azcares y pueden
tener entre tres y hasta siete tomos
de carbono. Los disacridos que
estn
formados
por
dos
monosacridos unidos entre s por
enlaces glucosdicos.
Los polisacridos que son polmeros
naturales con varios miles de
unidades de azcar sencillo ligadas
entre s.
De acuerdo con lo anterior, adems
de reconocer si un compuesto
pertenece a la familia de los
carbohidratos,
es
necesario
diferenciar si se trata de un
monosacridos tipo aldosa o cetosa,
si es fcilmente oxidable o no, es
decir si es un azcar reductor o no lo
es, si es de cinco tomos de carbono
2

(pentosa) o de seis tomos de

carbono (hexosa), si es disacrido o
polisacrido.
Ensayo de Molisch: Este ensayo es
un ensayo para reconocimiento
general de carbohidratos en el que
los polisacridos y disacridos se
hidrolizan
con
cido
sulfrico
concentrado hasta monosacridos y
se convierten en derivados del
furfural o 5-hidroximetil furfural los
cuales reaccionan con -naftol
formando un color prpura violeta.
Ensayo de Benedict: El ensayo de
Benedict permite el reconocimiento
de carbohidratos reductores, al igual
que el reactivo de Fehling, el de
Benedict contiene ion cprico en
medio alcalino que se reduce hasta
xido cuproso en presencia de
azcares
con
el
hidroxilo
hemiacetlico libre.
Ensayo de Barfoed: Esta prueba
permite
diferenciar
entre
monosacridos
y
disacridos
reductores, tambin contiene ion
cprico que se reduce hasta xido
cuproso ms rpidamente con los
monosacridos
que
con
los
disacridos.
Ensayo con Lugol: El reactivo de
Lugol que contiene una mezcla de
yodo y yoduro, permite reconocer
polisacridos,
particularmente
el
almidn por la formacin de una

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
coloracin azul violeta intensa y el
glicgeno y las dextrinas por
formacin de coloracin roja.
Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo
es especfico para cetosas y se basa
en la conversin de la cetosa en 5hidro-metil-furfural y su posterior
condensacin
con
resorcinol
formando as complejos coloreados.
Ensayo de Bial: El reactivo de Bial
contiene orcinol en cido clorhdrico,
el cual forma complejos de coloracin
slo con las pentosas.

PROCEDIMIENTO
Para realizar las diferentes pruebas
utilizamos dos muestras biolgicas:
MIEL DE ABEJAS: se disolvi 10 ml
de miel de abejas en agua destilada
hasta completar 100 ml y para que se
disolviera mejor se la agito en bao
Mara.
CLARA DE HUEVO: se midi 1ml de
clara de huevo y se agrego cinco
veces su volumen en agua y se agito
con la cual se har la identificacin de
azucares
1. Prueba para carbohidratos
en general: reaccin de
Molisch:
Carbohidratos:
miel
de
abejas, clara de huevo,
glucosa, sacarosa y almidn.
3

A un 1 ml de carbohidrato ms
agua se le agrego tres gotas
del reactivo de Molisch y se
agito, luego se dejo resbalar
por las paredes del tubo1 ml
de H2SO4 concentrado.
2. Prueba del acido mucico
para
reconocimiento
de
galactosa:
Carbohidratos:
miel
de
abejas, clara de huevo,
glucosa, galactosa y lactosa.
Esta prueba se realizo en la
cabina de extraccin de gases.
Se tomo 1ml de solucin de
carbohidrato en
diferentes
tubos de ensayo y luego se
adiciono
acido
ntrico
concentrado y se calent en un
bao Mara de agua hirviendo
hasta que el volumen del tubo
de ensayo sea la mitad del
original y la solucin tome un
color amarillento (1 hora).
Luego se saco los tubos del
agua hirviendo y se dejo
enfriar los tubos al aire libre
por 20 minutos y luego se los
deposito en bao de hielo.
Despus de haber pasado 2
horas con un agitador de vidrio
se tomo una pequea muestra
y se la miro en microscopio.
3. Prueba de ozasonas para
reconocimiento de azucares:
Carbohidratos:
miel
de
abejas, clara de huevo,

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
glucosa, galactosa, fructosa y
sacarosa.
Se coloco en diferentes tubos
0,5 ml de fenilhidrazina y luego
se
le
agrego
1ml
del
carbohidrato, luego se agito y
se calent en un bao de agua
hirviente y se dejo enfriar los
tubos a temperatura ambiente
para luego observar los
cristales en el microscopio.
4. Azucares
reductores:
Pruebas
de
Fehling
y
Benedict
Carbohidratos:
miel
de
abejas, clara de huevo,
glucosa, sacarosa y almidn.
Prueba de Fehling: en un
tubo de ensayo se mesclo 2ml
de solucin fehling A y 2 ml de
la solucin fehling B y al
instante se le agrego 1 ml de
solucin de carbohidrato, se
agito y se los coloco los tubos
en un bao Mara de agua
hirviente durante 15 minutos.
Prueba de Benedict: en un
tubo de ensayo se coloco 1ml
de la solucin de carbohidrato
ms 2ml de reactivo de
benedict, luego se agito y se
introdujo los tubos en bao de
agua hirviente durante 5
minutos.

5. Prueba de barfoed para

distinguir
entre
monosacridos
y
disacridos:
Carbohidratos:
miel
de
abejas, clara de huevo,
glucosa, fructosa, maltosa y
lactosa.
A 2ml de reactivo de Barfoed
se le agrego 1ml de solucin
de carbohidrato y luego se
agito, se calent el tubo en
bao de agua hirviente durante
5 minutos.
6. Prueba
para
el
reconocimiento de cetosas:
Carbohidratos:
miel
de
abejas, clara de huevo,
glucosa, fructosa y sacarosa.
Seliwanoff: a 2 ml de reactivo
de Seliwanoff se le agrego 1 ml
de la solucin de carbohidrato
y se calent en bao de agua
hirviente.
7. Prueba
de
Bial
reconocer pentosas:

para

Carbohidratos:
miel
de
abejas, clara de huevo, xilosa,
arabinosa y glucosa.
A 1ml de solucin de
carbohidrato se le agrego 3 ml
de reactivo de Bial, luego se
agito y se coloco en bao de
agua hirviente.

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
8. Reconocimiento
de
polisacridos con el reactivo
de lugol:
Carbohidratos:
miel
de
abejas, clara de huevo,
glucosa, dextrina, almidn y
glicgeno.
A 1ml de carbohidrato se le
agrego dos gotas del reactivo
del Lugol y se agito.

formaron
los
cristales
requeridos
para
esta
determinacin, esto se los
realizara en el microscopio,
una de las razones ms
considerables porque no se
produjo esta reaccin es la
estabilidad y calidad de los
reactivos que no fueron
suficientes en el aspecto de
calidad para generan los
objetivos propuesto.

DISCUSIN Y RESULTADOS
1.

Prueba para carbohidratos

en general: reaccin de
Molisch:
Al realizar
las diferentes
pruebas observamos que con
los
carbohidratos
que
reacciono la prueba de Molisch
fue con la sacarosa y la prueba
biologa en la cual utilizamos
miel de abejas ya que
observamos un anillo de color
violeta lo cual nos indica la
presencia de carbohidratos, en
las dems reacciones como
fue con el huevo dio como
resultado una coloracin rojiza
con un precipitado blanco igual
sucedi con el almidn.

2. Prueba del acido mucico

para
reconocimiento
de
galactosa:
Esta prueba fue imposible
comprobarla ya que no se
5

3. Prueba de ozasonas para

reconocimiento de azucares:
En esta prueba las reacciones
positivas
fueron
con
la
fructosa, el huevo y la
miel observando la aparicin
de cristales ya que las
ozasonas son compuestas por
la
condensacin
de
fenilhidrazina las cuales tienen
caractersticas cristalinas lo
cual
nos
permiti
su
identificacin. Con los dems
compuestos como fue con la
glucosa y sacarosa no se
observo reaccin alguna ya
que se obtuvo una coloracin
amarilla.
4. Azucares
reductores:
Pruebas
de
Fehling
y
Benedict:
Reaccin de fehling:

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
Se funda en el poder reductor
del grupo carbonilo de un
aldehdo. ste se oxida a cido
y reduce la sal de cobre (II) en
medio alcalino a xido de
cobre (I), que forma un
precipitado de color rojo. Un
aspecto importante de esta
reaccin es que la forma
aldehdo puede detectarse
fcilmente aunque exista en
muy pequea cantidad. Si un
azcar reduce el licor de
Fehling a xido de cobre (I)
rojo, se dice que es un azcar
reductor.
Se utiliza como reactivo para la
determinacin de azcares
reductores, y es til para
demostrar la presencia de
glucosa, y tambin para
detectar derivados de la
glucosa como la sacarosa o la
fructosa.

y rojas con baja intensidad, ya

que estos reactivos contienen
sales cpricas que le dan
coloracin en el reactivo como
fue en el caso de la sacarosa,
almidn y el huevo. En medio
alcalino el ion cprico se
transforma
en
hidrxido
cprico y este en presencia de
azcar reductor se transforma
en hidrxido cuproso que por
accin del calor se transforma
en oxido cuproso el cual es
insoluble en agua por lo cual
produce un precipitado de
color rojo y cuando se
encuentra
en
bajas
concentraciones su color es
amarillo como en el caso de
las reacciones que nos dieron
positivas ya que pertenecen a
grupos reductores libres.

Al
reaccionar
con
monosacridos,
se
torna
verdoso; si lo hace con
disacridos, toma el color del
ladrillo.

5. Prueba de barfoed para

distinguir
entre
monosacridos
y
disacridos:
Las pruebas que nos dieron
positivas fueron la fructosa, la
miel, la glucosa y el huevo ya
que al reaccionar con la
prueba de barfoed nos dio una
coloracin roja amarillenta ya
que aqu el cobre est en una
disolucin dbilmente acida,
en forma de acetato; por efecto
de sustancias reductoras en

Reaccin de benedict:
En
las
reacciones
que
realizamos
las
que
dio
positivas fueron: la glucosa, la
miel ya que se observo una
coloraciones de color amarilla
6

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
caliente, se producen iones
cuprosos que precipitan en
caliente en forma de oxido
cuproso.

arabinosa ya que nos dieron

una coloracin azul lo cual
quiere
decir
que
estas
contienen pentosas.
El huevo y la glucosa dieron
una coloracin amarilla.

6. Prueba
para
el
reconocimiento de cetosas:
SELIWANOFF:
Al transcurrir un tiempo de
realizar
la
reaccin
e
introducirla en bao de agua
hirviente se observo que los
carbohidratos
que
reaccionaron fueron la miel, el
huevo y la sacarosa ya que
produjeron un color rojo
intenso a los pocos minutos de
haberlo colocados al calor,
comprobando as que hubo la
presencia de cetohexosas,
aldosas. Ya que las cetosas en
presencia de acido clorhdrico
se deshidratan rpidamente
que las aldosas produciendo
derivados del furfural que se
condensa con resorcinol lo
cual da una coloracin roja.

8. Reconocimiento
de
polisacridos con el reactivo
de lugol:
En esta reaccin con el
almidn nos dio positiva ya
que obtuvimos una coloracin
azul oscura, pero con los
dems carbohidratos nos dio
una coloracin roja como fue
con la glucosa, el huevo y la
miel.
Con la dextrina la prueba nos
resulto con una coloracin
negra por lo cual pudimos
determinar que la muestra
estaba contaminada y el
glicgeno por ser altamente
ramificado, con segmentos
cortos produjo una coloracin
roja.

7. Prueba
de
Bial
para
reconocer pentosas:
La pruebas que nos dieron
positivas fueron la xilosa,

PRUEBAS

Miel

Clara
de
huevo

MOLISCH
ACIDO
MUCICO

OZASONAS
FEHLING

+
+

+
+

Glucosa

+
+

Sacarosa

Almidn

Galactos
a

Lactos
a

Fructosa

+
+

Maltos
a

xilos
a

Arabinos
a

Dextrina

glicgeno

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
BENEDICT
BARFOED
SELIWANOFF
BIAL
LUGOL

+
+
+

+
+
-

+
+

+
-

+
-

CONCLUSIONES

Los carbohidratos tienen una

estructura definida pueden ser
monosacridos,
disacridos,
trisacridos, oligosacridos y
polisacridos. y se los puede
identificar
mediante
las
pruebas
realizadas
anteriormente
en
donde
dependiendo de su estructura
indican una coloracin.

Los monosacridos reaccionan

de acuerdo a los grupos
hidroxilo y carbonilo que
poseen. Los disacridos y los
polisacridos
se
pueden
hidrolizar
para
producir
monosacridos. Los azcares
que dan resultados positivos
con
las
soluciones
de
Benedict Fehling se conocen
como azcares reductores, y
todos los carbohidratos que
contienen un grupo hemiacetal
o hemicetal dan pruebas
positivas. Los carbohidratos
que solo contienen grupos
acetal o cetal no dan pruebas
positivas con estas soluciones

y se llaman
reductores.

azcares

no

La
glucosa,
dextrosa
y
galactosa son monosacridos
y la lactosa, maltosa y
sacarosa, disacridos.

El uso del yodo no es buen

determinante
para
la
determinacin
de
polisacridos.

Comparada Con La Muestra

Biolgica Con La Muestra
Problema

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
PRUEBAS

Muestra
problema
Miel

Muestra
biolgica
Clara de
huevo

MOLISCH
ACIDO
MUCICO
OZASONAS
FEHLING
BENEDICT
BARFOED
SELIWANOFF
BIAL
LUGOL

+
-

EL ENSAYO DE MOLISH
En el caso de la muestra
problema (miel de abejas) la
prueba fue positiva
dando
lugar a derivados de color
prpura. Es una prueba
general de azcares.
OZASONAS
En el huevo y la miel se
observo la aparicin de
cristales ya que las ozasonas
son compuestas por
la
condensacin de fenilhidrazina
las
cuales
tienen
caractersticas cristalinas lo
cual
nos
permiti
su
identificacin.
FEHLING

Tanto la Muestra problema

(Miel) y muestra biolgica
(clara de huevo) fueron
positivas lo que indica,
Positivo: Aldehdos alifticos y
-hidroxialdehidos
Negativo:
Aldehdos
aromticos
y
cetonas
Reaccin de oxidacin de
azcares por iones cpricos
Un ejemplo tpico de azcares
reductores seran la glucosa y
la maltosa, y de azcares no
reductores,
el
disacrido
sacarosa
(O--Dfructofuranosil-(2-1)--Dglucopi Las cetosas, que no
son
azcares
reductores,
sufren,
sin
embargo,
reacciones de oxidacin tpicas
de los aldehdos; para ello
necesitan un medio bsico, ya
que a valores altos de pH se
produce una isomerizacin a la
correspondiente aldosa.
BENEDICT
Tanto la Muestra problema
(Miel) y muestra biolgica
(clara de huevo) fueron
positivas lo que indica,
Positivo: miel precipitada de
color
rojo
ladrillo
Negativo: clara de huevo

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
Lo que indica que:

SELIWANOFF

Cu + + OH - Cu (OH)
(precipitado amarillo)

la Muestra problema (Miel) y

muestra biolgica (clara de
huevo) fueron positivas lo que
indica, derivados de color rosarojo. Es una prueba especfica
de hexosas. Las cetosas en
medio cido se deshidratan
ms rpidamente que las
aldosas, por lo que ambos
grupos pueden diferenciarse
en funcin del tiempo que
tarda en aparecer el producto
coloreado.

El hidrxido pierde agua

2Cu
(OH)

Cu2O
(precipitado rojo ladrillo) + H2O
La aparicin de un precipitado
amarillo, anaranjado, o rojo
ladrillo evidencia la presencia
de un azcar reductor.
BARFOED
La aparicin de un precipitado,
en la Muestra problema (Miel)
y muestra biolgica (clara de
huevo). Fueron positivos.
Aparece un precipitado blanco
de
cido
mcico.

galactrico.Sirvio
para
identificar la galactosa los
azcares que la contiene. se
diferencia a los mono de los
disacridos. Estos ltimos
reaccionan ms lentamente
con el acetato cprico, debido
probablemente
al
tamao
molecular, aunque tambin
pueden estar implicados otros
factores tales como una
interaccin ms compleja con
los dos anillos monosacridos.

BIAL
Se realizo la prueba solamente
en la muestra biolgica (clara
de huevo), la cual resulto
negativa y no dio lugar a
derivados de color azul. Esto
indica que no Es pentosas.
LUGOL
Tanto la Muestra problema
(Miel) y muestra biolgica
(clara de huevo) fueron
negativas lo que indica, que no
hubo la presencia de almidn
al no cambiar su color de
caramelo a azul.

BIBLIOGRAFIA:
10

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 201

0
1. Qumica Orgnica. McGraw
Hill. Novena edicin. Espaa.
1997.

11

2.

J. Qumica Orgnica. Quinta

edicin, Thomson editores,
Mxico, 2001