I

INTRODUCCION
Las enzimas son biocatalizadores de naturaleza proteica cuya
funcin es acelerar las reacciones qumicas llevndolas ms
rpidamente a su posicin de equilibrio. Pertenecen al grupo de las
protenas globulares cuyos pesos moleculares oscilan entre 104 y
106 daltons; pueden consistir de una sola o de varias cadenas poli
peptdicas, y contener tambin partes no proteicas. En una
reaccin bioqumica catalizada por enzimas, a medida que
progresa la reaccin se incrementa la concentracin de los
productos a expensas de la desaparicin de los correspondientes
sustratos, en tanto que pertenece fija la concentracin de la
enzima. De esto podemos deducir que si se desea medir la
actividad de una enzima puede hacerse controlando el sustrato no
transformado (sustrato residual) o controlando los productos
liberados. Tambin puede medirse la modificacin de los factores,
en el caso de enzimas que requieren estas sustancias. La actividad
cataltica se expresa en trminos de unidades de actividad, y para
ello la Comisin de Enzimas para la Unin Internacional de
Bioqumica sugiri que Una unidad (u) de cualquier enzima se
define como la cantidad que catalizar la transformacin de un
micromol de sustrato por minuto bajo condiciones definidas de pH
y temperatura. En la prctica se estudiar la actividad de una
amilasa

de

origen

vegetal,

midiendo

el

sustrato

residual.

Asimismo, se medir su actividad especfica, que viene a constituir

un criterio de pureza, y se define como el nmero de unidades de
enzima por mg de protena.
II

OBJETIVOS
Determinar la actividad enzimtica de una amilasa, extrada de
trigo germinado, dosando almidn residual
Determinar la actividad especfica de la amilasa vegetal

III

CUESTIONARIO
1.- En la sntesis de arginina a partir de acido glutmico se
observaron las siguientes reacciones

Siendo 1, 2, 3,4 enzimas

Indica cuales son los sustratos y productos correspondientes para
estas enzimas mediante un cuadro.

2.- Por qu se sometieron las raicillas del cereal a un proceso

fsico y qumico en el proceso de extraccin?
El proceso de extraccin se basa en la obtencin de
amilasa, por lo que es necesario que las raicillas de
los cereales sufran un proceso fsico donde se van a
fragmentar en pedazos ms pequeos con la ayuda de
un mortero pero aun as siguen conservando su
naturaleza, luego se da el proceso qumico donde se
va a filtrar la parte liquida que seria la amilasa de
las semillas con la ayuda de una gasa ,luego a este
extracto se le van agregando una seria de reactivos lo
cual permitirn transformarla en un preparado
enzimtico
para
posteriormente
utilizarla
en
diferentes pruebas.

3.- Si se te da una solucin que supuestamente contiene

una enzima, Cmo determinaras en la solucin la
presencia de una enzima que cataliza la hidrolisis de
almidn?
Para determinar la presencia de una enzima en una
solucin y a la vez observar que cataliza la hidrolisis
de almidn solo se podra lograr a travs de una va
,la cual consiste en agregar reactivos que permitan
evidenciar tal presencia como es el caso del lugol ,
adems porque mientras el color de la mezcla sea
ms intenso significa que la actividad enzimtica que
ejerce la amilasa sobre el almidn ser un poco mas
baja , adems tambin la podemos notar ya que en la
solucin se va a observar la formacin de anillos en
la parte superior de dicho liquido o sustancia.

4.- Represente mediante un flujograma el proceso de extraccin

de una amilasa de una fuente diferente a la utilizada en
prctica.

RACES DE
YUCA
Agua

LAVADO

Cascarilla

RALLADO

Agua

TAMIZADO

SEDIMENTACION

Afrecho

Mancha de agua

FERMENTACION

SECADO

Almidn agrio

SECADO

Almidn nativo

5.- Como se puede incrementar la actividad especfica de una

enzima?
La actividad especfica de las enzimas se calcula
dividiendo la actividad enzimtica (por ejemplo;
U/mL) entre la concentracin de protenas (mg/mL). El
resultado final indica la cantidad de enzima por
milgramos de protenas presente. Se supone que si
purificas la enzima normalmente la actividad
especfica de la misma debe aumentar, ya que la
proporcin de enzima del total de las protenas
presentes debe tambin irse incrementando. A veces
esto no ocurre. En ese caso debe revisar el
procedimiento otra vez ya que algo puede estar
saliendo mal. Por ejemplo que se desnaturalice la
enzima en el proceso de purificacin por empleo de
algn solvente o pH o fuerza inica inadecuada.
Tambin debe tener en cuenta si la protena en
milimtrica, ya que la prdida de una subunidad
puede reducir significativamente su actividad.