UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE MEDICIA HUMANA

GUA PRCTICA:

PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA Y GLUCOSA

POST PRANDIAL

ALUMNO:
MENDOZA LOVERA, LEONEL
CICLO:
III - MA
CURSO:
BIOQUMICA Y NUTRICIN
PROFESOR:
GARCA CALDERON, JACK

ICA PER
2016

OBJETIVOS
1. Reconocer la presencia de algunos aminocidos en las protenas.
2. Adquirir informacin sobre algunas propiedades fsicas y qumicas de
aminocidos
3. Demostrar la capacidad tampn de un sistema amortiguador empleando
un cido dbil y la sal del cido dbil
4. Estudiar la curva de titulacin valoracin de un cido dbil HA,
como el cido actico (0.1N) y una base fuerte NaOH 0.1N y las
variaciones del pH con respecto a diferentes proporciones relativas entre
la sal y el cido de una solucin tampn.

MARCO TEORICO
En animales superiores, las protenas son los compuestos orgnicos ms
abundantes, pues representan alrededor del 50% del peso seco de los tejidos.
Desde el punto de vista funcional, su papel es fundamental. No existe proceso
biolgico alguno que no dependa de la presencia y/o actividad de este tipo de
sustancias; las protenas cumplen diferentes funciones: enzimas, hormonas,
trasportadores, los anticuerpos, receptores de muchas clulas, etc.

Todas las protenas contienen carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno y casi

todas poseen tambin azufre. Si bien hay ligeras variaciones en diferentes
protenas, el contenido de nitrgeno representa, trmino medio, el 16% de la
masa total de la molcula, lo cual permite calcular la cantidad de protena
existente en una muestra, por medicin del N de la misma.

Debido a su gran tamao, cuando se dispersa a estas molculas en un

solvente adecuado, forman obligadamente soluciones coloidales, con
caractersticas especiales que las distinguen de las soluciones de molculas
pequeas.

Por medio de la hidrlisis, las molculas protenicas son escindidas en sus

monmeros, los aminocidos. Y cientos o miles de estos aminocidos pueden
participar en la formacin de la gran molcula polimrica de una protena.

Los aminocidos, como ya hemos comentado, son materia prima de protenas

y pptidos que cumplen diferentes funciones en nuestro organismo. No
obstante, tambin pueden utilizarse como materia prima del metabolismo
energtico, de hecho, alrededor del 30% de los aminocidos, pasan a una ruta
metablica que, despus de eliminar el nitrgeno de la molcula, enva los
productos desaminados al ciclo de Krebs.

Las soluciones de cidos dbiles y sus bases conjugadas se comportan como

"soluciones amortiguadoras" o "buffers" ya que tienden a resistir los cambios de
pH. El efecto amortiguador se produce debido al equilibrio:
AH + H2O A- + H3O+
Si se agrega un cido, aumentar la [H+ ], pero el equilibrio se desplazar
hacia la izquierda favoreciendo la formacin del cido, lo cual consumir los
protones aadidos. Si en cambio se agrega una base, se producir inicialmente
una disminucin de la [H+ ] y esto favorecer la disociacin del cido (el
equilibrio se desplazar hacia la derecha) que repondr los H+ gastados.
La eficacia del amortiguador o tampn depende de las [A- ] y [AH], del pH del
medio y es mxima cuando este valor es prximo al pKa.

Una propiedad importante de los aminocidos, consecuencia del hecho

de que todos ellos tienen grupos carboxilo (-COOH) y grupos amino (-NH2) es
su conducto como electrolitos. Es costumbre considerar los grupos COOH
como de naturaleza acdica y los grupos NH como de carcter bsico.
Hemos estudiado en las clases tericas el comportamiento de los
aminocidos como iones dipolares y la conducta de ellos durante su titulacin
con cido y lcalis de modo que se comportan como verdaderas
sustancias tampones, amortiguadores buffers, para el sostenimiento del
pH del medio interno dentro de estrechos lmites (7.35 a 7.45).
Explicamos tambin el comportamiento amortiguador del ion dipolar glicina
al aadirle iones H+ o al aadirle OH impidiendo las variaciones bruscas
del pH sanguneo. La representacin de un aminocido tal como la glicina
por la frmula NH2CH2 COOH sugiere que se trata de una sustancia en la que
el grupo amino acta como una base conjugada y el grupo
COOH como un cido. Se ha observado, sin embargo, que esta formulacin
no es la correcta del estado inico de un aminocido en solucin acuosa.
La verdadera representacin es aquella que dimos del ion dipolar (A) y
que es la siguiente:
(Estructura A)
H
R C COOEstructura (A) NH3

H
R C COOH
Estructura (B) NH2

Y que es la forma en la cual se encuentran en el torrente circulatorio, es decir,

al pH fisiolgico (7.4) los grupos carboxilo existen como la base conjugada,
esto es, como in carboxlico R-COO-; y al mismo pH, la mayora de los
grupos amnicos estn predominantemente en la forma protnica R-NH 3+

La estructura (A) inica es la prevalente en la sangre y en la mayora

de los tejidos. La estructura (B) no puede existir a ningn pH. La
conveniencia nos ensea sin embargo que la estructura (B) se use por
razones didcticas y para explicar la mayora de las ecuaciones que
entraan reacciones distintas a las de los equilibrios protnicos. La
contribucin ms importante a la conducta de una protena como
electrolito procede de los grupos ionizables existentes en las cadenas
laterales de los aminocidos. La curva de titulacin de una protena
aminocido con cido lcali vendr determinada en gran medida por el
nmero de cada uno de estos grupos ionizables de las cadenas laterales
de sus unidades de aminocidos. Por estas razones las soluciones de
protenas tienen una poderosa capacidad tampn.
Esta propiedad amortiguadora es de importancia decisiva en los sistemas
biolgicos y ha sido estudiada con especial cuidado con relacin a los
amortiguadores de la sangre humana cuyo pH es controlado dentro de
estrechos lmites, tal como les expliqu en la clase terica. Les dije que
los valores de pH sanguneo varan dentro de lo normal entre 7.35 a 7.45,
cuando la sangre alcanza valores por debajo de 7.35 se produce acidosis;
y cuando los valores de pH se elevan por encima de 7.45 se produce
alcalosis. La sangre contiene otros dos sistemas tampones que son:
1) El Sistema bicarbonato/Acido carbnico (pK: 6,1)
2) El sistema fosfato mono sdico/di sdico (pK: 6,8)
La protena ms importante de la sangre del ser humano es la
Hemoglobina que tiene gran capacidad tampn en la proximidad del pH
7.4, lo cual se debe a su elevado contenido de histidina (grupo imidazol)
Aproximadamente el 60% de la capacidad tampn de la sangre total se debe
a la Hb, y un 20% es atribuible a las protenas del plasma (seroalbminas y
globulinas).
Recordemos que segn lo propuesto por Bronsted: un cido es una sustancia
que al ionizarse genera iones Hidrgeno, H+, una base es toda sustancia
capaz de aceptar estos iones hidrgeno. Como los cidos ceden protones
y las bases los captan, a cada cido le corresponde, como es lgico,
una base conjugada. Es decir, si un cido cede un protn, el ion, as
formado, puede captarlo de nuevo comportndose como base. Por lo
tanto, los procesos de cesin captura de protones transcurren de forma
reversible:
Cesin de protones

Acido

AH

A- + H+

captacin de protones

Base

El cido y la base conjugada forman un par cido/base. Las soluciones que

contienen cidos dbiles y sus sales se llaman soluciones tampn,
buffers amortiguadores. Su finalidad es impedir amortiguar las

bruscas variaciones del pH.El pH de una solucin amortiguadora puede

calcularse utilizando la ecuacin de Henderson-Haselbach:
SAL
pH = pK + log -----------ACIDO
A partir de esta ecuacin se deduce que el pH de una disolucin tampn
depende de la naturaleza del cido que la integra y de la proporcin entre la
sal y el cido (logaritmo de la relacin entre ambos) y no de las
concentraciones absolutas de cada uno de estos componentes. La
eficacia amortiguadora es mxima cuando el cociente de la relacin
sal/cido es prximo a la unidad.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:

Potencimetro.
Beakers de 50 ml de vidrio (11 para cada mesa de trabajo).
Baguetas de vidrio (3 por cada mesa).
Pipetas de 10 ml graduadas 1/10 (3 por cada mesa).
Agua destilada.
Solucin de CH3-COOH 0.1N.
Solucin de NaOH 0.1N.
Papel milimetrado cuadriculado.

PARTE EXPERIMENTAL:
Mezclar los volmenes de CH3 -COOH 0.1N y de NaOH 0.1N con agua
destilada sealados en la tabla siguiente, mezclar bien y luego medir el pH en
cada uno de los 11 Beakers con el potencimetro:

Beaker N

Acido Acetico
0.1 N (ml)

NaOH 0.1 N
(ml)

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11

10
10
10
10
10
10
10
10
10
10
10

0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Agua
Destilada
(ml)
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0

pH

En cada mesa los alumnos construirn su grfica de valoracin

colocando en las coordenadas los valores de pH en orden creciente y en
el eje de las abscisas los volmenes de NaOH 0.1N aadidos en cada
Beakers.

Ph

ml NaOh aadido

CONCLUSIONES
Las soluciones amortiguadoras son importantes en nuestros procesos vitales el
PH de los jugos gstricos ayudan a la digestin de los alimentos se mantienen
entre 1.6 - 1.7 mediante la accin amortiguadora. La saliva se mantiene a un
PH de 8.0. La sangre mantiene con mucha exactitud entre los lmites del PH
normal de 7.3 y 7.5 por un sistema complejo de soluciones amortiguadoras que
consisten en protenas del suero que consta de aminocidos que contienen
grupos cidos (-COOH) y bsicos (-NH2); iones de carbonato CO23- y los
iones de bicarbonato HCO3-; E iones de fosfato cido (H2PO4 -) y de fosfato
bsico HPO42 -. Por lo cual tienen mltiples aplicaciones, tanto en la industria
como en los laboratorios.

CUESTIONARIO:
1. Explique que es un par tampn, como funciona y porqu las protenas
sanguneas son amortiguadores.
Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora es la
mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y
su base conjugada, es decir, sales hidrolticamente activas. Tienen la
propiedad de mantener estable el pH de una disolucin frente a la
adicin de cantidades relativamente pequeas de cidos o bases
fuertes. Este hecho es de vital importancia, ya que meramente con un
leve cambio en la concentracin de hidrogeniones en la clula se puede
producir un paro en la actividad de las enzimas.
Mecanismo de actuacin de las soluciones tampn
Para poder entender con claridad el mecanismo que utiliza el organismo
para evitar cambios significativos de pH, pondremos un ejemplo de
actuacin del tampn de ms importancia en el organismo, el equilibrio
de cido carbnico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-), presente en el lquido
intracelular y en la sangre.
Como producto del metabolismo se produce CO 2 que al reaccionar con
las molculas de agua produce cido carbnico, un compuesto inestable
que se disocia parcialmente y pasa a ser bicarbonato segn el siguiente
equilibrio:
CO2 + H2O

H2CO3

HCO3- + H+

Entonces, el bicarbonato resultante se combina con los cationes libres

presentes en la clula, como el sodio, formando as bicarbonato
sdico (NaHCO3), que actuar como tampn cido. Supongamos que
entra en la clula un cido fuerte, por ejemplo, cido clorhdrico(HCl):
HCl + NaHCO3 NaCl + CO2 + H2O
Como se puede ver en la anterior reaccin el efecto cido
clorhdrico queda neutralizado por el bicarbonato de sodio y resultan
como productos sustancias que no provocan cambios en el pH celular y
lo mantienen en su valor normal, que es 7,4.
Las protenas plasmticas. Se comportan como amortiguadores gracias
a sus grupos carboxlico y amino, y pueden experimentar las siguientes
reacciones:

El grupo imidazlico de la histidina es tambin un importante

amortiguador de muchas reacciones.
2. Describa las principales sustancias amortiguadoras del organismo
humano.
El pH de la sangre de los seres humanos es de alrededor de 7,4. Un
aumento de pH por encima de 7,45 conduce a la condicin de alcalosis
que provoca espasmos musculares y parlisis respiratoria. Si el pH
fisiolgico cae por debajo de 7,35, se produce acidosis que provoca
depresin del sistema nervioso central. Varios factores, incluyendo el
ejercicio, la dieta y los cambios en los patrones respiratorios, alteran el
pH fisiolgico. El cuerpo responde a estos cambios a travs de la accin
de los amortiguadores que resisten la alteracin del pH.
Amortiguador bicarbonato
El mantenimiento del pH de la sangre se regula a travs del
amortiguador bicarbonato. Este sistema consiste en cido carbnico e
iones de bicarbonato. Cuando el pH de la sangre cae en el intervalo
cido, este amortiguador acta para formar dixido de carbono. Los
pulmones expulsan este gas fuera del cuerpo durante el proceso de
respiracin. En condiciones alcalinas, este amortiguador trae de nuevo
el pH a neutro, causando la excrecin de los iones bicarbonato a travs
de la orina.
Amortiguador fosfato
El sistema del amortiguador fosfato acta de una manera similar al del
bicarbonato, pero tiene una accin mucho ms fuerte. El medio interno
de todas las clulas contiene este amortiguador que comprende iones
de hidrgeno e iones de fosfato de dihidrgeno. En condiciones donde
un exceso de hidrgeno entra en la clula, este reacciona con los iones
de fosfato de hidrgeno, que los acepta. En condiciones alcalinas, los
iones de fosfato de dihidrgeno aceptan los iones de hidrxido en
exceso que entran a la clula.
Amortiguador de protenas
Las protenas consisten de aminocidos unidos por enlaces peptdicos.
Los aminocidos poseen un grupo amino y un grupo cido carboxlico. A
pH fisiolgico, el cido carboxlico existe como in carboxilato (COO-)
con una carga negativa y el grupo amino existe como in NH3 +.
Cuando el pH es cido, el grupo carboxilo ocupa el exceso de iones de
hidrgeno para volver de nuevo a la forma de cido carboxlico. Si el pH

de la sangre se vuelve alcalino, se produce una liberacin de un protn

desde el in NH3 +, que toma la forma de NH2.
Amortiguador de hemoglobina
El pigmento respiratorio presente en la sangre, la hemoglobina, tambin
tiene accin amortiguadora dentro de los tejidos. Tiene una capacidad
de unirse ya sea con protones o con oxgeno en un punto dado de
tiempo. La unin de uno libera al otro. En la hemoglobina, la unin de los
protones se produce en la porcin globina mientras que la unin del
oxgeno se produce en el hierro de la porcin hemo. En el momento del
ejercicio, se generan protones en exceso. La hemoglobina ayuda en la
accin amortiguadora por la toma de estos protones, y al mismo tiempo
libera oxgeno molecular.

BIBLIOGRAFA
1. DOcon MC, Garca MJ, Vicente JC (1998). Estudio del equilibrio cidobase. En DOcon MC, Garca MJ, Vicente JC (eds): Fundamentos y
Tcnicas de Anlisis Bioqumico, 1 ed. Editorial Paraninfo (Madrid,
Espaa), pp. 27 38.
2. McEnerney K (1995). Fisiologa acidobsica. En Anderson SC, Cockayne
(eds): Qumica Clnica, 1 ed. Editorial Interamericana McGraw-Hill
(Mxico D.F., Mxico), pp. 410 441. McKee T, Mckee JR (2003).
3. El agua: el medio de la vida. En Mckee T, McKee JR (eds): Bioqumica. La
Base Molecular de la Vida, 3 ed. Editorial McGraw-Hill Interamericana
(Madrid, Espaa), pp. 65 91.