Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
FISIOLOGICAS
Fecha: 01-04-2014
Plan: 3647 Bacteriologa y
Laboratorio Clnico
PRCTICA DE LABORATORIO N
2
Martha Solrzano
Enzimologa: Parte 1
PROCEDIMIENTO
Se prepararon distintas soluciones con base en los patrones descritos en las
Tablas 1 y 2 para evidenciar la influencia que tienen la temperatura y el cambio
de pH en la enzima Fosfatasa alcalina (FAL)
1) Efecto de la temperatura
- Se prepararon las soluciones segn los datos que suministra la Tabla 1.
- Antes de adicionar la enzima, se incubaron los tubos con los otros reactivos
por ms de 3 minutos en las diferentes temperaturas.
- Culminado el tiempo de incubacin, se agreg 0.1mL de la enzima a cada
tubo (con una diferencia de 3 minutos entre cada tubo) y rpidamente se
registr su Absorbancia.
- Los datos observados en la Tabla 1, corresponden a los registros obtenidos
por el Grupo 1 de la prctica, puesto que fueron los datos que ms se ajustaron
a los datos tericos reportados en el momento.
Tabla 1. Datos de preparacin de las distintas soluciones y de las absorbancias
registradas, influenciadas por las distintas temperaturas de tratamiento.
TUBO (ml)
SOLUCIN
Buffer B. pH 9.6
Agua destilada
p-NF 2.0mM
Temperatura C
Ex Enzima FAL
Absorbancia
Blanc
o
0.3
2.7
------25C
0.1
0.3
2.4
0.3
4C
0.1
0.15
4
0.3
2.4
0.3
30C
0.1
0.18
5
0.3
2.4
0.3
37C
0.1
0.23
2
0.3
2.4
0.3
50C
0.1
0.06
5
5
0.3
2.4
0.3
100C
0.1
0.091
1) Efecto del pH
- Se prepararon las soluciones segn los datos que suministra la Tabla 2.
- Antes de adicionar la enzima, se incubaron los tubos con los otros reactivos por
ms de 3 minutos a 37C.
- Culminado el tiempo de incubacin, se agreg 0.1mL de la enzima a cada tubo
(con una diferencia de 3 minutos entre cada tubo) y rpidamente se registr su
Absorbancia.
- Los datos observados en la Tabla 2, corresponden a los registros obtenidos por
el Grupo 5 (Nuestro grupo) de la prctica, puesto que fueron los datos que ms se
ajustaron a los datos tericos reportados en el momento.
Tabla 2. Datos de preparacin de las distintas soluciones y de las absorbancias
registradas, influenciadas por los distintos valores de pH.
SOLUCIN
Buffer 0.3 mL
Agua destilada
p-NF 2.0mM
Enzima FAL
Absorbancia
TUBO (ml)
1
pH
3.4
2.4
0.3
0.1
0.026
2
pH
7.0
2.4
0.3
0.1
0.044
3
pH
9.2
2.4
0.3
0.1
0.087
4
pH 9.6
2.4
0.3
0.1
0.092
5
pH
10.4
2.4
0.3
0.1
0.076
6
pH
10.8
2.4
0.3
0.1
0.065
CONCLUSIONES
en nuestro cuerpo debe ser optima, de no ser as, el ser humano puede
presentar mltiples fallas en su organismo.
BIBLIOGRAFA
[1] http://www.holadoctorfeldman.com.ar/dietaalcalina.html
[2] http://www.infobioquimica.com/wrapper/CDInterpretacion/te/bc/194.htm
ANEXOS
Grafica 2. Absorbancia vs pH