UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ZONA CENTRO ORIENTE - ZONAL BUCARAMANGA

ESCUELA DE CIENCIAS BSICAS, TECNOLOGA E INGENIERA
PROGRAMA DE QUMICA
CURSO: 401542_CROMATOGRAFA

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD

Escuela de Ciencias Bsicas, Tecnologa E Ingeniera (ECBTI)
Programa de Qumica
Cromatografa

Practica_1 HPLC Simulador

Pre-Informe

Olaya Bulla, Andrs Paul

Cd.: 1098695948

Grupo_2

Gloria Maria Doria

Tutor

Bucaramanga
Abril de 2015

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PROGRAMA DE QUMICA
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PRACTICA_1 HPLC SIMULADOR

Objetivos
Utilizar un Simulador de HPLC para la separar los componentes de una mezcla
basndose en diferentes tipos de interacciones qumicas entre las sustancias
analizadas y la columna cromatografa.
Familiarizar la terminologa con la prctica, enmarcando teora, componentes y
funcionalidad.

Marco terico:
Cromatografa lquida de alta presin es bsicamente una forma altamente mejorada
de cromatografa en columna. En lugar de un disolvente puede gotear a travs de una
columna bajo gravedad, es forzado a travs bajo altas presiones de hasta 400
atmsferas. Eso lo hace mucho ms rpido.
Tambin permite utilizar un tamao de partcula mucho menor para la columna que da
una superficie mucho mayor para las interacciones entre la fase estacionaria y las
molculas que fluye ms all de lo material de embalaje. Esto permite una mejor
separacin de los componentes de la mezcla.
La otra mejora importante sobre cromatografa en columna refiere a los mtodos de
deteccin que pueden ser utilizados. Estos mtodos son altamente automatizada y
extremadamente sensibles.
La columna y el solvente, hay dos variantes de uso en HPLC segn la polaridad
relativa del solvente y la fase estacionaria.
Fase normal HPLC: La columna est llena de partculas de slice diminuta, y el
solvente es no-polar hexano, por ejemplo.
Compuestos polares en la mezcla se pasa a travs de la columna se adhieren ya la
slice polar de compuestos no polares. Los no polares por lo tanto pasarn ms
rpidamente a travs de la columna.
Fase reversa HPLC: En este caso, el tamao de la columna es el mismo, pero el
slice es modificado para hacerlo no polares atando cadenas hidrocarbonadas largas a
su superficie, tpicamente con 8 18 tomos de carbono en ellos. Se utiliza un
solvente polar, por ejemplo, una mezcla de agua y un alcohol como el metanol.
En este caso, habr una fuerte atraccin entre el solvente polar y las molculas
polares en la mezcla se pasa a travs de la columna. No habr tanta atraccin entre
las cadenas de hidrocarburo adjunta a la slice y las molculas polares en la solucin.
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Las molculas polares en la mezcla por lo tanto, pasar la mayor parte de su tiempo
con el solvente.
Compuestos no-polares en la mezcla tender a puntos de inters de forma con los
grupos de hidrocarburos debido a fuerzas de van der Waals dispersin. Tambin
sern menos solubles en el solvente debido a la necesidad de romper los enlaces de
hidrgeno como aprietan entre las molculas de agua o metanol, por ejemplo. Por lo
tanto, pasan menos tiempo en la solucin en el solvente y esto les disminuir en su
camino a travs de la columna.
Eso significa que ahora es que las molculas polares que viajarn a travs de la
columna ms rpidamente.
Fase reversa que HPLC es la ms comnmente utilizada forma de HPLC.
Un esquema de flujo para HPLC:

El Simulador de HPLC es una simulacin de cromatografa lquida de alta presin

basado en la web. Ajustar una serie de parmetros experimentales y ver su efecto
sobre los parmetros cromatogrficos incluyendo tiempo de retencin, la eficiencia de
la columna y la contrapresin. Lo cual es de utilidad para fines educativos.

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Diagrama de Flujo:

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Recursos:
Reactivos:
No se requiere. Simulador Virtual Online
Equipos:
Computadora de Mesa o Portatil
Otros:
Aplicacin de Java 7.0, para desarrollar el simulador.

Analizar:
Haga una revisin de todos los componentes del software, las ventanas desplegables
y funciones que tiene cada uno. Desarrolle a travs de un mapa conceptual los pasos
para instalar el software hasta su operacin. Explore cada opcin y explique qu
funcin posee cada uno.
Luego se realizara la simulacin fenol, 3-fenil propanol, acetofenona, p-clorofenol y pnitrotolueno, dibuje las estructuras de estos compuestos y mencione su orden de
polaridad desde el menos polar al ms polar. Haga uso de un software para dibujar
estructuras qumicas, para que pueda describir como se la su estructura
espacialmente.
Describa que tipo de columna se muestra en la simulacin, si fuese de 18C mencione
como se dara la elucin.
Ajuste la fase mvil 100% de agua a 50% (%v/v) de acetonitrilo, 100% (%v/v)
acetonitrilo, 100% (%v/v) de metanol. Cmo se puede esperar los tiempos de elucin
de estas molculas, mencione si hay solapamiento y si estos cambios se asocian a la
polaridad.
Mencione que pasa con la altura de plato si se modifican los siguientes parmetros:
a. Incremento de la velocidad del flujo 2,0 ml/min a 7,0 ml/min.
b. Aumento de partcula 3.0 m a 6.0 m.
c. Aumento de temperatura de 30C a 70C.
d. Duplica la longitud de la columna
Referencias:
Universidad Nacional Abierta Y a Distancia, Escuela de Ciencias Bsicas, Tecnologa
e Ingeniera; Manual de Laboratorio, 401542 Cromatorgrafa; Creado por Gloria
Maria Doria Herrera, Tutor; Medelln 2015

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