INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIN ESPECTROFOTOMTRICA Y
CROMATOGRAFA EN CAPA FINA DEL DNA
Casillas Ramos Guillermo Arturo, Orta Camargo Berenice
3FV2 SECCION 2
Objetivo:
-Aislar, purificar y caracterizar DNA del germen
de guayaba.
-Realizacin de la cromatografa en capa fina
del DNA

Resultados:
Tabla 1. DATOS DELA ESPECTROMETRA.

Longitud de onda
(nm)
200
205
210
215
220
225
230
235
240
245
250
255
260
265
270
275
280
285
290
295
300

Absorbancia
0
0
0
3.00
0.847
0
0.021
1.051
0.234
0
0.160
0.016
0
0
0.001
0
0
0
0.
0.
0.

Absorbancia
4
3
2
1
0

Grafica 1. ABSORBANCIA VS LONGITUD DE ONDA

Imagen 2.CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA.

Tabla 2. RESULTADOS DE LA CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

Muestra
Adenina
Citosina
Guanina
Uracilo
Timina
RNA

DNA

Rf
0.4375
0.3544
0.3717
0.5696
0.6282
citosina
guanina
adenina
uracilo
citosina
guanina
adenina
timina

0.3205
0.4102
0.4871
0.5769
0.3376
0.3896
0.4805
0.6233

Discusiones:
Se realiz el experimento de aislamiento de DNA de
guayaba el cual se realiz de manera correcta ya el
DNA se enrollo de manera muy fcil y rpida en la
varilla de vidrio.
Debido a los resultados obtenidos en la prueba de
espectrometra no es posible calcular el porcentaje
de pureza del DNA ni su concentracin en g/mL
esto se debe a que utilizamos otro DNA que no fue
el nuestro por lo tanto no sabemos si su aislamiento
o purificacin fue el adecuado para esta prueba, sin

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embargo se realiz la grfica de absorbancia vs
Conclusiones:
longitud de onda la cual no tiene gran parecido a la
reportada en la literatura esto de igual modo puede
ser por que el DNA utilizado no fue aislado de la
manera correcta y contenga otras sustancias, que
provoca que la luz ultravioleta del espectrofotmetro
incide de manera diferente y nos proporcione datos
errneos.
Se realiz un cromatograma con las bases
nitrogenadas del DNA y del RNA: citosina, guanina,
adenina, uracilo y timina, aparte de poner una
muestra de DNA y RNA para as poder demostrar
que estos cidos nucleicos contienen estas bases
nitrogenadas, al revelar el cromatograma con una
lmpara de rayos UV se observaron unas manchas
respectivamente de las cuales se pudo observar
que el RNA contiene, uracilo, citosina, adenina y
guanina, mientras que el DNA contiene timina,
citosina, adenina y guanina.
Al trabajar con estas bases nitrogenadas podemos
saber que existes dos tipos: las puricas y las
pirimidicas, en las puricas encontramos la adenina y
la guanina mientras que en las bases nitrogenadas
pirimidicas se encuentra la timina, citosina y uracilo.

-Se comprob que el no realizar de manera

correcta el aislamiento y purificacin del DNA puede
afectar en los resultados de la prueba del
espectrofotmetro.
-Se realiz la comprobacin de las
bases
nitrogenadas que contiene el DNA y RNA mediante
la revelacin de una cromatografa en capa fina.

Bibliografa:
-Thomas M. Devlin, 2004,bioqumica: libro de
texto con aplicaciones medicas 4 edicin,
editorial Revert S. A., pp: 193
-Pea A, 2004 Bioqumica, editorial Limusa
Mexico, pp: 151