MI

Obetivo
Utilizar tcnicas de aislamiento y obtendr cultivos puros de bacterias a partir de muestras
mixtas, para determinar las caractersticas del cultivo as como algunas de sus propiedades.

Muestra de suelo
Se tom una muestra de suelo cerca de la cafetera, frente al edificio 6I en UABC. Se
pes 1g de la misma y se diluyo en un mililitro de agua dentro de un tubo de ensaye con
agua previamente esterilizada, posteriormente se llev a cabo el mtodo de aislamiento por
el mtodo de diluciones y por el mtodo de estra cruzada, esta ltimo en un agar nutritivo
MSA. Se incubo durante una semana.
Resultados:

Figura 1. Muestra de tierra del tubo de dilucin -1 por el mtodo de estra

cruzada en medio nutritivo MSA. Las colonias marcadas fueron las seleccionadas
para elaborar tincin de GRAM.

Observaciones:
De las diluciones hechas, solo en la dilucion -1 ( la ms concentrada) fue en la que
hubo crecimiento en el medio nutritivo, se encontraron alrededor de 25 colonias y se
seleccionaron 2 (figura1) para su posterior estudio.

UFC= (25) (1/10)= 250 bacterias/mililitros

Figura 1.1.
Tincin de
GRAM de las
colonias
En la tincin de GRAM de la colonia 1 de la muestraseleccionadas
de tierra
(dilucin -1) en medio MSA se observaron:
1
mostradas en
1. Bacilos G(-); Gram negativo.
la figura 1 2

Colonia 1:

2.

Cocos G(+); Gram positivo.

Se pudieron observar ambos tipos de microrganismos con diferente

tincin cada uno.

Colonia 2:
En la tincin de GRAM de la colonia 2 de la muestra de tierra
(dilucin -1) en medio MSA se observaron:
1.

Bacilos G(-); Gram negativo.

Solo se observaron microorganismos del tipo Gram negativo con

forma de bacilos.

Muestra de yogurt
Se tom una muestra de yogurt de una marca conocida (Jersey). Se agreg 1ml de la
misma dentro de un tubo de ensaye con 9 ml agua previamente esterilizada, posteriormente
se llev a cabo el mtodo de aislamiento por el mtodo de diluciones y por el mtodo de
vertido en placa, esta ltimo en un agar nutritivo de jugo de tomate. Se incubo durante una
semana.

Resultados:

Observaciones:
De las
diluciones
hechas, solo en
la

dilucion
observo

-3 se

crecimiento
de
colonias, se
observo una
serie de puntos
dentro del medio nutritivo,
Figura 2. Muestra de yogurt del tubo de dilucin -3 por el mtodo de
estas colonias se
vertido en placa (VP) en medio nutritivo jugo de tomate; se observaron
encontraban en el fondo del
manifestaciones crecimiento, pequeos puntos en el medio.
medio, portanto tuvimos que
sumergir en aza en el agar para tratar de conseguir la colonia para su posterior analisis ;
tincin de Gram y prueba de catalasa y oxidasa
PRUEBA
CATALASA
OXIDASA

RESULTADO
POSITIVO
NEGATIVO

Analisis de colonias:
En la tincin de GRAM de la colonia 1 de la muestra de tierra
(dilucin -1) en medio MSA se observaron:
Cocos G(+); Gram positivo.

UFC= haba demasiados puntos en el medio, por tanto el porcentaje de

error es muy grande.

Muestra ambiental
Se tom una muestra ambiental cerca de la cafetera, frente al edificio 6I en UABC; se sostuvo
una caja Petri abierta con agar nutritivo MH durante un minuto frente al sitio antes mencionado,
posteriormente se incubo durante una semana.

Resultados:

Observaciones:
A pesar
en el medio
utilizamos
tambien para
realizarle
pruebas
Bioquimicas, al

del poco tiempo de exposicion en el ambiente notamos crecimiento de colonias

de cultivo en cual

UFC= Solo tenemos

3 colonias y no se diluyo.
2

Figura 3. Muestra ambiental en medio MH. Las colonias marcadas fueron

las seleccionadas para elaborar tincin de GRAM.

Figura 3.1.
Tincin de
GRAM de las
colonias
En la tincin de GRAM de la colonia 1 de la muestraseleccionadas
de tierra
(dilucin -1) en medio MSA se observaron:
mostradas en
1
la figura 3 2
Cocos G(+); Gram positivo.

Colonia 1:

Solo se observaron microorganismos del tipo Gram positivo con

forma de bacilos.

Colonia 2:
En la tincin de GRAM de la colonia 2 de la muestra de tierra
(dilucin -1) en medio MSA se observaron:
2.

Cocos G(-); Gram negativo.

Solo se observaron microorganismos del tipo Gram negativo con

forma de bacilos.

Pruebas bioquimicas.
Oxidacin/Fermentacion (OF)

Va oxidativa: Negativa
Va fermentativa: Negativa

Anaerobia
No hay vire de color en ninguno de
Fermentacin de Glucosa:
los tubos.
Positiva
A/R
Prueba
con agar hierro de Kligler (KIA)

Negativo. No se observa
crecimiento ni cambio de
color

Prueba Citrato (CS)

Prueba de la decarboxilasa , desaminacin

y produccin de H2S.

Prueba Sulfihidrico Indol Movilidad (SIM)

Ya que solo el pico de flauta

es de color amarillo

No se observa cambio de
color azul en el tubo.
. Reaccin negativa (prpura
la superficie y amarillo el
fondo Fermentacin de la
glucosa nicamente

Rojo de Metilo/Voges Proskauer

Sulfhidrico:
Negativo
Indol: Negativo
Movilidad: Positivo

Rojo
Reaccin de Vogesde Metilo:
Proskauer:
Negativa. Color
amarillo en la
definido.medio.
superficie del
medio.

Prueba de la movilidad, produccin de Indol y decarboxilacin de

ornitina.
Movilidad: Positiva. Indol: Negativo. No se produce color, toma el color del
reactivo (amarillo). Ornitina:Positivo. Un color prpura en la superficie del
medio (alcalino).

Conclusiones
Los objetivos de la practica se lograron satisfactoriamente, por medio
de las tres practicas pudimos aislar y conocer a fondo un microorganismo,
desde su morfologia hasta sus reacciones con diferentes sustratos, lo cual es
muy importante y de suma importancia en el campo laboral ( industria), y
conocer y manejar estas tecnicas nos facilitaran y ayudaran en un futuro.