RECONOCIMIENTO DE MATERIALES MICROBIOLOGICOS

I.

INTRODUCCIN
En este trabajo se dan a conocer los instrumentos de laboratorio microbiolgico
bsicos para tener en cuenta que instrumentos debemos utilizar adecuadamente
en nuestras prcticas.
A travs de este trabajo que se ha realizado, damos a conocer informacin
elemental sobre lo aprendido durante
la prctica de laboratorio as como
tambin profundizamos y damos
explicaciones sencillas y de gran
importancia sobre cada proceso que se
lleva a cabo en el laboratorio de
microbiologa con cada de uno de los
instrumentos y equipos.

II.

OBJETIVOS

III.

Reconocer y manejar el material de uso comn en el laboratorio de

microbiologa.
Tomar conciencia y aplicar las indicaciones de seguridad en el
laboratorio de microbiologa.

MARCO TEORICO

El estudio de la Microbiologa es un campo muy amplio que posee varias reas

de aplicacin en las que se destaca la Microbiologa mdica, industrial, agrcola,
de alimentos y ambiental. Cada una de estas reas posee un objeto de estudio
especfico el cual se relaciona con un conjunto de problemas particulares.
La Microbiologa ambiental se destaca por estudiar no solo un microorganismo,
sino consorcios de los mismos que actan conjuntamente para transformar un
contaminante; en este sentido los mtodos de estudio de la Microbiologa
Ambiental deben contemplar la diversidad microbiolgica de cada sistema en
estudio y de las diferentes relaciones que se establecen entre ellos as como el
entorno fsico y qumico en que ellos se encuentran.
Por otra parte la Microbiologa Ambiental considera l diagnstico de
microorganismos patgenos presentes en aquellos desechos, sistemas o
subproductos de estos, que pueden entrar por diferentes vas en contacto con el
humano.

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Teniendo en cuenta el objetivo por el cual

se estudian los microorganismos, tambin
sern importantes grupos microbianos
especficos,
en
este
sentido
la
Microbiologa Ambiental considera grupos
especficos, dependiendo de los sistemas de
tratamiento, los contaminantes que
degraden, las condiciones ambientales y los
patgenos de inters. Podemos destacar
entre las bacterias los degradadores de la materia orgnica (hetertrofos),
aerobios y anaerobios; oxidadores y reductores de compuestos de azufre;
nitrificantes y denitrificantes; Pseudomonas, Coliformes fecales y otros
entricos. Virus, protozoos y algas.

IV.

MATERIALES
Tubo de Ensayo
Caja Petri
Pipetas
Probetas
Pipeta Pasteur
Mango de Koll
Marcador Permanente
Tubo de Durham
Matraz Erlenmeyer
Microscopio.
Contador de Colonias
Equipo de Filtracion de Menbrana Manual
Bomba de Vacio
Filtro de Menbrana Multiple
Encubadora
Esterilizadora
Autoclave
Camara de flujo Laminar

V.

PROCEDIMIENTO

Se inici este reconocimiento del laboratorio de microbiologa teniendo presente y

siempre invocando a los estudiantes a la bioseguridad para evitar algn dao perjudicial
seguidamente se dieron a conocer pequeos conceptos de manejo y uso de cada uno de
los materiales.

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Tubo de Ensayo
Destinados a conservar medios de cultivo en pequeos
volmenes. Se utiliza tubos de vidrios de diversos tamaos, con
tapas a rosca o a presin. El vidrio debe ser de buena calidad,
transparente y redondeada, que se utiliza en el laboratorio para
contener pequeas muestras liquidas.
Caja Petri
Caja

de

vidrio

de

seccin circular con

tapa.

Existen

de

diferentes tamaos segn su uso,

aunque las ms frecuentes utilizadas
tiene 10cm de dimetro. Se utiliza
para el cultivo de bacterias y otros
microorganismos, soliendo cubrir el
fondo

con

distintos

medios de cultivo segn el

microorganismo que se
quiera cultivar.

Pipetas
Se utilizan para realizar inoculaciones y diluciones. Para manejar
pequeos volmenes (Menores de 1ml) se recomienda el uso de
pipetas automticas que miden exactamente el volumen deseado.

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Probetas
Instrumento volumtrico, tubo generalmente transparente con
graduacin. En la parte inferior est cerrado y posee una base
que sirve de apoyo, mientras que en la superior est abierta y
posee un pico. Generalmente mide volmenes de 25 0 50 ml
incluso existen algunas que pueden medir volmenes hasta
2000ml.

Pipeta Pasteur
Tambin conocidos como goteros .Se usan para transportar pequeos volmenes
de lquido o para sembrar a partir de
medios de cultivo lquidos.
Mango de Koll
Sirve para sujetar al ansa y aguja. Est
compuesto por un mango de material aislante, que se prolonga en un vstago
metlico que sostiene mediante una
tuerca

un

alambre.

Cuando

el

extremo del alambre tiene forma de

anillo se denomina ansa; si se deja el
extremo recto se llama aguja y si se
doble en un angulo recto al extremo
libre se le llama gancho.
Marcador Permanente
Son marcadores resistentes al agua, se utilizan para escribir sobre la superficie
del vidrio.
Tubo de Durham
Pequeos tubos que son colocados en forma invertida dentro de los tubos de
ensayo que contienen medios de cultivo lquido, sirven para verificar la
produccin de gas por parte de los microorganismos.

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Matraz

Erlenmeyer
Se utilizan para preparar medios de cultivo lquidos.
Microscopio.
Al ser el microscopio compuesto un instrumento fundamental en microbiologa,
el conocer los principios bsicos de la microscopa y la pericia en el empleo y la
manipulacin de este instrumento, son requisitos imprescindibles para casi
cualquier estudio en esta ciencia.

Contador de Colonias
Se utiliza para aumentar la vista de las
colonias en la caja Petri, con el fin de
facilitar la identificacin microscpica y
el conteo de estas.

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Equipo de Filtracin de
Membrana Manual
Se usa para la tcnica de filtracin por membrana,
la cual consiste en hacer pasar la muestra de agua a
presin natural a travs de un filtro de membrana
microscpica, en cual quedaran retenidos los
microorganismos.
Bomba de Vaco
Estas bombas se pueden conectar al
equipo de filtro de membrana para
acelerar el proceso de filtracin con el uso de la presin, si este proceso
no se realiza el equipo de filtracin de membrana puede tardar
aproximadamente 24 horas en filtrar 100ml de lquido.
Filtro de Membrana Mltiple
Este equipo acelera la realizacin de pruebas de filtrado por membrana
y es prctico para los
analistas que deben evaluar
grandes volmenes de muestras
o que tienen que efectuar varios
ensayos de Coliformes al da.
El colector puede filtrar hasta
tres

muestras

en

forma

simultnea.

Incubadora

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Nos sirve para mantener un

lugar

ptimo

para

el

desarrollo y crecimiento de
microorganismos, tiene dos
divisiones en el que se
pone los microorganismos
y se puede regular la
temperatura. Generalmente
es a 38 C.
Sus funciones especficas nos permiten controlar la temperatura y humedad para
crear un ambiente ptimo para la reproduccin y desarrollo de organismos vivos.

Esterilizador
Especialmente para la destruccin de los
microorganismos

sean

patgenos

no,

mediante el calor seco.

Se trabaja a una temperatura de 180 C por
un tiempo de 2 horas con materiales
determinados, aunque es recomendable que
sean de metal o madera.

Autoclave
Es un equipo que se puede utilizar para esterilizar, el cual a travs del vapor de
agua a alta presin y temperatura coagula las protenas de los
microorganismos.
La temperatura que se usa es a 121 C en un tiempo de 15 a 20 min.
Es recomendable para los materiales de vidrio.

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Cmara de flujo Laminar

VI.

RESULTADOS
Se logro comprender el uso y funcionamiento adecuado de los distintos
materiales que utilizaremos en el transcurso de nuestras prcticas de
laboratorio. Ademas se conocio diferentes formas de esterilizacipon de
materiales ya se de uns forma simple como es el fuego o con la presencia de
vapor o calor y en que casos se debe usar cada uno de ellos.

VII. CONCLUSIONES
El laboratorio de microbiologa a diferencia de los laboratorios en los cuales
antes ya se trabajo se requiere aun mayor cuidado ya que se va realizar prcticas
con presencia de microorganismos que nos podran contaminar de manera
indirecta. Los materiales y equipos tienen situaciones especficas en las cuales se
van a usar, ya se dieron a conocer el modo de uso y claro con la supervisin del
especialista a cargo se van a realizar los trabajos buscando la bioseguridad que
todo ingeniero debe tener presente. Finalmente es fundamental tener el cuidado
necesario en cada prctica y con la indumentaria necesaria se podr lograr
buenos resultados.

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VIII. RECOMENDACIONES
1. El uso de la bata de laboratorio es indispensable para asistir a la prctica.
2. No se debe comer, ni beber en el laboratorio.
3. Mantenga la mesa libre de todo lo que no sea esencial.
4. Limpiar y desinfectar la superficie de mesones antes y despus del trabajo del da.
5. Lave sus manos con agua y jabn antes y despus de cada prctica. Luego
asegure de frotarse las manos con alcohol.
6. Llevar registro de sus anlisis indicando: Tipo de muestra, procedencia, fecha,
tipo de siembra o mtodo, cultivos empleados y resultados obtenidos.
7. Identificar las muestras antes de comenzar el anlisis, no desechar hasta obtener
el resultado.
8. El material a examinar debe tocarse exclusivamente con instrumentos estriles.
9. En caso de regarse un cultivo sobre la mesa o el piso o cualquier accidente como
cortadura, quemaduras, cada del material infectado en la conjuntiva ocular,
ruptura de una lmina montada al microscopio de aviso inmediato al profesor o
monitor. Tome todas las precauciones posibles para evitar estos accidentes.
10. Cuando tenga el asa bacteriolgica cargada con algn cultivo de
microorganismos no se desplace de un rea a otra ya que puede crear aerosoles,
trabaje solo en su puesto.
11. Flamee el asa antes y despus de usarla.
12. Descarte todo el material usado en recipientes destinados para tal fin por ningn
motivo en los desages o lavatorios.
13. Al final de la prctica dejar el lugar limpio y ordenado.

IX.

BIBLIOGRAFIA

http://es.wikipedia.org/wiki/Placa_de_Petri
http://www.femto.es/instrumentos/Balanza-digital.html
http://blog.acequilabs.com/incubadora-de-laboratorio-usos-y-funcionamiento
http://www.marienfeld-superior.com/2007/espanol/portaobjetos.htm
http://www.plagasydesinfeccion.com/desinfeccion/generador-de-ozono-paradesinfeccion.html http://es.wikipedia.org/wiki/Autoclave_de_laboratorio
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/lauril.htm
http://www.thermofisher.com/global/en/home.asp http://www.ingenieria.peruv.com/estadistica_muestreo/iso_iec_17025.htm PGINA 29

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CUESTIONARIO
I.

Qu tipo de microorganismos se puede

observar con el microscopio ptico?

El microscopio ptico nunca puede resolver detalles menores a 0,2 m (200

nm), la medida de una pequea bacteria. Esta resolucin es limitada por la
longitud de onda de la luz visible usada para iluminar la muestra. Los
microscopios pticos o de luz pueden aumentar efectivamente alrededor de 1000
a 1500 veces el tamao de la muestra real; si se incrementase el aumento, la
imagen proyectada sera borrosa

MICROSCOPIO PTICO
Caractersticas:
Permite aumentos desde 25 a
1500veces
El poder de resolucin es de 0,2 m
La muestra es atravesada por la luz
Las lentes son de vidrio
Los cortes son muy finos y se
obtienen con un microtomo
Ventajas:
Se pueden observar clulas vivas
Se pueden ver clulas enteras
Inconvenientes:
Los anlisis no pueden ser muy
detallados y profundos
Unidades de medida:
El micrmetro o micrn (m)

II.

Cul es la
diferencia
entre una

muestra en fresco y fijos?

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DIFERENCIAS
MUESTRA EN
MUESTRAS FIJAS
FRESCO
Son al instante.
En medios de cultivo
solido requiere unas gotas
de agua, en cambio en los
lquidos puede ser
observado directamente.
No necesitan alguna otra
sustancia para una
observacin en el
microscopio

Son preparaciones que

requieres ms tiempo.
En este caso se puede usar
reactivo que nos ayudaran
a identificar ciertos
organismos.
Necesitan un espacio para
que el reactivo pueda
actuar dando una
coloracin u otro aporte.

y una

III.

Qu es un equipo de campana de flujo

laminar?
CAMPANA DE FLUJO LAMINAR

Una cabina de flujo laminar, cmara de flujo laminar o campana de flujo laminar
es un recinto que emplea un ventilador para forzar el paso de aire a travs de un
filtro HEPA o ULPA y
proporcionar aire limpio a la zona
de trabajo libre de partculas de
hasta 0.1 micras. Este tipo de
equipos se fabrican en forma
generalmente prismtica con una
nica cara libre (la frontal) que da
acceso al interior, donde se
localiza la superficie de trabajo,
que normalmente permanece
limpia y estril.

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CARACTERISTICAS:
Dentro de estas cabinas o campanas se trabaja con obleas de semiconductor,
cultivos celulares o cualquier otro sistema que deba mantenerse limpio y deba
evitarse la contaminacin con partculas minsculas. Estas cabinas estn
diseadas para proporcionar un aire limpio y constante a una velocidad de paso
de aire de 0.30 a 0.50 metros por segundo para as barrer la superficie de la zona
de trabajo y evitar la suspensin de partculas as como una posible
contaminacin de las muestras. El aire es inyectado a la zona de trabajo a travs
de un filtro HEPA o ULPA e insuflado en forma de un flujo laminar o flujo
unidireccional, muy suave, hacia el usuario. La superficie de trabajo de la cabina
se construye generalmente de acero inoxidable grado 304 o superior para
facilitar su limpieza y aumentar su durabilidad por el uso, con acabados
sanitarios, sin espacios o juntas donde las esporas pueden llegar a acumularse.
Las cabinas de este tipo existen tanto en configuracin vertical como en
horizontal, segn que la posicin del
filtro est en la parte superior o en la
parte trasera de la zona de trabajo sin
embargo el flujo de aire siempre va hacia
el operador por lo cual estos equipos
ofrecen proteccin nicamente a la
muestra que se maneja en su interior, pero
nunca al operador.[2] La norma
reguladora que establece el estndar
comnmente aceptado para estas cabinas es la norma IEST-RP-CC002.3 aunque
tambin se emplea la norma NSF/ANSI-49.[3]
Las cabinas de flujo laminar pueden tener una lmpara de rayos ultravioleta-C
con accin germicida para esterilizar el recinto y su contenido, cuando no se
utiliza. Es importante apagar la lmpara durante la utilizacin de la cabina, ya
que rpidamente se produciran quemaduras de sol en la piel expuesta, y tambin
puede causar cataratas oculares.

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