I.

-GENERALIDADES

1. TTULO
Actividad antiparasitaria del aceite fijo de la semilla Hura polyandra bailon habilla.
Ayacucho 2014.
2. PERSONAL INVESTIGADOR
2.1.
Autor
Willian Eloy Espinoza Valdez, estudiante de la Escuela de Formacin Profesional de
Farmacia y Bioqumica, de la Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad
Nacional de San Cristbal de Huamanga.
2.2.Asesor(s)
Mg. Q.F. Enrique Javier AGUILAR FELICES, profesor asociado a Dedicacin
Exclusiva, Adscrito al Departamento Acadmico de Ciencias Biolgicas de la
Universidad Nacional de San Cristbal de Huamanga.
3. TIPO DE INVESTIGACIN

Bsica - Experimental

4. LUGAR DE EJECUCIN
El presente trabajo de investigacin se llevara a cabo en los laboratorios de
Farmacologa y Farmacognosia del rea Acadmica de

la Facultad de Ciencias

Biolgicas de la Universidad Nacional San Cristbal de Huamanga.

5. CRONOGRAMA DE TRABAJO
5.1. Duracin de trabajo: 4meses
5.2. Fecha de inicio: Junio
5.3. Fecha probable de trmino: Setiembre

5.4. Cronograma de actividades

ACTIVIDADES

JUN

JUL

AGO

SET

Revisin bibliogrfica

Elaboracin de proyecto

Estudio farmacolgico
Recopilacin de datos

Procesamiento de datos

Redaccin del informe final

6. RECURSOS DISPONIBLES

6.1 Recursos Humanos

01 tesista.
01 Qumicos Farmacuticos.
5 colaboradores
6.2. Materiales, reactivos y equipos:
6.2.1. Materiales
Fiolas de 50ml, 100ml, 200ml
Pipetas volumtricas de 1ml, 3ml, 5ml, 10ml
Vasos de precipitado de 100ml, 200ml, 500ml, 1000 ml
Probeta de 100ml, 200ml, 500ml,
Matraces de 100ml 200ml
Tubos de ensayo
Gradilla

 Varillas de vidrio
Placa Petri
Animales de experimentacin: lombrices

6.2.2. EQUIPOS
Estufas

Balanza analtica

Equipo de Fuerza mecnica

6.2.3. REACTIVOS
Agua destilada

Etanol 96

Piperasina

Levamisol

6.2.4. MATERIALES DE ESCROTORIO:

01 libreta de apuntes

Millares de papel bond

Bolgrafos

Marcadores

Tinta de impresora hp

 01 cmara digital

7. PRESUPUESTO

30.1

Bienes de Consumo:

SI. 1 500.00

51.1

Equipos:

SI. 7 000.00

32.2

Pasajes y Gastos de Transporte:

SI.100.00

33.1

Servicios de Consultora:

SI.200.00

39.1

Otros Servicios:

SI.300.00

8. FINANCIAMIENTO

Universidad Nacional de San Cristbal de Huamanga

SI. 7 400.00

Autofinanciamiento

SI. 1 900.00
Total: SI.9 300.00

II. PLAN DE INVESTIGACIN

1. PROBLEMA
1.1. Enunciado del problema
A qu concentracin tendr mayor actividad antiparasitaria el aceite fijo de la semilla
Hura polyandra bailon habilla?
I.2. DEFINICIN DEL PROBLEMA.
El propsito primordial de nuestro trabajo de investigacin es la actividad
farmacolgica que luego puede tener productos medicinales naturales, de tal manera
contribuir con el estudio etnobotnica y con la medicina tradicional.
En la actualidad han aparecido empresas dedicadas a la medicina natural y han
ocupado una buena parte del mercado de tal manera que nuestro trabajo puede
contribuir a desarrollar ms medicinas naturales y as contribuir con la sociedad.

Las parasitosis intestinales son un problema de importancia al que se enfrentan las

instituciones de Salud Pblica y Ambiental en los pases en vas de desarrollo.
Estas infecciones son generalmente subestimadas por ser asintomticas, pero
representan un factor de morbilidad importante cuando se asocian a la desnutricin. La
infeccin intestinal parasitaria afecta principalmente a la poblacin infantil, la cual es
especialmente susceptible de adquirirla, principalmente cuando la forma infectante del
parsito penetra por va oral.1
En los pases subdesarrollados, las malas condiciones higinicas, la escasa cultura
mdica,

el

deficiente

saneamiento

ambiental

las

pobres

condiciones

socioeconmicas estn asociados directamente con la presencia, persistencia y la

diseminacin de parsitos intestinales, as como con las caractersticas geogrficas y
ecolgicas especficas del lugar. La pobreza y las deficientes condiciones sanitarias
derivadas de ella, por su mayor riesgo de infeccin por helmintos y protozoarios,
repercuten en el estado nutricional del individuo. Los parsitos intestinales, a travs de
diferentes mecanismos relacionados con el tipo de enteropatgeno, privan al
organismo de nutrientes. 1
2. DELIMITACIN DEL PROBLEMA.
El trabajo de investigacin tiene como finalidad determinar la actividad antiparasitaria
del aceite fijo de la semilla Hura polyandrabailon habilla
3. OBJETIVOS
3.1.
Objetivos generales
Evaluar la actividad antiparasitaria del aceite fijo de la semilla Hura polyandra
bailon habilla
3.2.
Objetivos especficos
1. Determinar la concentracin ms eficaz del aceite fijo de la semilla Hura
polyandra baylon habilla
2. Determinar la mortalidad in vitro de lombrices sometidos al aceite fijo de la
semilla Hura polyandra bailon habilla

3. Determinar in vitro la paralizacin de lombrices sometidos al aceite fijo de la

semilla Hura polyandra bailon habilla
4. Comprobar la eficacia del preparado desparasitante natural con el producto
desparasitante comercial.
III.
MARCO TERICO
1. Antecedentes
Desde el punto de vista bioqumico es una familia muy diversa ya que contiene
alcaloides, glicsidos cianognicos, cidos grasos, glucosinolatos y terpenoides entre
otros. Adems algunas de sus especies contienen un ltex de color lechoso. Debido a
su extensin, diversidad y amplio abanico de aplicaciones de esta familia, muchas de
sus especies fueron utilizadas por las sociedades ms primitivas. Actualmente, sus
usos ms frecuentes son en alimentacin (tapioca) y en la produccin de medicinas,
venenos, aceites y grasas, ceras, gomas, caucho.2
La familia Euphorbiaceae contiene gran nmero de especies de las que se pueden
obtener productos de inters econmico como el caucho, la tapioca, ceras y aceites. El
principal poder curativo que se le atribuye a esta planta es como afecciones del
aparato respiratorio as como tambin contra parsitos y como laxante en Mxico.2
Durante el origen de la vida el hombre fue concebido para vivir sano. En la naturaleza
encontramos los alimentos que nos proporcionan los nutrientes y sustancias para
minimizar las enfermedades. En ella encontraremos los medicamentos y los
tratamientos curativos para acabar con los padecimientos. Sin embargo, la vida
moderna hace que fcilmente olvidemos que somos parte de la naturaleza y que por lo
mismo debemos de vivir dentro de sus reglas. Este olvido nos ha llevado a ser una
sociedad acostumbrada a la enfermedad pero con la ilusin de algn da inventar una
pldora mgica que nos cure todas las enfermedades. Para que nuestra modernidad
se transforme en verdadero desarrollo humano, deberemos acercarnos y no alejarnos
de la naturaleza, ser hasta entonces que podremos ser personas sanas tanto fsica
como emocionalmente. La medicina natural se utilizar siempre de forma masiva por

la simple razn de que funciona, pero cuando se practica con apoyo profesional e
institucional, los resultados superan cualquier expectativa.3
Viendo todas estas expectativas se tom inters es el estudio de una actividad
antiparasitaria de la semilla hura poliandra habilla.
2. Clasificacin sistemtica4
Divisin: MAGNOLIOPHYTA
Clases: MAGNOLIOPSIDA
Sub clases: ROSIDAE
Orden: EUPHORBIALES
Familia: EUPHORBIACEAE
Gnero: HURA
Especie: HURA POLYANDRA BAILON
Nombre vulgar: habilla
3. Descripcin botnica
rbol conocido con los nombres vulgares de "habillo", "haba", "rbol del diablo".
Arboles comnmente de 12-15 m de alto, con un tronco de 40-50 cm o ms de
dimetro, corteza griscea, corteza griscea, ramas y troncos cubiertos con espinas
cnicas, hojas alternas, caedizas, largamente pecioladas, ovado cordadas, glabras,
crenado-dentadas, flores monoicas, aptalos, las pistiladas en gruesas espigas; fruto
deprimido globoso, 8 a 10 cm de ancho, cerca de 15 celdas, semillas aplanadas,
cafs, cerca de 3 cm de dimetro.4

La actividad biolgica de una planta depende en primer lugar del principio o

principios activos mayoritarios que contiene, pero stos suelen estar acompaados
de otros principios que potencian o modulan la accin de los primeros; la proporcin
en la que se encuentran unos de otros es muy variable.
Una vez separados los principios activos y realizados con xito las pruebas
pertinentes, los cientficos aceptan que esa planta puede ser aplicada con finalidad
curativa.5

La actividad biosida se define como: La capacidad que posee un frmaco o

compuesto natural de inhibir el crecimiento de microorganismos. Generalmente los
compuestos que poseen dicha actividad vienen a tener un gran inters a nivel
mundial, ya que con ellos se puede controlar y hasta eliminar las infecciones
provocadas por los microorganismos. 5
Parasitologa: Es una rama de la ciencia ecolgica que trata el estudio integral del
fenmeno del parasitismo, las relaciones existentes entre el parsito y el hospedador
(dependencias metablicas) y los factores ambientales que influyen sobre esta
comunidad. La parasitologa es una ciencia muy importante que pretende englobar al
estudio de todos los organismos parsitos, por ejemplo, bacterias, virus, hongos y,
por supuesto, parsitos, propiamente dichos. 6
Los antibiticos naturales son aquellos remedios procedentes del mundo vegetal
que son capaces de inhibir el crecimiento de microorganismos o de eliminarlos. Son
aquellos remedios naturales que pueden ser capaces de evitar o curar muchas
enfermedades.7
Los antibiticos naturales se diferencian de los antibiticos sintticos, es decir
aquellos producidos por sntesis en el laboratorio, en las siguientes caractersticas:
- No tienen efectos secundarios: En general, por ejemplo, no producen reacciones
alrgicas o sensibilidad en el estmago.
- Son capaces de respetar los microorganismos beneficiosos para el organismo, por
ejemplo, aquellos que son necesarios en la flora intestinal.
- No resultan peligrosos por acumulacin.
- Son baratos y fciles de conseguir.
Parsito: agente que vive dentro o encima de otro organismo y a expensas de este
(hospedero o husped). Es ms pequeo y menos evolucionado que el hospedero. 8

Establecimiento, desarrollo y multiplicacin del parsito.

El establecimiento requiere que el parsito exprese algunas caractersticas
adaptadas al nuevo ambiente (activacin y determinadas formas parasitarias).
Migran a un rgano compatible a sus necesidades de desarrollo (seleccin de
hbitat). Se basa en requerimientos fsicos, bioqumicos y fisiolgicos del parsito. 9
Hospedero: Hospedero organismo que alberga al parsito. Es ms grande y ms
evolucionado que el parsito.
Simbiosis: es una relacin entre dos organismos que se adaptan a vivir juntos, a los
asociados se les conoce como simbiontes.
Parasitismo: es una simbiosis en la cual un simbionte se beneficia y el otro se
perjudica de la asociacin.
Mutualismo: es una simbiosis en la cual ambos simbiontes se benefician de la
asociacin.
Comensalismo: es una simbiosis en la cual un simbionte se beneficia de la
asociacin, sin que el otro se perjudique.
Ectoparsitos: parsitos que viven encima o dentro de la piel del hospedero.
Endoparsitos: parsitos que viven en el sistema digestivo, rganos, tejidos o
dentro de clulas.

10

Respuesta del husped frente a las infecciones producidas por parsitos.

1. Resistencia natural. El parsito es incapaz de establecerse en el husped.
Factores: conducta alimentaria, fisiologa y respuesta inmune del husped,
incompatibilidad husped-parsito.

2. Resistencia no especfica.
Factores: macrfagos, complemento, interleukinas, -TNF, protenas de fase aguda.
Se puede producir respuesta inflamatoria, fiebre o leucocitosis.
3. Respuesta inmune. El parsito se establece en el husped y es eliminado; el
parsito se establece y la respuesta del husped produce dao al propio husped; el
husped controla la infeccin, pero sin eliminar completamente al parsito. 5
Ciclos biolgicos de los parsitos.
1. El parsito requiere una sola especie para completar su ciclo, no resiste las
condiciones medioambientales y no tiene formas de vida libre.
2. El parsito requiere dos o ms especies para completar su ciclo vital, no siendo
expuesto al medio ambiente.
3. El parsito puede completar su ciclo vital en una o varias especies, no presenta
formas de vida libre pero puede exponerse al medio ambiente en formas de
resistencia (quistes o huevos).
4. El parsito completa su ciclo vital en distintas especies y presenta formas de vida
libre infectivas para sus huspedes de forma activa o pasiva. 6
Factores: anticuerpos, linfocitos T (CD4+, CD8+), linfocitos B (frecuente activacin
policlonal), macrfagos, eosinfilos, interleukina, -interferon.
Caractersticas: apropiada al sitio de la infeccin, no provoca la destruccin total del
parsito

(en

general),

inmunodepresin

frecuente,

eosinofilia

elevada

concentracin de IgE en helmintiasis, frecuentes respuestas de evasin de los

parsitos (por parasitismo intracelular, variacin antignica y supresin de la
respuesta inmune).9

Accin patgena
Principales efectos patgenos del parsito: dao hstico o celular, transformacin de
tejidos, interferencia mecnica (por obstruccin), alteraciones nutricionales y
trastornos inmunopatolgicos.
Mecanismos de patogenicidad: protenas formadoras de poros, produccin de
enzimas que alteran estructuras celulares del husped, liberacin de productos
metablicos que interfieren con el metabolismo del husped, apoptosis y dao
mecnico.9
Enfermedades parasitarias.
Caractersticas generales: asintomticas, cuando producen clnica, la instauracin de
los sntomas suele ser de forma subaguda, signos y sntomas inespecficos,
afectacin de diferentes rganos y sistemas. La eosinofilia se asocia con parasitosis
(caracterstica de las infecciones por helmintos hsticos).
Epidemiologa: Existen cuatro mecanismos de transmisin.
1. Ingestin por el husped del estadio de huevos o larvas del parsito.
2. Transmisin a travs de un vector.
3. Penetracin activa de las larvas del parsito en el husped.
4. Contagio directo
Profilaxis: medidas de saneamiento ambiental, educacin sanitaria y control
biolgico.
Diagnstico: el diagnstico definitivo se realiza por mtodos de laboratorio:
diagnstico

morfolgico

(examen

en

fresco

inmunolgicos. El diagnstico clnico es difcil. 10

de

heces),

cultivo,

mtodos

Composicin qumica
Desde el punto de vista bioqumico es una familia muy diversa ya que contiene
alcaloides, glicsidos cianognicos, cidos grasos, glucosinolatos y terpenoides entre
otros. Adems algunas de sus especies contienen un ltex de color lechoso. Debido a
su extensin, diversidad y amplio abanico de aplicaciones de esta familia, muchas de
sus especies fueron utilizadas por las sociedades ms primitivas. Actualmente, sus
usos ms frecuentes son en alimentacin (tapioca) y en la produccin de medicinas,
venenos, aceites y grasas, ceras, gomas, caucho.2
Antiparasitario: Es un medicamento usado en humanos y animales para el
tratamiento de infecciones causadas por bacterias y parsitos y para el tratamiento de
algunas formas de cncer, a diferencia de los aceites esenciales, son grasos, densos
y no voltiles.9
Tratamiento: Dos grupos de antiparasitarios: Antiprotozoarios actan, en general,
inhibiendo la sntesis de cidos nucleicos y antihelmnticos atacan la funcin
neuromuscular o el ciclo glucoltico de los gusanos. Frecuentes aparicin de
resistencias.10
ACEITES FIJOS: Los aceites fijos o aceites vegetales son ingredientes naturales
altamente emolientes obtenidos mediante procesos fsicos a partir de las semillas de
las plantas, garantizando un manejo ambientalmente limpio y sin generacin de
residuos nocivos.11
4. HIPTESIS
El aceite fijo de la semilla Hura polyandra bailon habilla tiene actividad antiparasitaria
a concentracin ms alta.
Variable dependiente

Actividad antiparasitaria
Indicadores:
1) Nmero de muertos
2) Nmero de paralizados
Variable independiente
Aceite fijo
Indicador:
Diferentes concentraciones
5. DISEO METODOLGICO
5.1.
Lugar de ejecucin:
El presente trabajo de investigacin se llevara a cabo en los laboratorios de
Farmacologa y Farmacognosia del rea Acadmica de

la Facultad de Ciencias

Biolgicas de la Universidad Nacional San Cristbal de Huamanga.

5.2 Poblacin:
Las semilla Hura polyandra bailon

habilla sern recolectados en el distrito de San

Francisco Provincia de Huamanga (VRAEM).

Muestra: (no probabilstico)
1 kg de semillas recolectados por conveniencia.
5.3 . Unidad de anlisis:
90 lombrices de tierra con un peso promedio de 0.5 g, 10 a 15 cm de largo,
seleccionados aleatoriamente y sern adquiridos en el programa de investigacin en
pastos y ganadera de la Facultad de las Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional
de San Cristbal de Huamanga.
Transportados a los laboratorios de Farmacia y Bioqumica de la Universidad Nacional
San Cristbal de Huamanga.

6. Recoleccin de la muestra:
6.1.
Muestra vegetal:
Se recolectarn las semillas de la Hura polyandra bailon habilla que estn en buen
estado, la recoleccin se har en la maana.
El material recolectado se trasladar en bolsas de nylon hasta el lugar donde se
proceder la muestra.10
6.2.

Secado:

Las semillas sern secados a una temperatura ambiente en sombra, protegido dela
humedad y con buena aireacin.
6.3.

Extraccin:

Sern extrados por una fuerza mecnica de prensado, luego se har una limpieza
fsica por medio de un filtrado o una decantacin.
Partiendo de la semilla limpia y lista para ser utilizada, el primer paso en la elaboracin
de aceites es la molienda o molturacin de la semilla, la cual se realiza con molinos a
martillos, cilindros o espolones. La finalidad de esta etapa es colapsar las estructuras
vegetales para que el aceite sea liberado de la semilla.
Segn las caractersticas del aceite, se puede plantear o no el refinado en tanques
especiales de acero inoxidable.9
7. Determinacin de la actividad antiparasitaria:
Para evaluar la actividad antiparasitaria del aceite fijo de la semilla Hura polyandra
bailon habilla, se realizar segn la tcnica in vitro de motilidad y supervivencia de la
lombriz de tierra. 10
Procedimiento experimental:
Las lombrices se extraern cuidadosamente de su medio de cultivo y se transferir
a un recipiente con agua destilada para ser lavadas.
Pesar las lombrices individualmente.

Colocar una lombriz en cada una de las placas Petri de 15 cm de dimetro,

identificados segn los grupos experimentales y controles. Las mismas que fueron
designadas como LOTE I, LOTE II, LOTE III, LOTE IV, LOTE V y LOTE VI para

cada dosis.
Seguidamente se aade las sustancias de ensayo y los controles con una jeringa
de la siguiente manera: diclorhidrato de piperacina 75 mg/kg control I al LOTE I,
clohidrato de levamisol al LOTE II, aceite de las semillas hebilla 1% al LOTE III,
aceite de las semillas hebilla 2% al LOTE IV, aceite de las semillas hebilla 3% al
LOTE V y al LOTE VI agua destilada.
La actividad antihelmntica se evaluar mediante la observacin directa y consiste
en detectar a las lombrices cambios en la motilidad y alteraciones en el tegumento
hasta la muerte en funcin del tiempo (motilidad y supervivencia), segn los
siguientes criterios:
Parlisis: tiempo transcurrido desde el inicio del experimento hasta que los
movimientos de las lombrices cesan ms all de su motilidad normal y se
expresan en tiempo de parlisis en minuto.
Muerte: tiempo transcurrido desde el inicio del experimento hasta que se
comprueba la muerte de las lombrices, colocando stas durante 10 segundos
en tubos de ensayo de 25 mm de dimetro contendiendo 10 ml de agua
destilada a 45C lo que provoca la estimulacin e induce movimientos en los
vermes si an se encuentran vivos.
Porcentaje de muerte: Se calcula con la siguiente frmula.

% Muerte= Cantidad de muertos/Cantidad de vivos + muertos X 100

8. Anlisis de Datos:
Diferenciacin no paramtrica entre grupos, entre concentraciones. Mtodo Kruskal Wallis

Blanco

Control

Semilla

Extraccin

Aceite

Ensayo fsicoqumico

Ensayo
biolgico

IV

III

II

Color, olor,
sabor,
contaminacin
con agua,
espumacin,
ndice de
refraccin

No de paralizados y muertos

Anlisis de Datos
Diferenciacin no paramtrica de grupos entre concentraciones
Mtodo Kruskal-Wallis
ANEXO 01. Un Rol como referencia para ejecutar el trabajo de investigacin