Caracterizacin de eucalipto INTERESANTE

I. RESUMEN:
La especie Eucalyptus globulus labill, es una hierva perenne muy fragante que
alcanza una altura de 40 a 65 m. se puede encontrar cultivado en muchas
regiones del mundo para la produccin de madera, fabricacin de pulpa de
papel y obtencin de aceite esencial. El aceite esencial de esta especie no ha
sido estudiada en su totalidad.

Muchas veces algunos aceites esenciales son

reemplazados por compuestos orgnicos sintticos disminuyendo as la calidad
de los productos en los que son utilizados, dado estos inconvenientes se realiza
el proceso de caracterizacin del aceite esencial de eucalipto; algunas de las
propiedades fisicoqumicas de estos aceites como volatilidad y estabilidad a las
diferentes temperaturas de trabajo, se puede utilizar la cromatografa gaseosa
asociada a un detector de masas para la identificacin de sus componentes
caractersticos. Para identificar asi su pureza se: utilizo el metodo del
picnmetro de 10.067ml (Germay ln20C); solubilidad en etanol, que consiste
en adicionar progresivamente al aceite una solucin acuosa de etanol de tal
manera que segn el grado de solubilidad se clasifica los aceites (a.e, soluble
en agua V) finalizando con la prueba de residuo por evaporacin a esta
inyectando temperatura para la evaporacin y pesar el residuo restante.

II. INTRODUCCIN.

El gnero Eucalyptus natural de Australia y de Tasmania, con ms de 300

especies, con capacidad de absorcin del agua que convierte a los eucaliptos
en especies muy agresivas para el medio ambiente al transformar los
ecosistemas por desecacin de la tierra donde se plantan y entre ella la
especie Eucalyptus globulus labill, es una hierva perenne muy fragante que
alcanza una altura de 40 a 65 m. de tallos erectos con corteza que se deshace
de color gris azulado, por la rapidez de crecimiento, se puede encontrar

cultivado en muchas regiones del mundo para la produccin de madera,

fabricacin de pulpa de papel y obtencin de aceite esencial.
Las caractersticas de los aceites esenciales se efecta llevando acabo una
serie de anlisis que ofrecen valores que estimaran el grado de pureza que
presenta un aceite esencial y principalmente al determinar su composicin. La
mayora de estos anlisis cae en la categora de anlisis fisicoqumicos. La
mezcla de componentes voltiles producto del metabolismo secundario de las
plantas en cuya composicin interviene una porcin de hidrocarburos de la
serie polimetilnica del grupo de los terpenos que responden compuestos casi
siempre oxigenados (alcoholes, steres, teres, aldehdos y compuestos
fenlicos) que son los que transmiten a los aceites el aroma que los NB
caracteriza, la siguiente prctica se realizo con objeto de Conocer los anlisis
fisicoqumicos que permiten determinar las caractersticas de los aceites
esenciales y establecer la calidad de estos.
III. MARCO TERICO.

1. DESCRIPCIN BOTNICA:

Nombre vulgar: Eucalipto.

Nombre cientfico: Eucalyptus globulus Labill.
Reino: vegetal
Clase: Angiospermae
Orden: Myrtiflorae
Familia: Myrtceas
Gnero: Eucalyptus

Hbitat: Es natural de Australia y de Tasmania, donde se pueden encontrar ms

de 300 especies del gnero Eucalyptus. Por la rapidez de crecimiento, se puede
encontrar cultivado en muchas regiones del mundo para la produccin de
madera, fabricacin de pulpa de papel y obtencin de aceite esencial.Ha sido
especialmente utilizado para sanear zonas pantanosas al eliminar la humedad
de las mismas con la consiguiente erradicacin de sus plagas de insectos,
principalmente mosquitos, y de las enfermedades que transmiten. Su uso ha
supuesto una gran ayuda para el control del paludismo en muchas zonas de
Asia, Amrica del sur y el sur de Europa. Por otra parte, esta capacidad de
absorcin del agua, convierte a los eucaliptos en especies muy agresivas para

el medio ambiente al transformar los ecosistemas por desecacin de la tierra

donde se plantan. Se utiliza ampliamente como rbol de jardn.
Caractersticas: rbol perenne de la familia de las mirtceas de 40 a 65 m de
altura. Tallos erectos con corteza que se deshace de color gris azulado. Hojas
adultas alternas, lanceoladas de hasta 30 cm de longitud, pecioladas, con el
nervio central muy marcado, verde oscuro, brillante, de textura endurecida;
hojas jvenes, sin peciolo que abrazan el tallo, de color verde gris y opuesto.
Flores solitarias o reunidas en umbelas de 3 con numerosos estambres muy
destacados y sin ptalos. Frutos en cpsula leosa de hasta 2,5 cm de longitud,
con hasta 4 celdas que contienen un gran nmero de semillas.
Cosecha y Rendimiento: en sitios de buena calidad crese rpido y puede lograr
incrementos medios anuales entre 20 y 34 m3 por hectrea. Por su dureza y
resistencia al ataque de patgenos, la madera del eucalipto es ampliamente
usada en construcciones, en mineria , como durmientes en lneas frreas ,
adems produce celulosa de buena calidad para la fabricacin de papeles y
cartn. Los rboles son muy tiles en la construccin de barreras vivas o rompe
vientos. Las hojas tiernas son muy utilizadas para la extraccin de aceites
esenciales. La corteza se emplea como curtiente por ser rica en tanino,
denominado Kino la esencia de algunas especies de eucalipto se utiliza como
combustible y para preparar gas.
Los aceites esenciales son mezclas complejas, normalmente lquidas, que
presentan una caracterstica: su volatilidad, por tanto son extrables en
corriente de vapor de agua. En general son los responsables del olor de las
plantas. Los aceites esenciales generalmente tienen cantidades de Terpenos,
los cuales sirven principalmente como vehculos para los grupos mas
importantes de compuestos orgnicos mas oxigenados (alcoholes, aldehdos,
cetonas, cidos y esteres), los cuales aunque presentes en cantidades mucho
menores, son estos los portadores del olor caracterstico del aceite en
cuestin.

Se definen, segn AFNOR (1998) como: productos obtenidos a partir de una

materia prima vegetal, bien por arrastre con vapor, bien por procedimientos
mecnicos a partir del epicarpio de los Citrus, o bien por destilacin seca. El
aceite esencial se separa posteriormente de la fase acuosa por procedimientos
fsicos en los dos primeros modos de obtencin; puede sufrir tratamientos
fsicos que no originen cambios significativos en su composicin (por ejemplo,
re-destilacin, aireacin).

Los compuestos disueltos en aceites esenciales se pueden clasificar como

sigue:
Esteres. Principalmente de cido benzoico, actico, saliclico y cinmico.

Alcoholes. Linalol, geraniol, citronelol, terpinol, mentol, borneol.

Aldehdos. Citral, citronelal, benzaldehdo, cinamaldehdo, aldehdo cumnico,
vainillina.
cidos. Benzoico, cinmico, mirstica, isovalrico todos en estado libre.
Fenoles. Eugenol, timol, carvacrol.
Cetonas. Carvona, mentona, pulegona, irona, fenchona, tujona, alcanfor,
metilnonil cetona, metil heptenona.
lactonas. Cumarina.
Terpenos. Canfeno, pineno, limoneno, felandreno, cedreno.
Esteres. Son compuestos que derivan de la reaccin de un alcohol primario
secundario con un cido eliminando una molcula de agua, de frmula general
R-C00-R; donde R y R son radicales monovalentes. Los esteres se nombran
cambiando la terminacin ico del cido por ato seguido del nombre.
Terpenos. Con el nombre de terpenos se conoce a un grupo importante de
componentes vegetales que tienen un origen biosinttico comn. Todos,
aunque con estructuras qumicas muy distintas, proceden de la condensacin,
en nmero variable, de unidades isoprnicas. La ruta biogentica se inicia por
condensacin de dos molculas de AcCoA, dando acetoacetil-CoA el cual se
condensa a su vez con otra molcula de AcCoA originando 3-hidroxi-3metilglutaril-CoA. Este compuesto se reduce para convertirse en cido
mevalnico (3,5-dihidroxi-3-metilvalerinico) y posteriormente por fosforilacin
y descarboxilacin, en isopentenilpirofosfato (IPP), el cual, por isomerizacin da
lugar a dimetilalil-pirofosfato (DAMPP), compuesto altamente reactivo. La
condensacin, mediante unin cabeza-cola de estos dos ltimos compuestos
origina el geranil-pirofosfato (GPP) que posee 10 tomos de carbono y es
precursor de un gran nmero de principios activos vegetales (monoterpenos,
iridiodes, algunos alcaloides, etc). El acoplamiento a este GPP de nuevas
unidades de IPP origina molculas de mayor peso molecular, incrementndose
el nmero de carbonos de cinco en cinco: sesquiterpenos (C-15), diterpenos (C20), triterpenos (C-30), etc. Desde el punto de vista farmacutico, los grupos
de principios activos de naturaleza terpnica ms interesantes son:
monoterpenos y sesquiterpenos constituyentes de los aceites esenciales,
derivados de monoterpenos correspondientes a los iridoides, lactonas
sesquiterpnicas que forman parte de los principios amargos, algunos
diterpenos que poseen actividades farmacolgicas de aplicacin a la
teraputica y por ltimo, triterpenos y esteroides entre los que se encuentran
las saponinas y los hetersidos cardiotnicos.
3. Iridoides Y Sesquiterpenos.

Iridoides. Bajo la denominacin de iridoides se agrupan una serie de

monoterpenos bicclicos (C10) derivados biosintticamente del monoterpeno
geraniol, que presentan como estructura bsica comn un ciclopentapirano
denominado iridano, por haberse detectado la primera vez en unas hormigas
pertenecientes al gnero Iridomirmex.. Estos compuestos pueden encontrarse
como estructuras abiertas (secoiridoides) o cerradas (iridoides) generalmente
en forma heterosdica, mayoritariamente como glucsidos. Existen una serie
de plantas que se emplean por sus propiedades farmacolgicas precisamente
porque algunos de sus principios activos son de naturaleza iridodica.

Lactonas sesquiterpnicas. Son compuestos que tradicionalmente han sido

considerados como amargos. Se originan a partir del cido mevalnico,
derivando casi todos ellos de la estructura del germacranlido. Poseen
diferentes actividades farmacolgicas: antiinflamatoria, antimicrobiana,
antimigraosa, etc. Sin embargo, son tambin causantes de procesos alrgicos,
principalmente dermatitis de contacto. Existen numerosas plantas que
presentan este tipo de compuestos, muchas de ellas pertenecientes a las
familias Asteraceae, Apiaceae y Magnoliaceae. Como se incluye a continuacin
una de las especies ms empleadas, el rnica.
4. Diterpenos. Los diterpenos constituyen un grupo muy amplio de
componentes de los vegetales cuya caracterstica comn es la de poseer una
estructura bsica con 20 carbonos y proceder biosintticamente del cido
mevalnico aunque existan un gran nmero de estructuras distintas. Desde el
punto de vista de su aplicacin directa a la teraputica, las plantas que
contienen diterpenos, carecen hoy por hoy de inters. Sin embargo, dentro de
este grupo figuran importantes compuestos naturales de aplicacin en
teraputica. Un ejemplo tpico es el caso del taxol, tambin conocido como
paclitaxel, compuesto obtenido a partir de las cortezas de tejo americano
(Taxus brevifolia Nutt.) que ha mostrado una elevada eficacia en el tratamiento
de algunos tipos de cnceres. Este compuesto es un diterpeno tricclico con
una funcin amida por lo que en ocasiones se considera como un
pseudoalcaloide.

5. Triterpenos y Esteroides. Este grupo de principios activos est constituido

por numerosos compuestos, estructuralmente muy similares, derivados
mayoritariamente del epoxiescualeno o en menor nmero del propio
escualeno. Todos ellos poseen un hidroxilo en el C3 que les permite la unin
con una o varias molculas glucdicas, dando lugar a estructuras heterosdicas.
Pueden establecerse dos grandes grupos dependiendo de su estructura
qumica: triterpenos (tetra y pentacclicos) y esteroides. Se encuentran en
estos grupos compuestos de gran inters farmacutico como son los
saponsidos y los hetersidos cardiotnicos.

6. Saponsidos. Tambin llamados saponinas, su nombre deriva del

latn sapo, saponis que significa jabn debido a que poseen propiedades
tensioactivas, pues al disolverse en agua y por agitacin forman espuma
persistente, tienen propiedades detergentes. Muchas de ellas tienen adems
propiedades hemolticas debido a que alteran la permeabilidad de las
membranas biolgicas resultando txicas para animales de sangre fra. Por
esta razn, algunas plantas que contienen estos principios activos, han sido
empleadas desde la antigedad en el arte de la pesca. Sin embargo no todos
los saponsidos cumplen estas caractersticas.
A.

Anlisis fisicoqumicos:

Entre los anlisis de carcter general se encuentran la densidad, ndice de

refraccin, solubilidad en etanol, residuo por evaporacin, punto de
congelacin y desviacin Polarimtrica (rotacin ptica). Entre los anlisis
fisicoqumicos de carcter especifico (para un tipo de esencia), tenemos: el
contenido de componentes carbonilados como el cifral en hierba luisa y limn,
ndice de mentona y mentol en menta y piperita, mua y hierba buena. Entre
otros se analiza el ndice de acidez, contenido de fenoles y alcoholes, etc.
Preparacin de las mezclas. Una vez obtenido o extrado el aceite, la
metodologa general considera una etapa denominada Preparacin de la
Muestra para el Anlisis que consiste en:
Eliminar el agua residual, mediante la adicin de una cantidad de sulfato de
magnesio.
Mas o menos el 10 % del peso de aceite esencial (4.4gr.),
mezclando y filtrando posteriormente.

Llevar el aceite esencial a la temperatura en que se va realizar los anlisis (20

C) mediante bao mara.
Son muchos los anlisis que se suelen aplicar a los aceites esenciales, entre
los mas importantes se encuentran.
A. Densidad. Consiste en medir el peso de un volumen dado de aceite
esencial, se utiliza el picnmetro y se expresa en(g/l) .
B. ndice De Refraccin. Consiste en la medida del ngulo de refraccin del
aceite esencial manteniendo en condiciones de transparencia e isotropismo,
siendo la longitud de onda de luz de 589.3 nm. que corresponden a la lnea
D del sodio. Se emplea un refractmetro clsico que permite la lectura
directa de los ndices de refraccin comprendidos entre 1300 y 1700 con
precisin de +/-0.0002.
C. Desviacin Polarimtrica. Es la medida de la rotacin del plano de
polarizacin de luz, a una longitud de onda definida, al atravesar un espesor
determinado de aceite esencial. La longitud de onda es generalmente aquella
correspondiente a la lnea de sodio. Se utiliza un polarmetro cuya precisin

debe ser por lo menos igual a +/- 0.03. se emplean tubos de observacin de
longitud apropiada.
D. Solubilidad En Etanol. Consiste en adicionar progresivamente al aceite
esencial a una solucin acuosa de etanol en concentracin adecuada y
conocida, observando el grado de solubilidad.

Segn el grado de solubilidad. Podemos clasificar a los aceites.

Aceite esencial soluble en V volmenes de etanol de graduacin dada T
permanece igual despus de la adicin posterior de l etanol de la misma
concentracin, hasta enturbiar.
Aceite esencial en V volmenes de etanol de graduacin dada T que se
enturbia al diluir.
Aceite esencial en V volmenes de etanol de graduacin dada T
enturbia en V volmenes ( V menor que 20).

que se

Aceite esencial soluble con opalescencia.

MTODOS DE ANLISIS DE ACEITES
ESENCIALES:

a. Ensayos de reconocimiento.

Debido a la diversidad de grupos funcionales que pueden estar presentes en

los componentes mono- y sesquiterpnicos de un aceite esencial no existe una
prueba especfica para su reconocimiento.

Otros reactivos tiles para revelar monoterpenos y sesquiterpenos son

anisaldehdo-cido sulfrico, vainillina-cido sulfrica y cido fosfomolbdico.

b. Extraccin y aislamiento.

Como se mencion anteriormente, la mayora de monoterpenos y

sesquiterpenos se encuentran presentes en los aceites esenciales de diversas
plantas. A partir de dichos aceites es posible realizar su aislamiento mediante
la utilizacin de uno o varios mtodos cromatogrficos tales como la
cromatografa en columna, en capa fina y HPLC. Para las cromatografas en
columna y en capa fina se utiliza ampliamente la slica gel como fase
estacionaria. Como fase mvil se emplea solventes apolares puros o
mezclados. Sin embargo actualmente se utilizan tcnicas de separacin ms
eficientes y rpidas como la cromatografa lquida de alta eficiencia HPLC, y la
cromatografa de gases (GC), as como tambin combinaciones online HPLCGC-MS.
c. Caracterizacin espectral.

Los monoterpenos y sesquiterpenos en un buen nmero se pueden caracterizar

qumicamente a partir de los datos de cromatografa de gases y los espectros
de masas tal como se anot anteriormente, pero cuando existen dudas de tal
caracterizacin se recurre a los mtodos espectrales como Infrarrojo,
Ultravioleta y Resonancia Magntica Nuclear.
d. Espectro infrarrojo.

El espectro infrarrojo permite detectar la presencia de grupos hidroxilo,

carbonilo, anillos aromticos, enlaces dobles C=C. cis y trans, etc. Para
determinar el espectro basta con colocar una gota del componente en una
celda de NaCl.
e. Espectro ultravioleta.

El espectro UV de los monoterpenos y sesquiterpenos permite el

reconocimiento de grupos funcionales y grupos cromforos. Por ejemplo el
limoneno presenta un mximo de absorcin en 262 nm (E = 6400). En general,
la espectrofotometra ultravioleta tiene una utilidad limitada en el estudio de la
gran mayora de los aceites esenciales monoterpnicos, ya que pocos terpenos
tienen grupos cromforos. Sin embargo, en la fraccin no voltil de los aceites
esenciales ctricos se encuentran componentes carotenoides o con ncleos
heterocclicos oxigenados (cumarinas, furocumarinas sustituidas y
polimetoxiflavonas), lo que da a estas esencias un comportamiento
caracterstico en el UV.

IV. MATERIALES Y MTODO.

B. METODO.
Una vez obtenido o extrado el aceite, la metodologa general considera una
etapa denominada preparacin de muestras para el anlisis que consiste en:
Eliminar el agua residual, mediante la adicin de una cantidad de sulfato de
magnesio anhdrido , mas que o menos al 10% del peso del aceite esencial,
luego ser filtrado y as en condiciones para someterse a las pruebas fsico
qumica. (Experimento. 1)
Determinacin de la densidad de Aceite Esencial. (Experimento 2)
Obtener el peso del picnmetro completamente limpio y seco (Pv).

Llenarlo completamente con agua destilada a 20 C. colocar la tapa,

observando la ausencia de burbujas en el interior o en el tubito de la tapa.
Secarlo muy bien y pesar de nuevo (Pc).
Vaciar el picnmetro y secarlo cuidadosamente.

Llenarlo el picnmetro con el lquido problema a la misma temperatura del

agua (20 C). taparlo y limpiar escrupulosamente el exterior. Pesar de nuevo
(Px).
Calcular el peso especfico (Pe) aplicando la siguiente formula.
Pe = (Px - Pv) / (Pa -Pv)
Solubilidad En Etanol. (Experimento 3)
Consiste en adicionar progresivamente el aceite esencial una solucin acuosa
de etanol de concentracin adecuada (70, 80, 90, 96).
Se coloca dentro de un tubo de prueba de 1 ml. De aceite esencial medido con
pipeta. Se coloca la probeta y su contenido en bao mara a temperatura
constante.
Usando una bureta se aade la solucin diluida del etanol de concentracin
conocida, en incremento de 1 ml, hasta que el aceite se disuelva
completamente, agitando frecuentemente y vigorosamente durante la adicin
del solvente. Cuando la solucin sea perfectamente clara, se anota el volumen
de la solucin de etanol aadido.
Se contina aadiendo el solvente en incrementos de 1 ml hasta llegar a 20
ml, se siguen agitando despus de cada adicin. Si la solucin se pone turbia y
opalescente antes de haber agregado un volumen total de 20 ml de etanol se
anota el volumen en el momento en que aparece la turbidez u opalescencia
y eventualmente el volumen en el cual desaparece.
Residuo Por Evaporacin. (Experimento 4)
Se pesa un gramo de muestra en una capsula de porcelana previamente
tarada.
Se evapora en el bao mara sin interrupcin a la temperatura y el tiempo
adecuado para cada aceite esencial.
Se deja enfriar la capsula y luego se coloca en un desecador y se pesa.
V. RESULTADOS:

OBSERVACIONES:

Del experimento 1:
Al adicionar sulfato de magnesio al aceite esencial este hace que el aceite se
clarifique, y se forma cristales de magnesio en la base del vaso precipitado.
Cuando el aceite si filtra la muestra es mas clara.
Del experimento 3:
Cuanto mayor es el grado del alcohol que se usa menor cantidad de hidrxido
de sodio se usa y la solubilidad es baja.
Por lo tanto la turbidez va cayendo paulatinamente.

Teniendo como resultado toda las variaciones de solubilidad en etanol a las

diferentes temperaturas se observo que a medida que se aumenta el grado
del contenido de alcohol para titular disminuye el gasto del volumen, esto nos
permite decir que a mayor grado de alcohol mayor solubilidad del aceite
esencial.

En cuanto a la comparacin del residuo por evaporacin se observo que el

aceite es bastante sensible al calor por eso, cuando el aceite se lleva a
temperatura de 51C por un tiempo que varia de 8min. resulta una
evaporacin de mayor cantidad del aceite.
En cuanto a la determinacin del volumen del aceite esencial no se realiz
satisfactoriamente, por que pudo apreciarse en el pesaje realizado del (Px) una
mnima cantidad de agua, lo cual impidi tomar el peso exacto del aceite puro
que era de nuestro inters.
Realizando las comparaciones en cuanto a la densidad, a medida que se
incrementa la temperatura este disminuye (densidad), entonces en las
evaluaciones es necesario controlar la temperatura, debido a que cuando hay
un incremento de calor sensible, la energa interna aumenta, en donde las
fuerzas de repulsin son mucho mayores que las de atraccin, por tanto hay
un movimiento mayor de las molculas y estas se encuentran mas dispersas,
lo cual ocasiona a que disminuya la densidad.
En los diferentes pesajes realizados se observ ligeras variaciones entre los
datos, esto indica que en el interior de la balanza analtica puede ser que haya
acumulacin de aire, lo cual hace que vari el peso cuando la muestra es
pesada ms de una vez, es decir, que cuando se pone la muestra sobre la
balanza. Otra causa posiblemente es el secado del picnmetro no ha sido
realizado apropiadamente, de tal manera que al hacer contacto con la yema
de los dedos, este transfiera mnimas cantidades de masa (grasa o sudor).