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de estudio y aplicaciones
Nestor E. Obispo. Ph.D.
E-mail: nobispo@gmail.com
Dificultades
Falta de conocimientos sobre la diversidad de las
poblaciones microbianas del rumen.
y de los mtodos adecuados a travs de los cuales se
puedan evaluar los cambios microbianos.
Fermentadores
Postgstricos
Ciego
chigire
conejo
tapir
Pregstricos
Rumen
bovino
ovino
caprino
crvidos
camlidos
jirfidos
Colon
caballo
rinoceronte
elefante
Fermentadores Pregstricos
Los animales con fermentacin pregstrica
derivan ventajas de la relacin simbitica:
Celulosa y otros polisacridos son hidrolizados
a compuestos de menor tamao que son
importantes fuentes de energa para el
hospedero;
Reducen moderadamente el volumen de la MS
que ha de pasar al tracto posterior;
Sintetizan vitaminas (excepto A y D);
Los cuerpos de los microbios son fuentes de
protena para el hospedero.
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El ambiente ruminal
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El ambiente ruminal
Temperatura: 38 - 40 C
Los protozoarios no sobreviven a
temperaturas superiores a los 40 C por
perodos prolongados.
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El ambiente ruminal
Es el factor ms variable;
Depende de la naturaleza de la dieta, frecuencia de alimentacin;
Es un reflejo de la cantidad de cido producido por la accin
El ambiente ruminal
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El ambiente ruminal
Presin osmtica:
El licor ruminal es hipotnico con respecto al plasma
Licor ruminal: 250 mOsm Kg-1
Plasma: 300 mOsm Kg-1
Materia seca:
10 - 13%
Tensin superficial:
45 - 59 dinas cm-1
El ambiente ruminal
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AGV
Protena Microbiana
Vitaminas
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Protozoarios
Observados por Gruby y Delafond (1843).
Clasificacin:
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Protozoarios
Son depredadores;
Dificultades para cultivarlos in vitro en medios
purificados (bacterias en los cultivos).
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Bacterias
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Bacterias
Pocos progresos:
Primeros experimentos, von
Tappeiner (1984 1940);
Baker y Harris (1947) observan
cocos que degradan la celulosa en
el rumen;
Rpidos avances:
Hungate y sus alumnos, desarrollan
y modifican tcnicas anaerbicas y
determinan las bacterias anaerbicas
que ms ocurren en el rumen
Hungate (1947) aisla en cultivos
(Hungate 1950, Bryant y Burkey
puros varias bacterias celulolticas
1953).
aisladas del rumen bovino;
Sijpestein (1948, 1951) Holanda,
crecimiento de bacterias
celulolticas y eventualmente
aislamientos de cepas puras;
Marston (1948) Inglaterra,
estudios in vitro con cultivos
mixtos de bacterias ruminales.
El futuro es ms promisorio
Las tcnicas moleculares abren
nuevos
caminos
para
la
investigacin del rumen.
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Ecuacin de Nermst
Hungate (1969) calcul la concentracin de O2 necesaria
para desarrollar en un medio de cultivo un Eh de -0,33V
(crecimiento de metanognicos), a este potencial el
medio contiene 1,48 x 10-56 moleculas de O2 L-1
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Condicin anaerbica;
Potencial Eh;
Osmolaridad;
Factores de crecimiento microbiano;
pH;
entre otros.
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Gas libre de O2
Tapn de silicn
Cu 2 O
2Cu + O2
(+1)
300C
Cu + H2 O
Cu 2 O + H2
300C
Tapn de silicn
Gas con O2
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Hemicelulolticas
Ruminococcus flavefaciens
Ruminococcus albus
Fibrobacter succinogenes
(Bacteroides succinogenes)
Eubacterium
cellulosolvens
Butyrivibrio fibrosolvens
Pectinolticas
Butyrivibrio fibrosolvens
Prevotella ruminicola
Fibrobacter succinogenes
Ruminococcus flavefaciens c-94
Rumincoccus albus 7
Amilolticas
Streptococcus bovis
Butyrivibrio fibrosolvens
Ruminobacter amylophilus
Prevotella ruminicola
Succinimonas amylolytica
Lachnospira multiparus
Selenomonas ruminantium
Succinivibrio dextrinosolvens Succinivibrio dextrinosolvens
Fibrobacter succinogenes
Eubacterium ruminantium
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Bacterias proteolticas:
Ruminobacter amylophilus, Prevotella ruminicola,
Selenomonas ruminantium, Butyrivibrio fibrosolvens,
Butyrivibrio akacticidigens.
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Mtodos de cultivo
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Cultivos puros:
Descripcin de las especies aisladas: celulolticas, amilolticas,
proteolticas y otras;
Uso de gases (CO2, N2) libres de O2;
Los contenedores de los cultivos son sellados con tapones de
caucho;
El medio de cultivo que intente reproducir el del ambiente
ruminal, contiene: 40% de licor ruminal, minerales, resazurina
(indicador), cistena (agente reductor), bajo presin de CO2, libre
de O2, sustratos.
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Fermentacin in vitro:
Celulolticos requieren poca cantidad de protenas o amninocidos,
usan amonio o urea.
Factores de crecimiento de los celulolticos entre otros, el Ac.
Valerico, PABA, Isobutirico, Isovalerico.
Estado de madurez y liginificacin del forraje afecta la actividad
degradativa, incluyendo las diferencias entre la pared celular de
leguminosas y gramneas.
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Alternativas ????
Rebao Nacional
Cambios en la alimentacin
Vacunas anti-metanognicos
Eliminacin de protozoarios
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Totales: 2,7x
Celulolticas: 1,14x
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GRACIAS