TCNICAS DE CONTEO

BACTERIANO

Conteo bacteriano

CARACTERSTICAS

Seala la magnitud
de la poblacin total
de microorganismos.

Los nmeros
obtenidos deben ser
calificados por la
tcnica.

Cada uno de los

mtodos es
diferente.

Bacterias psicrfilas o
bacterias anaerobias
estrictas tcnicas
especiales

Ocasionalmente
constituyentes
qumicos
BIOMASA

Colonias rojo violeta tpicas del crecimiento de Enterobacterias

PROCESOS
Definir los microorganismos a ser cuantificados
No se debe aplicar un mtodo universal a cualquier
microorganismo o hbitat
Dividir las tres fases: muestreo, procesado de muestras, y
el proceso de recuento.
Considerar el conteo para la interpretacin de los
resultados

Recuento de clulas totales

Recuento
Microscpico
directo

En
muestras
secas

Deben teirse

Cmaras de
recuento

En muestras
lquidas

(Petroff-Hausser)

Citmetro de flujo

Mtodos directos
Filtracin
Mtodos directos

NMP

Cuando la cantidad
de bacterias es muy
baja

Los organismos
por contar no
crecen en un
medio slido.

PEtroff-Hauser

Imagen 1

VENTAJAS:
No requiere un tiempo de incubacin.
Vlida para los contadores electrnicos de clulas.

DESVENTAJAS:
Bacterias mviles son difciles de contar.
Clulas muertas presentan un aspecto similar al de
las vivas.
Concentracin bastante elevada de clulas.

Recuento de clulas viables

La clula viable es aquella
capaz de dividirse y formar una
colonia en el medio de cultivo.
Se basa en que cada colonia
surge de una simple clula.
Posee dos enfoques
(Mtodos) bsicos

Imagen 2

1) Recuento en placa
mtodo determina
el nmero de
clulas de la
muestra

formar colonias
sobre un medio
slido

mide el nmero de
clulas viables

formar una colonia

cada clula viable

puede crecer y
dividirse

Procedimiento
postula

Desventaja

requieren bastante
tiempo lapso de 24
h

observacin de
colonias visibles

2)Vertido en placa
Esta tcnica se usa generalmente para bacterias aerobias
obligatorias.

Imagen 3

Imagen 4

Mtodos indirectos
BASADOS EN POBLACIONES BACTERIANAS Y
ACTIVIDAD DE LAS MISMAS

M. Turbidez

Imagen 5

Turbidimetra
Turbidez medida por
medio de un
espectrofotmetro o
colormetro
Cantidad de luz que
alcanza una clula
fotoelctrica
No es un mtodo til para
medir la contaminacin
en un lquido

Imagen 6

Actividad Metablica
La cantidad de cierto
producto metablico (Ej.
CO2) es directamente
proporcional a la
cantidad de bacterias
presentes.

Imagen 7

Peso en seco
Se extraen los hongos filamentosos o bacterias
Se filtran de materiales extraos
Se secan en un desecador
Se procede a pesar

Imagen 8

TEMPERATURA Y CRECIMIENTO

La temperatura afecta a la velocidad de

crecimiento
Cada bacteria muestra una curva
caracterstica de tasa de crecimiento en
funcin de la temperatura.

Donde podemos distinguir tres puntos

caractersticos llamados temperaturas
cardinales

La temperatura ejerce dos

tipos de efectos opuestos
sobre los organismos
vivos.

CLASES DE MICROORGANISMOS SEGN LA TEMPERATURA

Cada especie bacteriana tiene temperaturas cardinales distintas. Segn el
rango de temperaturas al que pueden crecer las distintas bacterias, se pueden
establecer 4 tipos principales:

Microorganismos
psicrfilos

Crecen a partir de
entre -5 a 5C.
Temperaturas bajas
ptimas.
Enzimas resistentes al
fro.
Gran cantidad de
cidos grasos
insaturados en la
membrana plasmtica

Existen colonias creciendo a los 0c pero

no crecen bien a esa temperatura.

Psicrfilas
obligadas

Tienen una
temperatura
ptima de 0-18C

Flavobacterium,
Tiene un crecimiento
ptimo 13C

Psicrfilas
facultativas o
psicrotolerantes O
PSICRTROFAS
Tienen una
temperatura ptima
en torno a los 20-30C
y mximas a los 35C.

Bacterias y hongos
psicrotrofos

Microorganismos
mesfilos

Temperaturas ptimas a los 25-40C y

mximas entre 35 y 47C.
Microorganismos que viven en ambientes
templados y tropicales.
Los simbiontes y parsitos, pertenecen a esta
categora.

Escherichia coli, Tiene

una temperatura
mnima es de 8C,
ptima de 39C y
mxima de 48C.

Microorganismos
Termfilos

nicas capaces de vivir por encima de 65C

son todas procariotas.
Presentan temperaturas ptimas a 50-75C y
mximos entre 80 y 113C.

Termfilas
extremas

Hipertermfilas.
Pueden presentar ptimos
cercanos a los 100C.
Taxonmicamente pertenecen
al dominio de las Archaea.

Microorganismos
hipertermfilos

Especies Quimioorgantrofas y
Quimiolittrofas.
Velocidades de crecimiento rpidas y
tiempo de generacin cortos (1h).
Archaeas > 100 o C cmaras
presurizadas

OXGENO Y CRECINIENTO
BACTERIANO
Formas de vida
Hbitats microbianos anxicos como:
-Fangos
-Pantanos
-Suelos forestales inundados
-Vertidos de aguas negras
-Zonas profundas de la corteza terrestre
En estos hbitats anxicos proliferan
microorganismos, particularmente procariotas.

TIPOS DE
MICROORGANISMOS CON
RELACIN AL OXIGENO
Microorganismos son muy variados en
cuanto a la necesidad o tolerancia del
oxgeno.

DEPENDIENDO DEL EFECTO DEL

OXGENO
AEROBIOS
Son especies capaces de crecer a tensiones normales de
oxgeno
Respiran oxgeno en su metabolismo
Muchos aerobios pueden tolerar concentraciones mas elevadas
de oxigeno (oxgeno hiperbrico)
Clasificacin
-Microaerofilos
-Obligados o estrictos
-Facultativos

AEROBIOS MICROAEROFILOS
Usan el oxgeno a niveles mas bajos que en el aire
(requieren alrededor de 12%)
Causas
-Limitada capacidad para respirar
-Portan alguna molcula sensible al oxgeno

Fig.1
Fig.2

AEROBIOS FACULTATIVOS
A condiciones apropiadas nutritivas y de cultivo
pueden crecer en condiciones:
-xicas
-anxicas
Fig.3

Fig.4

AEROBIOS OBLIGADOS O
ESTRICTOS
Microorganismos que necesariamente requieren
oxgeno para su crecimiento.

Fig.5
Fig.6

ANAEROBIOS
Microorganismos que no pueden respirar
oxgeno
Clasificacin
-Aerotolerantes
-Obligados o estrictos

ANAEROBIOS AEROTOLERANTES
Aquellos microorganismos que toleran el
oxgeno
Pueden crecer en presencia de oxgeno
No pueden usarlo

Fig.7
Fig.8

ANAEROBIOS OBLIGADOS O
ESTRICTOS
Mueren en presencia de oxgeno
Hiptesis de su mortalidad:
Puede deberse a que son capases de eliminar algunos
productos que se originan en el metabolismo del oxgeno

Fig.9
Fig.10

CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS SEGN SU NECESIDAD

DE OXGENO

CRECIMIENTO MICROBIANO Y PH

El ph es una funcin
logartmica: cambio de 10
veces en la concentracin de
hidrogeniones.
Ph neutro: =7
Ph cido: <7
Ph bsico o alcalino: >7

 Cada microorganismo tiene un

rango de ph ptimo bien definido
para su crecimiento.
Los ambientes naturales: ph 4-9
Pocas especies crecen por debajo
de 3 o por encima de 9 en ph.

Clasificacin de bacterias segn su ph:

cidfilos
Alcalfilos
Neutrfilos

ACIDFILOS

Organismos que crecen en ph bajo,

generalmente hongos: ph 5 o inferior.
Acidfilos obligados: incapaces de crecer
en ph neutro.
Algunas especies:

Archaea: Sulfolobus, Thermoplasma y

Ferroplasma
Procariota+Acidfilo: Picrophilus oshimae
(Ph 0.7)
Picrophilus oshimae

caractersticas
Lactobacillus acidophilus (probitico).
La acidez y la solubilidad del metal que producen las bacterias
acidfilas desempean una funcin benfica en minera.
Las bacterias Lactobacillus acidophilus tienen un crecimiento ptimo
en niveles bajos de pH, causando infecciones vaginales.
Producen caries.

ALCALFILOS

Ph ptimo de crecimiento elevado: ph 10

Se encuentran en hbitats como: lagos
sdicos, suelos ricos en carbonatos.
Alcalfilos mejor estudiados: Bacillus
firmus
Amplio rango de crecimiento: 7.5-11 ph
Son tambin alfilos (amantes de la sal)

Bacillus firmus

APLICACIONES

Enzimas Microbianas
Proteasas y Lipasas
Tienen aplicacin industrial: Aditivos de detergentes
domsticos.
Bacillus licheniformis
Catalasas:

Industria alimentaria: fermentacin

Industria textil: proceso de secado
Vibrio cholerae causa el clera en los seres humanos.

NEUTRFILOS

El citoplasma permanece neutro

o prximo a la neutralidad.
pH ptimo: 6-8
Intercambian
potasio
por
protones mediante un sistema
transportador del tipo antiporte.
Incluyen la mayora de las
especies de microalgas y otros
organismos que forman el
fitoplancton , as como algunas
bacterias y levaduras que viven
en el suelo.

tampones

Sustancias
amortiguadoras
que
mantienen el ph relativamente
constante.
Se usan diferentes tampones para
mantener diferentes valores de ph.
Por ejemplo:
Fosfato potsico
(KH2PO4), Carbonato Clcico (CaCO3).
Pptidos y Aminocidos de los medios
complejos tambin tienen un fuerte
efecto amortiguador de pH.

EFECTO OSMTICOS SOBRE EL CRECIMIENTO BACTERIANO

Agua determina crecimiento de microorganismos.
Depende concentracin de solutos.

Actividad hdrica y osmosis

Disponibilidad del agua se expresa como actividad de agua.
Agua se difunde desde regiones de alta a baja concentracin de agua.
Balance de agua positivo.

Halfilos y organismos relacionados

Microorganismos tienen generalmente dependencia por NaCl.
Hlfilos: Necesitan NaCl.
Discretos y moderados.
Mayoria de microorganismos no prosperan en ambientes Halfilos.
Halotolerantes: Crecen mejor en ausencia de solutos.
Organismos con baja actividad hdrica son importantes para industria
alimenticia.
Halfilos extremos: ambientes salinos.
Osmfilos: alta concentracin de azucares.
Xerfilos: ambientes muy secos.

Solutos compatibles
Organismos en un medio con baja actividad hdrica obtienen agua
aumentando su concentracin de solutos
Son sustancias orgnicas de bajo peso molecular utilizados para
regular el equilibrio osmtico que no deben inhibir procesos
bioqumicos
Azcares, alcoholes derivados de azcares, aminocidos y derivados

VIROLOGA

GENERALIDADES

Un virus es un conjunto de genes,

compuestos de ADN o ARN. Una
membrana de lpidos de doble capa
externa al recubrimiento a la se llama
envoltura. Los virus ms pequeos, los
tamao virin (parvovirus) tienen cerca de
20nm de dimetro, mientras que los virus
humanos de mayor tamao (poxvirus)
tienen un dimetro aproximado de 300nm.

Su organizacin simple y acelular

Fig 1

La partcula viral completa resultante

se denomina virin. Los virus se
hacen
parsitos
intracelulares
obligados los virus no tienen ncleo,
citoplasma, mitocondria u organelos
celulares solo se reproducen en el
interior de clulas vivas

La presencia de ADN o ARN pero

no ambos en la mayora de
viriones con algunas excepciones.

Fig 2

Su capacidad para reproducirse de

forma independiente de las
clulas.

Fig# 1

Fig# 2