POTENCIOMETRA

- Las potenciometrias se basan en la medida del potencial de una clcula

electroqumica, en condiciones estticas.
- No hay paso de corriente (i =0), por lo que la composicin de la celda
permanece constante.
- Las primeras aplicaciones surgen poco despus de 1889 tras la
formulacin de la ecuacin de Nerst, que relaciona el potencial de una
clula con la concentracin de especies electroactivas (slo se aplic a
electrodos metlicos).
- En 1906, Cremer descubre que cuando los dos lados opuestos de una
fina membrana de vidrio se ponen en contacto con disoluciones con
concentraciones diferentes de H3O+, aparece una diferencia de
potencial. Esto da lugar a la aparicin del electrodo de vidrio en 1909.
- En 1937, Kolthoff y Sanders disean el primer electrodo selectivo de
iones (capaz de medir Ag+ empleando perlas fabricadas con AgCl).

MEDIDAS POTENCIOMTRICAS
- Se mide la diferencia de potencial entre un electrodo indicador (o de
trabajo) y un contraelectrodo (dado i = 0, su nica misin es
suministrar un potencial que sirva de referencia, por lo que se
denomina electrodo de referencia).
- Los dos electrodos se separan para evitar reacciones redox espontneas
sobre su superficie. Cada uno est sumergido en una disolucin que
contiene iones (formando dos semiclulas). El potencial de cada
electrodo depende de la concentracin de estos iones.

- Un puente salino con un electrodo inerte (como KCl) conecta las dos
semiclulas. Sus extremos poseen vidrios porosos que permiten el paso
libre de iones K+ y Cl- a las disoluciones, pero impide el paso del
contenido del puente a las semiclulas. Este movimiento de iones (Clhacia la semicelda con exceso de cargas +, K+ hacia la semicelda con
exceso de cargas -) completa el circuto elctrico.

- No es tan sencillo calcular la concentracin de analito (aplicando la ley

de Nerst) como parece, debido a una serie de factores:
1. Los

potenciales

estndar

dependen

de

la

temperatura

(normalmente estn tabulados a 25).

2. La ecuacin de Nerst depende de las actividades, no de las
concentraciones.
3. Son posibles equilibrios adicionales (el par Fe2+/Fe3+ posee
potenciales estndar distintos en funcin del cido presente en el
medio)
4. En el sistema aparecen potenciales adicionales que no se
contemplan en la ecuacin de Nerst. As, existe una diferencia de
potencial en la interfase de cada extremo del puente salino y de la
disolucin en la que se encuentra sumergido (potencial de unin
lquida).
5. Los electrodos no responden, habitualmente, a un nico analito,
sino a varios. Por ejemplo, si se mide la especie A en presencia de
un posible interferente B, el potencial medido vendr dado por la
ecuacin

E = K + 0.06 log aA + kH,BaB

en donde kH,B es el coeficiente de selectividad del electrodo
para la especie interferente B, y aB es la actividad de ese ion. Este
coeficiente puede valer desde 0 (no hay interferencia) hasta valores
superiores a la unidad (el electrodo responde ms para el ion
interferente que para el analito).
El coeficiente de selectividad se puede calcular representando
el potencial obtenido en funcin del logaritmo de la concentracin de

analito, en presencia de una concentracin fija interferente (para

valores muy pequeos de concentracin de analito, la seal medida
se corresponde prcticamente a la del interferente, mientras que para
valores grandes de concentracin de analito, la seal correspondiente
al interferente es prcticamente despreciable).

POTENCIAL DE UNIN LQUIDA

- Aparece en la interfase entre dos disoluciones de distinta composicin,
y con distinta movilidad de los iones.
- Entre dos disoluciones de HCl 0.1 y 0.01 M separadas por una
membrana porosa se produce una difusin de H+ y Cl. de la disolucin
ms concentrada a la ms diluda.
- La movilidad del H+ es mayor, por lo que en un lado de la membrana
aparece un exceso de H+, y en el otro de Cl-. La diferencia de potencial
entre estas dos acumulaciones de carga es el potencial de unin
lquida.

- Esta diferencia de potencial puede llegar a medir 30-40 mV. Cuando se

emplea un puente salino, su magnitud puede minimizarse usando una
sal como el KCl, en la que la movilidad de catin y anin son
parecidas, y con elevadas concentraciones (disolucin saturada).
- Cuando se mide el potencial de la celda, se est midiendo Ecel = EC Ea
+ Eul. Como el potencial de unin lquida no es conocido, no se puede
calcular la concentracin de analito directamente con la ecuacin de
Nerst. Por ello, hay que realizar un calibrado previo.

ELECTRODOS DE MEMBRANA
- El descubrimiento de los potenciales de membrana dio lugar al
desarrollo de toda una clase nueva de electrodos selectivos de iones
(ESI) y de electrodos que responden a concentraciones de analitos
moleculares usando una reaccin qumica para generar iones que
pueden ser controlados con un ESI.
- Los ESI (como el electrodo de pH) funcionan usando una membrana
que reacciona de forma selectiva con un solo ion, formando la clula
Ref (muestra) [A]mues [A]int Ref (interno)
Ecel = ERef(int) ERef(muestra) + Emem + Eul
- Como los potenciales de unin lquida y los potenciales de los
electrodos de referencia son constantes, los cambios en el potencial de
la celda se atribuirn al potencial de membrana.
- Existe una disolucin interna con una concentracin de analito fija. La
corriente pasa a travs de la membrana gracias al movimiento del
analito o de un ion presente en la matriz de la membrana.

- Emem viene dado por la ecuacin

Emem = Easim + RT/zF ln [A]mues/[A]int

en donde [A]mues y [A]int son las concentraciones del analito en la
muestra y en la disolucin interna y z es su carga. En teora, el
potencial de membrana tendra que ser cero si ambas disoluciones
poseen la misma concentracin. En la prctica, esto no suele ser as, de
ah la existencia de un potencial de asimetra (Easim).
- Si sustituimos Ecel en la ecuacin que vimos antes, tenemos que

Ecel = K + 0.06 log [A]mues

donde K es un valor constante que resume todos los potenciales de
electrodos de referencia, asimetra, unin lquida, etc. Se obtiene, pues,
una relacin entre el potencial medido y la concentracin de analito.

ELECTRODOS DE VIDRIO
- Los primeros electrodos de vidrio posean una composicin de
alrededor de 22% Na2O, 6% CaO y 72% SiO2. Cuando se sumergen en
una disolucin varias horas, los 10 mm ms externos de la membrana
se hidrata, formando lugares con una carga negativa (G.) que forman
parte de la estructura de silicio de la membrana. Los iones de
hidrgeno se difunden por la misma, desplazando a los iones de Na+
(transportadores de la carga):
H+(aq) + G-.Na+ (s) G-.H+ (s) + Na+(aq)
- Estos electrodos responden a la ecuacin
Ecel = K + 0.05916 log [H+]
en un rango de pH de entre 0.5 y 9. A valores superiores de pH, la
membrana responde mejor a otros cationes como el Na+ o el K+.
- Sustituyendo el Na2O y el CaO por Li2O y BaO se ampla el rango til
de pH hasta valores superiores a 12.
- El comportamiento de la membrana descrita a pH alto llev a
desarrollar membranas selectivas para otros iones. Con 11% Na2O,
18% Al2O3 y 71% SiO2 se fabrica una membrana selectiva para el Na+.
Existen otros tipos de electrodo para anlisis de Li+, K+, Rb+, Cs+,
NH4+, Ag+ y Tl+.

- Como el espesor de las membranas es de unas 50 micras, han de ser

manipuladas con cuidado para evitar roturas o grietas, y deben ser
acondicionados sumergindolos durante horas en disoluciones que
contengan el analito. No deben dejarse secar, para evitar que se
destruya la capa de hidratacin de la membrana. La composicin
cambia con el tiempo, y el tiempo de vida de un electrodo es de unos
aos.

ESIs EN ESTADO SLIDO

- Formados por membranas de sales inorgnicas policristalinas o de un
solo cristal. Se preparan construyendo una perla de Ag2S o de una
mezcla entre esta y otra sal de plata o sulfuro metlico. Los iones de
Ag+ transportan la carga a travs de la membrana.

- En funcin de la sal aadida al construir la membrana, se pueden

obtener ESI para Cl- (AgCl), Cd2+ (CdS), Cu2+ (CuS) o Pb2+ (PbS).
- La selectividad de estos electrodos depende de la solubilidad. Por
ejemplo, el ESI de Cl- ser ms selectivo para Br- e I-, porque la
solubilidad de AgBr y AgI es menor que la de AgCl. As, en presencia
de Br-, el AgCl presente en la membrana sera sustitudo por AgBr, y la
respuesta del electrodo el Cl- disminuira.

- La membrana del ESI para el F- se fabrica con un nico cristal de LaF3

dopado con una pequea cantidad de EuF2. Los iones F- se mueven por
la membrana pasando por las vacantes que produce en el cristal la
existencia de EuF2. Este electrodo sufre pocas interferencias (excepto
el OH-, lo que pone un lmite mximo de 8 al pH al que se pueden
realizar las medidas; por otro lado, el pH no debe ser menor de 4, ya
que a esos valores el F- se encuentra como HF), y sigue la ecuacin

Ecel = K 0.05916 log [F-]

- Estos electrodos no requieren
de un acondicionamiento y
pueden guardarse secos. Por
otro lado, pueden envenenarse
(como se vio en el caso del
electrodo de Cl-, cuando parte
del AgCl se sustituye por
AgBr), aunque es posible
recuperar la forma cristalina
original frotando con arena y
pulimentando la membrana.

ESI BASADOS EN LQUIDOS

- Se basan en el empleo de una membrana hidrfoba que contenga un
agente complejante orgnico lquido selectivo.
- Se emplean tres tipos de lquidos orgnicos: intercambiadores de
cationes, intercambiadores de aniones e ionforos neutros.
- Un ejemplo es el ESI de Ca2+, consistente en una membrana de
plstico poroso saturada con di-(n-decil)fosfato.

La membrana se

coloca en el extremo de un tubo cilndrico no conductor y en contacto

con dos reservorios: uno externo que contiene di-(n-decil)fosfato en din-octofenilfosfonato (que empapa la membrana porosa) y otro interno
que contiene una disolucin acuosa de Ca2+ y el electrodo de referencia
Ag/AgCl. Existen modelos en los cuales el di-(n-decil)fosfato se
encuentra inmovilizado en una membrana de PVC, por lo que el
reservorio externo no es necesario.

- El potencial de membrana que se desarrolla se debe a la diferencia en

la posicin del equilibrio a ambos lados de la membrana de la reaccin
Ca2+ (aq) + 2 di-(n-decil)fosfato (m) Ca [di-(n-decil)fosfato]2 (m)
- Los electrodos que usan un reservorio lquido pueden guardarse en una
disolucin diluda del analito y no necesitan acondicionamiento.
- Los electrodos con membrana de PVC suelen guardarse cubriendo la
membrana con una caperuza que contenga una pequea cantidad de
gasa humedecida (ya que su caducidad es proporcional a su exposicin
a disoluciones acuosas), necesitando un acondicionamiento de 30-60
minutos antes de la medida.

ELECTRODOS SENSIBLES A LOS GASES

- Existen electrodos de membrana que responden a la concentracin de
gases disueltos.
- La membrana es permeable al analito gaseoso, pero no a los
componentes no voltiles de la muestra. El analito reacciona con la
disolucin interna y produce una especie cuya concentracin puede
controlarse con un ESI apropiado.
- Ejemplo: en el electrodo para CO2, se produce la siguiente reaccin

CO2(aq) + H2O (l) HCO3- + H3O+ (aq)

y el cambio en la concentracin de H3O+ es controlado con un
electrodo de pH.
- La composicin de la disolucin interna cambia con el uso, por lo que
debe reemplazarse peridicamente. Estos electrodos se guardan en una
disolucin similar a la interna para reducir al mnimo su exposicin a
los gases atmosfricos.

BIOSENSORES POTENCIOMTRICOS
- Los electrodos enzimticos consisten en una enzima atrapada o
inmovilizada en la superficie de un ESI. La reaccin del analito con la
enzima da lugar a un producto, cuya concentracin se mide con el ESI.
- Ejemplo: el electrodo para urea se basa en un electrodo para NH3 al
que se le ha aade una membrana de dilisis que atrapa una disolucin
de ureasa. La urea difunde a travs de la membrana de dilisis, donde
reaccin con la ureasa. El NH4+ producido se mantiene en equilibrio
con el NH3 que, a su vez, se difunde a travs de la membrana
permeable al gas, donde es detectado por el electrodo de pH.
- Otra versin emplea la enzima inmovilizada en una membrana de
polmero formada directamente sobre el extremo de un electrodo de
vidrio para pH = 5.

APLICACIONES CUANTITATIVAS
- Las determinaciones potenciomtricas de analitos se encuentran entre
las tcnicas analticas ms habituales. Las ms frecuentes son las
medidas de pH, pero tambin son importantes en anlisis clnico o
medioambiental.
- No se debe olvidar que la ecuacin de Nerst relaciona potenciales con
actividades, no con concentraciones, de forma que

Ecel = K + (0.05916/n) log aMn+

- Dado que la actividad de un ion es igual a su concentracin por su
coeficiente de actividad, tenemos que:

Ecel = K + (0.05916/n) log Mn+ + (0.05916/n) log [Mn+]

- Esta ecuacin puede resolverse slo si se conoce el coeficiente de
actividad, lo cual constituye una grave complicacin. Sin embargo, si
los patrones y las muestras tienen la misma matriz, entonces el
coeficiente de actividad permanece constante y la ecuacin se
simplifica a

Ecel = K + (0.05916/n) log [Mn+]

POTENCIOMETRA DIRECTA
Mediante patrones externos
- Aplicando la ecuacin de Nerst, en principio slo sera necesario
determinar la constante K, por lo que podra hacerse el calibrado con
un nico patrn. En la prctica, es frecuente observar pequeas
desviaciones en la pendiente 0.06/n, por lo que suele ser necesario
utilizar dos o ms patrones externo.
- En ausencia de interferentes, la curva de calibracin del potencial en
funcin del logaritmo de la actividad es una lnea recta. Por otro lado,
debido a los posibles cambios en el coeficiente de actividad, la curva
de calibracin en funcin del logaritmo de la concentracin puede
curvarse para valores de concentracin elevados. Cuando no se conoce
la composicin de la matriz de la muestra, esta curva no es
directamente aplicable.
- Una posibilidad es aadir un electrolito inerte a elevada concentracin
a todas las muestras y patrones. De este modo, la diferencia entre la
matriz de la muestra y la matriz de los patrones perder importancia, y
el coeficiente de actividad ser prcticamente el mismo en todas las
medidas. Estos electrolitos aadidos reciben el nombre de tampn de
ajuste de fuerza inica total (TISAB).
- Ejemplo: en la determinacin de F- se emplea un tampn TISAB con
una elevada concentracin de NaCl (1M) para garantizar que la fuerza
inica de la muestra y los patrones es la misma, AcOH y NaOH pH 5
5.5 para garantizar que todo el flor se encuentre como F- y no como
HF,

y un agente complejante (DCTA, o cido trans-1-2-

ciclohexanotetractico) para el Fe3+ y Al3+ que pudiera existir

(evitando la formacin de FeF63- o AlF63-).

Mediante adicin patrn

- En muchos mtodos se recurre a la adicin patrn debido a la
dificultad para mantener una matriz constante en las muestras y
patrones.
- En estos casos, tras medir la muestra, se aade un volumen conocido
de disolucin patrn a la misma. Si el volumen aadido es pequeo,
puede ignorarse el cambio de la matriz de la muestra, y el coeficiente
de actividad permanece constante.
Iones libres frente a iones formando complejos
- La mayora de los ESI son selectivos slo para el analito libre, y no
responden al analito que forma complejos. Por ello, cuando se busca
medir la concentracin total de analito hay que trabajar en condiciones
cuidadosamente controladas.
- Por otro lado, esta selectividad proporciona una ventaja significativa
cuando lo que se desea determinar es la concentracin de ion libre. Por
ejemplo, el calcio urinario puede encontrarse como Ca2+ libre o unido a
protenas. El anlisis con un ESI para Ca2+ proporciona una seal que
slo depender de los iones de Ca2+ libres.

MEDIDA DEL pH
- La definicin convencional de pH es pH = -log [H+]. Sin embargo, el
pH de una disolucin se define porla respuesta de un electrodo al ion
H+, y por lo tanto, a su actividad: pH = -log (aH+).
- En un electrodo de membrana de vidrio, el potencial de una disolucin
de pH desconocido viene dado por
Ecel = K (2.303 RT / F) pH
- en donde K comprende el potencial de referencia, de asimetra, de la
membrana de vidrio y de otras uniones lquidas. Todas estas
contribuciones a K estn sometidas a incertidumbre, y pueden cambiar
de un da para otro o para electrodos. Por ello, los electrodos deben
calibrarse usando un patrn de pH conocido.
- Para usar una disolucin como patrn, sera necesario conocer su
actividad de H+ con exactitud. En la prctica, no es posible hacer un
calculo riguroso de la actividad de un solo ion, por lo que los
electrodos de pH se calculan usando un tampn patrn cuya
composicin se elige de forma que el pH establecido se encuentre lo
ms cerca posible del obtenido mediante la ecuacin
Ecel = K + (0.05916 / n ) log [H+]
- Es habitual emplear dos patrones: uno de pH cercano a 7 y otro mucho
ms cido o bsico, dependiendo del pH previsto para la muestra.
- Algunos medidores de pH estn equipados con compensacin de la
temperatura. En estos casos, se introduce un detector de temperatura en
la muestra, junto con el electrodo.

APLICACIONES CLNICAS
- Es el rea de mayor uso de ESI, por su selectividad para con los
analitos en mezclas complejas.
- Los analitos ms frecuentes son electrolitos como Na+, K+, Ca2+, H+,
Cl- y gases disueltos como CO2.
- En lquidos extracelulrares (suero, orina, etc.), puede hacerse una
medida in vitro si se dispone de suficiente cantidad de muestra.
Algunos analizadores clnicos introducen distintos ESI en una clula
de flujo, con el fin de determinar varios analitos simultneamente.
- Para analizar lquidos intecelulares,
es necesario un ESI que pueda
introducirse directamente en las
clulas

investigadas.

microelectrodos
basados

en

de

Los

membrana

lquidos

(con

un

dimetro de una micra) se obtiene

calentando y estirando un capilar de
vidrio duro de un espesor inicial de
1-2 mm.
- La punta del electrodo se hace
hidrfoba

introduciendo

diclorometil silano. En su interior, se

aade

una

disolucin

interna

adecuada del analito deseado y un

electrodo de referencia (Ag/AgCl).
- La punta del microelectrodo se

sumerge en una disolucin que contiene el agente complejante lquido,

que penetra en el electredo y queda retenido en la punta por capilaridad
(no es necesaria una membrana slida).
- Se han desarrollados microelectrodos selectivos para H+, K+, Na+,
Ca2+, Cl- e I-.

APLICACIONES AMBIENTALES
- Se han desarrollado mtodos de referencia para el anlisis de CN-, F-,
NH3 y NO3- en el agua corriente y las aguas residuales (pero, salvo en
el caso de F-, se considera que otros mtodos son mejores).
- La incorporacin de un ESI en una clula de flujo permite el control
continuo de las corrientes de aguas residuales y otros sistemas.
- Se ha prestado una especial atencin al desarrollo de biosensores para
la deteccin sistemtica de diversos contaminantes de inters
prioritario en muestras medioambientales.

EVALUACIN
- Escala de aplicacin: la mayora de los ESI trabajan en un rango de
0.1 1 M como concentracin mxima y 10-5 10-10 M como
concentracin mnima. Estos lmites se extienden desde analitos
mayoritarios a ultrarresiduales. El volumen necesario de muestra es de
0.05 10 mL.
- Exactitud: limitada por el error de la medicin del potencial de la
clula, debidos a la presencia de iones interferentes, las diferencias de
coeficiente de actividad del analito en los patrones y la muestra, y los
potenciales

de

unin

lquida.

En

el

mejor

de

los

casos

(compatibilizando la matriz de los patrones con la muestra y separando

los interferentes antes de la medida) se pueden observar diferencias de
1 mV al medir muestras en principio de igual concentracin. Las
exactitudes tpicas rondan el 1-5% para iones monovalentes y 2-10%
para divalentes.
- Precisin: viene limitada por las variaciones de la temperatura y la
sensibilidad del potencimetro. En general, el potencial puede medirse
con una repetitibilidad de 1 mV, lo cual se corresponde con
incertidumbres de 0.4% mV para analitos monovalentes y 0.8% para
divalentes. Las reproducibilidades son alrededor de 10 veces peores.
- Sensibilidad: depende el trmino RT/nF, por lo que es mejor para
valores pequeos de n.
- Selectividad: la mayora de los ESI responden a ms de un ion, pero
muchos de ellos presentan una selectividad para el analito mucho
mayor que para casi todos los interferentes
- Tiempo, coste y equipo: son sistemas rpidos y relativamente baratos,
existiendo aparatos comerciales porttiles para pH o E porttiles con
poco coste.