PROPUESTA INVESTIGATIVA:

POR QU SE PRODUCE LA INTOLERANCIA A LA LACTOSA?

PAOLA ANDREA VERA SILVA - 2143299
FAIDER PABN PABN -2143289
RESUMEN
Esta propuesta investigativa se ha desarrollado con el fin de mostrar los alcances de la qumica orgnica en el
contexto de procesos biomoleculares, a la vez que clarifica y rene los elementos de un proceso tan importante en
el organismo de cuyo buen desarrollo depende la salud y el bienestar de las poblaciones como tambin se introduce
en los procesos que dan origen a la sintomatologa asociada a la intolerancia a la lactosa. El presente escrito se ha
obtenido a travs de una rigurosa consulta de informacin de importantes bases de datos que incluyen libros,
revistas, artculos cientficos e investigativos, tambin se han usado bancos mundiales de informacin y software
de graficacin molecular como Chemsketch. Finalmente hemos obtenido satisfactoriamente la estructura
generalizada de la enzima lactasa y el mecanismo puntual de la reaccin que conduce al rompimiento de la
molcula lactosa, como tambin las consecuencias de la acumulacin de lactosa y los procesos generalizados de
fermentacin de parte de la flora intestinal que generan sntomas de intolerancia.
Palabras clave: Lactasa, Lactosa, Galactosa, Sitio Activo, Enzima, Fermentacin, Flora Intestinal, Sustitucin
Nucleofilica.
ABSTRACT
This research proposal has been developed with the aim of show the scope of the organic chemistry within the
context of biomolecular processes while classifies and assembles the elements of such an important process in the
body whose good development depends the health and wellbeing of populations, also it is introduced into the
processes that give rise to the symptoms associated with lactose intolerance. This text has been obtained after a
rigorous research through the most important information databases that include books, magazines, scientific and
research articles, also have been used global data banks and graphing software molecular as Chemsketch. Finally
we have successfully obtained the generalized structure of the enzyme lactase and prompt reaction mechanism
leading to the breakdown of the lactose molecule, as the consequences of accumulation of lactose and generalized
fermentation processes of the intestinal flora that generate intolerance symptoms.
Keywords: Lactase, lactose, galactose, active site, enzyme, fermentation, Intestinal flora, nucleophilic
substitution
INTRODUCCIN
A lo largo del tiempo el hombre ha incluido en su dieta diaria el consumo de productos lcteos debido a su alto
valor nutricional, aunque igualmente se han concebido problemas digestivos posteriores a su ingesta, esta
patologa ha sido considerada como la intolerancia a la lactosa.
Es por esto que se lleva a cabo esta investigacin vinculada directamente al por qu se produce. En dicho
cuestionamiento se analizar el desarrollo de un proceso normal de rompimiento de la lactosa, y a su vez se
estudiar la malabsorcin de la lactosa consecuencia de una deficiencia en la enzima conocida como lactasa ,que
1

se encuentra en las vellosidades del intestino delgado y es la encargada de hidrolizar este azcar para su
asimilacin.
La lactosa que no fue digerida en su totalidad pasar por el intestino grueso y all ser descompuesta por las
bacterias que se encuentran localizadas en l , es fermentada por las bacterias del colon para producir cidos grasos
de cadena corta y gases, lo cual provoca una serie de malestares gastrointestinales tales como: Distensin
abdominal, clicos abdominales, diarrea, gases (flatulencia) y nuseas. ste trastorno ser descrito de manera
ms puntual a lo largo de este trabajo destacando as los aspectos ms relevantes de esta patologa.
LA LACTOSA:

Figura 1.proyeccin de Haworth de la lactosa y vista tridimensional obtenida por Chemsketch.

La lactosa es un disacrido que hace parte de la leche, compuesto por dos monosacridos diferentes D-glucosa y
D-galactosa unidos por un enlace glicosdico entre el C1 de la galactosa y el C4 de la glucosa, la digestin de
esta se da mediante la enzima lactasa.
La frmula condensada de la lactosa es C12H22O11, y la denominacin de la IUPAC es: -D-galactopyranosyl(14)-D-glucose.
LA GALACTOSA:

Figura 2.proyeccin de Haworth de la galactosa y vista 3D.

2

La galactosa es un constituyente del disacrido lactosa encontrado en los productos cotidianos,

este monosacrido est constituido por seis tomos de carbn y es obtenida a partir de la hidrlisis de la lactosa,
para su catabolismo requiere de la formacin de uridin difosfato glucosa ( UDPglucosa), la cual se forma a
partir de glucosa-1-P y UTP.
La denominacin de la IUPAC es: (2S,3R,4S,5R,6R)-6-(hydroxymethyl) oxane-2,3,4,5-tetrol, y su frmula
molecular es C6H12O6.

LA GLUCOSA

Figura 3.proyeccin de Haworth de la glucosa y vista 3D.

La glucosa fue el primer carbohidrato simple que se obtuvo puro, tiene frmula molecular C6H12O6, tambin es
conocida como dextrosa en la medicina. Este monosacrido es una forma de azcar, que tiene cuatro centros de
quiralidad. La glucosa se absorbe directamente al torrente sanguneo durante la digestin. Las clulas lo utilizan
como fuente primaria de energa y es un intermediario metablico. La denominacin de la IUPAC es: D-glucose.
Para el desarrollo de esta pregunta es importante determinar nociones mnimas sobre la estructura y
funcionamiento de las enzimas puesto que se trata de molculas bastante complejas que desarrollan operaciones
metablicas de una manera especfica y particular. El sustrato se adapta al sitio activo o cataltico de una enzima
como una llave a una cerradura enuncia Fisher en 1984, en nuestro caso el sustrato corresponde a la molcula de
Lactosa. Es por ello que requerimos encontrar los sitios activos de la enzima Lactasa y conocer su estructura.
ENZIMA LACTASA
Es una enzima de cuatro cadenas idnticas de polipptidos cada una de 1023 aminocidos 1 , los cuales determinan
a la vez 5 dominios proteicos indicados con distintos colores en la figura 4. Su estructura fue inicialmente
determinada en un cristal monoclnico pero ms adelante la estructura fue redefinida a 1.7 resolucin en un
cristal ortorrmbico con un tetrmero en la unidad asimtrica 2 . Esta ltima estructura es considerada la mejor
que se tiene de la Lactasa y es la que se usa en estudios funcionales.
3

Bioinformtica Estructural (RCSB) 3 obtenida por crio

microscopia electrnica a resolucin de 3.2

Figura 5: Esquema que muestra las principales

caractersticas de la lactasa tetramerica. Los
cuatro sitios activos se indican con asteriscos,
las dems indicaciones corresponden a rutas de

posteriormente esclarecida. 4

residuos monomricos 4 .

Figura 6: Aqu se aprecia con mayor facilidad las 4

cadenas idnticas de polipptidos y los ejes
coordenados que determinan la forma tetramrica de la

Figura 7: Centros reactivos de la enzima en

detalle, gracias al software interactivo del
RCSB. 3

Figura 4: Imagen tomada del Banco de Datos de

Protenas del Colaboratorio de Investigacin de

enzima.

Tabla 1:
Para un grado mayor de exactitud podemos establecer la
ubicacin de los cuatro sitios activos por secuencias dentro
de la enzima gracias al Recurso Universal de Protenas
(UPR), donde tambin se describe los sitios 1065 y 1538
principalmente como donadores de protones mientras los
sitios 1273 y 1749 son descritos como nuclefilos.

Cmo ocurre la reaccin?

La lactasa presenta un alto grado de especificidad en la configuracin con el sustrato lactosa adems para estar
completamente activada la enzima requiere Na+ o K+ y Mg2+. 6 Veamos como ocurre el proceso de entrada de la
lactosa en el sitio activo E537 de la lactasa

Figura 9: Una vez ha ocurrido el proceso de

rompimiento de la lactosa, la glucosa es
inmediatamente liberada mientras que la molcula de
galactosa entra a una fase profunda del sitio activo
para continuar un proceso de galactosilacin. 7

Figura 8 : Molcula de Lactosa cuyos tomos y

enlaces carbono se pintan de verde, entrando en el sitio
activo de galactosa en la posicin Q537 o GLU537, se
aprecian tambin los cationes metlicos que
contribuyen a la activacin de la enzima 7 .

El mecanismo por el cual se lleva a cabo esta reaccin cuenta con caractersticas que lo ubican entre los
mecanismos SN1 Y SN2. El caso del mecanismo SN1 es menos convincente en base a los estudios de cintica que
muestran que la cintica de la reaccin es secuencial mientras mantiene un rpido equilibrio aleatorio, actualmente
no hay evidencia experimental para apoyar el mecanismo SN1 como el ms adecuado para esta reaccin, mientras
que los estudios de difraccin cristalogrfica por rayos X sugieren que el mecanismo ms apropiado es SN2. 8

Estos mecanismos de sustitucin nucleoflica requieren el establecimiento de un agente nucleoflico y un agente

electrfilo, gracias a investigaciones de modificacin qumica y estudios estructurales se ha logrado establecer que
el GLU461 y el GLU537 en el sitio activo de la enzima actan como catalizador cido y nuclefilo
respectivamente. 9 10 El GLU 537 acta como nuclefilo hacia el carbono anomrico del grupo galactosil lo que
forma un intermedio con orientacin hacia el enlace alfa-glicosidico a la vez que se establece una protonacin
concertada del oxgeno glicosidico por parte del GLU 461.

Figura 10: Se aprecia paso a paso el mecanismo de reaccin. A) Comienza la interaccin entre el hidrogeno
del GLU461 y el oxgeno glicosdico a la vez que el GLU537 como nuclefilo buscar atacar el carbono
anmerico del ciclo galactosidico. B) Momento de transicin donde H de GLU461 pierde sus electrones y
recibe los del oxgeno al que queda unido simultneamente el Carbono cede un par de electrones a oxigeno
mientras recibe los electrones del GLU 537. C) Molcula de Glucosa libre mientras la galactosa queda unida
a la posicin GLU 537. 11
Pero Qu ocurre en aquellos organismos en los cuales por algn factor no ocurre este proceso cataltico?
Veamos.
La fermentacin es un proceso que se da por las bacterias que se encuentran en el coln cuando el azcar no fue
absorbido y llega intacto. La fibra es fermentada por las bacterias colnicas lo que da origen a la proliferacin de
ciertas poblaciones bacterianas, y a la generacin de cidos grasos de cadena corta junto con dixido de carbono
e hidrogeno.
Usualmente cuando la absorcin se ve disminuida, los cidos grasos disminuyen el pH, lo que impide la
reabsorcin de agua y sodio, cuando la capacidad de fermentacin bacteriana se ve aumentada por la cantidad de
azcar que llega al colon, se produce una sobrecarga osmtica que no podr ser compensada ,dando lugar a
distensin y diarrea. Los responsables de la fermentacin colnica son los carbohidratos no digeridos.
En una primera etapa de la fermentacin se produce gran cantidad de gases que se constituyen en el intestino
grueso, entre ellos cabe destacar el hidrgeno, la mayora de este gas es utilizado como sustrato por otras bacterias,
una parte del hidrgeno formado es absorbido por la corriente sangunea y desechado a travs de la respiracin, y
la otra parte es expulsada mediante flatulencias.

Figura 11 Esquema general de la fermentacin por la flora bacteriana colnica. (AGCC= cidos grasos de cadena
corta; AGCR=cidos grasos de cadena ramificada). 22

Niveles de deficiencia de lactasa:

Deficiencia de la intolerancia a la lactosa primaria:
Tambin conocida como hipolactasia de tipo adulto, esta
carencia es distinguida por su deficiencia hereditaria de
lactasa.
Dicho desorden es poco frecuente, adems es progresivo y
permanente, obedece a un defecto en el metabolismo que se
presenta desde la gestacin.
En Colombia, la poblacin deriva de una mezcla tritnica,
distribuida
en
los
siguientes
porcentajes:
10-11 % negros, 26-29% indgenas y 61-63% blancos,
donde se esperara una prevalencia de hipolactasia cercana
al 50%.
Figura 12: Fisiopatologa de malabsorcin de la
lactosa.23
7

Deficiencia de la intolerancia a la lactosa secundaria:

Es aquella que se da de manera espordica donde previamente haba una actividad normal de la lactasa, y una
produccin enzimtica activa, algunas de las probables causas pueden ser enfermedades tales como infecciones
virales, bacterianas, gastroenteritis, enfermedad celiaca, entre otras.
Cuando se ingieren productos derivados de la lactosa, nuestro organismo comienza un proceso enzimtico
producido en el intestino delgado, por la enzima lactasa que se produce en el borde de cepillo de las clulas que
recubren las vellosidades intestinales, y es la encargada del proceso de conversin de la lactosa. Dentro de la flora
bacteriana tenemos dos grupos de bacterias, por una parte tenemos las bacterias metanognicas que son las
encargadas de la produccin del metano, y por otro lado las bacterias sulfato-reductoras, que reducen compuestos
azufrados. Ambos tipos de bacterias disputan por el hidrogeno, siendo las bacterias metanognicas las que ganen,
lo que permite que se forme ms gas metano (CH4) que sulfuro de hidrgeno (H2S).
Cuando somos pequeos nuestros organismos producen la mayor cantidad de lactasa, pero a medida que vamos
creciendo incorporamos otros alimentos, lo que genera una disminucin en la cantidad de lcteos ingeridos, por lo
tanto no se hace necesaria la elaboracin de lactasa y el organismo reduce la produccin de esta enzima.
Es por esto que se les asocia a las personas de mayor edad una menor idoneidad para la digestin de la lactosa al
no ser capaces de absorberla en su totalidad.

CONCLUSIONES:
-Hemos explorado la estructura de la enzima Lactasa determinando, con el grado de precisin que nuestra pregunta
requiere, los 4 sitios activos que resultan relevantes para dar respuesta a la misma, obteniendo vistas detalladas
como se aprecia en las figuras 7 y 8 para una mayor comprensin de todo el proceso.
-Se ha establecido el mecanismo de rompimiento de la Lactosa como un intermedio entre los mecanismos SN1 y
SN2 al interior del sitio activo de la enzima, en el que toman parte un catalizador cido, GLU 461 que se desempea
como dador de protones y un agente nuclefilo, GLU537 que dona 1 par de electrones y retiene la molcula de
galactosa luego del rompimiento.
-Hemos logrado interactuar con el software de graficacin molecular Chemsketch al punto que nos ha permitido
obtener las vistas tridimensionales de las molculas involucradas en el proceso, as como tambin las respectivas
proyecciones de Haworth.
-Como resultado a la investigacin presentada anteriormente podemos concluir que la intolerancia a la lactosa se
puede presentar de manera congnita o ser desarrollada de manera espontnea.
-Por otra parte se pudo inquirir que la lactosa al no ser absorbida en su totalidad es la causa de un proceso de
fermentacin que lleva consigo una serie de reacciones patolgicas.

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