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ESCUELA DE BIOQUÍMICA
CARRERA DE ALIMENTOS
ESCUELA DE BIOQUÍMICA
CARRERA DE ALIMENTOS
...........................................................................................................................................1
ESCUELA DE BIOQUÍMICA.......................................................................................1
CARRERA DE ALIMENTOS........................................................................................1
ESCUELA DE BIOQUÍMICA.......................................................................................2
CARRERA DE ALIMENTOS........................................................................................2
CAPITULO I ...................................................................................................................6
CAPITULO II................................................................................................................11
2.1ANTECEDENTES..............................................................................................................11
................................................................................................................................................14
2.2 DEFINICIONES CONCEPTUALES .................................................................................14
2.2.1 Inoculantes biológicos................................................................................................14
2.2.1.1 Bioinoculantes..........................................................................................................14
2.2.1.2 Bioinoculante EMAS.................................................................................................15
2.2.1.3 Microorganismos autóctonos..................................................................................16
2.2.2 Microorganismos Fijadores de Nitrógeno.................................................................16
2.2.2.1 Generalidades...........................................................................................................16
2.2.2.2 Aislamiento ...............................................................................................................17
2.2.2.3 Selección...................................................................................................................18
2.2.2.4 Antagonismo.............................................................................................................19
2.2.2.5 Identificación.............................................................................................................19
2.2.2.6 Preservación.............................................................................................................20
2.2.2.7 Microorganismos Relacionados..............................................................................20
................................................................................................................................................21
2.2.3 Microorganismos Solubilizadores de Fósforo..........................................................21
2.2.3.1 Generalidades...........................................................................................................21
2.2.3.2 Aislamiento de Microorganismos............................................................................23
2.2.3.3 Selección de Microorganismos ..............................................................................24
2.2.3.4 Antagonismo.............................................................................................................25
2.2.3.5 Identificación.............................................................................................................25
2.2.3.6 Preservación.............................................................................................................26
2.2.3.7 Microorganismos Relacionados..............................................................................26
2.2.4 Microorganismos Antagonistas..................................................................................27
2.2.4.1 Introducción..............................................................................................................27
Mecanismos de acción.........................................................................................................28
Competencia.........................................................................................................................28
2.2.4.2 Aislamiento de Microorganismos............................................................................30
2.2.4.3 Selección de Microorganismos ..............................................................................30
2.2.4.4 Antagonismo.............................................................................................................31
2.2.4.5 Identificación............................................................................................................31
2.2.4.6 Preservación.............................................................................................................32
2.2.4.7 Microorganismos Implicados.................................................................................32
CAPITULO III..............................................................................................................33
CAPITULO IV...............................................................................................................45
4.1 Recursos..........................................................................................................................45
4.2 Presupuesto....................................................................................................................48
4.3 Cronograma.....................................................................................................................48
5. BIBLIOGRAFÍA.......................................................................................................49
6. ANEXOS.....................................................................................................................54
CAPITULO I
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Elaborar el Bioinoculante.
Realizar un muestreo del Bioinoculante en la fase de captura, solución
madre y solución de propagación.
Realizar un muestreo de suelos y raíces de los bloques 8 y 9 donde se
aplica el bioinoculante.
Aislar microorganismos fijadores de nitrógeno, solubilizadores de
fósforo, y antagonistas.
Seleccionar los mejores microorganismos fijadores de nitrógeno,
solubilizadores de fosforo y antagonistas.
Evaluar el antagonismo entre las cepas seleccionadas de cada grupo
Caracterizar las cepas evaluadas por género
Conservar los mejores microorganismos fijadores de nitrógeno,
solubilizadores de fósforo y antagonistas.
9 CASTELLANOS, Diana. CUBILLOS, Ricardo , Selección de Microorganismos Promotores de Crecimiento Vegetal (Ácido
Indol Acético) a partir de Muestras de Suelo Rizosférico, como Primera Etapa en el Desarrollo de un Biofertilizante, Pontificia
Universidad Javeriana
selección, multiplicación y producción.25
25 López Marisol, Efecto de biofertilizantes bacterianos sobre el crecimiento de un cultivar de maíz en dos suelos contrastantes, Centro Nacional de
Investigaciones Agropecuarias (CENIAP), Maracay, estado Aragua. Venezuela.
21 GREEN QUALITY | F.A.Q, mejoras en rendimientos a campo respecto de un control sin Biofertilizar , Gráficos de rendimiento
Trigo: Mejora en rendimiento de 12,3 % en Trigo. (Kg/Ha)
CAPITULO II
2.1 ANTECEDENTES
16 Elein Terry Alfonso, Microorganismos Benéficos como biofertilizantes eficientes para el cultivo del tomate (Lycopersicon esculentum, Mill), Revista
Colombiana de Biotecnología, volumen VII N: 2, Diciembre 2005, pág. 47-54
7 BORRERO, C. A, Efectos de Trichoderma (in vitro) en los microorganismos no patógenos descomponedores de la materia orgánica de un suelo oxisol
clase IV del piedemonte llanero, Ingeniería Agronómica de la Unillanos, VOLUMEN 9 Nº 2 ,2005
En Colombia se han realizado investigaciones en la Universidad Javeriana y la
Nacional de Colombia, Castellanos, D: con el tema “Selección de
Microorganismos Promotores de Crecimiento Vegetal (Ácido Indol
Acético) a partir de Muestras de Suelo Rizosférico, como Primera Etapa
en el Desarrollo de un Biofertilizante”, En este estudio se evaluaron 34
cepas de bacterias no filamentosas y 6 de actinomicetos, a partir de muestras
de suelo rizosférico de diferentes plantas, con el fin de evaluar su capacidad
productora in-vitro de AIA (Ácido Indol Acético) y así establecer un cepario de
posibles Microorganismos Promotores de Crecimiento Vegetal.13
13 Chirinos Jenny, Leal Ángel y Montilla Joan, Uso de Insumos Biológicos como Alternativa para la Agricultura Sostenible en la Zona Sur del Estado
Anzoátegui, El Tigre estado Anzoátegui .Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas, Revista Digital CENIAP HOY Nº 11 ,2006
34 STEFANOVA N., M. 1998. Métodos de aplicación y efectividad de Trichoderma sp. Como antagonista de hongos fitopatógenos. Curso internacional
de control biológico BIOSAV- 4. Instituto de investigaciones de Sanidad Vegetal. La habana-Cuba.
En Venezuela se han realizado investigaciones por el Centro Nacional de
Investigaciones Agropecuarias (CENIAP), López, M, con el tema “Efecto de
Biofertilizantes Bacterianos sobre el Crecimiento de un Cultivar de Maíz
en dos Suelos Contrastantes Venezolanos”, se evaluó el efecto de cepas
nativas fijadoras de N2 (FN) de forma asociativa y solubilizadoras de fósforo
(SF) sobre el crecimiento de maíz. Hubo efecto EPR (rizobacterias promotoras
de la emergencia) con la cepa FN en el suelo A, lográndose 30% más de
germinación y 24% más de plantas con primera hoja verdadera a los 6 días. En
el suelo B el efecto fue más tardío. La evaluación de altura de la planta,
diámetro del tallo, largo y ancho de la hoja y biomasa de raíces y partes aéreas
puso de manifiesto la efectividad de la inoculación con bacterias FN en ambos
suelos y la de SF en el suelo de baja fertilidad (B).26
Es por esto que países como Cuba, Colombia, Chile, Venezuela entre otros;
demostraron que con la utilización de microorganismos eran capaces de
mejorar la disponibilidad de nutrientes y generar alternativas amigables con el
ambiente y aumentar el rendimiento agrícola.
2.2.1.1 Bioinoculantes
26 López M, Evaluación de un Medio de Cultivo no comercial para la producción de un bioinoculante empleado en un cultivo de flores, Carrera de
Microbiología Industrial, Facultad de Ciencias, PUJ, 2006
contamina el ambiente, y mantiene al suelo desde el punto de vista de fertilidad
y biodiversidad (ICA, 2004).
Dentro de los beneficios que presenta el uso de microorganismos en la
agricultura están su capacidad de fijar nitrógeno atmosférico, la
descomposición de residuos orgánicos, la detoxificación de plaguicidas, el
control de las enfermedades de las plantas, el aporte de nutrientes al suelo, y la
producción de compuestos bioactivos como vitaminas y hormonas que
estimulan el crecimiento de la plantas (Loredo et al., 2004); del mismo modo es
importante incentivar estudios para la búsqueda de nuevas fuentes de
bioinoculantes y por supuesto nuevas aplicaciones.
En la actualidad el uso de bioinoculantes, aplicados como inoculantes dentro
de los sistemas de producción agrícola, está teniendo un gran auge,
especialmente para lograr una mayor disponibilidad de nutrientes que permitan
un rendimiento sostenible de los cultivos, con la conservación del medio
ambiente y una mayor producción.29
2.2.2.1 Generalidades
4 Arias Vega Carlos Aurelio , Estudio de 2 Grupos de Microorganismos como Agentes Aceleradores de Descomposición de los Desechos
Sólidos Orgánicos Originados en los Comedores de ESPOL, Facultad de Ingeniería en Mecánica y Ciencias de la Producción, ESPOL,
Guayaquil. 2007
El proceso es llevado a cabo ciertos microorganismos del suelo que se
conocen como microorganismos fijadores de nitrógeno, todos los
microorganismos que convierten el nitrógeno en amoniaco lo hacen gracias a la
actividad del complejo enzimático llamado nitrogenasa que está constituido por
dos metaloprotreinas, la proteína (I) llamada: hierro-molibdato-proteína, y la
proteína (II): llamada hierro- proteína( Baca et ál, 2000), la enzima requiere la
colaboración de otras dos proteínas ferrodoxina y flavodoxina, que actúan
como donadores de electrones y reductores naturales de la nitrogenasa. Los
electrones son trasportados a la nitrogenasa por la ferrodoxina y llegan a la
hierro-proteína, esta activa a la Mo-Fe- proteína y se produce la reducción del
nitrógeno, y luego siendo fijado como compuesto aminado (Hernández, 1998).24
2.2.2.2 Aislamiento
24 Lara Mantilla Cecilia, bacterias fijadoras asimbióticas de nitrógeno de la zona agrícola de San Carlos (Córdova – Colombia), Revista
Colombiana de Biotecnología. Volumen IX N.- 2, Diciembre 2007, pág. 6-14
6 bnLec33, pdf
Técnica del cultivo de enriquecimiento selectivo:
2.2.2.3 Selección
8 Brook D.T, y T.M Madigan, Microbiología, 6ta edición, México, Printice Hall Hispanoamérica S.A , 1993
23 Jiménez Avella Diego Javier, Caracterización Molecular de Cepas Nativas Colombianas de Azotobacter spp Mediante el Análisis de
Restricción del ADN Ribosomal 16S, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2007
2003).24
2.2.2.4 Antagonismo
2.2.2.5 Identificación
24 Lara Mantilla Cecilia, bacterias fijadoras asimbióticas de nitrógeno de la zona agrícola de San Carlos (Córdova – Colombia), Revista
Colombiana de Biotecnología. Volumen IX N.- 2, Diciembre 2007, pág. 6-14
5 Bobadilla Henao Catalina / Rincón Vanegas Sandra Carolina, Aislamiento y Producción de Bacterias Fosfato Solubilizadoras a Partir de
Compost obtenido de Residuos de Plaza, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2008
Tipo de metabolismo.
Forma y características del crecimiento en el medio de cultivo.
Determinación del perfil bioquímico mediante pruebas de diagnostico.
2.2.2.6 Preservación
2.2.3.1 Generalidades
2.2.3.4 Antagonismo
2.2.3.5 Identificación
5 Bobadilla Henao Catalina / Rincón Vanegas Sandra Carolina, Aislamiento y Producción de Bacterias Fosfato Solubilizadoras a Partir de
Compost obtenido de Residuos de Plaza, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2008
5 Bobadilla Henao Catalina / Rincón Vanegas Sandra Carolina, Aislamiento y Producción de Bacterias Fosfato Solubilizadoras a Partir de
Compost obtenido de Residuos de Plaza, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2008
decir aquellos aspectos que constituyen el fenotipo bacteriano y que toma en
cuenta los siguientes aspectos:
2.2.3.6 Preservación
Los objetivos de la conservación de los cultivos son los siguientes:
Preservar la pureza genética del cultivo sin pérdida de ninguna de sus
propiedades bioquímicas.
Preservar los niveles de su productividad inicial
Lograr que el cultivo pueda ser transportado y manejado con facilidad.
2.2.4.1 Introducción
• Competencia
Esta constituye un mecanismo de acción antagónica muy importante. Puede
definirse como el comportamiento desigual de dos o más organismos ante un
mismo requerimiento, siempre y cuando la utilización del mismo por uno de los
organismos reduzca la cantidad disponible para los demás. Un factor esencial
para que exista competencia es la escasez o limitación de un elemento porque
si hay exceso no hay competencia.
Los métodos para aislamiento que se usan más ampliamente son métodos
clásicos. Para hongos y bacterias antagonistas se siembra en medios
generales con antibacterianos y antifúngicos respectivamente.
Se emplea PDA (Anexo 2) para hongos antagonistas y Agar nutritivo (Anexo 1)
para bacterias, incubando por 7 días a temperatura ambiente y por 48 horas a
37 oC respectivamente.12
17 Fernández Orietta / Larrea Vega, Microorganismos antagonistas para el control Fitosanitario, Manejo Integrado de Plagas, Costa Rica,
No. 62 p , pág. 96 - 100 , 2001
12 Chávez García Mónica Paola, Producción de Trichoderma sp y Evaluación de su Efecto en Cultivo de Crisantemo, Bogotá, PUJ,
Facultad de Ciencias ,2006
del hongo antagonista como del hongo patógeno. Los cuales son colocados en
platos Petri contentivos de (PDA) uno frente al otro de manera equidistante.
Las observaciones se realizaron cada 24 horas por siete días consecutivos a
25oC, y se evalúa el crecimiento radial (cm/día) de las colonias de ambos
hongos. Con estos datos se determinó el porcentaje de inhibición de
crecimiento (PIC).El porcentaje de inhibición se determinó utilizando la fórmula:
J. M. Vincent, empleada por Latiegue (1990).
PIC = 100 (C –T)/C
Donde:
PIC: Porcentaje de Inhibición de Crecimiento del fitopatógeno
C: Crecimiento del Control
T: Crecimiento del Tratamiento
2.2.4.4 Antagonismo
2.2.4.5 Identificación
2.2.4.6 Preservación
1 Ángel Alarcón Dilia Irney, Evaluación de Técnicas de Conservación de Hongos Filamentosos y Lavaduriformes en el Cepario de la
Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Facultad de Ciencias, PUJ, 2006
Agrobacterium
Agrobacter
Pseudomona fluorescens
Bacillus subtilis
Pseudomonas spp
Serratia spp
Gliocladium virens
Trichoderma viride
CAPITULO III
Materiales de
Recolección
INICIO
TOMA DE
MUESTRA
Materiales de
Recolección
Muestras
Medios de Cultivo,
materiales y reactivos DILUCION DE
MUESTRA
Medios de Cultivo,
materiales y reactivos AISLAMIENTO
PRIMARIO
Medios de Cultivo,
materiales y reactivos AISLAMIENTO Cepas no útiles
SECUNDARIO
Medios de Cultivo,
materiales y reactivos Cepas con baja
SELECCIÓN actividad
Cepas Seleccionadas
Medios de Cultivo,
materiales y reactivos
EVALUACIÓN DEL
ANTAGONISMO
Cepas Evaluadas Tº, tiempo
Medios de Cultivo,
materiales y reactivos IDENTIFICACIÓN
Cepas Identificadas
Medios de Cultivo,
materiales y reactivos CONSERVACIÓN
3.4 VARIABLES
3.5.1.1 UBICACIÓN
3.5.1.2 MUESTREO
Fecha de
No Código Ubicación Cantidad
Muestreo
Solución 26-03-09
7 SP1 250 ml
Propagación
Solución 26-03-09
8 SP2 250 ml
Propagación
Solución 26-03-09
9 SP3 250 ml
Propagación
Anexo 6
3.5.2.1.1 Aislamiento
8 Brook D.T, y T.M Madigan, Microbiología, 6ta edición, México, Printice Hall Hispanoamérica S.A , 1993
medio minimal sin fuente de nitrógeno (medio Lipman o Ashby Sacarosa-
Anexo 3), se incubó durante 7 días a 30ºC.
3.5.2.1.2 Selección
3.5.2.1.3 Antagonismo
3.5.2.1.4 Identificación
24 Lara Mantilla Cecilia, bacterias fijadoras asimbióticas de nitrógeno de la zona agrícola de San Carlos (Córdova – Colombia), Revista
Colombiana de Biotecnología. Volumen IX N.- 2, Diciembre 2007, pág. 6-14
5 Bobadilla Henao Catalina / Rincón Vanegas Sandra Carolina, Aislamiento y Producción de Bacterias Fosfato Solubilizadoras a Partir de
Compost obtenido de Residuos de Plaza, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2008
Identificación Microscópica: Tinción Gram, realizada a través de métodos
estándar de cada cepa seleccionada.
3.5.2.1.5 Preservación
3.5.2.2.1 Aislamiento
24 Lara Mantilla Cecilia, bacterias fijadoras asimbióticas de nitrógeno de la zona agrícola de San Carlos (Córdova – Colombia), Revista
Colombiana de Biotecnología. Volumen IX N.- 2, Diciembre 2007, pág. 6-14
1 Ángel Alarcón Dilia Irney, Evaluación de Técnicas de Conservación de Hongos Filamentosos y Lavaduriformes en el Cepario de la
Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Facultad de Ciencias, PUJ, 2006
pasaron inóculos a un medio sólido por el método de estriación en placa8 en el
medio minimal con fosfato tricálcico como fuente de fósforo (medio PVK- Anexo
4), se incubó durante 7 días a 30ºC, con la observación diaria en busca de
halos claros alrededor de la colonia.
3.5.2.2.2 Selección
3.5.2.2.3 Antagonismo
3.5.2.2.4 Identificación
5 Bobadilla Henao Catalina / Rincón Vanegas Sandra Carolina, Aislamiento y Producción de Bacterias Fosfato Solubilizadoras a Partir de
Compost obtenido de Residuos de Plaza, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2008
consistió en observar el color, forma, borde, elevación, superficie en un medio
sólido de cada colonia de las cepas seleccionadas.
3.5.2.2.5 Preservación
3.5.2.3.1 Aislamiento
5 Bobadilla Henao Catalina / Rincón Vanegas Sandra Carolina, Aislamiento y Producción de Bacterias Fosfato Solubilizadoras a Partir de
Compost obtenido de Residuos de Plaza, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2008
1 Ángel Alarcón Dilia Irney, Evaluación de Técnicas de Conservación de Hongos Filamentosos y Lavaduriformes en el Cepario de la
Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Facultad de Ciencias, PUJ, 2006
Técnica de aislamiento en medios generales : De las diluciones 10-4, 10-6,
10-8 se pasaron inóculos a un medio sólido por el método de estriación en
placa8, se emplea PDA (Anexo 2) para hongos antagonistas y Agar nutritivo
(Anexo 1) para bacterias, incubando por 7 días a temperatura ambiente y por
48 horas a 37 oC respectivamente.
3.5.2.3.2 Selección
3.5.2.3.3 Antagonismo
3.5.2.3.4 Identificación
3.5.2.3.5 Preservación
CAPITULO IV
4.1 Recursos
Materiales:
Equipos
• Cocineta
• Balanza 0,1g
• Incubadora 25°C, 30°C, 37°C
• Shaker orbital 30°C, 180 rpm
• Refrigeradora 10°C± 1°C
• Congelador -80°C± 1°C
• Mechero
• Autoclave 121°C, 30 min
• Baño de agua 45± 1°C
• Centrifuga
• Microscopio
• Espectrofotómetro, etc.
4.2 Presupuesto
4.3 Cronograma
Meses 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Actividad
Recolección de
información
Aprobación
Toma de
muestras
Siembra
Aislamiento
Selección
Identificación
Conservación
Defensa del
Plan de Tesis
5. BIBLIOGRAFÍA
6. bnLec33, pdf
13. Chirinos Jenny, Leal Ángel y Montilla Joan, Uso de Insumos Biológicos
como Alternativa para la Agricultura Sostenible en la Zona Sur del
Estado Anzoátegui, El Tigre estado Anzoátegui .Instituto Nacional de
Investigaciones Agrícolas, Revista Digital CENIAP HOY Nº 11 ,2006
14. Cruz Martínez Lina Carolina, Estandarización del Proceso de Producción
masiva del Hongo Trichoderma Koningii Th003 Mediante Fermentación
Bifásica a escala piloto, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2007.
28. M.A. Osorio Nila / L.M Vásquez García /M.L Salgado Siclán / C.E
González Esquivel, Efecto de Dos Enmiendas Orgánicas y Trichoderma
sp, para Controlar Sclerotinia sp en Lechuga, Chapingo-México,
Universidad Autónoma Chapingo, 2005, pág. 203-208.
29. Mantilla Cardenas Miguel Eduardo, Evaluación de la Acción de un
Bioinoculante sobre un Cultivo de Crisantemo en Periodo de
Enraizamiento, Bogotá, PUJ, Facultad de Ciencias, 2007.
35. www.fao.org
36. www.monografías.com
37. www.inia.cl
38. www.fondef.cl
39. www.infoagro.com/flores/flores/rosas.htmt
40. www.ute.edu.ec/posgrados/dia_de_campo.html
41. www.inta.gov.ar/barrow/info/documentos/agricultura/Maiz/informe_inocul
_solubiliz.pdf
42. www.upch.edu.pe/.../Hormonas%20vegetales%201y2+Otros.ppt
43. http://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=2351591
6. ANEXOS
Anexo 1
Anexo 2
Anexo 3
Medio Lipman o Ashby - Sacarosa
Anexo 5
Medio Pikovskaya
(NH4)2SO4 0.15 g
NaCl 0.01 g
MgSO4.7H2O 0.2 g
KCl 0.002 g
Base mineral Ext. Levadura 0.01 g
MnSO4.H2O 0.1 g
FeSO4.H2O
Agua Agua destilada 1000 ml
pH = 7
Anexo 6
Procedimiento para la toma de muestras de suelos
El análisis de suelos es una herramienta muy importante en nuestra agricultura, utilizado como una
referencia excelente para el uso correcto, tanto de fertilizantes químicos y orgánicos, como de enmiendas.
El costo actual de los fertilizantes obliga a su empleo en las dosis adecuadas y balanceadas, en función
de los nutrimentos que contienen, principalmente en aquellos que deben ser importados, ya que ello
ocasiona una fuga de divisas para el país. Todavía esta práctica no es usada ampliamente por los
productores, motivado, en parte, al desconocimiento que existe sobre la manera correcta de tomar las
muestras para el análisis, falta de información sobre la disponibilidad de laboratorios y el relativo bajo
precio que por muchos años presentaron los fertilizantes y enmiendas, debido a los subsidios que
recibían.
El análisis de suelos será tan bueno como la calidad de las muestras tomadas, pues la muestra enviada al
laboratorio, de 0,5 a 1,0 kg, representa millones de kilogramos de suelo.
Por este motivo, una torna de muestra cuidadosa asegura unos resultados de análisis correctos y de gran
utilidad.
Recorra la finca y haga un plano o croquis sencillo de las superficies más o menos homogéneas, en
cuanto al tipo de suelo, apariencia física y clase de manejo recibido anteriormente, donde ubique los
detalles más importantes de la finca como lo son partes altas o bajas, planas o inclinadas, coloración del
suelo, si es arenoso o pesado, vegetación alta, media o baja, riesgo de aguachinamiento, áreas que no se
han trabajado ni fertilizado, y áreas trabajadas y fertilizadas. En todo caso, procure tomar siempre en
forma separada, muestras de áreas que usted ha observado le producen diferentemente.
Para la toma de muestra en cada lote utilice los implementos necesarios como barreno, pala, bolsa
plástica, y balde.
Recorra los lotes al azar en forma de zig-zag y cada 15 o 30 pasos tome una submuestra, limpiando la
superficie del terreno y depositándola en el balde. Las submuestras deben ser tomadas entre 20 y 30 cm
de profundidad. Luego de tener todas las submuestras en el balde (de 15 a 20 por ha) se mezclan
homogéneamente y se toma 1 kg aproximadamente. Esta es la muestra compuesta requerida para el
análisis. El proceso se ilustra en las siete figuras que acompañan este artículo.
1.4. Identificación de la muestra
Para identificar la muestra se debe colocar: el nombre del propietario, nombre de la finca, ubicación
geográfica, número de muestra y lote, superficie que representa y algunas informaciones
complementarias como lo son: pendiente del terreno, riesgo de aguachinamiento, color del suelo, tipo de
vegetación, cultivo anterior, rendimiento obtenido, disponibilidad de residuos, tipo de fertilizante usado, si
encaló y forma y época de aplicación.
El tamaño dependerá de la variabilidad del terreno y de la intensidad y tipo de uso del lote. En áreas muy
uniformes, con el mismo uso agrícola y vegetación, el lote puede estar representado por 10 ha. En áreas
de uso muy intensivo con fuertes aplicaciones de fertilizantes, abonos orgánicos y con riego (hortalizas y
frutales) el lote no debe ser mayor de dos hectáreas.
2. 2. Número de submuestras
Dependerá del tamaño del lote de muestreo y de la intensidad de uso. Mientras mayor sea el lote, mayor
número de submuestras serán necesarias. El mínimo puede ser entre 15 20 y lo ideal entre 30 40
submuestras.
• No tome muestras en áreas recién fertilizadas, sitios próximos a viviendas, galpones, corrales, cercas,
caminos, lugares pantanosos o erosionados, áreas quemadas, lugares donde se amontonan estiércol,
fertilizantes, cal u otras sustancias que pueden contaminar la muestra.