CROMATOGRAFA PLANA

La mayora de los principios que se aplican para la cromatografa en columna se

aplican tambin a la cromatografa en superficie plana.
Cromatografa en capa fina (TLC) Para la cromatografa en capa fina (TLC), la fase
estacionaria es una capa de partculas de unos milmetros de espesor, fijadas sobre
un soporte slido generalmente de aluminio, plstico o vidrio. Despus de aplicar el
analito cerca de la parte inferior de la placa seca, el disolvente empieza a producir la
separacin.
La ventaja principal de la TLC es que se analizan simultneamente la muestra y el
patrn, mientras que en la cromatografa en columna las muestras se analizan
individualmente. Adems, las muestras que son difciles de separar, se pueden
resolver utilizando dos disolventes diferentes por desarrollo de la placa en
direcciones perpendiculares.
Otra ventaja es que, si los componentes no se pierden en los vapores que rodean la
placa, todos estarn en algn lugar de la misma, mientras que en la cromatografa
en columna algunos componentes no eluyen y se pierden. Y a esto se suma que la
placa de TLC se usa una sola vez, por lo que se pueden utilizar condiciones severas
de separacin. La mancha en una placa de TLC se caracteriza por la distancia que
recorre con relacin a la distancia recorrida por la fase mvil. El grado de retencin
en cromatografa plana de superficie se expresa como el factor de retardacin, o
ndice de retencin
El frente del disolvente es el lmite alcanzado por la fase mvil, en ste se mide la
distancia en que se ha desplazado ste. El valor de Rf depende de las mismas
condiciones experimentales que el valor de K de la cromatografa en columna: la
composicin de la fase mvil, el tipo de fase estacionaria, la temperatura y el tipo de
compuestos separados.
Tambin se puede definir el coeficiente de distribucin, K, en trminos de la
concentracin del soluto en la fase mvil, Cm, y en la fase estacionaria,
La deteccin y localizacin de las manchas en la placa de TLC se hace observando
los cambios en la fluorescencia, o absorcin en el U.V., de un indicador que se
incorpor a la fase estacionaria. Toda la placa fluoresce bajo luz UV cuando no hay
solutos presentes. Los lugares en los que reside el soluto aparecen como manchas
oscuras. Tambin podemos observar el color de los compuestos despus de
reaccionar con reactivos especficos para grupos o metales, rociados sobre la placa,
como la fluorescamina para aminas.
Existen instrumentos para determinar directamente la fluorescencia y/o color de las
manchas en la placa. Los instrumentos deben ser capaces de cuantificar la medida
sobre el rea total de la mancha.
Cromatografa de capa fina .- La llamada capa fina consiste en una placa de vidrio,
rectangular o cuadrada,denominadas cromatoplacas, o simplemente placas sobre
cuya superficie sedeposita una capa uniforme muy delgada (en ocasiones de algunas
micras deespesor) de una substancia absorvente, casi siempre silicagel o almina,
encondiciones tales que resulte uniformemente extendida y
suficientementeadherida. En general, de hace una papilla acuosa con el adsorbente,
que sedeposita sobre la placa mediante un aplicador adecuado. Las placas se secan
enestufa para activar la superficie del adsorbente y se encuentran aptas
paraefectuar la cromatografa. A las ventajas de resistencia a la temperatura y a los
reactivos agresivos de lacromatografa en capa fina, hay que aadir una mayor
nitidez y sensibilidad de loscromatogramas, as como una mayor rapidez en su
desarrollo. Adems, loscromatogramas obtenidos pueden conservarse
indefinidamente y archivarse si sepulveriza la placa revelada con una dispersin de

un plstico transparente yespecial donde quede grabado el cromatograma sobre la

pelcula endurecida delplstico, que se separa fcilmente del soporte.Las
aplicaciones son semejantes a las de la cromatografa de papel.

Cromatografa en papel
En este caso, el soporte y fase estacionaria es papel. El papel que normalmente se
utiliza es de celulosa. La celulosa es muy polar en el agua y se vuelve
electronegativa. El papel tiene propiedades de intercambio inico dbiles, as como
de adsorcin.
La mayora de las propiedades varan de papel a papel, lo que provoca variaciones
en el Rf. Actualmente existen papeles modificados con resinas cambiadores de iones,
almina, etc. El aparato que se usa consta de un soporte para el papel, un recipiente
para el disolvente y una cmara hermtica para desarrollar el cromatograma. La
cmara hermtica es necesaria para evitar la evaporacin de los disolventes voltiles
debido a la gran superficie del papel expuesta. Antes de sumergir el papel en el
disolvente de elucin se aplica la muestra en forma de punto diminuto con cualquier
objeto que pueda transferir un pequeo volumen.
El papel debe estar en equilibrio con los vapores del disolvente antes de empezar el
desarrollo. La cromatografa en papel se ha aplicado con buen xito a problemas de
qumica orgnica e inorgnica y de bioqumica.
CROMATOGRAFIA EN PAPEL
Ques la cromatografia en papel?
La cromatografia en papel es la tcnica de separacin e identificacin desustancias
qumicas mediante un disolvente que se mueve sobre hojas o tiras depapel de
filtro.Se toma una pieza de papel de filtro y cerca de uno de sus extremos se
depositauna gota de la solucin que contiene la mezcla de las sustancias que se
quierenseparas. Se deja secar la gota y quedara la mancha de las sustancias
mezcladas.El extremo del papel mas proximo a la mancha se introduce en un
disolventeapropiado, pero sin que la mancha llegue a introducirse en l.Existen
muchos tipos de cromatografia sobre papel, una primera divisin de lasvariadas
clases podra ser:
1-Cromatografia ascendente: el disolvente se encuentra en el fondo delrecipiente
que sostiene al papel y va subiendo a traves de el por capilaridad.
2-Cromatografia descendente: el disolvente esta en un recipiente esta en
unrecipiente del que cuelga el papel, fluye por l hacia abajo por una combinacionde
capilaridad y gravedad.
3.-En ambos casos el disolvente avanza a lo largo del papel pasando por encima dela
mancha, al avanzar disuelve y arrastra las sustancias de la mancha, cada unade ellas
se mueve, por lo general a distinta velocidad que las otras.Se deja actuar el
disolvente un tiempo determinado, se seca el papel y seobservan las sustancias
separadas si tienen color, o en caso de no tener color seprocede al revelado por una
reaccin quimica apropiada.Esta tcnica se conoce como cromatografa
monodimencional y el papel resultanterecibe el nombre de cromatograma
monodimencional
La resultante de las fuerzas:

Cuando el disolvente avanza sobre las manchas de las sustancias, comienzan a

actuar dos tipos de fuerzas opuestas: unas que arrastran y otras que retardan.Las
fuerzas propulsoras actan apartando las sustancias de su punto de origen y
desplasandolas en direccin del flujo de origen. Las fuerzas retardantes tratan de
impedir el movimiento de las sustancias, llevndolas fuera del disolvente que fluye y
hacia atrs en el papel. La distancia recorrida por cada sustancia a partir del origen,
en un tiempo dado, es la resultante de estas dos clases de fuerzas.
Fuerzas propulsoras: Cuando se realiza un cromatograma en papel, las fuerzas
propulsoras ms importantes son: el flujo de disolvente y la solubilidad de cada
sustancia en le disolvente.
Flujo del disolvente:
4.- si la sustancia cromatografiada fuera completa e instantneamente soluble en el
disolvente que avanza, por ejemplo agua y azcar, y no actuaran fuerzas de retardo
la sustancia ascender desde el origen hasta donde llega el diluyente. En cambio si
la sustancia fuera completamente insoluble en el disolvente en movimiento no se
movera del origen.La corriente del disolvente es la misma para todas las sustancias
de la mancha, as pues, si el disolvente fuese capaz de disolver instantnea y
completamente todas las sustancias, estas avanzaran juntas hasta el final de la
trayectoria del disolvente y terminaramos donde empezamos con todas las
sustancias juntas.
Solubilidad: Una fuerza diferencial es, en efecto, la solubilidad. Pocas son las
sustancias que ofrecen la misma solubilidad en cualquier disolvente. La particular
solubilidad de una sustancia en la corriente del disolvente es una fuerza propulsora
que tiende a desplazarla, manteniendola en movimiento a lo largo del papel.
Fuerzas retardantes:
Hay tambin dos fuerzas retardantes principales: la adsorcin y el reparto.
Adsorcin:.-La celulosa de la que esta hecho el papel de filtro, posee
propiedadesadsorbentes. Las sustancias depositadas en el papel, en cromatografa,
puedenser ms o menos adsorbidas en el papel.La adsorcin es otra de las fuerzas
diferenciales, esto significa que unassustancias son adsorbidas ms que otras y, por
consiguiente, la liberacin de lassustancias de las manchas variar de una sustancia
a otra. Esto contribuye denuevo a la separacin. Mientras que se va realizando el
cromatograma, lassustancias mas fuertemente adsorvidas se van quedando atrs,
mientras que lasadsorvidas con menos fuerza avanzan hacia el frente.
Reparto:
La cormatografia se basa, en una medida considerable, en la presencia de dosfases
liquidas individualizadas. Una de ellas es la corriente del disolventecirculando por el
papel de filtro. La otra es la fase acuosa contenida en el mismopapel de filtro. Una
hoja de papel de filtro aparentemente seca contiene entre un 6y 12% de agua
firmemente adherida a la celulosa. Aqu es donde entra en funcinel reparto.Cuando
una sustancia que es soluble en dos disolventes no mezclados esexpuesta al mismo
tiempo a ambos, se repartir entre ellos. La cantidad que seencuentre en cada
disolvente depender de la relativa solubilidad del soluto encada uno. El grado de
reparto, una vez conseguido el equilibrio, se llama coeficiente de reparto o razon de
distribucin.
Constante Rf: El ltimo punto alcanzado por el disolvente en su avance se denomina
frente
Del disolvente. Puede usarse como punto de referencia para expresar las
distanciasrelativas recorridas por las diferentes sustancias en un cromatograma. El
smboloutilizado para designar esta distancia relativa es Rf y se define mediante:

5.- distancia recorrida por el compuesto desde el origenRf =Distancia del origen al
frente del disolventeComo el denominador es siempre mayor que el numerador en Rf
debera ser undecimal. Por razones de conveniencia se suele expresar como un
porcentaje. Asi un Rf de 50 indicara que el compuesto avanzo la mitad de la
distancia delfrente del disolvente.