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NDICE
y esponjas
Objetivos
El alumno aprender la utilizacin de las diferentes tcnicas reproductivas aplicadas a la
hembra, de tal manera que desarrollar habilidades y destrezas que le permitan
emplearlas adecuadamente en su mbito profesional.
Introduccin
Las ovejas y las cabras son polistricas estacinales (Figura 1), ello indica que su
temporada reproductiva se limita a cierta poca del ao. Esta reproduccin estacional la
regula la cantidad de horas luz (fotoperiodo).
La actividad sexual se inicia cuando la cantidad de horas luz disminuye (otoo e
invierno). Durante su estacin reproductiva, los ciclos estrales se presentan a intervalos de
17 3 das en la oveja y cada 21 3 das en la cabra; stos slo se interrumpen durante
la gestacin o por la presentacin del anestro.
Es de destacar una serie de eventos que ocurren durante el ciclo estral y que son
de importancia, ya que de su conocimiento permite realizar con xito su manejo
reproductivo.
El estro constituye el periodo en que las hembras manifiestan comportamiento de
atraccin a los machos, estas manifestaciones son bastantes marcadas, incluyen signos
externos como el enrojecimiento de la vulva; en ocasiones existe una descarga de moco
proveniente de la vagina, agitacin constante del rabo e incluso intentos de monta de otras
hembras (muy raro). Sin embargo, el signo 100% seguro es la inmovilidad a la monta. Lo
normal es que en la primera ovulacin de cada estacin reproductiva las cabras y las
ovejas no presenten signos de celo.
El estro en las cabras dura entre 24 a 48 horas, y 24 a 36 horas en la oveja,
coincidiendo la ovulacin con el final del estro. La duracin de este ltimo vara en funcin
de la edad, la raza, frecuencia del contacto con los machos, de forma que resulta ms
corto en animales jvenes.
Despus de la ovulacin se forma un cuerpo hemorrgico que luego se transforma
en cuerpo lteo, cuya funcin principal es producir progesterona, hormona responsable del
establecimiento y mantenimiento de la gestacin, cuando la gestacin no ocurre el cuerpo
lteo es lisado por efecto de la prostaglandina F2 (PGF2), hormona producida por el
tero, reiniciando otro ciclo estral; el conocimiento de estos eventos reproductivos permite
un manejo prctico de los pequeos rumiantes.
inicia
de
de
pododermatitis,
laminitis,
etctera).
QU DEBO REVISAR?
Vagina. Tiene forma tubular de estructura muscular (entre 10 a 14 cm en promedio), lo
que le permite distenderse a lo largo y ancho; se ubica en la cavidad pelviana en
relacin dorsal con el recto y centralmente con la vejiga; presenta fondos de saco
ciegos en la parte anterior ubicados a los costados de la proyeccin del crvix. La
mucosa est revestida por epitelio escamoso estratificado y slo existen glndulas en
la parte anterior, todas estas estructuras presentan coloracin roscea clara, en las
diversas etapas del ciclo estral cambia su coloracin, en estro est
ligeramente
diestro
la ms comn es
la
de
y longitud de 6.7
1.Vaginoscopio
para
hembras
Sin embargo, estos signos son difciles de apreciar, por ello se requiere la presencia del
semental, un macho celador (sin castrar) o una hembra androgenizada.
Inmediatamente la hembra en celo abre sus miembros posteriores y orina, el semental toma con
Existen tcnicas en que se utiliza al macho como celador, las ms comunes en pequeos
rumiantes son las siguientes.
tiras.
Esto
denomina
"delantal,
ltimo
se
"chaleco"
Los
mandiles
deben
estar
bien
La
hembra
que
est
en
celo
se
aparta
Una vez colocado el arns, se deja que el macho interacte libremente en un corral
con hembras y la que est en celo acepte la monta; luego el tcnico observar cules
tienen marcada la regin de la cruz con tinta del arns, ese indicio ser la indicacin
positiva.
A.
Vaginoscopio
B.
Aplicador de esponjas.
B
A
Colocacin de
esponjas, Colocacin
correcta
Introducir la esponja en el vaginoscopio con los hilos hacia atrs, como se muestra en la
fotografa y dibujo siguientes; de esta manera cuando sea retirada la esponja y se jale del
hilo, sta girar sobre su propio eje despegndose de la pared de la vagina y saliendo sin
dificultad.
Colocacin correcta
Colocacin incorrecta
Cuando se introduce la esponja en el vaginoscopio con los hilos hacia el frente, al
momento de su retiro, al jalar del hilo ste puede romperse y ocasionar lacerar la mucosa
vaginal, en la siguiente imagen y dibujo se muestra la forma incorrecta de colocar la
esponja dentro del vaginoscopio.
Colocacin incorrecta
Medidas precautorias
Es poco comn la ruptura del hilo, pero se debe tener a la mano pinzas largas para sacar
la esponja con hilo roto, para el caso de que esto ltimo sucediera.
A medida que se retiran las esponjas, habr que atarlas, juntarlas y contarlas, luego
se colocarn en un recipiente inaccesible a perros.
Para el caso de desinfecciones, entre cada hembra debe sumergirse el
vaginoscopio, aplicador de punta roma y mbolo en una solucin desinfectante no irritante,
como amonio cuaternario.
Las esponjas pueden permanecer entre 10 y 15 das en la hembra.
2. CIDR
3. Aplicador de CIDR.
A continuacin se procede a
en el
aplicador.
atencin a la IA en los pequeos rumiantes ya que hay que considerar, varios factores
que afectan la fertilidad en estas especies. Por ejemplo, la disposicin anatmica del
crvix y de los procesos de dilucin-conservacin tanto del semen refrigerado como del
congelado.
Existen diferentes tcnicas para realizar la IA en pequeos rumiantes, stas
consisten en depositar el semen en diferentes partes del tracto reproductivo, a
continuacin se procede a describir las ms comunes.
La
punta
de
la
pipeta
se
A
B
Descripcin de la tcnica de IA
Se coloca a la hembra en un potro con los miembros posteriores apoyados en una barra,
cuando se sujeta la hembra un ayudante le levanta la cola verticalmente (figura 1), la otra
forma consiste en colocar a la hembra en una prensa de manejo (Figura 2), posteriormente
se limpia la vulva con algodn con una solucin antisptica .
Figura 1
Figura2
lubricante
ya
que
son
luego
se
nivela
horizontalmente y se introduce
hasta 10
Posteriormente,
con
buena
viscosa
transparente
inseminacin,
mediante el espculo se deposita el semen en el tercero o cuarto anillos del crvix. Antes
de depositar el semen, se retirar un poco el vaginoscopio hacia atrs con el fin de facilitar
el cierre de la vagina anterior y evitar que el semen se derrame. Despus se sacar
primero la pipeta y luego el vaginoscopio, cuidando de evitar el reflujo (que se devuelva el
semen). Luego se anota el registro de inseminacin con la fecha y hora, para verificar el
no retorno a celo
plstico
para
la
inseminacin
de
bovinos.
Se estira sutilmente la pipeta hacia los extremos con la finalidad de reducir el lumen; luego
con la navaja de afeitar se corta el excedente de material que se form al estirar la
pipeta, se procura que en los cortes no se formen aristas ni bordes filosos.
B
Se acerca con mucho cuidado la
punta de la pipeta a la flama del
mechero (A); se aleja rpidamente,
y como se muestra en la foto B se
apoya con los dedos para formar
un ligero ngulo de 30 con el fin
de que la pipeta quede como en la
foto C.
IA intrauterina
La
desplazar
las vsceras abdominales contra la cara peritoneal y realizar fcilmente la inspeccin del
aparato genital. Luego se introduce el segundo trcar (5 mm) en el lado izquierdo.
se
cervical y
transcervical.
Realizar las pipetas de IA cervical y transcervical
Planificar la produccin.
Separar las gestaciones simples de las dobles para proporcionar adecuada alimentacin.
la
actualidad: tcnica del bastn, toma de radiografas, biopsia vaginal, laparotoma medio
ventral. Sin embargo, existen tcnicas inmunolgicas que detectan hormonas (progesterona)
o sustancias asociadas a la gestacin que pueden ser medidas muy precozmente (21 das en
cabras, 18 en ovejas, ambas despus del servicio), pero para su realizacin requieren de un
laboratorio especializado, adems de ser caras.
Existen dos tcnicas clnicas econmicas que se usan en la actualidad: El no retorno
al estro y la tcnica de palpacin abdominal -peloteo fetal.
Mtodos ultrasonogrficos
Entre los mtodos ms eficaces para realizar un diagnstico de gestacin precoz estn los
ultrasonogrficos; stos emplean ondas de sonido de alta frecuencia para producir imgenes
de los tejidos blandos y rganos internos, que se ven en una pantalla.
Ultrasonido doppler
Se realiza a partir de los 70 das de gestacin, su funcionamiento se basa en que los
cristales que se encuentran en el transductor emiten una seal que es reflejada por los
eritrocitos; la frecuencia de la seal se modifica por la velocidad de stos y esta variacin de
frecuencia es captada de nuevo y convertida en imagen grfica, a veces audible (depende
del equipo); se utiliza para detectar el latido fetal, el flujo del cordn umbilical y los pulsos de
los miembros del cuerpo. Se considera a una hembra como positiva a gestacin cuando se
aprecian latidos definidos, sumamente rpidos, que se refleja en una pulsacin de frecuencia
superior (140 a 180 por minuto) y distinguible de la del pulso materno, se considera un animal
vaco cuando despus de tres a cinco minutos de examen hay ausencia de sonido.
Ventajas. Se trata de un buen mtodo para determinar la viabilidad del producto, se
requiere de personal capacitado para su uso.
transductores sectoriales
MHZ).
(3.5 y 5.0
imgenes
blancas),
se
pueden
hiperecognicas
hipoecognicas
estructuras
slidas
se
Los transductores de baja frecuencia (3.0 y 3.5 MHZ) tienen mayor penetracin pero
menor definicin en la imagen, aunque se pueden visualizar tejidos ms profundos se
necesita una pequea superficie de contacto, por lo que su uso es externo. Los transductores
de altas frecuencias (5.0 y 7.5 MHZ) tienen menor penetracin, pero ms definicin de
imagen ya que sta se halla ms cercana a la superficie de exploracin, es comn que en
medicina veterinaria se use el transductor de 7.5 MHZ va transrectal para el diagnstico de
gestacin; en general, el ultrasonido modo B produce una imagen bidimensional de tero,
embrin, fluidos fetales, feto, latido cardiaco y estructuras como placentomas, en el caso de
rumiantes.
Existen dos mtodos para realizar el diagnstico en hembras gestantes en ovejas y
cabras, uno de ellos es mediante ultrasonografa transabdominal y transrectal.
Se sujeta
a la hembra
en posicin
de cuadripedestacin
o en
decubitodorsal, esto depender de la habilidad del tcnico; a) se limpia un flanco (ingle) para
retirar la mayor cantidad de grasa y material orgnico, despus se coloca al transductor un
gel para establecer buen contacto con la piel y eliminar espacios de aire, entre stos; b)
posteriormente, el transductor se ubica en la zona mencionada; c) se dirige en ngulo de 45
en direccin a la vejiga; d) observando el monitor para encontrar la estructura deseada (como
se muestra en la siguiente secuencia).
ms
posicin el transductor se
localiza la vejiga, que se
aprecia
ovalada
una zona
como
imagen
hipoecognica
de
interfase
fecha de
Lasflechasindicanlas
costillas y columna vertebral de un feto deovino de 90
El siguiente cuadro detalla, mediante imgenes de ultrasonido, restos de placentatero y un esquema; la anatoma de un placentoma.
1
5
5
3
3
5
5
3
3
4
4
2
2
CARUNCULA
5
5
3
3
Vista transversal
5
5
Vista longitudinal
Ultrasonografa transrectal
Se realiza a partir del da 25, se observa la vescula embrionaria, y despus del da 30 se
aprecia el desarrollo de los placentomas y al feto; sin embrago, a medida que el feto
aumenta de tamao se dificulta su observacin. Mediante el uso de esta tcnica
la
eficiencia de este mtodo vara desde 50% hasta 100% debido a diversos factores: tipo de
transductor empleado, edad, condicin corporal, inexperiencia del tcnico, etctera.
Tcnica. En este procedimiento se coloca a la hembra en una prensa de manejo, o
se sujeta en posicin de cuadripedestacin; al transductor se le coloca una varilla en
posicin dorsal y se fija con tela adhesiva, luego se envuelve en un guante que contiene
una jalea lubricante para que exista buen contacto.
Despus se localiza la
vejiga
V: Vejiga
Las flechas indican la curvatura del tero
de
ah
se
introduce lentamente el
transductor
localizar
hasta
los
cuernos
uterinos.
vescula
embrionaria
gestacin de 25 das.
en
Literatura recomendada
1. Blockey MA, Wilkings JF. Field application of the ram serving capacity. In: Lindsay D,
Pearce DT, editors: Reproduction in sheep. Camberra Australia: Australian Academy of
Science,1984. .
2. Ibarra, D., Laborde, D., Olivera, J. Comparacin de tres pruebas para medir la capacidad
de servicio en carneros adultos. Arch. med. vet., 1999, vol.31, no.2, p.189-196.
Objetivo
El alumno aprender a evaluar la capacidad reproductiva del carnero y del macho cabro, as
como la utilizacin de las diferentes tcnicas reproductivas; de manera que desarrollar
habilidades y destrezas que utilizar en su mbito profesional.
Introduccin
El objetivo de los programas reproductivos consiste en tener una produccin con eficiencia
reproductiva rentable. Para cumplir dicho objetivo se debe realizar un examen de la salud
reproductiva de los sementales incluidos: Examen fsico general, examen del aparato
reproductor, examen de lbido y capacidad de monta, as como examen de calidad de semen.
Este examen debe realizarse como mnimo cada seis meses; el mejor momento es alrededor
de 60 das antes de la poca
de empadre,
detectar los sementales que presenten alguna alteracin funcional o que se encuentren
enfermos y descartar a los machos que presenten problemas irreversibles. Lo anterior tiene
como propsito adquirir un nuevo semental o
como
para ser
reemplazos
de
las
patas
en
las
manos y
que
Posicin sentada.
Palpacin de testculos
Palpacin cuerpo del epiddimo
Palpacin de la cola del epiddimo
sin
laceraciones,
descarta
diversas
heridas,
fstulas o cicatrices amerita un minucioso estudio, pues stas son indicadores de otros
procesos patolgicos o complican la funcin de termorregulacin que cumple el escroto (los
testculos deben estar 1 a 2 grados por debajo de la temperatura corporal). Una medida
conveniente en carneros de razas productoras de lana consiste en trasquilar la
bolsa
escrotal, dejando slo 1 cm de lana, ello permite mejor higiene, mayor facilidad para la
palpacin, as como mejor regulacin de la temperatura testicular.
Testculos:
se
evala
su
los
conformados,
dos
de
testculos
buen
bien
tamao,
El tamao testicular es importante, pues tiene alta correlacin con la fertilidad y es importante
caracterstica heredable, que se refleja en incremento de la precocidad sexual de la progenie.
La correlacin entre la circunferencia testicular y circunferencia escrotal tambin es elevada,
por ello la medicin de esta ltima representa un parmetro de fertilidad objetivo, que puede
ser utilizado en la seleccin de sementales.
Medicin de la circunferencia testicular con una cinta mtrica de plstico y una metlica s
Prepucio y pene: Se
realiza
no
debe
tener
laceraciones,
parte
de
la
mucosa
En esta imagen la flecha seala el proceso uretral, que est separado del pene con los
dedos.
En animales prepberes; cuando se quiere saber de manera prctica si ya han alcanzado la
pubertad, una manera sencilla es desenvainar el pene, si el animal es prepber el proceso
uretral an est adherido al glande y ste se libera cuando por efecto de andrgenos se
produce una enzima proteoltica.
uretral
adherido
completamente
al
correspondiendo
glande,
a
un
animal
prepber.
En la imagen se aprecia al
proceso
uretral iniciando
desprendimiento,
la
su
flecha
Coleccin de semen
La coleccin del semen en pequeos rumiantes tiene ciertas caractersticas de manejo que
deben de revisarse para realizarla de forma eficiente; en este apartado se mencionarn las
diferencias ms notables en cuanto a evaluacin. Los mtodos para la coleccin de semen en
pequeos rumiantes son: a) Electroeyaculacin: aplicable a toros, carneros y machos cabros;
b) uso de la vagina artificial: es el ms prctico y de mejores resultados.
Luego de la evaluacin reproductiva del semental, se evala el semen; en este
contexto, el mejor mtodo para colectar al semental es por medio de una vagina artificial, que
simula las caractersticas de la vagina; se integra as: a) Un tubo rgido con vlvula de dos
vas; b) ltex interno tubular (funda); c) una perilla; e) se puede usar un tubo de centrfuga
graduado, una copita colectora o un cono de plstico; e) ligas.
B
A
dicho
procedimiento
permitir
la
En un extremo de la vagina artificial y con la funda colocada se conectar y se fijar con ligas
de goma un cono de ltex o plstico y en el extremo distal de ste se conecta el tubo de
centrfuga graduado o la copita colectora, si no se cuenta con esto se une a dicho extremo
un cono de plstico que funge como receptor del eyaculado.
Cono de plstico
1. Midiendo la temperatura
con termmetro.
Operario sujetando a una oveja; en la siguiente imagen se observa a una cabra sujeta
3. Cuando el macho monta a la hembra, el tcnico toma con una mano enguantada el
prepucio y as desva el pene a la vagina artificial.
4. Cuando el pene est dentro de la vagina artificial el macho realizar movimientos hacia
arriba y adelante y realizar el golpe de rin (introduccin del pene y arqueamiento de
la cabeza hacia atrs, indicando la eyaculacin). El macho descender de la hembra.
5. Se coloca la vagina artificial en posicin vertical con el tubo recolector en la parte inferior,
tapndolo de la luz; esto permitir que el eyaculado descienda al tubo (en esta imagen
no se protegi de la luz por cuestiones demostrativas).
6. Ya en el laboratorio se procede a
evaluar el semen midiendo el
volumen directamente del tubo
recolector
la
armar
Cuadro 1.
CARACTERSTICAS DEL EYACULADO DE LOS PEQUEOS RUMIANTES
Volumen
Carnero
Macho cabro
1.2 mL.
9
Movilidad (%)
70-95
70-95
pH
5.9-7.3
5.9-7.3
(concentracin)
Spz = espermatozoides
Carnero
El semen del carnero es de color lechoso o crema plido. Para el caso de que exista otra
coloracin, por ejemplo, el color rosado indica sangre, probablemente como consecuencia de
una lesin del pene durante la recoleccin, mientras que el semen con color gris o pardo
sugiere contaminacin o infeccin del tracto reproductivo. Los factores que pueden alterar la
calidad del eyaculado son edad, estado nutricional, poca del ao, habilidad del recolector y
frecuencia de obtencin de muestras.
Macho cabro
El semen del macho cabro es de color blanco-grisceo a amarillo; el color es ms variable
que el del semen del carnero. De hecho, el matiz vara entre animales, incluso distintos
eyaculados del mismo animal.
Los parmetros que se evalan de un eyaculado son:
morfologa espermtica
Evaluacin del pH
Se coloca una gota del eyaculado sobre la tira de pH, se espera unos momentos y se coloca
la tira al lado de los diferentes colores que estn en la caja para comparar el cambio de stos
en la tira y as determinar el pH.
una
serie
de
sombras
que
Clasificacin
Movimiento en ola
Muy
rpido
(MB)
Bueno
Escala
numrica
5
Movimiento en ola
lento
Oscilacin
generalizada
Oscilacin
espordica
Bueno (B)
Regular (R)
Pobre (P)
Morfologa
Para evaluar la morfologa de los espermatozoides, se tie una muestra del semen para
observar las anormalidades espermticas; se puede utilizar cualquier tipo de tincin pero la
que se recomienda es eosina-nigrosina, ya que adems de teir a los espermatozoides,
se distinguen a los que ya venan muertos en el eyaculado, stos se observarn de color
rosceo y los que no estaban muertos se observan translucidos.
color
La tcnica es muy sencilla para realizar el frotis slo se necesita poner una gota del
eyaculado sobre un portaobjetos, seguida de una gota de eosina-nigrosina; se
homogeniza sutilmente, se coloca un portaobjetos que contiene pequea cantidad del
homogenizado sobre otro portaobjetos y se desliza firmemente en una sola direccin, se
seca a medio ambiente. En la siguiente secuencia se muestra el procedimiento.
Frotis terminado
Morfologa espermtica
Morfologa mnima recomendada: 70% de clulas normales
Anormalidades espermticas
secundarias
Subdesarrollados
botn)
Microcfalos
Macrocfalos
Cabezas angostas
Defecto crter/diadema
Clulas epiteliales
Eritrocitos
Clulas redondas
Glbulos blancos
Flagelo accesorios
Espermatozoide
con
Otras clulas
dos
cabezas..
Cabeza doble
Los machos tienen ms del 70% de espermatozoides con morfologa normal. Las
anomalas primarias deben constituir menos del 10% y las secundarias menos del 20% de
espermatozoides defectuosos, incluidos 5% de espermatozoides muertos.
Concentracin espermtica
Este procedimiento se realiza con la cmara de Neubauer y se utiliza la pipeta cuenta9
Se cuentan los cuatro cuadros de las esquinas y el central, que estn subdivididos en
16 cuadros (sealados en la figura), ah se cuentan los espermatozoides.
Finalmente
actualidad
evaluar
el
semen
brinda
de
congelacin-descongelacin;
asimismo,
parte
de
la
poblacin
de
espermatozoides que sobreviven habrn sufrido daos que los convierten en incapaces de
fecundar. Adicionalmente en la mayora de los mamferos se halla un antioxidante que
protege a los espermatozoides de la oxidacin al tener contacto con el medio ambiente.
De ah la importancia de contar con un excelente eyaculado que contenga el
nmero suficiente de espermatozoides vivos y competentes despus del procedimiento de
refrigeracin o descongelacin, capaz de obtener alta probabilidad de fertilizacin. Por
tanto, al semen se le debe incorporar de forma casi inmediata un diluyente ideal para
disminuir ese deterioro. Dicho diluyente contendr diferentes sustancias que favorezcan la
preservacin de las clulas y reduzcan o detengan el metabolismo del espermatozoide y
prolonguen su vida frtil. Se considera que un nmero promedio adecuado de
espermatozoides en el carnero y en el macho cabro al descongelado capaz de fertilizar
es de 300 x 10
Equitainer
Caja de transporte de
semen refrigerado con un
refrigerante
de realizar
medio para
refrigeracin.
cido
(TES),
N-2-Hidroxietilpiperazina-N-2
etanosulfnico
(HEPES) y 3-(N. morfolino) cido propano sulfnico (MOPS). stos han demostrado mejor
capacidad amortiguadora, adems de poca toxicidad para el semen. Estos amortiguadores
actan penetrando a la clula y evitando cambios intracelulares del pH adems de
incrementar la tolerancia de las clulas a un aumento intracelular de cationes
monovalentes. Para el caso de los pequeos rumiantes, los ms utilizados son el TRIS y
MOPS.
Los espermatozoides, como otras clulas, son capaces de metabolizar los hidratos
de carbono, mediante un mecanismo oxidativo o aerbico (del cual quedan como
metabolitos CO2 y H202), o por un mecanismo anaerbico (degradacin incompleta),
producindose cido lctico.
Los monosacridos, como la glucosa y la fructuosa, son fcilmente metabolizados,
lo cual se transforma en motilidad; aunque muchos autores mencionan que la fructuosa
induce un patrn de motilidad ms rpido y lineal en comparacin con la glucosa. Sin
embargo, los espermatozoides que fueron incubados con medios a base de glucosa
presentan movilidad hiperactivada.
Aunado a estas propiedades energticas, algunos disacridos, como la lactosa y
la trialosa, tienen efecto crioprotector ya que interactan con la membrana de las clulas,
a nivel de las ligaduras de hidrgeno de los grupos hidroxilo.
Yema de huevo: La inclusin de este ingrediente al diluyente confiere proteccin
contra el choque por fro, estabilizando las membranas espermticas. En 1979, Watson
demostr que una lipoprotena de baja densidad es el factor activo, sea la que se una
directamente a la membrana plasmtica del espermatozoide durante el proceso de
refrigeracin y luego al de congelacin. Tambin se ha informado que la yema de huevo
reduce la frecuencia de cambios en el acrosoma, reduciendo la prdida de enzimas y de
las piezas medias. Sin embargo, para el caso del macho cabro este ingrediente resulta
contraproducente, ya que existe una enzima producida por las glndulas bulbouretrales
(fosfolipasa A) que al contacto con las lecitinas de la yema de huevo, las hidroliza
coagulndolas y provocando un efecto txico directo sobre el espermatozoide; no obstante,
este efecto negativo puede ser reducido mediante la separacin del plasma seminal por
centrifugacin o en su defecto disminuyendo la concentracin de la yema de huevo.
Crioprotectores: Estas sustancias son incorporadas cuando el semen va a ser
congelado; dentro de este grupo se encuentra el glicerol, dimetilsulfoxido (DMSO),
etilenglicol, propanodiol, butanadiol y metanol. El ms usado es el glicerol cuya funcin
principal es regular el flujo de agua, controlando as la deshidratacin, minimizando el
efecto de la solucin que es uno de los puntos difciles del proceso de congelacin.
Tambin hay evidencias que el glicerol se liga a los grupos hidrofilitos de cabeza de
los fosfolpidos, regulando la fluidez de las membranas y de las protenas y causando un
agrupamiento de las partculas intermembranosas. Adems, el glicerol tiene la
particularidad de que permite la formacin de cristales de hielo en forma de capas, en vez
de agujas que cortan al espermatozoide lisndolos y provocando su muerte. Una
concentracin idnea para semen congelado en ovinos sera de 4% a 10%, la cual
representa un perfecto equilibrio entre los efectos crioprotector y txico.
El mejor efecto del glicerol como crioprotector se ejerce cuando el semen diluido es
sometido al proceso de cristalizacin (-10 a -15C). Aunque muchos
investigadores
10C.
Se obtienen
los mejores
4.361 g
Glucosa
0.6 g
cido ctrico
2.388 g
Estreptomicina
0.005 g
Penicilina
0.006 g
Glicerol
4.0 mL
Agua bi o tridestilada
100 mL
Yema de huevo
20 mL
Cuando se han disuelto todos los ingredientes (en forma de sales), incluidos los
antibiticos, se adiciona yema de huevo al medio, la manera de adicionarla es la siguiente:
con
agua
bidestilada,
con
la
que
en
los
contornos
del
La yema de huevo se
adiciona
medio
lentamente
con
los
al
otros
ingredientes,
se
homogeniza
con
delicadeza y se tapa el
73
con
la
Llenado de pajillas.
Descongelamiento de pajillas
con
alcohol polivinlico.
variaciones
en
la
temperatura
del
semen
obtiene congelacin inicial de entre -72 y -79 C, ambos mtodos son rpidos y permiten
buena recuperacin de espermatozoides mviles al descongelado.
A pesar de que se ha probado gran cantidad de diluyentes para la congelacin del
semen en pequeos rumiantes, no existe un consenso acerca de cul proporciona mejores
resultados al descongelar, siendo los diluyentes a base de tris-yema de huevo o de
lactosa-yema de huevo los ms utilizados.
Algunos autores han encontrado que cuando se usa el diluyente a base de trisglucosa-yema de huevo, se obtienen buenos resultados al descongelar y buena fertilidad a
la inseminacin. Sin embargo, el diluyente lactosa-yema de huevo, ampliamente usado
para congelar el semen bovino, equino, suino y ovino, al contener un disacrido (lactosa)
es bastante efectivo para proteger a los espermatozoides, pues reduce la temperatura de
cristalizacin durante al congelamiento.
Se ha comprobado que mientras mayor concentracin espermtica por volumen
contengan los pelltes o las pajillas, la motilidad posdescongelamiento disminuir, pues
quiz los ingredientes del diluyente no son suficientes para proporcionar adecuado aporte
nutricional y de proteccin al espermatozoide durante la congelacin, por lo que esto ltimo
habr de considerarse al calcular el nmero de dosis a obtener de cada eyaculado.
la
diluyente
temperatura
utilizar,
que
con
la
habr
del
sido
en
el
refrigerador
5C,
donde
Despus de las dos horas del periodo de equilibrio, se elaborarn los pellets
haciendo pequeas perforaciones sobre una placa de hielo seco.
Perforacin
hielo seco.
del
bloque
de
Aproximadamente despus de 5
minutos, los pellets se congelarn y
se les formar una escarcha en la
superficie, ello indica que el proceso
de congelacin se llev a cabo, se
tomarn
con
pinzas
para
ser
depositados directamente en un
gobelet, previamente identificados,
para ser finalmente introducidos en
el termo con nitrgeno lquido a -
196 C.
1. Velln dorado
Citrato de sodio
2.8 g
cido ctrico
0.8 g
Estreptomicina
0.005 g
Penicilina
0.006
Agua bi o tridestilada,
o desionizada
100.0 mL
1. Tris-glucosa-yema de huevo
Tris
Glucosa
4.361 g
0.6 g
cido ctrico
2.388 g
Estreptomicina
0.005 g
Penicilina
0.006 g
Glicerol
6.0 mL
Agua bi o tridestilada,
o desionizada
76.0 mL
2. Lactosa-yema de huevo
Lactosa
5.5
Agua bi o tridestilada,
o desionizada
aforar a 50.0 mL
0.005 g
Penicilina
0.006 g
Glicerol
0.6 mL
Yema de huevo
2.0
mL
Literatura recomendada
1. Eiman M, Aboagla E, Terada T. Effects of egg yolk during the freezing step of
cryopreservation on the viability of goat spermatozoa. Theriogenology 2004; 62: 1160
1172.
2. Holt WV. Basic aspects of frozen storage of semen. Anim Reprod Sci 2000; 62: 322.
3. Salamon WM, Maxwell C. Storage of ram semen. Anim Reprod Sci 2000; 62: 77-111.
4. Salvador I, Yaniz Viudes-de-Castro MP, Gmez EA, Silvestre MA. Effect of solid storage on
caprine semen conservation at 5 8C. Theriogenology 2006; 66: 974981.
5. Spitzer J. Evaluacin de la salud reproductiva del toro: estado actual. Department of Animal
and Veterinary Sciences, Clemson University, Clemson, South Carolina, USA. In: Topics in
Bull Fertility, P. J. Chenoweth
Publisher: International Veterinary Information Service (www.ivis.org), Ithaca, New York,
USA. 2000
ANEXOS
DATOS GENERALES
Nombre del
Propietario:
Nombre del
semental:
Nmero
de identificacin:
HISTORIA CLNICA
Fecha:
No. de caso:
Telefono:
Edad:
Raza:
EVALUACIN DE LIBIDO
Normal
Izquierdo
Anormal
Normal
Capacidad
de
eyaculado:
Anormal
Excelente:
Buena:
Regular:
Normal
Anormal
Mala:
PENE
PREPUCIO
EVALUACIN DE SEMEN
Valores de Referencia
0.5- 2.0 ml
Volumen
Color
Olor
pH
% Movilidad
% Muertos
% espermatozoides normales
% Anormalidades 1rias.
% Anormalidades 2rias
Concentracin
6a7
> 75%
< 5%
< 20%
> 3000millones
OBSERVACIONES:
DIAGNSTICO:
Fecha:
Telfono:
Raza:
Pajilla:
Diluyente:
Pellet:
Temperatura de Descong:
VIABILIDAD POSTDESCONGELADO
% Mobilidad Progresiva:
0 hrs:
Vigor (0 a 5):
0 hrs:
% Acrosomas Intactos:
0 hrs:
Anormalidades
Secundarias
% espermatozoides aglutinados:
MORFOLOGA
Normales:
Anormalidades
Primarias
CONCENTRACIN
Total de espermatozoides por dosis:
Satisfactorio:
Cuestionable:
OBSERVACIONES:
Fecha:
Firma
:
84
Procedimiento
Aplicacin de
conocimientos
6
Utilizacin del equipo
4
Normas de antisepsia
3
Normas de seguridad
2
Evaluacin final y
Localizacin del cervix
1
A
B
C
D
Pasos de proceso
1.- Sujecin fsica de los animales
reproduccin
categora
puntuacin
A
B
D
6
4
2
A
B
C
D
6
4
3
2
A
B
C
D
6
4
3
2
A
B
C
D
E
6
4
3
2
1
58
85
PASOS
CATEGORIAS
PTOS DE LA
PBA
6
4
2
A
B
D
2.-Inspeccin
de
genitales
externos
(vulva)
A
B
C
D
6
4
3
2
3.seleccin
de
equipo adecuado
(vaginoscopios para
hembras adultas y
jvenes), lubricantes,
aplicadores,
antispticos
A
B
C
D
6
4
3
2
4.Introduccin
adecuada
del
vaginoscopio
e
inspeccin de la
vagina y localizacin
del cervix.
A
B
C
D
E
6
4
3
2
1
TOTALES
PTOS
OBTENIDOS
OBSERVACIONES
58
86
SECUENCIA DE
LAS ACCIONES
Nmero de destreza
y habilidad
Destrezas en las que el estudiante necesita mayor
adiestramiento
Si
No
Observaciones
Aplicacin de
conocimientos
A
3
Utilizacin del equipo
B
5
Normas de antisepsia
C
2
Normas de seguridad
D
4
Evaluacin final y
Deteccin de hembras en celo
6
E
Pasos de proceso
1.- Sujecin fsica de los animales
PASOS
1.- Sujecin fsica de
los animales
CATEGORIAS
A
B
D
reproduccin
PTOS DE LA
PBA
3
5
4
PTOS
OBTENIDOS
categora
puntuacin
A
B
D
3
5
4
A
B
C
D
3
5
2
4
A
B
C
D
E
3
5
2
4
6
OBSERVACIONES
2.-Colocacin
mandil al macho
del
3.Deteccin
hembras en celo
(inmovilidad
a
monta)
de
la
A
B
C
D
3
5
2
4
A
B
C
D
E
3
5
2
4
6
TOTALES
46
PARA OBTENER LA CALIFICACIN SE REALIZA LA FORMULA: PTOS
OBTENIDOS X 100
PTOS DE LA PB
SECUENCIA DE
LAS ACCIONES
Si
No
6.Mencione
hembras
los
mtodos
para
deteccin
de
celo
en
las
9.-coloque
en
los
espacios en blanco de la
imagen los nombres de
las siguientes partes que
conforman
la
vagina
artificial.
ALUMNO:
Procedimiento
PERODO:
FECHA:
Aplicacin de
conocimientos
6
Utilizacin del equipo
4
Normas de antisepsia
3
reproduccin
A
B
C
Normas de seguridad
D
2
Evaluacin final y
Localizacin del cervix e IA
9
E
Pasos de proceso
1.- Sujecin fsica de los animales
categora
puntuacin
A
B
D
6
4
2
A
B
C
D
6
4
3
2
A
B
C
D
6
4
3
2
A
B
C
D
E
6
4
3
2
1
66
93
CATEGORIAS
PASOS
PTOS DE LA
PBA
6
4
2
A
B
D
2.-Inspeccin
de
genitales
externos
(vulva)
A
B
C
D
6
4
3
2
3.- .-
seleccin de
equipo adecuado
(vaginoscopios
para
hembras adultas y
jvenes), pipetas de
IA, jeringas, manejo
del semen adecuado
A
B
C
D
6
4
3
2
4.Introduccin
adecuada
del
vaginoscopio
e
inspeccin de la
vagina y localizacin
del cervix y paso de
los primeros anillos
del cervix por la
pipeta, deposito del
semen
A
B
C
D
E
6
4
3
2
9
TOTALES
PTOS
OBTENIDOS
OBSERVACIONES
66
X 100
66
94