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Area
1,4
3,4
(1)Programa de Celulosa y Papel, Facultad de Ciencias Exactas, Qumicas y Naturales, Universidad Nacional de Misiones. Argentina
(2) Instituto de Qumica de So Carlos, Universidade de So Paulo. Brasil
(3)Universidad Nacional de La Plata. Argentina
(4)Consejo Nacional de Investigaciones Cientficas y Tcnicas (CONICET). Argentina
RESUMEN
El objetivo del trabajo fue aplicar una secuencia alcalina-cida como mtodo de fraccionamiento de aserrn de pino
para obtener fracciones lquidas de extractivos y hemicelulosas y un material slido lignocelulsico, que ser
posteriormente deslignificado y eventualmente hidrolizado con vistas a la obtencin de etanol. Se utilizaron muestras
de aserrn de pino elliotti que fueron caracterizadas siguiendo las normas Laboratory Analytical Procedure (LAP,
NREL). La etapa cida se optimiz aplicando un Diseo Central Compuesto de tres variables (temperatura, tiempo y
concentracin de H2SO4). La desresinacin alcalina se llev a cabo en un reactor de 7 ltl a presin atmosfrica, a
90C y 5% NaOH sms (sobre madera seca) por una hora y una relacin licor:madera (L:M) de 10. El slido
resultante fue exhaustivamente lavado con agua y sometido a la etapa cida para extraer las hemicelulosas. El
proceso cido se realiz sobre aserrn pretratado y sin pretratar en reactores de acero inoxidable de 200 ml en un
bao trmico con una relacin L:M de 10. Se evalu el rendimiento de los procesos y se determinaron extractivos,
lignina, carbohidratos y productos de degradacin mediante cromatografa lquida (HPLC). El anlisis de los
resultados se realiz con el programa STATGRAPHIC para un nivel de confianza del 95%. El rendimiento de la
etapa alcalina fue de 91,6% sms y una remocin de extractivos de 88,2% sms. En la etapa cida, se alcanz una
remocin mxima de hemicelulosas de 73,7 % y 68,5%, del aserrn tal cual y pretratado, respectivamente. La
relacin entre los factores estudiados y las cantidades de azcares extrados es lineal, es decir, no hay un punto que
maximice la variable. Las cantidades extradas de azcares del material pretratado son similares que la del material
sin tratar con la diferencia de que los azcares se extraen principalmente hidrolizados. Las condiciones ptimas
(Deseabilidad 0,6-0,7) corresponden a los niveles ms altos de tiempo y temperatura.
Palabras
hemicelulosas
1. INTRODUCCIN
Las biorrefineras se definen como instalaciones industriales en las cuales la biomasa puede
ser convertida, econmica y ecolgicamente a productos qumicos, materiales, combustibles y
energa (Da Cruz 2007). Por lo tanto permite el uso eficiente del potencial total de la materia
prima, para la ampliacin del rango de alto valor aadido de productos (por cooperacin en y
entre cadenas) (M. Area 2008). La biorrefinera forestal implica el uso de biomasa
lignocelulsica proveniente de la industrializacin de la madera (aserrn, viruta, costaneros). El
aserrn de eucalipto y pino se encuentran entre los desechos ms importantes en la regin
noroeste (NEA) de la Argentina. La superficie boscosa de la Argentina consiste en unos 33
millones de hectreas de bosques nativos y ms de 1,2 millones de hectreas forestadas de
monte implantado. En la Mesopotamia se concentra el 70% de la superficie forestada del pas,
donde un 64% de las forestaciones corresponde a las provincias de Misiones y Corrientes,
dividindose en un 58,9 % en conferas, un 24,9 % en eucaliptus, un 9,8 % en salicceas y 6,4
% en otras especies (Schwarz 2010). Los residuos de aserraderos representan el 34% del
volumen de todos los rboles implantados cortados en la regin del NEA, y solo son quemados
como combustible o simplemente para eliminarlos (Jacobo 2005). Adems, las conferas son la
principal fuente de biomasa lignocelulsica en el hemisferio norte (Galbe 2002)
El bioetanol de primera generacin se produce en base a subproductos de la industria
azucarera, lo que genera conflictos. El biocombustible de segunda generacin se produce
Stoffel Romina Bettiana. Programa de Celulosa y Papel. Facultad de Ciencias Exactas, Qumicas y Naturales.
UNaM Flix de Azara N 1552. Posadas (3300) Tel: +54-376-4422198. e-mail. rominastoffel@hotmail.com
R.B. Stoffel ; F.E. Felissia; A. da Silva Curvelho; L.M. Gassa; M.C. Area.
2. MTODOS
El aserrn de pino (principalmente elliotti) fue suministrado por una industria local (Aserradero
Forestal Eldorado, Misiones). El aserrn fue secado al aire, tamizado y colocado en bolsas
plsticas cerradas, previa determinacin de su contenido de humedad. Para los pretratamientos
se seleccion la fraccin que pasa por aberturas cuadradas de 3 mm.
La etapa alcalina se llev a cabo en un reactor de 7 lt (M/K Systems, Inc., Maryland) con
circulacin de licor, a 90 C, una hora, 5 % sms de NaOH y una relacin licor:madera de 10.
Luego, el material fue exhaustivamente lavado y secado al aire. Se tom una muestra del
slido para el anlisis qumico. El aserrn pretratado fue colocado en bolsas plsticas cerradas
previa su determinacin su contenido de humedad de equilibrio.
Para la caracterizacin de los slidos se utilizaron los mtodos analticos estndares para
biomasa (Standard Biomass Analytical Methods, del National Renewable Energy Laboratory,
NREL): Preparation of Samples for Compositional Analysis NREL/TP-510-42620,
Determination of Extractives in Biomass NREL/TP-510-42619, Determination of Ash in
Biomass NREL/TP-510-42622, Determination of Structural Carbohydrates and Lignin in
Biomass NREL/TP-510-42618, Determination of Acid Soluble Lignin Concentration Curve by
UV-Vis Spectroscopy NREL/TP-510-42617.
La etapa cida con H2SO4 se realiz en reactores de acero inoxidables de 200 ml calentados
en un bao de glicerina. El tratamiento se aplic al aserrn tal cual y al aserrn pretratado con
lcali. Se trabaj con 15 gr secos de aserrn manteniendo una relacin licor:madera de 10. Los
pretratamientos se realizaron siguiendo un Diseo Experimental Central Compuesto de tres
factores (temperatura, tiempo y concentracin de H2SO4) a cinco niveles. Pasado el tiempo de
reaccin, los reactores fueron enfriados instantneamente con hielo. Con este sistema de
reaccin no existen rampas de tiempo de calentamiento y enfriamiento ya que los mismos son
instantneos. El material fue lavado para extraer el licor residual y filtrado con vaco.
El lquido residual contiene los carbohidratos y productos de degradacin como
hidroximetilfurfural (HMF) y furfural, y otros cidos orgnicos. Los compuestos orgnicos en el
licor residual fueron cuantificados segn la norma NREL/TP-510-42623.
Los productos de degradacin y el cido actico fueron determinados por HPLC (Waters Corp.
Massachusetts, USA), en una columna AMINEX-HPX87H, bajo las siguientes condiciones:
4mM de H2SO4 como eluyente, caudal de 0,6 ml/min, 35C, y detector de Arreglo de Diodos
(cidos orgnicos a 210nm y furfural e HMF a 254nm).
Los muestras de licor se neutralizaron con Ba(OH)2 (Kaar 1991) y se determinaron los
carbohidratos por HPLC (Waters Corp. Massachusetts, USA), usando una columna SHODEX
SP810, bajo las siguientes condiciones: agua como eluyente a un caudal de 0,6 ml/min, 85C,
detector de ndice de Refraccin.
La cantidad total de celulosa (C), y hemicelulosas (H), fueron calculadas usando las siguientes
ecuaciones:
C= Glu*0,9 Man/b*0,9
Ec. 1
Ec. 2
Donde b es igual 4,15 (valor medio de unidades de manosa por unidad de glucosa en
hemicelulosas de pino) (Yoon 2008). Los carbohidratos se multiplican por un factor de
correccin anhidro para expresarlos como polmero (Kaar 1991)
R.B. Stoffel ; F.E. Felissia; A. da Silva Curvelho; L.M. Gassa; M.C. Area.
Los resultados se expresaron como porcentaje sobre madera seca (carbohidratos, cidos
orgnicos y productos de degradacin). El anlisis estadstico se realiz con el programa
Statgraphics a un nivel de significacin del 95%.
3. RESULTADOS Y DISCUSIN
La composicin qumica del aserrn de pino elliotti se presenta en la Tabla 1.
Tabla 1. Caracterizacin qumica aserrn de pino elliotti(a)
Componente
1,2
0,0
Extractivos en Etanol
3,4
0,4
Extractivos Total
4,7
0,4
Lignina
27,7
26,8
Glucosa
50,7
47,3
Manosa
11,2
11,1
Galactosa
2,8
2,4
Xilosa
8,5
7,9
Arabinosa
1,2
1,2
cido actico
1,5
0,0
Celulosa
43,2
40,2
Carbohidratos
Hemicelulosas
24,6
22,6
(a) Expresado como % sobre madera seca (% sms)
El aserrn se someti a una etapa alcalina suave (90C, 60 min y 5 g/l NaOH) con el objetivo de
eliminar los extractivos de la madera. El rendimiento obtenido en esta etapa fue de 91,6% sms.
La composicin qumica del aserrn tratado en medio alcalino se presenta en la Tabla 1.
En la etapa alcalina, se extrae un 88,2 % de los extractivos en etanol (cidos resnicos y
grasos) y todos los extractivos en agua caliente. Los extractivos remanentes en el aserrn
podran corresponder a la fraccin de extractivos insaponificables que estn presentes en la
madera. Adems, se extrajo 3,2 % de la lignina, 8,4 % de las hemicelulosas y 7 % de la
celulosa del aserrn original. El material tratado fue completamente deacetilado en condiciones
alcalinas.
Etapa cida
Posterior a la etapa alcalina se trat el aserrn con cido diluido para separar la fraccin de
hemicelulosas. Con el objeto de estudiar el efecto que produce la pre-etapa alcalina en la etapa
cida se realiz adems un tratamiento cido sobre aserrn tal cual. Se sigui un Diseo
Experimental Central Compuesto con tres factores (temperatura, tiempo y concentracin de
H2SO4) a cinco niveles cada factor. Las pruebas realizadas segn el diseo y los rendimientos
de esta etapa se presentan en la Tabla 2 para cada material.
El rendimiento del tratamiento cido del aserrn pretratado con lcali se expres como aserrn
tal cual, segn la siguiente expresin:
Rendimiento= Rendimiento etapa cida * Rendimiento etapa alcalina
Ec. 3
Tratamiento
T, t, C. a
120-30-2,5
94,9
87,8
2
3
150-30-2,5
120-60-2,5
91,1
92,3
84,0
84,0
4
5
150-60-2,5
120-30-7,5
85,2
79,9
81,8
80,2
6
7
150-30-7,5
120-60-7,5
74,9
76,2
73,3
76,2
8
9
150-60-7,5
110-45-5,0
70,7
94,2
69,9
86,1
10
11
160-45-5,0
135-20-5,0
70,2
90,3
70,0
83,4
12
13
135-70-5,0
135-45-0,8
81,9
90,5
71,4
87,6
14
15
135-45-9,2
135-45-5,0
78,0
80,0
76,9
79,0
16
135-45-5,0
80,5
79,9
17
135-45-5,0
80,9
79,2
(a) T: temperatura; t: tiempo; C.: concentracin de H2SO4 en g/l
Los rendimientos alcanzados en los procesos que utilizaron como materia prima aserrn
pretratado resultaron menores que los rendimientos para el aserrn tal cual. El aserrn en la
etapa de pretratamiento alcalino ha sido modificado estructuralmente y qumicamente por lo
cual los componentes del mismo son ms fcilmente extrados.
Tabla 3. Composicin qumica del licor del material tratado con lcali
N*
Glucosa
Xilosa
Galactosa
Arabinosa
Manosa
HMF
Furfural
0,05
0,86
0,20
1,08
0,00
0,02
0,00
0,05
1,93
2
3
0,71
0,20
3,04
1,43
1,26
0,46
1,23
1,10
1,93
0,22
0,03
0,03
0,00
0,00
0,23
0,14
7,23
2,95
4
5
1,42
0,30
4,30
2,21
1,72
0,80
1,16
1,28
3,73
0,61
0,04
0,02
0,11
0,00
0,48
0,14
10,78
4,58
6
7
1,92
0,65
4,42
2,76
2,06
1,33
1,13
1,23
4,99
1,38
0,10
0,03
0,19
0,01
0,66
0,30
12,62
6,40
8
9
2,88
0,27
3,79
1,54
1,45
0,45
1,23
1,21
4,94
0,13
0,48
0,02
0,72
0,00
1,56
0,22
11,51
3,04
10
11
2,61
0,44
4,11
2,34
1,52
0,85
1,10
1,26
5,53
0,76
0,43
0,03
0,60
0,00
1,18
0,23
12,43
4,91
12
13
1,06
0,07
3,59
0,88
1,65
0,16
1,19
0,62
3,01
0,22
0,02
0,03
0,06
0,00
0,31
0,02
9,27
1,76
14
15
1,25
0,98
3,65
3,28
1,63
1,57
1,14
1,22
3,18
2,39
0,02
0,01
0,06
0,03
0,44
0,38
9,47
8,24
16
17
0,87
0,91
3,09
3,18
1,37
1,55
1,65
1,29
2,00
2,34
0,04
0,03
0,02
0,02
0,35
0,32
7,83
8,15
R.B. Stoffel ; F.E. Felissia; A. da Silva Curvelho; L.M. Gassa; M.C. Area.
Tabla 4. Composicin qumica del licor del aserrn sin tratamiento alcalino
C
N*
Glucosa
Xilosa
Galactosa
Arabinosa
Manosa
Ac actico
HMF
Furfural
1
2
0,34
2,09
0,24
3,54
0,50
1,83
1,06
1,39
0,60
6,43
0,13
0,85
0,00
0,02
0,00
0,04
0,18 2,41
0,50 14,12
3
4
0,75
2,73
1,03
4,56
1,01
2,23
1,01
0,96
1,92
8,02
0,33
1,23
0,00
0,11
0,00
0,17
0,26 5,20
0,74 17,11
5
6
0,64
3,22
0,86
5,15
0,86
2,42
1,20
1,09
1,40
8,13
0,37
1,31
0,00
0,13
0,00
0,19
0,28 4,53
1,16 18,13
7
8
1,66
3,74
2,52
4,41
1,62
2,09
1,30
1,41
3,56
7,28
0,86
1,55
0,00
0,76
0,01
0,92
0,74 9,65
1,83 16,65
9
10
0,33
3,87
0,32
4,01
0,48
1,82
1,18
1,45
0,58
6,23
0,21
1,57
0,00
1,10
0,00
1,11
0,17 2,61
2,19 14,88
11
12
0,96
1,93
1,32
3,60
1,11
1,99
1,32
1,23
2,35
5,93
0,38
1,08
0,00
0,02
0,00
0,05
0,36 6,37
0,47 13,76
13
14
0,76
2,43
0,64
4,24
0,94
2,26
1,19
1,20
2,01
6,79
0,11
1,21
0,02
0,03
0,00
0,07
0,25 4,91
0,73 15,66
15
2,37
3,95
16
2,28
3,84
*Nmero de tratamiento
2,22
2,21
1,27
1,20
6,33
6,27
1,09
1,07
0,02
0,01
0,04
0,03
0,78 14,80
0,71 14,55
Despus de la manosa, la xilosa y la glucosa son los componentes mayoritarios en el licor. Las
hemicelulosas se caracterizan por poseer grados de polimerizacin bajos y una estructura
amorfa. La estructura de las hemicelulosas permite que los azcares sean fcilmente
hidrolizados en condiciones cidas relativamente suaves a diferencia de la celulosa. La
presencia de estos monmeros en el lquido de pretratamiento indica que hubo una parcial o
completa hidrlisis de los polmeros. La degradacin de azcares en ambos casos es baja y
aumenta en condiciones ms severas de temperatura. En la Fig. 1 se representan las
hemicelulosas extradas en la etapa cida para cada material expresadas como porcentajes de
hemicelulosas iniciales.
Figura 2: Polisacridos extrados (% sobre azcares totales extrados) en la etapa cida del aserrn
tratado con lcali
Figura 3: Polisacridos extrados (% sobre azcares totales extrados) en la etapa cida del aserrn
sin tratamiento alcalino.
En las condiciones ms suaves de temperatura, tiempo y concentracin de cido sulfrico los
componentes se extraen principalmente como polmeros para ambos materiales. El tratamiento
alcalino provoca cambios estructurales en el material que lo hacen ms accesible, por lo tanto,
en la etapa cida los carbohidratos son extrados principalmente como azcares. En la Fig. 4
se presenta una comparacin de cromatogramas de un licor antes y despus de hidrlisis.
R.B. Stoffel ; F.E. Felissia; A. da Silva Curvelho; L.M. Gassa; M.C. Area.
Figura 4. Comparacin de cromomatogramas del licor cido (135C-45 min-5 g/l H2SO4) del
material pretratado con lcali
Las ecuaciones de regresin para los azcares totales extrados del tratamiento cido del
aserrn pretratado con lcali fueron:
Glucosa = 0,79 + 0,71*T + 0,24*t + 0,39*C + 0,23*T2 + 0,15*T*t + 0,24*T*C
R2=98,5
Ec. 4
R2=92,8
Ec. 5
R2=74,3
Ec. 6
R2=94,9
Ec. 7
Tiempo
2
1,6
1,2
0,8
0,4
0
-0,4
-0,8
-1,2
-1,6
-2
Deseabilidad
0,0-0,1
0,1-0,2
0,2-0,3
0,3-0,4
0,4-0,5
0,5-0,6
0,6-0,7
0,7-0,8
0,8-0,9
0,9-1,0
-2
-1,6
-1,2
-0,8
-0,4
0
0,4
Temperatura
0,8
1,2
1,6
4. CONCLUSIONES
Se ha estudiado una secuencia alcalina-cida como mtodo de fraccionamiento de aserrn de
pino ellioti, la cual result efectiva para fraccionar el residuo. En la etapa alcalina se logr
extraer la mayor parte de los cidos resnicos y grasos sin afectar significativamente los dems
componentes de la madera.
La temperatura es el factor que tiene mayor influencia en la extraccin de azcares.
La extraccin de glucosa se acelera a valores mayores de temperatura, donde a su vez la
influencia del tiempo y la concentracin se hacen ms importantes.
La extraccin de manosa es afectada por la temperatura, el tiempo y la concentracin, y a
niveles mayores de temperatura se acelera.
La extraccin de galactosa se incrementa cuando aumentan los niveles de temperatura, tiempo
y concentracin de cido.
Para la xilosa existe un mximo de concentracin de cido a partir del cual comienza a
degradarse a furfural. A niveles ms altos de concentracin, el tiempo y la temperatura tienen
efectos menores.
El mayor % de hemicelulosas extradas para el aserrn tal cual fue 73,7 % y 68,5% para el
aserrn pretratado, ambos en las mismas condiciones (150C, 30 min, 7,5 g/l H2SO4)
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a la Universidad Nacional de Misiones (UNaM), al Consejo Nacional de
Investigaciones Cientficas y Tcnicas (CONICET) y al Instituto de Qumica de So Carlos,
Universidade de So Paulo.
REFERENCIAS
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