ELESTRSENLASPLANTAS

NoeliaHernndezOrtiz

INTRODUCCIN

Estrs: Presencia de un factor externo a la planta provocado por el medio ambiente

cambiante,queejerceunainfluencianegativasobresudesarrolloptimo.

Es un concepto relativo ya que una determinada situacin medioambiental puede

resultarestresanteparaunaespecieynoparaotras.Lainmovilidadhapodidoinfluir
en que las plantas hayan adquirido y perfeccionado a lo largo de la evolucin
mecanismos de autodefensa. Hay que tener en cuenta que los diferentes tipos de
estrsnosedandeformaaislada.
Alolargodesuciclovital,estnexpuestasaungrannmerodecondicionesofactores
estresantesquepuedendividirseen:
Factoresbiticos:Porlaaccindeseresvivos.
o Grandesypequeosanimales
o Otrasplantas
o Insectos
o Bacterias,hongosyvirus
o Nematodos
Factoresabiticos:Fsicosyqumicos.
o Sequa(estrshdrico)
o Excesodesalesenelsuelo(estrssalino)
o Calor,froycongelacin(estrsportemperaturasextremas)
o Luz
o Encharcamientoeinundacin(estrsporanaerobiosis)
o Estrs por contaminantes medioambientales (CFC, ozono, herbicidas,
metales)
o Deficienciaenelementosminerales(estrsnutricional)
o Viento,suelocompacto(estrsmecnico)
o Lesionesoheridas

Enestecasonosvamosacentrarsobretodoenelestrsproducidopordeshidratacin
o dficit hdrico. Para hacer frente a esta situacin, las plantas han desarrollado
mecanismoscomo:
1. Enrollamientofoliar
2. Acumulacindeosmticos
o Altopesomolecular:FructanosyRFOs(oligosacridosdelafamiliadela
rafinosa)
o Bajopesomolecular:Prolina,sacarosaypoliaminas.
3. Deshidrinas


1. ENROLLAMIENTOFOLIARENSITUACIONESDEESTRS

Reduce la transpiracin, la deshidratacin y el rea expuesta a la luz en las hojas de

diferentes especies como el arroz, el maz o el trigo y no solo viene dado como
respuestaaldficithdricosinotambincomorespuestaa:
Altas y bajas temperaturas: En el arroz, el enrollamiento es directamente
proporcional con el potencial osmtico de la hoja y su temperatura. En el
gnero Rhododendron ocurre a bajas temperaturas, por encima del punto
decongelacindeltejido.
Irradiacin:EnTriticumaestivum,lashojasaparecenenrolladasde11dela
maana a 2 de la tarde en das soleados. Tambin ocurre cuando plantas
adaptadasavivirenzonassombrassonexpuestasalsol.
Insectos: Bien para protegerse de su ataque o bien para que ellos se
protejan.
Virus, hongos y bacterias: Acompaado de otros sntomas debidos a la
infeccin,comoporejemplocambiodecolorenlashojas.
Otrosfactoresdescubiertosrecientemente:
Herbicidas
Metalespesadoscomoelcadmiooelcobre
Ozono
Nivelesbajosdeciertosmineralescomoelcobreysulfuros

Cambiosasociadosalenrollamientofoliar

Para entender cmo las plantas reaccionan a situaciones de estrs ambiental, se

utilizan molculas seal, una de las cuales es el cido saliclico. Aplicado en las
concentraciones adecuadas, causa de forma temporal un ligero estrs oxidativo
(disparalaoxidasaalternativa)queaumentarlacapacidadantioxidantedelasplantas
yayudarainducirlasntesisdecompuestosprotectores.
No hay datos suficientes acerca de la relacin entre el cido saliclico y el
enrollamientofoliarduranteelestrshdricoperosisehadetectado:
Una relacin positiva entre el contenido de cido saliclico endgeno y el
enrollamientofoliarenCtenanthesetosa.
Laaplicacinexgenadecidosaliclicoretrasaelenrollamientofoliarpor
la induccin de sistemas antioxidantes y cambios bioqumicos durante el
estrshdrico.

Cambiosenionesycidosorgnicos
No existen suficientes estudios basados en cambios en las concentraciones inicas
durante el enrollamiento foliar pero se sabe que tienen un papel importante en el
ajustedelpotencialosmticoenplantas.Sesabeque:
Existe una acumulacinen el citoplasma de iones sodio (que contribuye a
lasrelacioneshdricasdelasplantas)ycalcio(quetieneunpapelvitaltanto
nutricionalcomofisiolgicoenelmetabolismodelasplantas).
Seproduceunadisminucindepotasioycloruroenelcitoplasma.

Lasconcentracionesdemalatoycitratoaumentanduranteelenrollamientofoliar.La
acumulacin de malato y citrato en la vacuola contribuye al ajuste osmtico en el
citoplasma.

Fotosntesis
Se ve directamente afectada por la deshidratacin. El enrollamiento foliar durante
situaciones de estrs hdrico disminuye la superficie de la hoja expuesta a la energa
solary,juntoconelcierredelosestomas,disminuyelatranspiracin.Estoprovocar
unadisminucindelaentradadeCO2enlasclulas(descensodeCO2intercelular)y
unabajaeficienciaenelusodelaluz,inducindoseunmecanismodeinactivacindel
sistemafotosinttico.Portantoelenrollamientofoliarserinversamenteproporcional
al contenido en clorofilas. Cuando la luz es intensa, adems se produce una
acumulacindecarotenoidescomorespuestaadaptativa.

Regulacingnica
Recientementesehanidentificadogenesresponsablesdelenrollamientofoliar:
En el arroz, el gen OsAGO7 codifica para una protena perteneciente a la
familia AGO, cuando este gen se sobreexpresa provoca que las hojas se
curvenhaciaarriba.
Enmaz,elgenRLD1(rolledleaf1)codificaparaunaprotenadelafamilia
HDZIPIIIquecontrolaelenrollamientodelahoja.

Lasclulascomocausantesdelenrollamientofoliar
Clulas buliformes: Se encuentran en la epidermis de la regin adaxial de la hoja.
Actancomomotordelenrollamientodehojasenespeciescomoelarroz,mazytrigo.
Cuandolasclulasestnturgentes,lashojasmantienenunaposicinplana,enelcaso
contrario provocan el enrollamiento foliar. Mutaciones que presentaban clulas
buliformespequeaspresentaronunmayorenrollamientofoliar.
Clulas de la hipodermis: En algunas especies como C. setosa, realizan la misma
funcinquelasclulasbuliformes.
Clulas del esclernquima: En el arroz, mutantes que presentaban clulas
esclerenquimticas defectuosas presentaron un enrollamiento foliar intenso. En el
maz,dependiendodecmoestelesclernquimadistribuido,elenrollamientofoliar
serdiferente.Lasesclereidassonclulasdeparedesfuertementelignificadasquese
entremetenentrelasclulasparenquimatosasyenlosbordesfoliaresparaaumentar
la resistencia mecnica del tejido. Por tanto, es lgico que a menor nmero de
esclereidascorrespondamayorflexibilidad(mayorenrollamiento)

Alteracionesenelsistemaantioxidante
Elfuncionamientodelamaquinariametablicaaerbicagenerayconsume,deforma
continuaycontrolada,unaampliavariedaddeespeciesdeoxgenoreactivas(ROS).Sin
embargo,bajounaaltaintensidaddeluzasociadaaundficithdrico,seproduceun
exceso de excitacin de los fotosistemas, as como una restriccin de la difusin del
CO2 atmosfricoalinteriordelahoja.ElloreducelaproporcinCO2/O2 enelinterior
del cloroplasto, lo que favorece la fotorreduccin de O2 por el fotosistema I. Como
consecuencia, se forman ROS que producen daos oxidativos en la clula. Algunas
ROS:

 Aninsuperxido
Perxidodehidrgeno
Radicaleshidroxilo
Oxgenoenestadodesinglete
Reaccionan muy fcilmente con las macromolculas biolgicas ms importantes
desencadenando procesos destructivos oxidativos que son capaces de bloquear el
metabolismocelular.Porellosegeneran:
Antioxidantes enzimticos: Catalasa, peroxidasas, superxido dismutasa,
ascorbatoperoxidasa,glutatinreductasa
Antioxidantesnoenzimticos:Glutationyascorbato

Se han detectado cambios a nivel de estas enzimas durante el enrollamiento foliar

incrementndoselaactividaddealgunasdeellas.

Conclusiones
Entenderelmecanismofisiolgicoymoleculardeestefenmenopodraserunreade
investigacin interesante en el futuro. El aislamiento e identificacin de genes que
controlan el enrollamiento foliar podra ser beneficioso para crear cultivos con las
caractersticas deseadas, incluida la tolerancia al estrs. Sustituira a la aplicacin
exgena de solutos compatibles, reguladores del crecimiento, compuestos
antioxidantesysalesinorgnicas.

BeatrizLinillosPradillo

RELACIN ENTRE EL ENROLLAMIENTO DE LAS HOJAS Y LAS ENZIMAS DEL CICLO

ASCORBATOGLUTATINSUJETOSALESTRSPORSEQUA

Introduccin:ROS,estrsoxidativoymecanismosdedefensa

La produccin y consumo de oxgeno son funciones esenciales para la vida de las

plantas. Sin embargo, en ellas el metabolismo del oxgeno da lugar tambin a la
formacindesustanciasaltamentetxicas.Todaslassituacionesdeestrsqueafecten
al balance hdrico de las plantas, como la sequa, van a inducir un cierre de estomas
paralimitarlaprdidadeaguaportranspiracin.Elcierredeestomasrpidamenteva
a provocar una reduccin en la asimilacin del CO2 por parte del cloroplasto. Esto
ralentiza las reacciones del ciclo de Calvin, lo que conlleva a un menor consumo de
NADPHyATP.Estarespuestasetraduceenunafaltaderegeneracindeaceptoresde
electrones (NADP+, NAD+,FAD), facilitando la cesin de electrones de la cadena de
transporte electrnico al oxgeno, dando lugar a una mayor generacin de especies
reactivas del oxgeno (ROS) en el cloroplasto, como radicales superxido y H2O2. Por
tanto, como consecuencia del estrs por sequa que sufre la planta se incrementa la
produccindeROSypuedenprovocardaosoxidativostantoenorgnuloscomoenel
citoplasma.

Paraevitarqueestasproduzcandaos,lasplantashandesarrolladoenelcursodela
evolucin una serie de mecanismos de defensa. Cuando estos mecanismos son
desbordados se produce una situacin conocida como estrs oxidativo que puede

producirgravesdaosllevandoinclusoalamuertedelaplanta.Sinembargo,tambin
hay que considerar que niveles adecuados de ROS son importantes porque pueden
funcionarcomomolculasbiosealizadoras.

El estrs oxidativo es el estado en el cual se encuentra alterada la xidoreduccin

intracelular, es decir el balance entre oxidantes y reductores de una planta. Este
desequilibrio se debe a una excesiva produccin de especies reactivas de oxgeno
(ROS)y/opordeficienciaenlosmecanismosantioxidantesdelaplanta,conduciendoa
daocelular.

En estas condiciones la planta pone en marcha una serie de mecanismos o defensas

enzimticas(comolacatalasa,superxidodismutasaoperoxidasas)ynoenzimticas
paraprotegersecontraestosdaosoxidativosyllevaracaboladestoxificacindelas
especiesreactivasdeloxgeno.

Centrndonos en los antioxidantes no enzimticos juegan un papel muy importante

todas las enzimas del ciclo ascorbatoglutatin cuya funcin es la de eliminar H2O2 y
regenerar los antioxidantes no enzimticos ms importantes, que son el ascorbato y
glutatin.

Cicloascorbatoglutatin

El ciclo ascorbatoglutatin est constituido por cuatro enzimas, siendo la ms

abundantelaascorbatoperoxidasa(APX),querequiereascorbatoparareducirelH2O2
a H2O. El monodeshidroascorbato (MDHA) puede ser reducido a ascorbato de nuevo
porlamonodeshidroascorbatoreductasa(MDHAR),querequiereNADH,obienpuede
convertirse ascorbato y deshidroascorbato (DHA). A continuacin, la
deshidroascorbato reductasa (DHAR) regenera el ascorbato a partir de
deshidroascorbato(DHA)utilizandoelglutatinreducido(GSH)comoreductor.Elciclo
secompletaconlareduccindelglutatinoxidado(GSSG)aglutatinreducido(GSH)
mediante la actividad de la glutatin reductasa (GR) que necesita NADPH producido
porlaglucosa6fosfatodeshidrogenasa(G6PDH).

Antioxidantesnoenzimticos


Elascorbatoesunodelosantioxidantesnoenzimticosmspoderososyquizelms
importante en las plantas, ya que puede neutralizar ROS de forma directa: radicales
hidroxilo (.OH), superxido (O2.), oxgeno singlete (
), pero tambin puede
reparar molculas orgnicas oxidadas. El ascorbato se encuentra presente en el
cloroplasto, vacuola y el espacio apoplstico de las clulas de las hojas en elevada
concentracin. El cido ascrbico se encuentra en su forma reducida, lo que
representa el 90% del ascorbato total, en hojas y cloroplastos. La concentracin
intracelular de este compuesto se encuentra en el rango de 20 mM en el citosol, y
entre20y300mMenelestromadelcloroplasto.Comoyahemoscomentadoantes,
puede regenerase fcilmente por la accin de reductasas especficas y con ayuda de
otrasmolculascomoelNADH,elNADPHoelglutatinreducidoenelcicloAscorbato
Glutatin.

Elglutatinesuntripptidonoprotenicoquesederivadelosaminocidos.Contiene
unenlacepeptdicoinusualentreelgrupoaminodelacistenayelgrupocarboxilode
lacadenalateraldelglutamato.Setratadeuncompuestoabundanteenlostejidosde
lasplantasyseencuentravirtualmenteentodosloscompartimentoscelulares:citosol,
retculo endoplasmtico, vacuola y mitocondria. Participa directamente en la
neutralizacinderadicaleslibresyespeciesreactivasdeoxgeno(ROS).Elglutatinse
encuentracasiexclusivamenteensuformareducida,yaquelaenzimaquevuelvede
su forma oxidada, la glutatin reductasa, es constitutivamente activa e inducible por
estrs oxidativo. De hecho, la proporcin de glutatin reducido a glutatin oxidado
dentro de las clulas a menudo se utiliza cientficamente como una medida de la
toxicidadcelular.Elpapelesencialdelglutatinenladefensaantioxidantesedebeala
capacidadquetieneestecompuestoderegenerarotropoderosoantioxidantesoluble
enagua,elascorbato.

Relacincicloascorbatoglutatinconelenrollamientodelashojas

Por tanto, podemos deducir, que en presencia de un estrs oxidativo como causa la
sequa,hayunaumentodelasenzimasdelcicloascorbatoglutatinparaproducirlos
antioxidantes enzimticos, el ascorbato y el glutatin, y tratar de combatir el efecto
deletreodelasespeciesROS.Apartededisminuirlaprdidadeaguaconelcierrede
los estomas, las plantas para evitar los efectos de la sequa, tambin ocasionan el
enrollamientodesushojas,loquedisminuyelasuperficieevaporativaayudadoporla
plasticidadyserosidaddelascutculasdelasmismas.

LosestudiosrealizadosmuestranqueelciclodelasenzimasASCGSHseindujeronen
una forma diferente de ROS en la hoja y pecolo. Por esta razn, los niveles de
antioxidantes(GSHyASC)ylasactividadesdeenzimasantioxidanteenelpeciolono
eranmsaltosquelosdelahojas,apesardequeladisminucindelcontenidorelativo
de agua del pecolo fue mayor que en la hoja durante el perodo de balance. Las
diferenciasdeestossistemasantioxidantesenlahojayenelpeciolosedebenaquela
hojaseenrollamientrasqueelpeciolono.

TodasestasenzimasdelcicloASCGSHqueconducealadestoxificacindeROSpuede
tener un papel protegiendo los componentes celulares de los daos oxidativos
generados por la sequa, y tambin influyen en el control de enrollamiento de las
hojas.Porotraparte,lahojadelaminacinproporcionaunaproteccinnosloparala
hoja,tambinparaelpecoloaldisminuirlaprdidadeaguaatravsdesuperficiesde
lashojas.

AnaTableroNieto

2. ACUMULACINDEOSMTICOS

2.1 Osmticos de alto peso molecular: Fructanos multifuncionales y oligosacridos

delafamiliadelarafinosa

Definicin
Lasacarosaesuncompuestofundamentalenelmetabolismodelasplantas,yaquees
el primer azcar terminal formado durante la fotosntesis y el compuesto que
transportalosesqueletosdecarbonodesdesulugardeorigenalostejidos.Tambin
es el sustrato para la sntesis de diferentes tipos de oligosacridos derivados de la
sacarosa, entre ellos los fructanos y los oligosacridos de la familia de la rafinosa
(RFOs),quesonlasdosclasesdeoligosacridossolublesenaguamsimportantesdel
reinovegetal.Losfructanospuedenestarclasificadasporeltipodeenlacesquetengan
(el(1,2),el(2,6)oambos).
Los RFOs "clsicos" son solubles , no reductores, productos de (1,6) galactosil
transferasa(Gal)formandoextensionesdeSac.Eltrisacridorafinosa(Raf)eselms
pequeo y un RFO omnipresente en el reino vegetal, adems de la elongacin con
residuos de Gal que conduce a la estaquiosa DP4 (Sta). Mientras Raf y Sta estan
presentes en todas partes de la planta en acumuladores genuinos de RFO , el
homlogo superior se restringe generalmente a los rganos de almacenamiento . A
menudo Sta es el carbohidrato cuantitativamente dominante en dichos rganos de
almacenamiento.

Funcionesantesituacionesdeestrs:
Dado que las membranas y protenas de membrana son uno de los objetivos
principalesdelesinporcongelacinydesecacinenclulas,losefectosprotectores
demembranasehandedicadoafructanos,ascomoalasRFOs.
Las FEHs (fructanos exohidrolasas) liberan rpidamente cantidades masivas de
fructosa, disminuyendo el potencial osmtico y contribuyendo al flujo del agua y la
floracin.Losfructanosparecentenerfuncionesadicionalesenlasequaylatolerancia
alacongelacindelasplantas.Estoseveapoyadoporelhechodequelasplantasque
acumulan fructanos son especialmente abundantes en zonas de clima templado y
ridoconlasheladasestacionalesolosperodosdesequa,yestncasiausentesenlas
regionestropicales.Enespeciesvegetalesqueposeenfructanos,stosseacumulanen
mayor medida en situaciones de fro y sequa. De hecho, se ha observado que en
plantas transgnicas para fructanos, se sintetizan fructanos en situaciones de
toleranciaalestrs.

Similaralosfructanos,yencontrasteconalmidn,RFOssonosmticamenteflexibles,
yaquesudominioproteicopuedecambiarfcilmente,yconellolapresinosmtica.
Lasespeciesqueutilizansacarosacomoreservadehidratosdecarbono(Ej:remolacha
azucarera,caadeazcar)slopuedendoblarlapresinosmticaenlahidrlisis.
Los experimentos in vitro han evidenciado esta habilidad, lo que demuestra que
ambos, tanto fructanos como RFOs contribuyen a una mayor estabilidad de la
membrana durante la congelacin y la deshidratacin celular mediante la insercin
profundaentrecabezaslipdicas,tantoenmonoycomoenbicapas.Comotal,tambin
estn bien posicionados para eliminar los radicales hidroxilo (OH) que podran
originarseentonoplastosasociadosaactividadesperoxidasadeclaseIII.
Entre las especies reactivas de oxgeno biolgicamente relevantes (ROS: H2O2, O2 y
OH),losradicaleshidroxilosonlasespeciesmsreactivasypeligrosas.ElOHsesabe
que reacciona con casi todos los tipos de biomolculas ya que se producen en las
reaccionesdedifusincontrolada.
Mientrasquelosfructanossoncandidatosobviosparalaestabilizacinyproteccinde
lostonoplastos,losRFOsquesesintetizanenelcitosolsoncandidatosparaprotegerla
membranaplasmtica.

SehademostradorecientementequeRaf(trisacridorafinosa)sepuedeimportaren
cloroplastosyporlotanto,podrafuncionarcomounprotector.Comosehaexplicado
anteriormenteparalosfructanosyotrososmolitos(eltrminoosmolitosserefierea
osmticos de naturaleza mineral, pero tambin pueden ser orgnicos), se puede
especular que la capacidad de eliminacin de OH por Raf contrarresta el dao
producido en la membrana y las protenas, lo que contribuye a la estabilidad de la
membranatilacoidaldelcloroplastoylaintegridadbajoestrs.
En conclusin, se destacan dos nuevos papeles emergentes. En primer lugar, los
fructanos y los RFOs pueden contribuir en la homeostasis de especies reactivas
celulares de oxgeno (ROS) por procesos especficos eliminadores de ROS en las
proximidades de las membranas de los orgnulos (por ejemplo, vacuolas,
cloroplastos,).Ensegundolugar,seplantealahiptesisdequelosfructanosdemenor
tamao y los RFOs actan como compuestos de sealizacin mvil floemtica en
situaciones de estrs. Se especula que estos mecanismos de sealizacin activan a
antioxidantes y oligosacridos, que contribuyen a la prevencin de enfermedades en
plantas,ascomoenlosanimalesyenlossereshumanos.

FranciscoJavierBreaCorral

2.2 Osmticosdebajopesomolecular:Poliaminasyprolinaenelestrsporsequa.

Se realiz un experimento en plantas de tabaco para estudiar el papel de las

poliaminasylaprolinaenelestrsporsequayelestrscombinadodesequaycalor
(MilenaCvikrovaetal,2013).
Las poliaminas son importantes durante el ajuste osmtico en respuesta a la
deshidratacin, para el mantenimiento de estructura de la membrana plasmtica y
para realizar un barrido de radicales libres, como iones u otras molculas libres
(sacridos). Sin embargo, no est del todo clara su funcin durante la sequa. En

estudios anteriores con Arabidopsis, se conoci que plantas con altos niveles de
prolina,ascomodepoliaminasfueronmsresistentesalasequa.

Asimismo,lasfitohormonascomoelABA,medianenloscanalesinicosqueinducenal
cierre estomtico y la activacin de las vas de defensa frente al estrs por sequa.
Recientemente se ha descubierto que las citoquininas y auxinas, importantes en el
crecimientoyeldesarrollo,jueganrolesimportantesduranteelestrs.

Duranteesteestrsporsequa,laexposicinalasequayaltastemperaturasprovocan
la generacin de especies reactivas de oxigeno (ROS), reactivos potencialmente muy
dainosalaclula,enrespuestalasplantasproducenenzimasdebarridoyserealizan
elajusteosmticoparamantenerelpotencialhdrico,paraelloacumulanionescomo
calcio,azucaresopotasio,ascomoprolina,queacumulansintetizndoladenovo.

La sntesis de prolina y la de poliaminas, poseen varios intermediarios en comn.

Durante el experimento, se utilizaron plantas normales con fenotipo salvaje, WT, as
como P5CS, mutantes para la sobreexpresin de biosntesis de prolina. Impiden
inhibicinporconcentracionesaltasdeprolina,parapoderevaluardirectamentecomo
afectanaltosnivelesdeprolinaalestrsporsequayalmetabolismodepoliaminas.
Asimismo,seevaluaronlosnivelesdepoliaminas(putrescinaput,espermidinaspdy
esperminaspm.), asi como de las enzimas necesarias tanto para su sntesis, va
descarboxilacin de ornitina (ODC) o va descarboxilacin de arginina (ADC), como
para su oxidacin (diamino oxidasa DAO, o poliamino oxidasa, PAO)en ramas altas,
bajasyenlasraces,paraestudiarademssilasequaafectadelamismamaneraalas
distintaspartesdelaplanta.

Alexaminarlosdatosobtenidos,seobservaronlossiguientesresultados:
Cadadelpesofrescoyelcontenidorelativodeagua.
Ensequa,aumentanlosnivelesdeprolinaenambosgenotipos.
ElretornoalosnivelesnormalesdeprolinaeramsrpidoenWT
Aument la actividad de ODC, tras el perodo de sequa, que se puede
asociarconlaproduccindePAs.Enambosgenotipos,msacentuadoen
lasraces.
Asimismo, aumentaron tambin los niveles de ADC, aunque aumentaron
ms tras el perodo de rehidratacin comparados con el ODC, en ambos
genotipos. Casi un 25% por encima de los niveles de control tras
rehidratacin.
Los niveles de SAMDC aumentaron significativamente, niveles que
persistierontrasrehidratacin.

Estosaumentossepuedenasociaralasntesisdepoliaminas.

LasreduccionesenlosnivelesdeactividaddeDAOyPAOseobservanenlasraces
sobretodo.Enlarehidratacin,aumentanlosnivelesdePAOyDAO,lasreducciones
afectanmsalosmutantes.Lacadadelosnivelesdeaminooxidasas,DAOyPAO,se
correspondeconunaumentodelosnivelesdepoliaminas.Sinestrs,losnivelesde
PAssonsuperioresenlosmutantes.Elestrsporsequaproduce:

Disminucindeputyspd.
Aumentodespmydap(diaminopropano).
El spd, podra haberse consumido en la sntesis de spm o durante la
oxidacindepoliaminaoxidasaparaformardap.
Durante la rehidratacin: los niveles de put y spd se recuperan
rpidamente, as como la actividad de sntesis de poliaminas aumenta
considerablemente.

En definitiva, los resultados del estudio indican que los elevados niveles de prolina y
poliaminasenplantasdetabacotienenlevesperopositivosefectosenlatoleranciaal
estrsabitico.
Las ramas altas, parecen ms protegidas, demostrando as la eficacia de los
mecanismos naturales de defensa de las plantas al dao oxidativo, protegiendo los
tejidosjvenesyreproductores.

DanielCanoPulido

3. DESHIDRINAS

El grupo 2 de protenas LEA (abundantes en la embriognesis tarda), llamados

deshidrinas, se encuentran principalmente en las plantas. Se localizan tambin en
diferentestejidosvegetativosduranteelcrecimientobajocondicionesnormales,yse
acumulan sustancialmente en las clulas de todos los tejidos aunque normalmente
bajo condiciones de estrs que conducen a la deshidratacin celular se acumulan en
lostejidosvegetalesdeshidratadostalescomoenlassemillasendesarrollodurantesu
maduracin, o en tejidos vegetativos sometidos a un estrs ambiental tales como la
sequa, la baja temperatura y la salinidad y durante los procesos de deshidratacin
naturalesqueseproducendurantelamaduracindelasemilla.
Laacumulacindeestasprotenashidroflicasesunodeloscomponentesimportantes
de adaptacin de las plantas a condiciones ambientales severas. Las deshidrinas se
distribuyenenunaampliagamadeorganismos,incluyendoplantassuperiores,algas,
levadurasycianobacterias.

El rasgo distintivo de todos DHNs es que tienen un dominio rico en lisina con 15
aminocidos, EKKGIMDKIKEKLPG, denominado el segmento K. Se encuentra
generalmente presente cerca del Cterminal. Otras caractersticas tpicas de las
deshidrinas son: una cadena de residuos de Ser (el segmento S), un motivo de
consenso, T / VDEYGNP (el segmento Y), ubicado cerca del extremo Nterminal, y
regiones menos conservadas, por lo general ricas en aminocidos polares (el
segmentos ). Los segmentos no se conservan y muestran una considerable
variacinentrelasdiferentesDHNs.ElKsegmentoeselnicosegmentopresenteen
todas las deshidrinas. Segn la similitud de secuencia de aminocidos y sus
caractersticasestructurales,lasdeshidrinassepuedendividirendiferentestipos.
No existe una correlacin entre el tipo de deshidrina y localizacin del tejido. Varios
tiposDHNpuedenserlocalizadosenelmismotejido.

Funciones


1. Unirsealpidos
ElsegmentoKpresenteentodaslasDHNsseasemejaalsegmentohelicoidal,que
unelpidosanfipticosdeclaseA2.SielsegmentoKformaunaestructurahelicoidal
similar a la del segmento anfipticoA2, una de sus funciones sera las interacciones
hidrofbicasconlasmembranasylasprotenasdesnaturalizadas.
ExisteunaevidenciaenlosexperimentosinvitrodequeDHNstienenunapropensina
participareninteraccioneshidrfobasinvitroquepuedeimplicarlaformacinde
hlicesanfipticasporelsegmentoK.

El anlisis de espectros de dicrosmo circular de deshidrina de caup (Vigna

unguiculata) revel que en presencia de SDS la protena formaba hlices
anfipticas,yqueensuausenciacarecadeunaestructurasecundariabiendefinida.
Las dehidrinas in vivo pueden contener estructuras helicoidales capaces de una
unin a lpidos y tienen una conformacin en espiral al azar en el estado nativo. Se
sugiriquelaestructuradeespiralalazarpuedeformarunacapacohesivaconotras
estructurasytienenlacapacidadpararetenerelagua.Apartirdeestoshallazgos,las
DHNsparecenprotegeralasclulasdeplantascontraladeshidratacinpormediode
suestructuraenespiralaleatoria,quemantienelaestructuraproteicayseunealagua.
VariedadesdecaupconesaDHNmostraronunatoleranciamejoradaalarefrigeracin
duranteunmomentodeemergencia,loquenoseobservenvariedadesquecarecen
deestaprotena,apesardequenohaydiferenciaenelescapedelelectrolitoquefue
observado,loqueindicaqueestadiferencianoesdebidoaunaproteccinespecfica
delamembranaplasmtica.Sedemostrotraevidenciamsdirectadelacapacidad
dedehidrinasdeunirlpidosgraciasalosestudiossobreladeshidrinaDHN1delmaz
(Zea mays), aislado a partir de semillas maduras. Como se muestra, DHN1 se une in
vitroavesculasdelpidosquecontienencidosfosfolpidos,ysevioqueestaunin
era ms favorable con vesculas de pequeo dimetro (SUV) preparados a partir de
carga negativa fosfolipdica que contiene cido fosfatdico (PA), fosfatidil Ser (PS) y
fosfatidilglicerol (PG). El anlisis por dicrosmo circular demostr que esa protena
adoptabaestructurashelicoidalescuandoseunaavesculasderivadasdePA.Las
protenas por tanto pueden sufrir cambios conformacionales relacionados con la
estabilizacindevesculasuotrasestructurasendomembranalesbajocondicionesde
estrs.

2. Capacidadantioxidante
La deshidrina de Citrus unshiu, tiene una mayor tolerancia al fro en plantas
transgnicas de tabaco y pueden prevenir in vitro la peroxidacin de liposomas. La
peroxidacindelpidosesunprocesodedegradacinmediadaporradicaleslibresque
implicancidosgrasospoliinsaturadosylosresultadosenlaformacinderadicalesde
lpidos. Esta deshidrina facilita la aclimatacin al fro, al actuar como protena
antioxidante para proteger los sistemas de membrana bajo estrs por fro. La
peroxidacinlipdicaesinducidaporlosradicaleslibres(autooxidacin),fotooxidacin
en presencia de oxgeno singlete, o reaccin de la enzima (lipoxigenasa ,
ciclooxigenasa).Enunamembranadecidosgrasosinsaturados,losradicaleshidroxilo
inducen un proceso que conduce a la formacin de radicales de lpidos. La
peroxidacin causa una prdida de cidos grasos insaturados y disfuncin de la

membrana a travs de modificaciones en la fluidez, lo que afecta el transporte de

iones, la permeabilidad selectiva, la actividad enzimtica y la disponibilidad del
receptor. Se demostr que esta deshidrina tena la capacidad para eliminar los
radicaleshidroxiloyperoxilograciasasuuninconlosresiduosdeglicina,histidinay
lisina que posee esta deshidrina. Esta deshidrina es una protena captadora de
radicaleshidroxiloquepuedereducireldaooxidativoinducidoporelestrshdrico
enlasplantas.Loshidroxilosradicalessongeneradosporunsistemademetal/H2O2
duranteladeshidratacincelular,ycomosehavistosonextremadamentecitotxicos.

3. Laactividaddeunindemetal
La deshidrina del cidro se demostr que posea una actividad de unin a metal y se
identific cual era el dominio especfico de unin a metal en la secuencia de la
protena.LapropiedaddeuninametaldeladeshidrinaCuCOR15seprobmediante
cromatografadeafinidadporionesmetlicosinmovilizados(IMAC).Laafinidadms
altasedetectporCu2+.Ladeshidrinafuecapazdeligara16ionesCu2+.Seidentific
una secuencia central vinculante de Cu2+, HKGEHHSGDHH, que se localiz cerca del
extremo N terminal. A partir de estos resultados, los autores concluyeron que esta
deshidrinafuncionacomoradicalcarroero,reduciendolatoxicidaddelosmetalesen
lasclulasvegetalesbajocondicionesdeestrsporagua.Estaactividadantioxidante
puede ser una funcin crucial de las deshidrinas en condiciones que conducen a la
generacin de radicales hidroxilo en las plantas. Por tanto, esta funcin de unin a
metalesconfirmalafuncindeproteccinhacialasmembranascontralaperoxidacin
delpidosyladesestabilizacindesufuncin(comoyasevioenlafuncinanterior).
TambinseinformqueunaITPdeshidrina(protenadetransportedehierro)delas
semillas de ricino (Ricinus communis) podra participar en el transporte de hierro, y
queladeshidrinadeArabidopsisyladelapioestnimplicadosenlaunindecalcio,
queesdependientedelafosforilacindelasprotenas.

4. Actividadcrioprotectora
Algunas deshidrinas presentan actividad crioprotectora hacia enzimas sensibles a
congelacin. En las plantas cultivadas en condiciones no estresadas, las deshidrinas
conestaactividadselocalizanprincipalmenteenlostejidosvascularesderganosque
transportan(races,tallos),lostejidosvascularesdehojas,laspuntasdelasracesyla
parteapicaldelosbrotes.Bajoestrsalfro,lasprotenasseacumulanenlasclulas
de todos los tejidos, pero la acumulacin ms importante se encontr en los tejidos
vasculares y en las clulas circundantes. Su acumulacin en respuesta a baja
temperaturasecorrelacionadaconlacapacidaddelasplantasparaaclimatarsefroy
desarrollar una tolerancia a la congelacin. El sistema vascular y los meristemos
apicalessoncrucialesparaelcrecimientoysupervivenciadelasplantasyporesolas
deshidrinasserequierenparalaproteccindelosmecanismosdetransporteparael
agua y molculas hacia las clulas que crecen y se dividen en las zonas apicales.
Durantelacongelacin,laformacinintercelulardecristalesdehieloseiniciatantoen
los vasos subepidrmicos como perivasculares. Comprensiblemente, las clulas que
bordeanestasregionessonmspropensosaserafectadasporladeshidratacinyun
mayor estrs inico, resultado de la migracin del agua hacia el crecimiento de los
cristales de hielo extracelular. Por lo tanto, parece ser razonable suponer que la

toleranciadelasplantasalestrsabiticosebasaprincipalmenteenlacapacidadpara
protegerelreavascularcontraladeshidratacin.
La deshidrina de Citrus unshiu se vio que protega la catalasa y la lactato
deshidrogenasacontralainactivacinporcongelacin,yqueeramsefectivaquelos
solutoscompatibles,talescomosacarosa,betanaglicinayprolina,oBSA.
Anlisis del espectro de dicrosmo circular mostr que la estructura secundaria
importantedeestadeshidrinaenlasolucinesunaespiralalazar.Esprobablequela
estructuradeespiralaleatoriadedeshidrinaspuedadesempearunpapelimportante
enlaproteccindeenzimassensiblesalcongelamiento.Bajastemperaturasreducenla
actividaddelasprotenasoligomricasdebidoaquelasdisocianensubunidades.Esta
estructura en espiral al azar podra hacer capas cohesivas con la superficie de los
oligmeros, y prevenir la disociacin de las formas activas, es decir impedir la
inactivacindeestasenzimas.

Anlisis funcionales de la actividad crioprotectora y anticongelante tambin se han

observado para la deshidrina de Prunus persica y para lade Betula pubescens. La de
Prunus persica conserv in vitro la actividad enzimtica de la lactato deshidrogenasa
despus de varios ciclos de congelacindescongelacin en nitrgeno lquido. Las
deshidrinasde Betula pubescens, mejoraban laactividad amilasaen presencia de
polietilenglicol. Estos test in vitro sugieren que algunas deshidrinas pueden proteger
enzimasinvivobajocondicionespequeasdeestrstrmico.

5. Contribucinatolerardelestrs
Muchos estudios informaron una correlacin positiva entre la acumulacin de
transcritos de deshidrina o protenas y la tolerancia a la congelacin, la sequa, y
salinidad. Las plantas transgnicas y expresiones heterlogas en genes de levadura
sobreexpresados tambin se han utilizado para elucidar el papel potencial de las
deshidrinasenlatoleranciaalestrs.LasobreexpresindelgendeCitruseneltabaco
provoc una ligera disminucin de la fuga de iones durante la refrigeracin y la
congelacin.Recientementeseobtuvierondatossobrelasobreexpresindemltiples
genes que codificaban para deshidrinas en Arabidopsis y se vio que producan un
aumentodelatoleranciaalacongelacinylamejoradelasupervivenciaenexposicin
abajastemperaturas,loquedemuestraquelasdeshidrinascontribuyenalatolerancia
a la congelacin (refuerza la funcin mencionada anteriormente). Tambin en
condiciones de deshidratacin celular durante la maduracin de la semilla, pueden
proteger tambin a molculas contra la prdida de agua por eso en este caso se
acumulanenlasclulasembrionariasdelassemillas.

DavidArancnGarca

Las deshidrinas son protenas especficas expresadas en plantas y cuya cantidad

aumenta de forma considerable cuando desciende el contenido hdrico de la misma.
Se han detectado en plantas superiores, tanto en gimnospermas como en
angiospermas.Sonprotenashidroflicasconaltaproporcinenglicina.Seencuentran
tantoenelcitoplasmacomoenelncleo.Lasdeshidrinaspertenecenalafamiliade
protenas LEA (Late Embryogenesis Abundant), un grupo heterogneo de protenas
descritas por primera vez por su acumulacin durante el desarrollo de la semilla en

algodn. Se cree que las protenas LEA estn involucradas en el alivio del impacto
negativodelestrsambiental.
TodaslasdeshidrinascontienenalmenosunacopiadelsegmentoK,elcualconsisteen
unfragmentodequinceaminocidosaltamenteconservadosyricosenlisina,quees
diferente en gimnospermas y en angiospermas. Normalmente, se encuentra en la
regin Cterminal. Los segmentos K pueden estar involucrados en la formacin de
hlices anfipticas alfa tipo A2, lo que permite que puedan interactuar con
componentes lipdicos de la membrana y con regiones hidrofbicas de protenas
desnaturalizadasparcialmente.
LasdeshidrinastambinpuedentenersegmentosSysegmentosY.ElsegmentoSes
un fragmento de residuos de serina contiguos que pueden ser fosforilados. Por su
parte, el segmento Y presenta homologa con dominios de unin de nucletidos
presentes en chaperonas. Este segmento nicamente ha sido identificado en
deshidrinasdeangiospermashastaelmomento.
Las deshidrinas poseen otras regiones menos conservadas ricas en glicina y
aminocidospolaresllamadassegmentos.

En funcin de la combinacin de segmentos que presentan en la secuencia de

aminocidoslasdeshidrinashansidoclasificadasen5grupos:YnSKn,YnKn,SKn,Kny
KnS. Las deshidrinas pertenecientes al grupo YnSKn se conocen como deshidrinas
alcalinasyestnrelacionadasconsituacionesdeprivacindelaguadisponibleparala
planta, mientras que las deshidrinas SKn se conocen como deshidrinas cidas y son
responsablesdelmantenimientoanteelestrshdricoyantelasbajastemperaturas,
aligualquelaspertenecientesalgrupoYnKn.

Lasdeshidrinasseconsiderangeneralmentegenesdeexpresintardaenlarespuesta
alestrsysehandescritovariasfuncionesenlasquepodranestarimplicadas.Unade
ellas sera la de proteccin, estabilizando membranas mediante interacciones
hidrofbicas con los segmentos K. En algn caso se ha descrito actividad chaperona,
impidiendo la agregacin de protenas. Las deshidrinas tambin podran tener la
capacidaddeuninamolculasdeaguaqueasuvezpodrainfluirenlaproteccinde
enzimas, como por ejemplo la alfa amilasa durante estrs por fro, al mantener una
adecuada concentracin de agua a nivel local y reduciendo con ello los daos
provocados por los cristales de hielo durante la congelacin. Algunas deshidrinas
nucleares estn involucradas en la proteccin de la maquinaria de transcripcin
durante la desecacin asociada a la formacin de la semilla. Podran tener un papel
clave en este proceso y su abundancia estara directamente relacionada con la
viabilidadylongevidaddelasemilla.
RecientesestudioshandemostradoquelasdeshidrinasYnSKensuformafosforilada
pueden proteger al citoesqueleto de las clulas, asocindose con la red de
microfilamentosdeactina.
Otras deshidrinas podran presentar una funcin como antioxidantes debido a su
capacidadunirionesmetlicoslibres.EstoprevienedeunaexcesivaformacindeROS
(radicales libres de oxgeno). No obstante, a pesar de que sus funciones han sido
frecuentemente investigadas y revisadas en los ltimos aos, especialmente en
angiospermas,elmecanismoporelcuallasllevanacaboanestsinesclarecer.

Paracentrarnosenelpapeldelasdeshidrinasensituacindeestrshdricovamosa
utilizarelestudiorealizadoporIrinaIvanovaVaseva,IwonaAndersa,yUrsFellersobre
la expresin de las deshidrinas en la especie Trifolium repens ante situaciones de
privacindeagua.Lafinalidaddeesteestudioescompararlacantidaddedeshidrinas
enplantasqueseencontrabanprivadasdeaguaconaquellasqueseencontrabanen
unasituacinnormal,yladistribucindiferentedelasmismasenlaplanta.Setrabaj
con dos grupos de plantas, uno de ellos se utiliz como control y se mantuvo en
condicionesnormalesdetemperaturayfotoperiodo.Elotrogrupofuesometidoala
privacinparcialdelaguadisponibleduranteunperiododecatorcedas.
Acontinuacin,seprocedialaextraccindelmRNAquecodificaparalosdiferentes
tiposdedeshidrinasdeclulasdelarazdelashojasdelosdiferentesgrupos.Despus,
losfragmentosdemRNAobtenidosfueronsometidosaPCRcontranscriptasainversa
(RTPCR)conelfindeamplificarypurificardichassecuencias.

SeobservunaumentosignificativodelostranscritosdeestosmRNAenlasmuestras
delashojasyracesdeaquellasplantasquehabanestadosometidasacondicionesde
estrshdrico,locualindicaunaumentodelatranscripcindelosgenesresponsables
delaproduccindedeshidrinas.LostranscritosdeladeshidrinaY3SK2seencontraron
deformamuchomsabundanteenaquellosindividuossometidosalasequa,loque
sugierequepodrautilizarsecomomolculaindicadoradelestrshdrico.
En concreto, las deshidrinas de tipo YnSKn se encontraron de forma mucho ms
abundanteenlasplantasprivadasdeagua.
LatcnicadePCRcontranscriptasainversapermiticonocerlassecuenciasdeADNde
las diferentes clases de deshidrinas, demostrando que estn codificadas por muy
pocosgenes,quesufrenunprocesodesplicingalternativo.Deestaformasepueden
producirmltiplesdeshidrinasdiferentesapartirdeunsologen.

En esta imagen se muestran los resultados de la RTPCR (reaccin en cadena de la

polimerasa con transcriptasa inversa), para los transcritos de la deshidrina KS en las
muestrasncontrol(C)yenlasmuestrassometidasaestrshdrico(D)paralashojas(L)
y para las races (R). Los niveles ms altos de los transcritos se han detectado en las
hojassecundarias(DL2)ylasraces(DR)delasmuestrassometidasaestrshdrico.

EstagrficaindicaelcocienteentrelostranscritosobtenidosparaladeshidrinaKS224
con los transcritos obtenidos para las protenas de actina y tubulina, en hojas (L) y
races(R)deplantassometidasaestrshdricoydeplantasencondicionesnormales.
Losdatospresentadosdemuestranquelasdeshidrinasjueganunpapelimportanteen
la adaptacin del las plantas a condiciones de estrs hdrico. Existe un aumento
significativodelacantidaddedeshidrinasenaquellasplantassometidasalaprivacin
deagua,encomparacinaaquellasqueseencuentranencondicionesnormalesenlas
quelaexpresindeestasprotenasesmsbienescasa.Losrganosenlosqueseha
detectado una mayor acumulacin de deshidrinas ante situaciones de estrs hdrico
sonlasracesylashojasjvenes.