VI Curso de Microbiologa Clnica

2007-Resistencia Bacteriana:
Desafos para el Microbilogo
Diagnstico de Bacilos Gram negativo
fastidiosos : Grupo HACEK

T.M. M.Eugenia Valenzuela Montero

2007

BACILOS NEGATIVOS
Aerobios

Anaerobios
Bacteroides
Fusobacterium
Prevotella

Facultativos

BNF
Fastidiosos

Microaerfilos
Campylobacter

BFG

BNF

Bordetella
Legionella Pseudomonas
Brucella Acinetobacter
Burkholderia
Otros
Chryseobacteri
a Myroides
Otros

Ox (-)

Enterobacterias

Ox (+)
Aeromonas, Vibrio,
Plesiomonas

Fastidiosos

HAC EK

BACILOS NEGATIVOS FACULTATIVOS

Fermentadores de glucosa sobre medios
TSI

OF

NF

F
Ox (-)

Enterobacterias

Ox (+)
Aeromonas, Vibrio,
Plesiomonas

Fastidiosos
Grupo HACEK,
Otros (1-2 gotas de
suero de conejo estril)

BACILOS GRAM NEGATIVOS

ENTEROBACTERIAS

68 78%

BACILOS NO FERMENTADORES

8-20%

BACILOS FASTIDIOSOS

8-15%

ANAEROBIOS

5- 10%

MICROAERFILOS

1- 5%

INUSUALES

<1%

FASTIDIOSOS
H.aemophilus

Dysgonomonas

A.ctinobacillus spp

Eikenella corrodens

Bordetella
Simonsiella
Legionella

Kingella spp,

Brucella

Cardiobacterium hominis

Pasteurella spp
Capnocytophaga spp

Suttonella spp
Streptobacillus spp
CDC EF- 4a y 4b

Moraxella
Otros
Abiotrophia
Granulicatella
Leuconostoc
Pediococcus
Arcanobacterium
Corynebacterium

BACILOS NEGATIVOS FASTIDIOSOS

PASTEURELLACEAE
FLAVOBACTERIACEAE
NEISSERIACEAE

Actinobacillus
Pasteurella
Haemophilus

Capnocytophaga
Eikenella corrodens
kingella spp
C.violaceum
EF-4a

CARDIOBACTERIACEAE

C.hominis
S.indologenes

MYCOPLASMACETALES

S.moniliformis

BACILOS NEGATIVOS FASTIDIOSOS grupo HACEK

Habitan en la cavidad oral del hombre y los animales
Capaces de causar endocarditis, cuyos sntomas se caracterizan
por ser de larga duracin (2 semanas a 6 meses)

La endocarditis infecciosa es una infeccin de las

vlvulas del corazn
Endocarditis infecciosa

Kingella

Haemophilus

Eikenella corrodens
Actinobacillus

Cardiobacterium hominis

BACILOS NEGATIVOS FASTIDIOSOS grupo HACEK

AGENTES CAUSALES
-S.viridans : 50-60% de
endocarditis (S. sanguis,
S. mutans, S. milleri)
-S.aureus: 30% de
endocarditis, vlvulas
sanas o previamente
enfermas

FACTORES
PREDISPONENTES
Enfermedad reumtica
Prolapso de la mitral
Valvulopata
degenerativa calcrea
Vlvula artica bicspide
Prtesis valvulares
Transplantes vasculares
Otros

-Enterococo
-Grupo HACEK
Otras bacterias, hongos

VIAS DE ENTRADA
Infecciones diversas (oido medio)
Procedimientos quirrgicos o dentales
Contaminacin sanguinea directa

R
O
B
A
L

O
I
R
O
T
A

BACILOS NEGATIVOS FASTIDIOSOS GRUPO

HACEK
CARACTERISTICAS EN EL LABORATORIO
BACILOS O COCOBACILOS FACULTATIVOS
NUTRICIONALMENTE FASTIDIOSOS
INCUBACION EN ATMOSFERA DE CO2
GENERALMENTE NO CRECEN EN MAC CONKEY
SON INMVILES
TEMPERATURA PTIMA 30-35C
REACCIONES BIOQUMICAS LENTAS
GENERALMENTE RESISTENTES A VANCOMICINA

LABORATORIO : MEDIOS DE CULTIVO

AS/H

CHO/isov
Mac Conkey

MEV/ISP

FAMILIA: PASTEURELLACEAE

H.influenzae
H.aegyptus
H.haemolyticus
H.parainfluenzae
H.parahaemolyticus
H.paraphrophilus
H.segnis
H.ducreyi

H.aphrophilus

Haemophilus
Actinobacillus
Pasteurella

19 especies solo 9 especies del gnero son humanas.

FACTOR V ( dinucleotido de nicotidamina y adenina)
FACTOR X (lo proporciona la hemina)

Con excepcin del H. aphrophilus Y ducreyi. Todos los

Haemophilus requieren factor V
Las especies de Haemophilus dependiente del factor V
no crecen generalmente en agar-sangre de rutina.

Todos los Haemophilus reducen los nitratos a

nitritos y producen fosfatasa alkalina

Haemophilus aphrophilus
HABITAT: membranas mucosas del Tracto respiratorio
( placa dental y gingival)

FACTORES DE RIESGO: Traumatismo o infeccin

orofarngea, cirugia dental, en personas con
cardiopatas (vlvula mitral)

IMPORTANCIA CLNICA:Asociado a endocarditis

subaguda, abscesos cerebrales, artritis osteomelitis e
infecciones de cabeza y cuello

Conf. 10 : hemocultivos , abscesos cerebrales

LABORATORIO: Haemophilus.

CULTIVO: requiere hemina, CO2 y humedad

FACTORES X Y V
H.influenzae

XV

Crece solo en el disco con ambos factores

H.parainfluenzae

XV

Crece alrededor de ambos factores y del disco v

LABORATORIO : H.aphrophilus 10: hemocultivos ,

abscesos cerebrales
Crece en AS

NO NECESITA FACTORES
PARA CRECER

FAMILIA: PASTEURELLACEAE
ACTINOBACILLUS
Haemophilus
Pasteurella

Actinobacillus:

14

6 especies :
A.ureae : Infeccin del T.resp., hemo,
dialisados (3 : LCR y T.Resp )
A.hominis :Infec. T.resp. en pacientes
inmunosuprimidos, bacteremias . (1 : hemo)
A. Actinomycetemcomitans : 10 ; 8 hemoc
A.lignieresii : actinobacillosis en ganado
A.suis : enf.en caballos y cerdos
A.equuli : enf.en caballos y cerdos

Actinobacillus actinomycetemcomitans
HABITAT: forma parte de la flora saprfita de la cavidad
bucal y nasofaringea
Es el agente ms frecuente de endocarditis del grupo
HACEK
Especie de mayor importancia en cavidad bucal,
implicada particularmente en formas agresivas de
enfermedad periodontal en adolescentes (periodontitis
juvenil localizada),
Oportunista aislado tambin desde osteomielitis y
abscesos cerebrales
Se asocia con Actinomyces especialmente en
infecciones de tejidos blandos
SUSCEPTIBILIDAD : Sensible a cefalosporinas y
tetraciclinas y es Resistente a Penicilina

A.actinomycetemcomitans :10 conf. 8 hemocultivos

5 serotipos basados en polisacaridos de
superficie (PCR). Los serotipos ms comunes son
a, b y c
Serotipo b : periodontitis, bacteremia, endocarditis y
produccin de beta lactamasa

El serotipo c :se asocia

con infecciones
extraorales.

Se asocia con Actinomyces especialmente en infecciones

de tejidos blandos

LABORATORIO: Actinobacillus
GRAM: Cocobacilo a
cocoide, tincin bipolar,
solos en pares o cadenas
PAS: enriquecida y CO2
Capnfilo, colonias crece mejor
en AS/ hemina y agar chocolate
con vitox e incubado en CO2 o
medios con suero y azucares.
Son resistentes a vancomicina

A.actinomycetemcomitans
Colonias de cultivos viejos

FAMILIA : CARDIOBACTERIACEAE
Cardiobacterium.hominis
Suttonella indologenes

CARDIOBACTERIUM HOMINIS
HABITAT: Tracto respiratorio superior y posiblemente
en tracto gastrointestinal y genitourinario.
IMPORTANCIA CLNICA : endocarditis tpica del grupo
HACEK
FACTORES DE RIESGO:
Dao valvular especialmente la artica
Antecedentes de procesos dentarios
SUSCEPTIBILIDAD:
Susceptible a penicilina, amoxicilina, amixicilinacido clavulnico, cefalosporinas, aminoglucsidos,
tetraciclinas.
Resistente a Clindamicina y Eritromicina

Cardiobacterium hominis

GRAM: bacilos negativos solos o en pares o en forma de

rosetas que presentan bulbos en la punta, a menudo se
tien en forma irregular. El pleomorfismo desaparece
cuando est presente el extracto de levaduras en los
medios
COLONIAS: Crecen lentas 48h o ms son circulares,
opacas, son capnfilas

FAMILIA NEISSERIACEAE :

Eikenella corrodens
kingella spp
C.violaceum
EF-4a

EIKENELLA CORRODENS
HABITAT:cavidad oral de humanos y algunos animales y
T. Gastrointestinal, particularmente patgeno para
animales de laboratorio.
IMPORTANCIA CLNICA : endocarditis ( infecciones
por prtesis valvulares o drogadictos),
infecciones pleuropulmonares y abdominales, e
infecciones de heridas por mordeduras de animales
CRECIMIENTO: En AS con hemina o medio lquido con
concentraciones de 5 a 25 mg de hemina/litro de medio y
agar 0.2%, como medio selectivo agregar 5 ug/ml de
clindamicina
SUSCEPTIBILIDAD: Sensible: a los Beta-lactmicos,
tetraciclinas y quinolonas y es Resistente a
clindamicina

Eikenella corrodens

Eikenella corrodens

COLONIA : requiere
hemina, huele a
hipoclorito y
amarillenta en
cultivos viejos

E. corrodens es un microorganismo particularmente

virulento en animales de laboratorio

FAMILIA NEISSERIACEAE

kingella spp
Eikenella corrodens
C.violaceum
EF-4a

K.kingae
K.oralis
K.denitrificans
K.potus

KINGELLA
HABITAT:puede colonizar el T.respiratorio en nios.
IMPORTANCIA CLNICA:

K.kingae: inf.de tejidos blandos, endocarditis,

septicemia, keratitis e inf.del SNC. Muestra especial
predileccin por los nios, (6 m a 2 a)
K.denitrificans: endocarditis y enfermedades
granulomatosas en pacientes con SIDA
K.oralis: periodontitis
K.potus : aislada desde mordeduras de perros y gatos
SUSCEPTIBILIDAD: Sensible: a beta lactmico,
tetraciclina, quinolonas.
Resistente: a Clindamicina y Vancomicina.

KINGELLA

Kingella kingae :13 L.articular 8,hemocultivo 5

Nios desde
6m a 2 aos

BETA HEMLISIS

CAPNOCYTOPHAGA
FAMILIA :FLAVOBACTERIACEAE

CAPNOCYTOPHAGA
7 ESPECIES
C.ochracea
C.haemolytica
C. granulosa
C.gingivalis
C.sputigena

cavidad oral en humanos, periodontitis,

endocarditis osteomelitis, abscesos,
peritonitis y keratitis
Periodontitis

C.canimorsus : cavidad oral en animales

C.cynodegmi

ISP: 17

La mayoria de hemocultivo y abscesos

CAPNOCYTOPHAGA
HABITAT: Placa dental subgingival cavidad
oral de perros y gatos
MICROSCOPIA: Muestra un aspecto fusiforme, no
presentar flagelos pero tiene capacidad deslizante
sobre las superficies
C. FISIOLGICAS Y MACROSCPICAS : es capnfila de
lento desarrollo 2-3 dias, colonias granulosas a veces
con visos y de bordes difuso, al arrastrar con asa se
observa un color amarillo. Se desarrollan tanto en
anaerobiosis como aerobiosis

CAPNOCYTOPHAGA
IMPORTANCIA CLNICA
Patgenas oportunistas, bacterias periodontpatogenas,
asociadas a otras bacterias, encargadas de crear las
condiciones ideales en el tejido periodontal para que
acten P. gingivalis y A. actinomycetemcomitans, y han
sido aisladas en un gran nmero de infecciones en
pacientes inmunocomprometidos

SUSCEPTIBILIDAD: sensible a clindamicina y

tetraciclina y fluoroquinolonas y resistente a
vancomicina y los aminoglucsidos

CAPNOCYTOPHAGA
GRAM:

Capnocytophaga

Colonias de bordes difuso

granulosa a veces con visos

tiene capacidad deslizante

sobre las superficies

MEDIOS DE CULTIVO PRUEBAS

BIOQUMICAS Y REACTIVOS
UTILIZADOS EN LA IDENTIFICACIN
DE BACILOS NEGATIVOS
FASTIDIOSOS

CATALASA

TABLAS C O N

OXIDASA
N,N,N,N-tetramethylparaphenylendiamine
Sigma 25g T-3134

NITRATASA

CATALASA EN LMINA
REACTIVO: Agua oxigenada pura (perhydrol
al 30%) con Tween 80

a. Solucin stock de Tween 80

Tween 80.10ml
H2O 90ml
b. Solucin H2O2 al 15%
H2O2 al 30%..2ml
Sol.Stock Tween 802ml

NITRATASA

Griess-ILosvays**
cepa

Cataliza la reduccion
de nitrato a nitrito

+
Polvos de zinc

NO

*Indol-nitrato BBL 11298 100g

**Merck 500 ml (1.09023.0500)

NO2
N2
MEV/ISP

TABLAS C O N

N ORGANISMO

Fact Urea In Or
X V
dol niti
na

Li
si
na

Argi Es
nina culi Glu Lac OF
na

Actinobacillus spp

- + - - -

E. corrodens

- - - + +

Kingella spp

- - - - -

- + -/+ + - - - - - - - -

+
Pasteurella spp

Haemophilus
C.sputigena

ORGANISMO

C.hominis

Kingella spp

S.indologenes

Or
Fact Urea Indol niti
X V
na

Capnocytophaga spp
S.indologenes

Li
si
na

Argi Es
nina culi
na

INDOL

+ -

R. ehrlich

p-dimethylaminocinnamaldehyde
Sigma 1g D-4506
MEV/ISP

UREA
disco

Christensen

MEV/ISP

DECARBOXILACIN O HIDRLISIS DE aa
MEDIO BASE DE MOELLER

Arginina

Arginina

Lisina

Lisina

MEV/ISP

H. ESCULINA
-

+
-

Citrato frrico amoniacal

MEV/ISP

FACTORES X Y V

H.parainfluenzae

XV

H.influenzae

Crece alrededor de ambos

factores y del disco v

XV

V
V
X

Crece solo en el disco con

ambos factores
XV

MEV/ISP

TEST DE SUSCEPTIBILIDAD POR MTODO DE MICRODILUCIN EN

CALDO PARA BACTERIAS FASTIDIOSAS E INFRECUENTES.
Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI /NCCLS ) 2006

CONDICIONES DE LA PRUEBA
MEDIO : Caldo Mueller Hinton ajustado con cationes y
sangre desfibrinada de caballo (2.5-5% v/v)
INCULO: Suspensin a Mac Farland 0.5
INCUBACIN :35C CO2 24-48 h
CONTROL DE CALIDAD: Streptococcus pneumoniae
ATCC 49619 E.coli ATCC 35218

AGENTES ANTIMICROBIANOS
Ceftriaxona o cefotaxima
Ampicilina
Amoxicilina cido clavulnico
Imipenem
Ciprofloxacino o levofloxacin
Trimethoprim-sulfamethoxazole
Betalactamasa : Nitrocefin
Positiva : R a penicilina, ampicilina y amoxicilina para
Haemophilus M.catarrhalis, C.hominis, Eikenella, Kingella y
Pasteurella

Aislamiento de bacterias Fastidiosas / Inusuales en Lab

Fastidiosos 2002-2006
Brucella
H. Aphrophilus

10

Actinobacillus spp

14

Cardiobacterium hominis

Eikenella corrodens

11

Kingella spp,

13

Capnocytophaga spp

15

S. moniliformis

Pasteurella spp

50

CDC EF- 4a y 4b

14

P.phenylpyruvicus

Pediococcus

Leuconostoc

Weissella

Rothia mucilaginosa 4
Arcanobacterium 20

LABORATORIOS QUE HAN ENVIADO CEPAS DE BACILOS

NEGATIVO AL LAB. DE FASTIDIOSOS DEL ISP
U.Catlica

Fusat de Rancagua

H.Felix Bulnes

C.Cordillera

H. R del Rio

H.Militar

Sotero del Rio

H. S.P. Coquimbo

Van Buren Vpso

H.San Antonio

H. Lucio Crdova
H. Salvador

H.San Bernardo

C.Las Condes
E.L.S.A
H.Pto Montt
H.San J.de Dios
H.calvo Mackenna
H.Curic
H.San Borja Arriaran

H.Gustavo Frike
H.Juan Noe Arica
H.Concepcin

H.Quilpu
H.Padre Hurtado 3
H.La Serena
Indisalab
H.Vallenar
H.Valdivia
H.Rancagua
H.Chillan

Clinica Reaca

H.Clinico Hoseg
Vpso

U.C.Temuco

C. Indisa

H.Angol

H.Fach

H.INERT y CT

H ae

mop
h

Actinobacillus

Muchas Gracias
evalenzuela@ispch.cl

ilus

Kingella

ke
i
E

la
l
ne

C.hominis