Automatizacin en

Urianlisis
Prof. Boris Valdivia V.
UNMSM - 2016

Automatizacin en el Laboratorio Clnico

La automatizacin en el laboratorio clnico implica fundamentalmente un gran ahorro
de tiempo; en muchos casos tambin una disminucin en gastos de reactivos y, por
ltimo, evitar mucho de los errores humanos que pueden cometerse en el procesado
de las muestras
Los sistemas automatizados, permiten con una mnima manipulacin, realizar el
proceso y el anlisis de la muestra, as como la emisin y valoracin del resultado.

Propsito del diseo

1. Aumento de
productividad
2. Mejora en el Dx y
seguimiento de
enfermedades

Funcin del Analizador

1. Procesar con mnima
intervencin humana
2. Mejor performance del
mtodo
3. Disminuir la carga de
procesos

Automatizacin del anlisis de orina

El objetivo final de la automatizacin es mejorar la reproducibilidad y la
discriminacin de color mientras se aumenta la productividad y la
estandarizacin para informar los resultados del anlisis de orina
Se dispone actualmente de varios instrumentos automatizados para
estandarizar el procesamiento de las muestras, analizar las tiras reactivas,
realizar el anlisis de sedimento urinario, informar los resultados con calidad
uniforme y reducir el tiempo de respuesta.
Otras mejoras incluyen interfaz laboratorial, cdigo de barras, alarmas,
almacenamiento de resultados de pacientes y controles de calidad,
limpieza y mantenimientos mnimos

Estos instrumentos incluyen: lectores de tiras individuales, analizadores semi

automticos, analizadores qumicos totalmente automatizados, analizadores
de clulas automatizados y sistemas completamente automatizados

Automatizacin del anlisis de orina

El anlisis de orina es una herramienta de mucho valor

en para diagnosticar y monitorear, enfermedades del
tracto urinario y renal.

Tpicamente es una prueba que requiere una cantidad

media o alta de muestra para el anlisis bioqumico de
la muestra. Representa el 30% de todas las muestras
recividas
El anlisis rutinario consiste en examen macroscpico,
anlisis qumico y revisin de sedimento urinario

 Los anlisis qumicos a menudo se realizan con tiras reactivas que

se introducen en la muestra de orina. Los cambios de color son
ledos manualmente o por los lectores de tira utilizando
fotometra de reflectancia. Alternativamente, la mayora de los
elementos se pueden cuantificar con precisin mediante
Autoanalizadores qumicos, sondas de pH y osmmetros.
El examen microscpico se realiza manualmente en el sedimento
de una muestra de orina centrifugada. Este proceso es tedioso y
consume mucho tiempo.

Requiere de un tecnlogo mdico con excelente capacitacin

para la interpretacin y pueden estar sujetos a errores debido a
la perdida de pellet durante la decantacin y degradacin de
elementos formados durante la centrifugacin o el
almacenamiento de la muestra.

 Se requiere de aprox 12 15 mL
Centrifugar a 1500 rpm por 5 min
El pellet se resuspende en 250 uL de orina
Se lee aprox 1 gota( 50 uL ) y se lee en
aumento de 40X para la cuantificacin de
elementos
Existe un hemocitmetro que rara vez es
usado
Requiere de aprox 6 min, versus lo
automatizado que requiere menos de 1
min.
Se requiere de menos personal y el tiempo
de repuesta es mucho menor

Se pueden combinar con sistemas

automtizados para lectura de tiras
reactivas bioqumicas

 Las directrices para el anlisis de orina publicadas por el CLSI, establece que cada
laboratorio debe decidir cundo realizan el examen microscpico del sedimento de
orina basado en su poblacin de pacientes.
Las consideraciones incluyen protocolos de laboratorio y preferencia del mdico en
cuanto a poblaciones especficas de pacientes.
Incluyen examen microscpico manual en todas las muestras de orina de rutina, lo que
no es prctico para la mayora de laboratorios debido a la considerable carga de
trabajo que esto implica. Por lo tanto, algunos laboratorios han adaptado un
procedimiento de dos etapas, utilizando a las tiras reactivas como un tamizaje para
excluir las muestras de orina del posterior anlisis microscpico manual.

Los estudios que compararon el anlisis automatizado de orina completa a este

enfoque de dos pasos han informado de que el enfoque automatizado completo
produjo mejoras en la sensibilidad (98% vs. 91%) y valor predictivo negativo (96.5% frente
al 66,5%) para un hallazgo de sedimento de orina patolgica, por lo tanto, hay una
tendencia hacia la automatizacin del anlisis de orina rutinario no slo en los grandes
laboratorios referenciales, sino tambin, en los mas pequeos, debido a la mejora en la
estandarizacin, ahorro de costos y tiempo,

Tecnologas de
Anlisis de Orina

Tiras reactivas
bioqumicas
Las ms tiles por su rapidez, son bandas
de papel en las que llevan adosados al
menos 10 parmetros bioqumicos
Estas cintas pueden ser utilizadas en
forma manual, semi - automatizada y
completamente automatizada.
Entregan resultados semi cuantitativos

Incluyen: pH, densidad, cetonas,

urobilingeno, sangre, hemoglobina,
nitritos, Ac. Ascorbico, protenas,
glucosa, leucocitos, microalbmina, etc
Las tonalidades de color no siempre
concuerdan con la escala de colores
del inserto. Es subjetivo

Bioqumica semiautomatizada
El operador introduce
una tira reactiva en una
muestra de orina
Posteriormente
introduce la tira
individual en la ranura
del equipo
El equipo entrega un
informe impreso de la
lectura de todos los
parmetros
bioqumicos.

De esta manera queda

eliminado la
subjetividad del
operador

Equipo automatizado

1. Son equipos
autnomos en los que
el operador solo
coloca el tubo con
orina en el rack

2. Identificados con
cdigos de barra o
con la identificacin
respectiva del
laboratorio

3. El equipo dispensa
cantidades preestablecidas para
cada proceso de
anlisis que deba
realizar

4. El equipo otorga
una tira reactiva a
cada muestra

5. El equipo entrega
un informe de lectura
para cada muestra
analizada

 Cada sistema utiliza una tecnologa diferente para clasificar y

cuantificar las partculas de sedimento de orina y ofrece una
mejora en la estandarizacin sobre la microscopa manual al
eliminar la potencial variabilidad entre operadores distintos durante
la interpretacin de diapositivas.

La calidad de los resultados tambin se puede mejorar ya que las

muestras se pueden procesar de manera ms eficiente y por lo
tanto, garantiza una entrega oportuna de resultados,
disminuyendo la probabilidad de la lisis celular, la contaminacin
microbiana, o precipitacin a partir de un almacenamiento
prolongado.
Cada mtodo se describe a continuacin. Sus ventajas y
desventajas se resumen en la siguiente tabla

Citometra de Flujo
Sysmex ofreci previamente el sistema UF-100 que emplea la citometra de flujo
y fluorforos para clasificar las clulas y cilindros en la orina no centrifugada
marcado con fluorforos en funcin de su fluorescencia, el tamao, la
impedancia, y la luz dispersada.
En 2007, se introdujo UF-1000i, aprobada por la FDA. Una nueva generacin de
analizador de partculas que proporciona el recuento de glbulos blancos,
glbulos rojos, clulas epiteliales y bacterias con alta precisin. Sensibilidad
para cilindros patolgicos, cristales, levadura, esperma, moco y clulas
anormales tambin se incrementan, pero la especificidad, sigue siendo
insuficiente para diferenciar estos elementos, que, por tanto, debe ser
confirmada por microscopa manual.
Los usuarios pueden especificar criterios y umbrales para los resultados que se
encuentran fuera de rango segn la microscopa manual. Los resultados se
muestran como diagramas de dispersin que se puede guardar y visualizar por
el operador.

Digitalizacin de imagen con

reconocimiento de partculas
El Iris iQ200 de Iris Diagnostics, utiliza una imagen digital y auto-reconocimiento
de partculas (APRTM) para clasificar y cuantificar las partculas de orina en orina
no centrifugada basndose en el tamao y forma.
El analizador de imgenes clasifica en categoras que incluyen RBC, WBC,
leucocitos agregados, cilindros hialinos, cilindros no clasificados, clula
epiteliales, CE no escamosas, bacterias, levaduras, cristales, moco, esperma, y
sustancias amorfas.
Las imgenes digitales de las partculas se recogen, aprox en 500 cuadros por
muestra, y se pueden ver y reclasificarse por el operador, potencialmente sin la
necesidad de microscopa manual.
Sin embargo, muchos laboratorios an descartan muestras con resultados
patolgicos por una microscopa manual secundaria. Dado que la muestra no se
tie, la aparicin de componentes difiere de la observada por microscopa de
contraste de fase manual, que requiere considerable entrenamiento tcnico

PROCESO DE ANALISIS
Extraccin de caractersticas

PEQUEO

GRANDE

MAYOR
CONTRASTE

REDONDO

CUADRADO
MENOR
CONTRASTE

HIALINO

GRANULAR

CRISTALES OXALATO DE CALCIO

En individuos sanos (en orinas con

pH cido o neutro)
Enfermedades renales crnicas
severas

GLOBULOS ROJOS

Presentes en:
Calculos renales
Trauma renal

Necrosis tubular aguda

Nefrotoxicos
Tumores
Infecciones en el tracto urinario
Dao glomerular

Microscopa automatizada con

digitalizacin de imgenes
Un novedoso analizador de sedimentos de orina automatizado llamado sediMAX (77 Elektronika,
distribuido en Europa y Asia por A. Menarini Diagnostics) y se ha presentado en comparacin con
la microscopa manual. El instrumento produce una monocapa de sedimento de orina por
centrifugacin en una cubeta especial.
El sedimento se analiz mediante un microscopio de campo brillante y la cmara digital para
capturar y clasificar 15 imgenes de partculas basndose en el tamao y forma, usando un
software de procesamiento de imgenes.

El fabricante se esfuerza por mejorar continuamente el software y su rendimiento, y estas

actualizaciones de software se ponen a disposicin de los equipos existentes. Las imgenes
digitales pueden ser vistas por el operador con capacidad de zoom
En general, en comparacin con la microscopa manual de instrumento tuvo un buen desempeo
para la deteccin de los glbulos rojos y glbulos blancos (> 80% de sensibilidad), pero no as para
los cilindros patolgicos y clulas epiteliales no escamosas (~ 50% de sensibilidad).

Tamizaje para Urocultivos

Sensitive and specific methods for detecting bacteria are particularly valuable in
decreasing the number of samples sent to the microbiology lab for culture to confirm the
diagnosis of urinary tract infections (UTIs).
Up to 70% of specimens submitted to a typical hospital lab are negative, constituting a
large resource utilization that could potentially be reduced.

One study using the Sysmex UF-100 and a bacterial cutoff of 3,000/L for screening urine
samples demonstrated a sensitivity of 94.4% and specificity of 73.4% for subsequent culture
positivity (>105 organisms/mL) with a 0.012% false negative rate.
Thus it was possible to eliminate 58.2% of samples sent for culture. Similar performance has
been demonstrated for the UF-1000i, Iris iQ200, and SediMAX.
Cada laboratorio deber establecer sus cohortes bacterianos que indiquen un posterior
urocultivo , y esto puede variar dependiendo de la poblacin a ser evaluada.

Conclusiones .
EL anlisis de orina automatizado ofrece las ventajas de comodidad, eficacia y
una mayor sensibilidad para la deteccin de anomalas de las vas urinarias y
renales.
El verdadero valor puede estar en la capacidad de detectar de manera
eficiente e informar muestras de orina que carecen de hallazgos patolgicos.

En nuestra experiencia en un gran laboratorio clnico, hasta el 70% de las

muestras de orina pueden ser evaluadas y fueron informadas sin la necesidad
de una microscopa manual de confirmacin, ahorrando una cantidad
considerable de tiempo y trabajo.
Todos los analizadores automatizados de sedimentos examinados tienen
caractersticas de rendimiento con mejora en la estandarizacin sobre la
microscopa manual. El sistema que un laboratorio escoja puede basarse en la
preferencia individual por las ventajas que cada uno tiene en particular.