Universidad de la Amazonia

Facultad de Ciencias Bsicas

Programa de Qumica

LOGO PROGRAMA DE
QUMICA

PRCTICA N2
DETERMINACIN DE LOS VALORES DE pKa DE UN AMINOCIDO
1. OBJETIVOS
1.1 Determinar el pKa de un aminocido mediante el mtodo de titulacin por
neutralizacin cido-base.
1.2 Comparar los valores de pKa experimentales, con los valores tericos para del
aminocido en estudio
2. FUNDAMENTO TERTICO
Las protenas son macromolculas compuestas por unidades ms pequeas conocidas
como aminocidos. En las protenas se encuentra bsicamente veinte aminocidos
diferentes, los cuales contienen un grupo carboxilo y un grupo amino unidos al mismo tomo
de carbono (carbono ) estos aminocidos difieren unos de otros solo por la naturaleza de
sus cadenas laterales, o grupos R que varan tanto en estructura, como en tamao y carga
elctrica e influyen en la solubilidad en agua.
Los grupos carboxilo y amino de los aminocidos funcionan como cidos y bases dbiles,
respectivamente, y como tales, se ionizan cuando estn en solucin. Cada grupo tiene un
pK, el cual corresponde al pH en que se encuentra la misma cantidad de la forma ionizada
que de la ionizada.

Los aminocidos tienen al menos dos pK, por lo que tienen mayor capacidad
amortiguadora, ya que presentan de tres a cuatro formas inicas diferentes. Cuando la
forma inica tiene una carga neta de cero se dice que se encuentra en su punto isoelctrico
o pI. Al variar de pH, cambia la proporcin de las formas inicas y es posible ver la
capacidad amortiguadora de los aminocidos. Cada aminocido tiene sus propio pK, puesto
que presenta diferentes sustituyentes en sus cadenas laterales. Mediante una titulacin, se
puede determinar el pK de un aminocido.
3. TRABAJO PREVIO

Universidad de la Amazonia
Facultad de Ciencias Bsicas
Programa de Qumica

LOGO PROGRAMA DE
QUMICA

3.1 Qu es una solucin amortiguadora y para qu se utiliza?

3.2 Qu representa el pKa de un grupo carboxilo o de un grupo amino?
3.3 Indique si los aminocidos pueden usarse como amortiguadores y explique en
qu casos?
3.4 Cmo se determina el punto isoelctrico de un aminocido?
4. ELEMENTOS NECESARIOS PARA LA PRACTICA
4.1 Materiales y equipos (Por grupo)
1 Vaso de precipitado de 250 ml
1 Erlenmeyer de 250ml
1 Pipeta aforada de 25 mL
1 Pipeteador
1 bureta
1 Soporte universal y pinzas para bureta
1 vaso de precipitados de 50 mL
1 vaso de precipitados de 100 mL
1 Potencimetro
1 Agitador magntico
1 Plancha de agitacin y magneto.
4.2 Reactivos (Para todo el curso)
Cantidad
30 mL

Reactivo
NaOH
Fenilalanina

30 mL

Cisteina

30 mL

Leucina

30 mL

Isoleucina

20 mL

cido HCl

5. DESARROLLO EXPERIMENTAL
5.1 Valoracin de los aminocidos

Descripcin
0.3N
0.06 M (en
0.05 M)
0.06 M (en
0.05 M)
0.06 M (en
0.05 M)
0.06 M (en
0.05 M)
concentrado

HCl
HCl
HCl
HCl

Universidad de la Amazonia
Facultad de Ciencias Bsicas
Programa de Qumica

LOGO PROGRAMA DE
QUMICA

En un Erlenmeyer de 250 mL, colocar una alcuota de 25 mL de solucin de un aminocido.

Por otra parte, llenar la bureta con solucin 0.3N de NaOH y calibrar el potencimetro con
las soluciones amortiguadoras: calibrar con amortiguador de referencia pH = 7 y con
amortiguador de ajuste pH=4.

Colocar la solucin del aminocido sobre una plancha de agitacin con su

respectivo magneto.
Introducir el electrodo limpio en la solucin de aminocido y anotar la lectura de pH. Se
debe evitar golpear el electrodo con el agitador magntico. Medir el pH inicial de la solucin
del aminocido.
Iniciar la titulacin adicionando volmenes de 0.5 mL de NaOH 0.3 N y tomar la lectura de
pH en cada adicin. Continuar hasta alcanzar el pH de la solucin de NaOH
6.

RESULTADOS

6.1 Elaborar un cuadro de dos columnas donde la primera especifique el volumen de

NaOH aadido y la segunda, el valor de pH para cada volumen adicionado. A partir
de este cuadro, elaborar una grfica de volumen de NaOH aadido versus pH.
6.2 A partir de la grfica anterior, obtener los valores de pKa para el aminocido y
comparar con los valores reportados en la bibliografa (tenga en cuenta que algunos
aminocidos tienen solo 2 valores de pKa y otros por el contrario tienen 3).
6.3 Escribir las formas inicas en las que existe el aminocido en cada etapa de la
titulacin.
7. PREGUNTAS
6.1 Cules son los grupos funcionales del aminocido que se neutralizan en la
titulacin de un aminocido?
6.2 Partiendo de la especie totalmente protonada, escriba las reacciones de
disociacin que se presentan durante la titulacin con una base fuerte, de los
aminocidos trabajados?
6.3 Cul es el fundamento del potencimetro?

8. BIBLIOGRAFIA
Day, R. A. y Underwood, A. L. 1989. Qumica Analtica Cuantitativa, 5 Edicin.
Editorial Precentice-Hall Hispanoamericana, Mxico.
Day, R. A. Jr., Underwood, A. L. 1989. Qumica Analtica Cuantitativa 5 Ed., PrenticeHall Hispanoamericana, Mxico.

Universidad de la Amazonia
Facultad de Ciencias Bsicas
Programa de Qumica

LOGO PROGRAMA DE
QUMICA

Harris, D. C. 1992 Anlisis Qumico Cuantitativo. Grupo Editorial Iberoamericana,

Mxico
Segel, I H. 1982. Calculos fe Bioqumica. Cmo resolver problemas matemticos de
bioqumica general. 2 Edicin, Editorial Acribia, Zaragoza, Espaa.
Mathews C. K., Van Holde K. E., Ahern K. G. 2003. Bioqumica. Addison-Wesley,
Espaa.
http://web.indtate.edu/thcme/mwking/amino-acids.html (Caractersticas qumicas de los
aminocidos)
http://www.bi.umist.ac.uk/user/mjfrbn/Buffers/Makebuf.asp (pagina de ayuda para hacer
amortiguadores).