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Universidad Catlica Boliviana

Procesos Unitarios I

Centrifugacin
1. Resea Histrica
La palabra centrfuga proviene de la palabra latina centrum que
significa centro y de la palabra fugare que significa huir. La centrfuga
est diseada para utilizar la fuerza centrfuga que se genera en los
movimientos de rotacin, con el fin de separar los elementos
constituyentes de una mezcla. Existe una amplia diversidad de
centrfugas para poder atender necesidades especficas de la industria y
la investigacin. Nos enfocaremos en analizar las centrfugas de pie que
normalmente utilizan los laboratorios clnicos y de salud pblica.

Principios de la Centrifugacin
Los principios bsicos de separacin es donde los slidos pesados se
asientan en el fondo de un recipiente horizontal, sin movimiento, al cabo
de cierto tiempo debido a la fuerza de gravedad.
La fuerza centrpeta es la que provoca la sedimentacin de las
partculas slidas pesadas a travs de una capa de lquido por una masa
de solidos porosos sostenidos en un recipiente perforado en rotacin.
El mtodo de separacin es similar a la separacin por gravedad. La
fuerza motriz es mayor al ser resultado de la rotacin del lquido: en el
caso de la sedimentacin, donde la fuerza motriz es el resultado entre
las diferencias en densidad de las partculas slidas y liquidas, la
separacin se logra con una fuerza del orden de 1000 a 20000 veces
mayor que la gravedad.

Centrifugacin

Las centrfugas son una aplicacin prctica de las leyes del


movimiento de Newton. Cuando un cuerpo de masa [m] gira alrededor
de un punto central [O], experimenta una fuerza [N] denominada
centrpeta en la direccin del eje de rotacin, de magnitud igual N =
-m2R, donde: [m] es la masa del cuerpo, [R] el radio de giro y la
velocidad angular. La centrfuga dispone de un eje giratorio sobre el cual
se encuentra montado un elemento denominado rotor, el cual dispone
de un sistema de alojamiento, donde se colocan las muestras.
La velocidad tangencial viene dada por la ecuacin Vt = R.

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Cuando el sistema gira a una velocidad de radianes por segundo,


las muestras "parecen sentir" una fuerza Fp, de la misma magnitud de
N, pero de sentido contrario. A esta fuerza comn mente se la conoce
como fuerza centrfuga. El esquema mostrado representa la situacin
mencionada y resalta un diagrama de cuerpo libre del concepto, un
diagrama de su aplicacin en la realidad y un diagrama del resultado
obtenido. Dicha fuerza acta sobre las partculas de la sustancia que
est siendo centrifugada, produciendo que la misma se separe como
resultado de las diferencias de densidad, de forma que en el fondo del
tubo estarn las partculas ms densas, las cuales se sedimentan en
perodos de tiempo ms cortos, mientras que las ms ligeras requieren
de mayores tiempos de centrifugacin para poder sedimentarse, y se
encuentran depositadas sobre las de mayor densidad. La relacin entre
la aceleracin centrfuga [2r] a un radio dado [r] y la fuerza de la
gravedad [g] se conoce como campo o fuerza centrfuga relativa [RCF].

El RCF es la herramienta que permite comparar rotores de diferentes


especificaciones, cuando se requieren efectos centrfugos equivalentes.

Centrifugacin

2. Generalidades
La centrifugacin es un mtodo por el cual se pueden separar slidos
de lquidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria. La
fuerza centrfuga es provista por una mquina llamada centrifugadora, la
cual imprime a la mezcla un movimiento de rotacin que origina
una fuerza que produce la sedimentacin de los slidos o de las
partculas de mayor densidad.

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Los componentes ms densos de la mezcla se desplazan fuera del eje


de rotacin de la centrfuga, mientras que los componentes menos
densos de la mezcla se desplazan hacia el eje de rotacin. De esta
manera los qumicos y bilogos pueden aumentar la fuerza de gravedad
efectiva en un tubo de ensayo para producir una precipitacin del
sedimento en la base del tubo de ensayo de manera ms rpida y
completa.

3. Para que se utiliza


La centrifugacin es una tcnica de sedimentacin, acelerada gracias
al uso de fuerza centrfuga. Se usa en al anlisis o a la separacin de
mezclas de partculas, clulas, orgnulos o molculas.
Centrifugacin analtica
Objetivo: medir las propiedades fsicas de las partculas que
sedimentan, tales como su coeficiente de sedimentacin o su masa
molecular. Especialmente en la variante ultra centrifugacin analtica.
Las molculas se observan mediante un sistema ptico durante la
centrifugacin. Los tubos de centrfuga deben ser de cuarzo para dejar
pasar la luz visible y ultravioleta. Rotor basculante, observacin en
vertical.

Centrifugacin preparativa
De uso ms comn. Objetivo: aislar partculas, clulas o molculas
para su anlisis o utilizacin posterior. En general, se emplea mayor
cantidad de muestra que en la analtica.

4. Tipos de Centrifugacin
Centrifugacin diferencial: Se basa en la diferencia en la
densidad de las molculas. Esta diferencia debe ser grande para que
sea observada al centrifugar. Las partculas que posean densidades
similares sedimentarn juntas. Este mtodo es inespecfico, por lo
que se usa como centrifugacin preparativa para separar
componentes
en
la
mezcla
(por
ejemplo,
para
separar mitocondrias de ncleos y membrana) pero no es til para
separar molculas.
Centrifugacin

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Centrifugacin isopcnica: Partculas con el mismo coeficiente


de sedimentacin se separan al usar medios de diferente densidad.
Se usa para la separacin de ADN con mucha frecuencia.

Centrifugacin zonal: Las partculas se separan por la diferencia


en la velocidad de sedimentacin a causa de la diferencia de masa de
cada una. La muestra se coloca encima de un gradiente de densidad
preformado. Por la fuerza centrfuga las partculas sedimentan a
distinta velocidad a travs del gradiente de densidad segn su masa.
Se debe tener en cuenta el tiempo de centrifugacin ya que si se
excede, todas las molculas podran sedimentar en el fondo del tubo
de ensayo.

Ultracentrifugacin: Permite estudiar las caractersticas de


sedimentacin
de
estructuras
subcelulares
(lisosomas, ribosomas y microsomas) y biomolculas. Utiliza rotores
(fijos o de columpio) y sistemas de monitoreo. Existen diferentes
maneras de monitorear la sedimentacin de las partculas en la
ultracentrifugacin,
el
ms
comn
de
ellos
mediante
luz ultravioleta o interferones.

Centrifugacin

5. Proceso
Centrifugacin diferencial

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Centrifugacin

Centrifugacin isopcnica

Centrifugacin zonal

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Procesos Unitarios I

Centrifugacin

Ultracentrifugacin

6. Principales Equipos
La centrifugacin en el laboratorio se realiza por medio de un
aparato llamado centrfuga, en el cual se colocan tubos de ensayo
que contienen la mezcla; la centrfuga gira con tal velocidad que
separa el slido y lo deposita en el fondo del tubo. Luego se
efecta una filtracin o una decantacin. Este procedimiento, es

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muy til cuando el slido que est disuelto en el lquido es muy


fino y no sedimenta.

7. Frmulas Matemticas
o Frmula para hallar la fuerza centrifuga
FCR=

F c ( m. 2 . r) 2 . r
=
=
Fg
m. g
g

o Frmula para hallar la velocidad


V 2=

FCR . g
r .4 . 2

o Frmula para hallar la velocidad angular


=2 . v
o Aceleracin Centrifuga
Ec =2 . r
o Coeficiente de Centrifugacin
ln
K=

r max
r min

( )
2

10 13
3600

[ ( )] (

K=253,300 ln

Centrifugacin

o Radio de la Zona Neutra


A r 21 B r 22
2
r n=
A B

8. Ejemplos Principales
Lavadora de Ropa

r max
RPM
/
r min
1000

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Centrifugacin

Secador de lechugas

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Licuadora

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Mquina para hacer

jugos

Centrifugacin

9. Problemas

1. Una centrfuga tiene un rotor cuyo radio es 10 cm. Cuando el rotor


gira a 1000 rpm.
a) Calcule la fuerza centrfuga desarrollada, expresada con
respecto a la aceleracin gravitatoria (g);
b) Compare esa fuerza con la que se dara en un rotor con radio 20
cm girando a la misma velocidad.
Datos
Radio Rotor1 = 10cm
Velocidad = 1000rpm
FCR =?
Radio Rotor2 = 20cm
a) Formulas
FCR = Fc / Fg = (m 2 r) / m g = 2 r / g
= 2 v
= 2 v = 2 1000 min (1 min / 60 s) = 104.7 s
FCR = 2 r / g
FCR = (104.7)2 s2 0.1 m / 9.8 m s2 = 111.9
Respuesta: Fc = 112 g
b) Como r = 2r, FCR = 2 FCR = 224 g
Respuesta: 2 FCR = 224 g
2. Necesita alcanzar 20000 g para sedimentar una determinada
fraccin subcelular. Qu tipo de centrfuga utilizara? Si slo dispone
de un rotor para tubos de 50 mL, con radio 8 cm, a qu velocidad
(rpm) debe ajustarse la centrfuga?
Datos
Tipo de centrifuga =?
Radio Rotor = 8cm
V =?
Respuesta: 20000 g se podran alcanzar en una centrfuga de
alta velocidad, siempre que est refrigerada. En todo caso,
siempre se podra hacer en una ultracentrfuga.
Formula

v 2=

FCR . g
r .4 . 2

v2 = 20000 9.8 m s2 / (42 0.08 m)


v = 249 s = 14947 min
Respuesta: 15000rpm aproximadamente
3. Un rotor de centrfuga gira a 2400 rpm. Calcule la intensidad del
campo:
a) En un punto del rotor situado a 10 cm del eje de rotacin.
b) En un punto del rotor situado a 20 cm del eje de rotacin.
c) En el eje de rotacin.
Formula: Ec = 2
a) Datos
V = 2400 rpm
r = 10 cm
m/s

Ec = (2 rad/rev 2400 rev/min 1 min/60 s) 2 0.1 m = 6300


b) Ec = 12600 m/s2
c) En el eje r=0, no hay fuerza centrfuga, Ec = 0

4. Si un separador de nata tiene radios de descarga de 7,5 cm y 5 cm y


si la densidad de la leche es de 1032 kg /m3 y la de la nata es de
865 kg /m3 , calcular el radio de la zona neutra. Datos
r 1=75 cm=0,075m
r 2=5 cm=0,05 m
3
A =1032 kg/m
B =865 kg /m3
r n=?
2
2
A r 1 B r 2
2
Solucin: Partiendo de la ecuacin:
se tiene
r n=
A B
que,

kg
( 0,05 )
m3
( 2)
kg
1032 3 (0,075)2
=0,022 m2
kg
kg
m
1032 3 865 3
m
m
2
r n =
Respuesta: r n= 0,022 m 2=0,15 m
865

10.

Bibliografa

Harrison, Roger G., Todd, Paul, Rudge, Scott R., Petrides


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2003.

Dishon, M., Weiss, G.H., Yphantis, D.A. Numerical Solutions of the


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o http://es.slideshare.net/juangomez3726613/centrifugacion-1
o http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libr
os/celular/centrizonal.htm
o http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libr
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