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Biotecnologa es una palabra larga y que suena difcil. Sin embargo, si se analiza
por partes es ms fcil entender qu significa. Bio quiere decir vida y el trmino
tecnologa se refiere a las herramientas o tcnicas que se usan para fabricar o producir
algo. Entonces, si se junta todo se podra definir la biotecnologa como las herramientas
o tcnicas que emplean a los seres vivos para obtener algn producto. Los seres vivos
que participan en estas tcnicas son microorganismos (bacterias, hongos, levaduras),
plantas y animales. Y lo que se obtiene son alimentos, medicamentos y otros productos
tiles para las personas y para el ambiente en general. La biotecnologa se refiere a
toda aplicacin tecnolgica que utilice sistemas biolgicos y organismos vivos o sus
derivados para la creacin o modificacin de productos o procesos para usos especficos.
El trmino biotecnologa puede parecer nuevo para el pblico amplio, pero la biotecnologa est presente en la vida
cotidiana desde hace ya mucho tiempo. Como mencionamos, la biotecnologa comprende una amplia variedad de tcnicas
que utilizan sistemas biolgicos, organismos vivos o sus componentes, para la obtencin de productos y servicios para
usos especficos. En su sentido ms amplio, la biotecnologa es aplicada por el hombre hace ya miles de aos en la
obtencin de alimentos. El pan, la cerveza, el queso y el vino, resultantes de procesos de fermentacin por la accin de
bacterias y hongos, eran parte esencial de la dieta en las civilizaciones ancestrales como lo son actualmente. Sin
embargo, en aquella poca no se conoca acerca de los microorganismos ni de los procesos metablicos que realizaban.
No fue sino hasta la segunda mitad del siglo XIX cuando Luis Pasteur demuestra que estos procesos son consecuencia de
la actividad microbiana. Entonces, se incluye a los procesos de fermentacin dentro de la biotecnologa tradicional.
Aunque en ese entonces los hombres no entendan cmo ocurran estos procesos, ni conocan la existencia de
microorganismos, podan utilizarlos para su beneficio. Estas aplicaciones constituyen lo que se conoce como
Biotecnologa Tradicional y se basan en la obtencin y utilizacin de los productos del metabolismo de ciertos
microorganismos. Se puede definir la biotecnologa tradicional como la utilizacin de organismos vivos para la obtencin
de un bien o servicio til para el hombre. Tambin se incluye dentro de la denominacin de biotecnologa tradicional otras
tcnicas como la seleccin artificial, los cruzamientos selectivos (hibridacin) y la mutagnesis, que intervienen en
procesos productivos y en la transformacin gentica de especies que se utilizan en la industria alimenticia.
La Biotecnologa Moderna surge cuando los cientficos comprendieron ms cmo ocurren los procesos biolgicos que
permiten la fabricacin de productos biotecnolgicos. Esto les permiti desarrollar nuevas tcnicas a fin de modificar o
imitar algunos de esos procesos en un laboratorio y lograr una variedad mucho ms amplia de productos. La biotecnologa
moderna utiliza diferentes tcnicas (como cultivo de tejidos y otras), incluyendo las tcnicas de ingeniera gentica, para
modificar y transferir genes de un organismo a otro, permitiendo de este modo saltar la barrera de especie y realizar
procesos ms direccionados y precisos. La Biotecnologa Moderna utiliza diversas tcnicas in vitro de cidos nucleicos y la
fusin de clulas ms all de la familia taxonmica superando barreras fisiolgicas naturales de reproduccin o
recombinacin. Hoy, la biotecnologa moderna se asienta principalmente en tcnicas de ADN recombinante, tambin
llamadas tcnicas de ingeniera gentica.
Citogentica y biotecnologa
La citogentica es parte esencial de los estudios genticos actualmente, con importantes aplicaciones en la gentica
mdica, en la gentica evolutiva y en la gentica aplicada al mejoramiento animal y vegetal. Normalmente se asocia
citogentica con el cariotipo (el ordenamiento de los cromosomas segn su tamao construido a partir de imgenes del
material gentico teido y fotografiado).
Cariotipo humano femenino (superior) y masculino (inferior).
Se observa un total de 23 pares de cromosomas en cada
cariotipo compuesto de 22 pares de autosomas y el par de
cromosomas sexuales femeninos XX y los cromosomas
sexuales masculinos XY.
Esa fue la primera aplicacin de la citogentica para clasificar los cromosomas de cada especie y asociar ciertas
enfermedades o caractersticas de inters con algunos cromosomas en particular o con regiones dentro de los brazos de
los cromosomas. As se obtuvieron los primeros mapas fsicos del genoma de las especies, que permiten ubicar en el
genoma cierto gen responsable de un cierto fenotipo. Hoy en da, con el desarrollo de tcnicas de fluorescencia aplicadas
a la citogentica, se puede saber en qu cromosoma y en qu regin especficamente se ubica una secuencia gentica de
inters. Por ejemplo, si se desea conocer dnde se integr un transgn al realizar una planta o animal transgnico, como
se muestra en la figura:
factores de coagulacin, la vacuna contra la hepatitis B, y los cultivos transgnicos ornamentales, en los cuales se aplic el
conocimiento de gentica molecular del desarrollo floral para modificar la morfologa de las plantas, entre otros. Otra
importante aplicacin de la gentica molecular en temas de biotecnologa es el desarrollo de mapas genticos de
especies, los cuales facilitan luego los programas de mejoramiento tradicional (por cruzamientos), a esto se lo denomina
Mejoramiento asistido por marcadores moleculares o MAS (del ingls Marker assisted selection).
BIOTECNOLOGA TRADICIONAL
Definimos a la biotecnologa tradicional como el conjunto de tcnicas que emplean
organismos vivos (o partes de ellos) para obtener productos tiles, procesos o servicios.
De esta manera, si decimos que es el uso de organismos vivos para obtener algn
producto o servicio til nos daremos cuenta que la biotecnologa est presente en la vida
cotidiana ms de lo que la gente se imagina.
aprovechamiento. Los mtodos tradicionales para el mejoramiento gentico tales como la mutagnesis (tambin aplicada
al mejoramiento de plantas) y la conjugacin bacteriana han sido las bases de la industria de desarrollo de inculos
bacterianos (cultivos empleados para iniciar un proceso de fermentacin), mientras que la hibridizacin ha sido usada en el
mejoramiento de cepas de levadura utilizadas ampliamente en la industria de la panificacin y fabricacin de cerveza.
Estos mtodos se describen a continuacin:
1) MUTAGNESIS CLSICA: Esta metodologa involucra la produccin de mutantes por la exposicin de cepas
microbianas a sustancias mutagnicas qumicas o rayos ultravioletas que inducen cambios azarosos en sus genomas. Las
cepas as producidas son seleccionadas en base a propiedades especficas deseadas, tales como la resistencia a virus.
Sin embargo, la mutagnesis puede originar cambios secundarios, no buscados, que podran influenciar el
comportamiento del cultivo durante la fermentacin, u otros procesos metablicos.
2) CONJUGACIN: Es un proceso natural donde se transfiere material gentico entre especies microbianas
emparentadas, como resultado de un contacto fsico entre un microorganismo dador y otro aceptor. El intercambio de
genes por conjugacin permite la transferencia de genes situados en el cromosoma o en plsmidos (molcula de ADN
circular extra cromosmica que se encuentra presente en muchas bacterias y que puede transferirse de una bacteria a
otra).
3) HIBRIDIZACIN (O REPRODUCCIN SEXUAL): Las levaduras son hongos unicelulares (eucariotas) que usualmente
se reproducen asexualmente por divisin de sus clulas, pero tambin pueden hacerlo sexualmente por la fusin de dos
clulas que forman un nuevo organismo unicelular que contina dividindose por mitosis. La reproduccin sexual, con el
consiguiente fenmeno de recombinacin gentica, ha llevado a mejoramientos en este tipo de microorganismos.
FERMENTACIN
El proceso de fermentacin se encuadra tambin dentro de la biotecnologa tradicional, que incluye adems el
mejoramiento por cruzamiento sexual de distintas variedades de plantas y animales, y la mutagnesis. Existen evidencias
arqueolgicas y botnicas a partir de restos de semillas, prcticas y herramientas agrcolas que revelan habilidades
rudimentarias en el arte de la fermentacin microbiana en la Mesopotamia alrededor del ao 6000 a.C. La preparacin de
unas 38 comidas y bebidas alcohlicas tradicionales de los indgenas de Asia, frica y Amrica Latina involucraban la
utilizacin de un sustrato rico en almidn para la produccin de azcares fermentables por levaduras y bacterias.
Qu es la fermentacin?
Se estima que los alimentos fermentados contribuyen aproximadamente con la tercera parte de la dieta mundial. El
trmino fermentacin, en su acepcin estricta, se refiere a la obtencin de energa en ausencia de oxgeno. Pasteur
denomin a la fermentacin "la vie sans l'air" o "la vida sin aire". En otras palabras, es el proceso de transformacin de
sustancias orgnicas por los microorganismos (bacterias, levaduras y otros hongos) en condiciones anaerbicas, o por
complejos enzimticos de origen animal, vegetal o microbiano. Existen diferentes tipos de procesos de fermentacin que
se denominan segn el nombre del producto final que se obtiene. Entre ellos:
Fermentacin lctica: Se produce en muchas bacterias (bacterias lcticas), tambin en algunos protozoos y en el msculo
esqueltico humano. El producto de la reaccin es el cido lctico responsable de la obtencin de productos lcteos
acidificados como yogurt, quesos, cuajada, crema cida, etc. El cido lctico tiene excelentes propiedades conservantes
de los alimentos. En las clulas musculares humanas, la acumulacin de cido lctico produce los dolorosos calambres.
La reaccin de la fermentacin lctica sera:
Glucosa ---------> cido Lctico + energa + H2O
Fermentacin alcohlica: Esta fermentacin la realizan, por ejemplo, las levaduras del gnero Saccharomyces. Se obtiene
como producto alcohol etlico o etanol, y dixido de carbono (CO2). Se trata de un proceso de gran importancia industrial que,
segn el tipo de levadura empleada, da lugar a una variedad de bebidas alcohlicas: cerveza, vino, sidra, etc. Tambin en la
fabricacin del pan se aade a la masa una cierta cantidad de levadura que, al realizar la fermentacin a partir del almidn de
la harina, har que el pan sea ms esponjoso por las burbujas de CO2 que se desprenden e inflan la masa. En este ltimo
caso el alcohol producido desaparece durante la coccin.
La reaccin de la fermentacin alcohlica sera:
Glucosa -------> Etanol + energa + CO2
-Produccin de Queso
La elaboracin del queso consta de varias etapas, que comienza con la
pasteurizacin de la leche. Luego, se agrega el fermento que contiene las bacterias
lcticas, y se deja madurar la leche. Como consecuencia de la fermentacin, en la
cual las bacterias degradan el azcar de la leche (lactosa), se obtiene cido lctico. El
cido lctico desnaturaliza las protenas de la leche (fundamentalmente casena) que
precipitan arrastrando con ellas la grasa. Adems, produce acidez que inhibe el
desarrollo de grmenes indeseables, incluyendo los potencialmente patgenos. Una vez que las protenas de la leche han
coagulado, el cuajo obtenido se calienta y se exprime para eliminar la porcin acuosa de la leche (suero), se sala y se
somete a un proceso de maduracin (salvo en el caso de los quesos blandos no madurados). Cada tipo de queso es
elaborado por distintas cepas de bacterias. El fermento utilizado tiene una importante funcin en el desarrollo de sabor,
aroma y textura de los quesos.
-Produccin de Bebidas Alcohlicas
La fermentacin a gran escala por accin de las levaduras es responsable de la produccin de alcohol para fines
industriales y de bebidas alcohlicas. Las bebidas alcohlicas ms importantes que se
producen industrialmente con intervencin de las levaduras son el vino (fermentacin de zumo
de uvas), la sidra (fermentacin del zumo de manzana), la cerveza (fermentacin de cereales
malteados), y bebidas destiladas producidas por condensacin del alcohol proveniente de la
fermentacin. En todos estos procesos se utilizan levaduras del tipo Sacharomyces
cerevisiae, que es la misma que se utilizaba en la antigedad para el mismo fin.
-Elaboracin del Pan
El proceso que ocurre en la elaboracin del pan es tambin una fermentacin alcohlica.
Utilizando los componentes de la harina, la levadura fermenta expulsando al medio
dixido de carbono y alcohol. El alcohol obtenido se evapora en el momento del horneado
del pan, y el dixido de carbono desprendido de dicha fermentacin es el responsable de
los agujeritos y aspecto esponjoso de la miga del pan. La especie de levadura que ms se
utiliza para la fermentacin del pan normal es Saccharomyces cerevisiae, aunque se
utilizan tambin otros microorganismos para influir sobre el aroma y sabor del pan.
PROBITICOS Y PREBITICOS
Actualmente, es habitual escuchar acerca de los productos bio, probio y prebio, que se promocionan como
beneficiosos para la salud. De hecho, existen actualmente en el mercado productos probiticos y prebiticos.
Qu son los probiticos? Una de las definiciones ms aceptadas es la de microorganismos vivos que administrados
confieren beneficios a la salud del husped (FAO, WHO. 2002). Actualmente existe un gran
nmero de probiticos disponibles en los alimentos fermentados, especialmente en los
yogures donde las bacterias cido-lcticas funcionan como habitantes naturales del tracto
gastrointestinal y ejercen all una funcin de defensa ante potenciales agentes patgenos.
Algunas especies de bacterias cido-lcticas son administradas vivas a los humanos como
suplementos dietarios para mejorar la composicin de la microbiota intestinal. Se incluyen
cepas seleccionadas de Lactobacillus, Bifidobacterium, Lactococcus y Saccharomyces.
Qu son los prebiticos? Son ingredientes alimenticios no digeribles o de baja digestin que benefician al organismo
husped estimulando selectivamente la accin de una bacteria benfica o de un grupo de ellas- presentes en su intestino.
Algunos hidratos de carbono fermentables no digeridos en el intestino delgado cumplen esta funcin, ya que estimulan el
crecimiento de bifidobacterias entre otras.
ejemplares que resultan ms productivos o que ofrecen productos de mejor calidad. En la actualidad, a los mtodos
tradicionales de modificacin gentica, se suma la biotecnologa moderna como una herramienta ms para el
mejoramiento de especies y la obtencin de productos con mltiples aplicaciones en la agricultura, la salud, el ambiente y
en diferentes industrias.
El mejoramiento VEGETAL a travs de Tcnicas Tradicionales
La base de todo mejoramiento es la variabilidad gentica, fundamental para generar diversidad. Existe gran diversidad de
fenotipos en las plantas, en sus caractersticas y en sus funciones, determinada por la variabilidad gentica y la interaccin
de estos genotipos con el ambiente. Existen diferentes factores que favorecen la diversidad gentica y la variedad de
caractersticas entre individuos de una misma especie o de diferentes especies. Entre estos factores se puede mencionar
la reproduccin sexual y las mutaciones que aumentan la diversidad sobre la que acta la seleccin natural. A esto se
suma la accin del hombre que, a travs de la seleccin artificial y la hibridacin (cruzamientos selectivos) aprovecha esta
diversidad y promueve la reproduccin y supervivencia de determinadas especies o variedades que resultan favorables.
Todos estos mecanismos, naturales e inducidos por el hombre, se incluyen en lo que se denominan tcnicas tradicionales
de mejoramiento vegetal, que se detallan a continuacin:
1) SELECCIN ARTIFICIAL Y CRUZAMIENTOS SELECTIVOS. El hombre selecciona las plantas que le ofrecen ms
ventajas (mejores frutos, mayor crecimiento, mayor resistencia a enfermedades, etc.), y realiza cruzamientos selectivos
entre esas variedades para obtener descendencia con mejores rendimientos. Adems, desde que es agricultor, el hombre
no solo ha seleccionado sino que tambin ha trasladado especies vegetales de un lugar a otro, a otras condiciones
ambientales. Estas variables ambientales tambin originaron gran diversidad en los vegetales. Por ejemplo, las diferentes
coles (brcoli, coliflor, repollo, repollito de Burselas, y otros) son descendientes de una especie original, obtenidas por el
hombre mediante seleccin artificial. Adems, las diferentes variedades de maz (Dent, Sweet, Popcorn, Flint, Pod, etc.)
son producto de procesos de seleccin artificial, sumado a procesos de seleccin natural y mutaciones que el hombre fue
aprovechando y seleccionando hasta llegar a domesticarlo. Hoy en da hay una gran variedad de maces hbridos, ms
vigorosos, con mejores caractersticas, ms beneficiosos desde el punto de vista alimenticio, como el tamao y disposicin
de los granos.
TEOSINTE
MAZ
Estos mtodos se basan en el cruzamiento entre individuos de la misma especie pero que muestran caractersticas
diferentes, y una posterior seleccin de los ejemplares que presentan las caractersticas deseadas. Este mtodo de
cruzamiento y seleccin se repite sucesivamente de manera de lograr, en la variedad final, la incorporacin de los genes
que llevan informacin para los rasgos deseados y la eliminacin de aquellos relacionados con las caractersticas no
deseadas. Este proceso de generacin de nuevas variedades ha sido (y contina siendo) muy til en la agricultura y ha
originado a las variedades que se cultivan hoy en da.
A travs de los cruzamientos tradicionales se mezclan genes de plantas que presentan diferentes
variantes para una misma caracterstica, como el tamao del choclo en este caso. De la diversidad que
se obtiene, el agricultor selecciona el que ms le conviene y lo vuelve a cruzar, y as sucesivamente
hasta obtener la especie deseada. El hbrido que resulta por cruce sexual tiene una combinacin
gentica de los progenitores. Esta recombinacin es al azar.
El cruzamiento sexual de por s genera diversidad a travs de la recombinacin gentica. As, la primera tecnologa
utilizada para el mejoramiento de variedades, fue y es el cruzamiento o hibridacin entre individuos, razas o lneas de la
misma especie o entre especies relacionadas capaces de cruzarse y dar descendencia frtil. El hombre realiza
cruzamientos no solo entre diferentes variedades de una misma especie, sino tambin interespecficos (entre especies) e
inclusive intergenricos (entre diferentes gneros). Estos cruzamientos generan hbridos: mezcla entre dos especies o
gneros diferentes pero sexualmente compatibles que da como resultado una descendencia cuya combinacin de genes
ser al azar, diferentes de los progenitores. Esta tcnica es una de la que ms contribuy a la diversidad, siendo un
importante mecanismo para crear nuevas variantes y especies. El mejorador hace uso de esta diversidad para hacer
cruzamientos dirigidos y seleccionar los mejores atributos entre la progenie. No obstante, estas tcnicas tienen las
limitaciones de que son procesos largos y laboriosos y, en la actualidad, la asistencia de tecnologas cada vez ms
precisas resulta imprescindible para acelerar los programas. El uso de los Marcadores Moleculares es una de las tcnicas
de biologa molecular que ms impacto est teniendo en este sentido.
2) MUTAGNESIS INDUCIDA (agentes mutagnicos). Otra fuente para generar diversidad de los genomas son los
cambios o mutaciones. Una mutacin se define como un cambio heredable en el genoma y constituye un mecanismo
natural por el cual los genomas cambian. Las mutaciones pueden ser espontaneas o inducidas y as, una forma de
aumentar la diversidad de los genomas es induciendo o estimulando la aparicin de mutaciones (mutagnesis). Esta
tcnica se utiliza desde mediados del siglo XX. Por medio del uso de sustancias qumicas o radiaciones se inducen
mutaciones al azar en el genoma que generan cambios en la planta.
A fines de la dcada de 1920, los investigadores descubrieron que se pueden obtener mutaciones (cambios en el ADN)
exponiendo a las plantas a agentes mutgenos fsicos (rayos X y gamma, neutrones, protones, etc.) o qumicos
(etilmetanosulfonato, azida sdica, etc). Estas mutaciones ocurren al azar en el genoma y generan una enorme
variabilidad que puede dar lugar a la aparicin de caractersticas interesantes, las que son seleccionadas por el agricultor.
As se obtuvo el pomelo rosado, a partir del pomelo blanco mutagenizado por radiacin. Otros cultivos modificados por
mutagnesis son: trigo, arroz, lechuga y porotos, entre otros.
La mutagnesis no es dirigida. Se induce una gran cantidad de variaciones a travs de los agentes mutagnicos en
diferentes cromosomas, proporcional a la dosis del agente que se emple para causar las mutaciones. Las mutaciones
que se inducen son al azar, no se sabe qu tipo de mutaciones o dnde en el genoma de la planta ocurren, pero dan
nuevas variedades que pueden ser aprovechables porque ofrecen caracteres nuevos interesantes.
se cultivan en tanques llamados fermentadores. Estas enzimas se vienen usando desde hace ms de 40 aos con el
objetivo de reemplazar a los compuestos sintticos, minimizar el uso del agua y el consumo de energa, ya que antes las
manchas slo podan ser removidas con blanqueadores y altas temperaturas. Las enzimas optimizan la eficiencia de los
detergentes, a la vez que permiten el trabajo de limpieza a bajas temperaturas y perodos ms cortos de lavado,
reduciendo significamente el consumo de energa y las emisiones de CO2. Otro beneficio ambiental asociado al uso de
enzimas en los detergentes es que estas son biodegradables y reemplazan a los qumicos constituyentes de los
detergentes sintticos que se vienen liberando al ambiente desde hace muchos aos. Adems, una molcula de enzima
puede actuar sobre muchas molculas de sustrato (leche, sangre, barro), por lo cual una cantidad pequea de enzima
agregada a un detergente de lavado proporciona un beneficio grande en la limpieza. Las enzimas empleadas en
detergentes se encuentran disponibles en forma lquida y granular. stas actan sobre los materiales que constituyen las
manchas, facilitando la remocin de los mismos y de forma ms efectiva que los detergentes convencionales. Entre las
enzimas utilizadas se pueden encontrar:
Proteasas: aceleran la degradacin de protenas y producen pequeos pptidos o aminocidos individuales los cuales
pueden ser fcilmente solubilizados y removidos de los tejidos. Se usan a altos pH y temperaturas superiores a 60 o C. Las
enzimas usadas son producidas principalmente por Bacillus licheniformis o B. Amyloliquefaciens y Aspergillus flavus
mediante fermentacin.
Amilasas: aceleran la degradacin de los residuos de almidn de alimentos como papa, chocolate, etc. La amilasa de
Bacillus licheniformis es corrientemente agregada a los jabones en polvo. Esta enzima es resistente a la degradacin de
las proteasas, es activa a temperaturas de 85C y puede tolerar valores de pH cercanos a 10.
Lipasas: rompen los lpidos por hidrlisis, sacando manchas de grasa y aceite. Las lipasas deben mezclarse con los
lpidos para romperlos por hidrlisis, pero las lipasas son solubles en agua y los lpidos son insolubles en agua. Por lo
tanto, la hidrlisis slo ocurre en la interfase entre la gota lipdica y la fase acuosa, lo que causa que la reaccin sea
relativamente lenta e inefectiva.
Celulasas: la Cellulasa, producida por el hongo Humicola insolens, se utiliza para remocin de suciedad, y restaurador de
suavidad y color de fibras de algodn. Las celulasas aceleran la degradacin de pequeas fibras que endurecen la ropa y
opacan los colores sin afectar las fibras principales de la ropa, mejorando as la suavidad y los colores de la misma.
-Enzimas utilizadas en la industria del PAPEL
Al igual que en el tratamiento de telas, en la fabricacin de papel, se utilizan las enzimas celulasas para degradar la
celulosa, componente principal de la madera. Adems de la celulosa, la madera contiene lignina, un compuesto que debe
ser eliminado en la fabricacin de papel. La eliminacin se realiza con compuestos qumicos que son contaminantes del
medio ambiente. La elucidacin de los mecanismos enzimticos implicados en el proceso de biodegradacin de la lignina
est proporcionando nuevas herramientas biotecnolgicas para un mejor aprovechamiento de la biomasa vegetal en
sectores industriales, tales como la produccin de pasta de papel y la obtencin de biocombustibles.
-Aplicacin de las enzimas en ANLISIS CLNICOS
Las enzimas se emplean como reactivos estndar en los laboratorios para el diagnstico
de enfermedades, para el control y el seguimiento de enfermedades y de la respuesta del
paciente hacia la terapia seguida, y para la identificacin y control de la concentracin de
drogas o sus metabolitos en la sangre u otros fluidos corporales. Las tcnicas de
inmunoanlisis enzimtico (ELISA) representan un nuevo e importante avance al asociar
anticuerpos especficos a enzimas como la peroxidasa o la galactosidasa cuya unin
genera una reaccin colorimtrica (se observa color) proporcional a la extensin de unin del anticuerpo. Las enzimas se
emplean rutinariamente para diagnosticar enfermedades hepticas, miocrdicas, pancreticas y prostticas, anemias,
leucemias, distrofia muscular, tumores y toxemias del embarazo.
Las tcnicas enzimticas tambin se utilizan en la deteccin de drogas, anlisis de antibiticos, deteccin de antgenos o
anticuerpos, o en la deteccin de enzimas y metabolitos en los fluidos intracelulares. Estas tcnicas son generalmente ms
rpidas, especficas y baratas que otros mtodos de deteccin como el inmunoanlisis, los anlisis fotomtricos o
cromatogrficos.
-Uso de enzimas como PRODUCTOS MDICOS y FARMACUTICOS
A diferencia de otros usos industriales para las enzimas, las aplicaciones mdicas y farmacuticas de las mismas
requieren generalmente pequeas cantidades de enzimas muy purificadas. Esto se debe a que si el destino de una enzima
o de un producto obtenido por mtodos enzimticos es su administracin a un paciente, resulta evidente que el preparado
debe contener las menores cantidades posibles de material extrao para evitar probables efectos secundarios.
Uno de los productos obtenidos mediante el uso de enzimas son los aminocidos. Si bien se pueden sintetizar
empleando un proceso qumico, el resultado es una mezcla de dos tipos distintos (D y
L ismeros). Puesto que solamente el L-ismero es biolgicamente activo, la mezcla
debe ser separada en sus dos componentes. Adems de aminocidos, las enzimas
son utilizadas para la produccin de antibiticos semi-sintticos. Las penicilinas
semisintticas son los principales productos farmacuticos obtenidos por tecnologa
enzimtica. Tambin se utilizan enzimas en la produccin de esteroides. Los
esteroides se utilizan en un gran nmero de preparados farmacuticos (por ejemplo
en los antinflamatorios), por lo que los procesos empleados en la produccin de estas
sustancias presentan una considerable importancia econmica.
-Uso de enzimas para generacin de ENERGA
Otra aplicacin biotecnolgica de las enzimas es la produccin de energa, a partir de fuentes orgnicas en vez de
combustibles fsiles, no renovables. Cada ao crecen unos 200 mil millones de toneladas de biomasa (madera, cereales,
etc), de las cuales se usan slo un 3%. Por lo tanto, este rubro ofrece un enorme potencial que puede ser aprovechado.
Un ejemplo clsico de biocombustible es el alcohol obtenido por fermentacin de material rico en azcares y almidn, o de
residuos orgnicos como los forestales. El principal obstculo para la viabilidad de esta propuesta es el costo, puesto que
el petrleo sigue siendo ms barato. Sin embargo, los avances tecnolgicos permitirn en un futuro aumentar el desarrollo
de estos productos biodegradables.
BIOTECNOLOGA MODERNA
Actualmente, los cientficos comprenden mejor cmo ocurren los procesos biolgicos que
permiten la fabricacin de productos biotecnolgicos. Esto les ha permitido desarrollar
nuevas tcnicas a fin de modificar o imitar algunos de esos procesos y lograr una variedad
mucho ms amplia de productos. Los cientficos hoy saben, adems, que los
microorganismos sintetizan compuestos qumicos y enzimas que pueden emplearse
eficientemente en procesos industriales. Estos conocimientos dieron lugar al desarrollo de
la biotecnologa moderna. A diferencia de la biotecnologa tradicional, la biotecnologa
moderna surge en la dcada de los 80, y utiliza diversas tcnicas, esencialmente de
ingeniera gentica, para modificar y transferir genes de un organismo a otro. A travs de la biotecnologa moderna es
posible producir insulina humana en bacterias y, consecuentemente, mejorar el tratamiento de la diabetes. Por ingeniera
gentica tambin se fabrica la quimosina, enzima clave para la fabricacin del queso y que evita el empleo del cuajo en
este proceso. La ingeniera gentica tambin es hoy una herramienta fundamental para el mejoramiento de los cultivos
vegetales. La biotecnologa moderna avanza y, en la actualidad, son muchos los pases que utilizan las tcnicas de
ingeniera gentica para la obtencin de diferentes productos que tienen aplicacin en la produccin de alimentos, de
medicamentos, y de productos industriales.
Del ADN a la Biotecnologa Moderna
El conocimiento del ADN (cido desoxirribonucleico), su estructura y funcin, fue determinante
para el desarrollo de la biotecnologa moderna. La estructura de doble hlice del ADN, que los
investigadores James Watson y Francis Crick propusieran en 1953 proporcion respuestas a
muchas preguntas que se tenan sobre la herencia. Predijo la autorreplicacin del material
gentico y la idea de que la informacin gentica estaba contenida en la secuencia de las
bases que conforman el ADN. Ms an, con el correr de los aos y de las investigaciones, se pudo determinar que todos
los seres vivos contienen un ADN similar, formado a partir de las mismas unidades: los nucletidos. Este cdigo gentico
mediante el cual se escriben las instrucciones celulares es comn a todos los organismos. Es decir que el ADN de un ser
humano puede ser ledo dentro de una bacteria, y una planta puede interpretar la informacin gentica de otra planta
diferente. A esta propiedad de la informacin gentica se la conoce como universalidad del cdigo gentico.
El cdigo gentico universal es uno de los conceptos bsicos para comprender los procesos de la biotecnologa moderna.
Por ejemplo, la posibilidad de generar organismos transgnicos, y que las instrucciones del ADN de un organismo puedan
determinar nuevas caractersticas en organismos totalmente diferentes.
Qu es la Ingeniera Gentica?
Cuando los cientficos comprendieron la estructura de los genes y cmo la informacin que portaban se traduca en
funciones o caractersticas, comenzaron a buscar la forma de aislarlos, analizarlos, modificarlos y hasta de transferirlos de
un organismo a otro para conferirle una nueva caracterstica. Justamente, de eso se trata la Ingeniera Gentica, que se
podra definir como un conjunto de metodologas que permite transferir genes de un organismo a otro y expresarlos
(producir las protenas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. Los cientficos que
trabajan en el desarrollo de productos biotecnolgicos emplean tcnicas especficas. La mayora de estas tcnicas
permiten estudiar biomolculas, en particular ADN, ARN y protenas, y se las denomina tcnicas de biologa molecular. La
ingeniera gentica seran el conjunto de estas tcnicas que se usan para transferir genes de un organismo a otro y
construir fragmentos de ADN recombinante. El ADN que combina fragmentos de organismos diferentes se denomina ADN
recombinante y los organismos que reciben un gen que les aporta una nueva caracterstica se denominan organismos
genticamente modificados (OGM), transgnicos o recombinantes. Hoy, la ingeniera gentica es lo que caracteriza a la
biotecnologa moderna que implementa estas tcnicas en la produccin de bienes y servicios tiles para el ser humano, el
ambiente y la industria.
Principios de las tcnicas de trabajo con cidos nucleicos
Las tcnicas de biologa molecular y de ingeniera gentica se basan en una caracterstica particular que tienen los cidos
nucleicos: las bases A (adenina), T (timina), C (citosina) y G (guanina) que forman parte de las molculas de ADN y de
ARN tienen la capacidad de hibridar con bases complementarias. Es decir, las bases al enfrentarse pueden formar enlaces
entre s siguiendo siempre la siguiente regla: A se une con T y C se une con G.
As, si un investigador busca estudiar un gen de inters, basta con conocer al menos una parte de su secuencia, para
poder construir una porcin complementaria que permita pescar de algn modo a ese gen de inters. Esa porcin
pequea de cido nucleico se denomina sonda y al sintetizarla en el laboratorio se le suele poner alguna marca que
permita visualizarla luego fcilmente (por ejemplo, fluorescencia), como se representa en la siguiente imagen.
Sonda de ADN marcada que hibrida con una secuencia de ADN complementaria. Fuente: Las
sondas de cidos nucleicos por Rodolfo Wettstein en Ciencia Hoy, Volumen 4 -N 20Setiembre /octubre 1992.
Otro principio subyacente en las tcnicas de biologa molecular es que el ADN, debido a su estructura qumica y molecular,
es mucho ms estable que el ARN, por lo cual la mayora de las tcnicas ms fcilmente manipulables son con ADN.
Por ltimo, otro principio de las tcnicas es que se usa lo que naturaleza dio. Es decir que las enzimas que se usan para
cortar y pegar fragmentos de ADN, o para sintetizar fragmentos de ADN, provienen de organismos. Estas enzimas se
mejoran para que trabajen eficientemente en las condiciones de laboratorio.
bacterias. Las enzimas de restriccin del tipo I reconocen secuencias especficas en el ADN pero cortan el ADN en sitios al
azar que pueden hallarse algo distantes (1.000 pb o ms) de la secuencia de reconocimiento. Las enzimas de restriccin
de tipo III reconocen secuencias especficas y cortan el ADN en sitios cercanos, por lo general alrededor de 25 pb de
distancia. Las enzimas de restriccin de tipo II reconocen secuencias especficas y cortan el ADN dentro de la secuencia
de reconocimiento. Casi todos los trabajos en ADN recombinante se realizan con enzimas de restriccin de tipo II. A partir
de las bacterias se han aislado ms de 800 enzimas de restriccin que reconocen y cortan el ADN en ms de 100
secuencias diferentes. Muchas de estas enzimas se encuentran disponibles en el comercio. Cada enzima de restriccin se
denomina mediante una abreviatura que significa su origen bacteriano.
Las secuencias reconocidas por las enzimas de restriccin suelen tener 4 a 8 pb de longitud; la mayora de las enzimas
reconocen una secuencia de 4 o 6 pb. La mayor parte de las secuencias de reconocimiento son palndromos, es decir
secuencias que se leen igual hacia adelante o hacia atrs, como la palabra madam. Todas las enzimas de restriccin de
tipo II reconocen secuencias palindrmicas. Algunas de las enzimas
realizan cortes alternados en el ADN. Por ejemplo, Hindlll corta el
esqueleto azcar-fosfato de cada cadena y genera fragmentos con
extremos cortos monocatenarios que sobresalen. Estos extremos se
denominan extremos cohesivos o pegajosos porque son
complementarios entre s y pueden aparearse de manera espontnea
para conectar los fragmentos. Por tanto, los fragmentos de ADN pueden
pegarse: cualquiera de los dos fragmentos cortados por la misma
enzima tendr extremos complementarios y se aparear. Cuando sus
extremos cohesivos se han apareado, dos fragmentos de ADN pueden
unirse en forma permanente por la enzima ADN ligasa que sella las
hendiduras entre los grupos azcar-fosfato de los fragmentos. No todas
las enzimas de restriccin producen cortes alternados y extremos
cohesivos. Por ejemplo, Pvull corta en el medio de su sitio de
reconocimiento, que produce fragmentos con extremos romos.
-Visualizacin de los fragmentos de ADN
La electroforesis en gel nos proporciona un medio para la visualizacin de fragmentos de ADN. La electroforesis es una
tcnica bioqumica estndar para la separacin de molculas sobre la base del tamao y la carga elctrica. Hay varios
tipos diferentes de electroforesis; para separar las molculas de ADN se utiliza electroforesis en gel. Se prepara un gel
poroso, a menudo de agarosa (un polisacrido aislado de las algas
marinas) que se funde en una solucin buffer y se vuelca en un molde
plstico. Cuando se enfra, la agarosa se solidifica y forma un gel que se
asemeja a la gelatina firme. En uno de los extremos del gel se realizan
indentaciones pequeas denominadas pocillos con el objeto de
contener las soluciones de fragmentos de ADN, y se somete a una
corriente elctrica que pasa a travs del gel. Dado que el grupo fosfato
de cada nucletido de ADN posee una carga negativa, los fragmentos de
DNA migran hacia el extremo positivo del gel. En esta migracin el gel
acta como un cedazo; cuando las molculas de ADN migran hacia el
polo positivo, se mueven a travs de los poros entre las partculas de
gel. Los fragmentos pequeos de ADN migran con ms rapidez que los
grandes y, con el tiempo, se separan segn su tamao. La distancia que
recorre cada fragmento depende de su tamao.
Despus de la electroforesis, los fragmentos de ADN estn separados
segn el tamao. Sin embargo, los fragmentos de ADN todava son
demasiado pequeos para observarse; de modo que es necesario
dedicarse al problema de visualizacin del ADN. sta puede lograrse de
varias maneras. El procedimiento ms simple consiste en teir el gel con
un colorante especfico para cidos nucleicos, como el bromuro de etidio, que se introduce de modo firme (se intercala)
entre las bases de ADN. Cuando se expone a la luz UV el bromuro de etidio emite una fluorescencia anaranjada brillante,
de modo que la copia de cada fragmento de ADN aparece como una banda anaranjada brillante. La muestra concentrada
original de ADN purificado contena millones de copias de una molcula de ADN; por eso cada banda representa millones
de copias de fragmentos de ADN idnticos. De manera alternativa, los fragmentos de ADN pueden visualizarse mediante
el agregado de una marcacin radiactiva o de una sustancia qumica para el ADN antes de colocarla en el gel. Los
nucletidos con fosfato marcado en forma radiactiva (32P) pueden utilizarse como sustrato para la sntesis del ADN. En
que contiene el vector y 3) uno o ms sitios de restriccin dentro de los cuales puede insertarse un fragmento de ADN.
Para la clonacin gnica en bacterias suelen utilizarse tres tipos de vectores de clonacin: plsmidos, bacterifagos y
csmidos.
En placas de Petri se cultivan las bacterias. Se originan colonias de bacterias iguales (clones).
Las bacterias transformadas, que incorporaron el plsmido y el gen de inters, se seleccionan
por medio de antibiticos y por reacciones con indicadores de color.
Cuando se desarrolla una estrategia de clonacin deben tomarse en consideracin ciertos factores. stos incluyen cunto
se conoce acerca del gen por ser clonado, el tamao y la naturaleza del gen y el propsito final del experimento de
clonacin. El procedimiento para la clonacin de un fragmento de ADN pequeo, bien caracterizado por secuenciacin,
sera muy diferente del de la clonacin de un gen grande, mal conocido, para la produccin comercial de una protena.
Papel de la clonacin gnica. La manipulacin y el anlisis de los genes con tecnologa de ADN recombinante requiere
copias mltiples de las secuencias de ADN utilizadas. Durante muchos aos la nica manera de amplificar las secuencias
de ADN fue clonarlas en clulas bacterianas y la clonacin era un requisito previo para otros muchos mtodos
moleculares. En la actualidad los mtodos mucho ms rpidos de amplificacin del ADN (como la reaccin en cadena de
la polimerasa) han obviado la necesidad de la clonacin gnica en muchos procedimientos, si bien la clonacin sigue
siendo muy utilizada para crear secuencias de genes novedosos, para su insercin en clulas husped y para otras
manipulaciones de secuencias de ADN.
-Reaccin en cadena de la polimerasa para amplificar el ADN
Un problema fundamental cuando se trabaja en el nivel molecular es que cada gen es un fragmento diminuto del ADN
celular total. Debido a que cada gen es poco comn antes de poder estudiarlo debe ser aislado y amplificado. Antes de
mediados de la dcada de 1980 el tpico procedimiento disponible para amplificar el ADN era la clonacin gnica, es decir,
la colocacin del gen en una clula bacteriana y la multiplicacin de las bacterias. La clonacin es muy laboriosa y requiere
al menos varios das para el crecimiento de las bacterias. En 1983 Kary Mulls de Cetus Corporation conceptu una nueva
tcnica para amplificar el ADN en un tubo de ensayo. La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) permite amplificar
los fragmentos de ADN miles de millones de veces en el transcurso de unas pocas horas. La reaccin en cadena de la
polimerasa ha revolucionado la biologa molecular y es hoy una de las tcnicas moleculares ms utilizada.
La PCR es una tcnica "in vitro" que imita la habilidad natural de la clula de duplicar el ADN y permite crear un gran
nmero de copias de un segmento de ADN en un tubo de reaccin. Para esta amplificacin del ADN solo es necesario: el
ADN de origen a partir del cual se quiere amplificar un segmento, dos oligonucletidos sintticos que servirn como
cebadores, una ADN polimerasa termoestable (Taq) y los cuatro desoxirribonucletidos trifosfato (dATP, dGTP, dCTP y
dTTP). Un cebador es una cadena corta de cido nucleico que contiene un grupo 3'hidroxilo libre que forma pares
de bases complementarios a una hebra molde y acta como punto de inicio para la adicin de nucletidos por la enzima
polimerasa con el fin de copiar la hebra molde. En el proceso, los cebadores podrn adherirse a sus secuencias
complementarias en las cadenas molde de ADN y eso determinar la regin que ser amplificada. Esta tcnica requiere
conocer la secuencia de nucletidos de los extremos del fragmento que se quiere amplificar para disear los cebadores.
Para la sntesis del ADN la mezcla de reaccin se somete a ciclos sucesivos, de desnaturalizacin, de hibridacin o
alineacin y de elongacin.
-Durante la desnaturalizacin, que se realiza por calentamiento de la mezcla a 95C, se separan las dos cadenas del ADN
molde de origen.
-Durante la hibridacin, la temperatura de incubacin se reduce para permitir el apareamiento de las bases de ambos
cebadores en el sitio donde encuentran una secuencia complementaria. As, el punto de partida de la sntesis de ADN en
el molde es determinado los cebadores.
-Durante la fase de elongacin, la mezcla se calienta a 72C y la enzima Taq ADN polimerasa puede sintetizar cadenas
nuevas de ADN mediante el agregado de nucletidos a los cebadores. Se produce entonces la extensin de la cadena
complementaria a partir del extremo 3 de los cebadores y se sintetizan nuevas molculas de ADN del fragmento
determinado por los cebadores. Con cada ciclo, la cantidad de ADN objetivo se duplica; de modo que ste aumenta en
forma geomtrica. Al finalizar cada ciclo, la cantidad de ADN molde disponible para el ciclo siguiente aumenta al doble.
En la actualidad la reaccin en cadena de la polimerasa se utiliza con frecuencia en lugar de la clonacin gnica. Se debe
tener en cuenta, sin embargo, que el uso de la PCR requiere el conocimiento previo de por lo menos parte de la secuencia
del ADN objetivo para permitir la construccin de cebadores. Por consiguiente, la PCR no puede utilizarse para amplificar
un gen que no ha sido secuenciado, al menos en parte.
La tcnica de PCR permite obtener, a partir de una sola molcula de ADN, millones de copias de un fragmento de ADN particular. Las nuevas molculas de ADN
sintetizadas en cada ciclo sirven de molde para ciclos siguientes. Por lo tanto, la PCR es una reaccin de amplificacin de fragmentos de ADN en forma exponencial y al
final del ciclo 35-40 en el tubo de ensayos existen millones de copias del fragmento de inters.
2.
3.
4.
5.
1.
A continuacin se detalla cada una de estas etapas y las tcnicas que involucran.
Representacin de los pasos de restriccin y ligacin para clonar un fragmento de ADN en un vector
Como muestra la imagen el vector abierto y el fragmento de inters se agregan al tubo de ensayos en presencia de la
enzima ligasa. Al fragmento de ADN dentro del vector se denomina inserto y el nuevo vector se conoce como vector
recombinante.
3) Modificar el gen
La ventaja de tener el gen clonado en un vector, es que se puede transferir a una bacteria que, al multiplicarse en el
laboratorio, tambin multiplica al vector que porta. De esta forma se logra tener millones de copias del vector recombinante
para poder modificar el inserto que lleva dentro. Modificar el inserto significa agregarle pequeas secuencias de ADN,
mediante el uso de ligasas, necesarias para que el gen funcione correctamente en el organismo receptor. Por ejemplo: si
se clona un gen Bt de una bacteria para luego ponerlo en maz, se debe agregar un promotor que funcione bien en
plantas, es decir, que permita que las clulas vegetales expresen la protena Bt. El promotor es una regin fundamental del
gen ya que determina cundo y dnde se expresar el gen.
Representacin esquemtica de la tcnica de Southern Blot. En este ejemplo se analiza la presencia de un cierto gen en ADN de tres individuos. Esta tcnica consiste
en extraer ADN del organismo en estudio, fragmentar el ADN en forma aleatoria con enzimas de restriccin, someter los fragmentos de ADN a electroforesis en gel de
agarosa, y transferir los fragmentos de ADN desde el gel a una membrana (de nitrocelulosa o nylon). Luego, para detectar cuntas copias del transgn quedaron
integradas al genoma del organismo, se utilizan sondas marcadas (radioactivamente, con fluorescencia, u otros mtodos). La membrana se baa en una solucin que
contiene la sonda y se revela (como una radiografa) para ver si qued marca en algn fragmento de ADN. En la ilustracin las tres muestras de ADN poseen al menos
una copia del gen transferido.
Para la caracterizacin biolgica, el OGM se analiza desde el punto de vista del objetivo (en este ejemplo, si el maz
resulta efectivamente resistente a los insectos) y desde el punto de vista que sea necesario acorde al OGM en cuestin. Si
ser utilizado como alimento y se lo cultivar a campo, entonces se deber hacer el anlisis de riesgo alimentario y
ambiental.
respecto de las tcnicas tradicionales, puesto que elimina gran parte del azar presente en el mejoramiento tradicional. Esta
metodologa ofrece ventajas fundamentales respecto a las tcnicas convencionales de mejora gentica basadas en la
hibridacin:
Los genes que se van a incorporar pueden provenir de cualquier especie, emparentada o no (por ejemplo, un gen de una
bacteria puede incorporarse al genoma de la soja).
En la planta mejorada genticamente se puede introducir un nico gen nuevo preservando en su descendencia el resto de
los genes de la planta original.
Este proceso de modificacin demora mucho menos tiempo que el necesario para el mejoramiento por cruzamiento.
De esta forma se puede modificar propiedades de las plantas de manera ms amplia, ms precisa y ms rpida.
POR QU PRODUCIR CULTIVOS TRANSGNICOS?
Diferentes anlisis de expertos prevn para los prximos aos un incremento de la
demanda mundial de alimentos de entre el doble y el triple de la actual, especialmente en
pases subdesarrollados. Esto conlleva otras consecuencias, como el crecimiento en la
demanda de protenas para alimentacin animal, y mejoras cualitativas en los alimentos
para resolver problemas nutricionales de importantes sectores de la poblacin mundial.
Para lograr estos incrementos y mejoras en la calidad alimentaria deber plantearse una produccin sustentable en
trminos de respeto por el medio ambiente y por la biodiversidad. Y, ante la limitacin de recursos fsicos, como el suelo,
una de las variables disponibles para duplicar la productividad agrcola es el mejoramiento gentico. El incremento de la
eficacia productiva de los organismos puede encararse mediante el mejoramiento gentico convencional (cruzamientos
intra e interespecficos, mutagnesis inducida) o mediante la transformacin gentica. En la actualidad el mejoramiento de
plantas es un proceso multidisciplinario y coordinado, donde un gran nmero de herramientas y elementos de la mejora
tradicional, bioinformtica, biologa molecular e ingeniera gentica son utilizados e integrados.
El mejoramiento gentico convencional enfrenta algunas limitaciones, tanto en trminos de la disponibilidad de
germoplasma, como de los plazos requeridos para la obtencin de nuevas variedades. Las tcnicas de ingeniera gentica
se usan para mejorar o introducir nuevas caractersticas a los cultivos mediante intervenciones ms precisas, rpidas y
predictivas, cuando todas las otras tcnicas de mejoramiento agotan sus posibilidades. Por ejemplo, la ingeniera gentica
se aplica cuando la caracterstica a ser introducida no est presente en la especie de inters, o la caracterstica es muy
difcil de mejorar por mtodos convencionales, o cuando la introduccin o mejora de una caracterstica pueda llevar mucho
tiempo por mtodos convencionales.
La biotecnologa moderna, una alternativa sustentable
La biotecnologa es una alternativa sustentable a las prcticas convencionales. En la actualidad, millones de hectreas en
todo el mundo se cultivan con mtodos conservacionistas para reducir al mnimo el dao a las tierras. Con el paquete
tecnolgico cultivo transgnico tolerante a herbicida - siembra directa es posible evitar la degradacin y erosin del
suelo, por cuanto se reduce o elimina el desmalezado y roturacin de la tierra y se deja en los lotes el residuo de las
cosechas formando una capa protectora con reciclado de materia orgnica al suelo.
Otro problema existente en la agricultura es causado por la escarcha y las sequas o inundaciones que pueden arrasar los
cultivos. La biotecnologa puede proporcionar cultivos con una mayor resistencia a las variaciones climticas naturales y
disminuir la dependencia de la gestin de los recursos hdricos, desarrollando variedades resistentes a estrs hdrico.
Tambin, es posible aumentar la capacidad de las plantas de soportar un descenso de la temperatura y la escarcha.
Los insectos plaga y las enfermedades de las plantas que atentan contra la produccin agrcola exigen una alternativa a
los tratamientos qumicos que sean menos perjudiciales para los recursos naturales. Los cultivos transgnicos pueden
disminuir potencialmente la necesidad de plaguicidas y herbicidas para controlar plagas, malezas y enfermedades y
permitir una aplicacin ms selectiva de los productos qumicos agrcolas. Por ejemplo, los cultivos transgnicos BT
comercializados hace ya varios aos pueden resistir los ataques de los insectos por s mismos. Expertos de todo el mundo
estiman que las innovaciones biotecnolgicas triplicarn los rindes de los granos sin requerir ms tierra cultivada.
Beneficios para el consumidor
La biotecnologa ofrece los medios para producir alimentos ms nutritivos y de mejor gusto, mayor rendimiento de las
cosechas y plantas protegidas naturalmente de enfermedades e insectos. Si bien con la primera generacin de productos
biotecnolgicos en el mercado, caracterizados por mejoras agronmicas (mayor rendimiento, resistencia a insectos, etc.),
los beneficios han sido capitalizados principalmente por los productores, el consumidor se beneficia en el sentido de que
estas variedades ofrecen el potencial de reducir el empleo de agroqumicos. Y, por supuesto, si se reduce el empleo de
fitosanitarios, menor ser la contaminacin ambiental, y la exposicin animal y humana a los qumicos.
No obstante, la siguiente generacin de productos transgnicos est orientada a explotar otros nichos
econmicos y promete beneficios ms directos para la nutricin y salud animal y humana. Estos nuevos cultivos en
desarrollo, podrn presentar modificaciones que mejoren o complementen su calidad alimentaria y modificaciones que les
permitan producir compuestos con diversos fines industriales que mejoren la calidad de vida. Ejemplos de modificaciones
para mejorar el valor nutritivo de las plantas son aquellas que optimizan el balance de aminocidos esenciales que deben
ser provistos por la dieta porque el organismo es incapaz de sintetizarlos, o la composicin de determinados
micronutrientes, por ejemplo, la concentracin de hierro. Tambin es posible modificar rutas metablicas con la finalidad
de producir lpidos o carbohidratos de estructuras especiales, destinados a aplicaciones industriales o alimentarias
especficas (por ejemplo, aceites con distintas composiciones de cidos grasos o almidones de distinta composicin). Por
ltimo, tambin es posible implantar nuevas rutas metablicas para la sntesis de factores nutritivos no proteicos como
vitaminas A o E, que no estn normalmente presentes en las plantas. Un ejemplo de beneficio para el consumidor es el
arroz dorado, el cual podr ayudar a combatir la deficiencia de vitamina A en pases subdesarrollados proveyendo
betacaroteno, precursor de la vitamina A, y hierro. Otros ejemplos en desarrollo son las papas que absorben menor
cantidad de aceite, y alimentos hipoalergnicos (por ejemplo, man y soja libres de componentes alergnicos naturales).
Cultivos genticamente modificados y posibilidades para la industria
La ingeniera gentica hace posible la utilizacin de las plantas para producir molculas de uso industrial (molecular
farming, produccin de molculas en la granja) que antes deban extraerse de otros organismos u obtenerse mediante
fermentacin microbiana. Dentro de estas aplicaciones se incluye la produccin de sustancias de inters farmacolgico o
para la elaboracin de lubricantes y plsticos biodegradables. Tambin se trabaja en las rutas de sntesis de lignina
(polmero que al combinarse con la celulosa da rigidez a la madera) para obtener distintas calidades de madera en los
rboles, o la alteracin de la sntesis de determinados pigmentos para uso textil, cosmtica, pinturas, etc. Finalmente el
mejoramiento de plantas para su utilizacin como materia prima renovable para la produccin de biocombustibles
(bioetanol, biodiesel, biogs) constituye una necesidad mundial y en esto la ingeniera gentica presenta un enorme
potencial.
La seguridad de uso y consumo de los cultivos transgnicos
Pocas tecnologas en la historia de la humanidad han sido introducidas con marcos regulatorios tan estrictos como la
biotecnologa moderna. Las variedades transgnicas son testeadas rigurosamente antes de ser introducidos en el
mercado, en lo que respecta a seguridad ambiental y aptitud de los nuevos cultivos para el consumo humano y animal en
lo que se refiere a composicin sustancial, calidad nutricional y presencia de toxinas o alrgenos. El proceso de anlisis ha
sido seguido regularmente por la comunidad cientfica internacional y ha sido motivo de un intenso debate pblico. Es que
la biotecnologa moderna con el uso de la tecnologa del ADN recombinante es an desconocida para algunos, y esto
despierta incertidumbre y dudas, si no se cuenta con informacin confiable y precisa. Por el contrario, la realidad es que
desde hace ms de 15 aos, el mundo siembra cultivos genticamente modificados y consume sus derivados. Puede
afirmarse que ningn otro tipo de cultivo (de mejoramiento clsico) ha sido sometido a evaluaciones tan rigurosas como los
transgnicos. Millones de personas vienen consumiendo en todo el mundo plantas transgnicas y sus derivados (aceite,
harina, almidn, etc.) desde hace ms de una dcada sin que se haya reportado evidencia cientfica alguna que sugiera
que los alimentos derivados de cultivos genticamente modificados sean ms riesgosos para la salud humana que el resto
de los alimentos. Hasta la fecha no se ha publicado ningn estudio epidemiolgico que demuestre que los alimentos
obtenidos por biotecnologa moderna sean menos seguros que los alimentos tradicionales.
En Argentina, los cultivos genticamente modificados autorizados
para su comercializacin se han estudiado cuidadosamente y
cumplen con las normas de seguridad ambiental y alimentaria
establecidas por la Secretara de Agricultura, Ganadera, Pesca y
Alimentacin (SAGPyA) y sus comits cientficos asesores. El
Comit Tcnico Asesor sobre uso de Organismos Genticamente
Modificados del SENASA (Servicio Nacional de Sanidad y Calidad
Agroalimentaria) estudia la bioseguridad alimentaria de los
cultivos o sus subproductos, la CONABIA (Comisin Nacional
Asesora de Biotecnologa Agropecuaria) analiza los posibles
impactos ambientales del cultivo y la Direccin de Mercados
Agroalimentarios evala los efectos de su comercializacin.
Fuente: http://www.monsanto.com.ar/h/bio_marco_reg.html
lamo, tomate y pimiento transgnicos. En Argentina, los cultivos transgnicos autorizados para su siembra, consumo y
comercializacin son la soja, el maz y el algodn.
Cultivos tolerantes a herbicidas
Uno de los mayores retos que debe afrontar el agricultor al producir sus cultivos es el control de las malezas, es decir de
todas aquellas plantas que crecen en el agroecosistema y compiten con los cultivos provocando una drstica disminucin
del rendimiento y la calidad de los mismos. Debido a esto los productores vienen utilizando rutinariamente, desde muchas
dcadas, diferentes tcnicas de control que incluyen la utilizacin de una batera de herbicidas. Esto es porque la mayora
de los herbicidas comercializados combaten slo ciertos tipos de maleza y estn aprobados para ser usados nicamente
en determinados cultivos y en etapas especficas del desarrollo de las plantas. Por otro lado los residuos de algunos
herbicidas permanecen en el suelo un ao o ms y esto debe ser tenido cuenta a la hora de planificar la siguiente siembra.
Los cultivos transgnicos tolerantes a los herbicidas pueden resolver muchos de estos problemas porque presentan
transgenes que proporcionan tolerancia a herbicidas de amplio espectro, como el glifosato y el glufosinato de amonio, lo
que implica que controlan a casi todos los tipos de plantas excepto aquellas que tienen el gen de la tolerancia al herbicida
(Cultivos tolerantes a herbicida o TH). As, el agricultor puede aplicar un solo herbicida en sus campos sembrados con
cultivos tolerantes en la mayora de las etapas de desarrollo de los cultivos, segn se requiera. Otro beneficio importante
es que esta clase de herbicidas elegidos se descompone con rapidez en el suelo, lo cual elimina el problema de los
residuos de la campaa anterior y reduce los efectos ambientales. El glifosato es no txico para humanos y otros
mamferos, y es rpidamente degradado por microorganismos del suelo.
Cultivos resistentes a insectos
Numerosas plagas atacan los cultivos agronmicos en diferentes pocas del ao y los agricultores deben utilizar distintos
plaguicidas sintticos para salvar las cosechas y evitar grandes prdidas de rendimiento. Estas aplicaciones traen
aparejado problemas de contaminacin ambiental y para la salud de los trabajadores y consumidores.
Con la biotecnologa moderna y ms precisamente con los cultivos BT, surgi una forma alternativa o complementaria de
proteger la produccin agrcola. Los cultivos transgnicos Bt constituyen cultivos a los que se les ha incorporado la
caracterstica de resistencia a insectos. Este desarrollo fue posible gracias al descubrimiento de una protena insecticida (y
el gen involucrado en su expresin) presente en las esporas de una bacteria del suelo, Bacillus thuringiensis (de ah el
nombre BT de los cultivos) (Cultivos resistentes a insectos o Bt). Cmo acta esta protena? Cuando la protena es
ingerida por un insecto (dpteros, lepidpteros, colepteros), al llegar al intestino se descompone y libera una toxina
llamada endotoxina delta. Esta toxina se une al revestimiento intestinal y crea poros que dan como resultado un
desequilibrio inico y parlisis del sistema digestivo del insecto. Despus de unos das, el insecto deja de comer y muere.
Durante ms de cincuenta aos se han usado ms de 2000 toneladas de esporas Bt o protenas derivadas de ellas, como
alternativas biolgicas a los pesticidas convencionales en agricultura orgnica. Estos insecticidas Bt son considerados
inocuos para mamferos y pjaros y menos peligrosos que otros productos tradicionales para los insectos no perseguidos.
Sin embargo, los pesticidas Bt son de produccin costosa y debido a que se degradan rpidamente es necesaria una
reaplicacin frecuente.
En los cultivos transgnicos Bt una versin modificada del gen que codifica la protena BT ha sido incorporada en el ADN
vegetal, de tal modo que la planta transgnica resultante produce la toxina. Cuando el insecto mastica una hoja o barrena
el tallo de la planta que contiene Bt, ingiere la toxina y muere a los pocos das. El empleo de variedades transgnicas
resistentes a insectos (Bt) ha permitido reducir notablemente la cantidad de plaguicidas sintticos, a la vez que los
rendimientos han sido mayores.
Los cultivos transgnicos en Argentina
Los cultivos transgnicos argentinos son: soja, maz y algodn. La reglamentacin existente certifica que los OGM tienen
las mismas propiedades que las variedades convencionales y garantiza a las distintas industrias que los derivados de los
OGM tendrn las mismas aplicaciones y rendimientos que las variedades convencionales.
Soja
La soja es una importante fuente de protenas, calcio, hierro, zinc, fosfato, magnesio, vitamina B,
cidos grasos ms saludables, y otras sustancias que ayudan en la prevencin de enfermedades
cardacas. Adems de emplearla para alimentacin, se la utiliza en la fabricacin de productos
farmacuticos y combustibles.
La soja fue el primer cultivo transgnico en la Argentina. La soja transgnica (soja TH o RR) puede tolerar los efectos de los
herbicidas, es decir que al rociar estos productos sobre el campo sembrado con soja, todas las malezas mueren mientras que la
soja transgnica sobrevive. Hoy en da, casi el 100% de la soja cultivada en los campos es transgnica y tiene esta
caracterstica que es muy til para los agricultores porque les hace ahorrar plata y trabajar de manera ms eficiente.
Maz
El maz es uno de los tres cultivos ms importantes del mundo. A partir de ste se obtienen ms
de 600 productos, los cuales se usan para fabricar alimentos, medicamentos, plsticos, telas,
papel y productos de belleza.
Las caractersticas introducidas al maz, mediante ingeniera gentica son dos: tolerancia a herbicida (al igual que la soja) y
resistencia a insectos plaga (logrando que las plantas de maz produzcan por s mismas un insecticida que elimina a los insectos
que se alimentan de sus hojas o tallos). En la Argentina existen maces TH (tolerantes a herbicidas), BT (resistente a insectos) y
otros que poseen ambas caractersticas (TH y BT). Hoy en da, ms de la mitad del maz cultivado en Argentina es
transgnico.
Algodn
El algodn es un cultivo tpico de las provincias de Chaco y Santiago del Estero. De l se extrae la
fibra del capullo (utilizado en la industria textil), las semillas, e incluso los residuos que quedan
luego de la cosecha.
Al igual que el maz Bt, el algodn Bt es resistente a distintos tipos de insectos, las cuales se alimentan del capullo del algodn y as
se pierde toda la fibra que se extrae de esta planta. El primer algodn Bt apareci en nuestro pas 1998. Ahora, cuando el insecto
plaga se alimenta del algodn transgnico, muere sin la necesidad de aplicar insecticidas y los agricultores trabajan ms seguros
sin riesgo de contraer enfermedades por usar estas sustancias tan peligrosas para su salud. A partir de 2004, tambin se siembra
en nuestros campos, el algodn TH, tolerante al herbicida glifosato.
Nuevos desarrollos
La biotecnologa permite mejorar las propiedades nutritivas de los alimentos y tambin otras caractersticas de inters,
como su sabor, su calidad nutricional, su digestibilidad o su aspecto. Si bien los cultivos mejorados por agrobiotecnologa
todava no se comercializan en nuestro pas, algunos ya estn siendo evaluados como alimento para el consumo
humano. La siguiente tabla muestra algunos ejemplos de los productos que se encuentran actualmente en desarrollo o
en estudio y que ofreceran un beneficio al consumidor:
PRODUCTO
Arroz
Soja
Caf
Gluten
Mandioca
RESULTADO
Arroz ms sano.
Mtodos similares pueden
ser utilizados para eliminar
las protenas alergnicas
del man, la soja o la nuez
del Brasil.
Soja menos alergnica
Caf descafeinado
PRODUCTO
Vegetales
varios
Tomates
PRODUCTO
Arroz
Cultivos
oleaginosos
Cultivos
varios
Papa
reproduccin de la yuca.
Introduccin o aumento de sustancias promotoras de la salud
MEJORAMIENTO POR INGENIERA
CARACTERSTICA ASOCIADA
RESULTADO
GENTICA
Existen sustancias vegetales, llamadas fitoqumicas,
Las especies del gnero Brsica como el brcoli Vegetales con propiedades
que estaran involucradas en proporcionar efectos
o el coliflor tienen alto contenido en
beneficiosas para la salud.
beneficiosos para la salud. Por ejemplo, se cree que
glucosinolatos, lo que les dara su sabor y olor
algunos fitoqumicos presentes en la cebolla y el ajo,
caractersticos. Se estn realizando esfuerzos
los fitoestrgenos presentes en la soja, y los
tanto con la ingeniera gentica como con la
glucosinolatos presentes en el brcoli o coliflor,
mejora vegetal convencional, para aumentar el
podran tener efectos en la prevencin de algunos
nivel de glucosinolatos de sabores suaves
tipos de cncer. Por otra parte, los flavonoides de
agradables y beneficiosos para la salud.
frutas y verduras son importantes antioxidantes de la
dieta (reducen los efectos perjudiciales de los
radicales libres).
El licopeno es un componente del tomate y tiene un
Mediante ingeniera gentica se pueden
Tomates con mayor contenido
efecto antioxidante, es decir que neutraliza los
aumentar los niveles de licopenos agregando
de licopeno
radicales libres que se producen en el organismo y
los genes que tienen la informacin para
que llevan al envejecimiento celular y al desarrollo de
fabricar las enzimas que intervienen en la
enfermedades cardiovasculares y ciertos tipos de
sntesis del licopeno.
cncer.
Modificacin en la proporcin de macro o micronutrientes
MEJORAMIENTO POR INGENIERA
CARACTERSTICA ASOCIADA
RESULTADO
GENTICA
El arroz es un alimento bsico de muchas reas de
Se ha desarrollado mediante tcnicas de
Arroz dorado, suplementado
frica, Asia y Amrica Latina, pero es deficitario en
ingeniera gentica arroz suplementado con
con provitamina A.
varios nutrientes esenciales, entre ellos la vitamina A.
provitamina A (betacaroteno).
Su carencia puede provocar ceguera, y exacerba la
Debido a que no existen variedades de arroz
diarrea, afecciones respiratorias y enfermedades
que produzcan provitamina A en el
infantiles como el sarampin. La administracin oral de
endospermo (parte nutritiva del grano) no es
vitamina A es problemtica, principalmente por la falta
factible un mtodo de mejora convencional.
de una estructura de transporte y distribucin en
algunas de las regiones ms seriamente afectadas.
Aceites que se emplean como ingredientes en una
Una canola genticamente modificada que
Vegetales con aceites y
serie de productos alimentarios. El consumo de
contiene un gen del laurel de California
cidos grasos de mayor
algunos tipos de cidos grasos, que componen los
produce aceite rico en laurato, que podra
valor nutricional.
lpidos, podra tener consecuencias indeseables sobre
reemplazar algunos aceites que se emplean
el sistema cardiovascular.
en productos alimentarios. Se estn
desarrollando cultivos de canola y soja con
una composicin de lpidos alterada que
podra dar lugar a aceites con una
composicin ms sana, como cidos grasos
insaturados omega-3.
Presencia de almidn que puede tener diferentes
Cultivos genticamente modificados con una
Almidn de composicin
aplicaciones industriales.
composicin alterada de almidn para
alterada para su utilizacin
adecuar su utilidad a aplicaciones
con fines especficos.
determinadas, como agentes espesantes,
excipientes y estabilizantes alimentarios, u
otras aplicaciones industriales no
alimentarias.
Presencia de almidn que absorbe aceites.
Se han desarrollado papas con una
Papas con almidn
composicin de almidn alterada que absorbe
modificado.
menos grasa al frerse.
expresin nicamente en la glndula mamaria. De esta forma se consigui la expresin de genes que producen sustancias
con funcin farmacolgica en glndulas mamarias de ovejas, de cabras y de vacas. La primera ternera transgnica
desarrollada por clonacin fue obtenida por BioSidus en Argentina, y produce la hormona de crecimiento humana en su
leche.
Mansa es una ternera argentina que naci en 2002. Fue la
primera ternera clonada y transgnica, y pertenece a una
serie de experimentos que realiza la empresa BioSidus.
Esta investigacin empez con el nacimiento de Pampa en
2001, la primera ternera clonada del mundo (no
transgnica) que demuestra que las vacas se pueden
clonar y se pueden hacer transgnicas. Pampa se hizo con
una tcnica similar a Dolly pero en lugar de clulas de la
ubre se utilizaron clulas fetales. Luego lleg Pampa
Mansa y sus hermanas que, adems, son transgnicas.
Permite obtener a partir de un microorganismo, cultivo de clulas, planta o animal una protena completamente ajena, tal
INDICACIN TERAPUTICA
Hemofilia
Diabetes mellitus
Deficiencia de la hormona en nios
Anemia
Hepatitis B y C, cncer
Inmunizacin contra hepatitis B
Asma, artritis reumatoidea
Sepsis severa
Enfermedad de Gaucher
Fibrosis qustica
La siguiente tabla resume algunas enzimas producidas como protenas recombinantes en bacterias y en hongos
genticamente modificados, y que actualmente se usan en la industria alimenticia:
ENZIMAS
Alfa-amilasa
Aminopepetidasa
Fosfolipasa
Glucosa isomerasa
Hemicelulosa
Lactasa
Lipasa
Pectinasa
Proteasa
Quimosina
Xilanasa
BIOTECNOLOGA Y SALUD
Desde tiempos remotos, el hombre suea con derrotar enfermedades y, as, prolongar
su vida. Los mtodos para lograrlo fueron variando en diferentes pocas y culturas de
acuerdo con las creencias y los conocimientos del momento acerca del cuerpo humano
y de su funcionamiento. A partir del siglo XIX y hasta la actualidad, la ciencia y la
tecnologa avanzaron aceleradamente. Esto ha permitido conocer detalles de la
estructura y del funcionamiento del cuerpo humano, identificar las causas de muchas
enfermedades y encontrar la forma de prevenirlas, de curarlas o tratarlas. Uno de los
hitos de la medicina fue el descubrimiento de la penicilina en el siglo XX por Alexander Fleming, el antibitico ms usado
actualmente en el mundo que logr curar las infecciones y salv innumerables vidas. A partir de este descubrimiento, se
desarrollaron muchos otros antibiticos.
Durante las ltimas dcadas con el advenimiento de la biotecnologa moderna, el conocimiento de la estructura y el
funcionamiento del ADN, se estn desarrollando nuevas tcnicas para diagnosticar, prevenir, tratar y curar enfermedades.
El estudio del genoma humano permitir acelerar la identificacin de aquellos genes causantes de enfermedades, y
aportar valiosa informacin a las investigaciones cientficas en el rea de la salud.
En la actualidad, existen muchas aplicaciones de las herramientas biotecnolgicas en el rea de la medicina y la salud,
algunas se detallan a continuacin:
Diagnstico de enfermedades
El desarrollo de tcnicas para el diagnstico de enfermedades infecciosas o hereditarias es una de las aplicaciones de
mayor impacto de la tecnologa del ADN. Al utilizar las tcnicas de secuenciacin de ADN y de PCR (Reaccin en Cadena
de la Polimerasa) los cientficos pueden diagnosticar infecciones virales, bacterianas o fngicas. La tuberculosis, el SIDA y
muchas otras enfermedades infecciosas, son diagnosticados mediante tcnicas de PCR en forma ms sencilla y rpida
que por los mtodos tradicionales, permitiendo la intervencin y tratamientos ms tempranos. Las enfermedades
hereditarias son aquellas ligadas a la herencia gentica. Actualmente se conocen las alteraciones genticas que originan
muchas enfermedades hereditarias y por lo tanto es posible no slo explicarlas sino tambin diagnosticarlas y controlar a
los portadores de esos genes para posibilitar su diagnstico precoz y evitar el desarrollo de la enfermedad. En las familias
en las que se conoce que el riesgo de transmitir una enfermedad hereditaria es alto, el anlisis gentico de los futuros
padres as como el diagnstico prenatal son de un gran valor para poder anticiparse al problema.
Adems de la tcnica de PCR, se utilizan otros mtodos diagnsticos de enfermedades, como los anticuerpos
monoclonales, los chips de ADN y los biosensores.
Debido a la propiedad de unirse especficamente a los antgenos, los anticuerpos monoclonales se utilizan para
desarrollar mtodos de anlisis muy sensibles y precisos que permiten detectar la presencia de estos antgenos, como por
ejemplo en la sangre, donde el mismo puede ser una sustancia libre, estar unida a otras sustancias o incluso formar parte
de clulas aisladas u organismos completos, como virus o bacterias. Muchos de ellos son usados en anlisis cotidianos de
laboratorio como el ELISA, que detecta una amplia variedad de agentes infecciosos.
Un Anticuerpo es protena fabricada por las clulas del sistema inmune como respuesta a la presencia de una molcula
extraa (antgeno). El anticuerpo se une directamente al antgeno para neutralizarlo, o para desencadenar una serie de
reacciones complejas para eliminar al patgeno que lo presenta. La estructura del anticuerpo puede parecer simple, pero
la naturaleza extraordinaria que posee el sistema inmune para producir anticuerpos especficos contra un nmero
incalculable de diferentes antgenos es poco menos que inconcebible. Los anticuerpos se unen a sus respectivos
antgenos a travs de las regiones de complementariedad. Los Anticuerpos monoclonales son anticuerpos producidos por
un clon de clulas (clulas originadas a partir de una nica clula) y que, por lo tanto, reconocen a un nico determinante
antignico. La pureza de los anticuerpos monoclonales permite su uso para fines de diagnstico (para identificar in vitro
precisamente a un antgeno buscado) y tambin teraputico. Para el investigador, los anticuerpos se han transformado en
una herramienta fundamental para identificar y enriquecer molculas especficas en gran variedad de contextos:
en Western blots, ELISAs, ChIPs, Inmunoprecipitaciones e Inmunofluorescencia de clulas y tejidos. En el campo mdico,
los anticuerpos estn adquiriendo mayor utilidad como agentes teraputicos para el tratamiento de diferentes cnceres y
desordenes inmunes. El gran nmero y variedad de aplicaciones para las que son tiles los anticuerpos contina
creciendo a medida que conocemos mejor estas increbles molculas.
En la tcnica denominada ELISA se deja interactuar el suero del paciente (representado por
puntos rojos) con un anticuerpo especfico (en amarillo). Luego se agrega una
inmunoglobulina unida con una enzima (en azul) que se une al anticuerpo humano.
Finalmente se agrega un sustrato para la enzima. La enzima ligada al complejo acta sobre
el sustrato, produciendo cambio de color, que puede cuantificarse. El color que se produce es
proporcional a la cantidad de anticuerpo especfico que se fija al antgeno. En conclusin, la
presencia de color indica la presencia del antgeno. Este mtodo se utiliza en la deteccin de
virus hepatitis, virus varicela-zoster, Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, rotavirus,
adenovirus, entre otros.
Los Chips se basan en la propiedad de hibridacin del ADN, es decir que una hebra de simple cadena se unir o aparear
con otra de secuencia complementaria. Los chips sirven para identificar las molculas de ARN o de ADN contenidas en
una determinada muestra (por ejemplo, tejido tumoral). Gracias a esta tcnica, es posible el anlisis simultneo de miles
de genes en un solo experimento. Progresivamente, los chips tambin se estn aplicando en el diagnstico clnico y en
teraputica. El desarrollo de muchas enfermedades as como tambin la respuesta de los pacientes a ciertos frmacos,
viene dado por mutaciones de genes. A medida que se identifiquen dichos genes, los chips de ADN sern muy tiles para
identificar los individuos con mayor riesgo de desarrollar una determinada enfermedad as como para escoger el
tratamiento farmacolgico personalizado ms indicado. Actualmente, los chips de ADN permiten diferenciar subtipos
dentro de un mismo tumor lo que facilita un pronstico mucho ms acertado y seguro.
Un biosensor es un dispositivo de anlisis que utiliza un ser vivo o un producto derivado de ste, habitualmente enzimas,
capaces de modificar especficamente una sustancia contenida en una mezcla (sangre, orina, etc.). Los sensores
enzimticos ms fciles de utilizar y de mayor precisin contienen una enzima directamente unida a un elemento
electrnico que mide la intensidad de la reaccin enzimtica y as determina la concentracin del compuesto que se quiere
analizar. Hoy en da, se pueden obtener por biotecnologa enzimas recombinantes en grandes cantidades, que resultan
muy tiles para el diseo de numerosos sistemas de diagnstico: analizadores automticos de hospitales, tiras de
diagnstico individuales, biosensores electrnicos, etc. El ejemplo ms exitoso y difundido hasta el momento es el
biosensor para medir la glucosa en sangre de pacientes diabticos. Se trata de un dispositivo ms pequeo que un
telfono celular, cuyo medio de reconocimiento es la enzima glucosa oxidasa.
Produccin de protenas recombinantes
La recombinacin de genes humanos en el ADN de bacterias es una de las posibilidades ms importantes que ofrece la
biotecnologa. Esta tcnica posibilita obtener protenas humanas con fines teraputicos en sistemas de crecimiento rpido.
El ejemplo ms conocido es la obtencin de insulina humana a partir de la insercin del gen que la produce en plsmidos
de la bacteria Escherichia coli. Esta tcnica es de gran valor porque las bacterias, al duplicar su nmero cada 20 minutos,
producen en poco tiempo muchas copias del gen humano inserto en su ADN y en consecuencia, grandes cantidades de
protenas recombinantes.
Actualmente, los frmacos provenientes de organismos recombinantes se producen bsicamente en tres sistemas:
bacterias (fundamentalmente E. Coli), en levaduras, y en clulas de mamfero (en placas de laboratorio). Entre muchos
ejemplos, se pueden nombrar:
-Los factores de coagulacin VIII, IX y VIIa, indicados en el tratamiento de algunos tipos de hemofilia, producidos en cultivo
de clulas de mamfero.
-Algunas hormonas, como la folculo estimulante, tirotrofina, gonadotrofina corinica (en clulas de mamfero), insulina,
hormona de crecimiento, paratifoidea (en E. coli) y glucagon e insulina (en levaduras).
-Anticoagulantes como la irudina y activadores del plasmingeno tisular (en los tres sistemas).
-Factores hematopoyticos como el interfern alfa y gamma, producidos en E. coli.
-Anticuerpos monoclonales Anti-IgE , Anti-TNF y Anti-IL2, producidos en cultivo de clulas de mamfero.
Si bien, hasta el momento, estas protenas recombinantes son producidas solamente en estos tres sistemas, con el
advenimiento de las tcnicas de ingeniera gentica que permitieron obtener animales y plantas transgnicos surgi
tambin la posibilidad de utilizar a stos como productores de protenas recombinantes de inters farmacolgico. La
estrategia de utilizar animales de granja (ovejas, vacas, cerdos, cabras, gallinas, conejos, etc.) como fbricas de productos
farmacolgicos recombinantes se denomina Granja farmacolgica. Como ejemplo de una protena producida en un
animal transgnico se puede nombrar a la hormona de crecimiento humano para tratar casos de enanismo. Esta hormona
es producida por la primera vaca transgnica, llamada Pampa Mansa, y es un desarrollo de investigadores argentinos.
Produccin de antibiticos
nmero de copias de los genes que codifican para las enzimas que intervienen en la produccin del antibitico. De esta
forma se fabricar, a partir de una misma clula, ms cantidad del producto final.
Tambin, una vez conocidas las enzimas que participan en la sntesis del antibitico, la ingeniera gentica permite
transferir estos genes a organismos ms fciles de crecer y manipular en el laboratorio, como Escherichia coli, para que
stos produzcan el antibitico deseado en forma ms rpida.
En la actualidad no slo se fabrican antibiticos naturales, es decir, a partir del cultivo a gran escala de microorganismos,
sino que tambin hay antibiticos sintticos y semi-sintticos. Los antibiticos sintticos se producen en el laboratorio a
travs de procesos de sntesis qumica, como es el caso de las sulfamidas. Otros antibiticos se obtienen a partir de
cultivos microbianos y luego se modifican qumicamente. stos ltimos son los antibiticos semi-sintticos, como por
ejemplo, la ampicilina, derivada de la penicilina.
Produccin de vacunas recombinantes
Las vacunas constituyen un mtodo preventivo, mediante el cual el individuo adquiere
inmunidad permanente contra algn agente patgeno especfico. Tradicionalmente, las
vacunas son preparadas a base del agente que causa la enfermedad, pero en un estado no
patognico. Estas vacunas, si bien son muy eficaces, presentan algunas dificultades ya que no
todos los microorganismos se pueden cultivar en el laboratorio, la produccin a menudo es
cara, se requieren medidas muy estrictas para asegurar la completa inactivacin o la atenuacin adecuada de la cepa.
Es por eso que, desde principios de la dcada de 1980, se estn desarrollando nuevas vacunas que, posiblemente,
reemplazarn en un futuro a las vacunas tradicionales. Estas nuevas vacunas son producidas por ingeniera gentica,
basadas en la molcula de ADN y en las secuencias de aminocidos que contienen la informacin gentica con la cual el
organismo patgeno produce la enfermedad. El primer exponente de vacunas recombinantes comercializada fue la vacuna
contra la hepatitis B y en la actualidad se estn desarrollando investigaciones en vacunas contra el virus del HPV, la
malaria, el citomegalovirus, la shigella, el herpes, enfermedades parasitarias como la toxoplasmosis, el HIV, el clera, el
dengue, y varios tipos de cncer.
Las nuevas vacunas pueden clasificarse de la siguiente manera:
-Vacunas atenuadas: mediante tcnicas de ingeniera gentica, se pueden eliminar los genes de virulencia de un agente
infeccioso manteniendo la habilidad de provocar una respuesta inmune. En la actualidad, se encuentra en fase de ensayos
clnicos una vacuna de cepas estables del agente del clera (Vibrio cholerae).
-Vacunas vectores o de organismos recombinantes vivos: utilizan microorganismos no patgenos (virus o bacterias) a los
cuales se les incorporaron, mediante ingeniera gentica, genes de agentes patgenos que codifican para los antgenos
que desencadenan la respuesta inmune. De esta manera, se ha desarrollado una vacuna contra la rabia. Tambin se han
ensayado las expresiones de genes que codifican para antgenos de virus de la hepatitis B, de la gripe y del herpes simple.
-Vacunas de subunidades: para aquellos agentes infecciosos que no se pueden mantener en cultivo, se pueden aislar los
genes que codifican para las protenas que provocan la respuesta inmune (por ejemplo, las protenas de las cpsulas de
los virus) y expresar en un husped alternativo. Luego producir subunidades de protenas en grandes cantidades, las
cuales son recolectadas y purificadas para utilizarlas como vacunas. La vacuna contra la hepatitis B fue la primera vacuna
puesta en el mercado producida por este mtodo.
-Vacunas de ADN: son las vacunas en experimentacin que suscitan ms expectativa. stas consisten en unos pequeos
anillos de ADN llamados plsmidos en los que se introduce tan slo la pequea fraccin del material gentico del patgeno
contra el que se pretende inmunizar (los genes que codifican la produccin de uno o varios de sus antgenos). Cuando se
inyecta el plsmido en el msculo o en la piel, ste penetra dentro de la clula y llega al ncleo, para comandar desde all
la produccin de los antgenos del patgeno que desencadenarn la respuesta inmune. De esta forma lo que se hace es
trasladar la fbrica de la vacuna a los tejidos de la misma persona. Actualmente, se estn realizando ensayos de varias
vacunas de este tipo -para la hepatitis B, la malaria, la gripe, el herpes simple y el SIDA-.
Adems, en la actualidad se desarrollan diversas investigaciones centradas en mejorar las vacunas ya existentes para
lograr respuestas inmunitarias ms eficaces, buscar nuevas vas de administracin, y unir varias vacunas en una nica
aplicacin para reducir el nmero de inyecciones. Se estn estudiando otras vas de administracin de las vacunas, como
la nasal (a travs de las mucosas) o intradrmicas (en la piel, aunque sin pinchazo). Otra opcin de administracin de
vacunas muy interesante la constituyen aquellas que podran ingerirse con los alimentos o vacunas comestibles. El
objetivo de estas investigaciones es desarrollar, mediante ingeniera gentica, frutas o productos lcteos que sean iguales
a los productos que se consumen habitualmente excepto por una nica diferencia: la presencia de una protena capaz de
iniciar la respuesta inmune en el organismo. De esta forma, cuando el alimento es ingerido, se confiere inmunidad contra
determinados agentes patgenos especficos. As, estos alimentos pueden emplearse como vacunas comestibles para
seres humanos y animales.
El anlisis de ADN tiene numerosas aplicaciones de inters para el hombre. Por ejemplo, sirve
para diferenciar variedades de cultivos, identificar cepas de microorganismos causantes de
enfermedades, reconocer animales valuados en miles de dlares (caballos de carrera, toros
sementales), acelerar programas de mejoramiento gentico de especies vegetales y animales,
identificar biodiversidad, entre otras aplicaciones. Adems, efectivamente, debido a que todos
los individuos son diferentes, las molculas de ADN permiten identificarlos y resolver casos de
filiacin y de criminologa.
previamente el tamao de las unidades de repeticin y su secuencia. Por eso, las tcnicas de identificacin basadas en
ADN satlite requieren de un cierto conocimiento previo del genoma de la especie en estudio. En general, este tipo de
ADN muestra una variabilidad excepcional entre individuos, particularmente en lo que respecta al nmero de repeticiones
en cada lugar o locus, y esto es importante para la identificacin.
Tambin es posible identificar individuos a partir de mutaciones puntuales mediante la amplificacin aleatoria por PCR
(Polimorfismos de ADN por Amplificacin Aleatoria o RAPD por las siglas en ingls Random Amplification of Polymorphic
ADN). Las mutaciones puntuales en los genomas de los distintos individuos harn que un cierto fragmento de
amplificacin se pueda generar o no, lo cual se ver reflejado en el posterior patrn de bandas de la electroforesis en gel.
Esquema que representa la amplificacin aleatoria por
PCR. El individuo 1 y el 2 difieren en secuencia en la
regin marcada con crculo rojo, debido a una mutacin
puntual, y esta diferencia en el ADN provoca que no se
obtenga producto de PCR sobre esa regin del ADN
para el individuo 2. En un gel de agarosa se ver esa
banda en el individuo 1, pero no se ver en individuo 2.
LOS BIOCOMBUSTIBLES
El hombre y la energa
El ser humano, como todo ser vivo, depende del entorno para obtener energa. Previo al desarrollo industrial, el hombre
utilizaba los animales, los vegetales, la fuerza del viento y del agua para obtener la energa necesaria para sus funciones
vitales, para producir calor, luz y transporte. Luego, el hombre pas a utilizar fuentes de energa almacenada en recursos
fsiles, primero fue el carbn y posteriormente el petrleo y el gas natural. Actualmente, los combustibles fsiles y la
energa nuclear proporcionan cada ao alrededor del 90% de la energa que se utiliza en el mundo. Pero las reservas de
combustibles fsiles son limitadas y, en mayor o menor grado, son contaminantes.
Desde mediados del siglo XX, con el crecimiento de la poblacin, la extensin de la produccin industrial y el uso masivo
de tecnologas, comenz a crecer la preocupacin por el agotamiento de las reservas de petrleo y el deterioro ambiental.
Desde entonces, se impuls el desarrollo de energas alternativas basadas en recursos naturales renovables y menos
contaminantes, como la luz solar, las mareas, el agua, y la bioenerga proveniente de los biocombustibles.
Qu son los biocombustibles?
A diferencia de los combustibles fsiles que provienen de la energa almacenada
durante largos perodos en los restos fsiles, los biocombustibles provienen de la
biomasa, o materia orgnica que constituye todos los seres vivos del planeta. La
biomasa es una fuente de energa renovable, pues su produccin es mucho ms
rpida que la formacin de los combustibles fsiles. Entre los cultivos posibles de
utilizar para la elaboracin de biocombustibles, estn los de alto tenor de
carbohidratos (caa de azcar, maz, mandioca), las oleaginosas (soja, girasol,
palmas) y las esencias forestales (eucalipto, pinos).
En gran parte del mundo, la lea (o carbn vegetal) que se obtiene a partir de la madera sigue siendo el principal
biocombustible empleado para la cocina, la calefaccin y la luz. Esta fuente de energa es un recurso renovable si se
obtiene a partir de bosques convenientemente reforestados. Asimismo, muchos vehculos utilizan biocombustibles a base
de metanol y etanol mezclado con gasolina. Se puede obtener etanol a partir de la caa de azcar, de la remolacha o el
maz. En algunos pases como la India y la China producen biogs a partir de la fermentacin natural de desechos
orgnicos (excrementos de animales y residuos vegetales).
La obtencin de biocombustibles
Segn la naturaleza de la biomasa y el tipo de combustible deseado, se pueden utilizar diferentes mtodos para obtener
biocombustibles: procesos mecnicos (astillado, trituracin, compactacin), termoqumicos (combustin, pirolisis y
gasificacin), biotecnolgicos (micro bacterianos o enzimticos) y extractivos. En la siguiente tabla se presenta una
sntesis de estos principales procesos de transformacin y de los biocombustibles derivados, as como las aplicaciones
ms frecuentes en cada uno de ellos. Cada uno de estos procesos se inicia con la biomasa vegetal que se forma a partir
del proceso de fotosntesis, con el aporte de la energa solar que captan y transforman estos organismos.
Tcnicas
Productos
Aplicaciones
Mecnicos
Astillado
Trituracin
Compactacin
Leas
Astillas
Briquetas
Aserrn
Calefaccin
Electricidad
Pirolisis
Carbn
Aceites
Etanol
Varios
Biogs
Co2, CH4
Calefaccin
Calefaccin
Transporte
Calefaccin
Electricidad
Electricidad
Industria qumica Electricidad
Transporte
Transporte
Industria qumica
Industria qumica
Fuente: http://usuarios.lycos.es/biodieseltr/hobbies4.html
Extractivos
Extraccin
fsicoqumica
Aceites
steres
Hidrocarburos
Transporte
Industria qumica
Cada tcnica depende del tipo de biomasa disponible. Si se trata de un material seco puede convertirse en calor directo
mediante combustin, el cual producir vapor para generar energa elctrica. Si contiene agua, se puede realizar la
digestin anaerbica que lo convertir en metano y otros gases, o fermentar para producir alcohol, o convertir en
hidrocarburo por reduccin qumica. Si se aplican mtodos termoqumicos es posible extraer metanol, aceites, gases, etc.
El mtodo de la digestin por el cual se obtiene biogs es el ms empleado.
3. El Biogs
Casi tres mil millones de personas en el mundo emplean todava la lea como fuente de energa para calentar agua y
cocinar, lo que provoca, entre otros efectos, la prdida de millones de hectreas de bosques tropicales y zonas arboladas.
En respuesta a esta situacin surgen otras alternativas para obtener energa, entre ellas, la produccin de biogs a partir
de la fermentacin de la materia orgnica. Para la obtencin de biogs se puede utilizar como materia prima la excreta
animal, la cachaza de la caa de azcar, los residuales de mataderos, destileras y fbricas de levadura, la pulpa y la
cscara del caf, as como la materia seca vegetal. Esta tcnica permite resolver parcialmente la demanda de energa en
zonas rurales, reduce la deforestacin debida a la tala de rboles para lea, permite reciclar los desechos de la actividad
agropecuaria y, es un recurso energtico limpio y renovable.
El biogs que se desprende de los tanques o digestores es rico en metano que puede ser empleado para generar energa
elctrica o mecnica mediante su combustin, sea en plantas industriales o para uso domstico. El biogs se obtiene al
descomponerse la materia orgnica debido a la accin de cuatro tipos de bacterias, en ausencia de oxgeno:
-las hidrolticas, que producen cido actico, compuestos monocarbonados, cidos grasos orgnicos y otros compuestos
policarbonados;
-las acetognicas, productoras de hidrgeno;
-las homoacetognicas, que pueden convertir una cantidad considerable de compuestos carbonados en cido actico;
-las metanognicas, productoras del gas metano, principal componente del biogs, con una proporcin de 40 a 70 % de
metano (CH4).
BIBLIOGRAFA
- EL CUADERNO, boletn didctico del Programa Educativo Por Qu Biotecnologa. Disponible en
http://www.porquebiotecnologia.com.ar/index.php?action=cuaderno&opt=5.
- Gabriela Levitus, Viviana Echenique, Clara Rubinstein, Esteban Hopp, Luis Mroginski. 2014. Biotecnologa y
Mejoramiento Vegetal II. Ediciones INTA.
- PIERCE, B. 2010. Gentica, un enfoque conceptual. Editorial Mdica Panamericana, Madrid, Espaa.