Universidad Nacional Mayor de San Marcos

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

EAP DE TECNOLOGIA MDICA

GUIA DE PRACTICAS N 3
I.- OBJETIVOS:
-Realizar el Examen qumico de las muestras de orina a travs del uso de las tiras
reactivas de orina.
-Ejecutar, calificar y reportar la prueba confirmatoria qumica de: Thevenon, Ehrlich,
Benedict, Sulfosalicilico y Iodo.
-Ejecutar la prueba confirmatoria qumica de Lugol.

II.-INTRODUCCION
El examen qumico de la orina evala la composicin qumica del espcimen que se est analizando
para ello se ha estandarizado el uso de la tiras reactivas de orina.

CONSIDERACIONES A TENER EN CUENTA:

-Se debe de leer segn el tiempo prescripto por el fabricante.
-Las tiras no deben ser expuestas a la luz, calor, humedad debiendo guardarse en su envase original.
-No se debe exponer a sustancias voltiles.
-No exponerlas a temperaturas superiores a los 30C.
-Sacar la cantidad de tiras necesarias.
-Descartar las tiras si presentan coloracin o ya han caducado.
-Se debe de analizar la orina antes de las dos horas, ya que los tiempos de espera prolongados,
pueden dar lugar a falsos resultados debido a lisis celular, aumento de bacterias, aumento del pH,
formacin de cristales, oxidacin de la bilirrubina y urobilinogeno.
-Se ha observado interferentes propios de la muestra como el cido ascrbico, o contaminacin
externa por restos de detergentes en el material, que alteran los resultados.

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Breve descripcin de las determinaciones incluidas en las tiras reactivas:
1.-Leucocitos, los PMN poseen una enzima de tipo esterasa que es la responsable de la reaccin y da
el color violeta a la almohadilla.
Resultados: se considera normal valores debajo de los 5 cel. X campo o 10000 por ml. Sospechoso
cuando hallamos entre 10 a 20 x campo. Ms de 20 ya es patolgico. Considerar el tipo y la
procedencia de la muestra.
2.-Nitritos, algunas entero bacterias producen enzimas capaces de dar una reaccin qumica que
colorea la almohadilla de color rojo en diferentes tonos dependiendo de la cantidad de bacterias
presentes en la muestra.
Resultados: Negativo.
3.-Proteina, la tira contiene un indicador que en presencia de protenas vira de color de amarillo al
verde. Si hay reaccin se debe de verificar con el uso de cido sulfosalicilico al 5% .
Resultados: Normal hasta 30 mg/dl en la primera orina de la maana. La tira no detecta estos valores.
Si la lectura es positiva se sugiere la cuantificacin a travs de la proteinuria en orina de 24 horas.
4.-Glucosa, por una reaccin qumica compleja se colorea la almohadilla que vira en distinta gamas
de color rojo directamente proporcional a la cantidad de glucosa presente en la muestra.
Se confirma en algunos casos con Reactivo de Benedict.
Resultados, Normalmente es negativo. Cuando la glucosa supera el umbral renal se da la presencia
de glucosuria, la mayor parte de los casos son de pacientes diabticos, aunque existen otras causas
a nivel tubular, hipertiroidismo, asfixia, gastrectoma, etc.
5.-Cuerpos cetonicos, La almohadilla especfica para los cuerpos cetonicos reacciona qumicamente
y vira hacia un color morado.
Resultados, Normal negativo hasta 5 mg/dl indetectable por la tira. Se observa en casos de diabetes
descompensada, fiebre o ayuno prolongado.
6.-Urobilinogeno, Las tiras reactivas presentan almohadillas que reaccionan con el urobilinogeno y
viran hacia un color naranja. Para corroborar se usa el reactivo de Ehrlich.
Resultados, Normal hasta 1 mg/dl. Se halla aumentado en trastornos hepticos y hemolisis.
7.-Bilirrubinas, la bilirrubina reacciona qumicamente con reactivo diazo y vira hacia un color naranja.
Para su verificacin se usa la prueba del iodo de Smith.
Resultados, normalmente negativo. La bilirrubina est ausente en los casos de ictericia hemoltica y
aumentada en los casos de hepatitis, ictericia obstructiva y neoplasia de cabeza de pncreas.
8.-Sangre, la almohadilla tiene componentes qumicos capaces de detectar la presencia de
hemoglobina en los hemates intactos o la hemoglobina libre. Se debe verificar con la presencia de
hemates en el sedimento. Qumicamente se usa la reaccin de thevenon para verificar la presencia
de hemoglobina.
Resultados, normalmente negativo. Se halla elevado en casos de hematuria. Hemoglobinuria y
mioglobinuria.

III EQUIPOS Y MATERIALES

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Tiras reactivas de orina

Tubos 13x100 tipos prex.
Tubos de 12x 75
Gradillas
Papel toalla
Guantes
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Reactivo de Benedict.
Reactivo de Ehrlich
Reactivo de Lugol.
Reactivo de Thevenon.
Mechero de Bunsen

IV DESARROLLO DE LA PRCTICA
1.-ANALISIS QUIMICO.
Fundamento.
Es el estudio de la composicin qumica de ciertos metabolitos presentes en la muestras de orina
que tienen relevancia clnica y sern de utilidad para el diagnstico de ciertas patologas que afectan
al ser humano.
Procedimiento Tcnico
1.-Enumerar las muestras corroborando los datos de las ordenes y los rotulo de los frascos.
2.-Rotular los tubos de vidrio de 13x100
3.-Cargar una cantidad adecuada 5 ml aproximadamente de la muestra de orina.
4.-Sumergir la tira reactiva por 1 o 2 segundos y retirar de inmediato
5.-Secar el exceso de muestra con papel absorbente por los lodos y la parte posterior.
6.-Esperar el tiempo que indica el fabricante.
7.-Comparar la tira con la tabla que viene en el envase.
8.-Calificar cada uno de los analitos segn la escala cromtica y en cruces.
9.-Verificar mediante el uso de los reactivos especficos aquellos que den una reaccin.
10.-Anotar los resultados por cada analito.
NOTA: Antes de realizar la corrida diaria se debe de correr un control normal y patolgico para
verificar la calidad de nuestras tiras.
2.-PRUEBAS CONFIRMATORIAS DEL EXAMEN QUIMICO
1.-Prueba de Ehrlich
Fundamento:
La p-dimetilaminobenzaldehido reacciona con el urobilinogeno para dar un complejo coloreado de
color rojo.
Procedimiento Tcnico:
1.- Colocar 2.5 ml de muestra de orina fresca recin emitida en un tubo de vidrio.
2.-Aadir 0.25 ml de reactivo de Ehrlich.
3.-Dejar reposar por minutos y observar
Resultados:
De color ligeramente rosa a rosceo norma.
Color Rojo cereza Urobilinogeno aumentado.
2.-Prueba de Iodo.
Fundamento:
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El iodo reacciona con los pigmentos biliares presentes en la orina formando un complejo coloreado
de color verde.
Procedimiento tcnico:
1.-Colocar 2.5 ml de orina en un tubo de vidrio.
2.-Aadir 1.0 ml de reactivo de iodo.
3.-Cuando hay bilirrubina se forma un anillo color verde en la interface de ambos lquidos.
Resultados:
Se califica como positivo o negativo.
3.-Test con Reactivo de cido Sulfosalicilico
Fundamento:
Las protenas tienden a precipitarse por denaturacion en medio acido.
Procedimiento tcnico:
1.-Cargar 2.5 ml de muestra de orina centrifugada en un tubo de vidrio.
2.-Aadir 2.5 ml de reactivo de cido sulfosalicilico.
Resultados:
Reportar segn el grado de turbidez que se observa de 1+ a 4+.
4.-Test de Benedict.
Fundamento:
La glucosa es una sustancia reductora capaz de reducir el reactivo de benedict formando un complejo
coloreado.
Procedimiento tcnico:
1.-Colocar 2.5 ml de muestra de orina en un tubo de vidrio prex.
2.-Aadir 4 gotas de reactivo de benedict.
3.-Colocar el tubo en bao mara hirviente por 5 minutos o calentar con la llama por 1-2 minutos.
4.-Dejar enfriar y calificar.
Resultados:
Negativo
: Color azul claro
Trazas
: color verde azulado
1+
: Color verde precipitado verde o amarillo.
2+
: Color amarillo a verde precipitado amarillo.
3+
: Color amarillo naranja precipitado amarillo naranja
4+
: Color amarillo rojizo precipitado rojo ladrillo o rojo.
5.-Test de Thevenon.
Fundamento:
La hemoglobina reacciona en medio acido con el Reactivo de Piramidon al 5% y el perxido de
hidrogeno produciendo un color azul de acuerdo a la cantidad de hemoglobina.
Procedimiento tcnico:
1.-Colocar 3 ml de muestra de orina en un tubo de ensayo.
2.-Aadir unas gotas de cido actico al 3% mezclar bien.
3.-Agregar 1 ml de reactivo de piramidon al 5%.
4.-Aadir unas gotas de perxido de hidrogeno al 10%.
5.-Mezclar bien y leer.
Resultados:
Negativo
: No cambia de color
Positiva
: Vira a un color azulado
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V TRABAJO PRACTICO
1-Elaborar un formato de procedimiento operativo estndar del anlisis qumico de orina
2.-Describir los componentes qumicos y la reaccin que se da en cada uno de los parmetros de las
tiras reactivas.
3-Graficar las reacciones qumicas de cada uno de los test de reserva del examen qumico que se
han desarrollado en la prctica.
4.- Elaborar un cuadro con 3 casos clnicos donde se usen los criterios qumicos del examen de orina
para ayudar al diagnstico.

VI BIBLIOGRAFA
1. INSTITUTO NACIONAL DE SALUD DE CHILE. Recomendaciones para el anlisis del
sedimento urinario. Documentos tcnicos para el laboratorio clnico. 2013
2. Clinical and Laboratory Standards Institute. GP-16A3. Urinalysis; Approved Guideline-Third
Edition. USA. 2009
3. Jimnez, J., Ruiz, G. El Laboratorio Clnico 3: Anlisis de las muestras de orina. Editado por
LABCAM (Asociacin Castellano-Manchega de Anlisis Clnico). Castella. 2011
.

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