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ELISA
anticuerpo primario. En el caso del anticuerpo unido a la placa, se incuba con una
mezcla de antgeno y antgeno marcado. Se ensayan diferentes relaciones de
antgeno fro frente a una cantidad fija de antgeno marcado. Es el ensayo de
competicin del antgeno. En esta etapa es muy importante controlar los factores
tiempo y temperatura de incubacin para evitar la aparicin de falsos negativos. En
el caso del tiempo, si es inferior a 15 minutos, no ocurrir la interaccin antgenoanticuerpo y el color no ser evidente al final del ensayo, dando un falso negativo.
Por su parte, si la temperatura de incubacin es muy baja, la formacin del
complejo antgeno-anticuerpo tampoco se completar en el tiempo establecido,
mientras que si es muy alta, las protenas (antgeno y anticuerpo) se desnaturalizan
y, por tanto, disminuyen su capacidad para interaccionar, dando igualmente falsos
negativos.
4. Revelado de la reaccin enzimtica. Despus de un lavado para eliminar todas
las molculas marcadas no fijadas en forma de inmunocomplejos, se aade el
sustrato enzimtico en solucin. Se deja reaccionar y se lee la densidad ptica
mediante espectrofotometra.
INTERPRETACIN DE BK
0 / negativa
Paucibacilar
++
+++
REACCIN DE WIDAL
La reaccin de Widal es un test basado en el principio de aglutinacin antgenoanticuerpo, donde se determina la presencia de anticuerpos contra el antgeno O y H de la
Salmonella typhi para el serodiagnstico de fiebre tifoidea, sin embargo debido a su falta
de especificidad, debe ser interpretado en el contexto clnico del paciente. Para considerar
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el diagnstico de fiebre tifoidea con un titulo Anti-O y Anti-H aislado, se debe conocer su
prevalencia en una determinada comunidad, en trminos generales, se acepta ttulos antiO y anti-H 1: 160-200 y 1: 50-100 en zonas endmicas y no endmicas,
respectivamente.
Las pruebas de diagnstico serolgico a emplearse en los servicios de salud del Pas
sern las establecidas por el INS por estar estandarizados bajo las normas de la OMS.
Siendo las principales:
1. Prueba Tamiz
Constituido por:
a) Prueba de Rosa de Bengala
b) Prueba de Aglutinacin en Placa
Prueba de aglutinacin en Placa: detecta anticuerpos de tipo IgG e IgM, es una prueba
que reacciona rpidamente al inicio de una infeccin, esta puede permanecer en forma
residual por mucho tiempo y puede dar reacciones cruzadas con otras bacterias
(Salmonella grupo N (serogrupo 0:30), Vibrio cholerae, Escherichia coli 0:157,
Yersinia enterocoltica 0:9, Francisella tularensis, Stenotrophomonas maltophilia y
otras bacterias).
La interpretacin del resultado de estas pruebas para el diagnstico es la siguiente:
Esta interpretacin es muy especfica en brucelosis aguda, siendo menor en otros tipos de
brucelosis. *Cuando la Prueba Tamiz es positiva se realizar la prueba
complementaria
2. Prueba complementaria
Constituido por:
a) Prueba de Aglutinacin en Tubo
b) Prueba del 2 Mercapto-etanol
La interpretacin del resultado de estas pruebas para el diagnstico ser como sigue:
La validacin de los resultados de las pruebas ser teniendo en cuenta los sueros
controles.
RPR
El RPR es una prueba diseada para detectar reagina en el suero de manera rpida, no
requiere inactivacin por calor La muestra se mezcla con una suspensin que posee
cardiolipina, lecitina y colesterol en partculas de carbn. Si la muestra es positiva se
observa pequeos grumos negros (floculacin). El resultado se reporta como reactivo o
no reactivo; todos aquellos reactivos deben ser diluidos seriadamente para realizar la
titulacin, y se reporta la dilucin ms alta que exhibe reaccin.
Los falsos negativos se pueden producir por errores tcnicos y los falsos positivos son los
mismos que para la prueba de VDRL.
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Se ha desarrollado variantes de esta prueba en las que la muestra puede ser plasma sin
que se pierda su sensibilidad y especificidad.
FACTOR REUMATOIDE
BIBLIOGRAFA
1. BALCELLS A. La clnica y el laboratorio. Barcelona, Masson, S.A. 22. a ed.
2. Normal reference Laboratory values. N Engl J Med