5210 - Demanda bioqumica de oxignio (DBO)

Introduo

Discusso geral

A determinao da demanda bioqumica de oxignio (DBO) um teste

emprico que padronizado de procedimentos laboratoriais so usados para
determinar os requisitos de oxignio relativo de guas residurias, efluentes
e guas poludas. O teste tem sua mais ampla aplicao na medio de
cargas de resduos de estaes de tratamento e na avaliao da eficincia
de remoo de DBO de tais sistemas de tratamento. O teste mede o
oxignio molecular utilizada durante um perodo de incubao especificado
pela degradao bioqumica de matria orgnica (demanda carbonceo) e o
oxignio usado para oxidar o material inorgnico como sulfetos e ferro
ferroso. Ele tambm pode medir a quantidade de oxignio usado para oxidar
formas reduzidas de nitrognio (nitrogenado demanda), a menos que sua
oxidao impedida por um inibidor. Os procedimentos de semeadura e
diluio fornecem uma estimativa do DBO em pH 6,5 a 7,5.

Medies de oxignio consumida em uma 5 perodo de teste d (CBO 5-d

ou DBO5, 5210B), oxignio consumido aps 60 a 90 d de incubao (BOD
final ou UBOD, 5210C), e consumo de oxignio contnuo (mtodo
respiromtrico, 5210D) so descritos aqui. Existem muitas outras variaes
das medies de demanda de oxignio, incluindo o uso de perodos de
incubao mais curtos e mais longos e testes para determinar as taxas de
consumo de oxignio. Condies de propagao, diluio e incubao
alternativas podem ser escolhidas para imitar as condies de recepogua, proporcionando uma estimativa dos efeitos ambientais das guas
residurias e efluentes.

O UBOD mede o oxignio necessrio para a degradao total da matria

orgnica (demanda carbonceo final) e/ou o oxignio para oxidar reduzido
nitrognio compostos (demanda final nitrogenados). Valores UBOD e
descries cinticos apropriados so necessrios estudos de modelagem da
qualidade da gua, como UBOD: DBO5 ndices para relacionar fluxo
capacidade de assimilao dos requisitos regulamentares; definio de rio,
esturio ou lago desoxigenao cintica, e os valores de DBO carbonceos
ecolgica finais (UCBOD) para o modelo calibrao.

Carbonceos Versus azotada DBO

Um nmero de fatores, por exemplo, solveis contra partculas orgnicas,

sedimentveis e slidos flutuantes, oxidao de compostos reduzidos de
ferro e enxofre, ou falta de mistura pode afetar a exatido e preciso ou
medies de DBO. Atualmente, impossvel incluir ajustes ou correes
para contabilizar a influncia desses fatores.

Oxidao de formas reduzidas de nitrognio, como a amnia e nitrognio

orgnico, pode ser mediada por micro-organismos e exercer demanda
azotada. Demanda azotada historicamente tem sido considerada uma
interferncia na determinao de DBO, e a incluso de amnia da gua de
diluio contribui uma fonte externa de demanda azotada. A interferncia
da demanda azotada agora pode ser prevenida por um inibidor qumico. Se
no for usado um inibidor qumico, a demanda de oxignio medida a soma
das demandas carbonosos e nitrogenadas.

Medidas que incluem azotada demanda geralmente no so teis para

avaliar a demanda de oxignio associada com material orgnico. Demanda
nitrogenada pode ser estimada diretamente de nitrognio amoniacal (seo
4500-NH3); e carbonada demanda pode ser calculada subtraindo-se o
equivalente terico do nitrito e nitrato produzido nos resultados de teste
desinibida. No entanto, este mtodo complicado e est sujeito a erro
considervel. Inibio qumica da demanda azotada fornece uma medida
mais direta e mais confivel de demanda carbonceo.

A extenso da oxidao de compostos nitrogenados, durante o perodo de

incubao de 5 d depende da concentrao e tipo de micro-organismos
capazes de levar a cabo esta oxidao. Esses organismos geralmente no
esto presentes no esgoto primrio cru ou se estabeleceram em nmero
suficiente para oxidar quantidades suficientes de formas de azoto reduzido
no teste de DBO 5D. Muitos efluentes de planta de tratamento biolgico
contm um nmero suficiente de organismos nitrificantes causar nitrificao
nos testes de DBO. Porque a oxidao de compostos nitrogenados pode
ocorrer em tais amostras, inibio da nitrificao, conforme indicado na
5210B.5e) recomendado para amostras de efluente secundrio, por
exemplo semeado com efluente secundrio e para amostras de guas
poludas.

5210 B teste de DBO de 5 dias

Discusso geral

O mtodo consiste de enchimento com amostra diluda e semeado, a

ponto de transbordar, um frasco hermtico do tamanho especificado uma
incubao temperatura especificada para 5 d. do oxignio dissolvido
medido inicialmente e depois da incubao e o DBO calculada a partir da
diferena entre inicial e final DO. Porque a inicial que determinada logo
aps a diluio feita, todo consumo de oxignio, ocorrendo aps esta
medio includa na medio da DBO.

Para amostragem e procedimentos de armazenamento, consulte 5210. 4a.

Aparelhos

Frascos de incubao: usar garrafas de vidro com 60 mL ou maior

capacidade (garrafas de 300 mL, tendo uma rolha de vidro esmerilado e
uma boca queimada so preferidas). Limpe as garrafas com detergente,
enxaguar abundantemente e escorra antes de usar.

Incubadora de ar ou banho de gua, controlado por termstato a 20 1 C.

Exclua toda a luz para evitar a possibilidade de produo fotossinttica de
fazer.

Reagentes
Preparar reagentes com antecedncia, mas descartar se houver qualquer
sinal de precipitao ou crescimento biolgico nas garrafas das aes.
Comerciais equivalentes destes reagentes so aceitveis e diferentes
concentraes de estoque podem ser utilizadas se doses so ajustadas
proporcionalmente. Use grau reagente ou melhor para todos os produtos
qumicos e gua destilada ou equivalente, de preferncia esterilizada, para
fazer todas as solues.

Procedimentos preparatrios
Amostragem e armazenamento: amostras para anlise de DBO podem
degradar significativamente durante o armazenamento entre coleta e
anlise, resultando em baixos valores de DBO.

1) Pegar amostras se a anlise comeado at 2 horas aps a coleta,

armazenamento frio desnecessrio. Se a anlise no iniciado within2 h
de coleta de amostra, manter amostra ou inferior a 4 C da coleo de vez.
Comear a anlise dentro de coleo de 6 h; Quando isto no possvel
porque o local de amostragem distante do laboratrio, armazenar ou
inferior a 4 C e relatrio de comprimento e temperatura de
armazenamento com os resultados. Em nenhum caso comear a anlise de
mais de 24 h aps a coleta de amostra de garra. Quando as amostras
devem ser utilizados para fins de regulamentao envidar todos os esforos
para fornecer amostras para anlise dentro de 6 h de coleo.
2) Amostra Compostas amostras de manter ou inferior a 4 C, durante a
composio. Limite o perodo de composio de 24 h. Use os mesmos
critrios quanto ao armazenamento das amostras de garra, comeando a
medio do tempo do final do perodo de composio. Tempo de
armazenamento e as condies do estado como parte dos resultados.

Preparao da amostra e pr-tratamento:

1) Todas as amostras verificar pH; se no entre 6.0 e 8.0, ajustar a

temperatura de amostras de 20 3 C e, em seguida, ajustar o pH para 7.0
a 7.2, usando uma soluo de cido sulfrico (h2SO4) ou hidrxido de sdio
(NaOH) de tal fora que a quantidade de reagente no diluir a amostra por
mais de 0,5%. Excees podem ser justificadas com guas naturais quando
o corpo est a ser medido em valores de pH in situ. O pH da gua de
diluio no deve ser afetado pela menor diluio da amostra. Amostras
que foram pH ajustado de sementes sempre.

2) Amostras contendo compostos de cloro residual se possvel, evitar as

amostras que contm cloro residual por amostragem antes do processos de
clorao. Se houver cloro residual, cloro amostra. Em algumas amostras de
cloro dissipar dentro de 1 a 2 h de p na luz. Esta dissipao
frequentemente ocorre durante a movimentao e transporte de amostra.
Para amostras em que o cloro residual no se dissipar em um tempo
razoavelmente curto, destrua o cloro residual, adicionando soluo de
Na2SO3. Determine o volume necessrio de Na2SO3 soluo em uma
poro de 100 a 1000 mL da amostra neutralizada, adicionando 1 + 1 de 10
mL de cido actico ou 1 + 50 H2SO4, 10 mL de soluo de iodeto de
potssio (KI) (10 g/100 mL) por 1000 mL de amostra e titulada com soluo
de NaSO3 at o ponto final de amido-iodo para residual. Adicione a amostra
neutralizada o volume proporcional de Na2SO3 soluo determinada pelo
acima teste, misture e depois de 10 a 20 min verificar amostra de cloro
residual. (Nota: excesso Na2SO3 exerce uma demanda de oxignio e reage
lentamente com certos compostos de cloraminas orgnicas que possam

estar presentes nas amostras cloradas.) No teste amostras cloradas/cloro

sem semeadura.

3) Amostras contendo outras substncias txicas certos resduos

industriais, por exemplo, chapeamento de resduos, contm metais txicos.
Tais amostras geralmente exigem estudo especial e tratamento.

4) Amostras supersaturada com fazer as amostras que contenham

concentrao de fazer acima de saturao a 20 C podem ser anuladas em
guas frias ou na gua onde ocorre a fotossntese. Para evitar a perda de
oxignio durante a incubao de tais amostras, reduzir fazer a saturao
trazendo amostra de cerca de 20 3 C na garrafa parcialmente preenchida
enquanto agita por agitao vigorosa ou ventilar limpo, com ar comprimido
de filtrado.

5) Amostras contendo perxido de hidrognio gua oxigenada restantes

em amostras de alguns industriais branqueamento processos tais como
aqueles usados em fbricas de papel e txtil plantas podem causar
supersaturada nveis de oxignio em amostras colhidas para o teste de
DBO. Misture amostras to vigorosamente em recipientes abertos por tempo
suficiente permitir que o perxido de hidrognio a dissipar-se antes de
configurar o DBO teste. Verificao de adequao de remoo de perxido,
observando dissolvido as concentraes de oxignio ao longo do tempo
durante a mistura ou usando teste especfico perxido de tiras. Tempos de
mistura pode variar de 1 a 2 h, dependendo da quantidade de pelo perxido
de hidrognio presente. A reao de perxido pode ser considerada
completa quando o fazem j no aumenta durante um perodo de 30 min
sem misturar.

c) seleo e armazenamento de gua da fonte para BOD diluio da

amostra: obter a gua da torneira de fonte-destilada, apropriada, ou receber
gua. Certifique-se que a gua livre de metais pesados, especialmente
cobre e substncias txicas, tais como cloro, que pode interferir com as
medies de BOD. Protege a qualidade da gua de fonte usando garrafas,
tubos e vidraria limpa. gua deionizada frequentemente contm
quantidades suficientes de substncias orgnicas e micro-organismos que
causam a falha da verificao de controle de qualidade de gua de diluio
(5210B.6c). gua de fonte pode ser armazenada antes do uso, enquanto a
gua de diluio preparada (2010B.5a) atende a critrios de controle de
qualidade, o vazio de gua de diluio (5210B.6c). Essa armazenagem pode
melhorar a qualidade de algumas guas de origem mas pode permitir o
crescimento biolgico a deteriorao nos outros. Armazenamento de gua
de diluio preparada (5210B5h) para mais de 24 h aps a adio de
nutrientes, minerais e buffer no recomendado a menos que o festim de
gua de diluio consistentemente respeitar limites de controle de

qualidade. gua de fonte descarte armazenado se diluio gua branco

mostra mais de 0,20 mg/L fazer depleo em 5 d (ver 5210B.6c).
d) preparao da suspenso de semente: necessrio ter presente em cada
frasco BOD uma populao de microrganismos capazes de oxidar a matria
orgnica biodegradvel na amostra. guas residuais domsticas, cloradas
ou caso contrrio no desinfetados efluentes de estaes de tratamento
biolgico de guas residuais e guas de superfcie receptora das guas
residuais de descargas geralmente contm populaes microbianas
satisfatrias. Algumas amostras (por exemplo, alguns resduos industriais
no tratados, resduos desinfetados, resduos de alta temperatura, resduos
tendo valores de pH menor que 6 ou maiores que 8 ou resduos
armazenados mais de 6 h aps a coleta) no contm uma populao
microbiana suficiente. As sementes dessas amostras pela adio de uma
populao de micro-organismos apropriados. A semente preferida obtida a
partir de um sistema de tratamento biolgico dos resduos de
processamento. No caso, use o sobrenadante do resolvidos diludo de
efluentes domsticos, efluentes de clarificadores primrios, bebidas mistas
de uma bacia de aerao, efluentes no desinfetados, ou receber gua
abaixo do ponto de descarga. Quando efluente ou bebidas mistas de um
processo de tratamento biolgico usada como uma fonte de sementes,
recomenda-se a inibio da nitrificao. No use sementes de efluentes que
tenham sido desinfetados por cloro ou outros meios. Cursos de sementes
comerciais podem ser usados, mas so mais propensos a ser no adaptados
para os constituintes das guas residuais.
No filtrar fonte de semente; filtragem remove os microrganismos de
semente.
Quando a semente aclimado fontes no esto disponveis, desenvolve uma
semente aclimado no laboratrio continuamente ventilar uma amostra das
guas residuais domsticas se estabeleceram e adicionando pequenos
incrementos dirios da amostra dos resduos em questo. Use uma
suspenso de solo, lodo ativado ou uma preparao de sementes comerciais
para obter a populao microbiana inicial. Determine a existncia de uma
populao satisfatria, testando o desempenho das sementes nos testes de
DBO da amostra. Valores de DBO que aumentam com o tempo de
adaptao para um valor constante alta indicam aclimatao semente bem
sucedida.

Procedimento de teste

1) Preparao da gua de diluio: transferncia desejado trabalho volume

de gua de fonte (5210B.4c) para um frasco devidamente tamanho (vidro
o preferido). Verifique se que a concentrao de oxignio dissolvido de
pelo menos 7,5 mg/L antes de usar gua para testes de DBO. Se no,
adicione fazer agitando a garrafa ou ventilar com ar filtrado livre de
orgnicos. Alternativamente, di-me a gua em garrafas de algodo-ligado
o tempo suficiente para a concentrao de fazer a saturao de abordagem.

Adicione 1 mL de tampo fosfato, MgSO4, CaCl2, e preparado de soluo de

FeCl3/L para fonte de gua (5210B.4c). Misture bem e trazer a temperatura
de 20 3 C. Prepare diluio gua imediatamente antes da utilizao, a
menos que o festim de gua de diluio (5210B.6c) mostra que a gua
aceitvel aps tempos de armazenamento mais. Se os espaos de gua de
diluio mostram uma depleo superior a 0,20 mg/L, obter uma gua
satisfatria, melhorando a purificao ou usar gua de outra fonte. No
adicionar agentes oxidantes ou exponha a gua de diluio luz ultravioleta
em tentativas de trazer a diluio em branco no intervalo.
b) Ajuste da temperatura da amostra: trazer amostras de 20 3 C, antes
de fazer diluies.
c) Preparao de diluies: usando a gua de diluio preparado como um
acima, faa pelo menos trs diluies da amostra preparada, estima-se que
para produzir um residual pelo menos 1,0 mg/L e uma fazer captao de
pelo menos 2,0 mg/L aps uma incubao de 5D. Recomenda-se cinco
diluies, se a experincia com uma amostra particular no produz pelo
menos trs garrafas mnimo aceitvel ter fazer deplees e limites residuais
(5210B.6a). Uma anlise mais rpida, como o bacalhau (seo 5220),
podem ser correlacionados aproximadamente com BOD e servir como um
guia na seleo de diluies. Na ausncia de conhecimento prvio, use as
seguintes percentagens de guas residuais quando preparar diluies: 0,01
a 1,0% para fatores de desperdcio industriais fortes, 1 a 5% para esgoto
bruto e se estabeleceram, 5 a 25% para o efluente tratado biologicamente e
25 a 100% para as guas do Rio poludo. O nmero de garrafas para estar
preparado para cada diluio depende da tcnica de fazer e o nmero de
repeties desejado. Preparar diluies em recipientes volumtricos (classe
A vidro ou equivalente) e ento transfira para frascos de dbo ou preparar
com qualquer tcnica de medio.

1) Diluies preparadas em volumtrico recipientes-usando uma pipeta de

ponta larga, adicionem quantidade desejada de amostra preparada para
cilindros volumtricos individuais ou frascos. Misture a amostra bem
imediatamente antes da pipetagem para evitar perda de slidos por
sedimentao. Para diluies maiores que 1: 100, faa uma diluio
primria antes de fazer a diluio final na garrafa. Encher cilindros de bales
pelo menos dois teros de cheio de gua de diluio, sem entrada de ar.
Adicione quantidades adequadas de suspenso de semente ( d abaixo) e
inibidor de nitrificao ( e abaixo). Dilua a nvel final com gua de diluio
( um acima). Misture bem, mas evitar a entrada de ar. Diluio misturada
em um nmero apropriado de frascos de DBO, tomando cuidado para no
deixar a slidos resolver no cilindro do balo durante a transferncia do
sifo.

2) Diluies preparadas diretamente em BOD garrafas-usando uma pipeta

volumtrica de largo-dica, adicionar o volume da amostra desejada para
frascos de DBO individuais. Encha cada garrafa Pod aproximadamente doisteros cheio com gua de diluio. Adicione quantidades adequadas de

suspenso de semente ( d abaixo) e inibidor de nitrificao ( e abaixo)

para as garrafas individuais de BOD. Quando um frasco contm mais de
67% da amostra aps a diluio, nutrientes podem ser limitadas na amostra
diluda e posteriormente reduzem a atividade biolgica. Em tais amostras,
adicionar os nutrientes, minerais e solues-tampo (5210B.3a-e)
diretamente a amostra diluda comeram uma taxa de 1 mL/L (garrafa de
0,30 mL/300 mL) ou usar comercialmente preparadas solues projetadas
para dosar o tamanho do frasco apropriado.

d) Adio de suspenso de semente: se for usada a semeadura, adicione

suspenses de sementes para os vasos de diluio ou garrafas BOD
individuais antes de diluio final conforme descrito no c acima. No
adicione sementes diretamente de amostras de guas residuais que
contenham materiais que so txicos antes de diluio. Geralmente, 1 a 3
mL de resolvido cru guas residuais ou efluentes primrio ou 1 a 2 mL de
uma 01:10 diluio da garrafa de licor misto/300 mL ir fornecer uma
quantidade adequada de micro-organismos. No filtre a suspenso de
semente antes da utilizao. Agite a suspenso de sementes durante a
transferncia, para garantir que a mesma quantidade de micro-organismos
adicionada a cada frasco de DBO. Sempre Registre o volume exato da
suspenso de sementes adicionado para cada garrafa. A absoro imputvel
semente adicionada para cada garrafa geralmente deve estar entre 0,6 e
1,0 mg/L, mas a quantidade de sementes adicionados deve ser ajustada
esta gama requeridos para fornecer glicose-glutmico cidos resultados de
verificao (GGA) de 198 30,5 mg/L de DBO no cido glutmico-glicose
verificar, em seguida, use 1 mL em cada frasco BOD, recebendo as guas
residuais de teste.

e) Adio do inibidor de nitrificao: amostras que podem requerer a

inibio da nitrificao incluem, mas no esto limitadas a, efluentes
biologicamente tratados, amostras semeadas com efluentes biologicamente
tratados, e guas do rio. Observe o uso de nitrognio inibio e produto
qumico usado ao relatar os resultados. (Nota: TCMP o inibidor de
nitrificao preferencial mas requer manipulao e transferncia de forma
slida. Allylthiourea no sempre eficaz na nitrificao inibio dentro do
perodo de incubao de 5D e concentraes acima de 2 mg/L podem
causar aumentos em medies de BOD carbonceos. Concentraes de ATU
acima de 2 mg/L tambm podem afetar adversamente a modificao azida
do mtodo iodomtrico). Todas as amostras para qual nitrificao inibidor foi
adicionado as sementes. A quantidade de sementes deve ser coerente com
o que necessrio para alcanar resultados de teste GGA no intervalo de 198
30,5 mg/L (5210B.6b).

1) Nitrificao inibidor usando 2-chloro-6 (benzina) piridina (TCMP)-adicionar

10mg TCMP/L de amostra diluda ou 3mg TCMP para cada recipiente de
diluio de garrafa ou amostra de 300 mL, ou montantes proporcionais para
outro tamanho de garrafas, aps diluio da amostra inicial, mas antes do

final enchimento das garrafas com gua de diluio. No adicione TCMP

para frascos de dbo antes que eles so pelo menos dois teros cheios de
amostra diluda. (Nota: TCMP dissolve-se lentamente e podem flutuar por
cima da amostra, se no bem misturado). Algumas formulaes comerciais
de TCMP no so 100% TCMP; ajuste a dose apropriadamente.
2) Nitrificao inibio usando allylthiourea (ATU)-adicionar 1mL de soluo
de ATU [5210B.3g2]/L amostra diluda ou recipiente de diluio 0,3 mL/300
mL ensaio garrafa ou amostra. No adicione ATU para frascos de dbo at
que eles so pelo menos dois teros cheios de amostra diluda.

f) Da selagem de garrafas: completa de cada garrafa de enchimento,

acrescentando gua suficiente diluio essa insero da rolha sai sem
bolhas na garrafa. Misture a amostra girando manualmente vrias vezes a
garrafa, a menos que uma sonda de fazer tendo um agitador usado
imediatamente para medir inicial fazer concentrao. Como medida de
precauo contra o ar de desenho para os frascos de diluio durante a
incubao, use um selo de gua. Obter selos de gua satisfatria,
invertendo-se garrafas num banho de gua ou pela adio de gua boca
queimada do especiais garrafas BOD. Coloque uma tampa copo ou folha de
papel ou plstica queimado na boca da garrafa para reduzir a evaporao
do selo gua durante a incubao.

g) Determinao de fazer inicial: usar a modificao azida do mtodo

iodomtrico (seo 4500-oC) ou o mtodo do eletrodo de membrana (seo
4500-og) para determinar DO inicial em todas as diluies de amostras,
espaos de gua de diluio e, se for caso disso, controles de semente.
Substituir qualquer contedo deslocado com gua diluda de amostra ou
diluio suficiente para encher a garrafa, rolha-se firmemente todas as
garrafas e gua selar antes de comear a incubao. Depois de preparar a
diluio, a medida inicial fazer dentro de 30 min. Se for usado o mtodo do
eletrodo de membrana. Tome cuidado para eliminar deriva em calibrao
entre iniciais e finais fazer leituras. Se a modificao azida do mtodo
iodomtrico titrimetric usada, preparamos uma garrafa extra inicial
determinao para cada diluio da amostra.

h) De incubao da amostra: incubar a 20 C 1 C com a rolha e garrafas

BOD seladas contendo desejado diluies ( uma acima), controles de
sementes (5210B.6d), espaos de gua de diluio (5210B.6c) e cido
glutmico-glicose verifica (5210B.6b). Eliminar a luz para evitar o
crescimento de algas nas garrafas durante a incubao.

i) Determinao de fazer final: depois d 5 6 h de incubao, determinar

em todas as diluies da amostra e em todos os espaos em branco e
verifica como 5210B.6b-d, usando a modificao de azida de titulao ou o
mtodo do eletrodo de membrana.

Verificaes de controle de qualidade

As prticas de controle de qualidade, consideradas como parte integrante

de cada mtodo so resumidas na tabela 5020: eu.

1) Fazer mnimo residual e mnimo fazer esgotamento: s garrafas, incluindo

controles de semente, dando uma depleo mnima de 2,0 mg/L e um
residual de pelo menos 1,0 mg/L, aps 5 d de incubao so considerados
para produzir dados vlidos, porque pelo menos 2,0 mg/consumo de
oxignio L necessrio para dar uma medida significativa de consumo de
oxignio e pelo menos 1,0 mg/L deve permanecer durante todo o ensaio
para garantir que insuficiente fazer no afeta o taxa de oxidao dos
resduos constituintes. Excees ocorrem para fins de relatrio somente
quando as deplees para testes usando amostras no diludas em todas as
garrafas caem abaixo de 2,0 mg/L e quando DO residual em todas as
diluies inferior a 1,0 mg/L (5210B.7). Quando usando eletrodos de
membrana para a medio, fazer verificaes de calibrao frequente para
garantir leituras precisas de fazer (seo 4500-O.G.3a).
b) cido glutmico glicose cheque: O cheque de cido glutmico-glicose a
principal base para estabelecer a exatido e preciso do teste de DBO e a
principal medida de procedimento de instalao e qualidade de sementes.
Juntamente com cada lote de amostras, verificar a eficcia de sementes e
tcnica analtica usando procedimentos em 5210B.5 para fazer medies de
BOD em uma mistura de igual peso de glucose e cido glutmico, como
segue: Adicionar quantidades suficientes de glicose-glutmico padro
(5210B.3h) soluo de cido para dar glicose de 3,0 mg/L e cido glutmico
de 3,0 mg/L em cada um dos trs frascos de teste (20 mL soluo GGA/L
semeado gua de diluio ou garrafa de 6,0 mL/300 mL). Solues
comerciais podem conter outras concentraes de cido glutmico-glicose;
ajuste doses em conformidade. Adicione inibidor de nitrificao se semente
obtido de uma fonte que nitrificantes. Avaliar os dados conforme
descrito em 5210B.8, preciso e preconceito. A mdia resultante BOD as
trs garrafas, aps a correo para diluio e propagao, deve cair a gama
de 198 30,5 mg/L. Se o valor mdio cai fora desse intervalo, avaliar a
causa e fazer as correes adequadas. Consistentemente altos valores
podem indicar o uso de suspenso muita semente, gua de diluio
contaminados ou a ocorrncia de nitrificao; consistentemente baixos
valores podem indicar semente de m qualidade ou quantidade ou a
presena de um material txico. Se baixos valores persistem, preparar uma
nova mistura de glucose e cido glutmico e verificar as fontes de gua de
diluio e fonte de sementes.

c) gua de diluio de controlo de qualidade: com cada lote de amostras

incubar uma ou mais garrafas de gua de diluio que contm nutrientes,
minerais e solues tampo mas sem inibidor de semente ou nitrificao.
Esta gua de diluio em branco serve para verificar a qualidade da gua de
diluio no-semeada e limpeza dos frascos de incubao. Determine inicial
e final fazem como eu e o 5210B.5g. A absoro na 5D no deve ser
superior a 0,20 mg/L e preferncia no mais de 0,10 mg/L, antes de fazer
correes de semente. Se a gua de diluio em branco for superior a 0,20
mg/L, descartar todos os dados para testes usando esta gua de diluio ou
identificar claramente as amostras em registros de dados.
d) Controle de sementes: determinar DBO de suspenso quanto qualquer
outra amostra de semente. Este o controle da semente. Idealmente, fazer
trs diluies de sementes tal que a menor quantidade d pelo menos 2,0
mg/L esgotamento e os resultados de quantidade maiores em pelo menos
1,0 mg/L fazer residual aps 5 d de incubao. Determine a absoro de OD
por mililitro de sementes adicionados para cada garrafa usando o mtodo
de declive ou o mtodo da relao. Para o mtodo de inclinao, plotagem
esgotamento em miligramas por litro versus mililitros de sementes para
todos os frascos de controle semente tendo uma depleo de 2,0 mg/L e 1,0
mnimo residual DO. A trama deve apresentar uma linha reta para o qual a
inclinao indica fazer esgotamento por mililitro de semente. A
interceptao eixo a depleo de oxignio causada pela gua de diluio e
deve ser inferior a 0,20 mg/L, (ver c acima). Para o mtodo da relao,
divide o esgotamento pelo volume de semente em mililitros para cada
garrafa de controle de sementes tendo uma depleo de 2,0 mg/L e
superior residual mnimo de 1,0 mg/L fazer e os resultados a mdia.
Diluies de sementes mostrando deplees amplamente variadas por
mililitro de semente ( 30%) sugerem a presena de substncias txicas de
grandes partculas na suspenso de semente. Neste caso, verificar ou
alterar a origem de sementes.

Anlise de dados e relatrios

Clculos:
1) Para cada teste garrafa tendo esgotamento mnimo de 2,0 mg/L e no
teste residual de 1,0 mg/L, calcular a DBO como segue:

DBO5, mg/L =

Onde:
D1 = fazer de amostra diluda imediatamente aps o preparo, mg/L,
D2 = fazer de amostra diluda aps incubao d 5 a 20 C, mg/L,

S = oxignio captao de sementes, fazer / mL suspenso semente

adicionado por garrafa (5210B.6d) (S = 0 se a amostra no semeada),
Vs = volume de sementes na garrafa respectivo teste, mL, e
P = decimal frao volumtrica da amostra utilizada; 1/P = factor de
diluio.

2) Se esgotamento menor do que a concentrao de 2,0 mg/L e a amostra

100% (sem diluio exceto semente, nutrientes, minerais e soluestampo), semente real - corrigido, esgotamento pode ser reportado como o
mesmo se BOD menos de 2,0 mg/L.
3) Quando todos os resultados de diluies em um residual < 1.0, selecione
a garrafa tendo a menor concentrao (maior diluio) e relatrio:

DBO, mg/L >

Nos clculos acima, no faa correes para fazer captao junto gua de
diluio em branco durante a incubao. Esta correo desnecessria se
gua de diluio atende aos critrios em branco estipulados em 5210B.6c.
Se a gua de diluio no atender a esses critrios, correes adequadas
so difceis; No gravar os resultados ou, no mnimo, marc-los como no
satisfazendo critrios de controle de qualidade.

b. Relatrio: mdia os resultados do teste para garrafas todos qualificados

dentro de cada srie de diluio. Relatar o resultado como DBO5 se
nitrificao no inibida. Relatar resultados como CBOD5 se nitrificao
inibida. Amostras apresentando grandes diferenas entre a CBO computada
para diluies diferentes, por exemplo, superior a 30%, podem indicar a
presena de uma substncia txica ou problemas analticos. Quando o efeito
se torna repetitivo, investiga para identificar a causa. Identificar os
resultados em relatrios de ensaios, quando qualquer um dos seguintes
parmetros de controle de qualidade no atendida:

gua de diluio em branco for superior a 0,20 mg/L (5210B.6c),

Glicose-glutmico cido cheque cai fora dos limites aceitveis

(5210B.6b)


Teste Replica mostra mais de 30% de diferena entre os valores de
altas e baixas,

Amostras de controlo de semente no cumpram os critrios acima em

todas as diluies (2010B.6d), ou

DO mnimo inferior a 1,0 mg/L [5210B.7a3]).

Preciso e vis

No h nenhuma medida para estabelecer o vis do procedimento BOD. O

cheque de cido glutmico-glicose prescrito no 5210B.6b destina-se a ser
um ponto de referncia para avaliao da qualidade da gua de diluio,
eficcia de sementes e tcnica analtica. nico laboratrio testa usando um
300 mg/L misturado com soluo de cido glutmico-glicose fornecida os
seguintes resultados:

Nmero de meses: 14
Nmero de triplicates: 421
Mdia recuperao mensal: 204 mg/L
Desvio-padro mdio mensal: 10,4 mg/L
Em uma srie de estudos inter-laboratoriais, cada um envolvendo
laboratrios 2 a 112 (e, como muitos analistas e fontes de sementes), 5d
BOD medies foram feitas em amostras de gua sinttica, contendo uma
mistura de 1:1 de glucose e cido glutmico na faixa de concentrao total
de 3,3 para 231 mg/L. As equaes de regresso para X, valor mdio e
desvio padro, S, destes estudos foram:

X = 0.658 (adicionado a concentrao, mg/L) + 0,280 mg/L

S = 0,100 (adicionado a concentrao, mg/L) + 0,547 mg/L

Para o padro primrio misto de 300 mg/L, a mdia de 5 d pod seria 198
mg/L, com um desvio padro de 30,5 mg/L. Quando so utilizados inibidores
de nitrificao, resultados de teste GGA caindo fora do limite de controle
198 30,5 muitas vezes indicam uso de quantidades incorretas de
semente. Ajuste a quantidade de semente adicionado para o teste GGA para
alcanar resultados caindo dentro desse intervalo.

1) Controle limites: devido a muitos fatores que afetam o BOD testes em

estudos multi-laboratrios e a resultante extrema variabilidade nos
resultados de teste, um desvio padro, conforme determinado por testes

inter-laboratoriais, recomenda-se como um limite de controle para

laboratrios
individuais.
Alternativamente,
cada
laboratrio
pode
estabelecer seus limites de controle realizando um mnimo de 25 cheques
de cido glutmico-glicose (5210B.6b) ao longo de um perodo de vrias
semanas ou meses e calculando a mdia e o desvio-padro. Use os mdia
desvios-padro como o limite de controle para futuras glicose-glutmico
cido verificaes. Compare os limites de controle calculado para os nico
laboratrio testes apresentados acima e resultados inter-laboratoriais. Se os
resultados do teste de cido glutmico-glicose esto fora do intervalo de
198 30.5, reavaliar os limites de controle e investigar a origem do problema.
Se medido BOD para uma verificao de cido glutmico-glicose est fora
do intervalo de limite de controle aceitos, rejeitar testes feitos com
sementes e diluio gua ou identificar tais testes claramente em todos os
relatrios e registros de dados.
b) Escala de trabalho e o limite de deteco: A escala de trabalho igual
diferena entre a mxima DO inicial (7 a 9 mg/L) e mnima residual de 1
mg/L corrigido para as sementes e multiplicado pelo fator de diluio.
Limites de deteco so estabelecidos pelo mnimo esgotamento e mnimo
resduos como segue:

Limite inferior de deteco para amostras no-semeadas que requerem

diluio (S = 0; P < 1.0) 2 mg/L multiplicada pelo fator de diluio,
conforme estabelecido pela exigncia de um esgotamento mnimo de 2
mg/L.

O limite inferior para semeado amostras que requerem diluio (S > 0;

P < 1.0) aproximadamente 1 mg/L, conforme estabelecido pelo
esgotamento mnimo de 2,0 mg/L, menos a correo mxima de semente,
que deve ser menos de cerca de 1 mg/L.

O limite inferior para as amostras no-semeadas que exigem sem

diluio (S = 0; P = 1,0) igual ao limite de deteco do mtodo de
medio (~0.1 mg/L).

Limite inferior de deteco para semeado amostras que exigem sem

diluio (S > 0; P = 1,0) 0 mg/L, conforme estabelecido pela diferena
entre o esgotamento de amostra e a correo de semente.