2012 AdrianaLinharesDrummond

Universidade de Braslia UnB
Instituto de Qumica IQ
Programa de Ps-Graduao em Qumica PPGQ
Laboratrio de Pesquisa em Polmeros
DESENVOLVIMENTO DE SISTEMAS MAGNTICOS

NANOESTRUTURADOS PARA APLICAES BIOMDICAS
TESE DE DOUTORADO
ADRIANA LINHARES DRUMMOND
Orientadora: Profa. Dra. Maria Jos Arajo Sales

Co-orientador: Prof. Dr. Marcelo Henrique Sousa
Braslia - 2012
Universidade de Braslia UnB

Instituto de Qumica IQ
Programa de Ps-Graduao em Qumica PPGQ
Laboratrio de Pesquisa em Polmeros
DESENVOLVIMENTO DE SISTEMAS MAGNTICOS

NANOESTRUTURADOS PARA APLICAES BIOMDICAS
ADRIANA LINHARES DRUMMOND
Tese de Doutorado apresentada ao

Instituto de Qumica da Universidade de
Braslia, como parte dos pr-requisitos
para obteno do ttulo de Doutor em
Qumica.
Orientadora: Profa. Dra. Maria Jos Arajo Sales

Co-orientador: Prof. Dr. Marcelo Henrique Sousa
Braslia 2012
ii
iii
A Deus, por guiar os meus passos, iluminar o meu caminho e ancorar a

luz no meu corao!
minha famlia, meu sustentculo, pelo amor incondicional, pacincia,
firmeza e por tudo o que j fizeram e ainda fazem por mim e comigo!
s minhas amigas e amigos, irmos queridos, pela certeza da parceria
sempre firme, pelos ensinamentos e pela luz que so em minha vida!
Ao Tlio, meu amor, por simplificar as dificuldades, prolongar as alegrias
e crescer continuamente comigo!
iv
AGRADECIMENTOS
professora Maria Jos Araujo Sales, minha querida orientadora, pelos dez
anos de orientao e de carinho. E por fazer parte, diretamente, da minha
formao profissional e pessoal, com muita dedicao e sabedoria.
Ao professor Marcelo Henrique Sousa, meu querido co-orientador, pelas muitas
oportunidades, pelos ensinamentos e pelo otimismo que sempre atacou o meu
excesso de ps no cho.
Ao professor Luciano Paulino da Silva, do Laboratrio de Espectrometria de
Massa da Embrapa, mestre querido, pelo exemplo profissional e humano que
. Pela orientao, oportunidades, lies, disponibilidade, carinho e por
acreditar em mim.
Ao professor Andris Bakuzis, da Universidade Federal do Gois, pelas medidas
de
magnetizao
hipertermia
magntica,
pelas
discusses,
pelos
ensinamentos, pela pacincia e pela sua imensa disponibilidade.

Renata Carvalho e Felipe Coutinho Guimares, do Instituto de Biologia da
UnB, pela incrvel disponibilidade na obteno de imagens de Microscopia
Eletrnica de Transmisso e Microscopia Eletrnica de Varredura.
Ao professor Julio Lemos de Macedo, pelas aquisies e discusses dos
espectros no infravermelho.
Aos professores Joo Paulo Figueir Longo e Ricardo Bentes de Azevedo, do
Instituto de Biologia da UnB, pelas anlises no Zeta Sizer e de citotoxicidade
das nanopartculas magnticas sintetizadas.
Aos alunos de IC que trabalharam comigo: Ana Carolina Campos, Mariana
Hitaka, Tiago Rodrigues e Priscilla Peregrino, pela grande contribuio no
andamento desse estudo e pelas oportunidades de crescimento no trabalho
conjunto.
sempre parceira de doutorado, Nizamara Simenremis Pereira, por

compartilhar crises e solues desde o princpio e sempre me apontar os
caminhos certos.
Daniela Schlemmer, amiga e parceira de LabPol, pela alegria nas horas de
descanso e pelo consolo da certeza do ombro amigo, na cadeira ao lado.
Aos alunos de graduao e ps-graduao que passaram, nesses quatro anos,
pelo LabPol, pelo auxlio e pela agradvel convivncia.
Ao Faustino dos Santos, por sempre resolver os problemas tcnicos mais do
que prontamente.
Aos funcionrios do IQ.
Ao CNPq, pela bolsa de doutorado.
A quem, por descuido, deixei de mencionar o nome, mas estou grata de
corao!
vi
RESUMO
As pesquisas envolvendo a sntese e a aplicao de sistemas

magnticos nanoestruturados em biomedicina se intensificaram nas ltimas
dcadas, devido, em especial, potencial especificidade desses sistemas. Os
estudos, entretanto, se limitavam s formas esfricas, em detrimento das
anisotrpicas. Comportamentos diferenciados entre nanopartculas isomtricas
e anisotrpicas so esperados em meio biolgico, de forma que o uso desses
sistemas em aplicaes biomdicas in vivo e in vitro, apesar de ainda pouco
explorado, tem perspectivas promissoras. O objetivo desse estudo, portanto,
o desenvolvimento de novos sistemas magnticos nanoestruturados, baseados
em nanopartculas alongadas de magnetita (Fe3O4) e maghemita (-Fe2O3),
visando aplicaes biomdicas. A sntese das nanopartculas foi realizada por
meio da coprecipitao de Fe2+ e Fe3+ em meio alcalino a 100 C. A fim de se
alcanar o sistema mais adequado para as finalidades propostas, foram
investigadas a influncia do tempo de reao, natureza dos contra-ons,
proporo entre Fe(II) e Fe(III) e natureza da base, nas propriedades das
nanopartculas
obtidas. Os
resultados
mostraram que
combinao
FeSO4.7H2O, FeCl3.6H2O e ureia, na proporo de Fe(II):Fe(III) = 1:2 foi a mais

apropriada para a obteno de nanopartculas magnticas alongadas de
magnetita, com formato de basto. Essas nanopartculas apresentaram
comportamento ferromagntico nas curvas M vs H e uma variao de
temperatura grande com a aplicao de campos magnticos altos, nos
experimentos de hipertermia. Apesar de no ser o objetivo do estudo, no
decorrer dessa investigao, nanopartculas monodispersas esfricas de
maghemita, com comportamento superparamagntico nas curvas M vs H,
foram obtidas por um procedimento simples, com a mesma combinao de
reagentes descrita acima, exceto a ureia, em uma sntese do tipo one-pot, em
soluo amoniacal. Em virtude dos resultados positivos, essas snteses
tambm foram investigadas. A amostra obtida com seis horas de digesto
apresentou uma variao de temperatura grande com a aplicao de campos
magnticos baixos, nos experimentos de hipertermia. Pelos resultados, ambas
as amostras possuem potencial para aplicaes em hipertermia magntica.
vii
ABSTRACT
The researches involving the synthesis and application of nanostructured
magnetic systems in biomedicine have been intensified in recent decades, due
to the potential specificity of these systems in particular. The studies, however,
were limited to spherical shapes, instead of anisotropic ones. Distinct behavior
between anisotropic and isometric magnetic nanoparticles are expected in a
biological environment, so that the use of these systems in biomedical
applications (in vivo and in vitro), although poor explored, has interesting
perspectives. Therefore, the aim of this study is the development of new
nanostructured magnetic systems based on elongated nanoparticles of
magnetite (Fe3O4) and maghemite (-Fe2O3) for biomedical applications. The
synthesis of nanoparticles was realized by coprecipitation of Fe2+ and Fe3+ in
alkaline medium at 100 C. In order to achieve the most appropriate system for
the purposes, the influence of reaction time; nature of counter ions; ratio of Fe
(II) and Fe (III); and nature of the base on the nanoparticles properties were
investigated.
The
results
showed
that
the
combination
FeSO4.7H2O,
FeCl3.6H2O and urea in the proportion of Fe(II):Fe(III) = 1:2 was the most
suitable for obtaining rod-shaped elongated magnetite nanoparticles. These
nanoparticles showed ferromagnetic behavior in M vs H curves and a large
temperature variation with the application of high magnetic fields, in the
hyperthermia experiments. Although was not the aim of this study, in the course
of this investigation, monodisperse spherical maghemite nanoparticles, showing
superparamagnetic behavior in M vs H curves, were obtained by a simple
procedure, with the same combination of reagents described above, except
urea, in an one-pot synthesis, in ammoniacal solution. Given the positive
results, these syntheses were also investigated. The sample obtained with six
hours of digestion showed a large temperature variation with the application of
low magnetic fields in the experiments of hyperthermia. The results showed that
both samples have potential for applications in magnetic hyperthermia.
viii
NDICE
Lista de Tabelas ...............................................................................................xi
Lista de Figuras ................................................................................................xiii
Lista de Abreviaturas e Acrnimos....................................................................xix
1. INTRODUO E OBJETIVOS ..................................................................... 2
1.1.
Introduo ............................................................................................. 2
1.2.
Objetivos ............................................................................................... 4
1.2.1.
OBJETIVO GERAL .............................................................................. 4
1.2.2.
OBJETIVOS ESPECFICOS .................................................................. 4
2. REVISO BIBLIOGRFICA ......................................................................... 6

2.1.
Contextualizao ................................................................................... 6
2.2. Parmetros que Influenciam a Eficincia dos Sistemas Magnticos

Nanoparticulados para Aplicaes Biomdicas in Vivo ................................... 7
2.2.1.
PROPRIEDADES MAGNTICAS ........................................................... 8
2.2.2.
GEOMETRIA .................................................................................... 15
2.2.3.
TOXICIDADE ................................................................................... 22
2.3.
Qumica de Superfcie e Biocompatibilidade ....................................... 23
2.4.
Aplicaes Biomdicas ....................................................................... 24
2.4.1.
SISTEMA DE CARREAMENTO DE DROGAS ......................................... 24
2.4.2.
HIPERTERMIA ................................................................................. 27
2.5.
As Nanopartculas Magnticas ............................................................ 30
2.5.1.
ESTRUTURA CRISTALINA DA MAGNETITA E MAGHEMITA .................... 30
2.5.2.
PROPRIEDADES MAGNTICAS DA MAGNETITA E MAGHEMITA ............. 33
2.5.3.
NANOPARTCULAS MAGNTICAS ALONGADAS .................................. 34
3. PARTE EXPERIMENTAL ........................................................................... 37

3.1.
Materiais .............................................................................................. 37
3.2.
Metodologia ......................................................................................... 37
3.2.1.
SNTESE DAS NANOPARTCULAS ...................................................... 37
3.2.2.
CARACTERIZAO DOS MATERIAIS .................................................. 40
3.2.3.
REALIZAO DE ENSAIOS VOLTADOS PARA APLICAES BIOMDICA..45
4. RESULTADOS E DISCUSSO .................................................................. 50

ix
4.1.
Snteses e Caracterizaes do Primeiro Grupo .................................. 53
4.1.1.
INFLUNCIA DO TEMPO DE REAO ................................................. 53
4.1.2.
INFLUNCIA DOS CONTRA-ONS ....................................................... 74
4.1.3.
INFLUNCIA DA PROPORO ENTRE Fe(II) E Fe(III) ............................ 90
4.1.4.
INFLUNCIA DA BASE UTILIZADA NA ALCALINIZAO DO MEIO ........... 99
4.2.
Snteses e Caracterizaes do Segundo Grupo ............................... 107
4.3.
Realizao de Ensaios Voltados para as Aplicaes Biomdicas .... 119
4.3.1.
MAGNETOHIPERTERMIA ................................................................ 119
4.3.2.
FUNCIONALIZAO DA SUPERFCIE DAS NANOPARTCULAS............. 124
4.3.3.
ESPALHAMENTO DE LUZ DINMICO ................................................ 126
4.3.4.
ENSAIOS DE CITOTOXICIDADE ....................................................... 128
5. CONCLUSES E PERSPECTIVAS......................................................... 132

5.1.
Concluses........................................................................................ 132
5.2.
Perspectivas ...................................................................................... 134
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ............................................................... 136

ANEXOS .........................................................................................................140
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Condies de sntese das nanopartculas do primeiro grupo. .......... 39
Tabela 2. Condies de sntese das nanopartculas do segundo grupo. ......... 40
Tabela 3. Dimenses mdias das nanopartculas magnticas obtidas com a
variao do tempo de reao e seus respectivos desvios-padro. .................. 57
Tabela 4. Tabela comparativa das nanopartculas magnticas sintetizadas com
variao do tempo de reao, indexadas como magnetita. ............................. 61
Tabela 5. Indexao dos picos de DRX para as nanopartculas magnticas
sintetizadas com variao do tempo de reao. .............................................. 63
Tabela 6. Clculo dos parmetros de cela da fase de magnetita para as
nanopartculas magnticas sintetizadas com variao do tempo de sntese. .. 65
Tabela 7. Proporo de Fe(II) e Fe(III) nas amostras obtidas com a variao do
tempo de reao, determinada por Dicromatometria. ...................................... 65
Tabela 8. Proporo de Fe(II) e Fe(III) na NP1DI. ........................................... 66
Tabela 9. Dados obtidos por DRX da amostra NP1DI, indexada como
magnetita.......................................................................................................... 67
Tabela 10. Indexao dos picos de difrao de raios X para a amostra NP1DI.
......................................................................................................................... 68
Tabela 11. Perda de massa das amostras NP1A, NP1B e NP1D na etapa de
degradao entre 200 e 300 C. ...................................................................... 71
Tabela 12. Propriedades magnticas das amostras obtidas variando-se o
tempo de reao. ............................................................................................. 72
Tabela 13. Proporo entre os reagentes utilizados na sntese da NP2A, NP1D,
NP2B e NP2C. ................................................................................................. 75
variao do tempo de reao e seus respectivos desvios-padro. .................. 77
Tabela 15. Indexao dos picos do difratograma da NP2A como hematita. .... 79
Tabela 16. Tabela comparativa da NP2B e NP2C, indexadas como goethita.. 81
Tabela 17. Proporo de Fe(II) e Fe(III) nas amostras obtidas com a variao
dos contra-ons, determinada por Dicromatometria. ........................................ 83
Tabela 18. Propriedades magnticas das amostras sintetizadas variando-se os
contra-ons. ...................................................................................................... 88
xi
Tabela 19. Indexao dos picos de difrao de raios X para as nanopartculas

magnticas sintetizadas com variao proporo de Fe(II) e Fe(III). ............... 92
Tabela 20. Tabela comparativa da NP3A e NP3B, indexadas como magnetita.
......................................................................................................................... 93
Tabela 21. Clculo dos parmetros de cela para as nanopartculas magnticas
sintetizadas com variao da proporo entre Fe(II) e Fe(III). ......................... 94
Tabela 22. Proporo entre Fe(II) e Fe(III) nas amostras obtidas com a
variao da proporo entre Fe(II) e Fe(III), determinada por Dicromatometria.
......................................................................................................................... 95
Tabela 23. Propriedades magnticas das amostras obtidas variando-se a
proporo entre Fe(II) e Fe(III). ........................................................................ 98
variao do tempo de reao e seus respectivos desvios-padro. ................ 100
Tabela 25. Indexao dos picos dos difratogramas da NP4A como maghemita
e da NP1D como magnetita. .......................................................................... 102
Tabela 26. Indexao dos picos de DRX da NP4A. ....................................... 102
Tabela 27. Clculo do parmetro de cela da NP4A. ...................................... 103
Tabela 28. Proporo entre Fe(II) e Fe(III) nas amostras obtidas com a
variao da base, determinada por Dicromatometria. .................................... 103
Tabela 29. Propriedades magnticas das amostras obtidas variando-se a base
alcalinizante do meio. ..................................................................................... 105
Tabela 30. Dimenses mdias das nanopartculas magnticas do segundo
grupo estimadas por MET e pela Equao de Scherrer, usando os dados de
DRX. ............................................................................................................... 110
Tabela 31. Indexao dos picos dos difratogramas das amostras esfricas do
segundo grupo como maghemita, exceto a NPS0, indexada como magnetita.
....................................................................................................................... 112
Tabela 32. Indexao dos picos de DRX das amostras do segundo grupo . . 113
Tabela 33. Clculo dos parmetros de cela para as amostras do segundo
grupo. ............................................................................................................. 114
Tabela 34. Proporo entre Fe(II) e Fe(III) nas nanopartculas esfricas do
segundo grupo, determinada por Dicromatometria. ....................................... 115
Tabela 35. Propriedades magnticas das amostras do segundo grupo......... 118
xii
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Nanopartculas magnticas em biomedicina. (a) A superfcie das

nanopartculas magnticas deve ser biocompatibilizada e funcionalizada antes
de sua administrao; (b) elas podem ser guiadas at o alvo pela aplicao de
um campo magntico externo ou pela aplicao direta na regio apropriada.
Depois de localizadas no alvo, as propriedades magnticas das nanopartculas
adquirem nova funcionalidade: (c) como agentes de contraste para a obteno
de imagens; (d) como agentes de hipertermia; (e) como carreadores de drogas
ou genes; (f) para separao e diagnstico in vitro. ........................................... 3
Figura 2. reas de fronteira em nanotecnologia. Drug delivery (carreamento de
drogas) e displays (mostradores). ...................................................................... 6
Figura 3. Terapias de condies patolgicas utilizando sistemas magnticos
nanoestruturados, adaptada............................................................................... 7
Figura 4. Distribuio eletrnica do tomo de Zn. .............................................. 9
Figura 5. Distribuio eletrnica do tomo de Fe. ............................................ 10
Figura 6. Representao do alinhamento paralelo dos momentos magnticos
em um material ferromagntico. ....................................................................... 10
Figura 7. Representao do alinhamento
antiparalelo dos
momentos
magnticos em um material antiferromagntico. .............................................. 11

Figura 8. Representao do alinhamento antiparalelo dos
momentos
magnticos em um material ferrimagntico. ..................................................... 11

Figura 9. Representao dos domnios magnticos dentro de uma amostra,
separados pelas paredes de Bloch .................................................................. 12
Figura 10. Curva de magnetizao versus campo aplicado, onde FM
ferri/ferromagntico e SPM superparamagntico. ......................................... 13
Figura 11. Ilustrao do conceito de superparamagnetismo. Os crculos
representam trs nanopartculas magnticas e as setas, a direo da
magnetizao de rede nessas partculas. ........................................................ 15
Figura
12.
Representao
das
modalidades
de
direcionamento
das
nanopartculas magnticas para tumores. (a) EPR; (b) direcionamento

molecular; (c) direcionamento magntico. ........................................................ 16
xiii
Figura 13. As partculas tendem a se acumular nas proximidades das paredes

dos vasos sanguneos e se deslocam mais facilmente para os vasos
sanguneos de menor calibre, o que pode aumentar a sua acumulao nessas
regies.............................................................................................................. 18
Figura 14. A trajetria de uma partcula esfrica e uma elipsoidal em um capilar
idealizado sob tpicas condies hidrodinmicas capilares .............................. 19
Figura 15. Clipes de vdeo-microscopia por time-lapse abrangendo 39 minutos
da interao entre macrfagos e micropartculas idnticas de PS no
opsonizadas com forma de disco elipsoidal (eixo maior 14 m e eixo menor 3
m) em duas orientaes diferentes. (A) o macrfago se liga ao longo do maior
eixo da micropartcula e a internaliza completamente em 3 min. (B) o
macrfago se liga ao lado achatado de uma micropartcula idntica e se
espraia, mas no a internaliza .......................................................................... 20
Figura 16. Corte transversal do funcionamento de um sistema magntico
hipottico de veiculao de drogas .................................................................. 25
Figura 17. Fenmeno da reverso da magnetizao para gerao de calor sob
o efeito de um CMA (H0, f). (esquerda) Mecanismo de gerao de calor por
perda por histerese para nanopartculas ferri e ferromagnticas. Mecanismo de
gerao de calor por relaxao de (centro) Nel e (direita) Brown para
nanopartculas superparamagnticas .............................................................. 28
Figura 18. Princpios da MHT ........................................................................... 29
Figura 19. Estrutura de empacotamento compacto cbico (ecc). .................... 31
Figura 20. (a) Stios tetradricos e octadricos em um retculo de
empacotamento compacto; (b) stio tetradrico; e (c) stio octadrico. ............ 31
Figura 21. Um segmento da clula unitria de espinlio .................................. 32
Figura 22. Estrutura cristalina da magnetita ..................................................... 33
Figura 23. Micrografia de transmisso eletrnica de partculas alongadas de (a)
hematita, preparadas em presena de ons fosfato; e (b) maghemita,
preparadas a partir de tratamento trmico da hematita obtida ......................... 35
Figura 24. Diagrama do VSM. .......................................................................... 42
Figura 25. Produtos isolados da hidrlise de Fe(III), mostrados nas Eq. Qum. 5
e 6, respectivamente ........................................................................................ 50
Figura 26. Dmero formado a partir dos produtos da hidrlise do [Fe(H2O)6]3+ 51
xiv
Figura 27. Imagens obtidas por MET das nanopartculas sintetizadas com
variao de tempo de sntese: (a) NP1A, (b) NP1B, (c) NP1C, (d) NP1D, (e)
NP1E e (f) NP1F. Barra de escala = 0,2 m. ................................................... 54
Figura 28. Histogramas de distribuio de comprimento (1) e largura (2) para a
(a) NP1A, (b) NP1B, (c) NP1C, (d) NP1D, (e) NP1E e (f) NP1F. ..................... 56
Figura 29. Diagrama de disperso dos (a) comprimentos e das (b) larguras das
nanopartculas sintetizadas variando-se o tempo de reao............................ 57
Figura 30. Imagem (a) topogrfica e (b) de fase da NP1B, obtidas por MFA em
modo dinmico. Imagem de 2,5 x 2,5 m. ....................................................... 58
Figura 31. Imagem (a) topogrfica e (b) de fase da NP1B, obtidas por MFA em
modo dinmico/viscoelstico. Imagem de 156 x 156 nm. ................................ 59
Figura 32. Imagem de MFA obtida no modo fase da NP1B em 3D. ................. 59
Figura 33. Difratogramas das nanopartculas magnticas sintetizadas com
variao de tempo de sntese. ......................................................................... 60
Figura 34. Comparao entre os difratogramas da NP1D e da magnetita pura.
......................................................................................................................... 61
Figura 35. Comparao entre os difratogramas da NP1A e da goethita pura. . 63
Figura 36. Difratograma da amostra NP1DI. .................................................... 67
Figura 37. Espectros de FTIR das nanopartculas magnticas sintetizadas com
Figura 38. Tipos de coordenao dos grupos OH- superficiais ao Fe .............. 69
Figura 39. Modos de coordenao do sulfato .................................................. 70
Figura 40. Curvas TG das amostras (a) NP1A, (b) NP1B e (c) NP1D.............. 71
Figura 41. Curvas M vs H das nanopartculas magnticas sintetizadas com
Figura 42. (a) MS em funo do tempo de reao e (b) MS em funo da
quantidade estimada de magnetita em percentual de massa contida nas
amostras........................................................................................................... 73
Figura 43. Detalhe do lao de histerese da curva M vs H nanopartculas
magnticas sintetizadas com variao de tempo de sntese............................ 74
variao dos contra-ons. (a) NP2A, (b) NP1D, (c) NP2B, (d) NP2C. Barra de
escala = 0,2 m. ............................................................................................... 75
xv

(a) NP2A, (b) NP1D, (c) NP2B e (d) NP2C. ..................................................... 76
Figura 46. Comparao entre os difratogramas da NP2A e do padro de
hematita............................................................................................................ 79
Figura 47. Comparao entre os difratograma da NP2B, NP2C e goethita pura.
......................................................................................................................... 80
variao do contra-on. ..................................................................................... 82
Figura 49. Espectros de FTIR das nanopartculas sintetizadas, variando-se os
contra-ons. ...................................................................................................... 84
Figura 50. Espectro de FTIR dos reagentes utilizados nas snteses das
nanopartculas obtidas, variando-se os contra-ons. ........................................ 85
Figura 51. Comparao entre os espectros de FTIR do Fe2(SO4)3.9H2O e das
amostras NP2B e NP2C. .................................................................................. 86
Figura 52. Modos de coordenao de ligantes superfcie dos xidos de Fe. 86
Figura 53. Curvas M vs H da NP2A e NP2B. ................................................... 87
Figura 54. Curva M vs H da NP2C. .................................................................. 88
Figura 55. Detalhe do lao de histerese das curvas M vs H da NP2B e NP2C.89
Figura 56. Curvas M vs H das nanopartculas magnticas sintetizadas,
variando-se os contra-ons. .............................................................................. 90
Figura 57. Imagens obtidas por MET das nanopartculas sintetizadas variandose a proporo entre Fe(II) e Fe(III). (a) NP1D, (b) NP3A e (c) NP3B. Barra de
escala = 0,2 m. ............................................................................................... 91
variao da concentrao de Fe(II) e Fe(III). ................................................... 92
Figura 59. Espectros de FTIR das nanopartculas obtidas variando-se a
proporo entre Fe(II) e Fe(III). ........................................................................ 96
Figura 60. Curvas M vs H das nanopartculas magnticas sintetizadas
variando-se a proporo entre Fe(II) e Fe(III). ................................................. 97
Figura 61. Detalhe do lao de histerese das curvas M vs H das nanopartculas
magnticas sintetizadas com variao da proporo entre Fe(II) e Fe(III). ...... 98
variao da base utilizada na alcalinizao do meio. (a) NP4A e (b) NP1D.
Barra de escala = 0,2 m. ................................................................................ 99
xvi

(a) NP4A e (b) NP1D. ..................................................................................... 100
variao da base alcalinizante em comparao com os padres de magnetita e
maghemita...................................................................................................... 101
Figura 65. Espectros de FTIR das nanopartculas sintetizadas variando-se a
base................................................................................................................ 104
Figura 66. Curvas M vs H das nanopartculas magnticas sintetizadas com
variao da base alcalinizante do meio. ......................................................... 105
Figura 67. Detalhe do lao de histerese das curvas M vs H da NP4A e NP1D.
....................................................................................................................... 106
Figura 68. Imagens obtidas por MET das nanopartculas do segundo grupo,
sintetizadas variando-se o tempo de reao: (a) NPS0, (b) NPS1, (c) NPS3, (d)
NPS6, (e) NPS9. Barra de escala = 100 nm. ................................................. 108
Figura 69. Histogramas de distribuio de dimetro para a (a) NPS0, (b) NPS1,
(c) NPS3, (d) NPS6 e (e) NPS9. .................................................................... 109
Figura 70. Diagrama de disperso dos dimetros das amostras do segundo
grupo. ............................................................................................................. 110
Figura 71. Difratogramas das amostras de nanopartculas esfricas do segundo
grupo. ............................................................................................................. 112
Figura 72. Espectros de FTIR das nanopartculas esfricas das amostras do
segundo grupo. .............................................................................................. 116
Figura 73. Espectros Raman das amostras NPS0 e NPS6. ........................... 117
Figura 74. Curvas M vs H das amostras do segundo grupo........................... 117
Figura 75. Detalhe do lao de histerese das curvas M vs H das amostras do
segundo grupo. .............................................................................................. 118
Figura 76. Variao da temperatura em funo do tempo de medio para a
amostra NP1D, variando-se o campo magntico aplicado. ............................ 120
Figura 77. Variao da temperatura em funo do tempo de medio para as
amostras NP1A e NP1D, aplicando um campo de 267 Oe. ........................... 122
Figura 78. Variao da temperatura em funo do tempo de medio para a
amostra NPS6, variando-se o campo magntico aplicado. ............................ 122
xvii
Figura 79. Comparao da variao da temperatura em funo do tempo de

medio entre as amostras NP1D e NPS6, em (a) 169 Oe, (b) 223 Oe, (c) 267
Oe e (d) 312 Oe. ............................................................................................ 124
Figura 80. Modelo de funcionalizao da superfcie das nanopartculas via
adsoro de polieletrlitos. ............................................................................. 125
Figura 81. Imagens obtidas por MET das nanopartculas da amostra NP1D,
cujas superfcies foram funcionalizadas com TPF: (a) decantado e (b)
sobrenadante. Barra de escala = 0,2 m. ...................................................... 126
Figura 82. Histograma de distribuio de tamanho hidrodinmico das
nanopartculas da amostra NPS6................................................................... 127
Figura 83. Viabilidade celular das nanopartculas da amostra NP1D
funcionalizadas, em uma linhagem celular imortalizada derivada de um
adenocarcinoma mamrio murino 4T1. .......................................................... 128
Figura 84. Viabilidade celular das
nanopartculas da amostra NPS6
funcionalizadas, em uma linhagem celular imortalizada derivada de um

adenocarcinoma mamrio murino 4T1.. ......................................................... 129
Figura 85. Imagens obtidas por microscopia de luz da alterao da morfologia
celular aps o tratamento com nanopartculas. (a) controle; (b) NP1D; (c) NPS6
e (d) NPS6 com concentrao de 20 x 1013 partculas/mL. ............................ 130
xviii
LISTA DE ABREVIATURAS E ACRNIMOS

BET
Brunauer, Emmet e Teller (mtodo de determinao de rea

superficial)
cfc
Cbico de face centrada
CMA
Campo magntico alternado
DRX
Difrao de raios X
ecc
Empacotamento compacto cbico
EPR
Efeito de permeabilidade e reteno aumentadas (Enhanced

Permeability and Retention Effect)
FDA
Food and Drug Administration
FTIR
Espectroscopia no infravermelho com transformada de

Fourier
MET
Microscopia eletrnica de transmisso
MFA
Microscopia de fora atmica
MHT
Magnetohipertermia
MTT
Brometo de 3(4,5-dimetiltiazol-2il)-2,5-difenil-tetrazlio
PS
Poliestireno
ROS
Espcies de oxignio reativo (Reactive oxygen species)
SMF
Sistema mononuclear fagocitrio
SPM
Superparamagntico
SRE
Sistema reticuloendotelial
TG
Termogravimetria
TPF
Tripolifosfato de sdio
VSM
Magnetmetro de amostra vibrante (Vibrating sample

magnetometer)
xix
Captulo
1
Introduo e Objetivos
1. INTRODUO E OBJETIVOS
1.1. Introduo
Os primeiros estudos da aplicao de materiais magnticos para

hipertermia datam do final da dcada de 50.1 Porm, foi no final da dcada de
70, que o primeiro estudo sobre a aplicao de micro e nanopartculas
magnticas para o carreamento de drogas para alvos especficos no
organismo, foi reportado.2 A partir de ento, as pesquisas acerca das
aplicaes dos sistemas magnticos nanoestruturados em biomedicina se
intensificaram, devido, em especial, potencial especificidade desses
sistemas.
Esse potencial se deve a trs fatores principais. O primeiro relativo
dimenso nanomtrica das partculas, que as situa na faixa de dimenso das
protenas (5-50 nm), DNA (10-100 nm) e vrus (20-450 nm), permitindo, alm
de uma aproximao das estruturas biolgicas de interesse, a sua circulao
no interior do corpo e o acesso a reas especficas. O segundo fator refere-se
s suas caractersticas magnticas, que as faz responder aplicao de um
campo magntico externo. Uma vez que os campos magnticos penetram nos
tecidos do corpo, elas podem ser manipuladas remotamente, caracterstica
explorada no seu transporte e imobilizao; alm da gerao de calor em stios
especficos, quando aplicado um campo magntico alternado (CMA). O terceiro
fator est relacionado facilidade de modificao de sua superfcie,
caracterstica usada para associar grupos e substncias de interesse a elas,
possibilitando o carreamento de drogas e genes para alvos especficos e
tambm, aumentar ainda mais a sua especificidade. A unio e a explorao
dessas caractersticas permitem a aplicao biomdica desses sistemas com
finalidades teraputicas e diagnsticas (Figura 1).
(a) Nanopartcula
magntica
(b) Alvo
(c)
Ligao
Guiar
Obteno de
imagens
Modificao
da superfcie
(d) Hipertermia
(e) Vetorizao
(f) Separao e
Diagnstico
Figura 1. Nanopartculas magnticas em biomedicina. (a) A superfcie das nanopartculas

magnticas deve ser biocompatibilizada e funcionalizada antes de sua administrao; (b) elas
podem ser guiadas at o alvo pela aplicao de um campo magntico externo ou pela
aplicao direta na regio apropriada. Depois de localizadas no alvo, as propriedades
magnticas das nanopartculas adquirem nova funcionalidade: (c) como agentes de contraste
para a obteno de imagens; (d) como agentes de hipertermia; (e) como carreadores de
3
drogas ou genes; (f) para separao e diagnstico in vitro.
A constatao de que nessas aplicaes utilizam-se, geralmente,

nanopartculas magnticas esfricas, motivou a proposta desse projeto de
pesquisa: a sntese de sistemas magnticos baseados em nanopartculas
magnticas alongadas. Visto que a magnetita (Fe3O4) e a maghemita (-Fe2O3)
so as partculas magnticas mais comumente estudadas para essas
finalidades, elas foram o foco desse estudo. Espera-se que, em virtude de sua
morfologia anisotrpica, elas se comportem de modo diferenciado das
nanopartculas esfricas, em relao s suas propriedades magnticas e
pticas; s interaes com as entidades biolgicas; e ao seu transporte in vivo,
o que pode potencializar as aplicaes desses sistemas em determinadas
situaes.
1.2. Objetivos
1.2.1. OBJETIVO GERAL
Desenvolver novos sistemas magnticos nanoestruturados, baseados
em nanopartculas alongadas de maghemita (-Fe2O3) e magnetita (Fe3O4),
visando aplicao em biomedicina.
1.2.2. OBJETIVOS ESPECFICOS
Sintetizar nanopartculas alongadas de maghemita e magnetita;
Caracterizar as nanopartculas magnticas sintetizadas;
Selecionar as nanopartculas com as propriedades mais adequadas para as

finalidades desse estudo para os ensaios biolgicos e testes de hipertemia;
Realizar ensaios de citotoxicidade in vitro das nanopartculas selecionadas;
Efetuar medidas de hipertemia magntica das nanopartculas selecionadas.
Captulo
2
Reviso Bibliogrfica
2. REVISO BIBLIOGRFICA
2.1. Contextualizao
De maneira simplificada, nanocincia e nanotecnologia se referem ao
estudo e aplicao, respectivamente, da matria em escala nanomtrica. A
interdisciplinaridade uma caracterstica marcante dessa rea de fronteira
entre qumica, fsica, biologia, medicina, engenharia e informtica (Figura 2).
Figura 2. reas de fronteira em nanotecnologia. Drug delivery (carreamento de drogas) e

displays (mostradores).
Um de seus campos em franco desenvolvimento a nanobiotecnologia,

que pode ser definida como a aplicao de conhecimentos em escala
nanomtrica, para o desenvolvimento de materiais que agreguem valor a
produtos/processos biolgicos. Nesse contexto, est situado o foco desse
estudo, que o desenvolvimento e aplicao de sistemas magnticos
nanoestruturados para terapia (carreamento de drogas e hipertermia) de
condies patolgicas (Figura 3), em especial, o cncer.
Figura 3. Terapias de condies patolgicas utilizando sistemas magnticos nanoestruturados,

adaptada.5
2.2. Parmetros que Influenciam a Eficincia dos Sistemas

Magnticos Nanoparticulados para Aplicaes
Biomdicas in Vivo
As aplicaes biomdicas in vivo das nanopartculas magnticas se
baseiam, geralmente, no seu transporte passivo at o alvo pretendido pela
circulao sangunea, motivo pelo qual a farmacocintica deve ser considerada
no desenvolvimento dos sistemas magnticos que visam essas aplicaes.
Assim, para que seja efetiva, fatores relacionados s suas propriedades
magnticas, geometria (dividida didaticamente nesse trabalho em dimenso e
forma) e citotoxicidade, alm de fatores fisiolgicos relacionados regio alvo
e ao transporte das nanopartculas at l, devem ser considerados.
2.2.1. PROPRIEDADES MAGNTICAS

As propriedades magnticas de um material esto relacionadas ao
movimento dos eltrons nos tomos e a compreenso da sua dinmica
fundamental para o entendimento dos mecanismos que regem os sistemas
magnticos nas aplicaes biomdicas.
O momento magntico, m, um parmetro utilizado para quantificar as
propriedades magnticas de um material.6 Em um tomo ou on livre, ele
originado do spin dos eltrons, do seu momento angular orbital em relao ao
ncleo e da mudana no momento orbital, induzida por um campo magntico
aplicado.7,8 Ele no pode ser medido diretamente, mas dado em funo da
susceptibilidade magntica molar, , segundo a Equao 1:6
= 2,83
(Equao 1)
onde, T a temperatura absoluta e denota a relao entre a magnetizao, M

(soma dos momentos magnticos dos tomos da amostra por unidade de
volume),6,9 sofrida por um material disposto em um campo magntico aplicado,
H.
=
(Equao 2)
A unidade utilizada para m Joule/Tesla, mas utiliza-se tambm

magneton de Bohr (MB).
O magneton de Bohr, B, o momento magntico associado ao
movimento orbital de um eltron, girando na primeira rbita de Bohr. Ele
considerado o momento magntico fundamental6 e dado por:
= 4 = 9,2732. 10 J. T

(Equao 3)
onde e e me so a carga e a massa do eltron, respectivamente; c a

velocidade da luz; e h a constante de Planck.
Dessa forma, o momento magntico de um tomo a soma vetorial dos

momentos magnticos associados ao movimento dos eltrons em suas rbitas
e ao spin de cada um deles. Uma vez que, tanto o momento angular orbital
quanto o momento de spin so quantizados, o momento magntico tambm
ser quantizado.
Considerando a dinmica de interao entre os momentos magnticos,
podemos distinguir duas situaes: magnetismo individual e magnetismo
cooperativo.
O magnetismo individual se caracteriza pela ausncia de interaes
magnticas de longo alcance, de modo que os momentos magnticos esto
orientados aleatoriamente a campo zero. Dentro desse quadro, duas situaes
so possveis:
Diamagnetismo: os momentos magnticos individuais dos eltrons se

cancelam e o tomo no possui momento resultante. A susceptibilidade
magntica dessas substncias pequena (da ordem de 10-6), negativa e
independente da temperatura.6 O tomo de zinco (Zn) um exemplo de
diamagnetismo, pois possui 30 eltrons, todos emparelhados, como
mostra a Figura 4.
Figura 4. Distribuio eletrnica do tomo de Zn.
Paramagnetismo: o cancelamento dos momentos magnticos individuais

parcial, uma vez que existem eltrons desemparelhados e o tomo
possui um momento magntico resultante. Assim, a aplicao de um
campo magntico promove o alinhamento parcial dos momentos
magnticos paralelamente ao campo. A susceptibilidade magntica est
na faixa de 0 a 0,01, positiva e varia com a temperatura.6 O tomo de
ferro (Fe) um exemplo de paramagnetismo, uma vez que apresenta
quatro de seus 26 eltrons desemparelhados, como mostra a Figura 5.
Figura 5. Distribuio eletrnica do tomo de Fe.
No magnetismo cooperativo, os materiais possuem ordenamento

magntico proveniente de interaes magnticas de longo alcance entre os
momentos magnticos atmicos, conduzindo a uma magnetizao espontnea.
Essa situao s ocorre abaixo de uma temperatura crtica, denominada
temperatura de Curie (TC), para materiais ferromagnticos e ferrimagnticos, e
temperatura de Nel (TN), para materiais antiferromagnticos. Acima dessa
temperatura, os efeitos de flutuaes trmicas so suficientes para quebrar a
ordem e o material se torna paramagntico. Dentro desse quadro, trs tipos de
ordenamento so possveis:
Ferromagnetismo: os momentos magnticos dos diferentes tomos

esto alinhados paralelamente entre si (Figura 6). Esses materiais
apresentam um momento magntico resultante e uma alta e positiva
susceptibilidade magntica (0,01 106).6
Figura 6. Representao do alinhamento paralelo dos momentos magnticos em um material

ferromagntico.
Antiferromagnetismo: os momentos magnticos de igual magnitude dos

diferentes tomos esto alinhados antiparalelamente entre si, de modo
que se anulam e o momento magntico resultante do material zero
(Figura 7). Eles apresentam uma susceptibilidade magntica pequena e
positiva (0 0,1).6
10
Figura 7. Representao do alinhamento antiparalelo dos momentos magnticos em um

material antiferromagntico.
Ferrimagnetismo: tal qual no antiferromagnetismo, os momentos

magnticos dos diferentes tomos esto alinhados antiparalelamente
entre si. Entretanto, a magnitude desses diferentes momentos
magnticos desigual, levando a um momento magntico resultante
diferente de zero (Figura 8).
Figura 8. Representao do alinhamento antiparalelo dos momentos magnticos em um

material ferrimagntico.
Em um cristal, portanto, a magnetizao resultado da interao dos

momentos magnticos de muitos tomos. Para que a energia magnetosttica
desse sistema seja minimizada, ele se subdivide em regies com diferentes
tamanhos e formas, em cujos interiores os momentos magnticos tendem a se
alinhar espontaneamente, em uma mesma direo, gerando momentos
magnticos resultantes opostos. Essas regies so chamadas de domnios
magnticos e seus limites so as paredes de Bloch (Figura 9).
11
Figura 9. Representao dos domnios magnticos dentro de uma amostra, separados pelas
paredes de Bloch.
O alinhamento espontneo dos momentos magnticos se d segundo

direes preferenciais, chamadas de eixos de fcil magnetizao ou eixos de
magnetizao espontnea. Essa preferncia na orientao dos momentos
magnticos est associada a uma energia (anisotropia magntica), que
mnima quando os momentos magnticos esto orientados ao longo destes
eixos.
Assim, cada um desses domnios possui um vetor magnetizao prprio,
oriundo do alinhamento dos momentos magnticos individuais segundo os
eixos de fcil magnetizao dentro do domnio. Os vetores magnetizao de
todos os domnios da amostra podem no estar alinhados, originando uma
magnetizao menor do que a esperada se todos esses vetores estivessem
perfeitamente alinhados. Diminuindo-se o tamanho das partculas, diminui-se o
nmero de domnios at uma dimenso crtica, abaixo da qual se tem um
monodomnio magntico.
Aplicando-se um campo magntico H a uma amostra, possvel notar
que a sua magnetizao M aumenta com o aumento da fora do campo
aplicado at um valor mximo, denominado magnetizao de saturao, MS
(Figura 10). Nessa situao, os momentos magnticos de todos os domnios
esto alinhados. A curva de M versus H mostra um lao de histerese
correspondente magnetizao e desmagnetizao, porque nem todos os
domnios magnticos da amostra retornam s suas orientaes originais,
quando o campo magntico aplicado reduzido, aps ter atingido a MS. Dessa
forma, quando H retorna a zero, h uma magnetizao remanente, MR, que
pode ser removida pela aplicao de um campo magntico reverso,
12
denominado campo coercivo, HC. Materiais com um monodomnio magntico
Magnetizao, M
no apresentam lao de histerese, pois eles so superparamagnticos (SPM).
Campo magntico, H
Figura 10. Curva de magnetizao versus campo aplicado, onde FM ferri/ferromagntico e

SPM superparamagntico.10
2.2.1.1.
Superparamagnetismo
O fenmeno do superparamagnetismo pode ocorrer em monodomnios

magnticos ou em temperaturas muito elevadas.11
Os fundamentos fsicos do superparamagnetismo so baseados numa lei
de ativao para o tempo de relaxao da partcula, tido como o tempo mdio
que a partcula leva para passar de um estado de equilbrio a outro. Dois
mecanismos de relaxao so fundamentais e possuem o seu tempo de
relaxao caracterstico: relaxao browniana e relaxao de Nel-Brown.
A relaxao browniana corresponde rotao fsica das partculas
propriamente ditas e o seu tempo de relaxao, B (Equao 4),3,12 depende
das propriedades hidrodinmicas do fluido no qual as nanopartculas esto
dispersas:

3"#
$

(Equao 4)
onde, " a viscosidade do meio no qual s partculas esto suspensas; #% o
volume hidrodinmico da partcula que inclui qualquer camada no-magntica;

$& a constante de Boltzmann; e a temperatura.
13
J a relaxao de Nel-Brown diz respeito rotao dos momentos

magnticos dentro de cada partcula e o seu tempo de relaxao, N (Equao
5)12, sobre o qual se apoia o superparamagnetismo, determinada pela
energia de anisotropia magntica das nanopartculas superparamagnticas
relativa energia trmica:
'
onde,
-. #
/$ 0
&
( exp ,
(Equao 5)
tempo de relaxao do spin (da ordem de 10-9); -. a densidade de
energia anisotrpica; # o volume da partcula. O produto de -. e # fornece a
barreira de energia, E, que separa os dois estados de equilbrio.11
Uma partcula dita superparamagntica quando N menor que o tempo

necessrio para a realizao de uma medida, tm. Entretanto, se N for maior
que tm, a partcula se encontra no chamado estado bloqueado. Assim, se $&
>> E, ou seja, para altas temperaturas ou volumes muito pequenos, N tende a
ser menor que tm, os momentos magnticos das partculas flutuam livremente e
o sistema est no estado superparamagntico. Por outro lado, se $& << E, ou
seja, em temperaturas mais baixas e para partculas com volume maior, N

tende a ser maior que tm, de modo que o momento da partcula se encontra em
um vale durante a medida e o sistema est no estado bloqueado (Figura 11).
Ento, para partculas muito pequenas, E comparvel a $& temperatura
ambiente, de maneira que elas podem apresentar superparamagnetismo nessa

condio. Assim, na ausncia de um campo magntico externo, os momentos
magnticos das partculas esto orientados aleatoriamente. Quando um campo
magntico aplicado, os momentos magnticos tendem a se orientar na
direo desse campo, que, a partir de certo valor, conduz todos os momentos
magnticos a se alinharem paralelamente sua direo, atingindo a
magnetizao de saturao. Na medida em que o campo reduzido, no h
magnetizao remanente e, portanto, no h lao de histerese. Isso evita, por
exemplo,
que
as
nanopartculas
magnticas
superparamagnticas
se
14
aglomerem no corpo na ausncia de um campo magntico externo, podendo

provocar a obstruo de vasos sanguneos.
ou tm << N
ou tm >> N
Figura 11. Ilustrao do conceito de superparamagnetismo. Os crculos representam trs

nanopartculas magnticas e as setas, a direo da magnetizao de rede nessas partculas.13
2.2.2. GEOMETRIA
A geometria das nanopartculas est intimamente relacionada ao seu
tempo de permanncia na circulao sangunea, cujo aumento permite a maior
acumulao dos sistemas magnticos nos tecidos alvo, potencializando a sua
efetividade. A rpida remoo desses sistemas da circulao pode reduzir
substancialmente a sua funcionalidade biomdica. Dessa forma, a busca pelo
aumento do tempo de permanncia dos sistemas magnticos na circulao tem
sido um dos desafios no desenvolvimento desses sistemas.
O sistema mononuclear fagocitrio (SMF), tambm conhecido como
sistema reticuloendotelial (SRE) o principal responsvel pela remoo das
nanopartculas magnticas da circulao. O SMF atua, dentre outras coisas, na
remoo de clulas velhas, mortas ou alteradas e corpos estranhos, em vrias
reaes inflamatrias e na destruio de micrbios e clulas tumorais.14 No
processo de remoo das nanopartculas magnticas, as protenas do plasma
(opsoninas) funcionam como marcadores, se adsorvendo na superfcie das
nanopartculas, que so ento, reconhecidas e removidas da corrente
sangunea pelas clulas do SMF.
15
2.2.2.1.
Dimenses
As dimenses das nanopartculas influenciam diretamente a sua

trajetria no organismo. O limite superior da dimenso das nanopartculas
determinado pelo SMF e o limite inferior, pela filtrao renal: nanopartculas
maiores que 100 nm so geralmente opsonizadas e eliminadas da circulao
via SMF; nanopartculas com 5-6 nm de dimetro so removidas pela filtrao
renal e excretadas pela urina.15 Em geral, quanto maior uma partcula, menor o
seu tempo de permanncia na circulao sangunea.16 Dessa maneira,
geralmente aceito que nanopartculas com dimetro de 10 100 nm so
farmacodinamicamente apropriadas para aplicaes in vivo.
Uma das maneiras das nanopartculas alcanarem o alvo atravs do
efeito de permeabilidade e reteno aumentadas (do ingls Enhanced
Permeability and Retention Effect EPR). Esse fenmeno se baseia em
anormalidades estruturais nos vasos sanguneos de certas patologias, como
tumores, inflamaes ou infeces, ou seja, esses tecidos possuem vasos
sanguneos vazados que permitem que certas dimenses de partculas
extravasem e se acumulem mais no alvo do que em tecidos normais (Figura
12). Assim, as dimenses das nanopartculas podem ainda ser exploradas no
desenvolvimento desses sistemas, visando o aproveitamento desse efeito.
Ligante especfico
Campo magntico
Clulas saudveis
Vasculatura
permevel
Clulas tumorais
Figura 12. Representao das modalidades de direcionamento das nanopartculas magnticas

17
para tumores. (a) EPR; (b) direcionamento molecular; (c) direcionamento magntico.
16
2.2.2.2.
Forma
Alm da dimenso, as propriedades das nanopartculas magnticas

esto relacionadas tambm sua forma. Nanopartculas esfricas tm sido a
forma clssica estudada e utilizada em aplicaes biomdicas, apesar de
modelos tericos terem apontado os benefcios do uso de partculas noesfricas no carreamento de drogas, baseados na influncia da sua forma na
internalizao celular e nas dinmicas vasculares.18,19 Recentemente, muitos
estudos vm propondo o uso de nanopartculas alongadas para essas
finalidades.20,21
Uma vez administradas por via intravascular, as nanopartculas so
transportadas pelo fluxo sanguneo e aderem s paredes dos vasos
sanguneos, em condies apropriadas. A partir da, elas tm que controlar a
internalizao celular, evitando-a ou favorecendo-a, dependendo dos objetivos
do
tratamento.
Decuzzi
colaboradores20
dividiram
essa
trajetria
didaticamente em trs eventos: dinmica de marginao, adeso firme e

controle da internalizao.
Dinmica de marginao
Marginao um termo conhecido em fisiologia, convencionalmente
utilizado para descrever o deslocamento leucocitrio ou plaquetrio da poro
central do fluxo sanguneo para a periferia do fluxo, ao longo das paredes
endoteliais, em casos inflamatrios. Quando esse conceito aplicado s
nanopartculas, trata-se do processo do seu deslocamento da poro central do
fluxo, para as proximidades das paredes endoteliais, onde elas devem se
acumular, preferencialmente. Esse acmulo desejvel por dois motivos
principais: (1) com a maior proximidade, a probabilidade das interaes entre
as nanopartculas e as paredes dos vasos aumenta, possibilitando, dentre
outras coisas, o seu extravasamento pelas fenestraes do endotlio e a
expresso mais efetiva dos marcadores celulares, quando ligados a elas; (2) as
nanopartculas podem passar mais facilmente dos vasos sanguneos com
maior calibre para os de menor calibre, se acumulando na microcirculao.
As hemcias, ao contrrio, se concentram na poro central do fluxo
sanguneo, evitando interaes com as paredes endoteliais. A consequncia
17
imediata disso a formao de uma camada livre de hemcias nas

proximidades da parede, cuja espessura varia com o calibre do vaso e com a
velocidade mdia do fluxo sanguneo (Figura 13). As nanopartculas
desenvolvidas para circular no fluxo mais marginal tendem a se acumular
nessa camada livre de clulas, onde se observa quase um fluxo laminar linear.
Trilha das hemcias
Nanopartculas
Camada livre da clula
Figura 13. As partculas tendem a se acumular nas proximidades das paredes dos vasos
sanguneos e se deslocam mais facilmente para os vasos sanguneos de menor calibre, o que
pode aumentar a sua acumulao nessas regies.
20
As foras de resistncia hidrodinmica e de empuxo, bem como o torque

exercido pelo fluxo sanguneo, dependem da geometria e da orientao da
partcula em relao direo do fluxo e mudam constantemente. Estudos
mostraram que nanopartculas esfricas submetidas a um fluxo laminar linear
se movimentando nas proximidades de uma parede em um fluido viscoso, s
podem se deslocar lateralmente sob a ao de uma fora externa que force
esse deslocamento.22 A Figura 14 mostra a trajetria de uma partcula esfrica
e outra elipsoidal se deslocando em um tubo imitando um capilar. Assim que o
fluxo se inicia, a partcula esfrica se move para uma distncia de equilbrio da
parede e segue o curso nessa linha. J a partcula elipsoidal roda e translada
seguindo o fluxo da corrente, se movimentando lateralmente de um lado para o
outro do capilar, explorando as paredes do tubo. Isso porque partculas noesfricas experimentam movimentos mais complexos que podem ser usados
para controlar as dinmicas de marginao, sem a necessidade da ao de
foras externas. Foi mostrado que, para partculas no-esfricas, a velocidade
de desvio lateral diretamente relacionada sua razo de aspecto, com um
mximo entre os dois extremos: a esfera (razo de aspecto unitria) e o disco
(razo de aspecto infinita).23
18
Figura 14. A trajetria de uma partcula esfrica e uma elipsoidal em um capilar idealizado sob
tpicas condies hidrodinmicas capilares.20
Adeso firme
As partculas se movendo nas proximidades das paredes do vaso
sanguneo podem se aderir firmemente s clulas endoteliais por meio de
interaes especficas e no-especficas, em condies apropriadas de
cisalhamento hidrodinmico na parede e de tipo e nvel de expresso dos
receptores moleculares. Essa etapa crtica, visto que a adeso deve superar
as foras hemodinmicas exercidas sobre a partcula pelo fluxo sanguneo, que
tende a retirar a partcula do stio ao qual ela aderiu.
Estudos mostraram que para qualquer forma da partcula, existe um
volume timo para o qual a fora de adeso mxima e que as partculas
achatadas (razo de aspecto > 1) so mais efetivas na adeso a uma
superfcie sob um fluxo laminar do que as clssicas esfricas (razo de aspecto
1) em um volume fixo.18
Controle da internalizao
Uma vez aderidas s clulas endoteliais, as partculas podem ou no ser
internalizadas, dependendo do objetivo da sua aplicao. A internalizao
pelos macrfagos depende no exatamente da forma da partcula como um
todo, mas da geometria local no ponto de primeiro contato com o macrfago.24
Isso determinar se ocorrer a fagocitose ou simplesmente o espraiamento
sobre as partculas.
A geometria local varia no s entre diferentes partculas, mas tambm
em pontos diferentes de contato inicial do macrfago em uma mesma partcula,
exceto para partculas esfricas. A Figura 15 mostra um exemplo no qual os
19
macrfagos se ligam s micropartculas com formato de discos elipsoidais de

poliestireno (PS) em pontos iniciais de contato com geometria diferente. A
internalizao ocorre rapidamente (3 min) quando os macrfagos se ligam s
micropartculas ao longo do maior eixo (Figura 15-A). A sua membrana envolve
todo o comprimento da micropartcula em um movimento nico e coordenado.
Quando os macrfagos se ligam s mesmas micropartculas ao longo do
menor eixo (o lado com menor curvatura), as micropartculas no so
internalizadas nem aps 2 h (Figura 15-B). O que acontece o espraiamento
sobre a superfcie em um movimento no sincronizado, com frentes se
movendo em direes diferentes, em tempos diferentes. Dessa maneira,
micropartculas esfricas so internalizadas mais rapidamente do que
partculas no-esfricas, visto que, independente do ponto de contato do
macrfago, se dar o mostrado na Figura 15-A. Esse modelo pode ser um
ponto de partida para o estudo da influncia da forma na internalizao de
nanopartculas.
Figura 15. Clipes de vdeo-microscopia por time-lapse abrangendo 39 minutos da interao

entre macrfagos e micropartculas idnticas de PS no opsonizadas com forma de disco
elipsoidal (eixo maior 14 m e eixo menor 3 m) em duas orientaes diferentes. (A) o
macrfago se liga ao longo do maior eixo da micropartcula e a internaliza completamente em 3
min. (B) o macrfago se liga ao lado achatado de uma micropartcula idntica e se espraia,
mas no a internaliza.
24
Chithrani e colaboradores25 estudaram a dependncia da forma e

tamanho de nanopartculas de ouro em sua absoro por clulas de
mamferos. Eles observaram que nanopartculas esfricas
tm maior
20
probabilidade de entrarem nas clulas do que nanopartculas alongadas. Geng

e colaboradores26 mostraram que as nanopartculas cilndricas estudadas por
eles, as filomicelas, tendem a permanecer mais tempo na corrente sangunea
de camundongos do que as suas equivalentes esfricas, que so eliminadas
rapidamente. Dessa maneira, interessante observar que, a escolha da forma
das nanopartculas est diretamente relacionada ao objetivo de sua aplicao.
Alm disso, Cribb e colaboradores27 assinalaram outras vantagens em se
usar nanopartculas no-esfricas, no caso, nanopartculas cilndricas, como
carreadores de frmacos, em certos contextos fisiolgicos, como matriz
extracelular, barreiras de muco e fluidos sinuviais. Eles observaram que as
nanopartculas cilndricas utilizadas provocaram a pseudoplasticidade nos
meios estudados, em especial no muco, ou seja, elas diminuram a viscosidade
relativa dos meios pelo aumento da tenso de cisalhamento. Apesar dessas
nanopartculas
experimentarem
uma
maior
resistncia,
elas
tambm
experimentaram uma fora motriz maior e, portanto, uma maior tenso de

cisalhamento e capacidade de provocar a pseudoplasticidade. Confrontando as
duas tendncias, os autores notaram que as nanopartculas cilndricas
alcanam velocidade muito superior s nanopartculas esfricas nesses meios
com a aplicao de um mesmo campo. Dessa forma, a opo por
nanopartculas cilndricas diminui a necessidade de campos fortes.
2.2.2.2.1.
ANISOTROPIA MAGNTICA DE FORMA
Em relao s propriedades magnticas de nanopartculas alongadas,

uma das vantagens mais evidentes de seu uso que elas apresentam
anisotropia magntica de forma, ao passo que nanopartculas esfricas so
isotrpicas.
A anisotropia magntica de forma uma propriedade que reflete a
existncia de uma direo preferencial de magnetizao dependente da forma
da
partcula.
Essa
anisotropia
est
desmagnetizante, descrita pela Equao 6:
relacionada

444445
444445
12 =
2 .
6

com
energia
28
(Equao 6)
21
onde, 2 = 72
6 o campo desmagnetizante e 72 o coeficiente de
desmagnetizao na direo de 444445
6 . Para uma partcula elipsoidal, com eixo

maior a, a Equao 6 assume a forma da Equao 7:28
12 =
6 78 + :7; 78 <
6 => ?

(Equao 7)
na qual, 78 e 7; so os fatores desmagnetizantes e ? o ngulo entre a
magnetizao e o eixo de fcil magnetizao. Assim, 12 anisotrpica com

relao forma externa do cristal, que determina a separao dos plos de
superfcie para diferentes orientaes de magnetizao. Ela uniaxial, com o
eixo fcil de magnetizao sendo paralelo ao eixo maior, isto , para = 0 ou
= 180.
Dessa forma, os momentos magnticos de nanopartculas esfricas
esto dispostos aleatoriamente e tendem a se cancelar, diluindo a fora do

sinal magntico. J nas nanopartculas elipsoidais, eles tendem a se orientar
segundo o seu eixo longo, de modo que eles estaro sempre apontados para
dois sentidos possveis, dentro de uma mesma direo. Assim, a fora do sinal
magntico potencializada. Ou seja, partculas alongadas experimentam uma
maior fora quando comparadas s partculas esfricas de mesmo volume.
Rebolledo e colaboradores29 citaram ainda algumas outras situaes em
que
se
espera um comportamento diferenciado entre nanopartculas
anisotrpicas e isotrpicas, em meio biolgico. So elas: em aplicaes de

imagens por ressonncia magntica e tratamento de cncer por hipertermia,
em que se esperam diferenas nos tempos de relaxao; em sistemas
transportadores de drogas e de genes, nos quais a vetorizao magntica
tende a ser favorecida, visto que o gene tambm tem forma anisotrpica.
2.2.3. TOXICIDADE
Apesar do nmero de publicaes sobre materiais nanoparticulados ter
crescido significativamente nos ltimos anos, o foco da maior parte delas est
na sntese e desenvolvimento de novos materiais e menos de 1% tratam dos
22
seus impactos biolgicos.30 Uma vez que as aplicaes biomdicas de

nanopartculas magnticas envolvem o uso em humanos e animais, faz-se
necessria a avaliao da toxicidade desses sistemas.
Um dos paradigmas para o uso de nanopartculas in vivo a toxicidade
derivada da produo de excesso de espcies de oxignio reativo (ROS).30,31,32
Acredita-se que as nanopartculas magnticas de xido de ferro catalisam a
gerao de ROS por meio da reao de Fenton:32
H2O2 + Fe2+
Fe3+ + OH- + OH*
(Eq. Qum. 1)
ROS so fisiologicamente necessrias e, em nveis moderados,

desempenham papis especficos no organismo. Entretanto, o excesso dessas
espcies um indicativo de estresse oxidativo e pode danificar as clulas pela
peroxidao de lipdeos, alterao de protenas, ruptura do DNA, interferncia
em funes de sinalizao e modulao da transcrio gnica.30
Os mtodos de anlise in vitro so importantes no estudo da toxicidade
de materiais nanoparticulados porque tm baixo custo e geram resultados
rapidamente e com boa reprodutibilidade, sem o uso de animais.30 A interao
desses sistemas com o sistema biolgico in vivo dinmica e complexa, de
maneira que os testes in vivo so indispensveis em momentos posteriores aos
testes in vitro, com carter preliminar.
2.3. Qumica de Superfcie e Biocompatibilidade

O recobrimento da superfcie das nanopartculas uma estratgia
utilizada para reduzir ou eliminar alguns comportamentos indesejveis nas
aplicaes biomdicas. O seu intuito aumentar a biocompatibilidade das
nanopartculas. Eles so utilizados, dentre outras finalidades, para estabilizar
as partculas e prevenir a aglomerao; retardar internalizao celular das
nanopartculas ou facilitar, dependendo dos objetivos do seu uso; modificar a
carga ou a composio da superfcie, influenciando a sua biodistribuio e a
gerao de ROS; prevenir a sua dissoluo e a liberao de ons txicos.
23
Muitos grupos de materiais tm sido utilizados para modificar a qumica de

superfcie de nanopartculas magnticas, visando aplicaes biomdicas:
Polmeros biocompatveis: dextrana, amido, quitosana, polietileno glicol,

polisteres alifticos derivados de cidos ltico e gliclico;
Surfactantes orgnicos: oleato de sdio, dodecilamina;
Metais: ouro;
xidos inorgnicos: slica;
Molculas
estruturas
bioativas:
lipossomos,
peptdeos,
ligante/receptor.
2.4. Aplicaes Biomdicas

As
nanopartculas
magnticas
so
aplicadas
com
finalidades
teraputicas e diagnsticas em biomedicina, sendo que vrios sistemas tm

sido desenvolvidos para integrar as duas funes, o que deu origem ao termo
funo teranstica.17,32 Dentre as aplicaes teraputicas, iremos nos
concentrar nos sistemas de carreamento de drogas e no tratamento contra o
cncer por hipertemia.
2.4.1. SISTEMA DE CARREAMENTO DE DROGAS
As maiores desvantagens do tratamento convencional contra o cncer
com quimioterpicos so os
efeitos
adversos
provenientes
da no-
especificidade desse tratamento. Uma vez que a via de administrao dos

agentes teraputicos intravenosa, a sua distribuio sistmica e a natureza
no-especfica dessas drogas leva, portanto, ao ataque no somente de
clulas tumorais, que so os alvos primrios, como tambm de clulas normais
e saudveis, resultando nos to conhecidos efeitos adversos da quimioterapia.
Os estudos de sistemas magnticos nanoparticulados para esse fim se
baseiam no potencial de reduo dos efeitos adversos do tratamento com
agentes quimioterpicos convencionais pela reduo da sua distribuio
sistmica, bem como pela possibilidade de administrao de doses menores,
24
porm mais acuradas dos agentes teraputicos, visto que sero liberadas
diretamente e somente no alvo.
Os primeiros estudos do uso de micro e nanopartculas magnticas
como carreadores de drogas para alvos especficos no corpo datam do final da
dcada de 70.2,33,34 Os autores desses estudos desenvolveram e testaram in
vivo micro e nanopartculas magnticas s quais agentes teraputicos podem
se ligar. Desde ento, vrios grupos tm realizado pesquisas visando ao
desenvolvimento e s aplicaes biomdicas de sistemas magnticos
nanoparticulados.21,35,36,37
Esses sistemas, cujos ncleos so nanopartculas magnticas s quais,
de modo resumido, esto ligadas drogas, so, em geral, administrados por via
intravascular e transportados pelo fluxo sanguneo. O diferencial desse
tratamento a especificidade advinda da aplicao de um campo magntico
externo, usado para guiar e reter os sistemas magnticos em um alvo
especfico (Figura 16). Esses sistemas podem, alternativamente, ser injetados
diretamente na rea de interesse. S aps alcanarem e se concentrarem no
alvo, as drogas so liberadas, ou pela atividade enzimtica ou por mudanas
nas condies fisiolgicas, levando a uma maior absoro dos frmacos pelas
clulas-alvo. Dessa forma, doses menores de droga podem ser administradas,
sem sobrecarregar o organismo com as doses massivas utilizadas na
quimioterapia convencional.
Tecido
Sistemas
Sistemas
magnticos
magnticos
Tecido
Superfcie do
corpo
Vaso sanguneo
Alvo
Magneto
Figura 16. Corte transversal do funcionamento de um sistema magntico hipottico de

veiculao de drogas.
13
25
Os princpios fsicos que fundamentam a disperso das nanopartculas

magnticas in vivo baseiam-se na fora exercida por um gradiente de campo
magntico externo sobre uma nanopartcula superparamagntica, de acordo
com a Equao 8:13
@A = #A D% 2 E
(

(Equao 8)
onde, @A a fora magntica; #A o volume da partcula; = m - w a
susceptibilidade magntica efetiva da partcula em relao gua; % a

induo magntica; e ( a permeabilidade do espao livre. Assim, os
sistemas magnticos so separados da soluo circundante por meio de sua
imobilizao pela fora magntica @A ao passarem por uma regio onde existe
uma gradiente de campo magntico. Essa fora deve superar a fora de

resistncia hidrodinmica, @2 , atuando na partcula magntica na soluo
fluente, ou seja, @A > @2 , para que haja disperso (Equao 9):13
@2 = 6"GA H
(Equao 9)
na qual, a viscosidade do meio circundante da clula; GA o raio da

partcula magntica; e H = HA HI a diferena entre as velocidades dos
meios de diferentes viscosidades (da clula e da gua).5
Widder e colaboradores38 foram os primeiros a utilizar carreadores

magnticos para levar drogas citotxicas (doxorrubicina) a sarcomas
implantados na cauda de ratos. Eles conseguiram que 77% dos animais aos
quais a droga foi administrada por sistemas magnticos tivessem remisso
total do sarcoma com apenas uma sesso de terapia, ao passo que nenhuma
remisso ou regresso foi observada nos ratos tratados com sistemas nomagnticos.
Lbbe e colaboradores39 reportaram, em 1996, o primeiro experimento
clnico realizado em humanos. A droga epirrubicina, ligada a carreadores
magnticos, foi administrada a pacientes que apresentavam diferentes tipos de
cncer em estgio avanado. Eles j haviam sido tratados por quimioterpicos
26
convencionais, porm sem resultados satisfatrios. Os autores concluram que

o tratamento pareceu ser seguro, mas que ajustes necessitavam ser feitos
para, dentre outras coisas, torn-lo mais efetivo.
Os sistemas magnticos nanoparticulados podem carrear, alm de
drogas, genes, na chamada terapia gnica: o tratamento de doenas baseado
na transfeco de material gentico. A transfeco mediada por nanopartculas
magnticas, chamada de magnetofeco, foi demonstrada pela primeira vez, in
vitro, em 2000, por pesquisadores da Universidade da Flrida,40 com resultados
promissores, visto que aumenta a especificidade e eficincia da transfeco.
Desde ento, tem sido estudada para a retificao de desordens genticas,
tratamentos contra cnceres, infeces virais ou para a produo de agentes
que possam estimular o sistema imune.41,42,43
2.4.2. HIPERTERMIA
Outro procedimento teraputico utilizado no tratamento contra o cncer
a hipertermia induzida. Ela se baseia no aumento da temperatura de uma
determinada regio do corpo que esteja afetada por uma neoplasia para 41
46 C,3,44 , preferencialmente 42 44 C,17,45 visando causar a lise de suas
clulas tumorais, visto que elas so, em geral, mais sensveis ao calor do que
clulas normais. Esse procedimento , frequentemente, utilizado em conjunto
com outros procedimentos teraputicos, como quimioterapia e radioterapia,46
sobretudo por potencializar a ao dos agentes teraputicos utilizados nesses
tratamentos, sem aumentar o seu potencial citotxico.47
A
hipertermia
radiofrequncia,
pode
ser
microondas,
alcanada
ultrassom,
pela
aplicao
48
infravermelho
ou
de
laser,
implantes
ferromagnticos.49 Um dos obstculos desses mtodos, entretanto, a

dificuldade em aquecer uniforme e especificamente a regio do tumor
temperatura pretendida, sem, contudo, danificar as clulas normais vizinhas.
As nanopartculas magnticas surgem, ento, como agentes de hipertermia
alternativos para aquecer especificamente o alvo e assim, preservar os tecidos
saudveis. Esse mtodo se baseia no fato de que partculas magnticas,
quando submetidas a um campo magntico alternado (CMA), so aquecidas
27
por processos de perda magntica. Nesses casos, o tratamento chamado de

magnetohipertermia (MHT) ou magnetotermocitlise.
Essas perdas magnticas ocorrem durante o processo de reverso da
magnetizao no sistema das partculas magnticas e podem ocorrer por
diferentes mecanismos, mostrados na Figura 17: histerese, em materiais de
multidomnios magnticos; e relaxao browniana (Equao 4) e de NelBrown (Equao 5), em materiais superparamagnticos de monodomnio. Em
comparao s perdas magnticas, a circulao de correntes parasitas
induzidas em partculas magnticas pequenas desprezvel.
Fenmeno de magnetizao reversa

Nanopartculas FM
Relaxao de Nel
Relaxao de Brown
Energia
Mecanismo de perda por histerese
Nanopartculas SPM
Orientao do momento magntico
Figura 17. Fenmeno da reverso da magnetizao para gerao de calor sob o efeito de um
CMA (H0, f). (esquerda) Mecanismo de gerao de calor por perda por histerese para
nanopartculas ferri e ferromagnticas. Mecanismo de gerao de calor por relaxao de
(centro) Nel e (direita) Brown para nanopartculas superparamagnticas.
10
Para induzir a hipertermia especificamente no alvo, as nanopartculas

magnticas so guiadas e retidas na regio tumoral por um gradiente de
campo magntico externo (Figura 16), aps a administrao, como descrito na
seo anterior. Aplica-se, ento um CMA, de fora e frequncia tal, que a
magnetizao das partculas seja continuamente revertida, gerando calor
necessrio para causar a lise das clulas tumorais, que liberado para as
clulas vizinhas (Figura 18). Se essa temperatura puder ser mantida na faixa
preferencial de 42 44C por 30 min ou mais,10,13 o cncer pode ser destrudo.
A minimizao dos danos aos tecidos normais circunvizinhos faz da MHT uma
tcnica promissora para o tratamento de cnceres diversos.3,50,51,52,53,54
28
Acmulo das nanopartculas no tumor
Clulas saudveis
Clulas tumorais
Aquecimento localizado pelas nanopartculas
CMA aplicado
Figura 18. Princpios da MHT.
vasta
possibilidade
de
17
biofuncionalizao
da
superfcie
das
nanopartculas pode ser explorada para afinar a sua capacidade de

reconhecimento qumico e, portanto, a sua especificidade pelas clulas
tumorais.3,17 Quanto maior for a especificidade das nanopartculas por essas
clulas, menor o aquecimento das clulas normais e, portanto, os efeitos
colaterais. O transporte das nanopartculas via sistema vascular, permite ainda
que o tratamento por MHT possa ser realizado em tecidos mais profundos, que
no poderiam ser tratados por hipertermia de outra maneira.
Gilchrist e colaboradores 1 foram os primeiros a propor o uso de
nanopartculas de xido de ferro no tratamento contra o cncer por hipertermia
em 1957. Os estudos para aplicao dessa tcnica em seres humanos,
entretanto, se iniciaram com Jordan e colaboradores55 apenas em 2001,
quando eles apresentaram um novo sistema de terapia com campo magntico
alternado para aplicao clnica da MHT utilizando fluidos magnticos, visando
aplicaes no tratamento de glioblastomas e carcinoma de prstata. Esses
estudos culminaram com o estudo de Maier-Hauff e colaboradores,56 em 2007,
que reportou o primeiro caso da aplicao de nanopartculas magnticas para o
tratamento de cncer por hipertermia em humanos.
29
A pesquisa envolveu 14 pacientes com glioblastoma multiforme, que

foram tratados com uma combinao de radioterapia e sesses de MHT. As
nanopartculas magnticas de xido de ferro foram injetadas em regies de
tumor, detectadas por imagens de ressonncia magntica. Cada tumor recebeu
de 0,1 a 0,7 mL do fluido magntico e foram, ento, expostos a um campo
magntico alternado de 100 kHz e 3,8 a 13,5 kA m-1. Esse estudo mostrou que
essas nanopartculas podem ser utilizadas com segurana para os pacientes
no tratamento desse tipo de tumor cerebral, sendo depositadas nos alvos
planejados e l mantidas por semanas; e que as temperaturas de hipertermia
podem ser atingidas. Contudo, no foram feitas consideraes acerca da
sobrevivncia dos pacientes e do controle do tumor.
2.5. As Nanopartculas Magnticas

Nanopartculas de xido de ferro, em especial a magnetita (Fe3O4) e a
maghemita (-Fe2O3), so as nanopartculas magnticas mais usadas em
aplicaes biomdicas, devido s suas propriedades magnticas e sua
toxicidade relativamente baixa no corpo humano. A Fe3O4 foi aprovada pela
Food and Drug Administration (FDA) para o uso como agente de contraste em
imagem por ressonncia magntica.57
2.5.1. ESTRUTURA CRISTALINA DA MAGNETITA E MAGHEMITA
A estrutura cristalina da magnetita pode ser descrita em termos da
estrutura do espinlio (MgAl2O4), classificada como empacotamento compacto
cbico (ecc) , esquematizado na Figura 19.
30
58
Figura 19. Estrutura de empacotamento compacto cbico (ecc).
Nas estruturas ecc, os interstcios, ou stios, correspondem a 26% do

volume total da amostra e esto relacionados ao espao no ocupado do
retculo cristalino. Esses stios podem ser tetradricos ou octadricos, como
mostra a Figura 20a.
Figura 20. (a) Stios tetradricos e octadricos em um retculo de empacotamento compacto;

59
(b) stio tetradrico; e (c) stio octadrico.
Um stio octadrico origina-se do interstcio formado pela sobreposio

de dois tringulos planares de esferas em direes opostas. Dessa forma, ele
delimitado por seis esferas, com seis centros nos vrtices de um octaedro
(Figura 20c). J o stio tetradrico, formado pela sobreposio de uma nica
esfera sobre a depresso formada entre um tringulo planar de esferas. Ele ,
portanto, delimitado por quatro esferas arranjadas em um tetraedro que pode
ser normal ou invertido, dependendo da orientao do pice do tetraedro
31
(Figura 20b). Em muitos slidos, esses stios so ocupados por outros tomos,
sendo que os stios octadricos podem acomodar esferas de raio no superior
a 0,414r e os stios tetradricos, esferas de raio no superior a 0,225r, onde r
a relao entre os raios dos nions.8,59
As estruturas relacionadas ao espinlio podem ser dadas pela frmula
geral AB2O4 e consistem em um arranjo cbico de face centrada (cfc) dos ons
O2-, no qual os ons A habitam em um oitavo dos stios tetradricos e os ons B,
em metade dos stios octadricos (Figura 21). Ela geralmente representada
por A[B2]O4, com o colchete identificando a espcie localizada nos interstcios
octadricos.8
Figura 21. Um segmento da clula unitria de espinlio.
58
A estrutura da magnetita do tipo espinlio invertido, no qual a

distribuio geral dos ons B[AB]O4 (Figura 22). Assim, os stios octadricos
so ocupados por A (Fe2+) e B (Fe3+), enquanto os stios tetradricos so
ocupados por B (Fe3+). Sua clula unitria possui 32 ons O2- arranjados em
ecc, com arestas de 0,839 nm, gerando 64 stios tetradricos, dos quais 8
esto ocupados por Fe3+, e 32 stios octadricos, dos quais 16 esto ocupados
por Fe2+ ou Fe3+.6,8,59
32
Figura 22. Estrutura cristalina da magnetita.
maghemita
possui
estrutura
cristalina
similar
magnetita,
diferenciando-se pela ausncia (ou diminuio) de Fe2+ no retculo cristalino,

gerando vacncias ou lacunas. Idealmente, h apenas ctions Fe3+ ocupando
aleatoriamente 8 dos stios tetradricos e 16 dos stios octadricos gerados
pelo arranjo em ecc dos ons O2-. A clula unitria possui arestas de 0,834 nm
e composta por 32 ons O2-; 21,33 ctions Fe3+; e 2,33 vacncias, localizadas
nos stios octadricos.6
2.5.2. PROPRIEDADES MAGNTICAS DA MAGNETITA E MAGHEMITA
A magnetita ideal ferrimagntica temperatura ambiente e tem uma TC
de 577 C. Os stios tetradricos e octadricos em sua estrutura originam
subredes magnticas. Abaixo da TC, os spins dos ons nos stios tetradricos e
octadricos so antiparalelos. Alm disso, na clula unitria desse xido, 8 dos
64 stios da subrede tetradrica esto ocupados por Fe3+, e 16 dos 32 stios
octadricos esto ocupados por Fe2+ou Fe3+, podendo, o arranjo de spin ser
descrito como Fe3+[Fe3+Fe2+]O4, no qual os ons entre colchetes se localizam
nos stios octadricos. A origem da magnetizao se d, portanto, pela
diferena numrica de ons nas duas subredes e pela diferena de magnitude
dos momentos magnticos dos ons Fe2+ e Fe3+. Nessa ferrita, o eixo de fcil
magnetizao o (111).6
Tal qual a magnetita, a maghemita ferrimagntica temperatura
ambiente. A TC desse xido de difcil determinao, pois ele instvel em
33
temperaturas elevadas e se transforma em hematita (-Fe2O3), sua forma

polimrfica, acima de 440 C. Contudo, ela foi estimada entre 547 e 713 C.
2.5.3. NANOPARTCULAS MAGNTICAS ALONGADAS
2.5.3.1.
Mtodos de Sntese de Nanopartculas Alongadas
Uma das metodologias utilizadas para a sntese das nanopartculas

alongadas a hidrlise forada de sais de ferro na presena de certos nions
que influenciam a forma das partculas. Nesse procedimento, aproveita-se a
vantagem de que ctions hidratados de ferro so desprotonados em solues
aquosas a temperaturas prximas de 100 C. Dois dos nions utilizados para
essa finalidade so o fosfato (PO43-) e o sulfato (SO42-). Por meio de sua
adsoro especfica s faces da hematita paralelas ao eixo c, eles retardam o
crescimento do cristal na direo normal a esse eixo, originando partculas
alongadas.60
Ozaki e colaboradores61 foram os primeiros a realizar essa sntese, de
maneira que muitos estudos posteriores foram desenvolvidos, utilizando a
mesma metodologia para a obteno de partculas de hematita nesse
formato.62,63,64,65,66 Eles desenvolveram dois procedimentos para a sntese de
nanopartculas alongadas de hematita. No primeiro mtodo, solues aquosas
ou etanol/gua contendo cloreto de ferro (FeCl3) e fosfato ou hipofosfito de
sdio (NaH2PO4 ou NaH2PO2, respectivamente) foram envelhecidas a 100 C
por diferentes perodos de tempo. O segundo mtodo consistiu em,
primeiramente, precipitar hidrxido de ferro pela adio de hidrxido de sdio
(NaOH) a uma soluo de nitrato de ferro (Fe(NO3)3), com subseqente adio
de cido clordrico (HCl) e NaH2PO4, seguido por envelhecimento a 100 C. Os
autores observaram que a adio de pequenas quantidades de ons fosfato ou
fosfito levou a alterao na forma das partculas resultantes, tornando-as
alongadas. Um ano depois, os autores publicaram um estudo no qual
obtiveram maghemita a partir da hematita sintetizada, por tratamento trmico.
As partculas obtidas mantiveram o formato das precursoras (Figura 23).67
34
(a)
(b)
Figura 23. Micrografia de transmisso eletrnica de partculas alongadas de (a) hematita,

preparadas em presena de ons fosfato; e (b) maghemita, preparadas a partir de tratamento
trmico da hematita obtida.
67
Alm dessa metodologia, Sugimoto e colaboradores68 prepararam

partculas alongadas de hematita, utilizando o mtodo sol-gel, com adio de
PO43- e SO42-. Ocaa e colaboradores69 obtiveram nanopartculas de hematita
pela precipitao de perclorato de ferro (III) (Fe(ClO4)3), na presena de ureia
(CO(NH2)2) e PO43-. sabido que a ureia libera ons hidrxido, quando
aquecida sua temperatura de decomposio em soluo aquosa,
alcalinizando o meio.70
Compostos orgnicos tambm foram utilizados para conferir a forma
elipsoidal a essas partculas,71 tais como citratos, oxalatos,72 glicina 73 e
asparagina.74
As maiores dificuldades encontradas para a sntese de nanopartculas
so o controle de sua forma e disperso.
35
Captulo
3
Parte Experimental
36
3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Materiais
Acetona, C3H6O, VETEC Qumica Fina LTDA;
cido clordrico, HCl, P.A., VETEC Qumica Fina LTDA;
cido fosfrico, H3PO4, 85%, P.A, VETEC Qumica Fina LTDA;
cido sulfrico, H2SO4, 95/97%, P.A., F. Maia S/A Ind.;
gua Milli-Q;
Dicromato de potssio, K2Cr2O7, P.A., Quimiobrs Indstrias Qumicas

Limitada;
Difenilamina, (C6H5)2NH, pureza 99%, Aldrich;
Cloreto de mercrio (II), HgCl2, Merck;
Cloreto estanoso dihidratado, P.A., SnCl2.2H2O, VETEC Qumica Fina

LTDA;
Cloreto frrico hexahidratado, FeCl3.6H2O, P.A., VETEC - Qumica Fina

LTDA;
Cloreto ferroso tetrahidratdo, FeCl2.4H2O, Merck;
Hidrxido de amnia, NH4OH, P.A., InLab.
Sulfato ferroso hexahidratado, FeSO4.7H2O, Carlo Erba do Brasil;
Sulfato frrico, Fe2(SO4)3.nH2O, Carlo Erba do Brasil;
Tripolifosfato de sdio, Na5P3O10, Sigma-Aldrich Co..
3.2. Metodologia
3.2.1. SNTESE DAS NANOPARTCULAS
A sntese das nanopartculas foi realizada por coprecipitao em meio
alcalino de ons Fe2+ e Fe3+ em soluo aquosa a temperatura de ebulio, sob
refluxo e agitao vigorosa. Alguns parmetros foram variados com o objetivo
de estudar as suas influncias nas partculas resultantes e, assim, alcanar o
sistema mais adequado para os fins desse estudo. Eles foram: tempo de
reao, natureza dos contra-ons, proporo entre Fe(II) e Fe(III) e natureza da
37
base utilizada na alcalinizao do meio, dando origem ao primeiro grupo de

nanopartcula sintetizadas.
1. Tempo de reao: utilizando 1,5 mmol de FeSO4.7H2O, 3 mmol de
FeCl3.6H2O e 20 mmol de ureia, para a alcalinizao do meio, os tempos
de reao das nanopartculas estudados foram:
NP1A: 1 hora;
NP1B: 2 horas e trinta minutos;
NP1C: 4 horas;
NP1D: 6 horas;
NP1E: 8 horas;
NP1F: 12 horas.
Diante dos resultados satisfatrios obtidos para a amostra NP1D, as

prximas snteses foram realizadas com seis horas de durao e, essa
amostra, inserida em cada um dos grupos de snteses, para fins de
comparao.
2. Natureza dos contra-ons: utilizando 1,5 mmol de Fe(II), 3 mmol de
Fe(III) e 20 mmol de ureia, para a alcalinizao do meio, em uma sntese
com seis horas de durao, variou-se a natureza dos contra-ons da
seguinte maneira:
NP2A: FeCl2.4H2O e FeCl3.6H2O;
NP2B: FeSO4.7H2O e Fe2(SO4)3.9H2O;
NP2C: FeCl2.4H2O e Fe2(SO4)3.9H2O.
3. Proporo entre Fe(II) e Fe(III): utilizando FeSO4.7H2O, FeCl3.6H2O

como reagentes e 20 mmol de ureia, para a alcalinizao do meio, em
uma sntese com seis horas de durao, variou-se a proporo entre
Fe(II) e Fe(III):
NP3A: 1,5 mmol de FeSO4.7H2O e 1,5 mmol de FeCl3.6H2O;
NP3B: 3 mmol de FeSO4.7H2O e 1,5 mmol de FeCl3.6H2O.
38
4. Natureza da base utilizada na alcalinizao do meio: utilizando 1,5 mmol

de FeSO4.7H2O, 3 mmol de FeCl3.6H2O, em uma sntese com seis
horas de durao, a natureza da base utilizada para a alcalinizao do
meio foi variada, mantendo-se a sua concentrao relativa:
NP4A: 40 mmol de NH4OH.
A Tabela 1 resume as amostras sintetizadas no primeiro grupo:

Tabela 1. Condies de sntese das nanopartculas do primeiro grupo.
Amostra
NP1A
NP1B
NP1C
NP1D
NP1E
NP1F
NP2A
NP2B
NP2C
NP3A
NP3B
NP4A
Tempo de
Natureza dos
Proporo entre
Natureza da
reao (hora)
contra-ons
2SO4
2:30
2SO4
SO42-
2SO4
2SO4
12
SO42-
6
6
Fe(II):Fe(III)
base
e Cl
1:2
Ureia
e Cl
1:2
Ureia
e Cl
1:2
Ureia
e Cl
1:2
Ureia
e Cl
1:2
Ureia
e Cl
1:2
Ureia
1:2
Ureia
2SO4
1:2
Ureia
Cl e Cl
2SO4
-
2SO4
Cl e
SO42-
2SO4
2SO4
1:2
Ureia
e Cl
1:1
Ureia
e Cl
2:1
Ureia
e Cl
1:2
NH4OH
Todas as amostras foram resfriadas naturalmente, lavadas com gua

Milli-Q at pH neutro, centrifugadas e secas em estufa a 70 C.
Aps a caracterizao desse grupo de nanopartculas, a sntese na qual
se variou a natureza da base utilizada na alcalinizao do meio (NP4A), foi
selecionada para ser investigada paralelamente aos objetivos desse estudo,
devido aos resultados satisfatrios obtidos. Assim, alm da sntese do primeiro
grupo de nanopartculas, que visou obteno de nanopartculas magnticas
alongadas de xido de ferro, foi sintetizado um segundo grupo de
nanopartculas de xido de ferro, nesse caso esfricas, utilizando NH4OH como
base na alcalinizao do meio.
Para as snteses das nanopartculas do segundo grupo, foram
adicionados 40 mmol de NH4OH a uma soluo aquosa contendo 1,5 mmol de
39
Fe2SO4.7H2O e 3,0 mmol de FeCl3.6H2O, lentamente e sob agitao suave

temperatura ambiente. A mistura resultante foi aquecida a temperatura de
ebulio, sob refluxo e agitao vigorosa. A fim de se alcanar o sistema mais
adequado para aplicaes biomdicas, o tempo de reao foi variado:
NPS0: 0 hora (a mistura no foi aquecida);
NPS1: 1 hora;
NPS3: 3 horas;
NPS6: 6 horas;
NPS9: 9 horas.
A Tabela 2 resume as amostras sintetizadas no segundo grupo:

Tabela 2. Condies de sntese das nanopartculas do segundo grupo.
Amostra
NPS0
NPS1
NPS3
NPS6
NPS9
Tempo de
Natureza dos
Proporo entre
Natureza da
reao (hora)
contra-ons
2SO4
2SO4
2SO4
2SO4
SO42-
Fe(II):Fe(III)
base
e Cl
1:2
NH4OH
e Cl
1:2
NH4OH
e Cl
1:2
NH4OH
e Cl
1:2
NH4OH
e Cl
1:2
NH4OH
Todas as amostras foram resfriadas naturalmente, lavadas com gua

Milli-Q at pH neutro, centrifugadas e secas em estufa a 70 C.
3.2.2. CARACTERIZAO DOS MATERIAIS
As amostras sintetizadas foram caracterizadas pelas tcnicas descritas a
seguir.
3.2.2.1.
Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier

(FTIR)
Os espectros de FTIR das amostras sintetizadas e dos reagentes

utilizados foram obtidos em um espectrmetro da Nicolet, Modelo 6700, com
128 varreduras, em uma resoluo de 4 cm-1. Todos os materiais preparados
40
foram diludos em KBr, com 1% em massa das amostras (1 mg da amostra

para 100 mg de KBr). Os sofwares Origin 6.0 e OriginPro 8 foram utilizados
para a obteno das figuras apresentadas nesse estudo.
3.2.2.2.
Espectroscopia Raman
Os espectros Raman foram obtidos utilizando um microscpio inVia

Raman da marca Renishaw, equipado com microscpio ptico Leica com
objetiva de 50, na faixa de 100 cm-1 3200 cm-1. Um laser de He-Ne (632,8
nm) foi utilizado para excitao das amostras. A resoluo espectral foi de 5
cm-1. O sofware OriginPro 8 foi utilizado para a obteno das figuras
apresentadas nesse estudo.
3.2.2.3.
Difrao de Raios X (DRX)
Os difratogramas das amostras foram obtidos em um difratmetro de p

da Bruker, modelo D8 Focus, com radiao CuK = 1,5406 a 40 kV e 30 mA.
A varredura foi realizada a 0,5 min-1 e os valores de 2 foram analisados na
regio de 20 a 70.
A Lei de Bragg (Equao 10) foi utilizada para o clculo das distncias
interplanares:
J = 2K => ?
(Equao 10)
onde J o comprimento de onda da radiao incidente, K a distncia
interplanar e ? o ngulo de incidncia da radiao.
Uma vez que o objetivo da sntese a obteno de magnetita e
maghemita, a equao para o clculo de K em sistemas cbicos (Equao 11)

foi utilizada para a indexao dos picos, por meio da comparao entre os
valores experimentais de K e os seus respectivos ndices hkl do banco de

dados PDF. Os ajustes dos picos dos difratogramas foram feitos com o
software Origin 6.0, que, juntamente ao OriginPro 8, foi usado para a obteno
das figuras apresentadas nesse estudo.
41
KLMN = O + $ + Q
(Equao 11)
Essa equao tambm foi usada para calcular os parmetros de cela

das nanopartculas de magnetita e maghemita sintetizadas.
3.2.2.4.
Medidas de Propriedades Magnticas
As propriedades magnticas das amostras foram obtidas a temperatura

ambiente e em regime quase-esttico, por meio de um magnetmetro de
amostra vibrante (Vibrating Sample Magnetometer, VSM), modelo EV9,
fabricado pela empresa ADE-MAGNETICS (Figura 24), na Universidade
Federal de Gois (UFG). A preciso de medidas desse VSM de 10-6 emu. As
bobinas so resfriadas com gua e podem atingir um campo magntico de at
2 T.
Figura 24. Diagrama do VSM.
Os valores de MS, MR e HC foram obtidos graficamente utilizando o

software OriginPro 8, que, juntamente ao Origin 6.0, foi utilizado para a
obteno das figuras apresentadas nesse estudo.
3.2.2.5.
Microscopia de Fora Atmica (MFA)
As imagens por MFA foram obtidas utilizando-se um microscpio de

fora atmica Shimadzu SPM-9600, na Embrapa Recursos Genticos e
42
Biotecnologia, operado em modo dinmico, obtendo-se sinal de aquisio de

topografia e fase, simultaneamente. A ponteira utilizada foi a PPP-NCHR da
NanosensorsTM, recoberta com Al, com raio de curvatura < 10 nm, constante de
mola de 42 N m-1 e frequncia de ressonncia de, aproximadamente, 330 kHz.
Para preparao das amostras, as nanopartculas foram dispersas em H2O
Milli-Q, com auxlio de um banho de ultrassom, depositadas em substrato de
muscovita e secas a temperatura ambiente.
Os softwares utilizados para o processamento das imagens foram o
SPM 9600 off-line e o WSxM verso 5.0. Foi realizada a correo de plano
automtica 2D e o ajuste horizontal das imagens.
3.2.2.6.
Microscopia de Transmisso (MET)
As imagens por MET foram obtidas, utilizando-se um microscpio de

transmisso JEOL 1011, operando a 80 kV, no Instituto de Cincias Biolgicas
da Universidade de Braslia (UnB). Para preparao das amostras, as
nanopartculas foram dispersas em H2O Milli-Q, com auxlio de um banho de
ultrassom, depositadas em tela de cobre de 300 malhas cobertas com Formvar
0,4% e secas a temperatura ambiente, por 24 h em papel filtro.
As partculas foram medidas, utilizando o software ImageJ, verso 1.43.
A partir desses resultados, os histogramas de distribuio de dimenses foram
feitos com o auxlio do software OriginPro 8, utilizando a medio de 100
partculas.
3.2.2.7.
Determinao de Fe(II) e Ferro Total pelo Mtodo de

Dicromatometria
A determinao de Fe(II) e ferro total foi realizada pelo mtodo da

Dicromatometria. Nesse mtodo, o Fe(II) dosado, de acordo com a reao de
xido-reduo, descrita pela Equao Qumica 2:
Cr2O72- + 6Fe2+ + 14H+
6Fe3+ + 2Cr3+ + 7H2O
(Eq. Qum. 2)
43
Para a determinao de ferro total, Fe(II) + Fe(III), as amostras foram

abertas com cido clordrico (HCl) e todo o ferro foi reduzido a Fe(II), com o
auxlio de uma soluo de cloreto estanoso (SnCl2). O excesso do Sn(II) em
soluo, um interferente do mtodo, foi oxidado a Sn(IV), utilizando uma
soluo de cloreto de mercrio (II) (HgCl2), que no interfere no mtodo. Uma
soluo de cido sulfrico (H2SO4) e fosfrico (H3PO4) 1:1 foi adicionada ao
sistema, a fim de se adequar a concentrao hidrogeninica e regular o
potencial do sistema Fe(II)/Fe(III), para facilitar a visualizao no ponto de
viragem do indicador difenilamina. Feito isso, a amostra foi titulada com uma
soluo padro de dicromato de potssio (K2Cr2O7). A determinao de Fe(II)
foi feita pelo mesmo processo, porm sem a adio de SnCl2 e HgCl2. A
concentrao de Fe(III) foi calculada pela diferena ferro total Fe(II).
3.2.2.8.
Caracterizao das Propriedades Texturais
As propriedades texturais da amostra NP1D foram caracterizadas em

um equipamento Particle Characterization da Quantachrome Instruments,
modelo NOVA 2200e, utilizando o mtodo Brunauer, Emmet e Teller (BET)
com nitrognio como gs de anlise (adsorbato). A anlise foi efetuada sob
vcuo e em baixa temperatura (amostra imersa em N2 lquido), aps a amostra
ter sido seca em vcuo a 100 C.
3.2.2.9.
As
Anlise Termogravimtrica (TG)

curvas
TG
foram
obtidas
em
um
analisador
simultneo
termogravimtrico e termodiferencial DTG-60H da Shimadzu, utilizando cerca

de 5,0 mg de amostra, em cadinho de platina. Os ensaios foram realizados em
atmosfera de nitrognio (30 mL min-1) a uma razo de aquecimento de 10 C
min-1, da temperatura ambiente at 500 C.
44
3.2.3. REALIZAO DE ENSAIOS VOLTADOS PARA APLICAES

BIOMDICAS
Aps a caracterizao das amostras obtidas pelas tcnicas citadas na
seo 3.2.2., foram selecionadas duas amostras (uma de cada grupo), que
apresentaram as propriedades mais coerentes com os objetivos desse estudo,
para realizao de ensaios mais focados em aplicaes biomdicas. Dessa
forma, as amostras NP1D e NPS6 foram selecionadas para as etapas
seguintes.
3.2.3.1.
Magnetohipertermia
Os experimentos de hipertermia foram realizados na UFG, utilizando o

sistema do equipamento comercial de hipertermia da Ambrell, modelo
EasyHeat, que opera em campos de elevada amplitude e de baixa frequncia
de campo magntico alternado (CMA). Nesse estudo, a frequncia utilizada foi
de 300 kHz. Alm disso, a amplitude do CMA foi obtida a partir de medies
utilizando uma sonda de CMA adquirida da AMF Life Systems. Elas variaram
de 169 a 312 Oe. As correntes utilizadas tambm variaram de 53 a 98 A. As
massas das amostras em p utilizadas foram as mesmas (0,0070 0,0002 g).
Um sistema de fibra ptica operando na regio do infravermelho foi usado para
medio da temperatura das amostras.
3.2.3.2.
Funcionalizao da Superfcie das Amostras Selecionadas
Para a realizao dos ensaios de citotoxicidade, foi realizada a

disperso (ou peptizao) das nanopartculas em gua, a fim de se formar uma
suspenso coloidal estvel, por meio da funcionalizao da superfcie das
nanopartculas com um agente promotor de estabilizao: o tripolifosfato de
sdio (TPF). Para tanto, aps a sntese, as amostras foram lavadas com H2O
Milli-Q at o pH 7. Feito isso, o sobrenadante foi descartado e o pH foi ajustado
para 3,5, utilizando-se uma soluo de HCl 0,1 M. Foram adicionados, ento, 4
mL de uma soluo de TPF 0,15 M e a mistura foi mantida sob agitao por 20
h. Terminada a agitao, o pH da mistura foi ajustado para 8, utilizando uma
45
soluo de HCl 0,1 M. A mistura foi decantada e o sobrenadante, descartado.

Posteriormente, adicionaram-se 10 mL de acetona mistura que foi agitada por
10 m, decantada e o sobrenadante descartado. Essa etapa foi repetida. A
mistura foi mantida sob agitao, adicionando-se o mnimo de gua, at a
evaporao total da acetona e formao da suspenso coloidal.
Os experimentos descritos a seguir foram realizados com as suspenses
coloidais das nanopartculas das amostras NP1D e NPS6.
3.2.3.3.
Distribuio do Dimetro Hidrodinmico das Nanopartculas
As medidas de distribuio de dimetro das nanopartculas foram feitas

pela medida do espalhamento dinmico da luz das suspenses. A tcnica
consiste na passagem de um feixe de luz por uma amostra, adicionada a uma
cubeta de plstico e posicionada no aparelho Zetasizer ZS90 (Malvern). O
clculo baseado no espalhamento da luz laser, quando as nanopartculas
passam atravs de um movimento aleatrio pela frente da fonte de luz. O
espalhamento da luz devido a esta sobreposio de partculas confere o seu
tamanho mdio. As anlises foram realizadas em triplicata.
3.2.3.4.
Cultura de Clulas
A linhagem celular imortalizada, derivada de um adenocarcinoma

mamrio murino 4T1, foi utilizada como modelo biolgico para avaliar o
potencial citotxico das suspenses de nanopartculas sobre esta linhagem
celular. A escolha de uma linhagem tumoral se deve ao fato da potencial
aplicao das suspenses de nanopartculas contra tumores malignos, quando
aplicadas na magnetohipertermia. As culturas celulares foram mantidas em
meio de cultura DMEM (GIBCO-BRL), suplementado com soro fetal bovino a
10% e Penicilina / Estreptomicina a 10.000 g/mL (Gibco, USA), na proporo
1 mL do antibitico para cada 100 mL de meio, em pH 7,4. Os frascos de
cultura foram mantidos a 37 C, em atmosfera de 5% de CO2 e 80% de
umidade.
46
3.2.3.5.
Citotoxicidade das Nanopartculas Selecionadas sobre Sistemas

de Culturas Celulares de Mamferos
O potencial de citotoxicidade das nanopartculas NP1D e NPS6 foi

avaliado sobre as clulas 4T1. Para a execuo dos ensaios, 24 h antes dos
tratamentos, clulas 4T1 foram transferidas para placas de cultura de 96 poos,
em uma densidade celular de 104 clulas/200L/poo de cultura. Esse
procedimento visa permitir a adeso das clulas transferidas ao fundo do poo
da placa de cultura. Aps esse perodo inicial, as clulas foram tratadas com
diferentes concentraes das nanopartculas NP1D (0; 8,0 x 1012; 16,0 x 1012;
24,0 x 1012; 32,0 x 1012; 40,0 x 1012 partculas/mL) e NPS6 (0; 4,0 x 1013; 8,0 x
1013; 12,0 x 1013; 16,0 x 1013; 20,0 x 1013 partculas/mL). Cada concentrao
experimental foi aplicada em quatro poos de cultura diferentes (quadruplicata).
Aps 24 h de exposio celular s suspenses de nanopartculas, foi
realizado um ensaio de citotoxicidade pelo mtodo de MTT. Este ensaio de
citotoxicidade um teste colorimtrico, estabelecido por Mosmann,75 que
quantifica a reduo do reagente MTT (brometo de 3(4,5-dimetiltiazol-2il)-2,5difenil-tetrazlio) em um composto conhecido como formazan, pela ao de
desidrogenases mitocondriais. A presena de desidrogenases mitocondriais
ativas um indicativo de viabilidade celular. Os cristais do corante roxo
formazan, formados pela reduo do MTT, so quantificados por tcnicas de
espectrofotometria. Assim, o meio de cultura foi substitudo por um meio
adicionado com soluo estoque de MTT (5 mg/mL) na proporo 20L/180 L
de meio de cultura. Aps 3 h de incubao com o meio de cultura adicionado
com o corante MTT, este meio foi removido e adicionado 200 L de DMSO
para a solubilizao das estruturas celulares. Aps 3 min, os cristais de
formazan foram dissolvidos e a quantificao deste produto foi realizada em
leitora de placa (Espectra M2) em comprimento de onda 600 nm.
47
3.2.3.6.
Visualizao da Alterao da Morfologia Celular aps o

Tratamento com Nanopartculas
Para a avaliao das possveis alteraes morfolgicas, aps o

tratamento com as suspenses de nanopartculas, as clulas 4T1 foram
transferidas para placas de cultura de 6 poos, em uma densidade celular de
105 clulas/2mL de meio/poo de cultura. Aps um perodo de sedimentao
de 24 h, as clulas foram tratadas com supenses de nanopartculas em uma
concentrao de 16,0 x 1012, para a NP1D, e 8,0 x 1013, para a NPS6. Aps 24
h de exposio s suspenses de nanopartculas, as clulas foram
processadas para anlise de microscopia de luz.
48
Captulo
4
Resultados e Discusso
49
4. RESULTADOS E DISCUSSO
Uma das metodologias mais utilizadas para a sntese de nanopartculas
esfricas de magnetita a coprecipitao de Fe(II) e Fe(III) em meio
alcalino.76,77,78,79 Ela pode ser descrita, resumidamente, pela Eq. Qum. 3.78,80
Fe2+ + 2 Fe3+ + 8 OH-
Fe3O4 + 4 H2O
(Eq. Qum. 3)
Os mecanismos relacionados a essa reao envolvem a dissociao de

sais de Fe(III) para a formao de hexaquoons octadricos:
FeCl3 + 6 H2O
[Fe(H2O)6]3+ + 3 Cl-
(Eq. Qum. 4)
O on complexo formado, exceto em pH muito baixo (<1), sofre hidrlises

sucessivas, de acordo com as Eq. Qum. 5 e 6, formando espcies como as
mostradas na Figura 25:
[Fe(H2O)6]3+ + H2O
[Fe(H2O)5(OH)]2+ + H2O
[Fe(H2O)5(OH)]2+ + H3O+ (Eq. Qum. 5)

[Fe(H2O)4(OH)2]+ + H3O+ (Eq. Qum. 6)
Figura 25. Produtos isolados da hidrlise de Fe(III), mostrados nas Eq. Qum. 5 e 6,
respectivamente.8
As hidrlises podem ser potencializadas pela adio de uma base, pelo

aquecimento (hidrlise forada), ou pela diluio da soluo.6 Tais condies
podem levar tambm polimerizao dos ons resultantes da hidrlise do
50
[Fe(H2O)6]3+, devido capacidade dos grupos hidroxila formarem pontes entre

ons metlicos.6,8
Os produtos da polimerizao, tais como dmero [Fe2O(H2O)10]2+ (Figura
26), favorecem reaes hidrolticas adicionais pela disponibilizao de grupos
hidroxos extras, que por sua vez podem formar mais pontes entre os metais,
aumentando a cadeia. Os termos hidroxo e oxo so freqentemente
utilizados para denominar sistemas complexos com pontes M-(OH)-M e M-OM, respectivamente.
3+ 8
Figura 26. Dmero formado a partir dos produtos da hidrlise do [Fe(H2O)6] .
Uma seqncia de reaes de condensao hidroltica, chamadas de

olaes ou oxolaes, dependendo do tipo de pontes formadas, levam estes
hidroxopolmeros coloidais a precipitados, por mecanismos que envolvem
processos de nucleao e crescimento cristalino. Nessa etapa, podem ser
formados subprodutos da reao, como hidrxidos e xidos amorfos no
desejveis.6
No caso da formao da magnetita, ocorre a coprecipitao de Fe(II) e
Fe(III), com formao de cristal misto. Estes mesmos ons, que podem estar
coordenados octaedricamente ou tetraedricamente por molculas de gua,
formam entre si pontes hidroxo e oxo medida que o pH alterado, de forma
que, em condies limtrofes, uma estrutura do tipo espinlio pode surgir.
A proposta de sntese das nanopartculas magnticas do primeiro grupo
foi realizada com o intuito de solucionar a questo dos gradientes locais de pH,
originados pela adio de bases fortes ao meio. Isso influencia diretamente o
produto resultante nesse tipo de sntese, pois a formao dos cristais muito
rpida, sendo complexo o controle das caractersticas morfolgicas. Algumas
tentativas j foram realizadas nesse sentido, como a utilizao de bases mais
51
fracas, ou a
colaboradores
81
tentativa de uma agitao mais
homognea. Lian e
sintetizaram nanobastes de magnetita por coprecipitao
homognea de FeCl3.6H2O e FeSO4.7H2O, utilizando ureia como agente

precipitante. Segundo os autores, as partculas obtidas apresentaram dimetro
de 40-50 m e comprimento de 1 m. Quanto s propriedades magnticas,
elas apresentaram MS de 67,55 emu/g e coercividade de 114 Oe.
A hidrlise da ureia se processa lentamente em temperaturas prximas a
100 C e pode ser representada pela Eq. Qum. 7:
CO2 + 2 NH4+ + 2 OH-
(NH2)2CO + 3 H2O
(Eq. Qum. 7)
Dessa forma, ela muito empregada para a gerao homognea de

ons OH- na precipitao a partir de uma soluo homognea. Nesse processo,
o precipitado formado pela gerao do agente precipitante de forma
homognea em toda a soluo, por meio de uma reao qumica lenta. Uma
vez que o agente precipitante o on OH-, no caso da ureia formado lenta e
homogeneamente, ele reage imediatamente com o analito em cada ponto da
soluo,
no
havendo
excessos
82
supersaturao relativa baixa.
localizados
deste
mantendo
Assim, os gradientes locais de pH gerados
pela adio de bases fortes podem ser contornados, resultando, entre outras
coisas, em uma provvel maior homogeneidade do precipitado obtido. A
influncia da ureia, como base utilizada na sntese das nanopartculas
magnticas, foi uma das variveis avaliadas
no primeiro grupo de
nanopartculas sintetizadas nesse estudo.

Outra varivel avaliada nas snteses do primeiro grupo foi a utilizao do
on SO42- para a obteno de partculas anisotrpicas. Sabendo que esses ons
retardam o crescimento do cristal de hematita na direo normal ao eixo c,
resultando em partculas alongadas, a sua influncia na sntese proposta foi
estudada.
52
4.1. Snteses e Caracterizaes do Primeiro Grupo

O intuito das snteses do primeiro grupo foi a obteno de
nanopartculas magnticas alongadas de xidos de ferro, de acordo com o
objetivo desse estudo. Alguns parmetros foram variados a fim de se alcanar
o sistema mais apropriado para as aplicaes biomdicas visadas.
4.1.1. INFLUNCIA DO TEMPO DE REAO
As imagens de MET das nanopartculas obtidas variando-se o tempo de
reao mostraram que todas elas possuem dimenses nanomtricas e formato
alongado, como pode ser observado na Figura 27.
Por meio da anlise das imagens da Figura 27, foram obtidos
histogramas de distribuio de comprimento (Figura 28-1) e largura (Figura 282) para as nanopartculas sintetizadas nessa etapa do estudo. Os histogramas
mostraram uma larga distribuio dos comprimentos e uma distribuio mais
estreita das larguras das nanopartculas sintetizadas. Apesar disso, as
dimenses das nanopartculas se encontram, majoritariamente, entre 10-100
nm. De acordo com alguns autores, as nanopartculas cujas dimenses se
enquadram
nessa
faixa
so
farmacodinamicamente
apropriadas
para
aplicaes biomdicas in vivo.17 Nanopartculas menores que 10 nm esto

sujeitas a extravazamento para tecidos subjacentes e filtrao renal, ao passo
que nanopartculas maiores que 100 nm tendem a ser rapidamente
opsonizadas e removidas pelo SMF. Alm disso, o EPR permite que
nanopartculas
com
dimenses
dentro
dessa
faixa,
se
acumulem
preferencialmente nos tumores.3
53
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
Figura 27. Imagens obtidas por MET das nanopartculas sintetizadas com variao de tempo
de sntese: (a) NP1A, (b) NP1B, (c) NP1C, (d) NP1D, (e) NP1E e (f) NP1F. Barra de escala =
0,2 m.
54
(1a)
(1b)
(2a)
(2b)
(1c)
(2c)
(1d)
(2d)
55
(1e)
(2e)
(1f)
(2f)
Figura 28. Histogramas de distribuio de comprimento (1) e largura (2) para a (a) NP1A, (b)
NP1B, (c) NP1C, (d) NP1D, (e) NP1E e (f) NP1F.
Observando os valores da Tabela 3 e os diagramas de disperso

mostrados na Figura 29, observa-se que as dimenses mdias das
nanopartculas aumentam com o tempo de reao. Linhas de tendncia
polinomial de ordem 2 e linear, com um valor de R2 de aproximadamente 0,8,
podem ser obtidas para os diagramas de disperso dos comprimento mdios e
das larguras mdias, respectivamente. Essas tendncias mostram que o
aumento observado tende a ser mais acentuado para os comprimentos do que
para as larguras. Em 12 h de reao, o comprimento mdio aumentou em 50%,
enquanto a largura mdia aumentou em 25%.
56
Tabela 3. Dimenses mdias das nanopartculas magnticas obtidas com a variao do tempo
de reao e seus respectivos desvios-padro.
Amostra
Comprimento mdio (nm)
Largura mdia (nm)
NP1A
41,3 2,5
15,9 0,2
NP1B
58,4 2,6
16,7 0,9
NP1C
50,1 1,5
18,2 0,4
NP1D
49,9 2,0
16,5 0,3
NP1E
55,0 2,2
19,0 0,3
NP1F
79,4 6,5
20,3 0,4
(a)
(b)
Figura 29. Diagrama de disperso dos (a) comprimentos e das (b) larguras das nanopartculas
sintetizadas variando-se o tempo de reao.
A observao das imagens topogrfica e de fase obtidas por MFA da

NP1B, mostradas na Figura 30, permitem a diferenciao das nanopartculas
alongadas que compem os agregados.
57
(a)
127.22
[nm]
1.00 um
2.50 x 2.50 um
0.00
(b)
-38.41
[deg]
1.00 um
2.50 x 2.50 um
-74.71
Figura 30. Imagem (a) topogrfica e (b) de fase da NP1B, obtidas por MFA em modo dinmico.
Imagem de 2,5 x 2,5 m.
A Figura 31 mostra a magnificao de duas nanopartculas mostradas

na Figura 30. Comparando-se as imagens topogrfica e de fase dessa figura,
observa-se que as diferenas nas superfcies das nanopartculas podem ser
atribudas topografia, ou seja, a superfcie das nanopartculas apresenta
irregularidades. Essas irregularidades podem resultar em uma maior rea
superficial, sendo atraente para a ligao de grupos de interesse. A rea
superficial da amostra NP1D foi obtida pelo mtodo BET, resultando em 18,89
m2/g, coerente com o valor descrito na literatura de 10 a 100 m2/g.6
Nota-se ainda, que o formato dessas estruturas difere. Isso leva a crer
que houve a formao de estruturas heterogneas, como pode ser notado pela
observao das extremidades dessas nanopartculas.
58
(a)
36.17
[nm]
50.00 nm
156.00 x 156.00 nm
0.00
(b)
-35.43
[deg]
50.00 nm
156.00 x 156.00 nm
-68.40
Figura 31. Imagem (a) topogrfica e (b) de fase da NP1B, obtidas por MFA em modo
dinmico/viscoelstico. Imagem de 156 x 156 nm.
A Figura 32 mostra a imagem tridimensional das nanopartculas.
Figura 32. Imagem de MFA obtida no modo fase da NP1B em 3D.
59
A partir dos difratogramas obtidos das amostras, possvel calcular,

utilizando a Lei de Bragg (Equao 9), as distncias interplanares, dhkl,
relacionadas a cada pico e, comparando-as com o banco de dados PDF,
identific-los. O perfil dos difratogramas obtidos por DRX das amostras dessa
etapa do estudo (Figura 33) revela que, exceto a NP1A, todas apresentam a
estrutura do espinlio.
Figura 33. Difratogramas das nanopartculas magnticas sintetizadas com variao de tempo
de sntese.
Observando-se a Figura 34, possvel relacionar o perfil geral dessas

amostras ao padro da magnetita. Isso se torna ainda mais claro com os dados
das Tabelas 4 e 5, que mostram a comparao dos picos dos difratogramas
entre as amostras obtidas nessa etapa e os valores do banco de dados para o
padro de magnetita. Os resultados revelaram uma aproximao excelente, o
que permite a indexao desses picos como magnetita. Nota-se, entretanto, a
presena, em todas as amostras, de um pico em, aproximadamente, 2 = 21 e
de outro pico em 2 = 36,64, que no pertencem magnetita, marcado como
goethita (G) (-FeOOH) nos espectros. Esses picos tambm podem ser
observados
no
difratograma
da
magnetita
sintetizada
por
Lian
60
colaboradores,81 apesar dos autores afirmarem que no foram observados

picos de impureza.
Figura 34. Comparao entre os difratogramas da NP1D e da magnetita pura.
Tabela 4. Tabela comparativa das nanopartculas magnticas sintetizadas com variao do

tempo de reao, indexadas como magnetita.
Pico 1
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP1A
0,1930
30,0840
0,2968
0,2967
25,5
30
220
NP1B
0,1436
30,1010
0,2966
0,2967
33,9
30
220
NP1C
0,1183
30,1350
0,2963
0,2967
36,0
30
220
NP1D
0,1475
30,1200
0,2965
0,2967
28,0
30
220
NP1E
0,1458
30,0900
0,2968
0,2967
30,6
30
220
NP1F
0,1328
30,1400
0,2963
0,2967
32,5
30
220
Pico 2
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP1A
0,1502
35,4390
0,2531
0,2532
100,0
100
311
NP1B
0,1671
35,4620
0,2529
0,2532
100,0
100
311
NP1C
0,1445
35,4940
0,2527
0,2532
100,0
100
311
NP1D
0,1677
35,4770
0,2528
0,2532
100,0
100
311
NP1E
0,1601
35,4420
0,2531
0,2532
100,0
100
311
NP1F
0,1469
35,4980
0,2527
0,2532
100,0
100
311
61
Pico 3
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP1A
0,1741
43,0660
0,2099
0,2099
23,0
20
400
NP1B
0,1938
43,0860
0,2098
0,2099
20,2
20
400
NP1C
0,1673
43,1290
0,2096
0,2099
19,6
20
400
NP1D
0,2323
43,1070
0,2097
0,2099
20,4
20
400
NP1E
0,1952
43,0840
0,2098
0,2099
18,4
20
400
NP1F
0,1683
43,1250
0,2096
0,2099
21,3
20
400
Pico 4
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP1A
0,4519
53,2530
0,1719
0,1715
38,1
10
422
NP1B
0,4620
53,3400
0,1716
0,1715
11,2
10
422
NP1C
0,4700
53,4240
0,1714
0,1715
7,5
10
422
NP1D
0,2844
53,4680
0,1712
0,1715
8,8
10
422
NP1E
0,2304
53,4540
0,1713
0,1715
7,1
10
422
NP1F
0,2441
53,4740
0,1712
0,1715
5,5
10
422
Pico 5
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP1A
0,3288
57,0280
0,1614
0,1616
17,6
30
511
NP1B
0,2503
56,9910
0,1615
0,1616
20,2
30
511
NP1C
0,2289
57,0650
0,1613
0,1616
21,8
30
511
NP1D
0,2368
57,0210
0,1614
0,1616
22,5
30
511
NP1E
0,2588
56,9770
0,1615
0,1616
18,9
30
511
NP1F
0,2374
57,0230
0,1614
0,1616
19,4
30
511
Pico 6
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP1A
0,3800
62,5930
0,1483
0,1485
25,4
40
440
NP1B
0,2966
62,5820
0,1483
0,1485
25,6
40
440
NP1C
0,2616
62,6590
0,1481
0,1485
28,5
40
440
NP1D
0,2899
62,6110
0,1482
0,1485
27,2
40
440
NP1E
0,2734
62,5670
0,1483
0,1485
26,1
40
440
NP1F
0,2543
62,6140
0,1482
0,1485
26,4
40
440
62
Tabela 5. Indexao dos picos de DRX para as nanopartculas magnticas sintetizadas com
variao do tempo de reao.
NP1A
NP1B
NP1C
NP1D
NP1E
NP1F
hkl
(d/di)teo
(d/di)exp
(d/di)exp
(d/di)exp
(d/di)exp
(d/di)exp
(d/di)exp
220
1,000
1,000
1,000
1,000
1,000
1,000
1,000
311
1,173
1,173
1,173
1,173
1,173
1,173
1,172
400
1,414
1,414
1,414
1,414
1,414
1,415
1,414
422
1,732
1,729
1,729
1,729
1,731
1,733
1,730
511
1,837
1,837
1,837
1,837
1,837
1,838
1,836
440
2,000
2,000
2,000
2,000
2,000
2,000
1,999
Na Figura 35, a amostra NP1A foi comparada ao padro de goethita, a

fim de se observar a presena desse xido/hidrxido de ferro na amostra com o
menor tempo de reao. O pico em 2 = 21 pode ser indexado como o pico
(110) de maior intensidade e o pico em 2 = 37, como o pico (111)
segundo pico de maior intensidade da goethita, sugerindo que ele um
intermedirio provvel dessa reao. A diminuio da intensidade desses picos
com o aumento do tempo de reao um indicativo de que a goethita formada
evolui para a formao de magnetita, o que resulta em uma maior pureza da
magnetita sintetizada. Isso corroborado pelas anlises dos outros picos dos
difratogramas das nanopartculas que no podem ser indexados como
magnetita.
Figura 35. Comparao entre os difratogramas da NP1A e da goethita pura.

63
Os picos no pertencentes magnetita presentes no difratograma da

amostra NP1A foram indexados como goethita na Figura 35. Todos esses
picos diminuem medida que o tempo de reao aumenta, de maneira que a
sua distino nas nanopartculas sintetizadas com tempo de reao igual ou
superior a 6 h complexa, exceto para os picos (110) e (111), que so os picos
de maior intensidade da goethita discutido anteriormente. O pico (221) da
goethita se sobrepe ao pico (422) da magnetita e, como se esperava, houve
uma reduo significativa em sua rea nas amostras NP1D, NP1E e NP1F.
Relacionando esses resultados com o mecanismo de formao da
magnetita por coprecipitao de Fe(II) e Fe(III), pode-se afirmar que a hidrlise
do hexaquoon de Fe(III) ocorre at a formao de goethita e que a magnetita
obtida a partir desse intermedirio.81
[Fe(H2O)6]3+
-FeOOH + 3H+ + 4 H2O
(Eq. Qum. 8)
Uma vez que a morfologia bsica do cristal de goethita acicular,6

supe-se que a forma das partculas de goethita obtidas como intermedirios
so preservadas, durante a sua converso para magnetita.
Para se obter um grau de pureza satisfatrio das nanopartculas de
magnetita, observou-se que a sntese deve ser realizada com, no mnimo 6 h
de reao, para que a converso seja tal que a quantidade de goethita seja
reduzida.
Sabendo-se ento, que a fase de magnetita das partculas sintetizadas
pertence ao sistema cbico (espinlio), foi utilizada a Equao 11 para calcular
os parmetros de cela dessa fase, sendo que o valor de aresta obtido
corresponde mdia dos valores obtidos para cada pico. Os resultados esto
expostos na Tabela 6.
64
Tabela 6. Clculo dos parmetros de cela da fase de magnetita para as nanopartculas

magnticas sintetizadas com variao do tempo de sntese.
aexp (nm) ateo (nm)
NP1A
0,839
0,839
NP1B
0,839
0,839
NP1C
0,838
0,839
NP1D
0,839
0,839
NP1E
0,839
0,839
NP1F
0,838
0,839
Como no sistema cbico a = b = c,83 a cela unitria da fase de magnetita

das amostras obtidas com variao do tempo de sntese, possui arestas de
0,839 nm, valor prximo ao descrito na literatura para esse xido.6 Esse
resultado um indicativo de que as estruturas cristalinas dessa fase das
amostras se assemelham estreitamente magnetita.
A determinao de Fe(II) e ferro total nas amostras por Dicromatometria,
cujos resultados esto expostos na Tabela 7, mostrou que em nenhuma
amostra a proporo inicial entre o Fe(II) e o Fe(III) se manteve constante, fato
j esperado. Como a reao foi realizada em atmosfera oxidante, parte do
Fe(II) deve ter sido oxidado a Fe(III) durante a reao.
Tabela 7. Proporo de Fe(II) e Fe(III) nas amostras obtidas com a variao do tempo de
reao, determinada por Dicromatometria.
Amostra
Fe(II) (mol)
Fe(III) (mol)
NP1A
1,00
22,53
NP1B
1,00
6,14
NP1C
1,00
6,12
NP1D
1,00
3,46
NP1E
1,00
3,17
NP1F
1,00
3,32
A proporo mais discrepante foi apresentada pela amostra NP1A. Uma

vez que os Kps do hidrxido de ferro (II) (Fe(OH)2) e hidrxido de ferro (III)
(Fe(OH)3) so 2 x 10-39 e 4,1 x 10-15, respectivamente, infere-se que o Fe(OH)3
precipita primeiro e evolui para goethita, segundo a Eq. Qum. 9:81
65
Fe(OH)3
FeOOH + H2O
(Eq. Qum. 9)
A precipitao do Fe(OH)2 s ocorre aps a formao de mais ons

hidroxila. Assim, justifica-se a proporo encontrada para essa amostra, pois
como o Kps do Fe(OH)3 bem menor que o Kps do Fe(OH)2, provavelmente, 1 h
de reao no foi suficiente para que a precipitao do Fe(OH)2 atingisse o
desejvel. Esse resultado coerente com os de DRX, que indicam que essa
amostra composta, dentre outras fases, por goethita.
Essa razo diminui com o aumento do tempo de reao, como
esperado. Todavia, mesmo aps 12 h de reao, no se chega a uma
proporo de Fe(II):Fe(III) = 1:2. Buscando solucionar essa questo, alguns
pesquisadores retiram o ar das misturas, antes da reao,78,79 ou utilizam
propores entre Fe(II) e Fe(III) menores que 1:2 na sntese.84
A fim de avaliar a influncia da atmosfera oxidante nas nanopartculas
sintetizadas, foi realizada uma sntese nas mesmas condies da NP1D, porm
em atmosfera inerte, borbulhando nitrognio na mistura durante as 6 h de
reao. Essa amostra foi denominada de NP1DI. A Tabela 8 mostra os
resultados obtidos para a determinao de Fe(II) e ferro total por
Dicromatometria para essa amostra.
Tabela 8. Proporo de Fe(II) e Fe(III) na NP1DI.
Amostra
Fe(II) (mol)
Fe(III) (mol)
NP1DI
1,00
5,51
A proporo entre Fe(II):Fe(III) = 1:5,5, foi ainda maior do que a obtida

para a amostra NP1D. Esse resultado vai de encontro ao esperado, podendo
ser atribudo s variaes no acondicionamento da amostra e no tempo em que
ela ficou armazenada antes da realizao das medidas, uma vez que a
oxidao continua com o tempo, em uma taxa mais lenta, porm no
determinada nesse estudo. Assim, apesar desse mtodo ser validado para
esses fins, sugerido que mais estudos sejam feitos para sanar essa questo.
De qualquer forma, o difratograma dessa amostra (Figura 36) no apresentou
variaes significativas, em relao s outras amostras j apresentadas. Os
dados das Tabelas 9 e 10 corroboram essa afirmao. Como essa diferena
66
no foi expressiva, as snteses continuaram sendo realizadas em atmosfera

oxidante, a fim de se alcanar o procedimento mais simples para a obteno
das nanopartculas.
Figura 36. Difratograma da amostra NP1DI.
Tabela 9. Dados obtidos por DRX da amostra NP1DI, indexada como magnetita.
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
28,8
30
220
100,0
100
311
19,1
20
400
7,5
10
422
19,7
30
511
25,6
40
440
Pico 1
0,1204
30,0760
0,2969
0,2967
Pico 2
0,13924
35,43
0,2532
0,2532
Pico 3
0,16279
43,052
0,2099
0,2099
Pico 4
0,35477
53,351
0,1716
0,1715
Pico 5
0,20892
56,94
0,1616
0,1616
Pico 6
0,24032
62,534
0,1484
0,1485
67
Tabela 10. Indexao dos picos de difrao de raios X para a amostra NP1DI.
NP1DI
hkl
(d/di)teo
(d/di)exp
222
1,000
1,000
311
1,173
1,173
400
1,414
1,414
422
1,732
1,730
511
1,837
1,837
440
2,000
2,000
Os espectros de FTIR das nanopartculas sintetizadas variando-se o

tempo de reao (Figura 37), exceto a NP1D, apresentam uma banda de
absoro em 3128 cm-1, atribuda vibrao da ligao O-H estrutural,
presente na goethita e em outros xidos/hidrxidos de ferro. Embora em
pequena escala, os grupo OH tambm podem estar presentes nas pontes FeOH-Fe dos xidos de ferro.
Figura 37. Espectros de FTIR das nanopartculas magnticas sintetizadas com variao de
tempo de sntese.
Nessa regio, podem-se ter ainda bandas de absoro deslocadas para

comprimentos de ondas maiores, relacionadas vibrao dos grupos OH da
superfcie. Os tomos de ferro so considerados stios cidos, segundo a
68
definio de Lewis, e, em meio aquoso, adsorvem nions hidroxila ou

molculas de gua. importante notar a contribuio da gua em 3000 cm-1.
As molculas de gua adsorvidas, geralmente, se dissociam, resultando em
uma superfcie coberta por OH-. Esses nions so os grupos funcionais dos
xidos de ferro em meio aquoso. Para remov-los da superfcie dos xidos,
necessrio o tratamento trmico a temperaturas elevadas o suficiente, sendo
que, mesmo aps a desidroxilao, caso sejam expostos umidade, o
processo pode ocorrer novamente. Esses ons so capazes de se coordenar
ao Fe de maneiras diferentes (Figura 38), gerando deslocamentos das bandas
de vibrao. Dessa forma, era esperado que a superfcie das nanopartculas
magnticas sintetizadas nesse estudo estivesse recoberta por nions OH-,
mesmo aps a secagem, visto que foram sintetizadas em meio aquoso.
Simples
Duplo
Triplo
Geminal
Figura 38. Tipos de coordenao dos grupos OH- superficiais ao Fe.6
As bandas de absoro em 1645 cm-1, presentes nos espectros de todas

as amostras, se referem deformao HOH. Essa gua pode ser relacionada
umidade adsorvida no KBr utilizado para fazer as pastilhas, bem como gua
adsorvida superfcie das amostras.
As bandas em 897 e 798 cm-1 so relacionadas s deformaes da
ligao O-H.6,85,86,87 Como essas duas bandas so caractersticas desse xido
hidrxido, esses resultados no apenas confirmam os dados obtidos por DRX,
como tambm mostram que a amostra sintetizada com 12 h de reao
apresenta goethita em sua composio.
Outro aspecto notvel desses espectros o aumento da intensidade
relativa da banda de estiramento da ligao Fe-O, em 600 cm-1, com o
69
aumento do tempo de reao. Desse resultado, podemos inferir que h um

aumento do nmero de pontes Fe-O-Fe com o aumento do tempo de reao.
Esse aumento pode ser resultado do crescimento dos cristais, confirmando a
tendncia de aumento da rea das partculas com o aumento do tempo de
reao, mostrada na Tabela 3. Alm disso, comparando-se essa banda com a
correspondente da goethita (630 cm-1), possvel assinalar um deslocamento
para comprimentos de onda menores, situadas na regio dos xidos de ferro,
indicando a mistura de fases nessas amostras.
O espectro do FeSO4.7H2O, um dos reagentes utilizados nessas
snteses, apresenta uma banda larga e forte em 1095 cm-1 com um ombro em
1144 cm-1, atribuda vibrao do SO42-. Esse nion um ligante de elevada
simetria e, dependendo do modo como ele se coordena ao metal, a sua
simetria reduzida, resultando na degenerao das bandas de absoro
(Figura 39).88 Visto o perfil dessa banda no espectro do FeSO4.7H2O, pode-se
admitir a hiptese de sobreposio de bandas. O mesmo ocorre nas amostras
NP1A, NP1E e NP1F, pois, embora menos intensas, a sua forma sugere a
sobreposio. Ainda nesses espectros, possvel observar uma banda na
regio de 469 cm-1, tambm associada vibrao do SO42-, que aparece
somente como um ombro no espectro das outras amostras. Isso pode ser um
indicativo de mudana do modo de coordenao desse on. No espectro do
FeSO4.7H2O, h uma banda larga na regio de 942 a 400 cm-1, centrada em
623 cm-1, com indcios de sobreposio de uma banda nessa regio.
(a)
(b)
on livre
(c)
Complexo
monodentado
(d)
Complexo
bidentado
Complexo com
pontes
Figura 39. Modos de coordenao do sulfato.
88
As curvas termogravimtricas (TG) das amostras NP1A, NP1B e NP1D

(Figura 40) mostram uma perda de massa com Td (temperatura na qual a taxa
de variao de massa mxima) em, aproximadamente 250 C. A perda de
70
massa entre 200 e 300 C atribuda perda do OH estrutural, pela reao de

desidroxilao (Eq. Qum. 10):6,85
2 OH-
O2- + H2O
(Eq. Qum. 10)
A perda de massa nessa etapa diminui com o aumento do tempo de

reao, como mostrado na Tabela 11. Isso mais um indcio da diminuio da
fase de goethita nas amostras.
(b)
(a)
(c)
Figura 40. Curvas TG das amostras (a) NP1A, (b) NP1B e (c) NP1D.
Tabela 11. Perda de massa das amostras NP1A, NP1B e NP1D na etapa de degradao entre
200 e 300 C.
Amostras
Perda de Massa (%)
NP1A
NP1B
NP1D
71
Alm disso, as perdas de massa entre 100 e 200 C so associadas

gua adsorvida nas amostras. Dessa forma, as curvas TG evidenciam a
presena tanto de gua adsorvida, quanto de grupos OH estruturais.6
As curvas M vs H das nanopartculas obtidas nessa etapa do estudo
(Figura 41) mostraram que todas as amostras atingiram a saturao magntica.
Os valores de MS dessas amostras, bem como os valores de Hc e MR esto
expostos na Tabela 12.
Figura 41. Curvas M vs H das nanopartculas magnticas sintetizadas com variao de tempo
de sntese.
Tabela 12. Propriedades magnticas das amostras obtidas variando-se o tempo de reao.
Amostra
MS (emu/g)
HC (Oe)
MR (emu/g)
NP1A
12,3
79,6
0,7
NP1B
37,8
93,4
3,2
NP1C
50,8
57,0
3,0
NP1D
56,9
71,5
3,1
NP1E
55,5
82,1
4,1
NP1F
60,9
79,5
4,6
possvel notar que os valores de MS aumentam com o aumento do

tempo de reao, isto , com o aumento da quantidade de magnetita, como
mostrado na Figura 42-a. A grande diferena observada entre as MS das
72
amostras NP1A e NP1F pode ser explicada pela composio de cada uma
delas, baseando-se nos difratogramas e nas dosagens, que evidenciam o
aumento da fase ferromagntica (ou ferrimagntica) de magnetita, em
detrimento da diminuio da fase pouco magntica de goethita, com o aumento
do tempo de reao. A Figura 42-b mostra a MS em funo da quantidade
estimada de magnetita contida nas amostras. Ajustando-se os dados
experimentais, possvel estimar a MS em 100%, isto , para magnetita pura,
em 85 emu/g, prximo ao valor da MS da magnetita macia descrita na
literatura de 92 100 emu/g.6
Figura 42. (a) MS em funo do tempo de reao e (b) MS em funo da quantidade estimada
de magnetita em percentual de massa contida nas amostras.
A Figura 41 e a Tabela 12, juntamente com a Figura 43, que mostra o

detalhe do lao de histerese dessas amostras, permitem observar que todas
elas exibem comportamento ferromagntico, nessas situaes. Os valores de
MR so baixos, apesar do campo relativamente alto, necessrio para reverter
essa magnetizao.
73
Figura 43. Detalhe do lao de histerese da curva M vs H nanopartculas magnticas

sintetizadas com variao de tempo de sntese.
Apesar da amostra NP1F apresentar a maior MS, optou-se por dar

continuidade aos estudos com a amostra NP1D, visto a diferena na MS vir
acompanhada de uma menor MR e HC. Alm disso, a amostra NP1D apresenta
dimenses inferiores s da amostra NP1F, e um perfil de distribuio de
comprimento e largura que sugerem uma disperso menor, aumentando o seu
potencial em certas aplicaes biomdicas. Os outros resultados apresentados
no mostraram diferenas significativas entre as amostras NP1D e NP1F, de
modo que essa seleo foi baseada nos fatores j mencionados e em 6 h a
menos de reao para obt-los, o que torna essa sntese mais vivel. Assim,
as snteses das outras etapas foram realizadas com esse tempo de reao,
no descartando a possibilidade de retomar os estudos com outras amostras
desse grupo mais adiante, se for julgado interessante.
4.1.2. INFLUNCIA DOS CONTRA-ONS
Nessa
etapa,
influncia
dos
contra-ons
nas
nanopartculas
sintetizadas foi avaliada. A Tabela 13 foi desenvolvida visando a uma melhor

visualizao da proporo entre os reagentes utilizados nas snteses.
74
Tabela 13. Proporo entre os reagentes utilizados na sntese da NP2A, NP1D, NP2B e NP2C.
Amostra
FeCl2.4H2O
FeSO4. 7H2O
FeCl3.6H2O
Fe2(SO4)3. 9H2O
NP2A
NP1D
NP2B
NP2C
As imagens de MET das amostras obtidas com variao dos contra-ons

mostraram as diferenas nos formatos e dimenses dessas nanopartculas,
como pode ser observado nas Figuras 44 e 45 e na Tabela 14.
(a)
(b)
(c)
(d)
Figura 44. Imagens obtidas por MET das nanopartculas sintetizadas com variao dos contraons. (a) NP2A, (b) NP1D, (c) NP2B, (d) NP2C. Barra de escala = 0,2 m.
75
(1a)
(2a)
(1b)
(2b)
(1c)
(2c)
(1d)
(2d)
Figura 45. Histogramas de distribuio de comprimento (1) e largura (2) para a (a) NP2A, (b)
NP1D, (c) NP2B e (d) NP2C.
76
Tabela 14. Dimenses mdias das nanopartculas magnticas obtidas com a variao do
tempo de reao e seus respectivos desvios-padro.
Amostra
Largura mdia (nm)
NP2A
102,6 3,3
57,7 0,5
NP1D
49,9 2,0
16,5 0,3
NP2B
36,0 2,2
16,5 0,3
NP2C
40,6 1,6
15,9 0,4
Considerando-se apenas os contra-ons, a amostra NP2A foi sintetizada

utilizando-se somente Cl-, o que resultou em nanopartculas com o formato
mostrado na Figura 44a e dimenses superiores s das outras amostras
(aproximadamente, 2 vezes o comprimento e 3,5 vezes a largura da NP1D). O
formato dessas partculas alongado, porm no se assemelham ao formato
das nanopartculas sintetizadas com reagentes contendo SO42-. Alguns estudos
foram feitos para entender a influncia do Cl- na formao de xidos de ferro.
Musi e colaboradores89 realizaram a hidrlise de FeCl3 em solues contendo
ureia a elevadas temperaturas. Eles observaram que o produto hidroltico
principal a akaganeita (-FeOOH), rapidamente convertida em hematita (Fe2O3). De acordo com Sugimoto, 60 os ons Cl- produzem hematita
pseudocbica, pelo retardamento do crescimento da fase (012), em sistemas
sol-gel altamente condensados. Segundo Cornell,6 o on Cl- favorece
formao de lepidocrocita (-FeOOH). Foi sugerido que ele retarda a formao
de magnetita, impedindo a condensao de grupos OH vizinhos, para a
formao das pontes Fe-O-Fe.
No presente estudo, o alongamento das partculas da amostra NP2A
indica que no s a precipitao homognea influencia na morfologia dessas
nanopartculas, mas tambm a formao de um intermedirio alongado, uma
vez que no houve a adio de SO42-. Dessa forma, provvel que essa
sntese tenha passado pela akaganeita como intermedirio, cujas morfologias
bsicas so somatide e basto. A possibilidade de formao de outro
intermedirio poderia explicar as diferenas de morfologia e composio das
nanopartculas formadas.
Em contra-partida, a adio de SO42- mesmo em pequena proporo
(NP1D), conduz formao de nanopartculas alongadas com formato de
bastes, provavelmente, como descreve a literatura:60 pela adsoro especfica
77
desses nions s faces do cristal paralelas ao eixo c, suprimindo o crescimento

do cristal na direo normal a esse eixo. interessante ressaltar que as
nanopartculas que no tiveram a adio de SO42- (NP2A) apresentaram
largura 3,5 vezes superior a maior largura obtida nesse grupo de snteses
(NP1D), corroborando a hiptese da adsoro especfica desses nions. Alm
disso, o SO42- induz formao de goethita,6 cuja morfologia bsica acicular.
Assim, o formato das nanopartculas sintetizadas com esse contra-on pode ser
resultado tanto da adsoro especfica do SO42-, quanto da transformao
topottica do provvel intermedirio goethita em magnetita.
Em relao amostra NP2B, o que mais chama a ateno a reduo
de sua polidisperso, ou seja, a variao das dimenses dessas nanopartculas
menor do que das amostras sintetizadas com Cl-. Assim, pode-se supor que
esse nion intefere na polidisperso das nanopartculas. Alm disso, as
amostras NP2B e NP2C apresentaram comprimento mdio um pouco menor
do que das nanopartculas j discutidas.
Os difratogramas das nanopartculas sintetizadas variando-se o contraon, bem como os clculos de dhkl, apresentaram diferenas significativas, de
maneira que eles foram estudados separadamente.
O difratograma da NP2A apresentou estreita relao com o difratograma
do padro de hematita (-Fe2O3), como mostra a Figura 46. Os resultados da
Tabela 15 comprovam essa proximidade.
78
Figura 46. Comparao entre os difratogramas da NP2A e do padro de hematita.
Tabela 15. Indexao dos picos do difratograma da NP2A como hematita.

Pico
Largura
0,1626
24,1390
0,3684
0,1690
33,1400
0,2430
dexp (nm) dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
0,3660
33,4
25
012
0,2701
0,2690
100,0
100
104
35,5800
0,2521
0,2510
93,2
50
110
0,2234
40,8490
0,2207
0,2201
25,3
30
113
0,2519
49,4420
0,1842
0,1838
30,9
40
024
0,2261
54,0430
0,1695
0,1690
44,7
60
116
10
0,3118
57,4740
0,1602
0,1596
9,0
16
018
11
0,4214
62,5160
0,1485
0,1484
21,7
35
214
12
0,2779
63,9820
0,1454
0,1452
24,0
35
300
A formao dos xidos mistos, todavia, acontece. A presena de picos

no indexados como hematita, marcados como M na Figura 46, podem ser
indexados como o (220), (400) e (511) do espinlio. O dhkl desses picos est
entre o da magnetita e o da maghemita cbica, de modo que podemos supor
que se trata de uma fase intermediria, devido oxidao parcial de Fe(II) a
Fe(III). Alm desses picos, nota-se que o pico indexado como (110) da NP2A
apresenta intensidade relativa quase duas vezes superior ao da hematita pura.
Esse pico se encontra na mesma regio do (311) do espinlio, inferindo-se que
o pico da NP2A pode ser resultado da soma do (110) da hematita com o (311)
79
do espinlio. Do difratograma da NP2A conclui-se, portanto, que essa amostra

contm no mnimo duas fases, a hematita e a fase intermediria entre
magnetita e maghemita, sendo a primeira, a provvel fase principal. Esse
resultado est coerente com a literatura, que diz que o Cl- induz a formao de
hematita89 e tende a retardar a formao de magnetita.6
Os difratogramas da NP2B e NP2C (Figura 47) apresentaram um perfil
mais complexo. Os clculos de dhkl, mostrados na Tabela 16, confrontados aos
dados da goethita, mostraram semelhanas entre eles. O difratograma da
NP2B apresenta picos estranhos goethita, relacionados aos picos do
espinlio e marcados com M nessa Figura.
Figura 47. Comparao entre os difratograma da NP2B, NP2C e goethita pura.
80
Tabela 16. Tabela comparativa da NP2B e NP2C, indexadas como goethita.

Pico 1
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,3749
21,2230
0,4183
0,4183
100,0
100
110
NP2C
0,3495
21,3000
0,4168
0,4183
100,0
100
110
Pico 2
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,3613
33,2410
0,2693
0,2693
45,2
35
130
NP2C
0,4808
33,3130
0,2687
0,2693
41,6
35
130
Pico 3
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,2950
34,6940
0,2584
0,2583
22,7
12
21
NP2C
0,2581
34,7720
0,2578
0,2583
29,3
12
21
Pico 4
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,2563
36,6570
0,2450
0,2450
85,3
50
111
NP2C
0,2836
36,7200
0,2446
0,2450
84,2
50
111
Pico 5
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,1692
39,9620
0,2254
0,2253
24,2
14
121
NP2C
0,4015
40,0600
0,2249
0,2253
20,4
14
121
Pico 6
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,5322
41,1550
0,2192
0,2190
23,2
18
140
NP2C
0,4204
41,2680
0,2186
0,2190
26,2
18
140
Pico 7
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,4625
53,2830
0,1718
0,1719
31,3
20
221
NP2C
0,4325
53,3280
0,1717
0,1719
35,5
20
221
Pico 8
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,3671
59,0210
0,1564
0,1564
30,6
10
151
NP2C
0,5091
59,0890
0,1562
0,1564
24,3
10
151
Pico 9
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP2B
0,4533
61,3180
0,1511
0,1509
21,0
NP2C
0,2698
61,3840
0,1509
0,1509
22,6
81
Tal como na amostra NP2A, o dhkl dos picos marcados com M est
entre o da magnetita e o da maghemita cbica, de modo que deve se tratar de
uma fase intermediria, devido oxidao parcial de Fe(II) a Fe(III). Essa
amostra, sintetizada apenas com SO 42-, uma mistura de pelo menos essas
duas fases, com aparente predominncia da goethita. Esses picos no so
identificados na NP2C, o que um resultado interessante, visto que essa
amostra foi sintetizada com os nions Cl- e SO42- como a NP1D. Entretanto,
essa ltima composta majoritariamente por magnetita. sabido que o
FeCl2.4H2O instvel e facilmente oxidado, o que pode justificar a diferena de
composio da NP2C e NP1D, pois, provavelmente, no havia Fe2+ em
soluo para que ocorresse a formao do cristal misto. De qualquer modo,
esses resultados indicam que, como mencionado anteriormente, o SO42- induz
a formao de goethita.6
A Figura 48 mostra a comparao entre os difratogramas das amostras
obtidas nessa etapa do estudo. Dela, infere-se que a influncia dos contra-ons
(e dos reagentes) ultrapassa a morfologia das partculas, afetando a sua
composio.
Figura 48. Difratogramas das nanopartculas magnticas sintetizadas com variao do contraon.
82
A Tabela 17 mostra os resultados da determinao de Fe(II) e ferro total

nessas amostras, aonde pode-se observar que as amostras sintetizadas com
FeCl2.4H2O apresentaram uma maior quantidade de Fe(III), especialmente a
NP2C. Uma vez que no difratograma dessa amostra no foi possvel identificar
picos de espinlio, esses resultados so coerentes entre si, mostrando que na
NP2C houve larga oxidao de Fe(II) a Fe(III).
Tabela 17. Proporo de Fe(II) e Fe(III) nas amostras obtidas com a variao dos contra-ons,
determinada por Dicromatometria.
Amostra
Fe(II) (mol)
Fe(III) (mol)
NP2A
1,00
20,15
NP2B
1,00
14,85
NP2C
1,00
53,53
NP1D
1,00
3,46
Visto que a reao realizada em atmosfera oxidativa, os ons Fe(II) do

FeCl2.4H2O podem ter sido amplamente oxidados a Fe(III) durante a reao,
devido instabilidade desse sal. Esses resultados esto coerentes com os
apresentados por DRX, que mostram que a nica amostra cuja fase principal
magnetita a NP1D, cuja proporo Fe(II)/Fe(III) razovel.
A banda de absoro na regio acima de 3000 cm-1, nos espectros de
FTIR das amostras NP2B e NP2C (Figura 49), possui um perfil diferente das
amostras NP2A e NP1D. Essa banda, nas amostras NP2B e NP2C, pode ser
considerada como a sobreposio de ao menos quatro bandas: (i) a banda em
3447 cm-1 pode ser associada s vibraes dos grupos OH superficiais,
adsorvidos do meio aquoso, aonde foi realizada a sntese, ou do ambiente; (ii)
a banda em 3352 cm-1 pode ser atribuda vibrao da ligao N-H, oriunda da
ureia utilizada; e (iii) a banda de absoro em 3200 cm-1, pode ser relacionada
vibrao de estiramento da ligao O-H estrutural. A presena da banda em
3200 cm-1 coerente com o resultado obtido por DRX, que mostrou que essas
amostras so compostas, principalmente por goethita. Essa banda no pode
ser identificada nos espectros das amostras NP1D e NP2A. Como discutido
previamente, a amostra NP1D composta, principalmente, por magnetita,
contendo traos de goethita, que no devem ser expressivos o suficiente, para
que essa banda seja visvel. J a amostra NP2A, majoritariamente composta
83
por hematita, com traos de magnetita. Ambos os xidos de ferro,

teoricamente, no contm OH estrutural. Ruan e colaboradores90 mostraram
que hematita com excesso de OH-, chamada de hidrohematita, pode ser
formada a partir da goethita.
Figura 49. Espectros de FTIR das nanopartculas sintetizadas, variando-se os contra-ons.
As bandas de absoro relativas deformao HOH continuam

presentes nos espectros tanto das amostras, quanto dos reagentes utilizados
(Figuras 49 e 50) na regio de 1660-1630 cm-1. Como mencionado
anteriormente, ela pode ser relacionada umidade adsorvida no KBr utilizado
para fazer as pastilhas, bem como gua adsorvida superfcie das amostras.
Nas amostras NP2B e NP2C, entretanto, essa banda se dividiu em duas,
centradas em 1662 e 1623 cm-1. A diviso das bandas de deformao HOH
descrita na literatura e atribuda ao forte acoplamento entre os diferentes
modos vibracionais desse grupo.91
Outro aspecto interessante dos espectros dessas duas amostras o
aparecimento de duas bandas em 1463 e 1400 cm-1, atribudas absoro da
ligao N-H, dos grupos oriundos da ureia, concordando com a banda em 3352
cm-1. Isso sugere a presena desses grupos, que de alguma forma ficaram
adsorvidos e no foram liberados como amnia.
84
O espectro do Fe2(SO4)3.9H2O (Figuras 50 e 51) apresenta quatro

bandas em 1225, 1144, 1067 e 994 cm-1, relacionadas vibrao do SO42-. De
acordo com discusso prvia, pode-se concluir que o SO42- se coordena como
um ligante bidentado (Figura 39c e 39d)88 nesse sal. As bandas em 675, 587 e
499 cm-1 tambm so atribudas absoro desse nion.
Figura 50. Espectro de FTIR dos reagentes utilizados nas snteses das nanopartculas obtidas,
variando-se os contra-ons.
85
Figura 51. Comparao entre os espectros de FTIR do Fe2(SO4)3.9H2O e das amostras NP2B
e NP2C.
Os espectros das amostras NP2B e NP2C apresentam uma banda em

1116 cm-1 com um ombro em 1170 cm-1, semelhante ao perfil do FeSO4.7H2O
e diferente do perfil do Fe2(SO4)3.9H2O. Porm, elas tambm apresentaram as
bandas em 675, 587 e 499 cm-1 de maneira idntica ao Fe2(SO4)3.9H2O.
Relacionando
esses
dados
imagens
obtidas
por
MET
dessas
nanopartculas, observa-se que elas possuem formato semelhante, porm

dimenses levemente reduzidas, quando comparadas NP1D. Dessa forma,
supe-se que o sulfato se coordenou s nanopartculas NP2B e NP2C de
maneira tal, que o nmero de stios acessveis para o crescimento adicional do
cristal foi reduzido, levando a partculas menores.92 A Figura 52 mostra os
modos de coordenao possveis de ligantes superfcie dos xidos de ferro.6
Suspeita-se, portanto, que esse nion pode se coordenar de maneiras distintas
nessas amostras, porm mais anlises precisariam ser feitas para aprofundar
essa discusso.
mononuclear
monodentado
mononuclear
bidentado
binuclear
bidentado
Figura 52. Modos de coordenao de ligantes superfcie dos xidos de Fe.
86
Tal como os espectros das nanopartculas obtidas com variao do

tempo de sntese, a NP2B e NP2C tambm possuem duas bandas em 897 e
798 cm-1, relacionadas s deformaes da ligao O-H.6,85,86,90
Ruan e colaboradores 90 atribuem as bandas de vibrao abaixo de 700
cm-1 s vibraes do retculo octadrico de FeO6. No espectro da amostra
NP2A, a banda em 564 cm-1 caracterstica da hematita e associada
vibrao Fe-O. Pode-se observar o deslocamento dessa banda para
comprimentos de onda maiores na amostra NP1D (600 cm-1) e NP2B e NP2C
(620 cm-1), em concordncia com as regies dessa vibrao na magnetita e na
goethita, respectivamente.6 Esses resultados corroboram a hiptese de que a
fase principal formada na NP2A hematita, na NP1D magnetita e nas NP2B
e NP2C goethita.
As curvas M vs H das nanopartculas obtidas variando-se os contra-ons
foram mostradas separadamente, visto a discrepncia em suas respostas ao
campo magntico aplicado.
Na Figura 53, as curvas M vs H das amostras NP2A e NP2B, mostram
que essas amostras atingem a saturao magntica. Esse resultado preliminar
concorda com os resultados de DRX, que assinalam a presena de magnetita
ou maghemita nessas amostras, visto que hematita e goethita no se saturam
em campos de 1-2 T.
Figura 53. Curvas M vs H da NP2A e NP2B.
87
A MS da NP2B maior que da NP2A (Tabela 18), resultado coerente

com os apresentados at aqui. Foi mostrado anteriormente que essas
amostras apresentam propores prximas de Fe(II):Fe(III), sendo que a NP2B
possui mais Fe(II), o que sugere uma maior quantidade de magnetita nessa
amostra, aumentando, portanto, a sua MS. Esses valores para a goethita e a
hematita
descritos
na
literatura
so
0,01-1
emu/g
0,3
emu/g,6
respectivamente, o que fortalece a suspeita da presena de outra fase, visto

que os valores de MS das amostras so superiores a esses.
Tabela 18. Propriedades magnticas das amostras sintetizadas variando-se os contra-ons.
Amostra
MS (emu/g)
HC (Oe)
MR (emu/g)
NP2A
17,1
143,6
2,7
NP2B
22,4
4,4
0,8
NP2C
70,8
0,4
NP1D
57,0
71,5
3,1
Na curva M vs H da NP2C (Figura 54), observa-se, primeiramente, que

essa amostra no atinge a saturao magntica. O seu valor de magnetizao
mxima em campos altos 3,15 emu/g. Todos os resultados mostrados at
aqui confirmam a suspeita de que essa amostra, provavelmente, no contm
espinlio e deve ser composta por goethita e outras fases pouco magnticas.
Figura 54. Curva M vs H da NP2C.

88
A Figura 55 mostra o detalhe do lao de histerese correspondente

magnetizao e desmagnetizao das amostras, da qual se conclui que elas
apresentam
comportamento
ferromagntico
ou
ferrimagntico,
nessas
condies. Os valores de MR, contudo, so muito baixos. Um resultado

interessante o elevado valor de coercividade da NP2A, indicando que apesar
da magnetizao remanente ser baixa, necessrio um campo relativamente
alto para revert-la, ou seja, os momentos dessa amostra resistem
desmagnetizao.
Figura 55. Detalhe do lao de histerese das curvas M vs H da NP2B e NP2C.
A Figura 56 compara as curvas M vs H de todas as amostras dessa

etapa, mostrando a influncia dos contra-ons nas propriedades magnticas
das nanopartculas obtidas.
89
Figura 56. Curvas M vs H das nanopartculas magnticas sintetizadas, variando-se os contraons.
A unio de todos os resultados das amostras obtidas com variao dos

contra-ons mostrou que a combinao de contra-ons que mais atende aos
objetivos desse estudo a da amostra NP1D.
4.1.3. INFLUNCIA DA PROPORO ENTRE Fe(II) E Fe(III)
De acordo com a reao de formao da magnetita (Eq. Qum. 3),
necessrio uma razo molar inicial de Fe(II)/Fe(III) = 1:2, para a formao
desse xido misto. Nessa etapa, foi estudada a influncia dessa proporo no
produto obtido.
As imagens obtidas por MET das nanopartculas sintetizadas variandose a proporo entre Fe(II) e Fe(III) (Figura 57) mostraram que a morfologias
das amostras NP3A e NP3B diferem, consideravelmente, da morfologia da
amostra NP1D. Elas apresentaram formato indefinido, entre o esfrico e o
pseudocbico e, aparentemente, uma forte tendncia para formarem
aglomerados nessas condies. Alm disso, importante notar que o filme de
Formvar das telinhas de cobre usadas como substrato foi danificado no preparo
das amostras NP3A e NP3B. Essas snteses e caracterizaes, contudo, foram
90
repetidas, alcanando-se os mesmos resultados, assegurando que as

nanopartculas obtidas por essa sntese de fato possuem esse aspecto. A
imagem da amostra NP3A utilizada se refere repetio dessa caracterizao
e por isso, o fundo est normal. J a imagem selecionada da amostra NP3B, se
refere ao primeiro ensaio e foi selecionada para esse trabalho, porque se
mostrou a mais representativa da amostra, mesmo com o fundo prejudicado.
(b)
(a)
(c)
Figura 57. Imagens obtidas por MET das nanopartculas sintetizadas variando-se a proporo
entre Fe(II) e Fe(III). (a) NP1D, (b) NP3A e (c) NP3B. Barra de escala = 0,2 m.
Os difratogramas obtidos dessas amostras (Figura 58), bem como os

clculos e comparaes com valores padro de dhkl correspondente a cada
pico (Tabelas 19 e 20), mostraram que com as propores estudadas, as
amostras sintetizadas possuem a estrutura do espinlio e dhkl entre os valores
de magnetita e maghemita cbica.
91
Figura 58. Difratogramas das nanopartculas magnticas sintetizadas com variao da

concentrao de Fe(II) e Fe(III).
Sabendo-se que a maghemita e a magnetita possuem estrutura

cristalina similar e que a diferena entre elas reside na ausncia (idealmente)
de Fe(II) no retculo cristalino, gerando vacncias, supe-se que nessas
amostras ocorreu a oxidao parcial de Fe(II) a Fe(III), gerando vacncias no
retculo cristalino, tal como ocorreu em outras amostras j discutidas. Portanto,
essa fase pode ser tratada como uma fase de transio entre os dois xidos.
Tabela 19. Indexao dos picos de difrao de raios X para as nanopartculas magnticas
sintetizadas com variao proporo de Fe(II) e Fe(III).
NP3A
NP3B
NP1D
hkl
(d/di)teo
(d/di)exp
(d/di)exp
(d/di)exp
220
1,000
1,000
1,000
1,000
311
1,173
1,172
1,173
1,173
400
1,414
1,413
1,414
1,414
422
1,732
1,730
1,732
1,731
511
1,837
1,835
1,837
1,837
440
2,000
1,998
2,000
2,000
92
Tabela 20. Tabela comparativa da NP3A e NP3B, indexadas como magnetita.

Pico 1
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo Fe3O4 (nm)
dteo -Fe2O3 (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP3A
0,2559
30,2110
0,2956
0,2967
0,2953
30,4
30
220
NP3B
0,2357
30,1980
0,2957
0,2967
0,2953
30,0
30
220
NP1D
0,1475
30,1200
0,2965
0,2967
0,2953
28,0
30
220
Pico 2
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo Fe3O4 (nm)
dteo -Fe2O3 (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP3A
0,2669
35,5520
0,2523
0,2532
0,2518
100,0
100
311
NP3B
0,2354
35,5730
0,2522
0,2532
0,2518
100,0
100
311
NP1D
0,1677
35,4770
0,2528
0,2532
0,2518
100,0
100
311
Pico 3
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo Fe3O4 (nm)
dteo -Fe2O3 (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP3A
0,3227
43,2100
0,2092
0,2099
0,2089
20,0
20
400
NP3B
0,2228
43,2180
0,2092
0,2099
0,2089
21,7
20
400
NP1D
0,2323
43,1070
0,2097
0,2099
0,2089
20,4
20
400
Pico 4
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo Fe3O4 (nm)
dteo -Fe2O3 (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP3A
0,4780
53,6000
0,1708
0,1715
0,1704
6,8
10
422
NP3B
0,1935
53,6210
0,1708
0,1715
0,1704
10,6
10
422
NP1D
0,2844
53,4680
0,1712
0,1715
0,1704
8,8
10
422
Pico 5
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo Fe3O4 (nm)
dteo -Fe2O3 (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP3A
0,3134
57,1450
0,1611
0,1616
0,1607
25,6
30
511
NP3B
0,3457
57,1770
0,1610
0,1616
0,1607
26,2
30
511
NP1D
0,2368
57,0210
0,1614
0,1616
0,1607
22,5
30
511
Pico 6
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo Fe3O4 (nm)
dteo -Fe2O3 (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP3A
0,4175
62,7630
0,1479
0,1485
0,1476
33,4
40
440
NP3B
0,3271
62,7850
0,1479
0,1485
0,1476
35,9
40
440
NP1D
0,2899
62,6110
0,1482
0,1485
0,1476
27,2
40
440
Comparando esses resultados com os da amostra NP1D, possvel

notar, ao contrrio das amostras obtidas com variao do tempo de reao, a
ausncia do pico (110) da goethita, nas amostras NP3A e NP3B. Entretanto, na
NP3A, pode-se identificar um pico em 2 = 33,865 (dhkl = 0,2645 nm), que no
pertence ao espinlio. Esse pico se aproxima do dhkl = 0,2693 nm, (130) da
goethita, entretanto, no se pode afirmar que se trata dele. De qualquer
93
maneira, a amostra NP3B no apresenta picos estranhos ao espinlio,

indicando que se invertendo a proporo entre Fe(II) e Fe(III), essa estrutura
obtida, porm com morfologia indefinida e com forte tendncia a se aglomerar.
Isso sugere que alm da influncia dos nions SO42- e do processo de
precipitao homognea provocado pela hidrlise da ureia, a proporo entre
os metais tambm influencia na morfologia das partculas. Com a ausncia do
pico (110) da goethita, supe-se que, quando a proporo dos metais
variada, a sntese no passa por esse intermedirio, o que poderia justificar a
forma no alongada da NP3A e NP3B, assumindo que a influncia dos nions
SO42- no suficiente para induzir, individualmente, as partculas ao
alongamento, nessas condies.
Uma vez que a NP3A e a NP3B foram classificadas no sistema cbico, a
Equao 11 foi utilizada para calcular os seus parmetros de cela, cujos
resultados esto expostos na Tabela 21.
Tabela 21. Clculo dos parmetros de cela para as nanopartculas magnticas sintetizadas
com variao da proporo entre Fe(II) e Fe(III).
aexp (nm)
ateo Fe3O4 (nm)
ateo -Fe2O3 (nm)
NP3A
0,837
0,839
0,835
NP3B
0,836
0,839
0,835
NP1D
0,839
0,839
0,835
Dentre as amostras sintetizadas com a variao da proporo entre

Fe(II) e Fe(III), a NP1D apresentou o resultado mais prximo ao da magnetita
pura. J as amostras NP3A e NP3B, como esperado, apresentaram valor de
aresta entre o da magnetita e o da maghemita, fortalecendo a hiptese de que
so uma fase intermediria desses dois xidos.
A determinao de Fe(II) e ferro total por Dicromatometria (Tabela 22)
mostrou que, utilizando uma maior quantidade inicial de Fe(II), obtm-se uma
proporo mais razovel no produto final, caso este fosse identificado como
magnetita. Os resultados, entretanto, no esto coerentes com os obtidos por
DRX, os quais evidenciaram que a fase principal na amostra NP1D magnetita
e nas NP3A e NP3B, uma fase intermediria entre magnetita e maghemita,
94
obtida pela oxidao de Fe(II) a Fe(III). A proporo entre Fe(II) e Fe(III)

nessas amostras deveria, portanto, ser inferior obtida para a NP1D.
Tabela 22. Proporo entre Fe(II) e Fe(III) nas amostras obtidas com a variao da proporo
entre Fe(II) e Fe(III), determinada por Dicromatometria.
Amostra
Fe(II) (mol)
Fe(III) (mol)
NP3A
1,00
5,06
NP3B
1,00
2,62
NP1D
1,00
3,46
O que se observa nos resultados de Dicromatometria que a amostra

NP3B contm uma maior proporo Fe(II)/Fe(III), o que indicaria, a princpio,
que essa amostra contm mais Fe(II) em sua estrutura e, portanto, o seu
difratograma deveria apresentar maiores semelhanas com o da magnetita.
Como discutido anteriormente, quando a coprecipitao de Fe(II) e
Fe(III) realizada em atmosfera oxidativa, o Fe(II) oxidado a Fe(III), sendo
muito difcil manter a proporo Fe(II)/Fe(III) = 1:2 durante a precipitao. Para
sanar esse problema, Maity e colaboradores84 realizaram a coprecipitao de
Fe(II) e Fe(III) com NH4OH, utilizando razo molar inicial de Fe(II):Fe(III) 1:2,
tal como foi feito nesse estudo. Apesar do objetivo dessas snteses ter sido a
formao de magnetita, os autores observaram que mesmo utilizando maiores
quantidades de Fe(II), a fase principal formada em todas as razes Fe(II)/Fe(III)
utilizadas foi a maghemita, devido oxidao de Fe(II) em Fe(III), contendo um
pouco de -Fe2O3 e traos de magnetita.
Os espectros de FTIR das amostras obtidas variando-se a proporo
entre Fe(II) e Fe(III) (Figura 59) evidenciam a presena da banda relacionada
vibrao do SO42- na regio de 1200-1000 cm-1. Pode-se notar a provvel
sobreposio de outras bandas, de maneira que esse ligante deve se
coordenar das formas (b), (c) ou (d) da Figura 39.
95
Figura 59. Espectros de FTIR das nanopartculas obtidas variando-se a proporo entre Fe(II)
e Fe(III).
possvel observar tambm, uma diminuio significativa das bandas

de deformao O-H em 897 e 798 cm-1, caractersticas da goethita,
concordando com os resultados obtidos por DRX.
Outro aspecto interessante nesses espectros o deslocamento da
banda do Fe-O para comprimentos de onda menores (581 cm-1-), em relao
NP1D (600 cm-1). Esse deslocamento pode estar associado s vacncias
geradas pela oxidao parcial do Fe(II) a Fe(III), confirmando os resultados de
DRX.
As curvas M vs H das amostras obtidas nessa etapa (Figura 60)
mostram que essas amostras atingem a saturao magntica. Os valores de
MS esto expressos na Tabela 23.
96
Figura 60. Curvas M vs H das nanopartculas magnticas sintetizadas variando-se a proporo

entre Fe(II) e Fe(III).
Os valores de MS das amostras NP3A e NP3B so prximos e maiores

que os da amostra NP1D. De fato, foi possvel observar por DRX que as
amostras NP3A e NP3B no possuem os picos indexados como goethita, de
modo que elas so compostas majoritariamente por espinlio. Alm disso, elas
possuem morfologia bem diferente da amostra NP1D, fatores aos quais podem
estar associados essa maior MS.
Essas amostras foram relacionadas a fases intermedirias entre a
magnetita e a maghemita. A MS da maghemita descrita na literatura 60 80
emu/g,6 em concordncia com os valores obtidos. Ento, apesar da amostra
NP1D ser composta principalmente por magnetita, a sua MS inferior das
amostras NP3A e NP3B, compostas por uma fase intermediria entre
magnetita e maghemita, que deveriam ser, supostamente, menos magnticas,
devido, provavelmente, fase de goethita presente e sua morfologia.
97
Tabela 23. Propriedades magnticas das amostras obtidas variando-se a proporo entre
Fe(II) e Fe(III).
Amostra
MS (emu/g)
HC (Oe)
MR (emu/g)
NP3A
74,94
97,18
11,09
NP3B
71,40
102,19
11,26
NP1D
56,95
71,52
3,10
A Figura 61 mostra o detalhe do lao de histerese correspondente

magnetizao e desmagnetizao dessas amostras, da qual se conclui que as
amostras apresentam comportamento ferromagntico ou ferrimagntico,
nessas condies. Os valores de MR e HC (Tabela 23) das amostras NP3A e
NP3B so superiores ao da NP1D, o que faz sentido, uma vez que a MS
dessas amostras tambm superior. Esse resultado pode ser relacionado
maior tendncia aparente que essas nanopartculas tm em se aglomerar,
comparando-as com a NP1D, mostrado pelas imagens de MET.
Figura 61. Detalhe do lao de histerese das curvas M vs H das nanopartculas magnticas
sintetizadas com variao da proporo entre Fe(II) e Fe(III).
Os resultados dessa etapa mostraram que apesar da obteno de

amostras supostamente mais puras e com MS maior, o uso de propores
Fe(II)/Fe(III) > 0,5 levou morfologias indesejveis nesse estudo e a um valor
98
relativamente alto de magnetizao remanente e coercividade. Assim, a

amostra NP1D se mostrou a mais apropriada para os objetivos desse estudo,
de maneira que foi selecionada nessa etapa.
4.1.4. INFLUNCIA DA BASE UTILIZADA NA ALCALINIZAO DO MEIO

Pela observao das imagens obtidas por MET das amostras
sintetizadas variando-se a base utilizada na alcalinizao do meio (Figura 62),
notaram-se
diferenas
significativas
no
formato
dimenses
das
nanopartculas sintetizadas, dependendo da base utilizada.
(a)
(b)
Figura 62. Imagens obtidas por MET das nanopartculas sintetizadas com variao da base
utilizada na alcalinizao do meio. (a) NP4A e (b) NP1D. Barra de escala = 0,2 m.
A Figura 62a mostra que, utilizando-se NH4OH, foram obtidas

nanopartculas esfricas monodispersas com dimenses reduzidas, quando
comparadas s nanopartculas sintetizadas utilizando-se ureia (Figura 62b). Os
histogramas de distribuio de comprimento e largura, mostrados na Figura 63,
assim como a Tabela 24, evidenciam diferenas significativas entre as
dimenses das nanopartculas sintetizadas (os histogramas da amostra NP4A
so os mesmos, mudando-se somente a escala para fins de comparao, uma
vez que essas nanopartculas so esfricas).
99
(a1)
(a2)
(b1)
(b2)
Figura 63. Histogramas de distribuio de comprimento (1) e largura (2) para a (a) NP4A e (b)
NP1D.
Tabela 24. Dimenses mdias das nanopartculas magnticas obtidas com a variao do
tempo de reao e seus respectivos desvios-padro.
Amostra
Largura mdia (nm)
NP4A
14,1 0,1
14,1 0,1
NP1D
49,9 2,0
16,5 0,3
O primeiro fator observado nessas figuras a notvel diferena na

disperso das amostras NP4A e NP1D. Na sntese dessa amostra, o NH4OH
foi adicionado a frio, lentamente, sob agitao, e ento, aquecido a 100 C, sob
refluxo, por 6 h. Mesmo com a adio lenta dessa base, ocorreu,
provavelmente, a elevao da supersaturao relativa, resultando em um
aumento significativo da velocidade da etapa de nucleao, de maneira que ela
constituiu o mecanismo de precipitao principal e um grande nmero de
partculas pequenas com dimenses semelhantes foi formado.82 J na sntese
da NP1D, a precipitao ocorreu a partir da gerao homognea de ons
hidrxido, de maneira que a supersaturao relativa foi, provavelmente,
100
mantida baixa durante toda a precipitao, favorecendo a velocidade de

crescimento das partculas, em detrimento da nucleao adicional. Sabendo-se
que os ons SO42- se adsorvem especificamente nos ncleos, o crescimento
das partculas ocorreu na direo do eixo c, de maneira que a largura mdia
das nanopartculas da NP1D se aproxima das dimenses da NP4A. Segundo
Itoh e colaboradores,93 a adsoro dos ons sulfato ocorre lentamente. Dessa
maneira, a tcnica de precipitao utilizada pode influenciar a forma das
nanopartculas obtidas, uma vez que permite essa adsoro.
A Figura 64 revela que os picos do difratograma da NP4A esto
levemente deslocados para a direita, se sobrepondo aos picos do padro de
maghemita. Esse deslocamento confirmado pelos dados da Tabela 25, que
mostra as comparaes das amostras NP4A e NP1D com os valores padro de
dhkl para a magnetita e maghemita correspondentes a cada pico. Esses
resultados sugerem que a NP4A maghemita.
Figura 64. Difratogramas das nanopartculas magnticas sintetizadas com variao da base
alcalinizante em comparao com os padres de magnetita e maghemita.
101
Tabela 25. Indexao dos picos dos difratogramas da NP4A como maghemita e da NP1D
como magnetita.
Pico 1
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP4A
0,6691
30,3310
0,2944
0,2953
39,4
35
220
NP1D
0,1475
30,1200
0,2965
0,2967
28,0
30
220
Pico 2
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP4A
0,6189
35,6750
0,2515
0,2518
100,0
100
311
NP1D
0,1677
35,4770
0,2528
0,2532
100,0
100
311
Pico 3
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP4A
1,2304
43,3280
0,2087
0,2089
27,0
16
400
NP1D
0,2323
43,1070
0,2097
0,2099
20,4
20
400
Pico 4
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP4A
0,8222
53,8600
0,1701
0,1704
14,3
10
422
NP1D
0,2844
53,4680
0,1712
0,1715
8,8
10
422
Pico 5
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP4A
0,7699
57,3710
0,1605
0,1607
29,8
24
511
NP1D
0,2368
57,0210
0,1614
0,1616
22,5
30
511
Pico 6
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NP4A
0,7109
62,9920
0,1474
0,1476
42,0
34
440
NP1D
0,2899
62,6110
0,1482
0,1485
27,2
40
440
Tabela 26. Indexao dos picos de DRX da NP4A.

NP4A
NP1D
hkl
(d/di)teo
(d/di)exp
(d/di)exp
220
1,000
1,000
1,000
311
1,173
1,171
1,173
400
1,414
1,411
1,414
422
1,732
1,731
1,731
511
1,837
1,835
1,837
440
2,000
1,997
2,000
A sntese de nanopartculas por coprecipitao em meio alcalino

utilizando NH4OH geralmente realizada a frio, resultando em nanopartculas
102
esfricas de magnetita, sendo realizada a digesto posterior, em alguns

casos.78,79 Nesse estudo, ela foi realizada a 100 C, para que o nico
parmetro variado fosse a base utilizada. Sabendo-se que o produto formado
foi maghemita, supe-se que o produto inicialmente obtido foi magnetita, porm
as 6 h de aquecimento aceleraram a oxidao do Fe(II) a Fe(III) nesse xido,
levando a sua converso em maghemita.
Comparando-se o difratograma obtido, com o difratograma da amostra
NP1D, podemos obervar a ausncia do pico (110) da goethita, sugerindo, tal
como para as amostras NP3A e NP3B, que essa sntese no passa por esse
intermedirio.
Como a magnetita e a maghemita obtida pertencem ao sistema cbico, a
Equao 11 foi utilizada para calcular os parmetros de cela dessas amostras
mostrados na Tabela 27. A maior proximidade da aresta da NP4A maghemita
mais um indcio da composio dessa amostra.
Tabela 27. Clculo do parmetro de cela da NP4A.
aexp (nm)
ateo Fe3O4 (nm)
ateo -Fe2O3 (nm)
NP4A
0,834
0,839
0,835
NP1D
0,839
0,839
0,835
Os resultados obtidos por Dicromatometria (Tabela 28) concordam com

os obtidos por DRX, que mostram que a fase principal da NP4A maghemita.
A proporo Fe(II)/Fe(III) muito pequena, indica que grande parte do Fe(II) foi
oxidado durante a sntese, levando formao de maghemita.
Tabela 28. Proporo entre Fe(II) e Fe(III) nas amostras obtidas com a variao da base,
Amostra
Fe(II) (mol)
Fe(III) (mol)
NP4A
1,00
37,10
NP1D
1,00
3,46
No espectro de FTIR da amostra NP4A, mostrado na Figura 65, a banda

larga acima de 3000 cm-1 est relacionada aos grupos OH estruturais ou de
superfcie e a banda em 1645 cm-1, deformao HOH da gua estrutural ou
de superfcie, no sendo possvel distingui-las. O aparecimento da banda fraca
103
em 868 cm-1, no lugar das bandas de deformao O-H em 897 e 798 cm-1,
caractersticas da goethita, atribuda ainda deformao desses grupos, um
indcio da presena de OH estrutural nessa amostra, uma vez que a sntese foi
realizada em meio aquoso.
Figura 65. Espectros de FTIR das nanopartculas sintetizadas variando-se a base.
O aspecto mais interessante nesse espectro , contudo, a diviso da

banda referente s vibraes Fe-O, gerando duas bandas centradas em 634 e
587 cm-1. De acordo com a literatura,94,95 essas bandas so um reflexo da
desordem das vacncias no cristal de maghemita.
A curva M vs H da NP4A mostra que essa amostra atinge a saturao
magntica, apesar do seu perfil de curva ser diferente do perfil da amostra
NP1D (Figura 66). O valor de 65,7 emu/g encontrado para a amostra NP4A
est em tima concordncia com o descrito na literatura para a maghemita (60
80 emu/g),6 como mostra a Tabela 29.
104
Figura 66. Curvas M vs H das nanopartculas magnticas sintetizadas com variao da base
alcalinizante do meio.
Tabela 29. Propriedades magnticas das amostras obtidas variando-se a base alcalinizante do
meio.
Amostra
MS (emu/g)
HC (Oe)
MR (emu/g)
NP4A
65,70
NP1D
56,95
71,52
3,10
As diferenas observadas entre os valores de MS obtidos para a amostra

NP1D e NP4A podem ser associadas a diversos fatores. Apesar da MS terica
da magnetita ser superior da maghemita, o que se tem nesse caso, em
especial para a amostra NP1D, comprovado previamente, uma mistura de
xidos de ferro. Na amostra NP1D, a goethita presente reduz a MS esperada,
caso esse material fosse magnetita pura. Na amostra NP4A, no foi claramente
diferenciada nenhuma outra fase, o que leva a crer na maior pureza dessa
amostra. Adicionalmente, importante considerar o tamanho mdio inferior das
nanopartculas da amostra NP4A. Ao reduzir as dimenses de uma partcula,
se reduz tambm os domnios magnticos dessa partcula. E, por fim, deve-se
levar em conta o formato diferente dessas nanopartculas, que afetar
diretamente as suas propriedades magnticas.
105
O detalhe do lao de histerese dessas curvas (Figura 67) e os valores

mostrados na Tabela 29 indicam que a amostra NP4A apresenta um
comportamento superparamagntico nessas condies, motivo pelo qual o
perfil de curva dessas duas amostras diferente. Assim, apesar de no
possurem o formato alongado, essas nanopartculas apresentaram boa
disperso e pureza. Alm disso, pelas curvas de magnetizao, elas
apresentaram comportamento magntico adequado para certas aplicaes
biomdicas, tendo potencial para essas finalidades.
Figura 67. Detalhe do lao de histerese das curvas M vs H da NP4A e NP1D.
Os resultados das caracterizaes das amostras obtidas variando-se a

base mostraram que a ureia influencia diretamente a morfologia das
nanopartculas obtidas. O interessante nessa etapa, entretanto, foi que as
nanopartculas obtidas com NH4OH, sob as mesmas condies, apesar de no
serem o alvo primrio desse estudo, apresentaram grande potencial para
aplicaes biomdicas. Por esse motivo, foi realizado, paralelamente ao
objetivo geral desse trabalho, um estudo mais aprofundado acerca desse grupo
de nanopartculas, chamado de segundo grupo de snteses, que ser
apresentado a seguir.
106
Acerca do primeiro grupo de nanopartculas sintetizadas, apresentado

at aqui, interessante notar que nanopartculas com diferentes formatos,
dimenses, composio e propriedades magnticas foram obtidas. A ideia
inicial era selecionar apenas uma amostra para dar continuidade aos estudos.
Entretanto, as nanopartculas esfricas da amostra NP4A surpreenderam e
foram selecionadas para um estudo mais aprofundado e para ensaios focados
nas aplicaes biolgicas. Essa seleo no exclui a potencialidade de
aplicao de outras amostras sintetizadas nesse grupo. Como j discutido,
existem inmeras possibilidades de aplicaes biomdicas in vivo e in vitro
para as quais, algumas dessas amostras sintetizadas podem ser interessantes.
Entretanto, para tornar esse estudo vivel e, considerando-se os objetivos
iniciais, apenas uma das amostras alongadas foi selecionada (NP1D) e,
excepcionalmente, uma amostra das nanopartculas esfricas que ser
escolhida aps o estudo apresentado a seguir.
4.2. Snteses e Caracterizaes do Segundo Grupo

As snteses do segundo grupo foram realizadas em funo dos
excelentes resultados obtidos no primeiro grupo, ao se estudar a influncia da
base
utilizada
na
alcalinizao
do
meio.
Nanopartculas
esfricas
monodispersas superparamagnticas de maghemita foram obtidas em uma

sntese do tipo one-pot. O intuito das snteses do segundo grupo foi o estudo e
otimizao dessa sntese, a fim de se obter o sistema mais apropriado para as
aplicaes biomdicas. O nico parmetro variado foi o tempo de reao.
As imagens obtidas por MET (Figura 68) mostraram que aumentando o
tempo de reao, a forma esfrica das nanopartculas obtidas torna-se mais
definida e, aparentemente, diminui a tendncia a se formarem aglomerados.
107
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
Figura 68. Imagens obtidas por MET das nanopartculas do segundo grupo, sintetizadas
variando-se o tempo de reao: (a) NPS0, (b) NPS1, (c) NPS3, (d) NPS6, (e) NPS9. Barra de
escala = 100 nm.
108
Na Figura 69, possvel observar um estreitamento dos histogramas de

distribuio de dimetro obtidos para essas amostras, exceto para NPS9,
revelando uma tendncia diminuio da polidisperso das nanopartculas
com o aumento do tempo de reao.
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
Figura 69. Histogramas de distribuio de dimetro para a (a) NPS0, (b) NPS1, (c) NPS3, (d)
NPS6 e (e) NPS9.
Os dimetros mdios obtidos por meio do ajuste desses histogramas

com uma curva log normal esto expressos na Tabela 30. O diagrama de
disperso dos dimetros mdios dessas amostras (Figura 70) possibilita uma
109
melhor visualizao do comportamento do produto obtido com o aumento do

tempo de reao. O valor discrepante da amostra NPS1 pode ser resultado de
um ajuste no to adequado, visto que a maior frequncia obtida nesse
histograma se encontra entre 12,5 e 15 nm, que se encaixaria melhor no
diagrama de disperso, seguindo uma tendncia de crescimento exponencial.
De qualquer maneira, observa-se que o dimetro mdio das nanopartculas
aumenta com o tempo de reao.
Tabela 30. Dimenses mdias das nanopartculas magnticas do segundo grupo estimadas
por MET e pela Equao de Scherrer, usando os dados de DRX.
Amostra
MET - Dimetro mdio (nm)
DRX Dimetro mdio (nm)
NPS0
11,5 0,3
11,0
NPS1
17,6 0,4
11,9
NPS3
12,8 0,2
10,7
NPS6
14,1 0,1
13,1
NPS9
19,4 0,9
12,6
Figura 70. Diagrama de disperso dos dimetros das amostras do segundo grupo.
A Tabela 30 tambm mostra o dimetro mdio de cristal calculado pelos

resultados das anlises de DRX por meio da Equao de Scherrer (Equao
110
11), visto que as nanopartculas obtidas possuem formato, aproximadamente,

esfrico:
K = $JS cos ?
(Equao 11)
onde d o dimetro mdio das partculas; k a constante de proporcionalidade

que depende da forma das partculas, assumida como esfrica (k = 0,9); o
comprimento de onda da radiao do Cu (1,5406 ); e a largura a meia
altura do pico.
Alguns valores de dimetro mdio de partcula estimados pela Equao
de Scherrer diferem daqueles determinados pela anlise das imagens obtidas
por MET. Para esse tipo de comparao, deve-se ponderar que o DRX
considera apenas a parte cristalina das partculas e que, provavelmente,
existem espcies em sua superfcie, que podem ser medidas pelas imagens
obtidas por MET, que no so cristalinas. Assim, esses resultados podem ser
um indicativo de que no necessariamente cada partcula individual seja um
cristal isolado.
Os valores de pH medidos ao final das reaes variam de,
aproximadamente, 10 (NPS0) para 7 8 (NPS9) e auxiliam na elucidao dos
processos envolvidos nas snteses. Devido ao tempo prolongado de
aquecimento, a base evapora e, em novas condies (meio mais cido) e em
elevadas temperaturas, as partculas menores so mais susceptveis
dissoluo. O Fe3+ oriundo desse processo, provavelmente, se incorpora s
partculas que no se dissolveram, em um processo de reprecipitao,96 visto
que a concentrao de Fe detectada no sobrenadante ao trmino da reao
pequena. Essa hiptese pode justificar a tendncia de aumento do dimetro
mdio das nanopartculas, nos valores obtidos por meio das anlises das
imagens de MET.
Os difratogramas das amostras do segundo grupo, expostos na Figura
71, mostraram que os picos do difratograma da amostra NPS0 esto
deslocados para a esquerda, se aproximando do padro de magnetita. Na
medida em que o tempo de reao aumenta, os picos se deslocam para a
direita, se sobrepondo ao padro de maghemita. Esse deslocamento sutil,
111
mas pode ser visualizado com clareza, confrontado os valores de espao

interplanar, obtidos para as amostras e os valores das fichas dos xidos em
questo. Na Tabela 31, os valores experimentais obtidos foram comparados
aos valores padro de magnetita amostra NPS0 e de maghemita
amostras NPS1, NPS3, NPS6 e NPS9.
Figura 71. Difratogramas das amostras de nanopartculas esfricas do segundo grupo.

Tabela 31. Indexao dos picos dos difratogramas das amostras esfricas do segundo grupo
como maghemita, exceto a NPS0, indexada como magnetita.
Pico 1
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NPS0
0,8270
29,701
0,3005
0,2967
33,7
35
220
NPS1
0,6015
30,365
0,2941
0,2953
32,0
35
220
NPS3
0,7484
30,346
0,2943
0,2953
37,7
35
220
NPS6
0,6696
30,331
0,2944
0,2953
38,9
35
220
NPS9
0,6649
30,415
0,2937
0,2953
31,2
35
220
Pico 2
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NPS0
0,7553
35,057
0,2558
0,2532
100,0
100
311
NPS1
0,7019
35,724
0,2511
0,2518
100,0
100
311
NPS3
0,7792
35,718
0,2512
0,2518
100,0
100
311
NPS6
0,6357
35,675
0,2515
0,2518
100,0
100
311
NPS9
0,6611
35,763
0,2509
0,2518
100,0
100
311
112
Pico 3
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NPS0
0,8612
42,772
0,2112
0,2099
20,9
16
400
NPS1
0,6634
43,384
0,2084
0,2089
18,2
16
400
NPS3
0,8521
43,368
0,2085
0,2089
17,0
16
400
NPS6
0,8310
43,311
0,2087
0,2089
16,6
16
400
NPS9
0,7443
43,460
0,2081
0,2089
18,9
16
400
Pico 4
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NPS0
1,4175
53,138
0,1722
0,1715
18,0
10
422
NPS1
1,1666
53,778
0,1703
0,1704
16,2
10
422
NPS3
1,3096
53,771
0,1703
0,1704
16,9
10
422
NPS6
0,7392
53,863
0,1701
0,1704
12,7
10
422
NPS9
1,2993
53,89
0,1700
0,1704
20,9
10
422
Pico 5
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NPS0
0,7388
56,698
0,1622
0,1616
28,2
24
511
NPS1
0,7580
57,369
0,1605
0,1607
27,0
24
511
NPS3
0,8639
57,421
0,1604
0,1607
26,5
24
511
NPS6
0,7662
57,371
0,1605
0,1607
29,3
24
511
NPS9
0,5655
57,458
0,1603
0,1607
29,0
24
511
Pico 6
Amostra
Largura
dexp (nm)
dteo (nm)
IRexp
IRteo
hkl
NPS0
0,8850
62,364
0,1488
0,1485
38,7
34
440
NPS1
0,7685
63,016
0,1474
0,1476
36,7
34
440
NPS3
0,9055
62,985
0,1475
0,1476
43,1
34
440
NPS6
0,6798
62,991
0,1474
0,1474
40,6
34
440
NPS9
0,8076
63,077
0,1473
0,1476
37,6
34
440
Tabela 32. Indexao dos picos de DRX das amostras do segundo grupo .
NPS0
NPS1
NPS3
NPS6
NPS9
hkl
(d/di)teo
(d/di)exp
(d/di)exp
(d/di)exp
(d/di)exp
(d/di)exp
220
1,000
1,000
1,000
1,000
1,000
1,000
311
1,173
1,171
1,171
1,172
1,171
1,171
400
1,414
1,412
1,411
1,412
1,411
1,411
422
1,732
1,728
1,727
1,728
1,731
1,727
511
1,837
1,833
1,833
1,835
1,835
1,832
440
2,000
1,996
1,996
1,996
1,997
1,994
113
Tabela 33. Clculo dos parmetros de cela para as amostras do segundo grupo.
aexp (nm)
ateo Fe3O4 (nm)
ateo -Fe2O3 (nm)
NPS0
0,844
0,839
0,835
NPS1
0,834
0,839
0,835
NPS3
0,834
0,839
0,835
NPS6
0,834
0,839
0,835
NPS9
0,832
0,839
0,835
Esses resultados corroboram a discusso iniciada na sesso 4.1.4, na

qual foi sugerido que o produto inicial dessa sntese (antes do aquecimento
NPS0) magnetita, como descrito na literatura.78,79 O aquecimento posterior
acelerou a oxidao de Fe(II) a Fe(III), levando a sua converso em
maghemita. Segundo a reao que descreve a formao da magnetita (Eq.
Qum. 3), uma razo molar inicial de Fe3+:Fe2+= 2:1 necessria para a
formao desse xido. Entretanto, quando a sntese realizada em atmosfera
oxidante, difcil manter essa razo, pois o Fe2+ oxidado a Fe3+ e a magnetita
convertida em maghemita, de acordo com a Eq. Qum. 11:
2Fe3O4 + O2 -Fe2O3
(Eq. Qum. 11)
Os resultados da dosagem dessas amostras (Tabela 34) confirmaram

essa hiptese. Eles mostram que a divergncia da razo molar Fe3+:Fe2+
aumenta com o aumento do tempo de reao. Essa razo para a amostra
NPS0 consistente com a magnetita. O aumento do tempo de reao acelera
a oxidao de Fe2+ a Fe3+, at uma razo de Fe3+:Fe2+ = 58,50, obtida pra
amostra NPS9, na qual o Fe2+ deve estar praticamente ausente e a estrutura
mais plausvel a da maghemita. Isso consistente com resultados prvios,
nos quais a magnetita foi convertida a maghemita em atmosfera oxidante
durante a digesto das amostras.97
114
Tabela 34. Proporo entre Fe(II) e Fe(III) nas nanopartculas esfricas do segundo grupo,
Amostra
Fe(II) (mol)
Fe(III) (mol)
NPS0
1,00
3,07
NPS1
1,00
30,00
NPS3
1,00
40,33
NPS6
1,00
37,10
NPS9
1,00
58,50
Nos espectros de FTIR das amostras do segundo grupo (Figura 72),

duas regies chamam a ateno: a regio de 1285 a 945 cm-1 e a regio de
772 a 492 cm-1. Na primeira (1285 a 945 cm-1), observa-se o desaparecimento
da banda centrada em 1070 cm-1 e o surgimento de trs bandas em,
aproximadamente, 1215, 1154 e 1054 cm-1, com o aumento do tempo de
reao. De acordo com Nakamoto88, essas trs bandas se associam ao grupo
SO42- se ligando ao metal como um ligante bidentado, como mostrado na
Figura 39-c. Dessa maneira, possvel que com o aumento do tempo de
reao, e constatado nesse estudo a partir de 6 h (NPS6), o modo de
coordenao do grupo SO42- muda, gerando uma mudana em sua simetria
local.
Na segunda regio (772 a 492 cm-1), j discutida na seo 4.1.4, a
diviso da banda, atribuda s vibraes Fe-O, em outras duas, centradas em
634 e 587 cm-1, foi associada desordem das vacncias dos ctions no cristal
de maghemita, de acordo com a literatura.94,95 Morales e colaboradores 98
utilizaram a espectroscopia no infravermelho com sucesso para estudar s
caractersticas de ordem-desordem na estrutura da maghemita. Essas
caractersticas se referem ao ordenamento das vacncias octadricas que
geram vrias simetrias cristalinas. Foi sugerido que as vacncias podem ser
distribudas de trs formas: aleatoriamente (grupo espacial Fd3Wm); como o
ction de ltio em LiFe5O8 (grupo espacial P4132); e com uma distribuio

ordenada com simetria tetragonal (grupo espacial P43212). A partir das 6 h de
reao, nota-se que a banda em 634 cm-1, que at ento era menos intensa
que a banda em 587 cm-1, se tornou mais intensa nas amostras NPS6 e NPS9.
Segundo os autores, isso um indcio do aumento do grau de ordenamento
das vacncias. Outro ponto interessante a ser observado a mudana do perfil
115
da banda em 587 cm-1 na amostra NPS9, que sugere o incio da diviso dessa
banda. Ainda segundo os autores, mltiplas bandas de absoro nessa regio
esto associadas a um maior grau de ordenamento, fortalecendo a hiptese
levantada anteriormente.
Figura 72. Espectros de FTIR das nanopartculas esfricas das amostras do segundo grupo.
Devido s similaridades entre os difratogramas da magnetita e da

maghemita, a espectroscopia Raman foi utilizada como uma tcnica para se
distinguir diferentes fases nas nanopartculas magnticas de xido de ferro
(Figura 73). No espectro da amostra NPS0, as bandas largas em 302, 560 e
662 cm-1 foram atribudas aos fnons associados aos modos A1g e Eg da
magnetita. Alm disso, as bandas largas em, aproximadamente 710, 500 e 370
cm-1 mostradas no espectro da amostra NPS6 podem ser associadas
oxidao parcial do Fe2+ em Fe3+, levando transformao de magnetita em
maghemita.79,99,100 Dessa forma, os espectros dessas amostras obtidas por
espectroscopia Raman confirmaram as discusses realizadas at esse ponto
acerca da composio das amostras desse grupo.
116
Figura 73. Espectros Raman das amostras NPS0 e NPS6.
As curvas M vs H das amostras do segundo grupo (Figura 74) mostram

que todas as amostras atingem a saturao magntica.
Figura 74. Curvas M vs H das amostras do segundo grupo.
Esperava-se que houvesse uma diminuio na MS das nanopartculas

com o aumento do tempo de reao, visto que a MS terica da magnetita
117
inicialmente gerada maior do que a MS terica da maghemita, obtida a partir

da oxidao desse produto. Entretanto, os valores de MS obtidos (Tabela 35)
variam bastante, no sendo possvel estabelecer uma relao entre eles. A
maior MS obtida foi a da amostra NPS6.
Tabela 35. Propriedades magnticas das amostras do segundo grupo.
Amostra
MS (emu/g)
HC (Oe)
MR (emu/g)
NPS0
60,50
0,00
0,00
NPS1
63,74
0,00
0,00
NPS3
50,70
0,00
0,00
NPS6
65,70
0,00
0,00
NPS9
56,95
0,00
0,00
A Tabela 35, juntamente com o lao de histerese das curvas M vs H

(Figura 75), tambm mostra que as amostras do segundo grupo apresentam
comportamento superparamagntico nessas condies, como observado na
seo 4.1.4.
Figura 75. Detalhe do lao de histerese das curvas M vs H das amostras do segundo grupo.
Dessa forma, utilizando um procedimento simples, nanopartculas

magnticas esfricas superparamagnticas nessas condies de anlise, com
118
dimetro variando de 11,5 a 19 nm e com uma distribuio de tamanho

reduzida foram obtidas. Uma vez que no foram utilizados reagentes txicos
durante essa sntese e nem para a oxidao das partculas, e, levando-se em
considerao as caractersticas interessantes alcanadas, as nanopartculas
obtidas apresentaram potencial para aplicaes biomdicas.
Para dar sequncia aos estudos, a amostra NPS6 foi selecionada para
as
anlises
envolvendo
possveis
aplicaes
biomdicas,
devido
propriedades serem satisfatrias com um tempo de reao razovel.
4.3. Realizao de Ensaios Voltados para as Aplicaes

Biomdicas
Aps as caracterizaes das nanopartculas sintetizadas, uma amostra
de cada grupo foi selecionada para dar continuidade aos estudos, focando nos
experimentos relacionados diretamente com as aplicaes biomdicas.
Baseando-se em discusses prvias, as nanopartculas alongadas da amostra
NP1D e as nanopartculas esfricas da amostra NPS6 foram selecionadas.
4.3.1. MAGNETOHIPERTERMIA
As propriedades de magnetohipertermia das amostras NP1D e NPS6
foram investigadas. A Figura 76 mostra curvas de variao da temperatura em
funo do tempo de medio, variando-se a amplitude do campo magntico
aplicado, para a amostra NP1D.
119
Figura 76. Variao da temperatura em funo do tempo de medio para a amostra NP1D,
variando-se o campo magntico aplicado.
Nessa figura, observa-se que quanto maior o campo magntico, maior a

variao de temperatura para essas amostras. Partindo-se da temperatura
ambiente, o incio da faixa de temperatura preferencial de hipertermia (42-44
C)17,45 foi atingido aps, aproximadamente, 3 min, quando um campo de 223
Oe foi aplicado. A variao de temperatura continua aumentando com o tempo,
apesar de ser de maneira mais suave, chegando aos 44 C, em cerca de 6 min.
Fazendo uma projeo simples pelo perfil da curva, aps o tempo requerido
para causar a lise das clulas tumorais (cerca de 30 min), a temperatura ter
aumentado, aproximadamente, 20 C, o que poderia causar danos irreversveis
para as clulas normais circunvizinhas nesse caso. Isso trata de outro aspecto
interessante dessas curvas, que o aumento de sua inclinao com o aumento
do campo magntico aplicado, ou seja, um aumento da taxa de aquecimento.
Em um perfil de curva ideal, a temperatura de hipertermia seria atingida
rapidamente e mantida estvel durante o tempo requerido. Dessa maneira, se
teria um grfico com duas inclinaes: a primeira, referente variao de
temperatura inicial, com a maior inclinao possvel; e a segunda, um patamar
na temperatura desejada. Nesse caso, a temperatura aumenta rapidamente no
incio (primeira inclinao) e depois de certo ponto, continua aumentando,
120
porm com uma taxa menor que no incio (segunda inclinao). O aumento da
primeira inclinao mostra que, com o aumento do campo magntico aplicado,
a variao da temperatura inicial mais rpida, o que de certo modo
desejvel. O aumento mais suave da segunda inclinao pode estar associado
a fatores experimentais e no necessariamente s caractersticas das
nanopartculas, como por exemplo, o aquecimento da bobina dentro da qual as
medidas so realizadas.
A influncia da composio das nanopartculas nas propriedades de
magnetohipertermia tambm foi investigada. A Figura 77 mostra a comparao
entre as curvas de variao de temperatura em funo do tempo de medio
para as amostras NP1A e NP1D, compostas, majoritariamente por goethita e
magnetita, respectivamente. As duas amostras investigadas mostraram um
aumento da temperatura em funo do tempo, sendo que a NP1A apresentou o
menor aumento. Observando os perfis das duas curvas, que fazem parte das
nanopartculas do primeiro grupo, sintetizadas variando-se o tempo de reao,
pode-se inferir que a diminuio do percentual de goethita, cujas propriedades
magnticas so inferiores, e o aumento do percentual de magnetita nas
amostras levou a um aumento significativo na taxa de aquecimento, como
ocorreu com a MS, j discutido anteriormente. importante observar que o
aumento da quantidade de magnetita vem acompanhado de um aumento de
cerca de 8 nm nas dimenses dessas nanopartculas, o que pode tambm ter
influenciado as propriedades de magnetohipertermia.
121
Figura 77. Variao da temperatura em funo do tempo de medio para as amostras NP1A
e NP1D, aplicando um campo de 267 Oe.
A Figura 78 mostra curvas de variao da temperatura em funo do

tempo de medio, variando-se a amplitude do campo magntico aplicado,
para a amostra NPS6.
Figura 78. Variao da temperatura em funo do tempo de medio para a amostra NPS6,
variando-se o campo magntico aplicado.
122
Assim como na Figura 76, quanto maior o campo magntico aplicado,

maior a variao de temperatura para essas amostras. Comparando-se esses
resultados com os resultados obtidos para a amostra NP1D (Figura 79), notase que as nanopartculas da amostra NPS6 aquecem melhor a baixos campos
do que as nanopartculas da amostra NP1D, at um campo crtico (223 Oe). A
partir desse campo, as curvas se cruzam e a situao se inverte, ou seja, as
nanopartculas da amostra NP1D passam a se aquecer mais com o campo
aplicado. Esse fenmeno pode ser compreendido a partir da constante de
anisotropia das nanopartculas.
Pelas curvas de magnetizao, realizadas em frequncia quase esttica
(Figura
66),
observou-se
que
as
nanopartculas
da
amostra
NPS6
apresentaram comportamento superparamagntico nessas condies, em

contraposio com as nanopartculas da amostra NP1D que apresentaram lao
de histerese. Dessa forma, esperado que a constante de anisotropia da
amostra NPS6 seja menor. Uma menor constante de anisotropia responde
melhor a baixos campos, um dos motivos pelo qual a amostra NPS6 aquece
melhor nessas circunstncias. O aquecimento, contudo, depende da rea da
histerese. Aps romper a barreira energtica que estava impedindo a rotao
dos spins na amostra NP1D em baixos campos, ela se aquece muito mais,
devido a sua maior constante de anisotropia. O baixo aquecimento visualizado
nessa amostra a baixos campos, provavelmente, deve-se rotao dos spins
das partculas menores, visualizadas no histograma de distribuio de
tamanhos (Figura 45-b). Esse mesmo comportamento foi descrito previamente
na literatura para outras partculas.101,102
De qualquer maneira, os resultados preliminares obtidos nessa etapa do
estudo foram positivos, indicando que as nanopartculas estudadas tm
potencial para aplicaes magnetohipertermia.
123
(a)
(c)
(b)
(d)
Figura 79. Comparao da variao da temperatura em funo do tempo de medio entre as

amostras NP1D e NPS6, em (a) 169 Oe, (b) 223 Oe, (c) 267 Oe e (d) 312 Oe.
4.3.2. FUNCIONALIZAO DA SUPERFCIE DAS NANOPARTCULAS

Em uma suspenso coloidal de nanopartculas magnticas, h um sutil
equilbrio de foras, principalmente, a fora gravitacional, que compete com a
agitao trmica (movimento Browniano), que mantm as nanopartculas
suspensas; e as foras atrativas de van der Waals e de dipolo magntico. Em
geral, esse balano desfavorvel peptizao do coloide e foras repulsivas
devem ser introduzidas superfcie das partculas, para favorecer esse
equilbrio. Podem ser empregadas vrias estratgias para introduzir essa
repulso no sistema, dentre elas a funcionalizao qumica e a introduo de
cargas eltricas.
Na funcionalizao, em geral, um impedimento estrico entre as
nanopartculas gerado por meio da adsoro de agentes tensoativos em suas
superfcies, contrapondo-se a floculao devido s foras atrativas. J na
introduo de cargas, cria-se uma densidade superficial de carga eltrica nas
124
nanopartculas pela formao de uma dupla camada eltrica, por meio da

adsoro de ons em sua superfcie. Isso d origem a uma repulso
eletrosttica que se contrape s foras atrativas de van der Waals e de dipolo
magntico. H, ainda, a possibilidade de combinar ambas as estratgias, em
especial com a adsoro de polieletrlitos, que gera um impedimento ao
mesmo tempo estrico e elestrosttico (Figura 80). Essa foi a estratgia
adotada nesse estudo com a funcionalizao das superfcies com TPF, que
um polieletrlito de baixa toxicidade, possibilitando a preparao de
suspenses coloidais mais biocompatveis.
Figura 80. Modelo de funcionalizao da superfcie das nanopartculas via adsoro de

polieletrlitos.
Aps funcionalizao das nanopartculas magnticas com TPF, em

especial da amostra NP1D, o sol formado no se mostrou estvel ao longo do
tempo. Um percentual no determinado, se decantava, indicando desequilbrios
entre as foras citadas anteriormente. Nesse momento, duas fases eram
originadas: o decantado (fase preta) e o sobrenadante (fase amarelada).
Imagens obtidas por MET de cada uma dessas fases so mostradas na Figura
81.
125
(a)
(b)
Figura 81. Imagens obtidas por MET das nanopartculas da amostra NP1D, cujas superfcies
foram funcionalizadas com TPF: (a) decantado e (b) sobrenadante. Barra de escala = 0,2 m.
possvel observar que, na imagem do sobrenadante, h uma cobertura

sobre os aglomerados, em um cinza mais claro, que no visualizado na
imagem do decantado. Essa cobertura pode ser associada ao TPF, que se
adsorveu melhor a essas partculas ou que ficou em excesso. importante
ressaltar a polidisperso da amostra NP1D, com 16% das nanopartculas
acima de 100 nm. Trata-se, portanto, de uma amostra com um percentual
razovel de nanopartculas grandes, o que gera dificuldades de mant-las em
suspenso o tamanho ideal gira em torno de 10 nm.
Observou-se
tambm
que
essas
suspenses
apresentaram
propriedades tixotrpicas. Aps certo tempo, elas adquiriram aspecto de gel,

que se alterava pela agitao da suspenso, levando a um fluido com menor
viscosidade.
De qualquer maneira, foram essas as amostras utilizadas nas etapas
seguintes.
4.3.3. ESPALHAMENTO DE LUZ DINMICO
A distribuio do tamanho hidrodinmico das nanopartculas das
amostras NP1D e NPS6 funcionalizadas foram obtidas por espalhamento de
luz dinmico. Entretanto, os clculos realizados pelo prprio equipamento para
obteno desses resultados, basearam-se em nanopartculas com o formato
126
esfrico (ou aproximadamente, esfrico). Para a obteno de resultados

confiveis para as nanopartculas alongadas da amostra NP1D por meio desse
equipamento, seria necessria a introduo de outras bases de clculos,
apropriadas para partculas com o formato em questo. Dessa maneira, os
clculos realizados para as nanopartculas alongadas da amostra NP1D no
foram reportados nesse estudo, por no apresentarem confiabilidade.
A Figura 82 mostra os resultados obtidos para a amostra NPS6.
Nmero (%)
30
20
10
0
1
10
100
Tamanho
(nm)
Size (d.nm)
1000
10000
Figura 82. Histograma de distribuio de tamanho hidrodinmico das nanopartculas da

amostra NPS6.
Observa-se que a maioria das partculas possui de 24 a 80 nm,

aproximadamente, sem levar em considerao o elevado desvio-padro
dessas medidas. Comparando-se esse resultado com o histograma de
distribuio de tamanho obtido por MET para as nanopartculas cujas
superfcies no foram funcionalizadas (Figura 69-d), nota-se o deslocamento
do histograma para a direita. Esse fato pode ser atribudo a dois fatores
distintos. O primeiro diz respeito funcionalizao da superfcie das
nanopartculas com TPF, como mencionado na seo anterior. Assim,
esperava-se que a superfcie das nanopartculas fosse recoberta com ons,
como ilustrado na Figura 80, que mostra o core da partcula e o shell, no caso a
partcula de maghemita e os ons do TPF, respectivamente. Portanto, esse
aumento no tamanho mdio das nanopartculas pode estar associado ao shell
das nanopartculas, quando dispersas em um lquido. O segundo fator associase aglomerao das nanopartculas, cujas superfcies foram funcionalizadas
com TPF, quando dispersas em gua.
127
Apesar da discusso acima, o elevado desvio-padro dessas medidas

no permitem concluses. Mais experimentos so necessrios para a obteno
de resultados com mais reprodutibilidade, que permitiriam concluses parciais.
4.3.4. ENSAIOS DE CITOTOXICIDADE
Os resultados preliminares dos ensaios de viabilidade celular por MTT
para as amostras NP1D e NPS6 esto expressos nas Figuras 83 e 84,
respectivamente. Esses grficos no podem ser comparados diretamente, visto
a
diferena
nas
concentraes
de
nanopartculas
utilizadas.
Essas
concentraes foram obtidas aps a realizao dos testes, partindo-se das

diluies utilizadas e da pesagem da massa da soluo coloidal e do p, aps
secagem em estufa a 50 C.
Os resultados obtidos para a amostra NP1D mostram que, na faixa de
concentrao utilizada, essas nanopartculas apresentam baixa toxicidade.
Alm disso, possvel observar que a viabilidade celular se mantm,
aproximadamente, constante em cerca de 70% com o aumento da
concentrao. Isso um indicativo de que a toxicidade das nanopartculas da
amostra NP1D no dose-dependente nessa faixa de concentrao utilizada.
Figura 83. Viabilidade celular das nanopartculas da amostra NP1D funcionalizadas, em uma
linhagem celular imortalizada derivada de um adenocarcinoma mamrio murino 4T1.
128
J na faixa de concentrao utilizada nos ensaios da amostra NPS6

(Figura 84), a toxicidade parece ser dose-dependente. Adicionalmente,
observa-se que a viabilidade celular diminui drasticamente de 75% para 43%
com o aumento da concentrao de 16 x 1013 partculas/mL para 20 x 1013
partculas/mL.
Figura 84. Viabilidade celular das nanopartculas da amostra NPS6 funcionalizadas, em uma
linhagem celular imortalizada derivada de um adenocarcinoma mamrio murino 4T1..
A Figura 85 permite avaliar alteraes na morfologia celular, aps 24 h

de tratamento com as nanopartculas nas clulas 4T1. Nesse ensaio, no foi
observado morte celular em nenhum dos dois casos. Nota-se que, mesmo nas
imagens em que as clulas esto carregadas de fluido, ainda assim as clulas
se mantm viveis.
129
(a)
(b)
(c)
(d)
Figura 85. Imagens obtidas por microscopia de luz da alterao da morfologia celular aps o
tratamento com nanopartculas. (a) controle; (b) NP1D; (c) NPS6 e (d) NPS6 com concentrao
13
de 20 x 10 partculas/mL.
Esses so ensaios preliminares a respeito da citotoxicidade dessas

nanopartculas. Os experimentos devem ser ajustados, bem como o processo
de funcionalizao da superfcie das nanopartculas, que pareceu no ser
eficiente para as finalidades propostas. Contudo, esses resultados so um
indicativo de que essas suspenses tm baixo potencial de citotoxicidade nas
concentraes e nas clulas utilizadas.
130
Captulo
5
Concluses e Perspectivas
131
5. CONCLUSES E PERSPECTIVAS
5.1. Concluses
O formato alongado das nanopartculas magnticas sintetizadas utilizandose FeSO4.7H2O, FeCl3.6H2O e ureia como reagentes, na proporo de
Fe2+:Fe3+ de 1:2, est relacionado presena do SO42- (e, provavelmente,
sua adsoro especfica aos cristais) e da ureia (cuja termlise leva
gerao homognea de ons hidrxido em soluo). Alm disso, deve-se
considerar a influncia do formato acicular da goethita, que o
intermedirio das snteses utilizando esses reagentes.
As nanopartculas obtidas utilizando-se FeCl2.4H2O, FeCl3.6H2O e ureia

como reagentes (NP2A) diferiram das nanopartculas obtidas utilizando-se
os reagentes FeSO4.7H2O, FeCl3.6H2O e ureia (NP1D) em formato,
dimenso e composio. As primeiras, compostas majoritariamente por
hematita,
apresentaram
dimenses,
aproximadamente,
vezes
comprimento e 3,5 vezes a largura da amostra NP1D, com formato

alongado, porm com largura aumentada. A troca do reagente FeCl2.4H2O
pelo FeSO4.7H2O, na amostra NP1D, no apenas mudou o formato,
levando formao de nanobastes, como tambm influenciou a
composio das amostras obtidas, gerando magnetita, preferencialmente.
A variao da proporo Fe2+:Fe3+ para 1:1 (NP3A) e 2:1 (NP3B), levou a

obteno nanopartculas magnticas compostas por uma fase intermediria
entre a magnetita e a maghemita cbica. O formato predominante dessas
nanopartculas no foi alongado, como objetivou esse estudo. Isso pode ter
relao com o intermedirio das snteses nessas propores, que pode no
ter sido a goethita (formato acicular), visto no haver vestgios de sua
presena nas amostras. Alm disso, as MS dessas amostras foram
superiores da amostra NP1F (Fe2+:Fe3+ = 1:2), porm com maiores de MR
e HC, indicando uma maior tendncia a formao de aglomerados.
Dentre as amostras de nanopartculas magnticas alongadas sintetizadas, a

amostra selecionada para a realizao de ensaios mais focados nas
aplicaes biomdicas foi a amostra NP1D, obtida com 6 h de reao. A
132
escolha dessa amostra em detrimento da amostra com 12 h de reao

(NP1F) foi pautada, principalmente, na maior viabilidade da sntese, em
contraste com as diferenas entre as propriedades das amostras. Essa
seleo no descarta a retomada da amostra NP1F para realizao dos
ensaios citados, a fim de se observar e comparar o seu comportamento.
A utilizao da ureia, ao invs do NH4OH (mais convencional), influencia

diretamente o formato das nanopartculas nas condies de sntese
descritas, pela priorizao da etapa de crescimento cristalino, em
detrimento da nucleao, conduzindo a formao de nanopartculas
alongadas, em contraste com a formao de nanopartculas esfricas.
Com a variao dos tempo de reao, contra-ons, propores entre Fe2+ e

Fe3+ e base utilizada na alcalinizao do meio, foi possvel obter
nanopartculas de xidos de ferro com diferentes dimenses, formatos,
composies e propriedades magnticas. Apesar de apenas duas amostras
serem selecionadas para dar continuidade a esse estudo, uma gama de
opes de partculas foram delineadas para estudos posteriores. Como j
discutido, existem inmeras possibilidades de aplicaes biomdicas in vivo
e in vitro para as quais, algumas dessas amostras sintetizadas podem ser
interessantes.
Apesar de no ser o objetivo desse estudo, utilizando um procedimento

simples, nanopartculas esfricas monodispersas superparamagnticas de
maghemita, com dimetro mdio variando de 11,5 a 19 nm, foram obtidas.
Isso foi atingido por meio de uma sntese do tipo one-pot, onde o Fe2+ e o
Fe3+ foram precipitados em soluo amoniacal, levando a formao de
nanopartculas de magnetita, cuja oxidao a maghemita foi acelerada por
uma etapa de digesto hidrotrmica. Como no foram utilizados reagentes
txicos nem passos adicionais para reduzir a disperso ou oxidar a
magnetita a maghemita, as nanopartculas obtidas apresentam potencial
para aplicaes teragnsticas no campo biomdico. A amostra obtida com
seis horas de reao (NPS6) foi selecionada para as prximas etapas do
estudo utilizando os mesmos critrios de seleo da amostra NP1D. Da
mesma forma, essa seleo no descarta a retomada da amostra NPS9
para realizao dos ensaios citados, a fim de se observar e comparar o seu
comportamento.
133
Os experimentos de hipertermia mostraram que, para ambas as amostras

analisadas (NP1D e NPS6), a variao de temperatura aumenta com o
aumento do campo magntico aplicado. A amostra NPS6 aquece melhor
em baixos campos, devido sua menor constante de anisotropia, at o
campo crtico de 223 Oe, a partir do qual ocorre uma inverso, e a amostra
NP1D passa a aquecer mais, devido sua maior constante de anisotropia.
De qualquer modo, as duas amostras apresentaram potencial para
aplicaes em magnetohipertermia.
A funcionalizao da superfcie das nanopartculas NP1D e NPS6 com TPF

no se mostrou eficiente para as finalidades propostas. As solues
coloidais obtidas no se mostraram estveis ao longo do tempo, em
especial da amostra NP1D, cujas nanopartculas so maiores, gerando
dificuldades para mant-las em suspenso.
Os resultados preliminares de citotoxicidade in vitro das amostras NP1D e

NPS6 pelo mtodo do MTT indicaram que essas nanopartculas
apresentaram baixa toxicidade nas concentraes utilizadas nas clulas
4T1. Esses resultados, contudo, devem ser tomados com cautela, visto a
instabilidade das solues coloidais com que eles foram feitos.
5.2. Perspectivas
Para dar continuidade a esse estudo, algumas sugestes so propostas:
Reduzir
a disperso de tamanhos
sintetizadas
utilizando-se
das
FeSO4.7H2O,
nanopartculas
FeCl3.6H2O
alongadas,
ureia
como
reagentes, na proporo de Fe2+:Fe3+ de 1:2;
Buscar a metodologia mais adequada para a funcionalizao das

superfcies das nanopartculas alongadas e esfricas selecionadas com
TPF e com polmeros hidroflicos biocompatveis;
Buscar
outros
tipos
de
recobrimentos
biocompatveis
para
as
nanopartculas alongadas;
Aprofundar os estudos
de citotoxicidade e biocompatibilidade das
nanopartculas selecionadas;
134
Investigao das propriedades pticas das nanopartculas magnticas

selecionadas;
Aprofundar os estudos de hipertermia magntica, em especial das

nanopartculas alongadas.
135
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Gilchrist, R. K.; Medal, R.; Shorey, W. D.; Hanselman, R. C.; Parrott, J. C.;
Taylor, C. B.; Ann. Surg. 1957, 146, 596.
2. Widder, K. J.; Senyel, A. E.; Scarpelli, D. G.; Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1978,
58, 141.
3. Krishnan, K. M.; IEEE Trans Magn. 2010, 46, 2526.
4. http://inovabrasil.blogspot.com/2010/10/cnpq-edital-para-pesquisa-em.html,
acessado em novembro de 2010.
5. Knobel, M.; Goya, G. F.; Sci. Am. Bras. 2004, 58.
6. Cornell, R. M.; Schwertmann, U.; The Iron Oxides: Structure, Properties,
Reactions, Occurrence and Uses, 1st ed.; VCH Publishers, Inc.: Nova Iorque,
EUA, 1996.
7. Kittel, C., Introduction to Solid State Physics, 8 Ed., John Wiley & Sons, Inc.:
Nova Iorque, EUA, 2005.
8. Shriver, D. F.; Atkins, P. W.; Qumica Inorgnica, 3 ed.; Gomes, M. A. B.,
trad.; Bookman: Porto Alegre, 2003.
9. Teja, A. S.; Koh, P.; Prog. Cryst. Growth Charact. Mater. 2009, 55, 22.
10. Figuerola, A.; Corato, R.; Manna, L.; Pellegrino, T.; Pharmacol. Res. 2010,
62, 126.
11. Knobel, M.; Rev. Bras. Ens. Fs.2000, 22, 387.
12. Kalambur, V. S.; Han, B.; Hammer, B. E.; Shield, T. W.; Bischof, J. C.;
Nanotechnology 2005, 16, 1221.
13. Pankhurst, Q. A.; Connolly, J.; Jones, S. K.; Dobson, J.; J. Phys. D: Appl.
Phys. 2003, 36, R167.
14. Weinberg, J. B. In Wintrobes Clinical Hematology 11th Ed.; Greer, J. P.;
Foerster, J.; Lukens, J. N., eds.; Lippincott Williams & Wilkins Publishers:
Baltimore, 2003, ch. 13.
15. Choi, H. S.; Liu, W.; Misra, P.; Tanaka, E.; Zimmer, J. P.; Ipe, B. I.;
Bawendi, M. G.; Frangioni, J. V.; Nature Biotechnol. 2007, 25, 1165.
16. Arruebo, M.; Fernndez-Pacheco, R.; Ibarra, M. R.; Santamara, J.; Nano
Today 2007, 2, 22.
17. Cole, A. J.; Yang, V. C.; David, A. E.; Trends Biotechnol. 2011, 29, 323.
18 . Decuzzi, P.; Ferrari, M.; Biomaterials 2006, 27, 5307.
19. Decuzzi, P.; Ferrari, M.; Biophys. J. 2008, 94, 3790.
20. Decuzzi, P.; Pasqualini, R.; Arap, W.; Ferrari, M.; Pharm. Res. 2009, 26,
235.
21. Mitragotri, S.; Lahann, J.; Nat. Mater. 2009, 8, 15.
22. Decuzzi, P.; Lee, S.; Bhushan, B.; Ferrari, M.; Ann. Biomed. Eng. 2005, 33,
179.
23. Gavze, E.; Shapiro, M.; J. Fluid Mech. 1998, 371, 59.
24. Champion, J. A.; Mitragotri, S.; PNAS 2006, 103, 4930.
25. Chithrani, B. D.; Ghazani, A. A.; Chan, W. C. W.; Nano Lett. 2006, 6, 662.
26. Geng, Y.; Dalhaimer, P.; Cai, S.; Tsai, R.; Tewari, M.; Minko, T.; Discher, D.
E.; Nat. Nanotechnol. 2007, 2, 249.
27. Cribb, J. A.; Meehan, T. D.; Shah, S. M.; Skinner, K.; Superfine, R.; Ann.
Biomed. Eng. 2010, 38, 3311.
28. http://www.iag.usp.br/~agg110/moddata//GEOMAGNETISMO/Anisotropia%
20magnetic.pdf, acessado em novembro de 2010.
136
29. Rebolledo, A. F.; Bomat-Miguel, O.; Marco, J. F.; Tartaj, P.; Adv. Mat.
2008, 20, 1760.
30. Sharifi, S.; Behzadi, S.; Laurent, S.; Forrest, M. L.; Stroeve, P.; Mahmoudi,
M.; Chem. Soc. Rev. 2012, 41, 2323.
31. Nel, A.; Xia, T.; Madler, L.; Li, N.; Science 2006, 311, 622.
32. Shubayev, V. I.; Pisanic II, T. R.; Jin, S.; Adv. Drug Deliv. Rev. 2009, 61,
467.
33. Senyei, A.; Widder, K.; Czerlinski, G.; J. Appl. Phys. 1978, 49, 3578.
34. Mosbach, K.; Schroder, U.; FEBS Letters 1979, 102, 112.
35.Gupta, A. K.; Gupta, M.; Biomaterials 2005, 26, 3995.
36. Mahmoudi, M.; Sant, S.; Wang, B.; Laurent, S.; Sen, T.; Adv. Drug Deliv.
Rev. 2011, 63, 24.
37. Parveen, S.; Misra, R.; Sahoo, S. K.; Nanomed-Nanotechnol. 2012, 8, 147.
38. Widder, K. J.; Morris, R. M.; Poore, G. A.; Howard, D. P.; Senyei, A. E.; Eur.
J. Cancer Clin. Oncol. 1983, 19, 135.
39. Lbbe, A. S.; Bergemann, C.; Riess, H.; Schriever, F.; Reichardt, P.;
Possinger, K.; Matthias, M.; Drken, B.; Herrinann, F.; Grtler, R.;
Hohenberger, P.; Haas, N.; Sohr, R.; Sander, B.; Lemke, A.; Ohlendorf, D.;
Huhnt, W.; Huhn, D.; Cancer Res. 1996, 56, 4686.
40. Dobson J.; Gene Ther. 2006, 13, 283.
41. Schere, F.; Anton, M.; Schillinger, U.; Henke, J.; Bergemann, C.; Krger, A.;
Gnsbacher, B.; Plank, C.; Gene Ther. 2002, 9, 102.
42. Plank, C.; Schillinger, U.; Scherer, F.; Bergemann, C.; Rmy, J. S.; Krtz,
F.; Anton, M.; Lausier, J.; Rosenecker, J.; Biol. Chem. 2003, 384, 737.
43. Ryoo, S. R.; Jang, H.; Kim, K. S.; Lee, B.; Kim, K. B.; Kim, Y. K.; Yeo, W. S.;
Lee, Y.; Kim, D. E.; Min, D. H.; Biomaterials 2012, 33, 2754.
44. Jordan, A.; Scholz, R.; Wust, P.; Fhling, H.; Felix, R.; J. Magn. Magn.
Mater. 1999, 201, 413.
45. Ito, A.; Shinkai, M.; Honda, H.; Kobayashi, T.; J. of Biosci. Bioeng. 2005,
100, 1.
46. Van der Zee, J.; Gonzlez, D. G.; van Rhoon, G. C.; van Djik, J. D. P.; van
Putten, W. L. J.; Hart, A. A. M.; Lancet 2000, 355, 1119.
47. Durn, N.; Mattoso, L. H. C.; Morais, P. C.; Nanotecnologia: Introduo,
Preparao e Caracterizao de Nanomateriais e Exemplos de Aplicao;
Artliber Editora Ltda.: So Paulo, 2006.
48. Habash, R. W. Y.; Bansal, R.; Krewski, D.; Alhafid, H. T.; Crit. Rev. Biomed.
Eng. 2006, 34, 491.
49. Stauffer, P. R.; Cetas, T. C.; Fletcher, A. M.; DeYoung, D. W.; Dewhirst, M.
W.; Oleson, J. R.; Roemer, R. B.; IEEE Trans. Biomed. Eng. 1984, BME-31, 76.
50. Jordan, A.; Scholz, R.; Wust, P.; Fawling, H.; Felix, R.; J. Magn. Magn.
Mater. 1999, 201, 413.
51. Guedes, M. H.; Sadeghiani, N.; Peixoto, D. L. G.; Coelho, J. P.; Barbosa, L.
S.; Azevedo, R. B.; Kckelhaus, S.; Silva, M. F.; Moraes, P. C; Lacava, Z. G.
M.; J. Magn. Magn. Mater. 2005, 293, 283.
52. Jzefczak, A.; Hornowski, T.; Skumiel, A.; abowski, M.; Timko, M.;
Kopansk, P.; Konerack, M.; Szlaferek, A.; Kowalski, W.; J. Magn. Magn.
Mater. 2009, 321, 1505.
53. Meenach, S. A.; Hilt, J. Z.; Anderson, K. W.; Acta Biomater. 2010, 6, 1039.
137
54. Johanssen, M.; Gneveckow, U.; Thiesen, B.; Taymoorian, K.; Cho, C. H.;
Waldfner, N.; Scholz, R.; Jordan, A.; Loening, S. A.; Wust, P.; Eur. Urol. 2007,
52, 1653.
55. Jordan, A.; Scholz, R.; Maier-Hauff, K.; Johannsen, M.; Wust, P. Nadobny,
J.; Schirra, H.; Schmidt, H.; Deger, S.; Loening, S.; Lanksch, W.; Feliz, R.; J.
Magn. Magn. Mater. 2001, 225, 118.
56. Maier-Hauff, K.; Rothe, R.; Scholz, R.; Gneveckow, U.; Wust, P.; Thiesen,
B.; Feussner, A.; Deimling, A.; Waldoefner, N.; Felix, R.; Jordan, A.; J.
Neurooncol. 2007, 81, 53.
57. Tiefenauer, L. X. Chapter 29: Magnetic Nanoparticles As Contrast Agents
for Medical Diagnosis In Nanotechnology in Biology and Medicine: Methods,
DeVices, and Applications; Vo-Dinh, T., Eds.; CRC Press, Taylor and Francis:
Boca Raton, FL, 2007; pp 1-20.
58. http://www.ige.unicamp.br/site/aulas/186/Espinelios.pdf, acessado em
dezembro de 2010.
59. Lee, J. D.; Qumica Inorgnica No To Concisa; Toma, H. E.; Araki, K.;
Rocha, R. C., trad.; Editora Edgard Blcher Ltda.: So Paulo, 2001.
60. Sugimoto, T.; Wang, Y.; J. Coll. Int. Sci. 1998, 207, 137.
61. Ozaki, M.; Kratohvil, S.; Matijevi, E.; J. Coll. Int. Sci. 1984, 102, 146.
62. Sugimoto, T.; Muramatsu, A.; Sakata, K.; Shindo, D.; J. Coll. Int. Sci. 1993,
158, 420.
63. Stachen, M.; Morales, M. P.; Ocaa, M.; Serna, C. J.; Phys. Chem. Chem.
Phys. 1999, 1, 4465.
64. Shen, H. X.; Yao, J. L.; Gu, R. A.; Trans. Nonferrous Met. Soc. China 2009,
19, 652.
65. Serna, C. J.; Ocaa, M.; Iglesias, J. E.; J. Phys. C: Solid State Phys. 1987,
20, 473.
66. Radeva, T.; Colloids Surf., A 2002, 209, 219.
67. Ozaki, M.; Matijevi, E.; J. Coll. Int. Sci. 1985, 107, 199.
68. Sugimoto, T.; Khan, M. M.; Muramatsu, A.; Colloids Surf., A 1993, 70, 167.
69. Ocaa, M.; Morales, M. P.; Serna, C. J.; J. Coll. Int. Sci. 1999, 212, 317.
70. Harris, D. C.; Anlise Qumica Quantitativa, 5 ed.; Riehl, C. A. S.,; Guarino,
A. W. S., trad.; LTC Livros Tcnicos e Cientficos Editora S.A.: Rio de Janeiro,
2001.
71. Sugimoto, T.; Itoh, H.; Mochida, T.; J. Coll. Int. Sci. 1998, 205, 42.
72. Fischer, W. R.; Schwertmann, U.; Clays Clay Miner. 1975, 23, 33.
73. Hu, C.; Gao, Z.; Yang, X.; Mater. Chem. Phys. 2007, 104, 429.
74. Wang, G.; Li, W.; Jia, K.; Spliethoff, B.; Schth, F.; Lu, A.; Appl. Catal., A
2009, 364, 42.
75. Mosmann, T.; J. Immunol. Methods 1983, 65, 55.
76. Aphesteguy, J. C.; Jacobo, S. E.; Schegoleva, N. N.; Kurlyandskaya, G. V.;
J. Alloys Compd. 2010, 495, 509.
77. Mincheva, R.; Stoilova, O.; Penchev, H.; Ruskov, T.; Spirov, I.; Manolova,
N.; Rashkov, I.; Eur. Polym. J. 2008, 44, 615.
78. Valenzuela, R.; Fuentes, M. C.; Parra, C.; Baeza, J.; Duran, N.; Sharma, S.
K.; Knobel, M.; Freer, J.; J. Alloys Compd. 2009, 488, 227.
79. Jacintho, G. V. M.; Brolo, A. G.; Corio, P.; Suarez, P. A. Z.; Rubim, J. C.; J.
Phys. Chem. C 2009, 113, 7684.
138
80. Schwertmann, U.; Cornell, R. M.; Iron Oxides in the Laboratory: Preparation
and Characterization; VCH Publishers, Inc.: Nova Iorque, EUA, 1991.
81. Lian, S.; Wang, E.; Kang, Z.; Bai, Y.; Gao, L.; Jiang, M.; Hu, C.; Xu, L.; Solid
State Commun. 2004, 129, 485.
82. Skoog; D. A.; West, D. M.; Holler, F. J.; Crouch, S. R.; Fundamentos de
Qumica Analtica, 8 ed.; Editora Thompson: So Paulo, 2006.
83. Cullity, B. D.; Elements of X-Ray Diffraction; Addison-Wesley Publishing
Company, Inc.: Massachusetts, EUA, 1956.
84. Maity, D.; Agrawal, D. C.; J. Magn. Magn. Mater. 2007, 308, 46.
85. Kandori, K.; Shigetomi, T.; Ishikawa, T.; Colloids Surf., A 2004, 232, 19.
86. Nasrazadani, S.; Raman, A.; Corros. Sci. 1993, 34, 1355.
87. Ruan, H. D.; Frost, R. L.; Kloprogge, J. T.; Spectrochim. Acta, Part A 2001,
57, 2575.
88. Nakamoto, K.; Infrared and Raman Spectra of Inorganic and Coordination
Compounds, 4 ed.; John Wiley & Sons: Nova Iorque, EUA, 1986.
89. Musi, S.; Maljkovi, M.; Czak-Nagy, I.; Mater. Lett. 1997, 31, 43.
90. Ruan, H. D.; Frost, R. L.; Kloprogge, J. T.; Spectrochim. Acta, Part A 2001,
57, 2575.
91. Ruan, H. D.; Frost, R. L.; Kloprogge, J. T.; Duong, L.; Spectrochim. Acta,
Part A 2002, 58, 967.
92. Pardoe, H.; Chua-anusorn, W.; St. Pierre, T. G.; Dobson, J.; J. Magn. Magn.
Mater. 2001, 225, 41.
93. Itoh, H; Sugimoto, T.; J. Colloid Interface Sci. 2003, 265, 283.
94. Morales, M. P.; Veintemillas-Verdaguer, S.; Montero, M. I.; Serna, C. J.;
Chem. Mater. 1999, 11, 3058.
95. Tartaj, P.; Morales, M. P.; Veintemillas-Verdaguer, S.; Gonzlez-Carreo,
T.; Serna, C. J.; J. Phys. D: Appl. Phys. 2003, 36, R182.
96. Gomes, J. A.; Sousa, M. H.; Tourinho, F. A.; Aquino, R.; Silva, G. J.;
Depeyrot, J.; Dubois, E.; Perzynski, R.; J. Phys. Chem. C 2008, 112, 6220;
97. Jolivet, J. P.; Tronc, E.; J. Coll. Int. Sci. 1988, 125, 688;
98. Morales, M. P.; Pecharroman, C.; Gonzalez Carreo, T.; Serna, C. J.; J.
Solid State Chem. 1994, 108, 158;
99. Oliveira, F. C. C.; Effenberger, F. B.; Sousa, M. H.; Jardim, R. F.; Kiyohara,
P. K.; Dupont, J.; Rubim, J. C.; Rossi, L. M.; Phys. Chem. Chem. Phys. 2011,
13, 13558;
100. Rubim, J. C.; Sousa, M. H.; Silva, J. C. O.; Tourinho, F. A.; Braz. J. Phys.
2011, 31, 402.
101. Bordelon, D. E.; Cornejo, C.; Grttner, C.; Westphal, F.; DeWeese, T. L.;
Ivkov, R.; J. Appl. Phys. 2011, 109, 124904.
102. Verde, E. L.; Landi, G. T. Carrio, M. S.; Drummond, A. L.; Gomes, J. A.;
Vieira, E. D.; Sousa, M. H.; Bakuzis, A. F.; J. Appl. Phys., in press.
139

2012 AdrianaLinharesDrummond

Hochgeladen von

Dokumentinformationen

Originaltitel

Copyright

Verfügbare Formate

Dieses Dokument teilen

Dokument teilen oder einbetten

Freigabeoptionen

Stufen Sie dieses Dokument als nützlich ein?

Sind diese Inhalte unangemessen?

Copyright:

Verfügbare Formate

2012 AdrianaLinharesDrummond

Hochgeladen von

Copyright:

Verfügbare Formate

Universidade de Braslia UnB

DESENVOLVIMENTO DE SISTEMAS MAGNTICOS

Orientadora: Profa. Dra. Maria Jos Arajo Sales

Universidade de Braslia UnB

DESENVOLVIMENTO DE SISTEMAS MAGNTICOS

ADRIANA LINHARES DRUMMOND

Tese de Doutorado apresentada ao

Orientadora: Profa. Dra. Maria Jos Arajo Sales

A Deus, por guiar os meus passos, iluminar o meu caminho e ancorar a

ensinamentos, pela pacincia e pela sua imensa disponibilidade.

sempre parceira de doutorado, Nizamara Simenremis Pereira, por

As pesquisas envolvendo a sntese e a aplicao de sistemas

FeSO4.7H2O, FeCl3.6H2O e ureia, na proporo de Fe(II):Fe(III) = 1:2 foi a mais

OBJETIVO GERAL .............................................................................. 4

OBJETIVOS ESPECFICOS .................................................................. 4

2. REVISO BIBLIOGRFICA ......................................................................... 6

2.2. Parmetros que Influenciam a Eficincia dos Sistemas Magnticos

PROPRIEDADES MAGNTICAS ........................................................... 8

Qumica de Superfcie e Biocompatibilidade ....................................... 23

Aplicaes Biomdicas ....................................................................... 24

SISTEMA DE CARREAMENTO DE DROGAS ......................................... 24

As Nanopartculas Magnticas ............................................................ 30

ESTRUTURA CRISTALINA DA MAGNETITA E MAGHEMITA .................... 30

PROPRIEDADES MAGNTICAS DA MAGNETITA E MAGHEMITA ............. 33

NANOPARTCULAS MAGNTICAS ALONGADAS .................................. 34

3. PARTE EXPERIMENTAL ........................................................................... 37

SNTESE DAS NANOPARTCULAS ...................................................... 37

CARACTERIZAO DOS MATERIAIS .................................................. 40

REALIZAO DE ENSAIOS VOLTADOS PARA APLICAES BIOMDICA..45

4. RESULTADOS E DISCUSSO .................................................................. 50

Snteses e Caracterizaes do Primeiro Grupo .................................. 53

INFLUNCIA DO TEMPO DE REAO ................................................. 53

INFLUNCIA DOS CONTRA-ONS ....................................................... 74

INFLUNCIA DA PROPORO ENTRE Fe(II) E Fe(III) ............................ 90

INFLUNCIA DA BASE UTILIZADA NA ALCALINIZAO DO MEIO ........... 99

Snteses e Caracterizaes do Segundo Grupo ............................... 107

Realizao de Ensaios Voltados para as Aplicaes Biomdicas .... 119

MAGNETOHIPERTERMIA ................................................................ 119

FUNCIONALIZAO DA SUPERFCIE DAS NANOPARTCULAS............. 124

ESPALHAMENTO DE LUZ DINMICO ................................................ 126

ENSAIOS DE CITOTOXICIDADE ....................................................... 128

5. CONCLUSES E PERSPECTIVAS......................................................... 132

Perspectivas ...................................................................................... 134

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ............................................................... 136

Tabela 19. Indexao dos picos de difrao de raios X para as nanopartculas

Figura 1. Nanopartculas magnticas em biomedicina. (a) A superfcie das

magnticos em um material antiferromagntico. .............................................. 11

magnticos em um material ferrimagntico. ..................................................... 11

nanopartculas magnticas para tumores. (a) EPR; (b) direcionamento

Figura 13. As partculas tendem a se acumular nas proximidades das paredes

Figura 45. Histogramas de distribuio de comprimento (1) e largura (2) para a

Figura 63. Histogramas de distribuio de comprimento (1) e largura (2) para a

Figura 79. Comparao da variao da temperatura em funo do tempo de

nanopartculas da amostra NPS6

funcionalizadas, em uma linhagem celular imortalizada derivada de um

LISTA DE ABREVIATURAS E ACRNIMOS

Brunauer, Emmet e Teller (mtodo de determinao de rea

Cbico de face centrada

Campo magntico alternado

Empacotamento compacto cbico

Efeito de permeabilidade e reteno aumentadas (Enhanced

Food and Drug Administration

Espectroscopia no infravermelho com transformada de