Fisiologa Vegetal

TEMA 10:
Las Giberelinas (GA)

Berta Dopico
rea Fisiologa Vegetal
Facultad de Biologa

Las giberelinas: generalidades

Se caracterizaron en 1950 en el hongo Gibberella fujikuroi
Hay 136 descritas, no todas son activas ni todas se encuentran en
plantas superiores
-Algunas tienen 20 tomos de carbono (GAs C20) y otras 19 (GAs C19)
-Se nombran con la palabra GA y un subndice que indica el orden en el que
se encontraron. Por ejemplo: GA3, el cido giberlico, es una C19 aislada de
hongos y disponible comercialmente
-Se ha comprobado que tienen
requerimientos estructurales estrictos,
siendo GA1 y GA4 las ms activa (C19
aisladas de plantas y responsables del
efecto en el crecimiento)

Se valoran por bioensayos y por HPLC + gases + masas

Estructura qumica
Tienen naturaleza terpenoide: son diterpenos
tetracclicos derivados del esqueleto ent-giberelano
de 20 tomos de carbono aunque pueden perder el
C 20 y tenemos las Giberelinas C19
Precursor

Todos los terpenoides se forman a

partir de unidades de isopreno y
las GAs se forman por la unin 4
isoprenos dan un diterpeno de 20
tomos de carbono

Metabolismo: biosntesis e inactivacin

Lugar de sntesis
-Meristemos apicales de tallo y raz, hojas
jvenes, entrenudos superiores, semillas
inmaduras, anteras
-Las formas activas se producen en la clula o
en las clulas prximas al sitio de accin

Biosntesis
-En su biosntesis participan 3 compartimentos celulares: plastos, R.E. y citosol
-1 etapa en los plastos
Formacin de IPP (puede ser citoslico)
Formacin del geranilgeranil pirofosfato
Ciclacin para obtener ent-kaureno (CPS + KS) que sale

-2 etapa en el R.E.
El ent-kaureno sufre 2 oxidaciones sucesivas (KO + KAO)
Contraccin del anillo B para dar GA12 que sale al citosol

Metabolismo: biosntesis e inactivacin

-3 etapa en el citosol
Se producen -hidroxilaciones en el C-13, C-3 o
ambos, la ms frecuente una hidroxilacin en el
C-13 de la GA12 para dar la GA53
Se producen oxidaciones sucesivas en el C-20
(dioxigenasas), al final se pierde este carbono
como CO2
CH2
CH2OH
CHO
Se producen las GAs activas: GA1 y GA4 (GA3 y GA7 )

Inactivacin
-Se inactivan por hidroxilacin del C-2

Formas activas: requisitos

Las GAs activas son/tienen:
-C19
-Grupo hidroxilo en en posicin 3
-Grupo carboxilo en C6

La actividad es independiente de:

-la presencia de un grupo -OH en posicin 13
-la existencia de un doble enlace entre C1 y C2

Inactivacin por la presencia de:

-un grupo -OH en el C2
-un grupo -COOH en C20 (GAs C20)

Metabolismo: biosntesis e inactivacin

Enzimas de sntesis:
-GA 20-oxidasa
Cataliza las reacciones sucesivas de
oxidacin del C-20 entre la GA53 y la
GA20 y entre la GA12 y la GA9

-GA 3-oxidasa
Cataliza la -hidroxilacin del C-3 de la
GA20 y GA9 para producir GAs activas:
GA1 y GA4

Enzima de inactivacin: GA 2-oxidasa

Cataliza la adicin del grupo hidroxilo del C-2 para inactivar la GA1 y la GA4

Metabolismo: biosntesis
Mutantes en enzimas de sntesis

Conjugacin y transporte
Conjugacin

ster

ter

-Se conjuga con azcares: glucosa

-Son formas inactivas que pueden servir
como almacn
-Las formas conjugadas se transportan y se pueden convertir en GAs activas

Transporte
-No se conoce bien y parece que pueden actuar distal y/o localmente
-Las del tallo por el floema y races por xilema?
-Se transportan los intermediarios de la sntesis o las formas conjugadas
-Parece que actan cerca de dnde se producen las formas activas, que no
se transportan o solo se produce un transporte clula-clula

Metabolismo: regulacin de la biosntesis

Autorregulacin (DELLA)
Las GAs modifican la transcripcin de las
enzimas de sntesis (inhiben) y degradacin
(activan) que estn controladas por DELLA

Regulacin ambiental
-La luz por el fitocromo regula la sntesis de GA1 activando GA3ox
-El fotoperiodo (bolting/tuberizacin)
-La temperatura. El fro acumula ent-kaureno

Metabolismo: regulacin de la biosntesis

Regulacin por otras hormonas: IAA, BR y ABA
-El IAA promueve la sntesis de GAs (y a la inversa) induce la
transcripcin de GA20ox (tambin BR) y GA3ox e inhibe la GA2ox
-BR induce sntesis
-ABA inhibe sntesis

Regulacin por factores de transcripcin

-El KNOX reprime GA20ox
-RG5 induce KO

Modelo

Percepcin y transduccin: mtodos de estudio

Estudio con 3 tipos de mutantes que no responden a GA realizado
principalmente en crecimiento, movilizacin de reservas y
floracin:
-Tipo 1: Regulador positivo inactivo
Mutantes que dan plantas enanas con mutacin recesiva
Mutante de prdida de funcin
La ruta de las GAs no se produce nunca

-Tipo 2: Regulador negativo inactivo

Mutantes que dan plantas altas con mutacin recesiva
Mutante de prdida de funcin
La ruta de las GAs est siempre activa

-Tipo 3: Regulador negativo activo constitutivo

Mutantes que dan plantas enanas con mutacin semidominantes
Mutante de ganancia de funcin
La ruta de las GAs no se produce nunca

Percepcin: receptores
Soluble (nuclear): GID1 (mutante tipo 1)
-GID1 es una protena alostrica activada por GA que se ancla en un bolsillo
-Necesita que las GAs tengan: -COOH en C6 (puente H2 con serina y agua) y
3-OH (puente H2 con tirosina y agua)
-La unin a las GAs provoca un cambio conformacional en GID1 que hace que
se cierre el extremo N-terminal sobre GA y esto le permite interaccionar
con las protenas DELLA y provocar cambios en GRAS

Transduccin
Estudiadas en 3 procesos: Crecimiento, Floracin y movilizacin de
reservas, que presentan aspectos comunes
Parecen existir 2 vas diferentes:
-Rutas dependientes de Ca++
Activacin de calmodulina y kinasas
No hay variaciones en la expresin gnica (trfico vesicular y secrecin)

-Rutas independientes de Ca++

Variaciones expresin gnica va ubiquitina-proteosoma
Elementos:
-Factores reguladores activadores (positivos) como las protenas F-box y represores
(negativos) algunos degradados por ubiquitina como DELLA
-Genes de respuesta primaria (GAMYB) que codifican factores de transcripcin tipo
MYB
-Genes de respuesta secundaria (-amilasa) cuyos promotores presentan la secuencia
GARE (dominio GARC)

Transduccin: ruta independiente del Ca++

Reguladores negativos: Protenas DELLA (grupo de protenas GRAS)
-Protenas de localizacin nuclear que no son FT
-5 protenas: GAI (GA-insensitive), RGA (represor
ga1), RGA2, RGL1 y RGL3
-Presentan 2 dominios:
Dominio DELLA (regulador) relacionado
con la degradacin por GA y reconocido
por el receptor
Dominio GRAS (represor) relacionado
con unin a protenas (F-box) y el
bloqueo indirecto de genes de
respuesta primaria (no se une a DNA
parece que se une a FT)

-Estas protenas son degradadas en presencia de GA por el sistema

ubiquitina-proteosoma

Transduccin: ruta independiente del Ca++

-Las mutaciones en los diferentes dominios producen mutantes que
presentan fenotipos distintos
Mutantes en GRAS: altos
Mutantes en DELLA: enanos

Transduccin: ruta independiente del Ca++

Regulador negativo: SPY (similares a N-acetil glucosamina transferasa)
-Son enzimas que glicosilan protenas, lo que puede bloquear los sitios de
fosforilacin por PK (impiden la fosforilacin)
-No se sabe sobre qu protenas actan aunque para algunos actan sobre
protena DELLA
Si actan sobre DELLA es impidiendo su fosforilacin (si existe) e
induciendo su estabilidad (en ausencia de GAs)
Inhiben reguladores positivos (PHOR1)

-Acta en diferentes procesos de respuesta a GAs

-Puede ser un regulador positivo de las respuestas a CKs

Transduccin: ruta independiente del Ca++

Reguladores positivos
-GID2 (arroz) y SLY1 (arabidopsis)
Protena F-box
Pertenece al complejo SCF
Protena diana: Protenas DELLA

-PHOR1
Protena armadillo con dominio autoinhibitorio
Activa la respuesta a Gas por modificacin gnica
No se sabe si acta a travs de la inhibicin de DELLA

-FT: RSG, GAMYB?

Transduccin: ruta independiente del Ca++

La llegada de las GAs provoca:
-Ensamblamiento sistema ubiquitina
-Inactivacin del represor DELLA
-La activacin de protenas intermedias (FT) entre el represor y los genes

Transduccin: ruta independiente del Ca++

Genes de respuesta primaria
-Se encuentran bloqueados por las protenas DELLA
-3 grupos de genes:
-Codifican enzimas de la biosntesis de GAs
-Codifican los receptores de GAs
-Codifican factores transcripcin tipo MYB y bHLH

-Genes que codifican FT tipo MYB (GAMYB)

-Activan los genes de respuesta tarda con secuencias GARE
-Implicados en los 3 procesos
-Interactan con una PK que acta como represor del FT
-Controlados post-transcripcionalmente por miRNA (floracin)

Transduccin: ruta independiente del Ca++

Genes de respuesta secundaria
-Modulados por diferentes factores de transcripcin: MYB
por HRT que son desplazados MYB) y BPBF y SAD (unen a cajas
que se unen a las secuencias cis

(bloqueados
pirimidinas)

-Regiones CIS (-amilasa)

-Secuencias GARE (TAACAAA): Especficas, forman complejo GARC en
el que se incluyen cajas de pirimidinas
-Secuencias de expresin temporal y espacial
-Secuencias de intensidad de la expresin

-Otros genes de respuesta secundaria: Ciclinas, proteasas, XTH, LEAFY,

y -tubulinas

Transduccin: interaccin de ambas rutas

Esquema general

Funciones fisiolgicas: mtodos de estudio

Estudio con mutantes
-Afectados en la biosntesis: Plantas enanas que responden a GAs
-Afectados en la inactivacin de GAs (no inactivan): Plantas largas y
delgadas (slender)
-Afectados en la transduccin: Plantas enanas o alargadas que NO
responden a GAs
Enanos

Funciones

Slender

-Crecimiento
-Fisiologa de la semilla
-Fisiologa reproductiva
-Otras funciones

= mutante

Funciones: crecimiento
Las GAs no tienen un efecto tan general en el crecimiento como las
auxinas. Actan en 3 procesos:
-Induce la elongacin de entrenudos en plantas enanas
(enanismo por falta de GAs o por ser insensibles)
-Induce el crecimiento del tallo floral en plantas de
crecimiento en roseta (bolting)
-Induce crecimiento de hipocotilos y
entrenudos de cereales (sobre todo
sumergidos: arroz)

Afectan a 2 procesos: estimulan la divisin y la elongacin celular

Funciones: crecimiento
Efecto de las GAS en la divisin celular
-Inducen la expresin de genes de
protena kinasas dependientes de ciclina
(CDPK)
-Las CDPK regulan el ciclo celular y las
GAs activan la transicin desde la fase
G1 a la S
-Promueven la elongacin de clulas meristemticas e inhiben la
conservacin del meristemo
-Importante en meristemos intercalares (arroz)

Funciones: crecimiento
Efecto de las GAs en la elongacin celular
-Aumentan la extensibilidad (m) y la fuerza de relajacin sin acidificar el
medio y disminuyen la presin umbral ()
-Pueden aprovechar la acidificacin mediada por IAA
-La respuesta tras 40(arroz) o 3 h (guisante enano)
-Las respuestas de IAA y GAs son aditivas: mecanismos diferentes. Accin
combinada (IAA puede aumentar las GAs activas)
-No se conoce el mecanismo de induccin: XTH y expansinas (igual que IAA
pero por diferentes rutas)
-En la ruta de transduccin estn implicados los represores del efecto de
las GAs, las protenas DELLA

Otras funciones
Funciones en la fisiologa de la semilla
-Contribuyen a la salida de la dormicin
-Inducen la germinacin
-Favorecen la movilizacin de reservas

Funciones en la fase reproductora

-Transicin de juvenil a adulto

DC

-Desarrollo de la flor: iniciacin de la floracin

-Desarrollo anteras
-Determinacin del sexo
-Asentamiento del fruto

Otras funciones
-Senescencia de las hojas

DC + GAs

DL

Aplicaciones de las GAs

Produccin de frutos
-Racimos ms grandes en uvas sin semillas
-Cuajado del fruto en ctricos
-Aumento tamao y calidad en manzana
-Frutos partenocrpicos en manzana y pera
-Retrasa senescencia de naranjas

Malteado de la cebada
-Se germina la cebada para producir enzimas hidrolticas
-Las GAs potencian y adelantan el proceso

Aplicaciones de las GAs

Incremento de la produccin de azcar de caa
-La caa de azcar (Saccharum officinarum) almacena
sacarosa en los entrenudos
-Las GAs potencian la elongacin de
los entrenudos y por tanto la
produccin de sacarosa

Favorece la regeneracin de bosques de conferas

-Induce el paso de jvenes a adultos

Otras aplicaciones
-Desarrollo del tallo de la alcachofa y del peciolo del apio
-Induce la germinacin en arroz y la floracin precoz en calabaza
-Rompe la latencia de la tuberizacin en patata
-Incrementa las flores masculinas en cucurbitceas

Aplicaciones de los inhibidores de GAs

Reducir el desarrollo de especies

-Poinsetia, crisantemo
-Plantas ornamentales en maceta
-Ancymidol (A-rest), Paclobutrazol (Bonzi): inhibidores de la sntesis

Evitar el encamado de los cereales

-Tallos ms cortos reducen el encamado

Evitar el crecimiento excesivo de rboles frutales

Evitar el crecimiento de arbustos al borde de la carretera

Aplicaciones de las plantas transgnicas con GA modificada

Manipulacin de los genes de GA3ox, GA2ox y GA20ox
-Plantas enanas: Reduce el nivel de GAs activas (GA1)
Bloqueando el GA20ox y GA3ox o Sobre-expresando GA2ox
Estas transgnicas no florecen pero si lo que
falla es la sntesis se pueden pulverizar con
GAs

-Se ha conseguido retrasar el bolting en la

remolacha (reduce GAs)
-Aumento del crecimiento en Populus
(aumenta GAs)
-Se aplica al csped para que crezca poco y no florezca (reduce GAs)