ENZIMOLOGIA 1. a)Enlaecuacién: P+1—~—— PL, escribir una expresién que esté relacionada la funcién de Scatchar y Ia constante de disociacién. b) eQué valor deberia tener la concentracién del ligando en relacién con la constante de disociacién (en términos algebraicos) para saturar en un 50% a la proteina? 2. La velocidad de hidrdlisis de un sustrato por una enzima alostérica se ha estudiado en presencia de un activador a concentracién saturante (experimento A), de un inhibidor a concentracién saturante (experiencia B) y en ausencia de un activador y de un inhibidor (experiencia C). las velocidades de la reaccién, expresadas en unidades arbitrarias son las siguientes: $(105)M [A B Cc 1 062 on 0375 2 ii 018 0,65 35 167 027 1 5 24 033 125 75 26 oat 155 10 295 047 175 Zona | ae 0,59 22 35 42 067 2.5 50 44 aaa Ze a. Pardmetros cinéticos de A, B, C b. éQué modelo permite interpretar estos resultados? c. éCual es la constante de Transformacién? 3. Después de la purificacién de una enzima alostérica que sigue el modelo K de MWC, el equilibrio alostérico se halla desplazado casi por completo hacia la forma T. éCudl seré el comportamiento de la enzima respecto a la fijacién de sustrato? Cudl respecto a la fijacion de un inhibidor alostérico? 4. Un experimentador ha aislado un enzima que exhibe comportamiento cooperative respecto al sustrato. Por didlisis en equilibrio, se demuestra que el enzima fija, como maximo, dos moléculas de un andlogo de sustrato. Recomienza la experiencia en presencia de un inhibidor y encuentra que el enzima fija todavia como miximo dos moléculas del anélogo de sustrato. Dedujo las conclusiones siguientes: a) Elenzima obedece al modelo K del MWC y b) La forma T puede fijar el andlogo de sustrato. ¢Estén justificadas estas conclusiones? Explique. 5. Un enzima posee cuatro subunidades y se comporta de modo Michaeliano, respecto a su substrato. éPuede tratase de un enzima alostérico que presente por otra parte, fenémenos cooperativos? éCudl seré el aspecto de la curva de saturacién de este enzima por un activador alostérico? éy por un inhibidor alostérico? éCudl seré el aspecto de la curva de saturacién por el sustrato en presencia de un activador o de un inhibidor?10. 1. 12. aPueden existir inhibidores competitivos en el caso de un enzima alostérico que ‘obedece al modelo V de Monod ~ Wyman — Changeux? éQué caracteristicas deben presentar? Se ha aislado un enzima alostérico que obedece al modelo K de Monod ~ Wyman — Changeux. Se ha encontrado una sustancia A, que lo activa, y otra |, que lo inhibe. COmo puede trabajarse para saber sila forma T fija 0 no el substrato? Demuéstrese que la ecuacién general MWC de cuatro sitios solamente predice cooperatividad positiva y nunca cooperatividad negativa Citar los postulados del modelo concertado MWC; ventajas y desventajas, diferencias del modelo concertado y secuencial. Deducir la funcién de saturacién para un enzima con n subunidades, predecir las posibles variantes del modelo con su respectiva funcién de saturacién para cada variante; ventajas y desvertajas de cada una de ellas. Deducir fa funcién de saturacién para el modelo secuencial considerando una proteina dimérica, explicando cada paso, en caso se asemela a una saturacién michaelina, explicar. a) £Qué caracteristicas presentan los enzimas alostéricos? b) gQué caracteristicas comunes presentan la activacién de un zimégeno pancredtico en general y la activacién de la cascada de la coagulacién sanguinea?