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Bsicos
So aqueles que permitem o crescimento bacte riano, sem satisfazer , contudo nenhuma
exigncia em especial (Ex. caldo e gar simples).
Especiais
Meios de pr-enriquecimento
So aqueles que permitem a dessensibiliza o de microrganismos injuriados, i.e., para
amos tras que sofreram algum tipo de tratamento (trmico ou qumico). Ex. gua peptonada,
caldo lactosado (isolamento de salmonelas de leite em p).
Meios de Enriquecimento
Quando proporcionam nutrientes adequa dos ao crescimento de microrganismos presentes
us ualmente em baixos nmeros ou de crescimento lento, bem como microrganismos
exigentes e fastidiosos. Esses meios tm a propriedade de estimular o crescimento de
determinados microrganismos, mas existem algun s que tambm podem inibir o crescimento
de outros. Ex. Caldo Tetrationato e Selenito -Cistina para cultivo de Salmonelas (lquidos ),
Caldo Tioglicolato para Clostridium perfringens .
Diferenciais
Quando contm substncias que permitem estabelecer diferena s entre microrganismos
muito parecidos, tais como meio de Teague ou Eosina Azul de Metileno (diferencial para
coliformes), gar MacConkey para a diferenciao de enterobactrias, gar sangue, gar
Baird-Parker para isolamento e diferenciao de cocos Gram positivos (slidos).
Seletivos
Os que contm substncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de
microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Exemplo: meios com telurito de
potss io (para isolamento de Corynebacterium diphtheriae ), gar Salmonella -Shigella (SS) e
gar MacConkey, meios com sais biliares e verde brilhante para isolamento seletivo de
Salmonella , meios com 7,5% de cloreto de sdio, meio Baird -Parker, para isolamento de
Staphylococcus aureus , meios com antibiticos para isolamento de diversos microrganismos
(TSC, SFP , meio de Blaser, meio de Skirrow , etc.). A maioria deles tambm diferencial,
permitindo diferenciar as colnias (slidos) dos microrganismos.
Meios de triagem
Meios que avaliam determinadas atividades me tablicas permitindo caracterizao e
identificao perfunctria ou presuntiva de muitos microrganismos (gar trplice acar e
ferro, meio Instituto Adolfo Lutz, uria, etc.);
Identificao
Presta-se para a realizao de provas bioqumicas e verificao de funes fisiolgicas de
organis mos submetidos identif icao (meios Oxidao/Fermentao, gar Citrato, Caldo
nitrato, meio semi-slido, caldo triptofano, meio de Sulfito Indol Motilidade, etc.;
Dosagem
Empregados nas determinaes de vitaminas, antibiticos e aminocidos;
Contagem
Empregados para a determinao quantitativa da populao microbiana (Agar de Contagem
em Placas, TSC, Agar Batata Dextrose, gar Baird -Parker, etc.);
Estocagem ou manuteno
Preparao
1. Pesar as substncias e coloc -las em um bquer (a ex ceo do gar)
2. Acrescentar a metade dos 100 ml de gua destilada ou desmineralizada, medida com uma
proveta
3. Diss olver os ingredientes em gua agitando continuamente com um basto de vidro ou
com um agitador eltrico (uso de barra magntica), evitan do a formao de espuma. Aps
a formao de uma suspenso homognea, completar o volume do meio com o restante da
gua
4. Quando necessrio, dissolver os ingredientes do meio de cultura em banho -maria, vapor
fluente em autoclave ou utilizando a chama do b ico de Bunsen, ou chapa aquecedora
eltrica, protegida com tela de amianto, ou ainda em forno de microondas, at a ebulio,
agitando sempre. Evitar o aquecimento desnecessrio
5. Filtrar em papel de filtro qualitativo para retirar as impurezas
6. Verificar o pH atravs de potencimetro ou fita indicadora de pH e ajustar para 7,2
us ando soluo de cido ltico (0,1 %) ou hidrxido de sdio (1,0 N), com pipeta de 1
mililitro, gotejando aos poucos. O pH do gar simples ajustado antes da adio do
gar-gar
7. Dis tribuir 50 ml do meio em tubos de ensaio (5 a 7 ml por tubo)
8. Tamponar os tubos, proteg -los com papel e amarr -los com barbante
9. Es terilizar em autoclave a 121C (1 atmosfera de presso) por 20 minutos. Deixar dois
tubos sem esterilizar, incub-los a 37C por 24 a 48 horas, para constatar a necessidade
de esterilizao.
Obs ervao: A lguns meios de cultura so preparados da mesma forma, porm se for
necessrio utilizar algumas substncias termolbeis (uria) ou que reajam com as
subs tncias dos meios (aminocidos, acares), as mesmas so esterilizadas parte ou por
filtrao utilizando Filtro Seitz ou Filtros contendo membranas (de nitrocelulose ou acetato
de celulose) com poros de 0,22 u m de dimetro (Millipore, Sartorius), e depois incorp oradas,
assepticamente, ao meio previamente esterilizado. A inda, podem ser esterilizados por
tindalizao, tambm conhecida como esterilizao fracionada (100C por 1 hora por 3 dias
consecutivos, intercalados por incubao entre 30 a 45C), ou a 110C por 10 a 15 minutos , a
depender do tipo e carga microbiana.
gar Simples
1. A os 50 ml de caldo simples restantes, acrescentar 0,5 a 1,0 g de gar -gar
2. Colocar o bquer sobre uma tela de amianto (ajustada num trip metlico tendo por baixo
o bico de Bunse n aceso)
3. Diss olver o gar no meio, mexendo sempre com um basto de vidro, para no aderir ao
bquer, at a completa dissoluo, evidenciada pela ausncia de grnulos de gar nas
paredes do recipiente, tornando -se lmpido. Isto somente se consegue com a ebulio do
meio
4. Colocar em Erlenmeyer, tampar, proteger com papel e barbante
5. Es terilizar em autoclave a 121C por 20 minutos
6. Retirar do autoclave, esfri -lo a 50-70C e distribuir (cerca de 15 a 20 ml por cada
placa) em placas de Petri (15 x 1 00mm) estreis. Ou ainda, caso necessrio, colocar em
banho-maria a 45 -55C, adicionar 10 ml de sangue oxalatado de coelho ou de ovino ( gar
Sangue), e distribuir em placas de Petri estreis. (previamente esterilizadas). Se antes
da distribuio este meio for aquecido a 80C at ficar de cor marrom, temos o Agar
chocolate.