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Este documento presenta información sobre técnicas de cultivo de bacterias y hongos. Define términos clave como cepa, colonia bacteriana, cepario e inoculación. Describe las fases de crecimiento bacteriano en medios líquidos y sólidos, así como los términos utilizados para describir el crecimiento en estos medios. Además, explica por qué algunas bacterias producen pigmentos y menciona ejemplos. Finalmente, brinda detalles sobre las actinobacterias, incluyendo sus características y importancia
Este documento presenta información sobre técnicas de cultivo de bacterias y hongos. Define términos clave como cepa, colonia bacteriana, cepario e inoculación. Describe las fases de crecimiento bacteriano en medios líquidos y sólidos, así como los términos utilizados para describir el crecimiento en estos medios. Además, explica por qué algunas bacterias producen pigmentos y menciona ejemplos. Finalmente, brinda detalles sobre las actinobacterias, incluyendo sus características y importancia
Este documento presenta información sobre técnicas de cultivo de bacterias y hongos. Define términos clave como cepa, colonia bacteriana, cepario e inoculación. Describe las fases de crecimiento bacteriano en medios líquidos y sólidos, así como los términos utilizados para describir el crecimiento en estos medios. Además, explica por qué algunas bacterias producen pigmentos y menciona ejemplos. Finalmente, brinda detalles sobre las actinobacterias, incluyendo sus características y importancia
Equipo:5 R5 Tcnicas de cultivo de bacterias y hongos 1. Qu es un cultivo microbiolgico? un cultivo es un mtodo para la multiplicacin de microorganismos, tales como bacterias, hongos y parsitos, en el que se prepara un medio ptimo para favorecer el proceso deseado 2. Definir los siguientes trminos: * Cepa: poblacin de clulas de una sola especie descendientes de una nica clula, usualmente propagada clonalmente, debido al inters en la conservacin de sus cualidades definitorias. De una manera ms bsica puede definirse como un conjunto de especies bacterianas que comparten, al menos, una caracterstica. * Colonia bacteriana: agrupacin de bacterias originadas a partir de una bacteria madre que se establecen y extienden por determinado medio * Cepario: coleccin de microorganismos: bacterias, hongos, virus y parsitos, principalmente, as como parte o productos de ellos; cidos nucleicos, protenas o toxinas que se han conservado y utilizado en el diagnstico, la constatacin y la investigacin biomdica * Cultivo puro. Cmo se comprueba la pureza? Un cultivo puro es aquel donde todos los microorganismos son del mismo tipo obtenidos de aislar el microorganismo de los dems, se comprueba su pureza mediante una tincin para confirmar que no haya otro tipo de microorganismos presentes en el medio. * Cultivo axnico: consiste en una sola especie microbiana, proveniente de una sola clula * Inoculacin: en biologa es ubicar algo que crecer y se reproducir, y comnmente se utiliza esta con respecto a la introduccin de suero sanguneo, una vacuna o una sustancia antgeno dentro del cuerpo de un humano o de un animal, especialmente para producir inmunidad a una enfermedad especfica. Tambin se puede utilizar este trmino para referirse a la comunicacin (encomendar) de una enfermedad a un organismo vivo por transferencia del agente causal en el organismo, la implantacin de microorganismos o material infeccioso a un medio de cultivo como puede ser en la fabricacin de cerveza o
una placa Petri, o poner microorganismos o virus en el lugar donde la infeccin
es posible. 3. Cmo se puede describir el crecimiento bacteriano en medios lquidos? Si la bacteria crece en un medio lquido, en la mayora de los casos las clulas que se producen en cada divisin continan su vida independientemente formndose una suspensin de clulas libres. En un cultivo discontinuo de bacterias en medio lquido, se pueden diferenciar cuatro fases en la evolucin de los parmetros que miden el crecimiento microbiano: 1.- Fase lag o de adaptacin durante la que los microorganismos adaptan su metabolismo a las nuevas condiciones ambientales (abundancia de nutrientes y condiciones de cultivo) para iniciar la fase de crecimiento exponencial. 2.- Fase exponencial o logartmica: en ella la velocidad de crecimiento es mxima y el tiempo de generacin es mnimo. Durante esta fase las bacterias consumen a velocidad mxima los nutrientes del medio. La evolucin del nmero de clulas durante esta fase se explica con los modelos matemticos que describiremos a continuacin. 3.- Fase estacionaria: en ella no se incrementa el nmero de bacterias (ni la masa u otros parmetros del cultivo). Las clulas en fase estacionaria desarrollan un metabolismo diferente al de la fase exponencial y durante ella se produce una acumulacin y liberacin de metabolitos secundarios que pueden tener importancia industrial. Los microorganismos entran en fase estacionaria porque se agota algn nutriente esencial del medio o porque los productos de desecho que han liberado durante la fase exponencial hacen que el medio sea inhspito para el crecimiento microbiano. La fase estacionaria tiene gran importancia porque probablemente represente con mayor fidelidad el estado metablico real de los microorganismos en los ambientes naturales. 4.- Fase de muerte: se produce una reduccin del nmero de bacterias viables del cultivo. 4. Qu trminos se utilizan para describir el crecimiento bacteriano en medios slidos y semislidos? Las fases, parmetros y cintica de crecimiento discutidas para el caso de los cultivos lquidos se presentan tambin en cultivos slidos. La cintica de crecimiento, en este caso, se puede estudiar siguiendo la evolucin del nmero de clulas viables por unidad de superficie o por unidad de masa. Cuando una clula aislada e inmvil comienza a crecer sobre un substrato slido, el resultado del crecimiento al cabo del tiempo es una colonia. Por consiguiente, se denomina unidad formadora de colonia (UFC) a una clula bacteriana viva y aislada que si se encuentra en condiciones de substrato y ambientales
adecuadas da lugar a la produccin de una colonia en un breve lapso de
tiempo. Si el nmero inicial de bacterias por unidad de superficie es muy alto, la confluencia de las colonias da lugar a lo que se llama un csped cuando se realizan los cultivos en placas de laboratorio. En el caso de microorganismos mviles (deslizantes) o en el de los hongos filamentosos que tienen un crecimiento trfico no se producen colonias aisladas sino formaciones ms difusas o miceliares 5. Por qu algunas bacterias producen pigmentos en los medios de cultivo? Menciona el nombre de los pigmentos producidos por 5 microorganismos. Algunas bacterias producen pigmentos en los medios de cultivo como resultado de su nutricin siendo este un subproducto resultante de la degradacin del medio de cultivo. Tambin los producen como amortiguadores redox para el medio. Algunos ejemplos de estos pigmentos son: las melaninas producidas por los Bacillus subtilis, la piocianina es producida por pseudomonas, la pioverdina la producen las Pseudomonas fluorescens. La pulquerrimina es otro pigmento producido por bacterias y la prodigiosina son algunos ejemplos.
6. Qu son las actinobacterias? Cules son sus caractersticas microscpicas
y macroscpicas? Menciona su importancia a nivel industrial. Las Actinobacterias o actinomicetos son un filo y clase de bacterias Gram positivas. La mayora de ellas se encuentran en la tierra, e incluyen algunas de las ms tpicas formas de vida terrestre, jugando un importante rol en la descomposicin de materia orgnica, tales como la celulosa y quitina. Estas bacterias renuevan las reservas de nutrientes en la tierra y son fundamentales en la formacin de humus. Este tipo de bacterias son usados para la produccin de antibiticos y de fungicidas, tambin se a estudiado para ser usado como productor de protenas para el uso medico en seres humanos. 7. Si un medio de cultivo se contamina A qu atribuiras dicha contaminacin? A diversos factores, el primero puede ser que no fue esterilizado de manera adecuada y por ello se contamino, tambin una mala manipulacin del medio de cultivo puede hacer que se contamine de agentes externos debido a que hay bacterias y dems agentes contaminantes en el aire, otro factor de contaminacin es la mala inoculacin lo que provoca que agentes contaminantes se inoculen en el medio de cultivo. 8. Qu diferencias existen entre los hongos filamentosos y los levaduriformes? Los hongos filamentosos estn compuestos por hifas o filamentos que se pueden unir y entrelazar de forma abundante hasta formar el micelio que puede verse a simple vista. Las hifas pueden estar divididas por tabiques
llamados septos, con la presencia de un ncleo o tambin pueden ser
aseptadas o cenocticas (con muchos ncleos). Tienen pequeos poros que permiten el intercambio.El micelio se clasifica en areo (o reproductivo), ste crece en la superficie del medio de cultivo y contiene las estructuras reproductivas (conidias o esporas) y el micelio vegetativo, que est dentro del medio de cultivo para absorber y obtener los nutrientes. Mientras que los hongos levaduriormes son microorganismos unicelulares, de forma ovalada ms grandes que las bacterias, se dividen por gemacin o brotacin su hbitat es generalmente en ambientes con azcares: frutos, cortezas, flores; tambin pueden infectar insectos o animales. Es importante aclarar que no todas son patgenas, por ejemplo, Saccharomyces es muy usada en procesos fermentativos en la industria alimentaria. 9. En qu ambientes se encuentran este tipo de microorganismos? Cules son las condiciones ptimas para su crecimiento? Estos organismos se encuentran mejor en ambientes hmedos y oscuros, la temperatura optimad e crecimiento va de los 20C a los 30C no es necesaria la presencia de luz para que se desarrollen de manera optima.
10. Indica el nombre cientfico de 5 hongos filamentosos y de 3 levaduriformes
de importancia industrial. Dentro de los hongos filamentosos se encuentran el Penicillium roqueforti, el Penicillium notatum, Trichothecium roseum, Geotrichum candidum, Neurospora sitophila. Y de los hongos levaduriformes estn: Pleurotus ostreatus, Pleurotus eryngii, Pleurotus cornucopioides, Lentinus edodes.
11. Describe la tcnica que se emplea para sembrar hogos filamentosos y
levaduriformes en placa. Se pueden sembrar en agar Czapek los fiamentosos y en agar diamalt los levaduriformes. Para sembrar estos hongos en placas se tienen que hacer dilusiones con las muestras y una vez hechas estas dilusiones poner 1mL en la caja Petri y mover por toda la caja para que la dilucin se esparsa y proceder a solidificar el agar lo mas pronto posible y tapar para evitar contaminacin.
12. Qu son las hifas y los micelios? Cuntos tipos se conocen?
Las hifas son una red de filamentos cilndricos que conforman la estructura del cuerpo de los hongos multicelulares. Estn constituidos por una fila de clulas alargadas y tubulares, envueltas por una pared celular compuesta de quitina. El conjunto de estas hifas se denomina micelios.
13. Como se denomina al micelio de acuerdo a su posicin y funcin? Se
clasifican en reproductores y vegetativos dependiendo de donde crecen si crecen en el exterior son reproductivos y hacen orgnulos y los vegettivos crecen dentro y se encargn de la absorcin de nutrientes y crecen para abajo para poder cumplir esta funcin.
14. Qu caractersticas culturales de hongos levaduriformes se observan en
un cultivo en placa? se observan clulas nicas, aisladas, de forma redonda, oval o gemante. Adoptan formas alargadas que asemejan hifas.
15. Qu caractersticas culturales de hongos filamentosos se observan en un
cultivo en placa? Se observan colonias de filamentos en forma redonda u ovalada. Se puede llegar a observar el centro de la colonia. Tienen formas un tanto regulares.
16. Esquematiza diferentes estructuras microscpicas de reproduccin axesual
en hongos microscpicos.
R5. Tcnicas de cultivo de Protozoarios y Algas
1. Describe la importancia ecolgica de los protozoarios forman un eslabn de la cadena alimenticia, son productores de materia orgnica, depredadores naturales de bacterias (principalmente Gram negativas), conforman el zooplancton en mares, ocanos y cuerpos de agua, donde representan la conexin trfica entre los productores y recicladores de nutrientes. Aparte del valor intrnseco que poseen, el valor econmico se ve reflejado en los procesos industriales (bioinsecticidas) y de transformacin (tratamiento de aguas residuales, bioremediacin) y la importancia que tienen en la salud como agentes infecciosos causantes de la malaria o la amibiasis
2. Qu se requiere para cultivar protozoarios parsitos? Un organismo
husped para que pueda crecer el protozoario en l 3. Qu se utiliza para inhibir el movimiento de los protozoarios y facilitar su observacin en preparaciones en fresco? con soluciones viscosas tales como la metilcelulosa, las que se agregan a una gota (de tamao intermedio) de la muestra. 4. Cuntos tipos de rganos de locomocin presentan los protozoarios? Hay 3 tipos de organelos responsables de la locomocin en protozoarios: Pseudpodos que son extensiones temporeras del citoplasma, generalmente encontrados en amebas. Estos tambin son importantes para capturar alimento. Flagelos son estructuras alargadas en forma de cabello que impulsan el organismo. Estas estructuras reaccionan a sustancias qumicas y al tacto. La estructura interna del flagelo es similar en todos los eucariotes. Cilios son estructuras parecidas a flagelos, pero de menor tamao. Estos organelos pueden cubrir la superficie total del protozoario o estar restringida a una regin en particular como la regin oral. En algunos organismos estos cilios se fusionan formando cirris, que pueden funcionar como patas. 5. Cules son las estructuras que se observan con los siguientes colorantes: a) Rojo neutro diluido, b) Lugol, c) Verde de metilo, d) Solucin de Noland
6. Esquematiza 3 protozoarios (un sarcodario, un flagelado y un ciliado) e
indica en cada uno de ellos las estructuras que se observan En el ciliado se pueden observar sus cilios que son para movimiento adems de que se observa su interior.
7. Describe las caractersticas de las algas
8. Cul es la diferencia fundamental de las algas con los hongos y los
protozoarios?
9. Describe la importancia ecolgica e industrial de las algas
10. Cules son los componentes que se utilizan en los medios de cultivo para algas
11. Indica el nombre cientfico de 5 algas y esquematzalas.