Romero Carrera Alma Krystel.

Bioqumica.

Prctica No. 8
Coagulacin de una protena.
Introduccin:
Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua
soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de
cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70C o al ser tratadas
con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.
La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su
desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la
desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria
En este trabajo se presenta un procedimiento para ver la sucesin de
cambios asociada al calor de coagulacin puede, en condiciones adecuadas,
delimitarse claramente y demostrarse que consta de tres reacciones sucesivas. La
primera es la desnaturalizacin propiamente dicha, que es una reordenacin
intramolecular en la que ciertos grupos qumicos que no fueran hallados en la
protena pura son as restituidos en la sustancia desnaturalizada. La
desnaturalizada es necesaria, pero no es suficiente, para la produccin de una
protena coagulada. La segunda reaccin comprndela floculacin de la protena
desnaturalizada. La tercera y ultima, la coagulacin, procede de la formacin de
un coagulo insoluble debido a las polimerizacin de las molculas proteicas
desnaturalizadas.

Fundamento terico:
La coagulacin es el proceso por el cual se forma un cogulo sanguneo.
Comienza en respuesta a una lesin en un vaso sanguneo.
En el proceso de coagulacin se producen una serie de reacciones en
cadena en las que participan varios tipos celulares y protenas solubles de la
sangre con el objetivo de formar un cogulo para evitar la prdida excesiva de
sangre.
Un cogulo consiste en una red de protenas insolubles como la fibrina con
plaquetas y clulas atrapadas que bloquea la salida de sangre hasta que se
repare el tejido. Se distinguen dos rutas de activacin de la cascada de
coagulacin conocidas como va extrnseca y va intrnseca. Hacen referencia al
lugar donde se inicia la cascada de coagulacin: el interior de un vaso sanguneo
(intrnseca) o fuera de un vaso sanguneo (extrnseca).

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Ambas vas convergen en la activacin del factor, que transforma la
protrombina en trombina. En el paso siguiente la trombina genera fibrina a partir
de fibringeno.
En el proceso de coagulacin participan los siguientes elementos:

Clulas que presentan el factor tisular (TF): Estas clulas no estn

normalmente en contacto con elementos solubles de la sangre. Cuando se
produce una lesin con prdida de sangre, el reconocimiento entre el TF y
las protenas solubles dispara la cascada de la coagulacin.

Plaquetas: Son fragmentos celulares derivados del megacariocito.

Participan en el proceso de coagulacin en las fases de amplificacin y
propagacin y forman parte del cogulo. En sus membranas se dan
muchas de las reacciones del proceso de coagulacin y secretan varios
elementos imprescindibles durante el proceso.

Factores de coagulacin: Son un conjunto de protenas que participan en

las reacciones enzimticas encadenadas que hacen posible la cascada de
la coagulacin. Las protenas de la cascada se van activando por proteolisis
adquiriendo actividad proteasa y activando por proteolisis a la siguiente
protena de la cascada de coagulacin. La activacin de esta cascada lleva
a la produccin de grandes cantidades de trombina que posibilitan la
formacin del cogulo. Algunos de estos factores se asocian entre s en la
membrana de plaquetas y de otros tipos celulares que participan en el
proceso de coagulacin.

Sistema anticoagulante: Para evitar la formacin de trombos (cogulos

fijos dentro de los vasos) o mbolos (cogulos mviles que viajan por el
torrente sanguneo) existen una serie de protenas que confinan la
formacin del cogulo a la zona lesionada. Algunos elementos de estos
sistemas son la protena C, la protena S, la antitrombina (AT) y la
trombomodulina (TM).

Este proceso es debido, en ltima instancia, a que una protena soluble que
normalmente se encuentra en la sangre, el fibringeno, experimenta un cambio
qumico que la convierte en insoluble y con la capacidad de entrelazarse con otras
molculas iguales, para formar enormes agregados macromolculares en forma
de una red tridimensional.
El fibringeno, una vez transformado, recibe el nombre de fibrina.
Coagulacin es por lo tanto, el proceso enzimtico por el cual el fibringeno
soluble se convierte en fibrina insoluble, capaz de polimerizar y entrecruzarse.
Un cogulo es, por lo tanto, una red tridimensional de fibrina que eventualmente
ha atrapado entre sus fibras a otras protenas, agua, sales y hasta clulas
sanguneas.

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El proceso de coagulacin implica toda una serie de reacciones enzimticas
encadenadas de tal forma que actan como un alud o avalancha, amplificndose
en cada paso: un par de molculas iniciadoras activan un nmero algo mayor de
otras molculas, las que a su vez activan un nmero an mayor de otras
molculas, etc.
En esta serie de reacciones intervienen ms de 12 protenas.

Materiales y mtodos.
Se realizaron dos tcnicas para la determinacin del rea foliar, para ambas
tcnicas se utilizaron 5 hojas de diferentes especies vegetales, el primer mtodo
consisti en recortar un cuadro de 10 x 10 cm. De papel de estraza, y pesarlo,
despus se dibuj el contorno de las hojas sobre el mismo papel, se recort y se
pes, para poder obtener su rea foliar mediante una regla de tres.
La segunda tcnica es un poco ms laboriosa, primero se dibuja el contorno de la
hoja en un papel china, para posteriormente dibujarlo sobre un papel milimtrico, y
determinar el rea foliar contando los milmetros al interior de la hoja dibujada,
este mtodo resulta ms prctico al salir a campo, ya que al momento de dibujar el
contorno sobre el papel china se puede realizar directamente de la planta.

Resultados:
Para la primera tcnica se obtuvieron los siguientes resultados, al pesar
el cuadro de papel de estraza pes 0.7 gramos.
Hoja

1
2
3
4
5
0.3
0.2
0.1
0.1
0.1
Peso
gramos
gramos
gramos
gramos
gramos.
Con estos datos se realizaron los clculos en base a una regla de tres en
la que:
0.7g. = 100cm2
0.3g. = x.
Hoja
1
2
3
4
5
2
2
2
2
rea foliar 42.85cm
28.57cm
14.28cm
14.28cm
14.28cm2
Para el segundo mtodo los resultados encontrados fueron los
siguientes:
Hoja
1
2
3
4
5
2
2
2
2
rea foliar 43.05cm
25.82cm
17.26cm
12.77cm
15.22cm2
Finalmente se realizaron dos hojas ms directamente del rbol,
dibujando el contorno en papel china y copindolo en el papel
milimtrico, en este caso se obtuvieron los siguientes resultados.

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Hoja 1: 3.61 cm

Hoja 2: 8.93 cm

2.

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Discusin de resultados:
De las 5 hojas que se tomaron como muestra, las primeras 3 tuvieron un
peso diferente, que segn el criterio utilizado est dentro de un rango normal
menor de 3 cm; esto se debe a muchos factores, tales como el tamao o el grosor
de la hoja. Otro factor puede ser que al haber pesado, tal vez hubo un error en el
gramaje, ya que las hojas no son iguales y es por esto que la bscula no dio un
peso exacto como tal. Un factor que tambin pudo influir en la diferencia de
resultados fue que en algunas hojas tomamos en cuenta el pice al dibujarla sobre
el papel, lo que aumento la superficie en el papel milimtrico.
Desde mi punto de vista el mtodo que considero ms eficiente es el de
dibujar el contorno de la hoja en el papel milimtrico, aunque es ms laborioso y
tal vez un poco ms pesado, llegas a un resultado ms exacto, por as decirlo, ya
que con la bscula no tienes estos resultados, debido a que el peso no te lo da
exacto, a menos que sea una bscula de grado analtico que esa si te podra dar
el peso exacto de la hoja.

Bibliografa:
Calderon, A., Soto, F., Caldern, M., & Fundora, L. R. (2009). Estimacin de rea
foliar en posturas de mango y aguacatero. Red de revistas cientificas de Amrica
Latina, Caribe, Espaa y Portugal ., 43-48.
Meza, N., & Bautista, D. (1999). Estimacin del rea foliar en plantas jvenes de
Nspero. Bioagro, 24-28.
http://www.scielo.org.co/pdf/rudca/v12n1/v12n1a13
http://sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_ci/Agronomia
%20Tropical/at2601/arti/solorzano_p.htm

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Imgenes
Mtodo 1:

Se dibujo el contorno de las hojas y posteriormente se pesaron.

Mtodo 2.

Con este mtodo igual se dibujo el contorno de las hojas, pero se tuvo
que contar cuadrito por cuadrito, para as sacar el rea de la hoja.