Instruo de Uso Esperma Contagem Celular

A Contagem Espermtica realizada no esperma humano lquido estabilizado com conservante. O resultado deve ser
reportado em milhes/mL.
Seguem instrues relacionadas s cmaras de Makler e Neubauer.

Contagem (Cmara de Makler)

A cmara de Makler possui uma profundidade de 0.01 mm e

2
uma marcao graduada de 100 quadrados (rea total de 1 mm
3
e volume de 0,01 mm = 0,01 L) . Assim, o volume
compreendido na rea de 10 quadrados aps a colocao da
3
lamnula de 0.001 mm ou 0,001 L .

1.

Devem ser contados apenas os espermatozides intactos, ou seja, aqueles que possuem cabea e cauda.

2.

A contagem ser realizada nos 10 quadrados, o que corresponde a um volume de 0,001 L. Portanto, o
nmero de espermatozides contados por campo do microscpio dever ser multiplicado por um milho
(1.000.000) para que o resultado corresponda a milhes/mL:

Concentrao de espermatozides (milhes/mL) = nmero de espermatozides contados no campo do microscpio

x 1.000.000
Observao:
Os termos concentrao de espermatozides e nmero total de espermatozides no so sinnimos. O nmero
total de espermatozides o nmero total de espermatozides ejaculados enquanto a concentrao de
espermatozides o nmero de espermatozides por uma unidade de volume de smen.

Contagem (Cmara de Neubauer)

A rea da cmara dentro do crculo de 1,0 mm e contm 25 quadrados

grandes com 16 quadrados menores em cada um. A cmara de Neubauer
possui a espessura de 0,1 mm e volume (dos 25 quadrados grandes) de 0,1
3
mm = 0,1 L. A contagem de um quadrado grande multiplicado por 25
corresponde a 0,1L, que ao ser multiplicado por 10.000 resulta em milhes/mL.

1.

Devem ser contados apenas os espermatozides intactos, ou seja, aqueles que possuem cabea e cauda.

2.

Critrio de Seleo dos Espermatozides a serem Contados: Segundo a Organizao Mundial de Sade, para
determinar se um espermatozide deve ou no ser contado deve ser verificada a posio de sua cabea,uma
vez que a orientao de sua cauda no possui relevncia. Um quadrado grande limitado pela linha central
das trs que o demarca, conforme destacado em negrito na figura 1.
Um espermatozide dever ser contado quando:
-

Encontrar-se no interior do quadrado grande,

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Instruo de Uso Esperma Contagem Celular

3.

Se a maioria de sua cabea encontrar-se entre as duas linhas internas que o delimitam, conforme
exemplificado atravs dos crculos brancos da figura 1.

Caso a maioria de sua cabea esteja em uma linha central, este s deve ser contado se estiver sobre
o L formado entre o lado esquerdo e o lado inferior do quadrado grande, conforme exemplificado
atravs dos crculos brancos da figura 2.

Um espermatozide no dever ser contado quando encontrar-se entre as duas linhas exteriores que
delimitam o quadrado. Caso esteja sobre a linha central, para que este seja desconsiderado na contagem deve
estar fora da regio L descrita anteriormente, conforme exemplificado pelos crculos pretos das figuras 1 e 3.

Figura 1

Figura 2

Figura 3

Concentrao de espermatozides (milhes/mL) = nmero de espermatozides contados no campo do microscpio x

250.000 x fator diluio
Obs. O fator de diluio deve ser considerado na frmula acima apenas quando diluies forem realizadas no momento
da anlise do material.

Referncias Bibliogrficas

Laboratory Manual for the Examination and processing of Human Semen World Ministry of Healthy, WHO. 5 Edio, 2010.

PEREIRA, O. S. & JANINI J.B.M. Atlas de Morfologia Espermtica , Editora Atheneu, 2001.

PIVA, S. Espermograma. Laboratrio So Camilo, 2001.

GALBA E.S.MORAES. Espermocitologia Espermograma em Critrio Estrito, 2 edio, Editora Educs , 2007.

ALBUQUERQUE, C., MENDES, M.E. Gesto da Fase Analtica do Laboratrio: como assegurar a qualidade na prtica. ControlLab, Vol 1., 2010.

ALBUQUERQUE, C., MENDES, M.E. Gesto da Fase Analtica do Laboratrio: como assegurar a qualidade na prtica. ControlLab, Vol 2., 2011.

ALBUQUERQUE, C., MENDES, M.E. Gesto da Fase Analtica do Laboratrio: como assegurar a qualidade na prtica. ControlLab, Vol 3., 2012.

http://www.controllab.com.br/din2/pdf/WHO_laboratory_manual_for_the_Examination_and_processing_of_human_semen_FIFTH_EDITION.pdf

http://www.control-lab.com.br/din2/pdf/WHO_reference_values_for_human_semen_characteristics.pdf

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