LABORATORIO DE QUMICA ORGNICA

PRCTICA 3: CROMATOGRAFA DE CAPA FINA Y CROMATOGRAFA DE

COLUMNA

PRESENTADO POR:
LUIS ALFONSO GALLEGO VILLADA
SEBASTIAN FLOREZ JARAMILLO

PRESENTADO A:
JAVIER SILVA AGREDO

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE INGENIERIA
JUNIO 11 DE 2014
MEDELLIN

INTRODUCCIN
Este informe se realiza con el fin de analizar los resultados obtenidos en la
prctica de cromatografa de capa fina y cromatografa de columna llevadas a
cabo en el laboratorio. La cromatografa se podra definir como un proceso fsico
de separacin de compuestos que consiste en someter una mezcla a una fase fija
y a otra mvil en las cuales es inmiscible, lo que sucede durante el proceso es que
dependiendo de la afinidad de cada uno de los compuestos que hacen parte de la
mezcla con respecto a las fases, estos se quedarn en la fase fija o se irn
desplazando en la fase mvil, al final todos los compuestos deben quedar
separados en distintos lugares de la fase fija.
OBJETIVOS

Separar una mezcla de compuestos orgnicos en solucin, mediante

cromatografa en capa fina.
Ensayar varias mezclas en solventes en diferentes proporciones y escoger
cul de ellas efecta la mejor separacin.
Identificar cada uno de los compuestos separados comparndolos con
muestras patrones.
Calcular el valor de RF para cada compuesto en la proporcin de solvente
escogida.
Separar acetaminofn y cafena de un frmaco por cromatografa en
columna.

RESULTADOS
Rf muestra de cido Glico, Resorcinol y Naftol

cido glico:
Ddis=4 cm
Dc.gal=0 cm
Rf =

Distancia recorrida por el compuesto Dc . gal 0 cm

=
=
=0
Distancia reccorida por eldisolvente
Ddis
4 cm

Resorcinol:
Ddis= 4 cm
DRes= 0,8 cm

Rf =

Distancia recorrida por el compuesto DRes 0,8 cm

=
=
=0,2
Distancia reccorida por eldisolvente Ddis
4 cm

B-naftol:
Ddis=4 cm
Dnaf=2,5 cm

Rf =

Distancia recorrida por el compuesto DRes 2,5 cm

=
=
=0,62
Distancia reccorida por eldisolvente Ddis
4 cm

Con la muestra #48, se hizo cromatografa en placa fina y en la proporcin

Hexano: Acetato de etilo (0:1) se obtuvo que el frente del disolvente fue de
3,7 cm y la muestra subi 2,6 cm, entonces con estos datos se calcula el
Rf, as:
Rf =

Distancia recorrida por el compuesto 2,6 cm

=
=0,7
Distancia reccorida por eldisolvente 3,7 cm

La siguiente tabla muestra los datos del Rf obtenidos por todos los grupos:

Tabla 1: Rf en las diferentes proporciones de solvente.

Hexano : Acetato de etilo

Rf
B-naftol
Resorcinol
1:0
0,0
0,0
0:1
0,62
0,2
3:2
0,68
0,56
1:2
0,85
0,74
1:4
0,75
0,32
2:1
0,53
0,26
4:1
0,57
0,42
Los valores en negrilla son nuestros resultados.

cido glico
0,0
0,0
0,38
0,31
0,0
0,0
0,0

DISCUSIN
Lo primero que se realiz en el laboratorio fue la cromatografa en capa fina, para
la cual se utilizaron dos placas cromatogrficas y en una de ellas, se sembr una
muestra que contena cido glico, resorcinol y B-naftol en tres partes de la placa
en diferentes cantidades para ver el efecto que esto produca al realizar la
separacin por cromatografa en la cmara, utilizando las proporciones adecuadas
de solventes. Luego se sembr en la otra placa cromatogrfica, una muestra
desconocida (#48) y se separ por cromatografa en la cmara, utilizando las
proporciones de solventes indicado en la gua. De acuerdo a la informacin
obtenida, se pudo determinar que la muestra problema es una mezcla de Naftol
debido a que la polaridad del hexano-acetato es muy poca y la polaridad de las
tres sustancias conocidas es cido Glico, Resorcinol y Naftol en orden
decreciente; por lo tanto, la sustancia que ms se debe de separar es la que
presente la misma polaridad que el disolvente, que en este caso es el Naftol. De
igual forma, la sustancia que menos se desplace debe de ser la que menos
afinidad presenta, para el caso el cido Glico.
Lo segundo que se realiz en el laboratorio fue la cromatografa de columna que
consista en la separacin del color verde en sus componentes; sta separacin
fue realizada por los monitores y el profesor. En sta separacin, el color verde se
separ en amarillo y azul. El azul por ser ms polar y tener ms afinidad con la
silica gel que era la fase estacionaria, se qued en la parte superior mientras el
amarillo fue arrastrado por la fase mvil y sta era la mejor proporcin de hexanoacetato de etilo que fue previamente calculada en la cromatografa por capa fina.

PREGUNTAS

1 Qu tipos de cromatografa se utilizan segn la fase estacionaria?

Cromatografa plana: La fase estacionaria se sita sobre una placa plana
o sobre un papel. Se divide en cromatografa de capa fina y cromatografa
en papel.
Cromatografa en columna: La fase estacionaria encuentra empacada en
el tubo o situada en la columna. Segn el solvente usado en la fase mvil
se puede separar en: cromatografa de gases, de lquidos y cromatografa
de fluidos supercrticos.
2 Para qu se utiliza la cromatografa y en qu se diferencia de la
electroforesis?
La cromatografa es un mtodo fsico utilizado para la separacin de
distintos componentes de una sustancia basndose en sus diferentes
afinidades por las fases inmiscibles, una mvil y otra estacionaria. La
cromatografa se diferencia de la electroforesis en el sentido de que la
electroforesis realiza la separacin de las molculas segn la movilidad de
estas en un campo elctrico, mientras que la cromatografa utiliza como
soporte las distintas afinidades que tienen las sustancias con la fase mvil o
la acuosa.
3 En qu campos es ms til la cromatografa sobre papel?
sta tcnica es muy utilizada en los laboratorios para realizar anlisis
cualitativos ya que pese a no ser una tcnica muy potente, no requiere de
ningn tipo de equipamiento. La cromatografa sobre papel es un proceso
muy utilizado en la botnica, por ejemplo, en la separacin de los
componentes de los vegetales, se utiliza en el anlisis de sangre t en la
industria alimentaria, tambin en la bioqumica para separar compuestos
como ribosa, galactosa, sacarosa, etc.
4 Mencione cinco solventes que se utilicen en TLC
ter de petrleo, benceno, acetona, etanol, agua.
5. Se podra utilizar el agua como solvente en TLC? Explique.
Si se puede utilizar aunque no es recomendable utilizar agua como solvente
debido a que es un compuesto muy polar que no solubiliza gran cantidad de
compuestos orgnicos, a pesar de ser conocido como el disolvente
universal. Sin embargo, podra utilizarse dependiendo de las sustancias a
separar y sus polaridades, aunque en pocos casos.

6. Si se tiene como eluente hexano-ter 1:1 y se necesita aumentar la

polaridad de este Cul de los dos componentes necesita aumentar?
Por qu?
Se debe de aumentar el componente de ter, ya que al ser este un
componente polar y el hexano un componente apolar, al aumentar la
concentracin de ter se aumentar la polaridad del compuesto.
7. A un eluente benceno-cloroformo 1:1 se requiere disminuir la
polaridad, cul de los dos componentes aumentara? por qu?
Se debe aumentar el benceno ya que la polaridad del benceno es ms baja
que la polaridad del cloroformo, por tanto si se aumentar el cloroformo, se
aumentara la polaridad y no es lo que se quiere.
8. En qu se diferencian los trminos adsorcin y absorcin?
Cuando se habla de adsorcin, se est haciendo referencia a la propiedad
que poseen ciertos slidos para incrementar la concentracin en su
superficie de otras sustancias sin alterar su volumen mientras que la
absorcin consiste en la retencin de una sustancia por parte de una masa,
tendiendo a formar parte de la mezcla o a reaccionar qumicamente con la
misma, por lo que se considera un fenmeno msico y no superficial como
lo es la adsorcin.
9. Qu efecto tiene sobre la separacin, el largo y ancho de la columna?
Incide en la pureza, calidad y rendimiento de la mezcla a separar. En
cromatografa en columna, cada soluto debe atravesar completamente la
longitud de la columna, as el tiempo que dura la separacin est
determinada por el tiempo que tarda el componente ms lento en llegar a
la llave de separacin, por lo que el largo de la columna influye en los
resultados en cuanto al tiempo y se puede relacionar con el Rf de los
componentes de la mezcla.
El dimetro y ancho de la columna estn relacionados con la cantidad de la
mezcla a separar, ya que en esto se basa la fcil identificacin de los
componentes. As que, si la columna excede el ancho estipulado
(generalmente la longitud de la columna debe ser 10 veces su ancho), es
ms difcil reconocer y separar los componentes de la muestra sin existir
posibles contaminaciones entre ellos.
10. Cul es la explicacin para que el soporte o fase estacionaria deba
de estar finamente divido?

sta debe estar bien dividida para que en el momento de la separacin, se

puedan distinguir los componentes de la mezcla y llevar a cabo la
recoleccin de las mismas.
11. Por qu razn en una cromatografa sobre columna es necesario
eliminar las burbujas de aire?
Se necesita que la fase estacionaria est bien compacta y en forma
regular, sin aire entre medio, porque las molculas de un mismo
compuesto deben tardar lo mismo en eluir, por lo que se recogen en la
misma fraccin eluida. Si hubieran burbujas no se podra obtener una
buena separacin de las componentes.
12. Por qu razn se debe hacer la ccf previo a al cromatografa sobre
columna?
Una de las aplicaciones principales de la cromatografa en capa fina es
seleccionar las condiciones ptimas para llevar a cabo la cromatografa en
columna. Esto se refiere a identificar el solvente o la mejor proporcin de
solventes a utilizar dado que la cromatografa en capa fina es ms prctica
y se puede realizar muchas veces con un mnimo tiempo y material.

CONCLUSIONES

Uno de los factores ms importantes para llevar a cabo la cromatografa es

el solvente o proporcin de solventes a utilizar.
La cantidad de mezcla a separar determinar qu tan fcil podemos
observar las mezclas separadas en el proceso.

Antes de proceder a realizar la cromatografa por columna, debemos

primeramente hacer cromatografa en placa fina para escoger condiciones
ptimas para realizar sta.
Al utilizar menor cantidad de muestra en las placas cromatogrficas, es
mejor ya que se evita al mximo contaminaciones.
El proceso de cromatografa en placa fina se debe hacer con la cmara
cromatogrfica cerrada.
Es muy prctico utilizar la cmara cromatogrfica con espectro de luz para
observar mucho mejor las componentes.
Se puede reflejar la separacin de las componentes en la cmara de yodo
para medir bien las distancias recorridas y obtener Rf ms precisos.
Referente a sta prctica, se obtuvieron muchas variaciones en los
resultados obtenidos por los diferentes grupos y esto se debe en gran parte
a la incorrecta medicin de las distancias o en la siembra de la muestra.

BIBLIOGRAFA

http://html.rincondelvago.com/cromatografia-en-capa-fina.html 09/06/20146:55 pm
Libro manual de prcticas de fundamentos de qumica orgnica. Cecilia
Ramrez Ramrez. Wilson Cardona Galeano; Roberto Amars Amars.
http://es.wikipedia.org/wiki/Electroforesis 09/06/2014 - 8:35 pm
http://www.buenastareas.com/ensayos/Diferencia-Entre-Adsorcion-yAbsorcion/4319371.html 09/06/2014 - 10:15 pm
http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_en_papel 09/06/2014
10:30 pm