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Tesis
Que para obtener el grado de
UNIVERSIDAD DE COLIMA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS Y AGROPECUARIAS
OFICIO No. 646/2002.
Con fundamento en le dictamen emitico por el jurado revisro del colegiado del rea: de
Biotecnologa de esta Facultad a mi cargo, de su trabajo de tesis de Maestra y en virtud de que
efectu las correcciones y acat las sugerencias que le haban indicado los integrantes del mismo,
se le autoriza la impresin de la tesis " Sucesin de la comunidad bacteriana en suelos salinos
enmer ndados
con paja de maz y glucosa ", misma que ha sido dirigida por el Dr. Jos Gerardo
Lpez Aguirre, Profesor Investigador de esta Facultad.
Este documento reuni todas las caractersticas apropiadas como requisito parcial para
obtene r el grado de Maestra en Ciencias; rea:Biotecnologa y fue revisado en cuanto a forma y
conten ido por los C.C. M.C Salvador Guzmn Gonzalez, M.C. Arnoldo Michel Rosales y Dr.
Sergio Aguilar Espinosa, Profesores-Investigadores de la Universidad de Colima.
Sin otro particular de momento, me despido de usted muy cordialmente.
DEDICATORIA
Esta tesis la dedico a mi espoca Alisa y a mis hijos Elisa y Hctor por haber
aguantado pacientemente el tiempo que no les puede dedicar durante mi
formacin como investigador.
A la memoria de mi padre Adulfo que es el modelo que como productor,
admiro y sigo.
A mi madre Felicitas que con su incomprendico sacrificio impuso mi
desarrollo crtico.
AGRADECIMIENTOS
Con un profundo Agradecimiento para las personas que integran y dirigen al
F i d e i c o m i s o R a m n l v a r e z Buylla d e A l d a n a , p o r h a b e r a p o y a d o
econmicamente el desarrollo de la investigacin por el cual me form como
Maestro en Ciencias.
Agradezco tambin al Ing. Jos Luis Cruz Valdez y al Lic. Mario Soto
Velsquez, que se encontraban dirigiendo en esos momentos la Escuela de
Administracin Agropecuaria y Desarrollo Rural y que como amigos ms que por
sus cargos facilitaron mi estancia en Tecomn, Colima, auxilindome para resolver
tanto problemas de ndole econmicos, como administrativos y personales.
Al Doctor Jos Gerardo Lpez Aguirre, por darme la confianza y la
suficiente libertad requerida para desarrollarme como investigador, pues sin ellas
todo trabajo realizado hubiera sido frustrante.
En esta seccin, no puede quedar inadvertida la influencia de mi hermano
el Dr. Joel Lpez Prez que es quien abri la brecha, la cual actualmente sigo.
Claro est que para que esto sucediera, fue decisivo la influencia y el apoyo del
Dr. Miguel Arenas Vargas que es y seguir siendo el punto de vista que retorno,
no sin antes ir al fondo de los conceptos que el siempre pone en la mesa de las
discusiones, con la finalidad de estimular el aprendizaje consciente del individuo.
A la IQ Teresa Castillo Velasco encargada del Laboratorio Central del rea
Agropecuaria por su apoyo y asesora desinteresada que en mltiples ocasiones
resolvi mis dudas y alent mis determinaciones.
De la misma manera agradezco al Dr. Salvador Guzmn Gonzlez por su
disposicin para asesorarme y facilitarme el desarrollo de las pruebas
microbiolgicas en el Laboratorio de Biotecnologa de la Universidad de Colima.
Con Agradecimiento tambin para mi compaero y amigo Francisco Javier
Barragn por su apoyo en el manejo del equipo del Laboratorio de la Facultad de
Ciencias Qumicas de La Universidad de Colima.
NDICE
ndice de Cuadros
ndicede Figuras
Resumen
Abstract
I. INTRODUCCIN
II. REVISIN DE LITERATURA
2.1. Concepto y criterio de suelos salinos
2.2. Condiciones microbiolgicas de los suelos salinos
2.3. Biodiversidad
2.3.1. Diversidad gentica en las poblaciones
microbianas
2.3.2. Diversidad funcional en las poblaciones
Microbianas
2.4. Sucesin microbiana y sus interacciones
2.5. Materia orgnica
2.5.1. Dinmica de la materia orgnica
2.5.2. Humificacin
2.5.3. Interacciones del complejo formado por la
materia orgnica los minerales y las arcillas.
2.5.4. interaccin de los sesquixidos con
la materia orgnica
2.5.5. Dinmica de la materia orgnica disuelta
2.5.6. Fijacin y mineralizacin de la materia orgnica
2.5.7. Componentes lbiles y estables
de la materia orgnica
2.6. Manejo botecnolgico de los microorganismos mediante
el uso de substratos orgnicos.
2.7. Determinacin de la diversidad funcional
2.8. El uso de los substratos por las bacterias
2.8.1. El uso de la glucosa en la determinacin de
los procesos del suelo.
III. MATERIALES Y MTODOS
3.1. Ubicacin del sitio experimental
3.1.1. Muestreo del suelo
3.2. Composicin de los tratamientos
3.3. Anlisis de las caractersticas fsicas del suelo
3.4. Anlisis qumicos
3.5. Pruebas microbiolgicas.
3.6. Diseo estadstico
3.6.1. Anlisis de varianza.
3.6.2. Determinacin del ndice de
disimilaridad de Jaccard.
Pg.
iii
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108
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123
150.
ndice de cuadros
Cuadro
Nmero
1. Proporcion taxonmica de los grupos de las eubacterias
encontradas en suelos normales e hipersalinos.
2 . Los substratos ofrecidos por las ecoplacas Biolog
3 . Contenido de substratos en las placas Biolog GN y
sus nmeros de cdigos, Biolog.
4 . Ejemplo de grupos funcionales de microorganismos previamente
investigados por microautoradiografa.
5 . Caractersticas geogrficas y climticas del sitio estudiado.
6. Caractersticas qumicas generales de los tratamientos
incubados a 90 das.
7. Concentracin total de los aniones (meq/100g) en los
tratamientos del suelo incubado.
8 . Concentracin total de los aniones (meq/100g) en los
tratamientos del suelo incubado y lavados.
9 . Concentracin de los cationes solubles (meq/100g) en
los tratamientos despus de la incubacin.
10. Concentracin de los cationes solubles (meq/100g) en
los tratamientos del suelo despus del lavado.
11. Caractersticas qumicas generales de los tratamientos
del suelo despus de la incubacin.
12. Caractersticas qumicas generales de los tratamientos
del suelo despus de la incubacin y lavado del suelo.
13. Efectos fsicos de la materia orgnica en la capacidad de
campo y conductividad hidrulica.
14. Cambios sucesionales en el consumo de cidos carboxlicos
medidos por ndice de disimilaridad de Jaccard.
15. Cambios sucesionales en el consumo de carbohidratos
medidos por ndice de disimilaridad de Jaccard.
16. Cambios sucesionales en el consumo de
aminocidos medidos por ndice de disimilaridad de Jaccard.
17. Matriz de disimilaridad funcional para los carbohidratos
en muestras de los tratamientos incubados a 90 das.
18. Matriz de disimilaridad funcional para los cidos
carboxlicos en muestras de suelos incubados 90 das.
19. Matriz de disimilaridad funcional para los aminocidos
en muestras de suelos incubados 90 das.
20. Comportamiento de la diversidad y uniformidadmetablica
(Shannon-Weaver) de las poblaciones a 30, 60 y 90 das de
la incubacin.
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100
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iii
ndice Figuras
Figura
Nmero
pgina
17
2 . Materia orgnica del suelo (MOS) y su dinmica (Zech et al., 1997) 34
3. Materia orgnica de los tratamientos: antes de la
incubacin (1) despus de la incubacin (2) y posterior al
lavado del suelo (3).
93
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103
104
iv
105
Resumen
Abstract
vi
I. INTRODUCCIN
estructura
de
las
poblaciones
microbianas
imprimen
ciertas
Los suelos afectados por sal en el mundo tienen una baja productividad por
la dominancia de las sales solubles (salinidad) y/o el sodio intercambiable
(sodicidad) (Gupta y Abrol, 1990). La magnitud de este problema es valorada por
Qadir et al., (1996) donde precisan que de las tierras cultivables entre 23 al 37%
son salinas y salino-sdicas.
Aunque la agricultura de irrigacin contribuye con una proporcin
substancial de nuestros alimentos y produccin de fibras. La extensin de las
reas irrigadas tienden a incrementar la degradacin por la salinizacin y la
consignacin de las aguas resultantes por la sobre-irrigacin y otras formas de
pobre manejo agrcola (Ghassami et al., 1995).
Los esfuerzos que se hagan para el control y recuperacin de los suelos
salinos segn Hendry y Buckland, (1990) deben estar encaminados por el
entendimiento de las causas en cada una de las reas del conocimiento especfico
de los suelos, como un prerrequisito necesario para recomendar soluciones a este
problema.
Dentro de las causas de salinidad de los suelos se encuentra el agua de los
drenes que puede elevarse hasta el nivel de la superficie del suelo de las tierras
bajas. La baja permeabilidad del suelo causa el pobre drenaje por impedimento
del movimiento del agua hacia abajo. Estos impedimentos pueden ser los
resultados de una desfavorable textura del suelo, estructura o la presencia del
endurecimiento de las llamadas capas de caliche (Pessarakli, 1991).
En muchas ocasiones, la sal aparece en la superficie del suelo como un
resultado del movimiento por la capilaridad hacia arriba de los mantos friticos
superficiales que contienen sales disueltas y se acumulan en la superficie, con la
subsiguiente evaporacin durante la estacin de secas en las regiones ridas
(Patcharapreecha et al., 1989; Seeling et al., 1990; Hendry y Buckland, 1990;
Connie et al., 1993).
mayor
parte
de
la
informacin
generada
sobre
la
actividad
Petersen et al., 1991; Beyer et al., 1992; Rao y Pathak 1996; Garca y Hernndez,
1996; Batra y Manna 1997, Chorom y Rengasamy 1997; Pathak y Rao 1998).
de
bacterias,
las
cuales
exhiben
modificaciones
fisiolgicas
% (rango)
7-67
5-60
10-33
1-20
3-15
2-12
2-10
5
5
5
5
5
Suelos hipersalinos
Pseudomonas
Bacillus
Alcalgenes
Micrococcus
Arthrobacter
Planococcus
Staphylococcus
Actynomicetes
Vibrio
Flavobacterium
Corynebacterium
Acinetobacter
Halobacterium
halobacterium
No determinados
%
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3
3
3
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1
1
1
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Rodrguez-Valera, (1988).
10
para
obtener
de
ellos
microorganismos
necesarios
para
la
bioremediacin.
Margesin y Shninner (2001) por su parte consideran que el uso de
microorganismos capaces de degradar desechos orgnicos en presencia de sal
puede diluir los costos en la prevencin de la salinidad, o la remocin de la sal por
smosis inversa, el intercambio fnico o electrodilisis antes del tratamiento
biolgico.
2.3. Biodiversidad
La Convencin de la Biodiversidad de Ro constituida por 130 pases en
1996, define tres tipos de diversidad: una que se refiere a la multitud de tipos de
naturaleza o ecosistemas, otra que es la diversidad del nmero de especies, y su
variacin gentica dentro de cada especie. Al referirse a la diversidad en los tipos
de ecosistemas, se habla de los sistemas que a su vez estn integrados por un
determinado nmero de especies que son comunes de acuerdo a su naturaleza
(Hbard 1998).
Grime (1997) argumenta que no se deben usar trminos tendientes a
confundir el funcionamiento de los ecosistemas pobres en diversidad de especies.
Pues algunos de los ecosistemas ms extensivos y antiguos del mundo
bosques boreales, pantanos, y tierras calientes contienen pocas especies, y que
por lo tanto los ecosistemas ricos en diversidad de especies y pobres en
diversidad de especies, lo que se necesitan es estabilidad para que los
ecosistemas funcionen, en tales casos, si las prdidas actuales en biodiversidad
tienen serios daos para su funcionamiento, entonces se reducen los beneficios
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12
13
como tal, o bien son sus acciones y los rasgos distintivos que caracterizan las
especies los que definen a los sistemas ecolgicos.
De acuerdo con lo anterior, an quedan vigentes las hiptesis de
propuestas por Lawton y Brown (1993) como la de redundancia de las especies,
que considera que s todos los grupos funcionales estn representados en un
ecosistema, el funcionamiento de este no depende de la diversidad de las
especies. En otras palabras, dentro de los grupos funcionales las especies son
redundantes, o sustituibles. Esta puede ocurrir cuando las especies que quedan
dentro de un grupo funcional son capaces de compensar la biomasa de las
especies desaparecidas.
Proponen adems, la hiptesis de remaches que sugiere que todas las
especies tienen una significante contribucin al funcionamiento del ecosistema, as
como todos los remaches tienen una significante contribucin al funcionamiento de
un aeroplano (Lawton y Brown 1993; Lawton 1994).
Los cambios predichos por la hiptesis de remache son comprobados por
Tilman et al., (1997) demostrando con un modelo formal como las diferencias del
nicho con respecto a las especies conducen al decrecimiento de la produccin y la
explotacin de los recursos dentro de un nivel trfico cuando desaparecen
especies.
Adems de las dos hiptesis anteriores Lawton (1994), considera la
hiptesis de la respuesta idiosincrsica de acuerdo a la cual el funcionamiento de
un sistema cambia cuando quiera que una especie desaparece pero la direccin o
magnitud de la respuesta es impredecible.
Emmerson et al., (2001) retomando la hiptesis idiosincrsica demostraron
los efectos de diversidad representada en las especies de los sistemas marinos
costeros tanto a escala global como regional. Proveyendo evidencias del
incremento en la complementariedad del uso de los recursos se relaciona con el
aumento de diversidad y se mostr una fuerte evidencia de los efectos de la
diversidad en el ensamblaje natural de las comunidades a una escala regional.
La respuesta de la variabilidad entre las especies individuales es
consistente con un positivo pero idiosincrsico patrn de la funcin del ecosistema
14
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Al respecto los estudios evolutivos realizados por Bej et al., (1991) con
Pseudomona cepacia AC1100 demuestran el uso de los elementos genticos
movilizables para el cruzamiento molecular (evolucin) de tal manera que se
contribuye a la formacin de nuevas combinaciones genticas que incrementan la
diversidad gentica de la comunidad microbiana. Este tiene un potencial para
aumentar la evolucin cuando el nuevo y movilizable DNA se adiciona a la
comunidad microbiana, particularmente cuando los disturbios qumicos aumentan
la adaptabilidad por las recombinaciones. El incremento de la diversidad
trasciende indicando que la recombinacin gentica contribuye al incremento de la
diversidad en la mayora o en todas las recombinaciones que no son funcionales o
no competitivas.
En la Figura 1 se muestra como diversidad bacteriana del suelo est
compuesta por diversidad gentica, por las especies y por la diversidad funcional
dentro de la diversidad estructural (organizacin fsica) del sistema de estudio
(Trevors; 1998)
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de
azufre
puede
tener
efectos
nocivos
directos,
sobre
los
20
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24
consistentemente
se
encontr
en
una
cantidad
significante,
25
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obtener
informacin
valiosa
para
acelerar
los
procesos
de
28
Six et al. (2002), consideran que la materia orgnica del suelo puede ser:
(1) fsicamente estabilizada, o protegida sobre la descomposicin, a travs de la
microagregacin, o (2) por asociacin ntima con las partculas de arcilla y arena, y
(3) puede ser bioqumicamente estabilizada a travs de la formacin de
compuestos recalcitrantes de la materia orgnica del suelo (MOS).
La materia orgnica del suelo en sentido amplio, incluye los residuos de las
plantas (recursos primarios) los residuos de los animales del suelo y los
microorganismos (recursos secundarios), la materia orgnica disuelta (MOD), los
exudados de las races, y los compuestos macromoleculares hmicos
morfolgicamente inestructurados (Unger et al., 1997).
29
2.5.2. Humificacin
30
31
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33
34
Por otra parte Thompson et al. (1999), consideran que los cambios en la
composicin de las comunidades microbianas dependern de la calidad de los
substratos que estimulan el desarrollo y composicin de la estructura de las
poblaciones.
Desde otra perspectiva, Moller et al. (1999), contempla que en los
procesos de descomposicin se dan interacciones entre las bacterias y los hongos
y que de acuerdo con eso es ms probable explicarlas por competicin del
carbono de los substratos. Estas interacciones, de acuerdo con los datos que ellos
manejan para el ndice de mineralizacin, sugieren que estas se dan de manera
antagnica y que las transformaciones del carbn en un microcosmo controlado,
estimado como C mineralizado ms la formacin del carbn orgnico disuelto
(COD), es consistentemente ms elevado cuando los hongos estn presentes en
el inculo que cuando se comparan a las diversas comunidades de bacterianas
actuando solas.
Dentro de los procesos de humificacin se requiere llevar acabo los detalles
de la caracterizacin qumica de las fracciones que ingresan al suelo aunque
generalmente es aceptado que la materia orgnica particulada2 como los
materiales ligno-celulosos se deriva de las plantas, en contraste con la fraccin
lbil que en su mayora se deriva de los microbios, principalmente de los hongos.
(Six, et al., 2001).
Si bien la los materiales lignocelulosos pueden permanecer por un mayor
tiempo como materia orgnica recalcitrante, esta no quiere decir que permanezca
inactiva o no sufra ningn proceso de transformacin (Unger et al., 1997). Al
respecto Field (2001) observ que ciertas bio-conversiones anaerbicas, tales
como la dimetilzacin de la lignina y la reduccin de los grupos nitro- o azo pueden
activar los contaminantes durante los procesos de humificacin subsiguientes a la
exposicin del aire.
____________________________________________
2
Materia orgnica particulada.- Se refiere a la materia orgnica que se encuentra dispersa o no est unida en
sus superficies, similar a las partculas de arena; tal es el caso de las partculas finas de materiales lignocelulosos.
35
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orgnica del suelo, seguida del crecimiento de la biomasa de las plantas. Esta
xilanasa, la cual es producida y liberada extensamente por los hongos saprofticos
en los medios aerobios, est principalmente en las partculas de las cortezas del
suelo con una proporcin de C:N elevada, indicando que estas enzimas
principalmente se encuentran protegidas por las partculas de materia orgnica
(Kadeler et al., 1999).
Debido a la complejidad de la disposicin de los principales azcares
constituidos en las plantas se requiere de un paquete enzimtico consistente de
endo y exoxilanasas para degradar los compuestos del xilan, y la hemicelulosa.
Estas enzimas estn directamente implicadas en la degradacin de la mayora de
los constituyentes polmeros de la cama de los compuestos de las plantas, de aqu
que sea un til indicador para la descomposicin de materia orgnica (RodrguezKbana, 1982; Sinsabaugh et al., 1994).
37
38
39
orgnica [la fraccin ligera libre [1.85 g cm(-3)], la fraccin gruesa (250-2000 m) y
la fina (53-250 m) ms la materia orgnica particulada de los infraagregados] son
derivados predominantemente de las plantas, pero la alteracin microbiana lo
incrementa como sigue: la materia orgnica particulada gruesa de los intraagregados, en menor grado la fraccin ligera de los intra-agregados formados por
la materia orgnica particulada y menor en la fraccin lbil.
40
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es
descompuesto
en
nutrientes
nitrogenados.
La
asimilacin,
42
una abundancia de carbn el cual puede actuar como un substrato para la fijacin
de N2 por los hetertrofos de vida libre (Kahindi et al., 1997).
Con respecto a la relacin de C: N la descomposicin de los residuos con
bajo contenido de N tales como las pajas de trigo, sorgo, maz, y otros residuos de
cultivos de granos con elevada proporcin de C:N, pueden resultar en la
inmovilizacin microbiana del suelo y del N de los fertilizantes, de esta manera se
reduce la disponibilidad de N para los subsecuentes cultivos (Unger et al., 1997).
La inmovilizacin del N en los residuos de paja es principalmente un
proceso bitico en el cual la actividad fngica tiene un papel mayor que la biomasa
bacteriana (Cheschire et al., 1999).
Los resultados de Gibbs y Barraclough (1998) demuestran que el grueso de
la mineralizacin del nitrgeno es ligeramente afectado por la adicin de la
sucrosa, aunque incrementar marcadamente la inmovilizacin del N. Lo que
confirman en sus trabajos iniciales donde demuestran que la descomposicin es
afectada por las bacterias y la asimilacin de los pptidos o aminocidos ocurre
sin la mineralizacin.
Bajo condiciones de inundacin, la descomposicin de la paja puede servir
como fuentes de energa para la fijacin de N2 en las capas superiores. De
acuerdo con Raice y Paul (1972), los organismos fijadores de N2 en las capas
anaerbicas son dependientes de suplementacin de nutrientes de los organismos
presentes en las capas aerbicas.
La mayor fijacin de N2 bajo condiciones de inundacin puede ser debido a
la provisin de una adecuada humedad, la suplementacin de nutrientes y
condiciones favorables de aireacin para el desarrollo de los microorganismos
fijadores de N2 (Rajaramamohan-Rao 1976).
Las sales afectan grandemente la volatilizacin y la nitrificacin de
(NH4)2SO4 y la urea. La inhibicin de la nitrificacin por las sales se encuentra
entre un rango de 8 a 83% de acuerdo al contenido de sales. Considerando
finalmente que la amonificacin es menos sensitiva a la salinidad que la
nitrificacin (McClung y Frankenberger, 1985).
43
los
cuales
requieren
ciertas
condiciones
ptimas
para
su
funcionamiento.
Los estudios de Pathak y Rao (1998) sobre la nitrificacin en suelos salinos
demuestran que la actividad microbiana es deprimida por las sales, pero la
mineralizacin bioqumica contina por la accin enzimtica (aminasas y
deaminasas) que no son afectadas por la salinidad y que al final es el resultado de
la actividad microbiana, esto soporta el hecho de que la mineralizacin del N es de
naturaleza microbiolgica.
Por otra parte McClung y Frankenberger (1987), concluyen que la
amonificacin es estimulada a bajas concentraciones de sal e inhibida a elevadas
cantidades, mientras que la nitrificacin es muy sensitiva a la salinidad.
La estimulacin de la amonificacin a baja salinidad es explicable con base
en la solubilizacin de la materia orgnica que liberan substratos carbonceos
como protectores osmticos para los microbios (Broadbent y Nakashima, 1971).
Aunque la actividad microbiana es deprimida por las sales esta puede ser
estimulada por la adicin de enmiendas orgnicas como en el caso de la alfalfa,
que aparentemente reduce la sensibilidad del Nitrobacter spp., Nitrosomonas spp.,
al NaCI, teniendo un comportamiento similar toda la poblacin microbiana
(McCormik y Wolf, 1980).
Burket y Dick (1998), consideran que las investigaciones futuras sobre el
comportamiento del grado de diversidad microbiana resulte del manejo del suelo
y/o su gnesis como factores importantes en el control de las transformaciones de
nitrgeno. Aunque la medicin de la diversidad gentica tal como la
44
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46
47
los
contaminantes
que
ocasionan
factores
estresantes
como
los
48
que las comunidades son sistemas regulados por si mismos los cuales se forman
por los compuestos de carbn suplementados.
Los estudios de Drury, (1999) basados en la utilizacin de substratos
orgnicos para incrementar la accin de las bacterias aerbicas deprimidas por los
efectos estresantes, como en el caso de las aguas residuales de las minas, esta
estimulacin es fundamental para el desarrollo de sistemas que aceleren los
procesos de biotransformacin de las aguas residuales contaminadas de la
industria y la minera.
De manera similar a la posicin ideolgica de los autores anteriores,
Thouand et al., (1999) prueban ocho productos bacterianos comerciales que, de
acuerdo a los fabricantes, son capaces de degradar el petrleo. Estos estudios
comparan la actividad de biodegradacin del petrleo crudo por los inculos
comerciales contra los inculos naturales (Iodos activados y agua de acuario
tropical).
Los resultados condujeron a la conclusin que el inculo natural, como
cualquiera, se adapte o no adapte al petrleo crudo, es ms activo (de 16 a 25%
ms de prdida sobre el peso del petrleo crudo) y nicamente un inculo
comercial es capaz de degradar el 18% de petrleo crudo (Thouand et al., 1999).
Con la misma posicin que el autor anterior, Avnimelech (1999), en su
investigacin sobre estanques acucolas, control el nitrgeno orgnico para
manipular las proporciones de carbn/nitrgeno y observ que esto tiene un gran
potencial como mtodo de control de las condiciones qumicas y microbiolgicas
para los sistemas acucolas.
Este enfoque parece ser prctico y no un medio caro para reducir la
acumulacin de nitrgeno inorgnico en los estanques. El control es inducido por
la alimentacin de las bacterias con carbohidratos, y a travs de las subsiguientes
tomas de nitrgeno del agua por las bacterias, por la sntesis de las protenas
microbianas (Avnimelech, 1999).
Al igual que en los estanques acucolas, algunos de los compuestos de
nitrgeno pueden ser contaminantes que ocasionan problemas en otros sistemas
de produccin. Los reactores biolgicos que son parte de los pre-tratamientos para
49
evitar el lixiviado de nitritos a los mantos freticos, requieren de estudios sobre los
mecanismos para evitar el lixiviado de cancergenos como los nitritos. Al respecto
Helmer et al., (1999), desarrollaron investigaciones mediante el manejo de los
substratos para equilibrar las relaciones C:N en Mechemich (Alemania) en donde
observaron que el 60% del nitrgeno o ms, son eliminados bajo condiciones
mnimas de oxgeno disuelto (OD). El amoniaco es convertido sin la acumulacin
de nitritos y nicamente se produce una pequea cantidad de nitrato.
Los resultados indican que bajo concentraciones mnimas de OD las
bacterias autotrficas oxidadoras de amonio deben ser el agente causal de las
prdidas de nitrgeno observadas por la desnitrificacin aerbica/anaerbica con
el nitrito como electrn aceptor y el amonio (o quiz la hidroxilamina) como
electrn donador (Helmer et al., 1999).
Al analizar el desarrollo biotecnolgico del rea de la fertilidad biolgica, se
observa que los microorganismos del suelo, y los procesos que ellos gobiernan,
son esenciales para la sustentabilidad a largo plazo de los sistemas agrcolas,
aunque muchos de los estudios sobre los efectos de la agricultura en la microflora
del suelo solo se han desarrollado a corto plazo (Wardle et al., 1998).
Entre los estudios a largo plazo, realizados por Wardle et al., (1999) para
determinar los efectos de los herbicidas en el comportamiento de las poblaciones
microbianas, observaron que los tratamientos con atrazina permiten una elevada
biomasa de las hierbas causada por un gran incremento en la biomasa microbiana
y la respiracin despus de 3 aos, y en ambos sitios labiomasa microbiana est
positivamente correlacionada con la biomasa de las hierbas y negativamente con
la biomasa de las plantas de los cultivos.
De acuerdo al estudio de Wardle et al., (1999) se demuestra que las
propiedades biolgicas del suelo tales como la biomasa microbiana y su actividad
no son por necesidad adversamente afectados por la intensificacin de la
agricultura y que las consecuencias de la intensificacin principalmente dependen
de las prcticas de cultivo, las cuales alteran la calidad y la cantidad de residuos
dejados.
Por otro lado, es importante considerar que la estimulacin de la fertilidad
50
51
52
53
54
sesenta y dos tanto para las placas GN como para las placas GP y 33 substratos
son nicos para cada placa (Biolog system, 3938 Trust Way, Hayward, California,
USA 94545).
Es importante hacer notar que aunque el sistema es desarrollado para
examinar la actividad respiratoria ms que el crecimiento, las bacterias pueden
crecer en las fuentes de las pocillas. Si el inculo diluido usado tienen menos de
108 clulas por ml-1, el color no puede desarrollares, o bien puede tener una
funcin sigmoidea a travs del tiempo, en el cual los retrasos iniciales representan
un periodo durante el cual el inculo crece hasta alcanzar 108 clulas ml-1, adems
las fases lineales de crecimiento representan una actividad metablica especfica
de un microbio en un substrato especfico para las especies. De esta manera,
todas las fases de crecimiento son afectadas por la fisiologa de los microbios
sobre los substratos individuales. Resumiendo, la fase inicial retrasada es
elevadamente dependiente de la densidad celular en el inculo (Haack et al.,
1995).
Debido a que la fbrica produce tambin placas MT, en las cuales las
pocillas contienen el tinte de tetrasolium pero no substratos orgnicos, el
investigador puede crear un juego de substratos hechos a la medida, de aqu que
existan propuestas como las de Insam (1997), para seleccionar los substratos
disponibles
comercialmente
como
placas
de
multi-substratos
(Biolog,
55
carbohidratos
cidos carboxlicos
-D-Lactosa
-keto cido glutrico
-metil-D-glucosa D-cido galacturnico
polmeros
-ciclodestrina
Glicgeno
Amino cidos
Arginina
L-asparginina
D-manitol
I-eritritol
Glucosa-I-fosfato
D-cido glutmico
D-cido mlico
cido itacnico
Tween 40
Tween 80
Compuestos
Fenlicos
L-fenilalanina
L-serina
Xilosa
D-cido
Galactnico
Lactona
metil piruvato
-cido hidrxibutrico
2-hidrxibenzoato
estudiadas
debe
ser
usualmente
baja
para
permitir
probar
56
57
de
las
actividades
implicadas
en
tales
funciones
como
la
58
substratos
de
azcar
bajo
condiciones
quimiostticas4
con
niveles
Substrato utilizado
Bacterias autotrficas
Bacterias heterotrficas
14C-HCO3
3
H-glucosa
referencia
Carmen, 1990
Meyer-Reil, 1978
Mezclas de
3
H-aminocidos
Bacterias oxidadoras
C-HCO3-
P-PO4-
14
Bacterias biodegradadoras
de fsforo
33
Bacterias desnitrificadoras
14
C-acetato, NO3
______________________________________________
4
Quimiostato.- sistema de cultivo en flujo continuo que mantiene una poblacin de microorganismos en la
fase exponencial de crecimiento durante un largo intervalo de tiempo, limitando la concentracin de un
substrato esencial.
59
60
actuar como un substrato para la fijacin de N2 por las hetertrofas de vida libre
(Kahindi et al., 1997).
Dentro de las afinidades de los substratos por las diazotrofas aisladas en
las races de los pastos salados se encuentra el cido carboxlico, mientras que
por otro lado, son pocos los aislados cuando los cultivos de la raz de Spartina son
suplementadas con glucosa o sucrosa, no sucediendo lo mismo cuando se
suplement con sucrosa a los medios de cultivo para las races de Juncus
roemerianus que aumenta substancialmente el nmero de filtrados (Bagwell et al.,
1998).
Los substratos rpidamente disponibles, e.g. la glucosa, incrementan los
agregados estables al agua, los cuales trascienden durante varias semanas,
aunque sta es descompuesta rpidamente por los microorganismos del suelo
(Tisdall y Oades, 1982).
Esta trascendencia quiz se deba a la estimulacin de la actividad
microbiana, misma que produce geles de polisacridos extracelulares, los cuales
actan como agentes adherentes en los suelos (Burns y Davies, 1986), adems
de producir protones a travs de los cidos grasos que pueden reducir
dramticamente el pH del suelo, lo cual es linealmente relacionado a la proporcin
de la adicin de glucosa, confirmando la efectividad de la recuperacin de los
suelos alcalinos sdicos (Chorom y Rengasamy, 1997).
El crecimiento microbiano estimulado por los substratos orgnicos crea
condiciones geoqumicas que prevalecen en la superficie terrestre. Cuando los
microorganismos metabolizan varios electrones donadores a costa de los
electrones aceptores disponibles, forman la zona redox, a lo largo de las rutas de
flujo del agua. Estas condiciones geoqumicas cambiantes permiten la sucesin de
diferentes ensamblajes microbianos (Ulrich et al., 1998).
Las reacciones de xido-reduccin influyen en la capacidad de retencin
inica, por la presencia de grupos reactivos funcionales (carboxilos, enlicos y
fenlicos) que aceleran las reacciones qumicas, adems de que la biomasa
microbiana incorpora algunas cantidades de iones dentro de su sistema. Esta
retencin inica de la biomasa microbiana es de 3 a 4 veces ms elevada que en
61
62
63
64
65
66
que los nemtodos que se alimentan de los hongos inducen cambios similares en
los hongos que en las bacterias.
67
El Chococo
1847'
10355
10 msnm
26.9 C
1785.4 mm
801.2 mm
Agrcola
Hplico
Salina/Sdica
68
69
a) Caractersticas granulomtricas
Las caractersticas granulomtricas que se determinaron fueron: porcentaje
de arena, limo arcilla (textura) empleando el mtodo de Boyoucos. Estas
caractersticas se evaluaron en el total de las muestras recolectadas y mezcladas
de donde se obtuvo el suelo para los distintos tratamientos.
b) Conductividad hidrulica
La conductividad hidrulica se determin por el mtodo de carga constante,
el cual consiste en ponerle a una columna de suelo con una carga constante de
agua y evaluar a travs del tiempo la infiltracin de esta colectando en un
recipiente de volumen conocido el gasto que se almacena con intervalos de
tiempo definidos, posteriormente se calcula la velocidad de flujo y aplicando la
ecuacin de Darcy se calcula la conductividad hidrulica.
El resultado de las pruebas qumicas del suelo se efectu despus del
70
c) Capacidad de campo.
La capacidad de campo se determin en columnas de suelo de plstico
transparente de 30 cm de altura y 37 mm de dimetro interior, a las cuales se les
deposit 250 cm3 de suelo a las cuales se les adicionaron 35 ml de agua
destilada.
El porcentaje de humedad retenido por el suelo se hizo a las 24 horas de
adicionada el agua a las columnas de suelo. Tomando el tercio medio de la parte
humedecida, el cual se sec en estufa a 110 C hasta llevarlos a peso constante,
por diferencia de pesos se calcul el contenido de humedad correspondiente a la
capacidad de campo.
71
entre
0.230
hasta
19.017
mmol/L
con
una
lectura
en
el
e) Determinacin de cloruros
Los cloruros se determinaron por titulacin con nitrato de plata, despus de
la titulacin de los carbonatos y bicarbonatos agregndosele una gota de cromato
72
e) Determinacin de sulfatos
Los sulfatos se determinaron por turbidimeta usando una solucin
estabilizadora compuesta por glicerina, cido clorhdrico, alcohol isoproplico,
cloruro de bario y agua destilada.
La solucin patrn se elabor con K2SO4 para determinar la curva de
lectura y relacionarla con las cantidades de sulfatos contenidos en las muestras.
Los anlisis se determinaron por medio de la absorbancia con un
espectrofotmetro (Marca Spectronic 20).
concentracin
NaCI
2.05
KCI
1.05
CaCl2
0.83
KH2PO4
0.48
MgSO4.7H2 O
0.87
73
x mL de la muestra
= -----------------------------20 mL
74
100 l para cada una de las 96 pocilla contenidas en las placas (Derry, 1998).
Antes de inocular las placas se marcaron con el nmero de grupo y la fecha
correspondientes.
Las placas ya inoculadas se incubaron a 30 C durante 120 horas.
Los registros de los resultados, se efectuaron de manera visual para cada
una de las 96 pocillas de las placas, usando un formato cuadriculado en el cual
apareca en el mismo orden, el nombre y localizacin de cada uno de los
substratos contenidos en las pocillas.
Cada fondo de la pocilla que reaccionaba al tinte de tetrazolium,
transformndolo al formzan, apareca de color prpura en la placa lo cual se
consider como positivo.
Los datos con los que se registraron las placas fueron las siguientes:
Fecha:
Hora:
Tipo de placa:
Tipo de medio:
Placa #:
Nombre del filtrado:
Nmero de filtrado:
Observaciones:
Los signos usados para la identificacin de los resultados en las tarjetas
fueron:
XX = Positivo,
B = lnea bordeada,
.. = negativo
75
ec 1
C = Yi/rt = ( ij Yij)2
rt
76
ec 2
ec3
ec 6
rS
~ =
SY~ - Yi
Sr
ec 7
ec 8
dms = T /2 S
2(F)
r
ec9
77
78
Aplicaciones:
P = Poblaciones,
M = Muestras representativas.
DE = dentro de especies, EEM = Entre especies muy relacionadas, EEP
entre especies poco relacionadas.
T = La cantidad promedio de substratos utilizados por la muestra.
P = se aplica a Poblaciones
M = se refiere al nmero de muestras representativas.
DL = se define la disimilaridad dentro de los lotes.
Se define solo las relaciones existentes entre los grupos de substratos
(EEM), y las muestras que menos se relacionan (EEP).
Las observaciones de las matrices de correlacin, son tiles porque estas
pueden puntualizar las observaciones entre las variables que pueden mostrar las
coherencias del juego de datos y puede evidenciar la participacin individual de
los parmetros a evaluar (Helena et al., 2000).
Al comparar un par de variables de dos poblaciones, el inters es conocer
qu tan similares son? O, equivalentemente, qu tan diferentes (disimilares)
son?. Es necesario dar respuesta numrica y existen varias formas de hacerlo. Si
se consideran dos poblaciones, es decir i vs. j a las cuales se les determina su
disimilaridad con respecto las variables, en la siguiente tabla:
0
A
C
A+C
Poblacin j
1
B
D
B+D
A+B
C+D
N= A+ B+ C+D
79
1
0
1
2
1
1
3
1
0
4
0
0
5
1
1
6
0
7
0
1
8
1
1
9
1
1
10
1
0
11
0
1
12
1
0
13
0
1
14
0
1
15
1
1
0
A=2
C=3
5
0
1
Totales
Poblacin j
1
B=5
D=5
B10
7
8
15
Es claro que las "similaridades" entr las poblaciones estn dadas por A y
D, mientras que las diferencias o "disimilaridade estn dadas por B y C. Esta
informacin se puede resumir en un coeficiente de similaridad o disimilaridad de
diferentes maneras. Con respecto al coeficiente de Jaccard.
SJ = D / ( B + C + D ) = 0.3846
Este coeficiente vara entre 0 y 1. Se puede definir los correspondientes
coeficientes de disimilaridad como D = 1 S, con lo que tenemos:
D J = 1 SJ = ( B + C ) / ( A + B + C + D )
Considerando un caso de tres poblaciones en donde se analizan 15
variables preestablecidas, nos preguntamos qu tan diferentes son?
Pobl.
i
j
K
1
1
1
0
2
0
1
3
1
0
0
4
0
1
1
5
1
0
0
6
1
0
0
7
1
0
0
8
1
0
0
9
1
0
0
10
1
0
0
11
1
0
0
12
1
0
0
13
1
0
0
14
1
0
0
15
1
0
0
Disimilaridad de Jaccard
dj
j
i
0.9285714
j
0.0000000
k
1.000000
0.666667
81
82
E= H/1n S
Donde:
H= ndice Shannon de diversidad
S = nmero de fuentes con color desarrollado
83
IV. RESULTADOS
84
CE
dSm-1
T0
9.3
1.44
9.3
T1
9.1a
1.57a
9.8a
T2
8.8a
1.83a
8.7b
T3
8.4a
2.03a
9.4b
T4
8.0b
2.77a
8.9b
T5
7.7b
3.47b
7.7c
T6
3.83b
7.6b
7.6c
T7
8.2b
2.07a
8.7b
T8
7.7b
3.33b
8.8b
T9
7.4c
4.70c
8.4b
T10
8.0b
2.33a
8.7b
T11
7.8b
3.03b
8.1 c
T12
7.4c
3.83b
8.3b
Nota: las mismas letras no tienen diferencias significativas
CE
dSm-1
ND
0.57
0.40b
0.40b
0.33c
0.30c
0.30c
0.43b
0.40b
0.30c
0.47
0.40c
0.37c
b). Bicarbonatos
Despus
de
la
incubacin
las
concentraciones
de
bicarbonatos
86
CO32-
HCO3
T0
7.20
ND
ND
SO42mg/L
ND
T1
5.17a
1.65a
0.00a
38.7a
T2
T3
3.25b
1.83b
1.55a
1.35a
0.80a
0.75a
63.3c
62.0c
T4
T5
T6
2.83b
2.50b
3.75a
1.20a
1.25a
1.20a
1.88a
6.38b
6.68b
46.2a
46.0a
46.3a
T7
T8
T9
4.75a
4.78a
5.08a
0.90a
0.23b
0.20b
3.00a
5.96b
8.59c
46.7b
48.0b
50.3b
T 10
T 11
T 12
5.22a
5.00a
5.30a
1.00a
0.23b
0.38b
3.08a
5.56b
7.34b
48.7b
49.3b
50.7b
Tratamientos
Cl-
CO3-
HCO3-
T0
7.20
ND
ND
SO42mg/L
ND
T1
13.8a
1.80a
0.00a
19.3a
T2
T3
10.7c
12.1 b
1.35a
0.80b
0.60a
1.61c
4.0c
5.0c
T4
T5
T6
12.6a
12.0b
12.3b
0.98b
0.75b
0.45c
0.68b
0.45a
1.20b
7.0c
6.0c
5.3c
T7
T8
T9
13.0a
12.1 b
12.8a
0.90b
0.23c
0.23c
0.68b
1.39c
1.20b
8.7b
7.3c
5.0c
T 10
T 11
T 12
12.7a
12.5a
13.8a
0.63b
0.53b
0.45c
0.79b
1.16b
1.28b
7.7c
7.0c
5.7c
87
c). Carbonatos
Con respecto a los carbonatos despus de la incubacin, se observ que
estos disminuyen en algunos de los tratamientos donde se combin la paja con
concentraciones de glucosa superiores a 40 g/kg (T8, T9, T11 y T12) mientras que en
todos los dems tratamientos no se observaron diferencias significativas entre si
(P<0.05) (Cuadro 7).
Despus del lavado del suelo los carbonatos en la solucin del suelo permanecen
ms elevados en el grupo control (T1) y en el tratamiento donde se adicion paja
en proporciones de 20 g/kg (T2) mismos que no presentan diferencias
significativas entre s, adems de que las concentraciones de carbonatos en T1
son ms elevadas despus del lavado del suelo, mientras que en todos los dems
tratamientos las disminuciones son evidentemente significativas (P<0.05).
d). Sulfatos
El efecto de los tratamientos en el incremento de la concentracin de los
sulfatos despus de la incubacin fue considerablemente mayor cuando se usaron
enmiendas de paja con respecto a los dems tratamientos, mientras que en los
tratamientos control y los que contenan solo glucosa como enmienda no
mostraron diferencias significativas entre s (Cuadro 7).
Con respecto a las concentraciones de sulfatos por el efecto del lavado del
suelo, se observa que estos disminuyen en todos los tratamientos, aunque las
mayores concentraciones se presentaron en el tratamiento control, que fue
diferente significativamente a los dems tratamientos, los cuales mantuvieron una
proporcin dos a tres veces menor que el tratamiento control (Cuadro 8).
88
tratamientos donde se usaron enmiendas de paja sola y en los tratamientos T4, T7,
T10, y T11 (Cuadro 9).
El comportamiento del Mg2+ despus de la incubacin fue igual que el del
Ca2+, en cuanto a la significancia (P<0.05) entre los tratamientos, aunque las
concentraciones de este catin fueron menores que las del calcio (Cuadro 9).
Mg 2+
4.6
Na+
8.9
K+
0.29
T1
3.02a
1.75a
7.63a
0.70a
T2
T3
3.18a
3.43a
1.46a
1.43a
7.73a
7.78a
0.80a
1.00a
T4
T5
T6
4.10a
8.74b
8.49b
2.38a
4.90b
5.41 b
9.15b
9.41 b
8.29a
0.72a
0.70a
0.75a
T7
T8
T9
3.96a
8.90b
13.8b
2.53a
5.12b
8.65c
6.36a
6.24a
6.71a
0.90a
1.20a
1.30a
T 10
T 11
T 12
4.78a
4.90b
8.99b
2.66a
3.76b
7.03b
7.96a
8.29a
8.75a
1.30a
1.50b
2.20b
Tratamientos
T0
89
b) Potasio
Las concentraciones del potasio por efecto de los tratamientos despus de
la incubacin, solo presentan diferencias significativas (P<0.05) los tratamientos
T11 y T12 con respecto a los dems tratamientos (Cuadro 9).
En las concentraciones del potasio despus del lavado del suelo se observ
que existen diferencias significativas (P<0.05) en T3, T8 , T10, T11 y T12 los cuales
presentaron una mayor concentracin con respecto a los dems tratamientos
(Cuadro 10).
Cuadro 10. Concentracin de los cationes solubles (meq/100g) en los tratamientos del
suelo despus del lavado.
Tratamientos
T0
Ca 21
5.1
Mg2+
4.6
Na+
8.9
K+
0.29
T1
2.0a
2.6a
1.6a
0.16a
T2
T3
2.2a
2.3a
2.1 a
2.2a
1.4a
1.5a
0.29a
0.36b
T4
T5
T6
2.3a
2.2a
2.1a
2.3a
2.3a
1.1c
1.1a
1.0a
0.9b
0.16a
0.16a
0.20a
T7
T8
T9
2.4a
2.6a
2.9b
2.0b
2.6a
2.1a
1.5a
0.6b
0.3b
0.23a
0.45b
0.32a
T 10
T 11
T 12
2.7a
3.7c
3.7c
2.3a
2.0b
2.6a
1.4a
1.2a
0.3b
0.34b
0.37b
0.55b
c) Sodio
Se observ que las concentraciones del sodio por efecto de los
tratamientos despus de la incubacin solo presentan diferencias significativas
(P<0.05) los tratamientos T4 y T5 con concentraciones mayores al tratamiento
control (9.15 y 9.45 respectivamente contra 7.63 meq/100g de suelo para T1)
(Cuadro 9).
El efecto del lavado del suelo para el Na + de los tratamientos fue
significativo (P<0.05) con respecto al tratamiento control en los tratamientos T5, T 8,
90
T9 y T12, los cuales presentan las menores concentraciones en las soluciones del
suelo (Cuadro 10).
RAS
PSI
T0
ND
ND
CIC
meq/L
ND
T1
5.8a
7.42a
58.0a
T2
T3
5.6a
6.0a
6.91a
7.69a
63.0a
70.3b
T4
T5
T6
5.1b
5.4b
5.5b
6.33b
6.83b
6.80b
61.0a
63.7a
64.3a
T7
T8
T9
5.9a
5.8a
5.8a
7.45a
7.40a
7.40a
66.7b
68.3b
78.7c
T 10
T 11
T 12
5.7a
5.7a
5.8a
7.25a
7.25a
7.40a
66.7b
69.3b
80.3c
Despus del lavado de los suelos las RAS de todos los tratamientos no
mostraron diferencias significativas (P<0.05) observndose un rango en la RAS de
0.9 a 1.3, observndose el mismo comportamiento en o
l s bajos porcentajes del
sodio intercambiable que fueron de 0.03 a hasta 0.73. (Cuadro 12).
91
Cuadro 12. Caractersticas qumicas generales de los tratamientos del suelo despus
de la incubacin y lavado del suelo.
Tratamientos
RAS
PSI
T0
ND
ND
CIC
meq/L
ND
T1
1.2a
0.52a
42.3a
T2
T3
1.3a
1.3a
0.73a
0.65a
50.7a
58.8a
T4
T5
T6
1.1a
1.0a
0.9a
0.38a
0.23a
0.08a
41.3a
41.7a
43.0a
T7
T8
T9
1.0a
0.9a
0.9a
0.17a
0.08a
0.03a
53.3a
54.3a
56.0a
T 10
T 11
T 12
1.1a
1.1a
0.9a
0.03a
0.46a
0.30a
57.5a
62.0a
63.0a
92
Despus del lavado de los suelos se observa que los arrastres de los
solutos disminuyen la CIC, no existiendo diferencias significativas en ninguno de
los tratamientos (Cuadro 12).
93
a) Conductividad Hidrulica
Se puede considerar que las enmiendas mejoraron significativamente
(P<0.05) los ndices de infiltracin solo en los tratamientos donde se combinaron
40 g/kg de paja con las distintas proporciones de glucosa no siendo as para los
dems tratamientos.
b) Capacidad de campo
La capacidad de campo (CC) se midi a travs de muestras del suelo
original por separado, usando las mismas proporciones de enmiendas que se
usaron para cada uno de los tratamientos antes de iniciar la incubacin.
94
MO
%
1.63a
CC
%
18.0a
CH
cm/min
0.1 a
T2
T3
3.38b
4.52b
23.5b
27.1 b
0.6a
1.6a
T4
T5
T6
2.77b
3.88b
4.97b
19.9a
20.2a
21.1a
0.3a
0.2a
0.4a
T7
T8
T9
3.45b
4.68b
5.54c
21.6a
22.7a
22.7a
0.9a
1.7a
1.8a
T 10
T 11
T 12
4.47b
5.13c
5.49c
26.8b
27.2b
27.8c
2.7b
2.8b
5.0c
95
manejaron
por
grupos
separados
de
carbohidratos,
cidos
carboxlicos,
96
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9
T 10
T 11
T 12
disimilaridad
disimilaridad
entre el muestreo
entre el muestreo
a 30 y 60 dasa 30 y 90 das
0.083
0.154
0.533
0.214
0.400
0.143
0.278
0.143
0.278
0.200
0.368
0.375
0.077
0.267
0.125
0.313
0.188
0.313
0.240
0.438
0.125
0.125
0.125
0.176
disimilaridad
entre el muestreo
a 60 y 90 das
0.077
0.563
0.286
0.389
0.316
0.368
0.248
0.313
0.353
0.333
0.133
0.067
97
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9
T 10
T 11
T 12
disimilaridad
disimilaridad
entre el muestreo
entre el muestreo
a 30 y 60 das a 30 y 90 das
0.111
0.067
0.560
0.267
0.500
0.267
0.318
0.364
0.333
0.333
0.407
0.280
0.250
0.304
0.274
0.267
0.360
0.292
0.393
0.292
0.393
0.250
0.276
0.251
disimilaridad
entre el muestreo
a 60 y 90 das
0.000
0.480
0.500
0.292
0.320
0.254
0.400
0.251
0.296
0.250
0.179
0.138
98
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9
T 10
T 11
T 12
disimilaridad
entre el muestreo
a 30 y 60 das
0.143
0.333
0.429
0.462
0.462
0.500
0.308
0.250
0.286
0.357
0.385
0.286
disimilaridad
entre el muestreo
a 30 y 90 das
0.143
0.273
0.308
0.364
0.364
0.417
0.333
0.250
0.250
0.250
0.500
0.357
disimilaridad
entre el muestreo
a 60 y 90 das
0.000
0.091
0.286
0.333
0.167
0.231
0.214
0.167
0.154
0.286
0.400
0.313
99
100
101
102
103
105
106
Diversidad
30 das
2.109(0.05)a
uniformidad
30 das
0.557(0.009)a
Diversidad
60 das
2.253(0.048)a
uniformidad
60 das
0.585(0.060)a
Diversidad
90 das
2.237(0.055)a
uniformidad
90 das
0.581(0.06C)a
T2
T3
2.141(0.15)a
2.205(0.14)a
0.563(0.028)a
0.576(0.028)a
2.652(0.073)a
2.892(0.073)b
0.661(0.100)a
0.705(0.070)a
2.429(0.100)a
2.525(0.073)a
0.605(0.100)a
0.616(0.070)a
T4
T5
T6
2.557(0.12)b
2.365(0.12)b
2.604(0.22)b
0.643(0.023)b
0.607(0.023)a
0.652(0.041)b
2.940(0.073)b
3.116(0.048)b
3.212(0.048)b
0.714(0.070)a
0.746(0.100)a
0.764(0.150)a
2.700(0.073)a
2.780(0.096)b
3.100(0.146)b
0.656(0.070)a
0.666(0.100)a
0.737(0.150)b
T7
T8
T9
2.636(0.10)b
2.844(0.12)b
2.764(0.03)b
0.658(0.018)b
0.697(0.022)b
0.682(0.005)b
3.004(0.073)b
3.020(0.048)b
3.132(0.073)b
0.726(0.120)a
0.729(0.070)a
0.749(0.100)a
3.132(0.121)c
2.940(0.073)b
2.972(0.096)b
0.757(0.120)b
0.710(0.070)b
0.711(0.100)b
T10
2.684(0.13)b
T11
2.700(0.03)b
T12
2.892(0.03)c
ANOVA
P =0.102
0.667(0.024)b
0.670(0.005)b
0.705(0.005)c
P =0.019
3.292(0.073)b
3.419(0.073)b
3.547(0.096)c
P =0.060
0.778(0.150)a
0.801(0.100)b
0.824(0.100)b
P =0.011
2.988(0.146)b
3.212(0.096)c
3.308(0.096)c
P =0.089
0.706(0.150)b
0.753(0.100)b
0.769(0.100)c
P = 0.021
* el promedio de los tratamientos (la desviacin estndar). Dentro de cada una de las columnas, para cada
dato de las muestreas, los datos seguidos por las diferentes letras significan diferencias con el uso de la
prueba de Tukey (P<0.05).
107
V. Discusin
a) Comportamiento del pH y la CE
Despus del periodo de incubacin disminuy significativamente (P<0.05) el
pH en todos los tratamientos que contenan glucosa en proporciones mayores o
iguales a 40 g/kg de suelo ya sea que esta se encontrara sola o combinada con
paja. Esta disminucin del pH fue acompaada de un incremento en las
concentraciones de los electrolitos en las soluciones del suelo para todos los
tratamientos que contenan enmiendas.
Este comportamiento se considera que es debido a los productos de la
descomposicin de la glucosa, que en los primeros das da lugar a la produccin
de metabolitos como los cidos carboxlicos y los grupos hidroxil fenlicos, tal y
como lo explica Kim et al. (1998), por lo que probablemente el pH haya sido similar
al de los suelos tratados en el experimento de Choromo y Rengasamy (1997) en
donde registran un pH dentro de los primeros 30 das menor que 6.8, aunque al
final del periodo de incubacin (320 das) el valor de este parmetro qued en 7.4,
108
109
puede ser afectado por las caractersticas biogeoqumicas del suelo as como por
la distribucin relativa de los solutos en los poros.
La produccin de cidos orgnicos a partir de la descomposicin de las
enmiendas de glucosa (Chorom y Rengasamy, 1997) y paja (Bada, 2000)
incrementa la estabilidad del Ca2+ y el Mg2+ que se intercambia con el Na + , lo que
hace que el RAS no se vea afectada en los suelos salinos tal y como se observ
en el presente estudio (Cuadro 11 y 15).
Si consideramos solo los datos de las concentraciones electrolticas por
salinidad sin tomar en cuenta las dems condiciones fisicoqumicas y biolgicas
del suelo las concentraciones de 1.0 dSm-1 pueden destruir progresivamente las
clulas (Rao, 1994; Rao y Pathak, 1996; Garca y Hernndez, 1996) y adems
limitar la diversidad microbiana (Garabito et al., 1998).
De acuerdo con las observaciones anteriores el presente estudio difiere en
cuanto a que ellos determinaron que la CE se encuentra negativamente
relacionada con la actividad microbiana del suelo aunque estas observaciones
fueron hechas bajo condiciones de campo y sin la alteracin de las condiciones
del suelo por el efecto de las altas concentraciones de las enmiendas.
Estos hechos pueden ser observados si las poblaciones microbianas no
disponen de fuentes de carbono para modificar su medio ambiente y de esta
manera poder soportar mayores concentraciones de electrolitos (hasta 4.7 dSm-1
en T9), como las que se presentan en los tratamientos con enmiendas que
incrementan la diversidad bacteriana, en la medida que ellas disponen de fuentes
de carbono fcilmente disponibles, para sintetizar osmolitos orgnicos compatibles
como la glutamina, prolina, glicina-betaina y algunas acumulan solutos inorgnicos
tales como el K+ y el Mg2+ , adems la sntesis de patrones de protenas, lpidos,
cidos grasos y polisacridos pueden cambiar (Zahran, 1997; Tripathi et al., 1998).
La sntesis de estos compuestos orgnicos, forma lo que se conoce como
materia orgnica disuelta, que acta ligando los electrolitos que pueden ocasionar
la disminucin del crecimiento y muerte de las clulas microbianas. Adems de los
grupos funcionales producidos durante le proceso de humificacin, la misma
biomasa microbiana encargada de producir estos cidos orgnicos, incorpora
110
111
12
C y la CIC, y los espacios porosos totales que sugieren que las reacciones
de adsorcin pueden ser de gran importancia para que los organismos localizados
dentro de los pequeos poros sobrevivan.
Respecto a la supervivencia de las bacterias Kim et. al. (1998), encontraron
que en los tratamientos donde usaron glucosa al 1 % a un periodo de 55 das,
hubo una mayor sobrevivencia de las bacterias solubilizadoras de fsforo que con
otros tratamientos.
El efecto de la glucosa en la diversidad de las bacterias puede ser benfico,
sobre todo para aquellas bacterias de gran importancia para la fertilidad de las
plantas como las diazotrofas que a largo plazo incrementan en un 300% cuando
se usan enmiendas de glucosa (Keeling et al., 1998).
Adems del efecto de adsorcin provocado por la mayor CIC al adicionar
glucosa, (a incorporacin de la paja maz en los tratamientos increment la
capacidad de sorcin de los solutos orgnicos en los procesos de lavado. Esto
segn Hadas et al., (1998) y Stemmer et al. (1999) se debe a las caractersticas
fsicas y a la lenta descomposicin de las pajas cuando se mezclan con el suelo,
adems de incrementar la actividad microbiana cuando las pajas es mezclada con
fuentes de carbono fcilmente disponibles como la glucosa.
La influencia de las relaciones de C:N en la eficiencia la descomposicin de
este tipo de fuentes de C provenientes de la paja, puede ser limitante solo en las
primeras etapas de descomposicin, tal y como lo explican Hadas et al. (1998)
quienes trabajan con paja de trigo mezclada con arena y una suspensin
112
113
Desde otra perspectiva Noack et al., (2000) explican que las partculas del
suelo se clasifican segn el tamao y as aumenta el grado de la posible filtracin
fsica que los coloides con mayor movilidad en tierras de carga baja pueden
escapar bastante filtracin fsica por la matriz del suelo. Esto es aplicable
principalmente a la saturacin de la tierra por concentraciones de sal, sobre todo
cuando la saturacin es elevada y las interacciones entre las partculas aumentan
la movilidad.
El efecto de mayor movilidad de las partculas del suelo por efecto de la
filtracin se pudo demostrar cuando se incrementaron las concentraciones de paja
a 40g/kg combinndola con las distintas concentraciones de glucosa.
114
los estudios de Chenu (1993) y Nelson et al. (1999), donde observaron que el
incremento en la conductividad hidrulica (CH) es debido a la mejora en la textura
del suelo por efecto de los polisacridos microbianos que tienen una actividad
adherente y actan como un agente agregante en los suelos, de tal manera que la
estabilizacin de los suelos enmendados con glucosa y las combinaciones con
paja de maz puede ser atribuida en parte a la produccin de este muclago
microbiana formado por los carbohidratos en el subsuelo y los materiales alifticos
en la tapa del suelo que estabilizan el agua.
Las diferencias encontradas en los tratamientos para la CH se pueden
explicar con las observaciones de Tarchizky et al., (1998) que consideran que las
diferencias que se pueden encontrar en la CH dependen de la magnitud de las
propiedades del suelo, de las concentraciones de la MOD, el pH de la solucin y
los tipos de cationes intercambiables.
115
116
117
carboxlicos,
los
aminocidos
por
separado
para
analizar
el
118
119
VI. CONCLUSIONES
120
Con el uso de las enmiendas de paja se concluye que las concentraciones de los
cloruros disminuyen, as como con el uso de a glucosa sola en concentraciones
de 20 y 40 g/kg de suelo (P<0.05) con respecto a los dems tratamientos.
121
122
VII. REFERENCIAS
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132
133
14
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glycine
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betaine
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Anexo
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Atenta mente
Tecomn, Colima a 21 de Noviembre de 2002
UNIVERSIDAD DE COLIMA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS Y AGROPECUARIAS
UNIVERSIDAD DE COLIMA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS Y AGROPECUARIAS
Tecomn, Col., a 15 de Noviembre de 2002
Asunto: Liberacin de Tesis de Maestra
ATENTAMENTE