Informe de laboratorio

Propiedades qumicas de los carbohidratos

Elaborado por:
Carlos Manuel Alzate Rincn
Jos David Serna Morales
Juan David Collazos Escobar

Escuela de microbiologa

Universidad de Antioquia

2016

Introduccin
En este laboratorio se hicieron pruebas relacionadas con las propiedades
qumicas de las molculas orgnicas llamadas carbohidratos, sus procesos de
identificacin ya que estas molculas comprenden una gran amplitud de molculas
diferentes en sus propiedades fsicas y qumicas, por esta razn se organizan en
forma de: monosacridos, disacridos, oligosacridos y polisacridos.
Objetivos

Identificar los carbohidratos debido a su reactividad con la prueba de

Molisch
Reconocer CHOs preparando las ozasonas correspondientes
Diferenciar carbohidratos reductores y no reductores en presencia del
reactivo de fehling
Diferenciar aldosas y cetosas usando el reactivo de Seliwanoff
Hidrolizar la sacarosa y el almidn

Qu son los carbohidratos?

Definicin de carbohidrato
Los carbohidratos o hidratos de carbono son macronutrientes. Estos componentes
nutricionales deberan representar alrededor del 50% del valor calrico de tu dieta,
ya que a partir de ellos, las clulas de tu cuerpo obtienen la energa suficiente para
el correcto funcionamiento orgnico. Tal es as que, el aporte de energa es
quizs, la principal funcin de los carbohidratos en tu organismo.
Pero... cmo estn compuestos estos macronutrientes? Pues bien, los hidratos
de carbono estn formados por molculas de estos tres elementos qumicos:
Carbono
Hidrgeno
Oxgeno
Estructura qumica de los carbohidratos
Ahora bien, aunque la frmula general es (CH2O)n, debes saber que la estructura
qumica de los hidratos de carbono depender del tipo de azcar de que se trate.
Por tal razn, para entenderla es necesario que conozcas cmo se clasifican los
carbohidratos

Clasificacin de los carbohidratos

Monosacridos

Poseen 4, 5, 6 carbonos.
Estos sacridos se distinguen por la orientacin de los grupos hidroxilos (-OH), lo
que les brinda propiedades qumicas y organolpticas especiales.
Dentro de los monosacridos pueden encontrarse los de forma lineal y los de
forma anular. La fructosa es un ejemplo de ellos.

Disacridos

Estos carbohidratos se forman por la unin de diferentes monosacridos, los

cuales se encuentran unidos en carbonos especficos de cada molcula.
Dentro de este grupo encontrars la sacarosa, la maltosa y la lactosa.

Polisacridos

Estos representan la fuente de reserva de hidratos de carbono simples. Son

estructuras ms complejas formadas por varias uniones de diferentes
sacridos. Por ejemplo el almidn es una mezcla de amilasa y amilopectina, pero
a su vez la amilasa posee entre 200 a 20.000 unidades de glucosa que se
despliegan en forma de hlix.
Dentro de este grupo tambin se puede mencionar a la celulosa, un polmero de
cadenas largas sin ramificaciones de B-D-Glucosa, la cual presenta estructuras
rgidas
Las frmulas de los hidratos de carbono se van convirtiendo en ms complejas de
acuerdo a la cantidad de sacridos que contengan, y de esto depender su
funcin especfica.
Los monosacridos y disacridos son de fcil absorcin y son rpidamente
metabolizados por las clulas. En cambio los polisacridos, en sus diferentes
versiones, son ms difciles de digerir y por ende, de absorber, ya que son
estructuras ms complejas formadas por mucho azcares simples.
Tomado de: http://www.innatia.com/s/c-carbohidratos/a-estructura-quimicade-ch.html

Procedimiento
1. Formacin de ozasonas
A un tubo de ensayo agregue 10 gotas de las siguientes soluciones
Tubo 1: D-glucosa
Tubo 2: D-fructosa
Tubo 3: Sacarosa
Tubo 4: Lactosa
Luego a cada tubo adicione 20 gotas de solucin de clorhidrato de fenilhadrazina
ms acetato de sodio, agite y ponga los tubos al bao mara (80-90 C); espere a
que se forme el slido
2. Poder reductor de los CHOs. Coloque 10 gotas de las siguientes soluciones al
1%
Tubo 1: D-glucosa
Tubo 2: D-fructosa
Tubo 3: Sacarosa
Tubo 4: Lactosa
3. Prueba de Molisch. En cuatro tubos de ensayo agregue 10 gotas de soluciones
al 1% de los siguientes compuestos:
Tubo 1: D-glucosa
Tubo 2: D-fructosa
Tubo 3: Sacarosa
Tubo 4: Almidn
4. Prueba de Seliwanoff. En cuatro tubos de ensayo adiciones 10 gotas de
soluciones acuosas al 1% de los siguientes compuestos
Tubo 1: D-glucosa
Tubo 2: D-fructosa
Tubo 3: Sacarosa

Tubo 4: Almidn
A cada tubo adicione 10 gotas del reactivo de Seliwanoff. Caliente al bao mara
hasta la aparicin de una coloracin.
5. Hidrlisis de sacarosa: En un tubo de ensayo coloque 10 gotas de solucin de
sacarosa al 1% y adicione 10 gotas de HCl al 10%. Mezcle y caliente al bao
mara durante 10 minutos. En caliente adicione 5 gotas de Fehling A y 5 gotas
de Fehling B; luego agregue NaOH 25% hasta que de color azul o verde y
caliente nuevamente al bao mara.
6. Hidrolisis del almidn. En tres tubos de ensayo coloque 20 gotas de solucin
de almidn al 1% y adicione a cada tubo.
Tubo 1: 5 gotas de lugol
Tubo 2: 5 gotas de HCl concentrado
Tubo 3: 5 gotas de HCl concentrado
Al tubo 1 calintelo al bao mara durante 2 minutos, tome de este 10 gotas y
realice la prueba de fehling, luego agregue NaOH al 25% hasta color azul y
caliente al bao mara. A la solucin restante adicinele 4 gotas de lugol.
Repita el proceso para el tubo 3 pero dejndolo calentar por 5 minutos.
Resultados
Formacin de osazonas
En el procedimiento obtuvimos los siguientes resultados respecto a la formacin
del slido de fenilhidrazona.
Compuesto
D-glucosa
D-fructosa
Sacarosa
Lactosa

Tiempo de aparicin del solido

20 min
7 min
n/a
n/a

La formacin de osazonas se da debido a que la fenilhidracina reacciona con el

grupo carbonilo de los monosacridos de cadena abierta para formar
fenilhidrazona, y en exceso de reactivo producen las ozasonas correspondientes.
Por esta razn es que se evidenci el slido precipitado solamente en la Dglucosa y en la D-fructosa, que son monosacridos de cadena abierta, en cambio
la sacaros y la lactosa son disacridos, por lo tanto la prueba no tiene efecto en
ellos.

Poder reductor de los carbohidratos.

D-glucosa

D-fructosa

Sacarosa

Lactosa

Ilustracin 1 Reaccin de Fehling

En este experimento evidenciamos que la D-glucosa, la D-fructosa y la lactosa

dieron positivo a la prueba de fehling logrando oxidar el reactivo hasta formar
Cu2O, evidencindose por el color ladrillo. La D-glucosa y la D-fructosa son
monosacridos con su grupo carbonilo (aldehdo o cetona) libre, por lo tanto
poseen un poder reductor, siendo la glucosa uno de los ms importantes azucares
reductores, en caso de la maltosa al estar compuesta de dos molculas de
glucosa, las molculas de glucosa no pierden su poder reductor a diferencia de la
sacarosa, compuesto por una molcula de glucosa y una de fructosa cuyo enlace
se hace a travs de los carbonos reductores de estas, perdiendo as su capacidad
reductora, incapacidad que se evidencia dando un resultado negativo a la prueba
de fehling.

Prueba de Molisch

Ilustracin 2 Reaccin de Molisch

Para esta prueba todos los tubos dieron positivos: D-glucosa, D-fructosa,
Sacarosa y el almidn, esto se da debido a que todos estos compuestos son
hidratos de carbonos. La formacin del anillo violeta evidenciado en la prctica
debe su grosor a la concentracin de los carbohidratos usados, este anillo se
forma cuando las molculas, si son polisacridos o disacridos se hidrolizan en
sus monosacridos correspondientes, luego de esto se deshidratan por el medio
acido que produce el cido sulfrico, obtenindose un aldehdo cclico
denominado furfural si son pentosas o en hidroximetilfurfurales si son hexosas,
estos compuestos junto con el -naftol forman un compuesto de color violeta .

Ilustracin 3 Resultados de la prueba 3

Prueba de Seliwanoff
Compuesto
D-glucosa
D-fructosa
Sacarosa
Almidn

Tiempo de reaccion
3 minutos
4 minutos
-

La prueba de Seliwanoff solo funciona con las hexosas, ya que este forma un
complejo con el hidroximetilfurfural de las aldohexosas cetohexosas
respectivamente.

Ilustracin 4 Reaccin de Seliwanoff

En el caso de la sacarosa y la fructosa, la reaccin fue exitosa indicando que estos

dos carbohidratos son cetohexosas como en el caso de la fructosa o que por
hidrolisis producen cetohexosas como en el caso de la sacarosa por su bajo
tiempo de coloracin, mientras que la glucosa y el almidn no mostraron
coloracin, esto indica que la glucosa es una aldohexosa, y el almidn por
hidrolisis no produce aldohexosas.

Hidrolisis de sacarosa

Ilustracin 5 Hidrlisis de la sacarosa

La sacarosa al no tener poder reductor debido a que sus dos carbonos

anomricos estn presentes en la formacin del enlace glucosdico esta se
hidroliza en presencia de HCl y con ayuda del calor se hidroliza rompiendo el
enlace glucosdico y descomponindola en fructosa y hexosa, compuestos que si
son reductores por tanto dan positivo a la prueba de fehling.

Ilustracin 6 Reaccin positiva de las hexosas producto de la hidrolisis de la sacarosa con la prueba
de fehling

Hidrolisis del almidn

Almidn + lugol: coloracin violeta

Almidn + lugol + HCl calentado 2 minutos: coloracin marrn
Almidn + lugol + HCl calentado 5 minutos: coloracin marrn ms clara
El lugol forma complejos de inclusin con el yodo en las molculas del almidn
dando la coloracin violeta caracterstica, esto solo se da en fro y no se da en
disacridos o monosacridos por lo tanto a medida de que el almidn va ganando
molculas de glucosa la fijacin del yodo en las molculas de amilopectina va
disminuyendo, esto hace que de tonalidades marrones, indicando una hidrolisis
parcial del almidn.

Compuesto
Almidn + HCl
calentado 2 min

Almidn + HCl
calentado 5 min

Resultado bao
mara
Incoloro

Resultado en
fro
Violeta

Incoloro

violeta

Prueba de
fehling

La amilopectina y la amilosa son los componentes del almidn, la primera siendo

una cadena muy ramificada y la otra siendo una cadena lineal. La amilosa posee
un extremo reductor y el otro extremo no reductor y la amilopectina posee un
extremo reductor, pero muchos que no lo son, esto hace que en proporcin el
almidn sea un carbohidrato no reductor, esto se evidencia en las dos pruebas de
fehling realizadas, ambas con un resultado negativo.

Conclusiones

Se determin qumicamente que la D-glucosa, la D-fructosa , la sacarosa y

el almidn son carbohidratos mediante la prueba de Molisch
Se obtuvo como resultado que solo los monosacridos reaccionan con la
fenilhidracina formando osazonas, como fue en el caso de la D-glucosa y la
D-fructosa
Se determinaron los carbohidratos reductores (D-glucosa, lactosa y Dfructosa) y los no reductores (almidn y sacarosa) mediante la prueba de
fehling
Se diferenciaron las cetosas de las aldosas mediante la aparicin del
compuesto rojo obtenido en la prueba de Seliwanoff
Se hidroliz con xito el almidn descomponindolo en glucosa y fructosa,
evidenciados por la prueba de fehling

PREGUNTAS
1. A qu cree usted que se debe la diferencia de comportamiento del almidn
con la solucin de lugol en caliente ye en frio?
La reaccin del Lugol es un mtodo que se usa para identificar
polisacridos.
El almidn en contacto con el reactivo de Lugol (disolucin de yodo y
yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico. Esa coloracin
producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras
de la molcula de almidn. por lo tanto, no es una verdadera reaccin
qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las
propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul
violeta. Este complejo es sensible a la temperatura, ya que, si se calienta el
tubo, el color desaparece. Esto se debe a que las espiras del almidn se
"desarman", por as decirlo, y el yodo se libera. una vez fro, las espiras se
reorganizan y se vuelve a ver el color.
2. Se puede preparar el cido D glucnico por oxidacin de la D glucosa con
el reactivo de fehling o el reactivo de tollens?
Si ya que estos tienen grupos funcionales fcilmente degradables, por
ende, el empleo del reactivo de tollens y de fehling acta sobre el carbonilo
que posteriormente formara el cido correspondiente. En este caso la
glucosa se oxidar para formar el cido glucnico.
3. Cul es el reactivo que se utiliza generalmente para preparar el cido D
glunico?
El reactivo empleado es la alfa D-glucosa el cual se oxida por el empleo de
la enzima glucosa oxidasa para as a travs de un proceso dar como
resultado el cido. La enzima empleada es una flavo protena que remueve
dos hidrgenos de la glucosa reducindose. La forma reducida de la
enzima luego se re oxida con oxgeno molecular dando agua oxigenada
que es luego hidrolizada por una catalasa. La ecuacin neta se puede
escribir:
D-Glucosa + O,5 O2 ---> cido D-Glunico + H2O
4. Dibuja formulas estructurales para la sacarosa, la maltosa y la lactosa.
Cul de estos disacridos presenta mutarrotacin?

La mutarrotacin es un fenmeno que presentan los monosacridos donde

van a variar el plano de vibracin de la luz polarizada, si son dextrgiras
desvan hacia la derecha, si son levgiras, hacia la izquierda. Entonces en
soluciones acuosas los azucares tienden a ciclarse para ello tienen que
llegar a un equilibrio de +52. 7. En la alfa (D) glucosa tiene una rotacin
especifica de +112.2, para llegar al equilibrio (52.7) tiene que ir
disminuyendo. En la beta (L) glucosa tiene un poder de rotacin inicial de
+19 que tiene que ir aumentando para llegar a 52.7.
Ahora bien, en sntesis, la mutarrotacin es el fenmeno en el cual una
azcar se va transformando en la otra para poder llegar al equilibrio, la alfa
se transforma en beta hasta llegar a 52.7 y la beta aumenta
transformndose en alfa para llegar al equilibrio. La que va a presentar
mutarrotacin es la sacarosa que es la que est formada por glucosa
5. Qu conclusiones se puede sacar sobre las configuraciones de los tomos
de carbono, C3, C4 y C5 de la D glucosa y la D fructosa, como resultado de
la preparacin de sus osazonas?
Las osazonas se preparan por reaccin de un monosacrido con la
fenilhidracina (hidracina con un grupo fenilo). La reaccin genrica es:
R - CHOH - CHO + 2 PH - NH - NH2 ----> R - C=N -NH - PH(CH=N-NHPH)
PH es el grupo fenilo

La parte entre parntesis est unida por su carbono al otro carbono de la

parte sin parntesis.
El monosacrido puede ser un aldehdo o una cetona R- CO - CH2OH
Aqu lo importante es ver que entran dos molculas de hidracina en el
monosacrido, la primera en el C1 y la segunda en el C2.
Esta reaccin no afecta al resto de la configuracin del monosacrido. Es
decir, el C3, C4, C5, etc. permanecen inalterados.
Por consiguiente, los monosacridos que difieran slo en los sustituyentes
de los carbonos 1 y 2, y tengan el resto de la molcula igual, darn lugar a
la misma osazona.
Este es el caso de la D-(+)-glucosa y la D-(+)-fructosa, que solo difieren en
la posicin del carbonilo (la glucosa es un aldehdo, y por tanto tiene el
carbonilo en el C1 y la fructosa es una cetosa, y por tanto tiene el carbonilo
en el C2)
Por lo tanto, la conclusin que podemos sacar es que, si como resultado de
la reaccin con fenilhidracina obtenemos la misma osazona, entonces las
configuraciones de los tomos de carbono C3, C4 y C5 son iguales.
6. Cules son los azucares reductoras que contiene el zumo de naranja y
cul es el porcentaje de cada uno de ellos?
Azcares reductores la relacin es de 5,2 g/100 g de zumo,
lo que nos indica que el 5,2 % del zumo contiene azucares reductores, de
los que destaca la fructosa, galactosa, y glucosa.
De ese 5,2 % un 3% corresponde a fructosa, el 2,2 % restante se comparte
en partes iguales entre la galactosa y la glucosa, dependiendo de la
cosecha y la intensidad de luz solar que recibi el fruto.
7. Qu productos se obtendran al tratar la maltosa con metanol en medio
acido? Responda la misma pregunta para glucosa y la lactosa y escriba las
ecuaciones correspondientes.
La frmula de maltosa es C12 H22
La frmula de metano es CH4
la reaccin es la siguiente:
C12+H22+O11+CH4= CO2 + H20

en medio acido por ejemplo en cido sulfrico:

C12+H22+O11+CH4+H2SO4=CO2+H20+SO4
maltosa, lactosa y glucosa tienen la misma frmula emprica
Al tratarlos con cidos y enzimas, los disacridos combinan con una
molcula de agua y se dividen en dos monosacridos, dos molculas de
hexosa. La maltosa, por ejemplo, se divide en dos molculas de glucosa; la
lactosa se divide en una molcula de glucosa y otra de galactosa, y la
sacarosa se divide en una molcula de glucosa y otra de fructosa.

Referencias

http://joffre-rockemo.blogspot.com.co/2009/11/poder-reductor-de-loshidratos-de.html
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimicai/carbohidratos/hidrolisis-de-la-sacarosa
http://documents.tips/documents/hidrolisis-del-almidon-55b0846bb8def.html
http://es.slideshare.net/Vampiire1211/lab-carbohidratos
http://www.buenastareas.com/materias/azucares-reductores-en-zumo-de-naranjay-cual-es-el-porcentaje-de-cada-uno-de-ellos/0
https://www.clubensayos.com/my-documents.html