Philipp Christen, Rolf Jaussi, Roger Benoit Auth. Biochemie Und Molekularbiologie Eine Einführung in 40 Lerneinheiten PDF

Philipp Christen
Rolf Jaussi
Roger Benoit
Biochemie und
Molekularbiologie
Eine Einfhrung in 40 Lerneinheiten
Biochemie und Molekularbiologie
Philipp Christen
Rolf Jaussi
Roger Benoit
Biochemie und
Molekularbiologie
Eine Einfhrung in 40 Lerneinheiten
Philipp Christen
Biochemisches Institut
Universitt Zrich
Zrich, Schweiz
Rolf Jaussi, Roger Benoit

Paul Scherrer Institut
Villigen, Schweiz
ISBN978-3-662-46429-8ISBN978-3-662-46430-4 (eBook)
DOI10.1007/978-3-662-46430-4
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Vorwort
Dieses Buch eignet sich fr Studierende, welche die molekularen Grundlagen des Lebens kennenlernen mchten. Grundkenntnisse der Chemie werden vorausgesetzt; hingegen werden im
Gebiet der Biochemie und Molekularbiologie neu aufkommende Begriffe ausreichend erklrt.
Wir haben herausfordernde Tiefe statt Vollstndigkeit angestrebt und manches, z.B. gewisse
Aspekte des Stoffwechsels, vereinfacht dargestellt. Die Chemie des Lebens ist ein beraus
spannendes und auch weites Feld; wir haben versucht, die Leserin/den Leser nicht nur lauter
Bume, sondern auch den Wald sehen zu lassen.
Das Buch ist in sechs Teile mit zunehmend komplexeren Themen gegliedert:
I Die Molekle des Lebens (Proteine, Enzyme, DNA, RNA, Membranen; Kap.17),
II Molekulare Genetik (Replikation, Transkription, Translation; Kap.812),
III Stoffwechsel (Synthese, Abbau, Energiegewinnung; Kap.1321),
IV Molekulare Zellbiologie (zellulre Prozesse; Kap.2227),
V Molekulare Physiologie (organismische Prozesse; Kap.2836),
VI Methoden (Analytik, Strukturbestimmung, Gentechnik; Kap.3740).
Um den Ansprchen einer breiten Leserschaft aus Medizin, Naturwissenschaften und Biotechnologie zu gengen, werden die Biochemie und Molekularbiologie in 40Kapiteln mglichst
umfassend dargestellt. Wir empfehlen, vorab die ersten sieben Kapitel ber die biologischen
Makromolekle, die molekularen Maschinen, welche das Leben ermglichen, zu lesen. Die
Auswahl der weiteren, in sich weitgehend geschlossenen Kapitel kann der Studienrichtung
und den persnlichen Interessen angepasst werden: Die modulartigen Kapitel erlauben eine
-la-carte Lektre des Buches.
Die Biochemie/Molekularbiologie ist eine experimentelle Wissenschaft. Der Erkenntnisgewinn geht Hand in Hand mit den verfgbaren experimentellen Mglichkeiten. Die wichtigsten biochemischen und gentechnischen Methoden, einschlielich der Hochdurchsatztechniken und der Omik-Wissenschaften, sind daher gesondert in den letzten vier Kapiteln
vorgestellt. Diese Hervorhebung der Methoden ist auch begrndet durch die Entwicklung
biologisch orientierter Ingenieurwissenschaften. Die Inhalte mit spezifisch medizinischem
Bezug (Krankheiten, Krankheitserreger, Antibiotika, Zytostatika, Alkaloide, Ernhrung des
Menschen, Gendiagnostik u.v.a.m.) sind in einem zustzlichen Sachverzeichnis aufgelistet.
Eine Website ergnzt das Buch: ber einen QR-Code oder die Webadresse sind Moleklstrukturen, Animationen, EM-Bilder, weiterfhrende Literatur sowie Kurzzusammenfassungen
(Merkstze) und Multiple-Choice-Kontrollfragen abrufbar.
Der Lektorin Frau Stefanie Wolf danken wir fr ihre kompetente Untersttzung und die angenehme Zusammenarbeit. Ein Dankeschn geht auch an unsere Kollegen Prof. Dr. sc. nat.
Heinz Gehring, Prof. Dr. med. Eric Berger und Prof. Dr. med. Enrico Maroni, die Teile des
Buches kritisch gelesen haben. Wir danken auch Dr. sc. nat. Alvar D. Gossert, Dr. phil. Guido
Capitani, Dr. sc. nat. Takashi Ishikawa und Dr. sc. nat. Elisabeth Mller fr ihre Mithilfe beim
VI
Vorwort
Abfassen der Unterkapitel zur magnetischen Kernresonanz, Rntgenkristallographie und

Elektronenmikroskopie.
Den Leserinnen und Lesern sind wir dankbar fr Kommentare, Korrekturen und Verbesserungsvorschlge zum Buch und zur Website.
Philipp Christen, Rolf Jaussi, Roger Benoit
Zrich, im September2015
http://www.springer.com/?SGWID=0-102-2-1514742-0
VII
Abkrzungsverzeichnis
Abkrzungen fr Aminosuren Abb.2.4
Basen, Nucleotide Tab.7.2
Genetischer Code Tab.10.1
ACE
ACTH
ADH
Angiotensin-converting enzyme
Adrenocorticotropes Hormon,
Corticotropin
antidiuretisches Hormon, Vasopressin
Bacterial artificial chromosome

BAC
BH4 Tetrahydrobiopterin
bp Basenpaare
CAM
Cell adhesion molecule
cyclisches3, 5-Adenosinmonophosphat
cAMP
CAP Katabolit-Aktivatorprotein
komplementre DNA, copy DNA
cDNA
cGMP
cyclisches3, 5-Guanosinmonophosphat
CoA
Coenzym A
COX Cyclooxygenase
d desoxyDa Dalton
DAG Diacylglycerol
DNA Desoxyribonucleinsure
dsDNA
doppelstrngige DNA
EF Elongationsfaktor
ELISA
Enzyme-linked immunosorbent assay
ER
Endoplasmatisches Retikulum
FAD Flavin-adenin-dinucleotid
FH2 Dihydrofolsure
FH4 Tetrahydrofolsure
N-Formylmethionin
fMet
FMN Flavinmononucleotid
GABA gamma-Aminobutyrat
(gamma-Aminobutyric acid)
N-Acetylglucosamin
GlcNAc
GSH
reduziertes Glutathion
oxidiertes Glutathion
GSSG
HDL
High-density lipoprotein
humanes Immundefizienzvirus
HIV
HMG-CoA 3-Hydroxy-3-methylglutaryl-CoA
hnRNA
heterogene nuclere Ribonucleinsure
HPLC Hochdruck-Flssigkeitschromatographie
Hsp Hitzeschockprotein
IF Initiationsfaktor
Ig
Immunglobin (z.B. IgG)
IL Interleukin
IMP Inosinmonophosphat
IP3 Inositol-1,4,5-trisphosphat
IPTG Isopropylthiogalactosid
kDa Kilodalton
LDL
Low-density lipoprotein
MHC
Major histocompatibility complex
miRNA
micro RNA
Mr
relative Moleklmasse
mRNA Messenger-Ribonucleinsure
NAD+ Nicotinamid-adenin-dinucleotid
reduziertes Nicotinamid-adeninNADH
dinucleotid
NADP+ Nicotinamid-adenin-dinucleotidphosphat
NADPH reduziertes Nicotinamid-adenindinucleotidphosphat
NMP Nucleosidmonophosphat
mit beliebiger Base
Nuclear magnetic resonance
NMR
PAGE Polyacrylamid-Gelelektrophorese
PCR Polymerase-Kettenreaktion
PEP Phosphoenolpyruvat
Pi
anorganisches (inorganic) Phosphat
PLP Pyridoxal-5-phosphat
PPi
Diphosphat (anorganisches),
Pyrophosphat
PrP
Prion Protein
Q Ubichinon
RNA Ribonucleinsure
Reactive oxygen species
ROS
(reaktive Sauerstoffderivate)
ribosomale Ribonucleinsure
rRNA
Rubisco Ribulose-1,5-bisphosphat-Carboxylase/
Oxygenase
SAM
SDS
siRNA
SNP
snRNA
snRNP
SRP
ssDNA
S-Adenosylmethionin
Sodium dodecylsulfate, Natriumlaurylsulfat
small interfering RNA
Single nucleotide polymorphism
small nuclear RNA
small nuclear Ribonucleoprotein
Signal recognition particle
einstrngige DNA (single-stranded DNA)
TDP Thiamindiphosphat
TF Transkriptionsfaktor
TRH Thyroliberin
tRNA transfer-Ribonucleinsure
VLDL
Very-low-density lipoproteins
YAC
Yeast artificial chromosome
Quellenangaben
Die folgenden Abbildungen sind mit Genehmigung der Autoren bzw. der Verlage aus den
genannten Quellen bernommen worden bzw. sind als Vorlagen fr Umzeichnungen benutzt worden.
Abschn.
Abb.
Quelle
2.5
Sichelzelle
Lffler, G. und Petrides, P.E. (2003) Biochemie & Pathobiochemie, 7.Auflage,

Springer-Verlag, Berlin, S.347, Abb.11.20
3.3
Abb.3.3
ibd. S.74, Abb.3.22
23.3
Abb.23.2
ibd. S.199, Abb.6.27b
30.3
Abb.30.1
ibd. S.1033, Abb.33.1
30.3
Abb.30.2
ibd. S.1037, Abb.33.5
3.3
Abb.3.6
Creighton, T.E. (1993) Proteins, 2nded., Freeman, New York,

S.230, Abb.6.21
11.4
Abb.11.4
Hgele, K. and Kalisch, W.-E. (1980) Chromosoma79, 7583, Springer-Verlag,

Berlin, S.77, Abb.1c
40.5
Abb.40.3
Tucker, C.L., Gera, J.F. and Uetz, P. (2001) Trends Cell Biol.11, 102106, Elsevier,
Amsterdam, S.102, Abb.1
IX
Inhaltsverzeichnis
I
1
1.1
1.2
1.3
1.4
1.5
1.6
Die Molekle des Lebens

Biomolekle und ihre Wechselwirkungen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit
Die Entstehung des Lebens. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
Gre biologischer Strukturen, Geschwindigkeit biologischer Vorgnge
und molekulare Zusammensetzung der lebenden Materie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
Wechselwirkungen zwischenBiomoleklen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6
Wasser und hydrophober Effekt. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
Molekulare Erkennung. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
Fluss von Materie und Energie, energetische Koppelung von Reaktionen. . . . . . . . . . . . . . . 12
Kovalente Struktur der Proteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
2.1
2.2
2.3
2.4
2.5

Bauprinzip der Proteine. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
Gre und Gestalt der Proteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
Aminosuren, die Bausteine der Proteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
Ionisationszustnde von Aminosuren und Proteinen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
Aminosurezusammensetzung und Aminosuresequenzen von Proteinen. . . . . . . . . . . . . 24
Raumstruktur der Proteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29

3.1
Stabilisierung der Raumstruktur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30
3.2 Sekundrstruktur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
3.3 Tertirstruktur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
3.4
uere Gestalt und Quartrstruktur. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
3.5
Dynamik und funktionsgebundene Strukturnderungen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
3.6 Denaturierung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
3.7 Faltungswege. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
3.8 Proteinfehlfaltung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
3.9 Faserproteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39
4 Enzyme . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43
4.1
Allgemeine Eigenschaften der Enzyme. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44
4.2
Katalyse und Aktivierungsenergie. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
4.3 Enzymkinetik . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
4.4
Struktur der aktiven Stelle, Wirkungsmechanismen von Enzymen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51
4.5
Beispiele von Enzymmechanismen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 53
4.6
Regulation der Enzymaktivitt . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55
Inhaltsverzeichnis
Polysaccharide und Oligosaccharide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61

5.1 Reservehomoglykane. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62
5.2 Strukturhomoglykane. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63
5.3 Heteroglykane . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
Lipide und biologische Membranen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69

6.1 Fettsuren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70
6.2
Triacylglycerole und Wachse . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70
6.3
Phospholipide und Glykolipide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 72
6.4
Nichtverseifbare Lipide: Steroide, Terpene und Eicosanoide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
6.5
Biologische Membranen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76
6.6 Membranproteine. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 79
6.7
Durchlssigkeit biologischer Membranen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 79
7 Nucleinsuren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 81
7.1
Struktur und Funktion der Nucleinsuren, bersicht . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 82
7.2 Mononucleotide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 82
7.3 Nucleinsuren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85
7.4 Chromosomen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 89
II
Molekulare Genetik
Replikation, Reparatur und Rekombination der DNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 95
8.1
8.2
8.3
8.4

DNA-Replikation bei Prokaryonten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 96
DNA-Replikation bei Eukaryonten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100
DNA-Schden und Reparatursysteme . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 102
Genetische Rekombination. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105
Transkription: Biosynthese der RNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107

9.1 Initiation. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 108
9.2
Elongation und Termination . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 111
9.3
Modifikationen des primren Transkriptionsprodukts. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 111
9.4
Spleien (Splicing). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 113
9.5
Synthese der tRNA und rRNA. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 115
10
Translation: bersetzung des Gens ins Phn. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 117
10.1
10.2
10.3

Der genetische Code . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 118
Proteinsynthese, bersicht. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 120
Bildung der Aminoacyl-tRNA. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 120
XI
Inhaltsverzeichnis
10.4
10.5
Initiation, Elongation, Termination . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 123

Hemmstoffe der Proteinsynthese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 126
11
Regulation der Genexpression . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 127
11.1
11.2
11.3
11.4

Regulation der Transkription bei Prokaryonten: Operon. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 128
Regulation der Transkription bei Eukaryonten: Transkriptionsfaktoren. . . . . . . . . . . . . . . . 130
Posttranskriptionale Regulation der Genexpression. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 133
Epigenetische Regulation und Vererbung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 135
12
Plasmide, Viren, Viroide und Prionen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 139

12.1 Plasmide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 140
12.2 Viren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 144
12.3
Tumorviren und Onkogene. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 147
12.4
Subvirale pathogene Agenzien: Viroide und Prionen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 149
III Stoffwechsel
13
Grundstzliches zum Stoffwechsel. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 153
13.1
13.2
13.3
13.4

Experimentelle Untersuchung des Stoffwechsels. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 154
bersicht ber den Stoffwechsel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 156
Verwendung des im Katabolismus gebildeten ATP . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 158
Regulation des Stoffwechsels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 159
14
Glykolyse und Citratzyklus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 161
14.1
14.2
14.3

Glykolytischer Abbauweg. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 162
Von Pyruvat zu Acetyl-CoA. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 168
Abbau von Acetyl-CoA im Citratzyklus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 171
15
15.1
15.2
15.3
15.4
15.5
15.6
ATP-Synthese in Mitochondrien. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 177

Organisation der Atmungskette. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 179
Redoxkomponenten der Atmungskette(FMN, FAD, FeS-Zentren, Ubichinon,
Cytochrome) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 179
Chemiosmotischer Mechanismus der oxidativen Phosphorylierung. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 183
Transport von Reduktionsquivalenten vom Cytosol in die Mitochondrien. . . . . . . . . . . . 186
ATP-Bilanz des oxidativen Abbaus von Glucose. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 188
Regulation der mitochondrialen ATP-Synthese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 188
XII
Inhaltsverzeichnis
16
Gluconeogenese, Glykogen, Disaccharide und Pentosephosphatweg . . . . . . . . 193

16.1 Gluconeogenese . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 194
16.2
Abbau und Aufbau von Glykogen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 197
16.3
Stoffwechsel der Disaccharide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 204
16.4 Pentosephosphatweg. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 206
17
Stoffwechsel der Fettsuren und Lipide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 209

17.1
-Oxidation von Fettsuren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 210
17.2 Fettsuresynthese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 213
17.3 Ketonkrper . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 217
17.4
Synthese und Abbau der Triacylglycerole. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 218
17.5
Stoffwechsel der Phospholipide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 220
17.6
Stoffwechsel von Cholesterol . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 220
18
Stoffwechsel der Proteine und Aminosuren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 225

18.1
Abbau von Proteinen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 226
18.2
Abbau der Aminosuren: Weg des Stickstoffs. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 228
18.3
Abbau der Aminosuren: Weg des Kohlenstoffs . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 232
18.4
Strungen im Abbau der Aminosuren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 237
18.5
Synthese der Aminosuren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 238
18.6 C1-Stoffwechsel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 239
18.7
Synthese von Kreatin und Porphyrinen aus Aminosuren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 243
19
Stoffwechsel der Purin- und Pyrimidinnucleotide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 247
19.1
19.2
19.3
19.4
19.5

Synthese der Purinnucleotide; Wiederverwertung von Purinbasen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 248
Synthese der Pyrimidinnucleotide; Wiederverwertung von Pyrimidinnucleosiden. . . . . 250
Regulation der Nucleotidsynthese . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 251
Synthese der Desoxyribonucleotide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 251
Abbau der Nucleinsuren und Nucleotide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 255
20 Photosynthese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 259
20.1 Chloroplasten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 260
20.2
Komponenten und Organisation des Photosyntheseapparats . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 261
20.3 Chlorophyll . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 262
20.4
Lichtgetriebene Reduktion von NADP+ und Synthese von ATP. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 262
20.5
Synthese von Kohlenhydrat aus CO2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 266
21
Besonderheiten des Stoffwechsels von Pflanzen und Bakterien . . . . . . . . . . . . . . . 269
21.1
21.2
21.3

Stickstoff-Assimilation aus N2 und Nitrat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 270
Schwefel-Assimilation aus Sulfat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 272
Transport- und Speicherformenvon Kohlenhydraten, Lipiden und Proteinen
bei Pflanzen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 273
XIII
Inhaltsverzeichnis
21.4
Sekundrstoffwechsel der Pflanzen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 274
21.5 Phytohormone. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 276
21.6
Stoffwechselwege in Bakterien. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 277
IV
Molekulare Zellbiologie
22
Zellkompartimente und Proteinsortierung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 283
22.1
22.2
22.3
22.4
22.5
22.6
22.7
22.8
22.9

Kompartimenthnliche Strukturen in Bakterien. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 285
Kompartimente der Eukaryontenzellen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 285
Mechanismen des intrazellulren Proteintransports. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 287
Proteintransport im Golgi-Apparat. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 290
Proteintransport zwischen Golgi-Apparat, Zelloberflche und Lysosomen. . . . . . . . . . . . . 290
Proteinglykosylierung whrend Transport durch ER und Golgi-Apparat . . . . . . . . . . . . . . . 291
Import von Proteinen in Mitochondrien, Chloroplasten und Peroxisomen. . . . . . . . . . . . . 292
Pfrtner-kontrollierter Transport (Gated transport) durch die Kernhlle . . . . . . . . . . . . . . . 294
Kontrolle der Faltung und der Lokalisierung von Proteinendurch molekulare
Chaperone und Proteasomen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 295
23
Cytoskelett und molekulare Motoren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 297

23.1 Actinfilamente . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 298
23.2 Mikrotubuli . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 299
23.3 Intermedirfilamente . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 301
23.4
Motorproteine fr den intrazellulren Transport . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 303
24
Zellzyklus; Kontrolle von Zellwachstum und Zelltod. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 305
24.1
24.2
24.3
24.4
24.5
24.6

Konzept des Zellzyklus. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 306
Mitosen und Meiosen whrend des Lebenszyklus der Organismen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 307
Maschinerie des Zellzyklus. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 308
Wachstumskontrolle und Tumorbildung. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 309
Kontrolle der Bereitschaft zur Teilung: Checkpoints . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 312
Apoptose, programmierter Zelltod. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 313
25
Zelladhsion, Zellkontakte und extrazellulre Matrix . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 315
25.1
25.2
25.3
25.4

Stabile Zell-Zell- und Zell-Matrix-Kontakte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 316
Kurzlebige Zell-Zell-Wechselwirkungen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 318
Extrazellulre Matrix (ECM). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 319
Pflanzliche Zellwand: Papier und Holz. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 321
26
Stoffaustausch durch Membranen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 323
26.1
26.2

Grundstzliches zum Membrantransport. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 324
Mechanismus der Na+/K+-Pumpe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 325
XIV
Inhaltsverzeichnis
26.3
26.4
26.5
26.6
Symport- und Antiport-Systeme. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 326

Passiver Transport, erleichterte Diffusion. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 326
Ionenkanle, chemisches und elektrisches Membranpotenzial . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 327
Transzellulrer Transport. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 328
27
Rezeptoren und Signaltransduktion. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 331
27.4
27.5
27.6
27.7

Grundstzliches zur Signaltransduktion. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 332
Rezeptoren an der Zelloberflche: G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR). . . . . . . . . . 334
Rezeptoren an der Zelloberflche: Rezeptoren mit enzymatisch aktiver
cytosolischer Domne. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 336
Rezeptoren an der Zelloberflche: proteolytisch aktivierte Rezeptoren. . . . . . . . . . . . . . . . 340
Rezeptoren im Zellinnern . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 341
bermittlungsmodule leiten die Signale vom Rezeptor zum spezifischen Effektor. . . . . 341
Signaltransduktion in Pflanzen und Pilzen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 342
Molekulare Physiologie
28
Hormone und Mediatoren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 347
27.1
27.2
27.3

28.1
Hierarchie der Hormondrsen; Struktur, Regelkreise und Halbwertszeit der Hormone . . 348
28.2
Hormone von Hypothalamus und Hypophyse. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 349
28.3
Hormone der Nebenniere: Catecholamine; Cortisol und Aldosteron. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 352
28.4
Erythropoietin und Calcitriol aus der Niere; Renin-Angiotensin-Aldosteron-System . . . 353
28.5 Sexualhormone . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 354
28.6
Kontrolle des Grundumsatzes durch Schilddrsenhormone; Regulation des
Calcium- und Phosphathaushalts durch Parathyrin, Calcitriol und Calcitonin . . . . . . . . . . 356
28.7
Kontrolle der Blutzuckerkonzentration durch Insulin und Glucagon. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 358
28.8
Mediatoren (Gewebehormone): Signalstoffe geringer Reichweite . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 358
28.9
Hormone wirbelloser Tiere . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 361
28.10 Botenstoffe zwischen Individuen: Pheromone und von Bakterien sezernierte
Signalstoffe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 362
29
Neurotransmitter; Photo-, Geruchs- und Geschmacksrezeptoren;

Chemotaxis bei Eukaryonten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 363
29.1 Neurotransmitter . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 364

29.2
Photorezeptoren des Auges. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 369
29.3
Geruchs- und Geschmacksrezeptoren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 372
29.4
Chemotaxis bei Eukaryonten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 373
30
Bewegungsapparat: Muskeln, Bindegewebe und Knochen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 375
30.1
30.2
30.3

Vergleich der verschiedenen Muskeltypen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 376
Dickes Myosinfilament, dnnes Actinfilament. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 377
Entwicklung von Zugkraft im Sarkomer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 377
XV
Inhaltsverzeichnis
30.4
30.5
30.6
Regulation der Muskelkontraktion durch Calciumionen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 379

Bereitstellung von ATP im Muskel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 382
Bindegewebe, Knochen und Zhne. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 383
31
Enzymatische Schutzmechanismen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 387
31.1
31.2
31.3

Blutgerinnung und Fibrinolyse. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 388
Biotransformationen (Entgiftungsreaktionen). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 393
Schutz gegen reaktive Sauerstoffderivate (Reactive oxygen species ROS). . . . . . . . . . . . . . . 395
32 Immunsystem. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 399
32.1
32.2
32.3
32.4
32.5
32.6

Angeborene Immunitt . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 400
Adaptive Immunitt: Antikrper aus B-Zellen und zellulre Abwehr mit T-Zellen . . . . . . 402
Klonale Selektion der B-Zellen und T-Zellen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 403
Synthese, Struktur und Antigenbindung der Antikrper. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 404
Cytotoxische T-Zellen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 410
Immuntoleranz und Autoimmunkrankheiten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 410
33
Stoffaufnahme und Ausscheidung. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 413
33.1
33.2
33.3
33.4

Verdauung und Resorption. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 414
Transport von O2 und CO2 im Blut . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 419
Ausscheidung von Stoffwechselendprodukten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 422
Wasser-, Elektrolyt- und Sure-Basen-Haushalt. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 424
34
Organstoffwechsel und Lipidtransport im Blut . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 431
34.1
34.2
34.3
34.4

Stoffwechselleistungen der Organe in Resorptions- und Postresorptionsphase. . . . . . . . 432
Anpassung des Stoffwechsels an Hungerzustand. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 435
Diabetes mellitus. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 436
Lipidtransport und Lipoproteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 438
35
Biochemische Aspekte der menschlichen Ernhrung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 445

35.1
Bedarf an Brennstoffen und Baustoffen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 446
35.2 Hauptnhrstoffe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 448
35.3 Vitamine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 452
35.4
Elektrolyte, Mineralstoffe und Spurenelemente . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 461
35.5 Nahrungsmittel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 463
36
Zelldifferenzierung, Regeneration und Altern; Systembiologie

und Synthetische Biologie. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 467
36.1
Zelldifferenzierung und Ontogenese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 468
36.2
Regeneration von Organen und Extremitten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 470
36.3 Alterungsvorgnge . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 471
36.4 Systembiologie. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 472
XVI
Inhaltsverzeichnis
36.5
36.6
Synthetische Biologie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 474

Genomik, Proteomik, Transkriptomik, Interaktomik, Metabolomik und Mikrobiomik. . . 474
VI Methoden
37
Trennverfahren und allgemeine Analysemethoden . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 479

37.1 Zentrifugation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 480
37.2 Chromatographie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 482
37.3 Elektrophorese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 484
37.4 Spektroskopie. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 486
37.5 Massenspektrometrie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 489
37.6
Isotopenmarkierung, Radionuclide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 489
37.7
Monoklonale Antikrper . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 490
37.8 pH-Puffer. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 490
38 Proteinanalytik . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 493
Bestimmung der Aminosurezusammensetzung und Sequenzanalyse von Proteinen. . . 494
Analyse der 3D-Struktur von Makromoleklen durch Rntgenkristallographie. . . . . . . . 494
Analyse der 3D-Struktur von Makromoleklen durch magnetische
Kernresonanz (NMR). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 497
38.4 Elektronenmikroskopie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 497
38.5
Untersuchung posttranslationaler Modifikationen von Proteinen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 499
38.6
Untersuchung von Protein-Ligand-Wechselwirkungen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 499
38.1
38.2
38.3
39 Gentechnik. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 501
Werkzeuge der Gentechnik: Restriktionsenzyme und andere Nucleasen; Ligasen,
DNA-Polymerasen und Rekombinationsenzyme. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 502
39.2
Plasmide als Vektoren (Genfhren) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 504
39.3
Viren als Vektoren; Gentherapieversuche. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 504
39.4
Knstliche Chromosomen als Vektoren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 505
39.5
Polymerase chain reaction PCR. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 505
39.6
Genbanken: cDNA und genomische DNA. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 508
39.7
Bestimmung der Nucleotidsequenz von DNA. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 510
39.8
Southern, Northern und Western blotting. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 511
39.9
Expression rekombinanter Proteine und RNAs. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 512
39.10 Gezielte und zufllige Mutagenese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 514
39.11 Prsentation von Genprodukten auf Bakteriophagen(Phage display)
oder Ribosomen (Ribosome display); gerichtete molekulare Evolution. . . . . . . . . . . . . . . . . 515
39.12 Klonierung von Zellen und Organismen; transgene Organismen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 516
39.1
XVII
Inhaltsverzeichnis
40
40.1
40.2
40.3
40.4
40.5
40.6
Genomik, Proteomik, Bioinformatik, Datenbanken. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 519

Genomanalyse und Gendiagnostik. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 520
Modulare DNA-Rekombination. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 521
Mikrochips zur Quantifizierung von mRNA und Proteinen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 522
Proteomik: 2D-Gelelektrophorese, Massenspektrometrie und Mikrochips. . . . . . . . . . . . . 522
Kartierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen mit der Two-hybrid-Technik;
Interaktom. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 522
Datenbanken und Computerprogramme. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 524
Serviceteil . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 527
Verzeichnis der Themen mit spezifisch medizinischem Bezug. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 528
Sachverzeichnis. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 531
Die Molekle
des Lebens
Kapitel 1
Biomolekle und ihre Wechselwirkungen 3

Kapitel 2
Kovalente Struktur der Proteine 17

Kapitel 3
Raumstruktur der Proteine 29

Kapitel 4
Enzyme43
Kapitel 5
Polysaccharide und Oligosaccharide 61

Kapitel 6
Lipide und biologische Membranen 69

Kapitel 7
Nucleinsuren81
Biomolekle
und ihre Wechselwirkungen
1.1
Die Entstehung des Lebens 4
1.2
Gre biologischer Strukturen, Geschwindigkeit

biologischer Vorgngeund molekulare
Zusammensetzung der lebenden Materie 4
1.3
Wechselwirkungen zwischenBiomoleklen6
1.4
Wasser und hydrophober Effekt 8
1.5
Molekulare Erkennung10
1.6
Fluss von Materie und Energie, energetische

Koppelung von Reaktionen 12
Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit, Biochemie und Molekularbiologie,

DOI 10.1007/978-3-662-46430-4_1, Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2016
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Kapitel 1 Biomolekle und ihre Wechselwirkungen
Das Leben ist im Wasser entstanden, und Wasser

ist der quantitativ wichtigste Bestandteil aller Lebewesen. Wasser ist das Lsungsmittel, in welchem
die molekularen Lebensvorgnge ablaufen. Die
Trockensubstanz der Zellen besteht vorwiegend
aus biologischen Makromoleklen (ausnahmslos Polymere aus einfachen Bausteinen: Proteine,
Nucleinsuren, Oligo- und Polysaccharide) und
Lipiden; niedermolekulare Verbindungen und anorganische Ionen bilden einen wesentlich geringeren Anteil. Das Zusammenspiel der Biomolekle
wird in erster Linie durch nichtkovalente Wechselwirkungen und hydrophobe Effekte vermittelt.
Nucleinsuren sind die Trger der genetischen Information; Proteine sind die molekularen Maschinen, welche den Phnotyp, das Erscheinungsbild
der Organismen, erstellen und in Gang halten.
Ein hochkomplexes regulatorisches Netzwerk
steuert die mannigfaltigen Lebensvorgnge. Die
Lebewesen sind thermodynamisch offene Systeme, die nicht im Gleichgewicht mit ihrer Umgebung stehen. Sie beziehen Energie von auen,
um ihre hohe innere Ordnung herzustellen und
zu erhalten. Die molekularen Grundzge einfacher
Bakterien und menschlicher Zellen sind einander
bemerkenswert hnlich.
1.1
Die Entstehung des Lebens
Die Vorfahren der heutigen Zellen und Lebewesen haben sich im Wasser entwickelt Wahr-
scheinlich schon vor 4000Millionen Jahren sind

im Laufe der chemischen Evolution aus Vorstufen Aminosuren, Pyrimidinbasen, Purinbasen
und Zucker entstanden. Aus diesen Bausteinen
bildeten sich Proteine und Nucleinsuren, welche
die zwei Grundfunktionen des Lebens wahrnehmen konnten: zum einen den Stoffwechsel durch
Katalyse bestimmter Reaktionen, zum andern die
Speicherung genetischer Information. Eine Lipidmembran ermglichte die Anreicherung von
Biomoleklen und wird zur Bildung der ersten
Zellen gefhrt haben. Wenn auch verschiedene
Hypothesen zur Entstehung des Lebens bestehen,
so scheint es doch klar, dass auf der Erde eine einzige, einheitliche Form von Leben existiert mit
Nucleinsuren aufgebaut aus fnf verschiedenen
Nucleotiden, Proteinen aus 20 verschiedenen Aminosuren und einem nahezu universell gltigen genetischen Code.
Stoffwechsel
Gesamtheit der chemischen Umsetzungen in
einem Organismus, liefert chemische Energie,
baut Zellsubstanz auf und ab.
Gemeinsame Urzellen haben sich zu den Zellen

der heutigen Organismen entwickelt. Die biologische Evolution beruht einerseits auf Vernderungen der genetischen Information und andererseits
auf der Selektion genetischer Merkmale, welche
die Fortpflanzung des Trgers am besten sichert.
Grundstzlich sind die einfachen, kleinen Prokaryonten und die sehr viel komplexeren und auch
greren Zellen der Eukaryonten zu unterscheiden
(.Abb.1.1).
Im Zellinnern herrscht ein makromolekulares

Gedrnge (Macromolecular crowding) Die in ho-
her Konzentration vorhandenen Makromolekle

(300400mg/mL im Cytoplasma von E. coli) verringern das fr Makromolekle zugngliche Volumen
der zellinternen Flssigkeit: Die makromolekulare
Verdrngung erhht die effektive Konzentration der
Makromolekle und erleichtert damit die Bildung
von Multiproteinkomplexen und Nucleinsure-Proteinkomplexen.
1.2
Gre biologischer Strukturen,

Geschwindigkeit biologischer
Vorgngeund molekulare
Zusammensetzung der
lebenden Materie
Grenvergleich biologischer Strukturen:

Lnge bzw. Durchmesser
C-C-Bindung
0,15nm
H2O-Molekl
0,4nm
Hmoglobin
6,4nm
Mitochondrien
0,52m
Bakterien
0,53m
Erythrozyt (Mensch)
78m
Eukaryontische Zelle
1050m
5
1.2 Gre biologischer Strukturen, Geschwindigkeit biologischer Vorgnge
.. Abb.1.1 Prokaryontische und eukaryontische Zellen. Eukaryontische Zellen sind nicht nur viel grer als Bakterienzellen,
sondern enthalten auch durch Membranen abgegrenzte Zellorganellen. Bei Prokaryonten fehlt diese intrazellulre Kompartimentierung. Zum Grenvergleich: Mitochondrien sind etwa so gro wie eine Bakterienzelle. Die bakterielle und pflanzliche
Zellwand sowie die extrazellulre Matrix bei Tieren sind einander entsprechende von den Zellen sezernierte Bestandteile,
welche den Zellen und Geweben Formstabilitt verleihen
Lngeneinheiten
1mm=10 m=10 nm=10 ngstrm ()
Auf dem Durchmesser eines menschlichen Erythrozyten (78m) lassen sich etwa 1200Hmoglobinmolekle nebeneinander aufreihen.
3
Die Geschwindigkeiten biologischer Vorgnge

sind sehr verschieden Die meisten enzym-
katalysierten Reaktionen laufen innerhalb von

Millisekunden ab. Noch schneller, im Nano- bis
Mikrosekundenbereich stattfindend, sind Konformationsnderungen von Moleklen, die ohne
nderung kovalenter Bindungen durch Drehung
von Moleklteilen um Einfachbindungen zustande
kommen. Der langsamste biologische Vorgang ist
die Evolution der Lebewesen, ein Vorgang, der, wie

angenommen wird, vor ber 4000Millionen Jahren begonnen hat und noch heute andauert. Homo
sapiens ist erst etwa vor einem Zwanzigtausendstel
der Gesamtdauer der biologischen Evolution aufgetaucht.
Die lebende Materie besteht aus 23 verschiedenen
Elementen Von den insgesamt ber 90Elementen
der Erdkruste sind nur 23 als unbedingt notwendige

Bestandteile von Lebewesen nachgewiesen:
Hauptelemente
C, H, O, N, P, S
(95% der Trockenmasse)
Ionische Elemente
Na+, K+, Mg2+, Ca2+; Cl
Spurenelemente
Fe, Zn, Cu, Mn, Co, Mo, I, F, Se,

Cr, Si, Ni
Assoziate von Makromoleklen, welche durch

nichtkovalente Wechselwirkungen zusammengehalten werden und durch spontane, nichtkatalysierte
Selbstorganisation (Self-assembly) entstehen. Mit
zunehmender Moleklmasse nimmt die Vielfalt der
Biomolekle zu (.Tab.1.1).
1
2
3
Photosynthese
,
1.3 Wechselwirkungen
zwischenBiomoleklen
5
6
Drei Typen nichtkovalenter Bindungen, auch als

Sekundrbindungen bezeichnet, fhren zu intramolekularen Wechselwirkungen zwischen den verschiedenen Teilen biologischer Makromolekle und
zwischen den Biomoleklen untereinander.
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
200 000 Jahren
Die Strke elektrostatischer Anziehung/Abstoung zwischen geladenen Gruppen hngt

vom Medium ab Die dabei wirksame Kraft P ist
gegeben durch das Coulomb-Gesetz:
PD
Die Hauptelemente sind die Bausteine der organischen Verbindungen, insbesondere der biologischen
Makromolekle. Die ionischen Elemente kommen
nur als Ionen vor; vier anorganischen Kationen
steht Chlorid als einziges elementares anorganisches Anion gegenber (wichtige nichtelementare
anorganische Anionen sind anorganisches Phosphat
HPO42 und Hydrogencarbonat HCO3). Die Spurenelemente erhielten ihren Namen in den Anfngen der analytischen Chemie, als diese in geringen
Mengen vorkommenden Elemente nur in Spuren
festgestellt, aber noch nicht quantitativ bestimmt
werden konnten.
Alle biologischen Makromolekle (Nucleinsuren, Proteine, Polysaccharide) sind Polymere

aus wenigen relativ einfach gebauten Bausteinen
Die Makromolekle sind echte Molekle, d.h. alle

ihre Atome werden durch kovalente Bindungen
(Elektronenpaarbindungen) zusammengehalten.
Die Synthese der Makromolekle aus Vorstufen
und der Abbau der Makromolekle bentigen Enzyme als Katalysatoren. Im Gegensatz dazu sind
die supramolekularen Strukturen (z.B. Multiproteinkomplexe, Ribosomen oder Mitochondrien)
q1 q2
D r2
P, Kraft; q, elektrische Ladung; r, Abstand der Ladungen; D, Relative Dielektrizittskonstante (Permittivitt) des Mediums
Im Vakuum ist D=1; in Wasser sind die elektrostatischen Wechselwirkungen sehr stark abgeschwcht
(D=80). Im Innern von Makromoleklen wie Proteinen entspricht der Wert der Dielektrizittskonstante jedoch nahezu demjenigen im Vakuum. Die
Anziehung zwischen entgegengesetzt geladenen
Gruppen von Moleklen fhrt zur Ionenpaar-Bindung oder Salzbrcke.
Wasserstoffbindungen (H-Bindungen, Hydrogen bonds) knnen sich zwischen geladenen oder
ungeladenen polaren Gruppen ausbilden Ein
gemeinsames H-Atom bildet dabei eine Brcke zwischen zwei anderen Atomen. Das Atom, welches das
Wasserstoffatom strker bindet, wird als Wasserstoffdonor bezeichnet. Das andere Atom, welches
das Wasserstoffatom ber ein freies Elektronenpaar
bindet, ist der Wasserstoffakzeptor. Die wichtigsten Donoren sind O- oder N-Atome in HO- oder
HN-Gruppen, Akzeptoren sind O- oder N-Atome:
7
1.3 Wechselwirkungen zwischenBiomoleklen
.. Tab.1.1 Molekulare Zusammensetzung lebender Organismen

Bakterienzelle (E. coli)
Anzahl verschiedener
Molekle
Wasser
Erwachsener Mensch
Anteil in %
der Gesamtmasse
Anteil in %
der Gesamtmasse
70
60
Anorganische Ionen
20
Zucker und Vorlufer
250
Aminosuren und Vorlufer
100
0,4
Nucleotide und Vorlufer
100
0,4
Lipide
Andere niedermolekulare Verbindungen
Makromolekle
50
300
3000
1,5
15
0,2
25
20
In Bakterienzellen sind Proteine, RNA, DNA und Polysaccharide im Massenverhltnis von 15 : 6 : 1 : 2 vertreten.
gegenseitigen sterischen Behinderung (Behinderung durch Raumbeanspruchung) von Teilen eines Molekls zugrunde und schrnkt die Zahl der
Konformationen ein, welche ein Molekl annehmen
kann. Befinden sich zwei Atome im Abstand ihrer
Van-der-Waals-Radien, halten sich Anziehung und
Abstoung die Waage:
Die Bindungsenergie betrgt maximal ein Zehntel
derjenigen einer kovalenten Bindung (.Tab.1.2).
In wsseriger Lsung konkurrieren zudem die
Wassermolekle um die Donoren und Akzeptoren,
die H-Bindungen werden dadurch massiv abgeschwcht. Eine H-Bindung ist am strksten, wenn
Donor, Wasserstoffatom und Akzeptor auf einer Geraden liegen. H-Bindungen sind deshalb gerichtete
Krfte und bestimmen magebend die Form vieler
biologischer Strukturen.
Van-der-Waals-Krfte werden nur wirksam bei
sehr kleinen Abstnden zwischen zwei Atomen
Sie beruhen auf der elektrostatischen Anziehung

zwischen permanenten oder induzierten Dipolen.
Van-der-Waals-Krfte sind schwcher als Ionenpaar-Bindungen und H-Bindungen. Wenn zwei
Atome sich sehr nahe kommen, stoen sie sich
gegenseitig krftig ab. Diese Abstoung liegt der
Van-der-Waals-Radien
Die nichtkovalenten Wechselwirkungen sind

sehr viel schwcher als kovalente Bindungen
(.Tab.1.2); insbesondere ist eine einzelne Vander-Waals-Bindung zwischen einem Paar von Atomen mit 4kJ/mol nur wenig strker als die mittlere
thermische Energie von Moleklen bei Raumtemperatur (2,5kJ/mol).
.. Tab.1.2 Kovalente Bindungen und nichtkovalente Wechselwirkungen

Bindungstyp
2
3
4
5
Lnge (nm)
0,15
350
350
Ionenpaar-Bindung
0,25
250
10
Wasserstoffbindung
0,30
15
Van-der-Waals-Anziehung
0,35
1.4
Wasser ist ein unbedingt notwendiger Bestandteil

der lebenden Substanz Wasser ist das Lsungs-
11
12
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14
15
16
17
18
19
20
In H2O
Kovalente Bindung
10
Im Vakuum
Die Bindungslnge entspricht dem Abstand der Mittelpunkte der beteiligten Atome, bei der Wasserstoffbindung des
Donor- und Akzeptoratoms. Die Bindungsenergie ist die Energie, die notwendig ist, um eine Bindung zu spalten. Die
angegebenen Werte sind Richtwerte, die Bindungsenergie hngt von den beteiligten Atomen ab.
Bindungsenergie (kJ/mol)
Wasser und hydrophober Effekt
mittel, in dem sich alle biochemischen Vorgnge

abspielen; Wasser ist zudem Reaktionspartner bei
vielen biochemischen Reaktionen; Wasser liegt dem
hydrophoben Effekt zugrunde und ist damit wesentlich mitverantwortlich fr die Ausbildung aller
greren biologischen Strukturen.
Die biologisch wichtigen Eigenschaften des
Wassers sind:
Hohe Kohrenz (starke intermolekulare Wechselwirkungen durch H-Bindungen), die sich
im hohen Schmelz- und Siedepunkt wie auch
der hohen Oberflchenspannung manifestiert
(z.B. im Vergleich mit dem hnlich gebauten,
bei physiologischen Temperatur- und Druckverhltnissen gasfrmigen H2S).
Hohe Dielektrizittskonstante: Die polaren
Wassermolekle schwchen die elektrostatischen Wechselwirkungen zwischen Ionen ab
und erleichtern die Trennung entgegengesetzter
Ladungen, z.B. die Dissoziation von Salzen in
Ionen oder die Deprotonierung von Suren.
Ionenpaar-Bindungen und H-Bindungen sind
in wsseriger Lsung abgeschwcht (.Tab.1.2).
Diese Eigenschaften lassen sich durch den Bau des

H2O-Molekls erklren. Das H2O-Molekl ist zwar
elektrisch neutral, aber durch die ungleichmige
Verteilung der Bindungselektronen decken sich die
positiven und negativen Ladungsschwerpunkte nicht:
Der Dipolcharakter des H2O-Molekls ermglicht

die Ausbildung von H-Bindungen von H2O-Moleklen untereinander sowie mit anderen polaren
Verbindungen. In Eis bilden die Wassermolekle
ein Kristallgitter, wobei jedes O-Atom zwei H-Bindungen eingeht. Die zwei kovalent gebundenen
H-Atome und die H-Atome der H-Bindungen sind
tetraedrisch angeordnet:
9
1.4 Wasser und hydrophober Effekt
Die Struktur von flssigem Wasser bei 37C ist ein

im Bereich von ps (1012s) sich stetig nderndes
dreidimensionales Netzwerk von Wassermoleklen, die ber kurzlebige H-Bindungen miteinander
zusammenhngen.
Die Fhigkeit von Verbindungen, mit H2O-Moleklen H-Bindungen einzugehen, bestimmt
deren Wasserlslichkeit Zu den hydrophilen
Verbindungen gehren ionische bzw. ionisierbare
Verbindungen (Salze, Suren, Basen) und Verbindungen mit Heteroatomen (O, N, S). Ionen oder
geladene Gruppen haben eine starke Tendenz, sich
mit Wasserdipolen, d.h. mit einem Hydratmantel,
zu umgeben (Beispiele: Aminosuren, Proteine,
Nucleotide). Die Ionisierung wird, sofern dabei
eine Ladungstrennung stattfindet, durch die hohe
Dielektrizittskonstante des Wassers begnstigt.
Verbindungen mit Heteroatomen haben hnliche
Dipoleigenschaften wie H2O; man nennt sie deshalb polare Verbindungen (Beispiele: Zucker, Alkohole). Auch sie gehen H-Bindungen mit H2O ein
und sind gut wasserlslich:
dungen und Gruppen ist auf diesen Effekt zurckzufhren.

Amphiphile Verbindungen (griech. amphi, beiderseits) besitzen sowohl polare (hydrophile) Gruppen als auch apolare (hydrophobe, lipophile) Teile
und zeigen geringe echte Wasserlslichkeit.
Seifen (Alkalisalze lngerkettiger Fettsuren) bilden in Wasser keine echte Lsung, in der Einzelmolekle von H2O umgeben sind. Seifen bilden
eine trbe Suspension von Mizellen (.Abb.1.2).
Die Struktur der Mizelle entspricht einem Kompromiss zwischen der Wasserlslichkeit der ionisierten Carboxylatgruppen und der Unlslichkeit
der apolaren Kohlenwasserstoffketten in Wasser.
Diese Lslichkeitseigenschaften der amphiphilen
Verbindung in Wasser fhren zu einer definierten
Orientierung der Molekle und damit zur Ausbildung einer supramolekularen Struktur, die vorwiegend durch hydrophobe Effekte stabilisiert wird.
Hydrophobe Effekte sind durch Wasser bedingte Assoziationseffekte apolarer Molekle oder
Gruppen Die Wassermolekle, welche apolare
Hydrophobe (lipophile) Verbindungen besitzen
keine geladenen oder polaren Gruppen; sie sind

apolar (unpolar) und knnen keine H-Bindungen
eingehen. H2O-Molekle bilden daher um hydrophobe Molekle oder Gruppen eine kfigartige
Struktur, die durch H-Bindungen zusammengehalten wird und sich ber mehrere Schichten von
H2O-Moleklen erstrecken kann. Diese Kfig
struktur (Klathrat) entspricht einem Zustand hherer Ordnung, d.h. niedrigerer Entropie, und ist
daher energetisch ungnstig (Abschn.1.6). Die
geringe Wasserlslichkeit hydrophober Verbin-
Molekle umgeben, befinden sich in einem Zustand

hherer Ordnung als die sonstigen Wassermolekle,
da ihre Mglichkeiten, H-Bindungen auszubilden,
weniger zahlreich sind. Lagern sich die apolaren
Molekle zu einem Aggregat zusammen, verringern
sie ihre Kontaktflche zum Wasser (.Abb.1.2). Die
Freiheitsgrade der Wassermolekle werden dadurch
vermehrt: Ein thermodynamisch gnstigerer Zustand niedrigerer Ordnung (hherer Entropie) wird
erreicht. Hydrophobe Effekte sind nicht auf gegenseitige Anziehung der apolaren Molekle, sondern
auf deren Ausschluss durch die aneinanderhaftenden
H2O-Molekle zurckzufhren. Ohne Wasser gibt
es keine hydrophoben Effekte! Die nderung der
freien Energie G (Abschn.1.6) fr die berfhrung eines apolaren Molekls der Gre von Cyclohexan aus seiner flssigen Phase in eine wsserige
Lsung betrgt 25kJ/mol (6kcal/mol).
10
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.. Abb.1.2 Stearat-Mizelle in Wasser. Stearat-Anionen (CH3(CH2)14COO) lagern sich zu supramolekularen Assoziaten zusammen. Die hydrophoben (lipophilen) Kohlenwasserstoffketten werden vom Wasser ausgeschlossen und lagern sich aneinander.
Die negativ geladenen Carboxylatgruppen treten in Kontakt mit H2O-Dipolen. Hydrophobe Effekte stabilisieren die Seifenmizelle: Der Entropiegewinn der H2O-Molekle berwiegt den Entropieverlust der Fettsure-Anionen
Hydrophobe Effekte stabilisieren fast alle biologischen Strukturen Zusammen mit den ande-
ren Sekundrbindungen, insbesondere den H-Bindungen, sind hydrophobe Effekte verantwortlich fr

die Stabilisierung aller greren biologischen Strukturen wie Proteine, Ribosomen oder Membranen
im wsserigen Milieu der Zelle. Diese Stabilisierung
durch leicht lsbare nichtkovalente Wechselwirkungen verschafft den biologischen Makromoleklen
konformationelle Flexibilitt. Fr viele biologische
Makromolekle, insbesondere fr Proteine, sind
Konformationsnderungen eine Grundlage ihrer
Wirkungsweise.
1.5
Molekulare Erkennung
Alle biologischen Vorgnge beruhen auf spezifischen intermolekularen Wechselwirkungen
Wie treffen Molekle aufeinander? In einer Lsung

bewegen sich die Molekle durch Diffusion. Kollisionen mit anderen Moleklen fhren zu einem
statistischen Diffusionsweg, wodurch die Wegzeit
proportional zum Quadrat der Luftlinien-Distanz
zwischen Start und Ziel wird (doppelte Distanz
braucht vierfache Zeit). Fr die kurzen Distanzen

innerhalb einer Zelle ist die Diffusion eine durchaus
gengend schnelle Art der Fortbewegung. Ein Molekl der Gre von ATP braucht nur 0,2s, um ber
10m, den Durchmesser einer kleinen tierischen
Zelle, zu diffundieren.
Eine Zufallskollision zwischen zwei Moleklen, z.B. zwei Proteinen oder einem Makromolekl und einer niedermolekularen Verbindung,
kann zur unmittelbaren Bildung eines Komplexes
fhren. Die Geschwindigkeit der Komplexbildung
wird in diesem Fall durch die Geschwindigkeit der
Diffusion bestimmt (diffusionslimitierte Komplex
bildung). Die Komplexbildung ist langsamer, falls
die Molekle in einer gewissen Orientierung oder
Konformation aufeinandertreffen mssen, um einen Komplex bilden zu knnen, d.h. wenn nicht
jede Kollision zur Bildung eines Komplexes fhrt.
Sind sich die beiden Molekle mit ihren strukturell komplementren Oberflchen gengend nahe
gekommen, werden nichtkovalente Wechselwirkungen wirksam. Der entstandene Komplex bleibt
bestehen, bis die statistischen thermischen Bewegungen der Molekle und Moleklteile zu seiner
Dissoziation fhren.
11
1.5Molekulare Erkennung
keitskonstante k1 und der Assoziationsgeschwindigkeitskonstante k1:

k1
AB A C B
k1
Geschwindigkeit der Dissoziation
vdiss D k1 AB

.. Abb.1.3 Strukturelle Komplementaritt und Bildung eines
Komplexes zwischen zwei Moleklen. Die intermolekularen
Wechselwirkungen sind schwach und von geringer Reichweite. Ein Komplex ist umso stabiler, je mehr solcher Bindungen
bestehen. Nur bei genauer struktureller Komplementaritt
der beiden Bindungspartner kann sich die maximale Anzahl
von Bindungen ausbilden
Geschwindigkeit der Assoziation
vass D k1 AB
Im Gleichgewicht ist
vdiss D vass
k1 AB D k1 AB

k1
AB
D Kd
D
AB
k1
Konzentration/Moleklzahl
Eine Konzentration einer Verbindung von
1M in einer Sugerzelle mit einem Volumen
von 2nL entspricht 1200Millionen Moleklen
dieser Verbindung in der Zelle.
Strukturelle Komplementaritt ist ein fundamentales Prinzip der Organisation der lebenden
Materie Proteinmolekle unterscheiden sich
voneinander aufgrund ihrer verschiedenen Oberflchenbeschaffenheit sehr scharf in ihrer Wechselwirkung mit anderen Moleklen. Diese biologische
Spezifitt wird durch strukturelle Komplementaritt verwirklicht (.Abb.1.3). Strukturelle Komplementaritt ist verantwortlich fr die spezifische
Bindung von Substratmoleklen an Enzyme, von
Hormonen an Rezeptoren oder von Antigenen an
Antikrper und fhrt zur Einlagerung von Proteinen in supramolekulare Strukturen bei der Biogenese von Zellmembranen oder Viren. Auf struktureller Komplementaritt beruht die molekulare
Arbeitsteilung und Spezialisierung.
Bei den
Nucleinsuren sichert die Paarung komplementrer
Basen die Weitergabe der genetischen Information.
Die Bindungsgleichgewichtskonstante ist ein

Ma fr die Stabilitt eines Komplexes Die Dissoziationsgleichgewichtskonstante Kd entspricht
dem Quotienten der Dissoziationsgeschwindig-
Unterschiede in der Stabilitt von Komplexen sind

zumeist auf Unterschiede in der Geschwindigkeit
ihrer Dissoziation zurckzufhren. Die reziproke
Gleichgewichtskonstante wird als Bindungsgleichgewichtskonstante oder Assoziationskonstante
Kass=1/Kd bezeichnet.
Gebruchliche Einheiten
k1
s1
k1
M1s1
Kd
Kass
M 1
Je hher die Bindungsgleichgewichtskonstante Kass

ist, d.h. je niedriger die Dissoziationskonstante
Kd eines Komplexes AB ist, umso strker ist die
Bindung zwischen A und B, d.h. umso grere
Anteile der Molekle A und B liegen im Gleichgewicht als Komplex vor (Rechenbeispiel Enzym-Inhibitor-Komplex; .Tab.1.3). Die Kd-Werte
fr Komplexe zwischen Biomoleklen liegen im
Bereich von 103M bis 1012M, sie entsprechen
Bindungsenergien von 1872kJ/mol, welche z.B.
durch 4 bis 17H-Bindungen zustande kommen
knnten.
12
.. Tab.1.3 Komplexbildung und Dissoziationsgleichgewichtskonstante Kd, Rechenbeispiel fr Bildung von Enzym-Inhibitor-Komplexa
Enzym-Inhibitor-Komplex:
3
4
5
E + I EI
E
=1
Falls [I] = Kd, ist EI
d.h. die Hlfte des Enzyms liegt als EI-Komplex vor
Falls Kd= 105 M und [I] = 103 M,
ist EIE D
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16
17
18
19
20
1
100
d.h. 100/101 oder 99% des gesamten Enzyms liegen als EI-Komplex vor.
Die Dissoziationskonstante Kd bestimmt bei gegebener Konzentration des ungebundenen Liganden das Verhltnis
der Konzentrationen von freiem und ligandiertem Protein. Als Ligand wird die, i.d.R. niedermolekulare, Verbindung
bezeichnet, die durch ein Makromolekl, i.d.R. ein Protein, gebunden wird.
a
6
7
10-5
10-3
Die gegenseitige Erkennung von Moleklen

folgt statistischen Gesetzmigkeiten und verluft deshalb nicht ohne Fehler Ein Enzymmole-
kl wird gelegentlich auch ein Molekl binden, das

seinem spezifischen Substrat hnlich ist, selbst wenn
dessen Bindungsgleichgewichtskonstante kleiner
ist als diejenige des Substrats. Das Enzymmolekl
akzeptiert u.U. ein solches Pseudosubstrat, wenn
auch seltener als das spezifische Substrat. Fr eine
Reihe wichtiger Vorgnge, wie die Weitergabe der
genetischen Information oder die Umsetzung der
genetischen Information in die Proteinstruktur, hat
die Zelle daher Korrekturmechanismen entwickelt,
die eingefhrte Fehler beheben.
Konsequenzen von Fehlern
Fr die Zellen bedeuten Irrtmer, welche
durch ihre molekulare Maschinerie begangen
werden, im besten Fall eine Verschwendung
chemischer Energie, im schlimmsten Fall
Zelltod oder unkontrollierte Zellvermehrung.
Ohne Fehler im Kopieren der DNA (und ohne
Spontanmutationen) htte indessen die biologische Evolution nicht stattgefunden.
1.6
Fluss von Materie und Energie,

energetische Koppelung
von Reaktionen
Der zweite Hauptsatz der Thermodynamik besagt,

dass in einem geschlossenen System die Entropie
nur zunehmen kann. Die Entropie ist ein Ma fr

die Wahrscheinlichkeit des Zustands eines Systems
und damit ein Ma fr die Unordnung des Systems.
Lebende Organismen besitzen einen sehr hohen
Grad von Ordnung, der nach dem Tod verschwindet. Wenn Organismen wachsen, vergrern sie
den Bereich hoher Ordnung. Wie lassen sich die
Lebensvorgnge mit dem zweiten Hauptsatz vereinbaren?
Organismen existieren fern vom Gleichgewichtszustand, sie sind offene Systeme, die Energie
aus der Umgebung beziehen und Wrme in die Umgebung abgeben Die zugefhrte Energie erlaubt
den Nichtgleichgewichtszustand der belebten Natur

aufrecht zu erhalten. Die primre Energiequelle der
belebten Natur auf der Erde ist die Sonnenstrahlung.
Photosynthetisierende Zellen (hhere Pflanzen,
Grnalgen, Cyanobakterien) verwandeln die elektromagnetische Energie des Sonnenlichts in chemische Energie, d.h. in Energie chemischer Bindungen:
Lichtenergie C CO2 C H2 O !
Zucker C O2
Chemotrophe Zellen (Tiere) benutzen die chemi-
sche Energie der von photosynthetisierenden Zellen

aufgebauten Verbindungen. Durch oxidativen Abbau wird direkt verwertbare chemische Energie in
Form von ATP (Adenosintriphosphat) gewonnen:
Zucker u. a. Verbindungen
C O2 C ADP C Pi !
CO2 C H2 O C ATP
13
1.6 Fluss von Materie und Energie, energetische Koppelung von Reaktionen
Der Kohlenstoff durchluft damit einen Kreislauf

zwischen photosynthetisierenden und oxidierenden
chemotrophen Zellen.
Die in ATP steckende chemische Energie wird

verwendet, um Vorgnge anzutreiben, die sonst
aus energetischen Grnden nicht ablaufen wrden Dazu gehren z.B. die Synthese zellulrer
Makromolekle, der Transport von Moleklen und

Ionen durch Membranen gegen ein Konzentrationsgeflle oder die Leistung mechanischer Arbeit. Es
sind Vorgnge dieser Art, welche den hohen Grad
von Ordnung in Zellen und Organismen aufbauen
und erhalten.
Freie Energie und Gleichgewicht Eine Reaktionslsung, die weder Stoff noch Wrme mit der Umwelt austauscht, besitzt eine bestimmte freie Energie,
die von den Konzentrationen der Reaktanten abhngt und sich daher im Laufe einer Reaktion ndert:
ACB CCD
Die freie Energie G ist definiert als
G D H T S;
wobei H die Enthalpie (Innere Energie + pV), T
die absolute Temperatur, S die Entropie und p der
Druck und V das Volumen ist.
Beim Umsatz von 1mol A und B in C und D,
bei gegebenen Konzentrationen der Reaktanten und
isothermen sowie isobaren Bedingungen, ndert
sich die freie Energie des Systems um G, wobei
von G und nicht von G entscheidet, in welcher

Richtung eine Reaktion ablaufen kann:
Falls G<0, handelt es sich bei der Reaktion von
A+B nach C+D um eine exergonische Reaktion. Eine Nettoreaktion A+B nach C+D fhrt
in Richtung Gleichgewicht und ist mglich.
Falls G=0, befindet sich das System im
C D
Gleichgewicht, d.h. A B =K
Es findet keine Nettoreaktion statt.
Falls G>0, ist die Reaktion von A+B nach
C+D endergonisch. Eine endergonische Reaktion fhrt vom Gleichgewicht weg und kann
nur dann ablaufen, wenn sie mit einer exergonischen Reaktion gekoppelt ist. Die Rckreaktion
von C+D nach A+B kann hingegen ablaufen,
sie fhrt zur Erreichung des Gleichgewichts.
--
Numerischer Zusammenhang
Numerischer Zusammenhang zwischen K, der
Reaktionsgleichgewichtskonstanten, und G
(bei 25C) fr die Reaktion A+B C+D (1kJ
= 0,24kcal):
G (kJ/mol)
K=[C][D]
[A][B] im Gleichgewicht
18
0,001
12
0,01
6 (1.4kcal/mol)
0,1
10
12
100
18
1000
G ist eine Zustandsfunktion Der Wert von G
G D H T S
G lsst sich berechnen aus G, der nderung der
freien Energie bei Standardbedingungen, und den
Konzentrationen der Reaktanten:
G D G C RT ln
CD
AB
G ist bestimmt durch die Gleichgewichtskonstante K; G kann je nach dem Verhltnis der Konzentrationen der Reaktanten grer, gleich oder
kleiner sein als G Wenn die Konzentrationen
von Produkten und Edukten 1M (1mol/L) sind

(Standardbedingungen), ist G=G. Der Wert
ist nur abhngig vom Anfangs- und Endzustand des

Systems; der Weg, ber den das System vom Anfangs- in den Endzustand gelangt, ist hierfr ohne
Bedeutung. Fr die Werte von G und G spielt
es keine Rolle, ob z.B. Glucose mit Sauerstoff als
Oxidationsmittel direkt zu CO2 und H2O verbrannt
wird oder ob im Organismus aus Glucose ber eine
lange Reihe aufeinanderfolgender enzymkatalysierter Reaktionen die gleichen Produkte entstehen.
Biomolekle sind thermodynamisch labil, jedoch kinetisch stabil G gibt nur an, in welcher
Richtung die Reaktion ablaufen kann. ber die Geschwindigkeit der Reaktion wird nichts ausgesagt.
Alle biochemischen Reaktionen und Vorgnge sind
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entweder von sich aus exergonisch oder an exergonische Reaktionen gekoppelt. Die thermodynamischen Voraussetzungen, dass die Reaktionen ablaufen knnten, sind demnach erfllt. Dennoch laufen
sie spontan nicht oder nur sehr langsam ab. Glucose
zum Beispiel ist in Gegenwart von Luftsauerstoff stabil; ihr Abbau kann erst mit messbarer Geschwindigkeit ablaufen, wenn er durch Erhhung der
Temperatur oder durch Katalysatoren beschleunigt
wird (Verbrennung der Glucose in der Flamme bzw.
enzymkatalysierter Abbau der Glucose im Organismus). Die allermeisten biochemischen Reaktionen
laufen nur dann mit messbarer Geschwindigkeit ab,
wenn sie durch Enzyme katalysiert werden. Ohne
Enzyme sind die Biomolekle kinetisch stabil.
In der Biochemie gelten besondere thermodynamische Standardbedingungen Die Stan-
dardbedingungen der Chemie (Konzentrationen

1M=1mol/L) entsprechen nicht den physiologischen Bedingungen. Zur Vereinfachung sind besondere biochemische Standardbedingungen
definiert worden:
Alle biochemischen Reaktionen laufen in wsseriger Lsung ab; auerdem nimmt Wasser an manchen Reaktionen teil. Fr die Standardbedingungen
der Biochemie gilt deshalb:
H2 O D 55 M
.1 L Wasser enthlt 55 mol H2 O/
Protonen nehmen an vielen Reaktionen teil, z.B.:

C
ATP4 C H2 O ! ADP3 C HPO2
4 CH :
Eine Wasserstoffionenkonzentration von 1M entspricht einem pH-Wert von Null und ist damit weit
entfernt von physiologischen Bedingungen. Man
definiert deshalb fr die biochemischen Standardbedingungen:
HC D 107 M .pH 7/
Zur Berechnung von G und G unter biochemischen Standardbedingungen werden demnach eine
Wasserkonzentration von 55M und eine Wasserstoffionenkonzentration von 107M je mit dem
Wert1 in die Gleichungen eingesetzt. Wenn mit diesen Werten gerechnet wird, werden andere Werte fr
G und G erhalten, die mit G bzw. G bezeichnet werden ( : Rechenbeispiel zu G und G).
Energetische Koppelung bringt endergonische Reaktionen zum Ablaufen Wir betrachten
als Beispiel eine Reaktion, die aus zwei Teilreaktionen besteht:

zz Teilreaktion1
G0 D 5 kJ=mol
ABCC
ist unter den vorliegenden Bedingungen (Konzentrationen der Reaktanten) endergonisch; es kann
keine Nettoreaktion von A nach B+C ablaufen;
zz Teilreaktion2
BD
G0 D 8 kJ=mol
ist exergonisch und kann als Nettoreaktion ablaufen;

zz Die Gesamtreaktion
ACCD
G0 D 3 kJ=mol
ist exergonisch. Sie wird ablaufen, obwohl sie eine

endergonische Teilreaktion einschliet. Die beiden
Teilreaktionen sind miteinander gekoppelt ber das
gemeinsame Zwischenprodukt B.
Eine Reaktion mit stark negativem G (Gleichgewicht stark auf Seite der Produkte; Teilreaktion2
im obigen Beispiel) wird als energieliefernde Reaktion bezeichnet, wenn sie durch energetische
Koppelung eine Reaktion, welche von selbst nicht
ablaufen kann (Teilreaktion1), ermglicht.
Eine Verbindung, welche eine groe Tendenz hat,
eine Gruppe auf ein Akzeptormolekl zu bertragen,
wird in der biochemischen Terminologie als energiereiche Verbindung bezeichnet. Das Gleichgewicht
der Reaktion einer energiereichen Verbindung mit
einem Akzeptor liegt stark auf Seiten der Produkte;
die energiereiche Verbindung hat ein hohes Gruppenbertragungspotenzial. Beim Vergleich der
verschiedenen energiereichen Verbindungen wird
Wasser als Akzeptor gewhlt, d.h. es werden die
G-Werte der Hydrolyse miteinander verglichen.
ATP (Adenosintriphosphat) ist der wichtigste
Energiebertrger in der Zelle und der Prototyp ei-
15
ner energiereichen Verbindung. Die G-Werte fr

die Hydrolyse der zwei Phosphorsureanhydridbindungen weisen diese als energiereiche Bindungen
aus. Die Phosphorsureesterbindung ist dagegen
nicht energiereich:
ATP + H2O ADP + Pi
ADP + H2O AMP + Pi
G = 30kJ/mol = 7,3kcal/
mol (bei pH 7,0, 25C).
Unter physiologischen Be
dingungen betrgt G der
ATP-Hydrolyse ungefhr
50kJ/mol.
G = 30kJ/mol = 7,3kcal/mol
AMP + H2O Adenosin + Pi G = 14kJ/mol = 3,4kcal/mol
.. Tab.1.4 Freie Energie der Hydrolyse von ATP im

Vergleich mit der Hydrolyse anderer Verbindungena
G(kJ/mol)
Phosphoenolpyruvat
60
3-Phosphoglyceroylphosphat
54
Kreatinphosphat
43
ATP (ADP+Pi)
35
ATP (AMP+PPi)
37
Pyrophosphat (anorgan.
Diphosphat) PPi
33
Acetyl-Coenzym A
35
Aminoacyl-tRNA
35
Uridindiphosphat-Glucose
30
N -Formyltetrahydrofolat
26
Alanyl-Glycin
17
Glucose-6-phosphat
14
10
G entspricht der nderung der freien Energie bei

Hydrolyse unter biochemischen Standardbedingungen bei 25C. ATP nimmt im Vergleich mit anderen
Verbindungen eine Mittelstellung ein.
ATP besitzt somit zwei energiereiche Bindungen,

d.h. Bindungen, deren hydrolytische Spaltung ein
stark negatives G aufweist. Energiereiche Bindungen werden in der biochemischen Literatur
hufig mit einer Tilde~bezeichnet. Ein G von
30kJ/mol entspricht einer Gleichgewichtskonstante K=105, d.h. das Gleichgewicht liegt um diesen Faktor auf Seite der Produkte:
ADPPi
D K0 D 105
ATPH2 O
d.h. 1nM ATP und 55M H2O stehen mit je 10mM
ADP und Pi im Gleichgewicht (Zu beachten: 55M
H2O wird mit dem Wert1 in die Gleichung eingesetzt.)
Ein Vergleich mit anderen Verbindungen mit
hohem Phosphatgruppenbertragungspotenzial
sowie weiteren energiereichen Verbindungen zeigt,
dass der G-Wert von ATP eine Mittelstellung einnimmt (.Tab.1.4), die ATP zum generellen bertrger chemischer Energie in der Zelle prdestiniert.
In der Zelle liegt ATP in einer Konzentration von
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110mM als Mg2+ ATP-Komplex vor. Das positiv
geladene Mg2+-Ion schirmt die negativen Ladungen

der Phosphatgruppen des ATP ab.
Links auf
Springer Website:
http://www.springer.com/
life+sciences?SGWID=0-10
027-6-1514842-0
1.1 Die Entstehung des Lebens
1.2 Gre biologischer Strukturen, Geschwindigkeit biologischer Vorgnge und molekulare Zusammensetzung der lebenden
Materie
1.3 Wechselwirkungen zwischen Biomoleklen
1.4 Wasser und hydrophober Effekt
1.5 Molekulare Erkennung
Weiterfhrende Literatur
17
Kovalente Struktur
der Proteine
2.1
Bauprinzip der Proteine 18
2.2
Gre und Gestalt der Proteine 18
2.3
Aminosuren, die Bausteine der Proteine 20
2.4
Ionisationszustnde von Aminosuren und Proteinen 22
2.5
Aminosurezusammensetzung und
Aminosuresequenzen von Proteinen 24

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Kapitel 2 Kovalente Struktur der Proteine
Im Jahr 1838 fand Gerardus Mulder N-haltige

Stoffe, die in den Geweben quantitativ vorherrschten, und gab diesen den Namen Proteine (griech.
proteion, die erste Stelle). Die Bezeichnung ist auch
im qualitativen Sinn gerechtfertigt: Proteine sind die
wichtigsten und vielfltigsten Struktur- und Funktionstrger der Zelle.
Proteine sind unverzweigte Polymere aus 20
verschiedenen L-Aminosuren (das achirale Glycin mitgezhlt), die durch Peptidbindungen miteinander verknpft sind. Die Nucleotidsequenz der
DNA bestimmt die Abfolge der Aminosurereste
lngs der Polypeptidkette; die Aminosuresequenz
bestimmt ihrerseits die rumliche Struktur des Proteins. Die meisten Polypeptidketten, die in der Zelle
synthetisiert werden, besitzen einige hundert Aminosurereste und eine Moleklmasse zwischen 10
und 100kDa. Viele Proteine bestehen aus mehreren
Polypeptidketten (Untereinheiten), die durch nichtkovalente Wechselwirkungen zusammengehalten
werden. Die ersten grndlichen Untersuchungen
von Proteinen wurden an Hhnereiwei durchgefhrt; Proteine werden deshalb im Deutschen auch
als Eiweie bezeichnet.
2.1
Bauprinzip der Proteine
Proteine sind lineare Polymere von 20 verschiedenen Aminosuren Die Aminosuren sind durch
Peptidbindungen miteinander verknpft; in diesen
Sureamidbindungen ist die -Carboxylgruppe einer Aminosure mit der -Aminogruppe der nchsten Aminosure verbunden (.Abb.2.1). Dieses
Bauprinzip ergibt eine groe Zahl von Kombinationsmglichkeiten. Aus 20 verschiedenen Bausteinen lassen sich 203=8000 verschiedene Tripeptide synthetisieren. Bei einem kleinen Protein mit
100Aminosureresten bestehen 20100=1,2710130
Mglichkeiten (geschtzte Anzahl von Atomen im
Universum 1079). Allerdings wrden nur sehr wenige dieser Polypeptidketten eine stabile definierte
dreidimensionale Struktur einnehmen knnen und
damit als funktionelles Protein brauchbar sein.
Die periodische Abfolge von C-Atomen und
Peptidbindungen wird als Hauptkette des Peptids
oder Proteins bezeichnet; daran hngen in wechselnder Folge die verschiedenartigen Seitenketten.
Die Aminosuresequenz der Proteine ist genetisch bestimmt Die kovalente Struktur eines
Proteins, d.h. die Abfolge der Aminosuren lngs

der Polypeptidkette, wird auch als Primrstruktur
bezeichnet. Die Polypeptidkette faltet sich spontan
zu einer definierten, fr ein bestimmtes Protein spezifischen dreidimensionalen Struktur. Die Faltung
der Polypeptidkette im Raum (Kettenkonformation, 3D-Struktur) wird durch die Primrstruktur
bestimmt und ist damit indirekt ebenfalls genetisch

festgelegt. Die 3D-Struktur wird durch nichtkovalente Bindungen und hydrophobe Effekte stabilisiert. Besonders bei extrazellulren Proteinen tragen
auch Disulfidbindungen zur Stabilisierung bei. Die
fr ein bestimmtes Protein typische Faltungsform
wird als dessen native Struktur bezeichnet. Nur native Proteine sind biologisch aktiv. Infolge der definierten Raumstruktur knnen sich reine Proteine in
ein Kristallgitter einfgen.
Die meisten Proteine haben eine sehr hnliche elementare Zusammensetzung:
C
53
21
16
03
Massen-%
Der Stickstoffanteil von 16% ist von Protein zu Protein recht konstant und kann deshalb zur quantitativen Bestimmung von Proteinen benutzt werden.
Die Proteine knnen eingeteilt werden in einfache Proteine, welche aus einer oder mehreren
Polypeptidketten bestehen, und zusammengesetzte Proteine, welche auerdem eine Nichtproteinkomponente, d.h. ein Metallion oder eine niedermolekulare organische Verbindung, enthalten
(.Tab.2.1). Diese prosthetische Gruppe ist durch
kovalente oder nichtkovalente Bindungen fest an
das Protein gebunden. Sie ist notwendig fr die biologische Aktivitt des Proteins. Zudem ist sie verantwortlich fr die charakteristische Farbe einiger
Proteine. Proteine selbst sind farblos.
2.2
Gre und Gestalt der Proteine
Die Moleklmassen der Proteine liegen im Bereich

von 101000kDa. Ein Protein besitzt im Gegensatz
zu einem Peptid eine definierte 3D-Struktur. Fr die
Abgrenzung zwischen Protein und Peptid spielt demnach die Moleklmasse primr keine Rolle. Wohl ist
19
2.2 Gre und Gestalt der Proteine
.. Abb.2.1 Struktur eines Tripeptids. Die drei Aminosuren

besitzen je eine -NH2-Gruppe und eine -COOH-Gruppe;
sie unterscheiden sich jedoch in ihrer Seitenkette (R1R3).
Die -Carboxylgruppe der vorangehenden Aminosure
bildet eine Amidbindung (Peptidbindung) mit der -Aminogruppe der nchstfolgenden Aminosure. Je nach Anzahl
der Aminosurereste bezeichnet man das entstehende
Molekl als Dipeptid, Tripeptid, Tetra-, ... Polypeptid. Der
Ladungszustand ionisierbarer Gruppen ist in dieser Darstellung nicht bercksichtigt
.. Tab.2.1 Proteine mit prosthetischen Gruppen

Beispiel
Zugehrige prosthetische
Gruppe
Massenanteil der prosthetischen Gruppe (%)
Gewisse Enzyme
Coenzym
<1
Metallenzyme
Metallion
<1
Hmoglobin
Hm
Lipoproteine
Apo-Lipoproteine
Lipid
80
Glykoproteine
1-Glykoprotein
Kohlenhydrat
40
Phosphoproteine
Casein (in Milch)
Phosphat
Cofaktor-abhngige
Proteine
aber die Tendenz zu eindeutiger Raumstruktur umso

grer, je hher die Moleklmasse ist. Die meisten
in der Natur vorkommenden Polypeptidketten von
ber 10kDa besitzen eine definierte Raumstruktur
und sind demnach den Proteinen zuzuzhlen.
Anzahl As-reste in Protein
Durchschnittliche Moleklmasse eines
Aminosurerests=120Da; Moleklmasse des
Proteins/120Anzahl Aminosurereste
Viele Proteine sind aus mehreren Untereinheiten

zusammengesetzt Die lngsten Polypeptidketten
besitzen ber 1000Aminosurereste. Die meisten

Polypeptidketten sind krzer. Proteine mit Moleklmassen>50kDa bestehen oft aus mehr als einer
Polypeptidkette. Man unterscheidet monomere
Proteine mit einer Polypeptidkette und oligomere
Proteine, die aus mehreren Polypeptidketten aufgebaut sind. Die Untereinheiten oligomerer Proteine
werden durch nichtkovalente Wechselwirkungen
zusammengehalten.
Als Makromolekle unterscheiden sich Proteine

von niedermolekularen Substanzen in ihrem Verhalten gegenber Membranen. Viele biologische
und knstliche Membranen lassen Wasser und
niedermolekulare Stoffe durchtreten, sind aber fr
groe Molekle wie Proteine undurchlssig. Dieses
Verhalten wird bei der Dialyse und der Ultrafiltration genutzt.
Dialyse
Eine semipermeable Membran mit Poren von
etwa 2nm, die kleine Molekle und Ionen
durchlsst, Proteine aber zurckhlt, dient
dazu, Proteinlsungen von niedermolekularen
Substanzen zu befreien. Auf dem gleichen
Prinzip beruht die Hmodialyse in der
knstlichen Niere. Dabei wird ungerinnbar
gemachtes Blut gegen eine Elektrolytlsung
mit physiologischer Zusammensetzung dialysiert. Harnpflichtige Stoffe werden entfernt;
Blutzellen und Blutproteine werden zurckgehalten.
20
1
2
.. Abb.2.3 Kollagen als Beispiel eines Faserproteins. Drei

Kollagen-Polypeptidketten winden sich umeinander zu
einer Tripelhelix. Die Tripelhelices lagern sich wiederum
aneinander, um kollagene Fasern zu bilden. Kollagen ist der
wichtigste extrazellulre Bestandteil des Bindegewebes und
der organischen Grundsubstanz des Knochens. Der gezeigte
Abschnitt einer Kollagentripelhelix ist 11,4nm lang und entspricht 4% der 300nm langen Kollagentripelhelix
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Protein
Produkt
Haarkeratin
Wollfasern
Kollagen
.. Abb.2.2 Hmoglobin als Beispiel eines oligomeren
Proteins aus globulren Untereinheiten. Hmoglobin ist ein
Tetramer aus zwei - und zwei -Untereinheiten. Je ein -Globinmolekl (141 minosurereste) und ein -Globinmolekl
(146Reste) bilden ein Dimer; zwei dieser Dimere bilden ein
()2-Tetramer, das Hmoglobin A. Jede Untereinheit besitzt
als prosthetische Gruppe ein Hm-Molekl (in Blau), welches
je ein O2-Molekl binden kann
Die Proteine knnen in zwei groe Klassen eingeteilt werden:

Globulre Proteine: Die Polypeptidketten sind
zu kompakten, annhernd kugeligen Formen

gefaltet (.Abb.2.2). Globulre Proteine sind
zum groen Teil gut wasserlslich und haben
uerst vielfltige Funktionen.
Fibrillre Proteine (Faserproteine) bilden
langgestreckte Strukturen (meist aus vielen
aneinandergelagerten Polypeptidketten), sind
meist wasserunlslich und haben mechanische
Funktionen (.Abb.2.3). Faserproteine sind
vielfach in Produkten enthalten, die praktische
Verwendung finden :
Seidenfibroin
2.3
im Bindegewebe
der Haut
Leder
als organische
Grundsubstanz
des Knochens
Gelatine,
Tischlerleim
Seidenfasern
Aminosuren, die Bausteine

der Proteine
Proteine sind ausschlielich aus L-Aminosuren

(und Glycin) aufgebaut Die strukturelle und
funktionelle Vielfalt der Proteine beruht auf den

Eigenschaften der 20 verschiedenen in Proteinen
vorkommenden Aminosuren. Alle -Aminosuren
knnen formal als Derivate des Glycins aufgefasst
werden, in welchen ein H-Atom am -Kohlenstoffatom durch einen spezifischen Rest (Seitenkette) substituiert ist. Dabei wird C zum chiralen
Zentrum. AlleL-Aminosuren mit Ausnahme von
L-Cystein gehren zur S-Reihe im R/S-System. Die
Aminosuren knnen nach der Art ihrer Seitenketten geordnet werden (.Abb.2.4) .
.. Abb.2.4 Die 20 proteinogenen Aminosuren.

Die Dreibuchstaben- und Einbuchstabenabkrzungen sind angegeben.
Der gezeigte Ladungszustand der ionisierbaren Gruppen gilt fr pH7. Das zentrale C-Atom wird als C bezeichnet (s. die Formel
von Glycin) und trgt die sogenannte -Amino- und -Carboxylatgruppe. Die weiteren Atome werden fortlaufend mit griechischen Buchstaben bezeichnet (s. Formel von Lysin). Die Aminosuren sind nach der Art ihrer Seitenketten (in Blau) geordnet:
1.Glycin besitzt keine Seitenkette und ist daher nicht chiral.
2.Aminosuren mit hydrophober Seitenkette. Die Seitenketten bestehen aus Kohlenwasserstoffketten ohne reaktive Gruppen.
3.Saure Aminosuren (Monoaminodicarbonsuren). Die negativen Ladungen von Proteinen befinden sich auf diesen Aminosureresten.
4.Basische Aminosuren. Diese Aminosurereste tragen die positiven Ladungen von Proteinen.
5.Aminosuren mit polarer Gruppe in der Seitenkette. Diese Aminosurereste knnen H-Bindungen eingehen.
Die Aminosuren ohne geladene Gruppe in der Seitenkette heien neutrale Aminosuren
21
2.3 Aminosuren, die Bausteine der Proteine
22
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Chirale Medikamente
Die belebte Natur ist nicht nur bezglich
Aminosuren enantiomerspezifisch: Die
natrlich vorkommenden Zucker und deren
Derivate gehren ausschlielich der D-Reihe
an. Enzyme und Rezeptoren reagieren i.d.R.
nur mit dem einen Enantiomer einer chiralen
Verbindung. Die chemische Synthese eines
Medikaments liefert jedoch zumeist das
Razemat. Die Enantiomere unterscheiden sich
sehr oft ganz wesentlich in ihrem pharmakologischen Verhalten. Das bekannteste Beispiel
ist das frher als Schlafmittel eingesetzte
Thalidomid: In den ersten drei Monaten einer
Schwangerschaft eingenommen, fhrt es
beim Kind zu schweren Fehlbildungen der
Extremitten. Verantwortlich scheint das
S-Enantiomer zu sein, das nicht nur bei der
chemischen Synthese entsteht, sondern
auch im Organismus aus dem R-Enantiomer
gebildet wird.
Gewisse Aminosuren zeichnen sich durch besondere Eigenschaften aus: Glycin kann wegen
seiner geringen Raumbeanspruchung besonders
gut in die Raumstruktur von Proteinen eingebaut
und nicht leicht durch einen anderen Aminosurerest ersetzt werden. Die aromatischen Aminosuren (Trp, Tyr, Phe) sind verantwortlich fr das
Absorptionsmaximum der Proteine bei 280nm
(Abschn.37.4; ). Prolin besitzt anstelle einer primren eine sekundre Aminogruppe.
Durch den Ringschluss zwischen Seitenkette und
-Aminogruppe wird die freie Drehbarkeit der
N-C-Bindung stark eingeschrnkt mit wichtigen
Konsequenzen bei der Faltung einer Polypeptidkette. Die schwefelhaltige Aminosure Methionin
ist die einzige Aminosure mit einer langen ungeladenen und unverzweigten Seitenkette. Zwei Cysteinreste mit ihren Sulfhydrylgruppen knnen zu
einem Cystinrest oxidiert werden, dessen Disulfidbindung (Disulfidbrcke) zwei Polypeptidketten
oder verschiedene Abschnitte einer Polypeptidkette verbindet:
Asparagin und Glutamin besitzen eine Sureamidgruppe. Das eng benachbarte O-Atom beeinflusst
durch seine Elektronegativitt das freie Elektronenpaar am N-Atom, welches dadurch nicht mehr wie
bei den Aminen zur Protonenbindung zur Verfgung steht. Die Amidgruppen von Asn und Gln
sind somit polar aber nicht mehr basisch. Auer
den 20Standardaminosuren kommen in einigen
Proteinen noch weitere Aminosuren vor, die nicht
in der DNA codiert sind, sondern im fertiggestellten
Protein durch chemische Modifikation von Standardaminosuren entstehen (posttranslationale
Modifikation).
2.4
Ionisationszustnde von
Aminosuren und Proteinen
Alle Aminosuren sind in wsserigem Milieu ionisiert und knnen als Sure (Protonendonor)
und auch als Base (Protonenakzeptor) reagieren Substanzen, welche sowohl saure als auch
basische Eigenschaften aufweisen, werden als Ampholyte (amphotere Elektrolyte) bezeichnet. Die
Protonierung und Deprotonierung der Aminosuren und damit deren Ladungszustand hngen
vom pH-Wert der Lsung ab. Am einfachsten sind
diese Verhltnisse bei den neutralen Aminosuren,
die nur zwei ionisierbare Gruppen, nmlich die
-Aminogruppe und die -Carboxylgruppe, aufweisen (.Abb.2.5).
23
2.4 Ionisationszustnde von Aminosuren und Proteinen
.. Abb.2.5Sure-Base-
Titration von Aminosuren.
Bei einer Aminosure mit
einer ionisierbaren Gruppe
in der Seitenkette kommt
zu den zwei Titrationsstufen von -Carboxyl-Gruppe und -Aminogruppe,
wie sie sich bei Alanin
finden, noch eine dritte
Titrationsstufe dazu
Darstellung von Aminosuren
A
;
HA
die Henderson-Hasselbalch-Puffergleichung:
pH D pKa C log
Diese nichtionisierte Form einer Aminosure

kommt in wsseriger Lsung bei keinem pHWert vor. Gelegentlich wird diese Darstellung
der Einfachheit halber besonders bei Besprechungen des Stoffwechsels verwendet.
Die Ionisation einer Gruppe (z.B. AH A+H+)

wird durch das Massenwirkungsgesetz beschrieben:
[HC A
D Ka ; wobei Ka
HA
die Suredissoziationskonstante darstellt.
Logarithmieren gibt
A
logH C log
D log Ka
HA
C
Wird log [H+] = pH und log Ka = pKa gesetzt,

ergibt sich
A
A
Wenn pH = pKa, ist log [AH] = 0, d.h. [AH] = 1, d.h.

je die Hlfte der Molekle liegt in protonierter bzw.
deprotonierter Form vor.
Bei einem bestimmten pH-Wert der Lsung einer Aminosure liegen, auer dem Zwitterion, die
anionische und kationische Form in gleicher Konzentration vor (.Abb.2.5). Die gemittelte Nettoladung ist in diesem Fall gleich Null. Dieser pH-Wert
wird als isoelektrischer Punkt pI der Aminosure
bezeichnet und entspricht dem arithmetischen Mittel der pKa-Werte:
pI D
pK1 C pK2
2
Die Ladungseigenschaften der Proteine leiten

sich von den Ladungseigenschaften ihrer Seitenketten ab Die Amidgruppe (Peptidbindung
-CO-NH-) ist elektrisch neutral und hat weder basische noch saure Eigenschaften; nur die -Aminogruppe und -Carboxylgruppe an den Enden der
Kette tragen zur Ladung eines Polypeptids bei. Die
24
1
2
3
4
5
6
Ladung der Seitenketten wird nach Magabe ihrer

pKa-Werte durch den pH-Wert der Lsung bestimmt. Die pKa-Werte in einem Protein entsprechen zumeist nicht den Werten in freien Aminosuren, da sie von der Mikroumgebung beeinflusst
werden (.Tab.2.2). Abhngig vom pH-Wert der
Lsung kann die Gesamtladung von Proteinen positiv, negativ oder auch null sein. Demnach weisen
auch Proteine einen isoelektrischen Punkt auf. Die
pH-Titrationskurve eines Proteins entspricht der

Summe der Titrationskurven aller ionisierbaren
Gruppen. Bei vielen Proteinen zeigt sie deren v.a.
durch Histidinreste (pKa = 67) bedingte Pufferwirkung im physiologischen pH-Bereich. Proteine sind
wichtige Puffer in Zellen und im Blut.
Proteine knnen aufgrund ihres isoelektrischen
Punktes in saure, neutrale und basische Proteine
eingeteilt werden.
Beispiel
pI
Ladung bei pH7
Saure Proteine
pI<7
Pepsin
2,9
stark negativ
Aminosurenzusammensetzung
viel Asp und Glu
Neutrale Proteine
pI7
Hmoglobin
7,1
gleichviel saure und basische

Aminosuren
Basische Proteine
pI>7
Histone
10,8
stark positiv
viel Lys und Arg
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
2.5 Aminosurezusammensetzung
und Aminosuresequenzen
von Proteinen
Die Aminosureanalyse (Abschn.38.1) hat fr

die Untersuchung von Proteinen etwa die gleiche
Bedeutung wie die Elementaranalyse niedermolekularer Verbindungen in der Chemie. Die durchschnittliche Hufigkeit, mit welcher die verschiedenen Aminosuren in Proteinen vorkommen,
variiert recht stark: Leucin kommt siebenmal hufiger vor als Tryptophan.
Aminosuren in Proteinen
Durchschnittliche Hufigkeit (%)
Gly
7,5
Cys
1,7
Ala
8,3
Trp
1,3
Val
6,6
Tyr
3,2
Leu
9,0
Asn
4,4
Ile
5,2
Gln
4,0
Met
2,4
Asp
5,3
Phe
3,9
Glu
6,2
Pro
5,1
Lys
5,7
Ser
6,9
Arg
5,7
Thr
5,8
His
2,2
}
}
11,5
11.4
Die Aminosurezusammensetzung ist ein spezifisches Merkmal fr ein bestimmtes Protein. Im

Allgemeinen ist jedoch keine direkte Beziehung
zwischen Aminosurezusammensetzung und der
rumlichen Struktur oder Funktion des Proteins
ersichtlich. Nur in gewissen Extremfllen hngt die

Struktur und Funktion klar vom Vorhandensein eines groen Anteils bestimmter Aminosurereste ab:
Histone kommen im Chromatin des Zellkerns
vor. Es sind basische Proteine mit einem hohen
Gehalt an Lysin- und Argininresten, die an die
negativ geladenen Phosphatgruppen der DNA
binden.
Kollagen ist ein Faserprotein des Bindegewebes, welches langgestreckte Tripelhelices bildet,
deren Struktur durch den hohen Gehalt an
Glycin, Prolin, Hydroxyprolin und Hydroxylysin ermglicht wird. Hydroxyprolin und
Hydroxylysin entstehen durch posttranslationale Modifikation und kommen ganz selten in
anderen Proteinen vor. Ihre Hydroxylgruppen
dienen als Ansatzpunkte fr kovalente Quervernetzungen (Abschn.30.6).
Keratine sind ebenfalls Faserproteine und
bilden die Haare und andere Hautanhangsgebilde wie Ngel, Hufe oder Hrner. Die
Keratine enthalten sehr viele Disulfidbindungen, welche die einzelnen Polypeptidketten
zusammenhalten, und damit bis zu 10%
Schwefel (Abschn.3.9). Der typische Geruch
versengter Haare ist auf SO2 zurckzufhren.
Proteine mit gleicher Zusammensetzung aber ungleicher Sequenz der Aminosuren sind nicht identisch Die erste Sequenzbestimmung mittels chemi-
schen Abbaus war die von Insulin, einem Protein aus
25
2.5 Aminosurezusammensetzung und Aminosuresequenzen von Proteinen
.. Tab.2.2 pKa-Werte ionisierbarer Gruppen in Proteinen

pKa in freier
Aminosure
3.9
4.1
12.5
10.5
6.0
10.7
10.5
zwei Peptidketten mit insgesamt 51Aminosureresten. Frederick Sanger arbeitete zehn Jahre (194555)
an der Sequenzierung von Insulin. Auch heute dauert
die direkte Bestimmung der Aminosuresequenz
eines Proteins noch einige Monate. Die Nucleotidsequenz der entsprechenden DNA kann jedoch viel
rascher bestimmt werden (Abschn.39.7); mit Hilfe
des genetischen Codes kann daraus die Aminosuresequenz abgeleitet werden. Dabei ist zu beachten,
dass posttranslationale Modifikationen einzelner
Aminosurereste und proteolytische Abspaltung von
Teilen der Polypeptidkette die Primrstruktur eines
Proteins weiter verndern knnen.
Nomenklatur Aminosuresequenz
---
Beispiel eines Pentapeptids:

Alanyl-Seryl-Isoleucyl-Phenylalanyl-Lysin
Ala-Ser-Ile-Phe-Lys
ASIFK
Sequenz wird vom NH2-Terminus zum
COOH-Terminus (entspricht der Richtung
der Biosynthese) angegeben,
Peptid wird als Acylderivat der C-terminalen Aminosure bezeichnet,
Aminosuresequenzen von Proteinen
werden ausschlielich mit den Dreibuchstaben- oder Einbuchstabenabkrzungen
angegeben (.Abb.2.4).
Vergleich der Aminosuresequenzen von Proteinen Aus Sequenzvergleichen kann die molekulare Evolution von Proteinen rekonstruiert
werden. Beim Vergleich der Sequenzen verwandter

Proteine, z.B. von Myoglobin und Hmoglobin,
werden deren einzelne Aminosurereste miteinander so ausgerichtet, dass sich der grtmgliche
Grad von Sequenzidentitt ergibt (.Abb.2.6). Eine
offensichtliche hnlichkeit in der Aminosuresequenz (Identitt > 30%) wird als Sequenzhomologie bezeichnet. Sie ist die Folge des gemeinsamen
evolutionren Ursprungs dieser Proteine. Oft ergibt
sich das klare Bild einer Homologie erst, wenn in
den ausgerichteten Sequenzen bestimmte Positionen freigelassen werden. Diese Lcken existieren
in Wirklichkeit nicht. Sie sind blo Zeuge davon,
dass im Laufe der Evolution an diesen Positionen
Aminosuren eliminiert (Deletion) oder zustzlich
eingeschoben (Insertion) worden sind.
Nach Genduplikation, d.h. Verdoppelung eines
Gens, knnen aus einem gemeinsamen Vorfahren
zwei Proteine entstehen, die sich gesondert fr die
Erfllung je einer bestimmten Funktion spezialisieren. Auf diese Weise knnen Proteinfamilien entstehen, deren Mitglieder bei hnlicher 3D-Struktur
unterschiedliche Funktionen ausben. Ein Beispiel
ist die durch mehrfache Genduplikationen ermglichte Entwicklung von Myoglobin und verschiedenen Hmoglobinketten (, , , , , ).
Aus Sequenzvergleichen lassen sich phylogenetische Stammbume ableiten Sequenzverglei-
26
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
1
Myoglobin
10
20
30
40
G-LSDGEWQLVLNVWGKVEADIPGHGQEVLIRLFKGHPET
Hmoglobin V-LSPADKTNVKAAWGKVGAHAGEYGAEALERMFLSFPTT
.. Abb.2.6 Vergleich der Aminosuresequenzen von Myoglobin sowie der - und -Kette des Hmoglobins des Menschen.
Diese Proteine binden reversibel Sauerstoff. Die Abbildung zeigt nur die ersten 40Aminosurereste der Polypeptidketten, die je
nach Protein 141 bis 153Reste lang sind. Mit Strichen sind Deletionen angegeben.
Blau: Invariante Position (identische Aminosurereste in allen drei Sequenzen). Nhere Betrachtung zeigt, dass die Hmoglobin
- und -Ketten nher miteinander verwandt sind als mit Myoglobin.
Grau: Position mit konservativen Substitutionen (verschiedene aber einander hnliche Aminosurereste, d.h. der gleichen
Gruppe gem .Abb.2.4 zugehrig).
Wei: Variable Position (Aminosurereste gehren verschiedenen Gruppen von Aminosuren an)
che von Proteinen (.Abb.2.7) haben ergeben, dass

die Sequenzhnlichkeit eines gegebenen Proteins in
verschiedenen Spezies mit zunehmender phylogenetischer Distanz abnimmt (ermittelt durch pal
ontologische Untersuchungen). Die nderungsgeschwindigkeit bleibt fr ein gegebenes Protein ber
Jahrmillionen ungefhr konstant: Die Proteinuhr
tickt gleichmig. Die nderungsgeschwindigkeit
variiert jedoch von Protein zu Protein (.Tab.2.3).
fen; die fehlende oder mangelhafte Katalyse der

entsprechenden Reaktion fhrt zu einer Stoffwechselkrankheit. Nicht nur defekte Enzyme, sondern
auch andere funktionsuntchtige Proteine sind als
Ursache hereditrer Krankheiten bekannt. Zum
Beispiel liegen ein ungengend funktionierender
Chloridkanal der cystischen Fibrose (Mucoviscidose) und Kollagendefekte gewissen Krankheiten
des Bindegewebes zugrunde.
dermaen verndert werden, dass es seiner biologischen Funktion nicht mehr gengt. Schon der
Austausch eines einzigen Aminosurerests kann
eine vererbbare Krankheit verursachen. Bei vielen
Erbkrankheiten ist ein bestimmtes Enzym betrof-
ist in Position6 ein Glu durch Val ersetzt worden.

Der Austausch des negativ geladenen Glu durch das
hydrophobe Val fhrt zur Aggregation von desoxygeniertem HbS. Es bilden sich HbS-Filamente aus,
Erbkrankheiten sind molekulare Krankheiten

Ein Protein kann durch Mutation seiner DNA
Eine eingehend untersuchte molekulare

Krankheit ist die Sichelzellanmie des Menschen
In der -Kette des Sichelzell-Hmoglobins (HbS)
14
15
16
17
18
19
20
.. Abb.2.7 Phylogenetischer Stammbaum abgeleitet aus Vergleichen der

Cytochrom c-Sequenzen. Die Verzweigungspunkte entsprechen einem
gemeinsamen Vorfahren der daraus
hervorgehenden evolutionren
Linien. Die Zahlen geben die Anzahl
der zwischen den Verzweigungspunkten bzw. den angegebenen Spezies
vorgefundenen Unterschiede in den
Aminosuresequenzen an
27
2.5 Aminosurezusammensetzung und Aminosuresequenzen von Proteinen
.. Tab.2.3 nderungsgeschwindigkeit verschiedener Proteine whrend der Evolution. Ein Protein verhlt sich umso
konservativer je kritischer seine physiologische Funktion ist
Protein
Zeit, in der eine von 100Aminosuren

substituiert wurde (Millionen Jahre)
Funktion des Proteins
Histone (H3 und H4)
300400
Beteiligt an der Packung der DNA im

Chromatin
Cytochrom c
20
Beteiligt an der Atmungskette
Hmoglobin
O2-Transport
Fibrinopeptide
Verhindern Aggregation des Fibrinogens,

werden bei Gerinnung abgespalten, ohne
eine weitere Funktion zu haben
die sich durch den ganzen Erythrozyten erstrecken

und diesen zur Sichelzelle deformieren.
Die Sichelzellen behindern die Blutzirkulation
in den Kapillaren. Gewebeschden durch Hypoxie
sind die Folge. Zudem besteht eine hmolytische
Anmie, da die Lebensdauer der Erythrozyten auf
60Tage, die Hlfte der normalen Lebensdauer, herabgesetzt ist. Homozygote HbS-Kranke sterben
frhzeitig. Heterozygote Trger zeigen eine erhhte
Resistenz gegen Malaria. Aus diesem Grund hat sich
das HbS-Gen im tropischen Afrika und anderen
Malaria-Gebieten verbreitet.
Hufigste Erbkrankheiten
Die hufigsten monogenen (auf Vernderung
eines einzigen Gens zurckzufhrenden) Erbkrankheiten sind der Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase-Mangel (hmolytische Anmie
durch Mangel an reduziertem Glutathion in den
Erythrozyten; Abschn.16.4), die Thalassmie
(Mittelmeeranmie durch fehlerhaftes Spleien
der Globin-Pr-mRNA; Abschn.9.4) und die
Sichelzellanmie.
Links auf
Springer Website:
027-6-1514743-0
2.1
2.2
2.3
2.4
Bauprinzip der Proteine

Grsse und Gestalt der Proteine
Aminosuren, die Bausteine der Proteine
Ionisationszustnde von Aminosuren
und Proteinen
2.5 Aminosurezusammensetzung und
Aminosuresequenzen von Proteinen
29
Raumstruktur der Proteine

3.1
Stabilisierung der Raumstruktur 30
3.2
Sekundrstruktur31
3.3
Tertirstruktur31
3.4
uere Gestalt und Quartrstruktur 34
3.5
Dynamik und funktionsgebundene

Strukturnderungen35
3.6
Denaturierung36
3.7
Faltungswege37
3.8
Proteinfehlfaltung38
3.9
Faserproteine39

30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Kapitel 3 Raumstruktur der Proteine
Proteine sind dreidimensionale Gebilde. Sie sind

nur in ihrer genau definierten gefalteten Form,
der nativen Konformation, biologisch aktiv. Die
3D-Struktur eines Proteins entspricht einem Energieminimum; die Faltung der Polypeptidkette
erfolgt durch spontane Selbstorganisation. Die
3D-Struktur kann durch Rntgen-Kristallanalyse
oder anhand der magnetischen Kernresonanz
(NMR) bestimmt werden. Die in Proteinen erkennbaren strukturellen Muster sind periodische
Sekundrstrukturen (-Helix, -Faltblatt), die aperiodische Tertirstruktur (rumliche Organisation
der gesamten Polypeptidkette) und die Quartrstruktur (Aufbau aus Untereinheiten). Globulre
Proteine haben eine mizellenartige Struktur (innen hydrophob, auen hydrophil) und sind daher
gut wasserlslich, Faserproteine sind dagegen
wasserunlsliche Assoziate. Die Genabschnitte fr
Proteinfaltungseinheiten (Domnen) sind whrend
der Evolution in manchen Fllen verdoppelt worden
und haben nach Rekombination sowie Mutation zu
Proteinen mit neuen Eigenschaften gefhrt. Strukturelle Komplementaritt zwischen der Bindungsstelle von Proteinen und ihren Bindungspartnern
(Liganden) wie RNA, DNA, anderen Proteinen
sowie niedermolekularen Verbindungen fhrt zur
hohen Spezifitt der biologischen Wechselwirkungen zugrunde. Molekulare Chaperone wirken der
Fehlfaltung von Proteinen entgegen. Aggregierende
fehlgefaltete Proteine liegen manchen neurodegenerativen Krankheiten zugrunde.
Native Konformation
Die eindeutig definierte 3D-Struktur, welche
das Protein im lebenden Organismus aufweist
und mit welcher es die gleiche biologische
Aktivitt wie im Organismus besitzt.
3.1 Stabilisierung
der Raumstruktur
Proteine falten spontan zu ihrer nativen 3D-Struktur Der intramolekulare Vorgang kommt zustande
durch Wechselwirkungen zwischen verschiedenen,

in der Sequenz oft weit auseinanderliegenden Abschnitten der Polypeptidkette. An diesen Wech-
selwirkungen sind sowohl die Hauptkette als auch

die Seitenketten beteiligt. Es gibt zwei Gruppen faltungsbestimmender Faktoren:
Stereochemische Eigenschaften der Kette
(Raumbeanspruchung der einzelnen Gruppen,
Drehbarkeit um Bindungen),
Wechselwirkungen zwischen den einzelnen
Kettenabschnitten, welche die Faltung stabilisieren.
Am wichtigsten sind nichtkovalente Sekundrbindungen: Hydrophobe Effekte apolarer Gruppen, H-Bindungen zwischen polaren Gruppen,
Van-der-Waals-Wechselwirkungen, elektrostatische Wechselwirkungen zwischen geladenen
Gruppen. Besonders bei extrazellulren Proteinen
kommen noch intramolekulare Disulfidbrcken
dazu.
Die 3D-Struktur wird bestimmt durch das Zusammenspiel von zwei entgegengesetzten Tendenzen Die Hauptkette mit ihrer regelmigen
Struktur frdert die Tendenz zu regelmigen
Faltungsmustern, whrend die Seitenketten mit
ihren unregelmigen Strukturen fr unregelmige Faltungsmuster verantwortlich sind. Die Proteinstruktur ist hierarchisch organisiert:
Definition
Verantwortliche
Wechselwirkungen
Primrstruktur
Aminosure
sequenz
Peptidbindungen
Sekundrstruktur
Abschnitte regelmiger Faltung

(-Helix, -Faltblatt,
-Schleife)
Wasserstoffbindungen
zwischen Amidgruppen der Hauptkette
Tertirstruktur
Rumliche Gesamtstruktur einer

Polypeptidkette
bestehend aus
Sekundrstruktur
elementen und
unregelmig
gefalteten Abschnitten
Hydrophobe Effekte,
Wasserstoffbindungen
zwischen:
Amidgruppen der
Hauptkette
Amidgruppen der
Hauptkette und
polaren Gruppen
von Seitenketten
polaren Gruppen
von Seitenketten
Salzbindungen
zwischen geladenen
Gruppen*
Disulfidbrcken*
(* nicht in allen Proteinen vorkommend)
31
3.3Tertirstruktur
Definition
Verantwortliche
Wechselwirkungen
Domne
Globulr gefalteter
Abschnitt einer
lngeren Polypeptidkette; faltet sich
i.d.R. unabhngig
von den weiteren
Domnen des
Proteins. Oft Trger
einer bestimmten
Funktion
Gleiche Wechselwirkungen wie fr

Tertirstruktur
Quartrstruktur
Zusammenlagerung von zwei oder

mehr Polypeptidketten (Untereinheiten) mit eigener
Tertirstruktur zu
einem stabilen
oligomeren Proteinmolekl
Gleiche Wechselwirkungen wie

fr Tertirstruktur
3.2 Sekundrstruktur
Die Peptidbindung ist ein planares Resonanzsystem Die Geometrie der Peptidbindung und
deren chemische Eigenschaften bestimmen die

Ausbildung von Sekundrstrukturen. Die Peptidbindung (Amidbindung) kann durch zwei mesomere Grenzstrukturen beschrieben werden. Sowohl
O-Bindung als auch die C
N-Bindung entdie C
sprechen partiellen Doppelbindungen; die Peptidbindung ist ein Resonanzhybrid:
Sterische Konsequenz: Durch den partiellen

N-Bindung
Doppelbindungscharakter der C
wird deren freie Drehbarkeit eingeschrnkt.
Die Peptidbindung wird planar. Die Peptidkette kann als eine Reihe planarer Strukturen,
welche durch substituierte Methylengruppen
(-CHR-) voneinander getrennt sind, beschrieben werden (.Abb.3.1).
Chemische Konsequenz: Die Elektronendelokalisation fhrt zu Partialladungen am O- und
.. Abb.3.1 Geometrie der Peptidbindung. Freie Drehbarkeit

besteht nur um die mit Pfeilen bezeichneten Einfachbindungen. Alle sechs Atome liegen in der gleichen Ebene. NC
gibt die Richtung der Peptidkette vom Aminoende (N) zum
Carboxylende (C) an. Die Seitenketten sind mit R bezeichnet
N-Atom der Peptidbindung. Das partiell negativ geladene O-Atom wird zum nucleophilen
H-Akzeptor mit erhhter Tendenz, H-Bindungen einzugehen. Das partiell positiv geladene
N-Atom wird weniger nucleophil und damit
zum H-Donor.
Die -Helix und das -Faltblatt sind die wichtigsten Sekundrstrukturen Beide Strukturen
entsprechen folgenden Bedingungen: Planaritt

der Peptidbindung, maximale Anzahl von H-Bindungen zwischen den Amidbindungen (eine
H-Bindung pro Aminosurerest) sowie optimale
Lngen und Winkel fr H-Bindungen. -Helices
(.Abb.3.2) und -Faltbltter (.Abb.3.3) kommen
sowohl in globulren Proteinen als auch in Faserproteinen vor. Sterische Konflikte von Seitenketten
oder Hauptkette fhren zum Abbruch der regelmigen Struktur.
Weitere Sekundrstrukturen haben besondere strukturelle Aufgaben Die -Schleife

(-Turn) kommt in kompakten globulren Proteinen
bei Richtungsnderungen der Polypeptidkette um

fast 180 vor (.Abb.3.4). Neben der -Helix finden
sich in Proteinen die -Helix und die Kollagen-Tripelhelix (Abschn.3.9).
3.3 Tertirstruktur
Als Tertirstruktur wird die rumliche Anordnung

der gesamten Polypeptidkette bezeichnet. Sie wird
stabilisiert durch Wechselwirkungen zwischen Ami-
32
C
O
R1
R2
3
R3
4
5
R4
nosureresten, die in der Sequenz weit voneinander

entfernt sein knnen.
R5
R6
R7
R8
10
R9
11
R10
12
R11
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R2
R5
16
17
18
C
R1
C
C
19
20
R4
Information ber die Tertirstruktur lsst sich

nur durch experimentelle Messungen gewinnen
Die Raumstruktur lsst sich derzeit nicht aus der

Aminosuresequenz ableiten; die Wechselwirkungen der Seitenketten sind zu komplex, um rechnerisch gnzlich erfasst zu werden. Die umfassendste
Methode zur Bestimmung der Raumstruktur ist die
Rntgenkristallographie. Die Struktur kleinerer
Proteine lsst sich auch durch Messung der magnetischen Kernresonanz (NMR, Nuclear magnetic
resonance) bestimmen (Abschn.38.2, 38.3). Die
mit der Rntgenkristallanalyse theoretisch erreichbare Auflsung liegt bei 0,1nm (1 ) und lsst die
Position einzelner Atome ermitteln. Anhand zahlreicher Proteine konnte gezeigt werden, dass die
durch Kristallanalyse ermittelte Struktur derjenigen
in Lsung sehr hnlich ist.
Gewisse Bauprinzipien sind allen globulren
Proteinen gemeinsam Die Gesamtfaltung der Polypeptidkette globulrer Proteine (Tertirstruktur)
ist meist hochgradig aperiodisch.
14
15
.. Abb.3.2 -Helix. Die Peptidkette ist schraubenartig (helical)

rechtshndig (rechtsgngig) aufgewunden. Bei einer rechtshndigen Helix windet sich die Polypeptidkette, wenn lngs
der Helixachse in NC-Richtung gesehen (im Bild von oben
nach unten), im Uhrzeigersinn um die Schraubenachse (kleines
Bild). Die H-Bindungen innerhalb der -Helix stehen annhernd
parallel zur Helixachse. Die CO-Gruppe des Aminosurerests i
bildet jeweils eine H-Bindung mit der NH-Gruppe des Rests i+4.
Die Ebenen der Peptidbindungen sind parallel zur Lngsachse
der Helix angeordnet. Die Helix bildet eine kantige Struktur mit
den C-Atomen in den Ecken (kleines Bild). Auf eine Windung
kommen 3,6Aminosurereste. Die Ganghhe ist 0,54nm (5,4).
Die Seitenketten (R1R5) sind radial nach auen orientiert. Die
gegenseitige sterische Behinderung ist dadurch minimiert
R3
Unter den Aminosuren gibt es Helix-Bildner

und Helix-Brecher bzw. Faltblatt-Bildner und
Faltblatt-Brecher. Insbesondere Prolin mit seiner
sekundren Aminogruppe unterbricht regelmige
Kettenkonformationen (.Abb.3.5). Die Packungsdichte im Inneren von Proteinmoleklen ist sehr
hoch; etwa des Gesamtvolumens werden durch
Atome des Proteins mit ihren Van-der-Waals-Radien eingenommen (.Abb.3.6). Nur sehr wenige
H2O-Molekle sind im Innern von Proteinen zu
finden. Auf der Auenseite der Proteinmolekle
finden sich bevorzugt polare, hydrophile Aminosurereste, die mit Wassermoleklen interagieren
33
3.3Tertirstruktur
i+3
i+2
i+1
i
.. Abb.3.4 -Schleife. Die CO-Gruppe des Restes i eines Polypeptids bildet eine H-Bindung zur NH-Gruppe des Restes i+3.
Die Peptidkette ndert dadurch ihre Richtung um fast 180
.. Abb.3.3 -Faltblatt. Ein -Faltblatt entsteht durch Aneinanderlagern mehrerer Polypeptidketten oder verschiedener
Abschnitte einer Kette. NC und C N geben die Richtung
der Peptidkette an. Die fast vollstndig gestreckten Peptidketten sind antiparallel () oder parallel () angeordnet. Die
H-Bindungen zwischen den verschiedenen Ketten stehen
senkrecht zur Kettenrichtung. Zwischen zwei Ketten besteht
pro Aminosurerest eine H-Bindung. Die planaren Amidgruppen (Peptidbindungen) der Strnge bilden eine Zickzack-Ebene, ein Faltblatt. Die Seitenketten befinden sich alternierend
ber oder unter der Faltblattebene; sie sind hier weggelassen
und verantwortlich sind fr die gute Wasserlslichkeit globulrer Proteine (Abschn.1.4). Die apolaren, hydrophoben Aminosurereste hingegen
vermeiden den Kontakt mit Wasser (hydrophober
Effekt) und finden sich vorwiegend im Innern des
Proteins. Der Kompromiss beider Tendenzen fhrt
zur mizellenhnlichen Raumstruktur der Proteine
(.Abb.3.6).
In der gesamten Biosphre kommen schtzungsweise 100010000 verschiedene Faltungs-
.. Abb.3.5 Prolinrest in Peptidkette: Seitenkette und Hauptkette bilden eine kovalente Ringstruktur. Die Drehbarkeit
um die N-C-Bindung ist dadurch aufgehoben und das
N-Atom kann keine H-Bindung eingehen. Dadurch bildet
ein Prolinrest eine ausreichende (aber nicht notwendige)
Voraussetzung fr den Abbruch einer regelmigen Struktur.
Tatschlich findet sich in der Tertirstruktur von Proteinen
hufig am Ende von Helixabschnitten und -Strngen ein
Prolinrest. Das Gleichgewicht einer X-Pro-Bindung in einem
Peptid ohne definierte Konformation liegt bei 80% des
trans-Isomers. In manchen Proteinen liegen jedoch einige der
X-Pro-Bindungen permanent in der cis-Form vor. R bezeichnet
C der benachbarten Aminosurereste
muster von Proteinen vor (die Zahl der Folds hngt

von den angewandten Differenzierungskriterien
ab); auf jeden Fall ist die Anzahl der Faltungsmuster
wesentlich kleiner als die Anzahl der Proteine mit
verschiedener Funktion. Gewisse Faltungsmuster
sind weit verbreitet und werden bei Proteinen angetroffen, die ganz verschiedene Funktionen erfllen
und in Sequenzvergleichen keinerlei hnlichkeit
erkennen lassen.
Hydrophobe Effekte stabilisieren die 3D-Struktur von Proteinen Hydrophobe Effekte tragen am
meisten zur Stabilisierung der rumlichen Struktur
34
Grere Proteine sind aus Domnen aufgebaut Polypeptide mit mehr als200Aminosu-
reresten falten meist in zwei oder mehrere voneinander unabhngige Faltungseinheiten, in Domnen.
Hufig knnen Multidomnen-Proteine durch limitierte Proteolyse in Domnen zerlegt werden,
ohne den Faltungsmodus der einzelnen Domnen
wesentlich zu verndern. In manchen Fllen haben die verschiedenen Domnen eines Proteins
verschiedene Funktionen. Im Laufe der Evolution
scheinen viele Proteine modular aus verschiedenen
Domnen aufgebaut worden zu sein.
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.. Abb.3.6 Schnitt durch ein Proteinmolekl. Drei im

Abstand von 0,1nm aufeinanderfolgende Schnitte mitten
durch Flavodoxin sind gezeigt (Flavodoxin ist ein elektronenbertragendes Protein stickstofffixierender Bakterien
von 20kDa). Zwei Strukturmerkmale sind ersichtlich: die
dichte Packung der Polypeptidkette im Innern des Proteins,
die nur fr einzelne Wassermolekle Platz lsst, und das
apolare Innere (apolare Aminosurereste in Blau) umgeben
von einer polaren Hlle (polare Aminosurereste in Grau).
Die prosthetische Gruppe Flavinmononucleotid (FMN) ist
gestrichelt angegeben
der Proteine bei. Als ungerichtete Krfte bestimmen sie jedoch nur in geringem Mae den Faltungsmodus der Polypeptidkette.
Die H-Bindungen hingegen sind gerichtete
Krfte und damit die wichtigsten strukturbestimmenden Wechselwirkungen. Alle polaren Gruppen
von Hauptkette und Seitenketten im Proteininnern
sind in H-Bindungen einbezogen. Zur Stabilisierung der Proteinstruktur tragen H-Bindungen
hingegen wenig bei: In der ungefalteten Polypeptidkette bilden die polaren Gruppen H-Bindungen
mit H2O-Moleklen, und die Go-Werte fr die
Bildung einer H-Bindung mit einem H2O-Molekl
und mit einer polaren Gruppe im gefalteten Protein
sind etwa gleich. Hingegen wrde das Fehlen einer
H-Bindung einer polaren Gruppe im Innern des
gefalteten Proteins die Struktur des Proteins destabilisieren. Fr die Stabilitt des Proteins ist es daher
wichtig, dass alle diese Gruppen in intramolekularen H-Bindungen engagiert sind.
uere Gestalt
und Quartrstruktur
Strukturelle Komplementaritt fhrt zu biologischer Spezifitt Ein gegebenes Protein bindet
aufgrund seiner spezifischen Oberflchenbeschaffenheit selektiv nur diejenigen Molekle, welche

przis in seine Liganden-Bindungsstelle passen.
Die intermolekularen Krfte sind schwach und von
geringer Reichweite. Nur bei struktureller Komplementaritt knnen diese schwachen Krfte zusammenwirken und zu einer starken, spezifischen
Bindung zwischen Protein und Ligand fhren
(.Abb.1.3). Strukturelle Komplementaritt ist
die Grundlage fr die molekulare Arbeitsteilung
und damit fr die supramolekulare und zellulre
Spezialisierung. Das Beibehalten der Tertirstruktur im Verlauf der Evolution der einzelnen Proteine
beruht auf der Invarianz oder der konservativen
Substitution der Aminosurereste (.Abb.2.6),
welche die Struktur und Funktion des Proteins
bestimmen.
Die meisten Proteine bestehen aus mehreren
Untereinheiten Man unterscheidet zwei Typen
solcher Assoziate: Viele globulre Proteine sind
Oligomere aus wenigen Untereinheiten (Dimer,

Tetramer), die ein geschlossenes Assoziat bilden. Voraussetzung fr die Bildung oligomerer
Proteine sind rumlich komplementre Kontaktflchen. Quartrstrukturen entstehen durch Selbst
organisation; die Untereinheiten werden durch
Sekundrbindungen zusammengehalten (hydrophobe Effekte, H-Bindungen, elektrostatische
Wechselwirkungen; Disulfidbrcken nur in ein-
35
3.5 Dynamik und funktionsgebundene Strukturnderungen
zelnen Fllen). Am wichtigsten sind die hydrophoben Effekte. Das Hmoglobin zum Beispiel ist ein
()2 Tetramer aus zwei Paaren von Untereinheiten
hnlicher Tertirstruktur. Die Kontaktflchen der
Untereinheiten sind abgesttigt, sobald sie sich zu
einem Tetramer zusammengeschlossen haben. Das
monomere Myoglobin besitzt dagegen eine durchgehend polare Hlle.
In der Zelle bilden Proteine groe funktionelle

Komplexe Eine Eukaryontenzelle synthetisiert
etwa 10000 verschiedene Proteine in unterschiedlicher Kopienzahl und enthlt insgesamt ungefhr
109Proteinmolekle. Die meisten Proteinmolekle
sind in nichtkovalente Komplexe mit anderen Proteinmoleklen engagiert. Die Gre der funktionellen Proteinkomplexe ist variabel und wird im
Durchschnitt auf etwa 10 Proteine pro Komplex
geschtzt. Grere Komplexe sind beispielsweise
die Proteasomen mit mindestens 64Proteinmoleklen oder die eukaryontischen Ribosomen mit etwa
85Proteinmoleklen sowie 4rRNA-Moleklen.
Faserproteine (fibrillre Proteine) bilden
wasserunlsliche polymere Assoziate, die aus vielen Ketten bestehen. Die Assoziierung der Fasern
sttigt die Kontaktflchen nicht ab: Es bildet sich
ein offenes Assoziat, dessen Gre nicht genau
definiert ist.
3.5 Dynamik
und funktionsgebundene
Strukturnderungen
Proteine sind dynamische Strukturen Teile des
Gesamtproteins, d.h. einzelne Atome, Gruppen,

Aminosurereste, Schlaufen der Polypeptidkette
und auch grere Teile wie Domnen, bewegen
sich innerhalb sehr enger Grenzen im Picosekunden-Bereich (1ps=1012s). Ausgehend von der
3D-Struktur knnen mit aufwndigen Computer-untersttzten Rechnungen die Bewegungen aller Atome eines Makromolekls ermittelt werden
(Molekldynamik). Die durch Rntgenkristallanalyse bestimmte Struktur eines Proteins entspricht
einer ber die Zeit gemittelten Struktur, die angibt,
in welcher Position sich dessen Atome bevorzugt
aufhalten (.Abb.38.3).
Proteine knnen ihre Konformation ndern
Viele Proteine ndern ihre Struktur innerhalb

festgelegter Grenzen bei der Erfllung ihrer Funktion. Das Protein geht dabei von einer definierten
Struktur in eine andere definierte Struktur ber.
Bei manchen Enzymen lst das Binden des Substrats eine Konformationsnderung aus. Hufig
bewegen sich dabei zwei Domnen um ein verbindendes scharnierartiges Gelenk und schlieen
die Furche der aktiven Stelle. Liganden-induzierte
Konformationsnderungen regulieren die Aktivitt von Enzymen und anderen Proteinen, sie
liegen auch der biologischen Signalbermittlung
zugrunde.
Konformationsnderung
nderung der Struktur durch Drehung bestimmter Gruppen um Bindungsachsen ohne
nderung der kovalenten Struktur.
Auch unstrukturierte Proteine und Domnen

kommen in der Natur vor (Intrinsically disordered proteins) Der betreffende Abschnitt der Po-
Faserprotein
lypeptidkette faltet sich erst zu einer definierten

3D-Struktur, wenn das Protein mit einem anderen
Protein oder auch einer Nucleinsure in spezifische Wechselwirkung tritt. Beispielsweise nehmen
einige Transkriptionsfaktoren erst beim Binden an
die DNA eine bestimmte geordnete Struktur an.
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.. Abb.3.7 Reversible Denaturierung eines Proteins. Bei der Renaturierung faltet sich die Polypeptidkette in die native Konformation zurck, so dass sich wieder die richtigen Disulfidbindungen bilden knnen. Bei oligomeren Proteinen wird sich auch
die Quartrstruktur spontan zurckbilden. Die Primrstruktur eines Proteins enthlt offenbar alle Informationen zur Ausbildung
der nativen 3D-Struktur. Christian Anfinsen publizierte 1961 dieses klassische Experiment der Proteinchemie
3.6 Denaturierung
Von den funktionsgebundenen Konformationsnderungen sind weitergehende Strukturnderungen zu unterscheiden, welche durch unspezifische
uere Einflsse hervorgerufen werden und zum
Verlust der nativen Konformation fhren. Die
meisten globulren Proteine sind nicht sehr stabil.
Die freie Energie, die zur Aufhebung der definierten
3D-Struktur einer Domne von 150Aminosureresten notwendig ist, betrgt nur 0,10,4kJ/mol pro
Aminosurerest, d.h. 1560kJ/mol fr die ganze
Domne (Energiewerte der Sekundrbindungen;
.Tab.1.2).
Ein Protein denaturiert, sobald die native Konformation nicht mehr die stabilste ist, d.h. unter
Bedingungen, die entweder die destabilisierenden Krfte verstrken oder die stabilisierenden
Effekte schwchen:
Hitzeeinwirkung: Die verstrkte thermische
Bewegung von Teilen des Proteins lst die

stabilisierenden Sekundrbindungen (Beispiel:
Gerinnung von Hhnereiwei beim Kochen).
Organische Lsungsmittel (z.B. Aceton, Ethanol) und Detergenzien (z.B. Seifen, Dodecylsulfat) lagern sich an hydrophobe Seitenketten
und interferieren mit den proteinstabilisierenden hydrophoben Effekten.
Extreme pH-Werte (Suren, Basen) verndern
den Ladungszustand ionisierbarer Gruppen und
damit deren H-Bindungen und Salzbindungen.
Harnstoff und Guanidiniumsalze in hoher

Konzentration (8M bzw. 6M) kompetieren als polare Substanzen mit den polaren
Gruppen des Proteins um die Bildung von
H-Bindungen; zudem stren die beiden
Denaturierungsmittel die geordnete Wasserstruktur und vermindern dadurch hydrophobe Effekte.
Kontakt mit Grenzflchen kann durch
Spreiten der Proteinmolekle ebenfalls deren
Denaturierung bewirken (Beispiel: Die Haut
auf erhitzter Milch besteht aus denaturierten
Milchproteinen).
Die Denaturierung von Proteinen ist oft reversibel Die native Struktur kann sich spontan zurck-
bilden, sobald die Bedingungen wiederhergestellt

sind, unter denen die native Form die stabilste ist
(.Abb.3.7).
Bei der Denaturierung geht der geordnete

biologisch aktive Faltungsmodus in ungeordnete, biologisch inaktive Faltungsformen ber
Das Ausma der Strukturnderung variiert
stark von Protein zu Protein und ist abhngig von

den Denaturierungsbedingungen. Im Extremfall
kommt es zur vlligen Entfaltung der Kette. Wenn
ein Protein keine definierte rumliche Organisation mehr aufweist, spricht man von einem Zufallsknuel (statistisches Knuel, Random coil),
das eine unendliche Anzahl isomerer Formen aufweist.
37
3.7Faltungswege
Die Denaturierung hat wichtige Konsequenzen:

Verlust der biologischen Aktivitt: Ein
Protein ist nur in seiner nativen Konformation

aktiv.
Herabgesetzte Lslichkeit: Die Denaturierung hebt die mizellre Struktur des Proteins
auf. Hydrophobe Segmente der Polypeptidkette werden exponiert und fhren zur
Bildung intermolekularer Aggregate. Denaturierte Proteine fallen deswegen hufig aus.
Erhhte Empfindlichkeit gegen Proteasen:
Eine denaturierte Polypeptidkette kann leichter in die aktive Stelle eines eiweispaltenden
Enzyms eingepasst werden.
Die Proteindenaturierung ist von physiologischer

und praktischer Bedeutung Die Labilitt dena-
turierter Proteine gegenber proteolytischen Enzymen ist wichtig fr den fortwhrenden Umsatz von
Zellproteinen. Die Denaturierung der Nahrungsproteine durch Kochen oder Braten sowie durch
die Salzsure im Magensaft erleichtert deren Verdauung. Bei der Sterilisation und der Anwendung
gewisser Desinfektionsmittel werden Mikroorganismen abgettet durch Denaturierung ihrer Proteine
und Zerstrung ihrer Membranen.
3.7 Faltungswege
Wie erlangen Polypeptidketten ihre native

3D-Struktur? Untersuchungen der Faltung naszierender Polypeptidketten in der Zelle wie auch von
renaturierenden isolierten Proteinen im Reagenzglas zeigten, dass der Weg zum gefalteten Protein
ber bestimmte Zwischenstufen fhrt. Der spezifische Faltungsweg eines Proteins kommt dadurch
zustande, dass nur ein Teil der zunchst entstehenden Teilstrukturen stabil genug ist, um zu berdauern, bis sich durch Bildung weiterer Teilstrukturen die stabile Gesamtstruktur ausbilden kann.
Die Bildung von Teilstrukturen mit einer gewissen
Stabilitt schrnkt die Zahl der mglichen Konformationen whrend des Faltungsvorgangs rasch
ein. Bei der Renaturierung vollstndig denaturierter Proteine sind als Zwischenprodukte die Molten
globules zu beobachten. In diesen geschmolze-
nen globulren Proteinformen haben sich die Sekundrstrukturelemente (-Helices, -Faltbltter)

innerhalb von Millisekunden bereits ausgebildet,
doch ist deren gegenseitige Anordnung noch nicht
fixiert. Kleinere Proteine und Domnen knnen
ihre native 3D-Struktur innerhalb von Millisekunden bis Sekunden erlangen.
Besondere Enzyme und molekulare Chaperone untersttzen die in-vivo Faltung von
Proteinen Die Protein-Disulfidisomerase kata-
lysiert die Verschiebung von Disulfidbindungen

in einem Proteinmolekl, so dass sich diejenigen
Disulfidbrcken beschleunigt bilden, welche der
nativen 3D-Struktur des Proteins entsprechen.
Die Peptidyl-Prolylisomerase beschleunigt die
cis-trans-Isomerisierung von Peptidbindungen, in
welche Prolinreste einbezogen sind (.Abb.3.5).
Cyclosporin und Cyclophilin
Das Immunsuppressivum Cyclosporin ist ein
Inhibitor der Peptidyl-Prolylisomerase, die
auch als Cyclophilin bezeichnet wird. Die immunsuppressive Wirkung ist jedoch nicht auf
die Hemmung dieses Enzyms zurckzufhren;
der Cyclophilin-Cyclosporin-Komplex hemmt
indirekt die Aktivierung von T-Lymphozyten.
Molekulare Chaperone (Hitzeschockproteine) un-
tersttzen die Proteinfaltung. Sie binden vorbergehend kurze apolare Segmente noch nicht gefalteter
oder teilweise wieder entfalteter Polypeptidketten
und verhindern deren Aggregation. Gewisse Chaperone besitzen Disaggrease-Aktivitt und entwirren
fehlgefaltete und aggregierte Proteinmolekle. Das
Chaperonsystem der Zelle schtzt deren Proteine
gegen Stressbedingungen (erhhte Temperatur, reaktive Sauerstoffderivate, O2-Mangel, ionisierende
Strahlung, Schwermetalle). Chaperone sind auch
an der aktiven Translokation von Proteinen durch
Membranen beteiligt. Die meisten Chaperone verbrauchen ATP bei der Ausbung ihrer Funktion.
Zu den molekularen Chaperonen gehren die Hitzeschockproteine70 (Hsp70 mit 70kDa), Hsp90
(neben Chaperonfunktion auch Teil des Steroidrezeptors; Abschn.27.5) und Hsp100.
38
.. Tab.3.1 Proteinfehlfaltungskrankheiten mit

Funktionsverlust des mutierten Proteins
Krankheit
Betroffenes Protein
Cystische Fibrose (Strung des Chloridtransports in Epithelzellen)
Protein eines Chloridkanals (meist Deletion

von Phe508; autosomal-
rezessiv)
Marfan-Syndrom
(Bindegewebskrankheit,
besonders elastische
Fasern betroffen)
Fibrillin (diverse Mutationen; autosomal-dominant)
Morbus Gaucher (die

hufigste lysosomale
Speicherkrankheit)
Glucosylceramidase
(>400Mutationen bekannt; autosomal-rezessiv)
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18
Terminologie
Chaperon (frz.): In vergangenen Zeiten eine
erwachsene Person, welche junge Leute bei
gesellschaftlichen Anlssen begleitete, um
unerwnschte Kontakte zu verhindern.
Hitzeschockproteine Hsp: Auch als Stress
proteine bezeichnet; werden bei Hitze oder
anderen zellschdigenden Einwirkungen durch
erhhte Transkription vermehrt gebildet; sind
zum grten Teil auch unter Normalbedingungen als molekulare Chaperone wirksam.
Die Chaperonine bilden einen Behlter aus zwei

heptameren Ringen von Hsp60, in welchem partiell gefaltete kleinere Proteine oder Domnen vor
Wechselwirkungen mit apolaren Segmenten anderer Polypeptidketten geschtzt sind und korrekt
falten knnen.
Falls sich Proteinmolekle auch mit Hilfe der
Chaperone nicht korrekt falten (etwa 30% der
neusynthetisierten Proteinmolekle zumeist aufgrund von Transkriptions- oder Translationsfehlern), werden sie gezielt durch Proteasomen abgebaut (Abschn.18.1).
19
3.8 Proteinfehlfaltung
20
Die Fehlfaltung gewisser Proteine kann Krankheiten verursachen Bei manchen Erbkrankhei-
ten fhrt eine mutationsbedingte Deletion oder

Substitution eines Aminosurerests zu Fehlfaltung und raschem Abbau des betroffenen Proteins
(.Tab.3.1).
Bei Amyloidosen bilden fehlgefaltete Proteine unlsliche Aggregate Bei einer Reihe
wichtiger Krankheiten sind die Chaperone und

der zellulre Mechanismus zum gezielten Abbau
fehlgefalteter Proteine offensichtlich berfordert.
Gewisse fehlgefaltete Proteine lagern sich zu Fibrillen mit -Faltblatt-Struktur und diese zu greren
Aggregaten zusammen. Die zumeist extrazellulren Aggregate werden als Amyloid bezeichnet, da
sie sich mit Iod hnlich wie Strkekrner frben
(amylum lat., Strke). Unter besonderen experimentellen Bedingungen nehmen viele Proteine
-Faltblattstruktur an und bilden Amyloid. Die
Krankheiten mit Amyloidablagerungen (Plaques)
werden in systemische (mehrere Organe betreffend) und lokalisierte Amyloidosen eingeteilt.
Beispiele systemischer Amyloidosen sind die Amyloid-A-Amyloidose (Ablagerung von Akute-Phase-Proteinen bei chronischen entzndlich-rheumatischen Erkrankungen, die L-Ketten-Amyloidose
(Ablagerung im berschuss produzierter L-Ketten
von Immunglobulin; Abschn.32.4) oder die familir auftretende Amyloidose mit Transthyretin,
einem Transportprotein im Blut fr Schilddrsenhormone und Retinol.
Bei neurodegenerativen Krankheiten ist die
Amyloidablagerung auf gewisse Regionen des
Zentralnervensystems begrenzt Diese Krank-
heiten des Gehirns oder Rckenmarks entstehen

offenbar nicht durch den Aktivittsverlust eines
Proteins sondern eher durch die zellschdigende
Wirkung aggregierter fehlgefalteter Proteinmolekle. Die Krankheiten schreiten unaufhaltsam fort;
die Patienten knnen derzeit nur symptomatisch
behandelt werden (.Tab.3.2). Die Frage, wie aggregierte Proteine die Zellen schdigen, ist noch
ungelst. Mglicherweise schdigen die Proteinaggregate bestimmte Zellbestandteile wie Membranen
oder Mitochondrien.
Prionkrankheiten sind bertragbare Proteinfehlfaltungskrankheiten Fehlgefaltetes
Prionprotein, ein hydrophobes Membranglykoprotein mit 208Aminosureresten, fhrt zu den

Prionkrankheiten wie Scrapie bei Schafen, der
39
3.9Faserproteine
.. Tab.3.2 Neurodegenerative Krankheiten mit Amyloidbildung

Krankheit
Betroffene Zellen
Amyloid-bildendes Protein
Alzheimer-Krankheit (hufigste Ursache

einer Demenz)
Cholinerge Neuronen
-Amyloid (A42, Teil des Amyloid-

Vorluferproteins), tau()-Protein
(ein mikrotubuli-assoziiertes Protein;
Abschn.23.2)
Parkinson-Krankheit mit Lewy-

Krperchen
Dopaminerge Neuronen
-Synuclein, Ubiquitin und weitere

Proteine
Amyotrophe Lateralsklerose (seltene,

familire, autosomal-dominante Form)
Motoneuronen
Superoxiddismutase und andere Proteine
Huntington-Krankheit
(autosomal-dominant)
Neuronen in Basalganglien
und Cortex
Huntingtin mit zu langen Polyglutamin-

Repeats (>40Gln)
Creutzfeld-Jakob-Krankheit (seltene, familire, autosomal-dominante Formen)
Neuronen
Prionprotein (Gendefekt)
bovinen spongiformen Enzephalopathie (BSE,

Rinderwahnsinn) und der bertragbaren Form
der Creutzfeldt-Jakob-Krankheit des Menschen.
Aggregate fehlgefalteter Prionmolekle wirken als
Erreger: Sie veranlassen nach Infektion eines Organismus weitere Prionmolekle, ebenfalls eine
ausgedehnte -Faltblattstruktur anzunehmen und
weiter zu Fibrillen und amyloiden Plaques zu aggregieren. Das bertragende Agens wird als Prion
(Pri-on Proteinaceous infectious particle) bezeichnet
(Abschn.12.4).
3.9 Faserproteine
Die langen Polypeptidketten der Faserproteine

zeigen viel Sekundrstruktur und wenig Tertirstruktur. Sie sind Teil der Gerstwerke, die Zellen,
Gewebe und Organismen zusammenhalten. Die
Lngsachsen der Faserproteine verlaufen annhernd parallel in Faserrichtung. Die 3D-Strukturen
der Faserproteine sind nicht so gut bekannt wie diejenigen der globulren Proteine, da Faserproteine
nicht kristallisiert werden knnen.
Die Hautanhnge hherer Vertebraten, wie

Haare, Ngel, Hufe und Hrner bestehen aus
-Keratin Das Grundelement dieses Faserproteins
besteht aus zwei -Helices, welche sich schraubenartig umeinander winden (Coiled coil, Doppelwendel; .Abb.3.8; vgl. Leucin-Zipper, Abschn.11.2).
Die einzelnen Dimere assoziieren ber ihre glo-
bulren Kopfdomnen zu Protofilamenten; die

Protofilamente bilden Mikrofibrillen, welche zu
Makrofibrillen zusammentreten, die ihrerseits die
(abgestorbenen) Haarzellen ausfllen. Zahlreiche
Disulfidbrcken verbinden die Coiled coils in den
Protofilamenten und Mikrofibrillen. Diese kovalenten Vernetzungen liegen der Unlslichkeit und der
Reifestigkeit von -Keratin zugrunde.
Dauerwellen
Bei der Bildung von Dauerwellen werden
die Disulfidbrcken im -Keratin des Haars
zunchst reduktiv gespalten. Darauf wird das
Haar mechanisch verformt, z.B. in Locken
aufgerollt. Die nachfolgende Wiederherstellung oxidativer Bedingungen fhrt zur Bildung
neuer Disulfidbrcken, welche die Locken
stabilisieren.
Bei feuchter Hitze und unter Spaltung nur weniger

Disulfidbrcken knnen -Keratinfasern auf mehr
als das Doppelte ihrer Lnge gestreckt werden. Die
-Helices gehen dabei in eine -Faltblattstruktur
ber. -Keratin, wie es z.B. in Vogelfedern zu finden
ist, zeigt schon in seiner nativen Form -Struktur.
Seidenfibroin, das Protein der von Insekten und
Spinnen produzierten Seide besteht aus antiparallelen -Faltblttern. In der Aminosuresequenz findet
sich hufig die Hexamer-Wiederholung (Gly-SerGly-Ala-Gly-Ala).
40
1
2
3
4
5
6
.. Abb.3.8 Coiled coil: Zwei -Helices sind umeinander

gewickelt und bilden eine Doppelschraube. aDie Doppelschraubenstruktur ergibt sich aus der Aminosuresequenz
des -Keratins. In einer repetitiven Struktur von sieben Resten
a-b-c-d-e-f-g finden sich in Positionen a und d vorwiegend
apolare Reste (amphipathische -Helix: eine Seite apolar, andere Seite polar). Bei der Bildung einer -Helix (mit 3,6Resten
pro Windung) finden sich die apolaren Reste in jeder zweiten
Windung auf der gleichen Seite der Helix bereinander aufgereiht. bDer sich dabei ergebende hydrophobe Lngsstreifen
assoziiert mit dem hydrophoben Streifen einer zweiten -Helix der gleicher Art, indem sich die hydrophoben Seitenketten
reiverschlussartig ineinander verzahnen (Leucine zipper). Die
kleine Diskrepanz von (3+4) /2=3,5Resten der durchschnittlichen Position der apolaren Reste mit den 3,6Resten pro
Windung der -Helix fhrt dazu, dass die zwei -Helices nicht
in gestreckter Form, sondern als Doppelschraube assoziieren
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20
.. Abb.3.9Ausschnitt
aus einer elastischen
Faser. Quervernetzungen
sind in Blau angegeben.
Unter mechanischem Zug
kommen apolare Regionen der Polypeptidketten
in Kontakt mit Wasser. Bei
Nachlassen des Zuges
relaxiert die Faser in den
energetisch gnstigeren,
verkrzten Zustand
41
3.9Faserproteine
Kollagen ist bei Vertebraten das am hufigsten vorkommende Protein Es ist im Extrazellu-
lrraum aller Gewebe zu finden als Teil des Bindegewebes (Abschn.30.6). Ein Einzelmolekl des
Kollagens besteht aus drei Polypeptidketten, welche
je eine steile Helix bilden und sich zu einer nur im
Kollagen zu findenden Superhelix, der Kollagen-Tripelhelix, umeinander winden (.Abb.2.3).
Die elastischen Fasern des Bindegewebes bestehen aus Elastin und Fibrillin Elastische Fasern
finden sich besonders reichlich im Lungengewebe,

den Wnden der groen Arterien und im Nackenband von Wiederkuern. Sie sind aufgebaut aus einem Gerst von Fibrillin-Mikrofibrillen und darin
eingelagertem Elastin. Die Aminosuresequenz des
Elastins ist wie beim Kollagen (Abschn.30.6) sehr
typisch: ein Drittel Glycin, ber ein Drittel hydrophobe Aminosuren (Ala, Val, Leu, Ile) und viel
Pro, sehr wenig Hydroxy-Pro, kein Hydroxy-Lys.
Die Quervernetzungen zwischen den Polypeptidketten sind dieselben wie im Kollagen. Typisch fr
das Elastin sind zudem vierfache Quervernetzungen
vom Typ des Desmosins. Die elastischen Eigenschaften beruhen wahrscheinlich darauf, dass eine
Dehnung der Faser apolare Reste des Elastins in
Kontakt mit Wasser bringt und bei Wegfallen des
Zugs hydrophobe Effekte die Relaxation zum Ausgangszustand antreiben (.Abb.3.9).
Links auf
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027-6-1514848-0
3.1 Stabilisierung der Raumstruktur
3.2 Sekundrstruktur
3.3 Tertirstruktur
3.4 uere Gestalt und Quartrstruktur
3.5 Dynamik und funktionsgebundene
Strukturnderungen
3.6 Denaturierung
3.7 Faltungswege
3.8 Proteinfehlfaltung
3.9 Faserproteine
43
Enzyme
4.1
Allgemeine Eigenschaften der Enzyme 44
4.2
Katalyse und Aktivierungsenergie 45
4.3
Enzymkinetik46
4.4
Struktur der aktiven Stelle, Wirkungsmechanismen

von Enzymen51
4.5
Beispiele von Enzymmechanismen 53
4.6
Regulation der Enzymaktivitt 55

44
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20
Kapitel 4Enzyme
Enzyme sind katalytisch wirksame Proteine. Die

Stoffwechselwege in den Zellen setzen sich aus vielen verschiedenen Einzelschritten zusammen, von
denen jeder durch ein besonderes Enzym katalysiert wird. Ohne Enzyme laufen die allermeisten
biochemischen Reaktionen unmessbar langsam ab.
Eine Zelle von Escherichia coli enthlt etwa 1000 verschiedene Enzyme, eukaryontische Zellen ein Vielfaches davon. Enzyme beschleunigen die Einstellung
des Gleichgewichts zwischen Substrat und Produkt,
ohne die Lage des Gleichgewichts zu verndern.
Enzyme zeigen hohe Substrat- und Reaktionsspezifitt. Ein Enzym wird durch die Reaktion nicht verbraucht, es durchluft einen Kreisprozess, aus dem
es unverndert hervorgeht. Enzyme wurden frher
auch als Fermente bezeichnet (Fermentum lat., das
Agens, welches die alkoholische Grung auslst).
Proteinseitenketten und prosthetische Gruppen
(Coenzyme und Metallionen) binden das Substrat
an die aktive Stelle des Enzyms; ihre Wechselwirkungen mit dem Substrat fhren dazu, dass das Substrat innerhalb von Millisekunden in das Produkt
bergefhrt wird. Die Michaelis-Menten-Gleichung
beschreibt die Abhngigkeit der Geschwindigkeit
einer enzymkatalysierten Reaktion von der Substratkonzentration (Sttigungskurve). Die Reaktionsgeschwindigkeits-Temperatur (RGT-)Regel gilt
auch fr Enzymreaktionen.
Allosterische Regulationsmechanismen und
kovalente Modifikationen steuern den Stoffwechsel und verknpfen ihn mit vielen weiteren
zellulren Vorgngen zu einem regulatorischen
Netzwerk.
Enzyme finden vielfltige praktische Verwendung, die vom Zusatz bioaktiver Waschmittel,
ber klinisch-chemische Analytik bis zu Enzymreaktoren fr industrielle Synthesezwecke reicht.
4.1
Allgemeine Eigenschaften
der Enzyme
Enzyme sind substratspezifisch und reaktionsspezifisch Ein gegebenes Enzym akzeptiert nur
eine bestimmte Verbindung als Substrat und katalysiert nur eine bestimmte Reaktion des Substrats. Dank der hohen katalytischen Effizienz der
Enzyme knnen die Stoffwechselreaktionen bei

vergleichsweise niedriger Temperatur, im neutralen pH-Bereich und bei niedrigen Substratkonzentrationen (MmM) ablaufen. Die katalytische
Aktivitt eines Enzyms wird reguliert durch die
Konzentration seines Substrats und in manchen
Fllen durch besondere regulatorisch wirksame
Substanzen. Die Enzyme sind monomere oder oligomere globulre Proteine, viele von ihnen enthalten auch Nichtproteinbestandteile (prosthetische
Gruppen).
Es werden sechs verschiedene Klassen von Enzymen unterschieden :
1. Oxido-Reduktasen katalysieren Oxidationsund Reduktionsvorgnge (H- bzw. Elektronenbertragung). Beispiele: Dehydrogenasen
mit NAD+ oder NADPH+ als Elektronenakzeptor.
2. Transferasen bertragen eine Gruppe von Substrat1 auf Substrat2. Beispiel: Aminotransferasen (Transaminasen; .Abb.4.8).
3. Hydrolasen spalten Bindungen hydrolytisch.
Dazu gehren u.a. Esterasen, Glykosidasen und
Proteasen (synonym: Proteinasen).
4. Lyasen lagern Gruppen an Doppelbindungen
oder entfernen Gruppen aus ihren Substraten
unter Bildung von Doppelbindungen (nichthydrolytische Spaltung); Beispiel Fructose-1,6-bisphosphat-Aldolase (Abschn.14.1).
5. Isomerasen katalysieren Isomerisierungen.
Beispiel: Triosephosphat-Isomerase (Abschn.14.1).
6. Ligasen katalysieren die Bildung von Bindungen unter gleichzeitiger Spaltung von ATP. Beispiel: Aminoacyl-t-RNA-Synthetasen.
Alle Enzyme haben dreiteilige systematische
Namen:
Substrat(e)
Reaktionsklasse
Endsilbe -ase
L-Lactat:NAD-
oxidoreduct
ase
Nummerncode der Enzyme Commission EC1.1.1.27

(Klasse/Subklasse/Subsubklasse/individuelle Nummer).
Manche Enzyme besitzen Trivialnamen: Lactatdehydrogenase (obiges Beispiel), DNA-Polymerase,
Pepsin, Thrombin.
45
4.2 Katalyse und Aktivierungsenergie
Terminologie
Isoenzyme: Enzyme, welche in der gleichen
Spezies (nicht unbedingt im gleichen Individuum) die gleiche Reaktion katalysieren, sich
jedoch genetisch bedingt in ihrer Aminosuresequenz unterscheiden.
Mgliche Typen von Isoenzymen sind:
Enzyme mit separaten Genen. Beispiel:
Glutamat-Oxalacetat-Transaminase; in
jedem Individuum kommen zwei Iso
enzyme vor, eines in den Mitochondrien,
ein anderes im Cytosol.
Genetische Varianten (multiple Allele).
Beim Menschen sind ber 50Varianten
der Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase
gefunden worden.
Oligomere Enzyme aus verschiedenen
genetischen Varianten von Untereinheiten. Die Lactatdehydrogenase ist z.B. ein
Tetramer. Die Zellen synthetisieren sowohl
H-(Herz-) als auch M-(Muskel-)Untereinheiten. In gewissen Geweben kommen alle
fnf mglichen Isoenzyme (H4, H3M, H2M2,
HM3, M4) nebeneinander vor.
Das Enzym durchluft mit dem Substrat einen

Kreisprozess Der Enzym-Substrat-Komplex
ES bildet sich, indem das Substrat S an die aktive
Stelle bindet, die in einer Furche an der Oberflche des Enzyms E liegt. Das Substrat wird primr
durch nichtkovalente Krfte gebunden (H-Bindungen, Salzbindungen, Van-der-Waals-Krfte

und hydrophobe Effekte). Die Struktur der aktiven
Stelle ist derjenigen des Substrats komplementr (der berhmte Chemiker Emil Fischer hat die
Substratspezifitt von Enzymen mit dem Bild von
Schloss und Schlssel beschrieben). In der Phase
des Bindungswechsels wird ES in den Enzym-Produkt-Komplex EP umgewandelt:
P
EP
ES
Wechselwirkungen zwischen der aktiven Stelle und

dem Substrat, zu denen bei gewissen Enzymen auch
eine vorbergehende kovalente Bindung gehrt,
fhren dazu, dass die Reaktion ESEP viel schneller abluft (1061012-mal) als die nichtkatalysierte
Reaktion SP. Die Dissoziation des EP-Komplexes
schliet den Kreis. Das Enzymmolekl ist darauf bereit, den Zyklus mit einem weiteren Substratmolekl
erneut zu durchlaufen. Alle Teilreaktionen sind im
Prinzip umkehrbar. Der katalytische Zyklus wird
von den meisten Enzymen innerhalb weniger Millisekunden durchlaufen.
Das Binden des Substrats verndert die Konformation sowohl des Enzyms als auch des Substrats.
Die substratinduzierte Konformationsnderung des
Enzyms wird als induzierte Anpassung (Induced fit)
bezeichnet. Sie trgt zur besseren Erkennung des Substrats bei: Nur Verbindungen, welche die Anpassung
induzieren, werden zu Produkt umgesetzt, bloes
Binden an die aktive Stelle gengt nicht. Bei manchen
Enzymen fhrt das Binden des Substrats dazu, dass
die Furche der aktiven Stelle aus einer offenen in eine
geschlossene Form bergeht. Das Substrat gelangt dadurch in eine weitgehend wasserfreie Umgebung, in
der elektrostatische Wechselwirkungen verstrkt und
Nebenreaktionen mit Wasser ausgeschlossen sind.
4.2 Katalyse
und Aktivierungsenergie
Sowohl eine Erhhung der Temperatur als auch Katalysatoren beschleunigen chemische Reaktionen.
Dieser Sachverhalt lsst sich mit der Theorie des
bergangszustands beschreiben.
Die Aktivierungsenergie bestimmt die Geschwindigkeit einer Reaktion Ein Substratmole-
kl muss, um in Produkt umgewandelt zu werden,

einen aktivierten Zustand durchlaufen. Dieser bergangszustand hat eine hhere freie Energie als der
Ausgangszustand, die Differenz wird als freie Aktivierungsenergie bezeichnet (.Abb.4.1). In der enzymkatalysierten Reaktion ist die Aktivierungsenergie fr die Hin- und Rckreaktion um den gleichen
Betrag herabgesetzt: Hin- und Rckreaktion werden
um den gleichen Faktor beschleunigt. Die Lage des
Gleichgewichts zwischen S und P ist gegeben durch
die Differenz der freien Energie .G0 / von S und
46
Kapitel 4Enzyme
1
2
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4
5
Reaktionskoordinate
6
7
8
.. Abb.4.1 Aktivierungsenergie und

Reaktionsgeschwindigkeit. Die Reaktion
SP verluft umso schneller, je mehr
S-Molekle eine freie Energie aufweisen,
die gleich oder hher ist als diejenige des
bergangszustandes. Die Energieverteilung in einer Moleklpopulation bei
bestimmter Temperatur T ist gegeben
durch die Boltzmann-Verteilung. Eine
Temperaturerhhung um T verschiebt
die Boltzmann-Verteilung zu hheren
Energien der S-Molekle. Ein Enzym
hingegen erffnet einen neuen Reaktionsweg ESEP, welcher ber einen
bergangszustand mit niedrigerer freier
Energie verluft. In beiden Fllen besitzt
ein grerer Anteil der Moleklpopulation
eine freie Energie, die gleich oder hher
ist als diejenige des bergangszustandes
der Reaktion SP, d.h. in beiden Fllen
verluft die Reaktion schneller
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P; das Enzym ndert daran nichts. Die Aktivierungs

energie einer enzymatischen Reaktion wird durch das
jeweilige Enzym und nicht durch den Typ der Reaktion oder das Substrat bestimmt. Sie liegt im Bereich
von 2080kJ/mol (520kcal/mol, d.h. im Bereich der
Energie von Ionenpaarbindungen; .Tab.1.2). Die reaktionsbeschleunigende Wirkung eines Enzyms wird
als dessen katalytische Aktivitt bezeichnet.
Definitionen
Einheit (U) der Enzymaktivitt: 1 mol
Substrat/min (bei 25C und definierten, wenn
mglich optimalen Reaktionsbedingungen).
Spezifische Aktivitt: U/mg Protein (ein Ma
fr die Reinheit eines Enzymprparats); U/mL
Blutserum oder Blutplasma (in der klinischen
Chemie gebruchliche Angabe).
Molekulare Aktivitt (Wechselzahl, Turnover
number): mol Substrat/(mol Enzyms). Fr
die meisten Enzyme liegt der Wert im Bereich
von 103105s1; mit dieser Frequenz durchluft
ein Enzymmolekl den katalytischen Zyklus.
Die Enzymaktivitt lsst sich aus der Zeit-UmsatzKurve bestimmen In einem Reaktionsansatz wird
die Geschwindigkeit in der Anfangsphase der Reaktion nach Zugabe des Enzyms bestimmt; zu diesem
Zeitpunkt ist noch kein bzw. wenig P vorhanden
und es findet daher praktisch keine Rckreaktion
(E+S ESE+P) statt (.Abb.4.2).
4.3 Enzymkinetik
Die Enzymkinetik untersucht die Abhngigkeit der

Reaktionsgeschwindigkeit von den Reaktionsbedingungen: Konzentration des Enzyms, des Substrats
und von Inhibitoren oder Aktivatoren; Temperatur;
pH-Wert.
Fr die folgende Besprechung sollen drei Voraussetzungen erfllt sein: Mit Geschwindigkeit v
ist die Anfangsgeschwindigkeit gemeint; [S] [E];
Einsubstratreaktion. Die abgeleiteten Beziehungen
lassen sich auch auf Zweisubstrat-Reaktionen anwenden, indem eine dermaen hohe Konzentration
des zweiten Substrats gewhlt wird, dass sie wh-
47
4.3Enzymkinetik
kurve, die sich asymptotisch einem Maximalwert

nhert, beschreibt allgemein das Binden eines Liganden an ein Protein (z.B. von O2 an Myoglobin
oder eines Hormons an seinen Rezeptor). In analoger Weise beschreibt die Michaelis-Menten-GleiS
chung v D KVmmax
die Abhngigkeit der GeschwinCS
digkeit v einer enzymkatalysierten Reaktion von der
Substratkonzentration.
.. Abb.4.2 Bestimmung der Aktivitt eines Enzyms aus der

Zeit-Umsatzkurve. Die Anfangsgeschwindigkeit der Reaktion
v=d[P]
=d[S]
ist gleich der Neigung der Tangente an die
dt
dt
Zeit-Umsatzkurve zur Zeit Null: v=d[P]
=tgt=o. Das Ermitteln
dt
der Zeit-Umsatzkurve ist einfach, wenn sich Substrat und
Produkt in ihren Absorptionsspektren unterscheiden. Das ist
zum Beispiel der Fall beim Cosubstrat NAD+/NADH (Abschn.14.1; .Abb.14.2)
rend der Reaktion praktisch nicht verndert wird

und als Konstante in die Gleichungen eingeht.
Die Geschwindigkeit ist eine lineare Funktion

der Enzymkonzentration Die meisten enzymka-
talysierten Reaktionen laufen ohne Enzym unmessbar langsam ab: bei [E]=0 ist v=0. Die Geschwindigkeit nimmt mit steigender Enzymkonzentration
linear zu.
Ableitung der Michaelis-Menten-Gleichung
Eine enzymkatalysierte Reaktion lsst sich

vereinfacht durch die folgende Gleichung
darstellen:
k1
k2
E C S ES ! E C P
k1
wobeik1, k1 und k2 die Reaktionsgeschwindigkeitskonstanten der jeweiligen Reaktionsschritte darstellen.

Falls sich ES in einem Fliegleichgewicht (stationrer Zustand, Steady state) befindet, d.h.
mit gleicher Geschwindigkeit gebildet und
verbraucht wird, gilt
k1 ES D k1 ES C k2 ES oder
ES
k1 C k2
D
ES
k1
Der Quotient der Geschwindigkeitskonstanten wird als Michaelis-Menten-Konstante Km

definiert:
Die Michaelis-Menten-Gleichung beschreibt die

Abhngigkeit der Geschwindigkeit von der Substratkonzentration Eine hyperbolische Sttigungs-
Km D
k1 C k2
k1
Kapitel 4Enzyme
48
Aus
Reaktion 2.Ordnung:
ES
D Km und E D E0 ES ,
ES
wobei [E0] die Gesamtkonzentration des Enzyms ist, ergibt sich
Km
E0 ES
D
oder
ES
S
E0
Km
S
ES
D
C 1 oder
D
ES
S
E0
Km C S
5
6
Die Geschwindigkeit der Reaktion ist
vD
Die maximale Geschwindigkeit Vmax wird

erreicht, wenn alles Enzym als ES-Komplex
vorliegt: Vmax=k2 [E0].
Demnach ist
9
10
v
ES
Vmax S
S
D
oder v D
D
Vmax
E0
Km C S
Km C S
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
dP
D k2 ES
dt
Aus der Michaelis-Menten-Gleichung ergibt sich,

dass die Reaktion bei niedriger Substratkonzentration gem einer Kinetik erster Ordnung und bei
hoher Substratkonzentration gem einer Kinetik
nullter Ordnung abluft:
[S] Km : v S .Kinetik 1. Ordnung/

[S] Km : v = Vmax .Kinetik 0. Ordnung/
Terminologie
Reaktion 0.Ordnung: AB
vD
dB
Dk
dt
Reaktion 1.Ordnung: AB
dB
vD
D kA A t D A0 ekt
dt
vD
A+BC
dC
D kAB
dt
Km hat die Dimension einer Konzentration und entspricht der Substratkonzentration, bei welcher die
halbe Maximalgeschwindigkeit erreicht wird. Die
Maximalgeschwindigkeit Vmax wird erreicht, wenn
das Enzym mit Substrat gesttigt ist, d.h. wenn bei
[S]Km alle Enzymmolekle als ES-Komplex vorD Kd , d.h.
liegen. Falls k2k1, wird Km D kk1
1
der Wert von Km entspricht dem Wert der Dissoziationskonstanten des ES-Komplexes. Bei der Mehrzahl der Enzyme ist dies der Fall.
v, [S] und Km
S D Km
vD
1
2
S D 20 Km
vD
20
21
S D 10 Km
vD
Vmax
10
11
Vmax D 91 % von Vmax
Vmax D 95 % von Vmax
Eine Erniedrigung von Km bewirkt, dass bei gegebener Substratkonzentration die Geschwindigkeit der
Reaktion zunimmt, d.h. die Ausntzung des Substrats verbessert wird (.Abb.4.3). Km kann daher
als reziprokes Ma der Affinitt des Enzyms fr
ein bestimmtes Substrat bezeichnet werden. Die KmWerte der meisten Enzyme liegen zwischen 0,01 bis
1mM. In vielen Fllen liegt der Km-Wert im Bereich
der Konzentration des jeweiligen Substrats in der
Zelle. Enzyme arbeiten demnach in der Zelle nicht
unter Sttigungsbedingungen.
Bestimmung von Vmax und Km

Experimentelle Messung von v=f([S])
gem .Abb.4.3 und rechnergesttztes
Angleichen der Kurve (Curve fitting).
Alternative: Grafische Auswertung der
Daten durch Linearisierung der Michaelis-
Menten-Gleichung nach Lineweaver-Burk:
1
Km
1
1
C

D
v
Vmax
Vmax S
1
1
wird dabei eine lineare Funktion von
:
v
S
49
4.3Enzymkinetik
k=f(T)
Die Temperaturabhngigkeit einer chemischen (auch enzymkatalysierten) Reaktion ist
gegeben durch
kB T G =RT
kD
,
e
h

Die Reaktionsgeschwindigkeit nimmt bei Erhhung der Temperatur exponentiell zu Bei
erhhter Temperatur verschiebt sich die Boltzmann-Verteilung: Ein grerer Anteil der ES-Komplexe besitzt eine freie Energie, die gleich gro oder
grer ist als die Aktivierungsenergie, die Reaktion
luft schneller ab (.Abb.4.1). Die Reaktionsgeschwindigkeits-Temperatur-Regel (RGT-Regel) gilt
als grobe Faustregel auch fr Enzyme: Eine Temperaturerhhung um 10C verdoppelt die Reaktionsgeschwindigkeit (.Abb.4.4). Bei Temperaturen,
die hher sind als die blichen Umgebungstemperaturen des Organismus bzw. dessen Krpertemperatur, werden die Enzyme jedoch denaturiert und
damit inaktiviert.
.. Abb.4.3Km als reziprokes Ma der

"Affinitt" eines Enzyms fr dessen Substrat. Die Ausntzung des Substrats wird
verbessert unabhngig davon, ob der erniedrigte Km-Wert auf eine Erhhung von
k1 oder eine Erniedrigung von k-1 oder k2
zurckzufhren ist. Je niedriger Km, umso
hher ist bei gegebener Substratkonzentration die Geschwindigkeit
wobei k die Reaktionsgeschwindigkeitskonstante, kB die Boltzmann-Konstante, T die absolute Temperatur, h die Planck-Konstante, G
die Aktivierungsenergie und R die allgemeine
Gaskonstante darstellt. Die damit verwandte
Arrhenius-Gleichung lnk=lnAEa/RT zeigt,
dass lnk eine lineare Funktion von 1/T ist. A ist
eine Konstante, welche den maximal mglichen Wert der Geschwindigkeitskonstante
bei Ea=0 angibt (1013s1 bei 25C); Ea ist die
Aktivierungsenergie.
Die Temperaturabhngigkeit biologischer Vorgnge

ist von praktischer Bedeutung: Khlschrnke, Khlrume und Khlketten sind in der Lebensmittelbranche aber auch in der biologischen Forschung und
Technik nicht mehr wegzudenken. Im Winterschlaf
gewisser Tiere und bei der knstlichen Hibernation
von Patienten werden die Stoffwechselreaktionen verlangsamt und dadurch der Bedarf an Nhrstoffen und
Sauerstoff herabgesetzt. Umgekehrt beschleunigen
Fieber oder Hyperthermie den Stoffwechsel.
50
Kapitel 4Enzyme
.. Abb.4.4 Temperaturabhngigkeit der Geschwindigkeit enzymatischer Reaktionen. Die angegebene

Kurve entspricht einem Temperaturkoeffizienten von
2 (bei einer Temperaturerhhung von 10C verdoppelt sich die Reaktionsgeschwindigkeit). Oberhalb
einer gewissen Temperatur wird das Enzym rasch
denaturiert und damit inaktiviert. Bei berschreiten
der Denaturierungstemperatur lsst sich deshalb die
Geschwindigkeit der enzymkatalysierten Reaktion
nicht mehr messen
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Aktivatoren und Inhibitoren knnen die Aktivitt von Enzymen verndern Verbindungen,
welche die Geschwindigkeit einer enzymkatalysierten Reaktion beschleunigen oder verlangsamen,

jedoch weder Substrat noch Produkt der Reaktion
sind, werden als Aktivatoren bzw. Inhibitoren des
Enzyms bezeichnet. Es sind wesentlich mehr Inhibitoren als Aktivatoren bekannt. Inhibitoren hemmen
das Enzym, ohne es zu denaturieren.
Reversible Inhibitoren bilden einen Enzym-Inhibitor-Adsorptionskomplex. Ein reversibler kompetitiver Inhibitor und das Substrat knnen nicht gleichzeitig an das Enzym binden. In der
Gegenwart eines kompetitiven Inhibitors wird ein
hherer Wert von Km gemessen. Bei erhhter Substratkonzentration wird jedoch der gleiche Wert
von Vmax wie in der nichtgehemmten Reaktion erreicht:
Ein reversibler nichtkompetitiver Inhibitor bindet

unabhngig vom Substrat an das Enzym. In der Gegenwart eines nichtkompetitiven Inhibitors wird ein
niedrigerer Wert von Vmax gemessen, der Km-Wert
bleibt unverndert; die Hemmwirkung uert sich
wie eine Erniedrigung der Enzymkonzentration:
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20
Der einfachste Aktivator und Inhibitor von Enzymen ist das H+-Ion Die katalytische Aktivitt
jedes Enzyms ist vom Ladungszustand ionisierbarer Gruppen des Enzyms, insbesondere an dessen
aktiver Stelle, und des Substrats abhngig. Der Ladungszustand dieser Gruppen hngt vom pH-Wert
ab. Das pH-Optimum der meisten Enzyme liegt im
physiologischen pH-Bereich oder in dessen Nhe
(.Abb.4.5). Es kann scharf begrenzt sein oder sich
ber mehrere pH-Einheiten erstrecken.
51
4.4 Struktur der aktiven Stelle, Wirkungsmechanismen von Enzymen
Mit spezifischen Inhibitoren knnen Enzyme

gezielt gehemmt werden H+-Ionen wirken auf
alle Enzyme. Von besonderem Interesse sind jedoch

spezifische Wirkstoffe, welche ausschlielich ein bestimmtes Enzym hemmen. Substratanaloge, d.h.
Verbindungen mit substrathnlicher Struktur, binden an die aktive Stelle und verhindern damit das
Binden des Substrats. Das klassische Beispiel hierfr
ist die kompetitive Hemmung der Succinat-Dehydrogenase durch Malonat. Malonat mit seinen beiden
Carboxylatgruppen bindet anstelle von Succinat an
die aktive Stelle, kann jedoch nicht dehydrogeniert
werden, da wegen der fehlenden Methylengruppe
keine Doppelbindung eingefhrt werden kann:
Succinat
Die bisher beschriebenen spezifischen Enzyminhibitoren binden reversibel an ihr Zielenzym. Irreversible Inhibitoren, die kovalent an das Enzym
binden, wirken in der Regel strker und lnger anhaltend. Affinittsreagenzien bestehen aus zwei
Teilen: einem Substratanalogen, welches spezifisch
an die aktive Stelle des Zielenzyms bindet, und einer
reaktiven Gruppe, welche das Enzym an der aktiven
Stelle chemisch modifiziert und dadurch inaktiviert.
Mechanismus-aktivierte Inhibitoren (kcat-Inhibitoren) sind Substratanaloge, die von selbst nicht reak-
tiv sind, jedoch durch die katalytische Wirkung des

Enzyms in eine reaktive Form bergefhrt werden.
Sie nutzen nicht nur die Bindungsspezifitt, sondern auch die Reaktionsspezifitt des betroffenen
Enzyms, um dieses gezielt zu hemmen.
Zahlreiche Medikamente und auch Pestizide
sind spezifische Enzyminhibitoren Hierzu einige
Beispiele:
Acetylsalicylsure (Aspirin) und andere
nichtsteroidale Antiphlogistika und Throm-
.. Abb.4.5 pH-Aktivittskurve eines Enzyms. Im einfachsten

Fall entspricht jeder der flankierenden Kurvenste der Titrationskurve einer fr die Aktivitt kritischen ionisierbaren Gruppe. Die gezeigte Kurve knnte einem Enzym entsprechen, in
welchem ein bestimmter Histidinrest mit pKa6,5 deprotoniert
und ein Lysinrest mit pKa8,5 protoniert sein muss, damit das
Enzym katalytisch aktiv ist
bozytenaggregationshemmer hemmen die

Cyclooxygenase, die Prostaglandine und
Thromboxane produziert (Abschn.28.8).
Hemmstoffe des Angiotensin-converting
enzyme (ACE-Inhibitoren) dienen zur Behandlung von Bluthochdruck (Abschn.28.4).
Das Antibiotikum Penicillin ist ein kcat-Inhibitor der Transpeptidase, welche das Murein,
einen essenziellen Bestandteil der bakteriellen
Zellwand, synthetisiert (Abschn.5.3).
Medizinisch wichtige Substratanaloge sind
auch die Sulfonamide und die Folsureantagonisten, welche als Bakteriostatika und Zytostatika eingesetzt werden (Abschn.19.4).
Organophosphate hemmen die Acetylcholinesterase und wirken als Nervengifte
(Abschn.29.1). Gewisse Derivate werden als
Insektizide verwendet.
4.4
Struktur der aktiven Stelle,

Wirkungsmechanismen
von Enzymen
Fr das Binden des Substrats und die Katalyse des

Bindungswechsels sind Gruppen an der aktiven
Stelle verantwortlich:
Proteinseitenketten, welche mit dem Substrat eine nichtkovalente Bindung eingehen,
Kapitel 4Enzyme
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Protonen aufnehmen oder abgeben oder

als Nucleophil das Substrat vorbergehend
kovalent binden. An der Bindung der zumeist
anionischen Substrate ist sehr hufig die
Guanidiniumgruppe von Arg beteiligt. Weitere
Beispiele fr funktionelle Gruppen an aktiven
Stellen sind die Imidazolgruppe von His, die
SH-Gruppe von Cys, die OH-Gruppe von Ser,
die Carboxylgruppe von Asp und Glu sowie
die -Aminogruppe von Lys.
Prosthetische Gruppen (Nichtproteinbestandteile), die bei sehr vielen Enzymen die aktive
Stelle mit chemischen Eigenschaften, z.B. Redoxaktivitt, ausstatten, welche mit Proteinseitenketten allein nicht hervorzubringen wren:
Coenzyme, im Vergleich zu den Proteinseitenketten kompliziert gebaute organische
Verbindungen, in vielen Fllen aus einem
Vitamin gebildet,
Metallionen, Zn2+, Fe2+, Cu2+ u.a.m. durch
Chelatbindung ans so genannte Metallenzym gebunden.
philen Angriff einer Gruppe der aktiven Stelle des

Enzyms auf das Substrat kommt es zu einer kovalenten Bindung. Die damit elektrophil gewordene
katalytische Gruppe zieht Elektronen aus dem Reaktionszentrum ab und erleichtert so die Spaltung von
Bindungen im Substrat. Zum Abschluss der Reaktion wird die katalytische Gruppe wieder eliminiert.
Die Reaktionsmechanismen von Chymotrypsin
(.Abb.4.7) und der pyridoxalphosphat-abhngigen Enzyme geben hierfr Beispiele (.Abb.4.9).
Terminologie
11
Holo
enzym
12
aktiv
Apoenzym
(Protein)
inaktiv
prosthetische
Gruppe
(Coenzym/
Metallion)
sehr wenig aktiv
Das Binden an die aktive Stelle verformt das

Substrat in Richtung Struktur des bergangszustandes Ein Teil der freien Bindungsenergie
des Substrats (G der Bildung des ES-Komplexes)

wird aufgewendet, um das Substrat strukturell dem
bergangszustand anzunhern. Die Wechselwirkungen mit der aktiven Stelle fhren dazu, dass
Bindungswinkel, Bindungslngen, aber auch die
Elektronenverteilung im Substrat dem bergangszustand angeglichen werden. Dabei ist zu beachten, dass elektrostatische Wechselwirkungen in der
praktisch wasserfreien aktiven Stelle wesentlich
strker sind als im Wasser. Experimentelle Befunde
belegen die Wirksamkeit dieses Mechanismus der
Enzymwirkung:
Nichtenzymatische Reaktionen laufen schneller
ab, wenn die Struktur des Reaktanten der Struktur des bergangszustandes angenhert ist:
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Wechselwirkungen zwischen Enzym und Substrat

beschleunigen die Reaktion Der Beitrag der im
Folgenden aufgefhrten Mechanismen zum katalytischen Effekt ist von Enzym zu Enzym verschieden; viele Enzyme benutzen nur einen Teil dieser
Mechanismen.
Ionisierbare Gruppen der aktiven Stelle wirken als H+-Donoren oder H+-Akzeptoren Viele
Reaktionen werden durch H+- oder OH-Ionen beschleunigt; wenn Brnstedtsche Suren und Basen
die Reaktion katalysieren, spricht man von allgemeiner Sure-Basenkatalyse (z.B. Chymotrypsin;
.Abb.4.7). In manchen Enzymen bernimmt ein
Metallion an der aktiven Stelle die Rolle einer Lewis-Sure, d.h. eines Elektronenpaarakzeptors.
Gewisse Enzyme bilden vorbergehend eine
kovalente Bindung zum Substrat Durch nucleo
Stabile Analoge des (hypothetischen) bergangszustandes werden vom Enzym strker

gebunden als das Substrat und das Produkt.
Antikrper gegen Analoge des bergangszustandes knnen katalytische Wirkung aufweisen (katalytische Antikrper).
Enzyme verwandeln intermolekulare Reaktionen

in quasi-intramolekulare Reaktionen Die meis-
ten enzymkatalysierten Reaktionen sind mehrmolekulare Reaktionen, welche aus statistischen Grnden langsam sind. Durch Bildung des ES-Komplexes
werden alle Reaktanten (Substrat 1+Substrat 2+ka-
53
4.5 Beispiele von Enzymmechanismen
.. Abb.4.6 Katalyse durch Proximitt.

Vergleich der Geschwindigkeiten der
imidazol-katalysierten Hydrolyse von
Phenylacetat-Ester als intermolekulare und
intramolekulare Reaktion, d.h. damit bei
gleichen Konzentrationen von Ester und
Ester-Imidazol die intermolekulare Reaktion
gleich schnell abluft wie die intramolekulare Reaktion, msste die Konzentration von
Imidazol 30M sein. Bei der intramolekularen
Reaktion betrgt demnach die effektive
Konzentration von Imidazol 30M
Intermolekular
Intramolekular
Vinter = kinter [Ester] [Imidazol]
Vintra = kintra [Ester-Imidazol]
kintra
= 30 M
kinter
talytische Gruppen des Enzyms) Teil ein und desselben Komplexes. Nichtenzymatische Modellreaktionen zeigen, dass dieser entropische Effekt (Katalyse
durch Proximitt) zur Reaktionsbeschleunigung
beitragen kann (.Abb.4.6). Als weiterer entropischer Effekt der Bildung des ES-Komplexes werden
die Reaktanten optimal gegeneinander orientiert,
indem ihre relative Beweglichkeit eingeschrnkt
wird (Katalyse durch Orientierung).
4.5
Beispiele von
Enzymmechanismen
Serinproteasen: besonders reaktiver Serinrest an

der aktiven Stelle Eine gut untersuchte Serinprotease ist das Chymotrypsin, ein Verdauungsenzym
aus dem Pankreas, welches Peptidbindungen hydrolytisch spaltet. Sein Reaktionsmechanismus ist
aus chemischen und strukturellen Daten abgeleitet

worden (.Abb.4.7). Die OH-Gruppe von Ser195
ist ungewhnlich nucleophil durch Wechselwirkungen mit His57 und Asp102, sie geht vorbergehend eine kovalente Bindung mit dem Acylrest
ein. Aufgrund seiner Reaktivitt wird Ser195 spezifisch durch Diisopropylfluorophosphat und andere
Alkylphosphate (Organophosphate) alkyliert. Auf
hnliche Weise wird die Acetylcholinesterase an
cholinergen Synapsen irreversibel gehemmt (Abschn.29.1).
Ein Serinrest mit analoger Funktion und Reaktivitt findet sich auch bei anderen Serinproteasen.
Mit Ausnahme des Subtilisins haben sich alle Serinproteasen in .Tab.4.1 aufgrund hnlicher Aminosuresequenzen und 3D-Strukturen als zueinander
homolog erwiesen. Obwohl Subtilisin offenbar nicht
vom gleichen Proteinvorfahren abstammt, besitzt es
an der aktiven Stelle die gleichen drei katalytischen
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Kapitel 4Enzyme
.. Abb.4.7Kovalente
Katalyse der Hydrolyse von
Peptidbindungen durch
Chymotrypsin. Nach dem
gleichen Mechanismus
hydrolysiert das Enzym auch
Esterbindungen knstlicher
Substrate
55
4.6 Regulation der Enzymaktivitt
.. Tab.4.1Serinproteasen
Enzym
Vorkommen und Funktion
Chymotrypsin
Pankreas: Eiweiverdauung
Trypsin
do.
Elastase
do.
Thrombin
Blutplasma: Blutgerinnung
Plasmin
(Fibrinolysin)
Blutplasma: Auflsung
von Fibringerinnseln
Komplement C1
Blutplasma: Zell-Lyse
bei Immunreaktion
Subtilisin
Bacillus subtilis und andere Bacillus-Spezies, durch Plasmid codiert,

wird sezerniert. Verwendung in
bioaktiven Waschmitteln
Aminosurereste in gleicher rumlicher Anordnung: Durch konvergente molekulare Evolution

ist aus verschiedenen Ursprngen der gleiche katalytische Mechanismus entwickelt worden.
Pyridoxalphosphat-abhngige Enzyme katalysieren mannigfaltige Reaktionen von Aminosuren

Pyridoxalphosphat (PLP), ein Derivat von Vitamin
B6 (Pyridoxol, Pyridoxin), ist prosthetische Gruppe

vieler Enzyme im Stoffwechsel von Aminosuren
(.Abb.4.8). Alle Reaktionen von Aminosuren, die
von PLP-abhngigen Enzymen katalysiert werden,
sind auch mit PLP allein mglich. In diesem Fall laufen jedoch alle Reaktionen gleichzeitig nebeneinander und wesentlich langsamer ab. Die enzymatischen
und auch nichtenzymatischen Reaktionen fhren
ausnahmslos ber eine gemeinsame Zwischenverbindung (.Abb.4.9). Die PLP-abhngigen Enzyme zeigen angesichts der vielfltigen nichtenzymatischen
und enzymatischen Reaktionen sehr eindrcklich,
dass der Proteinteil des Enzyms (Apoenzym) verantwortlich ist fr die Substratspezifitt, die Reaktionsspezifitt und den hohen Beschleunigungseffekt.
4.6
Regulation der Enzymaktivitt
Die wechselnde Zufuhr von Nhrstoffen und der

wechselnde Bedarf an chemischer Energie oder
an bestimmten Stoffwechselprodukten verlangen
eine entsprechende Anpassung des Stoffwechsels.

Grundstzlich bestehen hierfr zwei Mglichkeiten:
nderung der Enzymkonzentration durch
nderung der Geschwindigkeit von Synthese
oder Abbau (langsam einsetzender Effekt;
Kap.11),
nderung der Aktivitt der in der Zelle vorhandenen Enzyme (unverzglich einsetzender
Effekt). Im Folgenden werden die allgemeinen
molekularen Grundlagen hierzu besprochen.
Die Substratkonzentration reguliert die Geschwindigkeit einer Stoffwechselreaktion In der
Zelle liegen die Konzentrationen der meisten Stoffwechselzwischenprodukte im Bereich der Km-Werte
der Enzyme. Die Geschwindigkeit der enzymkatalytischen Umsetzung des Substrats ist deshalb von
der Substratkonzentration abhngig (.Abb.4.3). Es
ergibt sich damit ein einfacher Mechanismus zur
Stabilisierung der Fliegleichgewichte des Stoffwechsels: Bei niedrigerer Konzentration wird das
Substrat langsamer und bei hherer Konzentration
schneller umgesetzt.
Enzyme mit sigmoider Kinetik (Kooperativitt) reagieren besonders empfindlich auf Vernderungen der Substratkonzentration- Eine
Reihe von Enzymreaktionen folgen nicht der Michaelis-Menten-Gleichung. Die Auftragung der
Reaktionsgeschwindigkeit als Funktion der Substratkonzentration ergibt eine S-frmige Kurve
(.Abb.4.10). Diese sigmoide Kinetik findet sich
nur bei oligomeren Enzymen, sie ist auf die Kooperativitt (gegenseitige Beeinflussung) der aktiven
Stellen zurckzufhren: Binden des Substrats an
die aktive Stelle einer Untereinheit erhht die Affinitt der noch unbesetzten Stellen auf den anderen
Untereinheiten (.Abb.4.11). Kooperativitt fhrt
zu einem empfindlicheren Ansprechen des Sttigungsgrades auf die Ligandenkonzentration (in
der Regeltechnik als steilere Regelcharakteristik
bezeichnet). Eine Hmoglobinvariante illustriert
eindrcklich die physiologische Bedeutung der
Kooperativitt (.Abb.4.12).
Manche Enzyme besitzen zustzlich zur aktiven
Stelle eine allosterische Regulatorstelle Die Aktivitt gewisser Enzyme kann durch Verbindungen be-
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.. Abb.4.8 Pyridoxalphosphat-abhngige enzymatische Reaktionen. Pyridoxamin-5-phosphat wird bei Transaminierungs

reaktionen aus Pyridoxal-5-phosphat gebildet. Auer den angezeigten Reaktionen werden auch - und -Eliminationsreaktionen sowie - und -Substitutionsreaktionen von PLP-abhngigen Enzymen katalysiert. Das Co-Substrat Tetrahydrofolat ist ein
allgemeiner bertrger von Einkohlenstoff (C1)-Fragmenten
57
.. Abb.4.9 Gemeinsame Zwischenverbindung aller PLP-abhngiger Reaktionen. Pyridoxalphosphat und Aminosure

bilden ein Imin (Schiff-Base). Diese kovalente Zwischenverbindung ist allen nichtenzymatischen und enzymatischen
PLP-abhngigen Reaktionen gemeinsam. Die Imin-Zwischenverbindung kann vielfltige Reaktionen eingehen
(.Abb.4.8), welche davon katalysiert wird, hngt ausschlielich vom Apoenzym ab
.. Abb.4.10 Sigmoide Kinetik eines Enzyms. Eine S-frmige

Kurve beschreibt die Abhngigkeit der Reaktionsgeschwindigkeit von der Substratkonzentration. Die Kurve entspricht
der Hill-Gleichung, in der K0,5 der Ligandenkonzentration bei
Halbsttigung entspricht:
vD
Vmax Sn
K0,5 CSn
Der Hill-Koeffizient n ist ein Ma fr den Grad der Kooperativitt. Sein Wert ist maximal gleich der Zahl der Substrat-Bindungsstellen des Enzyms. Ein Wert von 1 bedeutet Fehlen von
Kooperativitt; die Hill-Gleichung entspricht in diesem Fall
der Michaelis-Menten-Gleichung. Bei maximaler Kooperativitt liegt das Enzym nur als freies Enzym und als vollbesetztes
Enzym (alle Bindungsstellen mit Substrat besetzt) vor, Zwischenformen fehlen. Maximale Kooperativitt ist selten
.. Abb.4.11 Kooperativitt bei

oligomeren Enzymen. Das Binden des
Substrats an eine aktive Stelle, oder
allgemein eines Liganden an eine
Bindungsstelle, erhht die Affinitt
der anderen, noch unbesetzten Bindungsstellen. Hufig wird die Form mit
niedriger Affinitt als T-Zustand (tight)
und die Form mit erhhter Affinitt als
R-Zustand (relaxed) bezeichnet
einflusst werden, die entfernt von der aktiven Stelle

an einer anderen (allosterischen) Stelle an das Enzym binden. Das Binden des allosterischen Effektors
(allosterischen Aktivators oder Inhibitors) bewirkt
eine Konformationsnderung des Enzyms, welche
die Struktur und damit die funktionellen Eigenschaften der aktiven Stelle verndert (.Abb.4.13).
Allosterische Effekte sind von fundamentaler
biologischer Bedeutung Sie erlauben regulato-
rische Beziehungen zwischen Substanzen herzustellen, die chemisch-strukturell keine Mglichkeit
haben, miteinander direkt in Wechselwirkung zu

treten. Allosterisch regulierte Proteine wirken als
Vermittler bei der bertragung zellulrer Signale.
Allosterische Effekte ermglichen, dass sich die
verschiedenen Vorgnge in der Zelle und auch im
Gesamtorganismus zu einem regulatorischen Netzwerk verknpfen.
58
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.. Abb.4.12a-c Physiologische Bedeutung der Kooperativitt. Der Sttigungsgrad kooperativer oligomerer Proteine spricht
empfindlicher auf Vernderung der Ligandenkonzentration an. aOhne Kooperativitt: Um den Sttigungsgrad eines Enzyms
mit Michaelis-Menten-Kinetik von 10% auf 90% zu steigern, muss die Substratkonzentration 81-fach erhht werden. bMit
Kooperativitt (Beispiel Hmoglobin, ein Tetramer): Fr dieselbe Steigerung des Sttigungsgrades gengt eine 7-mal hhere
O2-Konzentration. cHmoglobin mit herabgesetzter Kooperativitt fhrt zu Problemen bei der O2-Abgabe: Normales Hmoglobin hat einen Hill-Koeffizienten n=2,7. Dieser Grad an Kooperativitt erlaubt, in der Peripherie viel O2 abzugeben (schwarzer
Pfeil), obwohl der Unterschied im O2-Partialdruck zwischen Lungen und peripheren Geweben verhltnismig klein ist. Eine
genetisch bedingte Hmoglobin-Variante (Hb Yakima, 99 Asp His) mit einem Hill-Koeffizienten von nur 1,5 gibt im Gewebe zu
wenig O2 ab (blauer Pfeil). Die Patienten leiden an den Folgen einer chronischen Unterversorgung der Gewebe mit O2; klinisch
steht eine starke Zunahme der Erythrozytenzahl im Vordergrund, die wegen der erhhten Viskositt des Blutes zu hmodynamischen Strungen fhrt
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.. Abb.4.13 Allosterische Regulation der Enzymaktivitt
59
Allosterische Regulationsvorgnge
Rckkoppelungshemmung (Feedback inhibition): Das Schrittmacherenzym katalysiert den

geschwindigkeitsbestimmenden, in der Regel
irreversiblen Schritt in einer Stoffwechselkette.
Seine Regulation sorgt fr den bedarfsgerechten Durchsatz durch die Stoffwechselkette
(Beispiele: Phosphofructokinase als Schrittmacherenzym der Glykolyse, .Abb.15.7;
-Aminolvulinat-Synthase in Hmsynthese,
Acetyl-CoA-Carboxylase in Fettsuresynthese
und HMG-CoA-Reduktase in Cholesterol
synthese).
Bei der bertragung hormonaler Signale
wirken Second messengers wie cAMP als allo
sterische Effektoren bestimmter Zielenzyme.
Signalverstrkung: Chemische Signale werden
verstrkt, indem das Produkt einer allosterisch
aktivierten Enzymreaktion ein zweites Enzym
allosterisch aktiviert (Signalkaskade).

Die Aktivitt gewisser Enzyme wird durch kovalente Modifikation reguliert Diese Art der Re-
gulation kann als ein Spezialfall der allosterischen

Regulation betrachtet werden, bei welchem der allosterische Effektor kovalent an das Protein gebunden ist. Beispiele hierfr sind die reversible Phosphorylierung von Serinresten gewisser Proteine
und die irreversible proteolytische Aktivierung
inaktiver Zymogene (Proenzyme).
Links auf
Springer Website:
027-6-1514850-0
4.1 Allgemeine Eigenschaften der Enzyme
4.2 Katalyse und Aktivierungsenergie
4.3 Enzymkinetik
4.4 Struktur der aktiven Stelle, Wirkungs
mechanismus von Enzymen
4.5 Beispiele von Enzymmechanismen
61
Polysaccharide
und Oligosaccharide
5.1
Reservehomoglykane62
5.2
Strukturhomoglykane63
5.3
Heteroglykane64

62
Kapitel 5 Polysaccharide und Oligosaccharide
12
Der weitaus grte Teil der in Organismen vorkommenden Kohlenhydrate sind Glykane (Polysaccharide und Oligosaccharide). Diese Polymere bestehen
aus glykosidisch verbundenen Monosacchariden
und Monosaccharidderivaten und haben, im Gegensatz zu Proteinen oder Nucleinsuren, keine
genau definierte Moleklmasse. Homoglykane
bestehen aus nur einer Art von Monosaccharid,
Heteroglykane dagegen aus zwei oder mehr verschiedenartigen Bausteinen.
Reservehomoglykane wie Strke oder Glykogen sind intrazellulre, -1,4-verknpfte Glucosepolymere und dienen als Energiereserve der Zelle
oder des Gesamtorganismus. Strukturhomoglykane wie Cellulose (-1,4-Glucosepolymer) oder
Chitin erfllen strukturelle Funktionen auerhalb
der Zelle.
Heteroglykane enthalten auer Glucose und
Galactose auch anionische Zuckerderivate. Glykoproteine (ZuckerProtein) und Proteoglykane/
Peptidoglykane (Protein/Peptid Glykosaminoglykane) finden sich an der Zelloberflche und sind
wichtig fr die Zell-Zell-Erkennung. Proteoglykane
der extrazellulren Matrix sind verantwortlich fr
die viskoelastischen Eigenschaften der Grundsubstanz des Binde- und Sttzgewebes. Ein Peptidoglykan, das Riesenmolekl Murein, bildet die Grundstruktur der bakteriellen Zellwand.
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5.1 Reservehomoglykane
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.. Abb.5.1 Glykosidische Bindung: 1,4-verknpfte D-Glucosereste. In der Ringform der Glucose (und anderer Zucker)
sind zwei Isomere mglich: Die Hydroxylgruppe an C1, d.h.
die freie Hemiacetalgruppe, kann nach unten (im -Anomer)
oder nach oben (im -Anomer) gerichtet sein. Es ergeben sich
dadurch zwei Typen glykosidischer Bindung
.Abb.5.2). Die -1,4-Bindungen der Amylose
und der unverzweigten Amylopektinabschnitte

ergeben eine schraubenfrmige 3D-Struktur der
Kette (.Abb.5.3). Die Strke der meisten Pflanzen
(insbesondere Weizen und Kartoffeln) besteht zu
7080% aus Amylopektin, der Rest ist Amylose.
Glykogen, das Speicherpolysaccharid in Tieren, ist dem Amylopektin sehr hnlich Es ist
Zucker (meist Glucose) als Energiereserve wird von

den Zellen als Polysaccharid gespeichert. Monosaccharideinheiten werden in Speicherpolymere eingebaut, um den osmotischen Druck, der proportional
zur Teilchenkonzentration ist, niedrig zu halten.
ebenfalls ein verzweigtes D-Glucosepolymer mit

-1,4-Bindungen und -1,6-Verzweigungen; das
Molekl ist jedoch kompakter gebaut mit einer
Verzweigung bei etwa jedem zehnten Glucoserest.
Glykogen findet sich besonders reichlich in der Leber und im Skelettmuskel. Es wird wie die Strke
intrazellulr in Granula gespeichert
speichern Strke in Form unlslicher Granula;

besonders reichlich findet sich Strke in Knollengewchsen (Kartoffeln) und Samen (Getreide);
hnliche Glucosepolymere kommen auch in Bakterien vor. Strke besteht aus unverzweigter Amylose (d-Glucose -1,4-glykosidisch verknpft;
.Abb.5.1) und verzweigtem Amylopektin (Glucose wie bei Amylose -1,4-verknpft, dazu bei
etwa jedem 25. Rest eine -1,6-Verzweigung;
sepolymer, kommt in vielen Bakterienhllen und

bei Pilzen (z.B. Hefe) vor. Die Glucosereste sind
-1,6-glykosidisch verbunden mit -1,2, -1,3 und
-1,4-Verzweigungen. Im biochemischen Labor
dient quervernetztes Dextran als Molekularsieb bei
der Gelfiltration (Size-exclusion chromatography).
Inulin ist ein in vielen Pflanzen vorkommendes
Fructosepolymer. Es ist im tierischen Krper nicht
abbaubar und wird zur Bestimmung des Volumens
Strke ist das wichtigste Speicherpolysaccharid in Pflanzen Die meisten Pflanzenzellen
In Pflanzen kommen weitere Reservehomoglykane vor Dextran, ein verzweigtes Gluco-
63
5.2Strukturhomoglykane
.. Abb.5.2-1,6-Verzweigungen in Amylopektin
und Glykogen. Ein Amylo
pektin-Polymer kann bis
zu 5000Glucosereste,
ein Glykogenpolymer bis
zu 60000Glucosereste
enthalten
.. Abb.5.3 Amylose. Die helicale Struktur ergibt sich aus den Bindungswinkeln der -1,4-glykosidischen Bindungen; ein
Molekl kann bis zu 1000Glucosereste enthalten. Iodprobe auf Strke: Einlagerung von I2 in die Amylosehelices (Einschlussverbindung) ergibt tiefblaue Farbe
des Extrazellulrraums (Abschn.33.4) und fr

Nierenfunktionsteste (Bestimmung der glomerulren Filtrationsrate) verwendet.
5.2 Strukturhomoglykane
Cellulose ist das wichtigste Strukturhomoglykan
der Pflanzen Sie macht mehr als 50% des gesam-
ten organisch gebundenen Kohlenstoffs in der Bio

sphre aus (ohne fossile Kohlenwasserstoffe). Die
extrazellulre, faserige und wasserunlsliche Substanz kommt in den Zellwnden sowie den verholzten Teilen der Pflanzengewebe vor. Das organische
Material des Holzes enthlt etwa 50% Cellulose.
Die Zellwnde der Baumwollfasern bestehen aus
Cellulose (Wolle und Seide, die zwei anderen natrlichen Textilfasern, bestehen aus Faserproteinen;
Abschn.3.9).
Cellulose ist ein lineares Homopolysaccharid
aus -1,4-verknpfter D-Glucose (.Abb.5.4). Die
langen Fadenmolekle (8000 bis 12000Glucoseeinheiten) lagern sich durch H-Bindungen zu zugfesten
Fasern zusammen. Tierische Organismen knnen
Cellulose nicht verwerten, da sie kein Enzym zur
Spaltung der -glykosidischen Bindung besitzen.
Ausnahmen sind holzabbauende Organismen wie
gewisse Bakterien, Pilze, Protozoen und Termiten
sowie Tierarten in Symbiose mit Cellulase produzierenden Mikroorganismen (z.B. Wiederkuer).
Das Homoglykan Chitin bildet das Grundgerst des Exoskeletts von Insekten und Crustaceen
Chitin besteht aus -1,4-verknpftem N-Acetyl
64
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.. Abb.5.4 Cellulose. Es kommen ausschlielich -1,4-Bindungen vor; die -Konfiguration bedingt, dass aufeinanderfolgende
Glucosereste um 180 gegeneinander gedreht sind: Es ergibt sich eine gestreckte Kette ohne Verzweigungen
glucosamin. Im Unterschied zur Cellulose ist beim

Chitin die Hydroxylgruppe an C-2 der Glucosereste
durch eine acetylierte Aminogruppe ersetzt. Chitin
ist wie Cellulose wasserunlslich. Bei Schalentieren
enthlt das Chitingerst oft zustzlich Calciumcarbonat, wodurch der Panzer fester wird.
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5.3 Heteroglykane
13
Neben Glucose und Galactose kommen in Heteroglykanen auch mannigfaltige Derivate von Zuckern
vor (.Abb.5.5), die zum Teil mit Schwefelsure
verestert sind. Die Heteroglykane sind von stark
variabler Gre; kurze Heteroglykane sind meist
kovalent mit Proteinen oder Peptiden verbunden;
lngere Heteroglykane sind Bestandteile der Zellmembran, der extrazellulren Matrix tierischer Gewebe und der Zellwand von Bakterien. Aufgrund
des Mengenverhltnisses zwischen Kohlenhydratund Proteinanteil werden Glykoproteine von Proteoglykanen und Peptidoglykanen unterschieden
(.Tab.5.1).
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.. Abb.5.5 In Heteroglykanen vorkommende Zuckerderivate
Bei Glykoproteinen berwiegt der Proteinanteil Die Oligosaccharide sind N- oder O-glykosi-
disch zumeist an -Schlaufen globulrer Proteine

gebunden (Abschn.22.6). Die Heteroglykanketten
sind nicht Teil der kompakten Proteinstruktur, sondern wasserlsliche Anhngsel. Die Glykosylierung
65
5.3Heteroglykane
.. Tab.5.1 Vergleich Proteoglykane und Glykoproteine

Bezeichnung
Kohlenhydrat
Nichtkohlenhydrat
Funktion
Glykoproteine
Oligosaccharide aus 220

verschiedenen Mono
sacchariden
Verschiedenste Proteine
Vielseitig, vom Protein und Zelltyp

abhngend; u.a. zellspezifischer
Marker fr Zell-Zell-Erkennung
Proteoglykane
(vgl. .Abb.5.6)
Glykosaminoglykane mit
sich wiederholenden Di
sacchariden; Moleklmasse
21033106
Einfach aufgebaute Proteinskelette (Kernprotein)
Bestandteil der extrazellulren

Matrix
Peptidoglykane
(vgl. .Abb.5.7)
Disaccharid aus N-Acetyl

glucosamin und N-Acetyl-
muraminsure
Peptide aus 45Aminosuren
Bestandteil der bakteriellen

Zellwand
kann gewisse Eigenschaften eines Proteins verndern, z.B. die Resistenz gegen Proteasen erhhen
und die Verweildauer im Blut verlngern.
Lectine
Zelloberflchenproteine von Pflanzen, Tieren
und auch Bakterien, welche spezifisch gewisse
Zuckerreste binden und zur Zell-Zell-Erkennung dienen. Im Labor werden Lectine zur
Affinittschromatographie von Zuckern und
Glykoproteinen benutzt:
Concanavalin A aus einer Bohnenart bindet -D-Glucose- und -D-Mannosereste,
Weizenkeim-Agglutinin bindet -N-Acetylmuraminsure- und -N-Acetylneuraminsurereste.
hnlich und bilden die viskoelastische, druckstabile

Komponente der Grundsubstanz des Binde- und
Sttzgewebes.
Hyaluronsure ist ein nichtsulfatiertes Glykosaminoglykan, dessen Disaccharideinheit aus Glucuronat und N-Acetylglucosamin besteht. Sie findet sich an Zelloberflchen adsorbiert, sowie in der
Gelenkschmiere, im Glaskrper des Auges und in
der Nabelschnurgallerte. Eine Hyaluronsurekette
bildet auch das Rckgrat riesiger Proteoglykankomplexe mit ber 500000Zuckerresten (105kDa).
Untereinheiten aus einem langen Kernprotein mit
angehefteten Heteroglykanketten sind ber ein Verbindungsprotein nichtkovalent mit dem Hyaluronsure-Rckgrat verbunden.
In Proteoglykanen berwiegt der Zuckeranteil
Die entsprechenden Heteroglykane werden als

Glykosaminoglykane oder saure Mucopolysac
charide bezeichnet.
Die Vorsilbe Muco weist
darauf hin, dass sie erstmals aus schleimartigen Sekreten isoliert worden sind (lat. mucus, Schleim).
Die Ketten bestehen aus sich wiederholenden Disaccharideinheiten. Mindestens einer der Zucker
besitzt eine negativ geladene Carboxylat- oder Sulfatgruppe, der zweite Rest ist oft ein Aminozucker.
Proteoglykane bestehen zu etwa 95% aus kurzen
Glykosaminoglykanen, die in Vielzahl kovalent an
ein Protein gebunden sind; diese groen Polyanionen binden Wasser und Kationen und sind sehr gut
wasserlslich. Die langen Ketten der im Folgenden
besprochenen Glykosaminoglykane sind einander
Chondroitinsulfat ist der Hyaluronsure sehr hn-
lich, enthlt jedoch sulfatiertes N-Acetylgalactosamin (NAG-Sulfat) anstelle von N-Acetylglucosamin.

Chondroitinsulfat findet sich an Zelloberflchen
adsorbiert, zusammen mit Hyaluronsure ist es zu-
66
Keratansulfat und Heparansulfat sind in Vorkom-
men und Bau dem Chondroitinsulfat hnlich, sind

jedoch strker sulfatiert.
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Das ebenfalls stark sulfatierte Heparin ist im Gegensatz zu den anderen Heteroglykanen nicht extrazellulr im Bindegewebe, sondern in den Granula von
Mastzellen zu finden. Es wirkt als Antikoagulans
durch Aktivierung von Antithrombin III (Abschn.31.1).
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.. Abb.5.6 Proteoglykankomplex aus Knorpel. Ein 400

4000nm langes Hyaluronsuremolekl dient als Rckgrat, an
dem bis zu 100Kernproteine hngen. Jedes Kernprotein trgt
um die 50Keratansulfatketten mit bis zu 250Disaccharideinheiten und etwa 100Chondroitinsulfatketten, die bis viermal
lnger sein knnen. Der Proteoglykankomplex besteht aus
95% Kohlenhydrat und 5% Protein
dem Bestandteil groer Proteoglykanaggregate in

der Grundsubstanz.
Agar aus Rotalgen ist ein Gemisch von Agarose
(linear verknpfte D-Galactose und 3,6-Anhydrogalactose) und Agaropektin. Agar wird zur Herstellung gallertartiger Nhrbden fr Bakterienkulturen und als Trgermatrix fr Elektrophoresen
verwendet.
Heteroglykane sind wichtig fr die Zell-Zell-Erkennung Die Zellen von Tieren besitzen keine
starren Wnde wie Pflanzen oder Bakterien, sondern eine weiche, flexible Oberflche, die oft als
Zellmantel (Cell coat) oder Glykokalix bezeichnet
wird. Die Kohlenhydratbestandteile des Zellmantels stammen von Glykoproteinen und Glykolipiden
der Plasmamembran (Abschn.22.6) wie auch von
adsorbierten Proteoglykanen. Der Zellmantel bildet
67
5.3Heteroglykane
.. Abb.5.7 Peptidoglykan, das Grundgerst der

Zellwand von Bakterien. Die Heteroglykanketten
bestehen aus N-Acetylglucosamin und N-Acetylmuraminsure, die alternierend auftreten und
-1,4-glykosidisch verknpft sind. Ein Tetrapeptid,
z.B. bei E. coli Ala D-Gln Lys D-Ala, setzt am
N-Acetylmuraminsure-Rest an. Das Vorkommen von
D-Aminosuren ist typisch fr bakterielle Zellwnde.
Ein Pentapeptid (Gly5) verbindet die Tetrapeptide
benachbarter Ketten
sich nur auf der Auenseite der Plasmamembran.

Einige Makromolekle, die an die Plasmamembran adsorbiert werden, sind auch Komponenten
der extrazellulren Matrix (z.B. Proteoglykane mit
Hyaluronsure und Chrondroitinsulfat; .Abb.5.6).
Die Plasmamembran geht damit flieend in die extrazellulre Matrix ber.
Vorgnge wie die Bildung eines Gewebes oder
das Erkennen fremder Zellen durch das Immunsystem hngen von der Erkennung einer Zelloberflche durch die Oberflche einer anderen Zelle ab.
Die extrazellulr exponierten Proteine der Plasmamembran sowie die meisten extrazellulren Proteine, z.B. die Proteine des Blutplasmas, sind Glykoproteine. Die Blutgruppenantigene entsprechen
dem Kohlenhydratanteil von Glykoproteinen und
Glykolipiden der Erythrozytenmembran. Bakterien
und Viren haften sich bei der Infektion von Zellen
an bestimmte Kohlenhydratanteile von Glykoproteinen und Glykolipiden der Zellmembran.
Vielfalt der Oligosaccharide

Zellen knnen durch Variieren der Struktur und
Anzahl der Oligosaccharide sowie des Ortes
der Verknpfung mit dem Protein eine groe
Anzahl art- und zellspezifischer Glykoformen
eines Proteins herstellen. Drei Monosaccharid
reste des gleichen Typs gengen, um ber
1000 verschiedene Trisaccharide zu bilden:
Die einzelnen Monosaccharide knnen
miteinander ber verschiedene Hydroxylgruppen verknpft sein.
Die glykosidische Bindung kann - oder
-Konfiguration haben.
Es knnen sich Verzweigungen bilden.
Ein Peptidoglykan bildet die Zellwand von Bakterien Bakterien besitzen auerhalb der Plasma-
membran eine Zellwand. Der wichtigste Bestandteil dieser robusten, doch flexiblen und porsen
Hlle ist das Riesenmolekl Murein, welches als
Sacculus (lat., Sckchen) die ganze Zelle umhllt.
Dieses Peptidoglykan besteht aus langen parallelen Heteroglykanketten, die durch Peptidbrcken
quervernetzt sind (.Abb.5.7). Intakte Zellwnde
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.. Abb.5.8 Die Zellhllen grampositiver und gramnegativer

Bakterien. Bei grampositiven Bakterien besteht die Zellwand
aus bis zu 20Lagen Peptidoglykan. Bei gramnegativen Bakterien, z.B. E. coli, ist das Peptidoglykan hingegen einschichtig.
Darber findet sich allerdings eine zustzliche Membran aus
Lipopolysacchariden, welche die Frbung verhindert. Die
Gramfrbung von Bakterien wurde von Hans Chr. J. Gram
eingefhrt
sind fr Bakterien lebensnotwendig: Bei ldierter

Zellwand kommt es in hypotonem Milieu infolge
des intrazellulren osmotischen Drucks zur Lyse
der Zelle. Nach dem Verhalten bei der sogenannten
Gram-Frbung werden grampositive und gramnegative Bakterien unterschieden (.Abb.5.8).
Archaea besitzen in ihrer Zellwand ein Pseudopeptidoglykan, das sich wesentlich vom Peptidoglykan
der Bakterien unterscheidet.
Das Enzym Lysozym und das Antibiotikum
Penicillin hemmen das Wachstum von Bakterien.
Das im Nasensekret und der Trnenflssigkeit
vorkommende Lysozym spaltet das Murein in
Disaccharide mit angehngten Peptiden. Penicillin hemmt die Synthese des Mureins, indem es als
kcat-Inhibitor mit der Glykopeptid-Transpeptidase
reagiert, welche die Vernetzung des bakteriellen
Zellwand-Peptidoglykans katalysiert:
Entdeckung des Penicillins

Alexander Fleming, Bakteriologe in London,
entdeckte 1922 das Lysozym, als er beobachtete, dass ein Tropfen Nasensekret Bakterien
auflst. Seine ganz groe Entdeckung machte
Fleming 1928, als er in einer Bakterienkultur
beobachtete, dass in der Umgebung des
kontaminierenden Schimmelpilzes Penicillium
notatum keine Bakterien wuchsen. Das erste
Antibiotikum, Penicillin, war entdeckt! Zum
Thema Zufallsentdeckung bemerkte Louis
Pasteur: Dans le champ de lobservation le
hasard ne favorise que lesprit prpar. Auf
Deutsch knnte das etwa heien: Alle haben
Glck, nur merkts nicht jeder!
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Links auf
Springer Website:
027-6-1514854-0
5.1 Reservehomoglykane
5.2 Strukturhomoglykane
5.3 Heteroglykane
69
Lipide und biologische

Membranen
6.1
Fettsuren70
6.2
Triacylglycerole und Wachse70
6.3
Phospholipide und Glykolipide 72
6.4
Nichtverseifbare Lipide: Steroide,

Terpene und Eicosanoide 73
6.5
Biologische Membranen76
6.6
Membranproteine79
6.7
Durchlssigkeit biologischer Membranen 79

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Kapitel 6 Lipide und biologische Membranen
Lipide sind wasserunlsliche Verbindungen, welche

sich durch apolare Lsungsmittel wie Chloroform,
Ether oder Benzol aus Gewebehomogenaten extrahieren lassen. Entsprechend dieser Definition, die
keinerlei Strukturmerkmale anfhrt, sind die Lipide
eine strukturell heterogene Gruppe von Biomoleklen. Auer ihren Lslichkeitseigenschaften ist ihnen
gemeinsam, dass sie aus aktivierter Essigsure (Acetyl-CoA; Abschn.14.2) synthetisiert werden. Zu
den Lipiden zhlt man die Fette (Neutralfette) und
die Lipoide (fetthnliche Substanzen). Ihre Funktionen sind vielfltig:
Bestandteil biologischer Membranen,
Intrazellulre Energiereserve,
Extrazellulre Transportform chemischer
Energie,
Schutzmantel an Oberflchen (Bakterienzellwnde, Pflanzenbltter, Insektenintegument,
Haut von Vertebraten),
Einige Vitamine und Hormone sind Lipide.
--
Jede Zelle besitzt eine Plasmamembran (Zellmembran), die sie gegen auen abgrenzt. Eukaryontische
Zellen besitzen zudem intrazellulre Membranen,
welche im Zellinnern die Zellorganellen abgrenzen.
Die Gesamtflche der intrazellulren Membranen
berwiegt diejenige der Plasmamembran bei weitem. Grundstzlich sind alle biologischen Membranen gleich gebaut: Eine durchgehende Lipiddoppelschicht wirkt als passive Barriere und darin
eingelagerte oder angelagerte Proteine erfllen
die aktiven Membranfunktionen (Stofftransport
durch die Membran, transmembranre Weiterleitung chemischer und physikalischer Signale, durch
Membranpotenziale getriebene Prozesse sowie Verankerung des Cytoskeletts). Plasmamembranen tragen an ihrer Oberflche zudem Kohlenhydrate, die
wichtig sind zur Zell-Zell-Erkennung.
dungen enthalten (einfach oder mehrfach ungesttigte Fettsuren; .Tab.6.1). Bei einer gesttigten
Fettsure besteht freie Drehbarkeit um alle C-C-Bindungen, wobei die wahrscheinlichste Konformation
mit niedrigster freier Energie die gestreckte Kette ist.
Die meisten ungesttigten Fettsuren besitzen eine
Doppelbindung zwischen C9 und C10. Die Doppel
bindungen liegen in der cis- (Z-) Konfiguration vor:
Lnge der Fettsure und Anzahl der Doppelbindungen bestimmen Schmelzpunkt Der Schmelz-
punkt liegt umso tiefer, je krzer die Kohlenwasserstoffkette ist und je mehr Doppelbindungen die
Fettsure besitzt (.Tab.6.1). Eine cis-Doppelbindung bewirkt einen Knick in der Kette, welcher die
regelmige Moleklpackung strt. Mehrfach ungesttigte Fettsuren werden starr und verkrzt.
6.1 Fettsuren
Lange unverzweigte Monocarbonsuren, v.a. die

Fettsuren mit 12 bis 24C-Atomen, sind Bausteine
vieler Lipide. Die Fettsuren in natrlichen Lipiden
besitzen eine gerade Anzahl von Kohlenstoffatomen,
weil sie aus C2-Einheiten (Acetyl-CoA) synthetisiert
werden. Sie knnen eine oder mehrere Doppelbin-
6.2
Triacylglycerole und Wachse
Triacylglycerole (Neutralfette, Triglyceride) sind

die quantitativ wichtigsten Lipide bei Eukaryonten Sie sind Ester des dreiwertigen Alkohols Gly-
71
6.2 Triacylglycerole und Wachse
.. Tab.6.1 Die am hufigsten vorkommenden Fettsuren und ihre Schmelzpunkte

Fettsure
Palmitinsure
Stearinsure
lsure
Anzahl C-Atome
und Anzahl
Doppelbindungen
16:0
18:0
Schmelzpunkt
(C)
cis-Isomer
trans-Isomer
.. Tab.6.2 Fettsuren im Neutralfett der mensch

lichen Leber
Massenanteil (%)
Palmitinsure 16:0
24
63
Stearinsure 18:0
70
lsure 18:1
43
Linolsure 18:2
18:1
20
13
Linolenure 18:3
45
Arachidonsure 20:4
a
Linolsure
18:2
Linolensure
18:3
11
Arachidonsure
20:4
49
cerol (Glycerin) mit drei Fettsuren. Sie bilden das

Reservefett und werden v.a. im Fettgewebe in spezialisierten Zellen gespeichert.
a
a
Alle Doppelbindungen in cis-(Z)-Konfiguration
Hydroxylgruppen des Glycerols sind mit verschiedenen Fettsuren verestert; dabei kommen mehr ungesttigte als gesttigte Fettsuren vor (.Tab.6.2).
Als Bausteine des Reservefettes sind langkettige
Fettsuren am gnstigsten, da sich auf diese Weise
viel Energie in osmotisch nicht wirksamen ltropfen speichern lsst. Reservefett und Membranlipide
sind bei Krpertemperatur flssig. Bei Raumtemperatur feste Triacylglycerole werden als Fett, flssige
als l bezeichnet. Triacylglycerole lassen sich durch
alkalische Hydrolyse spalten (Verseifung; eine Seife
ist das Alkalisalz einer Fettsure ):
Triacylglycerol+3 NaOH
Glycerol+3Seifen
Die in geringer Menge vorkommenden Mono- und
Diacylglycerole entstehen als Zwischenprodukte des
Fettstoffwechsels.
Wachse sind Ester langkettiger Fettsuren mit

langkettigen einwertigen Alkoholen Bei Wirbel-
tieren werden Wachse von den Hautdrsen ausgeschieden, um die Haut geschmeidig, gleitfhig und
wasserabstoend zu halten. Auch Haare und Federn
sind mit wachsartigen Sekreten berzogen. Besonders die Seetiere bilden und verwenden Wachse in
groen Mengen. Auch die Bltter und Frchte vieler
Pflanzen sind mit einer Wachsschicht berzogen.
Bienen bauen ihre Waben mit Wachs.
Die meisten der natrlich vorkommenden Neutralfette sind gemischte Triacylglycerole, d.h. die drei
1
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72
6.3
Phospholipide und Glykolipide
Phospholipide sind polare Lipide Sie besitzen
neben zwei langen hydrophoben Kohlenwasserstoffketten eine bei pH7 negativ geladene Phosphatgruppe und weitere ionische oder polare Gruppen.
Ihr amphiphiler Charakter ist wichtig fr die Struktur biologischer Membranen.
Glycerolphosphatide sind Bestandteile von

Membranen und von Lipoproteinen im Blut-
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Bei Sphingosinphosphatiden bildet Sphingosin

den Kern des Molekls Sphingosin ist ein lang-
kettiger ungesttigter Aminoalkohol. Die zweite

Kohlenwasserstoffkette der Sphingolipide liefert
ein Fettsurerest, der ber eine Amidbindung ans
Sphingosin gebunden ist. Der hufigste Vertreter
der Sphingosinphosphatide ist das Sphingomyelin.
plasma Wie bei den Triacylglycerolen bildet Glycerol den Kern des Molekls. Anstelle eines dritten
Fettsurerests enthalten Glycerolphosphatide eine
Phosphatgruppe und eine zustzliche Alkoholkomponente. Die am hufigsten vorkommenden Glycerolphosphatide sind Phosphatidylethanolamin
und Phosphatidylcholin (Lecithin). Daneben kommen Phosphatidylserin und Phosphatidylinositol
vor, die analog aufgebaut sind.
73
6.4 Nichtverseifbare Lipide: Steroide, Terpene und Eicosanoide
6.4
Nichtverseifbare Lipide:
Steroide, Terpene
und Eicosanoide
Alle bisher besprochenen Lipide sind verseifbar. Zu

den nichtverseifbaren Lipiden, die keine Ester- oder
Amidbindungen enthalten, gehren die Steroide,
Terpene und Eicosanoide.
Die Steroide sind formal Derivate des Sterans

Quantitativ am wichtigsten ist das Cholesterol
(Cholesterin), ein Bestandteil der eukaryontischen
Zellmembran. Cholesterol ist auch die Ausgangssubstanz zur Synthese von Gallensuren, Steroidhormonen und Vitamin D.
C
A
Glykolipide sind glykosylierte Derivate von

Acyl-Sphingosin Sie enthalten wie die Sphin-
gosinphosphatide einen Fettsurerest, hingegen

als polaren Teil einen oder mehrere Zuckerreste
anstelle der Phosphatgruppe und dem zweiten Alkohol. Cerebroside enthalten einen einzigen Zuckerrest (z.B. Galactose) und finden sich besonders
hufig in den Myelinscheiden der Nervenzellen.
Ganglioside enthalten mehrere Zuckerreste. Sie
kommen in Membranen, besonders von Nervenzellen, vor. Die hufigsten Zuckerkomponenten sind
Glucose, Galactose, N-Acetylglucosamin, N-Acetylgalactosamin oder N-Acetylneuraminsure
(.Abb.6.1).
Die wichtigsten Strukturmerkmale der polaren
Membranlipide sind in .Tab.6.3 zusammengefasst.
--
Drei
fettlsliche
Vitamine
sind
Terpene
(.Abb.6.2):
Vitamin A, ein Carotinoid. -Carotin, eine
Vorlufersubstanz von Vitamin A, enthlt
zahlreiche konjugierte Doppelbindungen und
kommt besonders reichlich in Karotten (Mhren) vor, denen es die gelb-rote Farbe gibt.
Vitamin E, ein Tocopherol.
Vitamin K, ein Phyllochinon.
Eicosanoide (Prostaglandine und Thromboxane)
sind Derivate der Arachidonsure, einer mehrfach
ungesttigten C20-Fettsure (gr. eikosi, zwanzig)
Die Prostaglandine kommen in hoher Konzentration im Prostatasekret vor. Sie werden auch in vielen
anderen Geweben gebildet und wirken als Signalstoffe. Thromboxane leiten sich von den Prostaglan-
74
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.. Abb.6.1 Glykolipide. Der langkettige Aminoalkohol Sphingosin dient als Kern des Molekls. Der Fettsurerest ist nicht wie
bei den Glycerolphosphatiden ber eine Esterbindung, sondern ber eine Amidbindung an das Sphingosin gebunden
75
6.4 Nichtverseifbare Lipide: Steroide, Terpene und Eicosanoide
.. Tab.6.3 Bausteine der polaren Membranlipide

Phospholipide
Glykolipide
Glycerolphosphatid
Sphingosin-
phosphatid
Cerebrosid
Gangliosid
Alkohol
Glycerol plus zweiter

Alkohol (z.B. Cholin)
Sphingosin plus
zweiter Alkohol
Sphingosin
Sphingosin
Fettsure
Phosphat
Zucker
mehrere
.. Abb.6.2Terpene.
Kohlenwasserstoffe
dieser Klasse entstehen
durch Polymerisation von
C5H8-Einheiten (Isopentenyldiphosphat; Abschn.17.6 und 21.4)
76
dinen ab und finden sich u. a. in den Thrombozyten

(Blutplttchen).
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Amphiphile Lipide bilden spontan Doppelschichten Die polaren Lipide der Lipiddoppel-
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6.5
Biologische Membranen
Funktion ab und variiert von Zelltyp zu Zelltyp:

Funktion
Proteingehalt
(Massen-%)
Myelinscheiden
Elektrischer
Isolator
18
Selektiver
Stoffaustausch
mit Umgebung
44
13
Plasmamembran einer
Leberzelle
14
Innere
Mitochondrienmembran
Stoffaustausch
und vektorielle Prozesse
(oxidative
ATP-Synthese)
76
15
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20
schicht sind Phospholipide oder Glykolipide und

bestehen demnach aus einem hydrophilen Kopf
und zwei hydrophoben Schwnzen. Bei eukaryontischen Zellen ist zwischen die Lipide Cholesterol
eingelagert.
Membranen sind supramolekulare Strukturen bestehend aus Lipiden, Proteinen (und Kohlenhydraten) Die Zusammensetzung hngt von ihrer
Membran
12
polarer Lipide, deren apolare Ketten eine

hydrophobe Zone im Innern der Membran
bilden.
Die Membranproteine sind globulre Proteine;
sie sind, wie die Membranlipide, amphiphil
und mosaikartig in der Membran verteilt. Sie
sind teils in die Membran eingebettet, teils an
die Membranoberflchen angelagert.
Die Membran ist strukturell und funktionell
asymmetrisch, die Lipide und Proteine der
ueren und inneren Seite sind verschieden.
Je mehr aktive Funktionen eine Membran erfllt,

umso hher ist ihr Proteingehalt. Eine bestimmte
Membran ist immer gleich zusammengesetzt
(. Tab. 6.4).
Eine flssige Lipiddoppelschicht ist die

Grundstruktur jeder Membran In die Lipid-
doppelschicht sind globulre Proteine eingelagert.

Die folgenden Charakteristika zeichnen die Flssigmosaik-Struktur biologischer Membranen aus
(. Abb. 6.3):
Die Membran ist eine zweidimensionale
Lsung bestehend aus einer Doppelschicht
Wie Fettsuren bilden die polaren Membranlipide aufgrund ihrer amphiphilen Eigenschaften
im Wasser spontan supramolekulare Strukturen
(. Abb. 6.4).
Die Lipiddoppelschicht befindet sich unter

physiologischen Bedingungen in flssigem Zustand Die Lipidmolekle knnen rotieren, sich
biegen und lateral diffundieren. Spontaner Seitenwechsel (Flip-flop) von der inneren zur ueren
Schicht und umgekehrt kommt hingegen selten vor.
Die ungleiche Verteilung der Lipide auf die beiden
Seiten der Membran kommt durch ATP-abhngige
Transporter (Flippasen, Floppasen) zustande. Proteinmolekle bewegen sich in der Membran durch
laterale Diffusion (. Abb. 6.5).
Bei Eukaryonten enthalten Plasmamembranen
bis zu einem Molekl Cholesterol pro Molekl polares Lipid (. Tab. 6.4). Cholesterol erniedrigt einerseits die Fluiditt, hemmt aber andererseits den Pha-
77
6.5Biologische Membranen
.. Tab.6.4 Zusammensetzung der Plasmamembran von Zellen hherer Tiere (Richtwerte in Massen-%)
Proteine
50%
Lipide
50%
Cholesterol
25%
Polare Lipide (Schweineerythrozyt)
Kohlenhydrate
110%
Phosphatidylethanolamin
20%
Phosphatidylcholin
20%
Sphingomyelin
20%
Andere
15%
kovalent an Proteine oder Lipide gebunden
.. Abb.6.3 Flssigmosaikmodell biologischer Membranen. Die folgenden Befunde fhrten zum Modell: Polare Lipide bilden
in Wasser spontan Doppelschichten (flchenartig ausgebreitete Vesikel); die Permeabilitt fr kleine Molekle und Ionen
sowie der elektrische Widerstand biologischer Membranen entsprechen einer Lipiddoppelschicht; im Elektronenmikroskop
(Transmission und Gefriertzung) zeigen biologische Membranen eine doppelschichtige Struktur. Das Bild hier stammt aus der
Publikation von S.J. Singer and G.L. Nicolson: Science 175 (1972), 723, worin die Flssigmosaikstruktur biologischer Membranen
erstmals vorgeschlagen worden ist. Die Abbildung gibt eine zu regelmige Struktur der Membran wieder, nicht alle Lipide
haben die gleiche Struktur und auerdem ist bei Eukaryonten Cholesterin ein essenzieller Membranbaustein. Nicht gezeigt
sind der Membran angelagerte Proteine sowie die Kohlenhydratanteile der Glykolipide und Glykoproteine. Das Bild hlt aber
klar das Wesentliche fest: Lipiddoppelschicht, in welche die Proteine mosaikartig eingelagert sind. Wichtig auch, was kein Bild
wiedergeben kann: Biologische Membranen sind dynamische Strukturen, die Lipiddoppelschicht ist flssig, Lipidmolekle
diffundieren schnell und Proteine langsamer in seitlicher Richtung. Die Dicke biologischer Membranen betrgt 57nm, des
hydrophoben Inneren 3nm
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.. Abb.6.4 Supramolekulare Strukturen polarer Lipide in wsserigem Medium. In allen Fllen erreicht das System Lipid/Wasser
ein Energieminimum, indem die hydrophoben Kohlenwasserstoff-Ketten sich aneinanderlagern und den Kontakt mit dem
Wasser meiden (hydrophober Effekt); die polaren Gruppen sind in Kontakt mit den Wasserdipolen. Supramolekulare Strukturen
bilden sich nur mit amphiphilen Lipiden. Neutralfette in Wasser bilden ltropfen ohne hhere innere Ordnung. Aus sterischen
Grnden (zwei Kohlenwasserstoffketten) bilden Membranlipide keine Mizellen. Lipiddoppelschichten schlieen sich hingegen
bei gengender Ausdehnung zu Vesikeln mit abgeschlossenem Innenraum. Experimentell hergestellte Strukturen dieser Art
werden als Liposomen bezeichnet
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.. Abb.6.5ac Experimenteller Nachweis der lateralen Diffusion von Membranproteinen. aFluoreszenzaufnahme einer Zelle,
deren Membranproteine mit einer fluoreszierenden Gruppe markiert sind. bDurch einen intensiven Lichtpuls werden an einer
zirkumskripten Stelle die fluoreszierenden Gruppen zerstrt (gebleicht). cDurch Diffusion gelangen ungebleichte Membranproteine in den gebleichten Bereich. Membranproteine, welche nicht durch Wechselwirkungen mit der extrazellulren Matrix
oder dem Cytoskelett in ihrer Beweglichkeit eingeschrnkt sind, zeigen eine Diffusionsgeschwindigkeit von mehreren m
min1. Membranlipide diffundieren mit einer Geschwindigkeit von1m s1
senbergang vom flssigen in den festen Zustand der

Lipiddoppelschicht. Cholesterol puffert demnach die
Membranfluiditt gegen Vernderungen der Temperatur. Bei Bakterien bestimmt das Verhltnis von
ungesttigten zu gesttigten Fettsureresten in den
Lipiden die Fluiditt der Membran. Die Membranlipide von E. coli-Bakterien, welche bei 27C wachsen, enthalten gleichviel gesttigte und ungesttigte
Fettsuren; bei 42C finden sich hingegen ber 60%
gesttigte Fettsuren in den Membranlipiden.
Die Fluiditt der biologischen Membran ermglicht Formvernderungen und die Teilung
von Zellen. Membranteile knnen sich berdies
ein- oder ausstlpen, sich abschnren und Vesikel
bilden. Umgekehrt kann ein Vesikel mit einer Membran fusionieren, d.h. ber Vesikelabschnrung
und -fusion knnen Membransegmente zwischen
verschiedenen Membranen ausgetauscht werden,
z.B. zwischen dem endoplasmatischen Retikulum
und der Plasmamembran.
79
6.7 Durchlssigkeit biologischer Membranen
.. Abb.6.6 Einbau von Proteinen in biologische Membranen

Integrierte Membranproteine: Bindung an Membran durch hydrophobe Effekte.
1.Transmembran-Proteine sind durch eine oder mehrere hydrophobe -Helices in der Membran verankert.
2.Verankerung in Membran durch einen kovalent ans Protein gebundenen langkettigen Kohlenwasserstoff.
3.ber Oligosaccharid und Phosphatidyl-inositol (Glykosyl-phosphatidyl-inositol (GPI)-Anker) in Membran verankert.
Periphere Membranproteine:
4.Bindung an Membranproteine durch nichtkovalente Wechselwirkungen
6.6 Membranproteine
Proteine knnen in die Membran integriert oder
peripher der Membran angelagert sein Die Art
des Einbaus richtet sich nach der Funktion des

Proteins (.Abb.6.6). Integrierte Membranproteine knnen mittels Detergenzien (Verbindungen
mit einem polaren und einem apolaren Teil) aus
der Membran herausgelst (solubilisiert) werden;
bei peripheren Membranproteinen gengen hierzu
hohe Salzkonzentrationen oder extreme pH-Werte.
Die Raumstruktur von Transmembranproteinen ist
schwierig zu bestimmen. In vielen Fllen knnen
nur die extramembranren Domnen dieser Proteine kristallisiert werden. Oft ist es jedoch mglich,
in ihrer Aminosuresequenz die 2030Reste langen
hydrophoben Helixsegmente zu erkennen, welche
die Membran durchqueren.
Kohlenhydrate der Membran sind kovalent an
Lipide oder Proteine gebunden Glykolipide und
Glykoproteine kommen nur auf der Auenseite der

Plasmamembran und der dem Cytosol abgewandten Seite anderer Membranen vor, z.B. auf der Innenseite der Membranen des Golgi-Apparats und
des endoplasmatischen Retikulums. Die Kohlenhydrate der Plasmamembran spielen eine wichtige
Rolle bei der Zell-Zell-Erkennung.
Biologische Membranen entstehen durch

selbstorganisiertes Wachstum vorbestehender
Membranen Polare Lipide knnen mit geeig-
neten Detergenzien aus der Membran extrahiert

werden. Bei erneuter Zugabe von Lipiden zu einer derart geschdigten Membran kann sich diese
vollstndig und unter Aufrechterhaltung ihrer
Asymmetrie rekonstituieren. Offenbar entspricht
die Anordnung der Proteine und Lipide einem
Energieminimum.
6.7
Durchlssigkeit biologischer
Membranen
Die Lipiddoppelschicht hat die Funktion einer

Permeabilittsschranke und eines elektrischen
Isolators Der elektrische Widerstand und die
Permeabilitt biologischer Membranen fr Molekle und Ionen entsprechen etwa derjenigen einer Lipiddoppelschicht. Ionen und grere polare
Molekle werden kaum durchgelassen. Die meisten Stoffwechselzwischenprodukte sind polar und
werden daher innerhalb der Zelle gehalten. Hingegen ist die Membran fr apolare und kleine polare
Molekle mehr oder weniger durchlssig. Gase
wie O2, CO2 und auch lipidlsliche Fremdstoffe
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3
wie Ethanol, Inhalationsansthetika (fluorierte

Kohlenwasserstoffe), viele Medikamente und Zellgifte diffundieren frei und rasch durch biologische
Membranen.
Inhalationsansthetika
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(heute nicht mehr verwendet)
Lachgas
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Desfluran
(hochfluorinierter Methylethylether)
Links auf
Springer Website:
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Wasser passiert die Membran nicht als Einzelmolekl, sondern als Moleklhaufen, der sich zwischen
den flexiblen Kohlenwasserstoffketten der Lipide
hindurch bewegt. In spezialisierten Membranen
mit hohem Wasserdurchsatz (z.B. Sammelrohre der
Niere, Dnndarmepithel) bilden Proteine aus der
Familie der Aquaporine selektive Wasserkanle.
Ein Kanal, ein Monomer mit sechs Transmembranhelices, lsst ungefhr 109Wassermolekle pro
Sekunde passieren. Aquaporine kommen in allen
Organismen vor. Besondere Transportproteine
besorgen die Translokation spezifischer Molekle
durch bestimmte Membranen (Kap.26).
027-6-1514858-0
6.1 Fettsuren
6.2 Triacylglycerole und Wachse
6.3 Phospholipide und Glykolipide
6.4 Nichtverseifbare Lipide: Steroide, Terpene
und Eikosanoide
6.5 Biologische Membranen
6.6 Membranproteine
6.7 Durchlssigkeit biologischer Membranen
81
Nucleinsuren
7.1
Struktur und Funktion der Nucleinsuren, bersicht 82
7.2
Mononucleotide82
7.3
Nucleinsuren85
7.4
Chromosomen89

82
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Kapitel 7Nucleinsuren
Die Desoxyribonucleinsure (Deoxyribonucleic acid,

DNA) ist die Trgerin struktureller und regulatorischer genetischer Information. Basische Proteine,
die Histone, verpacken die langen DNA-Doppelhelices der Eukaryonten in die Chromosomen. Ribonucleinsuren (Ribonucleic acids, RNAs) setzen
zusammen mit den Aminoacyl-tRNA-Synthetasen
die genetische Information der DNA in die Struktur
von Proteinen um und sind zudem an der Regulation dieses Vorgangs, der Genexpression, beteiligt.
Die Aufklrung der molekularen Mechanismen
der Vererbung und der Umsetzung des Gens ins
Phn (das krperliche Merkmal) ist einer der eindrcklichsten Erfolge der modernen Naturwissenschaft und hat vor einem halben Jahrhundert das
weite Gebiet der Molekulargenetik erffnet. Die in
der Folge geschaffenen experimentellen Mglichkeiten haben zu bahnbrechenden Fortschritten in der
Biologie und der Medizin gefhrt.
zwischen RNA und RNA. Nach dem zentralen

Lehrsatz der Molekularbiologie wird die Information von DNA ber RNA auf Proteine bertragen,
sie gelangt jedoch nicht von den Proteinen zurck
zu den Nucleinsuren (.Abb.7.1).
7.1
stickstoffhaltigen Basen sind Derivate von Pyrimidin oder Purin.
Struktur und Funktion

der Nucleinsuren, bersicht
7.2 Mononucleotide
--
Mononucleotide erfllen in der Zelle drei ganz

verschiedene Funktionen:
Sie sind die Bausteine der DNA und RNA.

Als bertrger chemischer Energie oder bestimmter Moleklgruppen sind sie Cosubstrate
bei vielen Reaktionen des Stoffwechsels.
Gewisse Mononucleotide sind als Signalstoffe
an der Regulation des Stoffwechsels und anderer Prozesse beteiligt.
Mononucleotide bestehen aus drei typischen

Bestandteilen: Base, Pentose und Phosphat Die
Nucleinsuren sind unverzweigte Polymere aus

Nucleotiden Die genetische Information ist in
der Nucleotidsequenz der DNA verschlsselt. Gene

codieren RNAs; gewisse RNAs codieren Proteine,
andere haben regulatorische, strukturelle oder
katalytische Funktionen. In der eukaryontischen
Zelle befindet sich der Hauptteil der DNA im Kern;
kleine Anteile sind in den Mitochondrien und
Chloroplasten zu finden. Die Gre des Genoms
korreliert (von Pflanzen abgesehen) einigermaen
mit der morphologischen Komplexitt des Organismus (.Tab.7.1). Beim Menschen und bei hheren Tieren hat der grte Teil der DNA (>95%)
keine codierende Funktion sondern erfllt regulatorische und andere, noch unbekannte Aufgaben
(Abschn.9.1).
Die DNA besteht aus zwei komplementren
Polynucleotidstrngen. Die RNA ist hingegen einstrngig. Sowohl bei der Replikation der DNA vor
der Zellteilung als auch bei der Expression der genetischen Information (Transkription und Translation) beruht die Weitergabe der Information auf
spezifischer Basenpaarung: (1) in der doppelstrngigen DNA, (2) zwischen DNA und RNA sowie (3)
Die hufigsten Pyrimidinbasen in Nucleotiden sind
Die beiden wichtigsten Purinbasen sind
83
7.2Mononucleotide
.. Tab.7.1 Gre des haploiden Genoms verschiedener Organellen und Organismena

Anzahl Basenpaare
absolut
Lnge der gestreckten DNA (mm)
Relativ (E.coli=1)
Plasmid pBR322
4,410
0,001
0,0014b
Mitochondrien (Mensch)
1,6104
0,003
0,004b
Virus (Bakteriophage )
4,9104
0,011
0,015b
Chloroplasten (Tomate)
1,4105
0,03
0,04b
Escherichia coli
4,6106
1,00
1,36b
Hefe
1,2107
2,6
3,5c
Arabidopsis thaliana (Ackerschmalwand)
1,2108
27
37c
Drosophila melanogaster
1,8108
39
53c
Maus
3,210
695
945c
Mensch
3,4109
739
1005c
Erbse (Pisum sativum)
4,8109
1043
1418c
Weizen (Triticum sativum)
1,71010
3696
5027c
Die Werte basieren auf der Nucleotidsequenz des Genoms oder, im Fall der Erbse, dem C-Wert (DNA-Gehalt einer
Keimzelle); 109bp1pg=1012g DNA.
In diesen Fllen liegt die DNA als Einzelmolekl vor.
In Eukaryonten ist die DNA auf mehrere Chromosomen verteilt.
.. Abb.7.1 bertragung der Information vom

Gen zum Phn. Die Replikation beruht auf der
spezifischen Basenpaarung zwischen einem
Regulation
DNA-Einzelstrang und den DesoxyribonucleomiRNA
tiden, aus denen der zweite, komplementre
siRNA
Strang synthetisiert wird. Bei der Synthese
der mRNA luft der analoge Vorgang mit
Ribonucleotiden ab. Bei der Translation fhrt
die spezifische Basenpaarung zwischen mRNA
und tRNA zum Einbau einer spezifischen
Aminosure an einer bestimmten Position in der Polypeptidkette. Die durch das Codon vorgegebene Aminosure wird vorher
durch eine entsprechende Aminoacyl-tRNA-Synthetase auf die passende tRNA bertragen. Aminoacyl-tRNA-Synthetasen
dienen somit zusammen mit den tRNAs als bersetzer der Nucleinsure-Information in Protein-Information. Die rRNAs sind
Bestandteile der Ribosomen, der molekularen Maschinen, welche Proteine nach dem von der mRNA vorgegebenen Programm
synthetisieren. Kleine RNAs wie siRNA (small interfering RNA) oder miRNA (micro RNA) erfllen genregulatorische Funktionen;
sie binden an bestimmte mRNAs und regulieren deren Aktivitt (vgl. .Tab.7.3)
Absorptionsmaxima
Pyrimidine und Purine und damit Nucleotide
sowie Nucleinsuren besitzen ein Absorptionsmaximum bei 260nm. Das Absorptionsmaximum der Proteine ist vorwiegend durch
Tryptophanreste bedingt und liegt bei 280nm.
Die Basen zeigen Keto-Enol- bzw. Amin-Imin-Tautomerie:
84
1
2
3
4
Das Gleichgewicht liegt dabei stark auf der Seite der

Ketoform. Fr korrekte Basenpaarung muss die
Ketoform vorliegen; durch die Enolform knnen
Fehlpaarungen zustande kommen.
Die Pentosen sind Ribose oder Desoxyribose

Monoribonucleotide und RNA enthalten -D-Ri-
bose; Monodesoxyribonucleotide und DNA enthalten hingegen 2-Desoxy--D-Ribose.
In Nucleosiden sind die Pentosen N-glykosidisch

mit den Pyrimidin- oder Purinbasen verknpft. C1
der Pentose ist mit N1 der Pyrimidinbasen bzw. N9
der Purine verbunden:
Die Nucleoside besitzen Trivialnamen, die von

denen der Basen abgeleitet sind und bei den Pyrimidinnucleosiden auf -idin und bei den Purinnucleosiden auf -osin enden. Wenn sie Desoxyribose enthalten, wird dem Namen Desoxy- (engl.
Deoxy-) vorangestellt.
Der erste, ber eine Esterbindung an die Pentose

gebundene Phosphatrest (-Phosphatgruppe) kann
eine Sureanhydridbindung mit einem zweiten
Phosphatrest (-Phosphatgruppe) eingehen. Eine
weitere Sureanhydridbindung fhrt zu einem dritten Phosphatrest (-Phosphatgruppe). Beide Phosphorsureanhydrid-Bindungen sind energiereiche
Bindungen (.Tab.1.4).
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20
Nucleotide sind Phosphorsureester der

Nucleoside Die Esterbindung befindet sich an
C3 oder C5 der Pentose.
85
7.3Nucleinsuren
.. Tab.7.2 Terminologie der Basen, Nucleoside und Nucleotide

Base
Nucleosid
Ribonucleosidmonophosphat
Desoxyribonucleosidmonophosphat
Nucleosid
diphosphat
Nucleosid
triphosphat
Adenin
Adenosin A
Adenosinmonophosphat
AMP
Desoxy-AMP
dAMP
ADP/dADP
ATP/dATP
Guanin
Guanosin G
Guanosinmono-phosphat
GMP
Desoxy-GMP
dGMP
GDP/dGDP
GTP/dGTP
Cytosin
Cytidin C
Cytidinmonophosphat CMP
Desoxy-CMP
dCMP
CDP/dCDP
CTP/dCTP
Uracil
Uridin U
Uridinmonophosphat
UMP
UDP
UTP
Thymin
Thymidin dT
dTDP
dTTP
Desoxythymidinmonophosphat
dTMP
Im gentechnischen Labor werden die Riboformen der Nucleoside und Nucleotide auch als rATP, rGTP usw. bezeichnet.
.Tab.7.2 zeigt die Terminologie der Basen und der
daraus abgeleiteten Nucleoside und Nucleotide. Die

hufigsten Nucleotide in der Zelle sind ATP, ADP
und AMP. ATP ist der hauptschliche bertrger
chemischer Energie in der Zelle. Der hydrolytische
Abbau von Nucleinsuren durch Nucleasen liefert
Nucleosid-5-monophosphate.
7.3 Nucleinsuren
Nucleinsuren sind lineare Polymere von Mononucleotiden, welche miteinander durch 3,5-Phosphodiesterbrcken verknpft sind (.Abb.7.2).
hnlich wie bei den Polypeptiden bestehen
die Polynucleotidstrnge aus einer Hauptkette
mit periodischer Struktur (-Phosphat-Pentose-Phosphat-Pentose-) und variablen Seitenketten
(Basen) als Trger der Individualitt und Information. Aus der Verknpfungsart der Nucleotide ergeben sich zwei verschiedene Enden des Nucleinsure-Molekls. Gem bereinkunft schreibt man die
Kette in der Richtung vom 5-Phosphat-Ende zum
3-Hydroxyl-Ende ohne Phosphat. Die Nucleotidse-
quenzen von Oligonucleotiden und Nucleinsuren

werden abgekrzt dargestellt: ACTG (manchmal
auch pApCpTpG).
86
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.. Abb.7.2 DNA-Einzelstrang und RNA. Die RNA unterscheidet sich von der DNA dadurch, dass sie Uracil statt Thymin und
Ribose statt Desoxyribose enthlt. Sowohl bei der DNA als auch bei der RNA befindet sich am 5-Ende eine Phosphatgruppe
und am 3-Ende eine freie Hydroxylgruppe
87
7.3Nucleinsuren
Die DNA ist doppelstrngig und bildet eine

Doppelhelix.
2 nm
Zwei helicale, antiparallele Polynucleotidstrnge winden sich rechtsgngig um eine

gemeinsame Achse (Doppelschraube). Die Abbildung ist eine nur leicht modifizierte Version
des Modells, welches von James Watson und
Francis Crick 1953 verffentlicht worden ist.
Terminologie
Rechtsgngige Helix: Jeweils in 53-Richtung gesehen windet sich jeder Einzelstrang
im Uhrzeigersinn um die Helixachse.
Doppelstrngige (double-stranded) und einzelstrngige (single-stranded) Nucleinsuren
werden als dsDNA oder dsRNA bzw. ssDNA
oder ssRNA abgekrzt.
Die Basen liegen im Inneren der Helix, die

hydrophilen Phosphat- und Desoxyribosereste
befinden sich auen. Die Ringebenen der

Basen stehen senkrecht zur Helixachse. Die
Struktur entspricht einer um die Lngsachse
verdrillten Leiter, wobei die Phosphat-Zucker-Ketten die Holme und die Basenpaare die
Sprossen bilden.
Der Helixdurchmesser betrgt 2,0nm. Aufeinanderfolgende Basen sind auf der Helixachse
0,34nm voneinander entfernt. Nach 10Basen
wiederholt sich die Helixstruktur, d.h. die
Ganghhe der Schraube ist 3,4nm.
Die Basenpaarung ist spezifisch: Adenin ist
mit Thymin ber zwei H-Bindungen, Guanin
mit Cytosin ber drei H-Bindungen verbunden. Nur bei A-T und G-C Basenpaaren liegt
jeweils ein H-Donoratom gegenber einem
H-Akzeptoratom. Die glykosidischen Bindungen der Purin-Pyrimidin-Basenpaare sind
immer gleich weit voneinander entfernt, die
88
Sprossen der Leiter sind immer gleich lang:

Ein Purin-Purin-Paar wre zu lang und ein
Pyrimidin-Pyrimidin-Paar zu kurz.
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Die H-Bindungen zwischen den Basen der

komplementren Strnge sowie hydrophobe
Effekte und Van-der-Waals-Krfte zwischen
den aufeinandergestapelten Basen (Base-stacking effects) stabilisieren die Doppelhelix.
Bei der Basenpaarung liegen die beiden
Zuckerreste nicht genau gegenber auf dem
Durchmesser der Doppelhelix, d.h. die
Leitersprossen fhren nicht durch deren
Lngsachse. Die Windungen der beiden
Helices liegen deshalb alternierend nher und
weiter voneinander, an der Oberflche der
Doppelhelix ergeben sich eine groe und eine
kleine Furche.
Die DNA kann neben der Watson-Crick-Doppelhelix, die als B-DNA bezeichnet wird, auch eine
Doppelschraube bilden, in welcher beide Strnge
nicht rechts-, sondern linksgngig verlaufen. Die
Phosphat-Zucker-Hauptkette verluft dabei im
Zickzack, weshalb diese Form Z-DNA genannt wird.
In GC-reichen Segmenten geht B-DNA besonders
leicht in die Z-Konformation ber. Die biologische
Bedeutung der Z-DNA-Struktur ist unklar.
Die Doppelhelixstruktur der DNA hat wichtige

Konsequenzen:
Die Basensequenz auf einem Polynucleotidstrang ist in keiner Weise eingeschrnkt.

Die Anzahl der Adeninreste ist bei allen DNAs,
unabhngig von der Spezies, gleich der Anzahl
der Thyminreste und die Anzahl der Guaninreste ist gleich der Anzahl der Cytosinreste:
A = T
G = C
(Purin) (Pyrimidin) (Purin) (Pyrimidin)

Die Summe der Purinreste ist damit gleich der
Summe der Pyrimidinreste:
ACG DTCC
Bei gegebener Basensequenz des einen Strangs

ergibt sich zwangslufig die Basensequenz des
zweiten Strangs: Die beiden Strnge sind kom-
89
7.4Chromosomen
plementr zueinander und enthalten damit

einander entsprechende Sequenzinformation.
Die Komplementaritt der beiden Strnge
liefert den Schlssel fr das Verstndnis der
Replikation der DNA bei der Zellteilung unter
Erhaltung der genetischen Information.
Ein berhmter Satz

It has not escaped our notice that the specific
pairing we have postulated immediately suggests a possible copying mechanism for the
genetic material. Aus der ersten Mitteilung
von James D. Watson und Francis H.C. Crick
ber das Doppelhelixmodell der DNA: Nature
171 (1953) 737738.
Die Replikation der DNA erfolgt semikonservativ

Bei der Synthese von DNA wird der Doppelstrang
geffnet, und jeder Einzelstrang determiniert jeweils

die Basensequenz eines komplementren Tochterstrangs. Die zwei neuen DNA-Doppelstrnge bestehen je aus einem Elternstrang und einem neu
synthetisierten Tochterstrang:
Die DNA kann schmelzen Bei hheren Tempe-
raturen (7090C) lsen sich die Einzelstrnge

voneinander (Schmelzen, Melting). Dieser mit
der Hitzedenaturierung von Proteinen vergleichbare Vorgang kann sehr einfach anhand der Zunahme der Absorption bei 260nm verfolgt werden.
GC-reiche DNA-Abschnitte haben einen hheren
Schmelzpunkt, da zwischen G und C drei und zwischen A und T nur zwei H-Bindungen zu lsen sind.
Die Renaturierung (Annealing) beim Abkhlen auf
niedrigere Temperatur fhrt zur vollstndigen Wiederherstellung der Doppelhelixstruktur.
Nucleinsuren mit komplementrer Basensequenz knnen hybridisieren Ein DNA-Einzel-
strang kann mit einem anderen DNA-Einzelstrang,

welcher eine grtenteils komplementre Basen-
sequenz aufweist (z.B. das gleiche Protein in einer

anderen Spezies codiert), eine hybride Doppelhelix
bilden. Zur Herstellung eines solchen DNA-DNA-Hybrids werden durch Erhitzen oder hohe pH-Werte
DNA-Einzelstrnge erzeugt und bei tieferer Temperatur und neutralem pH mit der komplementren
DNA hybridisiert. Alle Arten von Hybriden zwischen Nucleinsure-Einzelstrngen kommen vor:
DNA-DNA, DNA-RNA und RNA-RNA.
Die RNA ist in der Regel einstrngig Die kovalente Struktur der RNA unterscheidet sich von der
DNA-Struktur in zweierlei Hinsicht: Der Zucker in
der RNA ist Ribose statt Desoxyribose und anstelle
von Thymin kommt die nichtmethylierte Pyrimidinbase Uracil vor (Abschn.7.2). Die RNA-Molekle
sind mit Ausnahme einiger Virus-RNAs einstrngig.
Durch die Bildung so genannter Haarnadelschleifen
(Hairpin loops) ergeben sich jedoch auch Abschnitte
mit Doppelstrangstruktur. Die Basenpaarung ist nicht
so genau wie bei der DNA-Doppelhelix, z.B. paart
sich Uracil nicht nur mit A, sondern auch mit G.
RNA ist an der Expression der genetischen

Information beteiligt Die Gene bestimmen die
Aminosuresequenzen der Proteine. Die DNA ist

jedoch nicht die direkte Matrize fr die Proteinsynthese. Diese Aufgabe bernehmen mRNA-Molekle
(Kap.10). An der Proteinsynthese sind zudem
tRNA und rRNA beteiligt (.Tab.7.3). Die Auswahl der korrekten Aminosure treffen Aminoacyl-
tRNA-Synthetasen, welche die Aminosure kovalent an die passende tRNA koppeln (Kap.10).
Kleine RNAs (siRNA und miRNA, Abschn.11.3)
sind genregulatorisch wirksam.
7.4 Chromosomen
Die kleinen Genome von Bakterien und Viren sind
meist ringfrmig Bei Organismen mit kleinem
Genom wie Bakterien (.Tab.7.1) ist die gesamte

Erbinformation in einem oder mehreren ringfrmigen oder seltener linearen DNA-Moleklen enthalten und es sind eine bis ein paar wenige Kopien
des Genoms pro Zelle vorhanden. Die DNA bildet
zusammen mit basischen Proteinen, welche den
chromosomalen Proteinen von Eukaryonten entsprechen, das Nucleoid. Die Mitochondrien und
Chloroplasten der Eukaryonten besitzen ebenfalls
90
.. Tab.7.3 An der Proteinsynthese beteiligte RNA-Typen (vgl. Abb.7.1)

Massenanteil
in der Zelle (%)
Anzahl Nucleotide
mRNA, messenger RNA

Informationsbertrger von DNA zu Ribosom
variabel
tRNA, transfer RNA

Spezifische Trger der Aminosuren
15
75
rRNA, ribosomale RNA

Bestandteil der Ribosomen (Proteinsynthesemaschinen)
80
Prokaryonten
2900, 1500, 120
Eukaryonten
4700, 1900, 160, 120
snRNA, small nuclear RNA

Bestandteil der snRNPs
in Spleiosomen
wenig
100200
miRNA, micro RNA

Regulation: Abbau der mRNA, Hemmung der Proteinsynthese
wenig
2125
siRNA, small interfering RNA

Regulation: Abbau der mRNA
wenig
1923
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20
ein ringfrmiges DNA-Molekl mit einigen wenigen Genen. Auch die Nucleinsuren der Viren und
Plasmide sind zumeist ringfrmig.
Wie wird die DNA in Bakterienzellen gepackt?
Die gestreckte DNA von E. coli wre etwa 1000-mal
lnger als die Zelle. Das Packungsproblem wird
durch Verdrillung (Supercoiling) der ringfrmigen DNA zur kompakten DNA-Superhelix gelst
(.Abb.7.3). In der Zelle ist die DNA vorwiegend
im negativen Drehsinn verdrillt. Die DNA wird
hierbei in entgegengesetztem Sinn zur rechtshndigen Doppelhelix verdrillt, d.h. fr jede neu entstehende Windung in der Superhelix wird eine Windung in der Doppelhelix aufgehoben. Eine negative
Superhelix begnstigt daher die Trennung der Elternstrnge bei der Replikation.
Eukaryontische DNA ist linear und in Chromosomen verpackt Jedes Chromosom enthlt ein li-
neares DNA-Molekl mit freien Enden. Die gesamte

Lnge der 46 DNA-Molekle in einer diploiden
menschlichen Zelle betrgt etwa 2m; durch basische
Proteine (Histone) und andere Kernproteine wird
die DNA in die Chromosomen verpackt. Die Masse
der Chromosomen verteilt sich etwa hlftig auf DNA
und Proteine. Als Chromosomen wurden ursprnglich die nach Anfrbung im Lichtmikroskop sichtbaren Strukturen in Metaphase-Zellen bezeichnet. Im
Interphase-Kern ist die Struktur der Chromosomen

stark aufgelockert; sie fllen als Chromatin mehr
oder weniger gleichmig den Kernraum aus.
Nucleosomen sind die strukturellen Einheiten

des Chromatins Ein Chromosom ist etwa 10000-
mal krzer als das darin enthaltene DNA-Molekl.

Der hohe Verdichtungsgrad zeigt, dass die DNA
wie alle anderen biologischen Makromolekle nicht
nur eine dynamische sondern auch eine sehr flexible Struktur hat. In Eukaryonten bilden Histone
die Nucleosomen als erste Stufe der verdichtenden
Packung der DNA (.Abb.7.4). Die nucleosomalen
Histone H2A, H2B, H3 und H4 sind kleine Proteine
(102135Aminosurereste), die viel Lys und Arg
enthalten und das Histon-Oktamer, den Kern des
Nucleosoms, bilden. Die positiven Ladungen dieser basischen Seitenketten binden an die negativ
geladenen Phosphatgruppen der DNA. Die elektrische Neutralisierung der negativen Ladungen der
DNA durch die positiv geladenen Histone ist eine
zwingende Voraussetzung fr die dichte Packung
der DNA. H3 und H4 gehren zu den allerkonservativsten Proteinen; offenbar sind praktisch alle
ihre Aminosurereste funktionell wichtig. Das dem
Nucleosom aufgelagerte Histon H1 ist grer (etwa
220Aminosuren), und seine Sequenz ist weniger
konserviert.
91
7.4Chromosomen
11 nm
.. Abb.7.3 Verdrillung ringfrmiger DNA zu einer Superhelix. In Bakterien werden negative Supercoils durch ein
Enzym, die TopoisomeraseII (Gyrase) unter ATP-Verbrauch
eingefhrt. Dabei werden Phosphoesterbindungen in beiden
Strngen der DNA gespalten und nach Vernderung der
Topologie wieder zusammengefgt. Die TopoisomeraseI ermglicht den umgekehrten Vorgang, das Entdrillen der supercoiled DNA. Dabei wird in einer ATP-unabhngigen Reaktion
nur ein Strang gespalten und wieder zusammengefgt.
30 nm
.. Abb.7.4 Packung der DNA in Chromatin. aModell eines

Nucleosoms. Je zwei Kopien der vier nucleosomalen Histonproteine bilden den oktameren Kern des Nucleosoms (H2A,
H2B, H3, H4)2, um welchen die DNA in zwei Schlingen von
insgesamt 146bp gewunden ist. Die Lnge der Linker-DNA
zwischen den Nucleosomen betrgt gewhnlich 55bp, kann
aber je nach Gewebe und Spezies von etwa 10 bis ber
100bp variieren. Histon H1 ist auen angelagert; es bindet an
die DNA, welche zwischen benachbarten Nucleosomen liegt,
und stabilisiert die weitere schraubenfrmige Packung der
Nucleosomen.
bNucleosomenfilament. cChromatinfaser,
entsteht durch Anordnung des Filaments in Schraubenform
(wie hier gezeichnet) oder in Zickzackform. An den weiteren
Verdichtungsstufen (Schleifen, schraubenartige Anordnung
der Schleifen) sind die Nichthistonproteine des Chromatins
beteiligt.
92
1
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7
Das Nucleosomenfilament (Durchmesser

11nm) faltet sich zu Chromatinfasern von 30nm
Durchmesser auf. ber die noch strker verdichteten Chromatinstrukturen hherer Ordnung, an
deren Stabilisierung die Nichthistonproteine des
Kerns beteiligt sind, ist noch wenig bekannt. Fr die
Replikation und Transkription wird die DNA segmentweise von den Nucleosomen freigesetzt. Auch
die fr die Regulation der Transkription wichtigen
Transkriptionsfaktoren (Abschn.11.2) binden an
nucleosomenfreie DNA-Abschnitte.
Die ringfrmigen Genome der Mitochondrien
und Chloroplasten sind nicht in Nucleosomen
verpackt. In Spermien, deren DNA ja nicht transkribiert wird, sorgen basische Protamine anstelle
der Histone fr eine besonders dichte Packung der
DNA.
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7.1 Struktur und Funktion
der Nucleinsuren, bersicht
7.2 Mononucleotide
7.3 Nucleinsuren
7.4 Chromosomen
93
Molekulare Genetik
Kapitel 8
Replikation, Reparatur und Rekombination

der DNA95
Kapitel 9
Transkription: Biosynthese der RNA 107

Kapitel 10
Translation: bersetzung des Gens ins Phn 117

Kapitel 11
Regulation der Genexpression 127

Kapitel 12
Plasmide, Viren, Viroide und Prionen 139

II
95
Replikation, Reparatur
und Rekombination der DNA
8.1
DNA-Replikation bei Prokaryonten 96
8.2
DNA-Replikation bei Eukaryonten 100
8.3
DNA-Schden und Reparatursysteme 102
8.4
Genetische Rekombination105

96
1
2
3
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5
6
7
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12
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18
19
20
Kapitel 8 Replikation, Reparatur und Rekombination der DNA
Die Verdoppelung der DNA ist Voraussetzung fr

die mitotische Zellteilung: Fr die beiden Tochterzellen wird je eine identische Kopie der DNA
bereitgestellt. Die DNA-Biosynthese verluft in
drei Phasen: Initiation, Elongation und Termination. Die Weitergabe der genetischen Information
beruht auf spezifischer Basenpaarung. Die DNA
wird semikonservativ repliziert, die DNA-Doppelhelices der Tochtergeneration bestehen aus
je einem der beiden Elternstrnge und einem
neusynthetisierten komplementren Tochterstrang. Der Multiprotein-Replikationskomplex
produziert gleichzeitig die zwei neuen gegenlufigen Tochterstrnge. Der eine Tochterstrang wird
kontinuierlich durch Anknpfen eines Nucleotids
nach dem anderen an das 3-OH-Ende verlngert. Der andere Tochterstrang wird ebenfalls in
53-Richtung, jedoch stckweise, synthetisiert
(Okazaki-Fragmente; .Abb.8.1). Die Replikationsmaschinerie berprft die Komplementaritt
der neusynthetisierten Strnge und korrigiert
allenfalls auftretende Fehler. Die hohe Przision
des Replikationsvorgangs zusammen mit hochwirksamen Reparatursystemen garantiert, dass
in einer Sugerzelle im Durchschnitt pro Replikationsrunde nur etwa ein Fehler pro 109 replizierte
Basen eingefhrt wird.
Fehlerfrequenz bei Zellteilung
Das haploide menschliche Genom enthlt
3109Basenpaare (bp). Bei jeder Teilung
einer Zelle sind demnach mehrere Fehler zu
erwarten.
Die DNA-Synthese ist zuerst bei Prokaryonten, insbesondere bei E. coli, eingehend untersucht worden.
Grundstzlich verlaufen die meisten Schritte bei Eukaryonten hnlich. Der Hauptunterschied liegt darin, dass sich bei Eukaryonten mit ihren wesentlich
greren Genomen komplexere Regulationsmechanismen der Genexpression ausgebildet haben.
Die DNA-Reparatursysteme sind frh in der
biologischen Evolution entstanden und funktionieren bei allen Lebewesen auf hnliche Art und
Weise. Sie stabilisieren das Genom und wirken den
Alterungsprozessen und der Tumorentstehung entgegen.
Die Rekombination von Genen und Genteilen

zusammen mit Punktmutationen ermglicht die
genetische Anpassung an vernderte Bedingungen
und die biologische Evolution.
8.1 DNA-Replikation
bei Prokaryonten
Zur DNA-Synthese braucht die DNA-Polymerase

smtliche vier Desoxyribonucleosid-Triphosphate,
Mg2+-Ionen, sowie einen DNA-Matrizenstrang mit
einem damit gepaarten Primer (Startermolekl),
d.h. einen vorbestehenden DNA- oder RNA-Strang
mit freier 3-OH-Gruppe. Die DNA-Polymerase
katalysiert das Anfgen einer Desoxyribonucleotid-Einheit nach der anderen an das 3-OH-Ende des
wachsenden Strangs; der neue Strang kann nur in
53-Richtung verlngert werden (.Abb.8.2).
Terminologie
Die 53-Richtung wird beibehalten fr
die Synthese von RNA und das Ablesen der
Codons bei der Proteinsynthese. Diese Richtung wird als stromabwrts (downstream)
bezeichnet.
Beide Strnge der Eltern-DNA dienen je einem

Molekl der DNA-Polymerase als Matrize Die
Replikationsgabel, an welcher die Replikation vor
sich geht, bewegt sich lngs der Eltern-Doppelhelix, wobei sich die Replikationsgabel fortwhrend
weiter ffnet (.Abb.8.1). Der Leitstrang (Leading
strand), der in Richtung auf die Replikationsgabel
wchst, wird ohne Unterbrechung synthetisiert.
Bakterielle DNA-Polymerasen koppeln etwa
500Nucleotide pro Sekunde an das 3-OH-Ende
des wachsenden DNA-Strangs. Beim an sich einfachen Prinzip der semikonservativen Replikation ist
sogleich eine Schwierigkeit zu erkennen: Die zwei
Tochterstrnge verlaufen antiparallel zueinander,
die DNA-Polymerase kann jedoch die Tochterstrnge nur in 53-Richtung synthetisieren.
Das Problem der gegenlufigen Verlngerung des
Folgestrangs (Lagging strand), welcher von der
Replikationsgabel wegwchst, wird dadurch gelst, dass er stckweise aufgebaut wird. Die Oka-
97
8.1 DNA-Replikation bei Prokaryonten
.. Abb.8.1 Replikationsgabel mit kontinuierlich synthetisiertem Leitstrang und Folgestrang aus Okazakifragmenten
zaki-Fragmente umfassen 10002000Nucleotide
bei Bakterien und nur 100200 Nucleotide bei

Eukaryonten.
Die DNA-Polymerase braucht einen RNA-Primer Bei Bakterien katalysiert die DNA-abhngige DNA-Polymerase III (Pol III) die Verlngerung
sowohl des Leitstrangs als auch des Folgestrangs;

sie bentigt hierzu ein Starter-Oligonucleotid mit
freier 3-OH-Gruppe. RNA-Polymerasen hingegen brauchen keinen Primer, sie knnen die
Polymerisierung mit einem einzelnen Nucleotid beginnen. Eine besondere RNA-Polymerase,
die DNA-Primase, synthetisiert daher einen dem
Anfang des Eltern-DNA-Strangs komplementren RNA-Primer von etwa 10 Nucleotiden. Die
Synthese des Leitstrangs bentigt nur am Anfang einen RNA-Primer; beim Folgestrang muss
hingegen fr die Synthese jedes einzelnen Okazaki-Fragments ein Primer bereitgestellt werden.
Die Synthese eines Okazaki-Fragments wird abgebrochen, sobald Pol III beim nchsten Primer
angelangt ist. Zur Bildung eines durchgehenden
DNA-Folgestrangs werden die RNA-Primer hydrolytisch abgebaut durch die 5-3-Exonucleaseaktivitt der DNA-PolymeraseI, welche die RNA von
DNA-RNA-Hybriden in einzelne Mononucleotide
spaltet. Die dabei entstehenden Lcken zwischen
den DNA-Abschnitten werden durch dasselbe Enzym mit Desoxyribonucleotiden aufgefllt. Pol I
besitzt drei enzymatische Aktivitten: 5-3-Exonuclease zum Entfernen von RNA-Primern, Polymerase zum Ankoppeln von Desoxynucleotiden
und 3-5-Exonuclease fr das Korrekturlesen (s.
unten).
.. Abb.8.2 Verlngerung der Polynucleotidkette durch

DNA-Polymerase. Ein Desoxyribonucleotid wird an das
3-OH-Ende eines vorbestehenden und mit dem Matrizenstrang basengepaarten Primers (Startstrangs) gekoppelt.
Durch nucleophilen Angriff der freien 3-OH-Gruppe des
Primers auf das -Phosphoratom des Nucleotids entsteht
eine Phosphodiesterbrcke (.Abb.7.2). Auf dieselbe Weise
werden weitere Nucleotide angehngt; der neue Strang
wchst demnach in 53-Richtung. Die Polymerase bildet
die Phosphodiesterbrcke nur, wenn das neue Nucleotid eine
Basenpaarung mit dem Matrizenstrang eingeht. Der Matrizenstrang bestimmt daher, welches Desoxyribonucleotid
(A, G, T, C) an den Tochterstrang gekoppelt wird. Die Reaktion
wird angetrieben durch die Spaltung von zwei energiereichen
Phosphorsureanhydridbindungen: NTP +H2O NMP +PPi
und PPi +H2O 2 Pi. Die Hydrolyse von PPi wird durch die in
allen Zellen vorkommende Pyrophosphatase (anorganische
Diphosphatase) katalysiert
Die DNA-Ligase verknpft die einzelnen

DNA-Stcke DNA-Ligasen verknpfen gespal-
tene Phosphodiesterbrcken in einem Strang eines DNA-Doppelstrangs. Brche im Strang (engl.

Nicks), wie sie zwischen den einzelnen aufgefllten
Okazaki-Fragmenten bestehen, werden ebenfalls
auf diese Weise repariert. Die Energie fr diese
Reaktion wird bei E. coli durch Koppelung an die
Hydrolyse von NAD+ (.Abb.14.2) zu Nicotinamid-Mononucleotid+AMP und bei Eukaryonten
98
ist; (2) Pol III, welche den grten Teil der DNA
synthetisiert, wie auch Pol I besitzen zudem eine
korrekturlesende 3-5-Exonucleaseaktivitt, die
ungepaarte, d.h. dem Matrizenstrang nicht komplementre, Nucleotide vom wachsenden 3-Ende
entfernt.
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.. Abb.8.3DNA-Ligase. Ein AMP-Rest, der von NAD+ (bei

E.coli) oder ATP (bei Eukaryonten) stammt, aktiviert die freie
5-Phosphatgruppe des Downstream-Segments. Durch nucleo
philen Angriff der 3-OH-Gruppe des Upstream-Segments auf
das entstandene Phosphorsureanhydrid entsteht die beide
Segmente verbindende Phosphodiesterbrcke
durch die Hydrolyse von ATP zu AMP+PPi geliefert (.Abb.8.3).

Blunt-end ligation in Gentechnik
Die ATP-abhngige DNA-Ligase des Bakteriophagen T4 kann bei hohen DNA-Konzentrationen zwei beliebige glattendige DNA-Duplexe
miteinander verbinden (Blunt-end ligation).
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Zwei Korrekturlese-Mechanismen garantieren die

hohe Genauigkeit der DNA-Replikation: (1) Die
DNA-Polymerasen knnen einen Primer nur ver-
lngern, wenn er einschlielich des Nucleotids am

3-OH-Ende mit dem Matrizenstrang basengepaart
Das Entfernen ungepaarter Nucleotide vom 3-OHEnde erhht die Genauigkeit der Replikation. Die
Fehlerfrequenz von PolIII ist etwa 107, ohne Korrekturlesemechanismen wre sie 106105. Zustzliche Reparatursysteme, die erst nach der Synthese
der DNA wirksam werden, erhhen die Genauigkeit
weiter, so dass die Mutationsrate109 pro repliziertes Basenpaar betrgt.
Die Replikation beginnt am Origin An der bis
zu 300bp langen Startstelle (Origin of replication),
einem DNA-Segment mit vielen A-T Paaren (nur
zwei H-Bindungen!), entsteht die Replikationsblase, deren zwei Replikationsgabeln sich in entgegengesetzter Richtung vom Origin weg bewegen.
Das ringfrmige bakterielle Chromosom enthlt
nur ein Origin, dementsprechend bildet sich nur
eine Replikationsblase:
99
Bildung zweier Replikationskomplexe, die sich in

entgegengesetzter Richtung vom Origin entfernen,
ist die Initiation der Replikation abgeschlossen.
Whrend der Elongation werden der
Leitstrang und der Folgestrang durch je ein helicase-gebundenes Pol III-Molekl synthetisiert,
Zur Bildung der Replikationsblase binden mehrere

Kopien des Initiatorproteins DnaA ans Origin und
ffnen unter ATP-Verbrauch den Doppelstrang. Darauf bindet die DNA-Helicase an den Matrizenstrang
des jeweiligen Folgestrangs und entwindet die DNA.
Das natrlich vorkommende negative Supercoiling
der DNA (.Abb.7.3) erleichtert die Entwindung,
ist aber auf einen negativen Supercoil pro 20bp limitiert. Die Helicase bewegt sich in 53-Richtung
lngs des Matrizenstrangs des Folgestrangs und
zwingt unter ATP-Verbrauch die beiden Strnge
auseinander (.Abb.8.4). Das Binden zahlreicher Molekle des Einzelstrang-Bindungsproteins
(Single-strand binding protein SSB) verhindert, dass
die Einzelstrnge reassoziieren. Nach Synthese von
RNA-Primern durch die DNA-Primase beginnt Pol
III mit der Synthese des Leitstrangs bzw. des ersten Okazaki-Fragments des Folgestrangs. Mit der
.. Abb.8.4 Synthese von

Leitstrang und Folgestrang
durch den Replikationskomplex
von zwei DNA-Polymerase
III-Moleklen und Hilfsproteinen (der Komplex umfasst
weitere Proteine, die hier
nicht aufgefhrt sind). Durch
Bildung einer Schleife der
Folgestrang-Matrize knnen
beide Tochterstrnge gleichzeitig an der Replikationsgabel
synthetisiert werden. Nach
Synthese eines Okazaki-Fragments dissoziiert Pol III vom
Folgestrang und beginnt neu
mit der Synthese am Primer des
nchsten Okazaki-Fragments
welches sich mit der Replikationsgabel vom Origin

wegbewegt. Der Matrizenstrang des Folgestrangs
bildet eine Schleife, so dass beide Polymerasen des
Komplexes an der Replikationsgabel ihren Matrizenstrang in 35-Richtung ablesen knnen
(.Abb.8.4).
Die TopoisomeraseII (DNA-Gyrase; .Abb.7.3)
lst das bei der Wanderung einer Replikationsgabel
auftretende topologische Problem: Bei der ffnung der DNA-Doppelhelix in zwei Einzelstrnge
msste sich die stromabwrts liegende, noch nicht
replizierte, Doppelhelix um ihre Lngsachse drehen.
Da die B-DNA 10bp pro Windung aufweist, msste
jedes Mal, wenn die Replikationsgabel um weitere
10bp vorrckt, eine volle Drehung stattfinden. Bei
der zirkulren DNA von Bakterien ist eine Rotation
gar nicht mglich; es wrden positive Supercoils
(.Abb.7.3) eingefhrt. Bei Eukaryonten knnen
die Chromosomen im Zellkern ebenfalls nicht mit
der notwendigen Geschwindigkeit rotieren. Die
DNA-Topoisomerase II lst das Problem, indem sie
beide Strnge der DNA spaltet. Dadurch werden die
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vor und nach der Spaltstelle liegenden DNA-Stcke

frei gegeneinander drehbar; die DNA kann relaxieren und wird danach von der Topoisomerase wieder
ligiert.
Topoisomerase II-Hemmer
Die TopoisomeraseII ist unbedingt notwendig
fr die DNA-Replikation. Hemmstoffe bakterieller oder eukaryontischer TopoisomeraseII
kommen als Antibiotika bzw. Zytostatika in
Frage.
Der Leitstrang und die Okazaki-Fragmente werden kontinuierlich synthetisiert Pol III gleitet
auf dem Matrizenstrang von einer Base zur nchsten und katalysiert die Bildung von vielen tausend
Phosphodiesterbrcken, bevor sie von der DNA
dissoziiert (hohe Prozessivitt von Pol III). Pol I
hingegen, welche die Lcken zwischen den Okazaki-Fragmenten auffllt, bildet nur etwa 20Phosphodiesterbrcken in ununterbrochener Folge. Der
Replikationsgabel-Komplex ist eine Multiproteinmaschine aus zehn verschiedenen Proteinen mit
einer Gesamtmasse von 900kDa, welche die verschiedenen katalytischen Aktivitten (Polymerase,
5-3-Exonuclease, 3-5-Exonuclease) zusammenbringt. Die dimere Struktur des Komplexes erlaubt
die gleichzeitige Replikation beider Elternstrnge
an der Replikationsgabel. Die kontinuierliche bzw.
diskontinuierliche Synthese von Leitstrang und
Folgestrang bedingt den asymmetrischen Bau des
Komplexes, dessen beide Hlften zum Teil aus verschiedenen Polypeptidketten bestehen. Die hohe
Prozessivitt von Pol III ist auf deren zwei -Untereinheiten zurckzufhren, welche eine Klammer
um den Matrizenstrang (Clamp) bilden und den
Komplex der DNA entlang fhren.
--
8.2 DNA-Replikation
bei Eukaryonten
Die DNA der Eukaryonten wird grundstzlich auf

gleiche Weise wie in Prokaryonten synthetisiert
Die folgenden Unterschiede sind hervorzuheben:
Eukaryontische Zellen replizieren die DNA
nur whrend der S-Phase (Synthesephase)
des Zellzyklus (Kap.24). In Bakterien wird
whrend der Zellvermehrung dauernd DNA

synthetisiert.
Tierische Zellen enthalten mindestens

fnf verschiedene DNA-Polymerasen
(.Tab.8.1).
Eukaryontische Chromosomen besitzen viele
Origins of replication. Die DNA-Polymerase
koppelt nur etwa 50Nucleotide pro Sekunde
an, d.h. ist 10-mal langsamer als Pol III von E.
coli. Eine eukaryontische Zelle enthlt zudem
viel mehr DNA (.Tab.7.1). Mit einem einzigen Origin wrde die Replikation des lngsten
menschlichen Chromosoms ber einen Monat
dauern. Auf eukaryontischen Chromosomen
finden sich jedoch Origins im Abstand von
3300Kilobasen (kb). Die Vielzahl der Replikationsgabeln (>10000Origins im menschlichen Genom) verkrzt die Synthesezeit auf
einige Stunden:
Die drei DNA-Polymerasen von E. coli

Pol I: Entfernen der RNA-Primer, Fllen
der entstehenden Lcken im Folgestrang,
Korrekturlesen,
Pol II: Reparatur,
Pol III: Replikation, Korrekturlesen.
Alle vorbestehenden Histone bleiben an der Tochter-Doppelhelix, welche den Leitstrang enthlt,
gebunden. An die Tochter-Doppelhelix mit dem
Folgestrang lagern sich neu synthetisierte Histone.
Eukaryontische DNA ist linear, wodurch sich
bei der Synthese der 5-Enden der Tochterstrnge ein Problem ergibt Nach Entfernen
der RNA-Primer knnen die 5-Enden der
101
8.2 DNA-Replikation bei Eukaryonten
.. Tab.8.1 Funktionen eukaryontischer DNA-Polymerasen

DNA-Polymerase
Synthese von RNA-Primerna und deren Verlngerung mit dNTPs
Reparatur
Replikation der
Mitochondrien- und
Chloroplasten-Genome
Replikation, Korrekturlesen, Reparatur; enthlt

PCNAb
Reparatur,
Replikation
DNA-Polymerase enthlt 5Untereinheiten, darunter eine mit Primase-Aktivitt b PCNA (Proliferating cell nuclear antigen), reagiert mit Seren gewisser Patienten mit Lupus erythematodes, einer Autoimmunkrankheit) bildet Gleitklammer, die wichtig ist fr die Prozessivitt der DNA-Polymerase.
Tochterstrnge nicht aufgefllt werden, weil

fr das Ansetzen der Polymerase kein freies 3Ende vorhanden ist und fr die Synthese eines
Primers ein Matrizenstrang fehlt:
Bei jeder Zellteilung wird die lineare Eukaryonten-DNA unvermeidlich um die Lnge der RNA-Primer gekrzt und an den Enden der Chromosomen
liegende Gene wrden mit der Zeit eliminiert. Das
Problem wird dadurch gelst, dass besonderere
DNA-Abschnitte, die keine genetische Information
enthalten, beide Enden der chromosomalen DNA
verlngern. Diese Telomere (griech. telos, Ende)
werden stckweise bei der Zellteilung geopfert. Die
Telomere aller Eukaryonten sind einander sehr hnlich: Der Matrizenstrang der Telomer-DNA besteht
aus einigen hundert Wiederholungen einer Hexanucleotidsequenz (bei Vertebraten TTAGGG). Der
komplementre Strang ist 1216Nucleotide krzer.
Bei jeder Replikation gehen 50200Nucleotide der
Telomere verloren. Spermien, Oozyten und Zellen,
.. Abb.8.5 Mechanismus der Telomerase. Der Ribonucleo

protein-Komplex fungiert als reverse Transkriptase mit
eingebauter RNA-Matrize. Eine zur repetitiven (TTAGGG)n-Sequenz komplementre RNA ist Teil des Enzymkomplexes
und dient als Matrize fr die Verlngerung des 3-Endes des
Telomerenstrangs. Das 5-Ende wird darauf durch normale
Folgestrangsynthese aufgefllt
welche sich in Kultur permanent teilen (permanente

Zelllinien sowie niedere Eukaryonten wie Hefe),
besitzen Telomerase, einen Protein-RNA-Komplex, der Telomere synthetisiert und sie trotz Zellteilungen auf konstanter Lnge hlt. Als Matrize
dient ein Segment des RNA-Teils der Telomerase
(.Abb.8.5). Somatische Zellen vielzelliger Organismen besitzen hingegen keine Telomerase und
sind daher nicht unbegrenzt teilungsfhig (Abschn.24.5).
Mitochondrien und Chloroplasten besitzen
ihre eigene, ringfrmige DNA, welche durch die
DNA-Polymerase ber einen besonderen Mechanismus repliziert wird. Die DNA menschli-
102
.. Tab.8.2 DNA-Schden und zustndige Reperaturprozessea

Agenzien
Rntgenstrahlung
O2-Radikale
Alkylierende Rea
genzien
Spontane Reaktionen
(Hydrolyse, Des
aminierung)
UV-Licht
Polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe
Rntgenstrahlung
Chemotherapien
z.B. cis-Platin, Mito
mycin C
Replikationsfehler
DNA-
Schden
Fehlpaarungen (Uracil)
Basenelimination
Strangbrche
8-Oxoguanin
Pyrimidindimere und
weitere Photoprodukte
Ausgedehnte
DNA-Modifikationen
Quervernetzung
zwischen den beiden
Strngen
Doppelstrangbrche
A-G Fehlpaarungen
T-C Fehlpaarungen
Insertionen
Deletionen
DNA-
Reparatur
Basenexzisions
reparatur
Nucleotidexzisions
reparatur
Rekombinations
reparatur
Fehlpaarungs
(Mismatch)-Reparatur
a
Die unmittelbaren Konsequenzen von DNA-Schden sind Blockierung des Zellzyklus sowie Hemmung der Transkription, Replikation und Chromosomen-Segregation (Abschn.24.3); alles Strungen, welche Apoptose (programmierten Zelltod; Abschn.24.6) auslsen knnen. Irreparable Schden, welche nicht zur Apoptose der betreffenden Zelle
fhren, ergeben Mutationen, die verfrhtes Altern der Zellen oder Krebs und, falls in Keimbahn, Erbkrankheiten zur
Folge haben knnen.
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cher Mitochondrien (16569bp) enthlt die Gene

fr nur 13Proteine sowie fr die 22tRNAs und
2rRNAs, welche zu deren Synthese ntig sind. Die
einzelnen Gene berlappen sich zum Teil, offenbar, um Platz zu sparen. Der genetische Code der
Mitochondrien weicht in vier Codons vom universellen Code ab.
8.3 DNA-Schden
und Reparatursysteme
Unter normalen Bedingungen berwiegen die

endogenen Vernderungen der DNA bei weitem
die Schden, welche durch uere Einwirkung
entstehen Die chemische Labilitt der DNA
hat hufige strukturelle Vernderungen zur Folge.

Die Zahl der spontan auftretenden DNA-Schden
in einer menschlichen Zelle wird auf 100000 pro
Tag geschtzt. Die endogenen Schden umfassen
Replikationsfehler (verursacht u.a. durch falsche
Basenpaarung aufgrund von Basentautomerie;
Abschn.7.2) und Reaktionen mit krpereigenen
Substanzen, insbesondere hydrolytische Depurinierung/Depyrimidinierung und Desaminierung
(A zu Hypoxanthin, das mit C paart; C zu U, das
mit A paart), Oxidationen (insbesondere durch Hydroxylradikale) sowie nichtenzymatische Methylie-
rung durch S-Adenosylmethionin. Exogene Schden knnen durch verschiedene Strahlenarten (UV,
ionisierende Strahlung) und mutagene Agenzien
entstehen. DNA-Schden fhren zu falscher Basenpaarung, seltener zu Deletion oder Rekombination.
Diverse Reparatursysteme beheben unverzglich die allermeisten Vernderungen der DNA
(.Tab.8.2). Zusammen mit der hohen Replikationsgenauigkeit und der biologischen Selektion erhhen sie die biologische Stabilitt der chemisch labilen DNA. Nichtkorrigierte und replizierte, stabile
Vernderungen in der Nucleotidsequenz der DNA
werden als Mutationen bezeichnet. Die hufigste
Mutation ist eine Punktmutation in der Form einer Substitution eines einzelnen Basenpaars. Gewisse DNA-Schden verhindern die Basenpaarung
und es ergeben sich weitere Typen von Mutationen
wie Deletionen oder Insertionen von einem oder
mehreren Basenpaaren. Von den lokal begrenzten
nderungen der Nucleotidsequenz, sind die strukturellen und numerischen Chromosomenaberrationen zu unterscheiden, bei denen grere Chro-
mosomenteile oder ganze Chromosomen fehlen,

Chromosomen verdoppelt sind oder Bruchstcke
ausgetauscht haben.
103
8.3 DNA-Schden und Reparatursysteme
Prfung von Substanzen auf Mutagenizitt

Ames-Test: Ein Teststamm von Salmonella
typhimurium, welcher wegen einer Punktmutation in einem Gen Histidin nicht synthetisieren kann, wird auf ein Kulturmedium
ohne Histidin gegeben. Die Bakterien werden
sich nur vermehren knnen, wenn sie durch
eine Rckmutation die Fhigkeit, Histidin zu
synthetisieren, zurckgewinnen. Die Testsubstanz wird dem Kulturmedium zugegeben; ihre
mutagene Wirkung ergibt sich aus der Anzahl
der sich entwickelnden Kolonien.
Eine hohe Mutationshufigkeit gefhrdet die Lebensfhigkeit von Organismen. Die Mehrheit der
Mutationen beeintrchtigt die Funktionsfhigkeit
der Genprodukte, z.B. die katalytische Aktivitt eines Enzyms (Loss of function). In wenigen Fllen
kommt es zu einem Zugewinn an Aktivitt (Gain of
function), z.B. knnen Mutationen das Zellwachstum beschleunigen und damit kanzerogen wirken.
Die Reparaturmechanismen beheben DNA-Schden, welche die Transkription verhindern oder zu
Mutationen fhren knnten.
Direkte Reparatur Die DNA-Ligase behebt
Einzelstrangbrche und Alkyltransferasen reparieren alkylierte Nucleotide. An O6 alkylierte
Guaninreste sind stark mutagen, da sie hufig
zum Einbau von Thymin statt Cytosin fhren. Die
O6-Methylguanin-DNA-Methyltransferase entfernt diese Methylgruppen. Die DNA-Photolyase
von Bakterien, Pilzen und Pflanzen spaltet Pyrimidindimere. UV-Bestrahlung (200300
nm)
kann zur Quervernetzung von zwei nebeneinanderliegenden Thyminresten fhren (C-C und C-T
Dimere sind seltener). Die Photolyase spaltet die
C-C-Bindungen zwischen den Pyrimidinringen
in einer lichtabhngigen Reaktion (300500nm).
Die Photoreaktion bentigt zwei Cofaktoren. Ein
Chromophor (je nach Spezies N5, N10-Methylentetrahydrofolat oder ein Flavinderivat) vermittelt die
Anregung von FADH, welches seinerseits das zur
Spaltung der C-C-Bindung notwendige Elektron
liefert. Beim Menschen sind direkte Reparaturen
von geringer Bedeutung.
Basenexzisionsreparatur Desaminierte,
methylierte oder anderswie beschdigte Basen
.. Abb.8.6 Reparatur der DNA durch Nucleotidexzision. Der

Reparaturkomplex besteht aus verschiedenen Untereinheiten
und erkennt lokale Vernderungen der Form der DNA-
Doppelhelix, wie sie z.B. bei Thymindimeren zu finden sind.
Der Reparaturkomplex entfernt ein 1020Nucleotide langes
Oligonucleotid an der schadhaften Stelle. DNA-Polymerase
und Ligase fllen und schlieen die entstandene Lcke
werden von basenspezifischen DNA-Glykosylasen

durch hydrolytische Spaltung der N-glykosidischen
Bindung aus der DNA entfernt. Der Desoxyribose-Rest wird dabei nicht entfernt, die Hauptkette
des DNA-Strangs bleibt intakt. Die Stelle ohne Base
wird als AP-Stelle bezeichnet (apurinisch bzw.
apyrimidinisch). AP-Stellen knnen auch durch
spontane Hydrolyse entstehen. Durch eine AP-Endonuclease, DNA-Polymerase und DNA-Ligase
wird der Desoxyribose-Rest entfernt und die Lcke
im Einzelstrang geschlossen.
Warum Thymin statt Uracil in der DNA?
Cytosin wird oft spontan oder durch Nitrit
(NO2) zu Uracil desaminiert. Wenn die DNA
Uracil enthielte, wrde ein Reparaturmechanismus bei einem fehlgepaarten GU-Basenpaar nicht entscheiden knnen, ob es sich um
ein ursprngliches GC- oder AU-Basenpaar
handelt. Weil jedoch in der DNA kein Uracil,
sondern Thymin vorkommt, entspricht ein U
einem desaminierten C. Uracilreste werden
durch die Uracil-N-Glykosylase aus der DNA
herausgeschnitten.
Nucleotidexzisions-Reparatur Ein Stck des
beschdigten Strangs wird herausgeschnitten und

durch neue Nucleotide ersetzt. Zum Beispiel werden bei Tieren Pyrimidindimere auf diese Weise
entfernt (.Abb.8.6).
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Replikationsfehler ergeben keine modifizierten Basen

sondern Fehlpaarungen der blichen Basen sowie
Deletionen und Insertionen. Falls ein Fehler den
Korrekturlesemechanismen der DNA-Polymerasen entgangen ist, kann ihn die Mismatch-Reparatur
nachtrglich korrigieren. Hierbei muss nicht nur die
Fehlpaarung im DNA-Duplex erkannt werden, es
muss auch der Tochterstrang, welcher den Fehler
trgt, vom Elternstrang unterschieden werden. Andernfalls wrde in der Hlfte der Flle der Elternstrang dem fehlerhaften Tochterstrang angepasst
und der Fehler damit genetisch fixiert. Bei E. coli
werden Eltern- und Tochterstrang anhand des geringeren Methylierungsgrades des Tochterstrangs
unterschieden: Nach der Replikation wird jeweils
der neue Tochterstrang mit einer gewissen Verzgerung methyliert (meist wird nur ein kleiner Teil
der A- und C-Basen methyliert zur epigenetischen
Regulation der Genexpression; Abschn.11.4); die
Reparatursysteme haben damit etwa zwei Minuten
Zeit, den Tochterstrang vom Elternstrang zu unterscheiden. Zur methylgesteuerten Fehlpaarungskorrektur in E. coli braucht es mehrere Proteine: drei
Mut (Mutator-)Proteine, eine Helicase, eine Exonuclease, das SSB-Protein, Pol III und eine DNA-Ligase (.Abb.8.7).
Homologe der Mut-Proteine finden sich auch
bei Eukaryonten. Defekte in diesen Proteinen fhren beim Menschen zu einer vererbbaren Prdisposition fr gewisse Krebserkrankungen. Allerdings
ist beim Menschen noch unklar, anhand welcher
Merkmale der Tochterstrang erkannt wird.
Rekombinationsreparatur Beschdigte DNA
wird mglicherweise repliziert, bevor der Schaden ausgebessert worden ist. In diesem Fall wird
die Replikation des beschdigten Matrizenstrangs
an der Schadenstelle, z.B. einem Pyrimidindimer,
unterbrochen; der Tochterstrang wird an der entsprechenden Stelle eine Lcke aufweisen. Dieser
Schaden kann nicht durch eine Exzisionsreparatur
behoben werden, da kein intakter Komplementrstrang, der als Matrize dienen knnte, vorhanden
ist. Der Schaden lsst sich jedoch durch Rekombinationsreparatur beheben, indem die Lcke durch das
entsprechende Segment aus dem intakten Schwesterduplex nach dem Mechanismus der genetischen
Rekombination (Abschn.8.4) gefllt wird. AnFehlpaarungs-(Mismatch-)Reparatur
.. Abb.8.7 Methylierungsgesteuerte Mismatch-Reparatur

in E. coli. Die Fehlpaarung G-T uert sich in einer lokalen
Deformierung der DNA-Doppelhelix, welche durch das MutS-
Protein erkannt wird. MutH, ber MutL mit MutS verbunden,
bindet an die nchste GATC-Sequenz, welche nicht methyliert
ist. Damit ist dieser Strang als der neusynthetisierte Strang
identifiziert und wird an dieser Stelle durch MutH gespalten
(nicked). Diese Stelle kann bis 1000bp vom Mismatch entfernt
liegen. Wenn die GATC-Sequenz weit weg vom Mismatch
liegt, wird eine Biegung in der DNA erlauben, die Mut-Proteine in gegenseitigen Kontakt zu bringen. Eine Exonuclease
entfernt nun mit Hilfe von Helicase und SSB-Protein alle
Nucleotide zwischen der Spaltstelle und der Region des
Mismatch, welche MutS identifiziert hat. Die DNA-Polymerase
III fllt dann die Lcke und behebt den Fehler. Die Ligase
beendet den Korrekturvorgang. Um eine Fehlpaarung zu korrigieren, werden unter Umstnden Tausende von Nucleotiden
entfernt
Hereditre Lichtberempfindlichkeit
Xeroderma pigmentosum: eine sehr seltene
Erbkrankheit des Menschen, wird durch
einen Defekt des Nucleotidexzisions-Reparatur-Mechanismus verursacht. Die Unfhigkeit
der Hautzellen, durch UV-Licht verursachte
DNA-Schden zu reparieren, steht im Vordergrund. Es entstehen Lichtschden der
Haut, insbesondere entwickelt sich bei diesen
Patienten hufig Hautkrebs.
105
8.4Genetische Rekombination
schlieend kann der Schaden auf dem ersten Strang

durch die Photolyase oder ber eine Exzision behoben werden.
Auf DNA-Schden reagiert E. coli mit einer
SOS-Reaktion (SOS Response) Das RecA-Protein
bindet an einzelstrngige DNA, wie sie in beschdigter DNA auftritt. RecA wird dadurch aktiviert
und stimuliert die autokatalytische Spaltung und
damit die Inaktivierung des LexA-Repressorproteins. Die SOS-Gene fr mehr als 15 verschiedene
Proteine, die alle an der Reparatur beschdigter
DNA beteiligt sind, werden nun exprimiert. Zu den
SOS-Proteinen gehrt eine besondere DNA-Polymerase, welche, wenn auch mit erhhter Fehlerrate,
ber beschdigte DNA hinweglesen kann.
8.4
Genetische Rekombination
Genetische Vernderungen erlauben die Adaptation einer Spezies an sich verndernde Bedingungen und ermglichen die biologische Evolution.
Die Vernderungen im Genom ergeben sich aus
den oben besprochenen Punktmutationen aber
auch durch den Austausch von DNA-Stcken zwischen verschiedenen Genen. Die Rekombination
von Genen und Genteilen kann die Domnenstruktur von Proteinen, aber auch die quantitative und
zeitliche Steuerung der Expression von Proteinen
verndern. Es werden zwei Typen genetischer Rekombination unterschieden: die allgemeine oder
homologe Rekombination und die ortsspezifische
Rekombination.
Die homologe Rekombination tauscht komplementre Segmente zwischen homologen
DNA-Moleklen aus Die Rekombination beginnt
damit, dass in zwei homologen DNA-Doppelstrngen am gleichen Ort Einzelstrangbrche entstehen.

Die dabei gebildeten freien Enden verbinden sich
bers Kreuz mit den komplementren Einzelstrngen im Nachbar-DNA-Duplex (Crossing over).
Eine Ligase verbindet die Bruchstcke in der neuen
Kombination (.Abb.8.8). Der Kreuzungspunkt
kann sich nach beiden Richtungen verschieben.
Die vierstrngige Holliday-Struktur kann entweder durch Spaltung der crossed-over Strnge oder
durch Spaltung der unvernderten Strnge in zwei
DNA-Duplexe geteilt werden.
In E. coli frdert RecA die homologe Rekombination (RecA stimuliert auch die Autoproteolyse
von LexA zur Auslsung der SOS-Reaktion).
RecA-Molekle assoziieren auf einzelstrngigen
DNA-Segmenten zu langgestreckten Polymeren.
Das RecA-ssDNA-Filament bindet darauf an einen
DNA-Duplex. Die Doppelhelix wird dabei entwunden und nach einer Sequenz abgesucht, welche der
ssDNA komplementr ist. Der Duplex wird weiter entwunden und die ssDNA paart sich mit dem
komplementren Strang des Duplex. Fortgesetzter
Strangaustausch verschiebt den Kreuzungspunkt.
Die ortsspezifische (site-specific) Rekombination fhrt DNA-Segmente in ein Genom ein

Der Ort, an welchem ein DNA-Segment in eine
andere DNA eingefhrt wird, ist in diesem Fall

nicht durch die Basenpaarung zwischen homologen
DNA-Segmenten gegeben, sondern wird durch ein
Rekombinationsenzym bestimmt, welches spezifische Nucleotidsequenzen auf einem oder beiden zu
kombinierenden DNA-Moleklen erkennt.
Die ortsspezifische Rekombination wurde im
Fall des Bakteriophagen (Bakteriophage: ein Virus, das Bakterien als Wirtszellen benutzt) entdeckt,
der auf diese Weise sein Genom in das Chromosom
von E. coli einfhrt. Gelangt das Virus in die Wirtszelle, wird eine viruscodierte Transposase, die -Integrase, synthetisiert, die sowohl an ein bestimmtes
Segment der zirkulren Virus-DNA als auch an eine
bestimmte Sequenz der bakteriellen DNA bindet.
Die Transposase schneidet wie ein Restriktionsenzym (Abschn.39.1) die zwei DNAs, wobei kurze
komplementre Einzelstrangabschnitte (Sticky
ends) entstehen, und ligiert die Virus-DNA in die
bakterielle DNA (.Abb.12.2). Der Vorgang kann
auch in umgekehrter Richtung ablaufen. Ortsspezifische Rekombination liegt auch der Vielfalt von
Antikrpern zugrunde (Abschn.32.4).
Transposons sind mobile DNA-Segmente
Gewisse genetische Elemente knnen aufgrund

ihrer besonderen Struktur leicht ihren Platz im Genom wechseln. Transposons kommen sowohl in
Prokaryonten als auch in Eukaryonten vor. Die einfachsten Transposons sind die Insertionssequenzen mit einer Lnge von etwa 1kb; sie codieren
einzig fr eine hochspezifische Transposase. Komplexe Transposons enthalten auer dem Transposase-Gen und den flankierenden Elementen (Trans-
106
posase-Bindungsstellen) weitere Gene, z.B. fr

Enzyme, die bei Bakterien zu Antibiotika-Resistenz
fhren (Abschn.12.1). Bei Eukaryonten werden
Transposons ber eine RNA-Zwischenstufe durch
Retrotranskription (mit Reverser Transkriptase;
Abschn.12.2) nicht nur transponiert (Retro
transposition) sondern auch vermehrt. Aufgrund
von Sequenzhomologie der Retrotransposons und
retroviraler Genome wird angenommen, dass die
eukaryontischen Transposons von Retroviren abstammen.
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Links auf
Springer Website:
027-6-1514845-0
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8.2 DNA-Replikation bei Eukaryonten
8.3 DNA-Schden und Reparatursysteme
8.4 Genetische Rekombination
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.. Abb. 8.8 Rekombination bers Kreuz, die Holliday-

Junction. Der Austausch homologer Segmente zwischen
zwei DNA-Moleklen wird als allgemeine Rekombination
bezeichnet. Die klassische Genetik gab schon berzeugende
Hinweise auf das Vorkommen solcher Austauschprozesse.
Robin Holliday schlug 1964 dafr das folgende Modell vor:
(1) Zwei homologe DNA-Duplexe lagern sich aneinander;
je ein Strang jedes Duplex wird von einer Endonuclease
gespalten. (2) Ein Ende jedes gespaltenen Strangs dringt in
den Nachbarduplex ein und wird dort mit dem anderen Ende
des gespaltenen Strangs ligiert. (3) Der Austausch der Einzelstrnge kann weitergehen, der Kreuzungspunkt zwischen
den zwei Duplexen kann sich verschieben (Branch migration).
(4)Dieses Zwischenprodukt der Rekombination kann auf zwei
verschiedene Arten geschnitten und wieder ligiert werden.
Eine Rotation (Gedankenexperiment!) des unteren Teils macht
die Topologie verstndlicher. (5) Es knnen die beiden rekombinierten Strnge geschnitten werden (Schnitt x) oder die
beiden unvernderten Strnge (Schnitt y). (6) Fr Fall x und
y ergeben sich diese zwei Strukturen. (7) Ihre Ligation liefert
diese Rekombinationsprodukte
107
Transkription: Biosynthese
der RNA
9.1
Initiation108
9.2
Elongation und Termination 111
9.3
Modifikationen des primren Transkriptionsprodukts 111
9.4
Spleien (Splicing)113
9.5
Synthese der tRNA und rRNA 115

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Kapitel 9 Transkription: Biosynthese der RNA
Die Expression der proteincodierenden Gene erfolgt

ber RNA als Zwischenstufe: Bei der Transkription
wird die DNA eines Gens in einen RNA-Einzelstrang umgeschrieben. Die Biosynthese der RNA
und die Art der Codierung der genetischen Information sind den entsprechenden Vorgngen bei der
DNA-Replikation hnlich. Durch Basenpaarung
wird der DNA-Matrizenstrang (Minus-Strang) in die
Nucleotidsequenz der RNA transkribiert, wobei die
RNA in 53-Richtung synthetisiert wird (wie die
DNA). Die Nucleotidsequenz der RNA ist danach
identisch mit der Sequenz des codierenden Strangs
der DNA (Plus-Strang) mit der Ausnahme, dass U
statt T eingebaut ist. Die Synthese aller RNA-Typen
(mRNA, tRNA, rRNA, snRNA, miRNA, siRNA
u.a.m.) wird durch DNA-abhngige RNA-Polymerasen katalysiert. Die Anforderungen an die Genauigkeit sind geringer als bei der DNA-Replikation (ein
Fehler pro 104105 eingebaute Nucleotide); ein Korrekturlesen findet nicht statt. Etwa drei Viertel des
menschlichen Genoms werden transkribiert, wovon
die21000 proteincodierenden Gene nur knapp
2% des Genoms ausmachen.
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Bei der Replikation wird immer das gesamte Chromosom kopiert. Die Transkription hingegen ist
selektiv: In einer gegebenen Zelle werden zu einem
bestimmten Zeitpunkt nur gewisse Gene transkribiert. Das Signal (Erkennungsstelle) fr die Initiation ist ein A- und T-reicher Abschnitt, der Promotor. Damit die Transkription der Gene individuell
reguliert werden kann, muss die RNA-Synthesemaschinerie neben den Start- und Stopp-Signalen auch
regulatorische Sequenzen auf dem DNA-Doppelstrang erkennen.
Die primren Transkriptionsprodukte werden
bei Eukaryonten in vielfltiger Weise verndert.
Diese Reifung (Processing) der RNA verluft bei

den verschiedenen RNA-Typen in unterschiedlicher Weise. Bei der mRNA werden beide Enden
modifiziert und im Falle eukaryontischer mRNA
werden nichtcodierende Abschnitte (Introns) herausgeschnitten (Spleien, Splicing).
9.1 Initiation
Die RNA-Synthese bentigt keinen Primer Die
DNA-abhngigen RNA-Polymerasen verwenden

DNA als Matrize und die Ribonucleotide ATP,
GTP, UTP und CTP als Substrate. Im Unterschied
zur DNA-Synthese wird die Kette ohne Mitwirkung
eines Primers gebildet bzw. um einen Ribonucleosidmonophosphat-Rest verlngert durch nucleophilen Angriff der 3-OH-Gruppe des ersten Nucleotids
(GTP oder ATP) bzw. des wachsenden Strangs auf
das -Phosphoratom eines weiteren Ribonucleosidtriphosphats. Die Synthese wird angetrieben
durch die Hydrolyse des dabei entstehenden Pyrophosphats (PPi). Am 5-Ende neugebildeter mRNA
bleibt eine Triphosphatgruppe bestehen, welche
spter modifiziert wird. Nuclere DNA wird im
Kern transkribiert, die DNA von Mitochondrien
und Chloroplasten in den Organellen.
109
9.1Initiation
Box
-Box
.. Abb.9.1 Prokaryontische und eukaryontische Promotoren im Vergleich. Das erste Nucleotid, welches zu transkribieren ist,
wird mit +1 bezeichnet; das Nachbarnucleotid auf der 5-Seite (d.h. stromaufwrts) wird mit 1 nummeriert. Der Strang mit
den angegebenen Promotorsequenzen entspricht dem +Strang des betreffenden Gens. Die Transkriptionsfaktoren und die
RNA-Polymerase erkennen jeweils beide Strnge der DNA. Die Gre des eukaryontischen Promotors ist nicht genau festgelegt.
Kontrollregionen wie die GC-Box (Consensus-Sequenz GGGCGG), die CAAT-Box (nur diese ist angegeben) und die Octamer-Box
(ATTTGCAT oder ATGCAAAT) knnen fehlen; falls sie vorhanden sind, liegen sie bis zu 200Nucleotide stromaufwrts. Der Buchstabe N in der CAAT-Box bezeichnet irgendeines der Nucleotide A, T, G oder C. Die GC-Box findet sich bei konstitutiven Genen,
deren Expression nicht reguliert wird und die kontinuierlich exprimiert werden (Housekeeping genes)
Prokaryonten besitzen nur eine RNA-Polymerase

Das Enzym von E. coli besteht aus einem Kern
(Core-)Enzym mit vier Untereinheiten (2) und
einer (sigma-)Untereinheit, dem Initiationsfaktor, welcher bei der Initiation das Startsignal, das
Promotorsegment der DNA, erkennt. Der Promotor besteht aus der TATAAT-Sequenz oder einer
hnlichen Sequenz, die sich etwa 10bp stromaufwrts vom Start der RNA-Synthese befindet, sowie
einer weiteren, etwa 35bp stromaufwrts liegenden
Erkennungsstelle fr den Transkriptionskomplex
(.Abb.9.1). Die verschiedenen -Untereinheiten
der RNA-Polymerase erkennen spezifisch unterschiedliche Promotoren und bestimmen damit,
welche Gene transkribiert werden.
Definition
Consensus-Sequenz: Ein Sequenzabschnitt,
der innerhalb einer Gruppe verwandter
DNAs, RNAs oder Proteine nur geringfgig
variiert. Die Consensus-Sequenz gibt fr jede
Position an, welches Nucleotid oder welche
Aminosure dort am hufigsten vorkommt.
Consensus-Sequenzen bleiben erhalten, weil
sie funktionell wichtig sind. Hufig dienen
sie der Erkennung durch andere Molekle.
Die 10 (10bp upstream) Box ist ein Beispiel
fr eine Consensus-Sequenz. Ein Vergleich
vieler solcher Boxen zeigt, dass sich folgende
Nucleotide mit der angegebenen Wahrscheinlichkeit (%) an der jeweiligen Position

befinden: T80A95T45A60A50T96. In der AT-reichen
Promotorregion lassen sich zu Beginn der Transkription die beiden Strnge leichter voneinander trennen, da ein AT-Basenpaar nur 2 statt
3H-Bindungen wie ein GC-Paar besitzt.
Eukaryonten besitzen drei verschiedene Typen

von RNA-Polymerasen:
RNA-Polymerase I im Nucleolus transkribiert
die rRNA-Gene (45S rRNA-Vorlufer).

RNA-Polymerase II im Nucleoplasma synthetisiert die Vorlufer von mRNA sowie einen Teil
der kleinen Kern-RNAs (snRNA, small nuclear
RNA und miRNA, micro-RNA). -Amanitin,
ein Giftstoff aus Amanita phalloides, dem
Knollenbltterpilz, hemmt die RNA-PolymeraseII mit einem Ki von 108M.
RNA-PolymeraseIII im Nucleoplasma synthetisiert die kleinen RNAs wie tRNA, 5S-rRNA
und einen Teil der sn-RNA.
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Das menschliche Genom

Obwohl das menschliche Genom (3109bp)
etwa 1000-mal grer ist als das Genom von
Bakterien, lassen sich in ihm nur etwa 21000
proteincodierende Gene erkennen, d.h. etwa
10-mal mehr Gene als in Bakterien. Nur knapp
2% der menschlichen DNA entsprechen Protein-Genen. Transkriptionsfaktoren bindende
Regionen machen weitere 8% des Genoms
aus. Der grte Teil der restlichen DNA erfllt
regulatorische und strukturelle Funktionen und
enthlt zudem19000RNA-Gene mit regulatorischer, aber auch struktureller und katalytischer Funktion. Derzeit ist die Funktion von
etwa 80% des menschlichen Genoms bekannt.
Allgemeine und genspezifische Transkriptionsfaktoren (Genregulatorproteine) bilden den eukaryontischen Initiationskomplex Die bakteri-
elle RNA-Polymerase beginnt mit der Synthese der

RNA, sobald sie an den Promotor gebunden hat. In
hheren Eukaryonten hingegen startet die Transkription erst nach der Bildung eines Initiationskomplexes aus den allgemeinen Transkriptionsfaktoren (TF) und genspezifischen Regulatorproteinen.
Allgemeine TF werden bei der Initiation der Transkription aller Gene gebraucht und binden in der
Region der TATA-Box ; der Initiationskomplex der
RNA-Polymerase II, welche die proteincodierenden
Gene transkribiert, enthlt die grte Zahl allgemeiner TF (etwa 35 verschiedene Proteine). Die genspezifischen TF erfllen regulatorische Funktionen
und binden an zustzliche, weiter stromaufwrts
liegende Promotorteile oder auch an weiter weg
liegende DNA-Abschnitte (Enhancers, Silencers).
Das Vorhandensein einer TATA-Sequenz in
dem einen oder anderen Strang der DNA bestimmt
den +Strang fr das betreffende Gen; der Strang
fungiert als Matrizenstrang fr die RNA-Polymerase. Die TATA-Box der Eukaryonten gleicht der
A/T-reichen Sequenz im Promotor der Prokaryonten, liegt jedoch 25bp (statt 10bp) stromaufwrts
vom Transkriptionsstart (.Abb.9.1). Ein dort bindendes Protein, der TATA-Faktor (z.B. TATA-Faktor
TFIID/TFIIB fr RNA-Polymerase II oder TFIIIA
fr RNA-Polymerase III), ist notwendig fr das Andocken des allgemeinen Initiationskomplexes.
Die zustzlichen, upstream Promotorteile mit

spezifischen Nucleotidsequenzen binden genspezifische TF. Der allgemeine Initiationskomplex
an der TATA-Box ist ohne diese an upstream Elemente gebundenen genspezifischen TF zu instabil,
um wirksam zu werden. Die genspezifischen TF
bestimmen die Stabilitt des Initiationskomplexes
und damit die Wahrscheinlichkeit, dass er mit der
Transkription beginnen kann. Die Konzentrationen
der genspezifischen TF sind reguliert und variieren
von Zelle zu Zelle und mit deren Bedingungen.
Zu den upstream DNA-Sequenzen, an welche die
genspezifischen TF binden, gehren die GC-Box,
die CAAT-Box und die Oktamer-Box (.Abb.9.1).
Je nach Gen enthlt der Promotor nur einzelne Typen der upstream Promotorelemente, deren Anzahl
berdies variieren kann.
Ein Beispiel von Genregulatorproteinen sind die
Steroidhormonrezeptoren, die als induzierbare TF
durch das Binden von Steroidhormonen aktiviert
werden und danach an ihre upstream Zielsequenz
auf der DNA binden (Abschn.11.2 und 27.5). Verabreichung des weiblichen Sexualhormons stradiol an Hennen erhht ber diesen Mechanismus
die Kopienzahl der Ovalbumin-mRNA in den Eileiterzellen von ungefhr 10 auf 50000 pro Zelle.
Promotoren von Genen, welche durch die Polymerase I oder III transkribiert werden, binden
besondere TF, besitzen aber auch eine TATA-Box.
Zustzliche eukaryontische Transkriptionsfaktoren (zustzliche Genregulatorproteine) binden
an Enhancer und Silencer Bei Eukaryonten wird
die Genexpression in erster Linie auf der Ebene

der Transkription reguliert. Neben den Promotorregionen, die bis zu etwa 200bp stromaufwrts
der Bindungsstelle der RNA-Polymerase liegen
(.Abb.9.1), gibt es als Enhancer (Verstrker) bzw.
Silencer (Abschwcher) bezeichnete genregulatorische Sequenzen, die sehr weit weg vom Promotor
liegen knnen (tausende von bp stromaufwrts oder
stromabwrts, auf dem einen oder anderen DNAStrang und auch innerhalb codierender Abschnitte).
Die zustzlichen Genregulatorproteine erkennen
die spezifischen Basensequenzen der Enhancerund Silencer-Abschnitte. Durch Wechselwirkung
mit dem allgemeinen Transkriptionskomplex beeinflussen die Genregulatorproteine als zustzliche
TF die Stabilitt des Initiationskomplexes und damit
111
9.3 Modifikationen des primren Transkriptionsprodukts
.. Abb.9.2 Transkriptionsblase. Das Modell zeigt, wie der DNA-Duplex vorbergehend entwunden wird, damit sich der
DNA-RNA-Heteroduplex aus Matrizenstrang (in 35-Richtung abgelesen) und der neu in 53-Richtung synthetisierten RNA
bilden kann. An der Elongationsstelle wird ein Ribonucleotid nach dem anderen gem dem Prinzip der Basenpaarung angefgt. Der Elongationskomplex bewegt sich mit der beachtlichen Geschwindigkeit von etwa 50Nucleotiden pro Sekunde
die Frequenz der Initiation der Transkription. Die

flexibel-dynamische Struktur der DNA macht es
mglich, dass sich Proteine, die weitab von der codierenden Sequenz an die DNA binden, am Initiationskomplex beteiligen knnen. Nheres zur Regulation der Transkription findet sich in Kap.11.
9.2
Elongation und Termination
Sobald die COOH-terminale Domne, eine lange

repetitive (Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser)n-Sequenz,
der RNA-Polymerase II durch eine spezifische Proteinkinase phosphoryliert worden ist (zwei Ser pro
repetierte Einheit), zerfllt der Initiationskomplex,
die RNA-Polymerase wird frei und beginnt mit
der Elongation.
Damit die RNA-Polymerase
den Matrizenstrang (Strang) ablesen kann, entwindet eine Topoisomerase die beiden Strnge der
DNA. Auf einer Strecke von etwa 12bp entsteht ein
DNA-RNA-Heteroduplex. Die Region des Transkriptionskomplexes mit der RNA-Polymerase samt lokal
entwundener DNA und dem Heteroduplex wird als
Transkriptionsblase bezeichnet (.Abb.9.2). Nach
dem Durchgang der RNA-Polymerase verdrillt eine
Topoisomerase die DNA-Einzelstrnge wieder zum
Doppelstrang. Die Kettenverlngerung luft bei allen Genen gleich schnell ab, reguliert wird nur die
Frequenz des Transkriptionsstarts. Die Fehlerfrequenz (105104) ist dem weniger leistungsfhigen
Korrekturlesen entsprechend etwa 105-mal hher
als bei der DNA-Synthese.
Fr die Termination der Transkription sind

bei Prokaryonten besondere DNA-codierte Terminationssignale auf der neusynthetisierten RNA verantwortlich: Sekundrstruktur-Merkmale am 3-Ende
(Haarnadelschleifen) und eine U-reiche Sequenz,
die ein AU-Basenpaar-reiches DNA-RNA-Hybrid
von geringer Stabilitt ergibt, fhren zur Dissoziation der RNA-Polymerase vom Matrizenstrang. Der
Mechanismus der Termination bei Eukaryonten ist
je nach Typ der RNA-Polymerase verschieden. Die
RNA-Polymerase II stoppt mit der Transkription
kurz nach der Synthese des Polyadenylierungssignals (AAUAAA; Abschn.9.3). Nach Dephosphorylierung ihrer C-terminalen Domne ist die PolymeraseII bereit fr die nchste Transkriptionsrunde
und kehrt zurck an den Promotor.
9.3
Modifikationen des primren

Transkriptionsprodukts
Die RNA wird zum Teil schon whrend der Synthese modifiziert. Die Bearbeitung (Processing) des
primren Transkriptionsprodukts ist je nach RNATyp verschieden:
Transfer-RNA und ribosomale RNA werden
stckweise aus lngeren primren Transkripten herausgeschnitten (Abschn.9.5).
Messenger-RNA. Bei Eukaryonten ist das
primre Transkriptionsprodukt der proteincodierenden Gene im Gegensatz zu rRNA oder
tRNA eine hochmolekulare RNA unterschied-
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.. Abb.9.3 Cap am 5-Ende der mRNA. 7-Methylguanylat ist in umgekehrter Richtung angelagert, indem es ber eine 5-5-Triphosphatbrcke mit dem nchsten Nucleosid verbunden ist. Es sind drei verschiedene Cap-Formen bekannt: In Cap0 ist nur der
Guaninrest methyliert, in Cap1 ist zustzlich die Ribose des nchsten Nucleotids und in Cap2 auch die Ribose des bernchsten
Nucleotids methyliert. Die besonderen strukturellen Merkmale, welche die Cap-Struktur auszeichnen, sind in Blau wiedergegeben
licher Lnge (durchschnittliche Lnge etwa 8kb,

wobei Transkripte bis 20kb mglich sind). Diese
mRNA-Vorlufer werden als Pr-mRNA oder heterogene nuclere RNA (hnRNA) bezeichnet. Noch
im Zellkern wird die Pr-mRNA verkrzt und
modifiziert zur reifen mRNA, welche den Ribosomen als Vorlage zur Proteinsynthese dient. Die
Reifungsreaktionen sind langsam im Vergleich zur
Transkription und dauern etwa 30min. Weniger als
10% der primren Transkripte erscheinen als reife
mRNA-Molekle im Cytosol, der Rest wird im
Laufe der Reifung eliminiert. In einer Zelle kommen 1000020000 verschiedene mRNA-Spezies
vor, einzelne davon nur in wenigen Kopien.
Lnge von mRNA
Die mRNA eines Proteins von 300Aminosureresten ist etwa 1200Nucleotide lang:
3300Nucleotide zur Codierung der Aminosuresequenz plus die Translationssignale und
weitere Signale vor und nach dem codierenden Abschnitt.
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Die Reifung (Processing) eukaryontischer PrmRNA zu mRNA umfasst drei verschiedene Vorgnge: Modifikationen an beiden Enden der RNA
und Eliminierung nichtcodierender Abschnitte (Introns) im Innern der Pr-RNA durch Spleien.
Modifikation am 5-Ende (Capping). Kurz

nach Beginn der Transkription wird das 5-Ende
der sich in Synthese befindlichen Pr-mRNA zur
Cap-Struktur (Kappe; .Abb.9.3) umgewandelt. Die
Cap-Struktur schtzt die mRNA vor der Verdauung
durch 5-Exonucleasen und Phosphatasen und ist
auch wichtig fr das Spleien und die Translation.
Modifikation am 3-Ende. Eine Endonuclease
spaltet die hn-RNA 1030Nucleotide nach einem
AAUAAA-Signal. An das dabei neu entstehende
3-Ende der hn-RNA fgt die Poly(A)-Polymerase
einen Poly(A)-Schwanz von bis zu 250Nucleotiden
an. Der Poly(A)-Schwanz scheint, zusammen mit
anderen Faktoren, die Lebensdauer der mRNA zu
bestimmen. mRNAs mit weniger als 15A-Resten
am 3-Ende werden abgebaut (Abschn.9.4).
Gentechnik
Praktische Konsequenz des Poly(A)-Schwanzes: mRNA lsst sich durch Chromatographie
ber eine Oligo(dT)-Sule von anderen
Nucleinsuren trennen.
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9.4Spleien (Splicing)
9.4
Spleien (Splicing)
In eukaryontischen Genen unterbrechen nichtcodierende Abschnitte die codierende Sequenz
Eine nichtcodierende intervenierende (intra-genische) Sequenz der DNA und auch der Pr-mRNA
wird als Intron, ein proteincodierender (exprimierter) Abschnitt als Exon bezeichnet. Beim Spleien,
d.h. der Reifung der Pr-mRNA zur mRNA, werden
die Introns herausgeschnitten und die Exons zusammengefgt. Bestimmte Signalsequenzen kennzeichnen die Grenzen zwischen Exons und Introns.
Die Lnge und die Dichte (Introns pro Gen) der

Introns variieren von Spezies zu Spezies. Die Gene
niedriger Eukaryonten, z.B. von Hefen, enthalten
nur selten Introns (0,01Intron/Gen), das menschliche Genom enthlt hingegen im Durchschnitt
etwa 8Introns pro Gen. Durch Rekombination von
Exons (Exon shuffling) sind im Verlauf der Evolution neue Proteine entstanden, die in bestimmten
Domnen bereits definierte biologische Aktivitten
besaen (Modulbauweise der Proteine). Introns
kommen auch in RNA-codierenden Genen vor.
snRNPs besorgen das Spleien Das Spleien
findet im Zellkern statt und kann wie das Capping
schon vor Abschluss der Transkription erfolgen.
Das Herausschneiden der Introns und Zusammenfgen der Exons wird durch kleine Ribonucleoprotein-Partikel, die Small nuclear ribonucleoproteins
(snRNP oder Snurps) katalysiert. Die snRNP
binden an die Exon-Intron-bergnge und bilden zusammen mit der hnRNA die sogenannten
Spleiosomen (Spliceosomes). Bei hheren Eukaryonten sind 5 hauptschliche snRNP gefunden
worden, die mit U1, U2 etc. bezeichnet werden, da
ihre kurze RNA (snRNA, 100200Nucleotide) viel
Uracil enthlt.
Ein Intron kann die codierende Sequenz offenbar an beliebiger Stelle, sogar innerhalb eines
Codons, unterbrechen. Die snRNP binden an
Consensus-Sequenzen in der hnRNA. Die exakte
Erkennung der Consensus-Sequenzen wird durch
die snRNA der Snurps gewhrleistet, die mit den
Consensus-Sequenzen Basenpaarungen eingehen.

Das genaue Herausschneiden ist kritisch fr das
Erhalten des Leserasters der Exons.
Ein Lasso-Mechanismus spleit die PrmRNA Ein nucleophiler Angriff der 2-OH-
Gruppe des A-Rests der Intron-Verzweigungsstelle

auf das 5-terminale P-Atom des Introns leitet den
Spleivorgang ein (.Abb.9.4). Es entsteht eine 2,
5-Phosphodiesterbrcke innerhalb des Introns
und damit die Lasso (engl. Lariat)-Struktur. Das
3-OH-Ende von Exon1 wird frei und greift nun
seinerseits die Phosphodiesterbrcke zwischen Intron und Exon2 an. Dadurch werden Exon1 und
2 miteinander verbunden und das Intron in Lassoform freigesetzt. Das Spleien kommt demnach
durch zwei aufeinanderfolgende Umesterungen
zustande. Die beiden Fragmente der Pr-mRNA,
die bei der ersten Umesterung entstehen, werden
bis zur kovalenten Verbindung der Exons durch das
Spleiosom zusammengehalten.
Alternatives Spleien fhrt zu unterschiedlichen Genprodukten Durch Spleien an verschie-
denen Stellen knnen aus der gleichen hnRNA (PrmRNA) verschiedene reife mRNAs gebildet werden.
In solchen Fllen codiert das gleiche Gen mehrere
oder gar sehr viele verschiedenartige Proteine. Eine
Reihe von Proteinen kommt in unterschiedlich langen Versionen mit Deletionen oder Insertionen bestimmter Segmente vor. Typische Beispiele solcher
alternativ gespleiter Proteine sind die Immunglobuline, das Fibronectin der extrazellulren Matrix,
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.. Abb.9.4 Spleien der Pr-mRNA. Die angegebenen Sequenzen an den beiden Spleistellen (Splice sites) und am Verzweigungspunkt (Branch site) sind Consensus-Sequenzen. N steht fr irgendeine der vier Basen A, U, G oder C; Y ist ein Pyrimidinnucleotid, Yn eine Sequenz hauptschlich aus Pyrimidinnucleotiden (hufig ist n=10), R ein Purinnucleotid. Die Basen GU zu
Beginn des Introns (5-Ende) und AG an dessen 3-Ende sind obligat. Die Consensus-Sequenzen garantieren eine eindeutige
Erkennung durch die snRNAs der snRNPs und damit die exakte Eliminierung des Introns
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die Zelladhsionsproteine (Cell adhesion molecules,

CAMs), und der Vascular endothelial growth factor
(VEGF), ein Wachstumsfaktor. Alternatives, oft gewebespezifisches Spleien trgt wesentlich bei zur
Vielfalt des Proteoms von Eukaryonten.
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Herausgespleiter Proteinteil
Gestrtes Spleien
Beim systemischen Lupus erythematodes,
einer Autoimmunkrankheit, finden sich Antikrper gegen snRNPs, PCNA (.Tab.8.1) und
weitere nuclere Antigene. Gewisse Formen
der Thalassmie (Mittelmeeranmie, autosomal-rezessiver Defekt der Globinsynthese) sind
auf Mutationen zurckzufhren, die fehlerhaftes Spleien der (seltener der -)Globin-PrmRNA zur Folge haben. Das Spleien strende
Mutationen sind auch bei manchen anderen
Erbkrankheiten gefunden worden.
Gewisse RNA-Molekle sind katalytisch aktiv Bei
niederen Eukaryonten wie Ziliaten oder Pilzen knnen bestimmte RNA-Molekle ihre Introns ohne die
Mitwirkung von Proteinen entfernen. Solche Ribozyme genannten RNA-Molekle besitzen sowohl
Nuclease- als auch Polymeraseaktivitt.
Nach Entfernen aller Introns verlsst die reife

mRNA den Kern Die Bindung an die snRNPs ver-
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9.5 Synthese der tRNA und rRNA
.. Tab.9.1 Die Genome der Prokaryonten und Eukaryonten enthalten viele rRNA- und tRNA-Gene
Spezies
E. colia
Hefe
Mensch
18S/28S-rRNA
7
140
280
5S-rRNA
7
140
2000
tRNA
60
275
500
Bei E.coli bilden die 3rRNA-Gene jeweils ein Operon. Die 60tRNA-Gene sind teils ebenfalls in diese Operons und
teils in andere Operons integriert.
hindert den Austritt der hnRNA ins Cytosol. Nur

vollstndig gespleite RNA wird unter Mitwirkung
bestimmter Proteine durch die Kernporen ins Cytosol bugsiert. Bei Eukaryonten knnen ins Cytosol
gelangte mRNA-Molekle viele Male nacheinander
(bis zu 1000-mal) als Matrize fr die Proteinsynthese durch Ribosomen dienen
Bakterielle mRNA ist sehr kurzlebig; die Stabilitt eukaryontischer mRNA ist hher, variiert
betrchtlich und wird z.T. reguliert Die Halb-
wertszeiten der meisten bakteriellen mRNAs liegen

im Bereich weniger Minuten. Im Gegensatz dazu
variiert die Halbwertszeit eukaryontischer mRNAs
ber einen weiten Bereich (in Sugerzellen zwischen
10min und 24h). Mit einer Halbwertszeit von etwa
10h ist die Globin-mRNA recht stabil, die Halbwertszeiten kurzlebiger mRNAs von etwa gleich langen Wachstumsfaktoren betragen nur etwa 30min.
Die Stabilitt einer mRNA wird durch ihre Struktur
und insbesondere die Lnge des 3-Poly(A)-Schwanzes bestimmt: je krzer die Poly(A)-Region, umso
instabiler die mRNA. Beim Abbau entfernt zunchst
eine Poly(A)-Nuclease den Poly(A)-Schwanz, darauf wird die Cap-Struktur entfernt, und anschlieend depolymerisiert eine 5, 3-Exonuclease das
restliche RNA-Molekl. Verschiedene Abbaumechanismen sind bekannt: RNA-bindende Proteine
wie Exonucleasen und insbesondere an Ribosomen
gekoppelte Nucleasen bauen gewisse mRNAs bevorzugt ab. Der Abbau gewisser mRNAs wird durch
miRNA reguliert (Abschn.11.3).
9.5
Synthese der tRNA und rRNA
Die verschiedenen tRNAs werden von einem

Mehrfachen an Genen codiert Bei E.coli sind
tRNAs und rRNAs in Operons organisiert. Gene

fr tRNAs kommen hufig auch in rRNA-Operons
vor. Beim menschlichen Genom kommen etwa
50tRNAs und 500tRNA-Gene vor. Die tRNA-Gene
sind tandemartig hintereinander angeordnet mit
nichtcodierenden Zwischensequenzen (Spacer). Die
primren Transkriptionsprodukte werden im Zellkern durch die RNA-Polymerase III synthetisiert
und durch Nucleasen in die einzelnen tRNA-Molekle zerlegt. An deren 3-Ende wird durch die
tRNA-Nucleotidyltransferase die fr tRNA typische
Endsequenz CCA(3) angefgt. Weitere posttranskriptionale Modifikationen umfassen die Modifikation gewisser Basen und, bei Eukaryonten, das
Eliminieren von Introns.
Auch die rRNAs entstehen durch posttranskriptionale Spaltung lngerer RNA-Vorlufermolekle Das Genom von E. coli enthlt 7Ope-
rons mit den 3rRNA-Genen. In eukaryontischen

Genomen sind die Gene fr die 18S/28S-rRNA
in Tandem-Anordnung viele Male hintereinander wiederholt (.Tab.9.1) Die RNA-Polymerase
I synthetisiert im Nucleolus eine lange RNA (45S,
13000Nucleotide). Nach Methylierung an vielen
2-OH-Gruppen wird das 45STranskript durch spezifische Endonucleasen zerschnitten in 18SrRNA
fr die kleine Ribosomen-Untereinheit, sowie in
5.8S und 28SrRNA fr die groe Untereinheit. Die
5SrRNA der groen Untereinheit wird durch die
RNA-Polymerase III synthetisiert. Die kleinen und
groen Untereinheiten der Ribosomen werden im
Nucleolus aus den rRNA und den ribosomalen
Proteinen zusammengesetzt. Die Proteine und die
5S-rRNA werden vom Cytosol bzw. vom Kern dem
116
1
2
3
4
5
Nucleolus zugefhrt. Die kleinen und groen Ribosomen-Untereinheiten gelangen durch die Kernporen ins Cytosol.
Nucleolus
Ein kleines, dichtes, von keiner Membran
umgebenes Krperchen im Kern (Nucleus)
eukaryontischer Zellen, enthlt Ribonucleoproteine fr Synthese und Processing des
45SrRNA-Vorlufers sowie aus dem Cytosol
stammende ribosomale Proteine. In einem
Kern knnen mehrere Nucleoli vorkommen.
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7
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9
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20
Die rRNA und tRNA werden direkt durch Transkription gebildet, fungieren in der Zelle jedoch auf der
gleichen Ebene wie die Proteine. Bei der Synthese
der Proteine fhrt ein einziges Molekl des Transkriptionsprodukts, d.h. ein mRNA-Molekl, zur
Synthese vieler Proteinmolekle. Bei der Synthese
von rRNA und tRNA kompensiert die erhhte Anzahl von Genen das Fehlen dieses Amplifikationseffekts. Eine wachsende eukaryontische Zelle kann
107Ribosomen enthalten! (NB: Die Histone sind die
einzigen Proteine mit multiplen Genen.)
Links auf
Springer Website:
027-6-1514846-0
9.1 Initiation
9.2 Elongation und Termination
9.3 Modifikationen des primren
Transkriptionsprodukts
9.4 Spleien (Splicing)
9.5 Synthese der tRNA und rRNA
117
Translation: bersetzung
des Gens ins Phn
10.1
Der genetische Code 118
10.2
Proteinsynthese, bersicht120
10.3
Bildung der Aminoacyl-tRNA 120
10.4
Initiation, Elongation, Termination123
10.5
Hemmstoffe der Proteinsynthese 126

10
118
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Kapitel 10 Translation: bersetzung des Gens ins Phn
Die bersetzung der Nucleotidsequenz der DNA

in die Aminosuresequenz der Proteine beruht auf
dem genetischen Code. Die Entzifferung des genetischen Codes besttigte, dass die Nucleotidsequenz
der DNA die Aminosuresequenz der Proteine bestimmt.
Die Dolmetschermolekle, welche die Nucleotidsprache der Gene mit 4 verschiedenen Buchstaben in die Aminosuresprache der Proteine mit
20Buchstaben bersetzen, sind die tRNAs zusammen mit den Aminoacyl-tRNA-Synthetasen, welche die tRNAs mit der zugehrigen Aminosure
aufladen. Die Ribosomen sind die molekularen Maschinen, welche Aminosuren unter Verbrauch von
ATP und GTP zu Polypeptiden zusammensetzen.
Sie bestehen aus rRNA und Proteinen. Die mRNA,
als einzelstrngige, dem +Strang entsprechende
Arbeitskopie der DNA, steuert die Ribosomen und
bestimmt die Aminosuresequenz des Translationsprodukts (.Abb.10.1).
10
10.1
11
In der mRNA kommen 4 verschiedene Basen vor,

die 20 verschiedene Aminosuren codieren Die
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Der genetische Code
Buchstaben (A, G, C und U) bilden das Alphabet,

aus dem die Codons (Codewrter) zusammengesetzt sind. Mit vier Buchstaben knnen 43=64
verschiedene Tripletts gebildet werden, mehr als
genug, um die 20 proteinogenen Aminosuren zu
verschlsseln. In der Tat gibt es, mit zwei Ausnahmen, fr jede Aminosure mehr als nur ein Codon.
Synthetische RNA erlaubte die Entschlsselung des
genetischen Codes. Experimente mit Polymeren
eines Nucleotids (z.B. Poly(U): UUUU ) und
Co-Polymeren mit repetitiven Sequenzen von zwei
(z.B. UGUGUGoder GUGUGU) oder drei
Nucleotiden ermittelten die Bedeutung aller 64
mglichen Codons. Dabei lieen sich die folgenden
Regeln erkennen:
Die Codons berlappen nicht und sind nicht
durch Interpunktionszeichen getrennt.
Das Startcodon bestimmt das Leseraster fr
die mRNA.
Deletionen und Insertionen von Basen verschieben das Leseraster und verndern den
Sinn der Sequenz.
Von den 64 mglichen Tripletts codieren

61Tripletts je eine einzige Aminosure. AUG
dient zudem als Startcodon, d.h. als wichtigster Teil des Initiationssignals der Translation.
Die drei Stoppcodons dienen als Terminationssignale. Fr zwei Aminosuren (Trp,
Met) existiert nur je ein Codon, fr andere
gibt es bis zu sechs Codons (Leu, Ser, Arg).
Der genetische Code wird als degeneriert
bezeichnet, weil es fr bestimmte Aminosuren mehrere Codewrter gibt. Der Code ist
jedoch eindeutig, ein gegebenes Codon wird
nur von denjenigen tRNAs erkannt, welche
die entsprechende Aminosure bertragen
(.Tab.10.1).
Der Code ist nach einem bestimmten Prinzip degeneriert In Position3 wird nur zwischen Pyri-
midin und Purin unterschieden; manchmal haben

in dieser Position sogar alle vier Basen die gleiche
Bedeutung. Nur in vier Fllen ist auch die dritte Base
entscheidend: UGA Stopp, UGG Trp; AUG Met und
Start, AUA Ile. Fr jede der 20Aminosuren gibt es
in der Regel mehrere tRNA, die z.T. auch verschiedene Anticodons tragen. Es gibt jedoch auch tRNA,
deren Anticodon degenerierte Codons mit verschiedenen Basen an Position3 erkennt (Wackel- oder
Wobble-Mechanismus). Hier das Beispiel einer
tRNA fr Alanin:
Ala
Warum ist der genetische Code degeneriert? Wre
der Code nicht degeneriert, wrden 20 Codons

den Einbau von Aminosuren und die restlichen
44Codons einen Kettenabbruch bewirken: Der degenerierte Code minimiert die schdlichen Folgen
von Mutationen.
Der genetische Code ist universell Er gilt fr
alle Lebewesen, mit gewissen Ausnahmen bei der
DNA von Mitochondrien und bestimmten Einzellern. Die Vermehrung von Viren in Zellen ist nur
mglich, weil der zellulre Replikations-, Transkriptions- und Translationsapparat die Gene des Virus
interpretieren kann.
10
119
10.1 Der genetische Code
.. Abb.10.1 Translation. Die dem +Strang der DNA entsprechende mRNA enthlt das Programm zur Synthese
des Proteins mit genetisch bestimmter Aminosuresequenz. Die Basenpaarung zwischen dem Codon auf der
mRNA und dem Anticodon der Aminoacyl-tRNA sorgt fr
den Einbau der korrekten Aminosure durch das Ribosom. Voraussetzung dafr ist, dass die jeweilige tRNA mit
der richtigen Aminosure aufgeladen worden ist
.. Tab.10.1 Der genetische Code. AUG codiert nicht nur fr Methionin, sondern ist auch Startcodon, d.h. Teil des Initiationssignals. Ein Codon wird immer in 53-Richtung der mRNA angegeben und entspricht damit der Basensequenz
des +Strangs der DNA
Erste Base (5)
Zweite Base (Mitte)
Dritte Base (3)
Phe
Phe
Leu
Leu
Ser
Ser
Ser
Ser
Tyr
Tyr
Stopp
Stopp
Cys
Cys
Stopp
Trp
U
C
A
G
Leu
Leu
Leu
Leu
Pro
Pro
Pro
Pro
His
His
Gln
Gln
Arg
Arg
Arg
Arg
U
C
A
G
Ile
Ile
Ile
Met
Thr
Thr
Thr
Thr
Asn
Asn
Lys
Lys
Ser
Ser
Arg
Arg
U
C
A
G
Val
Val
Val
Val
Ala
Ala
Ala
Ala
Asp
Asp
Glu
Glu
Gly
Gly
Gly
Gly
U
C
A
G
120
.. Tab.10.2 Relativer ATP-Verbrauch fr Synthesen in

einer wachsenden Kultur von E. coli
DNA
RNA
Protein
Lipide
Polysaccharide
3
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19
20
2,5%
3,1
88
3,7
2,7
Definition
Offenes Leseraster (Open reading frame, Orf):
Eine aus der Nucleotidsequenz der DNA abgeleitete Abfolge von Codon-Tripletts, welche
bei einem bestimmten Leseraster (eine der
drei Mglichkeiten, eine Nucleotidsequenz als
eine Folge von Tripletts zu lesen) ein 5-Startcodon, ein 3-Stoppcodon und dazwischen
eine codierende Sequenz (ohne Stoppcodons!)
von plausibler Lnge aufweist. Ein offenes
Leseraster entspricht wahrscheinlich einem
proteincodierenden Gen.
10.2
Proteinsynthese, bersicht
Die Proteine sind mengenmig und am Energieaufwand gemessen das Hauptprodukt des Stoffwechsels Ihre Synthese ist wahrscheinlich der
komplizierteste biochemische Vorgang berhaupt.

An dieser Schnittstelle von Gen und Phn wird
Information in Struktur und Funktion umgesetzt.
Proteine werden stndig synthetisiert, da sie, wie die
meisten Biomolekle auer der DNA, fortwhrend
erneuert werden. Die Halbwertszeit von Proteinen
betrgt beim Menschen fr Leberenzyme Minuten
bis Tage, fr Muskelproteine einige Wochen und fr
Kollagen Jahrzehnte. Proteine sind mengenmig
und am Energieaufwand gemessen das Hauptprodukt des synthetischen Stoffwechsels (.Tab.10.2).
Proteine werden durch Ribosomen synthetisiert An der Synthese von Proteinen sind beteiligt:
Ribosomen, mRNA, tRNA, Aminosuren, Enzyme

(>20 verschiedene Aminoacyl-tRNA-Synthetasen),
ATP und GTP. Fr die Synthese eines Proteinmolekls werden insgesamt etwa 150Komponenten
bentigt. Ribosomen sind mRNA-programmierte
Proteinsynthesemaschinen: Riesenkomplexe mit je
einer groen und kleinen Untereinheit, die ihrerseits
aus Proteinen und rRNA bestehen (.Tab.10.3). Die

Ribosomen von Prokaryonten und Eukaryonten
sind einander hnlich. Die kleine Untereinheit bindet die mRNA und tRNA; die groe Untereinheit
ist am Binden der tRNA beteiligt und katalysiert
die Elongation der Polypeptidkette. Alle Ribosomen eines Organismus sind identisch; die mRNA
bestimmt, welches Protein synthetisiert wird.
Die Synthese eines Proteins lsst sich in vier

Phasen unterteilen:
1. Bildung der Aminoacyl-tRNA. Hochspezifische
Aminoacyl-tRNA-Synthetasen sorgen dafr,

dass jede tRNA mit der entsprechenden Aminosure aufgeladen wird. Die Carboxylgruppe
der Aminosure wird aktiviert und an die tRNA
gebunden. Jede Aminosure wird dadurch mit
dem zugehrigen Anticodon markiert und die
Nucleinsuresprache in die Proteinsprache
bersetzt (.Abb.10.1).
2. Initiation. Die mit der ersten Aminosure beladene tRNA (Initiator-tRNA), die mRNA, die
kleine und die groe Untereinheit des Ribosoms bilden zusammen mit Hilfsproteinen (Initiationsfaktoren, IF) den Initiationskomplex.
Damit ist die Maschinerie zur rastergerechten
Ablesung der mRNA bereit.
3. Elongation. Gem der Abfolge der Codons in
der mRNA wird vom Aminoende der Peptidkette her ein Aminosurerest nach dem anderen
angefgt. Nach jedem Syntheseschritt verschiebt
sich das Ribosom auf der mRNA um ein Codon
in 53-Richtung. Ans benachbarte Codon auf
der 3-Seite lagert sich die nchste AminoacyltRNA an.
4. Termination. Beim Stoppcodon lst sich das
Polypeptid vom Ribosom, das darauf von der
mRNA dissoziiert und in seine Untereinheiten
zerfllt. Noch whrend die Kettenverlngerung
an einem Ribosom abluft, knnen weitere Ribosomen an der mRNA mit der Translation
beginnen und sogenannte Polysomen bilden
(.Abb.10.2).
10.3
Bildung der Aminoacyl-tRNA
Jede der 20 verschiedenen Aminosuren wird

kovalent an eine fr die betreffende Amino-
121
10.3 Bildung der Aminoacyl-tRNA
10
.. Tab.10.3 Zusammensetzung der Ribosomen. Der Sedimentationskoeffizient ist ein Ma fr die Sedimentationsgeschwindigkeit eines Partikels im Zentrifugalfeld einer Ultrazentrifuge und wird in Svedberg-Einheiten (S = 1013 s)
angegeben (Abschn.37.1). Nt, Nucleotide
Ribosomen
Kleine Untereinheit
Groe Untereinheit
Sedimentationskoeffizient
70S
30S
50S
Masse (kDa)
2520
E. coli
930
1590
RNA (Massenanteil 66%)
16S (1500Nt)
23S (2900Nt)
5S (120Nt)
Proteine (Massenanteil 34%)
21
31
Ratte
Sedimentationskoeffizient
80S
40S
60S
Masse (kDa)
4220
1400
2820
RNA (Massenanteil 60%)
18 S(1900Nt)
28S (4700Nt)
5,8S (160Nt)
5S (120Nt)
Proteine (Massenanteil 40%)
33
49
.. Abb.10.2 Polyribosom. Die Ribosomen bestehen aus einer kleinen und einer groen Untereinheit, die ihrerseits aus rRNA
und Proteinen aufgebaut sind (.Tab.10.3). Ribosomen bilden sich nur bei der Translation; unttige Ribosomen dissoziieren in
ihre Untereinheiten. Die mRNA ist an die kleine Untereinheit gebunden. Die vom NH2- zum COOH-Ende wachsende Polypeptidkette verlsst das Ribosom auf der Seite der groen Untereinheit und beginnt sich schon vor Beendigung ihrer Synthese zu
falten. Meist lesen mehrere Ribosomen gleichzeitig eine mRNA ab, so dass sich die hier schematisch dargestellte Situation eines
Polyribosoms ergibt. Der Minimalabstand zwischen den Ribosomen auf einer mRNA ist etwa 80Nucleotide (25nm). Die Ribosomen haben einen Durchmesser von 22nm und folgen demnach recht dicht aufeinander; auf der mRNA fr eine Globinkette
von 140Aminosureresten sind jeweils 56Ribosomen gleichzeitig am Werk
sure spezifische tRNA gekoppelt Die Spezifitt der Koppelung wird garantiert durch die
Aminoacyl-tRNA-Synthetasen, welche sowohl
die Aminosure als auch die betreffende tRNA
erkennen; fr jede tRNA gibt es eine spezifische

Aminoacyl-tRNA-Synthetase. Die Carboxylgruppe
der Aminosure wird unter ATP-Verbrauch aktiviert
und darauf an die zugehrige tRNA gekoppelt. Die
122
1
2
Aminosure wird ber eine Esterbindung an die 2oder 3-OH-Gruppe des 3-endstndigen Adenosinnucleotids der tRNA gekoppelt. Alle tRNAs besitzen
ein CCA 3-Ende.
3
4
5
molekulargenetischen Polymerisierungsreaktionen ist proportional zum Ausma des mglichen
Schadens, der sich aus einem Fehler ergeben kann:

Replikation (verndertes Erbgut; Ausfall eines
Gens mglich)>Transkription (eine vernderte
mRNAviele fehlerhafte Proteinmolekle)>Translation (ein einziges fehlerhaftes Proteinmolekl).
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Stille Mutationen (Silent mutations)
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20
Punktmutationen (Austausch einzelner

DNA-Basen) und Fehler bei der Transkription
oder Translation knnen aus den folgenden
Grnden ohne funktionelle Folgen bleiben:
Die Aminosuresequenz des Proteins
bleibt unverndert, weil der genetische
Code degeneriert ist.
Die Aminosuresequenz des Proteins wird
wohl verndert, das Protein bleibt jedoch
funktionstchtig, weil der Austausch des
Aminosurerests strukturell und funktionell
keine Folgen hat (z.B. bei konservativer
Substitution wie GluAsp oder LeuIle).
Das fehlerhafte Protein ist inaktiv oder
instabil. Der Defekt bleibt unbemerkt, weil
andere Proteine den Ausfall kompensieren
(Redundanz). Der Phnotyp von knock-out
Musen (Abschn.39.12), bei denen ein
Gen ausgeschaltet worden ist, erweist sich
unter Laborbedingungen oft als unauffllig.
11
14
dass die tRNA mit einer falschen Aminosure beladen wird (z.B. Isoleucyl-tRNAVal), besitzen die
Aminoacyl-tRNA-Synthetasen einen hydrolytischen Korrekturmechanismus, welcher ValtRNAIle 100-mal rascher hydrolytisch spaltet als
Ile-tRNAIle. Aufgrund der Spezifitt des Enzyms
und dieses Korrekturmechanismus ergibt sich eine
Fehlerfrequenz von 0,010,01=104. Die Fehlerrate von 1:10000 bedeutet, dass bei der Synthese
eines Proteins von 500Aminosureresten in einem
von 20Proteinmoleklen eine falsche Aminosure
eingebaut wird. Die Genauigkeit der verschiedenen
Die Ribosomen bauen stur diejenige Aminosure

ein, welche an der tRNA hngt, deren Anticodon
an das Codon der mRNA gebunden ist. Die Spezifitt der Aminoacyl-tRNA-Synthetase fr eine
bestimmte Aminosure und fr die zugehrige
tRNA mit ihrem Anticodon sorgt dafr, dass bei
korrekter Paarung von Anticodon und Codon die
richtige Aminosure ins Protein eingebaut wird.
Die Aminoacyl-tRNA-Synthetase erkennt neben
der Anticodonschleife weitere Strukturmerkmale
der tRNA (.Abb.10.3). Schwieriger ist es fr das
Enzym, einander hnliche Aminosuren zu unterscheiden. Zum Beispiel unterscheiden sich Isoleucin und Valin in einer einzigen -CH2-Gruppe.
Fr den seltenen Fall (etwa 1% der Reaktionen),
123
10.4Initiation, Elongation, Termination
10
.. Abb.10.3 Struktur der tRNA. aDie schematische Kleeblattstruktur zeigt die mglichen Basenpaare (in Grau die kurzen Doppelhelix-Abschnitte14). Die angegebenen Nucleotide der insgesamt etwa 75Nucleotide entsprechen einer Consensus-Sequenz; die andern Nucleotide variieren und verleihen der tRNA Individualitt, so dass jede Aminoacyl-tRNA-Synthetase ihre
zugehrige tRNA klar erkennen kann. Die tRNAs enthalten zahlreiche modifizierte, nicht im Consensus inbegriffene Nucleoside
(fr die Alanin-tRNA der Hefe hier in Blau angegeben) wie T (Ribothymidin), (psi, Pseudouridin) und weitere ungewhnliche,
hier nicht bezeichnete Basen (Methylinosin, Dihydrouridin, Methylguanosin und Dimethylguanosin). bDie 3D-Struktur der
tRNA ist durch Rntgenkristallanalyse ermittelt worden und zeigt deren kompakten, L-frmigen Bau mit den vier Doppelhelixabschnitten. Das Anticodon liegt gut zugnglich am Ende des langen Arms des L; das 3-CCA-Ende, an welches die Aminosure
gekoppelt wird, ist am Ende des kurzen Arms ebenfalls gut zugnglich und frei beweglich
10.4
Initiation, Elongation,
Termination
Diese Vorgnge laufen bei Prokaryonten und Eukaryonten in hnlicher Weise ab. Im Folgenden
besprechen wir jeweils den Vorgang bei E.coli und
erwhnen danach die wichtigsten Besonderheiten
bei Eukaryonten.
Bei der Initiation wird die Proteinsynthesemaschinerie zusammengestellt und deren Ableseraster eingestellt Dazu werden bentigt:
--
mRNA mit 5-Cap-Region,

N-Formylmethionyl-tRNAf (f steht fr Formylmethionin); bei Eukaryonten Methionyl-tRNAi
(i steht fr Initiator),
Initiationsfaktoren IF (3 bei Prokaryonten;

mindestens 11 bei Eukaryonten),
GTP und ATP als Energielieferanten (wie
immer als Komplexe mit Mg2+),
beide ribosomalen Untereinheiten.
124
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EPA
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EPA
.. Abb.10.4 Bildung des Initiationskomplexes der Translation bei Prokaryonten. Die drei Initiationsfaktoren IF1-3
bilden zunchst mit der kleinen Ribosomen-Untereinheit den
30S-Initiationskomplex, der darauf unter GTP-Verbrauch zum
70S-Komplex vervollstndigt wird. Das Binden von IF1 und
IF3 an die kleine Untereinheit verhindert die Bildung eines
unproduktiven 70S-Komplexes ohne mRNA und fMet-tRNAf.
Im Initiationskomplex ist fMet-tRNAf an das Startcodon
und die P-Stelle (Peptidyl-Stelle) des Ribosoms gebunden;
A, Aminoacylstelle; E, Exitstelle des Ribosoms
Das Startcodon AUG (in Prokaryonten selten auch

GUG) bindet die Initiator-Met-tRNA (fMet-tRNAf
bzw. Met-tRNAi). AUG und GUG codieren auch fr
internes Methionin bzw. Valin, in diesem Fall werden die Codons von tRNAMet bzw. tRNAVal erkannt.
Die drei Initiationsfaktoren (IF1-3) fixieren unter
ATP-Verbrauch die kleine Untereinheit des Ribosoms
und Formyl-Met-tRNAf ans Startcodon (.Abb.10.4).
Das Auffinden des Startcodons auf der mRNA
wird erleichtert durch die Ribosomen-Bindungsstelle, eine purinreiche Consensus-Sequenz
(Shine-Dalgarno-Sequenz), deren Mitte etwa

10Nucleotide stromaufwrts des Startcodons liegt.
Die Consensus-Sequenz paart ihre Basen mit einem
9-Basen-Segment am 3-Ende der 16S-rRNA der
kleinen Ribosomenuntereinheit. Der vollstndige
Initiationskomplex besteht aus dem 70S-Ribosom,
fMet-tRNAf und mRNA. Das Startcodon und die
Initiator-Met-tRNA liegen an der P-Stelle (Peptidyl-Stelle) des Ribosoms.
Bei Eukaryonten sind mindestens 11 verschiedene Initiationsfaktoren beteiligt (eIF; e, eukaryontisch). Bei Eukaryonten ist das Start-Methionin nie formyliert. Die kleine Untereinheit des
Ribosoms bindet an die Cap-Region der mRNA
und verschiebt sich stromabwrts bis zum ersten
AUG-Triplett, wo nach Binden der groen Untereinheit die Translation beginnt. Die Consensus-Sequenz fr die Startregion (Kozak-Sequenz) stark
exprimierter Proteine lautet: CC(A/G)CCAUGG
(Start-Codon blau). Eukaryontische mRNAs sind
monocistronisch, d.h. codieren nur fr ein Protein.
Bei der Elongation durchluft das Ribosom
einen katalytischen Zyklus mit Platzwechsel der
wachsenden Polypeptidkette Das Ablaufen des
komplexen Zyklus (.Abb.10.5) bentigt folgende

Komponenten:
Initiationskomplex bzw. ein Ribosom mit
Peptidyl-tRNA in der P-Stelle (Peptidylstelle),
Aminoacyl-tRNAs,
Elongationsfaktoren EF-Tu und EF-Ts, die
Enzyme, welche das wachsende Peptid in
der P-Stelle auf die Aminoacyl-tRNA in der
A-Stelle (Aminoacyl- oder Akzeptorstelle)
bertragen. Met-tRNA bindet nicht wie
fMet-tRNAf an IF2, sondern an EF-Tu. EF-G
wird bentigt fr die Translokation der Peptidyl-tRNA von der A-Stelle zur P-Stelle.
GTP.
--
Die Elongation bei Eukaryonten ist derjenigen bei

Prokaryonten sehr hnlich. Die Funktionen von
EF-Tu und EF-Ts werden von den zwei Untereinheiten des eukaryontischen Elongationsfaktors eEF-1
bernommen. eEF-2 entspricht EF-G.
Die Termination wird eingeleitet, sobald ein
Stoppcodon an die A-Stelle gelangt Fr die Ter-
mination werden bentigt:
125
10.4Initiation, Elongation, Termination
E
P
A
Stellen des Ribosoms
10
.. Abb.10.5 Elongations-Zyklus bei E.coli. In der Ausgangssituation (links) befindet sich die Peptidyl-tRNA (oder die fMettRNAf vor dem ersten Elongationsschritt) an der P (Peptidyl)-Stelle des Ribosoms. Die neue Aminoacyl-tRNA bindet im ersten
Schritt an die A (Akzeptor)-Stelle. Dazu wird der Elongationsfaktor EF-Tu bentigt, der GTP hydrolysiert. Im zweiten Schritt
wird die Peptidkette auf die -Aminogruppe des neuen Aminosurerests bertragen (Transpeptidierung). Im letzten Schritt
wird die um den neuen Aminosurerest verlngerte Peptidyl-tRNA von der A-Stelle in die P-Stelle verschoben. Dabei bleibt die
Peptidyl-tRNA ber die Anticodon-Codon-Basenpaare mit der mRNA verbunden. Zusammen mit der Peptidyl-tRNA wird daher
auch die mRNA um drei Nucleotide verschoben. Die Aufrechterhaltung der Codon-Anticodon-Bindung ist bei der Peptidyl-tRNA
nicht mehr wichtig, um die einzubauende Aminosure zu bestimmen, sie ist jedoch wichtig, um die mRNA genau drei Nucleotide zu verschieben und so das Leseraster nicht zu verndern. Die frei gewordene tRNA an der P-Stelle wird in die E (Exit)-Stelle
verschoben und verlsst das Ribosom
--
Stoppcodon (UAG, UAA, UGA),

Terminationsfaktor, welcher das Stoppcodon
erkennt,
GTP.
Es gibt keine tRNA, deren Anticodon einem Stoppcodon entsprche. Je nach Sequenz des Stoppcodons bindet einer der zwei Terminationsfaktoren
(Release factors RF1 und RF2) an die A-Stelle, d.h.
ein Protein anstelle eines Anticodons erkennt das
Stoppcodon. Die Peptidyltransferase bertrgt daraufhin das Peptid auf Wasser statt auf die Aminogruppe einer neuen Aminosure und spaltet damit
die Peptidkette hydrolytisch von der tRNA in der

P-Stelle ab. Danach zerfllt das Ribosom in seine
beiden Untereinheiten. RF3 untersttzt diese Vorgnge unter Verbrauch von GTP. Eukaryonten besitzen nur einen Terminationsfaktor (Release factor
eRF), der ebenfalls GTP verbraucht. Bei den meisten
Proteinen wird der NH2-terminale Formyl-Methionin-Rest (Prokaryonten) oder Methionin-Rest
(Eukaryonten) enzymatisch abgespalten. Bei Eukaryonten wird die frei gewordene -Aminogruppe
des nachfolgenden Rests hufig acetyliert oder sonst
wie modifiziert.
126
Elongation
Geschwindigkeit (bei 37C):
E. coli
1520Aminosurereste pro s
Mensch
25Aminosurereste pro s
Energieverbrauch:
Beladen der tRNA (ATPAMP+2Pi)
2ATP
Binden der Aminoacyl-tRNA an

A-Stelle
1GTP
Translokation der Peptidyl-tRNA

(AP)
1GTP
5
6
Pro angefgten Aminosurerest werden

demnach 4 energiereiche Phosphatbindungen
bentigt.
hoher Letalitt. Das vom Krankheitserreger (Corynebacterium diphtheriae) ausgeschiedene Toxin ist
ein Enzym. Es inaktiviert den Elongationsfaktor EF2
von Eukaryonten durch eine chemische Modifikation. Ein einziges Molekl des Enzyms gengt, um
die Proteinsynthese einer Zelle stillzulegen. Fr den
nichtimmunisierten Menschen sind einige Nanogramm tdlich.
Antibiotika
Diverse Biomolekle, welche die Proteinsynthese nur in Prokaryonten hemmen, sind wichtig zur Bekmpfung bakterieller Infektionen:
Streptomycin:
Bindet an die bakterielle

16SrRNA der kleinen Untereinheit und fhrt zu fehlerhafter
Ablesung der mRNA und Hemmung der Translation.
Tetrazykline:
Binden an die 30S-Untereinheit

und hemmen das Binden der
Aminoacyl-tRNA.
Chloram
phenicol:
Hemmt die Peptidyltransferase-

Aktivitt der 50S-Untereinheit.
Erythromycin:
Bindet an die 50S-Untereinheit

und hemmt die Translokation.
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10.5 Hemmstoffe
der Proteinsynthese
Die ribosomale Proteinsynthese wird durch eine

Reihe mannigfaltiger Naturstoffe und synthetischer
Derivate derselben gehemmt. Die Hemmstoffe interferieren mit ganz verschiedenen Teilen der komplexen Proteinsynthesemaschinerie. Manche dieser
Inhibitoren werden in der Medizin als Antibiotika
verwendet, einzelne dienen als wichtige Werkzeuge
der biochemischen Forschung.
Puromycin aus Streptomyces alboniger, einem
Strahlenpilz, ist ein Strukturanalog des Tyrosyl-Adenosin-Teils der Tyrosyl-tRNA und kompetiert mit Tyrosyl-tRNATyr um die Bindung an die
A-Stelle. Puromycin bildet eine Peptidbindung mit
der Carboxylgruppe des wachsenden Peptids an
der P-Stelle. Das Proteinfragment mit Puromycin
am C-Ende dissoziiert vom Ribosom. Puromycin
wird experimentell als allgemeiner Inhibitor der
Proteinsynthese verwendet. Fr eine medizinische
Verwendung ist Puromycin zu toxisch, da es die
Proteinsynthese nicht nur in Prokaryonten sondern
auch in Eukaryonten hemmt.
Cycloheximid hemmt die Peptidyltransferase-Aktivitt der 60S-Untereinheit eukaryontischer
Ribosomen und dient ebenfalls nur fr experimentelle Zwecke.
Diphtherietoxin Die Diphtherie war vor der
Entwicklung einer wirksamen Impfung eine sehr
gefrchtete bakterielle Infektionskrankheit mit
Links auf
Springer Website:
027-6-1514847-0
10.1 Der genetische Code
10.2 Proteinsynthese, bersicht
10.3 Bildung der Aminoacyl-tRNA
10.4 Initiation, Elongation, Termination
10.5 Hemmstoffe der Proteinsynthese
127
Regulation
der Genexpression
11.1
Regulation der Transkription bei

Prokaryonten: Operon128
11.2
Regulation der Transkription bei Eukaryonten:

Transkriptionsfaktoren130
11.3
Posttranskriptionale Regulation der Genexpression 133
11.4
Epigenetische Regulation und Vererbung 135

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Kapitel 11 Regulation der Genexpression
Alle Zellen eines Organismus besitzen das gleiche

Genom (Gesamtheit der Gene). In Eukaryonten
dient die Mehrzahl der Gene (RNA-Gene) zur Produktion regulatorisch oder katalytisch aktiver RNA;
eine kleinere Anzahl der Gene (Protein-Gene) liefert Transkripte (mRNA) als Vorlage fr die Proteinsynthese. Die Palette der zellulren Proteine, das
Proteom (Gesamtheit der Proteine), variiert stark
je nach Zelltyp; in einer gegebenen Zelle werden
nur etwa 5% aller Protein-Gene exprimiert. Die
Regulation der Genexpression stellt das primre
Mittel zur zeit- und ortsgerechten Bereitstellung der
Makromolekle in der bentigten Menge dar. Die
allermeisten Gene werden ber die Frequenz des
Transkriptionsstarts gesteuert. Die Genregulationsmechanismen der verschiedenen Organismen gleichen sich in den Grundzgen; die wesentlichsten
Unterschiede finden sich zwischen Prokaryonten
und Eukaryonten.
Die DNA der Prokaryonten ist dicht mit hauptschlich proteincodierenden Genen besetzt und
verhltnismig einfache Mechanismen regulieren
deren Expression: Ein Operon enthlt mehrere hintereinander aufgereihte Gene, welche miteinander
reguliert und, nach Aktivierung des Operons, zusammen auf das gleiche mRNA-Molekl transkribiert werden.
Das Chromatin der Eukaryonten ist im Grundzustand stillgelegt, die Gene sind inaktiv; bei Aktivierung der weit verstreuten Gene wird das Chromatin lokal aufgelockert. Die eukaryontischen
Gene werden individuell reguliert: Sie besitzen
verschiedene Promotoren und zustzliche genspezifische regulatorische DNA-Abschnitte, darunter
auch die weitab vom Promotor liegenden Enhancer und Silencer. Jedes Gen codiert seine eigene
mRNA, deren Stabilitt von Gen zu Gen stark variiert. Die Genregulation bei vielzelligen Eukaryonten umfasst neben dem quantitativen Aspekt, d.h.
in welcher Menge ein bestimmtes Genprodukt
bereitgestellt wird, den komplexen qualitativen
Aspekt wie sich aus einer Eizelle die mannigfaltig
spezialisierten Zellen entwickeln, die doch alle das
gleiche Genom haben. Die Unterschiede zwischen
den verschiedenen Zelltypen entstehen frh in der

Entwicklung der Organismen und werden bei den
nachfolgenden Zellteilungen an die Tochterzellen
weitergegeben. Diese epigenetische Vererbung,
die Weitergabe von Merkmalen, welche nicht in
der Basenabfolge der DNA festgelegt sind, kommt
zustande durch Methylierung der DNA, Modifikation gewisser Histone und RNA-Interferenz
(RNAi).
Die groe Bedeutung eines regulatorischen
Netzwerks aus sehr vielen langen (>200Nucleotide)
nichtkodierenden RNAs, welches die Mehrzahl der
genregulatorischen Mechanismen beeinflusst, ist
erst in letzter Zeit erkannt worden.
11.1
Regulation der Transkription

bei Prokaryonten: Operon
Das Lactose-Operon (lac-Operon) von E. coli

fasst mehrere Gene zusammen In lactosefreiem
Medium wachsende Bakterienzellen besitzen pro

Zelle nur 12Molekle der -Galactosidase, die
Lactose (Milchzucker; Abschn.16.3) zu Glucose
und Galactose hydrolysiert. Enthlt hingegen das
Kulturmedium Lactose, wird die -Galactosidase
sehr rasch auf etwa 3000Molekle pro Zelle aufgestockt, sodass die Bakterien nun imstande sind,
Lactose effizient zu vergren (anaerob abzubauen
zu Lactat; Abschn.14.1). Lactose im Medium
bewirkt nicht nur die rasche Synthese (Induktion)
der -Galactosidase (Produkt des lacZ-Gens),
sondern beeinflusst auch die Expression anderer
Gene und Operons. Das lac-Operon reagiert auf
Lactose nicht nur mit einer Induktion der -Galactosidase sondern auch der Galactose-Permease
(Produkt des lacY-Gens) und der Galactosid-Acetyltransferase (Produkt des lacA-Gens). Die drei
Gene lacZ-lacY-lacA liegen in dieser Reihenfolge
hintereinander. Das Transkript des Operons, die
mRNA, enthlt die Leseraster aller drei Enzyme.
Fr deren Induktion ist nicht die Lactose direkt
verantwortlich, sondern ein metabolisches Umlagerungsprodukt, die 1,6-Allolactose.
129
11.1 Regulation der Transkription bei Prokaryonten: Operon
11
RNA-Polymerase. Die Allolactose wird in geringer

Menge als Isomerisierungsprodukt der Lactose gebildet. Im Labor wird zur Induktion des Operons oft
das metabolisch stabile synthetische Analog Isopropyl--d-thiogalactosid (IPTG) verwendet.
Das Regulator-Gen lacI macht das lac-Operon

induzierbar In gewissen E. coli Stmmen ist das
lac-Operon nicht induzierbar; die Gene werden

auch in Abwesenheit von Lactose exprimiert. Die
Induzierbarkeit hngt ab vom Regulator-Gen lacI,
welches den Lactose-Repressor codiert:
Das lac-Repressorprotein bindet an den Operator,

ein DNA-Segment in der 5-Kontrollregion des
Operons, verhindert die Bindung der RNA-Polymerase an den Promotor und blockiert dadurch die
Transkription. Sobald jedoch ein Induktormolekl
wie Allolactose an den Repressor bindet und eine
Konformationsnderung auslst, dissoziiert der
Repressor von der Operatorstelle (allosterischer Effekt; Abschn.4.6) und gibt den Weg frei fr die
Der lac-Repressor besteht aus vier identischen Untereinheiten und zeigt eine zweizhlige (180o) Symmetrie. Es bindet mit hoher Affinitt (Kd =1011M)
an das untenstehende DNA-Segment, ein sogenanntes Palindrom mit derselben Symmetrie.
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Terminologie
Ein molekulargenetisches Palindrom zeichnet
sich durch eine zweizhlige Symmetrieachse
(Punktsymmetrie, Rotation um 180) aus.
Die Sequenz vom 5- zum 3-Ende des einen
Strangs liest sich gleich wie die Sequenz vom
5- zum 3-Ende des anderen. Ein sprachliches
Palindrom hingegen liest sich von vorne gleich
wie von hinten, z.B. Anna oder Reliefpfeiler.
-Galactosidase wird nur synthetisiert, wenn das

Medium keine Glucose enthlt Wenn Glucose
vorhanden ist, bentigt die Zelle keine Lactose;

die Glucose reicht als Kohlenstoff- und Energiequelle. Glucose unterdrckt daher die Aktivitt des
lac-Operons (Katabolit-Repression). Bei niedriger
Glucosekonzentration erhht sich die Konzentration von cAMP (cyclicAMP; Abschn.16.2), einem
Hungersignal bei Bakterien, wie auch bei Mensch
und Tier. In E.coli bindet cAMP an das CAP (Catabolite gene Activator Protein), worauf der Komplex direkt stromaufwrts von der Bindungsstelle
der RNA-Polymerase im lac-Operon bindet. CAPcAMP erleichtert die Bindung der RNA-Polymerase
und erhht damit die Frequenz der Transkription.
Das lac-Operon steht demnach unter doppelter
Kontrolle: Hemmung durch Repressor und Aktivierung durch CAP-cAMP. Solange der Zelle gengend Glucose zur Verfgung steht, kme es einer
Verschwendung gleich, Enzyme zur Verwertung
anderer Energiequellen wie Lactose bereitzustellen.
Das Beispiel des lac-Operons zeigt, dass die Zelle zur
Regulation des Stoffwechsels verschiedene Regelgren benutzt, einerseits das Substrat des Operons
(Lactose) andererseits die allgemeine Stoffwechsellage (cAMP-Hungersignal). Die kombinierte Wirkung verschiedener Signale und regulatorisch wirksamer Proteine, die an spezifische DNA-Abschnitte
binden, finden sich auch bei Eukaryonten als Teile
komplexer regulatorischer Netzwerke.
11.2
Regulation der Transkription

bei Eukaryonten:
Transkriptionsfaktoren
Auch bei Eukaryonten wird die Expression spezifischer Gene entweder gefrdert oder gehemmt
durch das Binden bestimmter Proteine an die DNA
oder auch an die RNA. Dazu kommen regulatorische Effekte spezifischer kleiner RNA (miRNA und
siRNA) und chemischer Modifikationen der DNA
und der Histone.
Genspezifische Transkriptionsfaktoren (TF,
Genregulatorproteine) kontrollieren die Transkriptionsfrequenz Die Wechselwirkung genspezifi-
scher TF mit dem allgemeinen Transkriptionskomplex (Abschn.9.1) aktiviert die RNA-Polymerase.

Die Genregulatorproteine binden an stromaufwrts
gelegene genspezifische Promotor-Sequenzen
oder auch an weiter weg liegende Enhancer und
Silencer (Abschn.9.1); ihre groe Vielfalt ermglicht ein individuelles Regulationsmuster fr jedes
einzelne Gen.
Genspezifische TF bestehen aus zwei oder
drei Domnen: DNA-Bindungsdomne, Wirkungsdomne und Signalempfangsdomne Die
DNA-Bindungsdomne erkennt ein regulatorisches

Segment in der DNA-Doppelhelix. Die Wirkungsdomne interagiert mit der RNA-Polymerase und/
oder allgemeinen oder auch anderen genspezifischen
TF des Transkriptionskomplexes und beeinflusst dessen Stabilitt (und damit die Initiationsfrequenz).
Manche Genregulatorproteine besitzen zudem eine
Signalempfangsdomne, die externen Signalen erlaubt, die Aktivitt des TF zu steuern.
Die Bindungsstellen fr Genregulatorproteine
sind DNA-Segmente von 620bp; in manchen Fllen erkennt die DNA-Bindungsdomne nicht nur
ein bestimmtes DNA-Segment, sondern mehrere
Consensus-Sequenzen. Viele Genregulatorproteine
sind Dimere gleicher oder hnlicher Untereinheiten. Eine Dimerstruktur mit einer Rotationssymmetrie um 180o ist typisch fr DNA-bindende
Proteine: Sie entspricht der antiparallelen Struktur
der Erkennungsstellen in der DNA-Doppelhelix
(vgl. mit lac-Operatorstelle und Restriktionsstellen; Abschn.11.1, bzw. 39.1). Die Dimerisierung
eines TF erfolgt meist ber einen Leucin-Zipper
(Leucin-Reiverschluss; .Abb.11.1), eine Coiled
131
11.2 Regulation der Transkription bei Eukaryonten: Transkriptionsfaktoren
.. Abb.11.1 Leucin-Zipper. Der Leucin-Reiverschluss (vgl. .Abb.3.8) ist derjenige Teil

eines Transkriptionsfaktors, welcher das Dimer
stabilisiert. Er umfasst etwa 230Aminosurereste
und ist damit etwa doppelt so lang wie der hier
gezeigte Abschnitt. Er gabelt sich zur DNA-Bindungsdomne auf, welche die Ziel-DNA-Doppelhelix (schwarz/grau) mit basischen Aminosureresten
umklammert. Die Wirkungsdomne liegt am
anderen Ende (COOH-Ende) des Zippers und ist
hier nicht gezeigt. Koordinaten aus Protein Data
Bank, PDB-Accession 1YSA
coil-Struktur, wie sie auch im Keratin vorkommt

(.Abb.3.8).
Ein weiterer Typ von TF benutzt das Helix-turn-helix-Motiv, das sich ebenfalls scherenartig
an die DNA anlagert.
Ein drittes wichtiges Motiv DNA-bindender
Proteine ist der Zinkfinger, dessen Struktur durch
vier Bindungen der Polypeptidkette an ein Zinkion
zustande kommt (.Abb.11.2). Der helicale Teil eines Zinkfingers bindet in die groe Furche der DNA
und stellt den Kontakt mit zwei Nucleotiden her. In
vielen TF kommen mehrere Zinkfinger miteinander
vor; jeder der Zinkfinger bindet an eine bestimmte
Nucleotidsequenz und die Kombination mehrerer
solcher kurzer Sequenzen ergibt die Bindungsstelle
des TF. Mehrere hundert verschiedene Zinkfinger
und deren Zielsequenzen sind bekannt.
Genregulatorproteine mit einer Signalempfangsdomne wandeln chemische Signale in

genregulatorische Effekte um Das Signal, ein
nichtkovalent gebundener Ligand oder die Phosphorylierung durch eine bestimmte Proteinkinase,
fhrt zu einer Konformationsnderung der Signalempfangsdomne, welche nun die DNA-Bindungsdomne allosterisch aktiviert, indem sie
deren Affinitt fr das DNA-Zielsegment stark erhht. Dabei werden derart hohe Bindungsstrken
(Kd-Werte im Bereich von 1010 bis 108M) erreicht,
dass die Genregulatorproteine gezielt an die entsprechenden regulatorischen Sequenzen aller Zielgene
11
DNA-Bindungsdomne
DNABindung
in groer
Furche
.. Abb.11.2 DNA-bindendes Zinkfingermotiv. Das Zinkion

geht in diesem Beispiel eines Zinkfingers eine Komplexbindung mit den Stickstoffatomen zweier Histidinreste und den
Schwefelatomen zweier Cystein-Reste ein. In anderen Zinkfingern finden sich vier Cysteinreste als Liganden
binden. Die Wirkungsdomne des TF komplexiert

nun mit dem Transkriptionskomplex und frdert
oder erschwert die Initiation der Transkription des
entsprechenden Gens.
Die Aktivierung von Genen durch glucocorticoide Hormone gibt ein Beispiel, wie ein Signal die
Affinitt eines TF zur regulatorischen DNA-Sequenz
verndert. Glucocorticoide werden im Hungerzustand freigesetzt. Sie frdern in der Leber die Aktivierung der Gene bestimmter Stoffwechselenzyme
und damit die Produktion von Glucose aus Aminosuren und anderen Nicht-Kohlenhydrat-Ver-
132
1
2
bindungen (Abschn.16.1). Glucocorticoide sind

Steroidhormone, also kleine hydrophobe Molekle,
die leicht in die Zelle diffundieren. Dort binden sie
an ein spezifisches Rezeptorprotein. Das Rezeptor-
protein, ein inaktiver TF, wird nach Andocken des

Hormons aktiviert und bindet an ein spezifisches
DNA-Element (Glucocorticoid response element,
GRE) und reguliert die entsprechenden Gene:
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Initiationskomplex
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Bei anderen Zielgenen oder in anderen Zielgeweben bindet der Hormon-Rezeptorkomplex in einem
anderen Kontext von Genregulatorproteinen und
kann unter Umstnden die Transkription hemmen.
Glucocorticoide aktivieren bzw. reprimieren jeweils
einen zell- und gewebetypischen Satz von Genen.
Verantwortlich hierfr ist nicht nur die zelltypische
Expression von TF, sondern auch die zelltypische
bermittlung des Signals. Die Wirkung bestimmter Signale, z.B. eines Hormons, auf die Gesamtheit
der Gene einer Zelle oder eines Gewebes wird heute
mittels Chiptechnik erfasst (Abschn.40.3).
Ein Teil der Genregulatorproteine sind Enhancer/Silencer-bindende Proteine Die Enhan-
cer/Silencer-Sequenzen liegen oft mehrere Kilobasen von der Promotor-Region (Abschn.9.1)

entfernt. Mehrere Proteinkomplexe (Enhancerund Silencer-bindende Proteine sowie weitere
Genregulatoren und Mediatorproteine) knnen
miteinander auf einen allgemeinen Transkriptionskomplex einwirken. Die Wahrscheinlichkeit eines
Transkriptionsstarts entspricht der algebraischen
Summe der Wirkungen der verschiedenen Genregulatorproteine:
133
11.3 Posttranskriptionale Regulation der Genexpression
11
Mediatorproteine
Die Aktivierung eines Gens ist ein statistisches

Ereignis mit einer bestimmten Frequenz Die
Aktivierung eines Gens in einer Zelle ist ein Einzelereignis. Ein RNA-Polymerase-Molekl kopiert
das Gen nach erfolgter Initiation nur einmal mit
einer konstanten, nichtregulierten Geschwindigkeit von etwa 20 Nucleotiden pro Sekunde (in
Eukaryonten). Fr die Herstellung einer weiteren
RNA-Kopie muss das Gen erneut aktiviert werden.
Ein sehr aktives Gen kann in einer Zelle mehrere
Male pro Minute transkribiert werden; die Transkription eines schwach exprimierten Gens hingegen kann in einer Zelle innerhalb mehrerer Tage
auch nur einmal stattfinden. Falls die produzierte
mRNA und das Protein jedoch stabil sind, kann das
biologisch aktive Genprodukt trotz der niedrigen
Transkriptionsfrequenz permanent in der Zelle
vorhanden sein.
Die Aktivierung einer Reihe von Genen kann
durch ein bergeordnetes Mastergen koordiniert
werden Nach Aktivierung eines Mastergens wer-
den eine Reihe von Genen in koordinierter Weise

strker bzw. schwcher exprimiert: Ein typisches
Beispiel ist das MYOD-Gen, welches den Trans
kriptionsfaktor MYOD codiert. Wird das Gen in
Fibroblasten exprimiert, synthetisieren diese Zellen Muskelproteine, die sie sonst nicht enthalten
und entwickeln eine muskeltypische Morphologie. Die Expression des MYOD-Mastergens gengt, um Fibroblasten in Muskelzellen umzuwandeln. Andere Beispiele solcher Mastergene haben
sich aus entwicklungsbiologischen Studien an der
Fruchtfliege Drosophila ergeben: Die Bildung der
Krpersegmente der Fliege wird durch Gene von
Homodomnen-Transkriptionsfaktoren (Homo-
box-Gene) kontrolliert. Analoge Gene steuern die
Bildung von Extremitten oder Augen.
11.3
Posttranskriptionale Regulation
der Genexpression
RNA-Interferenz (RNAi) reguliert die Halbwertszeit der mRNA Die zellulre Konzentration einer
mRNA wird durch die Geschwindigkeit nicht nur

von deren Synthese sondern auch von deren Abbau bestimmt. Bei Eukaryonten wird der Abbau
mancher mRNAs durch kurze nichtcodierende
RNA-Transkripte kontrolliert. Diese micro-RNA
(miRNA, in Haarnadelform mit Doppelstrang)
wird durch die Endoribonuclease Dicer (to dice,
in kurze gleichmige Stcke zerteilen) zu siRNA
(small interfering RNA) prozessiert und danach von
einer Helicase in Einzelstrnge zerlegt. Ein Strang
wird abgebaut whrend der andere sich mit einer
komplementren Sequenz auf der Ziel-mRNA paart
und mit Hilfe des Proteinkomplexes RISC (RNA-Induced Silencing Complex) den Abbau der mRNA
durch eine Argonaut-Endoribonuclease auslst.
Eine aufgrund nur teilweiser Komplementaritt
schwchere Wechselwirkung zwischen siRNA und
Ziel-mRNA fhrt nicht zum Abbau, kann jedoch
die Translation der betroffenen mRNA blockieren
(.Abb.11.3). Zelleigene, endogene miRNA dient
somit der Regulation zelleigener Gene.
Die einzelstrngigen Vorlufer der miRNA
sind meist durch Introns codiert und werden durch
RNA-Polymerase II synthetisiert. Sie zeigen Inverted repeats (umgekehrte Wiederholungssequenzen;
Abschn.12.1), so dass der Strang eine ausgedehnte
134
MikrogenDNA
2)
mRNA
3)
3
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5
dsRNA
aus Virus
Chemische
Synthese und
Transfektion
miRNA
Dicer
miRNA
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19
20
100%
komplementr
Abbau der
mRNA
1)
RNAPolymerase II
Leseraster
Dicer
22bp Helicase EinzelsiRNA

strang
6
7
Abbau
Zellkern
Cytoplasma
RISCKomplex Teilweise
komplemit
Minus- mentr
strang
Translationsstopp
AAAAAA
.. Abb.11.3 Mechanismen der RNA-Interferenz RNAi. Die Entstehung und Wirkungsweise von siRNA ist vereinfacht dargestellt.
Die doppelstrngige siRNA kann aus drei verschiedenen Quellen stammen: 1) Transkriptionsprodukte aus hufigen regulatorischen Mikrogenen, die in nichtcodierender DNA und auch in Introns lokalisiert sein knnen; 2) im Labor synthetisierte miRNA,
die fr experimentelle Zwecke genutzt wird; 3) doppelstrngige RNA aus Viren und Transposons. Die Endonuclease Dicer spaltet miRNA in etwa 22bp lange Stcke, die doppelstrngige siRNA. Eine Helicase trennt die beiden Strnge der siRNA, worauf
der eine Strang abgebaut wird, whrend der zweite siRNA-Strang mit den Proteinen des RISC-Komplexes (RNA-Induced Silencing
Complex) zusammentritt. Der RISC bindet an mRNA-Abschnitte, welche zu seiner siRNA komplementr sind, und fhrt je nach
Passgenauigkeit zum Abbau der mRNA mit Hilfe der Argonaut-RNase (nicht gezeigt) oder zu einem Translationsstopp
Haarnadelstruktur bildet. Dicer-Endoribonucleasekomplexe schneiden die Vorlufer zu kurzen (21

25Nt) siRNA-Stcken zurecht, die am 5-Ende mit
einer Cap-Struktur versehen werden.
RNAi dient auch zum Schutz der Zelle gegen
mobile genetische Elemente wie Viren. Viele mobile
genetische Elemente produzieren dsRNA-Vorlufer,
welche in den Zellen von Dicern zu siRNA gespalten
werden. Durch Komplexierung mit RISC werden
danach die RNA-Produkte der mobilen genetischen
Elemente gezielt abgebaut, wobei die Zielsequenz
fr die Basenpaarung mit der siRNA berall auf der
exogenen mRNA liegen kann.
RNA-Interferenz bietet neue medizinische und

experimentelle Mglichkeiten Mittels RNA-In-
terferenz besteht die Mglichkeit, experimentell

oder als therapeutische Manahme die Expression
gewisser Gene zu unterdrcken. Im Labor bietet
siRNA eine Alternative zur Gen-knock-out-Technik
(Abschn.39.12).
In wenigen Fllen wird die Genexpression auf
dem Niveau der Translation reguliert Ein Bei-
spiel liefert die Synthese von Globin. In den Reti-
culozyten, den Vorluferzellen der roten Blutkrperchen, wird Hmoglobin bereitgestellt. Wird zu
wenig von der prosthetischen Gruppe, dem Hm,
produziert, blockiert eine Signalbermittlungskette
den Initiationsfaktor eIF2 und verhindert damit die
Initiation der Translation.
Posttranskriptionale bzw. posttranslationale
Modifikationen beeinflussen die biologische Aktivitt der Genprodukte Viele RNAs und Proteine
werden nach ihrer Synthese enzymatisch modifiziert und dadurch in ihrer biologischen Aktivitt
moduliert. Weit verbreitet sind die Phosphorylierung von Proteinen sowie die proteolytische Aktivierung inaktiver Proenzyme.
Riboswitches auf der mRNA stoppen deren

Translation oder brechen die Transkription ab
Vor allem in Bakterien, aber auch in Pflanzen und

Pilzen finden sich als Aptamere bezeichnete Bereiche der nichttranslatierten 5-Region gewisser
mRNAs, die aufgrund ihrer Raumstruktur einen
durch das Translationsprodukt beeinflussten Metaboliten binden. Diese Bindung lst eine Konformationsnderung der mRNA aus und kann deren
11
135
11.4 Epigenetische Regulation und Vererbung
Translation hemmen oder die Transkription abbrechen und so den betreffenden Stoffwechselweg
hemmen.
Lange, nichtkodierende Transkripte kommen
sehr hufig vor und haben wichtige strukturelle
und regulatorische Funktionen Lange Tran-
skripte ohne Leseraster kommen wesentlich hufiger vor als mRNAs. Sie stammen sowohl aus genreichen Regionen wie auch aus Zwischengenregionen
der DNA. Solche langen ncRNAs (Long noncoding
RNAs) greifen in die meisten genregulatorischen
Prozesse ein. Obschon die beteiligten Mechanismen
noch nicht aufgeklrt sind, scheint es plausibel, dass
lange ncRNA eine zentrale Rolle bei der rumlichen
Organisation des Chromatins und damit bei den
genregulatorischen Vorgngen spielt.
11.4
Epigenetische Regulation
und Vererbung
Epigenetische Regulationsmechanismen ermglichen die Differenzierung eukaryontischer

Zellen Alle somatischen Zellen eines Organis-
mus besitzen das gleiche Genom; die Unterschiede

zwischen einem Neuron, einer Leberzelle oder einer Epithelzelle beruhen auf einer zellspezifischen
stabilen Programmierung der unterschiedlichen
Expression bestimmter Gene (Zelldifferenzierung;
Abschn.36.1). Die Weitergabe von Expressionsmustern bei der Zellteilung, welche nicht genetisch,
d.h. in der Basenabfolge der DNA, festgelegt sind,
wird als epigenetische Vererbung bezeichnet. Die
wichtigsten epigenetischen Vererbungsmechanismen sind Histonacetylierung, DNA-Methylierung
und RNA-Interferenz.
Epigenetisch festgelegt sind auch Merkmale
wie die Verlngerung der Telomere in Keimzellen
(Abschn.8.2) und die Ausschaltung eines der zwei
X-Chromosomen in weiblichen Sugern. Ebenso
werden das Wachstum von Tumorzellen und die
Gedchtnismechanismen des Gehirns epigenetisch
beeinflusst.
Chromatin-Umlagerungskomplexe dienen
ebenfalls zur Regulation der Transkription Im
Grundzustand des Chromatins mit dichter nucleosomaler und supranucleosomaler Packung der
DNA sind die Promotorregionen nicht zugnglich
.. Abb.11.4 Sichtbare Genaktivitt in dekondensierten

polytnen Speicheldrsenchromosomen von Drosophila.
In den Puffs lsst sich der Einbau radioaktiv markierter
Ribonucleotide in die Transkripte durch Autoradiographie
(Exposition aufgetragener Rntgenfilm-Emulsion) mikroskopischer Prparate direkt darstellen. Die Silberkrner (schwarze
Flecken) sind nach der Entwicklung des gefrbten Prparats
im Mikroskop sichtbar und befinden sich in Regionen aktiver
RNA-Synthese.
fr die Bildung von Transkriptionskomplexen. Erst

eine Dekondensation macht die betroffenen Gene
fr die Transkriptionsmaschinerie zugnglich. Das
so genannte Puffing (Aufblhen) polytner Riesenchromosomen in den Speicheldrsen der Fruchtfliege Drosophila lsst die Dekondensation sichtbar
werden, weil in den polytnen Chromosomen etwa
1000 identische DNA-Molekle parallel zueinander
angeordnet sind (.Abb.11.4).
Unter ATP-Verbrauch lockern groe Chromatin-Umlagerungskomplexe die Struktur des Chromatins auf, lsen die DNA abschnittsweise von den
Nucleosomen und schaffen dadurch Zugang fr
Proteine zur DNA. Eine solche Umlagerung (Remodeling) des Chromatins ist nicht nur zur Replikation
der DNA notwendig sondern auch fr alle anderen
Vorgnge, bei denen Proteine an die DNA zu binden haben (Transkription, Regulation, Reparatur,
Rekombination etc.).
Histon-Modifikationen stabilisieren die aufgelockerte Struktur des Chromatins Die Histon-Acetyltransferase (HAT) bertrgt den Acetylrest von
Acetyl-CoA auf -Aminogruppen von Lysinresten

in der NH2-terminalen Domne der Histone:
O
CH3 C ~ S CoA
+ Lys (CH2)4 NH3

Lysin in Histon
Acetyl CoA
HAT
H S CoA
O
Lys (CH2)4 N C CH3
H
136
1
2
3
N-terminaler Histonschwanz
M M
A
MP
A
M
MA
A
M
A
MM P
2
R
9 10
K S
14
K
17 18
R K
23
K
26 - 28
RK S
36
K
4
K
Nucleosomenkern
4
5
K9
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Heterochromatin,
Gene stumm
K4
K9
Gene exprimiert
S10
K14
Gene exprimiert
K27
M
X-ChromosomInaktivierung
.. Abb.11.5 Der Histon-Code am Beispiel der Modifikation des Histons H3. Die aminoterminalen Schwnze der Histone ragen
aus dem oktameren Histonkern heraus und werden mehrfach posttranslational modifiziert. Die Modifikationen werden durch
Histonacetyltransferasen (HAT), Histonmethylasen und Histonkinasen durchgefhrt, die oft Teil eines Genaktivatorkomplexes
sind. Tausende von Varianten der Histonmodifikation knnen zustande kommen. Die spezifische Konstellation der Histonmodifikation in einer Chromatinregion wird von Proteinkomplexen erkannt und an die Proteine weitergeleitet, welche die Transkription, DNA-Reparatur, Rekombination, Genexpression usw. bewerkstelligen. Die Bedeutung nur einiger weniger Modifikationen
ist bekannt; wir sprechen jedoch im Sinn einer Hypothese vom Histon-Code. A, Acetylierung; M, Methylierung; P, Phosphorylierung; Zahl, Position des modifizierten Rests; R, Arginin; K, Lysin; S, Serin
Die positive Ladung der Histone und deren Affinitt

zur negativ geladenen DNA wird damit verringert,
wodurch die DNA sich leichter in eine Form umlagert, welche die Bildung des Transkriptionskomplexes zulsst: Das Gen wird aktiviert. Wie identifiziert
die HAT die zu aktivierenden Gene? Offenbar wird
sie durch Aktivatorproteine, einen besonderen Typ
signalabhngiger Transkriptionsfaktoren, an das
zu aktivierende Gen geleitet. Die aktivierten Gene
knnen auch wieder abgeschaltet werden; die Histondeacetylase macht die Acetylierung rckgngig, sobald die genaktivierenden Signale (Hormone,
Cytokine) verschwunden sind.
Weitere Histonmodifikationen wie die Methylierung von Lysin- oder Argininresten, Phosphorylierung und Ubiquitinierung knnen je nach Typ des
Histons und Ort der Modifikation die Genaktivitt

positiv oder negativ beeinflussen und somit das
zelltypische Genexpressionsmuster zustzlich fixieren. Der Zusammenhang zwischen dem Modifizierungsmuster der Histone und der Transkriptionsaktivitt der entsprechenden DNA-Abschnitte wird
in Analogie zum genetischen Code als Histon-Code
bezeichnet (.Abb.11.5). Vermutlich bleiben gewisse Histon-modifizierende Enzyme whrend der
Replikation ans Chromatin gebunden und ermglichen dadurch die Vererbung von Teilen des Histon-Codes.
Methylierung der DNA in der Kontrollregion
von Genen fixiert ein bestimmtes Expressionsmuster Dieser Mechanismus zur Programmie-
rung der Genexpression findet sich nur bei Verte-
137
braten. Gewisse Cytosinbasen werden in Position5

methyliert.
11
hnlich einer Immunreaktion, von einigen wenigen

Zellen ausgehend ber eine ganze Pflanze ausbreiten.
Die Umstrukturierung von Genen kann regulatorische Konsequenzen haben Die Um-
platzierung von Genabschnitten in eine neue regulatorische Umgebung ist typisch fr Gene des
Immunsystems (Abschn.32.4). Ein weiteres
Beispiel dieser Art sind die regulatorischen Effekte
durch Einfgung (Insertion) von Onkogenen in
Chromosomen (Abschn.12.3).
Bei Sugern sind etwa 70% der CG-Sequenzen
methyliert und knnen dank der Resistenz der
methylierten DNA-Abschnitte gegen Spaltung mit
bestimmten Restriktionsenzymen (Abschn.39.1)
nachgewiesen werden. Die Methylierungen kommen in Promotor-Regionen mit hohem Gehalt
benachbarter C und G-Nucleotide (CpG-Inseln,
CpG islands) gehuft vor. In der Regel hemmt die
Methylierung dieser CpG-Inseln die Expression
des Gens. Die DNA-Methylase bertrgt whrend
der Replikation den Methylrest von S-Adenosylmethionin auf die DNA. Das Enzym erkennt hemimethylierte Abschnitte im Eltern-DNA-Doppelstrang und methyliert im anderen Strang die
entsprechenden Basen, das Methylierungsmuster
wird so an die Tochterzelle weitergegeben. Diese
sogenannte genomische Prgung (Genomic imprinting) uert sich darin, dass bei einigen Genen
die Expression davon abhngt, ob das betreffende
Allel von der Mutter oder vom Vater stammt, auch
wenn die Basensequenzen der zwei Eltern-Allele
samt deren Promotoren miteinander identisch sind.
Bei solchen Genen fhrt ein epigenetischer Mechanismus nicht nur zur Weitergabe von Merkmalen
bei der Mitose, sondern auch bei der Meiose der
Keimzellen und damit zu deren Weitergabe an die
nchste Generation.
RNA-Interferenz fhrt mittels bertragung

von RNA-Fragmenten zu epigenetischen Effekten Nach der Spaltung eines RNA-Molekls durch
den RISC-Komplex wird die kurze den Prozess auslsende miRNA oder siRNA wieder frei und kann
weitere RNA-Molekle angreifen. Die bermittlung
solcher kurzer RNAs durch Zell-Zell-Kontakte oder
bei Zellteilungen ergibt epigenetische Vererbungseffekte. Eine Virusresistenz kann sich auf diese Weise,
Links auf
Springer Website:
027-6-1514849-0
11.1 Regulation der Transkription
bei Prokaryonten: Operon
11.2 Regulation der Transkription
bei Eukaryonten: Transkriptionsfaktoren
11.3 Posttranskriptionale Regulation
der Genexpression
139
Plasmide, Viren, Viroide

und Prionen
12.1
Plasmide140
12.2
Viren144
12.3
Tumorviren und Onkogene 147
12.4
Subvirale pathogene Agenzien: Viroide und Prionen 149

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Kapitel 12 Plasmide, Viren, Viroide und Prionen
Das Genom eines Organismus enthlt viele konservierte DNA-Segmente, die durch Viren oder
Plasmide innerhalb eines Chromosoms aber auch
zwischen Chromosomen verlagert werden knnen
(Transposition). Diese mobilen genetischen Elemente (Transposons) knnen whrend der Phylogenese (Evolution der verschiedenen Spezies), der
Ontogenese (Individualentwicklung) und der Zelldifferenzierung an andere Orte im Genom verschoben werden. Das menschliche Genom enthlt eine
Vielzahl von Transposons, die oft in mehrfachen
Kopien vorkommen. Kurze Insertionssequenzen
im Transposon und der Akzeptorregion bestimmen das Woher und Wohin des Austauschs; Rekombinationsenzyme erkennen diese spezifischen
Nucleotidsequenzen und katalysieren die ntigen
Bindungswechsel.
Die Integration und Entfernung mobiler
DNA-Segmente wurden zuerst bei der Infektion
von Bakterien durch Bakteriophagen beobachtet
(Abschn.8.4). Am einfachsten lsst sich die genetische Rekombination jedoch anhand bakterieller
Antibiotika-Resistenzfaktoren in Plasmiden (meist
zirkulre dsDNA) darstellen.
Viren bestehen aus Nucleinsuren (dsDNA,
ssDNA, dsRNA oder ssRNA) und 1200 verschiedenen Proteinen (Hllproteine und Enzyme); gewisse Viren besitzen zudem eine Lipiddoppelmembran. Es gibt wohl kaum einen Organismus, der
nicht von Viren befallen werden kann und dessen
Genom nicht viele Wiederholungen (Direct repeats
und inverted repeats) als typische Spuren von Transposition enthlt:
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12.1 Plasmide
Ein Plasmid kann seinem Wirtsbakterium Resistenz gegen ein Antibiotikum verleihen Plasmide wurden entdeckt, als Bakterienstmme von
medizinischer Bedeutung gegen Antibiotika (z.B.
Penicillin; Abschn.5.3) resistent geworden waren. Bakterien vermehren sich rasch. Eine Bakterienpopulation kann sich in 20Minuten verdoppeln;
ber Nacht kann aus einem einzelnen Bakterium
auf einem Nhrboden ein mit bloem Auge sichtbares Zellhufchen, eine Kolonie, entstehen. Die genetisch identischen Nachkommen eines einzelnen
Individuums werden als Klon oder Stamm (Strain)
bezeichnet:
Ein zunehmend ernsteres Problem der Medizin ist

die Entwicklung von antibiotikaresistenten Stmmen pathogener Bakterien. Die Resistenzmechanismen sind beraus vielfltig (.Tab.12.1).
Antibiotikum
16
19
Konformation. Viroide verursachen Krankheiten

von Kulturpflanzen, Prionen fhren bei Mensch,
anderen Sugern und auch bei Hefe zu Proteinfehlfaltungskrankheiten.
Inverted Repeats
Viroide und Prionen sind pathogene infektise Makromolekle und bestehen aus nackter zirkulrer
ssRNA bzw. aus dem Prionprotein in fehlgefalteter
Antibiotikum (Plural: Antibiotika): Produkt aus

Pilzen, Bakterien, Flechten usw., welches das
Bakterienwachstum hemmt. Halb- und vollsynthetische Derivate solcher Stoffe sowie biogene Verbindungen, die eukaryontische Zellen
wie Einzeller oder Pilze hemmen, werden oft
ebenfalls als Antibiotika bezeichnet.
Die Resistenz gegen ein Antibiotikum wird oft

von einer Bakterienzelle auf eine andere bertra-
141
12.1Plasmide
.. Tab.12.1 Wirkungsziele und Resistenzen verschiedener antimikrobieller Agenzien

Antimikrobielle Agenzien
Wirkungsziel
Beispiele von Resistenzen
Bacitracin, Carbapeneme, Cephalosporine, Cycloserin, Monobactame, Penicilline, Teichoplanin,

Vancomycin a, b
Zellwandsynthese
Penicillinase (-Lactamase)
Mutationen der D-Ala-D-Ala-
Synthetase
Verringerte Permeabilitt der Bakte
rienmembran
Trimethoprim a, b
Dihydrofolat-Reduktase
Synthese eines unempfindlichen

DHFR-Enzyms
Sulfonamide c
Synthese von Folsure
Mutationen in der Dihydropteroat-

Synthase
Polymyxine b
Zellmembran
Modifikation der Membran

glykolipide
Tetracycline, Spectinomycin d, e
30S-Untereinheit bakterieller Ribosomen
Exportsystem entfernt Antibiotikum

aus Zelle
Chloramphenicol, Clindamycin a, f
50S-Untereinheit bakterieller Ribosomen
Chloramphenicol-Transacetylase
Erythromycin (Makrolide) b
Peptidyltransferase
Methylierung von rRNA
Rifampicin
Bakterielle RNA-Polymerase
Mutationen der RNA-Polymerase
Chinolone
b, d
TopoisomeraseII (DNA-Gyrase), hemmen Entdrillung der DNA
Gyrase-Mutation
Das Antibiotikum wird beschleunigt abgebaut. b Das Zielmolekl des Antibiotikums wird verndert. c Sind keine
Antibiotika im engeren Sinn. Menschliche Zellen knnen Folsure als Vitamin aus der Nahrung aufnehmen und sind
deshalb unabhngig vom entsprechenden Syntheseweg. d Bakterien entwickeln effiziente Exportsysteme, welche die
Antibiotika aus der Zelle herauspumpen. e Inhibitoren der 50S-Ribosomen-Untereinheit, binden an die Peptidyltransferasestelle. f Inhibitoren der bakteriellen 30S-Ribosomen-Untereinheit, binden an die t-RNA-Akzeptorstelle.
a
gen Die Resistenzbertragung ist auf Transposons (Abschn.8.4) zurckzufhren. Transposons
sind als akzessorische Chromosomen zu betrachten;

sie werden als Plasmide bezeichnet, falls sie, wie die
Resistenzfaktoren, klein sind und sich unabhngig
von den entsprechenden chromosomalen Prozessen
vermehren. Plasmide bestehen aus zirkulrer doppelstrngiger DNA und kommen in Bakterien und
anderen Mikroorganismen vor. Pro Zelle knnen
mehrere Kopien eines Plasmids vorhanden sein,
die bei der Zellteilung oft ungleichmig auf die
Tochterzellen verteilt werden. Plasmide knnen
auch durch Konjugation (Paarbildung mit Hilfe von
F-Pili oder Sex-Pili) zwischen Zellen ausgetauscht
werden.
12
142
Struktur und Wirkungsweise der Plasmide
Die Gre von Plasmiden reicht von etwa 1000 bis

zu ber 100000 Basenpaaren. Ein Plasmid kann
sich unbeschrnkt vermehren, es benutzt die bakterielle Maschinerie zur Replikation wie auch zur
Transkription und Translation. Ein einfaches Plasmid besteht aus einer Replikations-Startstelle (Origin of replication, Ori), einer Insertionssequenz, einem Transposase-Gen und einem Resistenzgen. Die
Transposase wird durch die Synthesemaschinerie
des Wirtsbakteriums gebildet und katalysiert die Insertion des Plasmids ins Wirtsgenom sowie dessen
Exzision aus dem Wirtsgenom. In den Zellen liegt
die Plasmid-DNA als berspiralisierte geknuelte
Superhelix vor (.Abb.7.3).
Der Einbau mobiler genetischer Elemente in die
chromosomale DNA kann auf zwei Arten erfolgen,
je nachdem ob eine Homologie (partielle Sequenzidentitt) zwischen Transposon und Akzeptorregion
besteht oder nicht.
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Integration ohne Homologie fhrt zu Inverted

repeats (umgekehrte repetitive Sequenzen) und
zur Duplikation von DNA-Segmenten Die Transposase erkennt ein Palindrom in der Plasmid-DNA
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Plasmide knnen in die chromosomale DNA integriert und vererbt werden Die Integration ist ein
reversibler Prozess, der in hnlicher Weise auch bei

Viren vorkommt. Im Gegensatz zu Viren besitzen
Plasmide jedoch keine Proteinhlle und bestehen
aus nackter DNA. Plasmide wie auch Viren sind
wichtige Werkzeuge der Gentechnik.
und schneidet dieses glattendig bei seiner Symmetrieachse (.Abb.12.1). Das Wirtschromosom wird
an einer beliebigen Stelle mit einem versetzten
Schnitt geffnet und das Transposon dort von der
Transposase mit Hilfe wirtseigener DNA-Polymerase und DNA-Ligase eingefgt. An den Enden
des eingebauten Transposons verbleiben die beiden Hlften des Palindroms, die Inverted repeats.
Die Orientierung des eingebauten DNA-Segments
(die Ableserichtung eines Gens) bleibt unbestimmt.
Durch wiederholte Integration werden zahlreiche
Kopien eines Transposon-codierten Gens ins Chromosom eingebaut:
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Homologie-abhngige Integration: Die palindromische Insertionssequenz des Plasmids ist identisch mit der Akzeptorsequenz Die Transposase
schneidet das Plasmid und die Akzeptor-DNA an

den homologen Sequenzabschnitten mit versetzten
Schnittstellen, so dass gleiche DNA-Enden entstehen, die von einer Ligase des Wirts kovalent verbunden werden (.Abb.12.2). hnliche Integrationsmechanismen laufen auch whrend der Infektion
von Zellen durch Viren ab.
143
12.1Plasmide
12
.. Abb.12.1 Integration eines Plasmids ohne Homologie zur Nucleotidsequenz der chromosomalen DNA. Die Transposase
schneidet das Plasmid glattendig und die Akzeptor-DNA mit berhngen und bringt die Enden danach fr Ligation und
Auffllen der Einzelstranglcken zusammen. Eine DNA-Polymerasereaktion ersetzt die an den berhngen auf einem Strang
fehlende DNA und verdoppelt damit die Akzeptorsequenz
.. Abb.12.2 Integration eines Plasmids mit Homologie zur Nucleotidsequenz der chromosomalen DNA. Die Transposase
schneidet Plasmid und Akzeptor-DNA und fgt sie danach zusammen. Der Schnitt ist versetzt und erfolgt in beiden DNAs in einem Segment mit gleicher DNA-Sequenz, so dass die berhngenden Enden der DNA miteinander hybridisieren und nur noch
ligiert werden mssen. Nach erfolgter Rekombination liegt beiderseits der Insertion eine Akzeptorsequenz vor (Direct repeats)
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12.2 Viren
Viren sind Zellparasiten, die sich wie Plasmide
nicht selbst reproduzieren knnen Viren sind
absolute Parasiten; sie besitzen im Unterschied zu

Lebewesen keinen eigenen Stoffwechsel. Sie verwenden zellulre Maschinerien, Bausteine und
Energie zur Replikation sowie Transkription ihrer
DNA und zur Synthese ihrer weiteren Bestandteile,
dabei knnen sie die Wirtszelle schdigen oder tten. Sie sind, wie die noch primitiveren Plasmide, als
vagabundierende Gene aufzufassen.
Viren enthalten entweder DNA oder RNA

als Gentrger Es werden daher DNA-Viren und
RNA-Viren unterschieden. Die Gre des Genoms
ist uerst unterschiedlich; je nach Virus codiert das

Genom1200 verschiedene Proteine: Hllproteine,
welche die DNA umschlieen, und Enzyme fr die
Reproduktion der Viren; demgem variiert auch
die Gre und strukturelle Komplexitt der Viren.
Manche Viruspartikel zeigen geometrisch regulre
Strukturen und knnen daher kristallisiert und
rntgenkristallographisch mit atomarer Auflsung
untersucht werden.
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HIV, Human immunodeficiency virus, Aids-Virus
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Viren sind eine sehr heterogene Gruppe von

Zellparasiten
Sie werden nach diversen Ge-
sichtspunkten wie Typ der Wirtszelle, Art der Infektionsfolgen, der Nucleinsure und deren Replikation eingeteilt. Das International Committee on
Taxonomy of Viruses legt die Taxonomie der Viren
fest . Die folgenden Beschreibungen basieren
nicht auf dieser Taxonomie; sie bercksichtigen
die viralen Eigenschaften, welche den unterschiedlichen biologischen Effekten von Virusinfektionen
zugrunde liegen:
Bakteriophagen (kurz Phagen) befallen Bakterien als Wirtszellen, z.B. T4- oder (lambda)-Phagen in E. coli. Mykoviren (Pilzviren), pflanzliche
und tierische Viren befallen entsprechende Eukaryonten-Spezies.
Lytische Viren zerstren die Zellmembran. Unter Umstnden knnen sich die Viren aber auch
im lysogenen Zustand als temperente (abgeschwchte, nur potenziell lytische) Viren zusammen mit der Zelle vermehren, z.B. -Phagen und
Retroviren (.Abb.12.3).
Die Viren werden nach Nucleinsure und

mRNA-Synthese in sechs Klassen eingeteilt
(.Abb.12.4) Die Lebenszyklen der Virusklas-
senI und VI werden hier wegen deren Bedeutung

als Tumorviren und als Werkzeuge der Gentechnik
vorgestellt:
Viren der Klasse I enthalten doppelstrngige
DNA, die sie nach Adsorption an die Zelloberflche
in die Zielzelle injizieren (.Abb.12.5). Smtliche
Viruskomponenten werden durch die wirtseigene
Maschinerie produziert. Die neuen Viruspartikel
bilden sich spontan durch Selbstorganisation. Eine
viruscodierte DNase leitet den Abbau der zelleigenen DNA ein: Die Zelle wird lysiert und die Viren
145
12.2Viren
12
.. Abb.12.3 Lysogene und lytische Vermehrung des (lambda)-Bakteriophagen. Der -Phage ist nur eines unter vielen Viren,
welche sich durch zwei verschiedene Lebenszyklen den jeweils herrschenden Umgebungsbedingungen anpassen. Unter
bestimmten fr die Wirtszelle gnstigen Voraussetzungen wird das Virusgenom ins Genom des Wirts bertragen und vermehrt
sich dort kaum bemerkt fr viele Generationen zusammen mit der Wirts-DNA. Sind hingegen die Bedingungen fr den Wirt
stressig, kann sich das Virus durch rasche Synthese seiner viralen Produkte stark vermehren und sich von der Wirtszelle durch
deren Lyse absetzen
werden freigesetzt. In seltenen Fllen wird die DNA

des Virus ins Genom einer Zelle eingebaut, die dadurch lysogen wird.
Retroviren (Klasse VI) adsorbieren an Rezeptoren der Zelloberflche und gelangen durch
Membrantransport (Endocytose) ins Cytoplasma
(.Abb.12.6). Die virale +Strang-RNA wird durch
eine im Virus vorhandene Retrotranskriptase
(Reverse transcriptase) in einen komplementren
DNA-Strang umgeschrieben und vom selben Enzym zu einem DNA-Doppelstrang ergnzt (daher
die Bezeichnung Retroviren), der als provirale
DNA an beliebiger Stelle in ein Chromosom der
Wirtszelle eingebaut wird. Dieses integrierte Provirus, ein charakteristisches Merkmal der Retroviren, wird mit dem Genom der Zelle repliziert. Die
viralen Genprodukte (RNA und Proteine) werden
aufgrund der proviralen DNA synthetisiert, worauf
sie sich spontan zu neuen Viruspartikeln zusammen

lagern, welche die Wirtszelle via Membrantransport
(Exocytose) verlassen. Gewisse Retroviren nehmen
dabei aus der Zellmembran der Wirtszelle Lipide
und Proteine ihrer Hlle mit.
cDNA
Eine DNA, welche als Kopie einer RNA
durch Retrotranskription entsteht, wird als
copy-DNA, complementary DNA oder cDNA bezeichnet (cDNA ist wichtig in der Gentechnik;
Abschn.39.6).
Alle Viren sind Parasiten, Retroviren sind es im

hchsten Grad: Das virale Genom ist zwingend
ins Wirtsgenom integriert. Bei der Teilung der infizierten Zellen wird das Provirus auf die Tochter-
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Virusgenom
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.. Abb.12.4 Vereinfachte Klassifizierung der Viren nach Art der viralen Nucleinsure und nach Art der Bildung der mRNA. Das
virale Genom besteht aus dsDNA, ssDNA, dsRNA oder ssRNA, wobei ssDNA oder ssRNA jeweils einem +Strang (mit gleicher
Sequenz wie die mRNA) oder einem Strang (Komplementrstrang) entspricht. Die Transkription erfolgt ab dem Strang einer
dsDNA-Matrize oder ab dem Strang einer RNA-Matrize
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.. Abb.12.5 Vermehrung von Viren der KlasseI. Beispiele: Bakteriophagen T4, T7, Sugerviren wie SV40 (Tumoren bei Affen),
Vaccinia (Kuhpocken), Variola (menschliche Pocken), Hepatitisvirus (Leberentzndung)
147
12.3 Tumorviren und Onkogene
12
.. Abb.12.6 Vermehrung der Retroviren (KlasseVI). Beispiele: HIV (Human immunodeficiency virus, Aids (Acquired immune deficiency syndrome)-Erreger), RSV (Rous sarcoma virus, Sarkomvirus des Huhns), HTLV (Human T-cell lymphotropic virus, T-Zell-Leukmien), MMTV (Mouse mammary tumor virus, Brustkrebsvirus der Maus)
generation bertragen, die dann unter Umstnden

wieder Viren produziert. Diese Mglichkeit ist von
besonderem Interesse, weil gewisse Retroviren und
andere Viren die Bildung von Tumoren auslsen
knnen. Die Virusinfektion kann sogar ber die
Keimbahn auf sptere Generationen des Wirts
bergreifen.
12.3
Tumorviren und Onkogene
Virale DNA im Genom der Zelle kann Tumoren

erzeugen Gewisse Viren knnen die normaler-
weise strikt regulierte Zellteilung und das Gewebewachstum beschleunigen und daher Krebs oder
auch gutartige Tumoren (z.B. Warzen) erzeugen
(lat. tumor, Schwellung). Whrend des Wachstums
eines Organismus und bei der Wundheilung bertrifft die Zellproduktion den Zelltod; im ausgewachsenen Organismus halten sich Zellproduktion und
Zelltod die Waage. Hie und da gert eine Zelle auer Kontrolle, sie produziert Tochterzellen, die sich
ebenfalls zu hufig teilen. Der bergang einer Zelle
mit normalem Wachstum zu einer unkontrolliert
proliferierenden Zelle wird als Transformation bezeichnet (Abschn.24.4).

Die Erzeugung von Tumoren ist bisher nur bei
Viren der KlassenI, II und VI beobachtet worden,
die sich ins Wirtsgenom integrierende dsDNA besitzen und damit die Replikation ihrer DNA ermglichen (.Abb.12.4).
Onkogene erzeugen Tumoren Besonders gut
untersucht sind die zur Tumorbildung fhrenden
Vorgnge bei den Retroviren (KlasseVI). Das zuerst
entdeckte tumorerzeugende Virus ist das Rous Sarcoma Virus (RSV) . Die provirale DNA des RSV ist
auf beiden Seiten von einer Insertionssequenz begrenzt und enthlt je ein gag, pol, env und ein nicht
in allen RSV-Stmmen vorkommendes V-SRC-Gen.
Die Insertionssequenzen i (Long terminal repeats,
LTR) bestehen aus terminalen repetitiven Abschnitten und sind den Inverted repeats bei Plasmiden
hnlich. Das GAG-Genprodukt ist ein Vorlufer
der Capsidproteine, die im Wirt antigene Immunreaktionen auslsen. Das POL-Gen codiert die virale
Retrotranskriptase, das ENV-Gen die Glykoproteine
der Virushlle und das V-SRC (sarcoma-)Gen eine
Proteinkinase. Die SRC-Kinase ist in der Plasma-
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membran der Wirtszelle verankert und phosphoryliert Tyrosinreste bestimmter Proteine, welche
Signale zur Wachstumskontrolle bermitteln. Das
SRC-Gen kann auf diese Weise die Transformation
der Zelle auslsen und wird daher den Onkogenen
zugezhlt. Im Virus hat das Onkogen keine Funktion. RSV-Stmme ohne V-SRC-Gen erzeugen keine
GAG
POL
ENV
Tumoren; die Transformation erfolgt nur, wenn das

SRC-Onkogen die Synthese des Onkoproteins (im
Fall des SRC-Gens die SRC-Tyrosinkinase) veranlasst. Das Virus-Onkogen (V-SRC) ist eng verwandt
mit einem Gen der normalen Wirtszelle, dem zellulren Proto-Onkogen (cellular SRC, c-SRC, zelleigenes Tyrosinkinase-Gen).
v-SRC
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v-SRC =
Proto-Onkogene sind normale Bestandteile des

Genoms und codieren harmlose Zellkomponenten mit regulatorischer Funktion Sie werden erst
zu gefhrlichen Onkogenen, wenn sie strend ins

regulatorische Netzwerk der Zelle eingreifen, beispielsweise durch bermige Synthese eines Onkogenprodukts. Eine erhhte Transkriptionsfrequenz
des Proto-Onkogens kann infolge Stimulierung
durch benachbarte virale Kontrollelemente (Enhancer-Sequenzen in der viralen DNA) auftreten. Eine
weitere Mglichkeit, die Transkriptionsfrequenz zu
erhhen, besteht in der Amplifikation des viralen
Genoms.
Virale Onkogene stammen von zellulren Proto-Onkogenen ab Transpositionsmechanismen
hnlich denjenigen, die zwischen Plasmiden/Bakteriophagen und Bakterienchromosomen spielen,

knnen zellulre Proto-Onkogene in Viren bertragen. Viren dienen wie Plasmide als Vehikel zum
Gentransfer. Sie knnen einerseits virale Gene im
Wirtsgenom zurcklassen, andererseits aber auch
Wirtsgene oder Teile davon mitnehmen und in neue
Wirte einfhren.
Die Entdeckung zahlreicher Beispiele viraler
Onkogene (.Tab.12.2) hat wesentlich zum Verstndnis der Rolle der Proto-Onkogene bei der Kontrolle des Zellwachstums beigetragen. berdies ist
anzunehmen, dass Transpositionen die Evolution
der Organismen beschleunigen. Die Fhigkeit von
Plasmiden und Retroviren, fremde Gene nicht nur
Onkogene in Wirtszellen einzuschleusen, wird
auch biotechnologisch genutzt (Abschn.40.2).
Krebserzeugung durch DNA-Viren Im Gegensatz zu den Retroviren, die ein verndertes

zelleigenes Gen in die Zelle zurckbringen, fhren
DNA-Tumorviren der KlassenI und II der Zelle ein
viruseigenes Onkogen zu, das ins Zellgenom eingebaut wird. Das entsprechende Onkoprotein hemmt
ein zellulres Kontrollprotein, welches seinerseits
den Zellzyklus hemmt oder die Apoptose, den programmierten Zelltod, frdert. Zum Beispiel binden
die beiden Onkoproteine, das E7-Protein des Papillomavirus (Warzenvirus) und das E1A-Proteins
des menschlichen Adenovirus, an das Rb (Retinoblastom-)Protein. Das Rb-Protein ist ein Tumorsuppressorprotein und hemmt Aktivatoren des Zellzyklus. Die Onkoproteine verhindern die Bindung des
hemmenden Rb-Proteins an die Aktivatoren: Der
Zellzyklus luft schneller ab; die Hemmung einer
Hemmung frdert die Zellproliferation.
Andere Tumorvirus-Onkoproteine binden an
p53, ein weiteres wichtiges Tumorsuppressorprotein. Protein p53 stimuliert die Apoptose; seine
Hemmung frdert somit die Zelltransformation.
Die Onkogene und Tumorsuppressor-Gene wurden bei Viren entdeckt, sie spielen aber auch bei der
nichtviralen Krebsentstehung eine wichtige Rolle
(Abschn.24.4).
Viren verursachen nur wenige Tumorerkrankungen des Menschen (.Tab.12.3). Dennoch
ist deren Kenntnis wichtig, erffnet sie doch die
Mglichkeit, diese Tumoren durch Impfungen zu
verhindern (z.B. die Impfung junger Frauen gegen
Papillomaviren zur Prophylaxe von Gebrmutter-
149
12.4 Subvirale pathogene Agenzien: Viroide und Prionen
.. Tab.12.2 Beispiele von Onkogenen und Proto-Onkogenen a

Proto
onkogen
Onkogen
Zellulres
Produkt
c-SIS
v-SIS
B-Kette von
PDGF
c-ERB B
v-ERB B
EGF-Rezeptor
c-ERB A
v-ERB A
Thyroxin
rezeptor
c-haRAS
v-haRAS
G-Protein
c-SRC
v-SRC
Tyrosinkinase
c-FOS
v-FOS
Transkriptionsfaktor
c-MYC
v-MYC
Transkriptionsfaktor
Smtliche Proteine sind Bestandteile von Signal

bermittlungsketten zwischen Wachstumsfaktoren,
deren Rezeptoren und Transkriptionsfaktoren. PDGF,
Platelet-Derived Growth Factor; EGF, Epidermal Growth
Factor; G-Protein, Guanyl-nucleotide binding protein.
12
.. Tab.12.3 Viren und zugehrige Krebsformen a

Virus
Krankheit
Epstein-Barr-Virus
(DNA-Virus)
Burkitt-Lymphom in
Westafrika und Neuguinea; Nasopharyngeales
Karzinom in Sdchina;
bei uns keine Tumoren,
aber Pfeiffer-Drsenfieber
(Mononucleosis infectiosa)
Hepatitis B Virus
(DNA-Virus)
Hepatitis B und im
Sptstadium auch Leberkrebs
Papilloma-Virus
(DNA-Virus)
Warzen, Gebrmutterhalskrebs (Cervix-Karzinom),

Kaposi-Sarkom
HTLV-1 (Retrovirus,
verwandt mit HIV)
T-Zell-Leukmie in Japan
Die Fhigkeit bestimmter Viren, Krebs zu erzeugen,

hngt von der geographischen Lage ab. Die Lebensbedingungen und mgliche Einflsse anderer lokaler
pathogener Agenzien wie Malaria beeinflussen die
komplexe mehrstufige Karzinogenese.
halskrebs). Die potenzielle Gefahr einer bertragung tierischer Onkogene auf den Menschen durch
speziesbergreifend infektise Viren mahnt zur
Vorsicht im Umgang mit tierischem Material.
durch pflanzliche RNA-Polymerasen vermehrt, ihre

krankmachende Wirkung beruht mglicherweise auf
siRNA, die aus der viroidalen RNA entsteht und Teil
eines RISC (RNA-Induced Silencing Complex) wird.
12.4
den Prionkrankheiten ist das Prionprotein in seiner

Scrapie-Form (PrpSc; Abschn.3.8), eine konformationelle Abart des normalen Prpc (cellular Prp), eines Glykoproteins mit unbekannter physiologischer
Funktion, das an der Oberflche von Nervenzellen
und anderen Zellen ber Glycosylphosphatidylinositol (GPI) verankert ist. Das PrP-Gen wird in
infizierten kranken Tieren mit gleicher Frequenz
transkribiert wie in gesunden Tieren. Transgene
knock-out Muse ohne funktionierendes PrP-Gen
sind unter Laborbedingungen nicht zu unterscheiden von normalen Musen, erkranken aber nicht
nach Infektion mit PrpSc. Offenbar bewirkt PrpSc die
Umwandlung des normalen Prpc in PrpSc, das Aggregate mit ausgedehnter -Faltblattstruktur bildet
und sich weiter zu Fibrillen und amyloiden Plaques
zusammenlagert. Die kleinen, lslichen PrpSc-Agg-
Subvirale pathogene Agenzien:

Viroide und Prionen
Die kleinsten pathogenen Agenzien sind Makromolekle Mit der Zeit sind immer kleinere
Verursacher von Infektionskrankheiten gefunden

worden: Louis Pasteur und Robert Koch fanden
zwischen 1870 und 1880 die Bakterien; um die
Wende vom 19. zum 20.Jahrhundert wurden die
Viren entdeckt; und in den letzten Jahrzehnten sind
sogar Einzelmolekle, die Viroide (RNA) und die
Prionen (Proteine) , als Ursachen bertragbarer
Erkrankungen erkannt worden.
Viroide sind zirkulre ssRNA-Molekle mit 200
400Nucleotiden. Bis heute sind etwa 60 verschiedene
Typen bekannt, alle sind Erreger von Krankheiten
bestimmter Kulturpflanzen. Die Viroide werden
Prionen verursachen bertragbare Proteinfehlfaltungskrankheiten Das infektise Agens bei
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regate sind cytotoxisch und fhren ber unbekannte

Mechanismen zum Absterben der Neuronen im
Zentralnervensystem. Mglicherweise berlasten
die PrpSc-Aggregate die zellulren Chaperonsysteme, welche daher die Faltung anderer, fr das
berleben der Zelle wichtiger Proteine nicht mehr
ausreichend untersttzen.
In Hefe (S. cerevisiae) sind konformationelle
Varianten mehrerer Proteine gefunden worden, die
sich wie das PrpSc der Suger verhalten und bei der
Zellteilung der Hefe epigenetisch auf Tochterzellen
bergehen.
Prionkrankheiten
Spezies
Creutzfeld-Jakob-Krankheit
Mensch
BSE (Bovine spongiform

encephalopathy), Rinderwahnsinn
Rind
Scrapie
Schaf
Links auf
Springer Website:
027-6-1514855-0
12.1 Plasmide
12.2 Viren
12.3 Tumorviren und Onkogene
12.4 Subvirale pathogene Agenzien:
Viroide und Prionen
151
Stoffwechsel
Kapitel 13
Grundstzliches zum Stoffwechsel 153

Kapitel 14
Glykolyse und Citratzyklus 161

Kapitel 15
ATP-Synthese in Mitochondrien 177

Kapitel 16
Gluconeogenese, Glykogen, Disaccharide

und Pentosephosphatweg193
Kapitel 17
Stoffwechsel der Fettsuren und Lipide 209

Kapitel 18
Stoffwechsel der Proteine und Aminosuren 225

Kapitel 19
Stoffwechsel der Purinund Pyrimidinnucleotide247

Kapitel 20
Photosynthese259
Kapitel 21
Besonderheiten des Stoffwechsels

von Pflanzen und Bakterien 269
III
153
Grundstzliches
zum Stoffwechsel
13.1
Experimentelle Untersuchung des Stoffwechsels 154
13.2
bersicht ber den Stoffwechsel 156
13.3
Verwendung des im Katabolismus gebildeten ATP 158
13.4
Regulation des Stoffwechsels 159

13
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Kapitel 13 Grundstzliches zum Stoffwechsel
Die hunderte bis tausende chemischer Reaktionen, die in einer Zelle und in einem vielzelligen
Organismus ablaufen, werden in ihrer Gesamtheit als Stoffwechsel (Metabolismus) bezeichnet.
Der Stoffwechsel dient zwei Zwecken: Gewinnung
chemischer Energie sowie Auf- und Abbau der
Bestandteile des Organismus. Jedes Lebewesen
entspricht einer Insel hoher Ordnung (niedriger
Entropie) inmitten eines chemischen Chaos. Fr
Aufbau und Erhaltung des hohen Ordnungsgrades
muss Energie von auen (Sonnenlicht bei phototrophen Organismen; Nhrstoffe bei chemotrophen
Organismen) zugefhrt und in eine von den Zellen
verwendbare Form (ATP) bergefhrt werden. Dabei wird Wrme frei.
Phototroph
verschiedene RNA-Molekle und 10 bis

300106Molekle von 600 verschiedenen
niedermolekularen organischen Verbindungen. Alle diese Komponenten werden
auf kleinstem Raum rasch und im richtigen
Mengenverhltnis synthetisiert.
Eindrckliche Zahlen zum menschlichen
Stoffwechsel: Ein erwachsener Mensch wird
in 50Jahren insgesamt 7.5t Nahrung (Trockengewicht) und 4000050000Liter Wasser
umsetzen. Die chemische Zusammensetzung
des Organismus und das Gewicht bleiben
dabei unverndert.

13.1
Der Stoffwechsel entspricht einem Netzwerk von

Stoffwechselketten und -zyklen Bei der Untersu-
chung einer Stoffwechselkette der Art
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Experimentelle Untersuchung
des Stoffwechsels
Jede Einzelreaktion des Stoffwechsels wird durch

ein spezifisches Enzym katalysiert. Dank der Reaktions- und Substratspezifitt der Enzyme verluft der metabolische Fluss der Materie in den
geordneten Bahnen des Stoffwechselnetzwerks.
Komplexe regulatorische Netzwerke, welche die
katalytische Aktivitt einzelner Schlsselenzyme
steuern, passen den Stoffdurchsatz durch die verschiedenen Stoffwechselwege den jeweiligen Erfordernissen der Zelle und des Organismus an.
In diesem Teil des Lehrbuchs geht es darum, die
Bedeutung der wichtigsten Stoffwechselwege fr
das Leben der Zelle bzw. des Gesamtorganismus
aufzuzeigen.
Staunenswerte chemische Leistung
Eine Kultur von E. coli in einer wsserigen
Lsung von Glucose und anorganischen
Salzen verdoppelt bei 37C ihre Zellzahl alle
30min. Jede Zelle enthlt durchschnittlich
500Molekle von jedem der insgesamt
1000 verschiedenen Proteine, mehr als 1000
----
interessieren folgende Fragen:

Welches Produkt wird aus dem Ausgangsstoff
A gebildet?
Welche Zwischenprodukte (X, Y) treten auf?
Welche Enzyme sind beteiligt?
Wie gro ist der Durchsatz, d.h. wie viel A
wird in einer Zelle oder im Organismus pro
Zeiteinheit zu Produkt umgewandelt?
Wie wird der Durchsatz reguliert?
Wo laufen die Reaktionen ab: in welchem Gewebe, in welchen Zellen, in welchem Zellkompartiment?
Wenn sich die Zufuhr des Ausgangsstoffs A nicht

ndert und gleichviel Produkt verbraucht wird,
wie A zugefhrt wird, befindet sich die Stoffwechselkette samt ihren Zwischenprodukten in einem
Fliegleichgewicht (Steady state): Die Zwischenprodukte entstehen mit der gleichen Geschwindigkeit, mit der sie weiterreagieren, ihre Konzentrationen bleiben unverndert.
155
13.1 Experimentelle Untersuchung des Stoffwechsels
13
.. Abb.13.1 Differenzielle Zentrifugation zur Isolierung von Zellorganellen.

Die Zellen werden schonend, d.h. ohne
Beschdigung der Zellorganellen, aufgeschlossen. Das Zellhomogenat wird
mehrfach mit jeweils erhhter g-Zahl
zentrifugiert: Immer kleinere Zellbestandteile werden abzentrifugiert und
finden sich im Sediment
Terminologie
Terminologie
Gleichgewicht AB
Die Konzentrationen von A und B bleiben
konstant, pro Zeiteinheit reagiert gleichviel A
nach B, wie B nach A reagiert.
Fliegleichgewicht A B C
Die Konzentration von B bleibt konstant, pro
Zeiteinheit entsteht gleichviel B aus A, wie B
nach C weiterreagiert (Steady state).
Der Stoffwechsel lsst sich auf verschiedenen

Ebenen untersuchen Im intakten Organismus
lassen sich durch Ftterungsversuche mit einem

bestimmten Ausgangsstoff (Vorlufer, Edukt), insbesondere wenn er isotopenmarkiert ist, Zwischenprodukte und Endprodukte des Stoffwechsels in Geweben, Blut oder Urin feststellen. Aufschlussreich
sind auch angeborene Stoffwechselstrungen und
bakterielle Stoffwechselmutanten: In beiden Fllen
blockiert ein genetischer Enzymdefekt vollstndig
oder teilweise einen bestimmten Schritt in der Stoffwechselkette:
Die Zwischenprodukte vor dem Block liegen in

erhhter Konzentration vor, die Metaboliten nach
dem Block werden in verringertem Mae oder gar
nicht gebildet.
Metabolit: Substanz, die im Stoffwechsel

gebildet oder umgesetzt wird.
Metabolom: Gesamtheit der Zwischen- und
Endprodukte des Stoffwechsels in Zellkompartiment, Zelle oder Organismus.
Eine Untersuchung des Stoffwechsels im berlebenden isolierten Organ schliet die Interferenz
von Seiten anderer Organe aus. Die hufigste Versuchsanordnung ist der Perfusionsversuch, bei welchem das Organ (z.B. die Leber) zur Versorgung
mit O2 und Nhrstoffen und zum Einbringen des
Ausgangsstoffes mit Blut oder einer geeigneten Ersatzlsung durchstrmt wird. Die Perfusionslsung
wird auf das Vorhandensein von Stoffwechselprodukten des Ausgangsstoffes untersucht.
Bei der Gewebeschnittmethode werden dnne
(<0,5mm) Schnitte aus berlebenden Organen in
einer Nhrlsung suspendiert. Die Zellen werden
dank der geringen Schnittdicke durch Diffusion
ausreichend mit Nhrstoffen und O2 versorgt. Die
zu untersuchende Vorlufersubstanz wird dem Inkubationsmedium zugegeben, das danach auf Metaboliten analysiert wird.
Zellkulturen erlauben, den Stoffwechsel in Mikroorganismen (Bakterien, Einzeller wie Hefe) und
auch tierischen oder pflanzlichen Zellen zu untersuchen.
Zur Erfassung der Stoffwechselleistungen der
verschiedenen Zellorganellen werden die Zellen
schonend aufgeschlossen, so dass die Organellen
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intakt bleiben. Durch differenzielle Zentrifugation

(.Abb.13.1) solcher Zellhomogenate knnen bestimmte Organellen stark angereichert werden. Untersuchungen mit isolierten Organellen haben ergeben, dass gewisse Stoffwechselwege eukaryontischer
Zellen nur in bestimmten Organellen ablaufen (z.B.
Citratzyklus in Mitochondrien).
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Als Beispiel dient die Stoffwechselkette des Abbaus

von Glucose zu Pyruvat und die umgekehrte Reaktionsfolge zum Aufbau von Glucose:
bersicht ber
den Stoffwechsel
Die Stoffwechselwege lassen sich in zwei Gruppen einteilen:

Katabole Stoffwechselwege bauen groe,
komplexe Verbindungen zu kleineren, einfacheren Verbindungen ab.
Anabole Stoffwechselwege fhren von einfachen zu komplexeren Verbindungen.
Der Katabolismus, die Gesamtheit der abbauenden Reaktionen, ist als Ganzes genommen
ein exergonischer Vorgang Bei chemotrophen
Organismen werden Nhrstoffe und krpereigene

Makromolekle oxidativ unter Verbrauch von O2
zu CO2 und H2O abgebaut (.Abb.13.2). Die dabei
freiwerdende Energie wird zur Synthese energiereicher Phosphatverbindungen (v.a. ATP) verwendet,
z.T. wird sie als Wrme abgegeben.
Der Anabolismus entspricht im groen Ganzen einer Umkehr der katabolen StufenI und II
Die Synthesen der zelleigenen Makromolekle sind

endergonische Vorgnge. Sie werden zum Ablaufen
gebracht durch Verwendung der im Katabolismus
gewonnenen chemischen Energie (ATP); die Koppelung an die Hydrolyse von ATP macht sie exergonisch:
Bei sieben der zehn Einzelreaktionen entspricht

die anabole Reaktion einer Umkehr der katabolen
Reaktion, dasselbe Enzym katalysiert die Reaktion
in beiden Richtungen. Die Reaktion kann unter
physiologischen Bedingungen in beiden Richtungen ablaufen, weil sie in keiner Richtung stark
exergonisch ist. Als Beispiel die zweite Reaktion
im obigen Schema des Ab- und Aufbaus von Glucose:
157
13.2 bersicht ber den Stoffwechsel
13
.. Abb.13.2 Vereinfachte Darstellung des Katabolismus. Es lassen sich drei Stufen unterscheiden:
StufeI: Nhrstoffe und krpereigene Makromolekle werden zu ihren Bausteinen abgebaut.
StufeII: Bausteine werden zu Acetyl-Coenzym A abgebaut.
StufeIII: Acetyl-CoA wird oxidativ zu CO2 und H2O abgebaut.
Der Abbau der Makromolekle konvergiert ber gemeinsame Abbaustufen zu den wenigen Endprodukten. Alle Abbauwege
finden sich zusammen in einem zentralen Reaktionszyklus, dem Citratzyklus. Nucleinsuren sind nicht bercksichtigt, weil
sie quantitativ unwichtig sind. Ebenso sind andere Stoffwechselendprodukte als CO2 und H2O, wie z.B. NH3 oder Harnstoff als
Endprodukte des Stickstoffs von Aminosuren, nicht aufgefhrt
Einzelne anabole Reaktionen entsprechen jedoch

nicht einer einfachen Umkehr der katabolen Reaktion: Die anabole Reaktion folgt einem anderen
Reaktionsweg mit zustzlichen Reaktanten, welcher
durch ein anderes Enzym katalysiert wird. Hierzu
als Beispiel die dritte Reaktion im Schema:
Warum divergieren katabolische und anabolische

Stoffwechselwege bei bestimmten Schritten?
Die Zweigleisigkeit hat einen thermodynamischen

Grund. Wenn eine Reaktion in der katabolen Richtung stark exergonisch ist (G0), d.h. wenn
ihr Gleichgewicht stark auf der Produktseite liegt,
kann sie unter physiologischen Bedingungen,
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.. Abb.13.3 Umschalten der Richtung eines Stoffwechselweges (Schritt3 im Abbau von Glucose). Die katalytischen Aktivitten der Phosphofructokinase und der Fructose-1,6-bisphosphatase werden durch allosterische Aktivatoren und Inhibitoren
reguliert. Je nach Stoffwechsellage wird die Stoffwechselkette in kataboler Richtung (Glykolyse, Abbau von Zucker) oder anaboler Richtung (Gluconeogenese, Neubildung von Glucose) laufen. Das eindeutige Umschalten entweder auf katabole oder
anabole Reaktion verhindert einen ATP-verbrauchenden Leerlaufzyklus (Futile cycle), in welchem Fructose-1,6-bisphosphat
unter Verbrauch von ATP gebildet und gleich wieder zu Fructose-6-phosphat und anorganischem Phosphat hydrolysiert wird
insbesondere bei den Reaktantenkonzentrationen in der Zelle, nicht rckwrts ablaufen. Fr

die anabole Richtung muss deshalb ein anderer
Reaktionsweg eingeschlagen werden. Die Phosphofructokinase-katalysierte Reaktion im obigen
Beispiel ist irreversibel, weil ATP eine allzu energiereiche Verbindung ist, um aus energiearmem
Fructose-1,6-bisphosphat und ADP, die in niedriger Konzentration vorliegen, synthetisiert werden
zu knnen. Aus analogen Grnden ist die anabole
Reaktion irreversibel, Fructose-6-phosphat kann
in der Zelle nicht mit anorganischem Phosphat zu
Fructose-1,6-bisphosphat phosphoryliert werden.
Der Durchsatz von Stoffwechselketten wird

bei den getrennt verlaufenden irreversiblen
Schritten reguliert Da zwei verschiedene Enzyme
die katabole und anabole Reaktion katalysieren,

knnen die Stoffwechselwege getrennt und damit
gegensinnig reguliert werden. Dank der richtungsspezifischen Regulation kann die Zelle zwischen
katabolem Stoffwechsel (Energieproduktion) und
anabolem Stoffwechsel (Anlage von Reserven chemischer Energie) umstellen (.Abb.13.3). Die allos-
terische Regulation der Enzyme wird ergnzt durch

die Regulation der Synthese gewisser Enzyme.
13.3
Verwendung des im
Katabolismus gebildeten ATP
ATP ist die Energiewhrung der Zelle Endergo-
nische Vorgnge werden durch Koppelung mit der

Hydrolyse von ATP angetrieben; fast immer, wenn
ein Prozess Energie kostet, wird die thermodynamische Rechnung mit ATP bezahlt. Ein erwachsener Mensch verbraucht 5080kg ATP pro Tag (bei
einem gesamten ATP-Gehalt von etwa 100g)! ATP
wird in derselben Zelle verbraucht, in der es synthetisiert worden ist. ATP dient nicht als extrazellulre
Transportform chemischer Energie. ATP durchluft
einen Zyklus :
13
159
13.4 Regulation des Stoffwechsels
Die Zellbestandteile sind einem fortwhrenden

Umsatz unterworfen Untersuchungen mit iso-
topenmarkierten Verbindungen haben gezeigt, dass

Proteine und auch die anderen Zellbestandteile mit
Ausnahme der DNA dauernd abgebaut und durch
neu synthetisierte ersetzt werden. Die Zellkomponenten befinden sich in einem Fliegleichgewicht
(.Tab.13.1).
Der energieaufwndige Umsatz der Zell- und
Krpersubstanz (.Tab.10.2) ist von zweifacher Bedeutung. Er eliminiert fehlerhafte Zellkomponenten, die durch spontan ablaufende Alterungsvorgnge oder uere Einwirkung verndert worden
sind. Zudem erlaubt der fortwhrende Umsatz von
Enzymen eine Regulation des Stoffwechsels durch
Vernderung der Synthesegeschwindigkeit gewisser
Enzyme, ein andauernder Abbau ist unabdingbare
Grundlage hierfr.
13.4
.. Tab.13.1 Umsatz (Turnover) von Zellbestandteilena

t1/2 (Tage)
Leber
Protein
56b
Glykogen
0,51
Phospholipide
12
Proteine
30
Glykogen
0,51
Phospholipide
200
Muskel
Gehirn
a
Nach der Halbwertszeit t1/2 ist die Hlfte einer
gegebenen Population von Moleklen abgebaut und
durch neu gebildete Molekle ersetzt worden.
b
Die sehr kurzlebige Ornithin-Decarboxylase hat
eine t1/2 von nur 10min.
Regulation des Stoffwechsels
Ein Organismus und auch eine Zelle verfgen nicht

immer ber gleich viel Nhrstoffe, sie bentigen
auch nicht immer gleich viel chemische Energie und
Baustoffe: Die Zelle passt sich den Bedingungen an,
indem sie den Stoffwechsel entsprechend reguliert.
Wechselnder ATP-Bedarf
Der ATP-Bedarf einer Muskelfaser kann einige
hundert Mal zunehmen, wenn sie vom Ruhezustand zu maximaler Leistung bergeht.
werden zur Deckung des Energiebedarfs diese Reserven und darauf krpereigene Proteine abgebaut.
Der Stoffwechsel wird auf zwei Stufen reguliert: Aktivitt oder Konzentration bestimmter
Enzyme werden verndert Bei allosterisch regulierbaren Enzymen kontrollieren Inhibitoren
und Aktivatoren die katalytische Aktivitt. In der

Regel betreffen die Regulationsmechanismen Enzyme, welche irreversible Reaktionen am Anfang
einer Stoffwechselkette katalysieren (.Abb.13.3).
Definition
Die wichtigsten Regulationsmechanismen entscheiden zwischen Katabolismus und Anabolismus

Je nach Gewebe wird der Aufbau von Krpersubstanz bestimmt durch das Nhrstoffangebot (z.B. im
Fettgewebe die Synthese von Reservefett) oder durch

den Bedarf an Zellbestandteilen (z.B. die Synthese
von Muskelproteinen beim Bodybuilding). Der Abbau von Nhrstoffen zur Gewinnung von ATP wird
ausschlielich durch den ATP-Bedarf der Zellen gesteuert, keinesfalls durch das Nhrstoffangebot. Bei
einem berangebot wird nicht vermehrt ATP gebildet, sondern chemische Energie in Form von Glykogen und Reservefett gespeichert. Im Hungerzustand
Schrittmacherreaktion: Regulierte und meist

langsamste Reaktion in einer Stoffwechselkette, deren Geschwindigkeit den Durchsatz
durch die Kette bestimmt.
Einige Hormone regulieren den Stoffwechsel, indem sie indirekt ber eine Signalkaskade die Aktivitt von Schrittmacherenzymen beeinflussen; andere Hormone wiederum stimulieren oder hemmen
die Synthese bestimmter Enzyme. Gewisse Enzyme
werden bei Fehlen ihres Substrats gar nicht synthetisiert, ihre Synthese wird ber eine Regelkette
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durch das Substrat induziert. Im Gegensatz zu diesen induzierbaren Enzymen stehen die konstitutiven Enzyme, die immer in gleicher Konzentration
vorliegen.
Links auf
Springer Website:
027-6-1514857-0
13.1 Experimentelle Untersuchung
des Stoffwechsels
13.2 bersicht ber den Stoffwechsel
13.3 Verwendung des im Katabolismus
gebildeten ATP
13.4 Regulation des Stoffwechsels
161
Glykolyse und Citratzyklus

14.1
Glykolytischer Abbauweg162
14.2
Von Pyruvat zu Acetyl-CoA 168
14.3
Abbau von Acetyl-CoA im Citratzyklus 171

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Kapitel 14 Glykolyse und Citratzyklus
Fr die meisten Gewebe ist Glucose neben Fettsuren der wichtigste Energielieferant. Wenn gengend
O2 vorhanden ist, wird Glucose durch die Reaktionskette der Glykolyse (griech. Abbau von Zucker)
im Cytosol zu Pyruvat (Anion der Brenztraubensure, pyruvic acid) und darauf durch den Pyruvatdehydrogenase-Multienzymkomplex in den
Mitochondrien zu Acetyl-CoA (aktivierte Essigsure) und CO2 abgebaut (aerobe Glykolyse). Acetyl-CoA wird weiter ber den Citrat-Zyklus oxidativ
zu CO2 abgebaut. Die Oxidation der entstehenden
Reduktionsquivalente (NADH und FADH2) durch
O2 in der Atmungskette ist gekoppelt mit der Synthese von ATP. Diese oxidative Phosphorylierung ist der Hauptlieferant von ATP in eukaryontischen Zellen (etwa 30mol ATP/Mol Glucose).
Zellen knnen Glucose auch ohne Koppelung

mit O2-abhngigen Oxidationsvorgngen zur Gewinnung von ATP nutzen (anaerobe Glykolyse).
Bei der Milchsuregrung wird Glucose nichtoxidativ ber Pyruvat zu Lactat (Anion der Milchsure) abgebaut. Bei Mensch und hheren Tieren
wird Glucose nur unter bestimmten Bedingungen
auf diese Weise abgebaut: in den Erythrozyten, die
keine Mitochondrien besitzen, und in der Muskulatur, wenn bei hoher Leistung der O2-Nachschub
nicht mehr ausreicht. Bei der alkoholischen Grung
der Hefe wird Pyruvat anaerob zu Ethanol und CO2
abgebaut. Der anaerobe Abbau von 1mol Glucose
zu Lactat oder Ethanol liefert nur 2mol ATP.
14.1
(9020mg/100mL) gehalten. Die Glucose im

Blut stammt entweder aus dem Darm (Strke in
Nahrung) oder aus der Leber (Glykogen-Reserve,
Gluconeogenese). Glucosetransporter in der Zellmembran ermglichen den passiven katalysierten
Transport der Glucose (Abschn.26.4) lngs des
Konzentrationsgeflles in die Zelle.
In den meisten Geweben (z.B. Leber, Gehirn,
Erythrozyten) ist die Aufnahme von Glucose nicht
reguliert Die Menge der aufgenommenen Glucose
wird allein durch den Konzentrationsunterschied
zwischen Blut und Zelle, d.h. durch den Glucoseverbrauch der Zelle, bestimmt. Der Energiestoffwechsel des Gehirns ist ein Sonderfall. Whrend
die meisten Zellen zur Gewinnung chemischer
Energie vorwiegend Fettsuren abbauen, kann das
Gehirn normalerweise nur Glucose verwenden. Bei
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Glykolytischer Abbauweg
Alle Zwischenprodukte der Glykolyse (Abbau von

Zucker) sind phosphoryliert Der Abbau von Glucose zu Pyruvat erfolgt im Cytosol ber 10 enzy-
mkatalysierte Reaktionen (.Abb.14.1, ). Sobald

Glucose in die Zelle gelangt, wird sie phosphoryliert.
Alle weiteren Zwischenprodukte der Glykolyse tragen auch eine oder sogar zwei Phosphatgruppen
und sind bei pH7, dem physiologischen intrazellulren pH-Wert, negativ geladen. Da Ionen nicht
durch die Zellmembran diffundieren knnen, bleiben die Zwischenprodukte in der Zelle.
Abschnitt1: Aufnahme der Glucose in Zelle
und erste Phosphorylierung Beim Menschen
wird die Glucosekonzentration im Blut innerhalb relativ enger Grenzen konstant bei 51mM
163
14.1Glykolytischer Abbauweg
14
.. Abb.14.1 Glykolyse. Die

Reaktionskette von Glucose
zu Lactat lsst sich in folgende
Abschnitte unterteilen:
Aufnahme von Glucose in
die Zelle und Phosphorylierung
(Verbrauch von 1ATP)
Isomerisierung und Phosphorylierung (Verbrauch von 1ATP)
zu Fructose-1,6-bisphosphat
(C6) und Spaltung in 2Triosephosphate (2C3, Dihydroxy
acetonphosphat und Glycerinaldehyd-3-phosphat)
Bildung von ATP (Gewinn von
22 ATP) durch energetische
Koppelung mit der Oxidation
von Glycerinaldehyd-3-phosphat
zu Pyruvat
Reduktion von Pyruvat zu
Lactat zur Rckgewinnung von
NAD+
Blaue Pfeile geben die drei irreversiblen Reaktionen an
Absinken der Glucosekonzentration im Blut auf

Werte unter 23mM (Hypoglykmie) ist eine ausreichende ATP-Synthese im Gehirn nicht mehr gewhrleistet: Die Ionenpumpen versagen, es kommt
zu schweren Strungen der Gehirnfunktionen, die
von Krmpfen ber Bewusstlosigkeit und Koma bis
zum Tod fhren knnen.
Insulin frdert die Glucoseaufnahme in Muskel- und Fettzellen Insulin ist das wichtigste
Hormon zur Aufrechterhaltung einer konstanten

Glucosekonzentration im Blut. Ein Anstieg der
Glucosekonzentration erhht die Ausschttung
von Insulin. Das Hormon frdert in Muskel- und
Fettzellen die Fusion intrazellulrer Vesikel, wel-
che Glucosetransporter tragen, mit der Zellmembran, erhht damit die Anzahl der Glucosetransporter an der Zelloberflche und beschleunigt die
Aufnahme von Glucose. Durch Rckkoppelung
entsteht ein Regelkreis: Muskel- und Fettgewebe
nehmen mehr Glucose auf, die Glucosekonzentration im Blut sinkt, und die Insulinsekretion nimmt
wieder ab. Insulin ist das Hormon des berflusses: Bei berangebot dient die in Muskel- und
Fettgewebe aufgenommene Glucose zur Anlage
von Energiereserven in Form von Glykogen bzw.
Triacylglycerolen. Bei niedriger Konzentration
bleibt die Glucose im Blut dem Gehirn vorbehalten.
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Zur Phosphorylierung der Glucose zu Glucose-6-phosphat wird ATP investiert Unter physio-
logischen Bedingungen ist die Reaktion nicht umkehrbar; Glucose-6-phosphat ist keine energiereiche
Verbindung und kann nicht fr die Synthese von
ATP verwendet werden (.Tab.1.4).
Es folgt ein zweiter, wiederum irreversibler Phosphorylierungsschritt zu Fructose-1,6-bisphosphat,

katalysiert durch die Phosphofructokinase, dem
Schrittmacherenzym der Glykolyse (.Abb.14.1).
Dieses Enzym reguliert den Durchsatz durch die
ganze Stoffwechselkette. Der zweite Phosphorylierungsschritt sorgt dafr, dass bei der darauf folgenden Spaltung keine nichtphosphorylierte Triose
entsteht:
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Die Reaktion wird in der Leber und den insulinproduzierenden -Zellen des Pankreas durch die
glucosespezifische Glucokinase katalysiert. In allen
anderen Geweben phosphoryliert die allgemein fr
Hexosen spezifische Hexokinase die Glucose. Die
beiden Isoenzyme unterscheiden sich auch in ihrer
Affinitt fr Glucose. Die relativ hohe Affinitt der
Hexokinase fr Glucose (Km 0,1mM) fhrt dazu,
dass das Enzym bei physiologischen Glucosekonzentrationen bereits gesttigt ist und in die Zelle
aufgenommene Glucose mit Maximalgeschwindigkeit phosphoryliert. Die Glucokinase der Leber
hat hingegen einen hohen Km-Wert (10mM), die
Geschwindigkeit der Phosphorylierung erhht sich
daher mit dem Ansteigen der Glucosekonzentration im Pfortaderblut in der resorptiven Phase. Auf
diese Weise fngt die Leber berschssige Glucose
im Pfortaderblut ab. Sobald postresorptiv die Glucosekonzentration im Pfortaderblut sinkt, nimmt
auch die Geschwindigkeit der Phosphorylierung
ab, der Groteil der Glucose passiert die Leber und
steht den peripheren Geweben (Gehirn!) zur Verfgung.
Abschnitt2: ber Fructose-1,6-bisphosphat
(C6) zu zwei Triosephosphaten (2xC3) Glucose-6-phosphat, eine Aldose, isomerisiert zu Fructose-6-phosphat, einer Ketose:
Dihydroxyacetonphosphat, eine Ketose, und Glycerinaldehyd-3-phosphat, die entsprechende Aldose,
165
14
.. Abb.14.2 Oxidation von Glycerinaldehyd-3-phosphat zu 3-Phosphoglyceroylphosphat. Die Oxidation des Aldehyds zur
Carbonsure (mit NAD+, Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid, als Elektronenakzeptor) ist gekoppelt mit der Synthese eines energiereichen gemischten Sureanhydrids
stehen miteinander im Gleichgewicht. Glycerinaldehyd-3-phosphat ist das Substrat der nchsten

Reaktion.
Abschnitt3: Oxidationsreaktion liefert energiereiche Verbindung Die Glycerinaldehydphosphat-Dehydrogenase katalysiert die einzige
oxidative Reaktion der Glykolyse und produziert
aus Glycerinaldehyd-3-phosphat mit NAD+ als
Oxidationsmittel eine energiereiche Verbindung,
3-Phosphoglyceroylphosphat, ein gemischtes
Sureanhydrid aus 3-Phosphoglycerinsure und
Phosphorsure (.Abb.14.2). Die Oxidation von
Glycerinaldehyd-3-phosphat zu 3-Phosphoglycerinsure ist eine exergonische Reaktion; die Phosphorylierung der 3-Phosphoglycerinsure durch
anorganisches Phosphat zu 3-Phosphoglyceroylphosphat, einem energiereichen gemischten Sure-
anhydrid ist hingegen endergonisch. Die energetische Koppelung der beiden Teilreaktionen ber das
gemeinsame Zwischenprodukt, den energiereichen
Thioester der 3-Phosphoglycerinsure mit einem
Cysteinrest des Enzyms, ermglicht das Ablaufen
der Gesamtreaktion (.Abb.14.3).
NADH/NAD+
NADH besitzt ein Absorptionsmaximum bei
340nm (340=6220M1cm1), welches bei
NAD+ vllig fehlt. Enzymreaktionen, bei denen
NADH gebildet oder verbraucht wird, lassen
sich daher photometrisch verfolgen. Dieser
optische Test wird hufig zur Bestimmung von
Enzymaktivitten und Metabolitkonzentrationen eingesetzt.
166
.. Abb.14.3Glycerinaldehydphosphat-Dehydrogenase. Der Reaktionsmechanismus dieses

Enzyms liefert ein schnes Beispiel fr die energetische Koppelung zweier Reaktionen: Die
exergonische Oxidation eines Aldehyds (in Form
seines Thiohemiacetals mit der Sulfhydrylgruppe
eines Cysteinrests des Enzyms) zur Carbonsure
(Schritt2) bringt die endergonische Bildung eines
energiereichen Sureanhydrids (3-Phosphoglycerinsure+Phosphorsure3-Phosphoglyceroyl
phosphat) zum Ablaufen (Schritt3). Gekoppelt
sind die beiden Reaktionen ber den energiereichen Thioester
1
2
Thiohemiacetal
3
4
5
6
7
8
9
10
.. Tab.14.1 Energiearme und energiereiche Verbindungena

G
kJ/mol
11
12
Energiearme Phosphatbindungen
Phosphat
ester
13
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20
Glucose-6-P
+H2O
Glucose + Pi
13,8
Fructose-1,6-P2
+H2O
Fructose +Pi
16,7
Niedriges Phosphatgruppen ber

tragungspotenzial
Energiereiche Phosphatbindungen
Phosphat
anhydrid
ATP
+H2O
ADP+Pi
30,6
Gemischtes
Anhydrid
3-PGP
+H2O
3-PG+Pi
49,3
Enolphosphat
PEP
+H2O
Pyruvat+Pi
61,9
CoA+Acetat
31,4
Hohes
Phosphatgruppenber
tragungspotenzial
Energiereiche Thioesterbindung
Acyl-CoA
Acetyl-CoA
+H2O
Hohes Acetylgruppen-bertragungspotenzial
Um das Gruppenbertragungspotenzial der verschiedenen Verbindungen miteinander vergleichen zu knnen, wird

hier wie blicherweise die nderung der freien Energie der hydrolytischen Spaltung G angegeben, d.h. mit H2O als
Akzeptor der bertragenen Gruppe
a
167
Im nchsten Schritt wird ATP zurckgewonnen,

indem der Phosphatrest von 3-Phosphoglyceroylphosphat auf ADP bertragen wird:
Das Phosphatgruppenbertragungspotenzial von

3-Phosphoglyceroylphosphat ist wesentlich hher
ist als dasjenige von ATP (.Tab.14.1). Die Synthese
14
von ATP in dieser Reaktion ist damit exergonisch.

Die bisherige Reaktionsfolge hat zur Synthese von
ATP gefhrt, ohne dass dabei Sauerstoff verbraucht
worden wre. Man stellt diese anaerobe ATP-Synthese als Substratkettenphosphorylierung der
oxidativen Phosphorylierung in den Mitochondrien
gegenber.
Mit der Verlagerung des Phosphatrests aus Stellung3 in Stellung2 (.Abb.14.1) wird der nchste
Schritt vorbereitet, in welchem die Enolase aus
2-Phosphoglycerat Phosphoenolpyruvat produziert, die energiereichste biologische Verbindung
berhaupt (.Tab.14.1). Daraus wird in der nchsten Reaktion ATP gewonnen:
Enolase
Phosphoenolpyruvat hat ein derart hohes Phosphatgruppenbertragungspotenzial, weil sich das entstehende Enolpyruvat spontan und rasch in Pyruvat
umwandelt, d.h. aus dem Gleichgewicht entfernt
wird. Die Pyruvatkinase-Reaktion ist daher unter physiologischen Bedingungen nicht reversibel.
Auch bei dieser Reaktion zur Synthese von ATP
handelt es sich um eine Substratkettenphosphorylierung.
Abschnitt4: Reduktion von Pyruvat zu Lactat:
In der anaeroben Glykolyse (Milchsuregrung)

ist diese Reaktion unbedingt notwendig, weil sie
NAD+ regeneriert und damit die Glycerinaldehydphosphat-Dehydrogenase-Reaktion und die Glykolyse fortwhrend ablaufen lsst (.Abb.14.1).
Lactat, das Endprodukt der anaeroben Glykolyse
wird von den Zellen ins Blut abgegeben und in der

Leber zur Resynthese von Glucose verwendet (Cori-Zyklus).
Die ATP-Bilanz der anaeroben Glykolyse ist
positiv (.Tab.14.2). Pro mol Glucose, welches
zu 2mol Lactat abgebaut wird, werden 2mol ATP
gewonnen. Die Energiebilanz zeigt, dass unter
Standardbedingungen (Konzentrationen der Reaktanten 1M) 31% der chemischen Energie, die
beim Abbau von Glucose zu Milchsure frei wird,
in Form von ATP gewonnen werden. Die Rechnung mit physiologischen Konzentrationen der
Reaktanten ergibt einen Wirkungsgrad von etwa
40%. Der Rest der freien Energie der Glucose wird
als Wrme freigesetzt. Unter Standardbedingungen und auch bei physiologischen Bedingungen
ist G bzw. G der Gesamtreaktion negativ,
d.h. der anaerobe Abbau von Glucose zu Lactat
samt der damit gekoppelten Bildung von ATP ist
exergonisch.
Die alkoholische Grung der Hefe ist eine

Variante der anaeroben Glykolyse Die beiden
anaeroben Abbauprozesse unterscheiden sich nur

in den Endstufen. Die Hefe ist ein einzelliger Eukaryont, sie besitzt Mitochondrien und kann unter
168
1
2
.. Tab.14.2Glykolyse
3
4
5
ATP (mol/mol)
ATP-Bilanz (vgl. .Abb.14.1)

GlucoseGlucose-6-P
Fructose-6-PFructose-1,6-P2
3-Phosphoglyceroylphosphat3-Phosphoglycerat (2x)
+2
PhosphoenolpyruvatPyruvat (2x)
+2
Netto
+2
Energie-Bilanz
6
7
G (kJ/mol)
Glucose2 Milchsure
198
2ADP+2Pi2ATP+2H2O
+6l
Glucose+2ADP+2Pi2Milchsure+2ATP+2H2O
137
(Gesamtreaktion ist exergonisch!)
8
9
aeroben Bedingungen Pyruvat oxidativ zu CO2 abbauen. Bei Sauerstoffmangel stellen die Hefezellen
auf anaeroben Stoffwechsel um und bauen Glucose

zu Ethanol und CO2 ab:
Auch bei der alkoholischen Grung geht es darum,

NAD+ zu regenerieren, damit die Glykolyse unter
anaeroben Bedingungen kontinuierlich ablaufen
kann. Ihre Endprodukte sind beide von praktischer
Bedeutung: Die alkoholische Grung zuckerhaltiger Lsungen dient seit Urzeiten zur Herstellung
alkoholhaltiger Getrnke wie Bier und Wein; frei
gesetztes CO2 lsst Brot und Hefegebck beim Backen aufgehen.
14.2
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Alkoholische Getrnke
Die Hefezellen knnen Alkohol bis zu einer
Konzentration von hchstens 15Volumen-%
(12Gewichts-%; 2,6M) produzieren. Destillation von Grlsungen liefert die hherprozentigen Alkoholika (gebrannte Wasser).
Von Pyruvat zu Acetyl-CoA
In eukaryontischen Zellen unter aeroben Bedingungen wird Pyruvat durch oxidative Decarboxylierung zu Acetyl-CoA umgesetzt. Diese Reaktion
wird durch den Pyruvatdehydrogenase (PDH-)
Multienzymkomplex
katalysiert und luft in
der Matrix der Mitochondrien ab. Ein erst krzlich entdecktes Transportprotein der inneren
Mitochondrienmembran bringt, angetrieben durch
den Protonengradienten (.Abb.15.6), Pyruvat aus
dem Cytosol in die Mitochondrien . Nicht nur
die Glykolyse, der Hauptweg des Kohlenhydratabbaus, sondern auch der Abbau gewisser Aminosuren fhrt ber die Oxidation von Pyruvat (Abschn.18.2). Die einfache Decarboxylierung von
Pyruvat zu freiem Acetaldehyd wie in der Hefe ist
nicht mglich, weil die in der Hefe vorkommende
Pyruvatdecarboxylase fehlt.
169
14.2 Von Pyruvat zu Acetyl-CoA
14
34kJ/ mol
.. Abb.14.4 Oxidative Decarboxylierung von Pyruvat. Die Bildung des energiereichen Thioesters Acetyl-Coenzym A wird
ermglicht durch Koppelung an die Decarboxylierung und Oxidation von Pyruvat (Reaktionsmechanismus des Pyruvatdehydrogenase-Multienzymkomplexes: .Abb.14.5). Die Sulfhydrylgruppe des Cysteaminrests von CoA bildet mit Essigsure und
auch langkettigen Fettsuren energiereiche Thioester mit hohem Acylgruppen (Carbonsurereste)-bertragungspotenzial.
Im Stoffwechsel fungiert CoA als genereller bertrger von Acylresten. CoA ist ein Derivat von AMP, das ber einen weiteren
Phosphatrest an das Vitamin Pantothensure gekoppelt ist, welches ber eine Amidbindung mit Cysteamin verbunden ist
Coenzym A (CoA) dient allgemein als bertrger von Acylgruppen (Carbonsureresten) Der
wichtigste Teil von CoA ist seine Sulfhydrylgruppe,

die mit Carbonsuren, Essigsure im Fall von Ace
tyl-CoA, aber auch mit langkettigen Fettsuren,
energiereiche Thioester mit einem hohen Acylgruppen-bertragungspotenzial bildet (.Abb.14.4;
.Tab.14.1).
Fnf aufeinanderfolgende vom Pyruvatdehydrogenase-Multienzymkomplex katalysierte Teilreaktionen fhren von Pyruvat zu Acetyl-CoA. Der Enzym
komplex mit einer Gesamtmasse von 4,6 103kDa
(eukaryontisches Ribosom 4,3 103kDa) besteht aus
je 24Pyruvatdehydrogenase- und Acetyltransferasemoleklen sowie 12Dihydrolipoamid-Dehydrogenasemoleklen. Die Reaktionszwischenprodukte
sind jeweils kovalent an das entsprechende Teilenzym gebunden. Das Entfallen der freien Diffusion
der Zwischenprodukte erleichtert die Bildung der
Enzym-Substrat-Komplexe und verringert die Mglichkeit von Nebenreaktionen mit anderen Verbindungen (.Abb.14.5).
Das Endprodukt Acetyl-CoA mit seinem hohen

Acetylgruppenbertragungspotenzial ist Substrat
nicht nur fr den katabolen Citratzyklus sondern
auch fr anabole Reaktionen wie die Synthese von
Fettsuren und Cholesterol.
Reversible Phosphorylierung reguliert den
PDH-Komplex Es ist die irreversible Reaktion von
Pyruvat zu Acetyl-CoA, bei der die Regulationsmechanismen eingreifen (vgl. Abschn.13.4). Der
PDH-Komplex gibt ein Beispiel fr die Regulation
der Enzymaktivitt durch kovalente chemische
Modifikation. Die Multienzymkomplexe enthalten
neben den drei an den Stoffwechselumsetzungen
direkt beteiligten Enzymen zustzliche, regulatorisch wirksame Enzyme, nmlich PDH-Kinase und
PDH-Phosphatase.
170
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; Abschn. 15.2)
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oxidiert
.. Abb.14.5Pyruvatdehydrogenase-Multienzymkomplex
171
14.3 Abbau von Acetyl-CoA im Citratzyklus
14
versibel durch die darauf folgende Hydrolyse der
energiereichen Thioesterbindung.
, Citrat isomerisiert zu Isocitrat mit cis-
Aconitat als Zwischenprodukt. Die tertire Alkoholgruppe von Citrat wird damit zur sekundren Alkoholgruppe von Isocitrat, die im nchsten Schritt zu
einer Oxo-Gruppe dehydriert wird.
Oxidation mit NAD+ als Oxidationsmittel sowie irreversible Decarboxylierung der dabei intermedir entstehenden Oxosure Oxalsuccinat (nicht
im Schema) zu -Ketoglutarat (2-Oxoglutarat).
Wie die oxidative Decarboxylierung von Pyruvat zu Acetyl-CoA wird dieser Schritt von einem
Multienzymkomplex (-Ketoglutarat-Dehydrogenase) katalysiert, der die gleichen Coenzyme
Erhhte Konzentrationen von Stoffwechselprodukten, welche der Zelle chemische Energie liefern, aktivieren die PDH-Kinase allosterisch, wodurch die
PDH phosphoryliert und damit inaktiviert wird.
Wenn hingegen eine steigende Konzentration von
ADP einen Energiemangel der Zelle anzeigt oder
Pyruvat im berfluss vorliegt, wird die Kinase gehemmt, wodurch die Phosphatase die Oberhand
gewinnt und die PDH aktiviert.
14.3
Abbau von Acetyl-CoA

im Citratzyklus
Unter aeroben Bedingungen werden neben Pyruvat

auch Fettsuren sowie gewisse Aminosuren zu
Acetyl-CoA (C2) abgebaut. Durch Addition dieses
zentralen Zwischenprodukts des Stoffwechsels an
Oxalacetat (C4) wird Citrat (C6) gebildet, das im
Citratzyklus durch sukzessive Oxidations- und
Decarboxylierungsschritte zu CO2 und Oxalacetat
abgebaut wird. In der Bilanz wird dabei der Acetyl-Rest zu CO2 abgebaut. Citratzyklus, Zitronensurezyklus, Tricarbonsurezyklus und Krebszyklus
(nach Hans Krebs, Entdecker des Zyklus) sind Synonyma.
Der Citratzyklus luft ber 9Einzelreaktionen
(.Abb.14.6):
Der Acetylrest wird in den Zyklus eingeschleust. Die Aldoladdition wird praktisch irre-
(Thiamindiphosphat, Liponsure und FAD) und

Cosubstrate (CoA und NAD+) benutzt wie der
PDH-Komplex (.Abb.14.5).
Die Hydrolyse des energiereichen Thioesters Succinyl-CoA erlaubt, GTP aus GDP und Pi zu
synthetisieren (Succinat, Anion der Bernsteinsure;
succinic acid). Wie bei der Glykolyse handelt es sich
auch hier um eine Substratkettenphosphorylierung.
ATP und NTP

Aus GTP und ADP kann ATP gebildet werden.
Unspezifische Nucleosiddiphosphat-Kinasen
katalysieren die folgende Reaktion: ATP +NDP
ADP +NTP; wobei N irgendein Nucleosid
darstellt.
Die Succinatdehydrogenase bentigt FAD, ein

strkeres Oxidationsmittel als NAD+, als prosthetische Gruppe. Die Succinatdehydrogenase ist ein Enzym der Atmungskette in der inneren Mitochondrienmembran (KomplexII); alle anderen Enzyme des
Citratzyklus befinden sich in der mitochondrialen
Matrix.
Die Addition von H2O an die Doppelbindung
fhrt zu Malat (Anion der pfelsure, malic acid).
Die OH-Gruppe wird im nchsten Schritt zur Oxogruppe oxidiert.
Diese Reaktion bildet wieder Oxalacetat,
den Akzeptor von Acetyl-CoA. Fr jedes Molekl
Oxalacetat, das als Akzeptor verbraucht worden ist,
resynthetisiert der Zyklus ein Molekl Oxalacetat.
172
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FAD
FAD
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.. Abb.14.6 Citratzyklus. Im Reaktionsschritt dient Oxalacetat als Akzeptor des Acetylrests von Acetyl-CoA. Im Endschritt
wird Oxalacetat regeneriert. Ohne primr vorhandenes Oxalacetat kann der Zyklus nicht ablaufen
173
Bilanz des Citratzyklus
Acetyl-CoA C 3 NADC C FAD C GDP
14
Acetyl-CoA aktiviert allosterisch die Pyruvat-Carboxylase und hemmt die Pyruvat-Dehydrogenase:
C Pi C 2 H2 O
#
2 CO2 C 3 NADH C 3 HC C FADH2

C GTP C CoASH
Der Citratzyklus luft wie die Oxidation von Pyruvat zu Acetyl-CoA in der Mitochondrienmatrix ab.
Im Gegensatz zur Glykolyse werden im Citratzyklus
keine phosphorylierten Zwischenprodukte gebildet.
Alle Zwischenprodukte sind jedoch Tri- oder Dicarbonsuren und damit beim pH-Wert der Zelle
ebenfalls negativ geladen und nicht membrangngig.
Die wichtigsten Produkte des Citratzyklus sind
GTP und vor allen NADH und FADH2 als Substrate
fr die Atmungskette und die damit gekoppelte oxidative Phosphorylierung. Bemerkenswert ist ferner,
dass der Hauptteil des im Organismus gebildeten
CO2 in der Pyruvatdehydrogenase-Reaktion und
den zwei Decarboxylierungsreaktionen des Citratzyklus entsteht.
Warum laufen die oxidative Decarboxylierung
von Pyruvat zu Acetyl-CoA und der Citratzyklus
nur unter aeroben Bedingungen ab? Bei der
oxidativen Decarboxylierung von Pyruvat und den

Oxidationsschritten des Citratzyklus bernehmen
NAD+ und FAD die abgegebenen Reduktionsquivalente (Wasserstoffatome mit ihren Elektronen).
Nur unter aeroben Bedingungen knnen NADH
und FADH2 die Reduktionsquivalente in der Atmungskette auf O2 bertragen und dadurch zu
NAD+ und FAD reoxidiert werden.
Bei einem berschuss von Acetyl-CoA sorgen diese

Regelmechanismen dafr, dass weniger Ace
tylCoA, aber mehr Oxalacetat produziert wird. Dem
Citratzyklus wird dadurch mehr Akzeptor fr Acetyl-CoA zur Verfgung gestellt. Zudem wird mehr
Oxalacetat fr die Gluconeogenese (Abschn.16.1)
geliefert.
Der Citratzyklus muss permanent mit Zwischenprodukten aufgefllt werden Oxalacetat
und die anderen in Oxalacetat umwandelbaren

Zwischenprodukte des Zyklus sind wie die Enzyme
als Teile der Maschinerie, die Essigsure zu 2CO2
oxidiert, zu betrachten. Bei erniedrigter Konzentration von Oxalacetat knnte weniger Acetyl-CoA
in den Zyklus eingeschleust werden, Acetyl-CoA
wrde sich anstauen. In der Tat entziehen die Gluconeogenese und die Synthese bestimmter Aminosuren sowie von Hm und Fettsuren dem
Citratzyklus stndig Oxalacetat und andere Zwi-
174
1
2
3
schenprodukte. Im Citratzyklus wird Oxalacetat

zwar regeneriert, kann aber netto nicht neugebildet werden. Die Zelle muss daher ber Reaktionen
verfgen, welche verbrauchtes Oxalacetat nachliefern, die Auffllreaktionen oder anaplerotischen
Reaktionen
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Zudem fllen die Abbaureaktionen gewisser

Aminosuren den Citratzyklus mit Zwischenprodukten auf:
Die Carboxylierung von Pyruvat zu Oxalacetat

ist die wichtigste anaplerotische Reaktion. Die
Pyruvatcarboxylase bentigt Biotin, ein Vitamin, als prosthetische Gruppe und verbraucht
ATP:
175
Die Pyruvatcarboxylase-Reaktion und die

anderen anaplerotischen Reaktionen sind
nicht nur wichtig fr die Nachlieferung von
Zwischenprodukten des Citratzyklus, sondern
auch fr die Gluconeogenese (Neubildung von
Glucose) aus Lactat und aus Aminosuren.
ber die Reaktion Oxalacetat Phosphoenolpyruvat werden Oxalacetat und andere
Metaboliten der Gluconeogenese zugefhrt
(Abschn.16.1).
Der Glyoxylatzyklus bei Pflanzen und Mikroorganismen erlaubt, Acetyl-CoA in Kohlenhydrat

umzuwandeln Der Glyoxylatzyklus, eine Variante des Citratzyklus, erlaubt gewissen Bakterien,
mit Essigsure oder anderen Fettsuren als einziger

Kohlenstoffquelle zu wachsen. In Pflanzensmlingen erlaubt der in den Glyoxysomen ablaufende Zyklus, Reservefett fr die Synthese von Kohlenhydrat
zu verwenden (Abschn.21.3).
Links auf
Springer Website:
027-6-1517042-0
14.1 Glykolytischer Abbauweg
14.2 Von Pyruvat zu Acetyl-CoA
14
177
ATP-Synthese
in Mitochondrien
15.1
Organisation der Atmungskette 179
15.2
Redoxkomponenten der Atmungskette(FMN, FAD,

FeS-Zentren, Ubichinon, Cytochrome) 179
15.3
Chemiosmotischer Mechanismus der

oxidativen Phosphorylierung183
15.4
Transport von Reduktionsquivalenten vom

Cytosol in die Mitochondrien 186
15.5
ATP-Bilanz des oxidativen Abbaus von Glucose 188
15.6
Regulation der mitochondrialen ATP-Synthese 188

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20
Kapitel 15 ATP-Synthese in Mitochondrien
Im Citratzyklus und bei der Fettsureoxidation

(Abschn.17.1) entstehen NADH und enzymgebundenes FADH2, die in einer stark exergonischen
Reaktion Sauerstoff zu Wasser reduzieren knnen:
NADH C HC C 1=2 O2 ! NADC C H2 O
G0 D 219 kJ=mol
ist auch stark exergonisch, verluft aber langsamer. Die chemische Energie wird schrittweise freigesetzt und mit einem Wirkungsgrad
von 40% zur Synthese von ATP genutzt.
NADH C HC C 1=2 O2 ! NADC C H2 O

FADH2 C 1=2 O2 ! FAD C H2 O
Die enzymkatalysierte bertragung der Elektronen von NADH und FADH2 auf O2 verluft ber
die mehrstufige Atmungskette. In der damit gekoppelten oxidativen Phosphorylierung wird die
bei diesen Redoxreaktionen frei werdende Energie
fr die Synthese von ATP aus ADP und Pi genutzt.
Knallgasreaktion
Die Energie, welche bei der bertragung von
NADH-gebundenem Wasserstoff auf Sauerstoff
verfgbar wird, lsst sich abschtzen aus der
bekannten Knallgasreaktion:
H2 C 1=2 O2 ! H2 O G0 D 242 kJ=mol
In diesem Fall wird die gesamte Energie als

Wrme frei (Die Reaktion ist nicht nur stark
exotherm, sondern verluft auch sehr rasch,
daher der Knall!).
Der biochemische Vorgang, die in den
Mitochondrien ablaufende Atmungskette,
Auen
Eine Reihe hintereinander geschalteter Elek

tronenbertrger (Flavoproteine, FeS-Zentren,
Ubichinon und Cytochrome) in der inneren
Mitochondrienmembran transferiert die Elek
tronen von NADH oder FADH2 auf O2. Die dabei
freigesetzte Energie wird genutzt, um Protonen
aus der Matrix in den Intermembranalraum der
Mitochondrien zu pumpen: Die Protonenkonzentration auerhalb der Membran wird hher als in
der Matrix. Das Zurckflieen der Protonen in
Richtung des Konzentrationsgeflles ist seinerseits
gekoppelt mit der Synthese von ATP durch die
ATP-Synthase der inneren Mitochondrienmembran (chemiosmotischer Mechanismus der oxidativen Phosphorylierung). Pro mol NADH, welches
in die Atmungskette eingeschleust wird, entstehen
3mol ATP. Im tierischen Organismus liefert die
oxidative Phosphorylierung den weitaus grten
Teil von ATP: Mitochondrien, die Kraftwerke der
Zelle!
179
15.2 Redoxkomponenten der Atmungskette
Der Elektronentransfer ist strikt mit der Phosphorylierung gekoppelt, d.h. keiner der beiden
Prozesse kann ohne den andern ablaufen. Somit
wird O2 nur verbraucht, wenn gengend ADP zur
Phosphorylierung zur Verfgung steht, und gengend ADP steht nur zur Verfgung, wenn viel
ATP verbraucht worden ist. Gewisse Giftstoffe, z.B.
2,4-Dinitrophenol, entkoppeln Elektronentransfer
und Phosphorylierung mit der Folge, dass bei hohem O2-Verbrauch nur wenig ATP und umso mehr
Wrme produziert wird. Andere Giftstoffe, z.B.
Cyanid, blockieren den Elektronentransport und
damit die ATP-Synthese.
15.1
Organisation der Atmungskette
Die Atmungskette ist ein Membranprozess Im
Unterschied zur Glykolyse und den meisten Reaktionen des Citratzyklus wird die Reaktionskette der
Zellatmung nicht durch gelste Enzyme katalysiert,
sondern durch Proteine der inneren Mitochondrienmembran. Drei groe Multiproteinkomplexe
(KomplexI, III und IV) transportieren zusammen
mit kleineren, mobilen bertrgern von Reduktionsquivalenten [Ubichinon (Ubiquinone, Coenzym Q) und Cytochrom c] die Elektronen schrittweise von NADH und FADH2 auf molekularen
Sauerstoff. In der ersten Phase werden H-Atome
und daraufhin Elektronen bertragen (.Abb.15.1).
Terminologie
Reduktionsquivalente:
Elektron: e
H-Atom: [H], Proton plus Elektron
Hydridion: H, Proton plus zwei Elektronen
Abspaltung von 2[H]: Dehydrierung=Oxidation (z.B. Lactatdehydrogenase)
Abspaltung von H2O: Dehydratisierung
(z.B. Enolase)
Abspaltung von H+: Deprotonierung
Bei den Redoxreaktionen im Stoffwechsel handelt

es sich sehr hufig um die Aufnahme oder Abgabe
von zwei Wasserstoffatomen. Bei der bertragung
auf FAD (Abschn.15.2) bleiben beide Protonen
15
mit den Elektronen verbunden, im Fall von NAD+

(.Abb.14.2) wird ein Proton abgetrennt:
FAD C 2H ! FADH2
NADC C 2H ! NADH C HC

(NAD+ hat ein Hydridion aufgenommen, das Proton ohne Elektron geht in Lsung)
FADH2, das im Citratzyklus und beim Abbau
von Fettsuren entsteht, wird ber besondere Flavoproteinkomplexe in die Atmungskette eingeschleust.
Die FAD-abhngige Succinatdehydrogenase, die im
Citratzyklus Succinat zu Fumarat oxidiert, ist ein
Protein der inneren Mitochondrienmembran (KomplexII ) und bertrgt die Wasserstoffatome von
FADH2 auf Ubichinon. Auch die Acyl-CoA-Dehydrogenase liefert bei der -Oxidation von Fettsuren
(Abschn.17.1) die Reduktionsquivalente ber
FADH2 an die Atmungskette.
Die Redoxkomponenten der Atmungskette sind
ihrem Redoxpotenzial entsprechend in Serie hintereinander angeordnet (.Abb.15.2). Der Unterschied
im Standardredoxpotenzial zwischen NAD+/NADH
und O2/O2 von +1,14V entspricht 219kJ/mol.
Die Oxidation von 1mol NADH liefert demnach
219kJ, ein Energiebetrag, der zur Bildung von maximal 3mol ATP ausreicht.
15.2 Redoxkomponenten
der Atmungskette(FMN, FAD,

FeS-Zentren, Ubichinon,
Cytochrome)
NAD+/NADH weist das niedrigste Redoxpotenzial auf NADH ist der wichtigste Zubringer
von Elektronen zur Atmungskette. Es sind ber

200 NAD+-abhngige Dehydrogenasen bekannt,
welche der folgenden Reaktionsgleichung entsprechen:
NAD+ und NADH werden von den Dehydrogenasen wie ein zweites Substrat bzw. Produkt behan-
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.. Abb.15.1 Atmungskette. Vier Teilfunktionen sind zu erkennen: 1.Einsammeln der an NADH und FADH2 gebundenen H-Atome
mit ihren Elektronen. Die Wasserstoffatome von FADH2 (aus dem Citratzyklus und dem Fettsureabbau) werden von den entsprechenden FAD-abhngigen Dehydrogenasen (Succinatdehydrogenase und Acyl-CoA-Dehydrogenase) direkt an Q (Coenzym Q,
Ubichinon) abgegeben. 2.Weitergabe der Reduktionsquivalente (H-Atome, bzw. Elektronen) von einem Redoxpaar an das nchste, d.h. an zunehmend strkere Oxidationsmittel. 3.Reduktion von molekularem Sauerstoff (O2), dem Endoxidationsmittel (finalem
Elektronenempfnger). 4.Nutzung der chemischen Energie, die bei den Redoxvorgngen in den KomplexenI, III und IV frei wird,
zum Herauspumpen von Protonen. Die angegebene Stchiometrie der Reaktionen entspricht der Oxidation von einem Molekl
NADH, d.h. der Abgabe von zwei Elektronen. Wenn zur bertragung der zwei Elektronen der gleiche Vorgang zweimal abzulaufen
hat, ist das durch (2x) gekennzeichnet
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ox
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.. Abb.15.2 Anordnung der Redoxkomponenten in der Atmungskette (Q, Coenzym Q, Ubichinon). Die Atmungskette transportiert Reduktionsquivalente, alle beteiligten Komponenten kommen daher in einer oxidierten und einer reduzierten Form
vor. Die oxidierte Form dient jeweils als Akzeptor der Reduktionsquivalente ([H] oder e) und geht bei deren Aufnahme in die
reduzierte Form ber. Das Standard-Redoxpotenzial nimmt von links nach rechts zu, der Sauerstoff ist das strkste Oxidationsmittel. Definitionsgem entspricht das Standard-Redoxpotenzial (Eo) eines Redoxpaares (z.B. NAD+/NADH) dem Potenzial,
das sich bei Standardbedingungen (Konzentrationen 1M, 25C, pH7,0) gegen eine Normalwasserstoffelektrode einstellt.
Gox=nFEo; wobei F=Faraday-Konstante (96,5kJmol1V1) und n=Anzahl bertragene Elektronen. Das Redoxpotenzial
eines Redoxpaares gibt an, wie leicht das Redoxpaar Elektronen aufnimmt. Je hher das Redoxpotenzial, umso strker wirkt die
oxidierte Komponente des Redoxpaares als Oxidationsmittel (Elektronenakzeptor)
181
15
delt. Als Cosubstrate binden sie wie Substrat oder

Produkt nichtkovalent und reversibel an die aktive
Stelle. NADH kann somit an die aktive Stelle eines
anderen Enzyms binden und dort die Reduktionsquivalente an ein anderes Substrat weitergeben.
NADH, welches der Atmungskette zugefhrt
wird, stammt aus den Mitochondrien (Pyruvatdehydrogenase-Reaktion, Citratzyklus, Fettsureabbau und oxidative Desaminierung von
Glutamat zu -Ketoglutarat und NHC
4 ), aber auch
aus dem Cytosol (Glykolyse und weitere Reaktionen). NADH kann jedoch nicht aus dem Cytosol
durch die innere Membran in die Mitochondrien
gelangen. Besondere Mechanismen berfhren

die Reduktionsquivalente aus dem Cytosol in
die Mitochondrien (Abschn.15.4). Komplex I
(NADH-Q-Reduktase) mit einem Flavin-Coenzym
als Wasserstoffakzeptor besorgt das Einschleusen
der Reduktionsquivalente von NADH in die Atmungskette.
Flavin-abhngige Dehydrogenasen FMN
(Flavinmononucleotid) und FAD (Flavin-Adenin-Dinucleotid) enthalten ein intensiv gelbes heterozyklisches Ringsystem (lat. flavus, gelb). FMN
ist die phosphorylierte Form von Vitamin B2, FAD
ist ein Kondensationsprodukt von FMN und AMP.
FMN und FAD sind fest (durch nichtkovalente

Wechselwirkungen) an die entsprechenden Enzyme gebunden; als Coenzyme (prosthetische
Gruppen) dissoziieren sie nicht vom Enzym. ber
60Flavin-abhngige Dehydrogenasen sind bekannt
(Beispiele: Dihydrolipoamid-Dehydrogenase im
Pyruvatdehydrogenase-Komplex, .Abb.14.5; Succinatdehydrogenase im Citratzyklus, .Abb.14.6).
Das FMN der NADH-Q-Reduktase (Komplex I;
.Abb.15.1) hat ein hheres Redoxpotenzial als
NAD+. Daher wird NADH durch die NADH-QReduktase effizient oxidiert. Dabei entsteht die reduzierte Form von KomplexI (.Abb.15.2).
Eisen-Schwefel-Zentrum (FeS cluster) Eine
Komponente der Atmungskette mit noch hherem
Redoxpotenzial reoxidiert KomplexI. An der Weitergabe der Reduktionsquivalente ist ein FeS-Zentrum beteiligt. Zwei oder mehr Eisenionen sind
mit Cysteinresten des Proteins und mit Sulfidionen
koordiniert. Solche FeS-Zentren finden sich in Oxidoreduktasen und in den Komplexen der Atmungskette mit Ausnahme von KomplexIV.
Ubichinon (Q, Coenzym Q)

ist eine niedermolekulare Verbindung mit einer langen (C20) apolaren Seitenkette. Ubichinon ist daher fettlslich
und kann durch rasche Diffusion in der Lipiddoppelschicht der inneren Mitochondrienmembran mit
verschiedenen Membranenzymen reagieren. Ubichinon bernimmt Wasserstoffatome nicht nur von
KomplexI (FMNH2 ber FeS-Zentrum), sondern
auch von der Succinatdehydrogenase des Citratzyklus (KomplexII; FADH2). Ubichinon ermglicht
damit, dass Wasserstoffatome aus Metaboliten, die
nicht durch das relativ schwache Oxidationsmittel
NAD+ oxidiert werden knnen (das Redoxpaar Succinat/Fumarat hat ein relativ hohes Redoxpotenzial,
Eo=+0,031V), in die Atmungskette eingebracht
werden. Das gleiche Problem stellt sich beim oxidativen Abbau von Fettsuren. Auch dort gelangen
die Wasserstoffatome aus dem ersten Oxidationsschritt (Abschn.17.1) erst auf dem Niveau von
Ubichinon in die Atmungskette.
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Bei der Reoxidation der Hydrochinonform von

Ubichinon trennen sich die Wege von Protonen
und Elektronen (.Abb.15.1). Fortan werden in
der Atmungskette nur noch Elektronen weitergegeben, wobei die zwei Elektronen aus QH2 einzeln
weitergereicht werden (.Abb.15.2). Das hhere
Redoxpotenzial von KomplexIII ist bedingt durch
die an diesem Multienzymkomplex beteiligten
Cytochrome, die auch an den zwei weiteren Redoxschritten der Atmungskette mitwirken.
Cytochrome sind hmhaltige Proteine von
Elektronentransportsystemen Hm ist ein Kom-
plex eines zyklischen Tetrapyrrols mit einem an die

Stickstoffatome der vier Pyrrolringe gebundenem
Eisenion. Die Cytochrome sind rotbraune Chromoproteine, die aufgrund unterschiedlicher Seitenketten des Hms und entsprechend verschiedener
Absorptionsspektren als Cytochrome des Typs a, b
oder c bezeichnet werden. Das Tetrapyrrol im Hm
von Cytochromen des Typs b und auch von Hmoglobin und Myoglobin ist ProtoporphyrinIX, eines
von 15 mglichen Isomeren mit verschiedener Verteilung der Seitenketten . Beim Elektronentransport durch Cytochrome wechselt das Hm-Eisen
seinen Oxidationszustand:
Ferri-Protoporphyrin C e
.Fe3C ;Fe III/

Ferro-Protoporphyrin
.Fe2C ;Fe II/
Die Hauptbestandteile von Komplex III (QH2-
Cytochrom c-Reduktase oder kurz Cytochrom

c-Reduktase) sind die Cytochrome b und c1. Kom-
plexIII bergibt die Elektronen einzeln von QH2

(QH22H++2e) an Cytochrom c (.Abb.15.1).
Cytochrom c ist das einfachste Cytochrom der
Atmungskette (104Aminosurereste, 12kDa). Es ist
an der Auenseite der inneren Mitochondrienmembran lokalisiert und pendelt als Elektronbertrger
zwischen Komplex III (Cytochrom c-Reduktase)
und KomplexIV (Cytochrom c-Oxidase).
Die beiden zuletzt in der Atmungskette auftretenden Cytochrome a und a3 sind Bestandteile von
183
15.3 Chemiosmotischer Mechanismus der oxidativen Phosphorylierung
KomplexIV (Cytochrom c-Oxidase). An der ber-
tragung des Elektrons von Cytochrom c auf molekularen Sauerstoff sind auer den Cytochromen a und
a3 auch zwei Kupferionen beteiligt, die einzeln in der
Nhe des Hmeisens der beiden Cytochrome liegen
und ihren Redoxzustand verndern (Cu2++e Cu+).
Die Cytochrom-Oxidase katalysiert eine heikle
Reaktion: die konzertierte berfhrung von 4Elektronen (von 4 einzelnen Cytochrom c-Moleklen!)
auf 1O2-Molekl (.Abb.15.1 wiedergibt der Einfachheit halber die Stchiometrie fr 1NADH-Molekl, welches nur 2 Elektronen liefert). Die
Cytochrom-Oxidase reagiert jedoch mit molekularem O2. Die bertragung von 4 Elektronen ist
notwendig, um aus O2 vollstndig reduzierten Sauerstoff (2O2) zu erhalten, der zu Wasser protoniert
wird (2O2+4H+2H2O). Nur teilweise reduzierte
Zwischenprodukte wie O
2 (O2+e ; Superoxidradi2
kal, Superoxidanion) oder O2 (O2+2 e; Peroxidanion) sind uerst reaktiv und gefhrlich fr die
Zelle. Um allfllig gebildetes O
2 unschdlich zu
machen, besitzen die Mitochondrien eine eigene SuC
peroxiddismutase: 2 O
! O2 C H2 O2.
2 C 2H
Oxidationswasser
Die Atmungskette, genauer die
Cytochrom-Oxidase , verbraucht etwa 90%
des gesamten vom menschlichen oder tierischen Organismus aufgenommenen Sauerstoffs. Die restlichen 10% werden von anderen
Enzymen wie Oxidasen (z.B. Xanthinoxidase)
und Monooxygenasen (Hydroxylasen; z.B.
Steroidhydroxylasen) verbraucht.
Die Reduktion von O2 in der Atmungskette
liefert das sogenannte Oxidationswasser:
300mL/Tag beim erwachsenen Menschen!
Inhibitoren der Atmungskette hemmen die Synthese von ATP Alle Redoxkomponenten der
Atmungskette befinden sich in einem Fliegleichgewicht. Bei ungehinderter Oxidation der im Katabolismus anfallenden Reduktionsquivalente
nimmt das Verhltnis der Konzentration der reduzierten Form zur Totalkonzentration einer Redoxkomponente entlang der Kette graduell ab. Wenn
an einer Stelle der Elektronenfluss durch einen der
folgenden Inhibitoren blockiert wird, werden alle
15
Redoxkomponenten vor dem Block voll reduziert

und alle Komponenten nach dem Block voll oxidiert:
Rotenon, ein pflanzliches Produkt, hemmt
spezifisch KomplexI, wird als Insektizid verwendet.
Antimycin A, ein Antibiotikum aus Streptomyces-Pilzarten, hemmt KomplexII (Cytochrom
c-Reduktase), wird fr experimentelle Zwecke
benutzt.
Cyanid (CN; wird aus Zyankali KCN, oder
Blausure HCN freigesetzt) blockiert die
Cytochrom c-Oxidase durch Komplexbildung
mit deren Fe3+-Ionen.
Kohlenmonoxid (CO) fhrt zum gleichen Ergebnis; es komplexiert mit den Fe2+-Ionen der
reduzierten Cytochrom c-Oxidase (sowie mit
dem Fe2+-Ion von Hmoglobin und Myoglobin).
Alle genannten Hemmstoffe sind potente Gifte fr

Mensch und Tier. Sie blockieren die Atmungskette
und verhindern die ausreichende Bildung von ATP.
Fehlen von Sauerstoff (Hypoxie, Anoxie) fhrt zum
gleichen Ergebnis.
15.3 Chemiosmotischer
Mechanismus der oxidativen

Phosphorylierung
Der Elektronenfluss in der Atmungskette ist gekoppelt mit der Synthese von ATP Zu den Auf-
gaben der Atmungskette (Respiratory chain) gehrt

nicht nur die Regenerierung von NAD+ und FAD
sondern auch das Bereitstellen der Energie zur
Synthese von ATP. Das Redoxpotenzial nimmt von
einer Komponente der Atmungskette zur anderen
zu. Welche Schritte lassen eine Nutzung der chemischen Energie der Reduktionsquivalente zur
Synthese von ATP zu? Die hohen Stufen der Zunahme des Redoxpotenzials entfallen auf die drei
KomplexeI, III und IV (.Abb.15.2). Der Abfall
der freien Energie bei jeder dieser Stufen gengt,
um ATP zu synthetisieren. Im Unterschied zu den
ATP-liefernden Reaktionen der Glykolyse und des
Citratzyklus sind Atmungskette und ATP-Synthese
nicht ber gemeinsame energiereiche Zwischen-
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gekoppelt.
Der von Peter Mitchell, einem britischen Biochemiker, vorgeschlagene Mechanismus bercksichtigt nicht nur molekulare, sondern auch supramolekulare Gegebenheiten: Die mitochondriale
Matrix stellt ein geschlossenes Kompartiment dar,
das von seiner Umgebung, d.h. vom Intermembranalraum, durch die fr Metaboliten und Ionen
wenig durchlssige innere Mitochondrienmembran
getrennt ist. Hingegen ist die uere Mitochondrienmembran praktisch frei durchlssig, die Ionenzusammensetzung des Intermembranalraums entspricht derjenigen des Cytosols.
Die RedoxkomplexeI, III und IV pumpen Protonen aus den Mitochondrien Die Redoxreak-
tionen der Atmungskette sind mit einer Verschiebung von Protonen aus der mitochondrialen Matrix
gekoppelt. Sobald die Mitochondrien NADH und
FADH2 mit O2 oxidieren, nimmt der pH-Wert auerhalb der Mitochondrien ab und innerhalb der
Mitochondrien steigt er an (.Abb.15.1). Die drei
EnzymkomplexeI, III und IV haben, neben dem
Elektronentransport, noch eine zweite Funktion
als Protonenpumpen. Bei aktiver Zellatmung
bauen sie ein elektrochemisches Potenzial auf,
das aus einem elektrischen Potenzial (Ladungsunterschied innen und auen) und einem chemischen Potenzial (Konzentrationsunterschied der
H+-Ionen innen und auen; pH0,5) besteht.
Fr die Synthese von 1mol ATP mssen 34mol
H+ aus den Mitochondrien herausgepumpt werden
(.Abb.14.3).
Membranpotenzial der Mitochondrien
Elektrochemisches Potenzial ber innerer
Mitochondrienmembran:
RT
pH
F
D 0,17 V 0,06 .0,5/
p D Em 2,303
D 0,17 V C 0,03 V
.85 %/
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Zum Vergleich:
produkte, sondern durch einen chemiosmotischen Mechanismus miteinander energetisch
D 0,20 V
.15 %/
G0 D p F 19 kJ=mol HC
ADP C Pi ! ATP C H2 OI G0 D 30 kJ=mol

p
Elektrochemisches Gesamtpotenzial
(Proton motive force, Protonen bewegende Kraft)
Em
Elektrisches Membranpotenzial
Faraday-Konstante (96kJ/mol)
pH
0,5

Der Rckfluss von Protonen in die Matrix treibt
die ATP-Synthese an Das elektrochemische Po-
tenzial, das die Protonenpumpen aufbauen, wird

zur Synthese von ATP genutzt (.Abb.15.3). Der
Rckfluss der Protonen in die mitochondriale
Matrix ist ein exergonischer Vorgang, er erfolgt
in Richtung des elektrischen Potenzials und des
Konzentrationsgeflles. Die ATP-Synthase , ein
Multiproteinkomplex, der wie die Komplexe der Atmungskette in die innere Mitochondrienmembran
eingebettet ist, koppelt die endergonische Synthese
von ATP an den exergonischen Rckfluss der Protonen (.Abb.15.4). Die ATP-Synthase besteht aus
dem Protonenkanal Fo und der in die Matrix hineinragenden katalytischen Einheit F1. Der F1-Teil
besteht aus einem ringfrmigen ()3-Hexamer
und wird durch weitere Proteine in der Membran
verankert. Ins Innere des hexameren Rings ragt als
langgestreckter Stiel die -Untereinheit, welche ber
ein weiteres Protein mit dem Fo-Teil verbunden ist.
Die -Untereinheiten synthetisieren ATP in einem
dreistufigen zyklischen Vorgang.
ATP-Synthase-Hemmer
Das Subskript von Fo bedeutet, dass dieser Teil
der ATP-Synthase durch Oligomycin hemmbar
ist. Oligomycin, ein Produkt von Actinomyces-Pilzarten, verhindert den H+-Rckfluss
durch die Fo-Pore und hemmt auf diese Weise
die ATP-Synthase in Mitochondrien wie auch
die Photophosphorylierung in Chloroplasten.
Oligomycin wird als Fungizid verwendet.
Die ATP-Synthase wirkt als molekularer Motor, welcher den Protonenfluss nutzt, um ATP zu syntheti-
185
15.3 Chemiosmotischer Mechanismus der oxidativen Phosphorylierung
15
Auen
.. Abb.15.3 Chemiosmotischer Mechanismus der oxidativen Phosphorylierung. Das durch die Atmungskette mit ihren Protonenpumpen produzierte elektrochemische Potenzial treibt die Protonen zurck in die Matrix. Der Rckfluss der Protonen liefert
der ATP-Synthase die notwendige Energie, um ATP aus ADP und Pi zu synthetisieren. In den Reaktionsgleichungen bedeuten HC
i
Protonen innen (in der Mitochondrienmatrix) und HC
a Protonen auen. Die Stchiometrie der Bilanzgleichung ist vereinfacht:
Effektiv werden nur etwa 2.5Mol ATP pro Mol NADH synthetisiert
sieren. Das ()3-Hexamer wirkt als Stator und die

langgestreckte -Untereinheit im Innern des Stators
bernimmt die Rolle des Rotors (.Abb.15.5). Der
Protonenfluss durch die Kontaktflche zwischen
Stator und Rotor bewirkt eine Rotation des c12Rings und damit der -Untereinheit. Die Drehung
der -Untereinheit mit ihrer asymmetrischen Struktur verndert zyklisch die Konformation der drei
aktiven Stellen auf den -Untereinheiten des F1-Teils
und ermglicht damit die Synthese von ATP.
Auen
Die von oxidativer Phosphorylierung entkoppelte Atmungskette produziert nur Wrme Das
klassische Beispiel fr eine Entkoppelung der zwei

Vorgnge ist die Vergiftung der Mitochondrien mit
2,4-Dinitrophenol:
Dinitrophenol und Dinitrophenolat diffundieren

frei durch die innere Mitochondrienmembran. Es
entsteht so ein Kreisprozess, der zum Ausgleich
der Protonenkonzentrationen in und auerhalb
der Matrix fhrt. Die Atmungskette selbst luft
ungehindert ab, es wird jedoch kein elektrochemisches Potenzial aufgebaut und daher auch kein
ATP synthetisiert. Die durch Oxidation von NADH
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.. Abb.15.4 ATP-Synthase. Der Multiproteinkomplex ist in die innere Mitochondrienmembran eingebettet und besteht aus
einem statischen Teil (Stator in Grau) und einem sich drehenden Teil (Rotor in Blau). Der Rckfluss von Protonen durch die Kontaktflche von Protein a des Stators und dem je nach Spezies aus 9 bis 12c-Untereinheiten bestehenden Ring des Rotors in der
Membran versetzt den c12-Ring mitsamt der - und -Untereinheit in eine kontinuierliche Rotation. Die zwei -Untereinheiten
und die -Untereinheit fixieren das ()3-Hexamer an Protein a. Die -Untereinheit, die in den ()3-Ring des Stators hineinreicht und eine asymmetrische Struktur aufweist, dreht sich in 120-Schritten, dadurch wird die Konformation der -Einheiten
zyklisch verndert und die Synthese von ATP angetrieben. Abb.15.5). Nachdem 34Protonen durch die Stator (Protein a)-Rotor
(c12)-Kontaktflche in die Matrix zurckgeflossen sind, hat sich der c12-Ring kontinuierlich um 120 gedreht; bei Erreichen dieses
Drehwinkels relaxiert der Rotor durch eine ruckartige Rotation des -Stiels im ()3-Ring. Die Umwandlung der kontinuierlichen
Drehung des c12-Rings in die schrittweise Drehung des -Stiels setzt elastische Eigenschaften der Proteine voraus
und FADH2 verfgbare Energie wird ungenutzt als

Wrme freigesetzt. Bei einer Dinitrophenol-Vergiftung steigt die Krpertemperatur an (Hyperthermie). Als Abmagerungsmittel ist Dinitrophenol
wegen seiner hohen Toxizitt unbrauchbar.
Das Entkoppeln von Atmungskette und
ATP-Synthese durch Erhhung der Protonendurchlssigkeit der inneren Mitochondrienmembran ist
von physiologischer Bedeutung fr die Regulation
des Wrmehaushalts des Organismus. In Spezies,
bei welchen die Neugeborenen keinen Pelz besitzen (Mensch, Ratten) und auch bei Winterschlfern
(Murmeltieren) findet sich in der Unterhaut an
verschiedenen Stellen des Krpers braunes Fettgewebe (Die Farbe ist auf einen hohen Gehalt an
Mitochondrien mit ihren Cytochromen zurckzufhren). Das braune Fettgewebe oxidiert Fettsuren und produziert Wrme nach Bedarf als eine Art
Durchlauferhitzer fr den Organismus. Die innere
Mitochondrienmembran brauner Fettgewebezellen

enthlt das Protein Thermogenin (Uncoupling protein), welches Protonenkanle bildet, damit einen
Kurzschluss im Protonenkreislauf herstellt und die
oxidative Phosphorylierung zugunsten einer vermehrten Wrmeproduktion drosselt.
15.4 Transport
von Reduktionsquivalenten
vom Cytosol
in die Mitochondrien
Die innere Mitochondrienmembran ist fr NADH

nicht durchlssig NAD+ wird nicht nur in der
mitochondrialen Matrix (bei der oxidativen Decarboxylierung von Pyruvat und im Citratzyklus) sondern auch im Cytosol (Glykolyse) zu NADH reduziert. Damit die Glykolyse im Cytosol kontinuierlich
187
15.4 Transport von Reduktionsquivalenten vom Cytosol in die Mitochondrien
15
ablaufen kann, muss im Cytosol gebildetes NADH

reoxidiert werden. Die aerobe Reoxidation von
NADH ist jedoch nur in den Mitochondrien mglich, wobei die innere Mitochondrienmembran fr
NADH undurchlssig ist. Das Problem der Impermeabilitt der Mitochondrienmembran fr NADH
wird dadurch gelst, dass die beiden Reduktionsquivalente des NADH auf ein membrangngiges
Molekl bertragen werden. Die Membran ist selektiv durchlssig fr eine Reihe von Metaboliten des
Citratzyklus dank spezifischer Transportsysteme,
welche den Durchtritt von Dicarbonsureanionen
ermglichen. In den meisten Fllen handelt es sich
dabei um einen gekoppelten Gegentransport (Antiport): Ein Anion wird gegen ein anderes ausgetauscht; Teilchenkonzentration und elektrische Ladung auf den beiden Seiten der Membran verndern
sich nicht (Abschn.26.3). Fr die berfhrung
von Reduktionsquivalenten wird der Malat-Aspartat-Weg (Malate-aspartate shuttle) benutzt:
.. Abb.15.5 Katalytischer Zyklus der ATP-Synthase. aJede

der drei aktiven Stellen auf den -Untereinheiten des
()3-Hexamers durchluft der Reihe nach drei Phasen. In
der Loose-binding-Phase (L) werden ADP+Pi gebunden; in
der Tight-Phase (T) wird wegen der starken Bindung und
der reaktionsgnstigen gegenseitigen Positionierung von
ADP und Pi ohne weiteren Energieaufwand ATP gebildet; in
der Open-Phase (O) wird Energie verbraucht, um die aktive
Stelle zu ffnen und ATP freizusetzen. bDie drei -Einheiten
ndern ihren Funktionszustand in einer durch die schrittweise Rotation des -Stiels (in Blau) koordinierten Weise.
Jedes Mal wenn der -Stiel um 120 rotiert, geht jede der drei
Untereinheiten in den nchsten Funktionszustand ber. Die
asymmetrische Struktur der -Untereinheit soll andeuten,
dass deren Rotation die entsprechenden Konformationsnderungen in den drei aktiven Stellen auslst. Zum Beispiel wird
der O-Teil der -Untereinheit bei der nchsten 120-Drehung
des -Stiels der aktiven Stelle, die jetzt die T-Konformation
aufweist, die O-Konformation aufzwingen
(-Ketoglutarat)
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Malat und Aspartat sind C4-Verbindungen, die in

Mitochondrien und Cytosol an Stoffwechselreaktionen teilnehmen und deren Konzentrationen in den
beiden Kompartimenten ber zwei Antiport-Systeme im Gleichgewicht stehen. Im Cytosol bernimmt Oxalacetat die Reduktionsquivalente von
NADH, das dabei entstehende Malat bringt diese in
die mitochondriale Matrix, wo sie wieder auf NAD+
bergehen. Der Rest der Reaktionen dient dazu, den
Anfangszustand des Systems wieder herzustellen.
Aspartat dient dabei als Transportform von Oxal
acetat. Der Malat-Aspartat-Shuttle ist bei Vertebraten der quantitativ wichtigste Mechanismus zum
Transport von Reduktionsquivalenten aus dem
Cytosol in die Mitochondrien. Es bestehen weitere
Transportmglichkeiten fr Reduktionsquivalente,
z.B. der Glycerol-3-phosphat-Zyklus im Insektenmuskel.
15.5
ATP-Bilanz des oxidativen

Abbaus von Glucose
Die Oxidation von 1mol NADH in der Atmungskette reicht fr die Synthese von maximal 3mol
ATP Hingegen liefert die Oxidation von FADH2
(Succinat-Dehydrogenase des Citratzyklus, Fettsureabbau), dessen Reduktionsquivalente erst auf der

Stufe von Ubichinon in die Atmungskette gelangen,
nur 2mol ATP. Die maximale ATP-Ausbeute des
oxidativen Abbaus von Glucose zu CO2 und H2O
betrgt 38ATP (.Tab.15.1).
Wirkungsgrad
Energieausbeute
G0 .kJ=mol/
C6 H12 O6 C 6 O2 ! 6 CO2 C 6 H2 O
38 ADP C 38 Pi ! 38 ATP C 38 H2 O
2810
C1180
Wirkungsgrad
1180 kJ=mol
D 0;4 .40 %/
2810 kJ=mol
Wenn mit physiologischen Konzentrationen,

d.h. mit G-Werten, statt Standardbedingungen (G0; Konzentration 1mol/L) gerechnet
wird, ergibt sich ein Wirkungsgrad von 50%.
Die 38mol ATP sind aufgrund experimenteller
Befunde ein zu hoher Wert, ungefhr 30mol

ATP pro mol Glucose scheinen realistischer; der
entsprechende Wirkungsgrad ist 40%.

Die oxidative Phosphorylierung verwendet ausschlielich ADP als Substrat und kann nur ATP
synthetisieren Die unspezifische Nucleosiddiphosphat-Kinase phosphoryliert die anderen
Nucleosiddiphosphate (Ribo- und Desoxyriboformen) unter Verbrauch von ATP zu den entsprechenden Triphosphaten:
Diese Reaktionen weisen einen G0-Wert von

etwa Null auf, d.h. das Gleichgewicht bei Standardbedingungen liegt in der Mitte. Da jedoch
ATP in wesentlich hherer Konzentration als ADP
und die anderen Nucleosiddiphosphate vorliegt,
lassen sich die Triphosphate problemlos synthetisieren.
15.6
Regulation der mitochondrialen

ATP-Synthese
Ein Stoffwechselprozess, welcher der Zelle chemische Energie in Form von ATP liefert, erfllt seine
Funktion nur dann optimal, wenn sein Durchsatz
dem Bedarf der Zelle angepasst wird.
Die strikte Koppelung von Atmungskette und
ATP-Synthese zusammen mit dem strikten ATP/
ADP-Antiport bewirken eine bedarfsgerechte
Synthese von ATP Die strikte Stchiometrie von
ATP-Synthese und Oxidation von Coenzym-gebundenem Wasserstoff (3ATP pro NADH) weist
darauf hin, dass die beiden Vorgnge miteinander
gekoppelt sind. Die Koppelung ist gegenseitig: keine
ATP-Synthese ohne Oxidation, keine Oxidation
ohne ATP-Synthese. Die gekoppelten Reaktionen
knnen nur ablaufen, wenn jedes einzelne Substrat vorhanden ist: Reduktionsquivalente, O2, ADP
und Pi.
15
189
15.6 Regulation der mitochondrialen ATP-Synthese
.. Tab.15.1 Maximale ATP-Ausbeute des oxidativen Abbaus von Glucose zu CO2 und H2Oa
Substratketten-
Phosphorylierung
NADH-Oxidation
FADH2-Oxidation
Summe
2b1c
2b1c3d
2b1c3d
2b1c (GTP)
2b3c3d
2b1c2d
24
Glykolyse
Glucose2Pyruvat
(Cytosol)
Pyruvat-Oxidation
PyruvatAcetyl-
CoA+CO2
(Mitochondrien)
Citratzyklus
Acetylrest2 CO2
(Mitochondrien)
Total
38
Die Anzahl Mol ATP gebildet pro Mol oxidierter Glucose sind angegeben.
er Faktor2 ergibt sich aus der Tatsache, dass Glucose in 2Triosephosphate gespalten wird und ATP erst nach dieser
D
Spaltung gebildet wird.
Die zweite Zahl gibt an, wie viel Mal im betreffenden Stoffwechselweg ATP (GTP), NADH oder FADH2 gebildet werden.
Die dritte Zahl entspricht der Anzahl Mol ATP, die pro Mol NADH oder FADH2 maximal gebildet werden knnen.
Die Konzentration von ADP und Pi in

den Mitochondrien kann mit der Stoffwechsellage der Zellen stark schwanken, da in den
Mitochondrien ein einfacher Erhaltungssatz gilt:
[ATP]+[ADP]=konstant. Die Konstanz der Summe
rhrt daher, dass die Ausfuhr von ATP ins Cytosol,
wo es verbraucht wird, und die Einfuhr von ADP
aus dem Cytosol durch den ATP-ADP-Translokator der inneren Membran streng kontrolliert wird
. Das sekundr-aktive Antiport-System (Abschn.26.3) importiert ein ADP-Molekl fr jedes
exportierte ATP-Molekl. Zur Aufnahme von Pi
dient ein weiteres sekundr-aktives Antiport-System (.Abb.15.6). Ein hoher ATP-Verbrauch im
Cytosol lsst wegen des ATP/ADP-Antiports die
ADP-Konzentration in den Mitochondrien ansteigen. Umgekehrt fhrt ein geringer ATP-Verbrauch im Cytosol zu einer niedrigen ADP-Konzentration in den Mitochondrien. ADP-Mangel in
den Mitochondrien ist gleichzusetzen mit einem
Mangel an Akzeptor fr Pi. Ein Mangel an ADP
als Pi-Akzeptor verlangsamt die Phosphorylierung (Pi+ADPATP) und die damit gekoppelte
Atmungskette. Diese Regulierung der Zellatmung
durch den ATP-Verbrauch wird als Akzeptorkontrolle der Zellatmung bezeichnet.

Schwerarbeit
Die Zellatmung kann bei hohem ATP-Verbrauch, zum Beispiel bei schwerer aerober
Muskelarbeit, bis auf das Zehnfache des
Ruhewerts ansteigen. Entsprechend wird dann
auch zehnmal mehr O2 verbraucht und zehnmal mehr CO2 gebildet.
Die Akzeptorkontrolle der Zellatmung kann allerdings nur funktionieren, wenn auch der Nachschub an NADH und Metaboliten, deren Abbau
NADH liefert, adquat reguliert wird. Wie bereits
bei der Einfhrung in den Stoffwechsel (Kap.13)
erwhnt, wird die Geschwindigkeit von Stoffwechselketten bei den irreversiblen und damit nur in
einer Richtung ablaufenden Reaktionen gesteuert. Auf diese Weise werden auch die Glykolyse
und der Citratzyklus, die Zulieferer von NADH
und FADH2 fr die Atmungskette, reguliert
(.Abb.15.7).
190
Auen
1
z
3
4
.. Abb.15.6 Wichtige aktive Transportsysteme der inneren Mitochondrienmembran. Es handelt sich hier ausnahmslos
um sekundr-aktive Transportsysteme,
die entweder durch das elektrische oder
das chemische Potenzial, welche die
Atmungskette hervorbringt, angetrieben
werden
Translokator
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.. Abb.15.7 Allosterische Regulation von Glykolyse und Citratzyklus. Der Glykolyse vorgeschaltet ist die Mobilisierung des
Reservekohlenhydrats Glykogen durch die Glykogenphosphorylase (Abschn.16.2).
Reguliertes Enzym
Aktivator
Glykogenphosphorylase
AMP
ATP, Glucose, Hexose-P
Phosphofructokinase (PFK)
AMP, ADP, F-2,6-P2
ATP, Citrat
Pyruvatdehydrogenase-
Inhibitor
ATP, Acetyl-CoA
Komplex (PDH)
ATP, Acyl-CoA, NADH, Succinyl-CoA
Citrat-Synthase
Isocitrat-Dehydrogenase
AMP, ADP
Pyruvatcarboxylase
ATP, NADH
NADH, Succinyl-CoA
-Ketoglutarat-Dehydrogenase
Acetyl-CoA
191
15.6 Regulation der mitochondrialen ATP-Synthese
15
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Eine erhhte Konzentration von AMP widerspiegelt eine erhhte Konzentration von ADP:
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20
DieRegulation ist durchaus sinnvoll: bei hoher

Konzentration von ATP oder ATP-liefernden Metaboliten wird der Durchsatz der Glykolyse und des
Citratzyklus gedrosselt; bei tiefer Konzentration von
ADP und AMP werden diese katabolen Stoffwechselwege beschleunigt und liefern der Atmungskette
mehr NADH und FADH2.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517043-0
15.1 Organisation der Atmungskette
(FMN, FAD, FeS-Zentren, Ubichinon,
Cytochrome)
15.3 Chemiosmotischer Mechanismus
der oxidativen Phosphorylierung
15.4 Transport von Reduktionsquivalenten
vom Cytosol in die Mitochondrien
15.5 ATP-Bilanz des oxidativen Abbaus
von Glucose
15.6 Regulation der mitochondrialen
ATP-Synthese
193
Gluconeogenese, Glykogen,
Disaccharide
und Pentosephosphatweg
16.1
Gluconeogenese194
16.2
Abbau und Aufbau von Glykogen 197
16.3
Stoffwechsel der Disaccharide 204
16.4
Pentosephosphatweg206

16
194
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Kapitel 16 Gluconeogenese, Glykogen, Disaccharide und Pentosephosphatweg
Woher kommt die Glucose, welche der Zelle ber

Glykolyse, Citratzyklus und oxidative Phosphorylierung die Synthese von ATP ermglicht? Glucose
wird bei Mensch und Tier entweder mit der Nahrung in Form von Strke und Disacchariden zugefhrt oder durch Abbau des Reservekohlenhydrats
Glykogen erhalten. Sind diese Quellen erschpft,
wird Glucose aus Nichtkohlenhydrat-Vorlufern
synthetisiert (Gluconeogenese).
Der Pentosephosphatweg, ein alternativer Abbauweg fr Glucose, versorgt den Organismus mit
NADPH und Pentosen: Die Zelle bentigt NADPH
als Reduktionsmittel fr reduktive Synthesen (z.B.
von Fettsuren aus Acetyl-CoA) und Pentosen als
Bausteine von Nucleotiden und Nucleinsuren.
In NADP+ ist der Adenosinrest von NAD+ in der
2-Stellung phosphoryliert (.Abb.14.2). NADP+
wird wie NAD+ durch ein Hydridion (H) reversibel
zu NADPH reduziert.
16.1 Gluconeogenese
Die Neusynthese von Glucose und anderen Zuckern aus Nichtkohlenhydrat-Vorlufern macht
den Organismus unabhngig von zugefhrten
Kohlenhydraten Zucker und Zuckerderivate sind
Bausteine der bakteriellen Zellwand; bei Eukaryonten sind sie Bestandteile der Glykoproteine und Glykolipide der Zellmembran sowie der extrazellulren
Matrix, bei Pflanzen der Cellulosefasern. Bei Vertebraten versorgt Glucose das Gehirn mit Energie; die
Glucosekonzentration im Blut von 5mM (beim
Menschen) wird unabhngig von der Kohlenhydratzufuhr konstant gehalten.
Glucoseverbrauch
Das Gehirn eines erwachsenen Menschen
verbraucht etwa 140g Glucose pro Tag; Erythrozyten und Nebennierenmark bentigen
zustzliche 3040g pro Tag.
Leber, Niere und Darmmucosa besitzen die zur
Gluconeogenese notwendigen Enzyme. Wenn

keine Kohlenhydrate mit der Nahrung aufgenommen werden und die Glykogenreserve der Leber
erschpft ist, bilden diese Organe Glucose aus Aminosuren oder Lactat. Mensch und Tier synthetisieren keinerlei Kohlenhydrate aus Fettsuren. In
Pflanzen hingegen ist die Synthese von Kohlenhydrat aus Acetyl-CoA, d.h. aus Fettsuren, mglich
(Glyoxylatzyklus; Abschn.21.3).
Die Gluconeogenese entspricht einer Umkehrung der Glykolyse Die drei irreversiblen Schritte
der Glykolyse mssen allerdings aus energetischen

Grnden umgangen werden (.Abb.16.1).
1. PyruvatPhosphoenolpyruvat: Um Phosphoenolpyruvat (PEP, eine sehr energiereiche Verbindung) aus Pyruvat herzustellen, werden zwei
energiereiche Phosphatverbindungen bentigt.
2. Fructose-1,6-P2Fructose-6-P: Die irreversible
Phosphofructokinase-Reaktion wird umgangen.
Die Umwandlung von Fructose-1,6-P2 zu Fructose-6-P wird mglich durch Verzicht auf die
Synthese von ATP.
3. Glucose-6-PGlucose: Die Glucose-6-phosphatase liefert Glucose ins Blut. Das Enzym kommt
nur in Geweben vor, in welchen Gluconeogenese mglich ist.
16
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20
.. Abb.16.1 Gluconeogenese. Der Reaktionsweg entspricht weitgehend einer Umkehr der Glykolyse. Die drei irreversiblen glykolytischen Reaktionen mssen allerdings unter Energieverlust umgangen werden. Die drei Umgehungsreaktionen (blau) sind
exergonisch, weil andere Substrate und Produkte daran beteiligt sind. Sie werden daher auch durch andere Enzyme katalysiert.
Die Umgehungsreaktionen sind, wie die entsprechenden glykolytischen Reaktionen, irreversibel: eine wichtige Voraussetzung,
um einen Leerlaufzyklus zu vermeiden. Die Biotin-abhngige Pyruvatcarboxylase-Reaktion ist in Abschn.14.3 als anaplerotische Reaktion des Citratzyklus beschrieben. Die Malatdehydrogenase-Reaktion ist auch Teil des Citratzyklus. Zwei Isoenzyme
katalysieren die gleiche Reaktion im Cytosol und in den Mitochondrien. Die PEP-Carboxykinase ist das Schrittmacher- Enzym
der Gluconeogenese und wird durch glucocorticoide Hormone induziert
195
16.1Gluconeogenese
3 - Phosphoglyceroylphosphat
k
16
196
Bilanz der Gluconeogenese:
2 Pyruvat C 4 ATP C 2 GTP C 2 NADH
2
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C 2 HC C 6 H2 O
#
Glucose C 4 ADP C 2 GDP C 6 Pi C 2 NADC

G0 D 38 kJ=mol
Es werden 6 energiereiche Phosphatbindungen

verbraucht; bei der Glykolyse hingegen nur 2ATP
gewonnen. Der Organismus lsst sich die Synthese
von Glucose, dem Energietrger, etwas kosten.
allosterischer Aktivator der Phosphofructokinase

und allosterischer Inhibitor der Fructose-1,6-bisphosphatase schaltet Fructose-2,6-bisphosphat die
Stoffwechselkette auf Glykolyse (.Abb.16.2). Eine
regulatorische Kaskade, die durch die Glucosekonzentration im Blut ber die Hormone Insulin
und Glucagon (Abschn.28.7) kontrolliert wird,
fhrt bei hoher Glucosekonzentration zu vermehrter Bildung von Fructose-2,6-bisphosphat
und damit zu Glykolyse bei gehemmter Gluconeogenese.
Zur Neubildung von Glucose dienen glucogene Aminosuren und andere Metaboliten Alle
Stoffwechselzwischenprodukte, welche in Pyruvat

oder Oxalacetat umgewandelt werden knnen, taugen als Ausgangsstoffe der Gluconeogenese:
Glucogene (glucoplastische) Aminosuren,
Glycerol aus dem Abbau von Triacylglycerolen,
Lactat aus dem anaeroben Abbau von Glucose und Glykogen in Muskulatur (anaerobe
Glykolyse bei intensiver Muskelaktivitt) und
Erythrozyten (keine Mitochondrien, anaerobe
Glykolyse liefert ATP). Lactat gelangt auf dem
Blutweg in die Leber, die daraus Glucose synthetisiert, welche sie wiederum den peripheren
Geweben zur Verfgung stellt (Cori-Zyklus).
--
Definitionen
Hormone: Hormone sind Botensubstanzen
(Messengers), welche auf dem Blutweg von
der Hormondrse zum Zielgewebe gelangen
(Kap.28). Gewisse Hormonrezeptoren auf
der Zelloberflche sind mit einem G-Protein
(GTP-bindenden Protein) gekoppelt, das
seinerseits bei Binden des Hormons an den
Rezeptor die Adenylatcyclase aktiviert. Dieses
Enzym bildet cAMP (zyklisches, cyclic Adenosin-3,5-monophosphat) aus ATP (.Abb.16.4).
Als Second messenger bringt cAMP das chemische Signal zum entsprechenden Zielprotein
in der Zelle.
Glykolyse und Gluconeogenese werden gegensinnig reguliert Die drei Umgehungsreaktionen
der Gluconeogenese knnten in Kombination

mit den jeweiligen glykolytischen Reaktionen
zu ATP-verbrauchenden Leerlaufzyklen fhren.
Ein solcher Futile cycle, der nur Wrme produzieren wrde, knnte entstehen, wenn z.B. die
Reaktionen der Phosphofructokinase und Fructose-1,6-bisphosphatase gleichzeitig ablaufen
wrden (.Abb.16.1). Gegenlufige Regulation
der beteiligten Enzyme, welche den Stoffwechsel
entweder auf Glykolyse oder auf Gluconeogenese
schaltet, verhindert den Leerlaufzyklus (Abschn.13.2). Die wichtigste Rolle beim gegensinnigen Ein- und Ausschalten von Phosphofructokinase und Fructose-1,6-bisphosphatasen spielt
Fructose-2,6-bisphosphat, das in geringen Mengen aus Fructose-6-phosphat gebildet wird: Als

Hormonal gesteuerte Enzyminduktion verstrkt
die Gluconeogenese Bei Kohlenhydratmangel
wird vermehrt das Hormon Glucagon sezerniert,
das Enzyme der Gluconeogenese induziert. Ebenso

induzieren die glucocorticoiden Hormone, die
bei Stressbedingungen von der Nebennierenrinde
vermehrt sezerniert werden, diese Enzyme, insbesondere die PEP-Carboxykinase (.Abb.16.1). Die
Glucocorticoide bewirken eine lnger dauernde
Umstellung des Kohlenhydratstoffwechsels auf
Gluconeogenese aus Aminosuren, indem sie auch
16
197
16.2 Abbau und Aufbau von Glykogen
.. Abb.16.2 Gegensinnige Regulation von Glykolyse und Gluconeogenese durch Fructose-2,6-bisphosphat. Die Konzentration
der Glucose im Blut ist die Regelgre. Die Phosphofructokinase (PFK) und die Fructose-1,6-bisphosphatase (FBP) werden ber
folgende Kaskade reguliert:
Regelgre
Glucosekonzentration
Glucosekonzentration
hoch
niedrig
Hormone
Insulin
Insulin
Glucagon
Glucagon
Second messenger
cAMP
cAMP
Fru-6-P-Kinase
Fru-2,6-P2-Phosphatase
Dritter messenger
Fru-2,6-P2
Enzyme
PFK
Fru-2,6-P2
PFK nicht mehr
FBP
FBP nicht mehr
Stoffwechselweg
Glykolyse
Glykolyse
Gluconeogenese
Gluconeogenese
Trivial: Aufhebung einer Aktivierung entspricht einer Hemmung und Aufhebung einer Hemmung einer Aktivierung
den Proteinabbau stimulieren und Enzyme fr den

Abbau von Aminosuren induzieren.
16.2
Abbau und Aufbau

von Glykogen
Die am raschesten verfgbare Quelle fr Glucose

ist deren Speicherform, das Glykogen Das ver-
zweigte, wasserunlsliche, aber viel Wasser bindende Glucosehomopolymer bildet zusammen mit
den Enzymen fr seinen Aufbau und Abbau elektronenoptisch erfassbare Partikel (520 103kDa) im
Cytosol, die Glykogengranula. Glykogen wird
nach reichlicher Kohlenhydratzufuhr in der Leber
und Muskulatur synthetisiert und bei Mangel an
Glucose wieder abgebaut. Der Glykogengehalt der
Gewebe hngt daher vom Ernhrungszustand ab.
Glykogengehalt (erwachsener Mensch)

Leber
maximal 10% des

Organgewichts
150g
Muskel
maximal 1% des
Organgewichts
250g
_____
Total
400g
400g 17,5kJ/g=6900kJ=1640kcal
Das Glykogen deckt den Energiebedarf fr

2/3Tag (Tagesbedarf 10000kJ=2400kcal).
Der maximale Glykogengehalt (400g) ist 13-mal hher als der Glucosegehalt des Organismus (30g).
Warum wird Glykogen, dessen Synthese chemische
Energie kostet, statt Glucose gespeichert? Der osmotische Druck lsst die Speicherung von Glucose
in hheren Konzentrationen nicht zu; das polymere
Glykogen ist hingegen osmotisch nur wenig wirksam (niedrige Teilchenkonzentration!).
Glykogen hat die gleiche Struktur wie Strke,
das Reservekohlenhydrat der Pflanzen Glykogen
ist nur etwas strker verzweigt. Die Glucosereste sind

ber -1,4-Bindungen miteinander verbunden, die
198
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2
Verzweigungen kommen durch -1,6-Bindungen

bei etwa jedem 10.Glucoserest zustande. Das einzige C1-Ende ist glykosidisch an einen Tyrosinrest
des Proteins Glykogenin gebunden. Glykogenin als
autokatalytisch wirksame Glucosyltransferase phosphoryliert sich selbst und bildet das Zentrum jedes
Glykogenmolekls. Der Glykogeningehalt einer Zelle
bestimmt deren Gehalt an Glykogenmoleklen.
Glykogen wird phosphorolytisch abgebaut
Die Phosphorylase verkrzt die freien Enden eines

Glykogenmolekls, bis vor einer -1,6-Verzweigung nur noch drei -1,4-verknpfte Glucosereste
verbleiben und das Enzym aus sterischen Grnden
nicht mehr an die -1,4-Bindungen herankommen
kann. Die Transferase-Aktivitt des Debranching
enzyme
behebt die sterische Hemmung, indem
sie die drei -1,4-verbundenen Glucosereste auf
einen anderen Zweig des Glykogenmolekls verpflanzt. Eine zweite aktive Stelle des Debranching
enzyme spaltet den zurckbleibenden -1,6-gebundenen Glucoserest hydrolytisch unter Bildung von
freier Glucose ab. Damit ist die -1,6-Verzweigung
eliminiert und der phosphorolytische Abbau kann
fortgesetzt werden. Die Gleichung der Gesamtreaktion ist
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Die bertragung endstndiger Glucosereste auf

anorganisches Phosphat (statt auf Wasser wie bei
Hydrolyse) produziert Glucose-1-phosphat; ohne
Energieaufwand entsteht ein phosphorylierter Zucker, welcher die Zelle nicht verlassen kann.
Glykogen C nPi C mH2 O

#
n Glucose-1-P . 90 %/ C m Glucose . 10 %/:
199
16
Nur in Leber und Nieren kommt Glykogen zusammen mit Glucose-6-phosphatase vor Nur diese
Organe knnen aus Glykogen stammende Glucose

ins Blut abgeben. Die Muskelzellen hingegen verwenden ihre Glykogenreserve ausschlielich zur
Gewinnung von ATP. Die Glucose im Blut stammt
daher entweder aus dem Darm nach Kohlenhydratzufuhr oder aus der Leber (Glykogen oder Gluconeogenese).
Die Synthese von Glykogen entspricht nicht
einer Umkehrung des Abbaus Die Konzentration
Die freigesetzte Glucose wird ins Blut abgegeben

oder zu Glucose-6-phosphat phosphoryliert. Glucose-1-phosphat wird zu Glucose-6-phosphat isomerisiert, das entweder der Glykolyse zugefhrt oder
nach Dephosphorylierung ins Blut abgegeben wird:
Glykogen
Glucose-1-P
Phosphoglucomutase
Glucose-6phosphatase
Glucose-6-P
Glucose
H2O
Muskel
Glykolyse
Pi
Leber
Niere
Blut
von anorganischem Phosphat (12mM) ist im Vergleich zur Konzentration von Glucose-1-phosphat
zu hoch fr eine effiziente Rckreaktion ([Pi]/[Glucose-1-P] 100!). Die Glykogensynthese geht aus
von UDP-aktivierter Glucose, zu deren Synthese die
Zelle zwei energiereiche Phosphatbindungen investiert. Die Glykogensynthase koppelt die aktivierten
Glucosereste an das freie C4-Ende einer vorbestehenden -1,4-verknpften Polyglucosidkette:
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Die Verzweigungen werden durch das Branching

enzyme gebildet. Dieses Gegenstck zum Debranching enzyme versetzt -1,4-verknpfte Oligoglucoside von 67 Glucoseresten in eine zentralere
Stellung unter Bildung einer -1,6-Verzweigung,
worauf die Glykogensynthase den neuen Zweig
verlngert.
16
201
Die zahlreichen Enden der verzweigten Reservekohlenhydrate erlauben sowohl eine raschere Synthese
des Polymers als auch eine raschere Mobilisierung
der Glucose.
Gegensinnige Regulation des Aufbaus und
Abbaus von Glykogen verhindert einen Leerlaufzyklus Es sind hier die gleichen Mechanismen zur
Vermeidung eines Leerlaufzyklus wirksam wie bei

der Gluconeogenese und Glykolyse: Das Schrittmacherenzym der einen Stoffwechselrichtung wird
aktiviert und dasjenige der gegenlufigen Richtung
gehemmt. Die Glykogenphosphorylase und Glykogensynthase werden sowohl allosterisch als auch
hormonal reguliert (.Abb.16.3). Bei Brennstoffmangel, d.h. bei niedriger Konzentration von Glucose, Glucose-6-phosphat sowie ATP und erhhter Konzentration von AMP, wird der Abbau von
Glykogen stimuliert und dessen Aufbau gehemmt.
Bei Brennstoffberschuss, d.h. hohen Konzentrationen von Glucose-6-phosphat und ATP, wird
Glykogen synthetisiert und dessen Abbau gehemmt.
Die hormonale Regulation im Muskel wird
durch Muskelttigkeit ausgelst, welche die Freisetzung von Adrenalin aus dem Nebennierenmark
(Abschn.28.3) stimuliert. ber einen G-Pro-
tein-gekoppelten (coupled) Rezeptor (GPCR), die

Adenylatcyclase und eine Phosphorylierungskaskade wird die Glykogenolyse aktiviert und die
Glykogensynthese gehemmt (.Abb.16.4). In der

Leber wird die gleiche Signalkaskade durch das
Peptidhormon Glucagon, dem Gegenspieler von
Insulin, ausgelst. Absinken der Glucosekonzentration im Blut lst die Sekretion von Glucagon durch
die -Zellen der Langerhans-Inseln im Pankreas aus
(Abschn.28.7) :
Muskelaktivitt
Adrenalin Glykogenolyse
im Muskel
Versorgung
der Muskelfasern
mit Glucose
Blutglucose
Glucagon Glykogenolyse
in Leber
Abgabe von
Glucose ins Blut
Der Kaskadenmechanismus verstrkt das Signal Falls ein Signalmolekl ein Enzym aktiviert,
wird die Konzentration des Produkts der enzymatischen Reaktion hher sein als die Konzentration
des Signalmolekls, d.h. jede derartige Stufe der
Signalweitergabe verstrkt das Signal. Im Beispiel
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.. Abb.16.3 Regulation von Glykogensynthese und -abbau. Die allosterischen Aktivatoren und Inhibitoren sind alles Verbindungen, deren Konzentrationen die Versorgung der Zelle mit Glucose und allgemein mit chemischer Energie anzeigen.
Die Hemmung der Glykogenphosphorylase durch Hexosephosphate macht sich auch bemerkbar bei der Galactosmie und
der hereditren Fructoseintoleranz (Abschn.16.3), die beide mit hohen Konzentrationen eines Hexosephosphats (Galactose-1-phosphat bzw. Fructose-1-phosphat) einhergehen
der Glykogenolyse (.Abb.16.4) ist die Konzentration von Adrenalin 1010M, diejenige von Glucose-1-phosphat 104M: Die Kaskade verstrkt das
chemische Signal 106-mal!
UDP-Glucuronsure oxidiert werden, die an einer

Reihe von Reaktionen beteiligt ist:
Glykogenspeicherkrankheiten fhren zu
Glucosemangel Die Erkenntnis, dass der Auf-
und Abbau von Glykogen ber verschiedene Wege

laufen, ergab sich aus der Untersuchung von Patienten, die Glykogen wohl synthetisieren, aber
nicht abbauen konnten. Hereditre Defekte eines
der Glykogenolyse-Enzyme fhren zu einer berladung von Leber, Niere und Muskel mit Glykogen, erniedrigter Konzentration von Glucose im
Blut (Hypoglykmie) oder ungengendem Glucosenachschub in der Muskulatur. Diese seltenen
Krankheiten sind vielfltig; es kann ihnen ein
Mangel an Glykogenphosphorylase in Leber oder
Muskulatur, aber auch ein Defekt des Debranching
enzyme oder der Glucose-6-phosphatase zugrunde
liegen.
UDP-Glucose wird nicht nur zur Synthese von

Glykogen verwendet UDP-Glucose kann zu
ber diese aktivierte Form werden gut wasserlsliche Glucuronatreste in Heteroglykane

eingebaut. Galacturonat wird auf dieselbe
Weise aktiviert.
UDP-Glucuronat dient zur Konjugation
schlecht wasserlslicher Verbindungen
16
203
cyclase
in
.. Abb.16.4 Regulation der Glykogenolyse und der Glykogensynthese durch Hormone. Die Muskel- und Leberzellen besitzen
spezifische Hormonrezeptoren in der Zellmembran, die Adrenalin (aus Nebennierenmark) bzw. Glucagon (aus Pankreasinseln)
binden. Das Binden des Hormons an den Rezeptor wird ber eine Konformationsnderung an ein G-Protein (GTP-bindendes
Protein; Abschn.27.2) weitergeleitet, welches die Adenylatcyclase aktiviert, die ihrerseits aus ATP zyklisches (cyclic) AMP
(cAMP) produziert. cAMP steuert als intrazellulrer bertrger des Hormonsignals (Second messenger) gewisse Stoffwechselvorgnge. Im Fall des Glykogenstoffwechsels aktiviert cAMP allosterisch die Proteinkinase A (PK-A), welche durch Vermittlung der
Phosphorylase-Kinase die Phosphorylase aktiviert und die Glykogen-Synthase direkt inaktiviert. Die beiden Zielenzyme werden
an bestimmten Serin-, Threonin- oder Tyrosinresten phosphoryliert
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(Bilirubin, Steroidhormone, gewisse Medikamente) mit Glucuronat, um diese in besser

wasserlsliche und damit harnfhige Derivate
berzufhren (Glucuronidierung, eine der
Entgiftungsreaktionen der Leber; Abschn.31.2).
Die meisten Tiere knnen Ascorbinsure aus
UDP-Glucuronsure synthetisieren. Beim
Menschen fehlen die entsprechenden Enzyme,
Ascorbinsure ist daher ein essenzieller Nahrungsbestandteil (Vitamin C).
16.3
Stoffwechsel der Disaccharide
Die Synthese der Lactose geht von UDP-Glucose

aus, die zu UDP-Galactose isomerisiert:
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Bei dieser Reaktion wird einzig die Stellung der OHGruppe an C4 gewechselt. Die Reaktion macht den
Organismus unabhngig von zugefhrter Galactose.
UDP-Galactose dient zum Einbau von Galactose in
Glykolipide und Glykoproteine sowie zur Synthese
von Lactose:
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20
-Galactosyl-1,4-glucosid
Die Lactosesynthase kommt nur in der laktierenden

Milchdrse vor.
Lactose und Saccharose sind wichtige Bestandteile der menschlichen Nahrung Das
quantitativ wichtigste Kohlenhydrat in der menschlichen Nahrung, die Strke, ist ein Glucosepolymer. Mit der Lactose (-Galactosyl-1,4-glucosid,
Milchzucker), die bei Sugern am Anfang des Lebens das einzige Kohlenhydrat in der Nahrung ist,
und der Saccharose (-Glucosyl-1,2--fructosid,
Rben- bzw. Rohrzucker; Synthese in Pflanzen,
Abschn.21.3), die als Sstoff dient und in Industrielndern bis zu 15% des Kohlenhydrats in
der Nahrung ausmacht, werden neben Glucose
zwei weitere Zucker, Galactose und Fructose, dem
Stoffwechsel zugefhrt.
-Glucosido-1,2--fructosid
Die Lactose wird im Dnndarm zu den Monosacchariden hydrolysiert. Die freigesetzte Galactose
wird in der Leber in den Stoffwechsel eingeschleust
(.Abb.16.5). Zwei hereditre Stoffwechseldefekte betreffen den Abbau von Lactose:
Die hufige Lactoseintoleranz ist harmlos.
Bei milchungewohnten Bevlkerungsgruppen ist
es normal, dass Erwachsene Milchzucker nicht
verwerten knnen: Im Brstensaum des Dnndarmepithels fehlt die Lactase (-Galactosidase).
Die Darmflora baut die nicht resorbierte Lactose
zu Lactat und anderen niedermolekularen Verbindungen ab, die zu Durchfall, Blhungen und
Bauchschmerzen fhren. Lactoseintolerante Menschen entwickeln einen Widerwillen gegen Milch
und Milchprodukte. Bei der Mehrheit der Erdbevlkerung (75%) verschwindet ein Groteil der
Lactaseaktivitt im Jugendlichenalter; sie bleibt nur
erhalten bei Bevlkerungsgruppen, die Milchnahrung gewohnt sind. Die persistierende Expression
des Lactase-Gens ist auf eine Mutation in der regulatorischen DNA, welche das Lactase-Gen epigenetisch kontrolliert, zurckzufhren.
Die Galactosmie ist eine viel seltenere, jedoch
schwerwiegende Strung des Galactosestoffwechsels. Die autosomal-rezessiv vererbte Krankheit
beruht auf einem Mangel an Uridyltransferase,
dem Enzym, welches Galactose dem glykolytischen Abbauweg zufhrt (.Abb.16.5). Galacto-
205
16.3 Stoffwechsel der Disaccharide
16
.. Abb.16.5 Einschleusung von Galactose in den Stoffwechsel. Galactose stammt zum allergrten Teil aus der Lactose in
Milch und Milchprodukten. Die Lactase im Darm hydrolysiert die Lactose. Beim Eintritt in die Zellen wird die Galactose phosphoryliert. Die Epimerisierung zu Glucose (Wechsel der Stellung der OH-Gruppe an C4) erfolgt auf der Stufe der UDP-Formen
der beiden Zucker durch die UDP-Galactose-4-Epimerase, das Enzym, welches auch an der Synthese von Lactose beteiligt ist.
Die Uridyltransferase tauscht den Glucose-1-P-Rest gegen Galactose-1-P aus. Ein Defekt dieses Enzyms verursacht die Galactosmie; Mangel an Lactase im Darm fhrt zur Lactoseintoleranz
se-1-phosphat staut sich an und hemmt die Glykogenphosphorylase (.Abb.16.3). Die Hypoglykmie
uert sich bereits in den ersten Lebenstagen: Die
Kinder sind trinkunlustig, erbrechen, nehmen nicht
an Gewicht zu und werden, falls nicht behandelt,
wegen des Glucosemangels in einer kritischen
Phase der Gehirnentwicklung schwachsinnig. Die
klinisch-chemischen Befunde sind: Hypoglykmie,

Galactosmie (zu hohe Konzentration von Galactose im Blut), Galactosurie (Galactoseausscheidung im Urin) und Fehlen der Uridyltransferase.
Frherkennung der Krankheit ist uerst wichtig:
Lactosefreie Dit verhindert die Fehlentwicklung
des Gehirns und andere Folgen; die Dit ist lebens-
206
12
lang beizubehalten. Testen auf Galactosmie ist Teil

des routinemigen Neugeborenen-Screenings.
Die Saccharose wird im Darm hydrolytisch zu
Glucose und Fructose gespalten. Eine spezifische
Fructokinase phosphoryliert in der Leber Fructose zu Fructose-1-phosphat, welches dort durch
die ebenfalls spezifische Fructose-1-phosphat-Aldolase in Dihydroxyacetonphosphat und Glycerinaldehyd gespalten wird. Die Triosekinase
phosphoryliert Glycerinaldehyd zu Glycerinaldehyd-3-phosphat und schleust ihn damit in den
glykolytischen Abbauweg ein.
Bei der hereditren Fructoseintoleranz fehlt
die Fructose-1-phosphat-Aldolase. Das nicht abgebaute Fructose-1-phosphat hemmt allosterisch die
Glykogenphosphorylase (.Abb.16.3) sowie die
Fructose-1,6-bisphosphatase (.Abb.16.1). Hypoglykmie mit belkeit, Erbrechen, Schwitzen und
Schock ist die Folge; die Trger dieser Stoffwechselvariante meiden Frchte und Sigkeiten.
Typischerweise betreffen die hufigsten erblichen Strungen des Stoffwechsels (Glykogenspeicherkrankheiten, Fructoseintoleranz, Galactosmie)
dessen Zulieferwege und nicht Glykolyse, Citratzyklus oder oxidative Phosphorylierung. Strungen
dieser zentralen Stoffwechselwege sind mit dem Leben von Keimzellen oder frhen Embryonalstadien
nicht vereinbar.
13
16.4 Pentosephosphatweg
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Fr den Abbau von Glucose ist der Pentosephosphatweg unbedeutend (10% des gesamten
Glucoseabbaus), er ist jedoch wichtig zur Versorgung der Zellen mit NADPH und Ribose. Wie die
Glykolyse luft auch der Pentosephosphatweg im
Cytosol ab und beginnt mit Glucose-6-phosphat.
Der oxidative Teil des Pentosephosphatwegs
liefert NADPH und Pentosen Zwei Oxidations-
schritte und eine Decarboxylierung ergeben pro

mol Glucose 2mol NADPH und 1mol Pentose (Ribulose-5-phosphat).
NADPH dient als Reduktionsmittel bei der Synthese
von Fettsuren, Cholesterol, Desoxynucleosiddiphosphaten etc. und hlt das zellulre Glutathion
in reduzierter Form (Redoxhomostase; Abschn.31.3). Pentosen, insbesondere Ribose und
Desoxyribose, sind notwendig zur Synthese von
Nucleotiden, Nucleinsuren und gewissen Coenzymen (NAD+, NADP+, FAD, CoA). Eine Isomerase
katalysiert die Umwandlung der Ketose Ribulose-5-P in Ribose-5-P, die entsprechende Aldose.
207
16.4Pentosephosphatweg
Hereditrer G-6-P-DH-Mangel
Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase-Mangel ist die hufigste monogene Erbkrankheit
und die hufigste Enzymopathie berhaupt
(X-chromosomal-rezessiv vererbt). Die ungengende Produktion von NADPH fhrt in den
Erythrozyten zu einem Mangel an reduziertem Glutathion (Abschn.31.3). Oxidative
Schden von Proteinen und Zellmembranen
fhren zu einer hmolytischen Anmie.
Der nichtoxidative Teil dient der Rckfhrung

berschssiger Pentosen in den glykolytischen
Abbauweg:
Dieser Teil des Pentosephosphatwegs ist im Unterschied zum oxidativen Teil vollstndig reversibel.
Der Flux der Reaktanten passt sich daher den Stoffwechselbedrfnissen der Zelle an:
Bedarf der Zelle an NADPH
und Pentosen
Pentosephosphatweg
luft
im molaren Verhltnis>2 : 1
vollstndig ab
Bedarf an NADPH
und Pentosen
Nur oxidativer Teil luft ab
im molaren Verhltnis
von 2:1
Bedarf der Zelle an NADPH
und Pentosen
Nichtoxidativer Teil
luft
im molaren Verhltnis<2:1
rckwrts ab
Links auf
Springer Website:
027-6-1517044-0
16.1 Gluconeogenese
16.3 Stoffwechsel der Disaccharide
16.4 Pentosephosphatweg
16
209
Stoffwechsel der Fettsuren

und Lipide
17.1
-Oxidation von Fettsuren 210
17.2
Fettsuresynthese213
17.3
Ketonkrper217
17.4
Synthese und Abbau der Triacylglycerole 218
17.5
Stoffwechsel der Phospholipide 220
17.6
Stoffwechsel von Cholesterol 220

17
210
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Kapitel 17 Stoffwechsel der Fettsuren und Lipide
Der grte Teil der Fettsuren findet sich als Baustein der Triacylglycerole im Reservefett und der
polaren Lipide in den Membranen. Freie Fettsuren sind eine Transportform chemischer Energie;
das Fettgewebe versorgt damit die Muskulatur und
andere Organe. Die in Organismen vorkommenden
Fettsuren sind unverzweigt und besitzen meist eine
gerade Anzahl von C-Atomen, besonders hufig
sind C16- und C18-Fettsuren. Etwa die Hlfte der
Fettsuren in einem tierischen Organismus ist ungesttigt mit 1 bis 3Doppelbindungen.
Die Fettsuren werden in der Mitochondrienmatrix durch -Oxidation zu Acetyl-CoA abgebaut.
Zunchst wird die Fettsure mit CoA aktiviert, worauf mit FAD und NAD+ als Elektronenakzeptoren
das -Ketoderivat der Fettsure gebildet wird, das
darauf thiolytisch durch CoA-SH zu Acetyl-CoA
und dem um zwei C-Atome verkrzten Acyl-CoA
gespalten wird. Jeder weitere Abbauzyklus spaltet erneut Acetyl-CoA ab. Die Fettsuresynthese
luft im Cytosol ab, sie verwendet Acetyl-CoA als
Baustein und entspricht formal einer Umkehr der
-Oxidation: Ausgehend von Acetyl-CoA verlngert jeder Synthesezyklus die Kette um weitere zwei
C-Atome. Als Reduktionsmittel dient, wie bei den
meisten reduktiven Biosynthesen, NADPH. Fettsuren werden v.a. in der Leber aber auch in anderen Organen wie Fettgewebe und der laktierenden
Milchdrse synthetisiert.
Die Ketonkrper (Hauptvertreter -Hydroxybutyrat) werden in der Leber vermehrt gebildet,
wenn im Hungerzustand durch verstrkten Fettsureabbau mehr Acetyl-CoA anfllt, als der Citratzyklus aufnehmen kann. Die wasserlslichen Ketonkrper gelangen von der Leber zu peripheren Organen,
die sie zur Energiegewinnung abbauen.
Die Lipide sind nach dem Kriterium ihrer Lslichkeit in organischen Lsungsmitteln definiert,
sie sind daher nicht nur strukturell, sondern auch
funktionell sehr vielfltig: Triacylglycerole dienen
als Hauptreserve chemischer Energie, polare Lipide
und Cholesterol sind Membranbestandteile, und
aus Cholesterol entstehen wichtige, biologisch aktive Stoffe wie die Steroidhormone, das VitaminD
und die Gallensuren. Die Stoffwechselwege der
verschiedenen Lipidgruppen haben wenig gemeinsam.
17.1
-Oxidation von Fettsuren
Die hormonregulierte Lipase mobilisiert die quantitativ bedeutendste Energiereserve des tierischen Organismus: Sie hydrolysiert die Triacylglycerole in den
Fettzellen zu Glycerol und Fettsuren; ihre Aktivitt
erhht die Fettsurekonzentration im Blut. Die Lipase
wird durch Adrenalin, Noradrenalin und Glucagon
(Hungersignale der Zelle) ber cAMP aktiviert und
durch Insulin (berfluss-Signal) gehemmt. Die Fettsuren sind schlecht wasserlslich und werden daher
im Blut als Komplexe mit Serumalbumin transportiert (Abschn.34.4). Viele Gewebe resorbieren
Fettsuren aus dem Blut zur Energiegewinnung; eine
Ausnahme sind Gehirn und Erythrozyten, die hierzu
ausschlielich Glucose verwenden. Besonders intensiv ist der Abbau der Fettsuren in der Leber, die aus
Fettsuren Ketonkrper produziert und ans Blut abgibt zur Energieversorgung peripherer Gewebe.
Energiespeicher in Pflanzen
Auch Pflanzen und Algen speichern Kohlenhydratpolymere und Triacylglycerole als Energiereserve. Besonders reichlich sind die Reserven
in den Teilen, welche der Verbreitung der
Pflanzen dienen: Samen enthalten Strke (Getreidekrner, allgemein bei Grsern) oder Fette
(Sonnenblumenkerne), Wurzelknollen enthalten Strke als Energiereserve und Proteine als
Lieferanten von Aminosuren (Kartoffeln).
Vor dem Abbau werden die Fettsuren aktiviert und in die Mitochondrien verschoben:
211
17.1 -Oxidation von Fettsuren
Acyl-CoA-Synthetasen aktivieren die Fettsuren
Die Acyl-CoA-Synthetasen bilden eine kleine Familie

von drei an das ER und die uere Mitochondrienmembran gebundenen Enzymen, die Fettsuren verschiedener Lnge als Substrate akzeptieren. Wie bei
der Aktivierung der Aminosuren vor dem Beladen
der tRNA ist die Bildung von Acyl-AMP (energiereiches Sureanhydrid mit hohem Acylgruppen-bertragungspotenzial) gekoppelt mit der Hydrolyse von
PPi durch die ubiquitre Pyrophosphatase: Es werden
2 energiereiche Phosphatbindungen gespalten. Der
Acylrest von Acyl-AMP wird auf die SH-Gruppe von
CoA bertragen. Die Acyl-CoA-Synthetasen katalysieren beide Teilreaktionen:
17
Acyl-CoA, ein Thioester, ist eine energiereiche Verbindung mit einem hohen Acylgruppenbertragungspotenzial (.Tab.14.1). Analog zur Bezeichnung von Acetyl-CoA als aktivierte Essigsure, wird
Acyl-CoA als aktivierte Fettsure bezeichnet. AcylCoA kann die innere Mitochondrienmembran nicht
passieren.
Fr den Transport in die Mitochondrien wird

der Fettsurerest auf Carnitin bertragen:
Der Acylcarnitin-Carnitin-Carrier bugsiert Acyl

carnitin durch die Membran, worauf durch erneute
Umesterung wieder Acyl-CoA entsteht. Das freie
Carnitin gelangt mit demselben Carrier zurck ins
Cytosol:
-Oxidation baut die aktivierte Fettsure zu Acetyl-CoA ab Eine Oxidation an C (daher -Oxi-
dation) leitet die Abspaltung von Acetyl-CoA

ein. Geradzahlige Fettsuren werden vollstndig
zu Acetyl-CoA abgebaut durch Wiederholung einer
Folge von 4Reaktionen: Erste Oxidation, Hydratation, zweite Oxidation und Thiolyse durch CoA
(.Abb.17.1). Die Reaktionsgleichung fr die erste
Abbaurunde ist
Acyl.Cn /-CoA C FAD C NADC

CH2 O C CoA
#
Acyl.Cn2 /-CoA C FADH2 C NADH

CHC C Acetyl-CoA
Die Abbauzyklen wiederholen sich, bis die Fettsure

vollstndig zu Acetyl-CoA abgebaut ist. Wie bei den
Acyl-CoA-Synthetasen existieren drei Stze von Enzymen der -Oxidation fr verschiedene Bereiche
der Kettenlnge.
212
Die Bilanzgleichung fr den vollstndigen Abbau von Palmitinsure (gesttigte C16-Sure) zu Ace
tyl-CoA ist:
1
2
Palmitat .C16 /CATPC8 CoAC7 FADC7 NADC
C 7 H2 OCH2 O .fr die Hydrolyse von PPi /
8 Acetyl-CoAC7 FADH2 C7 NADHC7 HC
C AMPC2 Pi
5
ATP-Bilanz
ATP-Bilanz des vollstndigen Abbaus von

Palmitinsure zu CO2 und H2O ber Citratzyklus
und oxidative Phosphorylierung (mol ATP pro
mol Palmitat):
8Acetyl-CoA liefern
7
8
9
10
11
12
13
14
17
18
19
20
- 2ATP
Total
129ATP
Die Palmitinsure liefert mehr ATP pro C-Atom

als Glucose:
15
16
Bei der Aktivierung der Fettsure

sind 2 energiereiche Phosphatbindungen verbraucht worden
(ATP+H2OAMP+2 Pi)
Palmitinsure
.. Abb.17.1 -Oxidation aktivierter gesttigter Fettsuren.
Die Fettsuren werden vom COO-Ende her abgebaut.
Die erste Oxidation, die Einfhrung einer Doppelbindung
zwischen C und C, erfolgt durch FAD, welches an Flavoprotein5 (FP5) gebunden ist, ein Komplex, der wie KomplexII
zwei Wasserstoffatome an CoQ der Atmungskette abgibt.
Bei der Wasseranlagerung kommt eine OH-Gruppe an C
zu liegen. Die zweite Oxidation entspricht der Oxidation
eines Alkohols durch NAD+. Die Thiolyse durch CoA liefert
Acetyl-CoA und einen Acylrest, der bereits durch CoA aktiviert
ist fr die nchste Abbaurunde
Glucose
129 ATP=16 C 8;1 ATP=C
38 ATP=6 C 6;3 ATP=C
Der Unterschied beruht darauf, dass Palmitinsure strker reduziert ist als Glucose.
213
17.2Fettsuresynthese
Der Wirkungsgrad bezogen auf synthetisiertes

ATP:
O2
Fettsureoxidation .Palmitinsure C16 ! CO2 ; H2 O/

G0 D 9773 kJ=mol
ATP-Synthese .129 mol ATP 31 kJ=mol/
17
Beim Abbau ungeradzahliger Fettsuren

bleibt am Ende Propionyl(C3)-CoA Ungerad-
zahlige Fettsuren sind allerdings selten; Propionyl-CoA entsteht aber auch beim Abbau gewisser
Aminosuren. Ein besonderer Stoffwechselweg
schleust Propionyl-CoA in den Citratzyklus ein:
G0 D C3934 kJ=mol

Energieausbeute
3934
100 D 40 %
9773
Unter physiologischen Bedingungen ist die

Ausbeute hher (60%).
Der hufigste genetische Defekt in der -Oxidation

betrifft die Medium-chain acyl-CoA dehydrogenase
MCAD (spezifisch fr Acylreste mit 412C-Atomen). Der MCAD-Mangel uert sich beim Kleinkind durch eine ausgeprgte Neigung zu Hypoglykmie mit ungengender Bildung von Ketonkrpern
(Abschn.17.3) und kann zu pltzlichem Kindstod
fhren. MCAD-Mangel ist hufig (1:6000 in Europa
und Nordamerika; autosomal-rezessiver Erbgang;
Teil des Neugeborenen-Screenings). Therapie: Verhinderung einer katabolen Stoffwechsellage durch
hufige, regelmige Zufuhr von Kohlenhydrat.
Der Respiratorische Quotient (RQ), definiert als
mol CO2 produziert pro mol verbrauchtem O2, ist fr
Palmitinsure
Glucose
Glucogene Verbindungen
Propionsure kann ber die Reaktionen des
Citratzyklus der Gluconeogenese zugefhrt
werden. Verbindungen wie Propionsure, aus
denen im Stoffwechsel Glucose gebildet werden kann, werden als glucogene Verbindungen bezeichnet. Die glucogene Propionsure
ist wichtig bei der Celluloseverwertung der
Wiederkuer: Cellulose wird im Pansen durch
Bakterien zu Propionsure abgebaut (Propion
suregrung).
16 CO2
D 0;69
23 O2
6 CO2
D 1;00
6 O2
Experimentell gemessene Werte des RQ stimmen

mit diesen errechneten Werten gut berein. Der RQ
gibt Aufschluss, in welchem Verhltnis der Organismus Fette und Kohlenhydrate zur ATP-Synthese
verbrennt.
Bei ungesttigten Fettsuren ist der erste Abbauschritt vorweggenommen Ungefhr die Hlfte
der Fettsuren im tierischen Organismus ist ungesttigt. In der -Oxidation entfllt bei jeder Doppelbindung der erste Oxidationsschritt. Allerdings mssen
die Doppelbindungen in die jeweilige --Position
verschoben werden und von der cis-Konfiguration,
in der sie in allen natrlichen Fettsuren vorliegen,
zur trans-Konfiguration wechseln. Die 3-cis-2-transIsomerase katalysiert diese Umstellungen.
17.2 Fettsuresynthese
--
Die Synthese der Fettsuren entspricht in keiner

Weise einer Umkehr des Abbaus:
Die Synthese erfolgt im Cytosol.
Zwischenprodukte sind an Phosphopantethein, die prosthetische Gruppe eines
Proteins, gebunden.
214
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
--
Die beteiligten Enzyme sind (bei Sugern) Teil

eines multifunktionellen Enzymproteins, der
Fettsuresynthase.
Fettsuren werden durch sukzessives Ankoppeln von C2-Einheiten aufgebaut; der Donor
dieser C2-Fragmente ist eine C3-Verbindung.
Als Reduktionsmittel dient NADPH.
Die Fettsuresynthase liefert Fettsuren mit
maximal 16C-Atomen (Palmitinsure), zur
Verlngerung braucht es zustzliche Enzym
systeme.
Terminologie
Synthetase (X:Y Ligase; Enzymklasse6;
Abschn.4.1): verbindet zwei Substrate
unter ATP-Verbrauch (Beispiel: Acyl-CoA-Synthetase)
Synthase: Die Bezeichnung fr Enzyme aller
Klassen, bei welchen die Synthese im Vordergrund steht (Beispiel: Fettsuresynthase)
Carboxylierung von Acetyl-CoA zu Malonyl-CoA

leitet die Fettsuresynthese ein:
11
Die Fettsuresynthase ist eine groe molekulare

Maschine aus zwei identischen Polypeptidketten
mit je 2300Aminosureresten und 8 verschiedenen
Domnen. Sieben Domnen sind katalytisch aktiv und bearbeiten nacheinander das Substrat, das
von der achten Domne (Acyl carrier protein ACP)
durch kovalente Bindung an Ort gehalten wird. In
Bakterien liegen alle Domnen als einzelne Proteinmolekle vor.
Die zentrale SH-Gruppe des Phosphopantetheins, der prothetischen Gruppe der ACPDomne, bindet die Malonylreste kovalent und die
verlngerten -Ketoacylreste, an denen alle Syntheseschritte erfolgen. Das Phosphopantethein ist ber
eine Phosphoesterbindung an einen Serinrest der
ACP-Domne gebunden:
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Phosphopantethein hat dieselbe Struktur wie der

funktionelle Teil von CoA (.Abb.14.4). ACP entspricht damit einer makromolekularen Form von
CoA, welche an einem beweglichen, 2nm langen
Arm die zentrale SH-Gruppe trgt.
Zu Beginn der Synthese wird das Enzym mit
den Reaktanten geladen: Der Acetylrest von AcetylCoA wird durch die Acetyltransacylase auf die zentrale SH-Gruppe bertragen. Von dort bernimmt
ihn die Ketoacylsynthase (Condensing enzyme)
und bindet ihn an ihre periphere SH-Gruppe.
An die nun freie zentrale SH-Gruppe koppelt die
Malonyltransacylase einen Malonylrest aus Malo-
nyl-CoA. Die Fettsuresynthase ist damit bereit fr

den ersten Verlngerungszyklus (C2+C3C4+CO2;
.Abb.17.2) mit der Abfolge von Kondensation,
Reduktion, Wasserabspaltung und nochmaliger
Reduktion. Der lange Phosphopantethein-Arm der
ACP-Domne reicht dabei den Fettsurerest von einer Enzymdomne zur nchsten weiter. Wiederholtes Durchlaufen derselben Reaktionsfolge verlngert
den Acylrest weiter.
Warum liefert Malonyl-ACP und nicht Acetyl-ACP die C2-Einheiten zur Verlngerung? Die
bei Malonyl-ACP mgliche Decarboxylierung
macht die Kondensationsreaktion irreversibel, d.h.
215
17.2Fettsuresynthese
.. Abb.17.2 Synthese von

Fettsuren. Das Schema
beginnt mit der bereits beladenen Fettsuresynthase: Ein
Acetylrest an der peripheren
SH-Gruppe (der Ketoacyl-Synthase) und ein Malonylrest
an der zentralen SH-Gruppe
(des ACP). Die Polymerisierung
entspricht formal einer Umkehr
der -Oxidation. Nach der
Kondensation, die wegen der
Decarboxylierung irreversibel ist, wird die entstandene
-Ketosure zur -Hydroxysure reduziert. Darauf wird
H2O abgespalten unter Bildung
einer ,-Doppelbindung. Die
zweite Reduktion ergibt die
gesttigte Fettsure. Fr beide
Reduktionsschritte dient wie
bei den meisten Biosynthesen
NADPH als Reduktionsmittel. Zu Beginn eines neuen
Verlngerungszyklus laufen
die gleichen Vorgnge ab wie
beim ersten Aufladen der Fettsuresynthase: Der gesttigte
Acylrest wird von der zentralen
auf die periphere SH-Gruppe
bertragen, und die nun freie
zentrale SH-Gruppe wird mit
einem neuen Malonylrest
beladen. Das Enzym ist damit
fr eine neue Runde bereit. Zur
Synthese von Palmitinsure
(C16) luft der Zyklus 7-mal ab;
darauf setzt die Thioesterase-Domne aus Palmityl-ACP
hydrolytisch Palmitinsure frei
17
216
1
2
schiebt deren Gleichgewicht ganz auf die Seite des

Produkts.
Bilanzgleichung der Fettsuresynthese aus
Acetyl-CoA:
oxidative Decarboxylierung zu Pyruvat durch das

Malatenzym (Malic enzyme):
3
4
5
6
7
8
9
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11
12
13
14
ATP-Bedarf fr Fettsuresynthese
Es kostet 7ATP+14NAPDH
(143=42ATP-quivalente), d.h. total 49ATP,
um Palmitinsure (C16) aus 8Acetyl-CoA zu
synthetisieren. Beim Abbau der Palmitinsure
zu CO2 und H2O (Abschn.17.1) werden insgesamt 129ATP gewonnen. Der Organismus
49
100=38% der maxiinvestiert demnach 129
mal mglichen ATP-Ausbeute in das Anlegen
von Fettreserven!
Transportproblem: Die Fettsuresynthese luft im
Cytosol ab, das hierzu bentigte Acetyl-CoA entsteht hingegen in den Mitochondrien (aus Pyruvat
von der Glykolyse oder aus bestimmten Aminosuren) und kann die Mitochondrienmembran
nicht passieren. Lsung des Problems: In der ersten Reaktion des Citratzyklus, katalysiert durch die
Citratsynthase, reagiert Acetyl-CoA mit Oxalacetat
zu Citrat, das durch einen Antiport mit Malat in
das Cytosol bergefhrt wird. Hier gewinnt die
ATP-Citratlyase unter ATP-Verbrauch Acetyl-CoA
zurck:
Diese Reaktion liefert einen Teil des NADPH, welches fr die Fettsuresynthese bentigt wird; den
greren Teil liefert der Pentosephosphatweg. In
intensiv Fettsuren synthetisierenden Geweben finden sich sowohl die Enzyme des Pentosephosphatwegs als auch das Malatenzym.
Terminologie
Sure
Anion
HOOC-CHOH-COOH
pfelsure
Malic acid
Malat
Malate
HOOC-CH=CH-COOH
(cis)
Maleinsure
Maleic acid
Maleat
Maleate
HOOC-CH2-COOH
Malonsure
Malonic acid
Malonat
Malonate
Kettenverlngerung (>C16) und Einfhrung von

Doppelbindungen bentigen zustzliche Enzyme
auf der cytosolischen Seite der ER-Membran Die
Fettsuresynthase bildet nur gesttigte Fettsuren

mit 16 C-Atomen. Die Kohlenwasserstoffkette
wird unter Verwendung von Malonyl-CoA verlngert. Doppelbindungen werden durch die Desaturase eingefhrt:
15
16
17
18
19
20
Desaturase
ber diesen Weg kann Glucose, welche nicht zur

Energiegewinnung in den Mitochondrien abgebaut
wird, fr den Aufbau von Fettsuren und damit
zum Anlegen von Fettreserven verwendet werden.
Die NADH-abhngige Malatdehydrogenase reduziert das in der Citratlyase-Reaktion entstandene
Oxalacetat zu Malat, das durch Antiport mit Citrat
wieder in die Mitochondrien aufgenommen wird.
Ein weiterer Weg fr Malat im Cytosol ist dessen
Das Enzym enthlt FAD, Cytochrom b5 und Nichthm-Eisen und wird den mischfunktionellen Oxidasen zugezhlt: O2 oxidiert zwei Substrate, die
Fettsure und NADPH. Auf eine Hydroxylierung an
C9 folgt eine Wasserabspaltung unter Einfhrung
einer Doppelbindung zwischen C9 und C10. Suger
knnen nur eine C9-C10 (9)-Doppelbindung ein-
217
17.3Ketonkrper
17
fhren. Linolsure (18:2; C18, 2Doppelbindungen)

und Linolensure (18:3) sind daher essenzielle
Fettsuren, die mit der Nahrung zugefhrt werden
mssen. Arachidonsure (20:4) kann hingegen aus
Linolsure gebildet werden.
Der Nachschub an Malonyl-CoA reguliert die
Fettsuresynthese Fettsuren werden syntheti-
siert, wenn der Organismus ber einen berschuss

an Kohlenhydraten verfgt. Die Acetyl-CoA-Carboxylase, das erste Enzym in der Kette der Synthesereaktionen, wird allosterisch durch Citrat, dem
ersten Zwischenprodukt des Citratzyklus, aktiviert.
Citrat kann die Reaktion 25fach beschleunigen.
Eine hohe Citratkonzentration in der Zelle zeigt an,
dass die Zelle ausreichend mit chemischer Energie
versorgt ist. Palmitat hemmt das Enzym als Feedback inhibitor.
17.3 Ketonkrper
Im Hungerzustand und bei Diabetes mellitus (Abschn.34.3) steht den Zellen zu wenig Glucose zur
Verfgung. Unter diesen Bedingungen baut die
Leber Fettsuren zu Ketonkrpern (Acetoacetat,
-Hydroxybutyrat und Aceton) ab und liefert den
peripheren Organen Ketonkrper als Energietrger
anstelle von Glucose.
Die Ketonkrper werden in den Lebermitochondrien synthetisiert, sobald der Fettsure-
abbau mehr Acetyl-CoA liefert, als der Citratzyklus

aufnehmen kann:
Acetyl-CoA +
3-Hydroxy-3-methylglutaryl-CoA
Acetyl-CoA
Die Kondensation von zwei Moleklen Acetyl-CoA

zu Acetoacetyl-CoA, entspricht einer Umkehr des
Thiolyse-Schrittes beim oxidativen Abbau von
Fettsuren. Ein kleinerer Teil des Acetoacetyl-CoA
stammt aus unvollstndigem Abbau ketogener
Aminosuren (Abschn.18.3). Durch Kondensa-
tion mit einem dritten Molekl Acetyl-CoA entsteht

3-Hydoxy-3-methylglutaryl-CoA (ein Zwischenprodukt der Cholesterolbiosynthese; .Abb.17.5),
das durch die HMG-CoA-Lyase in Acetoacetat und
Acetyl-CoA gespalten wird. Aceton entsteht in geringer Menge durch spontane Decarboxylierung
218
1
2
3
4
von Acetoacetat. Die Reduktion von Acetoacetat

(Acetessigsure) zu -Hydroxybutyrat (-Hydroxybuttersure) dient der Rckgewinnung von NAD+.
Damit knnen durch -Oxidation fortwhrend
Ketonkrper ins Blut nachgeliefert werden. -Hydroxybutyrat und Acetoacetat sind im Gegensatz zu
den langkettigen Fettsuren wasserlslich und sind
normale Blutbestandteile.
Ernergietrger im Blut
Konzentration (Mensch):
6
7
9
10
12
13
14
15
16
17
18
19
20
5mM
Fettsuren
0,5mM
Ketonkrper
0,2mM
Die Konzentration von Ketonkrpern kann

im Hungerzustand und bei Diabetes mellitus
bis auf 10mM ansteigen. Eine berproduktion von Ketonkrpern, den Carbonsuren
-Hydroxybuttersure (pKa = 4,7) und Acetessigsure (pKa =3,6), fhrt zu einer metabolischen (durch den Stoffwechsel verursachten)
Acidose (bersuerung) des Organismus.
11
Glucose
Fr Skelett- und Herzmuskulatur sind Ketonkrper wichtige Energielieferanten auch unter normalen Bedingungen. Wenn die Versorgung mit
Glucose knapp wird, kann sogar das Gehirn nach
einer Angewhnungsphase, in der die notwendigen Enzyme synthetisiert werden, Ketonkrper zur
Gewinnung von ATP nutzen. Fettsuren kann das
Gehirn hingegen nicht verwenden, weil hierfr die
notwendigen Transportmechanismen fehlen (BlutHirn-Schranke).
Die peripheren Gewebe bauen Ketonkrper in
den Mitochondrien ber folgende Schritte ab:
Reoxidation von -Hydroxybutyrat zu Acetoacetat. Die periphere Zelle gewinnt dabei
NADH, welches der oxidativen Phosphorylierung zur ATP-Gewinnung zugefhrt wird.
Acetoacetat
3-Ketosure-CoA-
Acetoacetyl
Acetoacetyl-CoA wird durch Thiolyse mit CoA

zu 2Acetyl-CoA gespalten, die dem Citratzyklus zugefhrt werden; Succinyl-CoA und Succinat sind Zwischenprodukte des Citratzyklus.
17.4
Synthese und Abbau

der Triacylglycerole
Triacylglycerole (Triacylglycerole, Triglyceride,

Neutralfette) machen bei Mensch und Tier den
Hauptteil der Lipide aus und sind die quantitativ
wichtigste Energiereserve des Krpers.
Triacylglycerole entstehen aus Glycerol-3phosphat und Acyl-CoA Glycerol-3-phosphat
stammt aus der Glykolyse oder aus abgebauten

Nahrungsfetten:
P,
Die Fettsuren stammen aus Nahrungsfetten, abgebauten Krperlipiden oder werden aus Acetyl-CoA
neu synthetisiert; fr die Kondensation mit Glycerol-3-phosphat werden sie unter ATP-Verbrauch
zu Acyl-CoA aktiviert (wie bei der Vorbereitung
zur -Oxidation; Abschn.17.1). Die dreistufige
Synthese von Triacylglycerol wird durch den Triacylglycerolsynthase-Komplex in der Membran
des glatten ER katalysiert:
17
219
17.4 Synthese und Abbau der Triacylglycerole
Zusammensetzung des Krperfetts

Die Fettsurezusammensetzung des Krperfetts ist variabel und hngt in beschrnktem
Ausma von der Art des Nahrungsfetts ab:
Palmitinsure
16:0
20%
Stearinsure
18:0
7%
lsure
18:1
50%
Linolsure
18:2
Andere Fettsuren
10%
13%
Die ungesttigten Fettsuren berwiegen; das

Krperfett muss bei Krpertemperatur flssig
sein!
Der Abbau des Reservefetts wird durch die hormonregulierte Fettgewebelipase eingeleitet
Der Synthasekomplex selbst wird nicht reguliert.

Hingegen aktiviert Insulin (berfluss-Signal) die
Lipoproteinlipase, die aus den Triacylglycerolen der Lipoproteine (Chylomikronen und VLDL;
Abschn.34.4) Fettsuren freisetzt. Die Fettzellen
erhalten damit mehr Fettsuren zur Anlage von
Fettreserven.
.. Abb.17.3 Abbau von Triacylglycerol.
Die im Fettgewebe frei werdenden
Fettsuren werden in anderen Organen,
insbesondere in Muskeln und Leber,
oxidativ abgebaut und versorgen diese
Organe mit chemischer Energie. Glycerol
kann vom Fettgewebe nicht wiederverwendet werden, da dort die Glycerolkinase fehlt, wird aber in der Leber verwendet
zur Synthese von Glucose, polaren Lipiden
und Triacylglycerolen oder auch ber Glykolyse und Citratzyklus oxidativ abgebaut
Die Lipase im Fettgewebe spaltet Triacylglycerole

in Fettsuren, die vorwiegend in Muskulatur und
Leber verwertet werden, und in Glycerol, das von
der Leber weiterverwendet wird (.Abb.17.3). Im
Hungerzustand lsen die Hungersignal-Hormone
Glucagon (-Zellen des Pankreas) und Adrenalin/Noradrenalin (Nebennierenmark) ber ihre
G-Protein-gekoppelten Rezeptoren die erhhte
Bildung von cAMP aus, welches die Proteinkinase
A aktiviert, die ihrerseits die Lipase phosphoryliert
und damit aktiviert (vgl. mit der sehr hnlichen
Aktivierung der Glykogenphosphorylase, die im
Hungerzustand die Kohlenhydratreserve mobilisiert; .Abb.16.4). Das berfluss-Hormon Insulin
(-Zellen des Pankreas) hingegen wirkt antilipolytisch, indem es eine Phosphodiesterase aktiviert,
die cAMP hydrolysiert und damit die lipolytischen
Signale unterdrckt.
1
2
3
220
17.5
Stoffwechsel der Phospholipide
Synthese und Abbau von Phospholipiden Zur

Synthese von Phosphatidylcholin wird aktiviertes
Cholin (CDP-Cholin) an Diacylglycerol gekoppelt

(.Abb.17.4). Die Membranlipide werden rasch
umgesetzt (t1/2=12Tage). Ubiquitre Phospholi-
pasen bauen die Phospholipide ab: Zellulre Phos-
pholipasen bauen Membranlipide ab oder produzieren Signalmolekle; Phospholipasen aus dem

Pankreas verdauen Phospholipide aus der Nahrung.
Die Phospholipasen werden nach ihrem Angriffsort
in den Phospholipiden eingeteilt:
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
von
DurchSpaltung mit Phospholipase A2 entsteht

Lysophosphatidylcholin (Lysolecithin), ein amphiphiles Lipid mit einer einzigen Kohlenwasserstoffkette, das Mizellen bildet, wie ein Detergens
wirkt und biologische Membranen beschdigt. Die
in tierischen Giften (Bienen, Schlangen) vorkommende Phospholipase zerstrt daher, falls sie in den
Blutkreislauf gelangt, die Erythrozytenmembran
(Hmolyse). Ein ganz besonderes Membranlipid ist
Phosphatidylinositol, aus welchem die Phospholipase C zwei wichtige Second messengers bildet: Diacylglycerol (DAG) und Inositol-1,4,5-triphosphat
(IP3) (Abschn.27.2).
Gestrter Abbau von Sphingolipiden fhrt zu
Lipidspeicherkrankheiten Verschiedene lysoso-
male Hydrolasen sind am Abbau der Sphingolipide,

die wie die anderen Phospholipide rege umgesetzt
werden, beteiligt. Bei genetisch bedingtem Fehlen
bestimmter Hydrolasen kommt es zu den typischen
Sphingolipidosen, die zumeist schwere Strungen
der Gehirnentwicklung zur Folge haben, aber auch
andere Organe wie die Leber betreffen knnen. Die
Sphingolipidosen gehren zu den lysosomalen
Speicherkrankheiten.
17.6
Stoffwechsel von Cholesterol
Cholesterol (Cholesterin) ist biochemisch aber

auch medizinisch wichtig :
Der erwachsene menschliche Krper enthlt

140g Cholesterol; der hchste Gehalt (10% des
Organgewichts) findet sich in der Nebennierenrinde (Steroidsynthese!).
Cholesterol ist ein Bestandteil eukaryontischer
Membranen; bei Prokaryonten und in der
inneren Mitochondrienmembran kommt es
hingegen nicht vor. Eukaryontische Zellen,
welche wegen eines Stoffwechseldefekts kein
Cholesterol synthetisieren, neigen zu rascher
Lyse.
Cholesterol entspricht 50% der Gesamtlipide
in den Myelinscheiden der weien Hirnsubstanz.
Cholesterol ist Vorlufersubstanz von Gallensuren, Steroidhormonen und Provitamin D.
Cholesterol-Ablagerungen in den Gefwnden sind ein Teilaspekt der Arteriosklerose.
Gallensteine bestehen zum grten Teil aus
dem praktisch wasserunlslichen Cholesterol.
Cholesterol wird wie Fettsuren aus Acetyl-CoA

synthetisiert In einer ersten Synthesephase kon-
densieren 3Molekle Acetyl-CoA zu einer C6-Verbindung, die nach Decarboxylierung eine aktivierte
221
17.6 Stoffwechsel von Cholesterol
.. Abb.17.4 Synthese von Phosphatidylcholin
17
222
C5-Verbindung liefert. Weitere Kondensationen

ergeben Cholesterol und seine Derivate:
Acetyl-CoA (C2)
Mevalonat (C6)
Ubichinon
4
5
6
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8
9
10
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14
15
16
17
18
19
20
Isopentenyldiphosphat (C5)
In Bakterien und
Pflanzen: Vitamin A, K, E;
Kautschuk
Cholesterol
Vitamin D
Gallensuren
Progesteron
Cortisol
Oestradiol
Aldosteron
Pro Tag synthetisiert der erwachsene menschliche

Organismus 1g Cholesterol, bei gemischter Kost
werden zudem 0,3g aus tierischen Nahrungsmitteln
aufgenommen. Die erste Synthesephase geht von
Acetyl-CoA ber 3-Hydroxy-3-methylglutaryl-CoA
(HMG-CoA, ein Zwischenprodukt der Ketonkrpersynthese; Abschn.17.3) zur C5-Verbindung
Isopentenyldiphosphat (.Abb.17.5).
Statine hemmen Cholesterolsynthese
Die HMG-CoA-Reduktase (.Abb.17.5) ist das
Zielenzym von Medikamenten zur Senkung
der Cholesterolproduktion. Die Statine sind
Strukturanaloge von Mevalonat und damit
kompetitive Hemmstoffe der HMG-CoA-Reduktase.
.. Abb.17.5 Synthese von Cholesterol, PhaseI: vom

Acetyl-CoA zum Isopentenyldiphosphat. Der erste Schritt entspricht einer Umkehr der Thiolyse und ist reversibel. Die Thiolase kommt nicht nur in den Mitochondrien sondern auch im
Cytosol vor. Der zweite und der dritte Schritt sind irreversibel.
Der dritte Schritt, die Synthese von Mevalonsure, stellt
die Weiche in Richtung Cholesterol. In den Mitochondrien
werden aus 3-Hydroxy-3-methylglutaryl-CoA der Ketonkrper
Acetoacetat und Acetyl-CoA produziert (Abschn.17.3), im
Cytosol hingegen wird HMG-CoA zu Mevalonat reduziert, das
ber drei ATP-abhngige Reaktionen und einer damit verbundenen Decarboxylierung zu Isopentyldiphosphat umgewandelt wird. Die Polymerisierung dieser aktivierten Isopreneinheit (C5) mit ihrer Doppelbindung fhrt zur Synthese einer
Reihe biologisch wichtiger Verbindungen, einschlielich des
Cholesterols (.Abb.17.6)
223
In der zweiten Phase der Cholesterolsynthese wird

zunchst ein offenkettiges Polymer von Isopentenyldiphosphat aufgebaut, worauf oxidative Demethylierungen zu den Ringschlssen fhren
(.Abb.17.6). Bei den Reduktionsschritten beider
Synthesephasen dient vom Pentosephosphatweg
geliefertes NADPH als Reduktionsmittel.
C5 -PP
C5 -PP
Cholesterol wird nicht abgebaut, es kann

nur ausgeschieden werden Das Cholesterol
wird im Blut durch Lipoproteine (Abschn.34.4)

transportiert. Vom Gesamtcholesterol im Plasma
(Normalwert<5mM=214mg/100mL) sind zwei
Drittel mit ungesttigten Fettsuren verestert, ein
Drittel ist freies Cholesterol. Cholesterol kann nicht
wie Glucose oder Fettsuren zur ATP-Gewinnung
abgebaut werden. Es wird entweder in Gallensuren
oder Steroidhormone umgewandelt oder mit der
Galle (20% als Cholesterol und80% als Gallensuren) ausgeschieden.
C5 -PP
C15 -PP
C15 -PP
Die Cholesterolsynthese wird ber die HMGCoA-Reduktase reguliert Der wichtigste Regu-
lationsmechanismus betrifft die Transkription des

HMG-CoA-Reduktase-Gens. Dieses Gen wie auch
die Gene weiterer am Cholesterolstoffwechsel beteiligter Proteine, einschlielich des LDL-Rezeptors
(Abschn.34.4), enthalten ein Sterol-regulatory
element (SRE) im Promotor. Bei niedriger Cholesterolkonzentration setzt das ER den entsprechenden Transkriptionsfaktor, das SRE-Bindungsprotein
frei, dessen Binden ans SRE die Transkription des
HMG-CoA-Reduktase-Gens in Gang setzt. Bei hoher Cholesterolkonzentration hingegen verhindern
Sterolsensor-Proteine die Freisetzung des SRE-Bindungsproteins.
Zudem regulieren Hormone die katalytische
Aktivitt der HMG-CoA-Reduktase: Glucagon er.. Abb.17.6 Synthese von Cholesterol, PhaseII: Polymerisierung von Isopentenyldiphosphat und Ringschlsse. Durch
Kopf-Schwanz-Polymerisierung von 3Moleklen Isopentenyldiphosphat entsteht eine aktivierte C15-Verbindung (Farnesyldiphosphat), wovon 2Molekle Kopf-Kopf verbunden
werden zu Squalen (C30). Bei allen Polymerisierungsschritten
wird Pyrophosphat (PPi) freigesetzt, das darauf hydrolysiert
wird (nicht angegeben). Bei jedem Schritt werden demgem
2 energiereiche Phosphatbindungen (bei der Synthese von
Squalen sogar deren 4) gespalten, um die Reaktionen zum
Ablaufen zu bringen. Drei oxidative Demethylierungsschritte
fhren zu den Ringschlssen und damit zu Cholesterol (C27)
C30
C27
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224
1
2
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20
hht die Produktion von cAMP, die nachgeschaltete

Proteinkinase A phosphoryliert und inaktiviert die
HMG-CoA-Reduktase; Insulin hat die entgegengesetzte Wirkung.
Hypercholesterolmie und Arteriosklerose
Die Konzentration von Cholesterol im
Blutplasma korreliert mit der Hufigkeit des
Auftretens von Cholesteroleinlagerungen in
Arterienwnde (ein Teilaspekt der Arterio
sklerose) und mit dadurch bedingten Verengungen und Verschlssen der Koronararterien.
Zur Senkung der Cholesterolkonzentration im
Blutplasma bestehen folgende Mglichkeiten:
Verminderung der Cholesterolaufnahme
durch cholesterolarme Ernhrung,
Hemmung der HMG-CoA-Reduktase durch
Statine,
Steigerung der Ausscheidung von Gallensuren durch Hemmung von deren Rckresorption aus dem Darm (Gallensuren
bindende Ionenaustauscher).
Links auf
Springer Website:
027-6-1517045-0
17.1 -Oxidation der Fettsuren
17.2 Fettsuresynthese
17.3 Ketonkrper
17.4 Synthese und Abbau der Triacylglycerole
17.5 Stoffwechsel der Phospholipide
225
Stoffwechsel der Proteine

und Aminosuren
18.1
Abbau von Proteinen 226
18.2
Abbau der Aminosuren: Weg des Stickstoffs 228
18.3
Abbau der Aminosuren: Weg des Kohlenstoffs 232
18.4
Strungen im Abbau der Aminosuren 237
18.5
Synthese der Aminosuren 238
18.6 C1-Stoffwechsel239
18.7
Synthese von Kreatin und Porphyrinen

aus Aminosuren243

18
226
1
2
3
Der Abbau von Nahrungsproteinen und krpereigenen Proteinen speist den Aminosuren-Pool des
Organismus. berschssige Aminosuren knnen
nicht wie Glucose und Fettsuren als Reserve angelegt werden; sie werden zur Energiegewinnung abgebaut oder zu anderen Energietrgern umgebaut:
Krpereigene
Proteine
4
5
Kapitel 18 Stoffwechsel der Proteine und Aminosuren
CO2 + H2O oder Glucose,

Ketonkrper, Fettsuren
Nahrungsproteine
Aminosurenpool
Harnstoff
6
Biogene Amine,
Polyamine
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19
20
Die krpereigenen Proteine werden fortwhrend

umgesetzt (beim Menschen 12% des Gesamtproteins pro Tag). Der Abbau erfolgt in spezialisierten,
vom Rest der Zelle abgeschotteten Rumen: Die
membranumschlossenen Lysosomen besorgen den
generellen, nichtselektiven Abbau und im Innern
groer Proteinabbaumaschinen, der Proteasomen,
findet der Ubiquitin-kontrollierte, ATP-verbrauchende Abbau schadhafter Proteine statt.
Viele Enzyme des Aminosurestoffwechsels bentigen Pyridoxal-5-phosphat, ein Vitamin B6-Derivat, als prosthetische Gruppe. Die Phenylketonurie ist der hufigste der zahlreichen genetischen
Enzymdefekte im Aminosurestoffwechsel.
Aminosuren sind nicht nur die Bausteine von
Peptiden und Proteinen sondern auch Ausgangssubstanzen zur Synthese mannigfaltiger niedermolekularer stickstoffhaltiger Verbindungen mit
wichtigen Funktionen: biogene Amine, Polyamine,
weitere Signalmolekle und gewisse Hormone,

Stickstoffmonoxid (NO), Kreatin und Porphyrine.
18.1
Abbau von Proteinen
Proteine werden wie alle anderen biologischen

Makromolekle hydrolytisch abgebaut Die
Enzyme, welche Peptidbindungen spalten, werden

als Proteasen oder Peptidasen bezeichnet. Endopeptidasen spalten Peptidbindungen im Inneren von Polypeptidketten; Exopeptidasen spalten
Aminosuren vom NH2-Ende (Aminopeptidasen)

oder vom COOH-Ende (Carboxypeptidasen) ab.
Extrazellulre Proteasen finden sich unter den Verdauungsenzymen im Darm und als so genannte
Matrixproteasen in der extrazellulren Matrix; zudem erfllen sie besondere Funktionen, z.B. bei
der Blutgerinnung. Intrazellulre Proteasen kommen in allen Zellkompartimenten vor und bauen
die zelleigenen Proteine ab. Besondere Peptidasen
entfernen von Proteinen die zielbestimmenden
Prpeptide (Abschn.22.3) und die aktivittssupprimierenden Propeptide (Abschn.25.3 und
33.1). Die Proteine im Blutplasma werden intrazellulr abgebaut, das nichtglykosylierte Serumalbumin in den Nieren, die glykosylierten Plasmaproteine in der Leber.
Lysosomen bauen Proteine nichtselektiv und
ATP-unabhngig ab Die Lysosomen enthalten
etwa 50 verschiedene Hydrolasen, darunter eine

Reihe von Proteasen, die Cathepsine. Dem pH-Wert
in den Lysosomen entsprechend liegt das pH-Optimum der lysosomalen Hydrolasen bei pH5. Das
tiefe pH-Optimum schtzt die Zelle: Allenfalls
aus den Lysosomen ausgetretene Enzyme sind im
Cytosol bei pH 7 inaktiv. Lysosomen bauen Zellbestandteile und von auen aufgenommenes Material ab, indem sie mit membranumschlossenen
Teilen im Cytosol (Vesikeln, Endosomen und Phagosomen) fusionieren und deren gesamten Inhalt
verdauen. Lysosomen sind verantwortlich fr den
erhhten Abbau von Proteinen zur Gluconeogenese im Hungerzustand, den Muskelschwund bei
krperlicher Inaktivitt sowie das entwicklungsbedingte Einschmelzen von Organen wie Kaulquappenschwnzen oder die drastische Massenabnahme
des Uterus nach der Entbindung.
Proteasomen bauen fr den Abbau markierte

Proteine ab Diese Proteinabbaumaschinen neh-
men nur Proteine auf, die strukturell beschdigt

sind durch Mutation, fehlerhafte Synthese oder
Faltung, molekulare Alterungsvorgnge (Oxidation, Desamidierung u.a.m.) oder schdigende
Agenzien. Ein ATP-verbrauchendes Enzymsystem
identifiziert die schadhaften Proteinmolekle und
markiert sie mit Ubiquitin, einem Protein von nur
76Aminosureresten, das bei Eukaryonten in allen Zellen (ubiquitr) vorkommt. Dabei wird die
-Carboxylgruppe des Ubiquitins ber eine Amid-
227
18.1 Abbau von Proteinen
18
.. Abb.18.1 Das Proteasom ist ein

17nm langer Multiproteinkomplex
mit einem Durchmesser von 11nm
und einer Masse von 700kDa. Vier
aufeinander gestapelte Ringe von je
7Untereinheiten bilden einen zentralen 20S-Hohlzylinder, in welchem
die eingebrachten Proteine zu kleinen
Peptiden abgebaut werden. Die
kontrollierte Zufuhr der abzubauenden, mit Ubiquitin markierten Proteine
erfolgt durch die ATP-hydrolysierenden
19S-Kappen, auf einer oder auch beiden Seiten des Zylinders. Ubiquitinierungsenzyme und molekulare Chaperone sind die Zubringer beschdigter
Proteine und binden vorbergehend
an die Kappe
bindung an die -Aminogruppe von Lysinresten des

abzubauenden Proteins gebunden:
nicht-proteolytischen Regulation mannigfalti-
ger Prozesse wie Histonmodifikation oder Vesikeltransport.

Konservatives Ubiquitin
An einen Lysinrest (z.B. Lys48) des ersten angehefteten Ubiquitinmolekls kann ein zweites Ubiquitinmolekl auf gleiche Weise angehngt werden,
blicherweise wird eine Kette von 4Ubiquitinmolekle gebildet, um das Abbausignal zu verstrken. An einem Zielprotein knnen auch mehrere
Ubiquitinketten angebracht werden (Polyubiquitinylierung).
Der ubiquitinkontrollierte Abbau von Proteinen durch Proteasomen ist besonders wichtig bei
der Regulation des Zellzyklus (Abschn.24.3)
und bei der angeborenen Immunabwehr (Abschn.32.1). Zudem ist Ubiquitin beteiligt bei der
Die Aminosuresequenz von Ubiquitin ist

hochkonserviert: Sie ist bei Mensch und
Drosophila identisch und nur in 3Positionen
verschieden bei Hefe.
Das Proteasom hat eine fasshnliche Struktur

(.Abb.18.1, ). Die proteolytisch aktiven Stellen liegen im Innern des Fasses. Zustzliche Proteinkomplexe kontrollieren beide Zugnge: Nur
ubiquitinierte Proteine werden erkannt und unter
ATP-Verbrauch sowie Entfernung der Ubiquitinreste ins Innere der Proteasomen aufgenommen, wo
sie in kleine Peptide von 78Aminosureresten zerlegt werden. Die abgespaltenen Ubiquitinmolekle
werden rezykliert. Proteasomen mit etwas einfa-
228
1
2
3
4
cherem Bau und ohne Ubiquitinkontrolle kommen

auch in Prokaryonten vor.
18.2
Abbau der Aminosuren: Weg

des Stickstoffs
Das Endprodukt des intrazellulren Abbaus von

Proteinen wie auch der Verdauung von Proteinen
im Darm sind Aminosuren. Die freien Aminosuren im Organismus (beim erwachsenen

Menschen nur 70g) dienen zur Synthese von
Proteinen und anderen N-haltigen Verbindungen
oder werden zur Energiegewinnung verwendet;
bei proteinreicher Ernhrung und im Endstadium des Hungerzustands, wenn die Fettreserven
erschpft sind, werden Aminosuren vermehrt
abgebaut.
5
6
7
8
9
Polyamine
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14
Transaminierungsreaktionen sind an Synthese

und Abbau von Aminosuren beteiligt Bei ei-
ner Transaminierung wird die Aminogruppe einer

Aminosure auf eine -Ketosure bertragen:
Aminosure + -Ketosure
-Ketosure + Glutamat
Aminosure + Oxalacetat
-Ketosure + Asparat
Eine weitere Transaminierungsreaktion verbindet

diese beiden Reaktionen:
Asparat + -Ketosure
15
Oxalacetat + Glutamat
16
17
18
19
20
Reaktionen dieser Art werden durch Aminotransferasen (Transaminasen nach der lteren Nomenklatur) katalysiert, die alle Pyridoxal-5-phosphat
als prosthetische Gruppe verwenden (.Abb.18.2).
Die wichtigsten Transaminierungsreaktionen sind
die bertragungen der Aminogruppe einer Aminosure entweder auf -Ketoglutarat oder auf Oxalacetat unter Bildung von Glutamat bzw. Aspartat:
DieAminogruppen berschssiger Aminosuren knnen durch Transaminierung zur Synthese

mangelnder Aminosuren aus den entsprechenden
-Ketosuren verwendet werden. Transaminierungsreaktionen verbinden den Aminosurestoffwechsel ber die Ketosuren des Citratzyklus
mit dem Kohlenhydratstoffwechsel. Beim Abbau
der Aminosuren erlauben Transaminierungen,
die Aminogruppen verschiedenster Aminosuren
auf die Ketosuren des Citratzyklus (-Ketogluta-
229
18.2 Abbau der Aminosuren: Weg des Stickstoffs
18
-Ketoglutarat
.. Abb.18.2 Mechanismus der Transaminierung durch Pyridoxal-5-phosphat (PLP)-abhngige Aminotransferasen (Beispiel:
Alanin-Aminotransferase). In allen PLP-abhngigen Enzymen ist PLP ber eine Iminbindung (Schiff-Base) mit der -Aminogruppe eines Lysinrests an der aktiven Stelle kovalent verbunden. Der erste Reaktionsschritt der ersten Halbreaktion ist eine
Transaminierung: Die -Aminogruppe wird gegen die -Aminogruppe der Aminosure (das erste Substrat, Alanin im gezeigten
Beispiel der Alanin-Aminotransferase) ausgetauscht. Es entsteht eine Aldimin-Zwischenverbindung (Hydrolyse wrde einen
Aldehyd, nmlich PLP, liefern, daher die Bezeichnung Aldimin). Darauf wird ein Proton von C der Aminosure auf C4 des Co
enzyms verschoben, wodurch eine Ketimin-Zwischenverbindung entsteht. Hydrolytische Spaltung der neu entstandenen Doppelbindung zwischen C und N ergibt das erste Produkt, die -Ketosure, welche dem Aminosuresubstrat entspricht, sowie
die Aminform des Coenzyms, Pyridoxamin-5-phosphat. Damit ist die erste Halbreaktion der Transaminierung abgeschlossen.
Die zweite Halbreaktion entspricht einer Umkehr der ersten, allerdings mit einer anderen -Ketosure und damit auch einer
anderen Aminosure. Hier reagiert die Pyridoxaminform der Aminotransferase mit -Ketoglutarat zur Ketimin-Zwischenverbindung. Daraus entsteht durch Protonenverschiebung und nachfolgende Transaminierung das Aminosureprodukt Glutamat
und das Enzym im Ausgangszustand. Alle Teilreaktionen sind reversibel. Das Schema zeigt nur die Wechselwirkungen zwischen
dem Coenzym und den Substraten. Das Apoenzym, der Proteinteil des Enzyms, ist verantwortlich nicht nur fr eine zustzliche
Beschleunigung der einzelnen Reaktionsschritte, insbesondere der Protonenverschiebungen durch allgemeine Sure-Basen
katalyse, sondern auch fr die Substrat- und Reaktionsspezifitt des Enzyms
230
1
2
rat, Oxalacetat) zu bertragen und damit Glutamat

und Aspartat zu produzieren, die ihrerseits die
Aminogruppen fr die Synthese von Harnstoff liefern. Glutamat und Aspartat werden dadurch zum
3
4
5
6
7
8
9
Transaminierung
Aminosure
Aminosurespezifische
Aminotransferase
-Ketoglutarat
Sammelbecken der Aminogruppen aus anderen
Aminosuren.
Durch Koppelung mit Transaminierungsreaktionen wird die oxidative Desaminierung zum
Hauptweg fr die Bildung von Ammoniak:
Oxidative
Desaminierung
-Ketoglutarat
NH4+
NADH + H+
Harnstoff
Atmungskette
GlutamatDehydrogenase
Glutamat
H2O
NAD+
Glutamin dient als ungiftige Speicherund Transportform von NHC

4 Ammoniak
zentration im Blut 3040M) ist stark toxisch und

wird entgiftet, indem Glutamat unter ATP-Verbrauch zu Glutamin amidiert wird:
Glutamin ist ein Proteinbaustein und dient auch als

Quelle von N-Atomen zur Synthese von Pyrimidin- und Purinbasen sowie Aminozuckern. Durch
hydrolytische Spaltung der Amidbindung (Desamidierung) wird NHC
4 aus Glutamin bei Bedarf wieder
freigesetzt:
Vertebraten (Fischen und Amphibien vor der Metamorphose). Die schlecht wasserlsliche Harnsure
(ein Purin; Abschn.7.2) ist das Abbauprodukt
bei Sauropsiden (Reptilien und Vgel; weier Vogeldreck besteht aus fast reiner Harnsure). Suger
und Amphibien nach der Metamorphose eliminieren ber vier aufeinander folgende Vorgnge den
Stickstoff der Aminosuren als sehr gut wasserlslichen Harnstoff:
1. Verschiebung der -Aminogruppe auf -Ketoglutarat (Transaminierung),
2. Abspaltung der Aminogruppe aus dem entstandenen Glutamat (oxidative Desaminierung),
3. Bildung einer ungiftigen Transportform des
freigesetzten Ammoniaks (Glutamin),
4. Bildung eines harnfhigen N-haltigen Ausscheidungsprodukts (Harnstoff).
C
(NHC
4 NH3 C H I pKa D 9;25 , Normalkon-
10
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20
Vertebraten benutzen drei verschiedene Wege

zur Ausscheidung des Stickstoffs von Aminosuren Beim Abbau von Aminosuren stellt sich das
Problem der berfhrung der N-haltigen Gruppen in ausscheidungsfhige energiearme Abbauprodukte. Eine direkte Ausscheidung von NHC
4
durch die Haut findet sich nur bei wasserlebenden
231
18.2 Abbau der Aminosuren: Weg des Stickstoffs
18
.. Abb.18.3 Harnstoffzyklus. Die Bildung von Carbamoylphosphat und dessen Kondensation mit Ornithin zu Citrullin findet in
der mitochondrialen Matrix statt. Die anderen Reaktionen des Zyklus laufen im Cytosol ab. Carbamoylphosphat ist eine aktivierte
Form (gemischtes Sureanhybrid) der Carbaminsure (H2NCOOH), zu deren Bildung 2ATP verbraucht werden. Die mitochondriale Carbamoylphosphat-Synthase I braucht NHC
4 als Substrat, whrend die an der Synthese von Pyrimidinnucleotiden (Abschn.19.2) beteiligte cytosolische Carbamoylphosphat-Synthase II die Amidgruppe von Glutamin verwendet. Die Kondensation
von Citrullin und Aspartat verbraucht nochmals 2 energiereiche Phosphatbindungen. Das aus Argininosuccinat eliminierte
Fumarat kann ber einen nebengeschalteten Zyklus zu Aspartat zurckverwandelt werden. Daran beteiligt sind Reaktionen des
Citratzyklus (FumaratMalatOxalacetat) und die Transaminierung von Glutamat und Oxalacetat. Arginin ist der unmittelbare
Vorlufer von Harnstoff. Die Arginase spaltet die Amidingruppe hydrolytisch ab, es entsteht Isoharnstoff (nicht gezeigt), der
spontan zu Harnstoff tautomerisiert. Ornithin ist als C5-Diaminocarbonsure das nchstniedrigere Homolog von Lysin (C6).
Pro Zyklus werden 4 energiereiche Phosphatbindungen gespalten: Die Entsorgung hat ihren Preis!
Die Leber, das Hauptorgan des Aminosurenstoffwechsels, synthetisiert den Harnstoff durch eine
zyklische Reaktionsfolge, den Harnstoffzyklus
(Ornithinzyklus; .Abb.18.3). Der grte Teil der

NHC
4 -Ionen, welche zusammen mit HCO3 Carbamoylphosphat bilden, stammt aus der oxidativen
232
1
2
3
4
Desaminierung von Glutamat sowie aus der Desamidierung von Glutamin, der Transportform von
Ammoniak, d.h. ursprnglich wiederum aus Glutamat. Die beiden N-Atome des Harnstoffs stammen
demnach einerseits aus Glutamat und andererseits
aus Aspartat, d.h. aus den zwei Aminosuren, die
durch Transaminierung der entsprechenden -Ketosuren (-Ketoglutarat bzw. Oxalacetat) mit verschiedenen anderen Aminosuren entstanden sind:
5
6
7
18.3
Abbau der Aminosuren: Weg

des Kohlenstoffs
Die strukturelle Vielfalt der 20 proteinogenen Aminosuren fhrt zu unterschiedlichen Abbauwegen,

die sich aber grundstzlich hnlich sind. Die folgenden Teilschritte finden sich beim Abbau aller
Aminosuren:
1. Entfernen der Aminogruppe durch Transaminierung oder oxidative Desaminierung (die Aminosure wird zur entsprechenden Ketosure),
2. Einschleusen des zurckbleibenden C-Skeletts
in Glykolyse oder Citratzyklus,
3. Je nach Stoffwechsellage Abbau zu CO2 und H2O
bzw. Umbau zu Glucose (Gluconeogenese) oder
Fettsuren.
Aminosuren sind glucogen oder ketogen oder
beides Die drei einfachsten Flle:
8
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-Ketoglutarat
10
11
-Ketoglutarat
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-Ketoglutarat
Harnstoffzyklus
Der Harnstoffzyklus wurde 1932 von Hans
Krebs, der damals klinischer Assistent in
Freiberg i. B. war, und Kurt Henseleit, einem
Medizinstudenten, als erster zyklischer Stoffwechselweg beschrieben. Fnf Jahre spter,
in Sheffield, England, fand Hans Krebs den
Citratzyklus, auch Krebszyklus genannt.
Alle drei Produkte (Pyruvat, Oxalacetat und -Ketoglutarat) knnen zur Gluconeogenese verwendet
werden. Die Abbauwege der brigen in Proteinen
vorkommenden Aminosuren sind komplizierter.
Insgesamt werden aus den 20Aminosuren 7 verschiedene Abbauprodukte gebildet, wovon 5 (Pyruvat, Oxalacetat, -Ketoglutarat, Succinyl-CoA und
Fumarat) der Gluconeogenese zugefhrt werden
knnen. Die Aminosuren, deren Abbau eines dieser Zwischenprodukte liefert, werden als glucogene
Aminosuren bezeichnet. Mit Ausnahme von Lysin
und Leucin sind alle 20 proteinogenen Aminosuren
glucogen (.Abb.18.4); sie sind damit die wichtigsten Ausgangsstoffe fr die Gluconeogenese sowie
fr die anaplerotischen Reaktionen des Citratzyklus.
Ketogene Aminosuren liefern als Abbauprodukte
Acetoacetat, einen Ketonkrper, und Acetyl-CoA,
woraus sich Ketonkrper synthetisieren lassen. Ketonkrper knnen im tierischen Organismus nicht
233
18.3 Abbau der Aminosuren: Weg des Kohlenstoffs
18
-Ketoglutarat
.. Abb.18.4 Glucogene und ketogene Aminosuren. Das C-Skelett aller 20 proteinogenen Aminosuren kann zu CO2 und H2O
abgebaut werden. Aus den meisten Aminosuren kann Glucose gewonnen werden; bei einigen dieser glucogenen Aminosuren (den blau umrandeten) wird ein Teil des Molekls zu Acetyl-CoA oder Acetoacetat abgebaut, die in Lipide und Ketonkrper
umgewandelt werden knnen. Von den ketogenen Aminosuren liefern Isoleucin und die aromatischen Aminosuren (schwarz
umrandet) neben Acetyl-CoA auch Zwischenprodukte der Gluconeogenese. Ausschlielich ketogen sind einzig Leucin und Lysin
zu Kohlenhydrat, jedoch zu Lipiden umgebaut

werden. Ausschlielich ketogen sind nur Leucin
und Lysin. Sowohl glucogen als auch ketogen sind
Phenylalanin, Tyrosin, Tryptophan und Isoleucin.
Die C-Skelette aller Aminosuren knnen natrlich
auch, statt zu Glucose bzw. zu Lipiden umgebaut
zu werden, zu CO2 und H2O abgebaut und direkt
zur ATP-Gewinnung genutzt werden (.Abb.18.4).
Der Stoffwechsel von Phenylalanin und Tyrosin
wird im Folgenden wegen seiner biologisch-medizinischen Bedeutung ausfhrlicher dargestellt.
Phenylalanin wird durch eine mischfunktionelle Oxidase zu Tyrosin hydroxyliert:
234
1
2
3
In der Reaktion der Phenylalanin-4-monooxygenase (Phenylalaninhydroxylase ) stammt das

Sauerstoffatom der neu eingefhrten Hydroxylgruppe des Tyrosins aus molekularem Sauerstoff.
Das reaktionstrge O2-Molekl wird reduktiv
gespalten und aktiviert, indem das zweite Sauerstoffatom in einer stark exergonischen Reaktion zu
H2O reduziert wird. Die reduzierenden H-Atome
stammen aus dem Cofaktor Tetrahydrobiopterin
(BH4):
Phenylalaninhydroxylase
4
5
6
Dihydrobiopterin-
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20
Terminologie
Hydroxylase, Monooxygenase, mischfunktionelle Oxidase: Die beiden O-Atome von molekularem O2 oxidieren einerseits das Substrat
und andererseits einen H-bertrger (s. auch
Fettsure-Desaturase; Abschn.17.2).
Tetrahydrobiopterin: Die Pterine wurden als
Farbstoffe in Schmetterlingsflgeln entdeckt.
Wie bei der Reaktion der Phenylalanin-Hydroxylase fungiert BH4 als Cosubstrat bei einer
Reihe weiterer Hydroxylierungsreaktionen:
TyrosinDopa,
Tryptophan5-Hydroxytryptophan,
ArgininN-HydroxyargininCitrullin+NO.
(Die NO-Synthase katalysiert diese
NO-produzierende Reaktionsfolge, an
beiden Teilreaktionen ist BH4 beteiligt.)
--
Tyrosin ist glucogen und ketogen Der oxidative

Abbau fhrt zu glucogenem Fumarat und dem Ketonkrper Acetoacetat (.Abb.18.5).
Tyrosin ist ein Vorlufer von Catecholaminen Die Tyrosin-3-monooxygenase (Tyrosinhydroxylase), ein der Phenylalaninhydroxylase ho-
mologes BH4-abhngiges Enzym, hydroxyliert

Tyrosin zu Dopa (Dioxyphenylalanin, ltere Bezeichnung fr 3,4-Dihydroxyphenylalanin). Die
Decarboxylierung von Dopa und anderer (z.T.
ebenfalls hydroxylierter) Aminosuren durch Pyridoxal-5-phosphat-abhngige Decarboxylasen

produziert Dopamin und weitere biogene Amine,
die als Neurotransmitter, Hormone und Mediatoren
wirksam sind (Abschn.28.3 und 29.1):
;
(Neurotransmitter, Gewebehormon)
(inhibitorischer Neurotransmitter)
;
Gewebehormon, beteiligt an allergischen Reaktionen)
Tyrosin ist auch Vorlufer der Melanine Diese

wichtigsten Pigmente der belebten Natur schtzen
Mensch, Tiere, Pilze und Pflanzen vor ionisierender
Ultraviolettstrahlung. Melanin wird durch spezialisierte Zellen, die Melanozyten, produziert und intrazellulr in Melanosomen abgelagert. Melanin findet
sich in zahlreichen Abkmmlingen des Ektoderms
wie Haut, Auge (Iris und Chorioidea), Zentralnervensystem (Substantia nigra) und Haaren. Melanine sind
aromatische Polymere. Sie entstehen aus Tyrosin ber
eine Reaktionsfolge, deren erste zwei Schritte durch
die Tyrosinase katalysiert werden (.Abb.18.6).
Dopachinon kann auch Cystein addieren; Zyklisierung des Addukts und Polymerisierung zusammen mit Indol-5,6-chinon ergibt das gelbe bis
235
18.3 Abbau der Aminosuren: Weg des Kohlenstoffs
.. Abb.18.5 Oxidativer Abbau von Tyrosin. Der

Entfernung der Aminogruppe durch Trans
aminierung folgen zwei Oxidationsschritte mit
molekularem Sauerstoff als Oxidationsmittel, die
zur Ringffnung fhren. Das entstehende Diketon
durchluft eine cis-trans Isomerisierung und wird
darauf hydrolytisch gespalten. Die Endprodukte
sind der Ketonkrper Acetoacetat und Fumarat,
ein Zwischenprodukt des Citratzyklus. Tyrosin
ist daher sowohl ketogen als auch glucogen
(.Abb.18.4). Fehlen der Homogentisat-Dioxygenase fhrt zur Alkaptonurie (Abschn.18.4)
rotbraune Phomelanin oder das rote Trichochrom,

den Farbstoff roter Haare. Der Typ des Melanins
und die Dichte der Melanozyten bestimmen Hautund Augenfarbe.
Genetisch bedingtes Fehlen der Tyrosinase ist
fr den Albinismus verantwortlich. Die betroffenen
Individuen zeigen weie Haut, flachsblondes Haar
und rote Augenfarbe (bei Tieren: weies Fell, weies
Federkleid).
18
-Keto-
Tyrosinase
Die Tyrosinase ist ein Kupferenzym; bei der
Reaktion wechselt das Kupferion seine Valenz.
Das Enzym ist in Pflanzen und Pilzen weit
verbreitet. Tyrosinase-Reaktionen sind auch
verantwortlich fr das Dunkelwerden der
Schnittflchen von pfeln, Bananen, Champignons oder Kartoffeln.
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.. Abb.18.6 Melaninsynthese. Die erste und zweite Reaktion

sind eng miteinander gekoppelt, Dopa ist der Wasserstoffdonor
bei der Hydroxylierung von Tyrosin zu Dopa, die nach dem
allgemeinen Prinzip der Monooxygenase-Reaktionen verluft.
Die Tyrosinase katalysiert beide Reaktionen. Die nachfolgende
Bildung des Indolrings und die Polymerisierung zum Melanin
verlaufen spontan
18
237
18.4 Strungen im Abbau der Aminosuren
decarboxyliertem S-Adenosylmethionin (SAM)

und Spermin aus Spermidin plus decarboxyliertem SAM gebildet; Cadaverin (produziert von
Bakterien, mitverantwortlich fr den Geruch von
verwesendem Fleisch und Fisch) entsteht durch
Decarboxylierung von Lysin:
Polyamine haben wichtige, derzeit noch wenig

verstandene Funktionen Polyamine sind Abbau-
produkte basischer Aminosuren und werden in

pro- und eukaryontischen Zellen gebildet. Putrescin entsteht durch Decarboxylierung von Arginin
und Folgereaktionen oder durch Decarboxylierung
von Ornithin; Spermidin wird aus Putrescin plus
+
H3N
NH3
+
Putrescin
H3N
H2
+
N
NH3
+
Spermidin
+
H3N
H2
+
N
N
+
H2
Spermin
+
H3N
NH3
+
NH3
+
Cadaverin
Polyamine sind unbedingt notwendig fr die Proliferation von Sugerzellen. Sie stabilisieren biologische Membranen und modulieren gewisse Ionenkanle. Mit ihren mehrfachen positiven Ladungen
binden sie an DNA und RNA. Ihre Synthese ist
strikt reguliert.
18.4
Strungen im Abbau
der Aminosuren
Die Alkaptonurie ist eine seltene Stoffwechselanomalie Bei Kleinkindern mit diesem au-
tosomal-rezessiv vererbten Stoffwechseldefekt

(Hufigkeit 1:250000) frben sich urinbenetzte
Windeln spontan schwarz. Das Fehlen der Homogentisat-Dioxygenase (.Abb.18.5) fhrt zu stark
vermehrt ausgeschiedenem Homogentisat, einem
Hydrochinon, das durch Luftsauerstoff in alkalischem Milieu zum schwarzen Chinon oxidiert wird
(fr eine alkalische Reaktion sorgt der Harnstoff im
Urin, der durch die Urease der Bakterien, die sich in
genssten Windeln vermehren, zu Ammoniak und

CO2 hydrolysiert wird). Ablagerungen des Pigments
fhren im mittleren Lebensalter zu degenerativen
Gelenkerkrankungen.
Inborn error of metabolism
Archibald E. Garrod untersuchte zu Beginn des
20.Jahrhunderts die Alkaptonurie und prgte
dabei den Begriff der angeborenen Stoffwechselerkrankung (Inborn error of metabolism), der
ein Enzymdefekt zugrunde liegt.
Phenylketonurie: die hufigste (1:10000) und

wegen ihrer schwerwiegenden Konsequenzen
und der Mglichkeit einer wirksamen Therapie
auch die wichtigste erbliche Strung des Aminosurestoffwechsels Der autosomal-rezessiv
vererbten Krankheit liegt ein Defekt der Phenyl
alaninhydroxylase
zugrunde. Die Folge des
Defekts, eine gestrte Entwicklung des Gehirns, ist

nicht auf eine ungengende Produktion von Tyrosin
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zurckzufhren (bei normaler Ernhrung erhalten

Sugling und Kind gengend Tyrosin), sondern
ergibt sich aus dem Anstauen des Substrats der
Phenylalaninhydroxylase-Reaktion: Phenylalanin,
dessen Konzentration im Blut 1030fach erhht
ist, hemmt den Transport anderer groer neutraler
Aminosuren durch die Blut-Hirn-Schranke. Der
Mangel an Aminosuren fhrt zu ungengender
Synthese von Proteinen und gewisser Neurotransmitter (Catecholamine und Serotonin). Neben
Phenylalanin kommen auch Phenylpyruvat (durch
Transaminierung aus Phenylalanin entstanden)
und weitere Derivate in erhhter Konzentration in
Blut und Urin vor; die erhhte Konzentration von
Phenylpyruvat, einem Phenylketon, im Urin hat der
Krankheit den Namen gegeben.
Die Therapie besteht in einer lebenslangen
phenylalaninarmen Dit und ermglicht, falls sie
frh genug einsetzt, eine normale Entwicklung
des Gehirns. Die Diagnose muss daher so frh wie
mglich gestellt werden. Die Bestimmung der Phenylalaninkonzentration im Blut ist Teil des Neugeborenen-Screenings.
Phenylketonurie-Varianten
ber 400 verschiedene Punktmutationen
sind bekannt, welche eine Phenylketonurie
verursachen. Die meisten Patienten sind
gemischt-heterozygot, d.h. die beiden Allele
tragen verschiedene Mutationen. Es liegen
demnach viele verschiedene Varianten vor. Die
gemessenen Phenylalaninhydroxylase-Aktivitten liegen zwischen totalem Fehlen und
30% des Normalwerts.
Bei einer atypischen Form der Phenylketonurie

(12% der Patienten) liegt der Defekt in der Synthese von Tetrahydrobiopterin (Abschn.18.3),
des Cosubstrats der Phenylalaninhydroxylase. Die
genaue Diagnose ist wichtig, weil diese Patienten
durch Zufuhr des Cofaktors erfolgreich behandelt
werden knnen.
18.5
Synthese der Aminosuren
Pflanzen, Pilze und viele Bakterien knnen alle proteinogenen Aminosuren synthetisieren. Mensch
und Tier mssen gewisse Aminosuren, die essenziellen Aminosuren, mit der Nahrung aufnehmen.
Fr den Menschen sind 9Aminosuren essenziell:
Aminosuren mit verzweigten Seitenketten
Valin, Leucin, Isoleucin
Basische Aminosuren
Lysin, Histidin
Hydroxy-Aminosure
Threonin
Schwefelhaltige
Aminosure
Methionin
Aromatische
Aminosuren
Phenylalanin, Tryptophan
Die 11 nichtessenziellen Aminosuren werden natrlich zum groen Teil ebenfalls aus der Nahrung
bezogen, knnen aber bei Bedarf auch im Organismus gebildet werden. Sehr einfach ist die Synthese
aus den entsprechenden -Ketosuren durch Trans
aminierung, zumeist mit Glutamat als Donor der
Aminogruppe:
PyruvatAlanin,
OxalacetatAspartat,
-KetoglutaratGlutamat,
3-PhosphohydroxypyruvatPhosphoserinSerin.
---
Bei Glutamat besteht auch die Mglichkeit der Synthese durch reduktive Aminierung:
-Ketoglutarat+NH+4+NAD(P)H+H+
Glutamat+NAD(P)++H2O
Es handelt sich hier um die Umkehr der oxidativen Desaminierung. Als Ausnahme unter
den Dehydrogenasen verwendet die Glutamatdehydrogenase sowohl NADPH als auch
NADH.
Aus den obigen nichtessenziellen Aminosuren lassen sich weitere Aminosuren synthetisieren:
Glutamat+NHC
4 +ATPGlutamin+ADP+Pi
(Diese durch die Glutaminsynthetase katalysierte Reaktion ist auch bei der Stickstoffassimilation wichtig, da sie Ammoniak fixiert;
Abschn.21.1.)
239
18.6C1-Stoffwechsel
18
Aspartat+Glutamin+ATPAsparagin+Glutamat+AMP+PPi
(Transamidierung)
GlutamatProlin
(Ringschluss, mehrstufig, ATP- und NAD(P)-
abhngig)
Citrullin+AspartatArginin
(mehrstufig, Reaktionen des Harnstoffzyklus;
.Abb.18.3)
Serin Glycin+Methylen-Tetrahydrofolat
(Diese Reaktion wird durch die Pyridoxal-5-phosphat-abhngige Serin-Hydroxymethyl-Transferase katalysiert. Sie liefert ein
Einkohlenstoff (C1)-Fragment, fr welches
Tetrahydrofolat als bertrger fungiert;
Abschn.18.6)
Synthese aus essenziellen Aminosuren:

Phenylalanin Tyrosin
(Phenylalaninhydroxylase-Reaktion)
Methionin und Serin Schwefelatom bzw.
C-Skelett von Cystein (.Abb.18.8)
Bei der Synthese von Cystein wie auch bei der Synthese von Glycin aus Serin wird ein C1-Fragment
abgespalten und bertragen. Verschiebungen von
C1-Einheiten finden sich auch bei zahlreichen anderen Stoffwechselreaktionen, jedoch nicht in den
bisher besprochenen groen Abbau- und Syntheseketten, sie werden daher gesondert als C1-Stoffwechsel behandelt.
18.6 C 1-Stoffwechsel
Bei der Bildung von Glycin aus Serin wird die abgespaltene Hydroxymethylgruppe von Tetrahydrofolsure bernommen. Auch in anderen Reaktionen
treten an Tetrahydrofolat gebundene C1-Einheiten
auf.
Tetrahydrofolat, der bertrger von C1-Einheiten, leitet sich von Folsure, einem Vitamin,
ab Folat ist biologisch nicht aktiv, es muss ber
zwei Schritte zum aktiven Tetrahydrofolat (FH4) re-
duziert werden:
Die C1-Einheiten kommen in drei verschiedenen

Oxidationsstufen vor, zusammen bilden sie den C1Pool. Den drei Oxidationsstufen (IIII) entsprechen
die folgenden Gruppen (.Abb.18.7):
I
CH3
Methylgruppe (Oxidationsstufe
von Methanol H3COH)
II
CH2
Methylengruppe (Oxidationsstufe
von Formaldehyd HCHO)
III
CH=
Methenylgruppe (Oxidationsstufe
von Ameisensure HCOOH)
CHO
Formylgruppe
CHNH
Formiminogruppe
Die verschiedenen Oxidationsstufen von C1-FH4

liefern C1-Einheiten fr zahlreiche Synthesevorgnge.
S-Adenosylmethionin (SAM) ist wie Methyl-FH4

an Methylierungsreaktionen beteiligt Methionin
ist ein Thioether, der im tierischen Organismus nicht

synthetisiert werden kann. Die an das Schwefelatom
gebundene Methylgruppe ist reaktionstrge, sie wird
aktiviert, d.h. leicht bertragbar auf andere Verbindungen, durch die Bildung einer Sulfoniumverbindung mit Adenosin (.Abb.18.8). Die Umwandlung
von Methionin in Homocystein dient verschiedenen
Zwecken: SAM ist Methylgruppendonor bei zahlreichen Methylierungen, Methionin wird abgebaut und
(nichtessenzielles) Cystein wird synthetisiert.
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.. Abb.18.7 bertragung von C1-Einheiten aus Serin auf Tetrahydrofolat (FH4). Die
Hydroxymethylgruppe des Serins wird
zunchst an N10 des Tetrahydrofolats (FH4)
gebunden, woraus durch Wasserabspaltung
N5, N10-Methylen-FH4 entsteht. Die Spaltung
der C2-C3-Bindung des Serins wird durch
die Serin-Hydroxymethyl-Transferase, ein
Pyridoxal-5-phosphat (PLP)-abhngiges
Enzym katalysiert. Die drei verschiedenen
Oxidationsstufen FH4-gebundener C1-Einheiten knnen ber enzymkatalysierte Reaktionen ineinander umgewandelt werden.
Um Folsure in der Zelle zu halten, wird sie
ber ihren Glutamatrest an Polyglutamat
(Glu6) gebunden
241
18.4 Strungen im Abbau der Aminosuren
18
Serin
4
Cystathionin
-Ketobutyrat
.. Abb.18.8 S-Adenosylmethionin, Methylzyklus und Cysteinsynthese. Der Methylzyklus besteht aus drei Vorgngen:
Bildung von S-Adenosylmethionin (SAM). Bilanzmig werden drei Mol ATP verbraucht, um aus dem Thioether Methionin
ein Mol aktivierter Methylgruppe in Form von SAM, einer reaktionsfhigen Sulfoniumverbindung, zu gewinnen.
bertragung von CHC
3 , ein elektrophiles Carbokation, auf ein Atom mit freiem Elektronenpaar, z.B. ein N-Atom. Dabei entsteht wiederum ein Thioether.
Regeneration von Methionin in zwei Schritten. Nach hydrolytischer Abspaltung von Adenosin wird das entstandene
Homocystein durch N5-Methyl-FH4 zu Methionin methyliert. Die Methioninsynthase (FH4-Homocystein-S-Methyltransferase)
bentigt Cobalamin (Vitamin B12; Abschn.35.3) als prosthetische Gruppe.
Cysteinsynthese: Serin liefert das C-Gerst und Methionin via Homocystein die Sulfhydrylgruppe
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Methioninsynthase
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.. Abb.18.9Methyl-FH4-Zyklus und Methylzyklus: Zusammenspiel von Tetrahydrofolat und Cobalamin (Vitamin B12) bei
Methylierungsreaktionen. Das Schema zeigt die bekannten Reaktionen zur Gewinnung von C1-Einheiten aus Serin (.Abb.18.7)
und den Methylzyklus (.Abb.18.8). Die Methylierung von Homocystein zu Methionin ist eine dem Methyl-FH4-Zyklus und dem
Methylzyklus gemeinsame Reaktion; die dafr verantwortliche Methioninsynthase ist ein Cobalamin (Vitamin B12)-abhngiges
Enzym.
Im Methylzyklus (.Abb.18.9) wird die

Methylierung von Homocystein zu Methionin
durch die Methionin-Synthase mit Cobalamin als
prosthetischer Gruppe katalysiert. Damit sind die
SAM-vermittelten Methylierungsreaktionen von
zwei Vitaminen, Folsure und Cobalamin (Vitamin
B12), abhngig. Bei ungengender Aktivitt der Cobalamin-abhngigen Methionin-Synthase wird sich
FH4 als N5-Methyl-FH4 in der Methylfalle (Methyl
or Folate trap) anstauen und dem Stoffwechsel nicht
mehr zur Verfgung stehen. Die Symptome eines
Folsuremangels knnen daher auch die Folge einer
mangelhaften Cobalaminzufuhr sein.
Der wichtigste Lieferant von C1-Einheiten ist

Serin Zwei Quellen fr C1-Einheiten stehen zur
C1-Einheiten sind fr manche Biosynthesen die limitierenden Vorstufen, ohne C1-Einheiten lassen
sich weder Nucleinsuren noch Proteine synthetisieren. C1-Einheiten werden nicht in den Hauptstoffwechselketten gebildet und sind als Mangelware
eine Achillesferse des Stoffwechsels. Die entsprechenden Enzyme sind daher Ziele fr medikamentse Interventionen (Bakteriostatika, Zytostatika;
Abschn.19.4, .Abb.19.5).
Verfgung: Stoffwechselprodukte (Serin, Glycin, Histidin) und mit der Nahrung zugefhrte Verbindungen (Serin, Methionin, Glycin, Histidin, Phospholipide). Serin, die quantitativ wichtigste Quelle, kann
durch Oxidation des Glykolysezwischenprodukts
3-Phoshoglycerat zu 3-Phosphohydroxypyruvat,
gefolgt von Transaminierung zu Phosphoserin und
abschlieender Hydrolyse produziert werden; ber
diesen Weg werden C1-Fragmente aus Kohlenhydrat
gewonnen. Die C1-Einheiten werden auf verschiedenen Oxidationsstufen in den C1-Pool eingeschleust:
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18.7 Synthese von Kreatin und Porphyrinen aus Aminosuren
18.7
Synthese von Kreatin

und Porphyrinen aus
Aminosuren
Die Synthese vieler N-haltiger Verbindungen geht

von Aminosuren aus. Beispiele sind die Purin- und
Pyrimidinnucleotide (Kap.19), sowie Kreatin und
Porphyrine, deren Synthesewege im Folgenden besprochen werden.
Kreatinphosphat dient in Muskel- und Nervenzellen als Reserve an energiereichem Phosphat
Kreatinphosphat (in Muskelfasern 1020mM;
Abschn.30.5) dient durch Umkehr der Kreatin-
kinase-Reaktion zur Resynthese von ATP. An der

Synthese von Kreatin sind drei Aminosuren beteiligt (.Abb.18.10). Bei Crustaceen bernimmt Argininphosphat (ebenfalls mit Guanidiniumgruppe)
die Stelle von Kreatinphosphat.
Porphyrine sind prosthetische Gruppen zahlreicher farbiger Proteine Ein Porphyrin-Ringsystem bildet den organischen Teil des Chlorophylls
(Mg2+ als Zentralion) der Pflanzen und photosynthetisierenden Bakterien. Hm, das sich in den zahlreichen Hmproteinen (Hmoglobin, Myoglobin,
Cytochrome, Katalase, Peroxidasen) findet, ist ebenfalls ein Porphyrinderivat (Fe2+/Fe3+ als Zentralion).
Die Synthese von Hm beginnt und endet in den
Mitochondrien mit einem wichtigen Zwischenspiel
im Cytosol (.Abb.18.11). Die (delta-)Aminolvulinat-Synthase, welche die erste Reaktion, die
Bildung von 5-Aminolvulinat aus Glycin und Succinyl-CoA katalysiert, ist das Schrittmacherenzym
des ganzen Synthesewegs. Hmatin (mit Fe3+), das
unter aeroben Bedingungen spontan und sehr rasch
aus nicht an ein Hmprotein gebundenem Hm
.. Abb. 18.10 Synthese von Kreatinphosphat. Glycin liefert

den Kern, an den die Amidiniumgruppe von Arginin angehngt wird, und S-Adenosylmethionin fungiert als Methylgruppen-Donor. Kreatinphosphat bildet spontan Kreatinin,
das Lactam (intramolekulares Amid) von Kreatin. Kreatinin
wird nicht abgebaut, sondern im Urin ausgeschieden
(12 g/24h). Die Menge Kreatinin, die in 24h ausgeschieden
wird, ist proportional zur Muskelmasse und bemerkenswert
konstant fr ein bestimmtes Individuum. Die Bestimmung der
Serumkonzentration von Kreatinin dient daher als einfacher
Nierenfunktionstest (glomerulre Filtrationsrate)
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.. Abb. 18.11 Hmsynthese. Ein Teil der Synthesereaktionen findet in den Mitochondrien und ein Teil im Cytosol statt. Aus
Succinyl-CoA, einem Zwischenprodukt des ebenfalls in den Mitochondrien ablaufenden Citratzyklus, entsteht durch Kondensation mit Glycin und nachfolgende Decarboxylierung 5-Aminolvulinat (auch als (delta)-Aminolvulinat bezeichnet). Die
5-Aminolvulinat-Synthase, ein Pyridoxal-5-phosphat-abhngiges Enzym, ist das Schrittmacherenzym des Synthesewegs.
Das Endprodukt Hm, genauer dessen Oxidationsprodukt Hmatin mit Fe3+, wirkt nicht nur als allosterischer Rckkoppelungshemmer dieses Enzyms, sondern reprimiert auch dessen Synthese. Im Cytosol kondensieren zwei Aminolvulinat-Molekle zu
Porphobilinogen mit einem Pyrrolring. Die nchsten Schritte fhren zum zyklischen Tetrapyrrol, dabei werden die Aminogruppen abgespalten. Das entstehende farblose Uroporphyrinogen III wird durch die Einfhrung weiterer Doppelbindungen und
Decarboxylierung zu Protoporphyrin IX, das nun ein durchkonjugiertes System von Doppelbindungen aufweist und daher die
typische rote Farbe zeigt. Die Seitenketten sind mit zwei Ausnahmen nicht mehr polar und erlauben die Einbettung des Hms
ins apolare Innere von Proteinen. Zum Schluss baut ein besonderes Enzym, die Ferrochelatase, Fe2+ als Zentralatom in den
Porphyrinring ein. Das damit entstandene Hm b findet sich im Hmoglobin, Myoglobin und manchen Oxidoreduktasen, wo
es nichtkovalent ans Protein gebunden ist
(Fe2+) entsteht, wirkt nicht nur als allosterischer

Inhibitor der Synthase, sondern hemmt auch die
Transkription des Gens dieses Enzyms: eine gleich
doppelt wirksame Rckkoppelungshemmung! Beim
Menschen wird die Synthase mit einer Halbwertszeit von nur 80min umgesetzt. Hmatin hlt zudem
die Translation von Globin-mRNA in Gang (Abschn.11.3). Die gegensinnige Regulation stimmt die
Synthesegeschwindigkeiten von Hm und Globin
aufeinander ab.
Hereditre Strungen der Porphyrinsynthese

fhren zu schweren Krankheiten Bei Enzymde-
245
18.7 Synthese von Kreatin und Porphyrinen aus Aminosuren
fekten im Syntheseweg der Porphyrine hufen sich

Zwischen- und Nebenprodukte an, aus denen durch
Oxidationsreaktionen weitere Porphyrine entstehen.
Diese Porphyrine sind, wie das ProtoporphyrinIX,
rote und rot-fluoreszierende Farbstoffe, die photoaktivierbar sind und photochemische Prozesse
auslsen knnen. Die ausgeschiedenen Porphyrine
frben den Urin rot.
Die erythropoetische Porphyrie beruht auf
einer fehlgeleiteten Porphyrinsynthese in den Erythroblasten, den Vorluferzellen der Erythrozyten.
Nicht verwendbare Oxidationsprodukte von Porphobilinogen hufen sich an und lagern sich in der
Haut ab. Die Haut wird lichtempfindlich: Photochemische Prozesse bilden Sauerstoffradikale, die
Hautgeschwre und Hautnarben zur Folge haben.
Bei der hepatischen Porphyrie stehen episodische
Bauchbeschwerden (die Patienten werden bei unklarer Diagnose oft operiert) sowie neurologische
und psychische Strungen im Vordergrund.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517046-0
18.1 Abbau von Proteinen
18.2 Abbau der Aminosuren:
Weg des Stickstoffs
18.3 Abbau der Aminosuren:
Weg des Kohlenstoffs
18.4 Strungen im Abbau von Aminosuren
18.5 Synthese der Aminosuren
18.6 C1-Stoffwechsel
18.7 Synthese von Kreatin und Porphyrinen
aus Aminosuren
18
247
Stoffwechsel der Purinund Pyrimidinnucleotide

19.1
Synthese der Purinnucleotide; Wiederverwertung

von Purinbasen248
19.2
Synthese der Pyrimidinnucleotide; Wiederverwertung

von Pyrimidinnucleosiden250
19.3
Regulation der Nucleotidsynthese 251
19.4
Synthese der Desoxyribonucleotide 251
19.5
Abbau der Nucleinsuren und Nucleotide 255

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Kapitel 19 Stoffwechsel der Purin- und Pyrimidinnucleotide
Alle Gewebe synthetisieren dauernd Ribonucleotide

als Bausteine der RNA. Desoxyribonucleotide werden in geringerer Menge bentigt, da DNA nur vor
der Zellteilung und zu Reparaturzwecken synthetisiert wird. Die Zellen in Darmmucosa, Haut und
Knochenmark erneuern sich fortlaufend, hingegen
teilen sich die Zellen in Gehirn, Muskulatur, Knochen und Knorpel nur selten.
Purin- und Pyrimidinnucleotide werden entweder aus kleineren Vorstufen de novo synthetisiert
oder aus Purinbasen und Pyrimidinnucleosiden,
welche vom Nucleinsurenabbau stammen, wieder aufgebaut (Wiederverwertungsweg, Salvage
pathway).
Inhibitoren diverser Schritte der Purin- und
Pyrimidinsynthese werden als Bakteriostatika oder
Zytostatika eingesetzt: Sulfonamide hemmen die
Synthese der Folsure in Bakterien; das Zytostatikum Fluorouracil wird zu Fluoro-dUMP umgesetzt,
welches die Thymidylat-Synthase hemmt; Folsureantagonisten hemmen die Dihydrofolat-Reduktase
und werden als Bakteriostatika und Zytostatika verwendet.
berschssige Nucleotide werden abgebaut.
Die Ribose wird als Ribosephosphat freigesetzt; die
Pyrimidinbasen werden zu Ammoniak und CO2 abgebaut, whrend die Purinbasen je nach Spezies als
Harnsure oder Allantoin im Urin ausgeschieden
werden. Die schlecht wasserlsliche Harnsure
und ihr Natriumsalz (Natriumurat) fallen bei hheren Konzentrationen leicht aus: Harnsteine und
Gicht (Ablagerung von Natriumuratkristallen in
gewissen Geweben) knnen die Folgen sein.
19.1
phosphat (PRDP), worauf der Purinring Atom

um Atom aufgebaut und danach geschlossen wird
(.Abb.19.1). Pro mol Nucleotid werden 6mol
energiereicher Phosphatbindungen verbraucht.
Der komplizierte Syntheseweg die Atome des heterozyklischen Ringsystems stammen aus fnf verschiedenen Quellen zeigt die wichtige Rolle von
Aminosuren bei der Biosynthese stickstoffhaltiger
Verbindungen (Die Zahlen bezeichnen die einzelnen Additionsschritte in .Abb.19.1):
AMP und GMP werden aus IMP in weiteren energieverbrauchenden Reaktionen gebildet (.Abb.19.2).
Basenspezifische Nucleosidmonophosphat-Kinasen
produzieren daraus unter ATP-Verbrauch die entsprechenden Nucleosiddiphosphate:
Die Triphosphate werden durch eine unspezifische

Nucleosiddiphosphat-Kinase gebildet, die weder
zwischen den verschiedenen Basen noch zwischen
Ribo- und Desoxyribonucleotiden unterscheidet (N
und M bedeuten irgendein Nucleosid):
Synthese der Purinnucleotide;

Wiederverwertung von
Purinbasen
Ein erwachsener Mensch synthetisiert etwa 500mg

neuer Purin- und Pyrimidinnucleotide pro Tag; die
Wiederverwertung von Purinbasen und Pyrimidinnucleosiden aus dem Abbau von Nucleinsuren und
Nucleotiden liefert etwa zehnmal mehr.
Die heterozyklischen Ringe der Purinnucleotide werden vom Pentosephosphatrest

ausgehend aufgebaut Zunchst wird Ribo-
se-5-phosphat aktiviert zu 5-Phosphoribosyl-1-di-
Wiederverwertung der Purinbasen hilft Energie

sparen Rezyklieren der beim Abbau von Nuclein-
suren und Nucleotiden anfallenden Purinbasen

(Rcklauf bis zu 90%!) erbrigt deren energieaufwndige de-novo-Synthese. Wie bei der Neusynthese wird hierzu 5-Phosphoribosyl-1-diphosphat
(PRDP, die aktivierte Form von Ribose-5-phosphat)
verwendet:
249
19.1 Synthese der Purinnucleotide; Wiederverwertung von Purinbasen
19
.. Abb.19.1 De-novo-Synthese von Purinnucleotiden. An 5-Phosphoribosyl-1-diphosphat (PRDP), der aktivierten Form von
Ribose-5-phosphat, wird die Diphosphatgruppe stereospezifisch (-Anomer) durch die Amidgruppe von Glutamin ersetzt.
Darauf wird Glycin mit ATP aktiviert und ber eine Amidbindung angekoppelt. Im Folgenden wird Atom um Atom hinzugefgt
und der Fnfring und darauf der Sechsring aufgebaut. Die C-Atome stammen aus Glycin, Formyl-FH4 und CO2; die N-Atome
werden durch Glutamin (2x), Glycin und Aspartat geliefert. Das Endprodukt ist das Nucleotid Inosinmonophosphat (IMP); die
entsprechende Purinbase, 6-Hydroxypurin, wird als Hypoxanthin bezeichnet
In extrahepatischen Geweben wird der grte Teil

der Purinnucleotide ber den Wiederverwertungsweg gewonnen. Ein Ausfall der HGPRT hat daher
schwerwiegende Konsequenzen fr die Gehirnentwicklung (Abschn.19.5).
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.. Abb.19.2 Bildung von AMP und GMP aus IMP. Zur Synthese von AMP wird die Hydroxylgruppe in Stellung6 der tautomeren
Form von IMP durch die Aminogruppe von Aspartat ersetzt, dabei entsteht Fumarat (hnlich wie bei Schritt6 in .Abb.19.1
und bei der Harnstoffsynthese, .Abb.18.3). Zur Synthese von GMP wird in Stellung2 eine Hydroxylgruppe eingefhrt, die
darauf durch eine Aminogruppe ersetzt wird
19.2 Synthese
der Pyrimidinnucleotide;
Wiederverwertung
von Pyrimidinnucleosiden
Aminosuren sind auch an der Pyrimidinsynthese beteiligt Im Unterschied zur Synthese
der Purinnucleotide wird zunchst der N-haltige

Ring gebildet, der anschlieend an Ribosephosphat
gekoppelt wird. Der Pyrimidinring wird aus der
Amidgruppe von Glutamin, CO2 und Aspartat
gebildet (.Abb.19.3). Darauf wird unter Verwendung von aktiviertem Ribose-5-phosphat
ein Mononucleotid produziert, welches zu UMP
decarboxyliert wird. UMP wird unter Verwendung
von ATP zu UDP und UTP phosphoryliert. Trans
amidierung mit Glutamin ersetzt die Hydroxylgruppe von UTP durch eine Aminogruppe und
ergibt CTP:
Pyrimidinnucleoside werden wiederverwertet
Im Unterschied zu den Purinnucleotiden werden

bei den Pyrimidinnucleotiden nicht die Basen, sondern die beim Abbau anfallenden Pyrimidinnucleoside rezykliert:
251
19.4 Synthese der Desoxyribonucleotide
19
19.3 Regulation
der Nucleotidsynthese
Rckkoppelungsmechanismen regulieren die

Synthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden
Fr eine bedarfsgerechte Produktion von Purinnucleotiden (Syntheseweg: .Abb.19.1) sorgen
Rckkoppelungshemmungen auf mehreren Stufen

kombiniert mit einer Rckkoppelungsaktivierung
bers Kreuz: GTP aktiviert die Synthese von ATP
und ATP aktiviert die Synthese von GTP; die kreuz
weise Abhngigkeit stimmt die Synthesen von ATP
und GTP aufeinander ab:
Die allosterische Aktivierung des ersten Schritts

durch PRDP (5-Phosphoribosyldiphosphat), die
aktivierte Form von Ribose-5-phosphat, die fr die
Synthese von Purinnucleotiden (.Abb.19.1) und
auch von Pyrimidinnucleotiden (.Abb.19.3) bentigt wird, stimmt die Produktion von Purin- und
Pyrimidinnucleotiden aufeinander ab. Wie im ersten Schema gezeigt, wird die Synthese von PRDP
gedrosselt, sobald ausreichend Purinnucleotide vorhanden sind. Herabgesetzte Produktion von PRDP
hat verringerte Aktivierung, d.h. Verlangsamung
der Synthese von Pyrimidinnucleotiden zur Folge.
Da aus UTP sowohl CTP wie auch dTTP (s. unten)
entstehen, ist deren Synthese in diesen Regulationsmechanismus eingeschlossen.
19.4 Synthese
der Desoxyribonucleotide
Eine Rckkoppelungshemmung des ersten Schritts

(Carbamoylphosphat-Synthase) durch das Endprodukt UTP reguliert die Synthese der Pyrimidinnucleotide bei Eukaryonten. Bei Prokaryonten wird
die Aspartat-Carbamoyl-Transferase durch CTP
ber eine allosterische Rckkoppelungshemmung
reguliert:
Zur Synthese von DNA werden dATP, dGTP, dCTP

und dTTP bentigt. Diese Desoxyribonucleotide
entstehen durch reduktive Entfernung der Hydroxylgruppe an C2 der Ribonucleotide.
Die Ribonucleotide werden ausnahmslos

auf der Stufe der Ribonucleosiddiphosphate
reduziert Die Reduktion in der 2-Position des
Riboserests erfolgt fr die Purin- und Pyrimidinnucleosiddiphosphate auf die gleiche Weise: eine
252
Radikalreaktion mit Thioredoxin, einem kleinen

Protein (100Aminosurereste) mit zwei Sulfhydrylgruppen, als Reduktionsmittel (.Abb.19.4).
Die Ribonucleosiddiphosphat-Reduktase (Ribonucleotid-Reduktase) wird allosterisch reguliert.
Der wichtigste allosterische Rckkoppelungsinhibitor ist dATP, aber auch die anderen dNTPs sowie
ATP sind wirksam; durch Rckkoppelungshemmung und durch Modulation der Substratspezifitt
des Enzyms sorgen sie fr ein ausgewogenes Mengenverhltnis der verschiedenen dNTPs.
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Desoxythymidinmonophosphat (dTMP) entsteht aus dUMP In der DNA kommt Thymin
(5-Methyluracil) anstelle von Uracil vor. Die Synthese

der Desoxythymidinnucleotide geht von dUDP aus,
das zu dUTP phosphoryliert wird, woraus dUMP
durch hydrolytische Abspaltung von PPi entsteht:
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.. Abb.19.3 De-novo-Synthese von Pyrimidinnucleotiden.

Aus Hydrogencarbonat und der Amidgruppe von Glutamin
wird Carbamoylphosphat gebildet, das zusammen mit
Aspartat die Atome zum Aufbau des Pyrimidinrings liefert.
Die im Cytosol vorkommende Carbamoylphosphat-Synthase
II verwendet die Amidgruppe von Glutamin zur Synthese
von Carbamoylphosphat, whrend das mitochondriale
Isoenzym, die an der Harnstoffsynthese beteiligte Carbamoylphosphat-Synthase I, hierzu NHC
4 bentigt. Nach dem
Ringschluss wird Ribose-5-phosphat aus PRDP N-glykosidisch
angekoppelt. UMP wird zu UTP phosphoryliert, woraus die
weiteren bentigten Pyrimidinnucleotide gebildet werden.
Bei Eukaryonten wird die Carbamoylphosphat-Synthase II
und bei Prokaryonten die Aspartat-Carbamoyl-Transferase
durch allosterische Rckkoppelungshemmung reguliert
Die C1-Einheit fr die Methylierung von dUMP zu

dTMP stammt von N5, N10-Methylentetrahydrofolat.
Die Methylengruppe muss dabei zur Methylgruppe
reduziert werden. Methylen-FH4 fungiert in dieser durch die Thymidylat-Synthase katalysierten
Reaktion nicht nur als C1-Lieferant sondern auch
als Reduktionsmittel: FH4 wird zu FH2 (Dihydrofolat) oxidiert. FH2 kann im Gegensatz zu FH4 keine
C1-Einheiten bertragen. Die Dihydrofolat-Reduktase katalysiert die Rckgewinnung von FH4
aus FH2 mit NADPH als Reduktionsmittel.
Warum Methylierung von dUMP ?
Warum wird dUMP und nicht dUDP oder dUTP
methyliert? Der energieverbrauchende Umweg ber das Monophosphat verhindert, dass
die unspezifische Nucleosiddiphosphatkinase
dUDP zu dUTP phosphoryliert. Da die DNA-Polymerase nur ungengend zwischen dTTP und
253
.. Abb.19.4 Reduktion von

Ribonucleosiddiphosphaten
zu 2-Desoxyribonucleosiddiphosphaten. In einer komplexen
Radikalreaktion, an der ein Eisenzentrum der Ribonucleosiddiphosphat-Reduktase (Ribonucleotid-Reduktase) beteiligt ist, wird
die Hydroxylgruppe an C2 durch
ein Wasserstoffatom ersetzt
Ribon
Ribonucleosid
ribo
dUTP unterscheidet, knnte das Vorhandensein von dUTP in der Zelle dazu fhren, dass
dieses Nucleotid flschlicherweise in die DNA
eingebaut wrde.

Inhibitoren der Synthese von Folsure, dTMP
und Purinnucleotiden hemmen das Zellwachstum Zellen, die sich rasch teilen, sind auf einen
ausreichenden Nachschub von Purinnucleotiden

und von dTTP, einem Pyrimidinnucleotid, zur
Synthese von RNA und DNA angewiesen. Die Synthese beider Nucleinsurekomponenten ist von FH4
abhngig. Hemmstoffe der Synthese von Folsure,
der Thymidylat-Synthase und der Dihydrofolat-Reduktase werden als Bakteriostatika (Hemmer des
Bakterienwachstums) bei bakteriellen Infektionskrankheiten und als Zytostatika (Hemmer des Zellwachstums) bei gewissen Krebsformen eingesetzt
(.Abb.19.5).
Zytostatika
Bei einer Chemotherapie mit Zytostatika werden vorwiegend die Zellen mit hoher Teilungsrate betroffen: Krebszellen, daneben aber auch
die Zellen des Knochenmarks (eine massive
Abnahme der Zahl der weien Blutzellen ist zu
vermeiden), des Immunsystems, der Darmschleimhaut und der Haarwurzeln.
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.. Abb.19.5 Hemmstoffe der Synthese von Folsure und dTMP. Das untenstehende Reaktionsschema zeigt die Zielenzyme der
wichtigsten Inhibitoren der Synthese von dTMP.
Sulfonamide (Sulfanilamide) sind Analoge der para-Aminobenzoesure, einer Vorstufe der Folsure (Abschn.18.6). Sie
hemmen die Synthese der Folsure in Bakterien (im Schema nicht aufgefhrt) und werden, zumeist in Kombination mit einem
Folsureantagonisten, als Bakteriostatika verwendet. Mensch und Tiere knnen Folsure nicht synthetisieren: Folsure ist ein
Vitamin.
Fluorouracil wird in den Zellen in Fluoro-dUMP umgewandelt, welches die Thymidylat-Synthase nach dem Modus eines mechanismusaktivierten Inhibitors (kcat-Inhibitors) hemmt. Fluorouracil wird als Zytostatikum verwendet.
Folsureantagonisten sind Analoge der Folsure, die als kompetitive Inhibitoren mit sehr hoher Affinitt an die Dihydrofolat-Reduktase binden (Dissoziationskonstante des Enzym-Inhibitor-Komplexes Ki109M!). Folsureantagonisten werden als
Zytostatika und Bakteriostatika verwendet
255
19.5 Abbau der Nucleinsuren und Nucleotide
19.5
Abbau der Nucleinsuren

und Nucleotide
Purin- und Pyrimidinbasen aus der Nahrung sowie

berschssige Nucleotide aus abgebauter RNA (wenig aus DNA) werden dem Katabolismus zugefhrt.
Pyrimidinbasen werden wie Aminosuren unter
Energiegewinn abgebaut zu CO2, H2O und Ammoniak, das als Harnstoff ausgeschieden wird. Purinbasen hingegen kann der menschliche Organismus
nicht zu niedermolekularen Verbindungen zerlegen:
Sie werden hnlich wie Cholesterol lediglich in eine
Ausscheidungsform, in Harnsure oder Allantoin,
umgewandelt:
Harnsure ist extrem schlecht wasserlslich Beim
Abbau von Purinnucleotiden zu Harnsure wird zunchst vom Nucleosidmonophosphat der Phosphatrest hydrolytisch abgespalten, darauf wird die Pentose
phosphorolytisch entfernt und in zwei Oxidationsschritten die Harnsure produziert (.Abb.19.6).
Protonierte Harnsure (lat. acidum uricum; pKa=5,4)
ist extrem schlecht wasserlslich (Lslichkeitsgrenze
0,5mg/100mL); Urat, ihr Anion, ist etwas besser
lslich (6,4mg/100mL; 0,4mM). Die physiologische Konzentration von Natriumurat im Blutplasma
19
(0,250,3mM) liegt allerdings nur wenig unter der

Lslichkeitsgrenze. Das Lslichkeitsproblem der
Harnsure besteht nur bei Mensch, Menschenaffen und Neuweltaffen. Die anderen Suger besitzen
Uratoxidase und wandeln Harnsure zum weitaus
besser wasserlslichen Allantoin um (.Abb.19.6).
Strungen im Purinabbau verursachen eine

Reihe von Krankheiten Einer Form von schwerem
Immundefekt liegt ein kongenitaler Fehler im Purinabbau zugrunde. Ein Mangel an Adenosin-Desaminase fhrt zu einem Rckstau von Nucleotiden
(.Abb.19.6); die Konzentration von dATP kann

bei solchen Patienten bis auf das Fnfzigfache des
normalen Wertes ansteigen. Die Folge sind schwere
Strungen in der Regulation des Nucleotidstoffwechsels (Hemmung der Ribonucleosiddiphosphat-Reduktase; .Abb.19.4). Die sich daraus ergebende
mangelhafte DNA-Synthese uert sich als mangelhafte Entwicklung der B- und T-Lymphozyten.
Der Gicht, einer der hufigsten Stoffwechselkrankheiten, liegt eine erhhte Konzentration der
Harnsure zugrunde. Da die Konzentration von
Urat auch in den Geweben nur wenig unter der
Lslichkeitsgrenze liegt, fhrt schon eine verhltnismig geringe Erhhung der Konzentration zum
Ausfallen von Natriumuratkristallen. Die Kristalle
bilden sich intra- und extrazellulr in den Geweben (Knorpel, Sehnen) und der Synovialflssigkeit
(Gelenkschmiere) peripherer Gelenke (tiefere Temperaturen erleichtern Kristallisation). Dadurch ausgelste Entzndungsreaktionen verursachen akute
Schmerzattacken. Eine bevorzugte Lokalisation ist
das Grozehengrundgelenk (Podagra, Zipperlein).
Im chronischen Stadium kommt es zu irreversiblen
Schden der Nieren und der Gelenke.
Die Ursachen fr eine erhhte Harnsurekonzentration sind vielfltig. Mgliche Ursachen einer
primren Hyperurikmie sind:
berproduktion von Harnsure (bei einem Drittel der Patienten) wegen Defekt
im Wiederverwertungsweg der Purinbasen
(Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyl-Transferase, HGPRT),
Gesteigerte Biosynthese von Purinnucleotiden
aufgrund eines Defekts in der allosterischen
Hemmung durch AMP, GMP und IMP,
Hereditre Strung der Harnsureausscheidung durch die Nieren.
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Purinn
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Uratoxidase
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Sekundre Hyperurikmien ergeben sich als Folge

anderweitiger Strungen wie erhhtem Zellumsatz
bei Leukmien und hmolytischen Anmien, verringerter Harnsureausscheidung durch die Nieren
oder bermiger Zufuhr zellreicher Innereien (Leber, Niere, Thymus) mit der Nahrung.
Zur medikamentsen Behandlung der Hyper
urikmie dient Allopurinol. Dieses Strukturanalogon von Hypoxanthin hemmt die Xanthinoxidase
kompetitiv (.Abb.19.6). Als Folge werden anstelle
von Harnsure besser wasserlsliches Hypoxanthin
und Xanthin ausgeschieden.
19
Links auf
Springer Website:
027-6-1517047-0
19.1 Synthese der Purinnucleotide;
Wiederverwertung von Purinbasen
19.2 Synthese der Pyrimidinnucleotide; Wiederverwertung von Pyrimidinnucleosiden
19.3 Regulation der Nucleotidsynthese
Eine schwerwiegende Erbkrankheit, bei der verstrkt produzierte Harnsure zu Gicht fhrt, ist das
seltene Lesch-Nyhan-Syndrom (Syndrom: Symptomenkomplex). Ein Defekt der Hypoxanthin-Guanin-Phosphoriboxyl-Transferase (HGPRT; Abschn.19.1) schrnkt die Wiederverwertung der
Purinbasen ein. Die gestrte Entwicklung des Zentralnervensystems ist wahrscheinlich die Folge einer
ungengenden Versorgung der Zellen mit Purinnucleotiden.
.. Abb.19.6 Abbau von Purinnucleotiden (Ribo- und Desoxyribo-) zu Harnsure oder Allantoin. Die beiden durch die Xanthin
oxidase katalysierten Reaktionen liefern H2O2 und wegen teilweiser unvollstndiger Reduktion des Sauerstoffs auch das
Superoxidanion-Radikal O2. Wasserstoffperoxid und das Superoxidanion sind zellschdigende Produkte und werden durch besondere Enzyme unschdlich gemacht (Abschn.31.3). Die Uratoxidase (Uricase), welche die schlecht wasserlsliche Harnsure
durch Oxidation und Decarboxylierung in das weitaus besser lsliche Allantoin und weitere Produkte berfhrt, kommt bei den
meisten Sugern vor. Sie fehlt beim Menschen und einigen anderen Primaten. Ein genetischer Defekt der Adenosin-Desaminase
oder sehr selten der Purinnucleosid-Phosphorylase (blaue Querstriche) fhrt zu schwerer angeborener Immunschwche
259
Photosynthese
20.1
Chloroplasten260
20.2
Komponenten und Organisation

des Photosyntheseapparats261
20.3
Chlorophyll262
20.4
Lichtgetriebene Reduktion von NADP+

und Synthese von ATP 262
20.5
Synthese von Kohlenhydrat aus CO2266

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Kapitel 20Photosynthese
Phototrophe Organismen (Pflanzen, Algen, Cyanobakterien) benutzen Lichtenergie (E=h), um aus

CO2 und Wasser organische Substanzen, in erster
Linie Kohlenhydrate, aufzubauen. Von dieser Syntheseleistung abhngig sind auch die chemotrophen Organismen, die auf organische Nhrstoffe als
Energietrger und Baustoffe angewiesen sind. Die
Photosynthese liefert zudem den fr die oxidative
Phosphorylierung bentigten Luftsauerstoff.
Bei der Photosynthese werden Niedrigenergie-Elektronen aus H2O (hheres Redoxpotenzial)
auf CO2 bertragen unter Bildung von Kohlenhydrat (CH2O)n mit Hochenergie-Elektronen:
Photosynthese
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20.1 Chloroplasten
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nen, Protonen und Sauerstoffatome zerlegt und die

Elektronen durch Aufnahme von Lichtenergie auf
ein Energieniveau (mit stark negativem Redoxpotenzial) angehoben, das ausreicht, um NADP+ zu
reduzieren. An der Lichtanregung der Elektronen
zur Bildung von NADPH ist Chlorophyll beteiligt, ein grner Tetrapyrrol-Farbstoff hnlich dem
Hm, jedoch mit Mg2+ als Zentralion, welcher die
Lichtenergie einfngt. In Eukaryonten laufen die
Lichtreaktionen in besonderen Organellen ab, den
Chloroplasten.
NADPH ist ein gengend starkes Reduktionsmittel, um CO2 durch Reduktion an einem
organischen Akzeptor zu fixieren. Diese CO2-Assimilierung durch die Dunkelreaktionen ist lichtunabhngig; die beteiligten enzymatischen Reaktionen entsprechen zum Teil den nichtoxidativen
Abschnitten des Pentosephosphatwegs.
Die Photosynthese liefert Glucose entsprechend der

Nettogleichung
Lichtenergie
6 CO2 C 6 H2 O ! C6 H12 O6 C 6 O2 I

G0 D 2820 kJ mol1 :
Bilanzmig wird CO2 durch Wasser zu Kohlenhydrat reduziert; Lichtenergie ermglicht den photosynthetisierenden Zellen, das hierzu bentigte
NADPH und ATP bereitzustellen:
NADPH (.Abb.14.2) als Reduktionsmittel
mit negativem Redoxpotenzial, d.h. mit hoher
freier Energie,
ATP zum Antreiben gewisser Syntheseschritte.
Wasser ist ein zu schwaches Reduktionsmittel, um

CO2 zu reduzieren. In den Lichtreaktionen der
Photosynthese werden H2O-Molekle in Elektro-
Chloroplasten besitzen wie Mitochondrien eine

uere, permeable Membran und eine innere, protonenundurchlssige Membran. Ebenso verfgen
sie ber ein eigenes Restgenom, das einen geringen Teil ihrer Proteine codiert, und ber eine Proteinsynthesemaschinerie, die derjenigen von Prokaryonten entspricht: Chloroplasten sind wie die
Mitochondrien aus endosymbiontischen Bakterien
entstanden.
Die Chloroplasten enthalten Thylakoide, abgeplattete Membransckchen, die wie Mnzen aufeinander gestapelt sind und dadurch die Grana (lat.,
Krner) bilden. Die Grana sind miteinander ber
dnne Membrankanle verbunden.
261
20.2 Komponenten und Organisation des Photosyntheseapparats
20
(2x)
.. Abb.20.1 Die lichtabhngigen Reaktionen der Photosynthese. Durch Chlorophyll eingefangene Lichtenergie wird von
den PhotosystemenII (PS II) und I (PS I) benutzt, um H2O-Moleklen Elektronen zu entziehen und damit NADP+ zu reduzieren.
Diese Redoxreaktionen sind gekoppelt mit einer Erhhung der Protonenkonzentration im Lumen der Thylakoide. Drei in die
Thylakoidmembran eingelagerte Proteinkomplexe katalysieren diese Vorgnge. PS II spaltet Wasser in Elektronen, Protonen
und Sauerstoff; durch Licht angeregtes Chlorophyll bertrgt die Elektronen auf das niedermolekulare, in der Lipiddoppelschicht gelste Plastochinon (Q), das sie an den Cytochrom b6f(Cyt bf )-Komplex weitergibt. Der H+-Gradient wird hauptschlich
aus zwei Quellen gespeist: PS II, das bei der Wasserspaltung Protonen ins Thylakoidlumen abgibt, und der Cyt bf-Komplex, der
Protonen vom Chloroplastenstroma ins Thylakoidlumen pumpt (analog KomplexIII in der Atmungskette). Den Elektronentransport vom Cyt bf-Komplex zu PS I besorgt Plastocyanin (Pc), ein kleines Protein mit der gleichen Funktion wie Cytochrom cin
der Atmungskette. Eine weitere Anregung des Chlorophylls in PS I durch Licht ermglicht die Reduktion eines eisenhaltigen
Proteins, des Ferredoxins, dessen Fe2+-Form das Elektron zur Reduktion von NADP+ liefert
Der Chloroplastenraum auerhalb der Thylakoide

wird als Stroma, das Innere der Thylakoide als Lumen bezeichnet. Die Thylakoide entstehen durch
Abknospung der inneren Chloroplastenmembran:
Das Lumen der Thylakoide entspricht topologisch
dem Intermembranalraum der Chloroplasten. Das
lichteinfangende Chlorophyll befindet sich in der
Thylakoidmembran, wo auch die lichtgetriebenen
Elektronentransportvorgnge ablaufen (Lichtreaktionen). Im Stroma der Chloroplasten wird Kohlenhydrat aus CO2 und Wasser synthetisiert (Dunkelreaktionen). Der Ausdruck Dunkelreaktionen
bedeutet, dass sie lichtunabhngig sind; in der Natur
laufen die Dunkelreaktionen jedoch bei Licht ab, sobald die Lichtreaktionen das zur Kohlenhydratsynthese bentigte NADPH und ATP liefern.
20.2 Komponenten
und Organisation
des Photosyntheseapparats
Wie die Atmungskette besteht die Photosynthesemaschinerie aus groen membranstndigen Proteinkomplexen und kleineren beweglichen Elektronenbertrgern. In der Thylakoidmembran finden
sich in der Richtung des Elektronenflusses aufge-
fhrt drei Komplexe
: PhotosystemII (PS II),

Cytochromb6/f-Komplex (Cyt bf-Komplex) und PhotosystemI (PS I; .Abb.20.1). Die Nummerierung
entspricht der Reihenfolge, in welcher die beiden

Systeme entdeckt worden sind. Plastochinon (Q),
hnlich dem Ubichinon in der Atmungskette, bertrgt die Elektronen von PS II auf Cyt bf. Von dort
bringt Plastocyanin (Pc), ein kleines, wasserlsliches,
nicht in die Membran eingebettetes Protein, die Elektronen zu PS I. Das Kupferion des Pc wechselt dabei
zwischen dem Cu2+- und Cu+-Zustand. Ferredoxin,
ein eisenhaltiges Protein, ist an der bertragung der
Elektronen von PS I auf NADP+ beteiligt.
Die drei Komplexe PS I, Cyt bf und PS II vollbringen die folgende Nettoreaktion:
2 H2 O C 2 NADPC ! O2 C 2 NADPH C 2 HC
Das Einzigartige der Photosynthese ist, dass die
Energie zur Reduktion von NADP+ mit H2O dem
Licht entnommen wird. Zudem wird ein Teil der
eingefangenen Lichtenergie genutzt, um einen
Protonengradienten aufzubauen, aus dem, hnlich
wie bei der oxidativen Phosphorylierung, ATP gewonnen wird. Damit steht zur Verfgung, was zur
Synthese von Kohlenhydrat aus CO2 und H2O notwendig ist: NADPH und ATP.
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20.3 Chlorophyll
Grne Pflanzen verwenden Chlorophyll als Lichtrezeptor; photosynthetisierende Bakterien und

Algen benutzen andere Rezeptorfarbstoffe. Chlorophyll hat eine hnliche Struktur wie Hm (Abschn.15.2); jedoch ist das Zentralion im Tetrapyrrolring Mg2+ statt ein Eisenion und die Seitenketten
sind verschieden. Eine der Chlorophyll-Seitenketten eine ist hydrophobe Phytylgruppe, eine C16Kohlenwasserstoffkette mit 4Methylgruppen, die
ber eine Esterbindung mit dem Ringsystem verbunden ist:
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Die gelbrote Farbe des Herbstlaubes ist auf

Carotinoide zurckzufhren. Abbau des
Chlorophylls fhrt zum Sichtbarwerden der
Carotinoide.
Lichtgetriebene Reduktion von

NADP+ und Synthese von ATP
Die zwei Photosysteme sind in Serie geschaltet
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Bunt sind schon die Wlder
20.4
11
Die Lichtsammelkomplexe der Photosysteme

enthalten auer Chlorophyll auch Carotinoide als
zustzliche Lichtsammler. Carotinoide sind lange
Polyene; zahlreiche konjugierte Doppelbindungen
geben ihnen eine gelbrote Farbe (Abschn.6.4).
Die Carotinoide sind beteiligt an der Energiebertragung zum Reaktionszentrum. Auerdem fangen
sie Sauerstoffradikale ab, die bei den photochemischen Reaktionen entstehen.
Chlorophyll a (obige Struktur) und b (mit Formyl-
restCHO anstelle der blauen Methylgruppe), die

zusammen in Pflanzen vorkommen, absorbieren
aufgrund zahlreicher konjugierter Doppelbindungen intensiv im Rot- und Blaubereich (z.B. Chlorophyll a: 428=112 000M1cm1!); das Licht des dazwischen liegenden Grnbereichs wird reflektiert,
daher das Grn der Pflanzen.
Die Lichtsammelkomplexe von PS II und PS I
enthalten je einige hundert Chlorophyllmolekle.
Die allermeisten Chlorophyllmolekle nehmen
nicht direkt an den Photoreaktionen teil, sondern
dienen als lichtsammelnde Antennen: Sie werden
durch Photonen angeregt und bertragen die Energiequanten auf umgebende Chlorophyllmolekle.
Die Chlorophyllmolekle sind an Proteine gebunden und so angeordnet, dass sie anregende Quanten
(Excitonen) mit einer Ausbeute von nahezu 100%
an umgebende Chlorophyllmolekle weitergeben,
bis die Anregung ein Chlorophyll-Paar im Reaktionszentrum des PhotosystemsII erreicht (Chlorophyll P680, absorbiert Licht bis zu einer Wellenlnge von 680nm).
Die durch Serienschaltung der beiden Photosysteme

nutzbar gemachte Energie reicht aus, um NADP+
zu reduzieren und zudem ATP zu synthetisieren (.Abb.20.2). Das Chlorophyllpaar im Reak
tionszentrum des PhotosystemsII (P680+, d.h. in
oxidierter Form) bernimmt nacheinander die vier
Elektronen, die bei der Spaltung von 2H2O in 4H+
und O2 im Wasserspaltungszentrum (WSZ) frei
werden. Das aufgenommene Elektron ist ber beide
Molekle des 680-Paars delokalisiert. Im Dunkeln,
ohne Anregung durch Licht, kann Chlorophyll
P680 das aufgenommene Elektron nicht weitergeben. Wird es hingegen durch ein Exziton von den
Antennen-Chlorophyllmoleklen angeregt, hat es
eine starke Tendenz, das Elektron auf einen Akzeptor zu bertragen: Angeregtes Chlorophyll P680 reduziert Phophytin, ein dem Chlorophyll hnliches
Pigment (ohne Mg2+) des PS II.
Zwei reduzierte Phophytinmolekle bertragen darauf je ein Elektron auf Plastochinon (Q), den
lipidlslichen Elektronenbertrger zwischen PS II
und dem Cyt bf-Komplex:
263
20.4 Lichtgetriebene Reduktion von NADP+ und Synthese von ATP
20
Redoxpotenzial (v)
(2x)
.. Abb.20.2 Der Elektronenfluss von H2O zu NADP+ bei der Photosynthese. Ein Photon aktiviert ber den Lichtsammelkomplex
von PhotosystemII (PS II) die reduzierte Form von Chlorophyll P680 in dessen Reaktionszentrum. Im angeregten Zustand gibt
P680 ein Elektron an Phophytin (Ph), ein Chlorophyll ohne Zentralatom, ab. ber Plastochinon (Q), den Cytochrom b6f (Cyt
bf )-Komplex und Plastocyanin (Pc) gelangt das Elektron zu P700+, der oxidierten Form des Chlorophylls im Reaktionszentrum von
PS I, welches damit zu P700 reduziert wird. Anregung von P700 durch ein Photon ermglicht die Weitergabe des Elektrons ber
eine Kette von Elektronenbertrgern auf Ferredoxin (Fd). Die Ferredoxin-NADP+-Reduktase bertrgt das Elektron auf NADP+. Die
Passage des Elektrons durch den Cyt bf-Komplex ist gekoppelt mit einer Protonenpumpe, welche das Thylakoidlumen ansuert.
Der Protonengradient dient zur Synthese von ATP. Die von angeregten P680-Moleklen weitergegebenen Elektronen werden
durch Elektronen aus H2O ersetzt. Das Wasserspaltungszentrum (WSZ) von PS II enthlt ein Manganzentrum, das ber Redoxreaktionen von Mangan-Ionen (Mn4+ bis Mn2+) Elektronen aus H2O entfernt und an P680+ (die oxidierte Form von P680) weitergibt. Die
Entfernung von Elektronen aus H2O fhrt zur Bildung von O2 und zur Abgabe von Protonen ins Thylakoidlumen
,
,
Der Cyt bf-Komplex enthlt zwei Cytochrome und

ein Eisen-Schwefel-Zentrum (Abschn.15.2) und
berfhrt, energetisch gekoppelt mit aktivem Protonentransport ins Thylakoidlumen, zwei Elek-
tronen von Plastochinol (QH2) auf Plastocyanin

(Pc). Plastocyanin ist ein Kupferproteinkomplex;
das aufgenommene Elektron reduziert Cu2+ zu
Cu+. Das Elektron wird an Chlorophyll P700+ des
PS I weitergegeben. Sobald P700 durch ein Exziton aus den Antennen-Chlorophyllmoleklen
angeregt wird, gibt es das vom Plastocyanin bernommene Elektron weiter an eine kurze Reihe
von hier nicht weiter beschriebenen Elektronenbertrgern. Am Ende reduziert das Elektron das
Eisen-Schwefel-Zentrum von Ferredoxin, einem
kleinen (100Aminosurereste), wasserlslichen
Protein im Chloroplastenstroma. Die FerredoxinNADP+-Reduktase, ein FAD-haltiges Enzym, ber-
264
trgt zwei Elektronen von reduziertem Ferredoxin

auf NADP+:
ATP wird wie bei der oxidativen Phosphorylierung ber einen chemiosmotischen Mechanismus gewonnen Der Cyt bf-Komplex, der von
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lekl, 2NADPH- und 3ATP-Molekle zu produzieren. (E=h=hc/; rotes Licht mit einer Wellenlnge von 700nm hat eine Energie von 171kJ/
mol Photonen).
Wasserspaltungszentrum liefert Elektronen Das
Elektron, welches Ferredoxin reduziert, stammt

ursprnglich aus exzitonangeregtem Chlorophyll
P680 des PS II (.Abb.20.2). Aus P680 entsteht
dabei P680+, das ein neues Elektron erhalten muss,
damit ein weiteres Exziton die Kette von Redoxreaktionen erneut starten kann. Beim nachgeschalteten PS I spielt sich eine analoge Redoxreaktion mit
Chlorophyll P700+ und reduziertem Plastocyanin
ab: P700++Pc(Cu+)P700+Pc (Cu2+).
Das Elektron zur Reduktion von Chlorophyll
P680+ wird vom Wasserspaltungszentrum des PS
II (WSZ in .Abb.20.2) geliefert. Das WSZ ist ein
Mangan-Ionen Proteinkomplex, der Elektronen aus
Wasser ber Redoxreaktionen der Mn-Ionen (Mn4+
bis Mn2+) an P680+ weiterleitet und damit P680 fr
eine neue Runde lichtgetriebener Redoxreaktionen
bereitstellt. P680+ ist ein sehr starkes Oxidationsmittel mit einer dermaen starken Tendenz (strker
als Sauerstoff), ein Elektron zu bernehmen, dass es
ber den Mangankomplex sogar dem Wasser Elektronen entziehen kann:
2 H2 O C 4 P680C ! 4 HC C O2 C 4 P680
Die 4Protonen werden ins Thylakoidlumen freigegeben. Dabei ist es sehr wichtig, dass alle 4Elektronen rasch und mglichst gleichzeitig von
P680+-Moleklen aufgenommen werden, um die
Bildung unvollstndig oxidierter Sauerstoffderivate zu vermeiden. Das analoge Problem, wenn
auch in entgegengesetzter Richtung, besteht bei der
Atmungskette; dort gilt es, O2 mglichst vollstndig zu H2O reduzieren, damit ein Minimum unvollstndig reduzierter Sauerstoffderivate entsteht
(Abschn.15.2 und 31.3).
Die Stchiometrie der Photosynthese ist
schwierig abzuschtzen. Es wird angenommen, dass
die Energie von 8Photonen gengt, um 1O2-Mo-
QH2 Reduktionsquivalente bernimmt, um seinerseits Plastocyanin zu reduzieren, ist dem KomplexIII der Atmungskette hnlich, der ebenfalls
durch QH2 reduziert wird, um danach Cytochrom
c zu reduzieren (Abschn.15.2). Und wie KomplexIII verwendet auch der Cyt bf-Komplex die
beim Elektronentransport frei werdende Energie,
um Protonen durch die Membran zu pumpen. Die
ins Thylakoidlumen gepumpten Protonen zusammen mit den Protonen aus dem Wasserspaltungsapparat des PhotosystemsII (.Abb.20.2), suern
das Thylakoidlumen an (pH5). Der pH-Unterschied zwischen Thylakoidlumen und Stroma wird
zudem verstrkt durch das Proton, welches bei der
Reduktion von NADP+ zu NADPH im Stroma
verbraucht wird. Der Protonengradient wird genutzt, um ATP aus ADP und Pi zu synthetisieren
(.Abb.20.3).
Vergleich Thylakoide und Mitochondrien
In den Mitochondrien werden die Protonen
von innen nach auen gepumpt. In den Thylakoiden erfolgt der Transport in der entgegengesetzten Richtung. Bei diesem Vergleich ist
jedoch zu beachten, dass die Thylakoide durch
Einstlpung und Abschnrung der inneren
Chloroplastenmembran entstehen.
Sobald mehr reduziertes Ferredoxin vorliegt, als

zur Reduktion des anfallenden NADP+ bentigt
wird, bergibt Ferredoxin sein Elektron an den Cyt
bf-Komplex statt an NADP+. Der dadurch erhhte
Elektronenfluss durch den Cyt bf-Komplex erhht
die Leistung der Protonenpumpe und damit die
ATP-Synthese. Diese zustzliche Produktion von
ATP wird durch den zyklischen, ber PS I lichtgetriebenen Elektronenfluss (.Abb.20.2) in Gang
gehalten und daher als zyklische Photophosphorylierung bezeichnet.
265
20.4 Lichtgetriebene Reduktion von NADP+ und Synthese von ATP
20
(2x)
.. Abb.20.3 Synthese von ATP durch die ATP-Synthase in der Thylakoidmembran. Die Lichtreaktionen von PS II und PS I
fhren zu einem Konzentrationsunterschied von H+ zwischen Thylakoidlumen (pH5) und Chloroplastenstroma (pH8) mit
einem entsprechenden elektrochemischen Potenzial. Der Rckfluss der Protonen ins Stroma treibt wie bei der oxidativen
Phosphorylierung eine molekulare Maschine mit Rotor und Stator, die ATP synthetisiert (chemiosmotischer Mechanismus;
Abschn.15.3)
1
2
3
4
266
20.5
Synthese von Kohlenhydrat

aus CO2
Das erste Produkt der CO2-Fixierung ist 3-Phosphoglycerat Das auf der Erde wohl in grter
Menge vorkommende Protein, die Ribulose-1,5-bisphosphat-Carboxylase/Oxygenase, kurz Rubisco,
katalysiert die Fixierung von CO2:
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Die Spaltung der C2-C3-Bindung ist kombiniert

mit einer Carboxylierung an C2: Aus einer Pentose
(C5) und CO2 entstehen 2Triosen (2C3). Pflanzen,
die CO2 ausschlielich ber diese C3-Photosynthese
assimilieren, werden als C3-Pflanzen bezeichnet.
Dazu gehren die meisten Kulturpflanzen gemigter Klimazonen: Getreidearten, Kartoffeln, Leguminosen.
Der kleinere Teil des 3-Phosphoglycerats wird
aus den Chloroplasten ins Cytoplasma exportiert
(Antiport mit Pi) und dort zur Synthese von Glucose (Gluconeogenese, Abschn.16.1) und Strke
verwendet; der grere Teil des 3-Phosphoglycerats
wird im Calvin-Zyklus zur Resynthese von Ribulose-1,5-bisphosphat verbraucht (.Abb.20.4). Die
Reaktionen des Zyklus werden durch eine Reihe von
Enzymen im Chloroplastenstroma, darunter die
Aldolase (Enzym der Glykolyse) und die Transketolase (Enzym des Pentosephosphatwegs), katalysiert.
Die Bilanzgleichung des Calvin-Zyklus ist:
3 CO2 C 9 ATP C 6 NADPH

#
Glycerinaldehyd-3-P C 9 ADP C 8 Pi
C 6 NADPC :
Wie der Name andeutet, reagiert die Ribulose-1,5-P2-Carboxylase/Oxygenase nicht nur mit
CO2, sondern auch mit O2. Die Reaktion mit Sauerstoff spaltet Ribulose-1,5-P2, so dass nur ein Molekl
3-Phosphoglycerat produziert wird. Das zweite Produkt, 2-Phosphoglycolat (C2), geht dem Calvin-Zyklus verloren und wird ber hier nicht dargestellte
Reaktionen als Glycin in den Stoffwechsel einschleust. Die mit der Photosynthese kompetierende
Reaktion von Rubisco mit O2, wird als Photorespiration bezeichnet. Unter bestimmten Bedingungen
verringert sie die Photosynthese um fast ein Drittel.
Ihre Bedeutung ist unklar; mglicherweise ist sie ein
nicht eliminierbares berbleibsel aus den Zeiten, da
die O2-Konzentration auf der Erde noch gering war.
In einigen Pflanzen wie Mais und Zuckerrohr,
die bei hoher Lichtintensitt und Temperatur wachsen, findet sich zustzlich zur Rubisco-Reaktion
eine Variante der Photosynthese, welche den Anteil
der Photorespiration verringert: Zur Assimilation
von CO2 wird nicht nur Ribulose-1,5-P2 verwendet,
sondern auch Phosphoenolpyruvat (PEP) zu Oxal
acetat carboxyliert:
Oxalacetat ist eine C4-Verbindung, der Vorgang

wird daher C4-Photosynthese genannt und die entsprechenden Pflanzen werden als C4-Pflanzen bezeichnet. Die weiteren Schritte sind aus .Abb.20.5
ersichtlich. In den Gefbndelscheidenzellen oxidiert und decarboxyliert das Malatenzym (auch an
Fettsuresynthese beteiligt; Abschn.17.2) Malat
zu Pyruvat und CO2. Dadurch wird die CO2-Konzentration in den Zellen 10- bis 50-mal hher
267
20.5 Synthese von Kohlenhydrat aus CO2
.. Abb.20.4Calvin-Zyklus.
Rubisco fixiert CO2; die Synthese von Glucose, Strke
oder anderen Reservekohlenhydraten bentigt ATP
und NADPH; die zyklische
Reaktionsfolge regeneriert
Ribulose-1,5-bisphosphat,
den Akzeptor von CO2. Das
Schema des im Chloroplastenstroma ablaufenden
Zyklus ist vereinfacht,
verschiedene Zwischenprodukte sind weggelassen
.. Abb.20.5C4-Pflanzen. Der besondere Stoffwechselweg erhht

die Konzentration von CO2 in den
Gefbndelscheidenzellen und
verbessert dadurch bei der Rubisco-Reaktion die Bedingungen fr
die Photosynthese auf Kosten der
Photorespiration
Mesophyllzelle
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als in der Atmosphre. Bei dieser stark erhhten

CO2-Konzentration bertrifft die Photosynthese
durch Rubisco (Reaktion mit CO2) die Photorespiration (Reaktion mit O2) bei weitem. Das bei der
Decarboxylierung entstandene Pyruvat wird in Mesophyllzellen unter Verbrauch von zwei energiereichen Phosphatbindungen in Phosphoenolpyruvat
zurckverwandelt. Der Calvin-Zyklus luft gleich
wie in C3-Pflanzen ab . In verschiedenen C4-Pflanzen finden sich Varianten der C4-Photosynthese; bei
allen geht es jedoch darum, die CO2-Konzentration
in den Gefbndelscheidenzellen anzuheben, um
bei der Rubisco-Reaktion die Photosynthese auf
Kosten der Photorespiration zu frdern.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517048-0
20.1 Chloroplasten
20.2 Komponenten und Organisation des
Photosynthese-Apparats
20.3 Chlorophyll
20.4 Lichtgetriebene Reduktion von NADP+
und Synthese von ATP
20.5 Synthese von Kohlenhydrat aus CO2
269
Besonderheiten
des Stoffwechsels
von Pflanzen und Bakterien
21.1
Stickstoff-Assimilation aus N2 und Nitrat 270
21.2
Schwefel-Assimilation aus Sulfat 272
21.3
Transport- und Speicherformenvon Kohlenhydraten,

Lipiden und Proteinen bei Pflanzen 273
21.4
Sekundrstoffwechsel der Pflanzen 274
21.5
Phytohormone276
21.6
Stoffwechselwege in Bakterien 277

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20
Kapitel 21 Besonderheiten des Stoffwechsels von Pflanzen und Bakterien
Pflanzen beziehen Energie aus dem Sonnenlicht

und nehmen smtliche Baustoffe in anorganischer
Form auf: Kohlenstoff als CO2, Stickstoff als Nitrat
oder Ammoniak und Schwefel als Sulfat. Pflanzen
sind photoautotroph.
Die Photosynthese in Pflanzen, Algen und gewissen Bakterien versorgt alle anderen Lebewesen
mit organisch gebundenem Kohlenstoff. Bodenbakterien assimilieren N2 aus der Luft, und PflanC
zen assimilieren NO
3 und NH4 aus dem Boden,
wodurch sie die Biosphre mit organisch fixiertem
Stickstoff versorgen. Dasselbe gilt fr die Assimilation von Schwefel aus SO2
4 durch Bakterien und
Pflanzen. Stickstoff und Schwefel werden auf gleiche
Weise assimiliert: Reduktion zu NH3 bzw. H2S, danach Einbau in Aminosuren und Synthese weiterer
N-haltiger und S-haltiger Verbindungen.
Definition
Assimilation
Aufnahme einfacher anorganischer Verbindungen zur Synthese organischer Verbindungen.
Pflanzen transportieren Kohlenhydrat zumeist in

Form von Saccharose und speichern chemische
Energie in Form von Strke und Triacylglycerol.
Im Unterschied zu Mensch und Tier synthetisieren Pflanzen Speicherproteine als Aminosurereserve. Der Sekundrstoffwechsel der Pflanzen
produziert uerst vielfltige Verbindungen als
Schutz gegen Fra und mikrobielle Pathogene.
Zahlreiche sekundre Pflanzeninhaltsstoffe werden
als Medikamente verwendet. Die Phytohormone
regulieren fast ausschlielich Wachstum und Entwicklung der Pflanze und nur in seltenen Fllen
den Stoffwechsel. Die Besonderheiten der direkten
Zell-Zell-Verbindungen sowie der extrazellulren
Matrix bei Pflanzen sind in Abschn.25.1. bzw.
25.4 aufgefhrt.
Bakterien weisen zahlreiche Stoffwechselwege
auf, die weder bei Tieren noch Pflanzen vorkommen, und ihnen erlauben, unter verschiedensten
Bedingungen zu wachsen.
21.1
Stickstoff-Assimilation aus N2
und Nitrat
Pflanzen und viele Bakterien knnen alle Aminosuren aus kleineren Bausteinen synthetisieren Den dafr notwendigen Stickstoff beziehen
sie aus anorganischen Verbindungen. Fr Pflanzen

ist Nitrat (NO
3 ) die wichtigste Stickstoffquelle.
Frei lebende nichtsymbiontische Bodenbakterien
wie Clostridium, Azotobacter und Cyanobakterien
knnen N2 aus der Luft durch Reduktion zu Ammoniak in gebundene Form berfhren. Die symbiontischen Knllchenbakterien (Bodenbakterien
der Gattung Rhizobium) der Leguminosenwurzeln
versorgen auf diese Weise wichtige Kulturpflanzen
(Klee, Sojabohnen, Bohnen, Erbsen) mit Ammo
niak. Dngung trgt zustzlich NHC
4 und NO3 in
die Bden ein . Eine weitere Quelle fr Ammoniak sind Blitzentladungen in der Atmosphre, die
etwa 3% des natrlich fixierten Stickstoffs liefern.
Bakterien reduzieren N2 zu NH3 Die dafr
notwendigen Reduktionsquivalente stammen aus
der Oxidation organischer Verbindungen wie Pyruvat oder aus H2. Die Fixierung von N2 bentigt
auerdem viel ATP:
Die Nitrogenase ist ein Eisen und Molybdn

enthaltender Multienzymkomplex, welcher die
zur Reduktion von N2 bentigten Elektronen je
nach Bakterienspezies von reduziertem Ferredoxin
(Abschn.20.4) oder von Flavodoxin, einem kleinen, dem Ferredoxin hnlichen FeS-Protein, bernimmt und in die dreistufige Reaktion einspeist:
271
21.1 Stickstoff-Assimilation aus N2 und Nitrat
Die Nitrogenase reduziert zudem H2O zu H2, das

mit Diimin reagiert, um wiederum N2 zu bilden:
21
Dieser nicht unterdrckbare Leerlaufzyklus produziert pro mol N2, das fixiert wird, etwa ein mol
H2:
Photosystem
oder oxidativer
Elektronentransport
Die Hydrolyse von ATP ermglicht die Elektronenbertragung vom Fe-Protein auf das Mo-Fe-Protein.
Zwei ATP binden an das reduzierte Fe-Protein; ihre
Hydrolyse ndert dessen Konformation, erniedrigt
damit das Redoxpotenzial und ermglicht die Elektronenbertragung auf das Mo-Fe-Protein.
Leghmoglobin
ist Nitrat, das gewisse Bodenbakterien durch Oxidation von NHC

4 produzieren. Bei Nitratmangel
verwenden die Pflanzen auch direkt NHC
4 . Bei der
Nitratreduktion wird NO
ber
zwei
Schritte
zu
3
reduziert;
die
dafr
bentigten
ReduktionsNHC
4
quivalente stammen aus der Photolyse von Wasser
(Abschn.20.4; Photosynthese):
Die Rhizobium-Symbionten enthaltenden

Wurzelknllchen sind rtlich. Die von
Knllchenbakterien befallenen Wurzelzellen
synthetisieren Leghmoglobin, das O2 bindet
und damit in den Rhizobien einerseits den
O2-Partialdruck niedrig hlt und die leicht oxidierbare Nitrogenase schtzt, andererseits der
oxidativen Phosphorylierung O2 zur ATP-Synthese zur Verfgung stellt (die Fixierung von
einem N2-Molekl kostet 16ATP!).
Pflanzen reduzieren NO

3 zu NH3 Die meisten
Pflanzen behelfen sich ohne symbiontische N2-fixierende Bakterien. Ihre wichtigste Stickstoffquelle
Ammoniumion
+
NHC
4 wird rasch entgiftet Das zelltoxische NH4
wird organisch gebunden:
Synthetase
Glutamin + -Ketoglutarat
2 Glutamat
272
21
2
3
4
Die Summe beider Reaktionen
NHC
4
C -Ketoglutarat C NAD.P/H C ATP

#
Glutamat C NAD.P/C C ADP C Pi

entspricht, abgesehen vom ATP-Verbrauch, der
Reaktion, ber welche Bakterien NHC
4 assimilieren:
+ -Ketoglutarat
6
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8
9
Warum ist die Kombination der beiden ersten Reaktionen trotz ATP-Verbrauch wichtiger als diese
10
Denitrifizierung
Biologische Fixierung
(Nitratatmung)
11
ATP-unabhngige Reaktion? Die Glutamin-Synthetase hat eine fast 100-mal hhere Affinitt fr NH4+
(Km 0,1mM) als die Glutamat-Dehydrogenase. Die
Hydrolyse von ATP erlaubt, die Konzentration von
NHC
4 niedrig zu halten.
Die Assimilation von Nitrat und Sulfat luft in
den Chloroplasten ab. Als Transportform von Stickstoff zur Versorgung der oberirdischen Organe der
Pflanzen dienen Glutamin, Glutamat, Aspartat, bei
gewissen Pflanzen auch Allantoin und Allantoinsure.
Der Stickstoff durchluft wie CO2 und O2 (Photosynthese) einen globalen Kreislauf . Fakultativ
anaerobe Bakterien verwenden zur ATP-Synthese
Nitrat anstelle von O2 als Elektronenakzeptor in einer atmungskettenhnlichen molekularen Maschinerie; hierbei wird Nitrat zu N2 reduziert. Diese
anaerobe Atmung, genauer Nitratatmung, hat Denitrifizierung zur Folge, der Stickstoffkreislauf wird
damit geschlossen:
45 %
52 %
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20
21.2 Schwefel-Assimilation
aus Sulfat
Mensch und Tier sind auf die S-haltige Aminosure

Methionin in der Nahrung angewiesen. Pflanzen
und Bakterien knnen hingegen Sulfat und andere
oxidierte anorganische Schwefelverbindungen als
S-Quellen verwenden. hnlich wie Nitrat muss
Sulfat hierzu reduziert werden; und wie bei der Reduktion von Nitrat zu NH3 stammen die Reduktionsquivalente bei Pflanzen aus der Photolyse von
Wasser und bei Bakterien aus der Oxidation organischer Verbindungen. Vor der Reduktion wird Sulfat
unter ATP-Verbrauch zu Adenosin-5-phosphosulfat (APS) aktiviert:
Die Reduktion fhrt in zwei Schritten ber HSO

3
(Sulfit) zu H2S (Schwefelwasserstoff); die unmittelbaren Elektronenbertrger in Pflanzen sind
reduziertes Glutathion (GSH) und Ferredoxin
(Abschn.20.4), in Bakterien sind es u.a. Thioredoxin (Abschn.19.4) und NADPH. Wie NH3 ist
273
21.3 Transport- und Speicherformen
auch H2S ein Zellgift, das sofort organisch gebunden

wird; in einer Pyridoxal-5-phosphat-abhngigen
Reaktion wird H2S mit O-Acetylserin zu Cystein
und Acetat umgesetzt. Cystein liefert den Schwefel
zur Synthese der meisten anderen schwefelhaltigen
Verbindungen.
21.3
Transport- und Speicherformen

von Kohlenhydraten, Lipiden
und Proteinen bei Pflanzen
Energietrger und Bausteine werden im Phloem der

Leitorgane an ihre Verbrauchsorte transportiert. Die
wichtigsten Transportmetaboliten sind Saccharose
und proteinogene Aminosuren. Ein intensiver
Transport von Aminosuren findet vor dem Laubfall aus den Blttern in die berdauernden Organe
der Pflanze statt.
Saccharose wird aus UDP-Glucose und Fructose-6-P synthetisiert Im Cytoplasma wird zu-
nchst Saccharose-6-phosphat gebildet, das zu Saccharose (Abschn.16.3) dephosphoryliert wird.

Pflanzliche Zellwnde
UDP-Glucose dient auch zur Synthese der
Cellulose (-1,4-verknpftes Glucosepolymer;
.Abb.5.4), die pflanzlichen Geweben Zugfestigkeit verleiht, sowie weiterer Zucker und Zuckerderivate in der Zellwand (Abschn.25.4).
Lignin, ein wasserunlsliches Polymer, das den
Sttz- und Leitgeweben der Pflanzen Druckfestigkeit verleiht, entsteht in der verholzenden Zellwand durch oxidative Polymerisierung
aromatischer Alkohole (Phenylalaninderivate;
.Tab.25.2).
Strke entsteht aus ADP-Glucose In Samen,
Knollen und gewissen Frchten bilden die Amyloplasten Strke aus herantransportierter Saccharose.
Die Synthese erfolgt hnlich wie die Glykogensynthese bei Tieren (Abschn.16.2); ADP-Glucose
bernimmt dabei die Rolle von UDP-Glucose:
21
Strke wird wie Glykogen phosphorolytisch abgebaut.

Terminologie
Plastiden: Zellorganellen in Pflanzen mit multiplen Kopien eines eigenen kleinen Genoms
und einer Doppelmembran, entwickeln sich
aus Proplastiden zu Chloroplasten, Amyloplasten, pigmenthaltigen Chromoplasten und
weiteren ineinander umwandelbare Formen.
Oleosomen speichern Triacylglycerole Die in
Plastiden synthetisierten Fettsuren werden an der

ER-Membran zu Triacylglycerolen verestert. In kleinen, mit einer einfachen Lipidschicht umgebenen
ltrpfchen werden die Triacylglycerole ins Cytosol
freigegeben. Sie finden sich in allen Zellen; in fettspeichernden Samen (bis 50% der Masse) werden
sie bei der Keimung zu Kohlenhydraten umgebaut.
Besondere Organellen, die Glyoxysomen, bauen
die Fettsuren durch -Oxidation zu Acetyl-CoA
ab (in den Mitochondrien der Pflanzen findet keine
-Oxidation statt). Aus zwei Acetyl-CoA entsteht
darauf im Glyoxylatzyklus Succinat (.Abb.21.1),
das ber den Citratzyklus der Gluconeogenese zugefhrt wird. Pflanzen transportieren keine Lipide,
fr den Transport werden Lipide zu Saccharose umgewandelt.
Speicherproteine finden sich in Samen
und Speicherorganen (Wurzeln, Knollen) Im
Unterschied zu Mensch und Tier, synthetisieren

Pflanzen besondere Reserveproteine, die ausschlielich als Speicher von Aminosuren dienen.
Nach Synthese der Proteine an der ER-Membran
schnren sich proteingefllte Vesikel direkt vom
ER ab. Die Samenkeimung lst die Synthese von
Endoproteasen, Carboxy- und Aminopeptidasen
aus, welche die Reserveproteine zu Aminosuren
hydrolysieren.
274
.. Abb.21.1Glyoxylatzyklus. Der Glyoxylatzyklus

erlaubt Pflanzen und
gewissen Bakterien, im
Gegensatz zu den Tieren,
aus Fettsuren Kohlenhydrate herzustellen. In
Pflanzen luft der Zyklus in
spezialisierten Organellen,
den Glyoxysomen, ab
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21.4 Sekundrstoffwechsel
der Pflanzen
Stoffwechselwege, die weder Makromolekle noch

Energietrger synthetisieren, sind bei Pflanzen besonders zahlreich.
Mehr als 200000 pflanzliche Sekundrmetaboliten sind bekannt Die meisten davon treten
nur in bestimmten Pflanzengruppen und oft nur

unter bestimmten Bedingungen auf. Ihre Funktionen als Lockstoffe (Farb-, Duft-, Aromastoffe),
Schreckstoffe, Frahemmer, Bakterizide, Gifte oder
Hemmstoffe konkurrierender Pflanzen sind beraus vielfltig. In Anbetracht der Tatsache, dass zwei
Drittel aller Tierspezies Herbivoren sind und 30%
aller Pilzspezies, 1015% aller Bakterienarten, 45%
der bekannten Viren und smtliche Viroide Pflanzenpathogene sind, erweisen sich diese Schutzstoffe
zusammen mit Dornen, Stacheln und Zellwnden
als, wie ein Blick in die grne Natur zeigt, beraus
erfolgreich. Die wichtigsten Gruppen pflanzlicher
Sekundrmetaboliten werden im Folgenden mit

Beispielen vorgestellt.
Alkaloide sind die grte Gruppe sekundrer

Pflanzenstoffe Alkaloide enthalten Stickstoff (zu-
meist heterozyklisch gebunden) und reagieren daher alkalisch; sie werden zumeist aus Aminosuren,
insbesondere Tryptophan und Tyrosin synthetisiert.
Alkaloide dienen den Pflanzen als Bitterstoffe oder
Toxine.
Wichtige Alkaloide (.Abb.21.2, ):
Morphin, Hauptalkaloid des Opiums (aus
Schlafmohn, Papaver somniferum), wirkt auf
Zentralnervensystem, hochpotentes Analgetikum (Schmerzmittel),
Codein (Methylmorphin), wirkt auf ZNS,
hemmt Hustenzentrum, geringere analgetische Wirkung (und geringere Suchtgefahr) als
Morphin,
Lysergsurederivate (in .Abb.21.2 D-Lysergsure) Vorstufe der Ergotalkaloide aus
dem Mutterkorn (Secale cornutum, der
275
21.4 Sekundrstoffwechsel der Pflanzen
21
.. Abb.21.2 Alkaloide, einige wichtige Beispiele:

Morphin, hochwirksames Analgetikum, Suchtgefahr; Codein, Antitussivum (hustenstillendes Mittel);
D-Lysergsure, Vorstufe der Ergotalkaloide des
Mutterkorns auf Roggen, Lysergsure-Diethylamid
LSD wirkt halluzinogen; Cocain, Aufputschmittel,
Suchtgefahr; Vinblastin und Vincristin hemmen
Mitose, als Zytostatika verwendet; Nicotin; Chinin,
frher zur Prophylaxe und Therapie der Malaria
eingesetzt
Dauerform von Claviceps purpurea, einem auf

Roggen wachsenden Pilz); damit vergiftete
Personen erleiden Gefspasmen und deren
Folgen (Ergotismus, St. Antoniusfeuer im
Mittelalter); das knstlich hergestellte Lysergsure-Diethylamid LSD ist ein hochwirksames
Halluzinogen,
Cocain des Cocastrauches, wirkt auf ZNS,
Aufputschmittel,
Vinblastin und Vincristin aus Vinca rosea,

einer Immergrn-Art, hemmen die Ausbildung der Spindel-Mikrotubuli und damit die
Mitose, werden als Zytostatika verwendet,
Nicotin aus Nicotiana tabacum, wirkt erregend
und in hheren Dosen lhmend auf vegetative
Ganglien, wird auch als Schdlingsbekmpfungsmittel eingesetzt,
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Chinin der Chinarindenbume, frher zur

Prophylaxe und Therapie der Malaria eingesetzt, heute nur noch ausnahmsweise verwendet,
Atropin aus Tollkirsche Atropa belladonna und
dem Stechapfel Datura stramonium, kompetitiver Antagonist von Acetylcholin, hemmt
das parasympathische Nervensystem; erweitert
Pupillen, gibt den Augen einen sympathischen
Ausdruck (daher das Epitheton belladonna),
Coniin, das Gift in Sokrates Schierlingsbecher,
stammt aus dem Gefleckten Schierling Conium
maculatum; verursacht aufsteigende periphere
Lhmungen (motorisch und sensibel),
Colchicin aus der Herbstzeitlose Colchicum
autumnale, hemmt die Polymerisierung von
Tubulin und dient zur Behandlung akuter
Gichtanflle,
Curare, das Pfeilgift amazonischer Indianer,
blockiert die Acetylcholinrezeptoren und fhrt
zu schlaffer Lhmung der quergestreiften Muskulatur,
Strychnin aus der Brechnuss Strychnos
nux-vomica, lst Krampfanflle aus, durch
Blockierung inhibitorischer Glycinrezeptoren
(Chloridkanle im Rckenmark) .
Auch Phenole erfllen vielfltige Funktionen Als
Phenole werden Pflanzeninhaltsstoffe bezeichnet,

die einen aromatischen Ring mit einer oder mehreren OH-Gruppen aufweisen. Dazu gehren u.a.
die Elektronenbertrger Ubichinon in der Atmungskette, Plastochinon und Phyllochinon in der
Photosynthese, Tocopherole (Vitamin E), Cumarine (frahemmende Bitterstoffe) und Flavonoide,
deren Glykoside (Anthocyane) als Bltenfarbstoffe
und UV-Schutzpigmente dienen.
Terpenoide sind Polyisoprene mit mannigfaltiger Struktur und Verwendung Terpene
werden aus Isopentenyldiphosphat synthetisiert

(.Abb.17.5). Die niedermolekularen Terpenoide
besitzen einfache Ringe oder Ringsysteme. Die Zahl
der C5-Einheiten reicht von 2 bis ber 500. Dementsprechend vielfltig sind die biologischen Funktionen und die praktische Verwendung der Terpenoide
(.Tab.21.1).
Fraschutz durch toxische Proteine

Zum Fraschutz setzen Pflanzen neben Sekundrmetaboliten auch toxische Proteine ein:
Lectine (binden an spezifische Zuckerreste),
wie Concanavalin A oder Weizenkeim-Agglutinin, binden an Oberflchenglykoproteine
des Darmepithels und fhren zu funktionellen Darmstrungen; Protease-Inhibitoren
wehren Herbivoren und Bakterien ab; gewisse
Kartoffelsorten und Samen von Leguminosen
sind erst nach Hitzedenaturierung der darin
vorkommenden Protease-Inhibitoren zum
Verzehr geeignet. Das hochtoxische Ricin, ein
Protein aus Ricinus communis, bindet an die
60S-Ribosomenuntereinheiten und blockiert
die Translation.
21.5 Phytohormone
Wie die tierischen Hormone sind die Phytohormone in geringen Konzentrationen (<1M) wirksam. Den Pflanzenhormonen eigen sind die folgenden Eigenschaften:
Sie sind zumeist Stoffwechselendprodukte; nur
wenige Peptidhormone (z.B. das Abwehrhormon Systemin) sind bekannt. Das Blhhormon Florigen ist das bislang einzige bekannte
pflanzliche Proteohormon.
Sie regulieren Wachstums- und Differenzierungsvorgnge und nur in wenigen Fllen den
Stoffwechsel des ausdifferenzierten Organismus.
Ihre Rezeptoren sind vielfach intrazellulr
lokalisiert.
Ihre Gewebe- und Organspezifitt ist gering
und ihr Wirkungsspektrum oft recht breit.
Sie sind mit den tierischen Gewebehormonen
zu vergleichen, Syntheseort und Wirkort liegen
oft nahe beieinander.
Die wichtigsten Phytohormone:

Auxine frdern das Streckungswachstum der
Zellen und damit das Lngenwachstum von

Spross und Wurzel, sie steuern die verschiedenen Tropismen der Pflanzen. Der wichtigste
Vertreter dieser funktional definierten Gruppe
21
277
21.6 Stoffwechselwege in Bakterien
ist das aus Tryptophan gebildete Indol-3-acetat.

Cytokinine sind Adeninderivate mit substituierter Aminogruppe; sie frdern die Zellteilung. ber Rezeptoren in der Zellmembran
und eine Signalkette aktivieren sie Transkriptionsfaktoren. Das Nitratreduktase-Gen ist eines
der Zielgene.
Gibberelline sind tetrazyklische, aus 4Isopren
(C5)-Einheiten aufgebaute Terpene. Sie frdern die Zellstreckung in der Hauptachse; in
Zwergsorten ist hufig die Gibberellinsynthese
gestrt. Gibberelline mobilisieren bei der Samenkeimung die Speicherstoffe, u.a. aktivieren
sie die -Amylase-Gene.
Abscisinsure ist ebenfalls ein Terpenderivat.
Als Antagonist der anderen Phytohormone
bewirkt sie den Ruhezustand von Knospen
und Samen.
Ethylen (H2C=CH2), ein Gas, beschleunigt
Blattfall und Fruchtreifung. Zudem wird bei
Verwundung oder mechanischer Belastung,
z.B. durch Windeinwirkung, vermehrt Ethylen
synthetisiert und damit die Bildung von Festigungselementen, welche die mechanische Widerstandsfhigkeit erhhen, gefrdert. ber einen Rezeptor in der Zellmembran deblockiert
Ethylen einen Signalweg, der ber spezifische
Transkriptionsfaktoren die ethylenregulierten
Gene aktiviert (.Abb.27.4).
Brassinolide sind Phytosteroide, die lokal als
Wachstumsregulatoren wirken; Rezeptor ist
eine Proteinkinase.
21.6
.. Tab.21.1 Terpenoide, einige Beispiele

Beispiel
Anzahl C5-
Einheiten
Funktion und
praktische
Verwendung
Thymol, Menthol,
Kampfer
Schreckstoffe
Sesquiterpene
Lockstoffe
Phytol
Verankerung
von Chlorophyll
im Protein
Taxol
Stabilisiert Mikrotubuli, hemmt

Zellzyklus; als
Fungizid und
Zytostatikum
verwendet
Gibberelline
Phytohormone
Steroide (in der

Regel als Glykoside vorkommend) Saponine
6 (23)
Detergenzien mit
antimikrobieller
Wirkung
Herzglykoside
(Digitalis
glykoside,
Strophantin)
6 (23)
Gifte gegen Tiere
Carotinoide
8 (24)
Carotine, Xanthophylle als akzessorische Photosynthesepigmente,

Farbstoffe,
Provitamin A
Dolichol
15
Trger von
Oligosacchariden
in ER-Membran
fr Glykoproteinsynthese
Polyterpene
Kautschuk
Guttapercha
500
(all trans)
100
(all cis)
Fraschutz
(im Milchsaft)
do.
Stoffwechselwege in Bakterien
Dank der Vielfalt ihres Stoffwechsels haben Bakterien alle erdenklichen kologischen Nischen besetzt. Fr den Menschen sind sie wichtig als Erreger
von Krankheiten und als dominanter Teil des Mikrobioms (Abschn.36.6), zudem finden Bakterien
seit Urzeiten biotechnologische Verwendung.
Gewisse Bakterien besitzen photosynthetisierende Systeme Die frher als Blaualgen bezeichneten Cyanobakterien benutzen unter aeroben
Bedingungen wie die grnen Pflanzen zwei chlorophyllabhngige Photosysteme mit H2O als Elek
tronendonor. Andere Bakterien besitzen jedoch nur

ein einziges Photosystem und verwenden anstelle
der Wasserspaltung reduzierende Verbindungen wie
H2S u.a.m. Die in extrem salzhaltigen Gewssern
lebenden Halobakterien (Archaea) benutzen dem
Sehpigment Rhodopsin hnliche lichtsammelnde
Pigmente . Bacteriorhodopsin erzeugt in einer
278
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lichtabhngigen Reaktion einen Protonengradienten ber die Plasmamembran, welcher die Synthese
von ATP antreibt. Wie beim Sehvorgang dient Retinal als Photorezeptor, der bei Lichtabsorption
isomerisiert (11-cisall-trans; Abschn.29.2). Im
Unterschied zu den Chlorophyll-abhngigen Photosystemen werden Protonen durch die Membran
gepumpt, ohne dass Redoxvorgnge daran beteiligt
sind.
Bei Bakterien fhren verschiedene Wege zur

Kohlenstoffassimilation Cyanobakterien sind
wie die Pflanzen photoautotroph, andere Bakte-
rien nutzen anorganische Verbindungen nicht nur

als Synthesevorstufen, sondern auch als Quelle
chemischer Energie. Diesen chemoautotrophen
Organismen dienen anorganische Verbindungen
wie H2S, NH3, Fe2+ oder H2 als Reduktionsmittel
(Elektronendonoren). Wieder andere Bakterien sowie die Pilze sind heterotroph, d.h. auf die Zufuhr
organischer Verbindungen angewiesen, sei es aus
totem organischem Material (Saprophyten) oder
von lebenden Organismen (Symbionten, Parasiten;
hierzu gehren die fr Mensch, Tier oder Pflanze
pathogenen Bakterien).
Bakterien sind obligat aerob, fakultativ aerob,

aerotolerant anaerob oder obligat anaerob Die
aeroben Bakterien, deren Zellatmungssystem O2 als

terminalen Elektronenakzeptor verwendet, lassen
sich einteilen in obligate Aerobier, die unbedingt
O2 bentigen, und fakultative Aerobier, die mit O2
zwar besser wachsen, aber auch ohne O2 auskommen. Die Anaerobier beziehen chemische Energie
ber anaerobe Stoffwechselwege: Bei Grungen
dienen organische Verbindungen als H-Akzeptoren, wobei je nach Bakterium verschiedene reduzierte Endprodukte gebildet werden (Ethanol,
Propionsure, Milchsure, Buttersure, Methan);
bei anaerober Atmung nehmen anorganische Ver
2
bindungen die Elektronen auf (NO
3 , NO2 , SO4 , S,
). Aerotolerante Anaerobier bentigen kein
CO2
3
O2, knnen aber in Gegenwart von O2 wachsen.
Obligate (strikte) Anaerobier hingegen berleben
nicht in der Gegenwart von Sauerstoff, da sie ber
keine Schutzmechanismen gegen reaktive Sauerstoffderivate (Abschn.31.3) verfgen. Zu dieser
Gruppe gehren fr den Menschen wichtige Krankheitserreger wie Clostridium tetani, der Erreger des
Tetanus (Wundstarrkrampfs), sowie Clostridium
perfringens und andere Clostridienspezies, welche

den Gasbrand, eine gefrchtete Wundinfektion,
hervorrufen.
Gewisse pathogene Bakterien produzieren Toxine Die Cholera ist eine durch Vibrio cholerae
verursachte Infektionskrankheit des Darms. Hauptsymptom ist eine massive Diarrhe, die wegen Wasser- und Elektrolytverlust bald lebensbedrohend
wird. Verantwortlich dafr ist das Choleratoxin,
ein vom Bakterium ausgeschiedenes Protein. Darm
epithelzellen nehmen das Toxin auf; nach proteolytischer Abspaltung wirkt dessen A-Untereinheit
als Enzym, das ADP-Ribose von NAD+ auf einen
bestimmten Argininrest der -Untereinheit eines
G-Proteins bertrgt (Abschn.27.2). Die modifizierte -Untereinheit kann GTP nicht mehr hydrolysieren: Sie aktiviert die Adenylatcyclase, ohne
diese abschalten zu knnen. Die Konzentration von
cAMP kann daher bis auf das Hundertfache des
normalen Werts ansteigen. Die Epithelzellen reagieren mit einer entsprechend gesteigerten Sekretion
von Wasser und Elektrolytionen.
Der Diphtherieerreger Corynebacterium diph
theriae produziert ebenfalls ein Enzym. Das hochtoxische Enzym bertrgt, dem Choleratoxin hnlich,
ADP-Ribose von NAD+ auf den eukaryontischen
Elongationsfaktor eEF-2 und inaktiviert ihn (Abschn.10.5).
Das Botulinumtoxin
ist eine Protease; die
verschiedenen Stmme von Clostridium botulinum
scheiden mindestens sieben verschiedene Toxintypen aus. Die Bakterien vermehren sich unter anaeroben Bedingungen (Konserven!) in Fleisch, Fisch
oder proteinreichem Gemse. Das Toxin hemmt
die Freisetzung von Acetylcholin an cholinergen
Synapsen, indem es Proteine des SNARE-Komplexes (Abschn.22.3) spaltet und damit die Fusion
der synaptischen Vesikel mit der prsynaptischen
Membran verhindert. Das Botulinumtoxin (ein Enzym!) ist das strkste bekannte Gift; bei intravenser Verabreichung ist die fr den Menschen tdliche
Dosis 100ng. Erhitzen der kontaminierten Speisen desaktiviert das Toxin durch Denaturierung.
Therapeutisch wird das Toxin bei gewissen Formen
von Muskelkrmpfen und kosmetisch zur Glttung
von Hautfalten eingesetzt (Botox) .
Auf hnliche Weise hemmt das Tetanustoxin
von Clostridium tetani, dem Erreger des Wund-
279
starrkrampfes, die Ausschttung von Transmittern

an Synapsen im Rckenmark und fhrt damit zu
einer krampfartigen Lhmung der Gesichts- und
Rumpfmuskulatur.
Die Ursache von Nahrungsmittelvergiftungen
sind Toxine, die in den Nahrungsmitteln schon vor
deren Genuss produziert worden sind. Zumeist
ist es Staphylococcus aureus, der sich in unsachgem aufbewahrten Nahrungsmitteln vermehrt und
Membranporen bildende Proteine, die Enterotoxine, produziert. Nach Genuss der dadurch vergifteten Nahrungsmittel kommt es innerhalb kurzer
Zeit (1- 6h) infolge von Ionen- und Wasseraustritt
in den Darm zu Erbrechen und Durchfall.
Einige Bakterienarten produzieren medizinisch wichtige Antibiotika

Hierzu gehren
Streptomycin und hnliche Verbindungen, die
heute als Antibiotika der zweiten Reihe eingesetzt

werden. Makrolid-Antibiotika wie Erythromycin
besitzen groe Lactonringe mit angehefteten Zuckerresten. Die Tetracycline werden als Breitspektrum-Antibiotika gegen fast alle grampositiven und
gramnegativen Keime eingesetzt.
Die Stoffwechselleistungen gewisser Bakterien werden biotechnologisch genutzt Bakte-
rielle Prozesse liefern die Milchprodukte Kse und

Joghurt als auch eine Reihe weiterer Produkte der
Nahrungsmittelindustrie wie Essig, Zitronensure,
gewisse Vitamine (B1, B12, C) und Aminosuren
(Glutamat, ein die Umami-Geschmacksrezeptoren
ansprechender Geschmacksverstrker; Aspartat
und Phenylalanin zur Synthese des knstlichen
Sstoffs Aspartam; Abschn.29.3), sowie Dihydroxyaceton (Hautbrunungsmittel) und biologisch
abbaubare Polymere (Kunststoffe) wie Poly-3-hydroxybutyrat (PHB).
Gentechnisch vernderte Bakterien werden
weiter eingesetzt zur industriellen Produktion
menschlicher Proteine (Insulin u.a.m.) mittels
rekombinanter DNA (Abschn.39.9, .Tab.39.3)
und zur Synthese (insbesondere zur stereospezifischen Hydroxylierung) gewisser Steroidhormone.
Komponenten gewisser Bakterien, z.B. der Erreger
von Diphtherie, Tetanus und Keuchhusten, dienen
als Impfstoffe.
Enzymreaktoren mit isolierten bakteriellen
Enzymen stellen aus Maisstrke Fructose her, die
hufig als Sstoff benutzt wird, da ihre Skraft
21
hher ist als diejenige von Saccharose oder Glucose.

Weite Anwendung finden isolierte bakterielle Enzyme oder in Bakterien hergestellte rekombinante
Enzyme in der Gentechnik (Abschn.39.1). Abwasserreinigungsanlagen sind mikrobielle Kultursysteme, die organisches Material unter anaeroben
Bedingungen zu Methan und CO2 abbauen oder
unter aeroben Bedingungen zu Mikrobenzellen und
CO2 umwandeln.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517049-0
21.1 Stickstoff-Assimilation aus N2 und Nitrat
21.2 Schwefel-Assimilation aus Sulfat
21.3 Transport- und Speicherformen von
Kohlenhydraten, Lipiden und Proteinen
bei Pflanzen
21.4 Sekundrstoffwechsel der Pflanzen
21.5 Phytohormone
281
IV
Molekulare Zellbiologie
Kapitel 22
Zellkompartimente und Proteinsortierung 283

Kapitel 23
Cytoskelett und molekulare Motoren 297

Kapitel 24
Zellzyklus; Kontrolle von Zellwachstum

und Zelltod305
Kapitel 25
Zelladhsion, Zellkontakte und

extrazellulre Matrix315
Kapitel 26
Stoffaustausch durch Membranen 323

Kapitel 27
Rezeptoren und Signaltransduktion 331

283
Zellkompartimente
und Proteinsortierung
22.1
Kompartimenthnliche Strukturen in Bakterien 285
22.2
Kompartimente der Eukaryontenzellen 285
22.3
Mechanismen des intrazellulren Proteintransports 287
22.4
Proteintransport im Golgi-Apparat 290
22.5
Proteintransport zwischen Golgi-Apparat,

Zelloberflche und Lysosomen 290
22.6
Proteinglykosylierung whrend Transport

durch ER und Golgi-Apparat 291
22.7
Import von Proteinen in Mitochondrien,

Chloroplasten und Peroxisomen 292
22.8
Pfrtner-kontrollierter Transport (Gated

transport) durch die Kernhlle 294
22.9
Kontrolle der Faltung und der Lokalisierung von Proteinen

durch molekulare Chaperone und Proteasomen 295

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20
Kapitel 22 Zellkompartimente und Proteinsortierung
Eukaryontische Zellen sind durch symbiontische

Vereinigung prokaryontischer Zellen entstanden.
Intrazellulre Kompartimente sind ein wichtiges
gemeinsames Merkmal aller Eukaryonten; zum
Teil sind sie durch diese Endosymbiose entstanden,
zum Teil durch Einstlpen der Zellmembran.
Terminologie
Endosymbiont: Zelle, welche in Wirtszelle zu
gegenseitigem Vorteil existiert.
Zellkompartiment: funktionell spezialisiertes,
membranbegrenztes Abteil in Zelle.
Cytoplasma: Raum einschlielich aller Organellen zwischen Zellmembran und Kern.
Cytosol: Cytoplasma mit wasserlslichem
Material ohne Organellen und Cytoskelett.
In bereinstimmung mit der Endosymbionten-Theorie synthetisieren eukaryontische Zellen

Proteine einerseits im Cytosol und andererseits in
den aus Bakterien entstandenen Mitochondrien sowie den in Pflanzen vorkommenden Chloroplasten
und anderen Plastiden (NB Pflanzenzellen enthalten Chloroplasten und Mitochondrien!).
Im Laufe der Evolution sind die meisten Gene
der endosymbiontischen Zellen ins Genom der
Wirtszelle bertragen worden, so dass nun die
entsprechenden Proteine nach ihrer Synthese
im Cytosol in die Organellen importiert werden
mssen. In eukaryontischen Zellen werden auer
Mitochondrien und Chloroplasten diverse andere
Organellen und auch Membranen mit spezifischen
Proteinen ausgestattet. Diese nichtcytosolischen
Proteine werden bei ihrer Synthese mit einem
Kennzeichen, einer Adresse, versehen, die ihren
Bestimmungsort festlegt. Diese Adressen sind kurze
lineare Signalsequenzen, rumlich strukturierte Signale in greren gefalteten Regionen des Proteins
oder posttranslational bertragene Strukturen.
Das primre Sortierungssignal (Zielerkennungssequenz, Prsequenz) der im Cytosol produzierten Proteine befindet sich am NH2-Terminus;
es erscheint daher bei der Synthese des Proteins zuerst an der Oberflche des Ribosoms und bestimmt
die Einschleusung in den sekretorischen Weg. Bei
diesen Proteinen kann die Membrantranslokation
schon whrend der Translation in Gang kommen

(cotranslationale Translokation), whrend sie bei
anderen Proteinen erst nach Abschluss der Translation stattfindet (posttranslationale Translokation).
Eine Signalpeptidase spaltet das NH2-terminale Signalpeptid bei seinem Erscheinen im Lumen des ER
bzw. der Mitochondrien oder Plastiden ab.
Terminologie
Processing eines Proteins: Gesamtheit der
posttranslationalen Modifikationen und der
Zielfindungsprozesse (Targeting)
Sortierungssignale knnen aber auch im Protein

verbleiben und mehrfach Verwendung finden:
Kernproteine werden nach ihrer Synthese im Cytosol in den Kern transportiert; bei der Kernteilung
in jedem Zellzyklus zerfllt die Kernhlle vorbergehend und der Importvorgang wiederholt sich bei
der Bildung der Tochterkerne.
Der cotranslationale Weg dient dem Einschleusen von Proteinen in die entsprechende ribosomenbindende Membran. Das raue endoplasmatische
Retikulum (ER) bindet cytoplasmatische Ribosomen; die innere Mitochondrienmembran und die
Thylakoidmembran binden die bakteriellen Ribosomen des Organelleninnenraums, welche die wenigen in den Organellengenomen codierten Membranproteine synthetisieren. Nach dem Transport
durch die ER-Membran werden die Proteine, gegebenenfalls mittels weiterer Adressen, durch einen
komplex gesteuerten Vesikeltransport (lat. vesicula,
Blschen) in der Zelle weiterbefrdert.
Terminologie
Die ribosomenbesetzte Membran des ER
erscheint im elektronenoptischen Bild als
raues ER; glattes ER hingegen trgt keine
Ribosomen.
Endosymbiontische Organellen (Mitochondrien,

Plastiden) und Peroxisomen verwenden den posttranslationalen Weg fr den Import von Protei-
nen. Die meisten Proteine der Mitochondrien und

Plastide werden vom Genom des Zellkerns codiert
285
22.2 Kompartimente der Eukaryontenzellen
22
und auf freien (nicht membrangebundenen) Ribosomen synthetisiert. Die Proteine werden erst nach
Abschluss ihrer Synthese von der Zielorganelle aufgenommen. In den meisten Fllen wird das Sortierungssignal whrend oder kurz nach der Translokation durch die Membran proteolytisch entfernt.
22.2 Kompartimente
22.1 Kompartimenthnliche
dere Plastiden dazu. Die Anzahl und Form dieser

Kompartimente variiert stark je nach Zelltyp. Beispielsweise bildet der Golgi-Apparat in Neuronen
ein komplexes Netzwerk rund um den Kern und
in sekretorischen Zellen mehrere lateral ber Tubuli verbundene kompakte Stapel von Zisternen. In
Pflanzenzellen sind viele einzelne Zisternenstapel,
die Dictyosomen, im gesamten Cytoplasma verteilt.
Die Kompartimentierung eukaryontischer Zellen erlaubt, gewisse Vorgnge und Bedingungen
durch rtliche Isolierung auseinander zu halten:
Replikation und regulierte Transkription der DNA
im Kern, Abbau von Makromoleklen bei saurem
pH in Lysosomen, oxidativer Abbau sehr langkettiger Fettsuren (>C24) mit Produktion von H2O2 in
Peroxisomen, Proteinglykosylierung und Bildung
von Disulfidbrcken im ER. Die Kompartimentierung ist auch Voraussetzung fr eine Reihe essenzieller biologischer Prozesse, welche auf unterschiedlichen Konzentrationen gewisser Stoffe und
elektrischer Ladungen auf den zwei Seiten einer
Membran beruhen: Atmungskette und oxidative
Phosphorylierung, Photosynthese sowie Membranund Aktionspotenzial bei Neuronen.
Strukturen in Bakterien
Bakterienzellen besitzen keine membranbegrenzten Kompartimente, verfgen aber ber Mechanismen zur rtlichen Anreicherung spezifischer
Molekle Im periplasmatischen Raum zwischen
der Zellwand und der Plasmamembran gramnegativer Bakterien befinden sich zahlreiche Proteine,
z.B. Hydrolasen, welche polymere Nhrstoffe verdauen und membrangngig machen. Die periplasmatischen Proteine verlassen das Cytoplasma der
Zelle auf dem gleichen Weg wie andere sezernierte
Proteine: Ein NH2-terminales Signalpeptid , das
kurz nach Beginn der Synthese an der Oberflche
des Ribosoms erscheint, bindet an Rezeptoren der
Zellmembran, worauf die wachsende Polypeptidkette durch komplex gebaute Proteinporen ins Periplasma geleitet wird. Das Signal wird in der Regel
schon whrend der Translokation des naszierenden
Proteins proteolytisch abgespalten.
Die bakterielle Zellmembran vergrert hnlich
wie Mitochondrien durch mehrfaches Einfalten ihre
Oberflche. Dadurch werden membrangebundene
Prozesse wie die lichtgetriebene ATP-Synthese
durch Bakteriorhodopsin (ein lichtabsorbierendes violett-rotes Protein gewisser Archaea) in vermehrtem Mae mglich. Eine weitere lokalisierte
Struktur bildet das kovalent an Komponenten der
Zellmembran gebundene Nucleoid aus dichtgepackter DNA, dessen Bindung an die Membran die
Verteilung der Tochtergenome bei der Zellteilung
erleichtert. Die Anzahl der Genome pro Zelle ist
bei Bakterien nicht so streng reguliert wie bei Eukaryonten. Bakterien enthalten je nach Wachstumszustand eine bis vier Genomkopien pro Zelle und
knnen zustzlich viele Kopien kleiner genetischer
Elemente, z.B. Plasmide, enthalten.
der Eukaryontenzellen
Alle eukaryontischen Zellen haben dieselben

Kompartimente: Zellkern, endoplasmatisches
Retikulum (ER), Golgi-Apparat, Lysosomen,
Mitochondrien und Peroxisomen
In Pflanzenzellen kommen noch Chloroplasten und an-
Topologie der Zelle und Dynamik der Organellen Die rumliche Anordnung von Kompar-
timenten versteht sich aufgrund ihrer Evolution.

Eine Organellengruppe (Kern, ER, Golgi-Apparat, Lysosomen und zugehrige Vesikel) entstand
durch Einstlpung und Ablsung von Zellmembranteilen ins Zellinnere (.Abb.22.1). Charakteristischerweise bilden diese Organellen, mit
Ausnahme des Kerns, eine strukturelle und funktionelle Einheit, mit regem Membranaustausch
durch Vesikeltransport.
Der Innenraum dieser Organellen und Vesikel ist topologisch dem
Zellauenraum gleichzusetzen.
286
uere
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20
.. Abb.22.1 Hypothetische Evolution eukaryontischer Organellen. Die DNA einer Vorluferzelle war vermutlich an die Zellmembran gebunden und wurde in einer Einstlpung eingeschlossen. Spter verloren solche Einstlpungen den Kontakt zur
Zellmembran und entwickelten sich zum heutigen zusammenhngenden System, welches die doppelte Kernmembran und
das ER umfasst. Die Sekretion bestimmter Proteine drfte schon frh in der Evolutionsgeschichte zu membrangebundenen
Polyribosomen gefhrt haben. Auch in den heutigen eukaryontischen Zellen sind Polysomen an die Oberflche des ER und
des Kerns gebunden. Die Entstehung der Doppelmembranen von Mitochondrien und Chloroplasten wird ebenfalls durch
eine Einstlpung erklrt: ber Einstlpungen fanden die prokaryontischen Vorluferzellen dieser Organellen den Eintritt in
eukaryontische Wirtszellen. Whrend der weiteren Evolution ergab sich eine enge symbiontische Beziehung zwischen den
zwei vergesellschafteten Zellen; die eingewanderte prokaryontische Zelle spezialisierte sich zum Mitochondrium bzw. zum
Chloroplasten und anderen Plastiden
Mobile Membranlipide
Die Lipide des ER und der damit verbundenen Organellen (Golgi-Apparat, Lysosomen,
sekretorische Vesikel, Endosomen) und der
Zellmembran werden in einer Sugerzelle mit
einer Halbwertszeit von etwa einer halben
Stunde umgewlzt, d.h. vom ER in die Zellmembran gebracht und wieder zurckgefhrt.
Eine zweite Organellengruppe ist durch Symbiose

entstanden; prokaryontische Zellen wanderten
in eukaryontische Vorluferzellen ein. Durch das
nachfolgende Verlagern von Genen aus dem Genom der endosymbiontischen Zelle in das Genom
der Wirtszelle und eine Neuverteilung der Stoffwechselreaktionen entstand eine gegenseitige Abhngigkeit. Die Verlagerung der prokaryontischen
Gene in den Zellkern drfte mehrere Vorteile mit
sich gebracht haben: geringere Kopienzahl der
Gene pro Zelle, sexuelle statt mtterliche Vererbung, weniger DNA-Schden durch mitochondriale Reactive oxygen species ROS (Abschn.31.3)
sowie mit nucleren Genen integrierte regulatorische Kontrolle.

Im Gegensatz zu den Organellen des sekretorischen Weges (ER und damit verbundene Organellen) findet an den Membranen der endosymbiontischen Organellen kein Vesikelaustausch statt.
Dennoch sind auch die endosymbiontischen Organellen als dynamische Gebilde aufzufassen, kann
doch in einer Hefezelle durch einen schnellen, reversiblen Prozess ein einzelnes groes Mitochondrium
in hunderte kleinere Mitochondrien zerfallen. Der
Innenraum der Mitochondrien (Matrix) und Chloroplasten (Stroma) entspricht topologisch dem
Innenraum des ursprnglichen Endosymbionten.
Der Intermembranalraum entspricht dem Zellauenraum, bzw. dem prokaryontischen Periplasma.
Die Thylakoide der Chloroplasten sind von einer
zustzlichen Membran begrenzt und sind als abgeschnrte Einstlpungen der Innenmembran zu
verstehen.
287
22.3 Mechanismen des intrazellulren Proteintransports
22
22.3 Mechanismen
des intrazellulren
Proteintransports
Vier verschiedene Transportarten bringen neusynthetisierte Proteine an deren Zielort:

1. Cotranslationale Membraninsertion oder Membranpassage ins raue ER,
2. Vesikeltransport des sekretorischen Weges
(ER-Golgi-Zelloberflche),
3. Posttranslationale Translokation in Mitochon
drien, Plastiden und Peroxisomen (Abschn.22.7),
4. Pfrtner-kontrollierter Transport (Gated transport) durch die Kernhlle (Abschn.22.8).
In Fall1 und 3 wird das Protein durch eine Membran hindurch aus dem Zellinnenraum herausgebracht. In Fall2 und 4 verschiebt sich das Protein
innerhalb der Zelle zwischen verschiedenen Organellen; die Innen-auen-Topologie ndert sich nicht
(.Abb.22.2).
Bei der cotranslationalen Translokation bindet
das NH2-terminale Signalpeptid des naszierenden
Proteins ans Signal recognition particle (SRP) Das
SRP besteht aus einer kurzen RNA und sechs Polypeptiden. Es kann als dritte Untereinheit des Ribosoms aufgefasst werden: Es lagert sich an Ribosom
und Signalpeptid, unterbricht die Translation und
bindet an den SRP-Rezeptor an der ER-Oberflche
(.Abb.22.3) bzw. an der Innenseite der prokaryontischen Zellmembran. Sobald der Ribosom-SRP-Polypeptid-Komplex an den SRP-Rezeptor gebunden
hat und die Pore in der ER-Membran geffnet worden ist, dissoziiert das SRP weg, und die Translation der naszierenden Polypeptidkette wird fortgesetzt. Translation und Membrantranslokation des
Proteins sind nun gekoppelt: Das Polypeptid wird
weiter verlngert und gleichzeitig durch die Pore geleitet. Ein stark hydrophobes Segment (Stop-transfer-Sequenz) im naszierenden Protein bewirkt seine
Verlagerung aus der hydrophilen Translokationspore in die Lipiddoppelschicht der ER-Membran:
Es entsteht ein Transmembransegment des Proteins.
Ohne Stop-transfer-Sequenz wird das Protein von
Anfang bis Ende durch die Membran transloziert.
SRP-Komplex und Translokationspore knnen
whrend der Biosynthese eines Proteins auch erst
.. Abb.22.2 Intrazellulre Routen der Proteinverteilung. Mit

Ausnahme einiger in den Genomen von Mitochondrien und
Plastiden codierter Proteine werden alle Proteine im Cytosol
synthetisiert und anschlieend an ihre Bestimmungsorte in
der Zelle verfrachtet. Es existieren vier verschiedene Transportarten: Beim Gated transport werden bestimmte Proteine
zwischen dem Cytosol und dem Kern verschoben; die topologische Lage der Proteine ndert sich nicht. Beim cotranslationalen Membrantransport und beim posttranslationalen
Membrantransport wird das Protein durch eine Pore von der
einen Seite der Membran zur anderen befrdert. Beim Vesikeltransport bleibt das Protein auf derselben Membranseite,
wird aber in einem Vesikel von einem Kompartiment zum
anderen verschoben
beim Erscheinen eines proteininternen Signalpeptids aus dem Ribosom zusammengestellt werden.
Der NH2-Terminus befindet zu diesem Zeitpunkt
im Cytosol. Die nachfolgenden Teile des Proteins
werden jedoch in und durch die Membran geschleust, der COOH-Terminus kommt ins Innere
des ER zu liegen und der NH2-Terminus bleibt im
Cytosol. Enthlt das Protein mehrere Signal- und
Stop-transfer-Sequenzen, kann die Polypeptidkette
die Membran mehrfach durchqueren. Mittels geeigneter Abfolge von Signal- und Stop-transfer-Sequenzen knnen auf diese Weise verschiedene
Transmembran-Anordnungen der Polypeptidkette
entstehen.
Vesikel transportieren Proteine von einem
Kompartiment in ein anderes und zurck, aber
nicht durch Membranen Vesikel sind kleine
kugelfrmige, membranbegrenzte Rume mit

einem Durchmesser von 5075nm. Proteintrans-
288
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und Translokation
.. Abb.22.3 Proteintranslokation durch die Membran des ER. Vor und nach dem cotranslationalen Transfer des Polypeptids
hlt ein Protein die hydrophile Pore geschlossen
10
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.. Abb.22.4 Vesikeltransport von Proteinen. Proteine gelangen zunchst durch cotranslationale Translokation ins Innere des
ER. Darauf werden sie mittels Knospung und Fusion von Vesikeln weitertransportiert. Eine Translokation durch Membranen
findet dabei nicht mehr statt
portierende Vesikel entstehen durch Knospung

(Budding)
an der Membran des ER oder aus
den Membranen des sekretorischen, exocytotischen und endocytotischen Wegs. Die Vesikel
bringen ihre im rauen ER synthetisierte Proteinfracht an deren Bestimmungsorte und fusionieren (verschmelzen) dort mit der Zielmembran
(.Abb.22.4). Whrend des vesikulren Transports passieren die Proteine keine Membran.
Die Vesikel verschieben ihre Fracht (lsliche und
membrangebundene Proteine) blo von einer

Membranzisterne in die nchste.
Adressierung der Vesikel bestimmt den Transportweg Diffusion und GTP/ATP-getriebener
Transport entlang den Mikrotubuli (Abschn.23.4)

verteilen die Vesikel in der Zelle. Spezifische Adressen ermglichen den Vesikeln, ihre Zielmembran
zu erkennen. Eine allgemeine Adressierung entsteht
durch eine Oberflchenmarkierung, den Coat, der
nur auf bestimmten Vesikeln vorkommt: Clath-
289
rin-bedeckte Vesikel (Clathrin-coated vesicles)
besorgen den selektiven Transport von Transmem

branrezeptoren an die Zelloberflche. Clathrin ist
ein Proteinkomplex aus 3 schweren (je 180kDa)
und 3 leichten Ketten (je 25kDa) . Bei der Knospung der Vesikel aus der Plasmamembran entstehen
Vertiefungen, die Coated pits:
22
ARFGTP exponiert einen Fettsurerest des Molekls, der es in der Membran verankert. Nachdem
sich ein neues Vesikel von der Golgi-Membran
abgelst hat, verliert es den Coat: ARFGTP hydrolysiert sein GTP zu GDP, worauf ARFGDP den
Fettsurerest zurckzieht und zusammen mit dem
gebundenen Coatomer-Protein von der Membran
dissoziiert. Ein Guanin-Nucleotid-Freigabe/Austausch-Faktor (Guanine-nucleotide-releasing protein GNRP bzw. Guaninenucleotide-exchange factor GEF) katalysiert den Austausch von GDP gegen
GTP, das im berschuss im Cytosol vorliegt, und
regeneriert ARFGTP. ARF interagiert sowohl mit
Clathrin wie auch mit dem Coatomer-Proteinkomplex und kann daher das Coating und Uncoating
verschiedener Vesikeltypen antreiben.
Bindungsproteine (SNARE) identifizieren die

Zielmembran Fr die Zielfindung der freigesetz-
Coatomer-bedeckte Vesikel (Coatomer-coated

vesicles) besorgen den nichtselektiven Transport in
den Nahbereichen des ER und Golgi-Apparats. Das

Coatomer besteht aus einem Proteinkomplex von
700800kDa. Der ADP-Ribosylation factor ARF,
ein GTP-bindendes Protein aus der Unterfamilie
der kleinen monomeren G-Proteine, vermittelt das
Coating von Coatomer-bedeckten Vesikeln:
Alle Mitglieder der Familie der G-Proteine wirken

als Schalter (Heterotrimere G-Proteine der G-Protein-coupled receptors GPCR; Abschn.27.2): Sie
kommen in einer GTP- oder einer GDP-Form vor,
die sich funktionell voneinander unterscheiden.
ten coat-losen Vesikel sorgen v-SNARE (vesicular

Synaptosome-associated protein receptors) auf der
Vesikelmembran und t-SNARE (target-SNARE)
an den Zielmembranen (Target membranes). Das
Andocken von vSNARE (auf Vesikelmembran) an
passende t-SNARE (auf Zielmembran) bringt die
ATP- und GTP-abhngige Membranfusionsmaschinerie in Gang.
Falls die Plasmamembran die Zielmembran ist,
kommt es zur Exocytose: Der Inhalt der Vesikel
wird sezerniert (nach auen abgegeben). Diese Art
der Sekretion von Zellinhalt ist nicht auf Proteine
beschrnkt: Auch bei der bertragung der Nervenerregung an Synapsen verschmelzen die synaptischen Blschen des prsynaptischen Neurons mit
der prsynaptischen Membran und schtten den
Neurotransmitter in den synaptischen Spalt aus
(Abschn.29.1).
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22.4 Proteintransport
im Golgi-Apparat
Ein NH2-terminales Signal gengt zur Sekretion

eines Proteins Manche Proteine wie Serumpro-
teine, Verdauungsenzyme oder Proteohormone

werden von der Zelle sezerniert. Die NH2-terminale
Signalsequenz dieser Proteine gibt den Ansto zur
cotranslationalen Passage durch die ER-Membran;
das Signalpeptid wird dabei abgespalten. Abknospen der Membranregion und Verschmelzen der
entstandenen Vesikel mit einer Zielmembran bringt
die Proteine vom ER zum Golgi-Apparat, von dort
weiter zur Zellmembran und ins Auenmilieu. Dieser Weg wird als Standardweg (Default pathway)
bezeichnet und bentigt auer dem Signalpeptid
keine weiteren Adressen im Protein. Als Ausnahme
besitzen die fr das ER oder den Golgi-Apparat bestimmten Proteine ein Rckhaltesignal. Die beteiligten Membranregionen samt den Proteinen, welche den Transport bewerkstelligen, werden mittels
rcklufiger Vesikel rezykliert.
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Der Golgi-Apparat besteht aus einem Stapel flacher, untereinander Vesikel austauschender Zisternen Die aus dem rauen ER stammenden Pro-
teine werden in cis-Golgi-Zisternen aufgenommen

und via mediale und trans-Golgi-Zisternen weitergeleitet. Die Vesikel bewegen sich in der Randzone
des Stapels in unmittelbarer Nhe ihrer Zielmembran und gelangen ohne besondere Signale durch
Diffusion an ihr Ziel.
Im Golgi-Apparat werden Proteine mit Oligosacchariden modifiziert Whrend der Passage
durch die Zisternen des Golgi-Apparats werden

praktisch alle lslichen und membranstndigen
Proteine glykosyliert (Ausnahme: Serumalbumin).
Jedes Subkompartiment des Golgisystems und auch
des ER enthlt einen zelltypspezifischen Satz von
Glykosylierungsenzymen, welche in bestimmter
Reihenfolge die einzelnen Schritte der Mono- und
Oligosaccharid-Synthese katalysieren: Das Produkt
eines Enzyms ist das Substrat des nchsten Enzyms.
22.5
Proteintransport zwischen
Golgi-Apparat, Zelloberflche
und Lysosomen
Die Wege der konstitutiv sezernierten (1), der sekretorischen (2) und der lysosomalen Vesikel (3)
verzweigen sich beim Austritt aus dem Golgi-Apparat:
1. Der oben beschriebene Standardweg von Proteinen ohne zustzliches Signal fhrt an die
Zelloberflche. Membranproteine verbleiben

in der Zellmembran, bis sie durch Endocytose
internalisiert oder degradiert werden; lsliche
Proteine werden durch Exocytose ins Auenmedium sezerniert.
2. Der regulierte sekretorische Weg ermglicht
die Speicherung groer Mengen von Proteinen,
Peptiden und auch kleineren Moleklen (z.B.
Neurotransmittern in Nervenzellen), welche auf
ein Signal rasch abgegeben werden knnen. Die
Fusion dieser Vesikel mit der Zellmembran ist
reguliert, z.B. durch das Aktionspotenzial und
Ca2+-Ionen an den chemischen Synapsen (Abschn.29.1).
3. Im lysosomalen Weg erfolgt die Sortierung
der Proteine aufgrund eines Signals in ihrem
Oligosaccharidteil. Im Golgi-Apparat werden
die Oligosaccharide der fr Lysosomen bestimmten Proteine (Hydrolasen) mit Mannose-6-phosphat markiert. Damit binden diese
Proteine an Mannose-6-phosphat-Rezeptoren,
welche die Proteine in die Lysosomen leiten.
An der Zelloberflche werden durch Knospung
nach innen Vesikel, die Endosomen, gebildet.
Durch SNARE-gesteuerte Fusion mit den Gol-
291
22.6 Proteinglykosylierung whrend Transport durch ER und Golgi-Apparat
gi-Vesikeln, welche die Hydrolasen enthalten,

reifen Endosomen zu Lysosomen heran. Eine
ATP-getriebene Protonenpumpe in der Membran der lysosomalen Vesikel pumpt Protonen
nach innen. Das Innenmilieu wird auf pH5
angesuert, worauf die Hydrolasen vom Mannose-6-phosphat-Rezeptor dissoziieren. Die
freigesetzten Hydrolasen verdauen den Inhalt
der Lysosomen (Die lysosomalen Abbauenzyme
werden aufgrund ihres pH-Optimums im sauren Bereich als saure Hydrolasen bezeichnet).
Die niedermolekularen Abbauprodukte werden
via Membrantransport ins Cytosol befrdert.
Unverdauliche Reste werden von den Lysosomen durch Fusion mit der Plasmamembran aus
der Zelle gebracht. Die dabei mitentlassenen
lysosomalen Proteine werden mittels des Mannose-6-phosphat-Rezeptors wieder in eine Zelle
zurckgebracht; sie knnen auf diese Weise
auch von einer Zelle in eine andere gelangen.
22.6
Proteinglykosylierung whrend
Transport durch ER und GolgiApparat
Proteinglykosylierungen schtzen Zellen gegen

uere Einflsse Ein Drittel der neu synthetisier-
ten Proteine gelangt ins ER und wird dort modifiziert. Die cis-, medialen und trans-Zisternen des
Golgi-Apparats funktionieren wie ein Flieband: Sie
verfgen je ber einen bestimmten zellspezifischen
Satz von Enzymen, welche die im ER bertragenen
Oligomannose-Strukturen trimmen und mit Heteroglykanen versehen.
Die Oligosaccharidketten der Membranproteine, membranassoziierten Proteine und Glykolipide bilden einen Mantel rund um die Zelle, die
Glykokalix (.Abb.22.5). Weil Oligosaccharide
relativ rigide Strukturen bilden (im Gegensatz zu
Peptidbindungen haben glykosidische Bindungen
nur wenig Rotationsfreiheit) verwehrt die Glykokalix durch ihre Raumbeanspruchung ueren
Agenzien, wie z.B. abbauenden Enzymen, den
Zugang zur Zellmembran. Die stark hydrophilen
Zuckerreste an der Membranoberflche erschweren berdies das Umflippen der Glykolipide und
Glykoproteine auf die Innenseite der Membran und
22
.. Abb.22.5 Die Schutzhlle der Zelle: Glykokalix (Zellmantel) aus Glykoproteinen und Glykolipiden. Die Oligosaccharide der verschiedenen Glykoproteine und Glykolipide bilden
zusammen mit adsorbierten Proteoglykanen (nicht gezeigt)
die dichte Glykokalix-Schicht, welche die Zellmembran nach
auen abschirmt. Rezeptoren fr grere Molekle sind meist
selbst glykosyliert und ragen mit ihrer Erkennungsstelle fr
das Signalmolekl aus der Glykokalix heraus
tragen damit zur Aufrechterhaltung der Asymmetrie biologischer Membranen bei. Wie treten Makromolekle und Zellen trotz der Glykokalix in
Wechselwirkung mit der Plasmamembran? Bei vielen membranstndigen Rezeptoren ragt die ligandenbindende Domne des Rezeptors aus der Glykokalix heraus und ist ber ein stark glykosyliertes
Segment der Polypeptidkette mit der membrangebundenen Domne verbunden.
Proteine werden an bestimmten Sequenzsignaturen glykosyliert Die Signatur -Asn-X-Ser/Thr
veranlasst eine N-verknpfte (N-linked) Glykosylierung, sofern sie sterisch zugnglich ist:
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Fr die O-verknpften (O-linked) Glykosylierungen besteht keine typische Signatur; in den meisten
Fllen ist der erste an einen Ser- oder Thr-Rest geknpfte Zucker N-Acetylgalactosamin; oft werden
an mehreren benachbarten Ser- und Thr-Resten
(Cluster) Glykosylierungen gefunden:
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Auch diverse andere Aminosurereste knnen

O-verknpfte Oligosaccharide tragen. Kollagen ist
z.B. an Hydroxylysin-Resten mit Galactose oder
Glucose-Galactose2-Einheiten modifiziert.
Ein mannosereiches Oligosaccharid mit 14Zuckerresten leitet die N-verknpfte Glykosylierung
ein Bereits whrend der Translation werden im
rauen ER die N-verknpften Oligosaccharide ans
Protein gekoppelt. An der ER-Membran wird zunchst aus 2 N-Acetyl-Glucosaminresten und

5Mannoseresten eine Vorstufe aufgebaut, die ber
eine energiereiche Pyrophosphatbindung mit membranverankertem Dolicholphosphat verbunden ist.
Nach weiteren Modifikationen wird dessen Oligosaccharidteil auf Proteine bertragen (.Abb.22.6).
Die proteingebundenen Oligosaccharidketten
werden im Golgi-Apparat weiter modifiziert. Die
N-Glykosylierungen sind sehr variabel und knnen
120Zuckerreste enthalten. Ihre Zusammensetzung
hngt vom Vorhandensein der verschiedenen hochspezifischen Glykosylierungsenzyme im Golgi-Apparat ab. Jeder Zelltyp besitzt einen bestimmten Satz
solcher Enzyme, der zu einer zellspezifischen Signatur in Form komplexer Oligosaccharide an der
Zelloberflche fhrt.
Die menschlichen Blutgruppen-Haupttypen
(A, B und 0) sind beispielsweise auf genetisch vorbestimmte Glykosylierungsunterschiede der Erythrozytenmembran und verschiedener Epithelien
innerer Organe zurckzufhren. Die Blutgruppen
unterscheiden sich in den Spezifitten der von den

Blutgruppen-Genen codierten Glykosyltransferasen. Die Zellwnde der Darmbakterien (3001000
verschiedene Spezies) und vermutlich auch gewisse
Nahrungsbestandteile prsentieren viele verschiedene Oligosaccharide, ihre Abbauprodukte gelangen in die Blutzirkulation. Das Immunsystem des
heranwachsenden Organismus bildet Antikrper
gegen diese fremden Antigene. Hingegen wird ein
bestimmtes auf den eigenen Erythrozyten vorhandenes Oligosaccharid vom Immunsystem als krpereigenes Antigen erkannt; die Bildung spezifischer
Antikrper gegen die eigenen Antigene wird damit
ausgeschlossen (Abschn.32.6). Deshalb finden
sich in einem Individuum wohl Antikrper gegen
fremde Blutgruppenantigene, da diese bakteriellen
Oligosacchariden entsprechen, nicht aber gegen die
eigenen Blutgruppenantigene.
22.7
Import von Proteinen

in Mitochondrien,
Chloroplasten und Peroxisomen
Mitochondrien und Chloroplasten sind endosymbiontische Organellen, deren Gene zum grten
Teil ins nuclere Genom der Wirtszelle transferiert worden sind
Die Proteinaufnahme in
die Organellen endosymbiontischen Ursprungs erfolgt durch einen anderen Mechanismus als in die
vom ER abstammenden Organellen: Die Proteine
werden im Cytosol synthetisiert, von Rezeptoren
auf den Organellen gebunden und danach durch
deren energieabhngige Importmaschinerie aufgenommen. ATP-hydrolysierende Chaperone (Abschn.3.7) des Cytosols und der Organellen halten
die Proteine in entfalteter oder entfaltbarer Form,
sind beteiligt an der Membrantranslokation und
untersttzen die nachfolgende Faltung.
Amphipathische Signalpeptide fdeln die

mitochondrialen Proteinvorlufer (Precursors)
ber Rezeptoren an der Mitochondrienoberflche
in die Importmaschinerie ein Die etwa 20Ami-
nosurereste langen, vorwiegend NH2-terminalen

Importsignale (Prpeptide) enthalten hydrophobe
und basische, jedoch keine sauren Aminosurereste.
Die basischen Reste alternieren mit ungeladenen,
zumeist hydrophoben Resten, sodass sich eine
293
22.7 Import von Proteinen in Mitochondrien, Chloroplasten und Peroxisomen
22
.. Abb.22.6 N-Glykosylierung eines Proteins im ER. Dolicholphosphat mit seinen vielen hydrophoben Isopren-Einheiten
verankert das Oligosaccharid whrend dessen Synthese in der Membran. Die ersten Zuckerreste (2N-Acetylglucosamin- und
5Mannosereste) werden auf der cytoplasmatischen Seite der ER-Membran angefgt. Danach flippen die Molekle in der
Membran; das Oligosaccharid gelangt auf die luminale Seite der Membran. Dort werden weitere GDP- bzw. UDP-aktivierte
Mannose- und Glucosereste angehngt (nicht gezeichnet). Das verlngerte Oligosaccharid wird en bloc unter Abspaltung
seiner energiereichen Pyrophosphatbindung auf Asn-X-Ser/Thr-Sequenzen naszierender Polypeptidketten bertragen. Die
Amidgruppe der Asparaginseitenkette fungiert dabei als Akzeptor. Die mannosereiche (high-mannose) Glykosylierung wird in
der Folge zumindest teilweise wieder abgebaut. Zelltypspezifische Glykosidasen und Glykosyltransferasen modifizieren danach
die Oligosaccharide und erweitern sie im Golgi-Apparat mit zustzlichen Zuckerresten
amphipathische -Helix bildet (vgl. .Abb.3.8);

die Sequenz eines typischen mitochondrialen Importsignals ist z.B. NHC
3 -Met-Leu-Ser-Leu-Arg+-Glu-Ser-Ile-Arg+-Phe-Phe-Lys+-Pro-Ala-ThrArg+-Thr-Leu-. Das Signalpeptid bindet an den
Importrezeptor, der es an die Importmaschinerie
weiterleitet. Dieser Proteinkomplex schleust das
Protein in einer hydrophilen Pore durch beide
Membranen der Mitochondrien (.Abb.22.7).
Die Polypeptidkette bleibt whrend der Translokation entfaltet und wird im Innern der Organelle
von mitochondrialen Chaperonen empfangen. Die
Bindung der mitochondrialen Chaperone verhindert das Zurckdiffundieren der translozierenden
Kette; die Freisetzung derselben verbraucht ATP.
Der Importkomplex berbrckt die mitochondriale Auen- und Innenmembran und bringt sie so
nahe zusammen, dass die Translokation direkt in
die Matrix der Organelle fhrt. Von dort gelangt ein
Teil der importierten Proteine aufgrund weiterer Signale durch die mitochondriale Sekretionsmaschinerie zurck in die innere Membran oder in den
Intermembranalraum zwischen der inneren und der
ueren Mitochondrienmembran.
Peroxisomen besitzen kein eigenes Genom
Diese Organellen mit variabler Gre besitzen nur

eine einfache Membran. Sie entstehen durch Teilung
oder durch Abknospung aus dem ER. Zustzliche
Proteine werden in gefaltetem Zustand durch die
Membran importiert; das Signal ist meist eine Ser-
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uere Membran,
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Lys-Leu-Sequenz in der Nhe des COOH-Terminus.
Peroxisomen bauen oxidativ mit O2 als Elektronenakzeptor gewisse Verbindungen (z.B. lange Fettsuren mit >18C-Atomen) ab, welche die Hauptstoffwechselwege nicht bewltigen knnen. Dabei
bilden sie H2O2, das sie aber auch gleich entgiften
(Abschn.31.2). In Pflanzen sind sie an der Photorespiration beteiligt (Abschn.20.5).
22.8 Pfrtner-kontrollierter
Transport (Gated transport)

durch die Kernhlle
Die Kernhlle (Nuclear envelope) besteht aus zwei

ber Porenstrukturen verbundenen Membranen
Die innere Membran der Kernhlle enthlt
Proteine, welche an die Intermedirfilamente der

filzhnlichen nucleren Lamina binden. Der Raum
zwischen innerer und uerer Membran bildet ein
Kontinuum mit dem ER:
.. Abb.22.7 Import von Proteinen

in Mitochondrien und Chloroplasten. Die Topologie der beiden
Organellen ist hnlich, allerdings
bildet die Thylakoidmembran
mit dem Thylakoidraum einen
zustzlichen abgeschlossenen
Raum innerhalb der Chloroplasten.
Die Importmaschinerien beider
Organellen sind einander hnlich,
aber nicht homolog. Im vergrerten Ausschnitt wird das Beispiel
der besser bekannten Proteinimport-Poren der Mitochondrien
gezeigt. Whrend der Translokation
eines Proteins durch die beiden
Membranen bilden TOM (Translocator of outer membrane ) und TIM
(Translocator of inner membrane
) einen Komplex; freier
TOM mit andockendem Protein;
zustzlicher Porenkomplex fr
den cotranslationalen Einbau von
Proteinen in die innere Membran
und die Translokation in den Intermembranalraum. Die molekularen
Chaperone, welche die entfalteten
Proteine auerhalb und innerhalb
der Organelle binden, sind nicht
gezeigt
uere Kernmembran
295
22.9 Kontrolle der Faltung und der Lokalisierung von Proteinen
Die Kernhlle einer Sugerzelle besitzt 3000

4000Poren. Der Porenrand besteht aus je 8Multiproteinkomplexen; der ganze Porenkomplex enthlt 30 verschiedene Proteintypen und insgesamt
gegen 500Proteinmolekle. Kleine Molekle diffundieren ungehindert durch die Poren; Molekle von
>5kDa werden durch die Kernporenkomplexe in
beiden Richtungen unter Energieaufwand transportiert. Whrend der DNA-Synthese in der S-Phase des
Zellzyklus transportiert eine einzige Pore im Durchschnitt 100Histonmolekle pro Minute in den Kern;
bei raschem Wachstum mssen in der gleichen Zeit
ungefhr 6 ribosomale Untereinheiten den Kern in
der Gegenrichtung verlassen. Zudem werden laufend viele weitere Proteine transportiert. Die Poren
besitzen spezifische Import- und Export-Rezeptoren. Importsignale (Nuclear localization signals) sind
kurze basische Abschnitte von etwa 48Aminosuren mit Lysin-, Arginin- und Prolinresten; Exportsignale zeigen 4 nahe zusammenliegende hydrophobe
Reste, oft Leucinreste. Im Kern verbleibende (kernresidente) Proteine besitzen nur ein Importsignal,
wogegen Shuttle-Proteine wie die Histone sowohl
Import- als auch Exportsignale aufweisen. Auch reife
mRNA wird kontrolliert aus dem Kern exportiert.
Dank der groen Poren knnen alle Protein- und
RNA-Molekle in nativem Zustand einschlielich
fertig zusammengesetzter ribosomaler Untereinheiten die Kernhlle passieren.
22.9
Kontrolle der Faltung und der

Lokalisierung von Proteinen
durch molekulare Chaperone
und Proteasomen
Fehlerhafte oder falsch lokalisierte Proteine werden mit Ubiquitin markiert und durch Proteasomen abgebaut Die Biosynthese und Zielfindung
von Proteinen insbesondere von Membranproteinen sind fehleranfllige Vorgnge. Bei gewissen ins
ER importierten Proteinen erlangen blo 20% der
neusynthetisierten Molekle die native Faltungsform. Besondere Mechanismen zur Qualittskontrolle fhren deshalb falsch strukturierte oder lokalisierte Proteine dem Abbau zu. Fehlgefaltete Proteine
exponieren in der Regel hydrophobe Bezirke, die bei
22
korrekter Faltung ins Innere des Molekls zu liegen

kmen. Die exponierten hydrophoben Teile bewirken, dass die betroffenen Proteine in wsserigem
Milieu aggregieren. Die molekularen Chaperone
(Abschn.3.7) wirken der Aggregation entgegen:
Ein im Cytosol und auch im ER vorhandenes Hsp70
dient sowohl als Faltungshilfe wie auch als Kontrollpunkt zur Ausmerzung fehlgefalteter Proteine.
Entsteht die lsliche, native Struktur nicht innerhalb
einer begrenzten Zeit, werden sie durch Ubiquitinligasen mit mehreren Ubiquitinmoleklen gekennzeichnet (defekte ER-Proteine werden hierzu durch
eine besondere Glykosylierung markiert und aus
dem ER ins Cytosol exportiert) . Die Proteasomen erkennen Polyubiquitin-markierte Proteine
und bauen sie ab (Abschn.18.1). Die Proteasomen
eliminieren bis zu einem Drittel aller neu synthetisierten Proteine! Die Zelle betreibt demnach einen
groen Aufwand zur Kontrolle der korrekten Struktur und Lokalisierung der Proteine.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517051-0
22.1 Kompartimenthnliche Strukturen
in Bakterien
22.2 Kompartimente der Eukaryontenzellen
22.4 Proteintransport im Golgi-Apparat
22.5 Proteintransport zwischen Golgi-Apparat,
Zelloberflche und Lysosomen
22.6 Proteinglykosylierung whrend Transport
durch ER und Golgi-Apparat
22.7 Import von Proteinen in Mitochondrien,
Chloroplasten und Peroxisomen
22.8 Pfrtner-kontrollierter Transport (Gated
transport) durch die Kernhlle
22.9 Kontrolle der Faltung und der Lokalisierung von Proteinen durch molekulare
Chaperone und Proteasomen
297
Cytoskelett und molekulare

Motoren
23.1
Actinfilamente298
23.2
Mikrotubuli299
23.3
Intermedirfilamente301
23.4
Motorproteine fr den intrazellulren Transport 303

23
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20
Kapitel 23 Cytoskelett und molekulare Motoren
Das Cytoskelett, ein intrazellulres Proteingerst,

ist verantwortlich fr Form, mechanische Festigkeit
und rumliche Organisation der Zelle. Es besteht
aus groen teils linearen, teils vernetzten Proteinassoziaten aus wenigen Typen von Untereinheiten:
Actinfilamente und Intermedirfilamente sind
langgestreckte Polymere aus jeweils einem Typ von
Untereinheit, whrend Mikrotubuli aus Heterodimeren von - und -Tubulin aufgebaut sind. Alle
drei Filamenttypen knnen aus Tausenden von Untereinheiten bestehen und die ganze Zelle durchziehen. Sie knnen nach Bedarf, d.h. auf entsprechende Signale, durch Anlagern weiterer Einheiten
sich verlngern oder sich durch Depolymerisierung
verkrzen. Im Cytoskelett sind sie zu einem dynamischen Gesamtsystem verbunden. Zusammen
mit ATP-getriebenen Motorproteinen ist das Cytoskelett auch verantwortlich fr Formvernderungen
der Zelle und fr intrazellulre Bewegungen: Motorproteine transportieren zusammen mit Actinfilamenten und Mikrotubuli Proteine, Organellen und
Vesikel an deren Zielorte in der Zelle.
Terminologie
Assoziat: Geordnete Aneinanderlagerung
nativer Proteine (z.B. Multienzymkomplexe,
Cytoskelett)
Aggregat: Ungeordnete Aneinanderlagerung
fehlgefalteter Proteine (z.B. bei Proteinfehlfaltungskrankheiten)
23.1 Actinfilamente
Actinfilamente kommen berall in der Zelle vor,
konzentrieren sich aber im Zellcortex, der ueren Region des Cytoplasmas Actinfilamente
knnen in zwei- oder dreidimensionalen Netzwerken vorliegen.
Die Filamente bestehen aus flexiblen Actinpolymeren mit einem Querschnitt von 59nm. Monomeres
Actin ist ein asymmetrisches globulres Protein mit
zwei Domnen. Dadurch ergibt sich eine schraubenartige Packung im Filament und in der elektronenoptischen Darstellung der Eindruck zweier umeinander gewundener Polymerketten. Im Falle einer
Wechselwirkung mit Motorproteinen wie Myosin
sind die Filamente oft gebndelt (z.B. im Muskel;
Abschn.30.1).
Actincortex: eine flexible, kontraktile Hlle unter der Zellmembran Das Motorprotein Myosin
und weitere actinbindende Proteine vernetzen die

Actinfilamente. Nukleationszentren in der Plasmamembran organisieren den Actincortex. Die Signale
zur Reorganisation des Cortex durch neue Bndelung von Fasern stammen oft aus der Umgebung
der Zelle. Die Faserbndel des Actincortex knnen
die Zellmembran verformen und stachelartige bis
lamellenhnliche Ausstlpungen oder Einbuchtungen bilden.
299
23.2Mikrotubuli
23
Chromosomentrennung bei Zellteilung

Centrosom: Microtubuli Organizing Center
MTOC am Minus-Ende der Mikrotubuli einer
Zelle. Im Innern der diffusen Matrix des
Centrosoms befinden sich zwei Centriolen
(Basalkrperchen).
Centromer: Region der Chromosomen, wo die
Chromatiden zusammenhngen und bei der
Zellteilung die Spindelfasern ansetzen.
Kinetochor: Mehrschichtige Struktur auf dem
Centromer mitotischer Chromosomen, an welcher die Spindelfasern (ein einzelner Mikrotubulus in Hefen, 3040Mikrotubuli in Sugern)
ansetzen (.Abb.24.4).
Lamellenhnliche Ausstlpungen (Lamellipodien)

vermitteln das Kriechen von Zellen auf Unterlagen;
Einstlpungen leiten die Furchung der Zelle und deren Teilung in zwei Tochterzellen ein. Kontraktile
Actin-Myosin-Bndel knnen auch auerhalb des
Actincortex vorkommen.
23.2 Mikrotubuli
Die Mikrotubuli sind lange hohle Zylinder aus
Polymeren von -Tubulindimeren
Sie ha-
ben einem Auendurchmesser von 2025nm, sind

relativ steif und knnen von einem Ende der Zelle
bis zum anderen reichen. Sie bilden die grten zellulren Proteinstrukturen, und sie sind polar: Das
sogenannte Minus-Ende der Mikrotubuli ist stabil
ins kernnahe Centrosom eingebettet. Ihr Plus-Ende
mit den exponierten -Untereinheiten ragt in die
Peripherie, ins Cytoplasma hinaus; am Plus-Ende
knnen -Tubulindimere rasch anpolymerisieren
oder wegdissoziieren. Mikrotubuli knnen dadurch
vom Zellzentrum in die Peripherie hinauswachsen
bzw. sich von dort zurckziehen. Ein paar hundert
Mikrotubuli wachsen jederzeit vom Centrosom aus
ins Cytoplasma, einige davon bis zur Zellmembran.
Im Lichtmikroskop beobachtet man unregelmig
wiederkehrende ruckartige geradlinige Bewegungen
von Partikeln: Organellen werden von Motorproteinen den Mikrotubuli entlang transportiert.
Die
Geschwindigkeit der Elongation der Tubuli hngt
von der Konzentration der freien Tubulindimere
ab. Nach dem Erreichen eines bestimmten Ausmaes des Netzes ist die Konzentration der freien
Dimere derart gesunken, dass Depolymerisierung
und Polymerisierung einander die Waage halten.
Diese kritische Konzentration von freiem Tubulin
(20M 2mg mL1) entspricht etwa der halben Gesamtkonzentration. Die Halbwertszeit eines einzelnen Tubulus betrgt rund 10min; Tubulinmolekle
sind mit einer Halbwertszeit von ber 20h wesentlich stabiler. In intakten Zellen knnen Mikrotubuli
mit dem Mikroskop beobachtet werden, whrend
sie durch fluoreszenzmarkierte Tubulinmolekle
verlngert werden. Die Mikrotubuli wachsen mit
konstanter Geschwindigkeit gegen die Zellperipherie, schrumpfen aber pltzlich sehr rasch zurck.
Dieses Phnomen wird als dynamische Instabilitt
der Mikrotubuli bezeichnet. Die Instabilitt ist auf
die Hydrolyse des an -Tubulin gebundenen GTP
zurckzufhren (.Abb.23.1). In Gegenwart eines
nichthydrolysierbaren GTP-Analogs gewachsene
Mikrotubuli sind stabil. Nach der Polymerisierung
wird gebundenes GTP langsam zu GDP hydrolysiert. GDP-Tubulin am Plus-Ende dissoziiert vom
Tubulus. Rasch polymerisierende Tubuli, bei denen die Polymerisierung schneller abluft als die
Mikrotubuli sind dynamische Strukturen
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Ruhender
Tubulus
.. Abb.23.1 Dynamische Instabilitt der Mikrotubuli. Durch die Bindung von GTP wird das Tubulindimer gestreckt und in
dieser Form ins Polymer eingebaut. Langsame Hydrolyse des tubulingebundenen GTPs fhrt zur gekrmmten GDP-Form des
-Dimers und destabilisiert dadurch den Tubulus. Der stabile Bereich des wachsenden Tubulus, in welchem das GTP noch
nicht zu GDP hydrolysiert ist, wird als GTP-Cap bezeichnet
GTP-Hydrolyse, besitzen an ihrem Plus-Ende eine

GTP-Kappe (GTP-Cap), welche den Tubulus vor
der Depolymerisierung schtzt. Verlangsamt sich
die Polymerisierung, geht die Kappe verloren und
der betroffene Tubulus depolymerisiert rasch.
Die dynamische Instabilitt der Mikrotubuli
ermglicht die Morphogenese der Zelle Die
Depolymerisierung der radial vom Centrosom

ausgehenden Mikrotubuli wird in der Zellperipherie gesteuert. rtlich beschrnkte Stabilisierung der Mikrotubuli verlngert Cytoskelett und
Zelle in einer bestimmten Richtung. Die Stabilisierung wird durch Wechselwirkungen zwischen
den Mikrotubuli und zustzlichen Proteinen wie
Tropomyosin erreicht. Die damit entstehende Polarisierung der Zelle ist je nach Zelltypus stabil
(z.B. Epithelzelle mit ihrer apikalen und basalen
Seite) oder vernderlich (z.B. Makrophagen, die
ihre Pseudopodien mal in dieser, mal in jener
Richtung ausstrecken).
Bei der Zellteilung verteilt der aus Mikrotubuli
gebildete Spindelapparat die replizierten Chro-
mosomen auf die beiden Tochterzellen (Abschn.24.3).
Modifikationen und Mikrotubuli-assoziierte

Proteine beeinflussen die Eigenschaften des Cytoskeletts Mikrotubuli (z.B. in Nervenzellen)
knnen durch enzymatische Acetylierung und

andere Modifikationen stabilisiert werden. Die
Modifikationen hngen zusammen mit der Bindung zustzlich stabilisierender Proteine. Diese
Mikrotubuli-assoziierten Proteine (MAP) bilden
eine zelltypspezifisch exprimierte Gruppe von Proteinen, welche die Mikrotubuli stabilisieren sowie
deren Wechselwirkungen mit anderen Zellkomponenten beeinflussen. Besonders im Nervensystem
finden sich MAP-1 und MAP-2 sowie tau ()-Proteine (Bestandteil von Proteinaggregaten bei Alzheimer-Krankheit). MAPs und tau-Proteine binden
auf der gesamten Lnge der Mikrotubuli und vermitteln die Verbindung zu anderen Komponenten
des Cytoskeletts. MAPs knnen auch Motorproteine
sein, welche unter Hydrolyse von ATP entlang der
Filamente wandern.
301
23.3Intermedirfilamente
23
23.3 Intermedirfilamente
Die Intermedirfilamente sind eine Familie schnurhnlicher, reifester Fasern Intermedirfila-
mente finden sich besonders reichlich in Zellen,

welche mechanischem Stress ausgesetzt sind. Sie
bilden Netzwerke zwischen Zell-Zellkontakten und
verleihen den Geweben mechanische Stabilitt.
Filamente im Vergleich
Durchmesser (nm)
Actinfilamente
(Mikrofilamente)
59
Intermedirfilamente
10
Mikrotubuli
2025
Die nuklere Lamina, ein annhernd kugelfrmiges lcheriges Netzwerk innerhalb der Kernhlle,
besteht aus Laminen, einer besonderen Gruppe von
Intermedirfilamentproteinen. Ausgehend von der
Kernlamina durchziehen Intermedirfilamente das
Cytoplasma bis in die Zellperipherie, in Geweben
besonders zu den interzellulren Kontaktstellen
(Desmosomen; Abschn.25.1). Das stabile und unlsliche Netzwerk der Intermedirfilamente bleibt
nach Extraktion der Zellen mit milden Detergenzien als mit fluoreszierenden Antikrpern frbbares
Muster bestehen, was ursprnglich zur Bezeichnung
Cytoskelett gefhrt hat (.Abb.23.2).
Intermedirfilamente bestehen aus langen,

apolaren Polypeptidhelices Im Gegensatz zu
den globulren Actin- und Tubulinmoleklen sind

die Intermedirfilamentproteine lange Faserproteine mit einem NH2-terminalen Kopf und einem
COOH-terminalen Schwanz. Der Mittelteil besteht
aus einer -Helix mit Heptad repeats (repetitive
Consensus-Sequenz von 7Aminosuren). Die Wiederholung hydrophober Aminosurereste in regelmigen Abstnden fhrt zur Zusammenlagerung
zweier -Helices, die sich schraubenartig umeinander winden (Coiled coils; .Abb.3.8). Die apolaren
Dimere lagern sich antiparallel und in der Lnge
versetzt zu Tetrameren zusammen und bilden grere Assoziate, welche ihrerseits zu einem helikalen 10-nm-Filament zusammentreten (.Abb.23.3).
Die meisten Intermedirfilamentproteine haben
zentrale Stabdomnen von etwa 310Aminosure-
.. Abb.23.2 Intermedirfilamentgerst. Das Bild zeigt eine

vierzellige Kolonie menschlicher Leberkarzinomzellen in
Kultur. Mit fluoreszenzmarkierten Antikrpern gegen Keratin,
einem weit verbreiteten Intermedirfilamentprotein, sind die
Intermedirfilamente dargestellt. Die vernetzten Filamente
durchziehen die Zelle von der Kernlamina bis zur Zellmembran
resten, welche die ausgedehnte -Helix bilden. Die

beiden Enddomnen sind jedoch variabel; Intermedirfilamentproteine zeigen Moleklmassen von
40kDa bis 200kDa (.Tab.23.1). Die Enddomnen
ragen oft aus dem Filament heraus und vermitteln die Wechselwirkungen mit anderen zellulren
Strukturen. In einer Zelle knnen mehrere Typen
von Intermedirfilamenten vorkommen, die verschiedenen Intermedirfilamentproteine assoziieren
jedoch nie zu gemischten Filamenten.
Die Intermedirfilamente sind sehr stabil. Sie
werden nicht dauernd umgebaut wie Mikrotubuli
und verschwinden nicht whrend der Zellteilung
wie Actinfilamente. Eine Ausnahme ist die nuklere
Lamina, die whrend der Mitose zerfllt, sobald sie
durch eine Zellzyklus-Kinase phosphoryliert wird.
Nach beendeter Zellteilung werden die Modifikationen durch Phosphatasen rckgngig gemacht und
die nuklere Lamina tritt wieder zu einem Netz zusammen.
Intermedirfilamente sind uerst reifest
Die verschiedenen Filamente verhalten sich bei mechanischer Belastung unterschiedlich. Mikrotubuli
lassen sich strecken; sie reien, sobald sie auf etwa
das Anderthalbfache ihrer Lnge gedehnt werden;
Actinfilamente sind etwas zugfester, aber auch sie
reien bei hherer Belastung. Die elastischen Inter-
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.. Abb.23.3 Aufbau der Intermedirfilamente. Die Zusammenlagerung der Untereinheiten des Intermedirfilaments nach
dargestelltem Muster luft spontan in weiteren nicht dargestellten Schritten bis zur Bildung von Protofilamenten. Acht dieser
Protofilamente bilden ein Intermedirfilament mit einem Durchmesser von etwa 10nm
10
11
.. Tab.23.1 Proteine der Intermedirfilamente

Gruppe
Komponenten
Lokalisierung
Keratine
13
Typ I (sauer) oder Typ II (neutral/

basisch)
4070kDa
Weit verbreitet, besonders in Epithelzellen und Derivaten (Haare, Hrner,

Hufe, Ngel)
Nuklere Lamine
Nuklere Lamina
14
Lamine A, B, C
6575kDa
Vimentin-hnliche Proteine
Vimentin 54kDa
Mesenchymale Zellen, hufig whrend Entwicklung
Desmin 53kDa
Muskel
Glial fibrillary acidic protein (GFAP)

50kDa
Gliazellen (Astrozyten und

Schwann-Zellen)
Peripherin 66kDa
Neuronen
Neurofilamentproteine NF-L, NF-M,

NF-H
60130kDa
Neuronen
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Neuronale Intermedirfilamente
303
23.4 Motorproteine fr den intrazellulren Transport
23
medirfilamente sind jedoch die weitaus zugfestesten Filamente und sind hauptverantwortlich fr die
mechanische Stabilitt tierischer Zellen.
Wenig Intermedirfilamente in Pflanzen
Die mechanische Stabilitt der Pflanzengewebe ist durch die starren Zellwnde aus
Cellulose gewhrleistet; pflanzliche Gewebe
enthalten deshalb wesentlich weniger Intermedirfilamente als tierische.
23.4
Motorproteine fr den
intrazellulren Transport
Kinesine und Dyneine transportieren Organellen

den Mikrotubuli entlang Mit Fluoreszenzmikros-
kopie knnen Organellen beobachtet werden, wie sie

sich den Mikrotubuli entlang bewegen, umgekehrt
bewegen sich Mikrotubuli auf proteinbeschichtetem
Glas. Mit solchen Motilittstests konnten Dutzende
von Kinesinen und Dyneinen, den mikrotubuliassoziierten Motorproteinen, charakterisiert werden. Kinesine bewegen sich typischerweise zum Plus-Ende
(peripheren Ende) der Mikrotubuli, Dyneine zum Minus-Ende, d.h. gegen das Centrosom (.Abb.23.4).
Die weniger zahlreichen Dyneine besorgen den Organellentransport und sind Teil des Spindelapparats
whrend der Mitose. Die Kinesine bilden eine grere
Familie und spielen ebenfalls eine Rolle beim Transport von Organellen und bei Mitose und Meiose sowie beim axonalen Transport synaptischer Vesikel.
Ein spezifischer Rezeptor auf der Oberflche der Organelle bindet ber ein Adaptorprotein an ein Mikrotubuli-abhngiges Motorprotein, z.B. ein Kinesin
bei Vesikeln des endoplasmatischen Retikulums oder
ein Dynein bei Golgi-Vesikeln. Die verschiedenen
Motorproteine unterscheiden sich je nach zugehrigem Filament und Fracht (Cargo). Sowohl Dyneine
wie auch Kinesine bestehen aus zwei schweren und
zwei oder mehreren leichteren Polypeptidketten. Jede
schwere Kette enthlt einen globulren ATP-bindenden Kopf und einen Schwanz mit einer Reihe stabfrmiger Domnen.
Die Kopfdomnen der Motorproteine bestimmen Richtung und Geschwindigkeit der Bewegung Die Kopfdomnen sind ATPase-Motoren,
.. Abb.23.4 Motorproteine transportieren ihre Fracht den

Mikrotubuli entlang. Die Richtung des Transports wird durch
den Typ des Motorproteins bestimmt, die Art der Fracht durch
vielfltige Adaptorproteine
die an Mikrotubuli oder im Fall von Myosin an

Actinfilamente binden. Der Schwanzteil bestimmt
die Fracht, indem er mit spezifischen Adaptorproteinen interagiert.
Die meisten Motorproteine bewegen sich nur in
einer Richtung entlang den Mikrotubuli. In Axonen
beobachtet man kinesinvermittelten Transport von
Organellen, welche sich vom Zellkrper weg bewegen; Dyneine bringen ihre Fracht zum Zellkrper.
Das Dynein wird wie alle Proteine im Zellkrper
synthetisiert und muss danach in nichtfunktionellem Zustand zuerst in die Peripherie transportiert
werden, um dort Cargo aufzunehmen und zum
Zellkrper zu befrdern.
Spezialisierte Bndel von Mikrotubuli und

Motorproteinen bewegen Flagellen und Cilien
Auf der Oberflche vieler Zellen, z.B. von Pro-
tozoen oder von Lungenepithelzellen, befinden

sich haarhnliche Anhnge, die durch koordinierte
Bewegungen Flssigkeitsstrme an der Zelloberflche erzeugen oder die Zelle in wsserigem Milieu
fortbewegen. In den Lungen sind es etwa 109Cilien
pro cm2, welche den sezernierten Schleim zusammen mit abgestorbenen Zellen und eingeatmeten
Partikeln von den Lungen zum Rachen heraufbefrdern, von wo er hinuntergeschluckt wird. Eizellen
werden in hnlicher Weise durch den Eileiter vom
Ovar zum Uterus bewegt. Die Flagelle (lat. flagellum, Geiel), ein den Cilien verwandtes Organell,
treibt das Spermium zur Eizelle. Whrend die Cilien koordinierte peitschenartige Schlge ausfhren,
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schlngeln sich die lngeren Flagellen durch wellenfrmige Formnderungen vorwrts.

Die Grundstruktur beider Organellen ist das
Axonem, das sich ber die ganze Lnge einer Cilie oder Flagelle erstreckt und aus neun doppelten
Mikrotubuli besteht, die sich um ein zentrales Mikrotubulipaar scharen. Dynein verbindet die Mikrotubuli und krmmt unter ATP-Verbrauch die
Cilien und Flagellen. Die Basis fr das Axonem
bilden die Basalkperchen (Centriolen) mit neun
Tripletts von Mikrotubuli im Actincortex der Zelle.
Das Arrangement der Tripletts bildet das Muster fr
das Axonem. Aus jeweils zwei von drei Mikrotubuli des Basalkrperchens sprieen die axonemalen Mikrotubuli. Neue Centriolen entstehen durch
Duplikation aus den vorhandenen Centriolen. Die
Orientierung des Cilienschlags wird durch die Orientierung der Centriolen festgelegt.
Bakterielle Flagellen sind vollkommen anders
gebaut als Flagellen eukaryontischer Zellen. Das
bakterielle Flagellum ist ein helikal gewundenes
Rohr aus dem Protein Flagellin. Es wird an seiner
Basis im Bereich der Zellmembran von einem aus
einem Rotor und einem Stator gebildeten Motorkomplex in rotierende Bewegung versetzt und zieht
oder stt die Zelle je nach Drehrichtung, welche
hufig wechselt (bakterielle Chemotaxis; Abschn.27.3).
Links auf
Springer Website:
027-6-1517242-0
23.1 Actinfilamente
23.2 Mikrotubuli
23.3 Intermedirfilamente
23.4 Motorproteine fr den intrazellulren
Transport
305
Zellzyklus; Kontrolle von

Zellwachstum und Zelltod
24.1
Konzept des Zellzyklus 306
24.2
Mitosen und Meiosen whrend des

Lebenszyklus der Organismen 307
24.3
Maschinerie des Zellzyklus 308
24.4
Wachstumskontrolle und Tumorbildung309
24.5
Kontrolle der Bereitschaft zur Teilung: Checkpoints 312
24.6
Apoptose, programmierter Zelltod 313

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Kapitel 24 Zellzyklus; Kontrolle von Zellwachstum und Zelltod
Durch Zellteilung entsteht aus der befruchteten Eizelle ein erwachsener Mensch mit etwa 1014 Zellen.
Da whrend der Morphogenese gewisse Zellen kontrolliert absterben, werden wesentlich mehr als 1014
Zellen gebildet, bis ein Mensch zur vollen Gre
ausgewachsen ist. Auch nachher finden weiterhin
Zellteilungen statt: Die Teilung von Stammzellen
(Abschn.36.1) liefert Ersatz fr abgestorbene
Zellen; der Zellnachschub ist besonders intensiv in
den Geweben mit hohem Zellumsatz, wie Epidermis
(Oberhaut), Darmschleimhaut oder blutbildendem
Knochenmark. Die meisten differenzierten Zellen
eines adulten Organismus befinden sich jedoch im
Ruhezustand und teilen sich nicht mehr. Wachstumsfaktoren und andere uere Einwirkungen
knnen den Ruhezustand entsprechender pluripotenter Stammzellen beenden und sie erneut zur
Teilung bringen, z.B. bei der Wundheilung.
Wachstum und Zellvermehrung
Bei prokaryontischen und auch eukaryontischen Zellen wird der Ausdruck Wachstum
zumeist verwendet zur Bezeichnung der Vermehrung der Zellen durch Teilung und nicht
nur des Grerwerdens der einzelnen Zellen.
Eine lebende Zelle hat grundstzlich drei Mglichkeiten: Sie kann ruhen, in den Zellzyklus eintreten
oder sterben. Die Entscheidung zum Zelltod fllt
in der Regel, wenn die Zelle nicht mehr gebraucht
wird oder schdigend wirkt, indem sie sich z.B. am
falschen Ort befindet oder durch Mutationen die
Wachstumskontrolle verloren hat. Komplexe Mechanismen kontrollieren die Vorgnge, die zu Zellvermehrung oder Zelltod fhren. In vielen Fllen
knnen bei Ausfall eines bestimmten Kontrollmechanismus andere Mechanismen mit hnlicher Wirkung einspringen. Nie ist es ein einzelner Faktor,
der das berleben einer Zelle kontrolliert, sondern
immer ein Signalbermittlungs-Netzwerk, welches
zahlreiche Pro- und Kontra-Signale integriert. Fllt
die Entscheidung auf Zelltod, wird wenn mglich
der Vorgang des kontrollierten Zelltods (Apoptose) eingeleitet: Die Makromolekle der Zelle werden einem regulierten Programm gem abgebaut
und resorbiert. Falls der energieabhngige Weg der
Apoptose nicht mehr eingeschlagen werden kann,
zerfllt die Zelle in einem wenig kontrollierten Prozess, der Nekrose. Dabei entstehen toxische Produkte und schwer resorbierbare Zellfragmente, die
eine Entzndungsreaktion und die Einwanderung
von Phagozyten auslsen.
Redundanz
Produkte verschiedener Gene, welche dieselbe
Funktion oder sehr hnliche Funktionen
ausfhren knnen, werden als redundante
Proteine oder RNAs bezeichnet. Die Redundanz sichert die Zelle gegen Mutationen in
Genen, deren Proteine das Zellwachstum
kontrollieren.
24.1
Konzept des Zellzyklus
Der Zellzyklus ist ein Modell Zellen sind variable
Gebilde, die sich laufend ihrer Umgebung anpassen. Die Zellteilung verluft je nach Zelltyp unterschiedlich, und jede Zelle ist als ein Individuum zu
betrachten. Die Vergrerung der Zelle und deren
Teilung in zwei Tochterzellen werden daher nicht
einheitlich kontrolliert. Dennoch sind einige regulatorische Grundprinzipien festzustellen, die fr
praktisch alle Zellen zutreffen.
Der Zellzyklus luft in mikroskopisch und

biochemisch unterscheidbaren Phasen ab
Die vier Phasen sind die G1-, S-, G2- und M-Phase
(.Abb.24.1). G1 und G2 stehen fr Gap-Phasen

(Zwischenphasen), S fr Synthese und M fr Mitose. Ruhende (sich nicht teilende) Zellen, d.h. die
allermeisten somatischen Zellen, befinden sich im
Nebenschluss des Zyklus in der G0-Phase. Die G1und G2-Phasen knnen in den Zyklen bestimmter
Zellen, z.B. frher embryonaler Zellen, fehlen.
Terminologie
Somatische Zellen: Krperzellen auerhalb
der Keimbahn.
Keimzellen: Eizellen und Spermien, einschlielich deren Vorluferzellen. Keimbahn:
Zellfolge in der Individualentwicklung (Ontogenese), welche die Erbinformation direkt an
die Nachkommen weitergibt.
24
307
24.2 Mitosen und Meiosen whrend des Lebenszyklus der Organismen
In den Gap-Phasen wachsen die Zellen und stellen

die in der nchsten Phase bentigten Biomolekle
bereit; whrend der S-Phase wird die gesamte chromosomale DNA repliziert; und in der M-Phase werden die Chromosomen auf die zwei Tochterzellen
verteilt, die sich anschlieend trennen (Cytokinese).
Die Zellzyklusphasen auerhalb der Mitose werden
als Interphase zusammengefasst.
Frhe embryonale Teilungen laufen rasch

und ohne Vermehrung der Zellmasse ab Das
Eindringen des Spermiums aktiviert den Zyklus

der Eizelle, die darauf eine Reihe schneller Zyklen von nur je 3h durchluft. Whrend dieser
Furchungsteilungen halbiert sich die Zellgre bei
jeder Teilung; die Zellmasse wird nicht vermehrt,
es wird blo das Genom verdoppelt. Sobald bei der
Furchung die Gre somatischer Zellen des adulten Organismus erreicht wird, verlngert sich der
Zellzyklus um eine Wachstumsphase (in G1): Der
regulre Zellzyklus im adulten Suger dauert mindestens 24h.
24.2
Mitosen und Meiosen whrend

des Lebenszyklus
der Organismen
Diploide somatische Zellen durchlaufen Mitosen;

das haploide Genom der Keimzellen entsteht bei
der Meiose Bei der Mitose wird die DNA in der
S-Phase verdoppelt, worauf die zwei neuen Genome

auf die Tochterkerne und -zellen aufgeteilt werden.
Eine diploide somatische Sugerzelle wird somit
whrend der S-Phase kurzfristig zu einer tetraploiden Zelle, die bei der Cytokinese in zwei diploide
Tochterzellen gespalten wird; der tetraploide Kern
der G2-Zelle ist grer als der Kern der G1-Zelle.
Bei der Meiose finden im Gegensatz zur Mitose zwei Zellteilungen statt. Nach der Replikation
der DNA paaren sich die homologen Chromosomen. Gleichzeitig ist die DNA-Rekombination
massiv stimuliert; in den gepaarten Regionen werden Gene und Gensegmente ausgetauscht. Danach
werden in der ersten Zellteilung die Chromosomen
durch den Spindelapparat getrennt. In einer zweiten Zellteilung, die in einem verkrzten Zyklus ohne
DNA-Replikation abluft, werden die Chromatiden
voneinander getrennt.
24 h
Point of no return
.. Abb.24.1 Der eukaryontische Zellzyklus. Die schematische Darstellung eines typischen Zyklus von etwa 24h Dauer
deutet die relativen Lngen der einzelnen Phasen an, die
allerdings je nach Zelltyp verschieden sind. Die G1-Phase
kann sehr lange dauern, u.U. bis zum Absterben der Zelle. Bei
extrem langandauernder G1-Phase befindet sich die Zelle
nicht mehr im Zyklus sondern im G0-Zustand. G1, Gap (Lcke,
Zwischenphase)-Phase1; G2, Gap-Phase2; S, (DNA-)Synthese-Phase; M, Mitose; Point of no return, Zeitpunkt in G1-Phase,
ab dem der Zyklus unaufhaltsam weiterluft. Die Interphase
umfasst alle Bereiche des Zellzyklus auerhalb der Mitose
Chromosomen und Zellteilung

Ploidie: Anzahl der ungepaarten Chromosomen pro Zelle. Ein haploides menschliches
Genom enthlt 23Chromosomen; ein diploides deren 46, d.h. je einen mtterlichen und
vterlichen Chromosomensatz. Ein haploider
Chromosomensatz besteht aus 22Autosomen
und einem Geschlechts-Chromosom: dem
X-Chromosom oder dem Y-Chromosom (diploid weiblich: XX; diploid mnnlich: XY).
Meiose: Reduktionsteilung der diploiden Zelle
zu haploiden Tochterzellen.
Chromatid: einzelnes Chromosom mit nur einem DNA-Doppelstrang. Die zwei Tochterchromatiden werden whrend der Kondensation
der Chromosomen in der Mitose sichtbar.
Whrend des sexuellen Lebenszyklus lsen diploide und haploide Phasen einander ab Diploide
Zellen vermehren sich durch Mitosen; eine Meiose

bringt sie in die haploide Phase. Bei gewissen primitiven Eukaryonten, z.B. Hefen, vermehren sich auch
die haploiden Zellen durch Mitosen und knnen
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Cycline
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CDKs
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den Hauptteil einer Zellpopulation einnehmen. Bei

vielen niederen Pflanzen ist die haploide Phase auf
eine kurze Periode des Lebens beschrnkt. Bei hheren Pflanzen und Tieren befinden sich nur noch
die Keimzellen in der haploiden Phase.
24.3
Maschinerie des Zellzyklus
Fluktuationen der Konzentration der Cycline

begleiten den Zellzyklus Nach der Zugabe von
Spermien durchlaufen befruchtete Seeigel-Eier eine

Reihe synchroner Zellteilungen. Eine fr analytische Zwecke ausreichende Menge synchronisierter
Zellen ist damit einfach zu erhalten. Die elektrophoretische Auftrennung der Proteine solcher Zellen
zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Befruchtung zeigt, dass die Menge der meisten Proteine
entsprechend der Vergrerung und Vermehrung
der Zellen mit der Zeit zunimmt. Nur die Cycline
sind periodischen Konzentrationsschwankungen
unterworfen (.Abb.24.2): Sie verschwinden vor
bergehend und tauchen im nchsten Zellzyklus
wieder auf.
Eine Familie Cyclin-abhngiger Proteinkinasen treibt den Zellzyklus voran Proteinkinasen
kontrollieren nicht nur Stoffwechselvorgnge (Abschn.14.2, 16.2 und 17.4), sondern auch den Zellzyklus. Die Besonderheit der Zyklus-Proteinkinasen
ist, dass sie nur als Komplexe mit Cyclinen aktiv
sind, sie werden daher als Cyclin-dependent kinases
(CDKs) bezeichnet. Die regelmige Zu- und Abnahme der Konzentration der Cycline whrend dem
Zellzyklus wird begleitet von einer gleichermaen
fluktuierenden CDK-Aktivitt (.Abb.24.2). Wh-
.. Abb.24.2Die
Schwankungen der
Konzentration der Cycline und der Aktivitt
der CDKs (Cyclin-dependent kinases) im Zellzyklus. Das Verschwinden
und Wiederauftauchen
der Cycline wird leicht
verzgert durch die Aktivitt der CDKs, welche
die Mitose auslsen,
widerspiegelt
rend der Cyclingehalt der Zelle in der Interphase

stetig ansteigt, verndert sich die CDK-Aktivitt
sprungartig und bringt die Mitose in Gang.
Die CDK-Cyclin-Komplexe werden durch Phosphorylierung bzw. Dephosphorylierung gesteuert Die CDK-Cyclin-Heterodimere werden erst
aktiv, nachdem die T-Schleife (T-Loop) der Kinaseuntereinheit durch eine bergeordnete Proteinkinase phosphoryliert worden ist und eine dadurch
ausgelste Konformationsnderung des T-Loops die
aktive Stelle des Enzyms freigelegt hat. Eine zweite
bergeordnete Kinase wirkt dieser Aktivierung entgegen: Eine Phosphorylierung an der aktiven Stelle
der CDK verhindert die korrekte Orientierung des
gebundenen Substrats ATP. Das Fortschreiten des
Zyklus wird durch eine Phosphatase ausgelst,
welche die hemmende Phosphorylierung an der
aktiven Stelle entfernt. Die Aktivitt des CDK-Cyclin-Komplexes wird zudem durch hemmend wirkende Untereinheiten (z.B. p16 oder p21) reguliert.
Terminologie der Proteine
Mit p und einer Zahl, welche der Moleklmasse in kDa entspricht, z.B. p21, p53 etc.,
werden Proteine bezeichnet, die keinen anderen Namen tragen.
Heute sind rund 10 homologe menschliche CDKs,

etwa ebenso viele Cycline und eine Reihe inhibitorischer Untereinheiten bekannt. Fr den bertritt
von einer bestimmten Phase des Zellzyklus zur
nchsten sind jeweils Komplexe einer phasenspezifischen CDK mit einem phasenspezifischen Cyclin
zustndig (.Abb.24.3). Die Substrate der CDKs
24
309
24.4 Wachstumskontrolle und Tumorbildung
.. Abb.24.3 Aktivierung und Desaktivierung der Cyclin-abhngigen Kinasen (CDKs). Als regulatorisches Protein
bestimmt ein Cyclin nicht nur, ob die
Kinase aktiv ist, sondern auch, welche
Art von Substrat sie umsetzt. Deshalb
werden verschiedene Gruppen von
Zielproteinen am Anfang der S-Phase
und zu Beginn der Mitose phosphoryliert. Als zustzliche Kontrollmglichkeit besitzt die Kinase je eine die
Aktivitt positiv (am T-Loop) oder
negativ (an der aktiven Stelle, nicht
gezeigt) beeinflussende Phosphorylierungsstelle (zur Zeichenerklrung vgl.
.Abb.24.1)
CDK
Mitosen-Cyclin
Cyclin abgebaut
CDK
Cyclin
Cyclin abgebaut
CDK
variieren je nach Phase des Zellzyklus: Am G1-Sbergang werden vor allem Transkriptionsfaktoren zur Expression der Replikationsenzyme phosphoryliert. Zu Beginn der Mitose phosphorylieren
CDKs Effektorproteine, welche zu morphologischen
Konsequenzen fhren (Zerfall der Kernhlle durch
Phosphorylierung von Lamin, Chromosomenkondensation, Bildung der Mikrotubuli des Spindelapparats). Beim Abschluss einer Phase werden die
phasenspezifischen Cycline ubiquitiniert (Abschn.18.1) und rasch abgebaut.
Der Spindelapparat verteilt die Chromosomen
auf die Tochterzellen Die Mitose kann in mehrere
Phasen unterteilt werden, die sich im Lichtmikroskop aufgrund der Gestalt des Spindelapparats und
der Lokalisierung der kondensierten Chromosomen
unterscheiden lassen (.Abb.24.4). Motorproteine
befinden sich einerseits im Kinetochor, welches das
Chromosom mit den Kinetochor-Mikrotubuli verbindet, und andererseits zwischen sich gegeneinander bewegenden Mikrotubuli der inneren Spindelhlften. Die ueren Mikrotubuli der Spindel sind
ber Motorproteine mit Verankerungspunkten im
Actincortex in der Zellperipherie verbunden. Auf
diese Weise entstehen die Krfte, welche die Chromosomenhlften und Spindelpole whrend der Mitose auseinander ziehen.
24.4 Wachstumskontrolle
und Tumorbildung
Wachstumsfaktoren stimulieren die Vermehrung

von Sugerzellen Hefezellen knnen sich in Mini-
malmedien z.B. mit Glucose, Aminosuren und Vitaminen vermehren. Bei hheren Eukaryonten gengen diese Nhrstoffe zwar zum Erhalt der Zellen,
die Zellen beginnen sich aber erst zu teilen, wenn sie
durch Wachstumsfaktoren (Abschn.27.3) stimuliert werden. Der bergang vom Ruhezustand der
Zelle zum aktiven Zyklus wird als Start bezeichnet.
Startkinasen lsen den bergang zwischen G0/G1und S-Phase aus. In Hefezellen werden die Startkinasen aktiviert, sobald ausreichend Nhrstoffe zur
Verfgung stehen; in Sugerzellen wird der Phasenbergang durch Wachstumsfaktoren ausgelst. In
beiden Fllen aktivieren die vernderten Bedingungen intrazellulre Signalbermittlungsketten,
welche den Zellzyklus steuern.
Zell-Zell-Kontakte hemmen das Gewebewachstum Direkte Wechselwirkungen zwischen
benachbarten Zellen knnen ber Signaltransduktion und Zellzykluskontrolle das Gewebewachstum

einschrnken. In Kulturen normaler Zellen bringt
diese Kontaktinhibition das Wachstum zum Erliegen, sobald eine einlagige Zellschicht (Monolayer)
den Boden der Kulturschale vollstndig bedeckt;
Krebszellen hingegen haben die Kontaktinhibition
verloren und wachsen mehrlagig (Multilayer). An
310
1
2
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24
5
Kinetochor
.. Abb.24.4Chromosomensegregation
(Beispiel MeioseII). Zug- und Stokrfte
bringen die Chromatiden an ihre Zielorte. In
der ersten Phase werden bei stabiler Position
der Spindelpole die Chromatiden durch
Mikrotubuli der Spindelfasern auseinander
gezogen (Kinetochor: Struktur aus Proteinen
und DNA-Abschnitten, an welcher die Spindelfasern ansetzen). In der zweiten Phase
dehnt sich die gesamte Spindel zusammen
mit den Chromatiden seitlich aus. Gegen
Ende der Teilung werden die Chromatiden
noch weiter zu den Polen hin gezogen. Die
Wechselwirkungen zwischen den wachsenden Microtubuli der einen Spindelhlfte und
denjenigen der anderen rufen Stokrfte
hervor, welche die Spindel ausdehnen
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Sto-
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Wundrndern entfllt die Kontaktinhibition; von

den Rndern her wachsen Zellen ein und beheben
den Defekt.
In Krebszellen sind Gene der Wachstumskontrolle ausgefallen Sechs Merkmale sind typisch
fr einen malignen Tumor, alle haben einen engen

Bezug zur Kontrolle des Zell- und Gewebewachstums (.Tab.24.1). Grundstzlich wird angenommen, dass die Zellen eines Tumors von einer einzelnen mutierten somatischen Zelle abstammen.
Die genetisch identischen Nachkommen eines einzelnen Individuums werden als Klon oder Stamm
(Strain) bezeichnet.
Die hufigsten Mutationen bei der Initiation eines Tumors betreffen Gene, die zur Stabilisierung des
Genoms beitragen. Wird das Gen eines Proteins inaktiviert, welches an der DNA-Reparatur beteiligt ist,
erhht sich die Frequenz, mit der sich im Genom der
Zelle und ihrer Nachkommen Mutationen anhufen.
Mutationen, welche entweder Protoonkogene (Abschn.12.3) aktivieren oder Tumorsuppressorgene
(Abschn.24.5) inaktivieren, frdern die Entstehung
eines Tumors. Nach und nach verlieren die betroffenen Zellen die Kontrolle ber ihr Wachstum: Die
Promotionsphase des Tumors beginnt. In einem in
der Regel jahrelangen Prozess entsteht aus der ursprnglichen mutierten Zelle in Wechselwirkung mit
der Umgebung ein neues Gewebe, ein Tumor.
Gutartige oder benigne Tumoren (z.B. Adenome oder Myome) wachsen am Ort ihrer Entste-
311
.. Tab.24.1 Sechs Merkmale maligner Tumoren; ein

Tumor wird erst maligne, wenn er alle sechs angefhrten Eigenschaften erworben hat
Merkmal
Molekulare Grundlage
(Beispiel)
Erhhte Eigenversorgung mit Wachstumssignalen
Erhhung von RAS (Onkoprotein)
Unempfindlichkeit auf
anti-Wachstumssignale
Verlust von pRB, Retino

blastoma-Protein (Tumorsuppressorprotein)
Vermeiden von Zelltod

(Apoptose)
berproduktion des berlebensfaktors

IGF1, Insulin-like growth
factor 1
Unbegrenztes Replika
tionspotenzial, Aus
bleiben der Alterung
(der Seneszenz)
Erhhte Aktivitt
der Telomerase
Permanente Blutgefbildung (Angiogenese)
Produktion eines Induktors fr VEGF, Vascular

endothelial growth factor
Invasion ins Gewebe

und Metastasierung
Inaktivierung von E-Cadherin (Zelladhsionsprotein)
hung, respektieren die Gewebegrenzen und bilden

keine Ableger. Bsartige oder maligne Tumoren
(Karzinome, Sarkome und Leukmien) hingegen
zeichnen sich durch invasives Wachstum aus, penetrieren die Gewebegrenzen und durchdringen die
Gefwnde: Tumorzellen gelangen in Lymph- und
Blutbahn und bilden Ableger (Metastasen).
Die Transformation einer normal wachsenden Zelle zu einer unkontrolliert proliferierenden
Zelle beruht auf vielfacher Vernderung somatischer DNA Endogene und exogene Faktoren fr-
dern die Transformation: Chemische Stoffe durch

Modifikation der DNA, genetische Prdisposition
durch mangelhafte DNA-Reparatur (Abschn.8.3),
ionisierende Strahlung, Bildung von O2-Radikalen
(Abschn.31.3) und Tumorviren durch Insertion/Deletion von DNA im Wirtsgenom (Abschn.12.3).
Neu gebildete Blutgefe stimulieren das

Wachstum Ein Tumor kann nur dann ber eine
Gre von rund einem Millimeter Durchmesser
24
hinauswachsen, wenn er durch neu gebildete Blutgefe versorgt wird (Angiogenese). Mit zunehmendem Abstand zu einer Blutkapillare nimmt die
Lebensfhigkeit von Zellen aus zwei Grnden ab:
Mangel an Nhrstoffen, aber auch an Wachstumsund berlebensfaktoren, welche vom Endothel
(einlagige Zellschicht der Kapillarwand) produziert
werden. Erwirbt der Tumor die Fhigkeit, Blutgefe z.B. durch Sekretion bestimmter Wachstumsfaktoren anzulocken, wird er besser versorgt und
wchst. In weiteren Schritten kann der Tumor die
Fhigkeit erwerben, Gefwnde zu penetrieren
und zu metastasieren.
Zur Zelltransformation wrden prinzipiell
sechs Mutationen gengen Meist sind allerdings
mehr Mutationen notwendig, um die sechs zur

malignen Transformation einer Zelle notwendigen
Eigenschaften (.Tab.24.1) zu erwerben. In der Regel werden Tumorzellen durch Zelltod (Apoptose;
Abschn.24.6) oder Immunreaktionen des Krpers
(Kap.32) eliminiert, bevor in einer Zelle alle zur
Transformation notwendigen Prozesse abgeschlossen sind. Nur im seltenen Fall, dass alle Abwehrmechanismen unterlaufen worden sind, entsteht ein
maligner Tumor.
Auch bei virusbedingtem Krebs (Abschn.12.3) erklrt die Beteiligung des Virus nur einen Teilaspekt des zellpathologischen Geschehens.
Die maligne Transformation von Zellen ist in jedem
Fall die Folge eines vernderten genetischen Programms in somatischen Zellen, welches das Resultat
eines ber mehrere Jahre dauernden, mehrstufigen
Geschehens mit mannigfachen Ursachen ist. Genetische, infektise (z.B. virale), ernhrungs- und
umweltbedingte Faktoren spielen dabei zusammen.
Die Entwicklung von Resistenz gegen Zytostatika wird durch die Heterogenitt des Tumorgewebes und die erhhte Mutationsfrequenz in
Krebszellen begnstigt Woher stammt die bei
einer Krebsbehandlung sich hufig entwickelnde

Resistenz des Tumors gegen verschiedenste Zytos
tatika? Whrend der oft jahrelangen Entwicklung
eines malignen Tumors erwerben die ursprnglich
monoklonalen Krebszellen zahlreiche weitere Mutationen, sodass sich der Tumor zu einem heterogenen, mosaikartigen Gewebe aus verschiedenartig
mutierten Zellklonen entwickelt. Die zahlreichen
Folgemutationen garantieren, dass Tumoren in der
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Regel einige Zellen enthalten, welche sich durch

eine gewisse Resistenz gegen ein bestimmtes Zytostatikum auszeichnen; die hohe Mutationsfrequenz der Tumorzellen ermglicht zudem, unter
dem Selektionsdruck der Behandlung die Resistenz
rasch zu erhhen.
Terminologie
Neoplasien: Neubildungen von Gewebe aufgrund von Verlust der Wachstumskontrolle:
Karzinom: von epithelialem Gewebe ausgehend, z.B. Lungenkarzinom
Sarkom: von mesenchymalem Gewebe ausgehend, z.B. Osteosarkom
Leukmie: von Blutvorluferzellen im Knochenmark ausgehend, z.B. akute lymphatische
Leukmie
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.. Tab.24.2 Zusammenfassung der Zellzyklus-Kontrollpunktea

Zyklus
phase
Kontrollmerkmal
Reaktion der Zellzyklus-Maschinerie
G1
Zelle zu klein,
DNA-Schden
Stopp! Keine Aktivierung der Start-Kinase
DNA-Replikation
unvollstndig
Stopp! Keine
Vorbereitung zur
Aktivierung des CDKCyclin-Komplexes
G2
Zelle zu klein,
DNA-Schden
Stopp! Keine Aktivierung des CDK-Cyclin-

Komplexes
Chromosom
nicht an Spindel
Stopp! Keine Inaktivierung des CDKCyclin-Komplexes
Die Checkpoints, an denen durch Signale ausgelste mehrstufige Mechanismen den Ablauf des Zyklus
hemmen, sind angegeben.
24.5
Kontrolle der Bereitschaft

zur Teilung: Checkpoints
Kontrollpunkte (Checkpoints) berwachen den

korrekten Abschluss jeder Phase des Zellzyklus
Jede Zelle ist dauernd schdigenden Einfls-
sen ausgesetzt, welche die Integritt der DNA beeintrchtigen knnen. Treten DNA-Schden auf
oder stimmt z.B. die Verteilung der Chromosomen
in der Metaphasenplatte nicht, so stellen Sensoren
diese Unregelmigkeiten fest und bermitteln
entsprechende Signale in erster Linie an die Zellzykluskinasen. Der Zellzyklus wird vorbergehend
arretiert und damit Zeit zur Reparatur der Schden gewonnen. Bei Erfolg der DNA-Reparatursysteme wird der Zellzyklus wieder in Gang gesetzt;
bei irreparablen Schden wird der programmierte
Zelltod (Apoptose; Abschn.24.6) eingeleitet. An
den Kontrollpunkten werden nebst der Intaktheit
der DNA auch die Gre der Zelle und die korrekte Ausbildung des Spindelapparats berwacht
(.Tab.24.2).
Die Kontrollpunkte des Zellzyklus sind ber
negative Rckkoppelung gesteuert und reagieren
daher sehr empfindlich auf Schden Bei einem
Checkpoint sind theoretisch zwei berwachungsmodi mglich: die Feststellung der Intaktheit des
Genoms oder die Feststellung eines Fehlers. In der
Natur sind Checkpoints immer ber negative Rckkoppelung gesteuert und nicht ber ein positives
Signal, das besttigen wrde, dass alles in Ordnung
ist:
Feststellen eines Fehlers
Negativsignal
Zellzyklus stoppt
(Hochempfindlicher Kontrollmechanismus)
Feststellen der Intaktheit
Unter vielen Positivsignalen fehlt ein einziges.

Die geringe Verminderung der Positivsignale ist kaum
fassbar. (Untauglicher Mechanismus)
Betrachten wir als Beispiel eines Kontrollmerkmals

die Intaktheit der DNA: Mit Hilfe eines spezifischen Bindungsproteins ist es einfach, einen einzelnen Doppelstrangbruch zu registrieren und ein
Signal auszulsen. Tatschlich gengt ein einzelner
DNA-Doppelstrangbruch in einer Zelle, um das
Verlassen der G2-Phase zu blockieren!
313
24.6 Apoptose, programmierter Zelltod
Das Tumorsuppressorprotein p53 spielt eine

zentrale Rolle bei der Kontrolle des Eintritts in die
S-Phase Wenn eine Zelle mit beschdigter DNA
in die S-Phase eintritt, knnen whrend der Replikation der DNA Mutationen im Tochterstrang genetisch fixiert werden. In Tumoren ist das gehufte
DNA-Schden
p53
24
Auftreten von Mutationen oft auf Beschdigung

beider Allele des Gens des p53-Tumorsuppressorproteins zurckzufhren. Die Konzentration
dieses Proteins steigt in einer normalen Zelle bei
DNA-Schden rasch an und lst eine Blockierung
des G1-S-bergangs aus:
Synthese von p21
Hemmung von Zellzykluskinasen

Tendenz zur Apoptose erhht
Protein p53 fungiert hierbei als Transkriptionsfaktor, welcher die Synthese des Zellzyklusinhibitors p21
stimuliert; p21 bindet an die Zellzykluskinasen und
hemmt deren Aktivitt. Protein p53 frdert auerdem
den Eintritt der Zelle ins Apoptoseprogramm. Sowohl
das Verhindern der Akkumulation von Mutationen
wie auch die Eliminierung schwer beschdigter Zellen wirken der Kanzerogenese entgegen.
Das Tumorsuppressorprotein pRB wirkt als

Transkriptionsrepressor Defekte des Gens fr
pRB sind ursprnglich beim Retinoblastom, einem

seltenen Augentumor von Kindern, entdeckt worden. Analog zum p53-Gen finden sich Defekte des
RB-Gens allgemein bei Tumoren; in den meisten
Fllen ist wenigstens eines der beiden Gene mutiert.
In ruhenden Zellen ist pRB dephosphoryliert
und aktiv; es blockiert den Zellzyklus am G1-Checkpoint, indem es den Transkriptionsfaktor E2F bindet
und damit die Synthese von Proteinen verhindert,
welche die Zelle fr den bergang in die S-Phase
bentigt. Ein mitogener Stimulus bringt die folgende Regulationskaskade in Gang: Synthese von
G1-Cyclin Aktivierung der entsprechenden CDK
Phosphorylierung und damit Inaktivierung
von pRB Dissoziation des pRB-E2F-Komplexes
Proteinsynthese und bergang des Zyklus in
S-Phase. In analoger Weise ist pRB an der Regulierung des G0-G1-bergangs beteiligt.
Die Anzahl mglicher Teilungszyklen ist durch
das Altern somatischer Zellen (Seneszenz) begrenzt In Kultur gehaltene Zellen von Sugern
und Vgeln vermehren sich nicht unbeschrnkt. Fibroblasten aus Embryonen teilen sich etwa 50-mal.
Darauf geraten sie in eine lngere Ruhephase (G0),
nach der sie absterben. Zellen aus einem 40-jhrigen Menschen knnen sich noch etwa 40-mal teilen,
whrend Zellen aus einem 80-jhrigen Menschen
sich nur noch 30-mal teilen. Ebenso teilen sich Zellen von Tierarten mit einer kurzen Lebensspanne
in einer Zellkultur weniger oft als Zellen langlebiger Spezies. Zellen der Keimbahn und aus Tumoren vermehren sich hingegen praktisch beliebig, sie
sind unsterblich (immortal) und knnen sog. permanente Zell-Linien bilden. Eine mgliche Erklrung fr dieses Verhalten liefert die Beobachtung,
dass das Reparaturenzym Telomerase, das fr die
Erhaltung der Gesamtlnge der chromosomalen
DNA notwendig ist, nur in sich permanent teilenden Zellen aktiv ist (Abschn.8.2). Offenbar berwacht ein besonderer Mechanismus die DNA-Enden und stoppt bei Verkrzung der Telomere die
Vermehrung der Zellen durch forcierten Eintritt in
die G0-Phase.
24.6
Apoptose, programmierter
Zelltod
Der kontrollierte Zelltod spielt bei vielzelligen Eukaryonten eine wichtige Rolle whrend der Ontogenese und dient wie die Zellzykluskontrolle der
berwachung der Zellzahl, indem er nicht mehr
bentigte, beschdigte oder gealterte Zellen eliminiert. Insbesondere neigen auch Zellen, welche
den Kontakt mit ihren Nachbarzellen (fokale Adhsionspunkte; Abschn.25.1) verloren haben, zur
Apoptose. Die Plastizitt des Zentralnervensystems,
die Selektion von Eizellen und Spermien bei ihrer
Reifung und die Elimination autoreaktiver T-Zellen
sind Beispiele fr besondere Vorgnge im adulten
Organismus, an denen apoptotische Mechanismen
beteiligt sind.
Ein Teil der Zellen des primitiven Wurms

Caenorhabditis elegans stirbt whrend der Ent-
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wicklung gezielt ab Der etwa 1mm lange durch-
sichtige Fadenwurm C. elegans ist eine wichtige

Modellspezies der Entwicklungsbiologie. Die Entwicklung der insgesamt 959Zellen eines Tieres aus
der Eizelle kann im Lichtmikroskop verfolgt werden;
der Stammbaum jeder einzelnen Zelle ist bekannt.
Whrend der Entwicklung werden 131Zellen (14%
der Gesamtzahl) durch Apoptose entfernt: Der Kern
kondensiert, die Zellbestandteile werden abgebaut
und von den umgebenden Zellen resorbiert.
Beim Fadenwurm mit seiner berschaubaren
Anzahl von Zellen wurden Mutanten mit verstrkter oder auch reduzierter Apoptose entdeckt. Die
Proteinprodukte der mutierten Gene waren Caspasen, Proteasen mit einem Cysteinrest an der aktiven
Stelle, die Polypeptidketten COOH-terminal von
Aspartatresten schneiden, sowie mitochondriale
Proteine, welche den Zelltod frdern oder hemmen,
indem sie die Permeabilitt der Mitochondrien
fr bestimmte Proteine frdern (Bax) oder hemmen (Bcl2). Die Mitochondrien integrieren die
berlebens- und Todessignale der Zelle. Fllt der
Entscheid zum Zelltod, nimmt die Permeabilitt
der ueren Mitochondrienmembran rasch zu.
Zusammen mit einigen anderen Proteinen wird
Cytochrom c aus den Mitochondrien freigesetzt.
Dieser Bestandteil der Atmungskette wirkt auerhalb der Mitochondrien als Zellkiller: Cytochrom
c bindet im Cytosol an einen Proteinkomplex mit
Pro-Caspasen und aktiviert diese. Dadurch wird
eine proteolytische Kaskade ausgelst, die zum Abbau vieler Zellproteine fhrt und eine DNase aktiviert, die mit dem Abbau des Genoms beginnt. Die
Apoptose ist damit in Gang gebracht und wird mit
der Resorption der verdauten Zellbestandteile durch
die umgebenden Zellen abgeschlossen werden.
Ausma der Apoptose
Von den 1014 Zellen eines adulten menschlichen Organismus werden pro Tag um die
61010Zellen durch Apoptose ausgemustert,
d.h. im Schnitt eine von 2000Zellen.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517243-0
24.1 Konzept des Zellzyklus
24.2 Mitosen und Meiosen whrend
des Lebenszyklus der Organismen
24.3 Maschinerie des Zellzyklus
24.5 Kontrolle der Bereitschaft zur Teilung:
Checkpoints
24.6 Apoptose, programmierter Zelltod
315
Zelladhsion, Zellkontakte
und extrazellulre Matrix
25.1
Stabile Zell-Zell- und Zell-Matrix-Kontakte 316
25.2
Kurzlebige Zell-Zell-Wechselwirkungen318
25.3
Extrazellulre Matrix (ECM)319
25.4
Pflanzliche Zellwand: Papier und Holz 321

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Kapitel 25 Zelladhsion, Zellkontakte und extrazellulre Matrix
Die meisten Zellen hherer Organismen arbeiten

als Team in Geweben und Organen zusammen.
Die Zellen stehen dort in Kontakt mit der extrazellulren Matrix (Extracellular matrix ECM), einem
komplexen Geflecht sezernierter Faserproteine
und Glykane sowie daran gebundener Proteine der
Signalbermittlung. Die ECM hlt die Zellen und
die Gewebe zusammen. Direkte Zell-Zell-Wechselwirkungen stabilisieren die Gewebe zustzlich; die
zellinternen Netze der Intermedirfilamente und
Actinfilamente wirken dabei mit den Zell-Zell-Kontakten zusammen. Zelloberflchenproteine besitzen
Bindungsstellen fr die verschiedenen Komponenten der ECM. Viele Zellen neigen auerhalb ihrer
gewohnten Umgebung, d.h. ohne Verankerung in
der ECM, zur Apoptose.
Gewebetypische ECM
Die hauptschlichen Gewebe der Vertebraten
sind: Zentrales und peripheres Nervensystem,
Muskeln, Blut, lymphoides Gewebe, Parenchyme innerer Organe (Leber, Niere, Drsen),
Epithelien und Bindegewebe. Die extrazellulre Matrix (ECM) des Bindegewebes besteht
vorwiegend aus Kollagenfasern und enthlt
nur wenige Zellen. Im Gegensatz dazu werden
die flchigen Epithelien vorwiegend durch
direkte Wechselwirkungen zwischen den
Zellen zusammengehalten; die Zellen liegen
auf einer dnnen Schicht von ECM, der Basallamina. Die Zellen der Organparenchyme, d.h.
die spezifischen Zellen eines inneren Organs,
welche dessen Funktion ausben, sind in die
ECM eingebettet.
Pflanzliche Zellwnde sind eine besondere Form

der ECM, welche jede einzelne Zelle umschliet
und stabilisiert. Die pflanzlichen Zellwnde gaben
ursprnglich den Anlass zur Beschreibung der Cellulae (lat. Kmmerchen), die sich in Lichtmikroskopen gut darstellen lassen und in gewissen Fllen
sogar von bloem Auge sichtbar sind.
25.1
Stabile Zell-Zell- und ZellMatrix-Kontakte
Gewisse Zell-Zell-Kontaktstellen (Ankerverbindungen, Anchoring junctions) sind mit dem Cytoskelett oder der extrazellulren Matrix (ECM)
verbunden Anchoring junctions sind v.a. in
Epithelien gut ausgebildet (.Abb.25.1). Spezifische Ankerproteine verbinden gewisse Typen von
Zell-Zell-Kontaktpunkten mit dem Cytoskelett im
Zellinnern benachbarter Zellen (.Tab.25.1).
An denDesmosomen verbinden Plaques cytoplasmatischer Ankerproteine und Cadherine als Haftproteine die Keratinfilamente von Nachbarzellen.
Das Netzwerk der Keratinfilamente (spezifische Intermedirfilamente) stabilisiert damit das Gewebe
zellbergreifend:
An den interzellulren Adhrenzkontakten (Adherens junctions) vermitteln wiederum bestimmte

Cadherine die Verbindung zwischen den Actinfilamenten in den Adhsionsgrteln benachbarter
Zellen.
Hemidesmosomen
und fokale Adhsionspunkte verbinden die Zellen mit der extrazellulren Matrix. Auf der Zellinnenseite sind die
Hemidesmosomen wie die Desmosomen an Keratinfilamente gekoppelt, mit der ECM sind sie durch
Integrine verbunden (.Tab.25.1). An den fokalen
Adhsionspunkten sind Integrine in der Basallamina verankert und bilden durch ihre Verbindung
317
25.1 Stabile Zell-Zell- und Zell-Matrix-Kontakte
25
mit dem Actinskelett Ansatzstellen fr die Zellbewegung. Das Fehlen fokaler Kontakte kann Apoptose auslsen.
ab
Die Tight junctions dichten Epithelschichten

Diese Zell-Zellverbindungen bilden eine
Barriere dichter Nhte (Zonula occludens) zwischen

benachbarten Zellmembranen. Die Nahtstellen sind
mit eng aneinander liegenden Untereinheiten des
Tight-junction-Proteins besetzt. Beim Darmepithel
als Beispiel (.Abb.25.1) wird dadurch der Interzellulrraum vom Darmlumen abgeschlossen. Auerdem verhindern die Tight junctions, dass Proteine
der apikalen Zellmembran in die laterale oder basale
Membran diffundieren. Spezifische Proteine, z.B.
Transporter fr Metaboliten, sind damit auf bestimmte Oberflchenregionen der Zelle beschrnkt;
die apikal/basal Polarisierung des Epithels wird aufrechterhalten.
Adhsionsgrtel
Adherens junction
.. Abb.25.1 Zellvernetzung im Darmepithel. Die an den einzelnen Typen von Zell-Zell-Kontaktstellen beteiligten Proteine
sind in .Tab.25.1 aufgefhrt
In Pflanzen verbinden Plasmabrcken (Plasmodesmen) benachbarte Zellen Die dicken, star-
Durch Gap junctions knnen kleine Molekle

direkt von Zelle zu Zelle diffundieren
Gap
junctions finden sich in praktisch allen tierischen

Zellverbnden. Ionen und Molekle von weniger
als 1kDa knnen durch diese Proteinporen diffundieren. Bei einer Gap junction (Nexus) sind die
Membranen der beiden Zellen nur etwa 24nm
voneinander entfernt; die Connexone sind aneinander gelagert (Porendurchmesser 1,5
nm;
26Untereinheiten). Die elektrischen Synapsen,
z.B. im Herzmuskel, beruhen auf diesen interzellulren Kanlen.
ren Zellwnde der Pflanzen erlauben keine direkten

Verbindungen wie die Gap junctions zwischen zwei
benachbarten Zellmembranen. Pflanzenzellen kommunizieren durch feine fadenartige Plasmabrcken,
welche durch fusionierte Membranen benachbarter
Zellen entstanden sind und einen zentralen Desmotubulus aus glattem ER enthalten:
318
.. Tab.25.1 Zell-Zell und Zell-Matrix-Kontakte bei Vertebraten und die daran beteiligten Proteine (die intrazellulre
Lokalisierung der hier beschriebenen Kontaktstellen ist in Abb.25.1 am Beispiel einer Darmepithelzelle gezeigt)
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Zell-ZellVerbindung
Desmosom
Cytoskelett
Ankerprotein
Intermedirfilamente
Adherens
junction
Tight
junction
Actinfilamente im
Adhsionsgrtel
Keine
Verbindung
Desmoplakin
Plakoglobin
(-Catenin)
und Catenine
Keines
Gap junction
Nexus
Zell-Matrix
Verbindung
Hemidesmosom
Fokale
Adhsionen
Keine
Verbindung
Keines
Connexin
Intermedirfilamente
Actinfilamente
Plectin,
BP230
Talin, Vinculin,
-Actinin,
Filamin
Integrin 64,
BP180
Verschiedene
Integrine
Obwohl die Plasmodesmen vllig anders gebaut

sind als die Gap junctions, zeigen sie eine hnliche freie Permeabilitt fr Molekle <800Da. Der
Durchmesser der Plasmodesmen ist mit 2040nm
wesentlich grer als derjenige der Connexon-Poren. Pflanzliche Zellen im Gewebeverband knnen
deshalb als ein ber Plasmabrcken zusammenhngendes Syncytium betrachtet werden, worin eine
Vielzahl von Zellen mit je einem eigenen Kern ein
gemeinsames Plasma teilen.
25.2
Kurzlebige Zell-ZellWechselwirkungen
Die Gewebebildung beginnt mit dem Aneinanderhaften von Zellen Das Aneinanderhaften (die
Adhsion) der Zellen beruht nicht auf elektronenoptisch fassbaren Strukturen; die beteiligten Proteine
sind jedoch zum groen Teil bekannt. Schon frh
in der Embryonalentwicklung lsen sich Zellen aus
Transmembranprotein
Cadherin
(Desmoglein,
Desmocollin)
Cadherin
E-Cadherin
Tight junctionProteine
Extrazellulrer
Ligand
Desmoglein und
Desmocollin der
Nachbarzelle
Cadherin der
Nachbarzelle
Tight junctionProteine der
Nachbarzelle
Connexin der
Nachbarzelle
Funktion im
Gewebe
Mechanische
Stabilisierung
Mechanische
Stabilisierung
Abdichtung der
Epithelschicht
Zell-ZellKommunikation
ECM-Proteine
Verankerung
ECM-Proteine
Motilitt und
Signalbermittlung
dem Gewebeverband und wandern an neue Orte

aus. Die Zellen werden dabei durch Stoffgradienten geleitet oder bewegen sich entlang bestehender
Oberflchen. Die Zellen erkennen danach ihre Partnerzellen und setzen sich an ihnen fest.
Zelladhsionsproteine (Cell adhesion molecules, CAMs) vermitteln die organ- und gewebespezifische Assoziation von Zellen Zu den Zelladhs-
ionsproteinen gehren die durch Ca2+ stabilisierten

Proteine der Cadherin-Familie und verschiedene
Ca2+-unabhngige Zelloberflchenproteine mit Immunglobulindomnen.
Die Cadherine sind Transmembranproteine
mit extrazellulren Ca2+-bindenden Domnen, die
mit Cadherinen anderer Zellen homophile (gleich
mit gleich) Wechselwirkungen eingehen. Der
COOH-terminale intrazellulre Teil der Cadherine
ist ber einen Catenin-haltigen Proteinkomplex mit
dem Actinskelett verbunden (.Abb.25.2). E-Cadherin findet sich auf vielen epithelialen Zellen,
N-Cadherin auf Neuronen, Muskelfasern und Zel-
319
25.3 Extrazellulre Matrix (ECM)
25
.. Abb.25.2Zelladhsionsproteine. Cadherine
sind ber Ankerproteine
mit dem Cytoskelett
verbunden und knnen
Zugkrfte ins Zellinnere weiterleiten. Die
N-CAM-Zelladhsionsproteine hingegen
vermitteln den Kontakt
zwischen den Plasmamembranen benachbarter Zellen
len der Augenlinsen und P-Cadherin in der Plazenta

und in der Epidermis. Die Cadherin-vermittelten
Zell-Zell-Verbindungen sind wesentlich strker
als diejenigen der anderen CAMs. Die Cadherine
stabilisieren die spezifischen Zell-Zell-Wechselwirkungen (Leberzelle zu Leberzelle, Epithelzelle
zu Epithelzelle). Tierische Gewebe knnen deshalb
mit Hilfe von Proteasen in Einzelzellen zerlegt werden.
Die Ca2+-unabhngigen CAMs aus der Immunglobulin-Superfamilie (.Abb.25.2) sind eher
fr die Feinregulation der Zellassoziation verantwortlich (allgemein vorkommend: I-CAM, interzellulres Adhsionsmolekl; spezialisiert: N-CAM,
neuronales CAM und V-CAM, vaskulres CAM der
Blutgefe). Das Zusammenspiel vieler verschiedenartiger Proteine bestimmt die Adhsionseigenschaften einer Zelle.
25.3
Extrazellulre Matrix (ECM)
Das Netzwerk der ECM fllt den Extrazellulraum

der Gewebe aus Das Netzwerk besteht aus einer
Vielzahl verschiedener Proteine und Heteroglykane,

die von den Zellen sezerniert und lokal deponiert
werden. Im Bindegewebe wird die ECM von den
spindelfrmigen Fibroblasten aufgebaut, die sich
weiter spezialisieren knnen, z.B. in Knorpel bildende Chondroblasten oder Knochen bildende Osteoblasten.
Die Hauptbestandteile der ECM sind Glykosaminoglykane
und Faserproteine wie Kollagen,
Elastin, Fibronectin und Laminin. Die Glykosaminoglykane bilden Ketten von 70200Zuckerresten als Homopolymere aus Disaccharideinheiten
(Abschn.5.3). Die Carboxyl- und Sulfatgruppen
der modifizierten Zuckerreste ergeben eine dichte
Verteilung negativer Ladungen. Weitere polare
Gruppen verstrken den hydrophilen Charakter
der ECM. Die Proteine bilden zusammen mit den
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langen Polysaccharidketten ausgedehnte hydrophile

Gele, die Na+-Ionen und Wasser binden. Das aufgenommene Wasser verleiht der ECM Druckresistenz.
Die Knorpelmatrix im Kniegelenk kann Hunderte
von Bar aushalten.
Hyaluronsure untersttzt die Zellwanderung

whrend der Morphogenese und der Wundheilung Hyaluronsure
ist ein langes lineares
Polymer eines Disaccharids und kann aus bis zu

25000Zuckerresten aufgebaut sein. Sie ist das einfachste Glykosaminoglykan und besitzt keine Sulfatgruppen (Abschn.5.3). Hyaluronsure ist ein
typisches Fllmaterial, das whrend der Morphogenese und der Wundheilung rasch synthetisiert wird;
in die mit Hyaluronsure gefllten Rume wandern
danach Zellen ein.
Proteoglykane bestehen aus einem Proteinteil
mit kovalent gebundenen Glykosaminoglykanen
Auer der Hyaluronsure kommen alle Glyko-
saminoglykane
in Form von Proteoglykanen
vor, die wie die Glykoproteine im ER glykosyliert
werden. Der hohe Kohlenhydratgehalt von bis
zu 95Gewichtsprozent ist auf meist mehrere unverzweigte Glykosaminoglykanketten mit einer
typischen Kettenlnge von rund 80Zuckerresten
zurckzufhren. Proteoglykane knnen sehr gro
werden; der Proteoglykankomplex im Knorpel hat
eine Moleklmasse von etwa 3106Da und trgt
rund 100Glykosaminoglykanketten (.Abb.5.6).
Proteoglykane binden gewisse sezernierte

Proteine und regulieren deren Aktivitt Basi-
sche Wachstumsfaktoren wie z.B. der basic Fibroblast growth factor (bFGF) oder gewisse Formen des
Vascular endothelial growth factors (VEGF) werden
von Proteoglykanen adsorbiert, in der ECM angereichert und ihren Rezeptoren zugefhrt. Proteasen in der ECM knnen an der Freisetzung eines
Wachstumsfaktors beteiligt sein, indem sie einen
biologisch aktiven lslichen Teil des Faktors von
dessen ECM-Bindungsteil abspalten.
Die ECM enthlt in Fasern und Netze organisierte Kollagenfibrillen Beim Menschen sind
30 verschiedene, hufig zellspezifische, homologe

Kollagentypen bekannt (Abschn.30.6). Die hufigsten Kollagen produzierenden Zellen sind die
Fibroblasten. Kollagenmolekle werden von den
Zellen als Monomere sezerniert. Nach der proteolytischen Abspaltung ihres Propeptids im Extra-
zellulrraum bilden jeweils drei Kollagenmolekle

eine trimere Helix. Danach lagern sich je etwa hundert Helices spontan zu einer Fibrille zusammen.
Die Kollagen-Tripelhelices in einer Fibrille knnen
mehrfach unterbrochen sein, wodurch die Fibrillen
Biegsamkeit erlangen. Die 10300nm dicken Fibrillen sind mit Hilfe weiterer homologer Kollagene untereinander vernetzt und treten oft als Fasern mit
vielen parallelen Fibrillen auf.
Das KollagenIV der Basallamina ist besonders
flexibel und bildet in der Lamina mehrere bereinander liegende flchige Netze. Darin eingeflochten
sind Proteoglykane und das fibrillre Glykoprotein
Laminin. Das Protein Entactin verbindet das Laminin- mit dem Kollagennetzwerk. Die Basallamina
der Epithelien und Endothelien hat je nach Lokalisation unterschiedliche Funktion. Sie dient z.B. in
den Glomeruli der Nieren als Ultrafilter zur Trennung kleiner Ionen und Molekle von groen Moleklen; bei Muskelzellen fhrt sie die Axone (Nervenzellfortstze) zu den motorischen Endplatten.
Terminologie
Epithel: Zellschicht, welche ein Gewebe auen
begrenzt.
Endothel: Zellschicht, welche ein Blutgef
oder das Herz gegen das Lumen begrenzt.
Elastin in der ECM verleiht den Geweben Elastizitt Kovalente Netzwerke von Elastinfasern er-
langen ihre Elastizitt aufgrund der Expansion und

Kontraktion der ungefalteten Ketten der einzelnen
Elastinmolekle (.Abb.3.9).
Bei Vertebraten verbindet das Adhsionsprotein Fibronectin die ECM mit den Integrinen
der Zelloberflchen Beide Untereinheiten des
Fibronectinheterodimers bestehen aus mehreren

Domnen mit Bindungsstellen zur ECM und zur
Zelloberflche. Die COOH-terminalen Domnen
des Fibronectindimers sind ber zwei Disulfidbrcken verknpft. Fibronectin besitzt Bindungsstellen
fr Kollagene, es kann polymerisieren und innerhalb der ECM ein Netzwerk bilden.
Integrine an der Zelloberflche sind die Rezeptoren fr das Fibronectin Die Integrine
sind heterodimere Transmembranproteine aus einer

- und einer -Untereinheit:
321
25.4 Pflanzliche Zellwand: Papier und Holz
25
protease-Vorlufer, spaltet. Das durch diese sehr

spezifische Spaltung gebildete Plasmin ist eine eher
unspezifische Protease, welche z.B. Fibrin (in Blutgerinnseln, Abschn.31.1), Fibronectin und Laminin spaltet. Bei der Wundheilung und beim Umbau
von Geweben werden die Proteasenkaskaden in der
ECM aktiviert. Der Abbau der ECM und der Basallamina spielt eine wichtige Rolle bei der lokalen
Ausbreitung (Blutgefwachstum!) und der Metastasierung maligner Tumoren.
25.4
Die Integrinuntereinheiten kommen in verschiedenen homologen Varianten vor und dimerisieren in verschiedenen Kombinationen. Die Vielfalt
der so entstehenden Rezeptoren erlaubt, dass acht
verschiedene Integrine das RGD-Segment (Sequenz Arg-Gly-Asp) des Fibronectins binden. Die
Integrine stehen in enger Verbindung mit dem
Cytoskelett und den zellulren Proteinen der Signalbermittlung. Dadurch kann eine Zelle z.B. ihre
Actinbndel der Struktur des Fibronectingersts
auerhalb der Zelle anpassen. Integrine finden sich
an der Oberflche aller Zellen, auch auf zirkulierenden Blutzellen. ber diesen Weg knnen z.B.
Blutplttchen bei Kontakt mit beschdigten Gefoberflchen rasch aggregieren.
Die Integrine spielen mit der intrazellulren
Signalbermittlung zusammen Whrend der
Mitose werden gewisse Integrine phosphoryliert

und verlieren dadurch ihre hohe Affinitt zu Fibronectin. Die Zellen lsen sich daher whrend
der Mitose leichter von der Unterlage als in anderen Zellzyklusphasen. Integrine vermitteln Signale,
insbesondere berlebenssignale, ins Zellinnere;
viele Zellen sind ohne extrazellulre Kontakte nur
beschrnkt lebensfhig.
Strikt regulierte Metalloproteasen bauen die
ECM ab Die Matrix-Metalloproteasen (MMP), wel-
che durch die Bindung von Ca2+- oder Zn2+-Ionen

aktiviert werden, sind z.T. sehr substratspezifisch
und in proteolytische Kaskaden organisiert. Der
Plasminogen-Aktivator lst eine solche Kaskade
aus, indem er Plasminogen, einen inaktiven Serin-
Pflanzliche Zellwand:
Papier und Holz
Pflanzliche Zellwnde sind eine besondere Form

der ECM Die Entwicklung einer steifen Zellwand
reduzierte die Beweglichkeit der Pflanzen und

fhrte schon frh in der Evolution zu einer sesshaften Lebensweise. Die pflanzliche Zellwand und die
tierische ECM sind trotz ihrer unterschiedlichen
mechanischen Eigenschaften hnlich aufgebaut.
Netzwerke aus langen faserigen Proteinen und Polysacchariden bilden das Gerst beider Strukturen.
Das Polysaccharid Cellulose kommt in den Fasern
der Zellwnde der meisten Pflanzen vor; Hemicellulose, Pektin und eine Reihe von Strukturproteinen machen den Rest der pflanzlichen Zellwnde
aus.
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Das wsserige Milieu in der Zellwand ist hypoton im Vergleich zum Zellinnern Obwohl das
Wasser in der Zellwand mehr gelste Stoffe enthlt

als das Umgebungswasser der Pflanze (z.B. im Boden), enthlt es wesentlich weniger osmotisch aktive
Teilchen als das Cytoplasma. Deshalb entsteht ein
osmotischer Druck im Zellinnern, der Turgor. Die
Zellwand fngt den Druck auf und wird dadurch
versteift.
Die Gestalt der Pflanze wird durch die Anordnung der cortikalen Mikrotubuli bestimmt Der
Turgor zusammen mit der Orientierung der Cellulosefibrillen, die parallel zum Mikrotubuli-Cytoskelett des darunter liegenden Zellcortex orientiert
sind, bestimmt die Wachstumsrichtung. Als Meris
teme bezeichnete Wachstumsbezirke mit Gruppen undifferenzierter, sich rasch teilender Zellen
(pflanzliche Stammzellen) befinden sich an den
Spitzen der Wurzeln und Knospen sowie seitlich
der Gefe. Die pflanzlichen Zellwnde werden als
dnne, ausbaubare Cellulosewnde in den Meristemen angelegt. Spter, wenn die Form des entsprechenden Pflanzenteils ausgebildet ist, werden die
Komponenten der sekundren Zellwand sezerniert
und innerhalb der primren Zellwand abgelagert:
Der Pflanzenteil verholzt. Die Cellulose stellt mit
etwa 40% des Trockengewichts die Hauptkomponente von Holz dar. Eine weitere typische Komponente der sekundren Zellwand ist das Lignin, ein
Polymer aus substituierten Phenylpropaneinheiten,
das sich mit Cellulose und Hemicellulose vernetzt
(.Tab.25.2). Die Zusammensetzung des Lignins ist
je nach Spezies verschieden. Holz kann mit armiertem Beton verglichen werden. Die Cellulose entspricht der zugfesten Armierung, das Lignin dem
druckfesten Beton.
.. Tab.25.2 Die Makromolekle der pflanzlichen

Zellwand
Makro
molekl
Zusammen
setzung
Funktion
Cellulose
lineares Polymer
aus Glucose
Zugfeste
Fibrillen
Quervernetzende Hemi
cellulosen:
Xylan
Mannan
Xylose (Ketopentose), Mannose,

Glucose, Galactose
Quervernetzung
von Cellulose
fibrillen in
robuste Netzwerke
Pektine
Homogalacturonane und
Rhamnogalacturonane
Hydrophiles
Netzwerk;
Druckresistenz
und Zell-Zell-
Adhsion
Lignin
Quervernetzte
Cumaryl-,
Coniferyl- und
Sinapyl-Alkohole
(Phe-derivate)
Starre, wasserunlsliche und

abbauresistente
Polymere, Holz
Proteine und
Glykoproteine
Enzyme und
hydroxyprolinreiche Proteine
Umsatz und
Umbau der
Zellwand; auch
Abwehr von
Pathogenen
Links auf
Springer Website:
027-6-1517244-0
25.1 Stabile Zell-Zell- und Zell-Matrix-Kontakte
25.2 Kurzlebige Zell-Zell-Wechselwirkungen
25.3 Extrazellulre Matrix (ECM)
25.4 Pflanzliche Zellwand: Papier und Holz
323
Stoffaustausch
durch Membranen
26.1
Grundstzliches zum Membrantransport 324
26.2
Mechanismus der Na+/K+-Pumpe325
26.3
Symport- und Antiport-Systeme 326
26.4
Passiver Transport, erleichterte Diffusion 326
26.5
Ionenkanle, chemisches und elektrisches

Membranpotenzial327
26.6
Transzellulrer Transport328

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Kapitel 26 Stoffaustausch durch Membranen
Biologische Membranen begrenzen Zellen und

deren Kompartimente. Sie sind aufgrund ihrer Lipiddoppelschicht zwar durchlssig fr kleine hydrophobe Molekle (z.B. O2 und CO2) und kleine ungeladene Molekle (H2O, Harnstoff, Ethanol) aber
kaum permeabel fr Ionen und grere hydrophile
Molekle. Sie erfllen damit eine Voraussetzung zur
Ausbildung unterschiedlicher Stoffkonzentrationen
in den verschiedenen Kompartimenten.
Die relative Undurchlssigkeit biologischer
Membranen ermglicht den Zellen, in einer chemisch andersartig zusammengesetzten Umgebung
zu leben. Hierbei mssen bestimmte Stoffe selektiv
durch Membranen transportiert werden: Nhrstoffe
werden aufgenommen, Stoffwechselendprodukte
werden ausgeschieden; gewisse Stoffwechselreaktionen laufen nur in einem besonderen Kompartiment
ab, und ihre Produkte werden selektiv in andere
Kompartimente weitergeleitet.
Transporter
Aktiver Membrantransport huft unter Energieaufwand Molekle und Ionen in einem Kompartiment an. Passiver Transport entspricht einer
erleichterten (katalysierten) Diffusion, er erfolgt
vom Kompartiment mit der hheren Konzentration ins Kompartiment mit der niedrigeren Konzentration.
26.1 Grundstzliches
zum Membrantransport
Die Permeabilitt der Lipiddoppelschicht variiert

je nach Molekltyp Grere Molekle und Io-
nen knnen die Membran nur mit Hilfe spezifischer

Transportproteine durchqueren (Abschn.6.7):
Membrantransporter (Carriers) ermglichen die
Membranpassage grerer Molekle, und Kanle
lassen die kleineren Ionen passieren:
Kanal
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Membrantransporter binden spezifisch ihr bestimmtes Transportsubstrat. Das Binden des Substrats lst
eine Konformationsnderung aus, durch welche die
von der einen Seite zugngliche Substratbindungsstelle nach der anderen Seite offen wird und das Substrat entlsst. Je nach Typ des Transporters kann die
Verschiebung des Substrats in die Zelle, aus der Zelle
oder in beiden Richtungen stattfinden. Ionenkanle
lassen, in den meisten Fllen nur auf ein Signal, bestimmte Ionen passieren, wobei die Selektivitt durch
den Durchmesser und die elektrische Oberflchenladung der Kanle gewhrleistet ist (Aquaporin-Wasserporen sind permanent offen; Abschn.6.7). Ein
durch Proteine vermittelter Membrantransport
zeigt eine Sttigungskinetik vom Typus der Michaelis-Menten-Kinetik (Abschn.4.3). Jede zellulre
Membran enthlt viele verschiedene Transportproteine aus einer Reihe von Proteinfamilien. Die etwa
10000 gegenwrtig bekannten Transportproteine
gehren ber 800Familien an.
In einzelnen Membranen finden sich neben

den Transportproteinen auch noch Proteinporen Im Vergleich zu den selektiven ffnungen
der Membrankanle sind die ffnungen der Poren

wesentlich grer. Das ffnen dieser relativ weiten
Poren ist meist reguliert und ermglicht die beschrnkt selektive Passage von Wasser sowie verschiedener Ionen und Molekle.
Aktiver Membrantransport ist an die Hydrolyse von ATP gekoppelt Die Anhufung ei-
nes Molekls ist ein endergonischer Prozess, dessen

Energiebedarf gem der folgenden Gleichung berechnet werden kann (Abschn.1.6):
G D G0 C RT ln c2 =c1;
wobei c1 die Konzentration des Stoffes diesseits der
Membran und c2 die Konzentration des Stoffes jenseits der Membran bedeutet.
Fr den Transport eines gelsten Stoffes, dessen Struktur unverndert bleibt, gilt bei Standard-
325
26.2 Mechanismus der Na+/K+-Pumpe
bedingungen (1M Konzentrationen) Go=0; die

Gleichung wird zu
G D RT ln c2 =c1
Wenn das Konzentrationsverhltnis z.B. als 10/1
gewhlt wird, so lautet die Gleichung:
GD .8:315 J mol1 K1 / .298 K/ ln 10=1

D 5706 J mol1
d.h. der Transport von 1mol bei 25 C entspricht

einer Zunahme der freien Energie um 5,7kJ. Der
berechnete Fall gilt fr ein ungeladenes Molekl. Bei
einem Transfer elektrischer Ladungen fllt ein zustzlicher Energiebetrag fr den Aufbau des elektrischen Potenzials an (Abschn.15.3). Eine Nervenzelle verwendet einen groen Anteil ihres gesamten
ATP zur Aufrechterhaltung ihres Ruhepotenzials.
Anstelle von ATP kann auch Licht als Energiequelle fr aktiven Transport herangezogen werden Lichtgetriebene Membranpumpen finden
sich in Pflanzen und in verschiedenen Mikroorganismen, wo z.B. Chlorophyll- oder Retinal-haltige Proteinkomplexe Protonen durch Membranen
pumpen (Abschn.20.4 und 21.6).
Ein Unterschied in der Konzentration eines

Stoffes auf beiden Seiten einer Membran kann
den Transport eines anderen Stoffes antreiben
Der Transport eines ersten Stoffes lngs des Konzentrationsgeflles kann an den Transport eines zweiten
Stoffes gekoppelt sein, indem ein Trgerprotein die
beiden Substrate immer nur zusammen oder im
Austausch transportiert. Bei einem Symport wer-
26
den beide Substrate in die gleiche Richtung transportiert; bei einem Antiport werden die Substrate
in entgegengesetzte Richtungen transportiert. Der
Konzentrationsunterschied des ersten Stoffes treibt
durch die Koppelung den Transport des zweiten
Stoffes an. Obwohl dieser Transport direkt kein ATP
verbraucht, entspricht er einem aktiven Transport:
Die Herstellung des Konzentrationsunterschieds des
ersten Stoffes hat ATP verbraucht.
26.2
Mechanismus der Na+/K+Pumpe
Die Na+/K+-Pumpe transportiert Na+ aus der Zelle

und K+ in die Zelle, dabei verbraucht sie ATP Die
Na+/K+-Pumpe
tierischer Zellen baut die Na+/
+
K -Konzentrationsunterschiede ber der Zellmembran auf. Die hohe Na+-Konzentration auen
(145mM; innen 12mM) und die hohe K+-Konzentration innen (140mM; auen 4mM) knnen als
Energiequellen fr den aktiven Transport anderer
Stoffe durch die Membran dienen. Diese Konzentrationsunterschiede sind ferner die Grundlage
fr das Membranpotenzial und damit auch fr die
Weiterleitung von Signalen in erregbaren Membranen. Die Aufrechterhaltung der unterschiedlichen
Ionenkonzentrationen bentigt etwa ein Drittel des
Gesamtenergieverbrauchs eines Sugers im Ruhezustand. Die Na+/K+-ATPase besteht aus je zwei - und
-Untereinheiten. Die Bindung von ATP fhrt zu
einer Konformation, bei welcher der Transporter
gegen das Zellinnere geffnet ist und drei Na+-Ionen
prferenziell bindet:
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Auf der Zellauenseite liegt der Transporter geschlossen vor. Bei der folgenden Hydrolyse von
ATP wird das Protein auf der Zellinnenseite phosphoryliert und ndert seine Konformation. Nun ist
es offen nach auen und geschlossen nach innen.
Die drei Na+-Ionen werden an der Zellauenseite
abgegeben, und zwei K+-Ionen werden gebunden.
Danach wird die Phosphatgruppe vom Protein abgespalten und das Protein ffnet sich wieder nach
innen, wo die K+-Ionen freigesetzt werden und erneut drei Na+-Ionen gebunden werden. Die Na+/
K+-ATPase ist elektrogen, sie baut nicht nur einen
Konzentrationsunterschied sondern auch einen Ladungsunterschied ber der Membran auf: Der selektive aktive Transport von Na+ und K+-Ionen fhrt
zu einer elektrischen Spannung ber der Membran,
einem Membranpotenzial. Sowohl Stoffgradienten
wie auch elektrische Membranpotenziale knnen
nur unter Energieaufwand gebildet werden. Jede
lebende Zelle besitzt ein Membranpotenzial; eine
tote Zelle zeigt kein Membranpotenzial.
26.3
Symport- und Antiport-Systeme
Antiport- und Symport-Systeme nutzen die Energie bestehender Konzentrationsunterschiede

Zum Beispiel transportiert der Na+-Glucose-Sym-
porter Glucose auf Kosten der hohen extrazellulren

Natriumionen-Konzentration in die Zelle; Glucose
und Natriumionen werden nur gemeinsam importiert. Durch einen Transportmechanismus dieser Art resorbiert die Brstensaummembran des
Darmepithels Glucose und Aminosuren aus dem
Verdauungsbrei.
Der exergonische Import von Natriumionen
wird auch zum Export von Calciumionen ins ER
genutzt: Ein spezifischer Transporter exportiert
Calciumionen aus dem Cytosol der Zelle ins ER,
falls ein Konzentrationsgradient von Natriumionen zum Gegentransport zur Verfgung steht. Die
sich ergebende hohe Konzentration von Calciumionen im ER spielt z.B. bei der Aktivierung der
Skelettmuskelfasern eine wichtige Rolle. Daneben
existieren auch ATP-getriebene Calciumtransporter
(Ca2+-ATPasen; Abschn.30.4).
26.4
Passiver Transport, erleichterte

Diffusion
Viele Membrantransportvorgnge laufen ohne

Energieverbrauch entlang dem Konzentrationsgeflle des transportierten Stoffes ab Beim
katalysierten passiven Transport wird die Mem-
branpassage in Richtung Konzentrationsausgleich

durch selektive Transporter ohne Verbrauch chemischer Energie durch Erleichterung der Diffusion beschleunigt. Die Membran der Erythrozyten ist z.B. aufgrund eines Transporters in beiden

Richtungen durchlssig fr HCO
3 und Cl . Alle
tierischen Zellmembranen besitzen einen Transporter fr die erleichterte Diffusion von Glucose.
Ionenkanle lassen spezifische anorganische Ionen
durchtreten. Spezialisierte Membranen (z.B. in den
Sammelrohren der Nephrone) lassen Wassermolekle selektiv durch Aquaporinkanle passieren
(Abschn.6.7).
Aus dem Protein Porin gebildete Poren lassen bei Bakterien niedermolekulare Nhrstoffe
aus der Umgebung ins Periplasma der Zelle diffundieren Die relativ groen Poren der Porine
kommen durch die fasshnliche Anordnung von

-Faltblttern zustande. Der Durchmesser der Poren (ungefhr 0,1nm) erlaubt, dass viele niedermolekulare Stoffe annhernd frei passieren knnen.
Eine gewisse Selektivitt der Poren wird durch die
Struktur und Ladung der Schlaufen zwischen den
Faltblattregionen erreicht.
327
26.5 Ionenkanle, chemisches und elektrisches Membranpotenzial
26
Porin-Pore von unten , raumfllendes Modell
An der inneren bakteriellen Zellmembran (Plasmamembran) findet eine strengere Kontrolle des
Transfers von Moleklen mittels energieabhngiger
Transporter statt.
Ionophore
sind niedermolekulare organische Verbindungen, welche analog zu den passiven
Transportproteinen den Transfer bestimmter Ionen
durch Membranen erleichtern. Sie knnen, falls sie
selektiv fr bakterielle Membranen sind, als Antibiotika (z.B. das zyklische, K+-spezifische Peptid
analog Valinomycin) verwendet werden.
26.5
net: Nach Eintreffen eines Signals ffnen sie sich fr

Bruchteile einer Millisekunde. Die wichtigsten Kanle lassen spezifisch Na+-, K+-, Ca2+ oder Cl-Ionen
lngs des Konzentrationsgeflles passieren.
Hohe Effizienz der Ionenkanle
Ionenkanle eignen sich aufgrund ihrer hohen
Transportkapazitt hervorragend fr die rasche Weiterleitung eines Signals: Ein einzelner
Ionenkanal lsst pro Millisekunde105Ionen
durch! Die rasche Ionentranslokation kommt
durch das elektrische Potenzial zustande:
50mV ber einer Lipiddoppelschicht von
5nm Dicke entsprechen einer Feldstrke von
100000Vcm1. Zum Vergleich: Symporter und
Antiporter transferieren nur 102104Substratmolekle pro Sekunde, und eine ATP-getriebene Ionenpumpe 1100Ionen pro Sekunde.
Ionenkanle, chemisches und

elektrisches Membranpotenzial
Die meisten Ionenkanle ffnen sich nur auf ein

bestimmtes Signal
Ein Konzentrationsun-
terschied eines Stoffes auf den beiden Seiten einer

Membran wird als chemisches Membranpotenzial bezeichnet. Ein elektrisches Membranpotenzial entspricht der elektrischen Spannung ber der
Membran, die auf einem Unterschied in der elektrischen Ladung beruht. Chemische und elektrische
Membranpotenziale sind notwendig fr die Weiterleitung von Signalen in multizellulren Lebewesen;
in vielen Fllen ffnet dabei das Signal bestimmte
Ionenkanle. Signalregulierte (Pfrtner-kontrollierte) Kanle werden als Gated channels bezeich-
Ionenkanle sind sehr eng und dadurch selektiv

fr bestimmte Ionen Die passierenden Ionen
werden dehydratisiert; ihr Radius und ihre elektrische Ladung bestimmen, ob sie den betreffenden
Kanal passieren knnen. Nur wenige Kanle sind
permanent offen; die meisten sind Gated channels
und ffnen sich nur aufgrund bestimmter Signale:
Spannungsnderung ber der Membran
(Voltage-gated channels; z.B. in Nerven),
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Binden eines Liganden (Ligand-gated channels), wobei der Ligand extrazellulr sein
kann, z.B. ein Neurotransmitter (Transmitter-gated channels), oder intrazellulr, z.B.
ein Nucleotid oder ein Ion (Nucleotide- oder
Ion-gated channels),
Mechanischer Stress (Mechanically gated
channels, z.B. in Muskeln und Sehnen zur
propriozeptiven Feststellung der Lage der
Gliedmaen),
Temperaturregulierte Kanle (Wrme- und
Klterezeptoren der Haut).
Manche Ionenkanle werden auerdem ber Phosphorylierung/Dephosphorylierung ihrer cytoplasmatischen Domne reguliert und sind dadurch mit
der intrazellulren Signalbermittlung gekoppelt.
Stoffe knnen nicht nur durch Transportproteine sondern auch durch Vesikel aus Zellen
freigesetzt werden Verschiedenste Stoffe wie
12
Neurotransmitter, Hormone oder Verdauungsenzyme werden mittels sekretorischer Vesikel aus der
Zelle freigesetzt. Bei dieser regulierten Exocytose
(Abschn.22.5) lst ein rezeptorvermitteltes Signal
einen Einstrom von Ca2+ in die Zelle aus, worauf
die Membranen der sekretorischen Vesikel mit der
Zellmembran fusionieren und der Vesikelinhalt ins
Auenmilieu abgegeben wird.
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Darmepithel
Transzellulrer Transport
Stofftransporte finden nicht nur durch einzelne

Membranen statt, sondern auch durch Zellschichten wie Epithelien und Endothelien Der Trans-
port niedermolekularer Stoffe, z.B. durch das Kapillarendothel oder Darmepithel, kommt durch das
Zusammenspiel von Import- und Exportproteinen
auf den gegenberliegenden Seiten der Zellen zustande:
Die Permeabilitt des Kapillarendothels wird mittels

der spezialisierten vesikulo-vakuolren Organelle
gefrdert. Komponenten des Zellauenmilieus
knnen quer durch das Endothel flieen ohne ins
Cytosol der Zellen zu gelangen. Dieser transendotheliale Fluss wird durch perlenkettenartig aufgereihte Vesikel geleitet; Diaphragmen an den Vesikelkontaktstellen verndern ihre Permeabilitt beim
Eintreffen entsprechender Signale.
329
26.6 Transzellulrer Transport
Links auf
Springer Website:
027-6-1517245-0
26.1
26.2
26.3
26.4
26.5
Grundstzliches zum Membrantransport

Mechanismus der Na+/K+-Pumpe
Symport- und Antiport-Systeme
Passiver Transport, erleichterte Diffusion
Ionenkanle, chemisches und elektrisches
Membranpotenzial
26.6 Transzellulrer Transport
26
331
Rezeptoren
und Signaltransduktion
27.1
Grundstzliches zur Signaltransduktion 332
27.2
Rezeptoren an der Zelloberflche: G-Proteingekoppelte Rezeptoren (GPCR)334
27.3
Rezeptoren an der Zelloberflche: Rezeptoren mit

enzymatisch aktiver cytosolischer Domne 336
27.4
Rezeptoren an der Zelloberflche: proteolytisch

aktivierte Rezeptoren340
27.5
Rezeptoren im Zellinnern 341
27.6
bermittlungsmodule leiten die Signale vom

Rezeptor zum spezifischen Effektor 341
27.7
Signaltransduktion in Pflanzen und Pilzen 342

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20
Kapitel 27 Rezeptoren und Signaltransduktion
Mehrzellige Organismen entstanden auf der Erde

rund 2,5Milliarden Jahre spter als die einzelligen
bakterienhnlichen Organismen. Einzeller reagieren auf Vernderungen der Stoffkonzentrationen in
ihrer Umgebung, sie knnen beispielsweise Lockstoffe einer anderen Zelle wahrnehmen und sich
entlang des Konzentrationsgradienten darauf zu bewegen (Chemotaxis; Abschn.27.3); sie bentigen
jedoch keine hoch entwickelte Signalbermittlung.
Hingegen hat jede Zelle eines mehrzelligen Organismus als Teil eines greren Ganzen zu wirken. Die
Ausbildung dieses komplexen Organisationszustandes whrend der Ontogenese und dessen Aufrechterhaltung im ausdifferenzierten Zustand verlangen
entsprechend komplexe Systeme der Signalbermittlung. Als Mittel zur interzellulren Kommunikation sezernieren die Zellen spezialisierte Botenstoffe. Diese Signalmolekle binden an spezifische
Rezeptoren, d.
h. Transmembranproteine oder
manchmal auch intrazellulre Proteine der Zielzellen. Die Wechselwirkung mit dem Signalstoff fhrt
zu einer Konformationsnderung des Rezeptorproteins, die im Zellinnern ber Signalkaskaden von
Enzymaktivierungen und sekundren Botenstoffen (Second messengers) die spezifische Reaktion
der Zielzelle auslst. Intensitt, Dauer und Ort der
Signale bestimmen die Reaktionen der Zielzelle. Die
intrazellulre Signaltransduktion wird am treffendsten als ein regulatorisches Netzwerk in Raum und
Zeit beschrieben, das bestimmte zellulre Vorgnge
durch jeweilige Integration zahlreicher positiver
und negativer Signale steuert. Auf hnliche Weise,
wie ein regulatorisches Netzwerk jede einzelne Zelle
kontrolliert, steuern bergeordnete Signalnetzwerke
zwischen Zellen, Geweben und Organen den Gesamtorganismus. Hormone und Neurotransmitter
werden in Kap.28 bzw. 29 ausfhrlich beschrieben.
27.1 Grundstzliches
zur Signaltransduktion
Die Signaltransduktion, eine Gerchtekche
Die biologische Signalbermittlung basiert auf

uerst vielfltigen Mechanismen; in ihrer Komplexitt ist sie vergleichbar mit einem humansozialen Analogon, der Verbreitung einer Nachricht in
Form eines Gerchts. Das Gercht entsteht lokal,

nur einzelne Personen wissen Bescheid. Jede dieser Personen (Rezeptoren) erzhlt die Nachricht
einigen Bekannten, die sie wiederum an mehrere
Personen weitergeben. Das Gercht kann versanden oder sich rasch verbreiten, gegebenenfalls wird
seine Verbreitung beschleunigt durch katalytische
Effekte zustzlicher Mechanismen wie die Medien.
Sekundre Einflsse (Einstellung der weitergebenden Personen und Institutionen sowie andere aktuelle Gerchte und Nachrichten) modulieren jeweils
die Darstellung der weitergegebenen Nachricht. Das
Resultat: Viele wissen Bescheid, einige reagieren,
und am Schluss erlahmt das Interesse.
Eine typische Gewebezelle ist jederzeit Hunderten von verschiedenen Signalen aus der Umgebung
ausgesetzt. Die Zelle integriert diese (positiven und
negativen) Signale und reagiert entsprechend ihrer
spezifischen regulatorischen Programmierung. Signaltransduktionen sind beteiligt an der Regulation
aller wichtigen biologischen Vorgnge wie Stoffwechsel, Transkription, Bewegung der Zelle, Immunreaktion, Sehen, Riechen oder neuronale Prozesse. Signaltransduktionen knnen fundamentale
Entscheidungen der Zelle auslsen: Wachstum ohne
Teilung, Teilung, Differenzierung zu einem anderen
Zelltyp oder Apoptose.
Die Wirkung von Signalmoleklen wird zumeist durch Rezeptoren an der Oberflche der
Zielzelle vermittelt Zahlreiche Signalmole-
kle sind Peptide oder Proteine, die an spezifische Transmembranproteine der Zielzelle binden
(.Abb.27.1). Zu diesen membranstndigen Rezeptoren gehren die G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCR) , die enzymgekoppelten Rezeptoren und die in Abschn.26.5 besprochenen
ligandengesteuerten Ionenkanle. Die meisten
membranstndigen Rezeptoren besitzen eine Signalbermittlungsdomne in ihrem cytoplasmatischen Teil. Die Bindung des Signalstoffs verndert
die Konformation des Rezeptors und aktiviert die
cytoplasmatische Domne. Nachgeschaltete Enzyme (hufig Proteinkinasen) und sekundre Botenstoffe (Second messengers) leiten das Signal
ber eine vielstufige Signalbermittlungskette weiter. Jedes an einer Signalkaskade beteiligte Enzym
verstrkt das Signal. Typischerweise sind mehrere
Proteinkinasen in Serie geschaltet. Da jedes Kina-
333
27.1 Grundstzliches zur Signaltransduktion
IGF1
27
Riechstoffe
(GPCR,
7TM)
.. Abb.27.1 Strukturen verschiedener Rezeptortypen. Einige typische Transmembranproteine mit bekannter Rezeptorfunktion sind neben einem intrazellulren Rezeptor gezeigt. Die angefhrten Beispiele entsprechender Liganden sind: EGF, Epidermal
growth factor; Insulin und IGF1, Insulin-like growth factor1; NGF, Nerve growth factor; PDGF, Platelet-derived growth factor;
M-CSF, Macrophage colony stimulating factor; FGF, Fibroblast growth factor; VEGF, Vascular endothelial growth factor; Riechstoffe,
Hormone, Neurotransmitter, Lichtreize (Rezeptoren: GPCR, G-protein coupled receptors, die ausnahmslos 7-Transmembranhelix
7TM-Proteine sind); Steroidhormone wie strogene oder Testosteron dringen in die Zelle ein und binden an ihren intrazellulren Rezeptor. Ig, Immunglobulindomne; K, Tyrosinkinasedomne; S, Disulfidbrcke
semolekl viele Molekle der nachgeschalteten Proteinkinase phosphoryliert, ergibt sich ein mehrfacher Verstrkereffekt: Ein einzelnes Signalmolekl
kann aufgrund der Amplifikationskaskade eine
groe Wirkung auslsen (Beispiel: Regulation der
Glykogenolyse; .Abb.16.4). Mit der Vernderung
der Aktivitt des Effektorproteins am Ende einer
Signalkaskade erreicht der Regulationsvorgang sein
Ziel, beispielsweise wird die Phosphorylierung eines
Transkriptionsfaktors die Expression einer Reihe
von Zielgenen verndern.
raum (Interstitium) in den Blut- und Lymphkreislauf sezerniert und im ganzen Organismus verteilt;
ihre Zielzellen besitzen hormonspezifische Rezeptoren:
roidhormone knnen durch die Zellmembran diffundieren. Sie binden im Zellinnern an lsliche,
nicht membranstndige Rezeptoren. Das Binden
des Signalmolekls fhrt zu einer Konformationsnderung, die ein Kernlokalisierungssignal des
Rezeptors freisetzt. Der Rezeptor-Hormon-Komplex gelangt in den Kern und beeinflusst als aktiver
Transkriptionsfaktor die Expression der Zielgene.
Auch hier wird das Signal verstrkt: Ein einzelnes
Molekl eines Transkriptionsfaktors stimuliert
sein Zielgen zur Produktion vieler mRNA-Mole-
Die parakrine Signalbermittlung zwischen benachbarten Zellen erfolgt durch Diffusion im Interstitium. Zellgebundene Signalmolekle knnen
aber auch das Signal direkt von der einen Zelle zur
nchsten bertragen. Das Signalmolekl, z.B. ein
Rezeptoren kommen nicht nur an der Zell

oberflche, sondern auch im Zellinnern vor
Kleine hydrophobe Signalmolekle wie Ste-
kle, die ihrerseits von vielen Ribosomen abgelesen

werden.
Signalmolekle knnen ber den Blutkreislauf zum Rezeptor transportiert werden, aber
auch direkt von Zelle zu Zelle oder intrazellulr
wirksam sein Bei der endokrinen Signalbermittlung werden Hormone ber den Zellzwischen-
334
1
2
Interleukin im Immunsystem, wird auf der Zell

oberflche prsentiert und entfaltet seine Wirkung,
sobald die Membranen der kommunizierenden Zellen miteinander in Kontakt kommen:
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Bei der autokrinen Signalbermittlung wird das

Signalmolekl gar in der Empfngerzelle selbst
produziert, z.B. bei Tumorzellen, die ihr eigenes
Wachstum stimulieren:
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hht bei Speicheldrsenzellen die Sekretion: Jeder Zelltyp besitzt ein spezifisches Signaltransduktions-Netzwerk.
3. Das Beenden der zellulren Reaktion ist, wie
das Versanden eines Gerchts, ebenso wichtig
wie das Auslsen der Reaktion. Die Signalbermittlung wird auf festgelegte Art und Weise
abgestellt: Niedermolekulare Signalmolekle
werden nach erfllter Funktion zumeist abgebaut, whrend Rezeptoren, Transduktoren und
Effektorproteine laufend desaktiviert werden.
Permanent aktive oder signalgesteuerte Proteinphosphatasen entfernen die durch die Signalbermittlung gesetzten Phosphorylierungen.
Effektormolekle werden entweder demodifiziert oder abgebaut und durch neu synthetisierte Proteine ersetzt: Alle Signaltransduktionen, welche nicht fortwhrend aktiviert werden,
werden abgebrochen.
Drei Faktoren bestimmen die zellulre Reaktion:
1. Das Ausma der zellulren Antwort hngt

von der Anzahl aktivierter Rezeptoren ab.
Ein Signalmolekl aktiviert entweder einen
Rezeptor in der Zellmembran, der eine Signalkaskade auslst, oder einen lslichen Rezeptor
im Zellinnern, der an die Promotorregion eines
Zielgens oder an ein anderes Zielmolekl bindet. In beiden Fllen bestimmt die Strke des
Eingangssignals, z.B. die Konzentration eines
Hormons, die Anzahl der aktivierten Rezeptoren.
2. Die Reaktion hngt vom Zelltyp ab. Vernetzte
bermittlungsmodule verarbeiten die Signale
zwischen Rezeptor und Zielprotein. Diese Module, z.B. die MAP-Kinase-Kaskaden (Abschn.27.6), sind je nach Zelltyp verschieden,
so dass dasselbe Eingangssignal je nach Zelltyp
zu unterschiedlichen Reaktionen fhrt. Acetylcholin beispielsweise lst die Kontraktion von
Skelettmuskelzellen aus, erniedrigt jedoch im
Herzmuskel die Strke der Kontraktion und er-
Rezeptoren an der
Zelloberflche: G-Proteingekoppelte Rezeptoren (GPCR)
Der Rezeptor bergibt das Signal an hetero

trimere G-Proteine Die G-Protein-gekoppelten
Rezeptoren (G-Protein-coupled receptors GPCR)
bilden die grte Rezeptorfamilie; um die tausend solcher homologer Rezeptoren mit 7Transmembranhelices (7TM-Rezeptoren) kommen in
Sugern vor. Rezeptoren des 7TM-Typs erkennen
ganz verschiedene Signalmolekle, z.B. Riechstoffe, Hormone oder Neurotransmitter, ja sogar
Lichtreize. Der nicht aktivierte Rezeptor bildet
einen Komplex mit dem heterotrimeren G-Protein, dessen -Untereinheit in der GDP-Form
vorliegt (.Abb.27.2). Das Binden des spezifischen Signalmolekls an den Rezeptor bringt die
Signaltransduktion in Gang: Eine Konformationsnderung des Rezeptors wird auf die -Untereinheit des G-Proteins bertragen und bewirkt,
dass GDP durch GTP ersetzt wird (im Cytosol ist
die Konzentration von GTP etwa 10-mal hher
als die von GDP). Der Rezeptor wirkt somit als
GDP/GTP-Austauschfaktor (Guanyl-nucleotide
exchange factor GEF; Abschn.22.3). Die GTP-
Form der -Untereinheit dissoziiert sowohl vom
335
27.2 Rezeptoren an der Zelloberflche: G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR)
27
Rezeptor als auch vom -Dimer und gibt das Signal weiter, indem sie als nchsten Transduktor ein
Enzym aktiviert, das Second messengers produziert, z.B. die Adenylatcyclase oder die Phospholipase C (s. unten). Der vom G-Protein ausgehende
Signaltransduktionsvorgang ist zeitlich befristet,
da die -Untereinheit das gebundene GTP langsam zu GDP und Pi hydrolysiert. Die Hydrolyse
wirkt als Zeitschalter: In der GDP-Form lst sich
die -Untereinheit von ihrem Zielprotein; der
Ausgangszustand wird wiederhergestellt, indem
das -Trimer des G-Proteins in der GDP-Form
erneut an den Rezeptor bindet.
Sekundre Botenstoffe (Second messengers)
und Proteinkinasen leiten das Signal an die
Effektor
proteine weiter; Phosphatasen beenden die Signalbermittlung Bei vielen Rezep-
toren aktiviert die -Untereinheit des zugehrigen

G-Proteins eine Adenylatcyclase. Die Cyclase
katalysiert die Umwandlung von ATP zu cAMP,
einem sekundren Botenstoff (Second messenger; Strukturformel, .Abb.16.4). Das Binden
von cAMP an die regulatorische Untereinheit
einer cAMP-abhngigen Proteinkinase A setzt
deren katalytische Untereinheit frei. Die dadurch
aktivierte Untereinheit phosphoryliert bestimmte
andere Proteinkinasen (Beispiel: Regulation von
Synthese und Abbau von Glykogen; .Abb.16.4)
oder wird in den Kern transportiert, wo sie Transkriptionsfaktoren phosphoryliert und aktiviert
(z.B. das cAMP-response element binding protein
CREB). cAMP wird von der permanent vorhandenen cAMP-Phosphodiesterase zu 5-AMP hydrolysiert und dadurch laufend inaktiviert.
In einer Sugerzelle bewltigen ber 500 verschiedene Proteinkinasen einen groen Teil der
Signalbermittlung. In der Regel phosphorylieren
Tyrosinkinasen die Proteine am Anfang der aus
Serin/Threoninkinasen bestehenden Signalbermittlungskaskaden. Die Proteinkinasen bilden eine
Familie homologer Proteine und sind zumeist recht
substratspezifisch, d.h. erkennen jeweils nur eine
kleine Gruppe von Zielproteinen.
Fr das Abstellen des Signals von GPCR sorgen verschiedene Vorgnge: Der aktivierende
Ligand dissoziiert vom Rezeptor und wird enzymatisch eliminiert. Damit verliert der Rezeptor
seine GDP/GTP-Austausch-(GEF-)Aktivitt. Die
GDP
.. Abb.27.2 Signaltransduktion durch G-Protein-gekoppelten Rezeptor (GPCR). Die meisten Rezeptoren mit 7Transmembranhelices (.Abb.27.1) sind GPCR. Das Binden des
Signalmolekls aktiviert die Guanyl nucleotide exchange factor
(GEF)-Aktivitt des Rezeptors, die ber Konformationsnderungen die -Untereinheit des G-Proteins veranlasst, GDP
gegen GTP auszutauschen. Der GDP/GTP-Austausch fhrt
durch weitere Konformationsnderungen zum Ablsen des
G-Proteins vom Rezeptor und zur Dissoziation der -Untereinheit und des -Dimers. Die GTP-ligandierte -Untereinheit
aktiviert darauf ihr Zielprotein (ein Enzym oder einen Ionenkanal). In gewissen Fllen aktiviert auch das frei gewordene -Dimer ein spezifisches Zielprotein. Die -Untereinheit
hydrolysiert GTP zu GDP, worauf der Ausgangszustand von
Rezeptor und G-Protein wieder hergestellt wird. Die -Untereinheit und das -Dimer des G-Proteins sind beide durch
einen Lipid-Anker mit der Membran verbunden und finden
dadurch rascher zum Rezeptor zurck als frei lsliche, in drei
Dimensionen diffundierende Proteine
-Untereinheit des G-Proteins hydrolysiert das

gebundene GTP zu GDP, wird dadurch inaktiviert
und kann ihr Zielprotein nicht mehr aktivieren; sie
reassoziiert mit dem /-Komplex. Die GTPaseAktivitt der isolierten -Untereinheit ist gering, in
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der Zelle wird sie durch GTPase-aktivierende Proteine (GAP) erhht (fr weitere, nicht GPCR-spezifische Abstellmechanismen, s. Abschn.27.3,
.Tab.27.2). Einige Dutzend Phosphatasen sind
fr das Abstellen der Signale in den Signalkaskaden
verantwortlich; die Phosphatasen sind wenig spezifisch, zustzliche regulatorische Untereinheiten
knnen jedoch deren Substratspezifitt erhhen.
Manche G-Protein-gekoppelte Rezeptoren

verwenden Inositol-1,4,5-trisphosphat (IP3),
Diacylglycerol oder Calciumionen anstelle von
cAMP als sekundre Botenstoffe Die - Un-
tereinheiten gewisser G-Proteine aktivieren eine

membranstndige Phospholipase wie die Phospholipase C (PLC). Phosphatidylinositol wird durch
diese Phospholipase in Diacylglycerol (DAG) und
Inositol-1,4,5-trisphosphat (IP3) gespalten, die
beide als Second messengers in der Signaltransduktion dienen:
verschiedenste Rezeptoren streng kontrolliert und

ist an der Verstrkung und Integration der eingehenden Signale beteiligt. Von besonderer Bedeutung ist die Freisetzung von Ca2+ aus dem sarkoplasmatischen Retikulum durch spannungsgesteuerte
Ionenkanle, welche die Muskelkontraktion auslst;
Troponin bernimmt dabei die Rolle von Calmodulin (Abschn.30.4).
Die -Untereinheit eines G-Proteins kann nicht
nur cAMP oder cGMP bildende Cyclasen sondern
auch cGMP hydrolysierende Phosphodiesterasen direkt aktivieren. In der Phototransduktionskaskade der Sehzellen, die cGMP als sekundren
Botenstoff verwenden, aktiviert ein G-Protein eine
cGMP-Phosphodiesterase (Abschn.29.2).
27.3 Rezeptoren
an der Zelloberflche:
Rezeptoren mit enzymatisch
aktiver cytosolischer Domne
10
Enzymatisch aktive Rezeptoren bilden die zweitgrte Rezeptorgruppe an der Zelloberflche
11
Im Gegensatz zu den 7Transmembranhelices der

G-Protein-gekoppelten Rezeptoren finden wir hier
nur eine einzige Transmembranhelix (.Abb.27.1).
An Rezeptoren dieses Typs binden extrazellulre
Signalproteine, die Teilung, Wachstum, Differenzierung und berleben der Zellen kontrollieren.
Diese Signalproteine werden zusammenfassend als
Wachstumsfaktoren
bezeichnet (.Tab.27.1).
Sie werden in verschiedensten Geweben und Organen gebildet und sind in niedrigen Konzentrationen (1011109M) endokrin, parakrin oder autokrin wirksam. Das Binden eines Wachstumsfaktors
an die extrazellulre Domne des spezifischen Rezeptors lst eine Konformationsnderung aus, die
durch die Transmembranregion des Rezeptors oder
durch Dimerisierung des Rezeptors ins Zellinnere
bertragen wird und die katalytische Aktivitt der
intrazellulren Domne(n) stimuliert. Die aktivierte Enzymdomne modifiziert ihr Substrat und
bringt damit eine Signaltransduktion in Gang. In
manchen Fllen wird am Ende der Signalkette die
Aktivitt von Transkriptionsfaktoren beeinflusst,
wodurch sich die relativ langen Reaktionszeiten
(bis Stunden) auf Signale von Wachstumsfaktoren
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DAG verbleibt in der Membran, stimuliert die

Ca2+-abhngige Proteinkinase C und gibt auf diese
Weise das Signal weiter. Das hydrophile IP3 wandert zum ER und bewirkt dort die Freisetzung
gespeicherter Calciumionen, die verschiedene
Ca2+-bindende Proteine beeinflussen. Das allosterisch wirksame Protein Calmodulin ist in die
Ca2+ -abhngigen Signaltransduktionsketten eingeschaltet, es wird durch Ca2+ aktiviert und reguliert
die Aktivitt anderer Proteine (meist Enzyme). Die
Ca2+-Konzentration im Cytosol der Zelle ist sehr
niedrig (etwa 0,1M), sie wird von Hormonen,
Neurotransmittern und Wachstumsfaktoren ber
337
27.3 Rezeptoren an der Zelloberflche
27
.. Tab.27.1 Wachstumsfaktoren, eine Auswahl der wichtigsten Vertretera

Wachstumsfaktor(en)
Funktion
Rezeptortyp
Cytokine
Von Leukozyten und anderen Zellen produzierte

Wachstums- und Differenzierungsfaktoren: Chemokine wirken positiv chemotaktisch auf Leukozyten
und Endothelzellen; Interleukine wirken auf Zellen
des Immunsystems; Interferone induzieren Resistenzproteine gegen Viren (Abschn.28.8)
Proteinkinasen u.a.
Epidermal growth factor (EGF)
Stimuliert Wachstum epidermaler und epithelialer

Zellen
Tyrosinkinase
Erythropoietin (Epo)
Beschleunigt die Bildung von Erythrozyten
Tyrosinkinase
Fibroblast growth factors (FGF)
Beschleunigen die Bildung verschiedener Zellen
Tyrosinkinase
Insulin-like growth factors (IGF1,

IGF2)
Vermitteln Wirkung des Wachstumshormons, stimulieren Wachstum und Vermehrung vieler Zellen
Tyrosinkinase
Nerve growth factor (NGF)
Frdert Bildung gewisser Neuronen
Tyrosinkinase
Transforming growth factor-

(TGF)
hnlich wie EGF
Tyrosinkinase
Transforming growth factor-

(TGF)
Stimuliert bzw. hemmt gewisse Typen von Zellen
Serin-Threoninkinasen
Ein Teil der Wachstumsfaktoren wird durch verschiedene Zelltypen synthetisiert, andere nur durch einen bestimmten Zelltyp.
erklren. Schnelle direkte Effekte enzymatisch aktiver Rezeptoren auf das Cytoskelett sind aber auch
bekannt. Sie bestimmen, ob und wie sich die Zelle
bewegt oder ihre Gestalt verndert. Die sechs verschiedenen Klassen dieses Rezeptortyps sind hier
nach ihrer Hufigkeit in tierischen Zellen aufgefhrt:
Rezeptor-Tyrosinkinasen,
Mit intrazellulren Tyrosinkinasen assoziierte
Rezeptoren (Non-receptor tyrosine kinases
NRTK),
Rezeptorhnliche Tyrosinphosphatasen,
Rezeptor-Serin/Threoninkinasen,
Rezeptor-Guanylatcyclasen,
An Histidinkinasen gebundene Rezeptoren.
----
Rezeptor-Tyrosinkinasen binden Wachstumsfaktoren und Hormone; sie knnen aber auch durch
Wechselwirkung mit Rezeptoren der Nachbarzellen stimuliert werden
In der Regel fhrt
die Bindung von einem oder zwei Moleklen des

Liganden zur Dimerisierung des Rezeptors. Die
Tyrosinkinasedomnen im Zellinnern geraten bei
der Dimerisierung des Rezeptors in enge Nachbarschaft und phosphorylieren gegenseitig mehrere bestimmte Tyrosinreste. Die Autophosphorylierung
fhrt zur Weitergabe des Signals, indem die autophosphorylierten Stellen auf den Kinasedomnen
als neue Bindungsstellen zum Andocken weiterer
Signalbermittlungsproteine dienen. Ein bestimmter Rezeptor kann somit mehrere Signalbermittlungskaskaden gleichzeitig aktivieren.
338
welche stromabwrts in der bermittlungskette

liegen.
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SH3
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Das Abstellen des Signals oder die Desensibilisierung der Zelle erfolgt ber mehrere Wege Alle
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Die Rezeptoren mit Tyrosinkinaseaktivitt werden

nach ihren Liganden klassifiziert (.Abb.27.1). Die
grte Untergruppe der Rezeptor-Tyrosinkinasen
bilden die Ephrinrezeptoren. Da die Ephrine wie
die Ephrinrezeptoren membrangebundene Proteine
sind, kann die entsprechende Signalkette nur bei
direktem Zell-Zell-Kontakt in Gang kommen. Die
Ephrinsignalkette ist beteiligt an der Zielfindung der
Zellen bei der Embryogenese, der Wegfindung der
auswachsenden Axone, der Angiogenese und der
Differenzierung von Stammzellen.
Die phosphotyrosinbindenden Domnen der
verschiedenen andockenden Signalbermittlungsproteine sind oft miteinander homolog
Phosphotyrosinbindende Domnen wurden zuerst

im SRC-Onkoprotein (ausgesprochen sark; sarcoma-promoting) gefunden und als SH2-Domnen
(Src homology2domains) bezeichnet. Die phosphotyrosinbindenden Signalbermittlungsproteine
besitzen weitere Bindungsstellen, z.B. SH3-Domnen fr prolinreiche Motive in Partnerproteinen,
Signale werden mit einer gewissen Verzgerung

eliminiert. Selbst wenn das Signalmolekl permanent einwirkt, passt sich die Zelle an, indem sie die
Empfindlichkeit fr das Signal mindert. Diverse
Prozesse, welche das Signal aktivierter Rezeptoren
abstellen, sind bekannt (.Tab.27.2). Der Rezeptor
kann durch Internalisierung in Endosomen vom Signal getrennt werden (Abschn.22.5). Im sauren
pH der frhen Endosomen dissoziiert der Ligand,
worauf er und meist auch der Rezeptor abgebaut
werden. Die nicht abgebauten Rezeptoren werden
zur Zelloberflche zurckgebracht. Eine Reihe permanent aktiver aber auch signalregulierter Proteinphosphatasen spaltet aktivierende/inaktivierende
Phosphatgruppen von den Kinasen ab. Gewisse
Rezeptoren oder andere Proteine der Signaltransduktion werden durch Binden von Proteinen oder
niedermolekularen Stoffen gehemmt. Second messengers werden enzymatisch desaktiviert.
Inositolphospholipide dienen gewissen enzymatisch aktiven Rezeptoren als sekundre

Botenstoffe Signale extrazellulrer Wachstums-
faktoren sind notwendig fr das berleben und

die Teilung der Zellen. Wenn die Zellgre ber
die Teilungsrunde(n) erhalten bleiben soll, so muss
gleichzeitig auch das Wachstum (die Vergrerung)
339
27.3 Rezeptoren an der Zelloberflche
der Zellen stimuliert werden. In gewissen Fllen

wird Wachstum und Teilung durch den gleichen
Wachstumsfaktor stimuliert, in anderen wirken ein
Wachstumsfaktor und ein zustzlicher mitogener
Faktor (Mitogen, Teilungsfaktor) zusammen. Ein
wichtiger Signalweg zur Stimulierung des Wachstums, z.B. durch IGF (Insulin-like growth factor;
Abschn.28.2), verluft ber die Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI-3-Kinase). Zielmolekl dieser
Kinase ist membrangebundenes Phosphatidylinositol PI, PI-4-P oder PI-4,5-P2; der Phosphoinositolrest wird jeweils an der 3-Position phosphoryliert,
so dass PI-3-P (Phosphatidylinositol-3-phosphat),
PI-3,4-P2 oder PI-3,4,5-P3 entstehen. An membranstndiges PI-3,4,5-P3 docken weitere Signalproteine
mittels ihrer Pleckstrin-Homologie-Domne an
(erstmals gefunden in Pleckstrin, einem Protein in
Blutplttchen); zu diesen Signalproteinen gehren
Proteinkinasen, z.B. Akt/PKB, welche ber weitere Signalwege das Zellwachstum frdern und die
Apoptose hemmen.
Rezeptorhnliche Tyrosinphosphatasen sind
wichtige Signalbermittler bei Zell-Zell-Kontakten Whrend nur eine kleine Zahl menschlicher
Gene fr Serin/Threoninphosphatasen bekannt

ist, kennt man immerhin gegen 40Gene von Protein-Tyrosinphosphatasen. Etwa die Hlfte dieser
Enzyme sind Transmembranproteine der Zellmembran, die anderen sind lsliche cytosolische
Proteine. Die membranstndigen Tyrosinphosphatasen gleichen den Rezeptorkinasen und zeigen eine
extrazellulre Domne, ein Transmembransegment
und meist zwei intrazellulre Phosphatasedomnen; Phosphatasen dieser Art sind an Signalbermittlungen bei Zell-Zell-Kontakten beteiligt. Ein
Beispiel einer Rezeptor-Tyrosinphosphatase ist das
CD45-Protein (Cluster of differentiation CD), das
auf der Oberflche der weien Blutzellen vorkommt
und eine wichtige Rolle bei der Aktivierung von Bund T-Zellen des Immunsystems durch Fremdantigene spielt (Abschn.32.2).
Rezeptor-Serin/Threoninkinasen haben vielfltige Funktionen Die TGF-(Transforming
growth factor -)Superfamilie umfasst viele sezer-
nierte Proteine, die Signale vermitteln bei Zellvermehrung, Differenzierung, Produktion der extrazellulren Matrix oder Steuerung der Apoptose. Alle
TGF wirken ber Rezeptor-Serin/Threoninkinasen.
27
.. Tab.27.2 Beenden der Signaltransduktiona

Betroffene
Molekle
Mechanismus
der Inaktivierung
Rezeptoren
Down-regulation durch Abbau

in den Lysosomen
Internalisierung in Endosomen
Rezeptoren und
Signalbermittlungsproteine
Modifikation, z.B. durch

Proteinkinasen oder Proteinphosphatasen
Binden von Inhibitoren
cAMP, cGMP
Phosphodiesterasen
Ca
Sequestrierung im ER
2+
Die wichtigsten Wege, ber die Signale gedmpft

oder abgestellt werden, sind angegeben.
Die dimeren TGF binden an die Rezeptoren, die darauf dimerisieren oder auch grere signalisierende
Assoziate bilden.
Rezeptor-Guanylatcyclasen sind an der Kontrolle des Blutdrucks beteiligt Rezeptoren mit
einer intrazellulren Guanylatcyclase-Domne

haben eine einzelne Transmembranhelix. Ihr intrazellulres Produkt, cGMP, leitet das Signal auf eine
cGMP-abhngige Proteinkinase weiter.
Membranstndige Rezeptor-Guanylatcyclasen erkennen die natriuretischen Peptide (Abschn.33.4), welche den Salz- und Wasserhaushalt
regulieren sowie die Blutgefe erweitern und damit
den Blutdruck senken. Zurzeit sind beim Menschen
sieben solche Rezeptoren bekannt; einige von ihnen
sind noch Waisen-Rezeptoren (Orphan receptors),
d.h. ihre Signalliganden sind unbekannt.
Mit Histidinkinase gekoppelte Rezeptoren
vermitteln die bakterielle Chemotaxis Rezepto-
ren dieses besonderen Typs kommen auch in Hefen

und Pflanzen vor, jedoch nicht in Tieren. Die bakteriellen Chemotaxis-Rezeptoren
sind dimere
Transmembranproteine an der Zelloberflche, die
sowohl Lockstoffe (Attractants, i.d.R. Nhrstoffe
wie Glucose oder Aminosuren) als auch Schreckstoffe (Repellents) binden und darauf ber ein
Adaptorprotein die Histidinkinase im Zellinnern
inaktivieren bzw. aktivieren. Weitere Proteine leiten das Signal zu den Motorproteinen der Flagellen
(Geieln). Alle Flagellen einer Bakterienzelle (z.B.
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von E. coli) haben eine schraubenartige Struktur

mit der gleichen Hndigkeit (Chiralitt). Die Flagellen rotieren alle in gleicher Drehrichtung mit
ber 100 Umdrehungen pro Sekunde. Alle paar
Sekunden wechselt die Drehrichtung. Bei Rotation
der Flagellen im Uhrzeigersinn (lngs der Flagelle
gegen die Zelle gesehen) richten sich alle Flagellen
von der Zelle weg und ziehen an der Zelloberflche: Die Zelle taumelt, wechselt ihre rumliche
Orientierung, bleibt aber an Ort. Erfolgt die Drehung jedoch im Gegenzeigersinn, bndeln sich die
Flagellen und stoen die Zelle in eine bestimmte
Richtung.
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Attractants inaktivieren die Histidinkinase und

setzen die Frequenz des Richtungswechsels der
Flagellenrotation herab. Die Zelle taumelt damit
weniger hufig, wenn sie in Richtung des Konzentrationsgradienten auf den Lockstoff zu schwimmt.
Schwimmt die Zelle hingegen in falscher Richtung, taumelt sie hufiger und reorientiert sich
hufiger. Repellents aktivieren die Histidinkinase
und erhhen die Frequenz des Richtungswechsels
der Flagellenrotation; die Resultante der Zufallsbewegungen fhrt die Zelle von der Schreckstoffquelle weg. Die gelenkte Zufallsbewegung
kommt zustande durch das signalkontrollierte
Abwechseln von zwei Zufallsbewegungen: Geradeausschwimmen und Taumeln (rumliche Reorientierung).
27.4
Rezeptoren an der
Zelloberflche: proteolytisch
aktivierte Rezeptoren
Limitierte regulierte Proteolyse aktiviert Rezeptoren, welche die Entwicklung mehrzelliger

Lebewesen steuern Rezeptoren dieser Klasse,
wie z.B. der Notch-Rezeptor, kontrollieren die
Differenzierung von Zellen, indem sie molekulare

Unterschiede zwischen benachbarten Zellen konsolidieren und verstrken. Wenn beispielsweise
bei der Zelldifferenzierung eine Nervenzelle in der
Umgebung anderer Zellen entstanden ist, hindert
sie die Zellen in ihrer Umgebung ebenfalls zu neuronalen Zellen zu differenzieren. Das Binden des
Delta-Transmembranproteins des Neurons an die
Notch-Rezeptoren benachbarter Zellen lst spezifische proteolytische Spaltungen dieser Rezeptoren
aus (limitierte Proteolyse). Die kontaktabhngige
Proteolyse erfolgt extrazellulr und intrazellulr
durch zwei verschiedene Proteasen. Das intrazellulre Spaltprodukt von Notch wandert in den Kern,
bindet an einen Repressor und wandelt diesen zu
einem Aktivator seiner Zielgene um. Die angesteuerten Gene produzieren Transkriptionsfaktoren,
welche die neuronale Differenzierung reprimieren.
hnliche Mechanismen kontrollieren die Differenzierung mancher anderer Zelltypen.
Stress- und Entzndungssignale aktivieren

durch proteolytischen Abbau eines Inhibitors den
Transkriptionsfaktor NF-B (NF-kappaB, Nuclear
factor kappa-light-chain-enhancer of activated B
cells) Der Organismus reagiert auf Stress mit einer NF-B-Antwort. Die Zellen schtzen sich durch
geeignete Reaktionen vor schdigenden Einflssen

von Fremdorganismen, Verletzung und ungnstigen
Umweltfaktoren wie reaktive Sauerstoffradikale, toxische Chemikalien, Hitze, Klte oder Strahlung. Diese
Bedingungen belasten die Zellen, indem sie Schden
wie Modifikationen von Proteinen und Nucleinsuren verursachen. Auf Stress reagiert der Organismus
u.a. mit der Sekretion von TNF- (Tumor necrosis
factor , einem Cytokin aus Makrophagen/Monozyten, Lymphozyten und Mastzellen) und von IL-1
(Interleukin-1, v.a. aus Makrophagen). Die beiden
Proteine wirken ber ihre Rezeptoren und eine Reihe
von bermittlungsproteinen auf den Transkriptionsfaktor NF-B . Fnf Varianten von NF-B kommen
341
27.6 bermittlungsmodule leiten die Signale vom Rezeptor zum spezifischen Effektor
in Sugetieren vor und bilden Homo- und Heterodimere, die je einen bestimmten Satz von Genen aktivieren. NF-B liegt im Cytoplasma als Komplex mit
einem Inhibitorprotein vor. Bei Eintreffen des Signals
wird der Inhibitor phosphoryliert, ubiquitiniert und
abgebaut. Dadurch wird das Kernlokalisierungssignal von NF-B freigesetzt. Im Kern werden danach
etwa 60Zielgene aktiviert, welche eine Entzndungsund Immunreaktion und generell das berleben der
Zelle frdern. Eine intensive und lange andauernde
NF-B-Antwort kann aber auch die Apoptose der
Zelle auslsen.
27.5
Rezeptoren im Zellinnern
Die meisten Signalmolekle sind zu hydrophil oder

zu gro, um Membranen zu durchqueren. Einige
lipophile Signalmolekle knnen jedoch direkt zu
ihren Rezeptoren in der Zelle diffundieren.
Membrangngige Hormone binden direkt an

Transkriptionsfaktoren Kleine lipophile Hormone wie Steroidhormone, Schilddrsenhormone, Retinoide und 1,25-Dihydroxycholecalciferol (ein aus Vitamin D synthetisiertes Hormon)
passieren die Zellmembran und binden direkt an

ihre Rezeptoren im Cytosol (.Abb.27.1), eine
Signaltransduktionskette entfllt. Sobald das Hormon an die Ligandenbindungsdomne des Rezeptors gelangt, dissoziiert ein inhibitorisches Protein
(Hsp90, ein Hitzeschockprotein) vom Rezeptor. Ein
Kernlokalisierungssignal auf dem Rezeptor wird frei
und ermglicht dessen Translokation in den Kern.
Der Rezeptor dimerisiert, bindet mit seinen zwei
DNA-bindenden Domnen (mit Zinkfingern) an
die DNA, sodass seine transkriptionsaktivierenden
Domnen wirksam werden knnen. Eine besondere Gruppe von Steroidrezeptoren ist primr im
Kern lokalisiert und wird dort von ihren Liganden
erreicht.
Stickstoffmonoxid diffundiert durch die Zellmembran und bindet direkt an eine Guanylatcyclase Stickstoffmonoxid NO fungiert als gasfr-
miger interzellulrer Mediator (Abschn.28.8). Es

wird in Nervenzellen, Endothelzellen der Blutgefe
und aktivierten Makrophagen durch die NO-Synth
ase oxidativ aus Arginin gebildet. Das freie Radikal
diffundiert schnell durch das Gewebe, besitzt aber
27
eine Halbwertszeit von nur einigen Sekunden. In

niedriger Konzentration wirkt es als Signalsubstanz,
in hoher Konzentration als cytotoxischer Wirkstoff
der Makrophagen.
Im Gefsystem scheiden erregte cholinerge
Nervenendigungen den Botenstoff Acetylcholin
aus (Abschn.29.1) und veranlassen dadurch benachbarte Endothelzellen, NO zu produzieren. NO
diffundiert in die glatten Muskelzellen der Gefwand und aktiviert eine Guanylatcyclase, die cGMP
produziert (zur Struktur, vgl. cAMP; .Abb.16.4).
Nachgeschaltete intrazellulre Signaltransduktion
fhrt zur Relaxation der Muskelzelle, das Gef
dilatiert.
Stickstoffmonoxid und Ethylen (bei Pflanzen;
Abschn.21.5) sind nicht die einzigen Gasmediatoren: Kohlenmonoxid CO (Produkt der Hmoxygenase-Reaktion; Abschn.33.3) und Schwefelwasserstoff H2S erfllen hnliche Funktionen wie
NO.
Sildenafil/Viagra
Die Erektion des Penis kommt, ber eine
NO-gesteuerte Produktion von cGMP, durch
Erweiterung der lokalen Arteriolen zustande.
Das zur Behandlung von Erektionsstrungen verwendete Sildenafil (Viagra) ist ein
Inhibitor der cGMP-Phosphodiesterase und
verzgert den Abbau von cGMP.
27.6
bermittlungsmodule leiten
die Signale vom Rezeptor
zum spezifischen Effektor
Gerstproteine (Scaffold proteins) fassen die Komponenten von Signalketten zu Komplexen zusammen Die vielen verschiedenen Scaffold proteins
im Cytosol der Zelle dienen als Kerne spezifischer

Signalkomplexe, welche jeweils die einzelnen Signalproteine bestimmter intrazellulrer Signaltransduktionsketten vereinigen. Die Signalproteine eines
Komplexes knnen sich gegenseitig beeinflussen:
Sie knnen gemeinsame Bindungsstellen fr Kinasen bilden oder sich gegenseitig phosphorylieren
bzw. dephosphorylieren. Der Signalkomplex beschleunigt die Signalbermittlung und verhindert
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Signale zu
anderen Moleklen
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.. Abb.27.3 Schema einer Signalbermittlung durch ein MAP-Kinasen-Modul in einer tierischen Zelle. Das Signal wird in
mehreren Schritten von einem Wachstumsfaktor an der Zellauenseite bis zur Transkriptionsmaschinerie im Zellkern bermittelt und dabei krftig verstrkt. Die Bindung des dimeren Wachstumsfaktors (in Blau) lst eine verstrkte Dimerisierung
und eine Konformationsnderung des Rezeptors aus. Im Cytoplasma aktiviert die neue Konformation des Rezeptors eines der
Adaptorproteine und danach das GTP-bindende Proto-Onkoprotein Ras, welches das Signal an ein MAP-Kinasenmodul und die
zugehrigen Transkriptionsfaktoren weiterleitet. Die der MAPK vorgeschalteten Kinasen werden als MAPKK (MAP-Kinasekinase)
und MAPKKK bezeichnet. Die MAP-Kinasen phosphorylieren die Transkriptionsfaktoren, die daraufhin in den Kern transportiert
werden, wo sie die Expression ihrer Zielgene regulieren. GEF, Guanine nucleotide exchange factor
unerwnschte Vernetzung (Cross-talk, Signalaustausch) mit anderen Signalketten. Die Scaffold proteins lagern sich hufig an intrazellulre Domnen
enzymatisch aktiver Rezeptoren an.
Module von MAP-Kinasen bertragen Signale

von Rezeptor-Tyrosinkinasen auf Transkriptionsfaktoren Aktivierte Tyrosinkinasen bermitteln
das Signal oft ber ein Adaptorprotein an ein GDP/
GTP-Austauschprotein (Guanyl nucleotide exchange factor GEF) und weiter an GTP-bindende
Proteine wie das Proto-Onkogenprodukt Ras und
an entsprechende stromabwrts liegende Module

(Kaskaden) von MAP (Mitogen-activated protein-)
Kinasen (.Abb.27.3) . MAP-Kinasen finden sich
in allen Eukaryonten; tierische Zellen besitzen mindestens fnf verschiedene Module von MAP-Kina-
sen, die auf verschiedenste Stimuli reagieren. Die

zum Teil miteinander vernetzten MAP-Kinase-Module verarbeiten die Signale und leiten sie an Transkriptionsfaktoren und andere Effektorproteine
weiter. Spezifische Proteinphosphatasen dephosphorylieren und inaktivieren die MAP-Kinasen.
27.7
Signaltransduktion in Pflanzen
und Pilzen
Vielzelligkeit und Zellkommunikation haben

sich in Pflanzen und Tieren zum Teil unabhngig
voneinander entwickelt Frhe eukaryontische
Vorluferzellen besaen Kern und Mitochondrien.

Im Lauf der Evolution entstanden die drei Linien
343
27.7 Signaltransduktion in Pflanzen und Pilzen
der Vorluferzellen von Pilzen, Tieren und Pflanzen mit Chloroplasten. Erst anschlieend, vor rund
einer Milliarde Jahren, begann die Entwicklung zu
vielzelligen Organismen:
27
am hufigsten G-Protein-gekoppelte Rezeptoren

(GPCR) verwenden, sind in Pflanzen die meisten
Rezeptoren enzymgekoppelt, und auch hier finden
sich markante Unterschiede zu den Tieren. Pflanzen
besitzen, im Gegensatz zu Tieren, nur sehr wenige
membranstndige Rezeptor-Tyrosinkinasen. In
cytoplasmatischen Signalkaskaden spielen Tyrosinkinasen zwar auch bei Pflanzen eine wichtige
Rolle, jedoch auf tieferer hierarchischer Stufe als
bei Tieren. In der pflanzlichen Zellmembran treten Rezeptor-Serin/Threoninkinasen anstelle der
Rezeptor-Tyrosinkinasen gehuft auf. Sie besitzen
eine extrazellulre Signalbindungsdomne und eine
intrazellulre Kinasedomne. Etwa zwei Drittel der
Rezeptoren zeigen in ihrer extrazellulren Domne
tandemartige Repetitionen von leucinreichen Segmenten und werden demnach als LRR-Proteine
(Leucine-rich repeat proteins)
bezeichnet. Die
zugehrigen Signalmolekle sind oft Peptide, Steroide oder seltener sezernierte Proteine.
Pflanzliche Wachstumsregulatoren (Phytohormone; Abschn.21.5) wie Ethylen, Auxine, Gibberelline und Abscisinsure, knnen Zellwnde
durchdringen Ethylen bindet an eine Reihe von
Zelloberflche-Rezeptoren und hemmt deren intrazellulre Histidinkinaseaktivitt (.Abb.27.4).

Die in der Signalbermittlung nachfolgenden
MAP-Kinasen verlieren dadurch ihre Hemmwirkung auf bestimmte Transkriptionsfaktoren. Das
Rezeptorsystem erkennt jeweils zwei extrazellulre
Liganden, einen stimulierenden (z.B. Kupferionen)
und einen inaktivierenden (z.B. Ethylen). Diese
Zweikomponenten-Signalbermittlung ist typisch
fr Bakterien, Pilze und Pflanzen, findet sich aber
kaum bei Tieren.
Pflanzen, Pilze
Die grundlegenden intrazellulren Signalbermittlungsmechanismen sind bei Pilzen, Pflanzen und

Tieren hnlich. Pflanzen haben jedoch besondere
extrazellulre Signaltransduktionswege entwickelt
und verwenden gewisse niedermolekulare Signalmolekle wie Ethylen und andere Phytohormone
auf eigene Art und Weise (Abschn.21.5). NO,
Ca2+, cGMP und cAMP werden hingegen in allen
Eukaryonten zur Signalbermittlung verwendet.
In Pflanzen sind Serin/Threoninkinaserezeptoren am hufigsten Im Gegensatz zu Tieren, die
Photoproteine wandeln Lichtenergie in intrazellulre Signale um hnlich wie bei Photore-
zeptoren in der tierischen Retina (Abschn.29.2)

knnen lichtabsorbierende Chromophore in pflanzlichen Photoproteinen eine Konformationsnderung auslsen. Auch in diesen Fllen wird das Signal ber Proteinkinasen an Transkriptionsfaktoren
weitergeleitet. Die am besten bekannten Photoproteine sind die Phytochrome der hheren Pflanzen
und Algen. Die Phytochrome sind dimere cytoplasmatische Serin/Threoninkinasen mit linearen
Tetrapyrrolen als Chromophor. Ihre Aktivitt wird
durch rotes Licht stimuliert und durch kurzwelliges
344
Links auf
Springer Website:
027-6-1517246-0
3
4
27.1 Grundstzliches zur Signaltransduktion

27.2 Rezeptoren an der Zelloberflche:
G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR)
27.3 Rezeptoren an der Zelloberflche: Rezeptoren mit enzymatisch aktiver cytosolischer Domne
27.4 Rezeptoren an der Zelloberflche:
proteolytisch aktivierte Rezeptoren
27.5 Rezeptoren im Zellinnern
27.6 bermittlungsmodule leiten die Signale
vom Rezeptor zum spezifischen Effektor
27.7 Signaltransduktion in Pflanzen und Pilzen
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.. Abb.27.4 Ethylenrezeptor und Signalbermittlung durch

ein MAP-Kinasen-Modul. Der Rezeptor, ein Transmembranprotein an der Zelloberflche, ist ohne Signalmolekl aktiv
und aktiviert das MAP-Kinasen-Modul, das bestimmte Genregulatorproteine inaktiviert. Das Binden des Signalmolekls
Ethylen inaktiviert den Rezeptor, womit die Aktivierung der
MAP-Kinasen-Kaskade und die Hemmung der Expression der
Zielgene entfallen
Infrarot gehemmt. Die Phytochrome kontrollieren

u.a. den Phototropismus der Pflanzen, die Chlorophyllsynthese in den Blttern, das Wachstum von
Smlingen wie auch den Tagesrhythmus der Blten.
Die Flavoproteine der Cryptochrome hingegen sind
empfindlich fr blaues Licht und spielen eine Rolle
bei der Aufrechterhaltung des circadianen Rhythmus bei Pflanzen und Tieren. Die Cryptochrome
sind den Photolyasen homolog, die an der Reparatur von UV-Schden der DNA smtlicher Organismen mit Ausnahme der Suger beteiligt sind. Die
Cryptochrome haben keine DNA-Reparaturaktivitt; sie haben sich vermutlich aus den Photolyasen
zu Photosensoren entwickelt.
345
Molekulare Physiologie
Kapitel 28
Hormone und Mediatoren 347

Kapitel 29
Neurotransmitter; Photo-, Geruchs- und

Geschmacksrezeptoren; Chemotaxis bei
Eukaryonten363
Kapitel 30
Bewegungsapparat: Muskeln,
Bindegewebe und Knochen 375
Kapitel 31
Enzymatische Schutzmechanismen387
Kapitel 32
Immunsystem399
Kapitel 33
Stoffaufnahme und Ausscheidung 413

Kapitel 34
Organstoffwechsel und Lipidtransport im Blut 431

Kapitel 35
Biochemische Aspekte der menschlichen

Ernhrung445
Kapitel 36
Zelldifferenzierung, Regeneration und Altern;

Systembiologie und Synthetische Biologie 467
347
Hormone und Mediatoren

28.1
Hierarchie der Hormondrsen; Struktur, Regelkreise

und Halbwertszeit der Hormone 348
28.2
Hormone von Hypothalamus und Hypophyse 349
28.3
Hormone der Nebenniere: Catecholamine;

Cortisol und Aldosteron 352
28.4
Erythropoietin und Calcitriol aus der Niere; ReninAngiotensin-Aldosteron-System353
28.5
Sexualhormone354
28.6
Kontrolle des Grundumsatzes durch Schilddrsenhormone;

Regulation des Calcium- und Phosphathaushalts
durch Parathyrin, Calcitriol und Calcitonin 356
28.7
Kontrolle der Blutzuckerkonzentration

durch Insulin und Glucagon 358
28.8
Mediatoren (Gewebehormone): Signalstoffe

geringer Reichweite358
28.9
Hormone wirbelloser Tiere361
28.10
Botenstoffe zwischen Individuen: Pheromone und

von Bakterien sezernierte Signalstoffe 362

28
348
Kapitel 28 Hormone und Mediatoren
17
Hormone (griech. hormao, errege, treibe an) dienen zusammen mit den Wachstumsfaktoren
(Abschn.27.3) zur extrazellulren chemischen
Signalbertragung. Die strukturell recht heterogenen Hormone werden in spezialisierten Drsen
und Zellen gebildet und ins Blut oder die interstitielle Flssigkeit sezerniert (innere Sekretion). ber
den Blut- oder Lymphkreislauf gelangen sie zu ihren
Zielzellen (endokrine Signalbermittlung), binden
dort an ihre spezifischen Rezeptoren und bringen
deren Signaltransduktion in Gang.
Glandulre Hormone sind die klassischen
Hormone aus spezialisierten Hormondrsen; aglandulre Hormone werden von spezialisierten
Einzelzellen abgegeben, dazu gehren die neuro
sekretorischen Hormone aus Nervenzellen. Gewebehormone oder Mediatoren werden von verschiedenartigen Zellen gebildet; wegen ihres raschen
Abbaus haben sie nur lokale Wirkung.
Die hormonal regulierten Funktionseinheiten
sind Zellen, Gewebe oder Organe. Hormone koordinieren deren Zusammenspiel, insbesondere regulieren sie die Stoffwechselleistungen bestimmter
Organe. Die Anpassung des Organstoffwechsels an
vernderte Bedingungen luft innert Minuten bis
Stunden ab. Die hormonale Signalbermittlung ist
wesentlich langsamer als die neuronale bermittlung (Abschn.29.1).
Die hierarchisch am hchsten gestellten Hormondrsen liegen im Gehirn und kontrollieren mit
ihren Hormonen periphere Hormondrsen und andere Effektororgane. Das Nervensystem erlangt dadurch eine teilweise Kontrolle ber die hormonale
Signalbermittlung.
Die Pheromone und Autoinducers bermitteln
chemische Signale zwischen den Individuen einer
Spezies, insbesondere bei gewissen Bakterien und
Insekten dienen sie als Erkennungs- bzw. Sexuallockstoffe. Pflanzen verfgen ber besondere Phytohormone (Abschn.21.5).
18
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Hierarchie der Hormondrsen;

Struktur, Regelkreise und
Halbwertszeit der Hormone
Das Gehirn als schneller Verarbeiter innerer und

uerer Reize steuert ber die Hypothalamus-Hypo-
physe-Achse untergeordnete Hormondrsen. Hormone regulieren den Stoffwechsel und die Morphogenese des Krpers. Die Zielorgane einer bestimmten
Hormondrse sind entweder andere Hormondrsen
oder Effektororgane, oder beides. Die Ansprechbarkeit eines bestimmten Gewebes auf ein bestimmtes
Hormon hngt von der gewebespezifischen Expression des entsprechenden Rezeptors ab.
Die Signaltransduktionswege wasserlslicher
und lipidlslicher Hormone sind grundlegend
verschieden Die wasserlslichen Hormone sind
Aminosurederivate, Peptide oder Proteine. Sie
aktivieren membranstndige Rezeptoren, wel-
che das Signal ber verschiedene intrazellulre

Signaltransduktionsprozesse an spezifische Effektorproteine weiterleiten (Second messengers, Phosphorylierungskaskaden, PI-3,4,5-P3 oder limitierte
Proteolyse; Abschn.27.2, 27.3 und 27.4). Die Expression der Gene fr Peptid- und Proteohormone
wird durch gewebespezifische Promotoren reguliert.
Eine NH2-endstndige hydrophobe Signalsequenz
steuert Peptid- und Proteohormone in Vesikel, wo
sie vor der Sekretion gespeichert werden. In manchen Fllen wird ein inaktives Prohormon synthetisiert, das bei der Aktivierung in mehrere verschiedene Hormone gespalten wird; im extremen
Beispiel des Proopiomelanocortins entstehen aus
dem 32-kDa Vorlufermolekl fnf verschiedene
Peptidhormone. Zu den fettlslichen Hormonen
gehren die Steroide, Thyronine, Retinoide und
1,25-Dihydroxycholecalciferol. Sie werden nicht
gespeichert, sind membrangngig und aktivieren Rezeptoren im Cytosol der Zelle, die nach der
Bindung des Hormons als Transkriptionsfaktoren in
den Kern gelangen (Abschn.27.5).
Regelkreise kontrollieren die Hormonproduktion Die Nebennierenrinde ist ein Beispiel
einer ber die Hypothalamus-Hypophysen-Achse

gesteuerten Hormondrse (.Abb.28.1). Die Nebennierenrinde produziert Cortisol, das ber eine
Rckkoppelung die Produktion von Corticotropin-releasing hormone (CRH, Corticoliberin) im Hypothalamus und von ACTH (Adrenocorticotropes
Hormon, Corticotropin) in der Hypophyse hemmt.
Dieser hierarchische Regelkreis verbindet neuronale Signale mit der Sekretion von Steroidhormonen.
Der Tag-Nacht-Rhythmus und Stress beeinflussen
ber diesen Weg die Steroidproduktion.
349
28.2 Hormone von Hypothalamus und Hypophyse
28
Rhythmuszentrum)
Factor
.. Abb.28.1 Hormonale Regelkreise
Schneller Abbau ermglicht rasche Regulierung der Hormonkonzentration Die Halbwertszeit der Hormone im Blut liegt im Bereich von
Minuten. Die meisten Hormone werden von Leber
und Nieren rasch inaktiviert und ausgeschieden.

Peptid- oder Proteohormone werden proteolytisch
gespalten oder durch Reduktion von Disulfidbrcken inaktiviert. Steroidhormone werden entweder
an der Ketogruppe reduziert oder mit Sulfat oder
Glucuronat konjugiert. Eine Ausnahme bilden die
Schilddrsenhormone mit Halbwertszeiten bis zu
mehreren Tagen. Sie werden in der Leber deiodiert,
decarboxyliert und glucuronidiert.
Die strikt kontrollierten Konzentrationen der
Hormone im Blut liegen im Bereich von 1012 bis
106M (pMM). Die Sekretionsleistung der Hormondrse bestimmt die Endkonzentration eines
Hormons. Gewisse Hormone, z.B. das Wachstumshormon (Somatotropin aus der Adenohypophyse) werden kontinuierlich ins Blut abgegeben;
andere wiederum werden schubweise sezerniert,
sei es auf Bedarf (Insulin) oder in rhythmisch sich
wiederholenden Zyklen (Gonadotropine aus der
.. Abb.28.2Hypophyse. Die schematische Darstellung zeigt

die Adenohypophyse (Vorderlappen) und die Neurohypophyse (Hinterlappen). Nervenfasern aus dem Hypothalamus bringen ADH und Ocytocin in das Kapillarsystem der
Neurohypophyse. Von dort gelangen die Hormone direkt
in den Krperkreislauf. Die Adenohypophyse steht ber
Blutgefe in enger Beziehung mit dem Hypothalamus. Ein
erstes Kapillarnetz nimmt dort die Releasing hormones auf
und leitet sie ber eine pfortaderhnliche kurze Verbindung
zu einem zweiten Kapillarnetz in der Adenohypophyse,
wo die Releasing hormones die Synthese und Sekretion der
Vorderlappen-Hormone kontrollieren
Adenohypophyse, die auf die weiblichen und mnnlichen Keimdrsen wirken).

28.2
Hormone von Hypothalamus

und Hypophyse
Der Hypothalamus im Zwischenhirn verbindet

ber die Hypophyse das Nervensystem mit dem endokrinen System. Ein stielartiger Auswuchs des Hypothalamus enthlt neuronale Auslufer und Blutgefe, welche Hormone aus dem Hypothalamus
in die Neuro- bzw. Adenohypophyse berfhren
(.Abb.28.2). Die hypothalamischen Hormone sind,
mit Ausnahme von Dopamin, Peptide. Es gehren
dazu zwei Hormone, welche die Neurohypophyse
(Hypophysenhinterlappen) durch axonalen Transport aus dem Hypothalamus bezieht und ins Blut abgibt, sowie die Releasing hormones (factors), welche
die Hormonproduktion und -sekretion der Adenohypophyse (Hypophysenvorderlappen) kontrollieren
(.Tab.28.1). Die Adenohypophyse, im Unterschied
zur Neurohypophyse, synthetisiert alle von ihr ins
350
.. Tab.28.1 Hypothalamische Hormone des Menschena

Hormon
Kurzname
Struktur
Antidiuretisches Hormon, Adiuretin, Vasopressin
ADH
Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH2
Corticoliberin
CRH
Peptid von 41Aminosuren
Somatoliberin
GRH
Peptid von 44Aminosuren
Somatostatin
Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-PheThr-Ser-Cys
Dopamin
Dihydroxy-Phe, decarboxyliert
Thyroliberin
TRH
5-Oxo-His-Pro-NH2
Gonadoliberin
Gn-RH
5-Oxo-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2
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Ocytocin
Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2
Die entsprechenden Hormone anderer Spezies sind nahe verwandte Homologe. NH2 am COOH-Terminus eines
Peptids bezeichnet eine Amidgruppe.
Blut abgegebenen Hormone selbst. Die Adenohypophysenhormone sind Peptide, Proteine oder Glykoproteine, die meisten wirken als glandotrope Hormone, z.B. Corticotropin auf die Nebennierenrinde
und Gonadotropine auf die Gonaden.
Die zwei Hormone der Neurohypophyse sind
das antidiuretische Hormon (ADH, Vasopressin)
und Ocytocin Sie gelangen als Vorluferproteine
ber axonalen Transport vom Hypothalamus in

die Neurohypophyse. Die aktiven Peptide werden
proteolytisch freigesetzt und zusammen mit spezifischen Transportproteinen ins Blut sezerniert;
Abbau in der Leber beschrnkt ihre Halbwertszeit
auf 24min. Beide Hormone der Neurohypophyse
bewirken neben anderen Effekten die Kontraktion
bestimmter glatter Muskelfasern.
ADH
frdert die Synthese von Aquaporin
(Abschn.6.7) in den Sammelrohren der Nephrone
und ermglicht damit eine erhhte Rckresorption
von Wasser aus dem Primrharn. ADH wird auch
als Vasopressin bezeichnet, weil es die Kontraktion
der glatten Gefmuskulatur anregt und dadurch
den Blutdruck erhht. ADH gelangt zudem ber das
Kapillarsystem in die Adenohypophyse und stimuliert dort die Sekretion von Corticotropin.
Ocytocin bewirkt die Kontraktion der glatten
Muskulatur des Uterus wie auch der Brustdrse
und lst dadurch die Geburtswehen bzw. die
Milchejektion aus; beim Mann fhrt es im Orgasmus zur Kontraktion der glatten Muskelfasern der
Samenkanlchen. Ocytocin hat zudem eine direkte

(nicht endokrine) zentralnervse Wirkung auf das
Sozialverhalten: Sezerniert im Gefolge angenehmer
Sinneswahrnehmungen frdert es als Kuschelhormon emotionale zwischenmenschliche Bindungen.
Die Hormone der Adenohypophyse steuern

verschiedene Zielorgane Die 7 Hormone der
Adenohypophyse lassen sich aufgrund ihrer Homologien in 3Gruppen einteilen. Das Corticotropin
und Melanotropin (Melanozyten stimulierendes
Hormon MSH) sind verwandte Peptidhormone,
Somatotropin und Prolactin sind kleine Proteine,
und die dritte Gruppe umfasst die drei kleinen Glykoproteine Thyrotropin, Follitropin und Lutropin
mit einer bei allen drei identischen -Kette und einer hormonspezifischen -Kette (.Tab.28.2).
Corticotropin, Melanotropin, -Lipotropin,
En
dorphine und Enkephaline entstehen aus
einem Vorluferprotein, dem Pro-Opio-Melano-Cor-
351
28
.. Tab.28.2 Hormone des Hypothalamus sowie der Neuro- und Adenohypophyse a
Hypo thalamus
Hypophyse
Ocytocinvorstufe
Ocytocin
Uterus, Brustdrse
ADHvorstufe
ADH
Niere, Blutgefe,
Adenohypophyse
ADH
Corticoliberin
(CRH)
Somatostatin
+
+
Corticotropin
(ACTH)
Cortisol
-Lipotropin,
-Endorphin
Somatotropin,
Somatoliberin
(GRH)
Periphere
Drse
Thyroliberin
(TRH)
Somatostatin
Gonadoliberin
(Gn-RH)
Somatomedine
(IGF1und IGF2)
Knochen, Fettgewebe, Muskel
+
Brustdrse
Thyrotropin
Iodthyronine
Viele Gewebe
Androgene
strogene
(Hoden und Ovar)
Gonaden,
Fettgewebe,
Muskel, Knochen
Gestagene
(aus Ovar/Plazenta)
Genitale
+
+
Follitropin
Lutropin
Neurohypophyse,
Adenohypophyse.
. Die physiologische Funktion der Lipotropine ist unklar, sie wirken mglicherweise bei
der Regulation der Lipolyse mit. Die Endorphine und
Enkephaline sind die physiologischen Liganden fr
die Opiatrezeptoren im Zentralnervensystem (Abschn.29.1). Corticotropin (Adrenocorticotropes Hormon ACTH) stimuliert in der Nebennierenrinde die
Sekretion von Glucocorticoiden wie Cortisol als Stressantwort bei Klte, Verletzung, Infektion etc. In einem
tin (POMC)
Leber, viele
andere Gewebe
?, ev. Fettgewebe,
Darm, Nerven
Prolactin
Dopamin
Zielorgan
Regelkreis hemmen hohe Konzentrationen der Nebennierenrindenhormone im Blut die Ausschttung

des Corticoliberins (Corticotropin-releasing hormone
CRH) und damit des Corticotropins (.Abb.28.1).
Das Wachstumshormon Somatotropin stimuliert die Proliferation von Osteoblasten und
bewirkt bis Puberttsende das Lngenwachstum
der Knochen. Somatotropin ist speziesspezifisch,
hypophysrer Minderwuchs eines Kindes wird mit
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gentechnisch hergestelltem menschlichem Wachstumshormon behandelt (Abschn.39.9). Somatotropin hat anabole Wirkung und wird zum grten
Teil whrend des Schlafs freigesetzt. Die Peptide
Somatoliberin (Growth hormone-releasing hormone GRH) und Somatostatin des Hypothalamus
stimulieren bzw. hemmen die Produktion von Somatotropin (.Tab.28.2). Zustzlich frdert das im
Magen und Duodenum synthetisierte Hungerhormon Ghrelin (Abschn.35.1) die Sekretion
von Somatotropin. Im gleichen Sinn wirken akuter
Stress, Steroidhormone, Hypoglykmie und Aminosuren, whrend Catecholamine, freie Fettsuren
und chronischer Stress sich hemmend auswirken.
Die Somatotropinwirkung wird durch die v.a. in
der Leber gebildeten Somatomedine, die Insulin-like
growth factors IGF1 und IGF2, vermittelt. Die beiden
dem Proinsulin homologen Wachstumsfaktoren stimulieren Zellteilung und Zelldifferenzierung in vielen Geweben. Auf den Stoffwechsel haben sie eine
insulinhnliche Wirkung: Sie frdern die Glucoseaufnahme in die Zellen sowie die Synthese von Glykogen
und Proteinen, hemmen hingegen die Lipolyse.
Somatostatin hemmt auch die Sekretion des
Thyrotropins. Die gegenstzlichen Wirkungen
von Somatostatin und Thyroliberin steuern die
Produktion von Thyrotropin und nachfolgend von
Iodthyroninen (Abschn.28.6). Das Somatoliberin
wirkt auch als Gegenspieler des Dopamins, indem
es die Bildung von Prolactin frdert. Prolactin lst
u.a. den Brutinstinkt aus; es bereitet die Milchdrse
whrend der Schwangerschaft auf die Laktation vor
und frdert die Produktion und Sekretion der Milch
nach der Entbindung.
Die Gonadotropine sind im Gegensatz zu den
Sexualsteroiden nicht geschlechtsspezifisch und steuern sowohl die weiblichen als auch die mnnlichen
Keimdrsen: Follitropin (Follikelstimulierendes
Hormon, FSH) frdert die Entwicklung der Follikel
im Ovar und der Samenzellen im Hoden; Lutropin
(Luteinisierendes Hormon, LH) stimuliert die Bildung von Sexualsteroiden im Ovar und im Hoden.
Das beiden Hormonen bergeordnete Gonadoliberin
(Gonadotropin-releasing hormone Gn-RH) wird in
Pulsen vom Hypothalamus abgegeben. Beim Mann
betrgt die Pulszeit etwa 2h, bei der Frau ist sie zyklusabhngig und schwankt zwischen 1,5h und 3h. Die
Plazenta bildet ebenfalls ein gonadotropes Hormon,
das Choriongonadotropin (Human chorionic gonadotropin HCG), ein Glykoprotein, das whrend der
Schwangerschaft die Produktion von strogenen und
Progesteron stimuliert und damit das Uteruswachstum frdert. Es wird unmittelbar nach dem Einnisten
der befruchteten Eizelle in rasch ansteigender Menge
gebildet und zum groen Teil ber den Urin ausgeschieden. HCG eignet sich deshalb zum frhen Nachweis einer Schwangerschaft.
Das von der Epiphyse (Zirbeldrse; engl. Pineal
gland) in der Dunkelheit sezernierte Melatonin, ein
Tryptophanderivat, ist an der Steuerung des zirkadianen Rhythmus, u.a. ber die hypothalamischen
Hormone, beteiligt.
28.3
Hormone der Nebenniere:

Catecholamine; Cortisol
und Aldosteron
Die Nebenniere besteht aus Rinde und Mark. Die

Markzellen stammen vom Neuralrohr ab und
sind abgewandelte Nervenzellen, die aus Tyrosin
Noradrenalin (Norepinephrin; 20%) und Adrenalin (Epinephrin; 80%) bilden (biogene Amine;
Abschn.18.3). Die beiden Hormone gehren zur
Gruppe der Catecholamine:
353
28.4 Erythropoietin und Calcitriol aus der Niere; Renin-Angiotensin-Aldosteron-System
28
Sekretorische Vesikel in Nervenzellen und Nebennierenmark speichern die Catecholamine. Das efferente sympathische Nervensystem verwendet Adrenalin als Neurotransmitter (Abschn.29.1). Die
vom Nebennierenmark sezernierten Catecholamine
wirken als Stresshormone und bereiten den Organismus auf Kampf oder Flucht vor: Noradrenalin
fhrt zu allgemeiner Vasokonstriktion, Adrenalin
erhht Herzfrequenz, Blutdruck, Glucosesekretion
durch Leber, Glykogenolyse in Muskulatur und Lipolyse im Fettgewebe.
Die Nebennierenrinde synthetisiert eine

Reihe von Steroidhormonen
Diese Ste-
roide bilden drei Gruppen: Glucocorticoide wie

Cortisol, Mineralocorticoide wie Aldosteron und
adrenale Androgene mit untergeordneten Funktionen. Glucocorticoide und Mineralocorticoide
knnen einander teilweise ersetzen. Die Hormone
werden nach ihrer Synthese (Abschn.17.6) unverzglich ins Blut abgegeben. Im Blut ist Cortisol
an ein spezifisches Transportprotein gebunden,
whrend Aldosteron nebst zahlreichen anderen
lipophilen niedermolekularen Substanzen durch
Serumalbumin transportiert wird. Die Synthese
der Glucocorticoide (Cortisol
und Corticosteron) wird ber das Hypothalamus-(Corticoliberin-)Hypophyse-(Corticotropin-)System reguliert und folgt einem Tag-Nacht-Rhythmus mit
Minimum um Mitternacht und Maximum am
frhen Vormittag. Der Glucocorticoid-Rezeptor
ist ein Transkriptionsfaktor, der an das Glucocorticoid-responsive element GRE der DNA bindet
(Abschn.11.2).
Cortisol ist ein weiteres Stresshormon, Stress
erhht die Hormonkonzentration: Gluconeogenese, Proteinabbau, Lipolyse und Knochenabbau
(Osteoporose!) werden gefrdert, hingegen wird
die Proteinsynthese gehemmt. Eine therapeutisch wichtige Wirkung ist die Immunsuppression durch Hemmung der T-Zellproliferation,
des Aufwachsens von B-Zellklonen und der Antikrpersynthese. Ebenso wichtig ist die entzndungshemmende Wirkung durch Hemmung der
Synthese von Phospholipase A2 und damit der
Produktion von Eikosanoiden sowie durch Aktivierung des Transkriptionsfaktors NF-B (Abschn.27.4).
Die Mineralocorticoide (wichtigster Vertreter

Aldosteron) kontrollieren die Na+- und K+-Konzentration im Blut. Aldosteron induziert die Na+/
K+-ATPase der Nierentubuli und frdert dadurch die
Rckresorption der Na+-Ionen aus dem Primrharn
(Abschn.33.4).
28.4
Erythropoietin und Calcitriol

aus der Niere; ReninAngiotensin-Aldosteron-System
Erythropoietin (Epo) wirkt als Wachstumsfaktor
Erythropoietin , ein Glykoprotein von 18,4kDa,

beschleunigt die Bildung von Erythrozyten (Erythropoese) im Knochenmark. Das Hormon wird
in den peritubulren Zellen der Nierenrinde gebildet; mangelhafte Sauerstoffversorgung (Hyp
oxie) erhht ber Aktivierung des Transkriptionsfaktors HIF1- (Hypoxia-inducible factor) die
Epo-Synthese auf das 510fache. Gentechnisch
produziertes Hormon (Abschn.39.9) dient zur
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Behandlung nephrogener Anmien (und zum illegalen Doping).

Calcitriol (1,25-Dihydroxycholecalciferol) ist
an der Regulation des Calcium- und Phosphathaushalts beteiligt (Abschn.28.6). Das Hormon
wird ber verschiedene Vorstufen in Leber, Haut
(unter UV-Licht), wieder Leber und zuletzt Niere
aus Cholesterol synthetisiert; bei Lichtmangel muss
Vitamin D3 mit der Nahrung zugefhrt werden
(Abschn.35.3).
28.5 Sexualhormone
Die mnnlichen Sexualhormone bilden die Gruppe

der Androgene. Die weiblichen Sexualsteroide gehren zu zwei Gruppen, den strogenen oder Follikelhormonen und den Gestagenen oder Corpus-luteum-Hormonen.
Androgene sind Steroidhormone mit einem
Grundgerst von 19C-Atomen -
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Das Renin-Angiotensin II-Aldosteron-System er

hht den Blutdruck und vergrert das Extrazellulrvolumen
Die in der Niere gebildete
Endopeptidase Renin produziert aus dem von der

Leber sezernierten Angiotensinogen (Peptid mit
14Aminosureresten) das inaktive Decapeptid AngiotensinI, welches durch das Angiotensin-converting enzyme ACE auf den Kapillarendothelzellen der
Lunge und im Blutplasma unter Abspaltung eines
Dipeptids zum aktiven AngiotensinII umgewandelt wird. Das Octapeptid bewirkt eine Vasokonstriktion (Verengung der Arteriolen), eine erhhte
Synthese von Aldosteron in der Nebennierenrinde und damit eine erhhte Rckresorption von
Na+-Ionen durch die Niere. Spezifische Peptidasen
bauen das Hormon ab. Bei niedrigem Blutdruck geben Blutdruckrezeptoren in der Niere den Anreiz
zur Produktion des Renins. Eine Rckkoppelung
kommt durch Hemmung der Reninsekretion bei
hoher Konzentration von AngiotensinII zustande.
ACE-Hemmer finden therapeutische Verwendung
bei Bluthochdruck (Hypertonie).
Dihydrotestosteron
(17-Hydroxy-5androstan-3-on)
Das wichtigste mnnliche Sexualhormon der

Wirbeltiere ist Testosteron, das wie alle Steroidhormone aus Cholesterol gebildet wird; zudem
produzieren die Hoden das ebenfalls androgen
wirkende Dihydrotestosteron. Die Hoden synthetisieren auch stradiol, das gemeinhin zu den
weiblichen Sexualhormonen gezhlt wird; beim
Mann beeinflusst stradiol gewisse Hirnareale
und ist neben dem Testosteron notwendig fr
das Knochenwachstum. Die Hoden produzieren
pro Tag 0,55mg Androgene. Testosteron und
Dihydrotestosteron werden auch von der Nebennierenrinde in geringen Mengen sezerniert, beim
Mann hchstens 5%, und bei der Frau etwa 50%
der Gesamtproduktion. Das Lutropin der Hypophyse kontrolliert die Biosynthese der Androgene
(.Tab.28.2). Die aktiven Formen der mnnlichen
Sexualsteroide, d.h. Testosteron und Dihydrotestosteron werden teils im Hoden, teils erst am
Wirkort aus im Blut zirkulierenden Vorlufern
gebildet.
355
28.5Sexualhormone
Whrend der Entwicklung des mnnlichen

Fetus wird die Bildung der Hoden durch das
Y-Chromosom eingeleitet. Der fetale Hoden bildet
Androgene und bewirkt dadurch die Differenzierung zum mnnlichen Phnotyp. In der Pubertt
werden die sekundren Geschlechtsmerkmale unter
dem Einfluss der Sexualhormone ausgebildet. Im
ausgewachsenen Mann ist die andauernde Produktion der Sexualhormone fr die Reifung der Spermien und die Ttigkeit der akzessorischen Drsen
des Genitaltrakts notwendig; ebenso wird der Geschlechtstrieb, die Libido, von Androgenen beeinflusst. Androgene haben zudem eine ausgeprgte
anabole Wirkung; sie frdern die Proteinsynthese
und fhren zu einer positiven Stickstoffbilanz.
28
bei Sugetieren und den Menstruationszyklus bei

Primaten. stradiol wirkt auch extragenital: Es
vermindert den Blutlipidgehalt, frdert den Calciumeinbau in die Knochen und die Ausbildung der
subkutanen Fettdepots. Die strogene und deren
Abbauprodukte werden ber ihre Hydroxylgruppen
an Glucuronat oder Sulfat gekoppelt und in Urin
und Faeces ausgeschieden.
Gestagene (Gelbkrper- oder Schwangerschaftshormone) sind auch Steroidhormone

Das wichtigste Gestagen ist das Progesteron ,
ein Steroid mit 21C-Atomen:
strogene sind Steroidhormone mit einem

Grundgerst von 18 C-Atomen und einem aromatischen A-Ring mit phenolischer Hydroxylgruppe Die strogene werden im Ovar unter
Stimulation durch Lutropin produziert. Aromatisierung des A-Rings von Testosteron unter oxidativer Abspaltung der Methylgruppe (C19) liefert
das physiologisch wichtigste strogen, das stradiol. Das in Stellung17 nicht reduzierte stron ist
hormonal nur schwach aktiv; stronsulfat ist das
vorherrschende strogen in der Postmenopause.
Das nur schwach strogen wirkende striol wird
beim Abbau von stradiol in der Leber und in der
Plazenta gebildet.
-3,17
Progesteron entsteht unter Kontrolle des Lutropins

im Gelbkrper (Corpus luteum) und wird nur in
bestimmten Phasen des Menstruationszyklus und
whrend der Schwangerschaft gebildet. Es bereitet
die Uterusschleimhaut zur Einnistung des befruchteten Eis vor; whrend der Schwangerschaft verhindert es die Reifung weiterer Follikel und leitet
die Entwicklung der Milchdrsen ein. In der Frhschwangerschaft wird die Progesteronproduktion
zustzlich durch das Choriongonadotropin (HCG)
stimuliert (Abschn.28.2). Ab der 14.Schwangerschaftswoche bernimmt die Plazenta die Gestagenproduktion; mangelhafte Progesteronproduktion
kann zu Abort fhren. Progesteron wird wie die
strogene als Glucuronid ausgeschieden.
Vier Hormone steuern den Menstruationszyklus Der speziestypische Geschlechtszyklus ist
strogene frdern die Entwicklung der primren

und sekundren weiblichen Geschlechtsmerkmale.
Sie steuern zudem den Sexualzyklus der Brunst
bei vielen Tieren von der Jahreszeit abhngig. Im

Menstruationszyklus der Frau hingegen reift monatlich ein Follikel im Ovar zum Gelbkrper. Am
Regelkreis beteiligt sind ein Rhythmusgeber, der
wahrscheinlich im Zwischenhirn liegt, sowie Hypothalamus, Hypophyse und Ovar. Zu Beginn des
Zyklus reift ein Follikel heran, stimuliert durch das
von der Adenohypophyse vorbergehend vermehrt
ausgeschttete Follitropin (.Abb.28.3). stradiol
356
und damit zur Monatsblutung (Menstruation). Die

erniedrigte stradiolkonzentration fhrt ber Hypothalamus und Hypophyse zur gesteigerten Sekretion des Follitropins, worauf der Zyklus erneut
beginnt.
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Hormonale Kontrazeption
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.. Abb.28.3 Hormonale Steuerung des Menstruationszyklus.

Der zeitliche Verlauf der relativen Konzentrationen der beteiligten Hormone sowie der Basaltemperatur sind dargestellt.
Die Nullwerte fr die Kurven liegen an verschiedenen Stellen
der Ordinate und sind nicht angegeben. LH, Lutropin; F, Follitropin; E2, stradiol; P, Progesteron; C, Basaltemperatur (oral
oder vaginal gemessene Morgentemperatur)
bewirkt den Aufbau der neuen Uterusschleimhaut,

der kurz vor der Ovulation beendet ist. ber eine
Rckkoppelung bremst das stradiol die Sekretion
des Follitropins. In der Mitte des Zyklus induziert
Gonadoliberin aus dem Hypothalamus einen steilen Anstieg der Lutropinsekretion der Hypophyse,
der zur Ovulation fhrt. Nach dem Eisprung bewirkt das Lutropin die Bildung des Gelbkrpers
und erhht dessen Progesteronproduktion; die
Uterusschleimhaut erreicht den prgraviden Zustand und bleibt in diesem Zustand, solange die
Progesteronproduktion anhlt. Wird die Oozyte
befruchtet, entwickelt sich der Gelbkrper zum
Corpus luteum graviditatis mit nochmals gesteigerter Progesteronproduktion. Bei Ausbleiben der
Befruchtung bildet sich der Gelbkrper zurck; die
abnehmende Sekretion von Progesteron und stradiol fhrt zum Abstoen der Uterusschleimhaut
Falls die Konzentration des Gestagens

whrend des ganzen Zyklus knstlich hoch
gehalten wird, ist die Lutropinproduktion
gehemmt. Daraus ergibt sich eine Mglichkeit zur hormonalen Empfngnisverhtung.
Meist wird ein oral wirksames synthetisches
Gestagen eingesetzt, welches die Ovulation
verhindert. Ein dem Prparat zugesetztes
strogen frdert den Aufbau der Schleimhaut.
Nach dem Absetzen des Prparats findet eine
Entzugsblutung statt.
Die Pille danach zur postkoitalen Empfngnisverhtung enthlt ein Gestagenderivat, welches die Ovulation verhindert, die
Spermien in ihrer Bewegung hindert und die
Nidation hemmt. Das Steroid Mifepriston (Mifegyne), das zum Abbruch einer Frhschwangerschaft benutzt werden kann, blockiert den
Progesteronrezeptor, dessen Funktionsfhigkeit fr die Aufrechterhaltung der Schwangerschaft notwendig ist.
28.6
Kontrolle des Grundumsatzes

durch Schilddrsenhormone;
Regulation des Calciumund Phosphathaushalts
durch Parathyrin, Calcitriol
und Calcitonin
Thyronin und seine zwei iodierten Derivate Triiodthyronin (T3) und Thyroxin (T4) entstehen als
Teile eines Proteins, des Thyreoglobulins Das
Thyreoglobulin ist ein kohlenhydratreiches Protein

von 660kDa. Iodid-Ionen werden durch aktiven
Transport aus dem Blut in die Schilddrse aufgenommen und durch eine Peroxidase zu Radikalen
oxidiert, die mit den vielen Tyrosinresten des Thyreoglobulins reagieren. Diiodtyrosinreste reagieren
spontan mit den aromatischen Ringen benachbar-
357
28.6 Kontrolle des Grundumsatzes durch Schilddrsenhormone
ter Mono- und Diiodtyrosinreste unter Bildung von

Triiodthyronin- und Thyroxinresten:
28
gen von Iodmangel in Nahrung, Abschn.35.4).

Im erwachsenen Organismus wird der Grundumsatz (Abschn.35.1) durch die Schilddrsenhormone reguliert. Sie beschleunigen den Gesamtstoffwechsel, erhhen damit den O2-Verbrauch
und verstrken die Thermogenese. berfunktion
der Schilddrse (Hyperthyreose) fhrt zu motorisch-psychischer Unruhe, Gewichtsabnahme,
Tachykardie, Herzrhythmusstrungen und Exophthalmus.
Parathyrin (Parathormon) und Calcitriol

(1,25-Dihydroxycholecalciferol)
regulieren
zusammen mit Calcitonin den Calcium- und
Phosphathaushalt Parathyrin, ein Proteohormon
von 9.5kDa aus der Nebenschilddrse, erhht die
Thyroliberin (Thyrotropin-releasing hormone TRH)
aus dem Hypothalamus reguliert die Abgabe von

Thyrotropin aus der Adenohypophyse. Bei Stimulation der Schilddrse durch Thyrotropin aus
der Adenohypophyse werden Triiodthyronin (T3)
und Thyroxin (T4) in Lysosomen proteolytisch aus
dem iodierten Thyreoglobulin freigesetzt und ins
Blut abgegeben. Die Sekretion von Thyrotropin
wird ihrerseits, hnlich der Sekretion der anderen
glandotropen Vorderlappenhormone, ber ein Releasing hormone (TRH, Thyroliberin) durch den
Hypothalamus kontrolliert. Im Blut liegt nur 0.5%
von T3 und T4 in freier Form vor, der Rest ist an das
Thyronin-bindende Globulin und andere Proteine
gebunden. In den Effektororganen wird T4 zum
etwa viermal aktiveren T3 deiodiert, das an einen
nucleren Transkriptionsfaktor bindet.
Die Schilddrsenhormone sind unentbehrlich
fr Wachstum und Entwicklung Bei Mangel an
Schilddrsenhormonen (Hypothyreose) whrend
der Embryonalentwicklung und beim Heranwachsen bis zum Jugendlichen treten schwere krperliche und geistige Strungen auf (Kretinismus; Fol-
extrazellulre Konzentration von Calciumionen

(Normalwert 2,5mM) und erniedrigt die Konzentration von anorganischem Phosphat, indem es
die Osteoklasten aktiviert, die renale Ca2+-Rckresorption frdert und die Phosphatrckresorption
hemmt. Parathyrin stimuliert zudem die Synthese
von Calcitriol.
Ein Mangel an Parathormon (Hypoparathyreoidismus) fhrt ber Hypocalcmie zu neuromuskulrer bererregbarkeit mit schmerzhaften
tonischen Muskelkrmpfen (Tetanie; NBTetanus,
Wundstarrkrampf; Abschn.21.6).
Calcitriol, ein Vitamin D-Derivat (Abschn.35.3) aus der Niere, erhht die Resorption von
Calcium im Darm, indem es die Synthese verschiedener Proteine des transmembranren Ca2+-Transports induziert.
Calcitonin, ein in der Schilddrse aus einem
greren Prohormon abgespaltenes Peptid, ist
im Rahmen der Feinregulation der extrazellulren Ca2+-Konzentration ein Gegenspieler von Parathyrin. Es senkt rasch, jedoch vorbergehend die
Ca2+-Konzentration, indem es den Ca2+-Einbau in
die Knochen erhht und die Ca2+-Rckresorption
in den Nieren vermindert. Damit wird eine zu hohe
Calciumkonzentration nach Nahrungsaufnahme
vermieden.
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28.7 Kontrolle
28.8
Die Langerhans-Inseln des Pankreas produzieren Insulin (in den -Zellen), Glucagon (-Zellen)
und Somatostatin (-Zellen) Insulin wird als
Gewebehormone finden ihre Rezeptoren durch Diffusion im Interstitium und gelangen primr nicht
ins Blut, es sei denn, sie wrden von Blutzellen
gebildet. Sie werden sehr schnell abgebaut und
knnen sich deshalb nicht weit verbreiten.
der Blutzuckerkonzentration
durch Insulin und Glucagon
Prproprotein synthetisiert und erst durch proteolytische Spaltungen aktiv (.Abb.28.4). Aktives
Insulin besteht aus zwei Ketten. Es wird durch drei
Disulfidbrcken stabilisiert, bindet Zn2+-Ionen und
wird im Pankreas als Hexamer gespeichert.
Insulin wirkt anabol; es frdert den Aufbau von

Speicherstoffen und senkt die Blutzuckerkonzentration Im Blut liegt Insulin als Monomer in sehr nied-
riger Konzentration vor (70700pM beim Menschen).

Es wird in Leber, Nieren und Lungen nach Reduktion
der Disulfidbindungen proteolytisch abgebaut und hat
eine Halbwertszeit von nur 35Minuten. Insulin wird
bei hoher Blutzuckerkonzentration, z.B. nach Nahrungszufuhr, vermehrt sezerniert (Abschn.14.1). In
der Leber frdert Insulin die Synthese von Glykogen,
Proteinen, Fettsuren und Triacylglycerolen, whrend
Glykogenabbau, Gluconeogenese und Ketonkrperbildung gehemmt werden. Die Muskulatur steigert die
Proteinsynthese und fllt ihre Glykogenspeicher. Im
Fettgewebe werden Triacylglycerole aufgebaut und die
Lipolyse gehemmt (Insulinmangel fhrt zur Zuckerkrankheit, Diabetes mellitus; Abschn.34.3).
Glucagon ist der Gegenspieler des Insulins
Glucagon, ein Peptid von 29Aminosureresten,
wird ebenfalls aus einem Vorluferprotein gebildet;

seine Aminosuresequenz ist hnlich derjenigen
des Sekretins (Abschn.28.8). Glucagon frdert
den Abbau des Leberglykogens, die Gluconeogenese sowie die Lipolyse und Ketonkrperbildung.
Glucose, Insulin und freie Fettsuren hemmen die
Ausschttung von Glucagon, whrend Hypoglykmie, gewisse Aminosuren, Catecholamine und
Corticosteroide stimulierend wirken.
Somatostatin wird nicht nur vom Hypothalamus produziert (Abschn.28.2), sondern auch von
den -Zellen des Pankreas. Es hemmt auf parakrinem Weg die Sekretion von Insulin und Glucagon.
Zudem hemmt es die Sekretion der Gewebehormone des Magendarmtrakts wie Gastrin, Cholecystokinin und Sekretin (Abschn.28.8).
Mediatoren (Gewebehormone):
Signalstoffe geringer
Reichweite
Histamin vermittelt allergische Reaktionen
Histamin, ein biogenes Amin, entsteht durch

enzymatische Decarboxylierung von Histidin.
Permanent sezerniert wird Histamin in der Haut,
Magenschleimhaut und gewissen ZNS-Neuronen.
Gespeichert wird es vor allem in den Mastzellen
dieser Gewebe und in den basophilen Granulozyten. In den Granula dieser Zellen ist Histamin
gebunden an Heparin und Proteoglykane. Bei
Entzndungsreaktionen und allergischen Reaktionen wird es freigesetzt und bewirkt Vasodilatation sowie erhhte Kapillarpermeabilitt (Hautrtung, dem, Juckreiz, Schmerz, Quaddelbildung;
die Brennhaare der Brennnessel enthalten neben
Acetylcholin auch Histamin!). Bei Bronchialasthma lst Histamin die Kontraktion der glatten
Bronchialmuskulatur aus. Zusammen mit weiteren
Mediatoren stimuliert Histamin die Magensaft
sekretion. Antihistaminika dmpfen allergische
Reaktionen, indem sie die Histaminrezeptoren
blockieren.
Serotonin, 5-Hydroxytryptamin (decarboxyliertes
5-Hydroxytryptophan), ist nicht nur ein Neuro

transmitter im ZNS (Abschn.29.1), sondern
auch ein Gewebehormon. Es fhrt je nach Gewebe
zu Vasokonstriktion oder Vasodilatation und regt
die Darmttigkeit an. Bei der Blutgerinnung wird es
aus Blutplttchen freigesetzt. Im ZNS scheint Serotonin generelle Funktionszustnde wie Stimmung,
Schlaf-Wach-Rhythmus oder Schmerzempfindung
zu beeinflussen.
359
28.8 Mediatoren (Gewebehormone): Signalstoffe geringer Reichweite
28
.. Abb.28.4 Biosynthese und Reifung des Insulins und Aminosuresequenz des Glucagons. Insulin wird als Prpro-Vorluferprotein am rauen ER der -Zellen der Pankreasinseln synthetisiert. Durch die cotranslationale Abspaltung des Prpeptids und
Bildung der Disulfidbrcken wird das hier gezeigte Proinsulin gebildet. Im Golgi-Apparat wird Proinsulin in Vesikel verpackt. In
diesen Vesikeln, den -Granula, entsteht durch proteolytische Herausspaltung des C-Peptids Insulin, das bis zur Exocytose als
durch ein Zn-Ion stabilisiertes Hexamer in sekretorischen Vesikeln gespeichert wird. Insulin (Humaninsulin:51Aminosurereste,
5808Da) besitzt eine definierte 3D-Struktur. Sein Gegenspieler, das Glucagon, ist ein Peptid mit 29Aminosureresten
donsure (20:4) synthetisiert, besitzen 20C-Atome

(griech. eikosi, zwanzig) und, mit Ausnahme der
Leukotriene, einen durch die Cyclooxygenase eingefhrten aliphatischen Fnfring:
Eikosanoide leiten sich von mehrfach ungesttigten Fettsuren ab und erfllen verschiedene
Funktionen Zu den Eikosanoiden gehren die
Prostaglandine, Thromboxane, Leukotriene und
weitere Fettsurederivate. Sie werden aus Arachi-
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Prostaglandine wurden in den Samenblschen der
Prostata entdeckt, kommen aber in vielen weiteren

Organen vor. Sie werden durch Nervenimpulse,
Histamin und andere Mediatoren freigesetzt und
werden innert Sekunden bis Minuten inaktiviert.
Ihre autokrinen und parakrinen Wirkungen sind
uerst vielfltig und z.T. antagonistisch. Sie regulieren die lokale Blutzirkulation und den Blutdruck,
sind beteiligt am Auslsen von Entzndungsreaktion und Fieber, zudem hemmen sie die Chloridsekretion im Magen. In der Niere wirkt Prostaglandin E2 durchblutungsfrdernd und fhrt zur
Freisetzung von Renin. Thromboxane lsen die
Thrombozytenaggregation aus. Leukotriene haben
im Gegensatz zu den Prostaglandinen eine offene
Kettenstruktur mit 20C-Atomen und sind oft mit
Glutathion konjugiert. Sie kommen in Leukozyten
vor und wirken bei Abwehrreaktionen mit. Spezifische Enzyme sind fr den Abbau der Eicosanoide
verantwortlich.
An Entzndungsreaktionen sind auch die
kurzlebigen Gasotransmitter NO, CO und H2S
(Abschn.27.5) sowie reaktive Sauerstoffspezies
(ROS; Abschn.31.3) beteiligt.
COX: NSAR/NSAID
Cyclooxygenase(Cox)-Hemmer (Nichtsteroidale Antirheumatika NSAR; Nonsteriodal
antiinflammatory drugs NSAID). Acetylsalicylsure (Aspirin, jhrlicher globaler Konsum
40000Tonnen!) acetyliert einen Serinrest an
der aktiven Stelle der COX, hemmt dadurch das
Binden von deren Substrat, der Arachidonsure,
und somit die Synthese von Prostaglandinen
und Thromboxanen. Entsprechend vielfltig
sind die Wirkungen von Aspirin, im Vordergrund stehen Schmerzstillung, Entzndungshemmung, Fiebersenkung sowie Hemmung der
Thrombozytenaggregation (niedrig dosiertes
Aspirin zur Thromboseprophylaxe). Eine hnliche Wirkung wie Aspirin haben andere NSAR,
welche als kompetitive Inhibitoren das Binden
der Arachidonsure an die COX hemmen.
Das Herz sezerniert natriuretische Peptide zur

Blutdruckregulierung Das atriale natriuretische
Peptid ANP wird im rechten Vorhof, das nachfolgend gefundene Peptid BNP im Vorhof und Vent-
rikel bei Dehnung der Herzmuskelzellen gebildet

und ins Blut sezerniert. ANP und BNP wirken diu-
361
28.9Hormone wirbelloser Tiere
retisch und natriuretisch und damit antagonistisch
zum Renin-Angiotensin-Aldosteron-System. Die

Bindung der Peptide an ihre Rezeptoren lst eine
Signaltransduktion ber Guanylatcyclase und den
Second messenger cGMP aus. In der Niere hemmen
ANP und BNP die Ausschttung von Renin, in der
Nebenniere die Synthese und Ausschttung von
Aldosteron; zudem relaxieren sie die Gefe. Das
Herz pumpt nach ANP/BNP-Einwirkung ein geringeres Blutvolumen bei erhhter Herzschlagfrequenz:
Der Herzmuskel wird entlastet. Das im Gehirn gebildete CNP gelangt nicht ins Blut; es wird hauptschlich in Endothelzellen gebildet und dilatiert auf
parakrinem Weg die vensen Blutgefe.
Der Magendarmtrakt ist auch eine endokrine
Drse Endokrine Zellen der Magendarmschleim-
haut sezernieren ber 30 verschiedene Peptide mit

Hormonwirkung. Einige Peptide mit gleicher Sequenz werden im Nervensystem als Neurotransmitter oder Neuromodulatoren verwendet. Im Magendarmtrakt regulieren die Peptide die Verdauung,
indem sie Sekretion, Resorption und Motilitt beeinflussen.
Gastrin, ein in verschiedener Lnge vorliegendes
Oligopeptid, wird im Magen und Duodenum gebildet. Dehnung des Magens, Proteinabbauprodukte
und Ansteigen des pH-Werts des Mageninhalts lsen die Sekretion des Hormons aus. Es frdert die
Sureproduktion durch die Belegzellen des Magens.
Sekretin, ein Oligopeptid aus dem Duodenum, ist homolog zum Glucagon (gleiche Lnge,
Sequenzidentitt etwa 50%). Es wird ausgeschttet,
sobald saurer Mageninhalt ins Duodenum gelangt.
Es hemmt, als Gegenspieler des Gastrins, die Sureproduktion im Magen und stimuliert das Pankreas
zur Sekretion von Wasser und Hydrogencarbonat:
Die Verdauungsreaktionen im Darm verlangen einen leicht alkalischen pH-Wert (Abschn.33.1).
Sekretin ist das erste bekannt gewordene Hormon
(W. Bayliss und E. Starling, 1902).
Cholecystokinin CCK, ein ebenfalls in verschiedenen Varianten vorkommendes Oligopeptid, wird
durch die Mucosa des gesamten Dnndarms gebildet
und bei Vorliegen von Verdauungsprodukten (Fettsuren, Aminosuren und Peptide) ins Blut abgegeben. CCK stimuliert die Sekretion der Pankreasenzyme und lst die Kontraktion der Gallenblase aus.
Auerdem zeigt es eine gastrinhnliche Wirkung auf
28
die Belegzellen des Magens. Es hemmt jedoch die

Magenentleerung und vermittelt auf diese Weise die
Sttigungswirkung zugenommener Nahrung.
GLP-1, das Glucagon-like peptide-1 wird durch
die L-Zellen des Ileums sezerniert, sobald Nhrstoffe im Dnndarm auftreten. GLP-1 stimuliert
die Sekretion von Insulin, hemmt die Freisetzung
von Glucagon, die Magensuresekretion sowie die
Magenentleerung und wirkt als Sttigungssignal.
Ghrelin (Hungersignal aus Magen und Duodenum) und dessen Gegenspieler Leptin (Sttigungssignal aus dem Fettgewebe) werden in Abschn.35.1 nher vorgestellt.
Cytokine, Interleukine und Interferone sind

als Mediatoren wirkende Proteine und Glykoproteine aus Leukozyten und auch anderen Zelltypen Die meisten Cytokine sind Wachstums- und
Differenzierungsfaktoren und wirken auf Zellen des

blutbildenden (hmatopoietischen) Systems. Chemokine sind chemotaktisch wirksame Cytokine,
die anziehend auf Granulozyten, Makrophagen und
andere Leukozyten sowie auf Endothelzellen wirken; die Lymphokine, eine Untergruppe von Chemokinen, stammen aus T-Zellen. InterleukineIL
werden zumeist von Leukozyten zur Regulation der
Immunreaktionen produziert. Interferone sind von
Sugerzellen im Rahmen der Immunreaktion auf
virale Infekte sezernierte Glykoproteine. Die Interferone binden an ihre Rezeptoren auf anderen Zellen, die in der Folge Resistenzproteine gegen Viren
produzieren (Abschn.32.1).
28.9
Hormone wirbelloser Tiere
Besondere Hormone steuern die Entwicklung von

Insekten Whrend der Metamorphose gewisser
Insekten von Larve ber Puppe zur Adultform (Imago) muss sich das Tier am bergang zum jeweils
nchsten Stadium huten. Die Hutungen werden
durch Ecdyson ausgelst, das erste Insektenhormon, dessen Struktur aufgeklrt werden konnte.
Das Hutungshormon erwies sich als Steroid.
Es wird im Fettkrper der Insekten zum aktiven
20-Hydroxyecdyson umgewandelt. Die Hutungen whrend des Raupenwachstums werden durch
das Zusammenwirken von Ecdyson und dem Juvenilhormon, einem Terpenoid (Abschn.21.4),
362
1
2
gesteuert. Im Adulttier wirkt das Juvenilhormon als

gonadotropes Hormon und stimuliert die Dotterbildung. (Pflanzenhormone: Abschn.21.5)
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2O-Hydroxyecdyson
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Juvenilhormon
28.10 Botenstoffe
zwischen
Individuen: Pheromone und
von Bakterien sezernierte
Signalstoffe
Pheromone dienen der Signalbermittlung zwischen den Individuen einer Spezies. Ein Beispiel ist
Bombykol, der ber die Luft verbreitete Sexuallockstoff des Seidenspinners Bombyx mori:
15
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19
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Links auf
Springer Website:
027-6-1517247-0
28.1
13
14
Gene und damit das Ablaufen gewisser Prozesse, wie

asexuelle oder sexuelle Zellvermehrung, Entwicklung von Virulenz und Antibiotikaresistenz sowie
die Bildung von Biofilmen (Lebensgemeinschaft
von Mikroorganismen in extrazellulrer Matrix aus
Polysacchariden, Proteinen und DNA auf Grenzflchen von fester Phase mit flssiger Phase; Problem
bei Kathetern, Implantaten etc. wegen Mglichkeit
der Ablsung und metastatischen Verbreitung). Als
Signalmolekle fr das Quorum sensing (in diesem
Fall als Autoinducers oder ebenfalls als Pheromone
bezeichnet) dienen Oligopeptide und Aminosurederivate. Bei Erreichen einer gewissen Populationsdichte, d.h. einer Grenzkonzentration des Autoinducers, kommt eine positive Rckkoppelung
in Gang, indem die betroffenen Zellen/Individuen
beginnen, selbst mehr Autoinducer zu sezernieren.
Die volle Aktivierung der entsprechenden Rezeptoren induziert eine koordinierte Hochregulierung
gewisser Gene aller Individuen der Population, d.h.
deren koordinierte Reaktion.
Die Mnnchen dieser Art besitzen Antennen, die

schon einige wenige Molekle des Lockstoffs wahrnehmen. Auch bei Sugetieren sind Lockstoffe bekannt. Die Speicheldrsen des Ebers sezernieren
bestimmte Steroide, die bei der Kopulation durch
Nieen auf die Sau bertragen werden. Das Pheromon lst einen Stillhaltereflex aus und erleichtert
die Kopulation.
Das Quorum sensing bei gewissen Bakterien,
Hefen und sozialen Insekten beruht auf inter-individueller Kommunikation, welche den einzelnen Individuen einer Spezies erlaubt, die Populationsdichte
abzuschtzen und bei berschreiten eines Grenz
werts bestimmte Reaktionen auszulsen. Bakterien
koordinieren auf diese Weise die Expression gewisser
Hierarchie der
Hormondrsen; Struktur, Regelkreise
und Halbwertszeit der Hormone
28.3 Hormone der Nebenniere: Catecholamine,
Cortisol und Aldosteron
28.4 Erythropoietin und Calcitriol aus der Niere;
Renin-Angiotensin-Aldosteron-System
28.5 Sexualhormone
28.6 Kontrolle des Grundumsatzes durch Schilddrsenhormone; Regulation des Calcium- und
Phosphathaushalts durch Parathyrin, Calcitriol
und Calcitonin
28.7 Kontrolle der Blutzuckerkonzentration durch
Insulin und Glucagon
28.8 Mediatoren (Gewebehormone): Signalstoffe
geringer Reichweite
28.9 Hormone wirbelloser Tiere
28.10 Botenstoffe zwischen Individuen: Pheromone
und von Bakterien sezernierte Signalstoffe
363
Neurotransmitter;
Photo-, Geruchs- und
Geschmacksrezeptoren;
Chemotaxis bei Eukaryonten
29.1
Neurotransmitter364
29.2
Photorezeptoren des Auges 369
29.3
Geruchs- und Geschmacksrezeptoren 372
29.4
Chemotaxis bei Eukaryonten 373

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Kapitel 29 Neurotransmitter; Photo-, Geruchs- und Geschmacksrezeptoren; Chemotaxis bei Eukaryonten
Jede der insgesamt 1010Nervenzellen des Gehirns ist

ber ungefhr 104Synapsen mit anderen Neuronen
verbunden. Das neuronale Netzwerk des Menschen
besitzt demnach 1014 synaptische Verbindungen.
Das funktionelle Verhalten eines Neurons ist eine
einfache Alles-oder-nichts-Reaktion: Nach Verrechnung aller einkommenden aktivierenden und
hemmenden Signale wird entweder ein Signal (Aktionspotenzial) weitergegeben oder es wird kein Signal
weitergegeben. Die integrative Verrechnung der einkommenden positiven und negativen Signale durch
das einzelne Neuron und die komplexe Verdrahtung
der Neuronen sind die Grundlage der Leistungsfhigkeit des Gehirns. Die phylogenetische und ontogenetische Entwicklung des Gehirns sowie die Erfahrungen des Individuums bestimmen, welche Neuronen
unter welchen Bedingungen in welchem Mae und
unter Beteiligung welcher Drittneuronen zu einem
gegebenen Zeitpunkt miteinander kommunizieren.
Die Fortleitung des Aktionspotenzials entlang
des Axons ist ein elektrischer Vorgang, an dem
spannungsgesteuerte Na+- und K+-Kanle beteiligt
sind (s. Lehrbcher der Physiologie). Das Aktionspotenzial kann jedoch den synaptischen Spalt nicht
durchqueren. Die allermeisten Synapsen sind chemische Synapsen: Das ankommende Aktionspotenzial fhrt zur Ausschttung eines bertrgerstoffs
(Neurotransmitters) in den synaptischen Spalt. Das
Binden des Neurotransmitters an seinen Rezeptor
in der postsynaptischen Membran bewirkt deren
Depolarisierung, die ein Aktionspotenzial auslsen
kann. Der Transmitter wird innert Millisekunden
enzymatisch inaktiviert oder vom prsynaptischen
Neuron und von Gliazellen aufgenommen.
Elektrische Synapsen
In gewissen Hirnarealen und im Herzmuskel
wird das Aktionspotenzial ohne Beteiligung
eines Transmitters direkt von Zelle zu Zelle
ber Ionenflsse durch Gap Junctions (Abschn.25.1) weitergegeben. Im Gegensatz zu
den chemischen Synapsen kann die Erregung in diesem Fall bidirektional bertragen
werden.
Bei der Wahrnehmung eines Lichtreizes durch die

Photorezeptoren des Auges gengt jeweils ein Pho-
ton, um die cistrans-Isomerisierung eines Retinalmolekls zu induzieren. Retinal ist die prosthetische Gruppe des Sehpurpurs (Rhodopsin), deren
Isomerisierung ber eine Konformationsnderung
des Rhodopsins und ein G-Protein eine Signalkaskade in Gang setzt.
Die Geruchsrezeptoren des Riechepithels
der Nase sowie die Bitter-, S- und UmamiGeschmacksrezeptoren der Zunge sind ebenfalls G-Protein-gekoppelte Rezeptoren. Die Geschmacksqualitten salzig und sauer werden ber
Ionenkanle registriert.
29.1 Neurotransmitter
Die Neurotransmitter werden im Cytosol der prsynaptischen Zelle synthetisiert und in den synaptischen Vesikeln gespeichert. Im Folgenden wird
eine cholinerge Synapse mit Acetylcholin als Transmitter beschrieben.
An prsynaptischer Membran eintreffendes

Aktionspotenzial ffnet spannungsgesteuerte
Calciumkanle
Das Einstrmen von Ca2+-Io-
nen aus dem Extrazellulrraum (Ca2+-Konzentration1mM) in die prsynaptische Nervenendigung

lsst die dortige Ca2+-Konzentration von 0,1M auf
etwa 10M hochschnellen. Die 100-fach erhhte
Ca2+-Konzentration bewirkt, dass die synaptischen Vesikel mit der prsynaptischen Membran
verschmelzen und Acetylcholin in den synaptischen
Spalt ausschtten (.Abb.29.1). An diesem Vorgang
ist das Cytoskelett beteiligt. Das Protein Synapsin
fixiert die synaptischen Vesikel an Actinfilamente
und Mikrotubuli. Bei erhhter Ca2+-Konzentration
phosphoryliert eine Ca2+-abhngige Kinase das
Synapsin, worauf sich die Vesikel vom Cytoskelett
lsen und unter Beteiligung von v-SNARE- und
t-SNARE-Proteinen (Abschn.22.3) mit der prsynaptischen Membran verschmelzen: Einige tausend
Blschen geben zusammen etwa 107Molekle Acetylcholin in den synaptischen Spalt ab. Das Binden
von Acetylcholin an den Rezeptor, einen ligandengesteuerten Na+/K+-Kanal in der postsynaptischen
Membran, leitet das Signal weiter. Cholinerge Sy
napsen dieses Typs (nicotinisch) finden sich im autonomen (vegetativen) Nervensystem und an den
motorischen Endplatten (Abschn.30.4).
365
29.1Neurotransmitter
29
Synaptische Vesikel
.. Abb.29.1 Synapse zwischen Nervenzellen. Das Schema zeigt eine Synapse mit Acetylcholin (AcCh) als Transmitter; es gilt
auch fr die Verbindung zwischen Nerv und Muskel (motorische Endplatte; Abschn.30.4). Der Neurotransmitter wird in
prsynaptischen Vesikeln (Blschen) gespeichert. Bei Eintreffen des Nervensignals wird AcCh durch Exocytose in den synaptischen Spalt ausgeschttet. Die Bindung von AcCh an seine Rezeptoren in der postsynaptischen Membran fhrt zur ffnung
der Na+/K+-Kanle und damit zur Depolarisierung der Membran. berschssiges AcCh wird durch die Acetylcholinesterase der
postsynaptischen Membran inaktiviert. Nach Ausschttung bilden sich die synaptischen Vesikel zurck und werden erneut
durch ein aktives Transportsystem mit Acetylcholin aufgefllt
Der nicotinische Acetylcholinrezeptor ist ein

pentameres Transmembranprotein mit einem Na+/
K+-Kanal in der Mitte (.Abb.29.2). Beim ffnen
des Kanals (1ms) strmen wegen des negativen
Membranpotenzials viel mehr Na+-Ionen in die
Zelle als K+-Ionen aus der Zelle. Die postsynaptische
Membran wird depolarisiert. Falls die Depolarisierung einen Schwellenwert bersteigt, entsteht durch
kurzes ffnen spannungsgesteuerter Na+-Kanle
und verzgertes ffnen von K+-Kanlen ein positives Aktionspotenzial, das sich elektrisch entlang
des Axons fortpflanzt (beim Muskel von der Endplatte ber das Sarkolemm einschlielich der Tubuli
transversales; Abschn.30.4). Nach der Erregungsbertragung an der Synapse wird innerhalb weniger
Millisekunden der Ausgangszustand wieder hergestellt. Acetylcholin wird durch die Acetylcholinesterase der postsynaptischen Membran zu Acetat
und Cholin hydrolysiert oder diffundiert aus dem
synaptischen Spalt in den Interzellulrraum.
Die Acetylcholinesterase an den Synapsen
ist ein membranstndiges Glykoprotein
Ihr
Reaktionsmechanismus ist hnlich demjenigen
+ + +
+ + + +
+ + +
.. Abb.29.2 Nicotinischer Acetylcholinrezeptor (AcChR), ein

ligandgesteuerter Na+/K+-Kanal. Der Rezeptor besteht aus
fnf kreisfrmig angeordneten Untereinheiten (2), von
denen jede vier Transmembranhelices enthlt. Das Schema
zeigt nur die zwei -Untereinheiten. Der Kanal in der Mitte
des Rezeptors ffnet sich, wenn je ein Acetylcholinmolekl an
die beiden -Untereinheiten bindet. Die negativen Ladungen
von Carboxylatgruppen (Asp und Glu) halten Anionen davon
ab, den Kanal zu passieren. Nicotinische AcChR finden sich an
der motorischen Endplatte und in parasympathischen Gang
lien. Die muscarinischen AcChR sind GPCR (mit G-Proteinen
gekoppelt) und kommen an den Zielzellen postganglionrer
parasympathischer Neuronen vor
366
der Serinproteasen, in beiden Fllen entsteht eine

Zwischenverbindung mit acyliertem Serinrest und
wirken Organophosphate wie Diisopropylfluorophosphat als irreversible Inhibitoren (.Abb.29.3).
1
2
Blockierung des AcCh-Rezeptors
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exzitatorisch oder inhibitorisch wirkende Neuro

transmitter sind bekannt. Exzitatorische Transmitter fhren zu einer Depolarisierung der postsynaptischen Membran und frdern damit die Entstehung
eines Aktionspotenzials; inhibitorische Transmitter
hingegen fhren zur Hyperpolarisierung der Membran und wirken der Entstehung eines Aktionspotenzials entgegen. Der Vielfalt der Transmitter steht
eine noch grere Vielfalt der Rezeptoren gegen-
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Die Myasthenia gravis, eine Autoimmunkrankheit (Abschn.32.6), bei der Autoantikrper

die Acetylcholinrezeptoren der motorischen
Endplatten blockieren, uert sich in rascher
Ermdung der quergestreiften Muskulatur.
Therapie: Acetylcholinesterasehemmer.
Tubocurarin (Alkaloid im Pfeilgift Curare)
hemmt kompetitiv ohne depolarisierende Wirkung das Binden von Acetylcholin an dessen
Rezeptor in der motorischen Endplatte und
fhrt damit zu einer schlaffen Lhmung der
Skelettmuskulatur.
Im Gehirn wirken Aminosuren, Aminosurederivate und Peptide als Neurotransmitter ber 100
10
19
.. Abb.29.3 aHydrolyse von Acetylcholin (AcCh) durch

die Acetylcholinesterase. Als Zwischenverbindung entsteht
acetyliertes Enzym. Eine Acylierung eines Serinrests an
der aktiven Stelle kommt auch bei den Serinproteasen vor
(Chymotrypsin, weitere Pankreasproteasen und Thrombin;
.Abb.4.7). bWie diese Proteasen wird auch die AcCh-Esterase durch Diisopropylfluorophosphat (DFP) gehemmt, indem
der Serinrest an der aktiven Stelle kovalent blockiert wird.
Ein Ser-His-Asp-Ladungsbertragungssystem macht diesen
Serinrest besonders stark nucleophil. hnliche Verbindungen
wie DFP (Organophosphate) sind Nervengifte (die chemischen Kampfstoffe Tabun, Soman, Sarin); gewisse Derivate finden Verwendung als Insektizide. Die Vergiftungserscheinungen entsprechen einer inneren AcCh-Vergiftung. Krmpfe
der quergestreiften Muskulatur knnen zum Tod durch
Atemlhmung fhren. Als Antidot (Gegengift) dient Atropin,
ein kompetitiver Antagonist von AcCh an den nicotinischen
AcCh-Rezeptoren
367
29.1Neurotransmitter
ber. Die meisten Rezeptoren sind ligandenge-
steuerte Ionenkanle oder G-Protein-gekoppelte

Rezeptoren (GPCR, auch als 7-Transmembranhelices/7-TM-Rezeptoren bezeichnet) mit vielen gene-
tischen Varianten und Isoformen mit verschiedenen

Untereinheiten. Allgemein gilt, dass ein Transmitter
auf verschiedenartige Rezeptoren einwirkt und damit je nach Zielzelle unterschiedliche Effekte hervorruft.
Die Transmitter lassen sich aufgrund ihrer

Struktur in Gruppen einteilen:
Acetylcholin wirkt auf zwei Typen von Rezeptoren: Neben den nicotinischen Acetylcholinrezeptoren, Ionenkanal-Rezeptoren,
die auch auf Nicotin ansprechen, kommen

muscarinische Acetylcholinrezeptoren vor,
GPCR, die z.B. ber cAMP die ffnung von
Kationenkanlen veranlassen (und die auch
auf Muscarin, ein Alkaloid aus dem Fliegenpilz Amanita muscaria, ansprechen). An den
muscarinischen cholinergen Synapsen des
parasympathischen Nervensystems wirkt
Atropin (Alkaloid aus der Tollkirsche Atropa
belladonna) als kompetitiver Antagonist des
Acetylcholins.
Aminosuren: Im Gehirn ist Glutamat der
wichtigste exzitatorische Transmitter; mehr
als die Hlfte aller Synapsen im Gehirn
verwenden Glutamat als Transmitter. Die
Glutamatrezeptoren sind ligandengesteuerte
Kanle fr Na+- und Ca2+-Ionen (Ionenkanal- oder ionotrope Rezeptoren) und zum Teil
auch G-Protein-gekoppelte (metabotrope)
Rezeptoren. Glycin ist der wichtigste inhibitorische Transmitter in Rckenmark und
Stammhirn. Die Rezeptoren sind mit Chloridkanlen gekoppelt. Eine ffnung dieser Kanle
([Cl]auen>[Cl]innen) fhrt zur Hyperpolarisierung der postsynaptischen Membran und
wirkt damit der Entstehung eines Aktionspotenzials im postsynaptischen Neuron entgegen.
Biogene Amine entstehen durch Decarboxylierung von Aminosuren. Zu dieser
Gruppe gehren Catecholamine, GABA, Serotonin und Histamin:
Catecholamine (Dopamin, Noradrenalin und Adrenalin) werden aus Tyrosin
gebildet (.Abb.29.4a). Dopamin ist als
29
Transmitter an der Regulation der Motorik

in den Stammganglien beteiligt. Der Parkinson-Krankheit (Schttellhmung) liegt
eine Degeneration dopaminerger Neuronen
zugrunde. Noradrenalin und Adrenalin
sind die Transmitter an efferenten Synapsen des sympathischen Nervensystems,
werden aber auch im Nebennierenmark
als Hormone sezerniert (Abschn.28.3).
Ihre Rezeptoren (adrenerge Rezeptoren)
sind an G-Proteine gekoppelt und zeigen
hohe Organ- und Wirkungsspezifitt. Zur
Inaktivierung werden die Transmitter ins
prsynaptische Neuron resorbiert; ein
kleiner Teil wird durch eine extrazellulre
Catechol-O-Methyltransferase methyliert
oder durch eine Monoaminoxidase (MAO)
oxidativ desaminiert.
Serotonin (aus Tryptophan, .Abb.29.4b)
und Histamin (aus Histidin) wirken als
ZNS-Transmitter und Mediatoren.
GABA (Gamma amino butyric acid) ist
der wichtigste inhibitorische Transmitter im Vorderhirn. GABA entsteht
durch Decarboxylierung von Glutamat
(.Abb.29.4c). Wie die Rezeptoren fr das
ebenfalls inhibitorische Glycin sind auch
die GABAA-Rezeptoren ligandengesteuerte
Chloridkanle, deren ffnung zu einer
Hyperpolarisierung der postsynaptischen
Membran fhrt. Die GABAB-Rezeptoren
hingegen sind an ein G-Protein gekoppelt.
GABA wird durch Rckresorption oder
durch Transaminierung zu Succinatsemialdehyd inaktiviert.
Peptide: Die meisten neuroaktiven Peptide
sind kurz (315Aminosurereste), besitzen
am NH2-Ende einen ber eine Amidbindung
zum 5-Ring zyklisierten Glutamatrest (Pyroglutamat, 5-Oxoprolin) und sind am COOHEnde amidiert (-CONH2). Diese posttranslationalen Modifikationen verzgern den
Abbau durch Peptidasen. Viele Neuropeptide
wirken nicht nur als Transmitter sondern
auch als Hormone oder Mediatoren. Sie bilden die grte Gruppe von Neuromodulatoren; bis anhin sind mehr als 50 exzitatorische
oder inhibitorische Neuropeptide identifi-
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a
.. Abb.29.4 Synthese von Neurotransmittern aus Aminosuren. Die Decarboxylierungsreaktionen werden durch spezifische
pyridoxal-5-phosphat-abhngige Aminosuredecarboxylasen katalysiert. aBildung von Catecholaminen (Noradrenalin, Norepinephrin; Adrenalin, Epinephrin) aus Tyrosin. Dopa (Dioxyphenylalanin, eine alte Bezeichnung fr Dihydroxyphenylalanin).
bBildung von Serotonin aus Tryptophan. cBildung von -Aminobutyrat (GABA, Gamma-amino butyric acid) aus Glutamat
369
29.2 Photorezeptoren des Auges
29
.. Tab.29.1 Wichtige Neurotransmitter

Transmitter
Vorkommen
Wichtigster Inaktivierungsmodus
Acetylcholin
Motorische Endplatte
Parasympathikus
ZNSa (Nucleus caudatus)
Enzymatische Hydrolyse
Glutamat
ZNSa
Rckresorption
Glycin
Rckenmark
Stammhirn
Rckresorption
Dopamin
Hirnstamm
Rckresorption
Noradrenalin
und Adrenalin
Sympathikus
Rckresorption
Enzymatische oxidative Desaminierung und
O-Methylierung
GABA
ZNSa
Rckresorption
Enzymatische Transaminierung
Serotonin
Hirnstamm
Rckresorption
Enzymatische oxidative Desaminierung
Histamin
Hirnstamm
Enzymatische N-Methylierung
Neuropeptide
ZNS und weitere Organe (Darmtrakt)
Enzymatische Hydrolyse
Das Zentralnervensystem (ZNS) umfasst Gehirn und Rckenmark.
ziert worden. Durch limitierte Proteolyse

werden sie aus langkettigen Vorluferpoly
peptiden herausgespalten. Zum Beispiel
entstehen aus dem Proopiomelanocortin
(POMC, 241Aminosurereste) neben drei
verschiedenen Hormonen (Abschn.28.2)
die Endorphine (endogenen Morphine;
1631Aminosurereste). Endorphine sowie
die hnlichen Dynorphine (13Aminosurereste) und Enkephaline (Pentapeptide) sind
die natrlichen, krpereigenen Liganden der
Opioid-Rezeptoren im ZNS. Sie wirken wie
Morphin (Morphium, Hauptalkaloid des
Opiums) analgetisch, narkotisierend und
euphorisierend. Die Endorphine haben eine
20-mal hhere schmerzstillende Wirkung als
Morphin (auf molare Stoffmenge bezogen).
Ihre physiologische Funktion liegt in der
Kontrolle der Verarbeitung sensorischer
Afferenzen (z.B. der Schmerzempfindung)
wie auch von Antrieb und Verhalten. Die
Neuropeptide werden in prsynaptischen
Vesikeln gespeichert; eine Ausnahme sind
die neurohypophysren Hormone, die in
Sekretgranula gespeichert werden. Inaktiviert

werden die Neuropeptide durch enzymatische Hydrolyse.
Die wichtigsten Neurotransmitter und die Art ihrer Inaktivierung sind in .Tab.29.1 aufgelistet.
Viele natrliche und auch synthetische Stoffe beeinflussen die Signalbertragung an den Synapsen.
Die Entwicklung neuer, spezifisch auf bestimmte
Typen von Synapsen wirkender Medikamente hat
die Behandlung neuronaler, muskulrer und psychischer Krankheiten (Psychopharmaka) revolutioniert.
29.2
Photorezeptoren des Auges
Organismen benutzen sichtbares Licht fr zwei verschiedene Zwecke: Photosynthese (hhere Pflanzen,
Grnalgen und gewisse Bakterien) und optische
Orientierung (Mensch und Tier).
In der Netzhaut (Retina) des menschlichen
Auges kommen zwei Typen von Zellen mit Photorezeptoren vor. Die Stbchen ermglichen das
370
.. Abb.29.5 Sehzelle in der Retina

(Stbchen). Die Stbchen fr das Dmmerungssehen und die Zapfen fr das
Farbensehen sind sehr hnlich gebaut.
Der Sehpurpur, das Rhodopsin (Retinal
plus Opsin), ist ein 7-Helix-Transmembran (7TM)-Rezeptor in den Membranscheiben. Der Chromophor cis-Retinal
ist kovalent an einen Lysinrest des
Opsins gebunden. Die lichtinduzierte
Isomerisierung der cis-Form in die
trans-Form des Retinals (das N-Atom
des Lysinrests verschiebt sich um
0,5nm) lst ber eine Konformationsnderung des Rhodopsins eine durch
ein G-Protein (Transducin) vermittelte
Signalkaskade aus
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ueres
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trans-Retinal
Dmmerungssehen ohne Farberkennung; die

Rot-, Grn- und Blau-empfindlichen Zapfen erlauben bei hherer Lichtintensitt das Farbensehen.
In beiden Zelltypen ist der primre Auslser eines

Nervenimpulses die lichtinduzierte cistransIsomerisierung des Farbstoffes Retinal (Vitamin
A-Derivat; Abschn.35.3) im Protein Rhodopsin
(Sehpurpur).
Rhodopsin ist ein lichtempfindlicher G-Protein-gekoppelter Rezeptor (GPCR) Das uere
Segment der Stbchen enthlt ber 1000 bereinander gestapelte Membranscheiben, in deren
Membranen der 7-Helix-Transmembran (7TM-)
Rezeptor Rhodopsin eingebettet ist. Rhodopsin ist
ein lichtempfindliches Chromoprotein; der Chromophor Retinal (Aldehyd von Retinol, VitaminA;
Abschn.35.3) ist kovalent an das Apoprotein, das
Opsin, gebunden (.Abb.29.5). Die Absorption eines
Photons lst die cistrans-Isomerisierung von Retinal aus, die eine Konformationsnderung des Rhodopsins zur Folge hat. ber eine Reihe kurzlebiger
Zwischenformen entsteht innerhalb von Millisekunden MetarhodopsinII als metastabile Zwischenform.
Die vernderte Konformation von MetarhodopsinII
(auch als aktives Rhodopsin R* bezeichnet) lst ber
das G-Protein Transducin die Phototransduktionskaskade aus. Metarhodopsin II ist ausgebleicht
(farblos; max 387nm) und zerfllt innerhalb von Sekunden zu Opsin und all-trans-Retinal.
Stbchen und Zapfen
Die Netzhaut des menschlichen Auges besitzt
etwa 110Millionen Stbchen und 6Millionen
Zapfen. Retinal ist das lichtempfindliche Molekl in beiden Zelltypen; verschieden ist jedoch
der Proteinteil des Rhodopsins, der durch seine
371
29
Wechselwirkungen mit dem Chromophor

dessen Absorptionsmaxima bestimmt:
max
Stbchen
500nm
(500=40000M1cm1)
Zapfen fr Blau/Grn/Rot
420/530/560nm
Die relative Empfindlichkeit der Lichtwahrnehmung durch die Sehzellen als Funktion der
Wellenlnge entspricht dem Absorptionsspektrum ihres Rhodopsintyps.

Die Phototransduktionskaskade verstrkt das Signal Der Verlauf der komplexen Signalkaskade
ist in Zapfen und Stbchen identisch (detaillierte

Darstellung in .Abb.29.6). Besonders in Stbchen
(Dmmerungssehen!) erreicht die Kaskade einen
betrchtlichen Verstrkereffekt: Ein aktives Rhodopsinmolekl (R*) kann einige hundert Transducinmolekle aktivieren, die je ein cGMP-Phosphodiesterase-Molekl aktivieren, von denen jedes
etwa 1000cGMP-Molekle hydrolysieren kann. Ein
Photon, ein einzelnes Lichtquant, reicht aus, um die
Plasmamembran eines Stbchens um 1mV zu hyperpolarisieren; die Zapfen sind um zwei Zehnerpotenzen weniger lichtempfindlich. Nach Beendigung
des Lichtreizes steigt die cGMP-Konzentration sehr
schnell wieder an. Wie bei jedem G-Protein wird
das GTP der -Untereinheit von Transducin zu
GDP hydrolysiert und damit die cGMP-Phosphodiesterase wieder desaktiviert.
Na+-Kanle der
schlieen
Hyperpolarisierung
schlieen
Zur Regenerierung von Rhodopsin wird

all-trans-Retinal ber eine Reihe enzymatischer
Reaktionen zu cis-Retinal isomerisiert Das
all-trans Isomer dissoziiert vom Opsin, wird in

den Pigmentepithelzellen durch eine NADH-abhngige Dehydrogenase zu Retinol reduziert und
durch Lecithin-Retinol-Acyltransferase mit einem Palmitinrest aus Phosphatidylcholin (Abschn.6.3) verestert. Eine Isomerohydrolase isomerisiert den all-trans-Retinylpalmitinester und
setzt 11-cis-Retinol frei, welches zu 11-cis-Retinal
oxidiert wird. In den Stbchen bindet cis-Retinal
an Opsin, womit der Anfangszustand wieder hergestellt ist: Der gebleichte Sehpurpur hat wieder
Farbe gewonnen und ist bereit, erneut ein Photon
aufzunehmen.
.. Abb.29.6 Phototransduktionskaskade in Sehzellen. Rhodopsin* (MetarhodopsinII), die aktivierte Form von Rhodopsin mit all-trans-Retinal, entsteht innerhalb von 10ms nach
der Anregung durch Licht und aktiviert seinerseits das G-Protein Transducin. Die darauf aktivierte cGMP-Phosphodiesterase erniedrigt die cGMP-Konzentration in der Stbchenzelle.
Die herabgesetzte cGMP-Konzentration fhrt zum Schlieen
cGMP-aktivierter Na+-Kanle in der Plasmamembran der
Zelle. Dadurch wird die Membran hyperpolarisiert, worauf
sich deren spannungsgesteuerte Ca+-Kanle schlieen. Bei
herabgesetzter intrazellulrer Ca+-Konzentration stoppt die
Freisetzung von Glutamat an der Synapse. Die verminderte
Glutamat-Ausschttung an der Synapse wird von der postsynaptischen Zelle (Bipolarzelle) als Signal wahrgenommen, das
sie weiterleitet
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29.3 Geruchs-
und Geschmacksrezeptoren
Wie die Wahrnehmung von Licht und Farben orientiert auch die Wahrnehmung bestimmter Molekle
in der Luft und in der Nahrung einen Organismus
ber seine Umgebung. Der Geruchssinn und der
Geschmackssinn haben sich auf der Grundlage von
Strukturen entwickelt, die im Organismus auch fr
andere Zwecke verwendet werden (Membranrezeptoren und Ionenkanle).
Die Geruchsrezeptoren sind G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) und bilden bei Sugern eine der grten Genfamilien Bei Sugern
finden sich etwa 1000Gene fr 7TM-Geruchsrezeptoren; beim Menschen sind zwei Drittel davon
allerdings nichtexprimierte Pseudogene. Die Geruchsrezeptoren sind homolog mit den Opsinen
der Sehzellen und den 7TM-Rezeptoren von Neurotransmittern, z.B. den adrenergen Rezeptoren.
Jede Riechzelle exprimiert nur einen bestimmten
Rezeptortyp. Die Ligandenspezifitt der Geruchsrezeptoren berlappt; die einzelnen Riechstoffe
werden jeweils, in unterschiedlichem Mae, von
mehreren Typen von Rezeptoren wahrgenommen.
Jedem Riechstoff und Duftstoffgemisch entspricht
ein bestimmtes Erregungsmuster der verschiedenen Rezeptortypen, aus welchem das Gehirn
dessen Geruchsbild ermittelt. Der Mensch mit
seinem im Vergleich mit anderen Sugern stark
eingeschrnkten Riechvermgen kann auf diese
Weise immerhin gegen 10000 verschiedene Dfte
erkennen.
Die Chemotransduktionskette verluft wie folgt:
Rezeptor ! G-Protein ! Adenylatcyclase

! cAMP-aktivierter Kationenkanal
! Depolarisierung der Plasmamembran

der Riechzelle:
An der Synapse zwischen Riechzelle und Nervenzelle

wird das Lokalpotenzial in eine erhhte Frequenz der
Aktionspotenziale umgesetzt. Auch hier verstrkt die
Kaskade das Signal: Die Aktivierung eines Rezeptorproteins durch ein Duftstoffmolekl kann zur Bildung von 10002000Moleklen cAMP fhren, die
zur ffnung vieler Ionenkanle fhren.
Duftklassen
Geruchsqualitten: Eine Klassierung der
einzelnen Dfte ist schwierig. Folgende
Geruchsklassen werden unterschieden (in
Klammern jeweils eine die Duftklasse charakterisierende Verbindung): blumig (Geraniol), therisch (Benzylacetat), moschusartig
(Moschus), kampferartig (Kampfer), faulig
(H2S), schweiig (Buttersure) und stechend
(Ameisensure). Die Geruchsklassen lassen
sich nicht scharf gegeneinander abgrenzen.
Die natrlich vorkommenden Gerche sind
zumeist auf Gemische von Riechstoffen zurckzufhren.
Die Geschmacksrezeptoren sind entweder GPCR

oder Ionenkanle Whrend die Geruchsrezep-
toren der Nase flchtige Verbindungen wahrnehmen, registrieren die Geschmacksrezeptoren der
Zunge wasser- und fettlsliche Stoffe. Whrend
der Geruchssinn des Menschen tausende verschiedener Duftstoffe unterscheiden kann, ist die
Geschmackswahrnehmung eingeschrnkt auf die
fnf primren Geschmacksqualitten: s, umami
(japan. wohlschmeckend), salzig, sauer und bitter.
Die begrenzte Differenzierungsfhigkeit ist darauf
zurckzufhren, dass z.B. ein Bitterstoff nur von
den Bitterstoffrezeptoren registriert wird und jede
Bitter-Geschmacks-Sinneszelle zwar viele verschiedene Typen von Bitterrezeptoren besitzt, deren Signale jedoch undifferenziert weitergeleitet werden.
Die Information, welche das Gehirn erhlt, ist damit
sehr einfach: Vorliegen von Bitterstoff sowie Intensitt des bitteren Geschmacks. Die fnf Geschmacksqualitten gengen jedoch zum Erkennen der Nahrungsbestandteile als wahrscheinlich nahrhaft und
nutzbringend (s, umami, salzig) oder als wahrscheinlich schdlich oder gar giftig (sauer, bitter).
Die Bitterrezeptoren bilden beim Menschen
eine Familie von 501007TM-GPCR. Pflanzliche
Gifte sind hufig Bitterstoffe (z.B. Alkaloide wie
Chinin, Koffein, Strychnin, Nicotin usw.).
Die Srezeptoren sind ebenfalls 7TM-Proteine. Die meisten s schmeckenden Verbindungen sind Kohlenhydrate. Die Aminosuren Tryptophan und Glycin zeigen ebenfalls einen slichen
Geschmack. Knstliche Sstoffe wie Saccharin,
373
29.4 Chemotaxis bei Eukaryonten
Cyclamat oder Aspartam (N-L--Aspartyl-L-phenylalaninmethylester) besitzen eine im Vergleich zu

Zuckern sehr hohe Skraft.
Der Umami-Geschmack ist auf L-Glutamat zurckzufhren, dessen Natriumsalz als Geschmacksverstrker in der Lebensmittelindustrie und im
Haushalt breite Verwendung findet. Der Glutamat-Rezeptor in den Geschmackszellen der Zunge
ist homolog mit den 7TM-Glutamat-Rezeptoren im
Zentralnervensystem, besitzt jedoch eine geringere
Affinitt fr Glutamat (Schwellenkonzentration
1mM, entsprechend der Glutamatkonzentration
der Nahrung).
Die Salzrezeptoren sind unspezifische Kationenkanle fr ein- und zweiwertige Kationen. Der
vermehrte Einstrom z.B. von Na+-Ionen fhrt zur
Depolarisierung der Zellmembran. Auch Anionen
knnen einen salzigen Geschmack hervorrufen, sie
werden in benachbarte Zellen aufgenommen, die
ber Tight junctions mit den Sinneszellen verbunden sind.
Ein saurer Geschmack macht sich bei pH-Werten <3,5 bemerkbar. Der Mechanismus dieser Geschmackswahrnehmung ist unklar. Mglicherweise
depolarisiert ein direkter Einstrom von H+-Ionen
durch Na+-Kanle die Sinneszelle oder H+-Ionen
blockieren hyperpolarisierende K+-Kanle.
Die Druck- und Schmerzrezeptoren der Haut
scheinen aufgrund neuester Resultate verschieden zu
sein. Der Piezo2-Rezeptor, ein mechanisch aktivierter Ionenkanal, befindet sich in einer Untergruppe
sensorischer Neurone im Merkel-Zell-Neuritenkomplex und reagiert sehr empfindlich auf Druck.
Gentechnisch hergestellte Muse ohne diesen Mechanosensor sind aber immer noch schmerzempfindlich, sie reagieren blo nicht auf migen Druck.
29.4
Chemotaxis bei Eukaryonten
Die gerichtete Wanderung von Zellen entlang

chemischer Gradienten ist auch fr Eukaryonten
lebenswichtig Whrend der Embryogenese ist die
Chemotaxis wichtig zur Gewebe- und Organbildung und bei der Verdrahtung im Nervensystem,
im adulten Organismus fr die Aufrechterhaltung
der Gewebestruktur, die Wundheilung wie auch fr
die Zielfindung der Immunzellen.
29
Bei der bakteriellen Chemotaxis lsen Histidinkinase-gekoppelte Rezeptoren die Fortbewegung

der Zelle durch Flagellen aus (Abschn.27.3).
Eukaryontische Zellen verwenden zur zielgerichteten Fortbewegung ebenfalls das Prinzip der gelenkten Zufallsbewegung; die beteiligten Mechanismen (Rezeptoren der Lock- und Schreckstoffe,
Signaltransduktion und motorische Elemente)
sind jedoch anderer Art. Die kleinen Bakterienzellen knnen einen chemischen Gradienten nicht
direkt wahrnehmen, nur durch fortwhrendes
Umherschwimmen sind sie imstande, sich in einem Gradienten gerichtet fortzubewegen (Abschn.27.3). Die wesentlich greren Zellen der
Eukaryonten knnen hingegen einen Gradienten
an Ort direkt registrieren. Die chemotaktisch wirksamen Molekle sind zelltypspezifisch und mannigfaltig; ihre Rezeptoren sind zumeist mit einem
G-Protein gekoppelt (GPCR). Als Lockstoffe fr
neutrophile Granulozyten und Monozyten wirken von Bakterien produzierte kurze formylierte
Peptide (z.B. N-Formylmethionyl-leucyl-phenyl
alanin fMLP) sowie Produkte der Komplementkaskade (Abschn.32.1), Leukotriene (Eikosanoide;
Abschn.28.8) und diverse Chemokine (Abschn.28.8).
Die gerichtete Fortbewegung der Leukozyten
kommt durch Umstrukturierung des Cytoskeletts
zustande Im Vorderteil der Zelle verlngern sich
die distalen Enden der Actinfilamente durch Anlagerung von Actinmonomeren, wodurch ber deren
Verbindungen mit der Plasmamembran Pseudopodien entstehen; Assoziate von Actomyosin, ziehen
den hinteren Teil der Zelle nach.
Chemotaxis untersttzt auch die Wanderung

der Spermien durch den Eileiter zum Ei im Ovar
Als Lockstoffe dienen Progesteron und atriales natriuretisches Peptid ANP. Der von der Eizelle selbst
produzierte Lockstoff ist noch nicht identifiziert; ein
Teil der Rezeptoren des Spermiums sind den Geruchsrezeptoren im Riechepithel hnlich.
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29.1 Neurotransmitter
29.3 Geruchs- und Geschmacksrezeptoren
29.4 Chemotaxis bei Eukaryonten
375
30
Bewegungsapparat: Muskeln,
Bindegewebe und Knochen
30.1
Vergleich der verschiedenen Muskeltypen 376
30.2
Dickes Myosinfilament, dnnes Actinfilament 377
30.3
Entwicklung von Zugkraft im Sarkomer 377
30.4
Regulation der Muskelkontraktion

durch Calciumionen379
30.5
Bereitstellung von ATP im Muskel 382
30.6
Bindegewebe, Knochen und Zhne 383

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Kapitel 30 Bewegungsapparat: Muskeln, Bindegewebe und Knochen
Die Mglichkeit zur Fortbewegung stellt eine der

typischen Eigenschaften der Tierwelt dar. Alle Bewegungsarten beruhen auf der Entwicklung von
Zugkrften durch Muskeln. Die Muskulatur der
Vertebraten ist besonders wirkungsvoll, indem sie
mit einem beweglichen Endoskelett zusammenarbeitet. Zum Bewegungsapparat gehren daher auch
passive Teile: Knochen, Gelenke mit ihren Bndern
und Sehnen, die Knochen und Muskeln verbinden. Vertebraten besitzen aber auch Organe und
Gewebe, die ohne Beteiligung eines Skeletts chemische Energie in mechanische Arbeit umsetzen.
Dazu gehren die Muskeln, welche unwillkrliche
Funktionen erfllen und durch das vegetative Nervensystem gesteuert werden, wie der Herzmuskel,
die glatte Muskulatur des Darms, der Blutgefe
und anderer Hohlorgane. Alle Muskeltypen kontrahieren sich aufgrund hnlicher molekularer Mechanismen.
Muskeln sind spt im Verlauf der Evolution
entstanden. Ihr entscheidendes strukturelles Merkmal ist die regelmige Anordnung der ursprnglichen zellulren Bewegungselemente, der dnnen
Actinfilamente (Abschn.23.1) und der dickeren
Myosinfilamente. Sowohl die Actin- wie auch die
Myosinfilamente bestehen aus vielen hintereinandergelagerten Untereinheiten. Das Actinfilament
enthlt auer Actin auch Tropomyosin und Troponin. Das Myosinfilament besteht aus hunderten von
Myosinmoleklen. Die beiden Filamente werden
durch die summierte Kraftentwicklung vieler Myosinkpfchen gegeneinander verschoben, woraus
sich die Zugkraft des Muskels ergibt. Die Hydrolyse
des im Muskel gebildeten ATP liefert die bentigte
Energie; Muskelttigkeit geht einher mit erhhtem
Stoffwechsel und Wrmebildung.
30.1
Vergleich der verschiedenen

Muskeltypen
Die drei Muskeltypen der Suger: quergestreifter Skelettmuskel und Herzmuskel sowie glatte
Muskulatur
Bei allen drei Typen kommt die
Kontraktion zustande durch die Wechselwirkung

zwischen den Motorteilen von Myosinfilamenten
und den umgebenden Actinfilamenten (Strukturelemente der Muskeln; .Tab.30.1). Die Muskelty-
.. Tab.30.1 Strukturelemente der verschiedenen

Muskeltypen von Sugern
Skelettmuskelfaser
Quergestreift, mehrkernig,
ber 1cm lang, 0.1mm
Durchmesser
Herzmuskelzelle
Quergestreift, einkernig
Zelle der glatten

Muskulatur
Nicht quergestreift, einkernig
Sarkolemma
Plasmamembran
der Muskelzelle
Transversale Tubuli
Tief ins Zellinnere gestlpte

rhrenartige Fortstze der
Plasmamembran, Zubringer
des Aktionspotenzials (Depolarisierung der Membran)
Sarkoplasma
Cytoplasma der Muskelzelle
Sarkoplasmatisches
Retikulum
Spezialisiertes intrazellulres Rhrensystem des ER,

umschliet die Myofibrillen,
Speicher von Ca2+-Ionen
Myofibrille mit
Myofilamenten
Lngsgerichteter hochgeordneter Komplex aus Myosinfilamenten und Actinfilamenten (Actin, Troponin und
Tropomyosin)
Sarkomer
Quergestreifte zylinderfrmige Struktur- und Funktionseinheit der Myofibrillen, 3m

lang, 1,5m Durchmesser
pen unterscheiden sich in der Art ihrer Innervation

und der Organisation ihrer Filamente. Der quergestreifte Skelettmuskel ist willkrlich innerviert. Er
besteht aus von bloem Auge gerade noch sichtbaren Faserbndeln, die aus Muskelfasern aufgebaut
sind. Eine quergestreifte Muskelfaser ist ein Syncytium fusionierter Zellen, das im Cytoplasma die
Myofibrillen enthlt, in denen die Sarkomere mit
ihren Actin- und Myosin-Filamenten hintereinander aufgereiht sind (.Abb.30.1). Die Querstreifung entsteht durch die regelmige Anordnung der
Filamente in den Sarkomeren. Besondere Proteine
halten die Actinfilamente in der Z-Membran und
die Myosinfilamente in der Mittelebene der Sarkomere in einer kristallgitterhnlichen Anordnung.
Der Herzmuskel, das Myocard, ist auch quergestreift, jedoch nicht willkrlich gesteuert. Die
glatten Muskelzellen werden ebenfalls vegetativ
377
30.3 Entwicklung von Zugkraft im Sarkomer
30
kontrolliert; ihre Fibrillen sind unregelmig angeordnet, sodass die Sarkomere keine mikroskopisch
sichtbare Querstreifung ergeben.
30.3
30.2
gleiten die Myosinfilamente zwischen die Actinfilamente hinein (.Abb.30.4). Ein Myosinfilament
besteht aus zwei annhernd punktsymmetrischen,
in der Mitte verbundenen Hlften mit Myosinkpfchen, die an den Actinfilamenten ziehen. Die Kraft
entsteht durch eine Vielzahl zyklischer Prozesse:
Hunderte von Myosinkpfchen ragen seitlich aus
dem Filament heraus und hangeln sich am benachbarten Actinfilament vorwrts.
Zunchst wird die chemische Energie aus der
Hydrolyse des ATP in eine energiereiche Konformation des Myosinkpfchens bergefhrt und
darauf durch gerichtete Relaxation des Kpfchens
Kontraktionsarbeit geleistet (.Abb.30.5): Binden
eines ATP-Molekls an das Myosinkpfchen lst
dessen Verbindung mit dem Actinfilament; die
Dissoziation des Myosinkpfchens vom Actinfilament ist mit einer Konformationsnderung der
ATP-Bindungsstelle gekoppelt, welche die Hydrolyse des ATP auslst; bei der ATP-Hydrolyse
erweitert sich der Winkel des freien Myosinkpfchens zum Myosinfilament; das Kpfchen liegt nun
in seiner energiereichen Konformation vor und
bindet schwach an eine weiter vorne liegende Stelle
des Actinpolymers; das abgespaltene -Phosphat
wird freigesetzt, wodurch die Bindung des Kpfchens ans Actin verstrkt und die Konformationsenergie in die Zugbewegung umgesetzt wird ;
dabei wird auch das ADP freigesetzt. Der Zyklus
kann nun von neuem beginnen; ein Kpfchen kann
fnf Zyklen pro Sekunde durchlaufen. Die Zyklen
laufen bei vielen Myosinkpfchen gleichzeitig und
asynchron ab; die vielen kleinen Krfte summieren sich zur Muskelkraft. Ein kontrahierter Muskel
muss fortwhrend arbeiten, wenn seine Kraftwirkung bestehen bleiben soll. Ohne ATP-Nachschub
laufen keine kraftbildenden Zyklen ab; der Muskel
erschlafft.
In glatten Muskelzellen bilden die Filamente
keine Sarkomere, sie sind weniger strikt angeordnet und an Intermedirfilamenten verankert. Sie
kontrahieren sich aber ebenfalls durch die oben
beschriebenen kraftentwickelnden Zyklen und die
Dickes Myosinfilament, dnnes

Actinfilament
Myosinmolekle (520kDa) bilden die dicken Filamente Ein Myosinmolekl besteht aus sechs
Untereinheiten, zwei schweren Ketten von je gut

220kDa und zweimal zwei leichten Ketten von je 15
und 22kDa. Jede der schweren Ketten besitzt einen
Kopfteil und einen langen helikalen Schwanzteil.
Die beiden Schwanzteile sind zu einer Coiled-coil-Struktur verdrillt (.Abb.3.8). Der Schwanzteil
besitzt zwei Gelenke, eines in der Mitte und eines
beim Kpfchen. Einige hundert Myosinmolekle
sind ber Wechselwirkungen zwischen den hinteren
Schwanzteilen aneinander gelagert und bilden ein
dickes Filament mit vielen paarweise seitlich herausragenden Kpfchen (.Abb.30.2).
Das Actinfilament besteht aus dem Strukturprotein Actin und den Regulatorproteinen Tropomyosin und Troponin Das globulre Monomer
des Actins wird als G-Actin bezeichnet, seine polymere, filamentse Form als F-Actin. Ein einzelnes
Filament besteht aus hintereinander gereihten Actinmoleklen (Abschn.23.1). Oberflchliche Betrachtung seiner elektronenoptischen Abbildung lsst es
wie zwei helikal verdrehte polymere Ketten erscheinen. Es handelt sich jedoch um eine leicht verdrehte
Kette hintereinander aufgereihter Actinmolekle mit
ihren zwei globulren Domnen (.Abb.30.3). Seitlich angelagert sind zwei Coiled coils von Tropomyosin, die sich jeweils ber sieben Actinmonomere erstrecken. An jedes Tropomyosinmolekl bindet ein
dreiteiliger Troponinkomplex.
Die Actin- und Myosinfilamente werden im
Muskel durch eine Reihe weiterer Proteine in regelmiger Anordnung gehalten: Das Protein Nebulin
hlt die Actinfilamente in annhernd kristalliner
Anordnung; das Protein Titin verbindet das Myosinfilament elastisch mit den Z-Membranen des
Sarkomers (.Abb.30.1).
Entwicklung von Zugkraft

im Sarkomer
Das Sarkomer ist die kontraktile Einheit des

quergestreiften Muskels Bei der Kontraktion
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30.4 Regulation der Muskelkontraktion durch Calciumionen
Summierung der Wirkungen mehrerer kontraktiler

Einheiten.
Totenstarre
Das in der Muskulatur vorhandene und aus
Energiereserven nachlieferbare ATP ist einige
Stunden nach dem Tod verbraucht. Alle
Myosinkpfchen befinden sich danach in ATPfreiem Zustand und sind fest ans Actinfilament
gebunden (Ca2+-Konzentration hoch, da Ca2+Pumpe nicht mehr arbeitet; Abschn.30.4).
Der Muskel befindet sich im Zustand der
Totenstarre (Rigor mortis). Die Starre lst sich
nach etwa drei Tagen durch proteolytischen
Abbau der Filamente.
30.4 Regulation
der Muskelkontraktion
durch Calciumionen
Ca2+ bertrgt als Second messenger das Signal

von der motorischen Endplatte ins Zellinnere
Die T-Tubuli (Transversal-Tubuli) reichen als
schlauchfrmige, quer zur Muskelfaser verlaufende

Einstlpungen der Plasmamembran ins Innere der
Muskelfaser. Das von der motorischen Endplatte
(Nerv-Muskel-Verbindung) ausgehende Aktionspotenzial depolarisiert auch die Membran der
T-Tubuli und ffnet deren spannungsgesteuerte
Calciumkanle: Ca2+-Ionen strmen nun aus den
T-Tubuli ins Cytosol, worauf sich die Ca2+-gesteuerten Calciumkanle der direkt gegenberliegenden
Membran des sarkoplasmatischen Retikulums ffnen. Noch mehr Ca2+-Ionen lecken nun whrend
einiger Millisekunden vom sarkoplasmatischen Retikulum ins Cytosol; aufgrund der weitreichenden
Verstelung des Retikulums sind sie sofort ber die
ganze Zelle verteilt und lsen die Kontraktion aus.
30
Das sarkoplasmatische Retikulum ist eine besondere Form des endoplasmatischen Retikulums
und zeichnet sich durch eine hohe Konzentration
freier Ca2+-Ionen (300M) im Lumen aus; noch
mehr Ca2+-Ionen sind an das dortige Ca2+-Pufferprotein Calsequestrin gebunden. Die Ca2+-Konzentration im Cytosol der ruhenden Muskelfaser ist
hingegen <0.1M und steigt beim Auslsen einer
Kontraktion nach dem Einstrmen von Ca2+ aus
dem sarkoplasmatischen Retikulum kurzfristig auf
10M an. ATP-abhngige Calciumpumpen bringen danach die Ca2+-Ionen aus dem Cytosol rasch
ins sarkoplasmatische Retikulum zurck.
Ca2+ bindet an Troponin und bewirkt die
Freisetzung der Myosinbindungsstellen im Actinfilament Bei tiefer Ca2+-Konzentration im
Cytosol der Muskelfaser ist die Kontraktion des

Muskels gehemmt, weil das Tropomyosin in der
seitlichen Furche des Actinfilaments liegt und die
Bindungsstellen fr die Myosinkpfchen abdeckt
(.Abb.30.2). Bei erhhter Ca2+-Konzentration
bindet Ca2+ an Troponin und lst eine Konformationsnderung aus, die auf Tropomyosin bergreift
und die Bindungsstellen fr die Myosinkpfchen
freigibt.
Troponin gehrt zusammen mit dem in allen
eukaryontischen Zellen vorkommenden Calmodulin zur Familie Ca2+-bindender Proteine, welche
aufgrund einer Ca2+-abhngigen Konformationsnderung an allosterischen Regulationsprozessen
beteiligt sind. Ca2+, das auch an der Erregungsbertragung bei gewissen Synapsen und am Sehvorgang beteiligt ist, wird zu den Second messengers
gezhlt.
Frdiagnose von Herzinfarkt
Der Nachweis der myocardspezifischen Isoform von Troponin im Blut dient zur Frhdiagnose eines Herzinfarkts.
.. Abb.30.1 Strukturelle Organisation des quergestreiften Muskels. Der Skelettmuskel erscheint im Lichtmikroskop quergestreift mit hellen und dunklen Banden. Die I-Banden enthalten nur Actinfilamente und erscheinen im polarisierten Licht isotrop,
d.h. sie erscheinen bei allen Orientierungen des Prparats gleich hell. Die Breite der I-Banden variiert je nach Kontraktionszustand des Muskels (.Abb.30.4). Die A-Banden sind anisotrop und wechseln ihre Helligkeit beim Drehen im polarisierten Licht.
Sie entsprechen der Region der Myosinfilamente und bleiben immer gleich lang (1,85m). Die Myosinfilamente sind ber
Titinmolekle in der Z-Membran elastisch verankert. Die Actinfilamente sind ebenfalls in der Z-Membran befestigt
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30.4 Regulation der Muskelkontraktion durch Calciumionen
.. Abb.30.3 Actinfilament. Zwei langgestreckte Tropomyosinmolekle mit Coiled-coil-Struktur sind dem Actinfilament seitlich angelagert und decken im Ruhezustand die
Bindungsstellen fr die Myosinkpfchen ab. Auf jedem
Tropomyosinmolekl liegt ein Ca2+-Ionen bindender Troponinkomplex, der bei Erhhung der Ca2+-Konzentration eine
Konformationsnderung des Tropomyosins auslst, welche
die Bindungsstellen fr die Myosinkpfchen freisetzt
Schlaff
Dnne Filamente
Dicke Filamente
Z-Membran
Kontrahiert
.. Abb.30.4 Kontraktion eines Sarkomers. Je sechs zylindrisch angeordnete Actinfilamente umrunden ein Myosinfilament. Im
hier gezeigten Lngsschnitt sind jeweils nur zwei diametrale Actinfilamente zwischen den Myosinfilamenten sichtbar. Whrend
der Kontraktion gleiten die Myosinfilamente zwischen die Actinfilamente hinein und verkrzen das Sarkomer. Maximale Kraft
wird bei einer Sarkomerlnge von 2,02,25m entwickelt
.. Abb.30.2 Aufbau des Myosinfilaments. Ein Myosinmolekl besteht aus sechs Untereinheiten, zwei schweren Ketten mit
langen helikalen COOH-terminalen Abschnitten und globulr gefalteten NH2-terminalen Kpfchen sowie vier kleinen globulren Untereinheiten. Je zwei kleine Untereinheiten sitzen an den Kpfchen. Die beiden groen Untereinheiten sind durch die
Coiled-coil-Struktur ihrer COOH-terminalen Schwanzteile stabil miteinander verbunden. Mehrere hundert ber ihre Coiled-coils
aneinander gelagerte Myosindimere bilden ein Myosinfilament. Das Myosinfilament ist bipolar symmetrisch aufgebaut, in seiner
Mitte fgen sich die Coiled-coils der Myosinmolekle antiparallel zusammen. Gegen die Enden hin lagern sich die Molekle
ausschlielich parallel zueinander an. Die Myosinmolekle sind somit dies- und jenseits der Mitte des Filaments entgegengesetzt
orientiert; ihre Kpfchen sind gegen das nherliegende Ende des Filaments gerichtet. Die Kpfchen ragen seitlich aus dem Filament heraus und sind gelenkig mit dem Filament verbunden (Pfeile). Sie besitzen eine Actin-Bindungsstelle und ATPase-Aktivitt
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.. Abb.30.5 Arbeitszyklus eines Myosinkpfchens. Ein Myosinkpfchen ist an ein Actinfilament gebunden. Binden von
ATP lst das Kpfchen vom Actinfilament ab. Hydrolyse von ATP fhrt zu einer energiereichen Konformation des Kpfchens.
Falls die Myosinbindungsstellen auf dem Actinfilament nicht durch Tropomyosin verdeckt sind (hohe Ca2+-Konzentration im
Cytosol), bindet das Kpfchen wieder an das Actinfilament. Die Relaxation des Actin-gebundenen Myosinkpfchens in seine
energiermere Konformation entspricht dem Arbeitstakt des Systems
.. Tab.30.2 Konzentrationen von ATP und Kreatinphosphat in den verschiedenen Muskeltypen (ruhender Organismus)
ATP (mM)
Kreatinphosphat (mM)
Skelettmuskel
1020
Herzmuskel
1,5
Glatter Muskel
0,7
30.5
Bereitstellung von ATP

im Muskel
ATP ist die unmittelbare Energiequelle fr die

Kontraktion ATP ist nicht membrangngig und
wird direkt in der Muskelfaser bereitgestellt. Bei

geringer Leistung ist die Muskulatur mit gengend Sauerstoff fr die ATP-Produktion in den
Mitochondrien versorgt. Die Energie stammt aus
der Oxidation von Glucose, Fettsuren und Ketonkrpern. Bei hoher Muskelleistung wird die Sauerstoffversorgung limitierend und zustzliches ATP
wird dann durch anaeroben Abbau von Glucose zu
Lactat gewonnen.
Kreatinphosphat dient als Zwischenspeicher
von Energie Eine reversible Reaktion berfhrt
Energie aus ATP in Kreatinphosphat, ein intrazellulres Energiespeichermolekl. Der ruhende Muskel
enthlt bis zu viermal mehr Kreatinphosphat als ATP
(.Tab.30.2). Bei Bedarf wird ATP zurckgewonnen:
383
30.6 Bindegewebe, Knochen und Zhne
30
.. Tab.30.3 Charakteristika roter und weier Muskeln

Muskeltyp
ATP kann bei Bedarf auch aus ADP gewonnen werden:

2 ADP
Adenylatkinase
ATP + AMP
Whrend der Muskelarbeit nimmt die Konzentration von Kreatinphosphat und ATP ab und diejenige
von AMP und Pi nimmt zu. Die Konzentrationen
der energiereichen Phosphatverbindungen knnen
im lebenden Organismus mittels 31P-NMR gemessen werden (Abschn.38.3).
Die Energiequelle ist je nach Leistung des

Muskels verschieden Der Energieumsatz des
Muskels kann innert Sekundenbruchteilen mehrere hundert Mal zunehmen. Bei kurzer Maximalleistung (2s; Beispiel Gewichtheben) stammt
die Energie aus ATP und Kreatinphosphat. Im
100m-Sprint und im Mittelstreckenlauf werden
die Beitrge der oxidativen Phosphorylierung und
der anaeroben Glykolyse wichtiger; limitierend
wird die Ansuerung durch Milchsure . Bei
lnger andauerndem Energieverbrauch (Marathonlauf) muss das ATP auf aerobem Weg durch die
Mitochondrien bereitgestellt werden. Je nach Funktion enthalten die Muskeln mehr rote oder weie
Muskelfasern. Die weien Muskeln eines Kurzstreckenlufers enthalten viele cytochromarme Fasern
und produzieren die Energie, welche zustzlich
zum Vorrat an ATP und Kreatinphosphat bentigt
wird, vor allem auf glykolytischem Weg; Training
vermehrt die Glykolyseenzyme und den Glykogen-
Rote
Muskeln
Weie Muskeln
(Dauer
leistung)
(kurzdauernde
Kraftentwicklung)
Faserdurchmesser
klein
gro
Verkrzungsdauer
lang
kurz
Ermdbarkeit
gering
rasch
Stoffwechsel
vorwiegend
oxidativ
vorwiegend
glykolytisch
Mitochondrien
(Cytochrome)
viele
wenige
Glykogengehalt
gering
hoch
gehalt der Muskeln (.Tab.30.3). Hingegen besitzen die roten Muskeln eines Marathonlufers mehr
cytochromreiche Fasern und arbeiten aerob; Training verbessert den Sauerstofftransport, u.a. durch
ein erhhtes Herzminutenvolumen.
30.6
Bindegewebe, Knochen
und Zhne
Bei Arthropoden und Vertebraten ist fr die wirkungsvolle Umsetzung der muskulren Zugkrfte
in Bewegungen des Krpers ein mechanisch stabiles
Exo- oder Endoskelett erforderlich. Sehnen verbinden die Muskeln mit dem Skelett und Bnder halten
bei den Gelenken die Knochen zusammen.
Das Bindegewebe besteht aus Zellen und
extrazellulrer Matrix (ECM) Die Zellen sind in
erster Linie Fibroblasten, spindelfrmige Zellen,
die sich weiter zu Chondroblasten des Knorpels,

Osteoblasten des Knochens, Odontoblasten der
Zhne, glatten Muskelzellen der Arterienwnde,
Adipozyten des Fettgewebes oder Fibrozyten der
Haut differenzieren knnen. Alle diese Zellen haben
eine gewebestabilisierende Funktion. Die Bindegewebe sind von sehr verschiedener Struktur und me-
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2
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.. Tab.30.4 Gehalt einiger Gewebe an Kollagen, Elastin und Proteoglykanen

Gewebe
Kollagen
Elastin
Proteoglykane
(g pro 100g Trockengewicht)

Leber
0,160,30
Lunge
10
37
1224
2832
Aorta
Nackenband der Wiederkuer
17
75
Knorpel
4664
2037
Hornhaut des Auges (Cornea)
68
Haut
72
0,6
Achillessehne
86
4,4
0,5
Gesamter Knochen
23
0,2
Organischer Anteil des Knochens
88
0,8
5
6
Besonders elastische Gewebe wie die mit dem Herzschlag pulsierende Aorta oder das Nackenband der Rinder, welches beim Grasen gestreckt wird und darauf mithilft, den Kopf wieder hochzuziehen, sind reich an Elastin.
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chanischer Stabilitt. Das straffe Bindegewebe der

Sehnen und Bnder ist sehr faserreich, whrend das
lockere Bindegewebe des Glaskrpers des Auges nur
wenige Fasern aufweist. Die extrazellulre Matrix
(Abschn.25.3) wird von den Bindegewebezellen
sezerniert und enthlt Kollagenfasern und elastische Fasern in einer amorphen Grundsubstanz
aus gallertbildenden Proteoglykanen und Glykosaminoglykanen (.Tab.30.4). Die Glykosaminoglykane und Proteoglykane sind stark anionisch und
binden viel Wasser und Kationen. Dadurch entsteht
ein hydrophiles, gut verformbares Fllmaterial, das
Wasser aufnehmen oder abgeben kann. Auerdem
finden sich Strukturglykoproteine und Zelladhsionsproteine in der ECM.
Kollagen wird am rauen ER synthetisiert Die
unter einander eng verwandten Kollagenvarianten
bilden eine Proteinfamilie mit rund 30 verschiedenen Typen, welche mit rmischen Zahlen bezeichnet werden (.Tab.30.5). Kollagene machen etwa
25% des Gesamtproteins der Wirbeltiere aus.
Die Polypeptidketten von Kollagen werden
von Fibroblasten und anderen mesenchymalen Zellen als Vorstufen synthetisiert, die im ER
an Prolin- und Lysinresten hydroxyliert und im
Golgi-Apparat glykosyliert werden. Tripelhelices
formieren sich, wobei je nach Kollagentyp Homotrimere oder Heterotrimere gebildet werden.
Im NH2-terminalen Propeptidbereich bilden sich
unter Mitwirkung der Disulfidisomerase Disulfidbrcken, welche zusammen mit der Peptidyl-Prolinisomerase (Abschn.3.7) die Bildung der Tripelhelix erleichtern. Das tripelhelikale Prokollagen
wird ber sekretorische Vesikel vom ER in den
Extrazellulrraum sezerniert. Extrazellulre Peptidasen spalten die endstndigen Prosequenzen ab.
Eine Kollagentripelhelix ist etwa 300nm lang
(.Abb.2.3). Jede dritte Aminosure ist Glycin, das
Tripeptidmotiv Gly-X-Y kommt pro Kette mehrere
hundert Mal vor, an der PositionX befindet sich
hufig Prolin oder Alanin, an der Position Y hufig
Hydroxyprolin oder Alanin. Die sperrigen Seitenketten der Hydroxyprolin- und Prolinreste ragen
gegen auen.
Nach Abspaltung aller NH2- und COOH-terminalen Propeptide lagern sich jeweils 5Tripelhelices
regelmig lngs versetzt zu langen Mikrofibrillen
mit etwa 300nm Durchmesser zusammen (Die Propeptide verhindern die Bildung von Mikrofibrillen,
solange sich die Tripelhelices im ER befinden!). Die
Fibrillen werden durch kovalente Bindungen, Wasserstoffbindungen und elektrostatische Bindungen
30
385
zusammengehalten. Die Lysinoxidase produziert

endstndige Aldehydgruppen an Lysin- und Hydroxylysinresten. Die Lysinaldehyde bilden spontan kovalente Quervernetzungen mit anderen Lysinaldehyden und -Aminogruppen von Lysinresten
benachbarter Tripelhelices. Die Kollagenfasern
werden dadurch zugfest. Die versetzte Anordnung
verursacht ein elektronenoptisch darstellbares Bandenmuster.
Das Bindegewebe
ist allgemein fr den
Zusammenhalt der Organe verantwortlich Lo-
ckeres interstitielles Bindegewebe gibt inneren

Organen wie Lunge oder Leber Form und Halt.
Geflechtartiges Bindegewebe bildet die Darmaufhngebnder (Mesenterien) und die hauthnlichen
Hllen innerer Organe, die Bindegewebekapseln.
Manche Gewebe wie die Blutgefe sind durch eine
Basalmembran aus Bindegewebe von den anderen
Geweben getrennt. Die Bedeutung der Bindegewebefasern der Haut (in der Dermis, Lederhaut) zeigt
sich beim Altern der Haut; zunehmende Defekte der
kollagenen und elastischen Fasern vermindern die
Straffheit und Elastizitt der Haut; Falten und Runzeln sind die Folge.
Das Bindegewebe wird durch spezifische
Metallo-Matrix-Proteasen (MMPs) abgebaut Je
nach Bindegewebetyp variiert die Umsatzrate der

extrazellulren Proteine betrchtlich. Die Synthese
der Matrixproteasen ist reguliert, sie werden als
Vorstufen produziert und ber proteolytische Kaskaden aktiviert. Inhibitoren der MMPs, die Tissue
inhibitors of MMP, regulieren deren Aktivitt. Metastasierende Krebszellen bauen Bindegewebe ab,
um sich ber Gewebegrenzen auszubreiten.
Knochen und Zhne sind spezialisierte Bindegewebe Die Knochen sind der weitaus grte
Speicher fr Ca2+-Ionen und Phosphat; der Krper

eines erwachsenen Menschen von 70kg enthlt
ungefhr 1kg Calcium, 99% hiervon finden sich
im Knochen. Der Auf- und Abbau des Knochens
ist hormonal geregelt (Abschn.28.6). Seine organische Matrix besteht hauptschlich aus Kollagen.
Das Hauptmineral des Knochens ist Hydroxylapatit
Ca5(PO4)3OH, das in winzigen Kristallen von etwa
3035m auf der Knochenmatrix sitzt und eine
riesige Oberflche von rund 200m2 pro g Knochenmasse bildet. Der Knochen ist hnlich wie armierter
Beton aufgebaut: Die zugfesten Kollagenfasern ent-
.. Tab.30.5 Hufige Kollagentypena

Kollagentyp
Vorkommen
Besonderheit
I (1I)22
Sehnen, Knochen,
Haut, Hornhaut,
Zhne, Blutgefe,
Narben
Schwach
glykosyliert
II (1II)3
Knorpel
Stark
glykosyliert
(10%)
III (1III)3
Netzwerk in Haut,
Blutgefe, Darm,
innere Organe (Leber,
Niere, Milz); auch
fetales Kollagen, Granulationsgewebe
Schwach
glykosyliert
IV (1IV)3
Basalmembranen,
Augenlinse, Glaskrper, Nierenglomerula
Stark
glykosyliert
Es sind viele Kollagentypen (Homo- und Hetero

trimere) bekannt, die von etwa 30Genen codiert
werden.
sprechen dem Armierungseisen und die druckfesten Kristalle dem Beton. Die Knochenmasse unterliegt einem stndigem Umsatz: Osteoblasten bauen
auf, Osteoklasten bauen ab (Calciumhomeostase;
Abschn.28.6). Die Osteoklasten bilden eine abgedichtete Zone in der Abbauregion und sezernieren
Protonen und Chloridionen. Mit sinkendem pHWert nimmt die Konzentration des (PO3
4 )-Ions
durch Protonierung ab: Der Knochen wird demineralisiert. Sezernierte Proteasen zerlegen die Knochenmatrix.
Spezialisierte Bindegewebezellen bilden die
drei mineralisierten Bestandteile der Zhne: Zahnschmelz, Zahnbein (Dentin) und Zahnzement. Der
Mineralgehalt ist beim Zahnschmelz besonders
hoch (95%), whrend er beim Dentin um 70% und
beim Zahnzement um 60% liegt. Alle drei Komponenten sind strukturell den kompakten Knochenteilen hnlich.
386
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Zhneputzen und Fluoridprophylaxe

Zahnschmelzdefekte und Zahnkaries
(Zahnzerfall): Die Bakterien der natrlichen
Mundflora bilden einen zh haftenden Zahnbelag aus vernetzten Dextranen, die Plaque
(eine Art von Biofilm; Abschn.28.10). Durch
die organischen Suren aus dem bakteriellen
Abbau von Zucker wird der Zahnschmelz
aufgelst. Die Fluoridprophylaxe wirkt auf
zwei Wegen gegen Karies. Erstens werden
vermehrt Fluoridionen anstelle der Hydroxyl
ionen in den Apatit eingebaut; Fluoridapatit ist
sureresistenter als Hydroxylapatit. Zweitens
wirken Fluoridionen bakteriostatisch, indem
sie die Enolase und damit den Zuckerabbau
der Bakterien hemmen.
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Links auf
Springer Website:
027-6-1517249-0
30.1 Vergleich der verschiedenen Muskeltypen
30.2 Dickes Myosinfilament, dnnes Actinfilament
30.3 Entwicklung von Zugkraft im Sarkomer
30.4 Regulation der Muskelkontraktion durch
Calciumionen
30.5 Bereitstellung von ATP im Muskel
387
Enzymatische
Schutzmechanismen
31.1
Blutgerinnung und Fibrinolyse 388
31.2
Biotransformationen (Entgiftungsreaktionen)393
31.3
Schutz gegen reaktive Sauerstoffderivate

(Reactive oxygen species ROS)395

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Kapitel 31Enzymatische Schutzmechanismen
Zur Abwehr schdigender chemischer und physikalischer Einwirkungen haben die Organismen
verschiedene Mechanismen entwickelt. Hitzeschockproteine schtzen die Zellproteine vor hohen Temperaturen und anderen Stressbedingungen (Abschn.3.7). DNA-Reparaturmechanismen
vermindern die Folgen von ionisierender Strahlung,
UV-Licht und Spontanmutationen (Abschn.8.3).
Das Immunsystem (Kap.32) wehrt Krankheitserreger ab. ber weitere, enzymvermittelte Schutzmechanismen berichtet dieses Kapitel.
Bei Blutgefverletzungen minimieren Gefkonstriktion und Blutgerinnung (Blood coagulation) den Blutverlust. Eine proteolytische Kaskade
verstrkt bei der Gerinnung das primre Signal. Die
Auslsung der Gerinnung sowie deren zeitliche und
rtliche Begrenzung werden streng kontrolliert. Die
Fibrinolyse lst allfllige intravasale Gerinnsel proteolytisch auf.
Biotransformationsreaktionen wandeln nicht
ausscheidbare lipophile Verbindungen um in wasserlsliche, mit Urin oder Galle ausscheidbare Substanzen. Die Reaktionen entfernen sowohl krperfremde Substanzen (Xenobiotica) als auch schlecht
wasserlsliche krpereigene Verbindungen, z.B.
Steroidhormone. Die daran beteiligten Enzyme befinden sich hauptschlich im glatten endoplasmatischen Retikulum der Leber: In Phase1 werden
reaktive Gruppen in die inerten Substrate eingefhrt, vorwiegend mittels Hydroxylierung (durch
Cytochrom P450-abhngige Monooxygenasen); in
Phase2 dienen die eingefhrten Gruppen zur Konjugation mit gut wasserlslichen Verbindungen wie
Glucuronat.
Aerob lebende Organismen haben Abwehrmechanismen gegen reaktive Sauerstoffderivate (Reactive oxygen species ROS) entwickelt. O2 und dessen Reduktionsprodukt in der Atmungskette H2O
sind beide wenig reaktiv. O2 wird jedoch bei unvoll
stndiger Reduktion gefhrlich: z.B. O2+eO2
(Superoxidradikal). Ein Radikal entspricht einem
umherirrenden Elektron, das hunderte von Moleklen beschdigen kann. Radikalkettenreaktionen
knnen insbesondere an Membranlipiden groen
Schaden anrichten. Ein Zusammenhang von Radikalreaktionen mit krankhaften Vorgngen sowie
mit Alterungsvorgngen ist anzunehmen. Zu den
Abwehrmechanismen gegen reaktive Sauerstoffderi-
vate gehren besondere Enzymsysteme, welche ROS

in ungefhrliche Verbindungen umwandeln, sowie
Radikalfnger wie die Vitamine C und E.
Spontanmutationen
Selbst H2O ist nicht vllig unschdlich: H2O
(55M!) hydrolysiert nichtenzymatisch Adenin- und Cytosinreste der DNA und generiert
damit Spontanmutationen (Abschn.8.3).
Theophrast von Hohenheim, genannt Paracelsus (14931541): All Ding sind Gift und nichts
ohn Gift; allein die Dosis macht, das ein Ding
kein Gift ist.
31.1
Blutgerinnung und Fibrinolyse
Drei Mechanismen tragen zur Blutstillung bei: Konstriktion der Arteriolen (kleinen Arterien), Aggregation von Thrombozyten und die von Plasmaproteinen bewirkte Blutgerinnung. Die Gerinnung darf nur
am Ort der Verletzung ablaufen. Mit fortschreitender
Wundheilung sind die Blutgerinnsel wieder aufzulsen (Fibrinolyse); ebenso sind allfllige Gerinnsel
in unverletzten Gefen zu entfernen. Die Blutstillungsvorgnge sind auch unerlsslich zur Verhinderung innerer Blutungen. Durch mechanische Mikroverletzungen kommt es fortwhrend zu Blutungen in
Gelenken, Darmlumen, Mundhhle usw.
Die Blutgerinnung ist ein strikt lokal ablaufender Vorgang Eine Verletzung von Blutgefen
legt Strukturen frei, die unter dem Endothel (der

innersten Zellschicht, welche die Blutgefe auskleidet) liegen. Thrombozyten mit Rezeptoren fr
Proteine der extrazellulren Matrix wie Kollagen,
Fibronectin und Laminin aggregieren am Ort des
Gefschadens. Ihre Aggregation wird verstrkt
durch den von-Willebrand-Faktor, ein Protein aus
Endothelzellen. Die Besetzung der Membranrezeptoren der Thrombozyten durch die verschiedenen
Liganden (Fibrinogen und ECM-Proteine) fhrt zur
Sekretion von Thromboxan A2 (Abschn.28.8) und
vasokonstriktorisch wirksamem Serotonin. Der aus
aggregierten Thrombozyten bestehende Thrombus
(Pfropf) fhrt zur Dichtung des verletzten Gefes. Weitere Gerinnungsvorgnge verfestigen den
Thrombus.
389
31.1 Blutgerinnung und Fibrinolyse
31
.. Abb.31.1 Proteolytische Kaskade der Blutgerinnung. Die Aktivierungsschritte gehen in membrangebundenen Proteinkomplexen (im Schema umrahmt) vor sich; auf diese Weise bleibt der Gerinnungsvorgang lokal begrenzt. Der Gewebefaktor
(Tissue factor TF) ist ein Membranprotein subendothelialer Zellen in der Gefwand, die Aktivierung von FVII zu FVIIa und von
FIX zu FIXa luft an der Membran dieser Zellen ab. Die weiteren Aktivierungsschritte erfolgen in Komplexen (FIXa FVIIIa und
der Prothrombinaktivator-Komplex FXa FVa), welche an die Membran von Thrombozyten gebunden sind. Die Thrombozyten
ihrerseits sind ebenfalls an extrazellulre Strukturen am Ort der Gefverletzung gebunden. Das obige Gerinnungsschema
weicht von den Darstellungen in vielen Lehrbchern ab, welche einen durch TF ausgelsten exogenen (extravaskulren) Weg
und einen endogenen (intravaskulren) Weg der Aktivierung des Prothrombinaktivator-Komplexes FXa FVa unterscheiden.
Das obige Schema, in welchem TF und FVIIa zusammen mit FIXa die Hauptrolle in der Auslsung der Kaskade spielen, scheint
realistischer. Das Schema zeigt auerdem, dass der Gerinnungsprozess nicht nur durch die proteolytische Kaskade (in Blau),
sondern auch ber eine rckkoppelnde Aktivierung von Vorstufen (FVII, FVIII, FXI und FV) durch Thrombin, das letzte Enzym der
Kaskade, beschleunigt wird. Im gleichen Sinn wirkt die Rckkoppelungsaktivierung von FVII durch FIXaFVIIIa und FXaFVa
Terminologie
Thrombozyten (Blutplttchen) sind kleine, von
den Megakaryozyten des Knochenmarks abgeschnrte kernlose weie Blutkrperchen.
Eine proteolytische Aktivierungskaskade bringt

die Blutgerinnung in Gang In der Gerinnungs-
kaskade wandelt limitierte Proteolyse Plasmaproteine in aktive Proteasen um; wie in allen Signalkaskaden wird dabei das auslsende Signal verstrkt.
An der Blutgerinnung beteiligte Proteine werden
als Gerinnungsfaktoren bezeichnet (.Tab.31.1);
sie werden mit F und rmischen Ziffern benannt,
wobei ein nachgestelltes a die aktivierte Form angibt. Am Ende der proteolytischen Kaskade wird
aus lslichem Fibrinogen unlsliches Fibrinpolymer (.Abb.31.1).
Die Kaskade luft innerhalb membrangebundener Proteinkomplexe ab und sorgt damit
fr eine nicht nur rasche sondern auch lokal begrenzte Gerinnung. An -Carboxyglutamat-Reste
(Synthese abhngig von Vitamin K; Abschn.35.3)
gebundene Ca2+-Ionen vermitteln die Bindung der
Gerinnungsproteine an die Phospholipide der
Zellmembranen. Kontakt mit einer auerhalb der
Gefe liegenden Struktur gibt den ersten Ansto:
Auf extravasalen Zellen bildet der Gerinnungsfak-
390
.. Tab.31.1Blutgerinnungsfaktorena
Faktor
Name
Funktion
Krankheitsbild, bei dem Faktor

fehlt oder vermindert ist
(I)
Fibrinogen
Vorstufe des Fibrins
Angeborene Afibrinogenmie,
schwerer Leberschaden
(II)
Prothrombin
Vorstufe des Thrombins
Angeborene Hypoprothrombin
mie, Vitamin K-Mangel, Leberschaden, Cumarolbehandlung
(III)
Gewebefaktor, Tissue
factor (TF)
Membranprotein extravasaler Zellen,

wird bei Gefverletzung zugnglich fr
FaktorVII, aktiviert FaktorVII
(IV)
Ca2+
Aktivierungsfaktor auf mehreren Stufen
(Accelerator-Globulin)
Vorstufe einer Komponente des Prothrombin-Aktivator-Komplexes (X, V, Ca2+,

Phospholipid)
Angeborener Mangel (Parahmophilie), schwerer Leberschaden
VII
(Proconvertin)
Vorstufe eines Aktivators von FaktorIX,

durch Kontakt mit Oberflchen extra
vasaler Zellen (TF) aktivierbar
Angeborener Mangel, Vitamin

K-Mangel, Cumarolbehandlung
VIII
(Antihmophiles
Globulin)
Ca2+-stabilisiertes -Globulin, an Aktivierung von FaktorX durch FIXa beteiligt
Angeborener Mangel
(Hmophilie A)
10
IX
(Christmas-Factor)
Vorstufe des Aktivators von FaktorX
Angeborener Mangel (Hmophilie

B), Vitamin K-Mangel, Cumarolbehandlung
31
(Stuart-Prower-Factor)
Vorstufe einer Komponente des

Prothrombin-Aktivator-Komplexes
Vitamin K-Mangel, Leberschaden,

Cumarolbehandlung
12
XI
(Plasma-Thromboplastin-Antecedent PTA)
Vorstufe eines Aktivators von FaktorIX
Angeborener Mangel (Hmophilie C)
13
XII
(Hageman-Faktor)
Zymogen (nur an der in-vitro Gerinnung

beteiligt), aktivierbar durch Kontakt mit
benetzbaren Oberflchen
Angeborener Mangel, verzgerte

in-vitro Gerinnung
14
XIII
(Fibrinstabilisierender
Faktor FSF)
Zymogen, Vorstufe der Transglutaminase

(Umwandlung von Fibrin s in Fibrin i)
Angeborener Mangel
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Seltener verwendete Bezeichnungen sind in Klammern angegeben. Die Existenz des ursprnglich postulierten
FaktorsVI konnte nicht besttigt werden.
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torVII (FVII, ein Plasmaprotein), einen Ca2+-abhngigen Komplex mit dem Gewebefaktor (Tissue
factor TF, FIII, Gewebethromboplastin, einem
Membranprotein). TF aktiviert FVII proteolytisch
und steigert zudem die proteolytische Aktivitt von
FVIIa um ein Vielfaches. Zur Aktivierung von FVII
zu FVIIa tragen auch FIXa, FXa und Thrombin
bei. Die proteolytische Kaskade endet mit der
Aktivierung von Prothrombin (FII) zu Thrombin.
Die Geschwindigkeit der Gerinnung hngt von der

Verfgbarkeit der Gerinnungsfaktoren ab, limitierend ist TF. In TF-reichen Geweben wie Lunge,
Gehirn und Uterusschleimhaut gerinnt das Blut
besonders rasch.
391
31
Bedeutung inaktiver Proteasevorstufen

Im Magen und Pankreas wird auf diese
Weise die Selbstverdauung von Zellen,
welche Proteasen synthetisieren, verhindert
(Abschn.33.1). Die proteolytische Gerinnungskaskade bringt die Gerinnung rascher
in Gang als es eine Neusynthese der Faktoren
vermchte.
Die Blutgerinnung in vitro wird ber einen anderen

Mechanismus ausgelst als die Gerinnung im Gewebe. Durch Kontakt mit einer benetzbaren Oberflche (z.B. Glas) wird FaktorXII aktiviert. FXIIa
aktiviert FXI. FXIa aktiviert FIX zu FIXa. Damit
trifft die in-vitro Kaskade mit der in-vivo Kaskade
(.Abb.31.1) zusammen. Die in-vitro Gerinnung
luft viel langsamer ab als die in-vivo Gerinnung.
Ein Mangel an FXII fhrt zu keinen Gerinnungskrankheiten.
Terminologie
Blutplasma: Flssigkeit, welche bei der Zentrifugation von gerinnungs-gehemmtem Blut
durch Abtrennen der Zellen erhalten wird.
Blutserum: Flssigkeit, welche aus geronnenem Blut herausgepresst wird. Blutserum
unterscheidet sich von Blutplasma durch das
Fehlen von Fibrinogen und das Vorhandensein
der aktivierten Formen der Gerinnungsfaktoren (z.B. Thrombin anstelle von Prothrombin).
Antikoagulanzien hemmen die Blutgerinnung. Sie
werden eingesetzt, um Gerinnungszwischenflle

(Vorhofthrombose mit Embolierisiko bei Vorhofflimmern, Venenthrombose, Verschluss einer
Coronar- oder Hirnarterie) zu vermeiden (Blutverdnnung in Laiensprache) . Die oral anwendbaren Cumarolderivate sind Strukturanaloge von
Vitamin K und wirken als Vitamin K-Antagonisten
(Abschn.35.3). Hochdosierte Cumarolderivate
werden als Muse- und Rattengift eingesetzt; sie
bewirken innere Blutungen. Heparin ist ein saures
sulfathaltiges Heteroglykan (Abschn.5.3) und ist
parenteral zu verabreichen. Es bindet an AntithrombinIII (Plasmaprotein, auch als Thrombincofaktor
.. Abb.31.2 Die Umwandlung des Fibrinogens zum Fibrin

und dessen Assoziation zu Fibrinfasern. Jede Hlfte des
Fibrinogenmolekls besteht aus je einer -, - und -Polypeptidkette, die beiden Hlften werden ber Disulfidbrcken zusammengehalten. Das Molekl ist ein recht groes, lngliches
Gebilde (340kDa; 4,6nm lang). N und C bezeichnen das NH2und COOH-Ende der -, - und -Ketten. Die NH2-terminalen
Enden der - und -Ketten bilden negativ geladene Anhnge,
welche die Polymerisierung von Fibrinogen verhindern. Eine
Abspaltung der Fibrinopeptide durch Thrombin entfernt die
sich gegenseitig abstoenden Ladungen und legt hydrophobe Regionen der Fibrinmolekle frei. Diese Molekle
assoziieren nun zu Protofibrillen und Fasern, welche durch die
Transglutaminase quervernetzt werden. Die Quervernetzungen durch Isopeptidbindungen sind bezglich Stellung und
Anzahl arbitrr angegeben
bezeichnet); der Komplex hemmt Thrombin. Die

neuen oralen Antikoagulanzien hemmen Thrombin oder FXa. Chelatoren wie Citrat, Oxalat und
EDTA (Ethylendiamintetraacetat) binden Ca2+-Ionen und dienen als in-vitro Gerinnungshemmer.
392
knnen in diesem Zustand durch Denaturierungsmittel, z.B. 6M Harnstoff, noch in Lsung gebracht
werden. In der Folge wird das Fibringerst durch
die Einfhrung kovalenter Quervernetzungen zwischen benachbarten Fibrinmoleklen stabilisiert.
Die Transglutaminase (FXIIIa) verbindet Glutaminreste mit Lysinresten ber Isopeptidbindungen
(.Abb.31.3) und bildet so Fibrin i (insoluble).
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Antikoagulationsmechanismen helfen mit, die

Blutgerinnung auf den Ort der Gefverletzung
zu beschrnken Die Gerinnung muss mglichst
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.. Abb.31.3 Kovalente Quervernetzung von Fibrin s (soluble)

zu Fibrin i (insoluble) durch Isopeptidbindungen. Die inaktive
Vorstufe der Transglutaminase (FXIII) ist ein Plasmaprotein
und wird durch Thrombin proteolytisch aktiviert
Thrombin spaltet die Fibrinopeptide vom

Fibrinogen ab und lst die Polymerisierung von
Fibrin aus Thrombin aus der Familie der Serinpro-
teasen (.Tab.4.1) ist eine hochspezifische Protease,

die nur die Arg-Gly-Bindung in der Sequenz LeuVal-Pro-Arg-Gly-Ser von Fibrinogen und FXIII
spaltet.
Fibrinogen wird wie die anderen plasmatischen
Gerinnungsfaktoren in der Leber gebildet. Das
groe Molekl (335kDa) besteht aus sechs Polypeptidketten: ()2; Disulfidbindungen halten die zwei
-Hlften zusammen (.Abb.31.2). Thrombin
entfernt vier Fibrinopeptide (18 bzw. 20Aminosurereste) und legt dadurch hydrophobe Regionen frei:
Das entstandene Fibrin assoziiert spontan zu Fibrinpolymeren. Hydrophobe Effekte und H-Bindungen
stabilisieren dessen regelmiges Fasermuster. Innerhalb von 57min nach dem Beginn der Blutung
entsteht auf diese Weise ein Fibringerst, mit dem
Thrombozyten sowie rote und weie Blutkrperchen
verkleben (Koagulum, Blutgerinnsel). Die assoziierten Fibrin-Molekle (Fibrin s; s fr engl. soluble)
begrenzt bleiben, da gerinnungsbedingte Gefverschlsse zu O2-Mangelversorgung des Gewebes

fhren. Der Antikoagulationsfaktor Protein C,
ein Plasmaprotein, wird durch den Komplex von
Thrombin mit Thrombomodulin, einem Membranprotein der Kapillarendothelien, proteolytisch
aktiviert. Aktives Protein C hemmt FVa und FVIIIa.
Der Tissue factor pathway inhibitor (in Endothelzellen kleiner Gefe synthetisiert) und AntithrombinIII (ein Plasmaprotein aus der Leber) hemmen
die Koagulationskaskade ebenfalls. Auerdem wirkt
eine Produkthemmung von Thrombin durch Fibrin
und Fibrinspaltprodukte der Blutgerinnung entgegen.
Das Fibringerst wird im Verlauf der Wundheilung abgebaut (Fibrinolyse) Die Abdichtung
verletzter Gefe durch Gerinnungsthromben berbrckt die Zeit, bis die Wundheilung eine definitive
Abdichtung erzielt hat. Danach geht es darum, die
Gefe durch Abbau der Fibringerinnsel wieder
durchgngig zu machen. Auch bei der Fibrinolyse
wird eine inaktive Proteasevorstufe, das Plasmaprotein Plasminogen, proteolytisch aktiviert:
Plasminogenaktivator
(tPA)
Peptid
Plasminogen
Plasmin (Fibrinolysin)
Fibrin i
Lsliche
Spaltprodukte
DerGewebe-Plasminogenaktivator (Tissue plasminogen activator tPA), eine an Gefendothelzellen gebundene Protease, wird durch Thrombin
freigesetzt und bindet mit hoher Affinitt an Fibrin.
393
31.2Biotransformationen (Entgiftungsreaktionen)
vor. Der Name kommt von P fr Pigment und

dem Absorptionsmaximum der inaktiven
CO-ligandierten Cytochrome bei 450nm. Die
Monooxygenasen sind in der ER-Membran
verankert; sie fhren eine Hydroxylgruppe ins
Substrat ein:
Plasminogen, das Substrat von tPA, bindet ebenfalls

an Fibrin. Bei der Bildung des Fibringerinnsels ist
damit dessen Auflsung durch Plasmin bereits
vorprogrammiert. Die Fibrinolyse ist besonders
wirksam in tPA-reichen Geweben, z.B. sorgt sie im
Uterus fr die Verflssigung des Menstruationsblutes. Gentechnisch hergestellter tPA und andere
Plasminogenaktivatoren werden heute eingesetzt
zur Verhinderung und Behebung akuter Gefverschlsse (therapeutische Fibrinolyse).
AH C O2 C NADPH C HC !
A-OH C H2 O C NADPC
Der molekulare Sauerstoff wird reduktiv

gespalten; eines der beiden O-Atome wird auf
das Substrat A bertragen, das andere zu H2O
reduziert. Die fr die Reduktion notwendigen
zwei Elektronen des NADPH werden ber die
Cyt P450-Reduktase auf das Eisenatom (Fe II)
des Cyt P450 und den Sauerstoff bertragen.
31.2 Biotransformationen
(Entgiftungsreaktionen)
Manche niedermolekularen Fremdstoffe (Xenobiotica), seien sie biologischen Ursprungs (z.B.

aus Pflanzen, Pilzen oder Bakterien) oder knstlich hergestellt, sind schdlich fr den Organismus
und schlecht wasserlslich. Besondere Abbauwege
inaktivieren diese Stoffe und bringen sie in eine
ausscheidbare Form. Die Biotransformationsreaktionen eliminieren neben Xenobiotica auch krper
eigene Stoffe, fr welche keine spezifischen Abbauwege bestehen, z.B. Hm oder Steroide. Die meisten
dieser Reaktionen finden in der Leber statt.
Biotransformationen verlaufen in zwei Phasen
In Phase1 werden reaktionstrge apolare Verbin-
dungen durch Einfhrung funktioneller Gruppen

reaktionsfhig gemacht. In der Regel wird es erst
dadurch mglich, die Fremdstoffe in der Phase2 mit
polaren Verbindungen zu konjugieren.
Die Phase1-Reaktionen sind recht vielfltig
Oxidationen, insbesondere Hydroxylierungen, werden durch Cytochrom P450-Systeme katalysiert.
Enzyme der gleichen Art sind auch an der Synthese
von Steroidhormonen, Gallensuren, Eicosanoiden
und ungesttigten Fettsuren beteiligt. Cyt P450
kommen in der Leber aber auch in vielen anderen
Geweben vor. Die Cyt P450-Systeme der Leber zeigen
geringe Substratspezifitt und setzen diverse apolare
Verbindungen mit gesttigten oder aromatischen
Ringen um (z.B. Steroidhormone, viele Arzneimittel).
Cytochrom P450-abhngige Monooxygenasen
Cytochrome P450 sind Hmproteine wie

die Cytochrome der Atmungskette (Abschn.15.2); sie kommen aber auch in Bakterien
31
Die meisten Isoformen von Cyt P450 sind induzierbar. Die dauernde Einnahme gewisser Medikamente, z.B. des Antiepileptikums Phenobarbital,
und auch von Ethanol fhren zu einer markanten
Erhhung der Cyt P450-Aktivitt in der Leber. Medikamente knnen durch andere Medikamemte in
ihrer Wirkung abgeschwcht werden (beschleunigter Abbau durch Induktion von P450), aber auch
verstrkt werden (durch kompetitive Hemmung ihres Abbaus). Arzneimittel-Interaktionen dieser
Art knnen lebensbedrohlich werden.
Cyt P450 entgiften nicht nur, sondern wandeln
auch gewisse Stoffe zu toxischen Verbindungen um
(Giftung gewisser Verbindungen durch Bio
transformation, z.B. wird aus Benzpyren in Kohlenteer, Tabakrauch etc. das hochkanzerogene 3-Hydroxybenzpyren produziert).
Die wichtigsten Phase1-Reaktionen:
Oxidation: Hydroxylierung (Cyt P450), Bildung von Epoxiden und Sulfoxiden, oxidative
Desaminierung und Dealkylierung,
Hydrolyse von Estern (z.B. von Acetylsalicylat,
Aspirin), Amiden und Ethern,
Reduktion (z.B. der NO2-Gruppe des Antibiotikums Chloramphenicol zu einer NH2Gruppe),
Methylierung (z.B. von Adrenalin zu
O-Methylnoradrenalin).
394
Entgiftung von Fremdstoffen

Es ist bemerkenswert, wie gut Mensch und Tier
mit den vielen neu entwickelten und industriell
hergestellten Verbindungen (Insektiziden, Herbiziden, Nahrungsmittelzusatzstoffen (Abschn.35.5), Arzneistoffen, Weichmachern von
Kunststoffen, Farbstoffen) zu Rande kommen.
Die Biotransformationssysteme haben sich im
Laufe der Phylogenese entwickelt, um die mannigfaltigen Gifte, welche Pflanzen, Pilze und
Mikroorganismen im Sekundrstoffwechsel
zur Abwehr von Fremdorganismen und gegen
Tierfra produzieren, unschdlich zu machen.
Sie erlauben nun, auch die meisten neuen,
nichtbiologischen Fremdstoffe zu eliminieren.
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7
Phase2-Reaktionen bilden wasserlsliche Konjugate Die Produkte der Phase1, aber auch krper
9
10
31
12
13
eigene Stoffe wie das Hmabbauprodukt Bilirubin

oder die Steroidhormone, werden ber Ester- oder
Amidbindungen mit negativ geladenen Moleklen
gekoppelt. Die entstehenden Konjugate sind genug
wasserlslich, um im Urin oder mit der Galle ausgeschieden zu werden. Alle Konjugationsreaktionen
werden durch Transferasen katalysiert. Am hufigsten wird UDP-Glucuronat, eine aktivierte Form von
Glucuronat, verwendet, um wasserlsliche glucuronidierte Derivate (z.B. Bilirubindiglucuronid) herzustellen:
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20
tenz-Transporter, die zur Familie der ABC-Transporter-Proteine gehren) bringen die konjugierten
Verbindungen aus den Zellen.
ABC-Transporterproteine
ABC bedeutet ATP-binding cassette, ein der
Proteinfamilie gemeinsamer Genabschnitt, der
eine ATP-Bindungsstelle codiert. Bei Bakterien
gehren zu dieser Familie die periplasmatischen, Nhrstoffe importierenden Permeasen
sowie die Exportproteine fr Proteine und weitere Stoffe; bei Eukaryonten sind es die im Text
erwhnten Transporter und gewisse weitere
Membrantransportsysteme.
Peroxisomen entgiften wie Cyt P450 durch oxidative Reaktionen Peroxisomen, auch als Mikroso-
men bezeichnet, sind kleine, v.a. in der Leber und

Niere vorkommende Membranvesikel, in welchen
Oxidationsreaktionen ablaufen.
Die Oxidasen verwenden O2 als Elektronenakzeptor und produzieren Wasserstoffperoxid:
RH2 C O2 ! R C H2 O2
Das entstandene H2O2 wird durch die Katalase
(2H2O2 2H2O+O2) und durch Peroxidasen eliminiert, welche die folgende, ebenfalls entgiftende
Reaktion katalysieren:
RH2 C H2 O2 ! R C 2H2 O
15
18
ATP-abhngige Transporter (Multidrug-Resis-
Die Synthese von Sulfatestern unter Verwendung

von Phosphoadenosin-Phosphosulfat PAPS, einer
aktivierten Form von Sulfat, dient z.B. zur Ausscheidung von Steroidhormonen. Andere Verbindungen werden mit Aminosuren gekoppelt,
um ausgeschieden zu werden. Wenig spezifische
Peroxisomen bauen oxidativ Verbindungen ab, fr

welche die Standardabbauwege nicht zugnglich
sind: langkettige Fettsuren (>C18), die nicht durch
mitochondriale -Oxidation abgebaut werden knnen, sowie D-Aminosuren, Polyamine, Phenole
u.a.m. Ein kleiner Teil von Ethanol (Abschn.35.2)
wird ber eine Cyt P450-abhngige Reaktion zu
Acetaldehyd oxidiert (Microsomal ethanol-oxidizing
system MEOS ):
CH3 -CH2 OH C NADPH C HC C O2

#
CH3 -CHO C NADPC C 2 H2 O
31
395
31.3 Schutz gegen reaktive Sauerstoffderivate (Reactive oxygen species ROS)
.. Tab.31.2 ROS: freie Sauerstoffradikale und H2O2. ROS entstehen, wenn ein O2-Molekl weniger als 4Elektronen
aufnimmt. Solche unvollstndigen Reduktionen von O2 knnen als Nebenreaktionen im Stoffwechsel auftreten, wofr
unten Beispiele angegeben sind. Alle ROS entstehen auch bei der Radiolyse von H2O durch ionisierende Strahlung
(UV-, Rntgen- oder -Strahlung), wobei das Hydroxylradikal das Primrprodukt ist. Alle ROS schdigen die Gewebe, am
gefhrlichsten ist wahrscheinlich das Hydroxylradikal. Radikale sind kurzlebig (1ms), knnen jedoch Kettenreaktionen
auslsen.
Reduktionszustnde
von O2
Entstehung (Beispiele)
Eliminierung
Superoxidradikal

O2+eO2
Oxidation von Hmoglobin, Xanthinoxidase-Reaktion;

gehuftes Auftreten in reperfundiertem Gewebe
Superoxiddismutase (SOD)
Wasserstoffperoxid
O2+2e+2H+H2O2
Xanthinoxidase-Reaktion;
gehuftes Auftreten in reperfundiertem Gewebe

SOD: 2 O2 +2H+O2+H2O2
Katalase, Peroxidase
Hydroxylradikal
O2+3e+3 H+
OH+H2O
O2 +H2O2 OH+OH+O2 Reaktion von Fe(II) oder

Cu(I) mit H2O2, besonders bei Eisen- oder Kupferberladung der Gewebe: H2O2+Fe2+ OH+OH+Fe3+
(Fenton-Reaktion)
Radikalfnger wie Vitamin C

und E, Bilirubin, reduziertes
Glutathion, Harnsure etc.
Wasser
O2+4 e+4 H+2H2O
31.3
Schutz gegen reaktive

Sauerstoffderivate
(Reactive oxygen species ROS)
Das hohe Redoxpotenzial von O2 ergibt einen groen negativen Wert von G fr die Oxidation von
NADH durch O2 (die biologische Knallgasreaktion
der Atmungskette; .Abb.15.2). Der groe Vorteil
von O2 als Endoxidationsmittel ist dessen geringe
Reaktivitt. Die biologischen Oxidationsreaktionen
mit O2 laufen nur ab, wenn sie durch Enzyme katalysiert werden. Gefhrlich sind hingegen die sehr
reaktiven unvollstndig reduzierten O2-Spezies, die
weniger als 4Elektronen aufgenommen haben, d.h.
nicht zu H2O reduziert worden sind (.Tab.31.2).
Der Hauptteil (ber 85%) des gesamten Sauerstoffs,
welchen der menschliche Organismus verbraucht,
wird durch die Cytochrom-Oxidase der Atmungskette reduziert. Dabei wird praktisch kein unvollstndig reduzierter Sauerstoff freigesetzt.
Die Hauptquelle von ROS ist die Ein-Elektron-Reduktion von O2 Autoxidierbare Zwischen-
produkte der Atmungskette und des Stoffwechsels

(z.B. Semichinone, Flavine) knnen ein Elektron an
O2 verlieren. Dabei entsteht das Superoxidradikal

O2 . Nebenreaktionen von Cyt P450 sind ebenfalls

wichtige O2 -Produzenten. Spontane Mutationen
in der mitochondrialen DNA knnen Fehler bei der

Weitergabe der Elektronen in der Atmungskette zur
Folge haben, so dass autoxidierbare Zwischenprodukte einzelne Elektronen direkt an O2 abgeben un
ter Bildung von O2 . Da Mitochondrien ber kein
effizientes DNA-Reparatursystem verfgen, hufen
sich Mutationen im mitochondrialen Genom an.
Im allgemeinen Stoffwechsel produzieren insbesondere die FAD-abhngigen Oxidasen (z.B. die
Xanthinoxidase im Abbau der Purinbasen) H2O2

und als Nebenprodukt auch O2 . In den Erythrozyten produziert die Autoxidation von Hmoglobin
zum Methmoglobin ebenfalls das Superoxidradikal:
spontan
Hb .Fe2C / C O2 ! Hb .Fe3C / C O2
Met Hb
Auch ionisierende Strahlung produziert ROS Die
Radiolyse von H2O durch ionisierende Strahlung

(UV, Rntgen- und -Strahlung) produziert Hydroxylradikale und Elektronen:
hv
H2 O ! OH C e C HC

O2 C e ! O2
ROS schdigen alle Zellbestandteile In der DNA
verursachen ROS Strangbrche und Vernderungen
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einzelner Basen. In Proteinen sind Methionin-, Histidin- und Tryptophanreste besonders empfindlich
gegenber ROS. In den Membranlipiden lsen ROS
Radikalkettenreaktionen ungesttigter Fettsuren
aus.
Granulozyten bilden ROS zur Abwehr von
Bakterien Granulozyten und Monozyten phago-
zytieren Mikroorganismen (Angeborene Immunitt, Abschn.32.1) ; sie besitzen in ihrer Plasmamembran eine NADPH-Oxidase, die mit NADPH
aus dem Pentosephosphatzyklus das Superoxidradi
kal O2 produziert:

2 O2 C NADPH ! 2 O2 CHC C NADPC

Die Abschnrung des Phagosoms von der Plasmamembran ist begleitet von einer Aktivierung der
Oxidase: Superoxidanionen werden ins Innere des
Phagosoms abgegeben und der nichtmitochondriale Sauerstoffverbrauch der Zelle steigt innerhalb

von Sekunden an (Respiratory burst). Aus O2 entstehen H2O2 und hochreaktive Hydroxylradikale
(.Tab.31.2). Die ROS zerstren die Membranlipide
der Mikroorganismen in den Phagosomen; die phagozytierende Zelle selbst schtzt sich vor dem H2O2,
das durch die Phagosomenmembran diffundiert,
durch Katalase und glutathionabhngige Enzyme
(s. unten).
Tripeptid und dient der Zelle als Redoxpuffer

(.Abb.31.4). Reduziertes Glutathion (GSH),
das in den Zellen in relativ hoher Konzentration
vorkommt (0.510mM), hlt die Cysteinreste
intrazellulrer Proteine in reduziertem Zustand.
Auerdem fungiert GSH als Elektronenakzeptor
bei der Entgiftung von Wasserstoffperoxid durch
die Glutathion-Peroxidase (mit Selenocystein an
der aktiven Stelle; Abschn.35.4) katalysierten
Reaktion:
H2 O2 C 2 GSH ! GSSG C 2 H2 O
Die Glutathion-Reduktase reduziert das oxidierte
Glutathion (GSSG) wieder zurck:
GSSG C NADPH C HC ! 2 GSH C NADPC

Die Entgiftung von H2O2 mit GSH ist besonders
wichtig in den Erythrozyten, in denen bei der Oxi
dation von Hmoglobin zu Met-Hmoglobin O2
und damit auch H2O2 entsteht. Met-Hb wird durch
die NAD(P)H-abhngige Met-Hmoglobin-Reduktase zu Hb reduziert.
Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase-Mangel
Der X-chromosomal vererbte Defekt fhrt
zu ungengender Produktion von NADPH
(Abschn.16.4): Met-Hb und GSSG werden
unzureichend reduziert, Schdigung der
Erythrozytenmembran fhrt zu Hmolyse.
Auslser sind gewisse Malariamittel wie
Primaquin und Inhaltsstoffe der Favabohne
(Favismus). Der Gendefekt kommt v.a. in
Malariagebieten vor, da er eine leicht erhhte
Resistenz gegen Malaria mit sich bringt. Ein
weniger reduzierendes Milieu ist offenbar
ungnstig fr die Plasmodien, die Malariaerreger.
Enzymatische und nichtenzymatische Reaktionen schtzen die Zelle vor ROS Alle aerob leben-
den Organismen haben Schutzmechanismen gegen

ROS entwickelt. Obligate Anaerobier verfgen ber
keine solchen Mechanismen und berleben nicht in
der Gegenwart von O2. Die folgenden Enzyme sind
zur Entgiftung der ROS besonders wichtig:
Die Superoxid-Dismutase (SOD)
oxidiert

und reduziert je ein O2 -Molekl:

2 O2 C2 HC ! O2 C H2 O2
Die Hm-haltige Katalase zerstrt Wasserstoffperoxid:
2 H2 O2 ! 2 H2 O C O2
Auch die Glutathionperoxidase macht H2O2
unschdlich. Glutathion ist ein cysteinhaltiges
Antioxidanzien und Radikalfnger brechen Radikalkettenreaktionen ab, indem sie ROS nichtenzymatisch abfangen:
Wasserlsliches Ascorbat (Vitamin C) schtzt

gelste Substanzen auerhalb und innerhalb
der Zellen (Konzentration im Blutplasma im
397
31.3 Schutz gegen reaktive Sauerstoffderivate (Reactive oxygen species ROS)
31
.. Abb.31.4 Glutathion. Der Glutamatrest

ist ber eine -Isopeptidbindung mit dem
folgenden Cysteinrest verbunden. Die
SH-Gruppe des reduzierten Glutathions (GSH)
wirkt als Reduktionsmittel. Durch Oxidation
entsteht oxidiertes Glutathion, bei dem
zwei Tripeptide ber eine Disulfidbindung
verknpft sind (GSSG). Das GSH/GSSG-System
wirkt als allgemeiner Redoxpuffer der Zelle
zweistelligen M Bereich, intrazellulr im

einstelligen mM Bereich!).
Fettlsliche Tocopherole (Vitamin E) schtzen
insbesondere die Membranlipide durch Abbrechen von Radikalkettenreaktionen; Ascorbat
neutralisiert dabei anfallendes Tocopherolradikal.
Als weitere Antioxidanzien und Radikalfnger
wirken Harnsure (nur in hheren Primaten; Abschn.19.5), Bilirubin (wird durch
Reduktion aus Biliverdin, dem primren
Abbauprodukt des Hms, erhalten), reduziertes Glutathion (GSH, s. oben), Carotinoide
(Provitamin A) und Thioredoxin, ein kleines
Redoxprotein mit Dithiol/Disulfid-Gruppierung, das an der Reduktion von Cysteinresten
von Proteinen beteiligt ist (.Abb.19.4).
Mit Zellkomponenten, welche trotz dieser Schutzmechanismen oxidativ beschdigt worden sind, verfhrt die Zelle in verschiedener Weise: DNA wird
wenn mglich repariert, whrend Proteine und
Lipide abgebaut und durch neu synthetisierte Molekle ersetzt werden; irreparable Schden lsen die
Apoptose oder Nekrose der Zelle aus.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517250-0
31.2 Biotransformationen (Entgiftungs
reaktionen)
31.3 Schutz gegen reaktive Sauerstoffderivate
(Reactive oxygen species ROS)
399
Immunsystem
32.1
Angeborene Immunitt400
32.2
Adaptive Immunitt: Antikrper aus B-Zellen

und zellulre Abwehr mit T-Zellen 402
32.3
Klonale Selektion der B-Zellen und T-Zellen 403
32.4
Synthese, Struktur und Antigenbindung

der Antikrper404
32.5
Cytotoxische T-Zellen410
32.6
Immuntoleranz und Autoimmunkrankheiten 410

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Kapitel 32Immunsystem
Alle Lebewesen haben Schutzsysteme gegen die

Besiedelung durch potenziell pathogene (krankmachende) fremde Agenzien und Organismen entwickelt. Prokaryonten wehren sich gegen Virusbefall
mit dichten Zellwnden und Restriktionsenzymen,
die eingedrungene fremde DNA spalten. Die Abwehr
mehrzelliger Organismen beruht teilweise auf hnlichen Barrieren: Haut bei Tieren oder Zellwnde bei
Pflanzen bieten Schutz gegen auen, und FremdRNA wird abgebaut. Vertebraten setzen zudem die
spezialisierten Zellen des Immunsystems zur Abwehr
von Viren sowie fremder und auch krpereigener pathogener Zellen ein. In diesem Kapitel wird die weitaus am besten verstandene Immunabwehr des Menschen und anderer hherer Vertebraten besprochen.
Die angeborene Immunabwehr (Innate immunity) verteidigt den Organismus mit unspezifischen
Abwehrmechanismen, die unabhngig von einem
vorangehenden Kontakt mit dem pathogenen Agens
jederzeit und sofort wirksam sind. Bestimmte im
Blut zirkulierende Zellen des Immunsystems (Granulozyten u.a.m.) und gewisse Blutproteine (Komplementsystem) erkennen bakterielle Zellwandbestandteile und eliminieren eingedrungene Bakterien
durch Phagocytose (Aufnahme und Verdauung)
oder Lyse (Auflsung).
Die erworbene, adaptive Immunantwort (Adaptive immunity) hingegen richtet sich spezifisch
gegen jedes neue als krperfremd erkannte Agens.
Sie umfasst zwei verschiedene Typen von Reaktionen: Bei der durch Proteine in den Krperflssigkeiten vermittelten humoralen Immunantwort
erkennen spezifische Immunzellen das Pathogen
als krperfremd, darauf vermehren sie sich und
produzieren spezifische Abwehrproteine, die Immunglobuline (Antikrper); bei der zellulren
Immunantwort werden infizierte, beschdigte oder
transformierte Zellen durch spezialisierte Zellen des
Immunsystems als krperfremd erkannt und eliminiert. Die adaptiven Immunreaktionen werden
durch Zellen der angeborenen Abwehr nach Kontakt mit einem pathogenen Agens ausgelst.
19
32.1
20
Die angeborene Immunitt beruht auf Barrieren,

phagozytierenden Zellen und dem Erkennen
Angeborene Immunitt
pathogentypischer Strukturen Die einfachsten
Mittel gegen das Eindringen pathogener Agenzien

in einen Organismus sind widerstandsfhige Hautstruktur, Flimmerepithel, Schleimschicht, stark saurer Magensaft sowie extrazellulre Matrix und die
Plasmamembran jeder einzelnen Zelle. Zahlreiche
Sekrete (Speichel, Trnenflssigkeit, Nasensekret,
Zervix/Vulva-Sekret, Muttermilch) enthalten antibakteriell wirkendes Lysozym (Abschn.5.3) sowie
das bakterizide, fungizide und antiviral wirksame
Glykoprotein Lactoferrin (Lactotransferrin), das
Fe3+-Ionen bindet.
Die Abwehrzellen im Blut (Granulozyten, Monozyten/Makrophagen), die bei Bedarf auch ins
Gewebe einwandern, phagozytieren eingedrungene
Krankheitserreger und verdauen sie in ihren Lysosomen. Daran beteiligt sind auch die aus Monozyten oder Lymphozyten entstehenden dendritischen
Zellen , die besonders hufig in Oberflchengeweben und Schleimhuten vorkommen.
Das Komplementsystem (lat. complementum,
Ergnzung) besteht beim Menschen aus ber 25
miteinander in Wechselwirkung tretenden Komplementproteinen, die in der Leber hergestellt werden
und im Blut sowie der interstitiellen Flssigkeit
zirkulieren. Antigen-ligandierte Antikrper (Abschn.32.4), bakterielle Lectine (Abschn.5.3) und
andere Bestandteile der Pathogenoberflche aktivieren gewisse Komplementproteine und lsen
proteolytische Kaskaden aus, die weitere Komplementproteine aktivieren. Die aktivierten Komplementproteine lysieren die pathogene Zelle, indem
sie in deren Plasmamembran Poren bilden. Aktiviertes Komplement wirkt zudem positiv chemotaktisch auf Phagozyten, welche die Bedeckung der
Bakterienoberflche mit Komplementproteinen
(Opsonisierung) erkennen, das Bakterium aufnehmen und verdauen.
Viele Zellen besitzen Abwehrgene aktivierende
Oberflchenrezeptoren aus der Familie der Toll-like
receptors (TLR) TLR erkennen Lipopolysaccha-
ride, bakterielle Flagellen oder bakterientypische

CpG-reiche DNA. Auf diese Weise aktivierte TLR lsen eine intrazellulre Signaltransduktion aus, die zur
Aktivierung der NF-kappaB-Transkriptionsfaktoren
fhrt. Die dadurch aktivierten Gene stimulieren je
nach Signalstrke entweder berlebensreaktionen
der Zelle oder deren Apoptose (Abschn.27.4).
32
401
32.1Angeborene Immunitt
Auerdem werden auf diesem Weg Entzndungsreaktionen und die Synthese antibakteriell wirkender
Defensine stimuliert. Die TLR und die Defensine
sind stammesgeschichtlich alte Errungenschaften,
homologe Vertreter finden sich auch in Pflanzen.
complex) Proteine und verstrken die Abwehr
MHC-Proteine dienen zur Charakterisierung

krpereigener Zellen, indem sie Peptidfragmente
aller im Cytosol vorkommenden Proteine an der
Zelloberflche prsentieren.
Defensine
Defensine sind antimikrobiell wirksame
Peptide (kationisch, 1845Aminosurereste,
viel Cys, zerstren Membran). Diese krpereigenen Antibiotika werden von neutrophilen
Granulozyten und Epithelzellen synthetisiert
und sezerniert.
Virusinfizierte Zellen verhindern die virale Replikation, andernfalls werden sie durch andere Zellen
eliminiert Virale Partikel und Hllen aktivieren
das Komplementsystem nicht; nur die DNA- oder

RNA-Genome der Viren stellen erkennbare Unterschiede zu den Wirtszellen dar. Gegebenenfalls
auftretende virale dsRNA induziert die Produktion
von Interferonen IFN (Abschn.28.8), welche die
Zelle und benachbarte Zellen zur Produktion einer
RNase anregen; in der Folge wird einzelstrngige
RNA (ssRNA wie mRNA) abgebaut und die Proteinsynthese in der infizierten Region gestoppt. Zudem
spalten die Wirtszellen dsRNA in kurze Fragmente
(Small interfering RNA, siRNA; Abschn.11.3) und
eliminieren die virale mRNA auch auf diese Weise.
Phagozytierende weie Blutzellen (Makrophagen)
bauen danach die befallenen Zellen ab.
Interferone IFN
Interferone sind kleine z.T. glykosylierte
Proteine, die im Rahmen der angeborenen
Immunabwehr bei Virusinfektionen und auch
als Antwort auf mitogene Signale gebildet
werden: IFN- aus B- und T-Zellen und INF-
aus Fibroblasten und Epithelzellen wirken antiviral und antiproliferativ; INF- aus T-Zellen,
Lymphozyten und natrlichen Killerzellen moduliert die Immunantwort (induziert Cytokine,
aktiviert Immunzellen u.a.m.).
Natrliche Killerzellen (Natural killer cells, NK

cells) binden an MHC (Major histocompatibility
MHC I
MHC II
Peptid
2-Mikroglobulin
MHC I-Proteine kommen auf allen gesunden

Zellen vor. Sie prsentieren von Proteasomen ge-
lieferte Peptide aus Proteinen, welche in der Zelle

synthetisiert worden sind: Pathogeninfizierte oder
transformierte Zellen, die abartige Proteine synthetisieren, werden von NK Zellen bzw. von cytotoxischen T-Zellen (auch CD8+-Zellen genannt,
charakterisiert durch den Oberflchenmarker fr
den immunologischen Phnotyp der Zelle CD8,
Cluster of differentiation8) erkannt und eliminiert
(Abschn.32.5). Virusbefallene Zellen und Tumorzellen tragen hufig wenig oder keine MHC
I-Proteine an ihrer Oberflche und werden von
den Killerzellen ebenfalls zur Apoptose gezwungen.
MHC II-Proteine kommen nur auf spezialisierten antigenprsentierenden Zellen wie den
dendritischen Zellen vor und prsentieren von
Endosomen und Lysosomen gelieferte Peptide aus
phagozytiertem Material. Sie sind Teil der humoralen Immunantwort und stimulieren T-Helferzellen
(CD4+, Oberflchenmarker CD4) zur Produktion
spezifischer Antikrper (T-Zell-Rezeptoren).
Die menschlichen MHC werden als HLA (Human leukocyte antigen) bezeichnet.
402
bezeichnet. Die Verabreichung abgetteter Bakterien ruft eine adaptive Immunantwort hervor, als
Antigene wirken dabei die bakteriellen Lipopolysaccharide sowie andere bakterielle Makromolekle, die ber eine lokale Entzndungsreaktion des
Gewebes immunkompetente Zellen aktivieren. Die
adaptive Immunreaktion ist hochspezifisch: Der
Austausch eines einzigen Aminosurerests kann ein
krpereigenes Protein zu einem Antigen machen.
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Adjuvantien
Zur Verstrkung der Immunreaktion werden

bei Impfungen bakterielle Lipopolysaccharide
als Adjuvans (Hilfsstoff ) dem Antigen zugegeben. Die Bakterienbestandteile fhren zu einer
starken Immunreaktion unter Einbezug der
lokalen Lymphknoten.
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Die adaptiven Immunreaktionen sind Sache der

Lymphozyten Dabei sind zu unterscheiden die
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.. Abb.32.1 Lymphorgane. Die aktiven Zellen des Immunsystems stammen aus den primren Lymphorganen, dem
Thymus (T) und dem Knochenmark (B). Die Zellen werden in
die Blutzirkulation entlassen und in den sekundren Lymph
organen gesammelt, wo sie sich differenzieren. Sekundre
Lymphorgane: L, Lymphknoten; M, Milz; N, Nasenrachenmandeln und Mandeln; P, Peyer-Plaques in der Dnndarmwand
32.2
Adaptive Immunitt:
Antikrper aus B-Zellen
und zellulre Abwehr
mit T-Zellen
Das angeborene Immunsystem erkennt krperfremde Stoffe und regt das adaptive Immunsystem zur Produktion spezifischer Antikrper an
Eine die adaptive Immunantwort auslsende, Antikrper generierende Substanz wird als Antigen
humorale Immunantwort (lat. humor, Flssigkeit)

der B-Lymphozyten (Antikrperbildung) und die
zellulre Immunantwort der T-Lymphozyten (zellulre Immunitt). Die Lymphozyten stammen wie
alle Blutzellen von den hmatopoietischen Stammzellen ab. Die primren Lymphorgane , d.h.
Knochenmark (Bone marrow, B-Lymphozyten,
B-Zelle; .Abb.32.1) und Thymus (T-Lymphozyten, T-Zellen) liefern stetig neue Zellen nach. Die
frischen Lymphozyten wandern zu den sekundren
Lymphorganen (Nasenrachenmandeln, Mandeln,
peripheren Lymphknoten, Milz und Peyer-Plaques
im Dnndarm), wo sie mit Antigenen zusammentreffen.
Der Kontakt der B-Lymphozyten mit Antigenen lst die Bildung von Antikrpern (Immunglobulinen) aus, die von den B-Zellen sezerniert werden und im Blut zirkulieren. Die Antikrper binden
spezifisch die Antigene, welche ihre Produktion angeregt haben, und verhindern dadurch, dass Viren
oder Toxine an potenzielle Wirtszellen binden.
T-Lymphozyten besitzen membranstndige
antikrperhnliche T-Zell-Antigen-Rezeptoren
(T-cell receptors TCR). Sie erkennen damit Mikroor-
ganismen wie auch infizierte Wirtszellen, Fremdzellen und transformierte krpereigene Zellen und
tten diese ab. Dabei arbeiten die T-Zellen mit den
403
32.3 Klonale Selektion der B-Zellen und T-Zellen
dendritischen Zellen des angeborenen Immunsys-
tems zusammen.
Die dendritischen Zellen entstehen aus Monozyten sowie den Vorlufern von B- und T-Zellen; sie
finden sich besonders reichlich in den Oberflchengeweben wie Haut, Rachen usw., wo sie mit ihren
verzweigten Cytoplasmaauslufern die Umgebung
abtasten, aufgesprte Pathogene, z.B. Mikroorganismen, phagozytieren und in Lysosomen verdauen.
Die MHC II-Proteine der dendritischen Zellen prsentieren die dabei entstehenden Proteinfragmente an deren Zelloberflche. In den Lymphknoten erkennen entsprechende Antigen-Rezeptoren
von T-Zellen die von MHC II-Proteinen der dendritischen Zellen prsentierten Peptide: Dieser Kontakt
aktiviert selektiv die entsprechenden T-Zellen. Die
aktivierten T-Zellen gelangen aus den Lymphknoten
in die Blutzirkulation und werden in der Peripherie
das Antigen erkennen und die entsprechenden Mikroben angreifen.
T-Zellen haben cytotoxische, T-Helferzellen zellaktivierende Funktionen Cytotoxische
T-Zellen tten infizierte Zellen ab; T-Helferzellen

untersttzen die Aktivierung von Makrophagen
(Fresszellen), B-Zellen und cytotoxischen T-Zellen.
Sie sezernieren lokal wirkende Cytokine, z.B. die
als Interleukine (IL) bezeichneten Signalproteine
(Abschn.28.8). Im Gegensatz zu den B-Zellen,
die Antikrper ins Blut sezernieren und damit einen
Ferneffekt erzielen, wirken die T-Zellen ausschlielich vor Ort.
Zellreiches Immunsystem
Der menschliche Krper enthlt etwa
21012Lymphozyten; die gesamte Zellmenge
des Immunsystems entspricht derjenigen
von Leber oder Gehirn. Das Immunsystem
zeichnet sich zudem durch seinen hohen
Zellumsatz aus (Problem bei Chemotherapie;
Abschn.19.4).
32.3
Klonale Selektion der B-Zellen

und T-Zellen
Die adaptive Immunantwort beruht auf der

selektiven Vermehrung einzelner Zellen, welche
32
das Antigen binden Jede B-Zelle und T-Zelle
prsentiert auf ihrer Oberflche einen bestimmten

Antikrper, der ein spezifisches Antigen bindet.
Alle B-Zellen zusammen prsentieren insgesamt
ungefhr 109 verschiedene Antikrper. Diese groe
Vielfalt der Antikrper kommt durch genetische
Rekombination zustande (Abschn.32.4). Die antikrperprsentierenden Zellen, welche kein passendes Antigen finden (die groe Mehrheit), teilen
sich nicht und sind dem normalen Zellumsatz unterworfen. Bindet jedoch ein Antigen an eine der
antikrperprsentierenden Zellen, beginnt diese,
sich zu teilen und zu einem Klon zu expandieren
(.Abb.32.2). Bei der primren humoralen Immunreaktion differenzieren sich die auf diese Weise
stimulierten B-Zellen zu antikrpersezernierenden
Plasmazellen. Im Fall der T-Zellen entstehen fr die
zellulre Abwehr bereite T-Zellklone.
Ein Antigen stimuliert viele Zellen, die Immun
antwort ist polyklonal Selbst einfache Antigene
wie beispielsweise Dinitrophenol (Strukturformel,

Abschn.15.3) stimulieren hunderte verschiedener
Zellen, deren Klone danach ebenso viele verschiedene gegen Dinitrophenol gerichtete Antikrper
produzieren werden.
Monoklonale Antikrper
Monoklonale Antikrper werden von einem
Zellklon produziert und sind dementsprechend einheitliche Proteine. Sie knnen
mittels Zellkultur in groer Menge zu technischen oder medizinischen Zwecken (Hemmung chronischer rheumatischer Reaktionen
und Tumortherapie) bereitgestellt werden
(Abschn.37.7). Impfungen von Organismen
ergeben immer eine polyklonale Antwort,
d.h. viele verschiedene Antikrper gegen das
Impfantigen.
Das Immunsystem erinnert sich an einen vorausgegangenen Kontakt mit einem Antigen; die sekundre Immunantwort beruht auf dem immunologischen Gedchtnis Naive B- und T-Zellen, die
noch nie Kontakt mit einem Antigen gehabt haben,

entwickeln sich nach dem ersten Antigenkontakt
nicht nur zu Effektorzellen sondern auch zu Gedchtniszellen (Memory cells). Bei einem spteren
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.. Abb.32.2 Klonale Expansion von Pr-Lymphozyten nach Stimulierung mit Antigen. Die aktiven Zellen des Immunsystems
stammen von wenigen Vorluferzellen im Knochenmark ab, die sich laufend teilen und neue Pr-B-Lymphozyten bilden. Diese
Zellen entwickeln sich zu Antikrper prsentierenden B-Lymphozyten mit einem groen Repertoire verschiedenster Antigen-Bindungsstellen. Trifft eine dieser Zellen auf ein passendes Antigen, beginnt sie sich rasch zu teilen und die Nachkommen
entwickeln sich zu einem Klon Immunglobulin (Ig)-sezernierender Plasmazellen. Die Pr-Lymphozyten produzieren die -Kette
ihres zellgebundenen IgMs. Durch Reifungsprozesse wird nachfolgend eine andere Ig-Klasse, ein IgG mit derselben Antigenbindungsspezifitt, produziert und ins Plasma sezerniert. Infolge dieser Reifung wird nicht nur die Klasse des Antigens gewechselt,
nach Mutationen in den hypervariablen Regionen des Antikrpers nimmt auch die Affinitt fr das Antigen zu
zweiten Kontakt mit dem Antigen vermehren sich

die langlebigen Gedchtniszellen rasch und produzieren nicht nur grere Mengen der spezifischen
Antikrper, sondern auch besser bindende Antikrper (sekundre Immunantwort; .Abb.32.3).
Die jahrelange Dauer des Impfschutzes ist auf die
Gedchtniszellen zurckzufhren.
32.4
Synthese, Struktur
und Antigenbindung
der Antikrper
Die Antikrpervielfalt entsteht durch Rekombination vieler verschiedener Gensegmente Die
noch keine Antikrper synthetisierenden B-Zellvorlufer im Knochenmark besitzen in einer inaktiven

Region des Genoms eine groe Zahl verschiedener
Exons, welche die diversen Regionen der Antikrper codieren. Whrend der initialen Vermehrung
der Vorluferzellen wird ein spezialisierter Rekombinationsmechanismus aktiviert: Die Gensegmente
werden nach dem Zufallsprinzip so rekombiniert,
dass in jeder einzelnen Zelle ein bestimmtes An-
405
32.4 Synthese, Struktur und Antigenbindung der Antikrper
32
.. Abb.32.3 Primre und

sekundre Immunantwort.
Acht bis zehn Tage nach
dem Kontakt mit einem
neuen Antigen erscheinen
die ersten Antikrper gegen
dieses Antigen im Blut. Bei
einem zweiten Kontakt mit
demselben Antigen reagiert
das Immunsystem dank der
Gedchtniszellen nicht nur
schneller, sondern auch mit
hherer Konzentration und
Aviditt der Antikrper. Injektion des Antigens A; Injektion
des Antigens B
tikrper-Gen zusammengestellt wird. Dieses neue

Gen kommt in eine Region mit aktivem Promotor
zu liegen und wird transkribiert (.Abb.32.4)
Diversitt der Antikrper
Das Ausma der durch Rekombination erhaltenen Antikrperdiversitt lsst sich aus der
Anzahl der verschiedenen Gensegmente abschtzen. Die Zahlen gelten fr den Menschen:
H-Kette: 35VH-Gensegmente, 23D-Gensegmente und 45J-Gensegmente ergeben 35235=4025Varianten,
L-Kette: 900 verschiedene Kombinationen,
Anzahl der Antigenbindungsstellen:
3,6106.
Neben der Rekombination tragen zustzliche Mechanismen zur weiteren Diversifizierung der Antikrper bei: alternatives Spleien, Einfgen zustzlicher Basen sowie somatische Hypermutation in
den hypervariablen Regionen der V-und J-Gensegmente. Insgesamt ergeben sich etwas ber 109 verschiedene B-Zellvorlufer, von denen jeder seinen
eigenen Antikrper auf der Oberflche prsentiert.
Dieses groe Repertoire enthlt in jedem Fall einige
Zellen, welche ein bestimmtes Antigen binden.
Ein antikrperprsentierender unreifer Lymphozyt findet sein passendes Antigen in den
Lymphknoten Die dendritischen Zellen phago-
zytieren Pathogene am Ort der Infektion und nehmen sie in ihre Lysosomen auf. Danach wandern
die dendritischen Zellen ber die Lymphbahnen in
die lokalen Lymphknoten und prsentieren die an
MHC II-Proteine gebundenen Proteinfragmente
des Pathogens an ihrer Oberflche. Die unreifen,
antikrperprsentierenden Lymphozyten (B- und
T-Zellen) gelangen vom Knochenmark ber das
Blut in die Lymphknoten und treffen dort auf die
antigenprsentierenden dendritischen Fresszellen. Enthlt eines der Proteinfragmente auf einer
dendritischen Zelle ein an den Antikrper eines
der Lymphozyten bindendes Epitop (antigene
Determinante, Antikrperbindungsstelle), wird
dieser Lymphozyt stimuliert. Er teilt sich, ein Klon
entsteht und wandert aus dem Lymphknoten in die
Blutzirkulation. Eine stimulierte B-Zelle (Plasmazelle) sezerniert ihren Antikrper ins Plasma; eine
stimulierte T-Zelle verrichtet ihre zellulre Immunfunktion (Abschn.32.5). Nicht stimulierte
Lymphozyten verlassen die Lymphknoten auf dem
Lymphweg und gelangen ber den Brustlymphgang
(Ductus thoracicus) zurck in die Blutzirkulation.
Die meisten Immunglobuline besitzen zwei
Antigenbindungsstellen Die einfachsten Antikrper bestehen aus zwei schweren Ketten (Heavyoder H-chains mit etwa 440 Aminosureresten)
und zwei leichten Ketten (Light oderL-chains mit
220Aminosureresten). Ihre Form gleicht einem Y

mit je einer Antigenbindungsstelle an den beiden
Astenden (.Abb.32.5). Flexible Verbindungsst-
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407
cke im Astwinkel erlauben den Antikrpern, den

Abstand der beiden Antigenbindungsstellen dem
Antigen anzupassen.
Fnf Antikrperklassen mit unterschiedlicher

Funktion kommen bei Sugern vor Die Antikrperklassen IgA (Immunglobulin A), IgD, IgE,
IgG und IgM sind jeweils durch eine spezifische
schwere Kette charakterisiert, die -, -, -, - oder
-Kette. Zwei leichte Ketten, und , kommen in
allen Klassen vor (.Tab.32.1). Obschon kein funktioneller Unterschied zwischen den - und - Ketten
zu bestehen scheint, kommt immer nur ein Typ pro
Zelle vor: Die zwei bis zehn Antigenbindungsstellen eines Immunglobulinmolekls sind immer
identisch. Das gleiche Epitop kann von Antikrpern verschiedener Klassen erkannt werden, welche
in diesem Fall als Antikrper-Isotypen bezeichnet
werden.
Sowohl die leichten als auch die schweren Ketten der Antikrper werden an mehreren Stellen
glykosyliert. Die Glykosylierung schtzt die Antikrper gegen proteolytischen Abbau und verbessert
deren Wasserlslichkeit; die Antigenbindung wird
nicht wesentlich beeinflusst. Jede Antikrperklasse
besitzt ihr eigenes Muster der Positionen und Strukturen der Oligosaccharide. Aufgrund der Variabilitt der Glykosylierungen differieren die Moleklmassen innerhalb einer Antikrperklasse.
In unreifen B-Zellen kommt IgM
an der
Zelloberflche vor; in naiven reifen B-Zellen tritt
zustzlich IgD auf. Diese Zellen treffen in den peripheren Lymphorganen auf die antigenprsentierenden Zellen. Nach Kontakt mit einem passenden
Epitop teilt sich die B-Zelle, und ihre Nachkommen
sezernieren zunchst weiter IgM. In zwei Wochen
32
reifen diese B-Zellen zu IgG-sezernierenden Plasmazellen oder langlebigen Gedchtniszellen fr

eine allfllige sekundre Immunantwort. Whrend
des Reifungsprozesses der sezernierenden Zellen
wird die Mutationsfrequenz des exprimierten IgGGens erhht (somatische Hypermutation in den
hypervariablen Regionen; .Abb.32.5). Das Antikrper-Repertoire wird dadurch vergrert und
es entstehen IgG mit erhhter Affinitt fr das Antigen.
IgM ist nicht nur das erste Immunglobulin an
der Zelloberflche, es wird auch bei der primren
humoralen Immunantwort sofort nach Antigenkontakt sezerniert als ein sternfrmiges Molekl
aus fnf Y-frmigen Immunglobulinmoleklen,
die ber Disulfidbrcken und eine kleine J-Kette
miteinander verbunden sind (.Tab.32.1). Bereits
ein einzelnes antigengebundenes IgM-Molekl
kann die Lyse eines zellulren Pathogens durch das
Komplementsystem einleiten.
Die Hauptmenge der Immunglobuline im Blut
ist IgG, das durch reife Plasmazellen bei der sekundren Immunantwort sezerniert wird Der
COOH-terminale Teil dieser Y-frmigen Antikrper (Fc-Teil; .Abb.32.5) bindet an die Fc-Rezeptoren der Phagozyten, welche die Antigen-Antikrperkomplexe aufnehmen und verdauen. Auf diese
Weise werden ganze Bakterien markiert und ber
Phagozytose eliminiert. Wie IgM aktiviert auch
Antigen-ligandiertes IgG das Komplementsytem.
IgA wird in Krpersekrete wie Speichel, Milch oder
Trnen abgegeben.
IgE vermittelt entzndliche und allergische
Reaktionen Allergien sind berempfindlich-
keitsreaktionen gegen Antigene. Sie knnen relativ
.. Abb.32.4 Die Diversitt der Antikrper entsteht durch genetische Rekombination. Die Exons fr bestimmte Abschnitte
der Antikrper kommen erst durch einen Rekombinationsprozess zusammen, wobei alle Codierungselemente einer Antikrperkette in einem Gen stromabwrts von einem Promotor zusammengestellt werden. In menschlichen Keimzellen liegen auf
Chromosom1 51VH-Gensegmente der variablen Region der H-Ketten vor. In einer anderen Regionen desselben Chromosoms
befinden sich 27Gensegmente mit D-Exons (D steht fr Diversitt), 6J-Exons (J steht fr joining, verbindend) und 8C-Exons
fr die konstante Region der schweren Ketten. Whrend der Reifung eines Pr-Lymphozyten zum Lymphozyten werden die
Gensegmente so rekombiniert, dass sie in der ReihenfolgeL-V-D-J-C (L steht fr Leader sequence, d.h. Prsequenz, das Signal fr
den cotranslationalen Import der Kette ins ER, Abschn.22.3) stromabwrts hinter einen aktiven Promotor zu liegen kommen.
Nach der Reifung des primren Transkripts zur mRNA wird die schwere Kette des Immunglobulins durch Ribosomen an der
ER-Membran (raues ER) synthetisiert. Eine analogeL-V-J-C-Rekombination auf Chromosom2 fhrt zur Bildung des aktiven
Gens der leichten Kette. Die H- und L-Ketten werden im Golgi-Apparat ber Disulfidbrcken kovalent miteinander verbunden
und von der Zelle sezerniert. Beim Klassenwechsel vom IgM zum IgG wird die -Kette des IgM aufgrund einer entsprechenden
Rekombination durch die -Kette des IgG ersetzt
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b
.. Abb.32.5 Sezerniertes Immunglobulin G (IgG). aSchematische Darstellung der Domnenstruktur eines IgG. Die hufigsten
Antikrper sind vom IgG-Typ. Sie verfgen im Bereich der NH2-Termini der H-Ketten (Heavy chains) und L-Ketten (Light chains)
ber zwei identische Bindungsstellen fr dasselbe Antigen. VL, variable Region der leichten Kette; VH, variable Region der schweren Kette; CL, konstante Region der leichten Kette; CH, konstante Region der schweren Kette; S-S, Disulfidbrcken. Antikrper
knnen durch spezifische proteolytische Spaltung in den flexiblen Regionen in typische Fragmente zerlegt werden. Durch Proteolyse mit Papain entstehen zwei Fab- Fragmente (Antigen-binding fragments) und ein Fc-Fragment (Crystallizable fragment).
Durch Spaltung mit Pepsin entstehen das (Fab)2 -Fragment (nach Reduktion 2Fab) und das Fc-Fragment. bRumlicher Verlauf
der Polypeptidkette ohne Seitenketten. Links: zwecks besserer Erkennbarkeit sind die schwere und leichte Kette voneinander
getrennt; Rechts: schwere und leichte Kette als Dimer. Die direkten Kontakte mit dem Antigen erfolgen ber die hypervariablen
Schleifen oder Complementarity determining regions (CDRs). Je drei solcher Schleifen von H-Kette und L-Kette bilden zusammen
die Bindungsstelle. Dank der Flexibilitt der Gelenkregion knnen IgG-Antikrper zwei Antigenmolekle in verschiedener
rumlicher Lage binden
32
409
.. Tab.32.1 Klassen der Immunglobulinea

Ig-Typ
IgA
IgD
IgE
IgG
IgM
360720kDa
172kDa
196kDa
150kDa
935kDa
g/L im Serum
3,5
0,03
0,00005
13,5
1,5
H-Kette
L-Kette
oder
oder
oder
oder
oder
Zusatzkette
Struktur
(22/22)1-3J
J
22/22
22/22
22/22
(22/22)5J
Die fnf Typen der schweren Ketten definieren die Immunglobulinklassen. Nur zwei verschiedene leichte Ketten
kommen vor, die bei allen Immunglobulinen gefunden werden. Das Vorkommen der schweren und leichten Ketten ist
zelltypisch, in einer Zelle findet sich immer nur einer der H- und L-Typen. Die Serumkonzentrationen der verschiedenen Immunglobulinklassen liegen in einem bemerkenswert weiten Bereich.
harmlos sein, wie Heuschnupfen oder Asthma, oder

auch lebensbedrohend wie Reaktionen auf Fremdblut bei Transfusionen. Vier Typen von berempfindlichkeitsreaktionen mit verschiedenen Mechanismen sind heute bekannt. Im Fall des TypsI (z.B.
Heuschnupfen und Asthma) bindet der Fc-Teil des
IgE (.Tab.32.1) mit hoher Affinitt an eine Klasse
von Fc-Rezeptoren, welche auf basophilen Granulozyten
im Blut und Mastzellen im Gewebe
vorkommt. Die hierdurch stimulierten Zellen geben
Cytokine und biogene Amine (Histamin u.a.) ab.
Die lokalen Blutgefe werden erweitert und vermehrt permeabel. Antikrper, Komplement und
immunreaktive Zellen gelangen aus dem Blut ins
Gewebe und bekmpfen den Infekt. Parasiten werden oft durch IgE markiert und mittels eosinophiler Granulozyten angegriffen. Bei den TypenII bis
IV der berempfindlichkeit sind andere Antikrper-Isotypen und Zellarten beteiligt.
Die Antigenbindungsstelle besteht aus den
hypervariablen Teilen der leichten und schweren
Ketten In den zwei NH2-terminalen Regionen
der Y-frmigen Antikrpermolekle liegen die Antigenbindungsstellen. Die entsprechenden DNA-Bereiche werden whrend des Heranwachsens der
B-Zellklone durch Rekombination modulartig

zusammengesetzt (.Abb.32.4). Diese hypervariablen Regionen bilden Schleifen (Hypervariable
loops; .Abb.32.5), welche das Antigen binden
(Complementarity determining regions CDR). Die
weniger vernderlichen Teile der Antikrper werden als variable bzw. konstante Regionen bezeichnet.
Mehrfachbindungen zwischen Antikrper
und Antigen erhhen die Bindungsstrke Na-
trliche Antikrper besitzen mindestens zwei Antigenbindungsstellen pro Molekl. Wenn einem
Antigen mit mehreren Epitopen ein Antiserum mit
mehreren passenden Antikrpern zugegeben wird,
bilden sich vernetzte Immunkomplexe, die als Immunprzipitate ausfallen:
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Die Immunprzipitation wird zum Nachweis oder

zur Anreicherung von Antigenen angewendet.
Die aufgrund der Vernetzung verstrkte Assoziation beruht auf dem Effekt, dass beim Lsen einer
einzelnen Bindung in einem solchen Komplex, im
Gegensatz zu einer bimolekularen Wechselwirkung,
andere Bindungen weiter bestehen. Die Tendenz zur
Assoziation der Bindungspartner wird in solchen
Fllen als Aviditt und nicht als Affinitt oder Bindungsstrke bezeichnet.
Immunglobuline gehren zur Ig-Superfamilie Die meisten Proteine, welche der Zell-Zell-Er-
kennung im Immunsystem dienen, enthalten

Ig-Domnen. Zur Ig-Superfamilie gehren die
Antikrper, T-Zellrezeptoren, Fc-Rezeptoren,
MHC-Proteine, Zelladhsionsproteine sowie die
Rezeptoren fr Wachstumsfaktoren. Rund ein
Viertel aller bekannten Proteine an der Oberflche von Leukozyten enthlt wenigstens eine IgDomne, die meist in einem eigenen Exon codiert
ist, vermutlich einem ehemaligen weit verbreiteten
Transposon.
Hochaffine monoklonale Antikrper
Die Dissoziationskonstanten (Kd; 1/Kd=Affinittskonstante) der meisten Antikrper
(IgG) liegen im nanomolaren Bereich. Durch
gerichtete Evolution mit der Phage/Ribosome-display-Technik (Abschn.39.11) lassen
sich monoklonale Antikrper mit Kd-Werten
im einstelligen picomolaren Bereich erhalten.
Die hohe Affinitt insbesondere von monoklonalen Antikrpern macht sie zu einem
hochempfindlichen Nachweisreagens fr
Proteine (ELISA, Abschn.37.7; Western blot,
Abschn.39.8; Mikrochips, Abschn.40.3).
16
17
32.5
18
MHC I-gebundene Proteinfragmente aktivieren

cytotoxische T-Zellen Cytotoxische T-Zellen
19
20
Cytotoxische T-Zellen
erkennen Peptide aus abgebauten krperfremden

Proteinen, welche auf der Zellmembran einer krpereigenen infizierten oder transformierten Zelle
durch MHC I-Proteine prsentiert werden. Dabei
knnen Proteinsegmente erkannt werden, welche
im intakten Pathogen, z.B. einem Virus, unzugnglich sind. Proteasomen der infizierten Zelle
verdauen die krperfremden Proteine. ABC-Transporter (ATP-binding cassette Transporter; Abschn.31.2) transferieren die ins Cytosol freigesetzten Peptide ins Lumen des ER, wo sie an MHC
I-Proteine binden. Die cytotoxische T-Zelle besitzt
an ihrer Oberflche antikrperhnliche Molekle,
die T-Zell-Rezeptoren (TCR), welche die antigenprsentierenden MHC I an der Oberflche der Zielzelle
erkennen. Durch diese Bindung und weitere Wechselwirkungen zwischen Zelladhsionsproteinen der
beiden Zellen wird die T-Zelle aktiviert.
Aktivierte cytotoxische T-Zellen lsen die
Apoptose infizierter Zellen aus Nach ihrer Ak-
tivierung durch eine antigenprsentierende Zelle

kann eine cytotoxische T-Zelle mehrere mit dem
bekannten Pathogen infizierte Zellen zur Apoptose bringen, bevor diese das Pathogen vermehrt
und freigesetzt haben. Die cytotoxische Zelle verwendet hierzu zwei Strategien: Sie bindet an die
Zielzelle und setzt das Protein Perforin frei, das in
deren Plasmamembran Poren bildet, und schickt
durch diese Poren sekretorische Vesikel mit Granzymen genannten Proteasen. Die Granzyme spalten bestimmte Procaspasen der Zielzelle, welche die
Apoptose einleiten (Abschn.24.6). Zudem lst das
Binden des Fas-Liganden der cytotoxischen T-Zelle
an das komplementre Fas-Protein auf der Zielzelle
deren Apoptose aus. ber MHC I-Proteine aktivierte cytotoxische T-Zellen sind auch an der Abstoung von Gewebetransplantaten beteiligt.
32.6
Immuntoleranz und
Autoimmunkrankheiten
Eine schwierige Aufgabe fr das Immunsystem:

Erkenne das Selbst Die krpereigenen Molekle
mssen von den Immunreaktionen verschont bleiben. Wie werden fremde und eigene potenzielle
Antigene auseinander gehalten? Fr die angeborene
Immunabwehr, die ausschlielich pathogentypische
Strukturen erkennt, ist das kein Problem. Das adaptive Immunsystem hingegen muss lernen, die krpereigenen Antigene von der Reaktion auszunehmen.
Transplantationsexperimente mit verschiedenen
Stmmen genetisch identischer Muse haben wich-
411
32.6 Immuntoleranz und Autoimmunkrankheiten
tige Erkenntnisse ber die verantwortlichen Mechanismen geliefert. Wenn Gewebe zwischen genetisch unterschiedlichen Individuen transplantiert
werden, erkennt der Empfngerorganismus in der
Regel das fremde Gewebe und stt es durch eine
Immunreaktion ab. Werden aber Zellen des Donorstamms in eine neugeborene Maus des Akzeptorstamms transplantiert, berleben einige dieser
Zellen whrend des ganzen Lebens der Empfngermaus. Die Empfngermaus akzeptiert Transplantate
aus dem Donorstamm, stt jedoch Transplantate
aus anderen Mausstmmen weiterhin ab: Die Maus
besitzt eine erworbene Immuntoleranz.
Die Toleranz fr krpereigene Epitope wird
durch zentrale und periphere Mechanismen erworben Von den zentralen, primren Lymph
organen (Knochenmark und Thymus) werden

nur diejenigen B- und T-Zellen an den peripheren
Lymphorgane weitergegeben, welche einerseits
MHC erkennen, andererseits sich aber nicht durch
MHC-Komplexe mit krpereigenen Peptiden aktivieren lassen. Zellen, welche diese Voraussetzungen
nicht erfllen, werden der Apoptose zugefhrt; nur
12% der im Thymus reifenden Zellen berleben.
Die zweite Schranke gegen Autoimmunreaktionen
ergibt sich bei der Aktivierung der naiven Immunzellen in den peripheren, sekundren Lymphorganen (Lymphknoten). Neben dem Stimulus durch
das Antigen werden zur Aktivierung auch Co-Stimuli (berlebenssignale) durch benachbarte T-Helferzellen und antigenprsentierende Zellen bentigt.
Co-stimulatorische Signale entstehen beim Kontakt
mit Pathogenen, jedoch nicht beim Kontakt mit
krpereigenen Antigenen. Bei Fehlen der Co-Stimuli lst das Binden des Antigens die Apoptose der
Zellen aus. Auf diese Weise werden die naiven, noch
nicht aktivierten Zellen mit Antikrpern gegen krpereigene Epitope eliminiert, bevor die Zellen zum
Klon expandieren.
Falls die Mechanismen zur Verhinderung der
Immunreaktion gegen einzelne krpereigene Antigene versagen, knnen sich Autoimmunkrankheiten
entwickeln, wie z.B. Diabetes mellitus
Typ 1 (Autoantikrper gegen die Inselzellen des
Pankreas), rheumatoide Arthritis (Autoantikrper gegen IgM u.a. Ig), Myasthenia gravis (Muskelschwche aufgrund von Autoantikrpern gegen
nicotinische Acetylcholinrezeptoren).
32
Geschwchtes Immunsystem
Immunschwche und Tumoren: Bei gewissen
Krankheiten wie Aids (Acquired immune deficiency syndrome) ist die Funktion des Immunsystems beeintrchtigt. Gehuft kommt es zu
rezidivierenden Infektionskrankheiten und
bestimmten malignenTumoren, bei Aids zum
Kaposi-Sarkom, einem Hautkrebs.
Immunsuppression: Abschwchung der
Immunantwort durch Immunsuppressiva
(z.B. Glucocorticoide) oder Bestrahlung zur
Therapie von Autoimmunkrankheiten und
nach Organ- oder heterologer Gewebetransplantation zur Vermeidung einer Abstoung;
unerwnschte Wirkung bei der Krebsbehandlung mit Zytostatika oder Bestrahlung.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517251-0
32.1 Angeborene Immunitt
32.2 Adaptive Immunitt: Antikrper aus
B-Zellen und zellulre Abwehr mit T-Zellen
32.3 Klonale Selektion der B-Zellen und
T-Zellen
32.4 Synthese, Struktur und Antigenbindung
der Antikrper
32.5 Cytotoxische T-Zellen
32.6 Immuntoleranz und Autoimmun
krankheiten
413
Stoffaufnahme
und Ausscheidung
33.1
Verdauung und Resorption 414
33.2
Transport von O2 und CO2 im Blut 419
33.3
Ausscheidung von Stoffwechselendprodukten 422
33.4
Wasser-, Elektrolyt- und Sure-Basen-Haushalt 424

33
Kapitel 33 Stoffaufnahme und Ausscheidung
414
1
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Heterotrophe Organismen wie Mensch und Tier

stehen in regem Stoffaustausch mit ihrer Umgebung. Die Hauptnhrstoffe Kohlenhydrat, Eiwei
und Fett werden im Magendarmtrakt hydrolytisch
in ihre niedermolekularen, resorbierbaren Bausteine zerlegt. Beim oxidativen Abbau der Brennstoffe in den Zellen ist Sauerstoff der finale Elektronenakzeptor. O2 wird in den Lungen aufgenommen
und durch das Hmoglobin der Erythrozyten den
Geweben zugefhrt. Das Hmoglobintetramer ist
wegen der Kooperativitt seiner vier O2-Bindungsstellen hervorragend geeignet fr diese Aufgabe. O2
wie auch das Abbauprodukt CO2 diffundieren frei
durch alle biologischen Membranen. CO2 wird im
Blut hauptschlich als Hydrogencarbonat HCO
3
zu den Lungen transportiert, die CO2 abatmet. Die
anderen Stoffwechselabbauprodukte werden durch
die Nieren mit dem Urin ausgeschieden, einige auch
durch die Leber mit der Galle.
Die Niere ist das Hauptorgan zur Aufrechterhaltung eines konstanten Milieu intrieur.
Krperinnere Flssigkeitskompartimente, deren
Volumen, Ionenzusammensetzung und pH-Wert
konstant gehalten wird, bei homoiothermen Spezies sogar mit gleichbleibender Temperatur, waren
eine Voraussetzung fr die Zellspezialisierung in
vielzelligen Lebewesen. Der Wasser-, Elektrolytund Sure-Basen-Haushalt des Krpers wird in
diesem Sinne reguliert: Die Hormone Vasopressin
bzw. Aldosteron kontrollieren die Ausscheidung
von Wasser und Elektrolytionen durch die Nieren;
verschiedene Puffersysteme, sowie Lungen und
Nieren sorgen fr einen konstanten pH-Wert der
Krperflssigkeiten.
33.1
Verdauung und Resorption
Alle Nhrstoffe werden hydrolytisch gespalten, um

aus dem Darm resorbiert zu werden (Ausnahmen:
Glucose und Fructose). Ein aktiver, Na+-gekoppelter
Transport bringt die Verdauungsprodukte durch die
Darmepithelzellen ins Interstitium und damit ins
Blut (das Kapillarendothel ist fr niedermolekulare
Stoffe durchgngig).
Darmlumen abgegeben. Die Verdauung der Nhrstoffe (sowie der Verdauungsenzyme) und die Resorption der Spaltprodukte finden vorwiegend im
Dnndarm statt. Obwohl alle an der Verdauung
beteiligten hydrolytischen Spaltungen exergonisch
sind, ist der Energieaufwand betrchtlich: Die Verdauungsenzyme sind stets neu zu synthetisieren,
und bei der Abgabe der Verdauungssekrete in den
Magendarmtrakt und der Resorption der Verdauungsprodukte ist Transportarbeit zu leisten.
Wie schtzt sich der Krper vor Selbstverdauung? Wie schtzen sich die Proteasen produ-
zierenden Zellen vor Selbstverdauung, wie werden

die Epithelzellen des Magendarmtrakts vor den
Proteasen geschtzt? Zwei Schutzmanahmen sind
wirksam: (1) Die Proteasen werden ausnahmslos
als katalytisch inaktive Proenzyme (Zymogene)
synthetisiert, die erst im Lumen des Gastrointestinaltrakts durch limitierte Proteolyse aktiviert werden; (2) eine Schleimschicht aus Mucinen schtzt
das Magen- und Darmepithel vor den Proteasen.
Die Mucine sind Proteoglykane (Abschn.5.3)
und bilden ein durch nichtkovalente Wechselwirkungen stabilisiertes Netzwerk, das mehr als 90%
Wasser enthlt. Die Kohlenhydratketten verwehren
den Proteasen den Zugang zu den Epithelzellen
(und zu den Proteinkomponenten der Mucine).
Die niedermolekularen Verdauungsprodukte knnen hingegen durch das wasserreiche Netzwerk
diffundieren.
Die Verdauung der Proteine beginnt schon im
Magen Der Magensaft enthlt von den Belegzellen der Magenschleimhaut sezernierte Salzsure
(pH2). Der tiefe pH-Wert wirkt bakterizid und
schirmt den Magendarmtrakt gegen mit der Nahrung aufgenommene Mikroorganismen ab. Zudem
werden die Nahrungsproteine denaturiert und fr
Proteasen leichter angreifbar. Eine H+/K+-ATPase
pumpt H+ im Austausch mit K+ aus den Belegzellen
ins Lumen (.Abb.33.1). Die Protonen stammen
aus durch Hydratation von CO2 entstandener Kohlensure:
CO 2 + H 2O
H 2CO 3
H + + HCO 3
Carboanhydrase
Die Verdauung der Nhrstoffe ist aufwndig
Beim Menschen werden pro Tag etwa 9L Ver-
dauungssekrete mit 60g Verdauungsenzymen ins
Die Carboanhydrase ist ein Zinkenzym und

findet sich im Krper berall dort, wo Protonen
415
33.1 Verdauung und Resorption
sezerniert werden (Belegzellen des Magens, Tubuluszellen der Niere) oder rasch das Hydratationsgleichgewicht von CO2 hergestellt werden muss
(Erythrozyten).
Sobald Nahrung in den Magen gelangt, geben besondere Zellen der Magenschleimhaut das
Peptidhormon Gastrin ins Blut ab. Gastrin stimuliert die Sekretion von HCl aus den Belegzellen
und von Pepsinogen aus den Hauptzellen der
Magenschleimhaut. Im Pepsinogen blockiert ein
NH2-endstndiges Propeptid die Substratbindungsstelle. Sobald Pepsinogen in den sauren Magensaft
gelangt, durchluft das Propeptid eine Konformationsnderung, worauf es durch die aktive Stelle
abgespaltet wird, d.h. Pepsinogen aktiviert sich
autokatalytisch zum proteolytisch aktiven Pepsin.
Das pH-Optimum von Pepsin liegt fr Enzyme
ungewhnlich tief bei pH23. Pepsin ist eine relativ unspezifische Endopeptidase, spaltet jedoch
bevorzugt Peptidbindungen zwischen Phe, Tyr, Leu
und Val.
Terminologie
Endopeptidasen spalten Polypeptide im
Innern der Kette, die Produkte der Spaltung
sind Peptide. Exopeptidasen greifen Polypeptidketten an deren Enden an: Carboxypeptidasen spalten vom COOH-Ende eine Aminosure
nach der anderen ab, Aminopeptidasen
wirken in gleicher Weise am NH2-Ende.
Die Proteinverdauung wird im Dnndarm fortgesetzt Sobald der Mageninhalt, der Chymus von
breiiger Konsistenz, in den obersten Dnndarmabschnitt, das Duodenum (Zwlffingerdarm) gelangt,

stimuliert seine Sure das Duodenum, die Hormone
Sekretin und Cholecystokinin freizusetzen, die
ihrerseits das Pankreas (Bauchspeicheldrse) zur
Sekretion des Pankreassaftes bzw. die Gallenblase
zur Kontraktion anregen. Pankreassaft, Galle und
das Sekret der Duodenalschleimhaut enthalten Hydrogencarbonat HCO
3 und sind alkalisch (pH8);
sie neutralisieren die HCl, der Darminhalt wird
leicht alkalisch.
33
.. Abb.33.1 HCl-Sekretion im Magen. Eine H+/K+-ATPase

der Belegzellmembran pumpt H+ im Austausch gegen K+
ins Magenlumen. Der pH-Wert in den Belegzellen ist 7, der
pH-Wert ihres Sekrets 1: Die Protonenpumpe berwindet
einen Konzentrationsunterschied von etwa 106! Der Magensaft (pH2) ist weniger sauer als das Sekret der Belegzellen,
da er zudem das pepsinogen-haltige Sekret der Hauptzellen
enthlt. Die hinausgepumpten Protonen stammen aus
H2CO3, das durch die Carboanhydrase (CA)-Reaktion nachgeliefert wird. Fr jedes ins Magenlumen abgegebene H+
wird ein HCO

3 ber einen Antiport gegen Cl ausgetauscht,
das wie auch K+ durch einen Ionenkanal ins Magenlumen
gelangt
Gastrointestinale Hormone
Der Magendarmtrakt und seine Anhangsdrse, das Pankreas, produzieren eine Reihe
von Hormonen: Gastrin im Magen, Sekretin
und Cholecystokinin im Duodenum sowie
Insulin und Glucagon im Pankreas. Alle diese
Hormone mit Ausnahme des Proteohormons
Insulin sind Peptidhormone.
Das Pankreassekret enthlt Enzyme zur Verdauung von Proteinen, Strke, Triacylglycerolen und
Nucleinsuren. Die Serinproteasen (Abschn.4.5)
Trypsin , Chymotrypsin und Elastase sowie die
zinkabhngigen Carboxypeptidasen A und B werden im Pankreas als inaktive Proenzyme synthetisiert und im Duodenum proteolytisch aktiviert. Die
von Dnndarmzellen produzierte Enteropeptidase
lst die Aktivierungskaskade aus durch hochspezifische Spaltung einer bestimmten Peptidbindung
des Trypsinogens (.Abb.33.2). In der Folge aktiviert Trypsin weiteres Trypsinogen und alle anderen
Pro-Proteasen. In allen Fllen werden bestimmte
kurze Peptidstcke vom Proenzym abgespalten. Die
416
.. Abb.33.2 Aktivierung der Pankreasproteasen. Die Enteropeptidase wird nicht als

Proenzym synthetisiert; sie ist ungefhrlich fr
die Zellen der Darmschleimhaut, in denen sie
synthetisiert wird, da sie hochspezifisch nur
eine bestimmte Peptidbindung im Trypsinogen
spaltet. Das Zusammentreffen der Enteropeptidase mit Trypsinogen leitet die Aktivierungskaskade ein: Trypsin aktiviert noch nicht gespaltenes Trypsinogen und alle anderen Zymogene
aus dem Pankreas
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Proenzyme werden im Pankreas in sekretorischen

Vesikeln aufbewahrt, die sich nach Stimulation ins
Darmlumen entleeren. Die Drsenzellen produzieren eine geringe Menge eines Trypsininhibitors
(ein Protein von 6kDa), der als Substratanalog mit
sehr hoher Affinitt nichtkovalent an Trypsin bindet (Kd=1010M). Damit wird allfllig schon im
Pankreas aktiviertes Trypsin, welches die Aktivierungskaskade vorzeitig auslsen knnte, unschdlich gemacht.
Trypsin, Chymotrypsin und Elastase sind Endo
peptidasen mit unterschiedlicher Spezifitt:
Bevorzugte Spaltung
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Trypsin
Lys
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Chymotrypsin
Tyr
Elastase
Keine Spezifitt
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Arg
Phe
Trp
Die Spaltungsspezifitten des Pepsins und der drei

Pankreasproteasen ergnzen sich, das Zusammenwirken der Enzyme zerlegt die Nahrungsproteine in
kleine Peptide. Exopeptidasen (Carboxypeptidasen aus dem Pankreas und membranstndige Amino-Dipeptidylpeptidasen, Dipeptide abspaltende
Exopeptidasen, des Dnndarmepithels) besorgen
die weitere Zerlegung der Peptide. Die Mucosazellen resorbieren die freigesetzten Aminosuren,
Di- und Tripeptide ber Na+-Symportsysteme unterschiedlicher Spezifitt (.Abb.33.3).
Kohlenhydrate werden zu resorbierbaren

Monosacchariden hydrolysiert Die wichtigen
Kohlenhydrate in der menschlichen Nahrung

sind Strke, Lactose und Saccharose. Die unver-
zweigte Komponente der Strke, die Amylose, wird

durch die -Amylase
des Pankreas in Maltose
(4--Glucosidoglucose) gespalten. Die -Amylase
kommt auch im Speichel vor; die Speichelamylase
dient wahrscheinlich zur Zahnreinigung, fr die
Verdauung ist sie nicht wichtig. Im Amylopektin,
der verzweigten Komponente der Strke, kann
die -Amylase die -1,4-Bindungen in der Nhe
einer -1,6-Verzweigung nicht angreifen; eine
Amylo--1,6-Glucosidase (Isomaltase) spaltet die
-1,6-Verzweigungen. Durch die Amylase produzierte Maltose und kurze Oligosaccharide werden
durch die membranstndige Maltase, eine -Glucosidase, zu Glucose hydrolysiert. Auch Lactose
und Saccharose werden durch membranstndige
Disaccharidasen gespalten: Lactose durch die Lactase (-Galactosidase) in Glucose und Galactose,
Saccharose durch die Saccharase (-Fructosidase)
in Glucose und Fructose.
Die Resorption von Glucose und Galactose erfolgt wie bei den Aminosuren (.Abb.33.3) ber
einen sekundr-aktiven Symport mit Na+ an der
luminalen Membran und durch erleichterte Diffusion an der basolateralen Membran. Die Fructose passiert beide Membranen durch erleichterte
Diffusion.
Verdauung von Triacylglycerolen durch
Pankreaslipase bentigt Gallensuren Die Nah-
rungsfette sind bei Krpertemperatur flssig. Als

apolare Molekle bilden sie in Wasser ltropfen.
Die vom Pankreas sezernierte Lipase ist ein wasserlsliches Protein und kann nicht in die ltropfen
eindringen, sie kann die Triacylglycerole nur an der
Wasser/l-Grenzflche angreifen. Eine gengend
schnelle Verdauung der Triacylglycerole setzt voraus, dass durch eine feinere Emulgierung die Oberflche der Fetttrpfchen vergrert wird.
417
.. Abb.33.3 Resorption von Aminosuren und kleinen

Peptiden. Sekundr-aktiver Symport mit Na+ befrdert
Aminosuren (As) sowie Di- und Tripeptide durch die Brstensaummembran. In der Mucosazelle werden die kurzen
Peptide in Aminosuren gespalten. Die sich in der Zelle anreichernden Aminosuren gelangen durch erleichterte Diffusion
(Trgerprotein) aus der Zelle in den interstitiellen Raum und
in die Kapillaren. Die Na+/K+-ATPase sorgt dafr, dass die Natriumkonzentration in der Zelle niedrig bleibt. Grundstzlich
gleiche Mechanismen dienen der Resorption von Glucose
und anderen Monosacchariden
Emulgierung von l in Wasser

Als Emulsion wird die feine Verteilung einer
flssigen unlslichen Substanz (z.B. l) in
einer zweiten Flssigkeit (z.B. Wasser) bezeichnet. Je feiner die Emulsion, umso grer ist die
Grenzflche. Wenn das Volumen eines ltropfen auf Trpfchen mit halbem Radius verteilt
wird, entstehen 8 kleine Trpfchen:
Vo D 4=3r3o
Wenn r1 D ro =2:
33
.. Abb.33.4 Gallensuren. Bei der Synthese der Gallensuren aus Cholesterol wird die Seitenkette um 3C-Atome
verkrzt und das Ende (C24) zu einer COO -Gruppe oxidiert.
Die Doppelbindung im Ring B wird reduziert und zustzliche
OH-Gruppen werden eingefhrt. Die wichtigste Gallensure
ist die Cholsure, die weiteren Gallensuren unterscheiden
sich in der Zahl und Stellung der OH-Gruppen. Das raumfllende Modell der deprotonierten Cholsure zeigt, dass alle
hydrophilen Gruppen auf der gleichen Seite des Ringsystems
liegen. Gallensuren besitzen daher eine polare und eine
apolare Seite. Ein groer Teil der Gallensuren wird in den
Hepatozyten durch CoA aktiviert und mit den Aminosuren

Glycin oder Taurin (NHC
3 CH2 CH2 SO3 , durch Oxidation und
Decarboxylierung aus Cys synthetisiert) konjugiert
Fo D 4r2o
V1 D 1=8Vo
Die Oberflche eines kleinen Trpfchens ist

jedoch F1=1/4Fo, die Gesamtoberflche der
8Trpfchen ist 8F1=2 Fo, d.h. die Verteilung
auf 8Trpfchen hat die Gesamtoberflche
verdoppelt.
Eine Vergrerung der Oberflche ist jedoch aus

energetischen Grnden nicht ohne weiteres mglich. Der Kontakt zwischen l und Wasser ist
energetisch ungnstig, eine einfache l-in-WasserEmulsion fhrt unweigerlich zur Phasentrennung
(Abschn.1.4). Die Oberflchenspannung wirkt

einer Vergrerung der Grenzflche entgegen. Die
Gallensuren lsen das Problem: Als amphiphile
Molekle lagern sie sich in die l-Wasser-Grenzflche mit der hydrophoben Seite gegen den ltropfen und der hydrophilen Seite gegen das Wasser
(.Abb.33.4). Amphiphile Gallensuren an der
l-Wasser-Grenzflche entsprechen einem energetisch gnstigen Zustand und lassen eine Vergrerung der Grenzflche zu. Fr die Verdauung der
Nahrungsfette sind die Gallensuren unbedingt
notwendig, bei einem Gallengangverschluss wird
fetthaltiger Stuhl ausgeschieden.
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Zusammensetzung der Galle

Die Galle ist ein Sekret der Leber, das ber den
Gallengang (Ductus choledochus) ins Duodenum ausgeschieden wird. Neben Gallensuren
enthlt die Galle Cholesterol und die Gallenfarbstoffe Biliverdin und Bilirubin (Abbauprodukte von Hm).
Die Gallensuren erfllen neben der Emulgierung

der Triacylglycerole noch zwei weitere wichtige
Funktionen. In der Galle bilden sie zusammen mit
Phospholipiden und Cholesterol gemischte Mizellen und verhindern das Ausfallen von Cholesterol
und die Bildung von Konkrementen, die sich zu
Gallensteinen
auswachsen knnten. Gallensuren sind zudem notwendig fr die Resorption der
Fettsuren und auch der fettlslichen Vitamine. Sie
bilden zusammen mit Fettsuren, Monoacylglycerol,
Cholesterol und Phospholipiden aus der Nahrung
gemischte Mizellen, deren Bestandteile durch die
Plasmamembran der Mucosazellen diffundieren.
Etwa 90% der ausgeschiedenen Gallensuren
werden resorbiert, gelangen zurck in die Leber
und werden wieder mit der Galle in den Darm
ausgeschieden. Diesen enterohepatischen Zyklus
durchlaufen die Gallensuren 6- bis 10-mal pro Tag.
Die Pankreaslipase spaltet bevorzugt die beiden ueren Fettsurereste der Triacylglycerole ab:
Die Darmepithelzellen resynthetisieren Triacyl

glycerole aus den resorbierten Monoacylglycerolen und freien Fettsuren ber denselben Syntheseweg wie die Fettzellen (Abschn.17.4). Im
ER der Darmepithelzellen bilden Triacylglycerole
und Cholesterol zusammen mit Apolipoproteinen
Chylomikronen, die durch Exocytose und ber die
Lymphbahn (Ductus thoracicus zum linken Venenwinkel) den Blutkreislauf erreichen (Lipidtransport
und Lipoproteine; Abschn.34.4).
Auch fr die mengenmig weniger wichtigen Bestandteile der Nahrung liefert das Pankreas
die entsprechenden Hydrolasen: Ribonuclease
(RNase), Desoxyribonuclease (DNase), Cholesterolesterase (hydrolysiert Cholesterolfettsure-Ester) und Phospholipase A2 (spaltet Phospholipide).
Der Hauptteil des Wassers wird im Dnndarm
ber Aquaporinkanle resorbiert, im Dickdarm
erfolgt die abschlieende Eindickung des Stuhls.
Die Wasserresorption wird angetrieben durch das
osmotische Druckgeflle, welches der aktive Natriumtransport aus dem Darmlumen ins Interstitium
aufbaut. Derselbe aktive Natriumtransport ist auch
gekoppelt mit der Resorption von Monosacchariden
und Aminosuren (.Abb.33.3).
Die Biochemie des Dickdarms ist Sache der
intestinalen Flora Im oberen Colonabschnitt
berwiegen Grungsvorgnge, d.h. der anaerobe
Abbau von Kohlenhydraten. Darmbakterien verdauen pflanzliche Zellwnde und bauen die freigesetzte Strke zu organischen Suren (Propionsure,
Buttersure) ab. Der pH-Wert des Darminhalts wird
leicht sauer und hemmt Fulnisvorgnge (anaeroben Abbau von Proteinen). Im unteren Colon
versiegt die Grung; das HCO
3 -haltige Sekret der
Dickdarmepithelzellen fhrt zu einem alkalischen
pH-Wert. Unter diesen Bedingungen berwiegen
durch Bakterien unterhaltene Fulnisprozesse:
Decarboxylierung und weiterer Umbau von Aminosuren produzieren die typischen Fulnisprodukte. Fr den Geruch der Faeces sind in erster
Linie Tryptophanabbauprodukte Indol und Skatol
(Methylindol) verantwortlich. Die Bakterien, welche den Dickdarm besiedeln, sind zum allergrten Teil obligate Anaerobier. Sie produzieren einige
Vitamine (Vitamin K, Folsure, Vitamin B12). Fr
den Menschen ist jedoch einzig die Synthese von
VitaminK (Abschn.35.3) wichtig. Etwa zwei Drit-
419
33.2 Transport von O2 und CO2 im Blut
tel der Trockenmasse der Faeces bestehen aus Bakterien und abgeschilferten Darmepithelzellen.
Mikrobiom des Menschen
Die Gesamtheit der Mikroorganismen (Bakterien, Pilze und Archa), welche den Magendarmtrakt sowie Haut und Schleimhute
bewohnen, wird als Mikrobiom bezeichnet.
Die Zahl dieser Zellen bertrifft zumeist die
1014Zellen, aus welchen der Krper besteht.
Ihre Gesamtmasse betrgt 12kg; die Zahl der
in einem Organismus vertretenen mikrobiellen
Spezies betrgt mehrere hundert.
33.2
Transport von O2 und CO2

im Blut
Molekularer Sauerstoff ist das Endoxidationsmittel,

das in den Mitochondrien von der Cytochrom
Oxidase, dem letzten Enzym der Atmungskette, die
Elektronen bernimmt. Landlebende Vertebraten
nehmen den Sauerstoff in den Lungen auf, von wo
er durch das Hmoglobin (Hb) der Erythrozyten
zu den Geweben transportiert wird.
Warum ein Trgerprotein fr den O2-Transport im Blut? Die Lslichkeit von O2 in Wasser ist
zu gering, um die peripheren Gewebe mit im Blut

gelstem O2 ausreichend zu versorgen. Bei einem
O2-Partialdruck von 100mm Hg (13kPa) sind in
einem Liter Blut 3mL O2 gelst und200mL O2,
also 70-mal mehr, an Hmoglobin gebunden.
Warum Erythrozyten? In Blutplasma gelstes
Hb in der vorhandenen Konzentration (160g/L)
ergbe eine zu viskse Flssigkeit, um durch die
Blutgefe gepumpt zu werden. Die Verpackung
des Hb in die Erythrozyten lst dieses hmodynamische Problem.
Warum ein Hmprotein als O2-Trger? Fe2+,
nicht aber Fe3+, kann O2 binden, wobei jedoch der
gebundene Sauerstoff Fe2+ rasch zu Fe3+ oxidiert.
Das Gleiche wie fr freie Fe2+-Ionen gilt fr Fe2+ in
Hm: Nur Fe2+-Hm bindet O2, wobei es rasch zu
Hmatin mit Fe3+ oxidiert. Das Binden von Hm
in die Hmtasche des Globins macht das Fe2+
des Hms viel weniger oxidationsempfindlich. Im
Unterschied zu den Cytochromen, die durch rever-
33
siblen Valenzwechsel zwischen Fe2+ und Fe3+ Elektronen abgeben und aufnehmen, durchluft das Fe2+Ion im Hb keinen Valenzwechsel bei der Aufnahme
und Abgabe von Sauerstoff.
Methmoglobin
MetHb entsteht spontan aus Hb durch langsame Oxidation von Fe2+-Hm zu Fe3+-Hm
(Hmatin). Met-Hb, das O2 nicht mehr binden
kann, wird durch die Methmoglobin-Reduktase (mit NADPH) zu Hb reduziert. Der
Met-Hb-Anteil im Blut ist daher normalerweise
nur 1%.
Hmoglobin/Myoglobin-hnliche O2-Trgerproteine finden sich bereits bei niederen Wrmern und

in den Wurzelknllchen der Leguminosen (Leghmoglobin; Abschn.21.1). In Erythrozyten verpackt ist Hmoglobin jedoch erst bei Vertebraten.
Viele Mollusken und Arthropoden haben blaues
Blut, da sie Hmocyanin als O2-Trger verwenden.
Die O2-bindende Gruppe ist in diesem Fall nicht
Hm, sondern ein Paar von Cu2+-Ionen. Desoxyhmocyanin mit Cu+ ist farblos. In manchen Spezies
bildet Hmocyanin sehr groe, in der Lymphe frei
gelste Oligomere (Mr der Untereinheit 75kDa).
O2-Bindungskurve von Hb ist sigmoid Das
Binden von O2 wird als Oxygenierung des Hb bezeichnet (Die Oxygenierung ist keine Oxidation,
das Fe2+-Hm gibt keine Elektronen ab). Hb ist
ein Tetramer, jede Untereinheit von 16kDa trgt
ein Hm und bindet ein O2-Molekl. Hm besteht
aus Protoporphyrin IX mit Fe2+ als Zentralatom
(.Abb.33.8). Im Hb besetzen die N-Atome der
Pyrrolringe vier der sechs Koordinationsstellen des
Eisens, ein N-Atom eines Histidinrests des Globins
besetzt die fnfte, und im Oxy-Hb bindet O2 an die
sechste Koordinationsstelle des Eisens.
Das Hb des erwachsenen Menschen besteht aus
zwei - und zwei -Globinuntereinheiten. Je eine
- und eine -Untereinheit bilden ein Dimer, zwei
solcher -Dimere bilden das ()2-Hb-Tetramer
(.Abb.2.2). Die vier O2-Bindungsstellen des Hb
verhalten sich kooperativ, das Binden jedes O2-Molekls erhht die O2-Affinitt der noch unbesetzten
Bindungsstellen (Abschn.4.6). Die Kooperativitt der vier Bindungsstellen uert sich in einer
420
.. Abb.33.5O2-Bindungskurve von Hmoglobin.

Der Sttigungsgrad von Hmoglobin (Hb) ist als
Funktion des O2-Partialdrucks (pO2) angegeben. Ein
pO2 von 100mm Hg (13kPa) entspricht dem pO2
in den Lungenalveolen (Lungenblschen). In den
Kapillaren der Gewebe, z.B. in arbeitenden Muskeln,
kann der pO2 bis auf 20mm Hg absinken. Dank der
sigmoiden Bindungskurve gibt Hmoglobin bei
diesem pO2 70% des gesamten gebundenen O2
ab. Zum Vergleich die O2-Bindungskurve des monomeren Myoglobins (Mb), das keine Kooperativitt
zeigt und eine wesentlich hhere Affinitt fr O2
aufweist als Hmoglobin (p50 von Hbp50 von Mb).
2,3-Bisphosphoglycerat (BPG) sowie ein niedrigerer
pH-Wert (Bohr-Effekt) verschieben die O2-Bindungskurve nach rechts (s. Text)
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.. Abb.33.6 Vernderungen im Hm bei der Oxygenierung

des Hmoglobins. Im Desoxyhmoglobin liegt das Eisen
atom etwas auerhalb des Porphyrinrings des Hms. Nach
Oxygenierung passt das nun etwas kleinere Eisenatom in den
planaren Porphyrinring. Die Lageverschiebung des Eisens
(um 0,7nm) bringt auch seinen Liganden, den Histidinrest,
nher an die Ringebene und pflanzt sich als Konformationsnderung im ()2-Tetramer fort
sigmoiden O2-Bindungskurve (.Abb.4.12). Das

Binden von O2 verschiebt das Konformationsgleichgewicht der noch unbesetzten Stellen vom
niedrigaffinen T (Tight-)Zustand in den hochaffinen R (Relaxed-)Zustand. Dank der Kooperativitt setzt Hb in den Geweben mehr O2 frei, als bei
fehlender Kooperativitt geliefert werden knnte
(.Abb.33.5).
Die Konformationsnderungen, welche der kooperativen O2-Beladung zugrunde liegen, werden
durch eine Bewegung des Fe2+-Ions ausgelst, das
im Desoxy-Hb (T-Zustand) etwas auerhalb des
entsprechend verzerrten Protoporphyrinrings liegt
(.Abb.33.6). Sobald ein O2-Molekl ans Hm bindet, bewegt sich das Eisenion wegen der vernderten Elektronenverteilung in die Ebene des planaren
Tetrapyrrolrings. Diese geringe Lageverschiebung
pflanzt sich ber den Histidinliganden ins Protein
fort und lst die Umlagerung der unbesetzten Untereinheiten in den hochaffinen R-Zustand aus.
Myoglobin und Hmoglobin sind homologe
Proteine (Vergleich der Aminosuresequenzen;
.Abb.2.6) Myoglobin ist ein monomeres Pro-
tein mit einer Hmgruppe und gibt den Muskeln

deren rote Farbe. Der an Myoglobin gebundene
Sauerstoff dient als O2-Reserve: Wenn die O2-Konzentration in der Muskulatur absinkt, wird er an
33
421
die Mitochondrien abgegeben. Als Monomer ohne

Kooperativitt zeigt Myoglobin eine hyperbolische
O2-Bindungskurve (.Abb.33.5). Die Affinitt von
Myoglobin fr O2 ist hher als diejenige von Hb, es
kann ohne weiteres O2 von Oxy-Hb bernehmen.
2,3-Bisphosphoglycerat BPG verschiebt die
O2-Bindungskurve nach rechts BPG wird durch
Phosphorylierung des Glykolysezwischenprodukts

3-Phosphoglycerat gebildet. Die Normalkonzentration von BPG in Erythrozyten ist 5mM, etwa der
Konzentration von Hb-Tetrameren entsprechend.
BPG mit seinen fnf negativen Ladungen passt genau in eine mit positiven Ladungen ausgekleidete
Tasche zwischen den zwei -Dimeren des Hb-Tetramers, die sich im niederaffinen T-Zustand gengend ffnet, um BPG darin zu binden; im hochaffinen R-Zustand ist die Tasche zu eng. Das Binden
von BPG stabilisiert den niederaffinen T-Zustand
und erleichtert damit die Freisetzung von O2. Je
hher die Konzentration von BPG, umso mehr O2
kann Oxy-Hmoglobin in der Peripherie abgeben.
Eine erhhte BPG-Konzentration in Erythrozyten
ist Teil der Hhenadaptation des Krpers.
(22; 98%) und HbA2 (22; 2%) ersetzt wird. Alle

whrend der Ontogenese nacheinander auftretenden Hb-Typen sind homologe Proteine.
Der tiefere pH-Wert in den Gewebekapillaren
verschiebt die O2-Bindungskurve nach rechts
Oxy-Hb hat eine niedrigere Affinitt fr Protonen

als Desoxy-Hb, d.h. Oxy-Hb ist die strkere Sure:
Hb C 4 O2 Hb .O2 /4 C nHC
Der Wert von n ist etwa 2. Die Protonen werden

in erster Linie von Histidinresten freigesetzt, deren
pKa-Werte durch den TR-bergang herabgesetzt werden. Umgekehrt wird eine Zunahme der
Wasserstoffionenkonzentration das Gleichgewicht
zwischen Desoxy-Hb und Oxy-Hb auf die Seite von
Desoxy-Hb verschieben, d.h. die Freisetzung von
O2 frdern.
Dieser physiologisch wichtige Zusammenhang
zwischen der O2-Beladung von Hmoglobin und
dem pH-Wert ist bekannt als Bohr-Effekt . Das
in den Geweben produzierte CO2 diffundiert in die
Erythrozyten, wo es durch die Carboanhydrase
(CA) zu H2CO3 hydratisiert wird, das seinerseits
in Hydrogencarbonat (Bicarbonat) und ein Proton
dissoziiert:
CO2 + H2O
H2CO3
CA
Fetales Hmoglobin hat eine hhere Sauerstoffaffinitt als adultes Hmoglobin (HbA) Damit in
der Plazenta das mtterliche Blut O2 ans fetale Blut

weitergeben kann, muss das fetale Hb eine hhere
O2-Affinitt als das mtterliche Hb aufweisen. Ein
besonderes fetales Hmoglobin (HbF), in welchem die -Ketten durch -Ketten ersetzt sind, erfllt diese Voraussetzung: Hb F (22) bindet praktisch kein BPG und besitzt eine wesentlich hhere
O2-Affinitt (p50 19mmHg) als HbA (p50 27mmHg;
.Abb.33.5). HbF tritt ab der 9.Schwangerschaftswoche an die Stelle der embryonalen Hmoglobine
und wird noch einige Monate nach der Geburt in
Leber und Milz weiter synthetisiert, bis es gnzlich durch im roten Knochenmark gebildetes HbA1
(1)
HCO3 + H+
(2)
Die Protonen, die hierbei freigesetzt werden, verschieben das Gleichgewicht der Reaktion (1) nach
links und erleichtern damit die Freisetzung von O2
in den Geweben. Der Bohr-Effekt entspricht den
physiologischen Notwendigkeiten.
CO2 wird als HCO
3 in die Lungen transportiert Das gem Gl.(2) freigesetzte HCO
3 verlsst die Erythrozyten durch Anionenkanle, die
H+-Ionen knnen jedoch die Zelle nicht verlassen
(.Abb.33.7). Die Elektroneutralitt wird gewahrt
durch Einstrom von Cl ber die gleichen Anionenkanle. Dieser Austausch von HCO
3 gegen
Cl ist bekannt als Chloridverschiebung (Chloride
shift). Der weitaus grte Teil (90%) des CO2 wird
als HCO
3 in gelster Form im Blutplasma zu den
Lungen transportiert. Dort laufen die obigen Vorgnge in umgekehrter Richtung ab: Im Austausch
gegen Cl in die Erythrozyten gelangendes HCO
3
422
Erythrozyt in Gewebekapillare
2
3
wird zu H2CO3 protoniert, das nach Dehydratisierung durch die Carboanhydrase als CO2 abgeatmet
wird. Nur 5% des CO2 werden in gelster Form im
Blutplasma zu den Lungen transportiert. Die restlichen 5% des CO2 werden durch Hb transportiert;
CO2 bildet spontan ein kovalentes Addukt mit den
-Aminogruppen des Hb:
CO2 C R-NH2 R-NHCOOH
R-NHCOO C HC
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Erythrozyt in Lungenkapillare
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Die -Aminogruppen von Lysinresten mit ihren hheren pKa-Werten reagieren kaum mit CO2.
Wie wird H+ in die Lungen transportiert? Damit in der Lunge die Reaktion der Gl.(2) in umgekehrter Richtung ablaufen kann, muss nicht nur
+
HCO
3 , sondern auch H von den Geweben in die
Lungen transportiert werden. Dazu dienen die Puffersysteme des Blutes (HCO
3 , Hmoglobin, Plasmaproteine und Phosphat; Abschn.33.4), welche
die anfallenden Protonen aufnehmen und den pHWert des Blutplasmas nur wenig absinken lassen
(im Bereich der zweiten Kommastelle). Zudem trgt
der Bohr-Effekt zur Pufferung bei (2H+ pro Hmoglobin-Tetramer).
Ausscheidung von
Stoffwechselendprodukten
Die Niere ist das Hauptorgan zur Ausscheidung

von Wasser und wasserlslichen Verbindungen
.. Abb.33.7 Transport von CO2 im Blut. Die katalytische
Beschleunigung der Hydratisierung von CO2 in den Geweben
und der Dehydratisierung der H2CO3 in der Lunge durch die
Carboanhydrase (CA) in den Erythrozyten ist sehr wichtig,
weil die Erythrozyten die Kapillaren in weniger als einer
Sekunde passieren. Die nichtenzymatische Dehydratisierung
wre zu langsam, um in den Lungen CO2 vollstndig fr
die Abatmung bereitzustellen. Der Bohr-Effekt luft nicht
stchiometrisch ab, nur etwa 2H+ werden pro Hmoglobin
(Hb)-Tetramer aufgenommen und abgegeben (s. Text). Nicht
von Hmoglobin aufgenommene H+ werden ber die Pufferbasen des Blutes in die Lungen transportiert. Der Unterschied
im pH-Wert von arteriellem (pH7,40) und vensem Blut
(pH7,37) ist gering
Die Ultrafiltration des Blutes in den Glomeruli

lsst alle Plasmabestandeile mit einer Masse unter
etwa 15kDa ungehindert in den Primrharn passieren. Durch sekundr-aktive Rckresorption in den
proximalen Tubulusabschnitten werden Elektrolytionen und Metaboliten zurckgewonnen, welche
noch genutzt werden knnen (Glucose, Aminosuren, Lactat, Pyruvat und Ketonkrper). Die distalen
Tubuli und die Sammelrohre resorbieren Wasser
sowie Na+ und Cl. Der Primrharn von 180L/Tag
wird dabei auf etwa 1,5L/Tag konzentriert. Drei
Hormone regulieren diese Resorptionsvorgnge:
Das antidiuretische Hormon ADH (Vasopressin)
aus dem Hypophysenhinterlappen ist notwendig fr
die Wasserresorption, d.h. die Konzentrierung des
423
33.3 Ausscheidung von Stoffwechselendprodukten
.. Tab.33.1 Ultrafiltration, Resorption und Sekretion

in der Niere
33
.. Tab.33.2 Zusammensetzung des Urins (Mensch)

Ausscheidung
Ultrafiltration
Resorption
Aktive
Sekretion
Wasser
Glucose
H+
Harnstoff
2035
Gelste Plasmabestandteile mit

einer Moleklmasse
< 15kDa
Lactat
Pyruvat
K+
NH4+
Kreatinin
11,5
Harnsure
0,32,0
(mmol/Tag)
Ketonkrper
Harnsure
Na+
100150
Aminosuren
Kreatinin
6080
Na+, K+, Ca2+,

Mg2+,
Cl, SO2
4 ,

HPO2
4 , HCO3
Gewisse
Medikamente
(g/Tag)
Cl
Ca
120240
2+
Mg
2+
411
36
Wasser
Urins; Aldosteron aus der Nebennierenrinde reguliert die Resorption von Na+-Ionen; und Parathyrin
(Parathormon) aus der Nebenschilddrse hemmt
die Resorption von anorganischem Phosphat.
Die aktiven Membrantransportvorgnge in den
Nieren sind energieaufwndig und verbrauchen
7% des Ruheumsatzes (.Tab.34.3). Eine Reihe
harnpflichtiger Stoffe wie gewisse Stoffwechselendprodukte und Pharmaka werden nicht nur ultrafiltriert, ohne wieder aus dem Primrharn resorbiert
zu werden, sondern zustzlich aktiv sezerniert
(.Tab.33.1). Die Menge und Art der Nahrung bestimmt im Wesentlichen die chemische Zusammensetzung des Urins. Die Hauptbestandteile des Urins
sind die N-haltigen organischen Stoffwechselendprodukte (Harnstoff, Harnsure) und die Elektrolytionen (.Tab.33.2). Die gelben Urinfarbstoffe (Urochrome) sind Abbauprodukte des Hmoglobins.
Nieren- und Blasensteine
In stehengelassenem, auf Umgebungstemperatur abgekhltem Urin fallen hufig gewisse
Substanzen aus. Wenn fr einen Urinbestandteil schon bei Krpertemperatur die
Sttigungsgrenze erreicht wird, bilden sich in
den Harnwegen Konkremente (Calciumoxalat,
Magnesiumammoniumphosphat (NH4)
Mg(PO4)6 H2O, Hydroxylapatit Ca5(PO4)3OH
und Harnsure, die zu Harnsteinen (Nierenoder Blasensteinen) heranwachsen knnen.

Auch die Leber erfllt mit der Sekretion der Galle
Ausscheidungsfunktionen Die Hauptbestand-
teile der Galle sind Gallensuren, Cholesterol und

Phospholipide. Cholesterol wird zum kleineren Teil
(20%) in unvernderter Form und zum greren
Teil (80%) in Form von Gallensuren ausgeschieden
(Abschn.17.6). Freie deprotonierte Gallensuren
sowie ihre Addukte mit Glycin und der nicht-proteinogenen Aminosure Taurin dienen zur Emulgierung der Nahrungsfette (Abschn.33.1).
Mit der Galle werden auch die Abbauprodukte
des Blutfarbstoffs Hm ausgeschieden Die Hm
abbauprodukte geben der Galle ihre grnbraune

Farbe. Die Erythrozyten des Menschen werden nach
einer mittleren Lebenszeit von 120Tagen durch retikulohistiocytre Zellen in Milz, Lymphknoten, Knochenmark und Leber abgebaut. ber die Zeit abgebaute Oligosaccharidketten der Glykoproteine in der
Erythrozytenmembran dienen hierbei als Zeitschaltuhr. Nach Endocytose der Erythrozyten in retikulohistiocytre Zellen ffnet die Hmoxygenase in
einer oxidativen Reaktion den Protophoryinring,
es entsteht das lineare Tetrapyrrol Biliverdin (von
grnlicher Farbe), das zu Bilirubin (gelb-orange)
reduziert wird (.Abb.33.8). Das schlecht wasserls-
424
liche Bilirubin wird als Komplex mit Serumalbumin

(daher die gelbe Farbe des Blutplasmas) zur Leber
transportiert, wo Bilirubin durch Konjugation mit
zwei Glucuronatresten ins wasserlsliche Bilirubindiglucuronid bergefhrt und mit der Galle ausgeschieden wird.
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N
Fe
Gelbsucht
Eine erhhte Konzentration von Bilirubin im
Blut und in den Geweben einschlielich der
Haut uert sich als Gelbsucht (Ikterus) .
Die Gelbsucht ist ein Symptom, das verschiedene Strungen als Ursache haben kann: Bei
hmolytischen Anmien hat die verkrzte
Lebensdauer der Erythrozyten einen verstrkten Abbau von Hm zur Folge; bei Leberfunktionsstrungen, z.B. einer Hepatitis, ist die
Glucuronidierung des Bilirubins und damit
zu dessen Sekretion durch die Hepatozyten
herabgesetzt; zum gleichen Ergebnis fhrt ein
Gallengangverschluss durch einen Gallenstein
(aus Cholesterol) oder einen Tumor.
33.4
Wasser-, Elektrolyt- und SureBasen-Haushalt
Die Regulation zur Konstanthaltung der Flssigkeitskompartimente des Krpers erstreckt sich auf
.. Abb.33.8 Abbau von Hm zu Bilirubin und Bildung von
Bilirubindiglucuronid. Die Hmoxygenase-Reaktion ffnet
den Tetrapyrrolring durch Oxidation einer Methingruppe
unter Bildung von Kohlenmonoxid CO. Das freigesetzte Eisen
wird dem Eisenpool zugefhrt. Das lineare Tetrapyrrol Biliverdin (grn) wird zum Bilirubin (gelb) reduziert (M, Methyl-; V,
Vinyl-; P, Propionylgruppe). Nach Transport mit Serumalbumin
in die Leber wird das schlecht wasserlsliche Bilirubin an den
Propionylseitenketten glucuronidiert zum gut wasserlslichen Bilirubindiglucuronid, das mit der Galle ausgeschieden
wird. (Struktur von Glucuronsure, Abschn.16.2). Die stetige Verkleinerung des Systems konjugierter Doppelbindungen
von Hm ber Biliverdin zu Bilirubin zeigt sich im Farbwechsel
von Blau ber Grn zu Gelb, der sich bei Blutunterlaufungen
der Haut oder einem blauen Auge im Verlauf von Tagen eindrucksvoll verfolgen lsst. Im Darm entfernen Bakterien die
Glucuronatreste und reduzieren die Gallenfarbstoffe zu farb
losen Urobilinogenen. Im Endabschnitt des Colons werden
die Urobilinogene z.T. reoxidiert zu farbigen Urobilinen; das
Nachdunkeln der Fzes an der Luft ist auf die Autooxidation
der noch vorhandenen Urobilinogene zurckzufhren
33
425
33.4 Wasser-, Elektrolyt- und Sure-Basen-Haushalt
.. Tab.33.3 Elektrolytzusammensetzung der Flssigkeitskompartimente

Plasma
(mmol/L)
Interstitielle
Flssigkeit
(mmol/L)
Intrazellulre
Flssigkeit
(mmol/kg H2O)
Kationen
Na+
142
144
10
150
2,5
1,25
1,5
0,75
13
K+
Ca
2+
Mg
2+
Anionen
Cl
103
114
2
H2 PO
4 / HPO4
50
SO2
4
0,5
0,5
10
27
30
10
Organische Suren
35
Protein
HCO
3
--
Volumen der Kompartimente (Wasserhaushalt),

osmotischen Druck und die Konzentrationen
der einzelnen Elektrolytionen (Elektrolythaushalt),
pH-Wert (Suren-Basen-Haushalt).
Das Krperwasser verteilt sich auf Flssigkeitskompartimente verschiedener Zusammensetzung Das Volumen der einzelnen Kompartimente
lsst sich experimentell als das Verteilungsvolumen

bestimmter Stoffe ermitteln. Fr einen Mann von
70kg Krpergewicht ergeben sich folgende Werte:
Flssigkeitskompartiment
Volumen
Stoff zur Ermittlung

des Verteilungs
volumens
Gesamt
krperwasser
45L
2
H2O (Deuteriumoxid,
schweres Wasser)
Intrazellulre Flssigkeit
30L
Ergibt sich aus

minus
Extrazellulre Flssigkeit
15L
Inulin (Fructose
polymer, 6kDa),
passiert Kapillarendothelien, aber nicht
Zellmembran
Interstitielle
Flssigkeit
12L
Blutplasma
3L
Ergibt sich aus

minus
131
I-markierte
Plasmaproteine
6,5
Die unterschiedliche Zusammensetzung der Kompartimente in Bezug auf Elektrolytionen und organische Verbindungen (.Tab.33.3) ergibt sich
aus aktiven Membrantransportvorgngen und der
Undurchlssigkeit der Zellmembran. Die Kapillarendothelien sind fr viele Stoffe frei durchlssig
(Sonderfall Blut-Hirn-Schranke; Abschn.34.1);
Proteine knnen jedoch kaum passieren. Die Flssigkeiten der verschiedenen Kompartimente sind
isotonisch.
Physiologische Kochsalzlsung
Die Lsung enthlt 0,9Gewichts-% NaCl
(154mM, 308mOsmol/L) in Wasser und ist
isotonisch mit den Krperflssigkeiten.
Der Wassergehalt des Krpers wird ber die Wasseraufnahme (Durstgefhl) und die Rckresorption von Wasser aus dem Primrharn reguliert
Unter Normalbedingungen nimmt ein erwachsener

Mensch pro Tag2L Wasser auf: 1L mit der flssigen und 0.7L mit der festen Nahrung, dazu kommt
0.3L Oxidationswasser (Abschn.15.2). Das antidiuretische Hormon ADH (Vasopressin) frdert in
den Sammelrohren ber cAMP die Verlagerung von
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20
Aquaporin aus dem endoplasmatischen Retikulum

in die Plasmamembran, wo Aquaporin einen nur fr
H2O durchgngigen Kanal bildet (Abschn.6.7).
Die Sekretion des ADH aus der Neurohypophyse
wird durch eine Zunahme der Osmolaritt des Blutplasmas sowie eine Abnahme des Blutdrucks und
des Blutvolumens stimuliert. Bei unzureichender
Sekretion von ADH wird der Primrharn nur noch
ungengend konzentriert und groe Urinvolumina
(bis 30L pro Tag) werden ausgeschieden: Diabetes
insipidus (lat. geschmacklos, im Gegensatz zum Diabetes mellitus; Abschn.34.3).
Die Resorption von Na+-Ionen aus dem Primrharn ist lebenswichtig Nur ein sehr kleiner
Teil (<3%) der Na+-Ionen im Primrharn wird mit

dem Endharn ausgeschieden. Ein sekundr-aktiver
Symport bringt Na+ zusammen mit Glucose oder
Aminosuren aus dem Tubuluslumen in die Zellen. Eine Na+/K+-ATPase in der basalen Membran
der Tubuluszelle pumpt unter ATP-Verbrauch 3Na+
ins Blutplasma im Austausch gegen 2K+ (Abschn.26.2). Das Nebennierenrindenhormon Aldosteron frdert die Synthese des Symporters und der
Na+/K+-ATPase. Die Sekretion von Aldosteron aus
der Nebennierenrinde wird ber das Renin-Angiotensin-System stimuliert . Eine Unterproduktion
von Aldosteron fhrt zu Salzverlust (Hyponatrimie)
und eingeschrnktem Blutvolumen mit hmodynamischen Problemen; gleichzeitig kommt es zu einer
Hyperkalimie (Nebennierenrinden-Insuffizienz,
Addison-Krankheit).
Ein Gegenspieler des Aldosterons ist das atriale natriuretische Peptid ANP, das von Myozyten
des linken Vorhofs bei Dehnung des Vorhofs sezerniert wird (Pr-pro-ANP 151, ANP 28Aminosurereste). Dieses Peptid und homologe Peptide
aus dem Gehirn erhhen die glomerulre Filtration
und hemmen die Na+-Resorption im Sammelrohr,
wodurch die Ausscheidung von Na+ und H2O erhht wird.
Der pH-Wert der extrazellulren Flssigkeit
wird konstant gehalten Im Blut und der interstitiellen Flssigkeit liegt der pH-Wert bei 7,4 (H+-Kon-
zentration 40nM) . Abweichungen auerhalb des

Bereichs von 7,357,45 fhren bereits zu Strungen
(Zu beachten: Auf der logarithmischen pH-Skala
entspricht ein pH von 0,3 einem Unterschied in
der H+-Konzentration um einen Faktor2). Eine Ab-
nahme des pH-Werts unter den Normbereich wird

als Acidose, eine Zunahme als Alkalose bezeichnet.
Grenzwerte der Ionenkonzentrationen
Mit dem Leben vereinbare Konzentrationsbereiche, d.h. Extremwerte gemessen bei
Patienten, welche sich wieder erholt haben:
H3 OC
C
Na
K
20160 nM
.pH 7;76;8/
100200 mM
1;512 mM
Warum fhren Abweichungen des pH-Werts vom

Normalwert zu Strungen? Die Aktivitt von Proteinen, insbesondere von Enzymen, Ionenpumpen,
Ionenkanlen und Proteinen der Signaltransduktion, ist von einem bestimmten Ladungszustand
ihrer ionisierbaren Gruppen und damit vom pHWert abhngig.
Der intrazellulre pH-Wert liegt bei pH7,07,2
und ist damit tiefer als der extrazellulre Wert. Der
Zellstoffwechsel produziert laufend H+, die Zellen
verfgen daher ber aktive Transportmechanismen
fr den Export von H+ und den Import von HCO
3:
Na+/H+-Antiport koppelt den Na+-Einstrom
mit dem Export von H+; dieses System wird
bei intrazellulrem H+-berschuss aktiviert.

+
Cl/HCO
3 -Antiport und Na /HCO3 -Symport
verschieben in Abhngigkeit von den bestehenden elektrochemischen Gradienten die
Base HCO
3 in die Zelle.
Belastungen des Sure-Basen-Haushalts Der
Stoffwechsel eines erwachsenen Menschen produziert, hauptschlich im Citratzyklus, 1020mol CO2

pro Tag. Im Blut wird CO2 als HCO
3 zu den Lungen
+
transportiert: CO2 +H2O H2CO3 HCO
3 +H .
+
Das bei dieser Reaktion entstehende H wird durch
die Puffersysteme des Blutes abgefangen und senkt
den pH-Wert des Blutes nur geringfgig (arterielles
Blut pH7,43, venses Blut pH7,40). In den Lungen
luft die Reaktion nach links und CO2 wird abgeatmet. Bei normaler Lungenfunktion ergibt sich durch
CO2 keine Belastung des Sure-Basen-Haushalts.
Neben dem flchtigen CO2, das abgeatmet werden kann, produziert der Stoffwechsel jedoch auch
nichtflchtige Suren. Dazu gehrt die Schwefel-
427
sure H2SO4, die beim Abbau der schwefelhaltigen
Aminosuren Cystein sowie Methionin entsteht (bei

gemischter Kost 4060mmol pro Tag) und vollstndig zu Sulfat und 2H+ dissoziiert.
Milchsure, die bei anaerobem Stoffwechsel in
der Muskulatur in greren Mengen gebildet wird
(bis 25mM; normal 12mM), dissoziiert zu Lactat und H+. Bei starker anaerober Muskelleistung
kommt es zu einer vorbergehenden Ansuerung
der Muskulatur (bis pH<7), des Bluts und des gesamten extrazellulren Flssigkeitskompartiments.
Lactat wird jedoch nicht ausgeschieden, sondern als
Milchsure zu ungeladenen Verbindungen umgebaut, z.B. der Gluconeogenese zugefhrt (Cori-Zyklus); dabei verschwindet das Proton aus der Bilanz:
Lactat+H+MilchsureGlucose.
Fr die Ketonkrper, Acetessigsure und 3-Hydroxybuttersure, gilt im Normalfall das Gleiche
wie fr Milchsure, sie belasten den Sure-Basen-Haushalt nicht. Im Hungerzustand und bei
nicht behandeltem Diabetes mellitus hingegen
werden vermehrt Ketonkrper gebildet und zum
Teil im Urin ausgeschieden. Da der pKa-Wert der
Ketonkrper etwas niedriger ist als der pH-Wert4,5
von maximal angesuertem Urin, werden die Ketonkrper vorwiegend als Anionen ausgeschieden.
Zurck bleiben die Protonen und suern den Krper an (metabolische Acidose).
Puffersysteme halten den pH-Wert trotz der
Belastungen des Sure-Basen-Haushalts mglichst konstant Die Pufferwirkung bei Zugabe von
Sure oder Base ist am grten, wenn der pKa-Wert

des Puffers dem pH-Wert der Lsung entspricht.
Das wichtigste Puffersystem im extrazellulren
Kompartiment ist der Hydrogencarbonat (Bicarbonat)-Kohlensure-Puffer. Das Verhalten dieses
Puffersystems lsst sich mit der Henderson-Hasselbalch-Puffergleichung beschreiben:
pH D pKa C log
HCO
3
H2 CO3
(pKa D 3;5I die hier angegebenen Werte
gelten bei 150 mM NaCl, pH 7,4 und 25 C/
ber die sehr schnelle Carboanhydrase-Reaktion
CO2 C H2 O H2 CO3
33
steht H2CO3 mit dem gelsten CO2 im Gleichgewicht. Wird dieses Gleichgewicht in der Puffergleichung bercksichtigt, ergibt sich
pH D pK0a C log
HCO
3
H2 CO3 C CO2
Bei einem Partialdruck von CO2 in den Lungenalveolen pCO2=40mm Hg (5,3kPa) liegt CO2 in der
folgenden Konzentration vor:
CO2 D pCO2
D 0;03 mM mmHg1 40 mmHg D 1;2 mM;

wobei =0,03mM mmHg1 der Lslichkeitskoeffizient von CO2 ist. [H2CO3] ist im Hydratationsgleichgewicht ungefhr 400-mal niedriger und kann in der
Gleichung vernachlssigt werden. Weil ferner pCO2
die am einfachsten zu bestimmende Gre ist, wird
bei der Untersuchung des Sure-Basen-Haushalts
pCO2 statt [CO2] in die Gleichung eingesetzt:
pH D pK0a C log
HCO
3
pCO2
Dabei ergibt sich durch Einsetzen der gemessenen

Normalwerte von [H2CO3] und pCO2 ein apparenter (scheinbarer) Wert fr pKa:
7;4 D pK0a
24 mM
0;03 mM mmHg1 40 mmHg
24 mM
D pK0a C log
D pK0a C log20
0;12 mM
D pK0a C 1;4
Clog
pK0a D 6;1
Wird pCO2 statt [H2CO3] in die Puffergleichung

eingesetzt, schreibt sich diese als
HCO
3
pCO2
HCO
3
D 6,1 C log
CO2
pH D 6,1 C log
Obwohl der pKa-Wert von 6,1 weit ab vom pH-Wert

liegt, welcher konstant zu halten ist, bildet Hydro-
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Effizientes HCO
3 -CO2-CO 2-Puffersystem
Vergleich des Puffereffekts von geschlossenem und offenem Hydrogencarbonat/Kohlensure-System:
Ausgangssituation:
HCO
3
CO2
24 mM
20
pH D 6,1 C log
D 6,1 C log
D 7,4
1,2 mM
1
pH D pKa0 C log
Belastung durch 12mM HCl:

C
12 mM HCO
3 C 12 mM H
12 mM H2 CO3
#
12 mM CO2
16
Konsequenz in geschlossenem System:
17
pH D 6;1 C log
18
Konsequenz in offenem System:
19
20
pCO2 in den Lungenalveolen ist der pH-Wert

nur auf 7,1 statt 6,06 herabgesetzt worden.
Die Pufferwirkung wird weiter verbessert,
wenn durch verstrkte Atmung (Hyperventilation) pCO2 in den Lungenalveolen abgesenkt
wird. Wenn pCO2 auf 20mmHg halbiert wrde
(ein hypothetischer Wert, der in vivo nicht
erreicht werden kann), ergibt sich
gencarbonat/Kohlensure ein sehr wirksames Puffersystem. Es ist effizient, weil es sich um ein offenes
System handelt, bei dem [CO2], die Konzentration
des im Blut gelsten CO2, mit der Alveolarluft im
Gleichgewicht steht und pCO2 der Alveolarluft wegen des kontinuierlichen atmungsbedingten Austausches mit der Umgebungsluft konstant ist. Der Term
pCO2 bzw. [CO2] in den obigen Gleichungen wird
daher konstant gehalten. Eine Belastung des Systems
mit Sure fhrt ber H++HCO
3 H2CO3 wohl zu
einer Abnahme von [HCO
],
verndert
aber den
3
Wert des Nenners nicht. Das Rechenbeispiel (s.
unten) belegt die Wirksamkeit des Hydrogencarbonat/Kohlensure-Systems und zeigt auch, dass
Hyperventilation bei einer Acidose den pH-Wert
im Normbereich halten kann (respiratorische Kompensation einer metabolischen Acidose).
pH D 6;1 C log
24 mM 12 mM
D 6;06
1;2 mM C 12 mM
12
D 7;1
1;2
Das durch die Ansuerung gebildete CO2 wird

abgeatmet, pCO2 wird wieder 40mmHg und
[CO2] 1,2mM. Durch die Konstanthaltung von
pH D 6;1 C log
12 mM
D 7;4
0;6 mM
Das Absenken des pCO2 in den Lungenalveolen

hat den pH-Wert normalisiert; die Acidose ist
respiratorisch kompensiert worden. Trotz des
normalen pH-Wertes besteht jedoch immer
noch eine Acidose: [HCO
3 ] ist erniedrigt und
die Hyperventilation muss fortgesetzt werden.
Im Blut tragen Hmoglobin (1218g/100mL)

und Plasmaproteine (68g/100 mL) zusammen
etwa ein Viertel zur Pufferkapazitt bei. Besonders
pufferwirksam sind die Histidinreste dieser Pro2 ;
teine; anorganisches Phosphat (H2 PO
4 =HPO4
pKa = 6,8) trgt wegen seiner niedrigen Konzentration (1mM) nur wenig bei.
Der intrazellulre pH-Wert wird durch Puffer

und aktiven H+-Export konstant gehalten In den
Zellen wirken die Proteine mit den Imidazolgruppen

ihrer Histidinreste (pKa=6,07,0) und organische
Phosphatreste (Nucleotide, RNA, phosphorylierte
Stoffwechselzwischenprodukte) als Puffer. berschssige H+ werden durch aktiven Transport, zumeist im Austausch mit Na+, aus der Zelle befrdert.
Pufferkapazitten
Tierversuche haben ergeben, dass die verschiedenen Flssigkeitskompartimente am
Auffangen einer Surebelastung des Krpers
mit den folgenden Anteilen beteiligt sind:
Intrazellulr
51%
Extrazellulres
HCO
3 /CO2
42%
Hmoglobin in Erythrozyten
6%
Plasmaproteine
1%
429
33
+
+
.. Abb.33.9 Rckresorption von HCO
3 durch die Nieren. Die treibende Kraft ist die Na /K -ATPase in der basalen Membran,
welche die Na+-Konzentration in der Tubuluszelle niedrig hlt. H+ entsteht in der Tubuluszelle durch Dissoziation von H2CO3 und
wird durch einen sekundr-aktiven Antiport im Austausch mit Na+ ins Tubuluslumen gebracht. Dort wird H+ von HCO
3 , das bei
+
der Ultrafiltration in den Primrharn gelangt ist, abgefangen. HCO
3 , welches bei der Verschiebung von H im Tubuluslumen
+
zurckbleibt, wird durch einen Na+-gekoppelten elektrogenen Symport (3 HCO
3 plus 1Na ), der durch das negative Membranpotenzial angetrieben wird, aus der Zelle geschafft. Bilanzmig wird durch die Sekretion von H+ ins Tubuluslumen HCO
3 aus
dem Tubulus rckresorbiert und ans Blutplasma zurckgegeben. Unter Normalbedingungen werden auf diese Weise mehr als
95% des filtrierten HCO
3 ins Blutplasma zurckgebracht
Die Puffersysteme und die respiratorische Kompensation schwchen die Wirkung eines H+-berschusses oder H+-Defizits des Krpers auf den pHWert wohl ab, bieten jedoch nur eine temporre
Lsung: Der Puffereffekt wird erkauft durch eine
erhhte Protonierung der Pufferbasen und im Hydrogencarbonat/Kohlensure-System mit einem
Verlust an HCO
3:
HC C HCO
3 ! H2 CO3 ! H2 O C CO2
.CO2 wird abgeatmet/
Bei der Normalisierung der Konzentration von

HCO
3 tritt durch die umgekehrte Reaktion der
H+-berschuss wieder auf. Nur die Niere kann einen metabolisch bedingten H+-berschuss oder
ein H+-Defizit endgltig beheben.
Die Nieren scheiden Protonen durch Ansuern eines gepufferten Urins aus Die Tubulus-
zellen scheiden H+ durch einen sekundr-aktiven

Antiport im Austausch mit Na+ aus (.Abb.33.9).
Im distalen Tubulus und im Sammelrohr ist zu-
dem eine H+-transportierende ATPase wirksam.

Der Urin kann maximal auf pH4,5 (entsprechend
0,03mmol H+ pro L Urin) angesuert werden. Da
pro Tag 80120mmol fixe Suren (H2SO4 und organische Suren) anfallen, wre eine Ansuerung
quantitativ bedeutungslos, wenn ein ungepufferter Urin ausgeschieden wrde. Die ausscheidbare
Menge von H+ wird jedoch durch im Urin vorhandene Puffersubstanzen stark erhht. Das ins
Tubuluslumen gepumpte H+ wird von HCO
3 aus
dem Primrharn abgefangen. Das entstehende
H2CO3 steht ber die Carboanhydrasereaktion mit
CO2 + H2O im Gleichgewicht. Weil das ins Lumen
gepumpte H+ aus der Dissoziation von H2CO3 in

+
HCO
3 +H stammt, wird bilanzmig HCO3 aus
dem Lumen in die Tubuluszelle und weiter ins Blutplasma verschoben. Die H+-Ausscheidung in der
Niere dient in erster Linie der Rckgewinnung von
HCO
3 . Quantitativ weniger wichtig ist die Ansuerung von Pufferbasen wie HPO2
4 und organischen
Suren.
Der grte Teil des anorganischen Phosphats
im Primrharn wird resorbiert, nur 10% werden
430
.. Abb.33.10 Ausscheidung von Ammoniumionen. Die

Glutaminasereaktion liefert NH4+, welches die Tubulusmembran nicht durchdringen kann. NH3 diffundiert
durch die Membran und wird im saureren Urin durch
Reprotonierung abgefangen. Die Differenz im pH-Wert
zwischen Tubulus-Zelle und Urin (pH4,5 entspricht maximal angesuertem Urin) fhrt dazu, dass die Konzentration von NH4+-Ionen im Urin sehr viel hher als in der Zelle
ist. Bilanzmig ist NH4+ im Austausch mit Na+ in den Urin
gebracht worden (H+ ist durch sekundr-aktiven Antiport
mit Na+ im Urin ausgetauscht worden, vgl. .Abb.33.9)
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2
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20
mit dem Endharn ausgeschieden (Parathormon

hemmt die tubulre Resorption von Pi). Der pK2Wert von Phosphorsure ist 6,8. In Abhngigkeit
vom pH-Wert liegt Phosphat in den folgenden Formen vor:
pH7,8
pH4,5
HPO2
4
99%,
H2 PO
4
1%
H2 PO
4
100%
Bei gemischter Kost werden tglich 40mmol

Phosphat ausgeschieden. Der Regulationsbereich
der H+-Ausscheidung durch Protonierung von
Phosphat ist demnach betrchtlich mehr als die
0,03mmol/Tag mit einem ungepufferten Urin.
Bei Acidose wird NHC
4 vermehrt ausgeschieden Bei gemischter Kost werden 3050mmol
NHC
4 (pKa=9,3) pro Tag ausgeschieden. Die Menge
hngt vom pH-Wert des Urins ab (.Abb.33.10).
Die Protonierung von NH3 zu NHC
4 fhrt allerdings
nicht wie bei Phosphat zu erhhter Ausscheidung
von H+, in der Bilanz ist einfach NHC
4 aus der Zelle
in den Urin gebracht worden. Trotzdem leistet die
Ausscheidung von NHC
4 einen Beitrag zur Aufrechterhaltung des Sure-Basen-Gleichgewichts:
Die Ausscheidung von Protein-Stickstoff in Form

von NHC
4 verbraucht kein HCO3 . Dies im Gegensatz zum alternativen Weg (Synthese von Harnstoff
in Leber und dessen Ausscheidung durch Niere),
welcher dem Krper HCO
3 entzieht (.Abb.18.3).
Bei einer Acidose werden in der Leber (nicht in der
Niere!) die Glutaminase und die Harnstoffsynthese

gehemmt sowie die Aktivitt der Glutaminsynthetase der Leber (Abschn.18.2) und der Glutaminase der Niere erhht.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517252-0
33.3 Ausscheidung von Stoffwechsel
endprodukten
33.4 Wasser-, Elektrolyt- und Sure-BasenHaushalt
431
Organstoffwechsel
und Lipidtransport im Blut
34.1
Stoffwechselleistungen der Organe in Resorptionsund Postresorptionsphase432
34.2
Anpassung des Stoffwechsels an Hungerzustand 435
34.3
Diabetes mellitus436
34.4
Lipidtransport und Lipoproteine 438

34
432
1
2
3
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20
Kapitel 34 Organstoffwechsel und Lipidtransport im Blut
Die Spezialisierung der Organe bei Mensch und

hheren Tieren ist nur mglich dank des Blutkreislaufs, der alle Organe miteinander verbindet. Was
sind die Transportgter? Auer den Blutgasen O2
und CO2 sind es die molekularen Bausteine, die
Energietrger und die Ausscheidungsprodukte,
die allen Zellen des Organismus bzw. den Ausscheidungsorganen zugefhrt werden; es gehren dazu
auch die Signalstoffe, die Hormone, die zusammen
mit dem Nervensystem den gesamten Organismus
regulatorisch vernetzen.
Die Leber ist das zentrale Stoffwechselorgan.
Zusammen mit dem Fettgewebe gleicht sie die
Fluktuationen in der Nhrstoffzufuhr aus und sorgt
fr eine der Stoffwechselsituation des Organismus
angemessene Versorgung der Verbraucherorgane
mit Brenn- und Baustoffen. Bei den Energietrgern
Glucose, Fettsuren und Ketonkrpern wird die
Richtung und das Ausma des Transports sowohl
vom Angebot aus Darm und Leber als auch vom
Bedarf der Gewebe bestimmt. Bei den Aminosuren, den wichtigsten Baustoffen, wird das Ausma
des Transports aus Darm und Leber in die Peripherie weitgehend durch deren Bedarf an Aminosuren bestimmt. Ein Rcktransport von Aminosuren zur Leber findet nur im Hungerzustand statt,
wenn die Muskeln Proteine abbauen zugunsten
der in der Leber ablaufenden Gluconeogenese aus
Aminosuren. Bei der Zuckerkrankheit (Diabetes
mellitus) knnen die Muskel- und Fettzellen infolge Insulinmangels oder defekter Insulinrezeptoren nur wenig oder gar keine Glucose aufnehmen;
der Stoffwechsel entspricht weitgehend einem
Hungerzustand.
Der Transport der wasserlslichen Stoffe (Glucose, Ketonkrper und Aminosuren) im Blut bentigt keine besonderen Transportvehikel. Hingegen
sind die wasserunlslichen Lipide (Triacylglycerole,
Cholesterol und Fettsuren) auf besondere Transportproteine (Lipoproteine und Serumalbumin)
angewiesen.
34.1 Stoffwechselleistungen
der Organe in Resorptionsund Postresorptionsphase
Drei Stoffwechselzustnde sind zu unterscheiden:

Die Resorptionsphase beginnt mit der Nahrungsaufnahme; die Nhrstoffkonzentration
im Blut ist erhht.
Die Postresorptionsphase beginnt, sobald
einige Stunden nach der Nahrungsaufnahme
keine Nhrstoffe mehr resorbiert werden.
Der Hungerzustand setzt 23Tage nach der
letzten Nahrungszufuhr ein.
Allosterische, hormonale und weitere Regulationsvorgnge passen den Fluss der Nhrstoffe
dem Stoffwechselzustand an In der Resorpti-
onsphase dienen die Nhrstoffe, welche nicht unmittelbar zur Energiegewinnung abgebaut werden,
zur Anlage von Reserven (Glykogen und Triacyl
glycerole). In der Postresorptionsphase und im
Hungerzustand werden die Reserven mobilisiert.
Vier verschiedene Mechanismen regulieren den
Durchsatz der einzelnen Stoffwechselwege:
Regulation durch Substratkonzentration ([S]
im Bereich vonKm! Abschn.4.6),
allosterische Aktivatoren und Inhibitoren,
kovalente Modifizierung der Enzyme,
Induktion oder Repression der Enzymsynthese.
--
Die Kontrollmechanismen sind nach ihren Reaktionszeiten aufgelistet: Vernderungen der Substratkonzentration sind unmittelbar wirksam, whrend
eine vernderte Synthesegeschwindigkeit eines
Enzyms sich unter Umstnden erst nach Tagen bemerkbar macht.
Hormone passen den Organstoffwechsel den
sich verndernden Stoffwechselzustnden an
(Abschn.28.7). Insulin erhht in der Resorptionsphase die Aufnahme von Glucose in die Muskel- und Fettzellen und frdert damit die Anlage
von Energiereserven. Die meisten anderen Gewebe, insbesondere die Leber, nehmen Glucose
unabhngig von Insulin auf. Glucagon und Adrenalin mobilisieren die Energiereserven in der
Postresorptionsphase und in Stress- und Gefahrensituationen.
34
433
34.1 Stoffwechselleistungen der Organe in Resorptions- und Postresorptionsphase
.. Tab.34.1 Import und Export von Nhrstoffen durch die einzelnen Organe
Resorptionsphase
Postresorptionsphase
Hungerzustand
Import
Export
Import
Export
Import
Export
Leber
Glucose
Fettsuren
Fettsuren
Glucose
Fettsuren
Aminosuren
Glycerol
Ketonkrper
Glucose
Fett
gewebe
Fettsuren
Fettsuren
Glycerol
Fettsuren
Glycerol
Muskulatur
Glucose
(Lactat)
Fettsuren
Ketonkrper
Fettsuren
Aminosuren
Herz
muskel
Fettsuren
Glucose
Lactata
Fettsuren
Ketonkrper
Ketonkrper
Gehirn
Glucose
Glucose
Ketonkrper
bei anaerober krperlicher Leistung
Akute-Phase-Reaktion
Bei schwerer Gewebeschdigung (Trauma,
Operation) oder ausgedehnten Entzndungsvorgngen (Infektionen) kann der Ruheenergieumsatz des Krpers bis auf das Zweifache des
Normalwertes ansteigen. Damit einher gehen
erhhte Krpertemperatur, erhhte Freisetzung von Aminosuren aus der Muskulatur,
verstrkte Gluconeogenese in der Leber, die zu
Hyperglykmie fhren kann, sowie eine Cytokin-ausgelste (Interleukin-1, IL-6, IL-8; TNF-)
erhhte Konzentration der Akute-Phase-Proteine im Blutplasma (C-reaktives Protein CRP,
Fibrinogen, u.a.m.).
Die Leber ist das zentrale Nhrstoffverteilungszentrum Die Pfortader bringt die Nhrstoffe vom
Darm direkt in die Leber, welche die Nhrstoffe

zur Energiegewinnung abbaut, oder sie speichert
oder auch an andere Organe weitergibt. Die Leber,
zusammen mit dem Fettgewebe, wirkt damit als
Puffer, welcher die Versorgung der Peripherie mit
Nhrstoffen trotz Vernderungen des Stoffwechselzustands mglichst konstant hlt.
Auerdem synthetisiert die Leber fast alle
Plasmaproteine sowie die Gallensuren, die sie
zusammen mit Cholesterol und Bilirubin in der
Galle ausscheidet. Die Leber ist berdies das zentrale Entgiftungsorgan: Steroidhormone, Ethanol,
Bilirubin, Medikamente und andere Xenobiotica
werden durch Biotransformation inaktiviert und in
wasserlsliche Verbindungen bergefhrt (Abschn.31.2).
Kohlenhydratstoffwechsel der Leber: In
der Resorptionsphase nach einer kohlenhydratreichen Mahlzeit nimmt die Leber etwa 60% der
mit dem Pfortaderblut zugefhrten Glucose auf.
Verantwortlich fr die Aufnahme von Glucose ist
die Glucokinase mit ihrem hohen Km-Wert von
10mM, deren Reaktionsgeschwindigkeit linear auf
Glucosekonzentrationen im millimolaren Bereich
anspricht. Das Enzym phosphoryliert die Glucose
zu Glucose-6-phosphat, das zur Synthese von
Glykogen bentigt wird. ber Signalkaskaden aktiviert Insulin die Glykogensynthase und hemmt
die Glykogenphosphorylase (Abschn.28.7). Die
erhhte Produktion von Glucose-6-phosphat in der
Resorptionsphase erlaubt zudem, ber den Pentosephosphatweg vermehrt NADPH zu bilden, das
fr die Synthese von Fettsuren verwendet wird.
Ebenso wird vermehrt Glucose zu Acetyl-CoA abgebaut, das entweder zur Energiegewinnung ber
den Citratzyklus oder zur Synthese von Fettsuren
verwendet wird. Die Gluconeogenese ist in der
Resorptionsphase praktisch eingestellt; sie ber-
434
1
2
3
4
.. Tab.34.2 Die Energiereserven des menschlichen Krpers (erwachsener Mann, 70kg)

Menge
(kg)
Glykogen
Fett
Protein
a
Brennwert
(kcal)
0,45a
15
6
(kJ)
1800
7500
140000
590000
24000
100000
Gesamtglykogen: Muskeln (300g) und Leber (150g)
Nur etwa ein Drittel des gesamten Krperproteins (18kg) kann zur Energiegewinnung abgebaut werden, ohne
lebensnotwendige Funktionen zu gefhrden
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nimmt jedoch in der Postresorptionsphase, wenn

die Glykogenreserve abnimmt, die Versorgung des
Organismus mit Glucose (.Tab.34.1).
Fettstoffwechsel der Leber: Die Leber ist auch
das Hauptorgan fr die Neusynthese von Fettsuren. Ein Anstieg der Konzentration von Acetyl-CoA und NADPH als Folge eines gesteigerten
Abbaus von Glucose sowie die Aktivierung der
Acetyl-CoA-Carboxylase durch Citrat frdern die
Fettsuresynthese (Abschn.17.2). Das erhhte
Angebot von neu synthetisiertem Acyl-CoA beschleunigt die Synthese von Triacylglycerolen in
der Leber; im gleichen Sinn wirkt die erhhte Zufuhr von Fettsuren durch den Abbau der Reste
(Remnants) von Chylomikronen, den proteinhaltigen Partikeln mit denen Fette aus dem Darm der
Leber zugefhrt werden. Glycerol-3-phosphat, die
Kerngruppe fr die Synthese der Triacylglycerole,
stammt aus der Glykolyse. Die Leber verpackt die
neu synthetisierten Triacylglycerole in VLDL (Very
low-density lipoproteins; Abschn.34.4), die an
das Blut abgegeben werden zur Versorgung der Peripherie mit Fettsuren.
Aminosurestoffwechsel der Leber: Mensch
und Tier verfgen ber keine besonderen Speicherproteine. Whrend der Resorptionsphase werden in
den Muskeln die Proteine ersetzt, welche whrend
einer allfllig vorangehenden lngeren Nahrungskarenz zugunsten der Gluconeogenese abgebaut worden sind. berschssige Aminosuren werden abgebaut oder zur Synthese von Fettsuren verwendet.
und bei Bedarf werden sie mobilisiert (.Tab.34.2).

Die Fettsuren aus dem Nahrungsfett gelangen als
Triacylglycerole in Chylomikronen ber Lymphe
und Blutbahn vom Darm ins Fettgewebe; ein
geringerer Teil wird mit Lipoproteinen (VLDL)
aus der Leber zugefhrt. Die Lipoproteinlipase,
ein extrazellulres Enzym an der Oberflche der
Kapillarendothelien in Fettgewebe und Muskel,
hydrolysiert die Triacylglycerole der Chylomikronen und VLDL zu Fettsuren und Glycerol. Das
fr die Resynthese der Triacylglycerole bentigte
Glycerol-3-phosphat beschaffen sich die Fettzellen
ber den glykolytischen Weg, sie besitzen keine
Glycerolkinase.
In der Resorptionsphase hemmt die antilipolytische Wirkung des Insulins den Abbau der Triacylglycerole (Insulin fhrt zur dephosphorylierten, inaktiven Form der hormonregulierten Lipase;
Abschn.17.4).
Wichtige Lipasen
Die Pankreaslipase hydrolysiert im Darm die
mit der Nahrung aufgenommenen Triacylglycerole (TAG) zu Fettsuren und 2-Monoacylglycerol. Sie kann TAG nur mit Untersttzung der
oberflchenaktiven Gallensuren angreifen.
Die Lipoproteinlipase findet sich in extrahepatischen Geweben (Fettgewebe, Muskel) an
der Oberflche der Kapillarendothelzellen. Das
Enzym spaltet die TAG von Chylomikronen und
VLDL in Fettsuren und Glycerol.
Die hormonregulierte Lipase in den Fettzellen
wird durch eine cAMP-abhngige Proteinkinase
aktiviert und baut die gespeicherten TAG ab.
Das Fettgewebe enthlt ber 80

% der
gesamten Energiereserve des Krpers Die
Stoffwechselleistungen des Fettgewebes sind beschrnkt: Triacylglycerolreserven werden angelegt,
435
34.2 Anpassung des Stoffwechsels an Hungerzustand
34
Blut-Hirn-Schranke
.. Tab.34.3O2-Verbrauch in Ruhe whrend
der Postresorptionsphase
Organ
O2-Verbrauch
(% des Totalverbrauchs)
Muskulatur
Gehirn
Leber
Herz
Nieren
Rest
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20
10
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8
Eine selektiv durchlssige Permeationsbarriere zwischen Blut und Gehirn bei Vertebraten, die durch das Kapillarendothel und
umgebende Gliazellen mit Tight junctions und
selektiven Transportern zustande kommt.
Die Blut-Hirn-Schranke hat eine Schutzfunktion, ist jedoch ein Problem bei der Therapie
neurologischer Erkrankungen mit gewissen
Medikamenten und bei der Chemotherapie
von Hirntumoren.
Grter Energieverbraucher des Krpers ist die

Muskulatur Beim Menschen kann intensive Kr-
perarbeit den Sauerstoffverbrauch der Muskulatur

von etwa einem Drittel (.Tab.34.3) auf 90% des
Gesamtverbrauchs steigern!
Kohlenhydratstoffwechsel und Fettstoffwechsel der Muskeln: Whrend der Resorptionsphase ist
Glucose der Hauptbrennstoff, falls Kontraktionsarbeit zu leisten ist; mit berschssiger Glucose wird
die Glykogenreserve nachgefllt. In der Postresorptionsphase lsen Fettsuren sowie Ketonkrper die
Glucose als Hauptbrennstoff ab (.Tab.34.1). Die
Fettsuren werden durch die Lipoproteinlipase aus
Chylomikronen und VLDL freigesetzt.
Aminosurestoffwechsel der Muskeln: In der
Resorptionsphase nach einer eiweihaltigen Mahlzeit nehmen die Muskelzellen Aminosuren auf und
resynthetisieren die Proteine, welche zuvor zur Gluconeogenese verwendet worden sind.
Das Gehirn hat im Stoffwechsel eine Sonderstellung inne Beim erwachsenen Menschen
entspricht das Gehirn etwa 2% der gesamten Krpermasse, verbraucht aber 20% des Sauerstoffs,
welchen der Krper im Ruhezustand aufnimmt
(.Tab.34.3). Der Energiebedarf des Gehirns ist
konstant und unabhngig von krperlicher oder
geistiger Ttigkeit. Bei ausreichender Ernhrung
verwendet das Gehirn ausschlielich Glucose als
Brennstoff; es verfgt weder ber nennenswerte
Mengen von Glykogen noch ist es zur Gluconeogenese befhigt. Das Gehirn besitzt auch keine
Fettreserven, noch knnen Fettsuren die BlutHirn-Schranke passieren. Das Gehirn ist daher
vllig abhngig von der Glucose im Blut. Eine ausgeprgte Hypoglykmie (z.B. nach Insulinberdosierung bei Diabetes) kann zu Bewusstseinsverlust,
Gehirnschden und Tod fhren.
34.2
Anpassung des Stoffwechsels

an Hungerzustand
Unabhngig von der Ursache des Hungerzustands

(Nahrungsmangel, freiwilliges Fasten oder Krankheit) reagiert der Krper mit einem herabgesetzten
Insulin/Glucagon-Verhltnis, wodurch die Triacyl
glycerol-Reserven mobilisiert werden (.Tab.34.1).
Die Leber sorgt fr eine ausreichende Glucosekonzentration im Blut Sobald einige Stun-
den nach einer kohlenhydrathaltigen Mahlzeit der

Nachschub an Glucose aus dem Darm versiegt,
wird unter der Einwirkung von Glucagon das Glykogen in der Leber zu Glucose abgebaut. Nach
weiteren 1018h ist diese Reserve erschpft und
wird durch verstrkte Gluconeogenese ersetzt.
Die Substrate fr die Gluconeogenese sind glucogene Aminosuren aus dem Abbau von Muskelproteinen (.Tab.34.2), Glycerol aus dem Abbau
von Triacylglycerol im Fettgewebe sowie Lactat aus
Erythrozyten und anaerob arbeitenden Muskeln.
Glucagon und Cortisol aus der Nebennierenrinde
(Abschn.28.3) induzieren verschiedene Schlsselenzyme der Gluconeogenese.
Die Leber produziert Ketonkrper als Brennstoff
fr periphere Organe Ketonkrper, hauptschlich
3-Hydroxybutyrat (Abschn.17.3), werden produziert, sobald durch den Abbau von Fettsuren mehr
Acetyl-CoA anfllt, als der Citratzyklus aufnehmen
kann. Die Oxidationsmittel NAD+ und FAD, d.h. die
oxidative Kapazitt der Atmungskette, setzen diese
Limite. Die Synthese von Ketonkrpern wird bereits
in den ersten Tagen der Nahrungskarenz gesteigert.
Die Ketonkrper ersetzen, sobald ihre Konzentration
436
Der Skelettmuskel stellt bei lnger dauerndem

Hungerzustand gnzlich auf Fettsuren als Brennstoff um Nach einer Hungerperiode von etwa
1
2
3Wochen verbrennen die Muskeln ausschlielich

Fettsuren; die Ketonkrper, deren Konzentration
im Blut dadurch weiter ansteigt, stehen damit dem
Gehirn und anderen Organen zur Verfgung. Die
Umstellung der Muskeln auf Fettsuren verringert
wie die Umstellung der meisten anderen Organe auf
Ketonkrper den Abbau der Muskelproteine.
3
4
5
34.3
Die Zuckerkrankheit betrifft etwa 3% der Erdbevlkerung, sie ist die weltweit hufigste endokrine
Krankheit. Wegen ungengender oder fehlender
Insulinproduktion (Diabetes Typ 1) oder eines
Defekts der zellulren Insulinrezeptoren (Diabetes
Typ2) berwiegt die Wirkung des Glucagons.
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20
Diabetes mellitus
.. Abb.34.1 Hormonale Regulation des Abbaus von Triacyl

glycerol im Fettgewebe. Die Aktivierung der hormonregulierten Lipase verluft hnlich wie die Aktivierung der Glykogenphosphorylase (.Abb.16.4). Die Phosphorylierung der
Lipase wird durch eine Phosphatase rckgngig gemacht
gengend hoch ist, in den meisten Geweben die Glucose als Brennstoff (.Tab.34.4). Dadurch verringert
sich der Bedarf an Aminosuren als Substrate fr die
Gluconeogenese; der Abbau krpereigener Proteine
wird entsprechend reduziert. Bei lnger dauerndem
Hungerzustand adaptiert das Gehirn seinen Stoffwechsel und kann die Glucose als Energietrger zur
Hlfte durch Ketonkrper ersetzen.
Im Fettgewebe mobilisiert die hormonregulierte Lipase die Triacylglycerol-Reserve Im
Hungerzustand werden Glucagon, Adrenalin und

Noradrenalin vermehrt ausgeschttet und aktivieren ber einen G-Protein gekoppelten Rezeptor
(GPCR) und cAMP die Lipase (.Abb.34.1). Die
freigesetzten Fettsuren werden ins Blut abgegeben,
an Serumalbumin gebunden und als Energietrger
zu anderen Organen transportiert. Das freigesetzte
Glycerol dient der Leber als Substrat fr die Gluconeogenese. Im Hungerzustand verhindert die
niedrige Konzentration von Insulin die Synthese
von Fettsuren und Triacylglycerol und hlt die
Aktivitt der Lipoproteinlipase niedrig.
Zuckerkrankheit
Diabetes mellitus: Diabetes (griech. diabet-,
Wortteil mit der Bedeutung hindurchgehen;
Harnruhr, Polyurie; wegen des osmotischen
Drucks der Glucose im Urin wird bermig
viel Harn ausgeschieden); mellitus (lat. mit
Honig verst; von mel, Honig). Der Urin
schmeckt s wegen seines Glucosegehalts.
Die rzte frherer Zeiten kompensierten das
Fehlen klinisch-chemischer Analyseverfahren
durch Unzimperlichkeit.
Der Diabetes mellitus entspricht einem intrazellulren Hungerzustand Die Aufnahme von
Glucose in Muskel- und Fettzellen ist stark herabgesetzt; das metabolische Profil des unbehandel-
ten Diabetes mellitus ist demjenigen des Hungerzustands hnlich, obwohl auerhalb dieser Zellen
Glucose im berfluss vorhanden ist:
Glykolyse vermindert, Gluconeogenese erhht;
Glykogenspeicher leer. Proteine werden abgebaut, um Aminosuren zur Gluconeogenese zu
nutzen;
Abbau der Triacylglycerole im Fettgewebe
erhht, Fettsure- und Triacylglycerolsynthese
erniedrigt;
437
34.3Diabetes mellitus
34
.. Tab.34.4 Energietrger in Blutplasma
Glucose
(mM)
Unveresterte Fettsuren
(mM)
Ketonkrper
(mM)
Normal
5,0
0,5
0,2
Nahrungskarenz
(nach 1Woche)
3,7
1,5
5,0
Fettsureoxidation erhht; Leber synthetisiert

Ketonkrper, die von extrahepatischen Geweben als Brennstoff verwendet werden;
Konzentration von Glucose, Fettsuren und
Ketonkrpern im Blutplasma erhht.
Der Typ-1 Diabetes ist auf eine Zerstrung der

-Zellen in den Pankreasinseln durch Autoim
munreaktionen (Autoantikrper bei 90% der Patienten), welche hufig mit bestimmten viralen Infekten zusammenhngen, zurckzufhren. Bei einem
Teil der Patienten ist die Ursache unklar, genetische
Prdisposition und Umweltfaktoren knnten mitspielen. Gegen 10% der Diabetiker leiden an Diabetes Typ1, der sich meist schon im Kindes- oder
Jugendlichenalter manifestiert und unbehandelt
schwerere Symptome zeigt und gravierendere Folgen hat als der Diabetes Typ2: Die Konzentration
von Glucose im Blut (normal 5mM) ist auch in der
Postresorptionsphase erhht (Hyperglykmie); im
Urin wird Glucose ausgeschieden (Glucosurie; die
Nierentubuli knnen die mit dem Primrharn in erhhter Konzentration ausgeschiedene Glucose nicht
vollstndig resorbieren); der Organismus wird angesuert durch erhhte Bildung von Ketonkrpern
(Ketoacidose). Ein Teil der Ketonkrper wird nicht
abgebaut, sondern mit dem Urin ausgeschieden. Da
der pKa-Wert der hauptschlichen Ketonkrper,
-Hydroxybuttersure und Acetessigsure, mit 4,4

etwas unterhalb des pH-Wertes von maximal angesuertem Urin (pH4,5) liegt, werden mehr als die
Hlfte der Ketonkrper als Anionen ausgeschieden;
zurck bleiben die zur Acidose fhrende Protonen.
Sptfolgen des unbehandelten Typ-1 Diabetes sind Schdigungen von Blutgefen, Nieren,
peripherem Nervensystem und Retina sowie eine

Trbung der Augenlinse (Katarakt). Die Schdigungen sind die Folge der lang andauernden Hyperglykmie und betreffen Zellen, welche Glucose
unabhngig von Insulin aufnehmen und daher bei
einer Hyperglykmie mit Glucose berschwemmt
werden.
Eine mgliche Erklrung fr die Entwicklung
von Sptschden aufgrund der Hyperglykmie ist
die nichtenzymatische Glykierung (Glycation) von
Proteinen (.Abb.34.3). Beim gesunden Menschen
sind 5% der Molekle des langlebigen Hmoglobins
(t1/2120Tage) glykiert. Die Bestimmung von glykiertem Hmoglobin (HbA1c) dient zur Langzeitkontrolle der Blutzuckerkonzentration bei Diabetes
patienten, bei schlechter Einstellung (inadquater
Insulindosierung) kann der Wert auf das Zwei- bis
Dreifache der Norm ansteigen. Eine weitere Erklrung der Sptschden ist die bei Hyperglykmie
erhhte Bildung von Sorbitol:
438
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.. Abb.34.2 Glykierung von Proteinen durch Glucose. Die -Aminogruppe eines Lysinrests reagiert mit Glucose unter Bildung
eines Imins. Eine Amadori-Umlagerung und weitere spontan ablaufende Reaktionen (Maillard-Reaktionen, Brunungsreaktionen) fhren zu den Advanced glycation end products (AGE). hnliche Reaktionen sind beim Brotbacken und Fleischbraten
verantwortlich fr die Brunung der Oberflche und die Entwicklung der typischen Aromastoffe
In Zellen mit geringer Sorbitoldehydrogenase-Aktivitt huft sich Sorbitol an und fhrt zu einem osmotischen Wassereinstrom, der ber Elektrolytvernderungen zur Zellschdigung, z.B. zur Quellung
der Linsenfasern und zum Katarakt fhrt.
Typ-1 Diabetes wird mit rekombinantem Humaninsulin (subcutane Injektion) behandelt. Das
Ziel ist, die Glucosekonzentration des Blutes im
Normbereich zu halten, ohne eine gefhrliche Hypoglykmie (Gehirn!) auszulsen.
Der wesentlich hufigere Typ-2 Diabetes beruht auf einer Strung der Insulinsekretion (ohne
autoimmune Schdigung der Inselzellen) oder einer Insulinresistenz der Gewebe (Defekte der Insulinrezeptoren, der Signaltransduktion oder auch
der Glucosetransporter). Die klinischen Symptome
sind weniger auffllig als beim Diabetes Typ1, hufig wird die Strung erst bei Routineuntersuchungen
vornehmlich bei lteren Patienten entdeckt. Die genetische Veranlagung und die Lebensgewohnheiten
spielen bei der Entwicklung dieser Diabetesform
eine wichtige Rolle. Diabetes Typ2 bildet zusammen
mit Adipositas, Lipidstoffwechselstrung (HDL,
VDL ; Abschn.34.4) und Hypertonie das so genannte metabolische Syndrom mit stark erhhtem
Arteriosklerose-Risiko. Die Behandlung zielt wie
beim Diabetes Typ1 auf eine Normalisierung der
Glucosekonzentration im Blut. In manchen Fllen
gengt hierzu eine Reduktion des Krpergewichts
und vermehrte krperliche Bettigung. Orale Antidiabetika
(Sulfonylharnstoffe u.a.m.) regen
.. Tab.34.5 Niedermolekulare Bestandteile des

Blutplasmas. Die angegebenen Werte entsprechen
Normalwerten in der Postresorptionsphase
Konzentration
(mM)
Glucose
Fructose
Galactose
Lactat
Pyruvat
Glycerol, freies
Triacylglycerol
Cholesterol (gesamt)
Fettsuren, freie (unverestert)
Aminosuren
Harnstoff
Harnsure
Kreatinin
Bilirubin (gesamt)
Ammoniak
3,96,4
<0,55
<0,24
0,62,4
0,070,11
<0,25
<2,0
<5,0
0,20,9
2,34,0
<11,9
0,210,42
0,070,10
<0,020
0,0090,033
die Freisetzung von Insulin aus den -Zellen an,

ausnahmsweise muss Insulin eingesetzt werden.
34.4 Lipidtransport
und Lipoproteine
Die niedermolekularen organischen Substanzen,

welche im Blutplasma in etwa millimolaren Konzentrationen vorkommen, sind Brennstoffe, Bau
stoffe oder stickstoffhaltige Ausscheidungsprodukte
(.Tab.34.5).
439
34.4 Lipidtransport und Lipoproteine
Fettsuren
34
Fettsuren
.. Abb.34.3 Der Transport von Energietrgern zwischen den verschiedenen Organen. Die Pfeile geben die Verschiebungen
der wichtigsten Metaboliten zwischen der Leber und den extrahepatischen Geweben an. Das Ausma des jeweiligen Transports hngt von der Stoffwechsellage ab (vgl. .Tab.34.1 ber Import und Export von Nhrstoffen der einzelnen Organe)
Der Blutkreislauf ermglicht den Austausch

von Energietrgern zwischen den verschiedenen
Organen Dem Gesamtorganismus zur Verfgung
stehende Energiereserven sind das Glykogen in
der Leber und die Triacylglycerole im Fettgewebe.
Der Transport von Nhrstoffen im Blut dient zwei

Zwecken:
Konstanthaltung der Glucosekonzentration im Blut (5mM), um das Gehirn und
andere strikt glucoseabhngige Zellen, z.B.
die Erythrozyten, ausreichend mit Energie zu
versorgen,
Adquate Versorgung der anderen Organe
mit Energie in Form von Fettsuren aus dem
Fettgewebe und Ketonkrpern aus der Leber
(.Abb.34.3).
Der Transport von Lipiden im Blut ist ein

Sonderfall und bentigt besondere Transportproteine Die Lipide bilden im zirkulierenden
Blut keine Fetttropfen und in stehengelassenem

Blut keine Fettaugen. Der Grund dafr ist, dass
die wasserunlslichen Lipide im Blut ausnahmslos als nichtkovalente Komplexe mit besonderen
Transportproteinen vorkommen. Fettsuren wer-
den durch Serumalbumin, alle anderen Lipide

durch Lipoproteine transportiert. Die Bindung
der Fettsuren an Albumin verhindert, dass sie als
Detergenzien die Lipiddoppelschicht der Membranen zerstren. Serumalbumin besitzt 6 hochaffine
Bindungsstellen fr langkettige Fettsuren sowie
zahlreiche schwchere Bindungsstellen.
Lipoproteine sind dynamische Partikel aus
Lipiden und Apoproteinen, die fortwhrend
gebildet, umgebaut und abgebaut werden
Aufgrund der elektrophoretischen Beweglichkeit

und der Dichte werden vier Typen unterschieden
(.Tab.34.6).
Chylomikronen,
VLDL, Very-low-density lipoproteins,
LDL, Low-density lipoproteins,
HDL, High-density lipoproteins.
---
Die Dichte der Partikel nimmt zu mit steigendem

Proteinanteil und abnehmendem Anteil an Triacylglycerolen. Die unterschiedlichen Eigenschaften
der Lipoprotein-Typen sind bestimmt durch deren
Gehalt an Apoproteinen (.Tab.34.7). Die Apoproteine organisieren die Verpackung der unlslichen
440
.. Tab.34.6 Die vier Typen von Lipoproteinen

Chylomikronen
VLDL
LDL
HDL
Bildungsort
Darmmucosa
Leber
Leber
Entstehen im Blut
aus VLDL
Durchmesser (nm)
1001000
3070
1525
7,510
Dichte (g/mL)
<0,95
0,951,006
1,0191,063
1,0631,210
Apolipoprotein (%
der Gesamtmasse)
10
20
50
Triacylglycerole
(%)
8590
50
10
15
Cholesterol (gesamt; %)
48
19
45
15
Phospholipide (%)
79
18
23
30
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
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15
16
17
18
19
20
.. Tab.34.7 Apoproteine und ihr Vorkommen in den

verschiedenen Lipoproteintypen
Apoprotein
Lipoprotein
A-I
A-II
A-IV
B-48
B-100
C-I
C-II
C-III
D
E
HDL
HDL
Chylomikron
Chylomikron
LDL, VLDL
VLDL, HDL
VLDL, HDL
VLDL, HDL
HDL
VLDL, LDL, HDL, Chylomikron
Lipide in die lslichen Lipoprotein-Komplexe und

dienen zudem als Erkennungsmolekle fr Memb
ranrezeptoren der Zellen, welche Lipide importieren, und fr Enzyme, welche am Stoffwechsel der
Lipide beteiligt sind. Die Apoproteine bestimmen
demnach, welches Gewebe ein bestimmtes Lipoprotein aufnimmt (.Abb.34.4).
Die Lipoproteinlipase spaltet die Triacylglycerole der Lipoproteine. Das Enzym findet sich an
der Oberflche der Kapillarendothelien sowie an
den Plasmamembranen im Fettgewebe und anderen extrahepatischen Geweben. Insulin induziert
die Synthese der Lipoproteinlipase; das C-II Apoprotein der HDL aktiviert das Enzym.
Die Darmmucosa synthetisiert whrend der

Resorptionsphase die Chylomikronen Durch
Pinocytose gelangen die im ER gebildeten Chylomikronen in den Interzellulrraum und mit der
Lymphe ber den Ductus thoracicus (unter Umgehung der Leber!) in die Blutbahn. Dort baut die
Lipoproteinlipase die Triacylglycerole der Chylomikronen ab (.Abb.34.5). Die freigesetzten Fettsuren werden vom Fettgewebe und der Muskulatur
aufgenommen oder als Komplex mit Serumalbumin
der Leber zugefhrt. Die Chylomikronenreste, die
Remnants, werden in der Leber abgebaut.
Die Leber synthetisiert die VLDL Die Fettsuren zur Synthese der Triacylglycerole in den VLDL
stammen aus dem Blut (Chylomikronenreste und
Komplexe mit Serumalbumin) oder werden aus
Glucose neu synthetisiert. In der Peripherie verwandeln der intravasale Abbau der VLDL-Triacylglycerole durch die Lipoproteinlipase und die
Aufnahme anderer Apoproteine die VLDL zu LDL.
Die freigesetzten Fettsuren dienen dem Fettgewebe
zur Anlage von Fettreserven und der Muskulatur
als Brennstoffe.
LDL haben den hchsten Cholesterolgehalt

aller Lipoproteine Der Abbau der Triacylgly-
cerole der VLDL lsst in den LDL Cholesterol als

hauptschliches Lipid zurck. Die LDL binden an
spezifische LDL-Rezeptoren extrahepatischer Zellen (.Abb.34.5), die spezifisch Apoprotein B-100
erkennen; der Cholesterolbedarf der Zelle regelt
die Zahl der Rezeptoren. Durch Endocytose ber
Clathrin-coated pits (Abschn.22.3) gelangen die
Rezeptor-LDL-Komplexe in die Zellen. In Endoso-
441
34
.. Abb.34.4 Grundstzliche Struktur der Plasma-Lipoproteine. Eine polare Oberflche aus Phospholipiden und freiem Cholesterol umgibt den lipophilen Kern aus Triacylglycerolen und Cholesterol-Fettsure-Estern. Es ist zu beachten, dass Lipoproteine
keine Membranvesikel sind, sie besitzen nur eine Einzelschicht von Phospholipiden (Monolayer) und entsprechen eher Mizellen
mit apolarem Inhalt. Die Apoproteine sind in die Phospholipid-Einzelschicht integriert (z.B. Apo B) oder dieser angelagert (z.B.
Apo C)
men dissoziieren die LDL von den Rezeptoren. Die

Rezeptoren werden rezykliert. Die LDL fusionieren
mit Lysosomen, wonach die Cholesterol-Fettsure-Ester hydrolytisch gespalten und die Apoproteine
abgebaut werden. Das freigesetzte Cholesterol wird
in Membranen eingebaut oder zur Synthese von
Steroidhormonen verwendet; berschssiges Cholesterol wird von der zelleigenen Acyl-CoA-Cholesterol-Acyltransferase (ACAT) mit Fettsuren
verestert und in besonderen Vesikeln gespeichert.
Unverestertes Cholesterol hemmt allosterisch die
HMG-CoA-Reduktase, das Schlsselenzym der
Cholesterolsynthese (Abschn.17.6), und hemmt
zudem die Synthese von LDL-Rezeptoren.
Die Leber bildet auch die HDL Die HDL haben den hchsten Proteingehalt unter den Lipoproteinen. HDL liefern Apolipoproteine fr die Bildung
der Lipoproteine geringerer Dichte und nehmen
Apoproteine zurck aus den Chylomikronenresten
und den LDL, bevor diese durch die Leber bzw. extrahepatische Zellen aufgenommen und abgebaut
werden. Die HDL enthalten daher zahlreiche verschiedene Apoproteine (.Tab.34.6); insbesondere
geben sie apoC-II, welches die Lipoproteinlipase aktiviert, an Chylomikronen und VLDL ab. HDL dienen zudem als Vehikel fr den Transport von Cholesterol; sie bernehmen unverestertes Cholesterol
aus den Plasmamembranen peripherer Zellen und
aus anderen Lipoproteinen, verestern es mit Fettsuren und bringen die Cholesterolester zur Leber.
HDL enthalten auch die von der Leber ins
Blut sezernierte Phosphatidylcholin-Cholesterol-Acyltransferase (PCAT, oder LCAT, L fr Lecithin, eine ltere Bezeichnung von Phosphatidylcholin), die durch apoA-I der HDL aktiviert wird
und in den HDL die folgende Reaktion katalysiert:
Cholesterol C Phosphatidylcholin
"#
Cholesterol-Fettsure-Ester
C Lysophosphatidylcholin
442
1
2
Andere
e
3
4
5
(CE+C)
(TAG+CE+C)
6
7
8
(TAG+CE+C)
(TAG+CE+C)
9
10
11
12
13
34
15
16
17
18
19
20
.. Abb.34.5 Die Transportfunktionen der Plasmalipoproteine. TAG, Triacylglycerol; C, Cholesterol; CE, Cholesterolester; ACAT,
Acyl-CoA-Cholesterol-Acyltransferase; PCAT (LCAT), Phosphatidylcholin (Lecithin)-Cholesterol-Acyltransferase (in HDL). Die
Lipoproteinlipase kommt in extrahepatischen Geweben insbesondere in Fettgewebe und Muskulatur vor
ber diese Reaktion werden die HDL mit Cholesterolestern aufgeladen. Etwa zwei Drittel des Gesamtcholesterols im Plasma sind verestert. Die
mit Cholesterolestern beladenen HDL werden ber
besondere HDL-Rezeptoren in die Leberzellen aufgenommen und hydrolysiert. Ein Teil des freigesetzten Cholesterols dient zur Synthese von Gallensuren, der Rest wird mit der Galle ausgeschieden oder
wiederum in VLDL verpackt.
Strungen im Lipidstoffwechsel erhhen
das Risiko fr Gefkrankheiten Bei Patienten
mit Verengungen der Koronararterien (Herzkranzgefe) und anderer Arterien werden oft
eine Hyperlipidmie und Lipidablagerungen
in den betreffenden Blutgefen festgestellt. Im
Tierversuch fhrt eine Cholesterolbelastung zu
Lipideinlagerungen in die Arterienwnde. Die Ar-
teriosklerose, d.h. Lipideinlagerungen in die In-
nenschicht (Intima) der Gefwnde und dadurch

ausgelste Bindegewebewucherungen, engen nicht
nur das Geflumen ein, sondern verndern auch
die Gefinnenflche, worauf Turbulenzen in der
Blutstrmung die Gerinnungstendenz erhhen.
Bei intravasaler Gerinnung entsteht ein Thrombus (Blutpfropf), der zum Gefverschluss fhren
kann. Die Anfangsphase der Arteriosklerose steht
in enger Beziehung zum Lipoproteinprofil; epidemiologische Untersuchungen haben gezeigt, dass
das Risiko fr kardiovaskulre Erkrankungen mit
den folgenden Blutplasmawerten korreliert (Therapie; Abschn.17.6):
Gesamt-Cholesterolkonzentration >5mM,
hohe LDL-Konzentration,
hohe Triacylglycerol-Konzentration,
--
443
tiefe HDL-Konzentration (HDL entsorgt berschssiges Cholesterol).
Der familiren Hypercholesterolmie liegt ein

Mangel an LDL-Rezeptoren zugrunde Bei die-
sem autosomal vererbten Stoffwechseldefekt werden die LDL in ungengendem Mae in die Zellen
aufgenommen, ebenso entfllt die Rckkoppelungshemmung der Cholesterolsynthese auf der Stufe der
HMG-Reduktase (Abschn.17.6). Die Cholesterolkonzentration im Plasma (normal <5mM) ist daher
erhht: 8mM bei heterozygoten, 18mM bei homozygoten Patienten. Schwere Gefvernderungen knnen schon im Jugendlichenalter zum Tod
durch Verschluss einer Herzkranzarterie fhren.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517253-0
34.1 Stoffwechselleistungen der Organe in der
Resorptions- und Postresorptionsphase
34.2 Anpassung des Stoffwechsels an Hungerzustand
34.3 Diabetes mellitus
34
445
Biochemische Aspekte
der menschlichen Ernhrung
35.1
Bedarf an Brennstoffen und Baustoffen 446
35.2
Hauptnhrstoffe448
35.3
Vitamine452
35.4
Elektrolyte, Mineralstoffe und Spurenelemente 461
35.5
Nahrungsmittel463

35
Kapitel 35 Biochemische Aspekte der menschlichen Ernhrung
446
1
2
3
4
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20
Unterernhrung (ungengende Zufuhr von Brennstoffen), Fehlernhrung (ungengende Zufuhr von
Proteinen und essenziellen Nahrungsbestandteilen) und berernhrung (bermige Zufuhr von

Brennstoffen) grassieren in verschiedenen Regionen
der Erde und verursachen etliche der medizinischen
Probleme unserer Zeit. Es gibt keine gesundheitsfrdernden Manahmen, die wirkungsvoller und
kostengnstiger sind als eine adquate Ernhrungsweise.
Eine ausreichende Ernhrung liefert gengend
Brennstoffe zur Energiegewinnung; die Hauptnhrstoffe Kohlenhydrat, Triacylglycerol und Protein
knnen sich hierbei nach Magabe ihres Energiegehalts gegenseitig vertreten. Auerdem ist gengend
Protein zuzufhren, um den Krper im Stickstoffgleichgewicht zu halten; aus dem Aminosurenpool geht dauernd reduzierter Stickstoff, hauptschlich in Form von Harnstoff, verloren. Zu einer
angemessenen Ernhrung gehren auch gengend
essenzielle Aminosuren, essenzielle Fettsuren,
Vitamine und anorganische Krperkomponenten (Elektrolytionen, Mineralstoffe und Spurenelemente). Mangelnde Zufuhr eines essenziellen Nahrungsbestandteils fhrt in manchen Fllen zu einer
Mangelkrankheit mit spezifischen Symptomen.
Essenzielle Nahrungsbestandteile
Stoffe, welche der Krper bentigt, aber nicht
selbst synthetisieren kann (gewisse Aminosuren, mehrfach ungesttigte Fettsuren, Vitamine und anorganische Komponenten) mssen
mit der Nahrung zugefhrt werden. Autotrophe
Mikroorganismen und Pflanzen synthetisieren
alle organischen Bestandteile des Organismus
aus anorganischen Vorstufen. Heterotrophe
Organismen knnen einzelne organische Verbindungen nicht synthetisieren, da ihnen die
entsprechende Enzymausstattung fehlt.
35.1
Bedarf an Brennstoffen
und Baustoffen
Grundumsatz, Aktivittsumsatz und postprandiale Thermogenese bestimmen den Gesamtenergieverbrauch Der Grundumsatz entspricht dem
Energiebedarf zur Erhaltung der minimal erforderlichen Organfunktionen, er wird whrend der
Postresorptionsphase bei vlliger Ruhe und minimaler Wrmeproduktion (Indifferenztemperatur)
gemessen. Die Grundumsatz-Energie wird bentigt,
um aktiven Membrantransport anzutreiben, mechanische Arbeit (Herz, Atemmuskulatur) zu leisten
und Biosynthesen zum Ablaufen zu bringen. Der
Grundumsatz
wird in erster Linie von der fettfreien Krpermasse (Lean body mass) bestimmt:
Frau (60kg):
1300kcal (5400kJ)/Tag
Mann (70kg):
1700kcal (7100kJ)/Tag
Messung des Energieverbrauchs

Das klassische, aufwndige Verfahren der
direkten Kalorimetrie misst die gesamte vom
Krper abgegebene Wrme. Einfacher ist die
spirometrische Messung von O2-Verbrauch
und/oder CO2-Bildung. Ebenfalls aufwndig,
aber vielseitig anwendbar ist die Methode
mit 2 H18
2 O (Wasser doppelt markiert mit
den stabilen Isotopen Deuterium und 18O);
nach oraler Verabreichung von 2 H18
2 O haben
die Versuchspersonen lediglich periodisch
Urinproben zu sammeln. Fr praktische Zwecke wird mit einer empirischen Formel ein
Schtzwert des Grundumsatzes als Funktion
von Geschlecht, Gewicht, Krperlnge und
Alter berechnet.
Der zustzliche Aktivittsumsatz entspricht bei

moderater krperlicher Arbeit und normalem
Schlaf/Wach-Rhythmus etwa 40% des Gesamtumsatzes (.Tab.35.1). Ein zustzlicher Energieumsatz fr Verdauung, Resorption und Transport der
Nhrstoffe uert sich in der Resorptionsphase nach
einer Mahlzeit als postprandiale Thermogenese,
die besonders hoch ist fr Protein und auch Ethanol
(1530% des Brennwerts, 510% fr Kohlenhydrate, 3% fr Fette).
Die drei Hauptnhrstoffe Kohlenhydrat, Fett
und Protein dienen als Brennstoffe und decken
den Energiebedarf des Organismus; sie knnen
sich nach Magabe ihres Energiegehalts gegenseitig ersetzen (.Tab.35.2). Eine Unterernhrung
(ungengende Zufuhr von Brennstoffen) fhrt zu
35
447
35.1 Bedarf an Brennstoffen und Baustoffen
.. Tab.35.1 Energie-Gesamtumsatz whrend eines Tages bei durchschnittlicher krperlicher Ttigkeit

Ttigkeit
Dauer
Energieverbrauch
Frau, 60kg
Schlafen, Liegen
Sitzen
Gehen
Radfahren
(h)
(kcal/min)
8
12
3
1
1,0
1,25
2,8
4,0
Mann, 70kg
(kcal total)
480
900
500
240
(kcal/min)
(kcal/total)
1,1
1,8
3,5
5,0a
530
1300
630
300
Gesamtumsatz (kcal/Tag)
2120
2760
davon Grundumsatz
Aktivittsumsatz
1300
820
1700
1060
Zum Vergleich: Pickeln, Schaufeln 7,512kcal/min
Gewichtsverlust, Wachstumsstillstand beim Kind,

negativer Stickstoffbilanz (Abschn.35.2) und allgemeiner Abnahme der Leistungsfhigkeit. Eine
bermige Zufuhr von Nhrstoffen hat bergewicht oder gar Fettsucht (Adipositas) zur Folge.
Unter- und bergewicht
Der Body-Mass-Index (BMI) ist definiert als der
Quotient von Krpergewicht [kg] und dem
Quadrat der Krpergre [m2]. Der Normalbereich des BMI ist 1825kg/m2. Tiefere Werte
entsprechen einem Untergewicht, hhere
einem bergewicht und Werte von 30 einer
Fettsucht.
Dem Bedarf angepasste Brennstoffzufuhr hlt

das Krpergewicht im optimalen Bereich Der
Stoffwechsel verfgt ber Mechanismen, um Energiereserven anzulegen und bei Bedarf wieder abzubauen. Ein Zuwenig an Nahrung oder sogar deren Fehlen kann vom adulten Krper lngere Zeit
ohne bleibende gesundheitliche Schden ertragen
werden (Abschn.34.2). Lngere Hungerperioden
gehrten in prhistorischer Zeit wohl zur normalen
menschlichen Erfahrung.
Wie reagiert der Organismus auf ein Zuviel an
Nahrung? Der einzige Weg, welcher dem Organismus offen steht, mit unntig aufgenommenen
Brennstoffen fertig zu werden, ist die Deponierung
von Triacylglycerolen im Fettgewebe: Nur eine Re-
.. Tab.35.2 Physiologischer Brennwert der Hauptnhrstoffe. Der physiologische Brennwert entspricht

der metabolisierbaren Energie und ist fr Protein, im
Gegensatz zu Kohlenhydrat und Fett, nicht gleich dem
physikalischen Brennwert (23kJ/g), da der Brennwert
des Harnstoffs im Krper nicht genutzt wird
Nhrstoff
kcal/g
kJ/g
Kohlenhydrat
Fett
Protein
4,1
9,3
4,1
17,2
39,0
17,2
duktion der Nhrstoffaufnahme kann das Anlegen

bermiger Fettreserven verhindern.
Die Nahrungsaufnahme wird ber ein komplexes hormonal-neuronales Netzwerk gesteuert. Als
Hungersignale fungieren Ghrelin, ein Peptidhormon aus Magen und Duodenum (Abschn.28.8),
und das Neuropeptid Y des Hypothalamus; als
Gegenspieler wirken die Sttigungssignale, die
von Cholecystokinin aus dem Dnndarm (Abschn.28.8), Leptin aus dem Fettgewebe sowie Melanocortin und Serotonin des Hypothalamus bermittelt werden. Der Hypothalamus verrechnet die
diversen Signale.
Leptin , ein 16-kDa Protein, wird von den
Fettzellen ins Blut sezerniert. Seine Plasmakonzentration korreliert mit dem Fettgehalt des Krpers.
Ob(obese-)Musen fehlt das Leptin-Gen. Verabreichung von Leptin an ob-Muse und auch normale
Muse fhrt zu einer Gewichtsreduktion infolge einer herabgesetzten Futteraufnahme und einer von
448
1
2
3
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20
erhhter Krpertemperatur begleiteten Zunahme

des Energieverbrauchs.
Die Regulation der Nahrungsaufnahme entspricht offensichtlich nicht der heutigen Lebensweise und dem Nahrungsangebot in den Industrielndern: berernhrung und ihre Folgen
(metabolisches Syndrom; Abschn.34.3) sind zu
einem wichtigen gesundheitlichen Problem geworden.
Neben Brennstoffen mssen dem Organismus

auch die Baustoffe zugefhrt werden, welche er
aus den Brennstoffen nicht selbst synthetisieren
kann Der wachsende Organismus bentigt die
Baustoffe, um die Krpersubstanz zu vermehren;

der adulte Organismus, um den fortwhrenden
Umsatz (Turnover) von Krpersubstanz aufrechtzuerhalten. Zu den essenziellen Nahrungsbestandteilen gehren:
Protein als Quelle von reduziertem Stickstoff
(bei minimaler Zufuhr vorwiegend als Baustoff
verwendet, bei reichlicher Zufuhr auch als
Brennstoff),
Essenzielle Aminosuren,
Essenzielle Fettsuren,
Vitamine,
Anorganische Bestandteile.
---
Bei der Versorgung des Organismus mit essenziellen Nahrungsbestandteilen gilt das Gesetz des
Minimums Der Mangel eines einzigen dieser
Stoffe fhrt zu Ausfallserscheinungen; ein normales

Funktionieren des Organismus ist nur gewhrleistet, wenn alle essenziellen Nahrungsbestandteile in
gengender Menge zugefhrt werden. Die Folgen
einer mangelnden Zufuhr (Fehlernhrung) sind
wie bei einer Unterernhrung unspezifische Symptome wie Gewichtsverlust bzw. Wachstumsstillstand
und Abnahme der Leistungsfhigkeit. In manchen
Fllen treten aber auch spezifische Mangelerscheinungen auf. Gewisse essenzielle Nahrungsbestandteile (Vitamin A und D sowie Spurenelemente) wirken bei bermiger Zufuhr toxisch.
35.2 Hauptnhrstoffe
Bei blicher gemischter Kost stehen die Kohlen

hydrate klar an erster Stelle der drei Brennstoffe:
Industrielnder
Entwicklungslnder
Kohlenhydrat
55%
85%
Fett
30%
7%
Eiwei
15%
8%
Strke ist das wichtigste Kohlenhydrat in der

menschlichen Ernhrung Strke ist der haupt-
schliche Energietrger aller Getreidegattungen.

Beispiele strkehaltiger Nahrungsmittel sind Reis,
Hafer, Brot und andere Backwaren, Teigwaren sowie Kartoffeln und Leguminosen (Bohnen, Erbsen).
Wichtige Nhrstoffe sind ferner die Disaccharide
Lactose (Milchzucker, die einzige Kohlenhydratquelle fr den Sugling) und Saccharose (Rohroder Rbenzucker), die in Industrielndern als
billiger Sstoff bis zu 20% der gesamten Kohlenhydratzufuhr ausmachen kann. Die Monosaccharide
Glucose und Fructose kommen in Frchten und
im Honig vor; Fructose wird als Sstoff durch
Hydrolyse von Saccharose industriell produziert
(Abschn.21.6). Cellulose, ein Bestandteil aller
Nahrungsmittel pflanzlichen Ursprungs, kann vom
Menschen nicht verdaut werden, da er ber keine
-Glucosidase verfgt.
Kohlenhydrate dienen hauptschlich als Brennstoffe. Alle krpereigenen Kohlenhydrate knnen
auch aus Proteinen (Gluconeogenese) oder aus dem
Glycerol der Fette synthetisiert werden. Ihre Vertrglichkeit ist gewhnlich sehr gut (Ausnahmen:
Lactoseintoleranz, Galactosmie und Fructoseintoleranz). Kinder und Schwerarbeiter knnen mit
alleiniger Kohlenhydratzufuhr ihren Energiebedarf
nicht decken.
Fette und le sind die Nhrstoffe mit dem
hchsten Brennwert Fetthaltige Nahrungsmittel
enthalten nebst den energiereichen Triacylglycerolen essenzielle Fettsuren und fettlsliche Vitamine.
Zudem geben sie der Nahrung eine ansprechende
Textur, machen sie besser schluckbar und lassen die
Geschmackswerte fettlslicher Aromastoffe besser
hervortreten.
Zu den essenziellen Fettsuren (empfohlene
Tagesdosis 8g)
gehren die mehrfach ungesttigten cis-Fettsuren, insbesondere die Linol-
449
35.2Hauptnhrstoffe
35
Bereich berschssiger
Proteinzufuhr
.. Abb.35.1 Proteinbilanz. Die angegebenen Werte gelten fr einen erwachsenen Mann von 70kg Krpergewicht unter der
Voraussetzung, dass der Energiebedarf voll durch Kohlenhydrat und Fett gedeckt ist und die Nahrungsproteine hochwertig
sind, d.h. alle essenziellen Aminosuren in gengender Menge enthalten. Entspricht die Proteinzufuhr dem Minimalbedarf
(32g/Tag; Punkt A im Diagramm), zeigt der gesunde Krper eine ausgeglichene Stickstoffbilanz, die Proteinzufuhr entspricht
genau dem obligatorischen Proteinverlust (Verdauungsenzyme, abgeschilferte Darm- und Hautzellen etc.). Bei ungengender
Zufuhr, d.h. kleiner als der Minimalbedarf fr eine ausgeglichene Proteinbilanz, verliert der Krper mehr Protein als zugefhrt
wird. Die Kurve weicht von der Diagonale ab in den Bereich negativer Proteinbilanz. Ein Proteinverlust von 24g/Tag besteht
auch bei vllig fehlender Zufuhr. Der Punkt B bezeichnet die empfohlene Proteinzufuhr von 60Gramm pro Tag. bersteigt die
Proteinzufuhr den Minimalbedarf, werden die berschssigen Aminosuren der Fettreserve zugefhrt
sure (C18; 2 cis-Doppelbindungen, 9,12, eine

(omega)-6-Fettsure) und die Linolensure (C18;
3 cis-Doppelbindungen, 9,12,15, -3-Fettsure).

Als Bausteine der Membranlipide halten sie deren
Schmelzpunkt tief. Zudem sind sie die Vorlufer fr
die Synthese von Prostaglandinen, Leukotrienen
und Thromboxanen. Spezifische Mangelerscheinungen wie trockene, schuppende Haut treten selten auf.
Triacylglycerole mit ungesttigten trans-Fettsuren, wie sie bei der Fetthrtung und beim Erhitzen oder Braten von Fett entstehen, erhhen die
LDL und erniedrigen die HDL im Blut; zusammen
mit ihrer ungnstigen Wirkung auf Endothelmembranen wird dadurch das Risiko fr Arteriosklerose
erhht. Viele Lnder schreiben einen Maximalgehalt von Lebensmitteln an trans-Fettsuren vor.
Proteine sind unersetzliche Baustoffe Sie liefern reduzierten Stickstoff und essenzielle Aminosuren. Die Stickstoffbilanz des Krpers entspricht
der Proteinbilanz. Der Stickstoffgehalt von Proteinen ist 16Massen-%. Eine N-Bestimmung in der
zugefhrten Nahrung und in den Ausscheidungen
(Urin, Fzes, Schwei, Hautabschilferungen) ergibt
ein verlssliches Abbild des Proteinumsatzes. Beim
Erwachsenen entspricht die N-Zufuhr der N-Ausscheidung, der Organismus befindet sich im sog.
N-Gleichgewicht (.Abb.35.1). Das N-Gleichgewicht (ein Fliegleichgewicht!) wird, falls die Proteinzufuhr eine Mindestmenge, den obligatorischen
Proteinverlust, berschreitet, unabhngig von der
Proteinzufuhr erhalten; Nahrungsprotein wird nur
in dem Mae in Krperprotein bergefhrt als dem
Proteinumsatz entspricht. berschssiges Protein
wird zu Kohlenhydrat und Fett umgebaut, der Stickstoff als Harnstoff ausgeschieden.
Eine positive N-Bilanz (Zufuhr>Ausscheidung)
findet sich im Wachstum, whrend der Schwangerschaft, in der Rekonvaleszenz nach zehrenden Krankheiten und beim Krpertraining, insbesondere dem
Krafttraining. Sie wird gefrdert durch anabol wirksame Hormone: Wachstumshormon (zusammen mit
IGF-1), Insulin und androgene Steroide. Beim Kind
frdern Schilddrsenhormone das Wachstum.
Eine negative N-Bilanz (Zufuhr<Ausscheidung)
ergibt sich bei Proteinmangelernhrung, Mangel an
essenziellen Aminosuren, kataboler Stoffwechsellage (Fieber, zehrenden chronischen Krankheiten),
erhhtem Proteinverlust (Laktation, Proteinurie)
450
1
2
3
4
5
6
.. Tab.35.3 Essenzielle Aminosuren. Zur Bestimmung des Minimalbedarfs einer essenziellen Aminosure muss jede einzelne der anderen essenziellen
Aminosuren in ausreichender Menge verabreicht werden und alle Aminosuren mssen gleichzeitig miteinander verabreicht werden (Gesetz des Minimums!). Fr
Histidin sind keine Bedarfswerte aufgefhrt: Histidin ist
fr Kinder essenziell; bei Erwachsenen ist es schwierig,
den Bedarf an Histidin quantitativ zu erfassen
Minimalbedarf
(g/Tag)
Aliphatisch mit verzweigter
Seitenkette
Valin
0,80
Leucin
1,10
Isoleucin
0,70
Hydroxyaminosure
S-haltige Aminosure
Threonin
Methionin
10
11
12
13
14
35
16
17
18
19
20
fiziert (.Tab.35.3). Die nichtessenziellen Aminosuren knnen von Mensch und Tier synthetisiert
werden, sofern gengend Stickstoff in reduzierter
Form zur Verfgung steht. In der Tat kann der Proteinbedarf von Tieren bei kalorisch ausreichender
Ernhrung durch eine Kombination essenzieller
Aminosuren mit einem Ammoniumsalz gedeckt
werden.
Die biologische Wertigkeit eines Proteins

oder Nahrungsmittels hngt von dessen Gehalt
an essenziellen Aminosuren ab; sie kann aus der

Aminosurezusammensetzung und den Werten in
.Tab.35.3 abgeleitet werden oder im Tierversuch
mit Ftterungsexperimenten ermittelt werden.
Hierbei wird die minimale Menge eines Nahrungsmittels bestimmt, die ausreicht, um den Organismus
im N-Gleichgewicht zu halten, und mit dem Bedarf
an Hhnereiweiss verglichen:
0,50
Biologische Wertigkeit
Minimalbedarf an Hhnereiweiss (g/Tag)
1,10
Aromatische Aminosuren
Phenylalanin
1,10
Tryptophan
0,25
Basische Aminosuren
Lysin
0,80
Histidin
und im Hungerzustand (Abschn.34.2). Die negative Bilanz wird gefrdert durch katabol wirksame
Hormone: Glucagon, Glucocorticoide und Schilddrsenhormone in hohen Dosen. Nur etwa ein Drittel des Gesamtkrperproteins kann abgebaut werden,
ohne lebenswichtige Funktionen zu gefhrden.
Die empfohlene Proteinzufuhr (60g/Tag) entspricht etwa der doppelten obligatorischen Abntzungsquote der Krperproteine (.Abb.35.1). Der
Proteinumsatz ist wesentlich hher: Im N-Gleichgewicht werden pro Tag insgesamt etwa 300g Protein
abgebaut und durch Neusynthese aus rezyklierten
und zugefhrten Aminosuren ersetzt.
Die essenziellen Aminosuren wurden durch
Ftterungsversuche mit Ratten und Ernhrungsversuche mit freiwilligen Versuchspersonen identi-
100
Minimalmenge eines Nahrungsmittels
fr N-Gleichgewicht (g/Tag)
Die biologische Wertigkeit tierischer Nahrungsmittel ist hoch, diejenige pflanzlicher Nahrungsmittel
ist niedriger (.Tab.35.4). Die Wertigkeit pflanzlicher Nahrungsmittel, mit Ausnahme von Sojabohnen und anderen Leguminosen, ist dermaen niedrig, dass der Proteinbedarf nicht mit einem einzigen
pflanzlichen Nahrungsmittel gedeckt werden kann
(.Tab.35.5). Am einfachsten wird das N-Gleichgewicht erreicht mit gemischter Kost aus Cerealien,
Leguminosen (Hlsenfrchten wie Bohnen oder
Erbsen) und etwas tierischen Proteinen (Fleisch,
Fisch, Eier oder Milch).
Ein Proteinmangel hat hnliche Folgen wie
eine Chemotherapie mit Zytostatika oder eine
Verstrahlung In erster Linie sind die sich rasch
erneuernden Gewebe betroffen:

Darmmucosa
Resorptionsstrungen
Knochenmark
Anmie, Infektanflligkeit wegen herabgesetzter Leukozytenzahl
Haut
Geschwre
35
451
35.2Hauptnhrstoffe
.. Tab.35.4 Biologische Wertigkeit (Protein digestibility

corrected amino acid score) verschiedener Nahrungsmittel. Die geringe Wertigkeit pflanzlicher Nahrungsmittel
ist in manchen Fllen hauptschlich auf das geringe
Vorkommen einer einzelnen Aminosure zurckzufhren, beruht aber nicht nur auf der Aminosurezusammensetzung sondern z.T. auch auf der Verdaubarkeit
pflanzlicher Nahrungsmittel. Eine Kombination
pflanzlicher Nahrungsmittel ist daher gnstig. Tradi
tionellerweise wird z.B. in Indien Reis mit Linsen oder in
Zentralamerika Mais mit Bohnen kombiniert
Hhnereiweiss
100
Kuhmilch
100
Rindfleisch
92
Sojabohnen (wenig Met)
100
Kartoffeln
62
Reis (wenig Trp, Lys)
60
Mais (wenig Trp, Lys)
51
Weizenmehl (wenig Trp, Lys, Met)
40
Bei Proteinmangel kommt dazu eine verringerte Synthese von Serumalbumin in der Leber.
Der erniedrigten Albuminkonzentration entsprechend sinkt der kolloid-osmotische Druck des Blutplasmas: deme und Flssigkeitsansammlung im
Bauchraum (Aszites) sind die Folgen.
In Hungergebieten sind v.a. Kinder von den
prekren Ernhrungsbedingungen betroffen: Im
Wachstum bentigen sie trotz geringer Krpermasse
etwa die Hlfte des Erwachsenenbedarfs an Protein.
Hufig ist der Proteinmangel kombiniert mit unzureichender Zufuhr von Brennstoffen und einem
Vitaminmangel (Fehl- und Unterernhrung; Protein-Energie-Mangelsyndrom, Kwashiorkor).
Ethanol liegt kalorienmig zwischen Kohlenhydrat und Fett Ethanol ist wie Lactat das Pro-
dukt eines anaeroben und damit unvollstndigen

Abbaus von Glucose (Hefegrung; Abschn.14.1)
und besitzt einen betrchtlichen physiologischen
Brennwert von 7,1kcal/g (29,7kJ/g). Ethanol wird
im gesamten Magendarmtrakt resorbiert; gleichzeitige Nahrungsaufnahme verzgert die Resorption.
Die Alkoholkonzentration im Blut wird bestimmt
durch die Geschwindigkeit von Resorption, oxidativem Abbau in der Leber und Ausscheidung durch
Nieren und Lungen. Der mit Wasser gut mischbare
.. Tab.35.5 Minimale Tagesration einzelner Nahrungsmittel zur Deckung des Proteinbedarfs

Nahrungsmittel
Tagesration zur
Deckung des
Proteinbedarfs
(g/Tag)
Entsprechende
Energiezufuhr
(kcal/Tag)
Rindfleisch
Kartoffeln
Mais
Karotten
Sojabohnen
(getrocknet)
120
1710
4200
8720
83,5
360
1300
4032
4000
285
Alkohol verteilt sich auf alle Flssigkeitskompartimente aller Gewebe. In gut durchbluteten wasserreichen Organen wie Gehirn und Lungen erreicht
die Konzentration von Ethanol rasch annhernd die
Konzentration im Blut.
Blutalkoholkonzentration
Berechnung aus der Menge des aufgenommenen Alkohols:
Blutalkoholkonzentration .Gewichtspromille/
D
Getrunkener Alkohol .g/

Krpergewicht .kg/ 0;7 .L=kg/
(Der Faktor 0,7L/kg entspricht dem Anteil

des Verteilungsvolumens von Ethanol an der
Gesamtkrpermasse.)
Fr einen Mann von 70kg Krpergewicht, der
einen Viertelliter Wein trinkt, ergeben sich
folgende Zahlen:
2,5dL Wein enthalten 25g Alkohol (10Gewichtsprozent, Dichte 0,79g/mL, 12,6Vol.%)
25
D 0,5 Gewichtspromille;
70 0;7
Eine Ethanolkonzentration von 0,5g/L entspricht einer molaren Konzentration von

0;5 g=L
D 0;011 mol=L D 11 mM
46 g=mol
und ist hoch im Vergleich zu den Metabolitkonzentrationen im Blut (.Tab.34.5).
452
Ethanolkonzentrationen 3,5 (76mM!)

knnen tdlich sein. Als Faustregel gilt, dass
die Ethanolkonzentration im Blut um 0,1
pro h zurckgeht.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11

Ethanol wird in der Leber abgebaut Der Haupt
abbauweg verluft ber die Reaktionen der Alkoholdehydrogenase und Aldehyddehydrogenase

(.Abb.35.2). Bei hheren Konzentrationen wird ein
kleiner Teil von Ethanol durch Cytochrom P450 abgebaut. Dieses als MEOS (Microsomal ethanol oxidizing system) bezeichnete Enzym ist im Gegensatz zur
Alkoholdehydrogenase induzierbar und beschleunigt
den Alkoholabbau bei chronischem Missbrauch.
Der hohe Energiegehalt von 7kcal/g hat zur
Folge, dass Alkoholiker ihren Energiebedarf bis zur
Hlfte mit Ethanol decken. Da die meisten alkoholischen Getrnke leere Kalorientrger ohne essenzielle Nahrungsbestandteile (Junk food) sind, leiden
viele chronische Alkoholiker an entsprechenden
Mangelerscheinungen.
Zwei Fragen sind bis heute noch ungelst: Wie
kommt die Wirkung von Ethanol auf das Gehirn
zustande? Was ist die Grundlage der Alkoholsucht?
12
35.3 Vitamine
13
Zuerst die Definition: Vitamine sind essenzielle

organische Verbindungen mit einer empfohlenen
Tagesdosis im Mikro- bis Milligrammbereich
(Vitamin B12, Cobalamin 2,4 g; Vitamin C, Ascorbinsure 90mg; die Tagesdosen aller anderen
Vitamine liegen zwischen diesen Werten). Die
quantitative Einschrnkung grenzt die Vitamine
von den essenziellen Aminosuren und Fettsuren ab, deren Tagesbedarf im Grammbereich liegt.
Die Vitamine dienen als Vorlufer fr die Synthese
von Coenzymen, Cosubstraten und Signalstoffen.
Manche Vitamine werden erst im Organismus zur
biologisch aktiven Wirkform umgewandelt. Eine
unzureichende Zufuhr mancher Vitamine fhrt zu
spezifischen Vitaminmangelkrankheiten.
Gewisse Vitaminmangelkrankheiten sind seit
Jahrtausenden bekannt; da sie oft als Massenerkrankung (Endemie, Epidemie) in Erscheinung
traten, wurden sie fr Vergiftungen gehalten. Das
14
35
16
17
18
19
20
.. Abb.35.2 Abbau von Ethanol in der Leber. Der limitierende Faktor beim Abbau von Ethanol ber diesen
Stoffwechselweg ist die Verfgbarkeit von NAD+. Disulfiram,
ein irreversibler Inhibitor der Aldehyddehydrogenase, fhrt
bei Ethanolzufuhr zu einer hchst unangenehmen Acetaldehydvergiftung. Das Medikament wird bei der Therapie der
Alkoholabhngigkeit zur Rezidivprophylaxe eingesetzt
Konzept einer Mangelkrankheit konnte sich erst

zu Beginn des 20.Jahrhunderts durchsetzen. Die
1912 geprgte Bezeichnung Vitamin hat wesentlich zur Popularisierung dieser Gruppe essenzieller
Nahrungsfaktoren beigetragen. Die Identifizierung
und Strukturaufklrung der Vitamine ist einer der
groen Erfolge der medizinischen und chemischen
Forschung des 20. Jahrhunderts (19 Nobelpreise
wurden an Vitaminforscher vergeben). Es stellte
sich dabei heraus, dass nur eine kleine Minderheit
der Vitamine Amine sind und eine Reihe davon
nicht einmal Stickstoff enthalten.
Die empfohlenen Tagesdosen (Recommended
dietary allowances der World Health Organization
453
Anteil des Kollektivs
35.3Vitamine
Empfohlene
Tagesdosis
2SD
54
1SD
m
Zufuhr
1SD
2SD
65,5
77
88,5
100
Prozent der empfohlenen Tagesdosis
.. Abb.35.3 Ermittlung der empfohlenen Tagesdosis eines

essenziellen Nhrstoffs. In einer gesunden reprsentativen
Bevlkerungsgruppe ohne Mangelsymptome werden die
aktuellen Tagesdosen des essenziellen Nahrungsbestandteils
bestimmt. Die empfohlene Tagesdosis wird berechnet, indem
zum Mittelwert der individuellen Tagesdosen, unter Annahme
einer Gauschen Verteilung, zwei Standardabweichungen
(SD) addiert werden. Die empfohlene Tagesdosis sollte damit
fr mindestens 97,5% der Bevlkerung ausreichen
WHO ) enthalten eine Sicherheitsmarge und

gengen fr mindestens 97,5% der Bevlkerung
(.Abb.35.3). Eine Unterversorgung oder vllig
fehlende Zufuhr eines Vitamins fhrt zu einer Hypovitaminose bzw. Avitaminose. Der bergang
von suboptimaler Versorgung mit unspezifischen
Mangelsymptomen zur spezifischen Mangelkrankheit ist flieend. Eine Hypovitaminose kann auch
entstehen aufgrund einer gestrten Resorption im
Darm, z.B. fr fettlsliche Vitamine bei Strungen
der Fettresorption, oder bei erhhtem Bedarf, z.B.
whrend Schwangerschaft und Stillzeit.
Die Mehrzahl der Vitamine ist wasserlslich;
eine berdosierung bleibt ohne Folgen, da berschssiges Vitamin ausgeschieden wird. Die fettlslichen Vitamine A, D, E und K hingegen sind Begleiter der Nahrungsfette, sie werden zusammen mit
den Fetten resorbiert und transportiert. Ein berschuss kann nicht ber die Nieren ausgeschieden
werden: berdosen von Vitamin A und D wirken
toxisch, es besteht die Gefahr einer Hypervitaminose.
Die fettlslichen Vitamine (ADEK; .Tab.35.6)
sind ausnahmslos Polyisoprene:
Vitamin A (Retinol, Retinal und Retinsure)
kommt nur in Nahrungsmitteln tierischen Ur-
35
sprungs vor. Pflanzliche Carotinoide sind Provitamine, welche im Dnndarmepithel zu Retinal

umgewandelt werden. Retinal ist der Chromophor
des Sehpurpurs Rhodopsin. Retinoat, das Anion
der Retinsure, steuert die Transkription gewisser
Gene, z.B. von Laminin und Keratinen, und ist
an Entwicklungs- und Wachstumsvorgngen beteiligt. Vitamin A-Mangel fhrt zu einer Strung
des Dmmerungssehens (Nyktalopie, Nachtblindheit), Verhornung von Schleimhuten, Schdigung
der Hornhaut des Auges (Xerophthalmie), die bis
zum Erblinden fhren kann, und zu Wachstumsstrungen. Eine Hypervitaminose uert sich in
Hautproblemen, Haarausfall und schmerzhafter
Knochendemineralisierung. Eine Aknebehandlung
mit Retinoat-Derivaten bei Schwangeren kann zu
Missbildungen des Embryos fhren.
Vitamin D, antirachitisches Vitamin (Calciferole, d.h. Steroide, welche qualitativ gleich wie
Calciol, Cholecalciferol, Vitamin D3 wirken). Calciol entsteht in sonnenexponierter Haut durch eine
photochemische Ringffnung aus 7-Dehydrocholesterol, einem in der Leber gebildeten Steroid:
14
35
16
17
18
19
20
10
11
12
13
Coenzym der
Carboxylierung
von Glu in
Proteinen
Phyllochinon
K1
Hypoprothrom
binmie
Rachitis
Osteomalazie
Nyktalopie
Xerophthalmie
120g
15mg
10g
900g
Tages
dosis
Grnes Gemse,
Leber; Eigenproduktion in
Darmflora
Pflanzenle
Leber, Eigelb;
Eigenproduktion
in Haut (UV-Licht)
Leber, Eigelb,
-carotin-reiche
Nahrungsmittel,
Butter
Hauptschliches
Vorkommen
Die hier angegebenen empfohlenen Tagesdosen gelten fr 1965-jhrige Mnner und sind fr Frauen und Kinder entsprechend dem geringeren Krpergewicht etwas
tiefer. Werte gem RDA, Recommended daily allowances, USA.
Antioxidans
Tocopherol E
Ca2+-Mobilisierung
Calcitriol
1,25-Dihydroxycholecalciferol
Calciol
Cholecalciferol D3
Sehpurpur
11-cis-Retinal
Retinol A
Mangel
krankheit beim
Menschen
Bekannte
molekulare
Funktion
Wirkform
Struktur
Vitamin
.. Tab.35.6 Die fettlslichen Vitamine A, D, E und K a
454
455
35.3Vitamine
35
Nur wenn die Eigenproduktion nicht ausreicht, z.B.

bei mangelnder UV-Bestrahlung der Haut, muss das
Vitamin mit der Nahrung zugefhrt werden. Calciol
wird in der Leber in Stellung25, darauf in der Niere
in Stellung1 hydroxyliert. Das entstehende Calcitriol
(1,25-Dihydroxycholecalciferol) ist die Wirkform
des Vitamins und wird ber das Blut zu den Zielorganen gebracht, es entspricht damit der Definition
eines Hormons. Zusammen mit Parathormon und
Calcitonin reguliert Calcitriol den Calciumstoffwechsel (Abschn.28.6). Ein Mangel an Vitamin D
fhrt zu einer Strung der Knochenmineralisierung,
die sich beim Kind als Rachitis und beim Erwachsenen als Osteomalazie (Knochenerweichung) uert.
Eine Hypervitaminose fhrt ber eine Entkalkung

des Knochens zu Hypercalcmie mit Calciumablagerungen in Gefen und Nierentubuli.
Vitamin E (Tocopherole) sammelt sich in der
Lipiddoppelschicht biologischer Membranen an
und schtzt als Radikalfnger die ungesttigten
Lipide vor reaktiven Sauerstoffspezies (ROS; Abschn.31.3). Die Peroxyradikale der ungesttigten
Fettsurereste werden in Form der stabileren Tocopherolradikale abgefangen:
Das Tocopherolradikal seinerseits reagiert mit anderen Radikalen oder wird durch Ascorbinsure
oder reduziertes Glutathion reduziert. In beiden
Fllen wird die Radikalkettenreaktion beendet. Ein
Molekl des Radikalfngers pro tausend Membranlipidmolekle gengt, um die Membran zu schtzen. Eine spezifische Vitamin-E-Mangelkrankheit
ist nicht bekannt.
Vitamin K (Phyllochinon und hnliche Verbindungen) dient als Cofaktor bei der -Carboxylierung von Glutamatresten in Prothrombin und anderen Gerinnungsfaktoren:
Die an der Carboxylierung als Cosubstrat beteiligte

Hydrochinon-Form von VitaminK wird durch enzymatische Reduktion gebildet. Vitamin K-Antago-
456
1
2
3
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6
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18
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20
nisten wie Dicumarole hemmen die entsprechende
Reduktase und werden als Antikoagulanzien eingesetzt.

Darmbakterien synthetisieren etwa die Hlfte
des vom Menschen bentigten Vitamin K; Mangelzustnde sind daher selten. Gefhrdet sind jedoch Neugeborene, deren Darm noch steril ist. Da
Vitamin K nicht gespeichert werden kann, kann
schon ein Tag nach der Geburt eine Gerinnungsstrung auftreten. Um den gefrchteten bei Vitamin
K-Mangel auftretenden Hirnblutungen vorzubeugen, erhalten alle Neugeborenen prophylaktisch
Vitamin K.
Wasserlsliche Vitamine: Vitamine der
B-Gruppe und Vitamin C (.Tab.35.7) Alle B-Vi-
tamine sind Coenzym- oder Cosubstratvorstufen.

Vitamin B1 (Thiamin) wird durch Diphosphorylierung zu Thiamindiphosphat TDP, das als
Coenzym wirkt bei der oxidativen Decarboxylierung
von 2-Oxosuren wie Pyruvat und -Ketoglutarat
(.Abb.14.5 und 14.6) und bei der Transketolasereaktion im Pentosephosphatweg (Abschn.16.4).
Ein Vitamin B1-Mangel fhrt zu Beriberi (singhalesisch, groe Schwche) mit Strungen des peripheren und zentralen Nervensystems, Herzmuskelschdigung und Muskelatrophie.
Vitamin B2 (Riboflavin; lat. flavus, gelb) ist ein
Baustein der Redox-Coenzyme Flavinmononucleotid FMN und Flavin-Adenin-Dinucleotid FAD, die
jeweils zwei H-Atome bertragen. Eine spezifische
Mangelkrankheit ist nicht bekannt.
Vitamin B6 (Pyridoxol, Pyridoxin) ist Vorstufe von Pyridoxal-5-phosphat (PLP), das als
prosthestische Gruppe von Enzymen des Aminosurestoffwechsels dient. Die Reaktionen, an
denen PLP als Coenzym beteiligt ist, sind uerst
vielfltig: Transaminierung, Decarboxylierung,
Seitenkettenabspaltung, Razemisierung, Eliminations- und Substitutionsreaktionen (.Abb.4.8).
PLP ist zudem prosthetische Gruppe der Glykogenphosphorylase. Die beim Menschen seltenen
Vitamin B6-Mangelerscheinungen uern sich als
Hautvernderungen und Strungen des Zentralnervensystems.
Ein Coenzym zwei Funktionen

In den Enzymen des Aminosurestoffwechsels
nimmt die Aldehydgruppe von PLP am Bindungswechsel teil; in der Glykogenphosphorylase wirkt
die Phosphatgruppe von PLP katalytisch als Protondonor. Das gleiche Molekl erfllt vllig ver
schiedene Zwecke, ein bemerkenswertes Beispiel
fr die Findigkeit der Natur!

Nicotinsure und Nicotinsureamid (zusammen
als Niacin bezeichnet) sind Bausteine von Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid NAD+ und Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid-Phosphat NADP+. Diese
Redox-Cosubstrate bertragen im Energiestoffwechsel bzw. bei Biosynthesen ein Hydridion (H).

Der menschliche und tierische Organismus kann
Nicotinat aus Tryptophan synthetisieren. Mangelerscheinungen treten deshalb nur auf, wenn in der
Nahrung nicht nur Nicotinat, sondern auch Tryptophan fehlt, wie das z.B. bei Mais als Hauptnahrungsmittel der Fall sein kann (.Tab.35.4). Die
Mangelkrankheit, die frher endemisch vorkommende Pellagra (lat. pellis aegra, kranke Haut) uert sich durch Hautvernderungen an belichteten
Stellen (Dermatitis), Durchfllen, Depression und
anderen psychischen Strungen; die Pellagra wird
daher auch als die Krankheit der drei D bezeichnet.
Vitamin B12 (Cobalamin), ein zyklisches Tetrapyrrol mit Cobalt als Zentralatom, ist das struk-
turell komplizierteste Vitamin. Cobalamin

ist
als Coenzym an Umlagerungen von Alkylgruppen
beteiligt, d.h. der Umwandlung von Methylmalonyl-CoA zu Succinyl-CoA (Abbau ungeradzahliger
Fettsuren; Abschn.17.1) und der Bildung von
Methionin aus Homocystein (.Abb.18.8). ber
diese Reaktion ist Cobalamin auch essenziell fr
die Funktionen der Tetrahydrofolsure im C1-Stoffwechsel (Synthese von Nucleinsuren und Phospholipiden; Abschn.18.6).
Der Bedarf an Vitamin B12 ist nur 13g/
Tag. Da die Leber Cobalamin speichert, manifestiert sich eine ungengende Aufnahme erst nach
Monaten. Die Ursache von Mangelzustnden ist
meist nicht eine ungengende Zufuhr (Darmflora
synthetisiert einen Teil des aufgenommenen Vitamins), sondern eine gestrte Resorption des Vitamins aus dem Darm. Cobalamin, der sog. Extrinsic
Coenzym der
2-OxosurenDecarboxylasen
und von Transketolase
Thiamin-pyrophosphat (TDP)
FMN
FAD
Pyridoxal-5-
phosphat
Pyridoxamin-5-
phosphat
NAD+
NADP+
Thiamin B1
Riboflavin B2
Pyridoxol B6
Nicotinat
und Nicotinamid (Niacin)
16mg
(900mg
Tryptophan)
1,3
1,7mg
Strung des
ZNS Dermatitis
Pellagra (3D)
1,3mg
1,2mg
Beriberi
Dermatitis
Tg
licher
Bedarf
Mangel
krankheit beim
Menschen
Cerealien,
Leber,
Fleisch,
Milch, Gemse
Gemse,
Hefe, Leber,
Fleisch,
Milch, Eier
Leber,
Fleisch, Milch,
grnes Blattgemse
Cerealien,
Leber, Fleisch
Haupt
schliches
Vorkommen
tiefer. b Ausnahme bei Folat: Fr Frauen mit Kinderwunsch werden 600g/Tag empfohlen. Werte gem RDA, Recommended daily allowances, USA.
Cosubstrat von
Dehydrogenasen
Coenzym von
Enzymen des
Aminosurenstoffwechsels
Flavinenzyme
Bekannte molekulare Funktion
Struktur
Wirkform
Vitamin
.. Tab.35.7 Die wasserlslichen Vitaminea
35.3Vitamine
457
35
17
18
19
20
12
13
14
35
16
400gb
2,4g
Tg
licher
Bedarf
Leber,
Fleisch, Milch,
Eigelb,
Gemse
Leber,
Fleisch, Milch
Haupt
schliches
Vorkommen
Anmie
bertragung von
C1-Fragmenten
11
Tetrahydrofolat
(FH4)
10
Folat
9
Pernicise
Anmie
8
Coenzym von
B12-Enzym
5-Desoxyadeno
sylcobalamin,
Methylcobalamin
Cobalamin
Extrinsic
factor B12
Mangel
krankheit beim
Menschen
Wirkform
Struktur
Vitamin
.. Tab.35.7(Fortsetzung)
458
CoA
Pantothenat
Redox-System,
Antioxidans,
Cofaktor in Kollagensynthese
Skorbut
Mangel
krankheit beim
Menschen
90mg
Citrusfrchte,
Kartoffeln,
Kohlarten,
Hagebutten
Leber, Fleisch,
Eigelb,
Gemse,
Cerealien
Leber, Eigelb,
Cerealien
30g
5mg
Haupt
schliches
Vorkommen
Tg
licher
Bedarf
Ascorbat C
Coenzym von
Carboxylasen
(z.B. Pyruvatcarboxylase)
Carboxybiotin
Biotin
Coenzym der
Acyl-bertragung
Struktur
Wirkform
Vitamin
.. Tab.35.7(Fortsetzung)
35.3Vitamine
459
35
460
1
2
3
4
5
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8
9
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35
16
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19
20
.. Abb.35.4 Redoxreaktionen von Ascorbat. Bei der Oxidation entsteht als Zwischenprodukt das Ascorbylradikal, das sofort
ein weiteres Elektron abgibt und damit zu Dehydroascorbat wird. Als Radikalfnger gibt Ascorbat ein Elektron und ein Proton
zum Beispiel an ein Hydroxylradikal ab. Das entstehende Ascorbylradikal reagiert mit einem zweiten Hydroxylradikal oder
disproportioniert zu Ascorbat und Dehydroascorbat. In beiden Fllen wird die Radikalreaktion abgebrochen. Dehydroascorbinsure kann unter Verbrauch von NADH oder reduziertem Glutathion zu Ascorbat reduziert werden
factor, wird in tiefer gelegenen Dnndarmabschnitten (Ileum) als Komplex mit einem Protein,
dem Intrinsic factor (IF), resorbiert. Der IF wird
durch die Magenschleimhaut gebildet. Ein Mangel

an IF infolge Atrophie der Magenschleimhaut oder
nach ausgedehnter Magenresektion sowie Erkrankungen des Dnndarms knnen zu einem Vitamin B12-Mangel fhren. Die Mangelkrankheit, die
pernizise Anmie (lat. perniciosus, schadenbringend) uert sich als eine megalocytre Anmie
begleitet von schweren neurologischen und psychischen Strungen. Die frher tdlich verlaufende
Krankheit kann heute mit Vitamin B12 (parenteral
oder erhhte perorale Dosis) erfolgreich behandelt
werden.
Folsure wird zur Wirkform Tetrahydrofolat
reduziert, einem Cosubstrat des C1-Stoffwechsels.
Ein Folat-Mangel beeintrchtigt die Synthese von

Nucleinsuren und Phospholipiden und damit die
Zellproliferation. Die Folge ist wie beim Vitamin
B12-Mangel eine megalocytre Anmie. Im Fetalstadium hat ein Mangel Entwicklungsdefekte des
Rckenmarks (fehlenden Neuralrohrverschluss,
Spina bifida) zur Folge.
Die bakteriostatisch wirksamen Sulfonamide
hemmen die Folsuresynthese in Bakterien; die bakteriostatisch und zytostatisch wirksamen Folsureantagonisten hemmen die Dihydrofolat-Reduktase
(Abschn.19.4; .Abb.19.5).
Biotin dient als prosthetische Gruppe von
Carboxylasen, z.B. der Pyruvatcarboxylase (Ab-
schn.14.3) und der Acetyl-CoA-Carboxylase (Abschn.17.2). Biotin wird wie Folsure von der Darm-
flora gebildet; Mangelerscheinungen sind selten.
Biotin bindet mit hoher Affinitt (Kd=1015M!)

an Avidin, ein Protein des Hhnereiklars. Die beraus starke Bindung wird im biochemischen Labor
fr experimentelle Zwecke genutzt.
Pantothensure ist ein Bestandteil von CoA
(.Abb.14.4) und prosthetische Gruppe des
Acyl-Carrier-Proteins (Abschn.17.2). Mangelerscheinungen sind selten.
Vitamin C (Ascorbinsure) ist nur fr Trockennasenprimaten, zu denen Mensch, Menschenaffen
und einige andere Affenfamilien gehren, sowie
fr Meerschweinchen und einige andere Tierfamilien essenziell; sonst sind im Tierreich keine Mangelerscheinungen bekannt, da alle Tiere, von den
obigen Ausnahmen abgesehen, Ascorbat (2-Oxogulonolacton) aus Glucuronat synthetisieren knnen. Die sauren Eigenschaften sind auf die beiden
Hydroxylgruppen des Lactonrings zurckzufhren.
Ascorbinsure dient als Reduktionsmittel bei Hydroxylierungsreaktionen (Hydroxylierung von Pro
und Lys im Prokollagen, sowie von Catecholaminen, Steroiden und Gallensuren) und wirkt zudem
als Antioxidans und Radikalfnger (.Abb.35.4).
Vitamin C-Mangel ist heutzutage selten. Frher
war der Skorbut eine gefrchtete Krankheit, die
mit ber Monate sich entwickelnden Bindegewebeschden und sich daraus ergebenden Blutungen
durch Kapillarrupturen und Zahnausfall einherging und ber weitere Organschden zum Tode
fhren konnte.
461
35.4 Elektrolyte, Mineralstoffe und Spurenelemente
35.4
Elektrolyte, Mineralstoffe
und Spurenelemente
In Gramm-Mengen pro Tag bentigt werden die

Elektrolyte Na+, K+ und Cl und die Mineralstoffe
Ca2+, Mg2+, Phosphat und Sulfat (.Tab.35.8); in
Milligramm-Mengen notwendig sind die Spuren-
35
elemente Fe, Zn, Mn, Cu, Co, Cr, Mo, I, Se und

F, die zumeist als Cofaktoren von Proteinen, insbesondere von Enzymen dienen. Insgesamt ist der
menschliche Krper aus mindestens 21Elementen
aufgebaut. Fr gewisse Bakterien ist auerdem Ni
essenziell (Urease ist ein Nickel-Enzym), und V ist
essenziell fr gewisse Algen- und Pilzspezies.
(Homo sapiens)
Schwankungen in der Zufuhr anorganischer Bestandteile werden bis zu einem gewissen Grad
durch krpereigene Speicher aufgefangen: Apatit im
Knochen fr Calcium; Ferritin und Hmosiderin in
Knochenmark, Leber, Milz fr Eisen; Thyreoglobulin in der Schilddrse fr Iod. Hormone regulieren
die Aufnahme und Ausscheidung von Na+, Ca2+,
Phosphat wie auch von Wasser (Abschn.33.4).
Pflanzennahrung enthlt weniger Na+ und
mehr K+ als Nahrung tierischen Ursprungs
Pflanzengewebe enthalten nur wenig extrazellulre

Flssigkeit und dementsprechend wenig Na+, das
Hauptkation im extrazellulren Kompartiment:
Kartoffeln
Fleisch
Na+
(mmol/100g)
K+
(mmol/100g)
Na+/K+
0,3
3
15
9
0,02
0,33
Pflanzliche Nahrung muss mit NaCl supplementiert werden (Salzhunger der Wiederkuer!). In der
Menschheitsgeschichte war die Verfgbarkeit von
Kochsalz eine Voraussetzung fr den bergang zu
Ackerbau und sesshafter Lebensweise.
Calcium ist der mengenmig wichtigste Mineralstoff des Krpers Knochen und Zhne ent-
halten 11,5kg Calcium als Teil des Apatits. Nur

wenig Ca2+ (510g) findet sich in der extrazellulren
Flssigkeit (2,5mM) und in den Zellen (0,1M), wo
Ca2+ als Second messenger bei hormonaler Regulation und Muskelkontraktion wirkt. Das Vitamin
D-Derivat Calcitriol frdert die Resorption von
Ca2+ aus dem Darm (Ileum), indem es die Synthese
des Ca2+-Transportsystems induziert. Eine ungengende Ca2+-Zufuhr fhrt zu Mineralisationsstrungen des Knochens und der Zhne.
462
.. Tab.35.8 Anorganische Bestandteile des Krpers a
Elektrolyte
Na
K
Cl
Gehalt
Empfohlene Tagesdosis b
(g)
(g/Tag)
100
150
100
1,5
4,7
2,3
Mineralstoffe
(g)
(g/Tag)
Ca
Mg
Pc
1200
20
650
1,0
0,4
0,7
Spurenelemente
(g)
(mg/Tag)
Fe
Zn
Mn
Cu
Co
Mo
Se
I
45
3
0,02
0,1
0,001
0,01
0,0150,030
0,02
6
7
8
9
10
11
12
13
14
35
16
17
18
19
20
8
11
2,3
0,9
0,045
0,055
0,15
Hauptvorkommen
Extrazellulr
Intrazellulr
Extrazellulr
Knochen
Knochen
Knochen
Hmoglobin, Myoglobin
Zinkenzyme, Zinkfinger
Pyruvatcarboxylase
Cytochromoxidase
Cobalamin
Xanthinoxidase
Glutathionperoxidase
Thyreoglobulin
Die Zahlen gelten fr einen erwachsenen Menschen (65kg). Die Bezeichnung Spurenelemente stammt aus der
Zeit, als sich der geringe Gehalt dieser Elemente noch nicht quantitativ erfassen lie.
Werte gem RDA, Recommended daily allowances, USA.
Elementarer Phosphor, im Knochen als Hydroxylapatit Ca5(PO4)3OH
Eisen ist das hufigste Spurenelement im

menschlichen Krper Drei Eigenschaften erklren
--
die biologische Wichtigkeit des Eisens:

Mglichkeit des Wechsels der Oxidationsstufe:
Fe3++e Fe2+,
Komplexbildung von Fe2+ mit O2,
Feste Komplexbindung von Eisen an Proteine
(und Protoporphyrin).
Der Gesamtbestand von Eisen beim erwachsenen

Menschen betrgt 45g, davon sind zwei Drittel
im Hmoglobin. Eisenmangel uert sich daher in
ungengender Bildung von Hmoglobin (Eisenmangelanmie) und umgekehrt manifestiert sich
ein grerer Blutverlust im Eisenstoffwechsel. Die
Eisenmangelanmie ist die hufigste Anmieform
(80%!) und die weltweit hufigste Mangelkrankheit berhaupt (20% der Erdbevlkerung).
Auch ohne Blutverlust verliert der Krper
dauernd etwas Eisen durch Abschilferung von
Darmepithelzellen und anderen Zellen. Der Eisenbedarf von Frauen ist wegen der Menstruation
etwa doppelt so hoch wie der von Mnnern und

steigt whrend Schwangerschaft und Stillzeit weiter
an. Die empfohlene Zufuhr entspricht dem Zehnfachen des obligatorischen Verlusts, da Eisen im
Darm schlecht resorbiert wird. Den Transport von
Fe3+ im Blut und die Speicherung in den Geweben
besorgen die Proteine Transferrin bzw. Ferritin
und Hmosiderin (.Abb.35.5). In Sekreten wie
Milch, Speichel, Nasensekret und Trnenflssigkeit ist das Eisen an Lactoferrin (Lactotransferrin)
gebunden. Diese eisenbindenden Proteine halten
die Konzentration von freiem Eisen in den Krperflssigkeiten und Sekreten auf<0,1nM und wirken
dadurch antimikrobiell. Bei hheren Konzentrationen von freiem Eisen wrden unlsliche Eisensalze
(Phosphate und Hydroxide) ausfallen; zudem bildet frei gelstes Eisen schdliche Sauerstoffderivate
.H2 O2 ; O2 ; HO /.
Die Eisenresorption aus dem Darm wird auf
den Bedarf abgestimmt, bei Eisenmangel erfolgt
sie 2- bis 3-mal effizienter als bei ausreichender
Eisenversorgung. Sobald der Krper ber genug
463
35.5Nahrungsmittel
35
.. Abb.35.5 Stoffwechsel des Eisens: Aufnahme, Transport und Ausscheidung. Freies Eisen wird in reduzierter Form (Fe2+)
durch einen besonderen Transporter fr zweiwertige Metallionen in die Darmepithelzellen bergefhrt. Aus tierischer Nahrung
wird Hm in die Epithelzellen aufgenommen. In der Zelle wird durch eine Hmoxygenase Fe3+ freigesetzt (.Abb.33.8) und
zu Fe2+ reduziert. Im Plasma wird Fe2+ wiederum zu Fe3+ oxidiert und an das Transportprotein Transferrin gebunden. Transferrin
bindet 2Fe3+-Ionen und wird, hnlich wie die LDL, ber Membranrezeptoren und Endocytose in die Zellen aufgenommen. In
lysosomenartigen Vesikeln gibt das Transferrin bei tiefem pH das Eisen ab und wird anschlieend durch Exocytose wieder aus
der Zelle befrdert (beim LDL-Rezeptor findet keine Rezyklierung statt). Vom Eisen, das mit Transferrin im Plasma transportiert
wird, werden etwa 80% von Erythrozyten (EC)-Vorluferzellen im Knochenmark bentigt, um Hmoglobin zu synthetisieren.
Der Rest dient zur Synthese von Cytochromen und Nicht-Hm-Eisenproteinen in anderen Zellen des Organismus. berschssiges Eisen wird in Ferritin gespeichert. Das Eisenspeicherprotein Ferritin besteht aus 24Untereinheiten, die eine Hohlkugel
(Innendurchmesser78nm) bilden, in die bis zu 4500Fe3+-Ionen als Ferri-Hydroxid-Phosphat gelagert sind. Hmosiderin ist ein
weiterer Eisenspeicher, der neben Ferritin auch Lipide und Nucleotide enthlt
Eisen verfgt, wird die Resorption aus dem Darm

gedrosselt (Mucosablock). berschssiges Eisen
kann der Krper nicht ausscheiden; genetisch bedingte bermige Resorption aus dem Darm und
Speicherung von Eisen fhren zur Hmochromatose, einer Eisenspeicherkrankheit mit schweren
Organstrungen.
Iod ist nach Eisen das medizinisch wichtigste

Spurenelement Mit der Nahrung aufgenomme-
nes Iodid wird durch Na+-gekoppelten Transport in

der Schilddrse angereichert und ausschlielich zur
Synthese der Schilddrsenhormone Triiodthyronin
(T3) und Thyroxin (T4) verwendet.
Kaliumiodid-Tabletten
Bei einer Nuklearkatastrophe freigesetztes radioaktives Iodid wrde sich in der Schilddrse
ansammeln. Sofortige Zufuhr von nichtradioaktivem Kaliumiodid verhindert die Akkumulation von radioaktivem Iodid und dadurch
hervorgerufene Schilddrsenkarzinome.
Der Iodidgehalt der Nahrungsmittel ist abhngig

vom Iodidgehalt des Bodens. Die Bden mancher
Regionen der Erde sind arm an Iodid, weil die gut
wasserlslichen Iodidsalze im Laufe geologischer
Zeitrume ausgewaschen wurden. In Europa sind
vorwiegend die Alpen und die Pyrenen betroffen, wo noch im vergangenen Jahrhundert Iodidmangel zu endemischem Auftreten von Struma
(Kropf) und Schilddrsenunterfunktion (Hypothyreose) fhrte. Bei Kindern kam es zu Entwicklungsstrungen (Retardierung bis zu Kretinismus
mit Kleinwuchs, Gehrstrungen und Schwachsinn). Eine sehr einfache Manahme, die Zufuhr gengender Mengen Iodid mit der Nahrung
(150g/Tag), z.B. durch Zugabe von Natriumiodid
zum Kochsalz, hat alimentr bedingten Kretinismus und Kropf zum Verschwinden gebracht. Die
Iodidprophylaxe ist ein Groerfolg der Prventiv
medizin!
Zur Fluoridprophylaxe gegen Zahnkaries, s.
Abschn.30.6.
35.5 Nahrungsmittel
Die ernhrungsphysiologischen Eigenschaften der

Nahrungsmittel wie Milch, Brot, Gemse und
Wurst ergeben sich aus deren Gehalt an den verschiedenen chemisch definierten Nhrstoffen, Ballaststoffen, essenziellen Nahrungsbestandteilen und
allflligen Zusatzstoffen.
Der Proteingehalt (Casein und Lactalbumin)
und Mineralgehalt der Milch korreliert mit der
464
1
2
3
4
5
6
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8
9
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11
12
13
14
35
16
17
18
19
20
speziestypischen Wachstumsgeschwindigkeit
Bei Mensch und Sugetier ist die Milch das einzige

Nahrungsmittel im ersten Lebensabschnitt, die Korrelation ist damit gut begrndet:
Verdoppelung
des Geburts
gewichts (Tage)
Protein
(g/100mL)
0,2
0,7
0,8
2,5
1,0
3,2
5,2
10,4
180
Mensch
47
Rind
14
Schwein
Kaninchen 6
Mineralgehalt
(g/100mL)
Die unterschiedliche Zusammensetzung von Human- und Kuhmilch macht verstndlich, warum fr
Suglinge Kuhmilch die Humanmilch nicht ersetzen kann:
Protein
Lactose
Fett
Mineralstoffe
Humanmilch
g/100mL
Kuhmilch
g/100mL
1,0
6,9
4,4
0,2
3,2
4,6
3,7
0,7
Um als Suglingsnahrung zu taugen, muss Kuhmilch

verdnnt werden und Zucker zugesetzt bekommen.
Fleisch und Fisch sind Quellen hochwertiger
Proteine Der Fettgehalt ist variabel; Kohlenhydrat
ist keines vorhanden, das Glykogen ist bei der Lagerung des Fleisches zu Milchsure abgebaut worden. Der sich daraus ergebende pH-Wert von 56
hemmt das Wachstum von Bakterien und Pilzen.
Innereien sind bezglich Proteingehalt mit Fleisch
vergleichbar, Leber enthlt besonders viel Vitamine
und Eisen.
Cerealien (Getreide: Weizen, Reis, Mais) und
die daraus hergestellten Produkte (Brot, Teigwaren)
sind, zusammen mit Kartoffeln, die wichtigste und
billigste Energie- und Proteinquelle. Die Strke ist
im Mehlkern des Getreidekorns gespeichert, die
Proteine (und Vitamine) in der Aleuronschicht um
den Kern. Gewisse Getreideproteine, beim Weizen das Gluten (Kleber, ein Gemisch von Gliadin
und Glutenin), sind wichtig fr die Backfhigkeit
des Mehls. Ihre Aminosurezusammensetzung
ist fr die menschliche Ernhrung nicht optimal
(.Tab.35.4).
Zliakie
Das in Weizen, Roggen und Gerste vorkommende Gluten ruft bei glutenempfindlichen
Menschen eine entzndliche, immunologisch
bedingte Erkrankung der Dnndarmschleimhaut hervor (Prvalenz in Europa 1:200 bis
1:70). Eine lebenslange glutenfreie Dit ist die
einzige wirksame Behandlung.
Kartoffeln und Leguminosen (Erbsen, Bohnen,
Linsen) liefern Strke und recht hochwertige Proteine (.Tab.35.4). Kartoffeln wie auch Leguminosen enthalten Proteaseinhibitoren, welche die
Proteinverdauung im Magendarmtrakt hemmen.
Kochen denaturiert diese Inhibitoren.
Gemse und Frchte enthalten etwas Kohlenhydrat und sind eine gute Quelle fr Vitamin A,
Ascorbinsure, Thiamin, Riboflavin, Calcium und
Eisen.
Ballaststoffe (pflanzliche Faserstoffe) sind
durch die Verdauungsenzyme nicht abbaubare Nahrungsbestandteile wie Cellulose und andere Polysaccharide (Hemicellulose, Pektin, Lignin, Inulin); ein
Teil davon wird durch die Darmflora abgebaut. Ballaststoffe vergrern durch vermehrte Wasserbindung das Volumen des Darminhalts, wodurch die
Peristaltik stimuliert und die Verweildauer des Darminhalts im Dickdarm verkrzt wird. Ballaststoffe
binden zudem Gallensuren und entziehen sie dem
enterohepatischen Zyklus; die dadurch notwendige
Neusynthese aus Cholesterol verringert dessen
Konzentration im Blut. Ballaststoffe (empfohlene
Tagesdosis 30g) finden sich reichlich in hochausgemahlenen Mehlen (Vollkornmehlen), Gemsen wie
Hlsenfrchten, Frchten wie Zwetschgen, Pflaumen, Feigen und in Beeren sowie Nssen.
Hitzebehandlung der Nahrung bringt Vorteile
Kochen, Braten oder Rsten der pflanzlichen Nahrungsmittel schliet die Cellulosemembranen und
Strkekrner auf; die Nhrstoffe knnen besser verwertet werden. Zudem ttet die Hitzebehandlung
allfllig vorhandene Krankheitserreger ab und denaturiert die Nahrungsproteine, die damit fr die
Verdauungsproteasen besser angreifbar werden.
Bei der Nahrungszubereitung durch Braten oder
Rsten entstehen berdies zustzliche Aroma- und
465
35.5Nahrungsmittel
Geruchsstoffe (Bratenduft!). Ein Nachteil der Hitzebehandlung ist der damit einhergehende Verlust gewisser Vitamine, der verringert werden kann durch
kurze Kochzeit und Luftausschluss (Dampfkochtopf
oder Kochen mit Pfannendeckel).
Viele Fertigprodukte enthalten Zusatzstoffe
Die Verwendung von Zusatzstoffen (in Europa einheitlich mit E-Nummern bezeichnet ) ist durch
Positivlisten mit Angabe von Hchstmengen geregelt. Grundstzlich sind jegliche Zustze verboten,
auer sie seien auf der Liste aufgefhrt. Beispiele
von Zusatzstoffen: Farbstoffe (z.B. -Carotin, Anthocyane), Konservierungsmittel (Benzoesure,
Ameisensure, Zucker, NaCl, Nitrit), Antioxidanzien (Ascorbinsure, Sulfit), Emulgatoren (Glycerolmonostearat), Gelier- und Verdickungsmittel (Gelatine, Pektine), Aromastoffe (Natriumglutamat als
Geschmacksverstrker, fr die fnfte Geschmacksqualitt Umami verantwortlich) sowie natrliche
und knstliche Sstoffe (Saccharin, Cyclamat oder
Aspartam, N-L--Aspartyl-L-phenylalanin-Methyl
ester; Vergleich der relativen Skraft, s. ).
Schadstoffe in Lebensmitteln sind nicht zu
vermeiden Fr alle in der Praxis wichtigen Sub-
stanzen (Rckstnde von Herbiziden, Pestiziden,

Insektiziden und Antibiotika sowie Schwermetalle)
sind Hchstmengen in Lebensmitteln festgelegt.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517254-0
35.1 Bedarf an Brennstoffen und Baustoffen
35.2 Hauptnhrstoffe
35.3 Vitamine
35.4 Elektrolyte, Mineralstoffe und Spuren
elemente
35.5 Nahrungsmittel
35
467
Zelldifferenzierung,
Regeneration und Altern;
Systembiologie
und Synthetische Biologie
36.1
Zelldifferenzierung und Ontogenese 468
36.2
Regeneration von Organen und Extremitten 470
36.3
Alterungsvorgnge471
36.4
Systembiologie472
36.5
Synthetische Biologie474
36.6
Genomik, Proteomik, Transkriptomik, Interaktomik,

Metabolomik und Mikrobiomik 474

36
468
1
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20
Kapitel 36 Zelldifferenzierung, Regeneration und Altern; Systembiologie und Synthetische Biologie
In Populationen parasitisch lebender Einzeller, z.B.

von Malariaerregern (Protozoen), entstehen durch
Differenzierung verschiedene Zelltypen. Im Falle
mehrzelliger Organismen entwickeln sich aus einer totipotenten befruchteten Eizelle (Zygote,
Stammzelle) smtliche Gewebe und Organe. Das
Entwicklungspotenzial der Zellen verringert sich
whrend der Differenzierung durch epigenetische
Mechanismen: Zum Beispiel entstehen aus einem
Hepatozyten nur noch weitere Leberparenchymzellen. Zellen auf Zwischenstufen der Differenzierung
werden als pluripotente Stammzellen bezeichnet,
falls sie sich noch zu verschiedenen Zelltypen (z.B.
von Leukozyten) entwickeln knnen. In der Medizin wird dem Einsatz von Stammzellen zur Regeneration geschdigter Gewebe groes Potenzial
zugeschrieben.
Alterungsvorgnge uern sich auf vielfltige Art; sie fhren zu verminderter Leistungsfhigkeit von Organellen, Zellen und Organen
und dadurch auch zu vermehrter Anflligkeit fr
Krankheiten. Spontanmutationen und ROS (Reactive oxygen species, Abschn.31.3), Nebenprodukte des mitochondrialen Stoffwechsels, scheinen
die Hauptursachen der Alterungsvorgnge zu sein.
Fehlfunktionen in der Atmungskette alternder
Mitochondrien fhren zu erhhter ROS-Produktion
und damit zu weiterer Schdigung mitochondrialer
Proteinkomplexe: ein Teufelskreis.
Die Systembiologie versucht, gewisse Vorgnge in Organismen gesamtheitlich zu verstehen.
Es gilt, aus der enormen Vielfalt der zugnglichen
Daten die Grundzge biologischer Vorgnge zu formulieren. Die Resultate verschiedener Hochdurchsatztechniken (z.B. zur Erfassung von Stoffwechsel,
Signaltransduktion oder Genaktivierung) werden
kombiniert und die Vernetzungen dieser Vorgnge
im Organismus erfasst. Systembiologische Anstze
in der medizinischen Diagnostik erlauben eine besser fundierte personalisierte Therapie.
Die Synthetische Biologie entwickelt neue
Organismen, die nicht in der Natur vorkommen,
d.h. Zellen mit neu eingefhrten Genen oder sogar neuem vollsynthetischem Genom. Sie erffnet
neue Wege zur industriellen Synthese nutzbarer
Stoffe und hat das Potenzial, groe anstehende Probleme zu lsen, wie beispielsweise den absehbaren
Energiemangel und hohen globalen CO2-Aussto.
Lichtgetriebene Assimilation von CO2 und dessen

Einbau in Energietrger wie Ethanol durch synthetische Mikroorganismen ergbe einen transportund
lagerfhigen Treibstoff bei ausgeglichener CO2-Bilanz.
36.1 Zelldifferenzierung
und Ontogenese
Relativ wenige Zellen eines adulten Organismus

sind zur fortgesetzten Teilung fhig Whrend
der Ontogenese (Individualentwicklung) eines
Organismus steuert eine vernetzte Signalbermittlung das Wechselspiel von Zellwachstum, Differenzierung und Apoptose. Die differenzierten somatischen Zellen machen die Hauptmenge der Zellen
des erwachsenen Krpers aus. Sie teilen sich meist
nicht mehr, altern, sterben ab und werden durch
neue Zellen ersetzt. Ein Extremfall sind die kernlosen Erythrozyten der Sugetiere. Nur ein kleiner
Teil der somatischen Zellen, die Stammzellen, ist
zur fortwhrenden Teilung und Bildung neuer Zellen befhigt. Stammzellen sind wichtig fr den
Zellersatz in den Geweben und fr die Wundheilung. Die Teilung einer Stammzelle verluft asymmetrisch, die eine Tochterzelle bleibt Stammzelle,
die andere differenziert sich mittels epigenetischer
Mechanismen (Abschn.11.4) zu einer spezifischen Gewebezelle, welche sich nicht mehr oder
nicht mehr beliebig oft teilen kann. In proliferationsaktiven Geweben wie der Darmschleimhaut
befinden sich lebenslang adulte Stammzellen in
bestimmten Nischen des Gewebes (.Abb.36.1).
Nur wenige Typen differenzierter somatischer
Zellen, z.B. Hepatozyten, knnen sich bei einer
Regeneration (einem Ersatz abgestorbener Zellen)
effizient vermehren, wobei sie jedoch nur Tochterzellen ihres eigenen Zelltyps hervorbringen. Solche
Krperzellen, welche sich nur zu Tochterzellen des
gleichen Typs teilen, werden als unipotente Zellen
bezeichnet. Befruchtete Oozyten sind totipotente
(omnipotente) Zellen, sie knnen sich zu smtlichen Zelltypen differenzieren; hingegen bringen pluripotente (multipotente, oligopotente)
Stammzellen nur noch einige bestimmte Zelltypen, z.B. B- und T-Lymphozyten (Abschn.32.3),
hervor.
36
469
36.1 Zelldifferenzierung und Ontogenese
Stammzellen knnen kloniert und in vitro

vermehrt werden John Gurdon gelang es 1962
erstmals, eine Kaulquappe aus einer entkernten

Frosch-Eizelle nach Mikroinjektion des isolierten
Kerns einer differenzierten Frosch-Epithelzelle zu
zchten (Nobelpreis2012). Die wesentlich kleineren
und empfindlicheren Oozyten und embryonalen
Stammzellen der Sugetiere konnten erst Jahrzehnte
spter isoliert und fr analoge Versuche verwendet
werden.
Differenzierte
Zellen in der
G0-Phase
Knstliche Stammzellen knnen aus Oozyten oder frhen embryonalen Zellen hergestellt
werden Ein fremder Kern, meist der Kern einer
somatischen Zelle, wird durch Mikromanipulation

in eine entkernte Oozyte oder entkernte embryonale
Zelle eingefhrt. Im eingefhrten Kern bewirken
Proteine der Empfngerzelle die Dedifferenzierung
des Genoms, welches die epigenetisch programmierten zelltypspezifischen Eigenschaften verliert
und pluripotent wird. Pluripotenz kann auch durch
gezielte gentechnische Einfhrung (Abschn.39.1
39.4) 34 Transkriptionsfaktoren (Oct4, Nanog,
Klf4 und u.U. c-Myc) in gewissen differenzierten
Zellen induziert werden (induzierte pluripotente
Stammzellen, iPS). Die Genome differenzierter
Zellen erlangen dadurch erneut die Fhigkeit, nach
bestimmten Stimuli (z.B. Wachstumsfaktoren, ZellZell-Kontakte) die entsprechenden neuen Zelltypen
zu programmieren.
Mit den folgenden Versuchen ist ein erster
Schritt in Richtung regenerativer Medizin gelungen.
Ein Gemisch von Endothelzellen aus Nabelschnur,
mesenchymalen Stammzellen und aus menschlichen iPS gewonnenen Leberentodermzellen, organisierte sich unter Zellkulturbedingungen zu einem
Gewebe. Nach Transplantation dieses Gewebes in
immuntolerante Muse bildete sich eine leberhnliche Gewebeknospe, die menschliches Serumalbumin produzierte. Weitere organhnliche Strukturen
wie Augenbecher (Augenanlage), Darmgewebe oder
Hirngewebe sind aus entsprechenden Zellgemischen in vitro hergestellt worden.
Die Gre und Form von Zellen, Geweben und
Organen wird kontrolliert Der Mechanismus die-
ser Kontrolle ist nach wie vor unklar. Es handelt sich

aber nicht um ein einfaches Zhlen der Zellteilungen oder ein Messen der Wachstumszeit. Gewisse
Proteine der Signalbermittlung sowie Proteine zur
Sich rasch
teilende Zellen
(Zykluszeit 12 h)
Stammzelle
Differenzierte Paneth-Zellen
.. Abb.36.1 Stammzellen in Darmkrypten. Das Schema zeigt eine Darmkrypte, den Ort der Erneuerung der
Darmschleimhaut. Eine Krypte im Dnndarm ist etwa 3mm
tief. Im untersten Bereich befinden sich einige differenzierte Zellen (Paneth-Zellen, deren Sekret Lysozym enthlt).
Darber folgen wenige sich langsam teilende Stammzellen,
deren sich differenzierende Tochterzellen nach oben geschoben werden, wo nachfolgend raschere Teilungszyklen
vonstattengehen. In der oberen Hlfte der Krypten liegen
die sich nicht mehr teilenden, ausdifferenzierten Zellen
der Darmmucosa. Sie werden nach und nach in die aus der
Darmwand herausragenden Darmzotten (Darmvilli, nicht
gezeigt) geschoben. Die hier nicht dargestellten Mikrovilli
sind Ausstlpungen der apikalen Zellmembran (Zellcortex
mit Mikrovilli; .Abb.25.1)
470
Empfnger = Spender
1
2
3
Implantation
Biopsie und
Zellisolierung
5
6
+ Wachstumsfaktoren
7
8
Trgernetz
+ Zellen
Zellkultur
9
10
11
12
13
14
15
36
17
18
19
20
.. Abb.36.2 Gewebeersatz aus

Zellkultur. Nach der Entnahme
geeigneter Zellen aus einem
immunologisch vertrglichen
Spender (wenn immer mglich
autologe Transplantation) wird
ein Ersatzgewebe im Labor
gezchtet. Die Zellen aus der
Biopsie werden meist durch Behandlung mit Trypsin und Kollagenase vereinzelt und mittels
differenzieller Zentrifugation
angereichert. Oft werden mehrere Zelltypen wie Fibroblasten,
mesenchymale Stammzellen aus
Knochenmark oder Fettgewebe
zusammen mit Endothelzellen
in einer Kultur gezchtet
Vermehrung der Zellen
Kontrolle der Zellpolaritt scheinen bei der Erfassung von Gre und Form eine Rolle zu spielen.
Einfluss der Apoptose auf die Bildung der Gewebestruktur des Gehirns Whrend der Entwick-
lung des menschlichen Gehirns werden mehrere

schubartig auftretende Phasen mit Apoptose von
Neuronen beobachtet. Es wird vermutet, dass diese
Prozesse diejenigen Neuronen eliminieren, welche
zum gegebenen Zeitpunkt nicht mit anderen Neuronen vernetzt sind. Versuche mit hochauflsenden
bildgebenden Verfahren zur rumlichen Kartierung
der Vernetzung der Neuronen anhand der elektrischen Vorgnge bei der Signalbertragung sind in
Gang. Allerdings werden solche Untersuchungen
der Komplexitt der Gehirnfunktion nur teilweise
gerecht: Zahlreiche Variable der Signalverarbeitung
und -bermittlung werden notgedrungen auer
Acht gelassen.
36.2
Regeneration von Organen

und Extremitten
Pflanzen und wirbellose Tiere knnen Krperteile und Organe ersetzen Verlorene Krperteile
knnen bei diesen Organismen durch erneutes

Wachstum regeneriert werden. Bei Wirbeltieren ist
diese Fhigkeit zu einem groen Teil nicht mehr
vorhanden. Blo einzelne Organe knnen teilweise
ersetzt werden, beispielsweise abgetrennte Gliedmaen bei gewissen Amphibien, deren lokale Gewebe dedifferenzieren und zu neuen Gliedmaen
nachwachsen.
Gewebsersatz und Regeneration finden bei

Sugern nur in geringem Ausma statt Nur
in den Geweben mit hohem Zellumsatz wie Haut,

Darmschleimhaut, Immunsystem und Knochen
findet eine nennenswerte Regeneration statt. Insbesondere wird bei der Wundheilung, von diesen
Ausnahmen abgesehen, die vorherige Struktur
nicht rekonstruiert. Bei der sogenannten Regeneration der Leber wird nur die Masse der Leberparenchymzellen durch Teilung differenzierter Zellen
471
36.3Alterungsvorgnge
36
.. Tab.36.1 Sieben Merkmale des Alternsa

Merkmal
Grundlage
Effekt
Krankheit, Beispiel
Anhufung genetischer
Schden
Mangelhafte DNA-Reparatur
Ausfall von Genprodukten

in betroffenen Zellen und
deren Abkmmlingen
Werner Syndrom (Progerie), Xeroderma pigmentosum
Verkrzung der Telomere
Inaktive Telomerase
Zellzyklus-Blockierung;
Hemmung der Tumorbildung
Lungenfibrose, aplastische
Anmie
Mitochondriale Fehlfunktion
Deletionen/Mutationen in
mitochondrialer DNA
Vermehrte Produktion
von ROS
Mitochondriopathien (Mutationen im
mitochondrialen Genom)
Erlahmen der Teilungsfhigkeit somatischer

Zellen und Stammzellen
Akkumulierte DNA-Schden, verkrzte Telomere
Verminderte regenerative
Fhigkeit, Gewebeschwund
Abnehmende Muskel- und

Herzleistung
Epigenetische Vernderungen
DNA-Methylierungen,
Histonmodifikationen
Vernderte Chromatin
struktur
Diverse Krebserkrankungen
Verlust der Proteostase
Vermehrte Bildung fehlgefalteter Proteine (Ursache

zumeist unbekannt)
Proteinaggregation, Amyloidose
Alzheimer-Krankheit,
Parkinson-Krankheit,
Huntington-Krankheit
Vernderte Zell-Zell-Kommunikation
Vernderte endokrine,
neuroendokrine und
neuronale Signale
Vermehrte Entzndungsreaktionen
Schwchung des adaptiven

Immunsystems
a
Die Kumulation progredienter Schden ist verantwortlich fr das Altern der Organismen und das vermehrte Auftreten gewisser Krankheitsbilder
wiederhergestellt, nicht aber die Organstruktur. Die

Reparatur anderer grerer Schden ist unvollstndig, meist ersetzt Bindegewebe die funktionstragenden Strukturen.
In-vitro Gewebekulturen kommen in der Klinik zu Einsatz Vor allem epitheliale Gewebe lassen
sich relativ leicht in vitro kultivieren. In der regenerativen Medizin werden Ersatzgewebe nach in-vitro
Vermehrung verwendet. Die primren zu vermehrenden Zellen werden dem Patienten entnommenen
(.Abb.36.2). Ein Hautersatz dieser Art wird hufig
zur Behandlung groflchiger Verbrennungs- und
Schrfwunden eingesetzt.
Menschliche embryonale Stammzellen wurden durch Mikroinjektion isolierter Kerne von
kultivierten Hautfibroblasten in entkernte Oozyten
(reife Oozyten in Metaphase der MeioseII) erhalten. Diese Klone mit dem Genom einer somatischen
Zelle wuchsen zu einem frhen Embryonalstadium
aus (Blastula). Aus ethischen Grnden sind solche
menschliche Klone nicht weiter gezchtet worden.
Menschliche iPS mit Patientengenom knnten jedoch Ersatz fr geschdigtes Gewebe liefern. Ein
weiterer Vorteil von iPS dieser Art wre neben dem
hohen Wachstumspotenzial deren Tolerierung
durch das Immunsystem des Empfngers.
36.3 Alterungsvorgnge
Molekulare Ursachen des Alterns sind vor allem
oxidative Schden sowie DNA-Mutationen Das
Altern ist ein degenerativer biologischer Prozess,

der zu verminderter krperlicher und geistiger
Leistungsfhigkeit sowie einer erniedrigten Resistenz gegen Krankheiten fhrt. Durch reaktive
Sauerstoffspezies ROS (Reactive oxygen species,
Abschn.31.3) verursachte Schden an Makromoleklen, insbesondere in den Mitochondrien
(die in hohem Ma ROS-exponiert sind und ber
kein eigenes DNA-Reparatursystem verfgen),
sowie die zunehmende Hufigkeit von Spon-
472
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20
tanmutationen durch verminderte Effizienz der

DNA-Reparatursysteme drften fr diese Prozesse
verantwortlich sein. Sieben typische Merkmale des
Alterns (.Tab.36.1) berlappen teilweise mit den
typischen Merkmalen der Transformation bei der
Tumorbildung (.Tab.24.1) und bieten damit eine
Erklrung fr das gehufte Auftreten von Tumoren
im Alter (Abschn.24.4).
Die Ursachen des Alterns sind allerdings bis
heute nicht abschlieend geklrt, offenbar sind verschiedene Mechanismen daran beteiligt. Die Anzahl
der Teilungszyklen, welche eine bestimmte Zelle
durchlaufen kann, ist durch die fortschreitende Verkrzung der Telomeren und daraus resultierender
Zellzyklusblockierung (Abschn.24.5) limitiert.
In alternden Zellen und Organismen hufen sich
peroxidierte Lipide, oxidierte Makromolekle und
Mutationen in der DNA an. Die Gene zur Reparatur
von oxidativen Schden und DNA-Schden sind im
Alter hochgeregelt.
Progerien sind seltene Krankheiten mit vorzeitigem Altern der Betroffenen: Das Hutchinson-Gilford Progeriesyndrom betrifft die Reifung der RNA
eines Lamin-Gens. Das unvollstndig prozessierte
Prlamin A (Abschn.23.3) fhrt zu unregelmigen Einbuchtungen in der Kernmembran und
zu diversen Strungen regulatorischer Art durch
Bindung des vernderten Lamins an Transkriptionsfaktoren. Fr das Werner-Progeriesyndrom ist
ein DNA-Reparaturdefekt verantwortlich.
Der Zustand der Mitochondrien beeinflusst
die Lebenserwartung Mitochondrien sind nicht
nur wichtig bei der Auslsung der Apoptose (durch

Cytochrom c; Abschn.24.6), sie knnen auch die
Lebenserwartung der Zellen und des Organismus
nachhaltig beeinflussen. Defekte in der Atmungskette fhren zu vermehrter Bildung von ROS, welche in erster Linie wiederum mitochondriale Lipide
und Proteine modifizieren. Da die Mitochondrien
die hauptschliche Quelle fr ROS sind, spielt ihr
Zustand bzw. ihre Stoffwechselaktivitt eine wichtige Rolle beim Altern. Reduzierte Synthese gewisser mitochondrialer Proteine verlngert die
Lebenserwartung diverser Tiere (Experimente mit
Wrmern und Sugern).
Neurodegenerative Krankheiten treten im
Alter hufiger auf Bei den neurodegenerativen
Krankheiten sind meist verschiedene Gene mutiert:
Den Proteinfehlfaltungskrankheiten wie der Alzheimer- und der Parkinson-Krankheit liegt die Aggregation bestimmter Proteine zu Fibrillen und Plaques zugrunde, deren Ursache bislang unbekannt ist
(Abschn.3.8). Die aggregierten Proteine fhren
zu Neuronenverlust in bestimmten Gehirnarealen.
Die Huntington-Krankheit ist eine Polyglutaminkrankheit, bei der eine Region mit repetierten
Glutamincodons im Gen des Proteins Huntingtin
verlngert ist (CAG repeats). Poly(Glu)-Huntingtin
lagert sich amyloidhnlich im Gehirn ab, Krmpfe
(Veitstanz) und progressive Demenz sind die
Folgen. Bei der amyotrophen Lateralsklerose degenerieren Vorderhorn-Motoneuronen, in einem
Teil der Flle aufgrund der Fehlfaltung bestimmter
Proteine.
Mitochondriale Sirtuine reaktivieren gealterte Stammzellen des Bluts Stammzellen zur
Blutbildung altern durch oxidativen Stress und

verlieren dadurch ihre Teilungsfhigkeit. Proteine
aus der Familie der Sirtuine, welche Histondeacetylase-Aktivitt zeigen, wirken dieser altersassoziierten Degeneration entgegen. Verschiedene
Sirtuine kommen in den Mitochondrien vor und
werden bei reduzierter Zufuhr von Kalorien induziert. Unter Laborbedingungen wird dabei eine
Verlngerung der Lebenserwartung der Versuchs
tiere festgestellt.
Die Aktivitt der Mitochondrien der Darmzellen scheint ebenfalls wichtig fr die Langlebigkeit
Das Produkt des Gens PGC-1, ein Transkriptions-
faktor, aktiviert den mitochondrialen Stoffwechsel

bei Drosophila. Falls das Gen im Darm der Fruchtfliegen berexprimiert wird, verlngert sich die Lebensdauer der Tiere um bis zu 50%. berexpression
des Gens in anderen Geweben verleiht den Fliegen
jedoch keine zustzliche Lebensdauer.
36.4 Systembiologie
Die Systembiologie fasst Resultate verschiedener

analytischer Techniken zusammen mit dem Ziel,
die Vernetzungen innerhalb eines Organismus zu
erkennen. Die mittels Hochdurchsatztechniken
(Omik-Techniken; Kap.40) erhaltenen Daten
werden miteinander verrechnet, um zu mglichst
umfassenden Modellen zu kommen (.Tab.36.2).
36
473
36.4Systembiologie
Die Ergebnisse verschiedener Hochdurchsatzverfahren werden mit aufwndigen Computermodellen unter Bercksichtigung mglicher
gegenseitiger Beeinflussung interpretiert Hoch-
.. Tab.36.2Systembiologiea
Zelle/Gewebe/Organ
durchsatzverfahren wie die Chiptechnologie oder

das schnelle Bestimmen der DNA-Sequenzen ganzer Genome haben zahlreiche vielversprechende
Anstze zum Erreichen bestimmter Ziele ergeben
(neue Medikamente und Impfungen, qualitativ verbesserte Kulturpflanzen usw.). Die praktische Erfahrung zeigt jedoch, dass die berwiegende Mehrzahl
der als aussichtsreich eingeschtzten Entwicklungsstrategien klglich scheitert, falls der Komplexitt
der hochvernetzten Organismen nicht gengend
Rechnung getragen wird. Insbesondere sind Strukturdaten oft nicht mit Informationen ber Transport, Lokalisation, regulatorische und metabolische
Vorgnge verknpft: Unzulnglichkeiten, welche die
systembiologische Betrachtungsweise nun zu korrigieren versucht.
Immer mehr Biomarker werden identifiziert
Biomarker sind Molekle, deren Konzentrationen
DNA-Sequenz
DNA-Modifikation
Chromatinstruktur
Genomik
mRNA und
nichtcodierende RNAs
Transkriptomik
Protein
Proteomik
Metabolomik
Protein-ProteinWechselwirkung
Posttranslationale Proteinmodifikationen
3D-Struktur von Proteinen
Medikamentse Therapien werden den Resultaten der verfeinerten Diagnostik angepasst Die
Resultate systembiologischer Forschung drften zu

neuen Anstzen in der Medizin wie der personalisierten Therapie von Patienten mit Symptomen
oder Krankheiten mit heterogenen Ursachen (z.B.
Tumoren) fhren. Wichtig ist auch das Erfassen
der individuellen Reaktion auf eine medikamentse
Therapie, einschlielich der Verstoffwechselung der
Medikamente, welche deren Aktivierung oder Desaktivierung zur Folge haben kann (Abschn.31.2);
prdiktive Pharmakologie erlaubt die Optimierung
der medikamentsen Behandlung eines bestimmten Patienten. Zum Beispiel werden heute Brustkrebs-Patientinnen durch Tumorbiopsien auf die
berexpression des HER2/neu Gens berprft, da
diese Form von Brustkrebs mit Herceptin, einem Antikrper gegen den HER2/neu Rezeptor, behandelt
werden kann. Auch der Prdisposition zur Krebsbildung wird vermehrt Aufmerksamkeit geschenkt:
Rund 40000Genomsequenzen von Krebspatienten
und Gesunden wurden im Jahr2014 bestimmt und
verglichen. Die Analyse der Atemluft mittels Gas
chromatografie und Massenspektrometrie ergibt eine
Art Fingerabdruck des Atems und hat Potenzial als
nichtinvasive diagnostische Methode.
Systembiologie
Metaboliten
Bioinformatik
Modelle
Simulationen
a
Integrierendes Vorgehen zur Erforschung der Vernetzungen
Indizien fr bestimmte Funktionszustnde sind. Die

Kenntnis der Biomarker in Individuen liefert eine
Grundlage zur personalisierten Therapie bzw. einer
adquaten Ernhrung. Beispielsweise zeichnen sich
gewisse Krankheiten wie Diabetes mellitus durch
besondere Stoffwechselmuster aus. Als Biomarker
dienen z.B. Metaboliten und Enzyme fr Stoffwechselkrankheiten, Antikrper gegen Viren und Bakterien fr Infektionskrankheiten, Autoantikrper fr
Autoimmunkrankheiten, miRNA und Mutationen
des Tumorsuppressors p53 fr Tumoren. Bei der
Suche nach Biomarkern fr gesundes Altern fielen gewisse Protein-Protein-Wechselwirkungen im
Chromatin auf, sowie Biomarker fr T-Zellaktivierung und tiefen Blutdruck. Die Methylierung der
mitochondrialen DNA wird ebenfalls als Biomarker
fr Krankheiten und Alter in Betracht gezogen.
Systembiologie vermindert den Einsatz von
Labortieren Zum Beispiel ist ein Computermo-
dell mit allen Daten zur Physiologie der Ratte (The
474
1
2
3
virtual physiological rat) in Entwicklung und soll die

Funktion des kardiovaskulren Systems der Tiere
mit der Kenntnis ihrer genetischen Varianten insbesondere von Stoffwechsel- und Transportvorgngen
verbinden, um allfllige Zusammenhnge zu identifizieren.
36.5
Die Synthetische Biologie befasst sich mit dem de

novo Design und der Synthese nutzbringender Bio
systeme wie Viren, Stoffwechselwege oder Zellen,
welche in der Natur nicht vorkommen.
6
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20
Synthetische Biologie
Synthetische Plasmide und Viren sind die Vorreiter der synthetischen Biologie Optimierte syn-
thetische Gene werden routinemig in Plasmide

eingebaut, da sie den natrlichen Genen bei der
Expression in fremden Zellen oft berlegen sind.
In einem nchsten Schritt sind die Gene fr die Expression funktioneller Stoffwechselwege in Wirtszellen eingebracht worden und synthetische Viren
wie das Poliovirus, Grippeviren, Retroviren sowie
Bakteriophagen gebaut worden. Synthetische Viren
sind unter Umstnden als Vakzinen oder zum Studium der pathogenen viralen Elemente geeignet.
Durch Genmanipulation optimierte Organismen (Genetically modified organisms, GMO) werden
immer hufiger verwendet Der heutige Bedarf
an Insulin knnte mit Schlachttieren nicht mehr

gedeckt werden. Eine Liste in der Medizin verwendeter gentechnisch hergestellter Proteine und
Peptide gibt .Tab.39.3. Gentechnisch vernderte
Organismen wie transgene Mikroorganismen, Drosophilafliegen oder Muse werden auch in der experimentellen Forschung hufig verwendet (Abschn.39.12).
Vielfltige Entwicklungen und Anwendungen
der Gentechnik sind in der Landwirtschaft im Gang.
Weltweit sind gegenwrtig etwa 9% der Agrarflche mit transgenen Nutzpflanzen bebaut. Besonders
hufig werden gegen Pflanzenschutzmittel tolerante
oder Insektizid produzierende Varianten eingesetzt.
Ein neu eingefhrtes vollsynthetisches Genom ndert den Phnotyp des Bakteriums Das
Genom von etwas ber 106bp eines Bakteriums der

Spezies Mycoplasma mycoides wurde synthetisiert
und in ein Bakterium der Spezies Mycoplasma capri-
colum eingefhrt. Nach dem gezielten Abbau des

ursprnglichen Genoms der Wirtszelle verwandelte
sich deren Phnotyp zu demjenigen der Spezies mycoides. Als erstes eukaryontisches Chromosom ist
ein kleineres Hefechromosom mit 270000bp synthetisiert worden. Weitere Entwicklungen zielen darauf ab, Zellen mit besonderen Stoffwechseleigenschaften zu bauen, die beispielsweise mit Hilfe von
Sonnenlicht CO2 assimilieren und speicherund
transportfhige Energietrger wie Ethanol herstellen.
Erste Schritte zur knstlichen Erweiterung des
genetischen Codes In aufwndigen Versuchen ist
es erstmals gelungen, ein Basenpaar, welches nicht

in der Natur vorkommt, in bakterielle DNA einzufhren und in vivo zu replizieren. Damit ist gezeigt,
dass die Erweiterung des genetischen Codes auf
dem Niveau der DNA mglich ist. Falls es gelnge,
eine dem neuen Code und Aminosurederivat entsprechende Transkription bzw. Translation in Gang
zu bringen, wre die in-vivo-Biosynthese neuartiger
Polypeptide mit nicht in der Natur vorkommenden
Aminosurevarianten mglich.
36.6
Genomik, Proteomik,
Transkriptomik, Interaktomik,
Metabolomik und Mikrobiomik
Globale Analysen fhren zur Entdeckung biologischer Netzwerke Die klassische biochemische
Analyse schlsselt beispielsweise einen Stoffwechselweg Schritt fr Schritt auf und untersucht dessen regulatorischen Aspekte durch Beobachtung
der Wirkung von Induktoren oder allosterischen
Effektoren auf einzelne Enzyme. Hochdurchsatztechniken hingegen erlauben eine globale Analyse,
z.B. lsst sich mittels Chiptechnik die Wirkung eines bestimmten Signals auf die Expression smtlicher Genprodukte des Systems erfassen. Dadurch
lassen sich unbekannte und unerwartete Effekte
finden. Zusammenhnge zwischen verschiedenen
Signalbermittlungsketten treten zutage und knnen experimentell verifiziert werden.
Hochdurchsatzanalysen machen Omiks
mglich Die Omik-Gebiete der Biochemie und
Molekularbiologie haben zum Ziel, die Gesamtheit der Biomolekle zu charakterisieren und zu
475
36.6 Genomik, Proteomik, Transkriptomik, Interaktomik, Metabolomik und Mikrobiomik
quantifizieren. Das Erfassen vollstndiger Muster

zellulrer Antworten auf vernderte Bedingungen
ist einer der bedeutendsten Fortschritte, welche
dank der neuen Hochdurchsatztechniken mglich
geworden sind.
Die Genomik vergleicht die Genome verschiedener Organismen und entdeckt dabei Homologien, die evolutionre Zusammenhnge klren .
Der Vergleich individueller menschlicher Genome
zusammen mit epidemiologischen Daten identifizieren genetische Ursachen oder Prdispositionen
fr gewisse Krankheiten. Der Begriff Genomik lsst
sich auf die gesamte Biosphre anwenden; so gibt es
beispielsweise die Bakteriophagen-Genomik oder
die menschliche Genomik. Unter Metagenomik
wird die summarische Genomik heterogener Proben mit vielen Spezies bezeichnet, z.B. die Bakterien in einer Bodenprobe. Oft wird dabei nur ein
bestimmtes Molekl wie die 16S rRNA sequenziert
und so Aufschluss ber die Artenvielfalt in der
Probe gewonnen (Umwelt- oder Oekogenomik).
Ausgehend von der Nucleotidsequenz des Genoms lsst sich das Proteom des gesamten Organismus definieren. Die Proteomik untersucht die
Proteinausstattung verschiedener Zelltypen und
Gewebe sowie deren Variation unter verschiedenen
Bedingungen (Geschlecht, Alter, Gesundheitszustand, Ernhrung, krperliche Bettigung, Krankheit, Medikamente).
Die Transkriptomik hat ein hnliches Ziel,
sie untersucht die Gesamtheit der RNA-Molekle
(mRNA, rRNA, tRNA und andere nichtcodierende
RNA), die von verschiedenen Zelltypen unter verschiedenen Bedingungen synthetisiert werden.
Das Interaktom kartiert die Wechselwirkungen zwischen smtlichen Proteinen einer Zelle.
Dazu werden verschiedene Kriterien fr die
Wechselwirkung, d.h. Komplexbildung (Two-hybrid-Technik; Abschn.40.5), zwischen Proteinen
gewichtet und auch speziesbergreifende Information zu funktionell entsprechenden (orthologen)
Proteinen bercksichtigt. Die Kombination der
Information aus Interaktom-Datenbanken mit
Information aus genetischen Datenbanken (z.B.
ber SNPs) und Stoffwechselinformationen (Metabolom) verbessert die Treffsicherheit von Voraussagen, z.B. die Identifizierung von Zielproteinen
fr neue Medikamente.
36
Die Metabolomik untersucht die Gesamtheit

der Metaboliten und der Stoffwechselreaktionen
unter verschiedenen Bedingungen.
Das Mikrobiom umfasst alle Mikroorganismen,
die einen hheren eukaryontischen Organismus besiedeln. Die Flora von Darm, Haut, sowie Nasenrachenraum und Urogenitaltrakt des Menschen weist
schtzungsweise zehnmal mehr Zellen (Bakterien
und Archa) auf als dessen eigener Krper und hat
ein Gewicht von 0.51,5kg. Das Mikrobiom scheint
eine Rolle zu spielen bei der Entwicklung gewisser
Autoimmunkrankheiten wie Diabetes Typ1. Die
in Mikrobiomen vorkommenden Spezies werden
durch Sequenzierung der Gesamt-DNA bestimmt;
zwischen den einzelnen Trgerindividuen zeigen
sich klare Unterschiede, deren Bedeutung noch
weitgehend unklar ist.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517255-0
36.1 Zelldifferenzierung und Ontogenese
36.2 Regeneration von Organen und Extremitten
36.3 Alterungsvorgnge
36.4 Systembiologie
36.5 Synthetische Biologie
36.6 Genomik, Proteomik, Transkriptomik, Interaktomik, Metabolomik und Mikrobiomik
477
Methoden
Kapitel 37
Trennverfahren und allgemeine

Analysemethoden 479
Kapitel 38
Proteinanalytik493
Kapitel 39
Gentechnik501
Kapitel 40
Genomik, Proteomik, Bioinformatik,

Datenbanken519
VI
479
37
Trennverfahren und
allgemeine Analysemethoden
37.1
Zentrifugation480
37.2
Chromatographie482
37.3
Elektrophorese484
37.4
Spektroskopie486
37.5
Massenspektrometrie489
37.6
Isotopenmarkierung, Radionuclide489
37.7
Monoklonale Antikrper490
37.8
pH-Puffer490

480
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20
Kapitel 37 Trennverfahren und allgemeine Analysemethoden
Zur Analyse biochemischer Vorgnge mssen oft

Zellbestandteile voneinander getrennt werden. Die
Biomolekle unterscheiden sich in Struktur, Gre,
Ladung und Affinitt zu Bindungspartnern (Liganden) und ermglichen damit ihre Auftrennung.
Ein besonderes Problem besteht darin, dass viele
Biomolekle Polymere aus einer sehr beschrnkten Anzahl von Bausteinen sind: Zwei DNA-Stcke
von 30bp, deren Sequenzen sich in einem einzigen
Nucleotid unterscheiden, sind schwierig voneinander zu trennen. Zwei Molekle von gleicher Gre
und Ladung knnen sich sogar nur in der Sequenz
der Bausteine unterscheiden. Auch die niedrige
Konzentration von Biomoleklen kann ein Problem darstellen: Meist kommen nur eine oder zwei
Kopien eines DNA-Molekls in einer Zelle vor. Erst
in den letzten Jahrzehnten sind effiziente Amplifizierungs- und Trennmethoden fr Makromolekle
entwickelt worden. Dieses Kapitel stellt die wichtigsten Trenn- und allgemeinen Analyseverfahren
vor.
37.1 Zentrifugation
Masse, Dichte und Form sowie das Zentrifugationsmedium bestimmen die Sedimentationseigenschaften von Moleklen im Zentrifugalfeld
Die Umdrehungszahlen von Zentrifugen variieren zwischen einigen hundert bis etwas ber
100 000min1. In den hohen Beschleunigungsfeldern von Ultrazentrifugen, deren Rotoren zur Vermeidung der Wrmeentwicklung durch Luftreibung
im Hochvakuum drehen, werden sogar gelste Makromolekle zur Sedimentation gebracht. Die Sedimentationsgeschwindigkeit der Molekle und Partikel hngt von deren Masse und Form, sowie vom
Dichteunterschied zwischen Partikel und Zentrifugationsmedium und der Zentrifugalbeschleunigung
ab. Bei gleicher Dichte von Medium und Partikel
ergibt sich weder Sedimentation noch Auftrieb, d.h.
das Zentrifugationsgut sammelt sich in der Zone
gleicher Dichte an.
Die Sedimentationseigenschaften von Partikeln lassen sich wie folgt berechnen: Die Erd-
beschleunigung g betrgt 981cm s2 und wird als

Einheit der relativen Zentrifugalbeschleunigung
(RZB) verwendet. Die RZB wird als Vielfaches von
g angegeben, z.B. RZB=10000g. Bei Zentrifugation mit konstanter Winkelgeschwindigkeit

(=2rpm/60; rpm, Rotationen pro min) erfhrt
ein Teilchen im Abstand r von der Drehachse eine
Zentrifugalbeschleunigung B=2r (in cm s2) oder
eine RZB=2r/981g=1,118105rrpm2g. Die
Sedimentationsgeschwindigkeit eines kugelfrmigen Partikels in einer Flssigkeit berechnet sich
nach Svedberg als =d2 (pm)RZB/18, wobei
die Sedimentationsgeschwindigkeit, d den Teilchendurchmesser, p und m die Dichte des Teilchens
bzw. des Mediums und die Viskositt des Mediums bedeuten. Der Sedimentationskoeffizient s,
die Sedimentationsgeschwindigkeit pro Einheit der
Zentrifugalbeschleunigung, wird in Svedberg-Einheiten S angegeben, s=/2r (1S=1013sec). Der
Sedimentationskoeffizient grerer biologischer
Molekle liegt im Bereich einiger Svedberg-Einheiten (ribosomale RNAs werden mit ihrem Sedimentationskoeffizienten bezeichnet, z.B. 18S-rRNA).
Bei der differenziellen Zentrifugation werden
Partikel nach ihrer Gre getrennt Zur Sedimen-
tierung von Partikeln aus einer Suspension wird

die Suspension in einem Rhrchen zentrifugiert.
Ein Teil des Zentrifugierguts setzt sich am Boden
des Rhrchens ab und bildet das Sediment (Pellet); der berstand (Supernatant) wird abgegossen
und nochmals bei hherer Drehzahl zentrifugiert
(.Abb.13.1). Dieses Verfahren ist bekannt als differenzielle Zentrifugation . Zur Isolierung von
Zellorganellen oder groer Partikel wie Polysomen
verwendet man Medien mit geringerer Dichte als
die der Organellen oder Partikel. Zellkerne mit viel
DNA und RNA sedimentieren unter diesen Bedingungen rascher als Mitochondrien, Membranvesikel
und Polysomen. Eine hhere Auflsung wird durch
die Zonenzentrifugation erreicht . Eine Probe
mit kleinem Volumen wird als schmale Zone auf ein
Medium mit hherer Dichte aufgetragen, das meist
als Dichtegradient vorgelegt wird und den Hauptteil
des Zentrifugenrhrchens fllt. Solche vor der Zentrifugation hergestellte Gradienten mit zunehmender Dichte verringern die Durchmischung der Flssigkeitssule durch Konvektionsstrmungen und
verbessern dadurch die Trennschrfe. Als Medien
fr die Dichtegradienten-Zentrifugation werden Zuckerlsungen, v.a. Saccharose (Sucrose) oder,
um in besonderen Fllen eine zu hohe Osmolaritt
481
37.1Zentrifugation
zu vermeiden, Lsungen von Polymeren (Dextran

oder Ficoll) verwendet. Bei diesen Gradienten wie
auch bei der differenziellen Zentrifugation erfolgt
die Trennung aufgrund der unterschiedlichen Sedimentationsgeschwindigkeiten der Partikel. Beide
Zentrifugationsarten werden entweder in Festwinkel- oder in Ausschwingrotoren durchgefhrt
(.Abb.37.1a und b).
Plasmid-DNA und andere Partikel lassen sich
durch Dichtegleichgewichtszentrifugation in
CsCl-Gradienten reinigen Das Zentrifugationsgut
wird bei dieser Technik aufgrund von Dichteunterschieden seiner Komponenten aufgetrennt. Es wird,
meist in Vertikalrotoren (.Abb.37.1c), so lange
zentrifugiert, bis sich ein Dichtegradient des CsCl
gebildet hat und sich die einzelnen Komponenten
am Ort ihrer Dichte eingeschichtet haben. Mit dieser
Methode lsst sich z.B. hochreine Plasmid-DNA gewinnen. Lineare und einzelstrngige DNA-Molekle
sammeln sich in anderen Regionen des Gradienten
an als die superhelicale DNA des Plasmids. Die besonders dichte RNA wird im Sediment angereichert.
Dichtegradienten dienen auch zur Isolierung der
verschiedenen Zellorganellen (.Tab.37.1).
37
Die Masse von Makromoleklen kann durch

analytische Ultrazentrifugation ermittelt werden
In analytischen Ultrazentrifugen erlauben Glasfenster im Rotor die Beobachtung des Zentrifugationsgutes bei laufender Zentrifuge. Zwei Verfahren zur Bestimmung der Moleklmasse stehen zur
Verfgung:
Bei der Sedimentations-Diffusions-Gleichgewichtszentrifugation wird das Material
so lange zentrifugiert, bis sich in der Probenkammer ein Gleichgewicht zwischen
Zentrifugalbewegung und entgegenwirkender
Diffusion eingestellt hat. Dieser Gradient wird
ausgemessen und erlaubt, die Moleklmasse
zu berechnen.
Die analytische Ultrazentrifuge kann auch zur
Sedimentationsanalyse verwendet werden.
Die Probe wird whrend der Sedimentation
beobachtet und aus der gemessenen Sedimentationsgeschwindigkeit der Sedimentationskoeffizient s berechnet. Aus diesem und dem
separat bestimmten Diffusionskoeffizienten D
lsst sich die Moleklmasse nach der Svedberg-Gleichung berechnen:
c
.. Abb.37.1Rotortypen. aIn Festwinkelrotoren bleibt
die geneigte Lage der Zentrifugenrhrchen whrend der
Zentrifugation unverndert; bbei Ausschwingrotoren ndert
sich der Lagewinkel der Zentrifugenrhrchen whrend der
Zentrifugation. cIn Vertikalrotoren, die sich fr die Dichtegleichgewichtszentrifugation eignen, bleiben die Rhrchen
whrend des Laufs senkrecht stehen. In diesem Fall sind die
Rhrchen vollstndig gefllt und oben versiegelt. Die Proben
lagern sich aufgrund der Dichteunterschiede im wechselnden
Beschleunigungsfeld (vertikal-horizontal-vertikal) um. Der
Auftragebereich der Probe und die Zonen mit den getrennten
Moleklen sind blau markiert
Mr D
RTs
;
D.1 /
R, allgemeine Gaskonstante; D, Diffusionskoeffizient; T, absolute Temperatur; , Dichte des Mediums

bei 20C; , partielles spezifisches Volumen des Molekls (Volumen der Substanz pro g in verdnnter
Lsung, bei Proteinen etwa 0,73cm3g1; Reziprokwert der Dichte!). Die bei verschiedenen Protein-
482
1
2
.. Tab.37.1 Sedimentationseigenschaften biologischer Partikel. Die unterschiedliche Gre oder Dichte der verschiedenen Zellorganellen und Makromolekle lsst sich zu deren Trennung nutzen. Die Sedimentationsanalyse ergibt den
grenabhngigen Sedimentationskoeffizienten (in Svedberg-Einheiten S angegeben), die Dichte der Teilchen bestimmt
deren Position im Dichtegradienten bei der Dichtegleichgewichtszentrifugation. Zur Technik der Isolierung von Zellorganellen und Membranvesikeln mittels differenzieller Zentrifugation s. auch Abb.13.1
Durchmesser (m)
Sedimentationskoeffizient (S)
Dichte (g/mL)
Zellen
150
107108
1,051,2
Kerne
312
10 10
>1,3
Kernmembran
112
1,181,22
Plasmamembran
320
1,151,18
Golgi-Apparat
Mitochondrien
Lysosomen
8
9
4
5
6
7
10
1,121,16
0,54
1 10 5 10
1,171,21
0,50,8
4 1032 104
1,171,21
Peroxisomen
0,50,8
4 103
1,191,4
Glatte ER-Vesikel
0,050,3
103
1,061,23
Ribosomen
0,020,03
7080
1,551,58
Lsliche Proteine
0,0020,01
125
1,21,7
DNA
1,7
RNA
2,0
11
12
13
14
15
16
37
18
19
20
konzentrationen gemessenen Werte fr s und D

werden auf unendliche Verdnnung des gelsten
Stoffes in Wasser bei 20C extrapoliert.
37.2 Chromatographie
Die Chromatographie trennt Molekle aufgrund
ihrer unterschiedlichen Verteilung auf eine mobile und eine stationre Phase Im Gleichge-
wichtszustand verteilt sich ein Molekl auf zwei

verschiedene Phasen nach Magabe seiner relativen Affinitt fr die beiden Phasen. Das Ausschtteln organischer Substanzen aus wsseriger Phase
in ein mit Wasser nicht mischbares organisches Lsungsmittel ist ein einfaches, hufig verwendetes
Trennverfahren, das auf dieser Grundlage beruht.
In der Chromatographie wird die Verteilung des
Trennguts auf eine stationre Phase und eine daran stetig vorbeiflieende mobile Phase ausgentzt.
Eine Substanz, welche sich nur in der stationren
Phase aufhalten kann, wird nicht mobilisiert und
bleibt am Start der Chromatographie zurck. Im

anderen Extremfall wandert eine Substanz, welche sich nur in der mobilen Phase aufhlt, mit der
Front der mobilen Phase. Die beste Trennleistung
wird bei langsamem Fluss der mobilen Phase erreicht, so dass sich das Verteilungsgleichgewicht
fortwhrend einstellen kann. Eine ganze Reihe
mglicher Wechselwirkungen mit einer stationren Phase wird zur Trennung von Moleklen genutzt (.Tab.37.2).
Bei der Gelfiltration (Grenausschluss-Chromatographie; Size-exclusion chromatography, SEC)
besteht die stationre Phase aus kleinen schwammartigen Polysaccharid (Gel-)Partikeln in einer
Chromatographiesule. Die Molekle der Probe
werden nach ihrer Gre getrennt (.Abb.37.2).
483
37.2Chromatographie
37
.. Tab.37.2 Molekltrennung mittels Chromatographie. Die unterschiedliche Verteilung der Molekle auf eine stationre und eine mobile Phase erlaubt deren Trennung
Molekleigenschaft
Chromatographietyp
Stationre Phase
Mobile Phase
Moleklgre und Form
Gelfiltration, Ausschluss groer

Molekle aus porsen Gelpartikeln (Size exclusion)
Puffer innerhalb Gelpartikel
Puffer auerhalb Gelpartikel
Ladung
Ionenaustausch
Geladene Gruppen auf

inertem Trger
Puffer
Lslichkeit
Verteilung, z.B. bei Dnnschichtchromatographie mit

Cellulose oder Kieselgur (SiO2)
Wsserig (Hydrathlle der

Partikel in Trennschicht)
Apolare organische
Lsungsmittel
Bindung an spezifische
Liganden
Affinitt
Spezifischer Ligand auf

inertem Trger
Puffer
Bindung an hydrophobe
Matrix
Hydrophobe Wechselwirkung
(Hydrophobic interaction chromatography HIC)
Hydrophob
Puffer-Salz-Lsung
Bindung an hydrophobe
Matrix
Reversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography

RP-HPLC
Hydrophob
Laufmittel mit zunehmend apolarem

Gradienten
Komplexierung (Protein
mit His-Tag)
Metallchelate (Immobilized
metal ion affinity chromatography IMAC)
Metall an Matrixchelat
Puffer mit pH45 oder

mit Komplexbildner
Elutionsvolumen
Das stoffspezifische Volumen, welches durch die
Chromatografiesule fliet, bis das herausflieende Eluat die halbmaximale Konzentration
des gegebenen Stoffes erreicht. Mit Gelfiltration
(SEC) lsst sich nach Kalibrierung der Sule mit
Proteinen bekannter Masse die Moleklmasse
eines Proteins durch Vergleich seines Elutionsvolumens mit Standards bestimmen.
Die Ionenaustauschchromatographie trennt Molekle aufgrund ihrer unterschiedlichen Bindungsstrke an eine mit elektrischen Ladungen besetzte
stationre Phase (Gelpartikel mit positiv oder negativ geladenen Gruppen: Anionen- bzw. Kationen-Austauschchromatographie).
Bei der Gaschromatographie (GC) ist die Probe
gasfrmig oder wird verdampft und in der mobilen Gasphase (N2 , He oder Ar) ber eine stationre
Phase (meist Flssigkeitsfilm auf geheiztem inertem
Trger) geleitet.
Die Affinittschromatographie trennt Molekle aufgrund ihrer Bindung an spezifische stationre Liganden (z.B. Antigen-Antikrper-Wechselwirkung auf Gelpartikeln mit kovalent gebundenen
Antikrpern). Gentechnisch hergestellte Proteine
(Abschn.39.9) mit einem eingebauten Histidin-Tag (610Histidinreste; engl. tag, Anhnger)
binden prferenziell an mit gewissen Metallionen
komplexierte Gelpartikel und knnen durch Chelatbildner wie Imidazol oder eine pH-nderung
eluiert werden (Immobilized-Metal Affinity Chromatography, IMAC).
In spezialisierten Gerten kann jeder Typ der
Flssigchromatographie durch Verwendung feinkrniger Trgermaterialien und erhhten Druck
verbessert und beschleunigt werden (FPLC, Fast
Protein Liquid Chromatography bei einigen Bar;
HPLC, High Performance/Pressure Liquid Chromatography bei>10bar). Das hervorragende
Auflsungsvermgen dieser Verfahren beruht

auf der Kleinheit und Uniformitt der meist kugelfrmigen Partikel der stationren Phase. Eine
stationre Phase dieser Art erhht jedoch den
484
37.3 Elektrophorese
In einem elektrischen Spannungsfeld bewegen

sich die Molekle entsprechend ihrer Ladung,
Gre und Form Bei einer Elektrophorese be-
2
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8
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10
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16
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20
b
.. Abb.37.2Gelfiltration. a Eine Gelfiltrationssule ist vereinfacht dargestellt. Groe Molekle (Substanz A) knnen nicht
in die Gelpartikel eindringen und verteilen sich ausschlielich
im ueren Volumen (outer volume) Vo; kleinere Molekle
(B und C) dringen in die Gelpartikel ein und verteilen sich
je nach Gre zustzlich auf das innere Volumen Vi der
Gelpartikel, wobei der jeweils zugngliche Teil von Vi von der
Moleklgre abhngt. b Das Elutionsprofil einer Gelfiltration. Die Gelfiltration trennt Substanzen aufgrund von Unterschieden im Verteilungskoeffizienten (Distribution coefficient)
Kd (0Kd1), d.h. des Anteils des inneren Volumens, welcher
der Substanz zugnglich ist: Elutionsvolumen Ve=Vo+KdVi;
Beispiel A, Kd=0; B, 0<Kd>1; C, Kd=1
hydrodynamischen Widerstand und bedingt den

erhhten Druck.
Chromatographien werden in verschiedenen
Formaten durchgefhrt: Papierchromatographie,
Dnnschichtchromatographie, Sulenchromatographie, Kapillarchromatographie und Chromatographie auf Mikrochips (Microfluidics). Gengt die mit
einem einzelnen Verfahren erreichbare Auflsung
nicht, knnen zwei Verfahren (zweidimensionale
Chromatographie) oder auch mehrere Verfahren
(multidimensionale Chromatographie) oft auch
unter Einbezug von Elektrophorese miteinander
kombiniert werden.
wegen sich geladene Teilchen in einem elektrischen

Feld, bei positiver Nettoladung zur Kathode (- Pol),
bei negativer Ladung zur Anode (+Pol). Bei gegebenem Protein bestimmen dessen isoelektrischer
Punkt und der pH-Wert des Puffers Vorzeichen
und Gre der Ladung. Die elektrophoretische Beweglichkeit hngt zudem von der Gre und Form
des Teilchens sowie vom Medium ab. Das Trennverfahren wird entweder in Lsung (trgerfreie
Elektrophorese, gewisse Typen der Kapillarelektrophorese) oder in einer groporigen Matrix (Gelelektrophorese, Membranelektrophorese) durchgefhrt.
Die hohe Auflsung der Gelelektrophorese erlaubt
die Trennung hunderter verschiedener Proteine
oder Nucleinsuren in einem Lauf. DNA-Molekle
besitzen ausnahmslos eine Ladung pro Nucleotid
und eignen sich deshalb bestens zur elektrophoretischen Trennung nach Gre. Proteine bilden
mit dem denaturierenden Detergens Natriumlaurylsulfat (SDS, Sodium dodecyl sulfate) Komplexe
(ein SDS-Anion pro zwei Aminosurereste), deren
Ladung/Masse-Verhltnis fr die meisten Proteine
annhernd gleich ist. Die SDS-Gelelektrophorese
erlaubt daher, Proteine nach ihrer Gre aufzutrennen (.Abb.37.3).
Die Wanderungsgeschwindigkeit der Teilchen ist proportional zur angelegten elektrischen
Feldstrke. Die bei der Elektrophorese infolge des
Stromflusses entstehende Wrme beschrnkt die
anwendbaren Feldstrken auf <300Vcm1. Die
elektrophoretischen Analyseverfahren werden in
zunehmendem Mae miniaturisiert (Mikrochiptechnik) und dadurch deutlich schneller und empfindlicher.
P=qU
Die elektrische Feldstrke U (in Vm1)
bestimmt die Kraft P (Newton), die auf ein
Teilchen mit der Ladung q (Coulomb) wirkt.
Die isoelektrische Fokussierung von Proteinen

erreicht hchste Trennschrfen Grundlage fr
485
37.3Elektrophorese
37
.. Abb.37.3 Zwei hufig zur Trennung von Makromoleklen verwendete Typen der Gelelektrophorese. aSDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) von Proteinen.
Das ionische Detergens Natriumlaurylsulfat (Sodium dodecyl
sulfate SDS) denaturiert Proteine, wobei das Dodecylsulfat-Anion in einem annhernd stchiometrischem Verhltnis
ans Protein bindet (1,4g SDS pro g Protein). Bei konstantem
Ladungs-Massenverhltnis bestimmt die Moleklgre die
Wanderungsgeschwindigkeit im Gel; die Laufdistanz verhlt
sich umgekehrt proportional zum Logarithmus der Moleklmasse. Durch Vergleich mit einem Standardgemisch von
Proteinen bekannter Moleklmasse kann die Moleklmasse
eines Proteins ermittelt werden. Das Polyacrylamidgel wird
als Lsung von Acrylamid und dem Quervernetzungsreagens
Bisacrylamid in Puffer zwischen zwei Glasplatten gegossen
und polymerisiert einige Minuten nach der Zugabe eines Katalysators. Danach wird das Glasplattensandwich mit dem Gel
in eine Elektrophoreseapparatur montiert und Puffer in die
Elektrodentrge eingefllt. Den Probelsungen werden vor
dem Auftragen Saccharose oder Glycerol zugegeben, damit
sie eine gengend hohe Dichte aufweisen, um in die Probentaschen abzusinken. Nach Auftrennung der Proteingemische
der Proben durch das elektrische Feld (Gleichspannung!) wird
das Gel gefrbt. Im Lauf rechts ist ein Standardgemisch mit
Proteinen bekannter Moleklmasse aufgetragen. bHorizontales Submersgel (Submarine gel) aus Agarose zur Trennung von
DNA oder RNA. Das Gel liegt auf einem Elektrophoresetisch in
einer Pufferlsung
diese Methode ist ein pH-Gradient, der beispielsweise durch kovalenten Einbau verschiedener
Puffersubstanzen ins Trenngel hergestellt wird.
Ein bestimmtes Protein bewegt sich whrend der
Elektrophorese genau bis zu dem pH-Wert im Gradienten, welcher seinem isoelektrischen Punkt (pI)
entspricht und wo seine Nettoladung Null betrgt.
Sobald sich ein Protein von diesem Ort wegbewegt,
sei es durch Diffusion oder infolge von Konvektionsstrmungen, gert es in eine Zone mit einem
hheren oder tieferen pH-Wert, wo es durch Deprotonierung bzw. Protonierung erneut geladen
und zurckgetrieben wird: Die Proteine werden in

einer schmalen Zone fokussiert (.Abb.37.3a). Die
Kombination der nach pI trennenden isoelektrischen Fokussierung mit einer senkrecht dazu verlaufenden nach Gre trennenden SDS-Gelelektrophorese ermglicht die Auftrennung von einigen
tausend Proteinflecken auf einer einzigen Gelplatte.
Die zweidimensionale Gelelektrophorese ist wegen ihres hohen Auflsungsvermgens wichtig bei
Proteomanalysen (Abschn.40.4).
Polyacrylamid- und Agarose-Gele sind die

meistbenutzten Trgermaterialien fr Elektro-
486
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phoresen Polyacrylamid-Gele sind querver-
netzte Kunststoffgele, die mit variabler Porenweite

herstellbar sind (NB: Acrylamid ist neurotoxisch
und kanzerogen!). Sie sind optisch klar und erlauben, kleinste Mengen von Proteinen oder Nucleinsuren nachzuweisen. Die Gele werden meist
zwischen Glasplatten gegossen und vertikal zwischen zwei Pufferbecken mit Elektroden montiert
(.Abb.37.3a). Die hochauflsende Gelelektrophorese in Kapillaren ist insbesondere zur DNA-Sequenzierung nach Sanger ntzlich (Abschn.39.7).
Agarose ist ein Polysaccharid aus Meeresalgen.
Ein Agarose-Gel verflssigt sich bei erhhter Temperatur und erstarrt bei tieferer Temperatur wieder zu einem Gel. Die Porengre variiert je nach
Konzentration der Agarose. Meist liegt das Gel
horizontal auf einem Elektrophoresetisch in Puffer
eingetaucht (.Abb.37.3b). Agarose-Gele trennen
DNA- und RNA-Molekle von 0,1100kb Lnge.
Spezifische Frbungen machen Nucleinsuren und Proteine sichtbar Das Kation des Fluoreszenzfarbstoffs Ethidiumbromid (mutagen und
kanzerogen!) interkaliert zwischen die Basen doppelstrngiger DNA und RNA, wodurch seine orangefarbene, UV-anregbare Fluoreszenz markant verstrkt wird. Die Nachweisgrenze liegt in der Praxis
bei 1ng DNA.
37.4 Spektroskopie
Spektroskopie erfasst Wechselwirkung zwischen
Untersuchungsobjekt und elektromagnetischer
Strahlung Elektromagnetische Strahlung be-
stimmter Wellenlnge und Intensitt wird ins zu

untersuchende Objekt, in der Biochemie zumeist
eine Lsung, eingestrahlt. Die Lsung absorbiert
oder streut das Licht. In der Photometrie wird das
austretende Licht auf Intensitt und Wellenlnge
untersucht und mit der eintretenden Strahlung
verglichen. Strahlung einer bestimmten Energie E
(Frequenz bzw. Wellenlnge; E=h=h1) regt
Elektronen oder Moleklteile an, bei welchen der
Wechsel im Energieniveau der Energie der Strahlung entspricht. Daher hat jeder Stoff ein charakteristisches Absorptionsspektrum. Spektroskopische
Analysen werden sowohl im sichtbaren als auch in
unsichtbaren Bereichen des Spektrums durchgefhrt. Sie sprechen unterschiedliche Moleklteile
an und verlangen entsprechende Lichtquellen und
Detektionsgerte (.Tab.37.3).
Elektromagnetische Wellen bestehen aus einer
elektrischen und einer magnetischen Komponente,
deren Feldvektoren senkrecht zueinander und senkrecht zur Ausbreitungsrichtung stehen:
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Ethidium-Kation
Proteine werden meist durch Frbung mit Coomassie Brilliant Blue (frher zur Frbung von Blue jeans
verwendet) nachgewiesen. Die Nachweisgrenze liegt
hier im Bereich von 10ng. Sowohl fr die Nucleinsurefrbung als auch die Proteinfrbung stehen
noch empfindlichere Verfahren zur Verfgung,
z.B. eine Frbung, welche auf der Ausfllung von
Silberkomplexen beruht und bereits 0,1ng Protein
nachweist.
Bei normalem Licht oszillieren die elektrischen

und magnetischen Felder in allen Drehrichtungen
isotrop um die Ausbreitungsachse. Bei linear polarisiertem Licht liegen die Feldvektoren nur in je einer
Ebene. Bei zirkular polarisiertem Licht beschreiben
die Feldvektoren Schraubenbahnen entlang der
Ausbreitungsrichtung des Lichts.
Im Folgenden werden die drei in der Biochemie gebruchlichsten spektroskopischen Methoden
diskutiert: (1) Die Absorptionsspektrometrie misst
das vom Untersuchungsobjekt absorbierte Licht; (2)
in der Fluoreszenzspektrometrie wird das Objekt mit Licht einer bestimmten Wellenlnge angeregt und das bei einer hheren Wellenlnge wieder
ausgesandte (energiermere) Licht gemessen; (3) die
487
37.4Spektroskopie
37
.. Tab.37.3 Wellenlngenbereiche fr spektroskopische Analysen

Bereich
Wellenlnge
Anregung von
Anwendungen
Rntgen (X-ray)
0,01100nm
inneren Elektronen
Rntgenkristallografie
Ultraviolett (UV)
100400nm
ueren Elektronen und

delokalisierten Elektronen
UV-VIS Spektroskopie
Sichtbar (Visible, VIS)
400760nm
Infrarot (IR)
0,781000m
diversen Moleklschwingungen
Infrarotspektroskopie
Radiowellen
0,130cm
Elektronenspin
Elektronenspinresonanz
(ESR)
10cm10m
Kernspin
Nuklearmagnetische Resonanz (NMR)
Zirkulardichroismus-Spektrometrie misst die un-
terschiedliche Absorption von rechts- und links-polarisiertem Licht.
Lichtabsorption ist abhngig vom untersuchten Stoff, dessen Konzentration und der Schichtdicke Wird Licht einer bestimmten Wellenlnge
(monochromatisches Licht) durch eine Lsung
eines lichtabsorbierenden Stoffes gestrahlt, ist die

Intensitt des austretenden LichtsI niedriger als diejenige des eingestrahlten Lichts I0. Der QuotientI/
I0 wird als Durchlssigkeit D oder Transmittance T
bezeichnet und hngt von der Konzentration c des
lichtabsorbierenden Stoffs und der Schichtdicke d ab:
Molare Extinktionskoeffizienten
Die Werte gelten bei der als Subskript angegebenen Wellenlnge in nm, welche der Wellenlnge des jeweiligen Absorptionsmaximums
im nahen UV-Bereich entspricht.
ATP
260=15400M1cm1
NADH (fehlt bei NAD+)
340=6220M1cm1
Tryptophan
280=5550M1cm1
Chlorophyll a
428 =112000M1cm1
A D 10 log.I=I0 / D 10 logD D k c d;
Ist der Extinktionskoeffizient einer Substanz bekannt, kann deren Konzentration in einer Lsung
(ohne andere absorbierende Stoffe) durch Messung
der Absorption bestimmt werden. Enzymatische
Reaktionen knnen photometrisch verfolgt werden, falls sich Substrat und Produkt in ihren Absorptionsspektren unterscheiden. Diese Mglichkeit ist gegeben bei Reaktionen, an denen NADH
oder NADPH beteiligt sind, sowie bei Reaktionen,
welche mit einer solchen Reaktion gekoppelt werden knnen (Optischer Test nach Warburg); dabei
sind die Bedingungen so zu whlen, dass die zu
messende Reaktion geschwindigkeitsbestimmend
ist.
wobei die Konstante k als Absorptions- oder Extinktionskoeffizient bezeichnet wird. Wird c in mol/L
und d in cm angegeben, wird k zum molaren Absorptions-/Extinktionskoeffizienten , welcher der
(theoretischen) Absorption einer 1M Lsung des
Stoffes bei einer Schichtdicke von 1cm und der angegebenen Wellenlnge entspricht.
messungen sind bis 100fach empfindlicher als

photometrische Messungen. Proteine fluoreszieren
wegen ihres Gehalts an aromatischen Aminosureresten. Da die Nahumgebung eines Fluorophors die
Wellenlnge und die Intensitt der Fluoreszenz stark
beeinflusst, eignet sich die Fluoreszenz bei manchen
D D I=I0 D 10k cd
D wird oft in % angegeben: D % D I=I0 100:

Die gebruchliche Messgre fr photometrische
Messungen ist die Absorption A, die auch als Extinktion E oder Optische Dichte OD bezeichnet
wird. Die Absorption ist gem dem Beer-Lambert-Gesetz direkt proportional zur Konzentration
c und zur Schichtdicke d:
Messung der Fluoreszenz erlaubt sehr empfindlichen Nachweis vieler Stoffe Fluoreszenz-
488
.. Abb.37.4CD-Spektren
von Peptiden mit verschiedener Sekundrstruktur. Je nach
ihrer Aminosuresequenz
zeigen Peptide in Lsung
unterschiedliche Sekundrstrukturen oder liegen auch
als ungeordnete Molekle
(Zufallsknuel, Random
coil) vor. Die CD-Spektren
solcher Peptide sind deutlich
verschieden
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Proteinen als Indikator fr Konformationsnderungen; auch das Binden eines Liganden an ein Protein
kann u.U. fluorimetrisch erfasst werden.
Proteinfluoreszenz
Die Eigenfluoreszenz von Proteinen ist in
erster Linie auf deren Tryptophanreste zurckzufhren. Tryptophan wird im Bereich seiner
maximalen Absorption bei 280nm angeregt;
das Fluoreszenzlicht wird zwischen 300nm
und 350nm ausgesandt. Je polarer die Umgebung eines Tryptophanrests, umso hher ist
die Wellenlnge des emittierten Lichts.
Ein im UV- bis Blaubereich angeregtes Protein einer Quallenart, das Green fluorescent protein (GFP),
fluoresziert im Grnbereich. Der Fluorophor, ein
delokalisiertes -Elektronensystem, bildet sich
spontan durch Ringschluss, Dehydratation und
Oxidation innerhalb einer bestimmten SYG-Sequenz des Proteins. Ein gentechnisch hergestellter
Expressionsvektor fr ein Fusionsprotein mit GFP
liefert nach Transfektion in Zellen unter oxidativen
Bedingungen ein fluoreszenzmarkiertes Zielprotein.
In den Zellen kann das Protein mittels Fluoreszenzmikroskopie mit dermaen hoher Sensitivitt
nachgewiesen werden, dass sogar Bewegungen von

Strukturen wie des Cytoskeletts in Echtzeit in der
lebenden Zelle verfolgt werden knnen. Durch gezielte Mutationen im GFP-Gen ist eine Reihe von
Farbvarianten des Proteins verfgbar geworden.
Fluoreszenzmikroskopie erlaubt das zeitliche

Verfolgen komplexer Prozesse im Zellinnern In
den letzten Jahrzehnten sind unterschiedliche, bei

verschiedenen Wellenlngen anzuregende und fluoreszierende Markierungen fr Biomolekle entwickelt worden, die erlauben, mit Laser-Scanning-Fluoreszenzmikroskopie zellulre Vorgnge mit hoher
rumlicher Auflsung zu verfolgen.
Die Zirkulardichroismus (Circular dichroism,
CD-)Spektroskopie untersucht die Sekundrstruktur von Proteinen Optisch aktive Substanzen ab-
sorbieren linksund rechts-zirkular polarisiertes

Licht in verschiedenem Ausma. In der CD-Spektroskopie wird der Unterschied in der Absorption
der beiden Lichtarten gemessen. Die Differenz
zwischen den Extinktionskoeffizienten fr linksund rechts-polarisiertes Licht L und R wird als
Elliptizitt (theta) bezeichnet und ist eine Funktion der Wellenlnge des eingestrahlten Lichts:
() =(LR)cd (c, Konzentration; d, Schichtdicke). Im CD-Spektrum wird die Abhngigkeit der
Elliptizitt von der Wellenlnge dargestellt. Die
489
37.6Isotopenmarkierung, Radionuclide
37
Ladung(M/z-)Quotienten aufgetrennt und in ei-
.. Abb.37.5 Massenspektrometer. Eine Reihe verschiedener

Typen von Massenspektrometern erlaubt die Bestimmung
der Moleklmasse freier ionisierter Molekle einschlielich
Peptide und Proteine im Hochvakuum. Die Ionenquelle
produziert und beschleunigt die Ionen. Der Massenanalysator trennt die Ionen des Strahls im Hochvakuum nach
ihrem Masse/Ladung-Verhltnis. Der Detektor registriert die
auftreffenden Ionen. Alle drei Teile eines Massenspektrometers kommen in verschiedenen Versionen vor. Fr die Analyse
biologischer Makromolekle eignen sich vor allem zwei
Kombinationen von Ionenerzeugung und Massenanalysator:
Im Fall des MALDI-TOF-Massenspektrometers werden die Molekle in eine organische Matrix eingebettet und mit einem
Laserpuls verdampft (Matrix-assisted laser desorption/ionization MALDI). Die Flugzeit (Time of flight TOF) von der Erzeugung
bis zum Eintreffen auf dem Detektor erlaubt, den Masse/
Ladung-Quotient zu bestimmen. Im Fall der Elektrospray-Ionisation (Electrospray ionisation ESI) werden Ionen durch Einsprhen der Lsung in ein elektrisches Feld erzeugt, wobei es
je nach Bedingungen zur Fragmentierung grerer Molekle
kommen kann. Die Auftrennung der Ionen erfolgt z.B. mittels
eines Quadrupol- oder Ionenfallen-Massenanalysators
hufigste Anwendung der CD-Spektroskopie ist

die Analyse von Sekundrstrukturen in Proteinen
im Spektralbereich von 160250nm, in welchem
Peptidbindungen Licht absorbieren (.Abb.37.4).
Der Gehalt an -Helix- und -Faltblattstruktur lsst
sich auf Grund des CD-Spektrums eines Proteins
abschtzen.
37.5 Massenspektrometrie
Masse- und Strukturbestimmungen sind die
Hauptanwendungen der Massenspektrometrie
(MS) Bei dieser hochprzisen Analysemethode
wird die Probe organischer Verbindungen im

Hochvakuum in die Gasphase bergefhrt, durch
eine Ionenquelle ionisiert (zumeist Masse M+H+,
d.h. mit Ladung1+) und je nach Verfahren fragmentiert. Ein elektrisches Feld beschleunigt die
Ionen, die darauf im Analysator nach ihren Masse/
nem Detektor aufgefangen werden (.Abb.37.5).

Die M/z-Quotienten aller Teilchen eines komplexen
Gemisches werden in einem einzigen Messgang mit
der Genauigkeit von bis zu 1105 bestimmt. Die
MS ist eine destruktive Technik, bentigt jedoch nur
sehr geringe Substanzmengen (ng) pro Messung.
Je nach Messtechnik lassen sich die Massen und
relativen Mengen niedermolekularer Verbindungen,
aber auch von Proteinen und Nucleinsuren bestimmen. Der Vorteil der MS liegt in der schnellen und
genauen Bestimmung der Moleklmasse, die in
vielen Fllen eine rasche vorlufige Identifizierung
ermglicht. Die Methode eignet sich deshalb z.B.
zur Qualittskontrolle biotechnisch hergestellter
Proteine. Das Fragmentierungsmuster (Massen
spektrum) erlaubt zudem Rckschlsse auf die
chemische Struktur eines Molekls einschlielich
der Aminosuresequenz von Peptiden und Proteinen (Abschn.38.1). MS-Verfahren eignen sich
fr Hochdurchsatz-Analysen beispielsweise in der
Proteomik und Metabolomik.
37.6 Isotopenmarkierung,
Radionuclide
Isotope dienen zur Markierung von Biomoleklen

Die Protonen- oder Ladungszahl des Atomkerns
bestimmt die Art des Elements; die Formen eines

Elements mit verschiedener Neutronenzahl werden als Isotope bezeichnet. Das Protonen/Neutronen-Verhltnis ist variabel, z.B. kann der Kern von
Wasserstoff aus einem Proton (11 H-Isotop: Wasserstoff, stabil) oder einem Neutron und einem Proton
(21 H-Isotop: Deuterium, schwerer Wasserstoff, stabil)
oder einem Proton und zwei Neutronen (31 H-Isotop:
Tritium, radioaktiv) bestehen. Das Verhltnis der
Neutronen- und Protonenzahl bestimmt die Stabilitt des Kerns. Sowohl bei Protonen- wie auch bei
Neutronenberschuss ist der Kern instabil und zerfllt unter Aussendung von Strahlung, er ist radioaktiv. Isotopenmarkierte Verbindungen verhalten sich
bei chemischen und biochemischen Umsetzungen
meist gleich wie nichtmarkierte Verbindungen. Sie
lassen sich jedoch physikalisch von nichtmarkierten
Verbindungen unterscheiden und quantitativ bestimmen: stabile Isotope durch MS, radioaktive Isotope
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anhand der Radioaktivitt. Beides sind sehr empfindliche Messmethoden, eine isotopenmarkierte
Verbindung lsst sich auch bei groem berschuss
der nichtmarkierten Verbindung nachweisen.
Isotopeneffekt
Die Vernderung physikalischer, chemischer
oder biochemischer Eigenschaften einer Verbindung aufgrund eines vernderten Gehalts
an Isotopen wird als Isotopeneffekt bezeichnet. Es handelt sich zumeist um geringfgige
reaktionskinetische Effekte oder Verschiebungen des Reaktionsgleichgewichts. Die grten
Isotopeneffekte finden sich bei den Wasserstoffisotopen, weil sie die grten relativen
Unterschiede in der Atommasse aufweisen.
Eine bestimmte Verbindung oder auch eine bestimmte Moleklgruppe kann mit einem geeigneten
Isotop markiert werden, so dass ihr Weg bei Enzymreaktionen oder im Stoffwechsel verfolgt werden
kann. Isotope, die auf diese Weise verwendet werden,
werden auch als Leitisotope (Tracer) bezeichnet. Radioaktive Nuclide sind dabei besonders einfach nachzuweisen; ihr Nachteil besteht in ihrer Toxizitt und
Kanzerogenitt. Die wichtigsten Eigenschaften der in
der Biochemie am hufigsten verwendeten Isotope
sind in .Tab.37.4 zusammengefasst.
37.7
Monoklonale Antikrper
Antikrper knnen aufgrund ihrer hohen Spezifitt und Affinitt oberflchengebundene Biomolekle nachweisen Insbesondere monoklonale
Antikrper werden aufgrund ihrer hohen Spezifitt
und Affinitt als vielfltig einsetzbare Reagenzien

verwendet. Solche Antikrper werden durch Fusion
von Antikrper-produzierenden Zellen mit Myelomzellen hergestellt (Abschn.32.3). Klone von
solchen Fusionszellen produzieren danach spezifische Antikrper in unlimitierter Menge. Bei der ELISA-Technik (Enzyme-linked immunosorbent assay)
werden die Probelsungen, z.B. Zellextrakte, in die
Vertiefungen von Mikrotiterplatten gegeben. Diese
Microwell plates sind Kunststoffgefe mit vielen
voneinander abgetrennten Vertiefungen (Wells,
96 bis 1536 pro Platte), in denen die Proteine der

Probelsung durch Adsorption an den Kunststoff
rtlich fixiert werden. Nach dem Wegwaschen des
nicht adsorbierten Proteins wird die Platte mit einer
verdnnten Antikrperlsung inkubiert, gewaschen
und nachfolgend mit der Lsung eines zweiten Antikrpers beschickt, welcher gegen den Fc-Teil des
ersten Antikrpers gerichtet ist. Die zweiten Antikrper sind vorgngig gereinigt und durch kovalente Koppelung mit einem Enzym markiert worden; sie erlauben somit den Nachweis des ersten,
ans fixierte Antigen gebundenen Antikrpers ber
eine durch das Enzym katalysierte farbgebende Reaktion. Die ELISA-Technik kann bei geeigneter Kalibrierung die verschiedensten Antigene quantitativ
bestimmen.
37.8 pH-Puffer
pH-Puffer sind Mischungen schwacher Suren/Basen mit ihren konjugierten Basen/Suren Der
pH-Wert ist definiert als pH=10log[H+]. Starke
Suren und Basen sind in wsseriger Lsung vollstndig dissoziiert. Eine 0,1M HCl-Lsung liegt
beispielsweise vollstndig in Form von Wasserstoffionen und Chloridionen vor. Ihr pH-Wert betrgt
demnach 1,0. Bei einer schwachen Sure ist die Dissoziation unvollstndig. Die Suredissoziationskonstante Ka definiert das Gleichgewicht zwischen
der dissoziierten und der undissoziierten Form:
A HC =AH D Ka
A, dissoziierte Sure; H+, Wasserstoffion, AH,
undissoziierte Sure. Essigsure, ein Beispiel fr
eine schwache Sure ist in einer 0,1M Lsung nur
zu 1,5% dissoziiert; ihr pH-Wert ist etwa 2,85.
(Fr Basen gilt eine entsprechende Gleichung:
[B][H+]/[BH+]=Kb).
Wird die obige Gleichung umgeformt zu
Ka =HC D A =AH
und pKa definiert als 10logKa, ergibt sich
pH = pKa + 10 log
A
;
AH
37
491
37.8pH-Puffer
.. Tab.37.4 Eigenschaften von Isotopen, die in der Biochemie hufig verwendet werden
Nuclid
Art der Strahlunga
Reichweite
der Strahlung
in Luft b
Reichweite
der Strahlung
in Wasser b
Halbwertszeit
des Zerfalls c
Freigrenze,
Bq/kg d
Typische markierte Molekle

Wasser, diverse
Molekle
keine
stabil
6mm
0,006mm
12Jahre
3 105
diverse Molekle
14
22cm
0,026cm
5730Jahre
2 10
organische
Molekle
32
6,5m
0,79cm
14Tage
4 103
Nucleinsuren
35
25cm
0,03cm
87Tage
4 104
Proteine
100m
1m
60Tage
6 102
Proteine
125
-Strahlung besteht aus Elektronen; -Strahlung ist elektromagnetisch. Beide Strahlenarten werden mit Nuclid-typischen Energien ausgesandt und sind deshalb unterschiedlich durchdringend.
b
Reichweite, diejenige Distanz, bei welcher praktisch keine Dosis mehr gemessen wird. Die Reichweite kann nur fr
partikulre Strahlenarten angegeben werden, fr elektromagnetische Strahlung wie Rntgenstrahlen ist die Abschwchung in wenig dichten Materialien gering. Bei dichten Materialien wie Blei rechnet man mit Zehntelswertdicken. Eine Bleiabschirmung von 5cm Dicke reduziert Rntgenstrahlung auf ungefhr ein Zehntel der Ursprungsdosis,
etwas verschieden je nach Energiebereich der Strahlung. In der Tabelle sind bei 125I ungefhre Zehntelswertdicken fr
Rntgenstrahlung () angegeben.
c
Die Halbwertszeit ist diejenige Zeit, in der die Hlfte der radioaktiven Kerne zerfllt. Zerfallsgesetz:
Nt D N0 e kt
t1=2 D
0;69
ln2
D
k
k
Nt, Zahl der radioaktiven Kerne zur Zeit t; N0, Anzahl der radioaktiven Kerne zur Anfangszeit0; k, Geschwindigkeitskonstante des Zerfalls; e=2,718, Basis der natrlichen Logarithmen (ln). Das Becquerel (1s1) ist die SI-Einheit der
Zerfallsrate. Die Zerfallsrate wird in der Praxis oft auch in cpm (Counts per min, gemessene Zerflle pro min) oder dpm
(Decays per min, effektive Zerflle pro min) angegeben.
d
Freigrenze bedeutet die vom Gesetzgeber in der EU festgelegte Maximalmenge des Nuclids, welche gerade
noch als inaktiv, d.h. unwesentlich ber der lokalen Untergrundaktivitt, betrachtet werden darf. 1Bq=1Becquerel=1Zerfall pro s
die Henderson-Hasselbalch-Puffergleichung. Sie

zeigt, dass pH=pKa, wenn [A]=[AH], d.h. wenn
die Sure zu 50% dissoziiert vorliegt. Weil in diesem
Bereich bei einer pH-Verschiebung am meisten Protonen abgefangen bzw. abgegeben werden, puffert
eine Sure (oder Base) am besten, wenn der pHWert der Lsung ihrem pK-Wert entspricht (vgl.
Titrationskurve einer Aminosure; .Abb.2.5).
Wird eine gute Pufferkapazitt angestrebt, sollte
der pH-Wert der Pufferlsung nicht weiter als etwa
0,5pH-Einheiten vom pKa der Puffersubstanz entfernt liegen. Je schwcher eine Sure ist, desto hher liegt ihr pKa. Zur Pufferherstellung wird in der
Praxis oft die Lsung einer schwachen Sure (z.B.
Essigsure) mit einer Lsung eines ihrer Alkalisalze

(z.B. Natriumacetat) gemischt.
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Links auf
Springer Website:
027-6-1517256-0
37.1 Zentrifugation
37.2 Chromatographie
37.3 Elektrophorese
37.4 Spektroskopie
37.5 Massenspektrometrie
37.6 Isotopenmarkierung, Radionuclide
37.7 Monoklonale Antikrper
37.8 pH-Puffer
493
Proteinanalytik
38.1
Bestimmung der Aminosurezusammensetzung

und Sequenzanalyse von Proteinen 494
38.2
Analyse der 3D-Struktur von Makromoleklen

durch Rntgenkristallographie494
38.3
Analyse der 3D-Struktur von Makromoleklen

durch magnetische Kernresonanz (NMR)497
38.4
Elektronenmikroskopie497
38.5
Untersuchung posttranslationaler
Modifikationen von Proteinen 499
38.6
Untersuchung von Protein-LigandWechselwirkungen499

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Kapitel 38Proteinanalytik
Die kovalente Struktur von Proteinen einschlielich

allflliger posttranslationaler Modifikationen lsst
sich mit chemischen und biochemischen Methoden ermitteln. Rntgenkristallanalyse, magnetische
Kernresonanz (Nuclear magnetic resonance, NMR)
und hochauflsende Elektronenmikroskopie erlauben, die Raumstruktur biologischer Makromolekle
aufzuklren. Proteine erfllen ihre Funktion, indem
sie mit anderen Moleklen (Proteinen, anderen Makromoleklen und niedermolekularen Verbindungen) oder mit Ionen Komplexe bilden. Physikalische
Verfahren gestatten, solche molekularen Wechselwirkungen qualitativ und quantitativ zu erfassen.
38.1
Bestimmung der
Aminosurezusammensetzung
und Sequenzanalyse
von Proteinen
Zur Bestimmung der Aminosurezusammensetzung wird das Protein vollstndig zu Aminosuren hydrolysiert Hierzu wird das reine Protein fr
14h in 6NHCl unter Vakuum bei 110C gehalten.

Die Aminosuren im Hydrolysat werden mit einem
fluoreszierenden Reagenz kovalent markiert, durch
Ionenaustauschchromatografie oder Reversed-phase
HPLC (High-performance liquid chromatography)
aufgetrennt und anhand ihres Elutionsvolumens
identifiziert. Aus dem Chromatogramm lassen
sich durch Vergleich mit einem Standardgemisch
die einzelnen Aminosuren quantitativ bestimmen
(.Abb.38.1).
Zur Bestimmung der Aminosuresequenz
werden Proteine mittels gezielter enzymatischer
oder chemischer Spaltung in Peptide zerlegt
Nach chromatografischer Auftrennung werden die

Peptide einzeln sequenziert. Durch schrittweisen
chemischen Abbau (Edman-Abbau) oder enzymatischen Abbau (Amino- und Carboxypeptidasen)
wird an den Enden der Peptidkette eine Aminosure nach der anderen abgespalten und durch
Chromatographie oder MS identifiziert. Bei einem
einzelnen Satz nichtberlappender sequenzierter
Peptide ist deren Reihenfolge im Protein noch unklar. Es muss mindestens ein zweiter Satz mit berlappenden Peptiden sequenziert werden, um die
Gesamtsequenz des Proteins zu ermitteln.
Eine alternative Methode zur Sequenzierung

der Peptide bietet die Massenspektrometrie
(Abschn.37.5). Die MS hat den Vorteil eines hohen Probendurchsatzes und der Mglichkeit auch
posttranslationale Modifikationen des Proteins wie
Glykosylierung, Phosphorylierung samt Disulfidbrcken zu identifizieren. Grundstzlich knnte
MS in Verbindung mit einem sehr hohen Rechenaufwand ganze Proteine direkt sequenzieren; meist
wird jedoch die Totalsequenz auch bei Verwendung
von MS aus zwei Stzen berlappender Peptide ermittelt oder es wird die Reihenfolge der Peptide aus
der DNA-Sequenz abgeleitet.
Die direkte Bestimmung der Aminosuresequenz eines Proteins ist unabhngig vom gewhlten Vorgehen aufwndig und ist nur angezeigt zur
Ermittlung der effektiven kovalenten Struktur einschlielich Disulfidbrcken und posttranslationaler Modifikationen. Die von cDNA- und Genomsequenzen abgeleiteten Aminosuresequenzen der
meisten Proteine sind heute, falls eine kurze Teilsequenz bekannt ist, aus Datenbanken abrufbar.
Allerdings liefern diese Datenbanken nicht direkt
bestimmte, sondern indirekt ermittelte wahrscheinliche Sequenzen, die mit einem gewissen Fehlerrisiko, u.a. wegen differenziellen Spleiens oder
posttranslationaler Modifikationen, behaftet sind
und je nach Fragestellung experimentell verifiziert
werden mssen.
38.2
Analyse der 3D-Struktur

von Makromoleklen
durch Rntgenkristallographie
Rntgenlicht mit einer Wellenlnge, welche den

Atomabstnden entspricht, wird durch ein Kristallgitter gestreut In konzentrierten Lsungen
reiner Makromolekle bilden sich unter geeigneten Bedingungen Kristalle. Rntgenlicht, das
durch kristallin angeordnete Materie geschickt
wird, durchdringt den Kristall zum groen Teil
ungehindert. Ein kleiner Teil der Strahlung wird
jedoch durch Wechselwirkung mit der Elektronenhlle der Atome gestreut. Im Kristallgitter sind
die Streuungszentren periodisch angeordnet. Da
die Wellenlnge des verwendeten monochromatischen Rntgenlichts den Atomabstnden im
495
38.2 Analyse der 3D-Struktur von Makromoleklen durch Rntgenkristallographie
38
13
.. Abb.38.1 Auftrennung eines Gemisches von Aminosuren. Ein Standardgemisch mit je 125pmol von 21Aminosuren und einigen seltener vorkommenden Aminosurederivaten wurde mittels HPLC aufgetrennt. Die groen Spitzen (Haupt-Peaks) des Chromatogramms entsprechen den eingesetzten Standardsubstanzen, kleine Spitzen zeigen Zerfallsprodukte oder Verunreinigungen
an. Die Flche des Peaks fr die einzelnen Aminosuren hngt stark von der Nachweismethode ab. Durch den Vergleich der Positionen der Peaks und deren Flchen im experimentellen Chromatogramm und im Standardchromatogramm kann die Aminosurezusammensetzung der Probe qualitativ und quantitativ ermittelt werden. Die in den Haupt-Peaks nachgewiesenen Substanzen sind:
1Aspartat, 2Glutamat, 3Asparagin, 4Serin, 5Glutamin, 6Histidin, 7Glycin, 8Threonin, 9Citrullin, 10Arginin, 11Alanin, 12Tyrosin,
13Cystin, 14Valin, 15Methionin, 16Norvalin, 17Tryptophan, 18Phenylalanin, 19Isoleucin, 20Leucin, 21Lysin, 22Hydroxyprolin,
23Sarkosin (N-Methylglycin), 24Prolin. Zu beachten ist, dass bei der vorgngigen sauren Hydrolyse eines Proteins Asn und Gln zu
Asp und Glu hydrolysiert werden sowie Trp vollstndig zerstrt wird und spektroskopisch bestimmt werden muss
Kristallgitter entspricht, verstrken Interferenzef-
fekte das Licht in bestimmten Richtungen. Das

interferenzverstrkte gebeugte Rntgenlicht wird
mit einem Detektor auerhalb des Kristalls registriert und quantifiziert (.Abb.38.2). Das Muster
und die Intensitt der Beugungsmaxima zusammen
mit der Kenntnis der Phasen der gebeugten Wellen
erlauben mittels Fourier-Transformation die Verteilung der Elektronendichte im Kristall und somit
die Lage der Atome zu berechnen. Das Ergebnis
der Rntgenkristallanalyse ist eine dreidimensionale Elektronendichtekarte , in welche nun
die Polypeptidkette mit ihren Aminosureresten
eingepasst wird. Die heutigen Diffraktometer verwenden Rntgenlicht aus Synchrotron-Anlagen.
In diesen Grogerten werden Elektronen in Ringbeschleunigern mit einem Umfang von mehreren
hundert Metern nahezu auf Lichtgeschwindigkeit
gebracht und danach durch Magnetfelder von
ihrer Bahn abgelenkt. Dabei entsteht monochromatisches Rntgenlicht von genau definierter Wellenlnge im fr Proteinkristallografie geeigneten
Bereich von 0.070.18nm (0.71.8). Die hohe
Intensitt und die feine Fokussierung erlauben, bei
Tieftemperaturen um 100K Datenstze von Kristallen mit Kantenlngen von einigen Mikrometern
mit Belichtungszeiten von einigen Sekunden aufzunehmen. Die Hauptvorteile von Synchrotronanaly-
sen sind die schnelle Datengewinnung, die gezielt

variierbare Wellenlnge zur Phasenbestimmung
und die Mglichkeit, kleine Proteinkristalle zu
untersuchen. Neueste FEL(Free-electron laser)-Anlagen ermglichen die Analyse von Kristallen im
Grenbereich von etwa 500nm (je kleiner der
Kristall, umso grsser die Chance fr ein durchgehend uniformes Gitter).
Die Bestimmung der 3D-Struktur von Makromoleklen ist aufwndiger als deren Sequenzierung Die Hochdurchsatzverfahren zur Eruierung
der geeigneten Kristallisationsbedingungen verlangen verhltnismig groe Mengen von Protein. Ist
die cDNA eines Proteins einmal kloniert, kann sie in
vielen Fllen auch zur Expression gebracht werden.
Nach Expression der meisten Leseraster aus einem
Bakteriengenom sind in der Regel rund 80% der
erhaltenen Polypeptide lslich und knnen Kristallisationsversuchen zugefhrt werden. Die Bereitstellung von Expressionsklonen mit vielen mittels
Mutagenese erhaltenen Varianten des interessierenden Proteins durch automatisierte Subklonierung
(Abschn.40.2) erhht die Chancen fr eine erfolgreiche Kristallisierung. Allerdings knnen nicht
alle Proteine im gleichen Bakterienstamm in ausreichender Menge produziert werden; in manchen
Fllen ist eine Prfung verschiedener Expressionssysteme nicht zu umgehen. Die Optimierung aller
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Elektronendichtekarte
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Elektronendichtekarte
.. Abb.38.2Kristallographische
Ermittlung der Raumstruktur
eines Proteins . Nach der
Kristallisation des Proteins (hier
Lysozym, ein Protein aus dem
Eiklar des Hhnereis, das auch in
der Trnenflssigkeit, im Speichel
und weiteren Sekreten vorkommt
und bakterielle Zellwnde verdaut)
werden mglichst regelmig
gebaute Kristalle ausgewhlt und
in einen Rntgenstrahl gebracht.
Das gebeugte Licht wird in einem
Detektor (Photonen zhlender
Pixeldetektor oder Rntgenfilm)
aufgefangen. Die Genauigkeit der
Struktur hngt davon ab, wie viele
Streupunkte gemessen werden
knnen, die erreichbare Auflsung
ist innerhalb der eingezeichneten
Ringe in nm (0,1nm=1) angegeben. In die mittels Fourier-Transformation berechnete rumliche
Elektronendichtekarte wird die
bekannte Aminosuresequenz
eingepasst. Der Indoldoppelring
eines Tryptophanrests, welcher aus
einer -Helix (Blickrichtung senkrecht zur Helixachse) des Proteins
herausragt, ist leicht zu erkennen
497
38.4Elektronenmikroskopie
Variablen erlaubt in vielen Fllen die Reindarstellung des codierten Proteins in Milligramm-Mengen
und ermglicht damit Versuche zu dessen Kristallisation und Strukturanalyse.
Die Bedingungen fr eine erfolgreiche Kristallisierung eines Proteins mssen experimentell
ermittelt werden Eine Reihe variabler Parame-
ter und deren Kombinationen sind zu testen: Art

und Konzentration des Mittels zur Herabsetzung
der Lslichkeit des Proteins (Polyethylenglykol mit
Mr 100020000, Salze wie Ammoniumsulfat oder
organische Lsungsmittel), Proteinkonzentration,
pH-Wert und Temperatur. Die Automatisierung
der Pipettierschritte und der Prfung der einzelnen
Anstze auf Kristallwachstum verringert nicht nur
den Arbeitsaufwand, sondern auch das notwendige
Ansatzvolumen (derzeit 0,2L), so dass gleichzeitig
mehrere hundert verschiedene Kristallisationsbedingungen fr ein bestimmtes Protein getestet werden
knnen.
38.3
Analyse der 3D-Struktur

von Makromoleklen
durch magnetische
Kernresonanz (NMR)
Die NMR-Technik beruht darauf, dass bestimmte

Atomkerne, insbesondere der Wasserstoffkern, ein
magnetisches Moment (Kernspin) besitzen Die
Raumstruktur von Proteinen kann mit Kernspinresonanzspektroskopie (Magnetischer Kernresonanz,

Nuclear magnetic resonance NMR) mit dem Protein
in Lsung bestimmt werden. Die Strukturbestimmung mit NMR ist jedoch nur mit relativ kleinen
Proteinen (<50kDa) und mit einer Proteinmenge
von mehreren hundert Milligramm durchfhrbar.
Atomkerne mit ungerader Protonen- und/oder
Neutronenzahl verfgen ber einen quantenmechanischen Drehimpuls (Spin) und haben damit ein
magnetisches Moment. Fr die Strukturbestimmung
biologischer Molekle sind vor allem 1H, 13C, 15N und
31
P wichtig. Da 13C und 15N nur in sehr kleinen Anteilen natrlich vorkommen, mssen Biomolekle fr
bestimmte NMR-Experimente mit diesen Isotopen
angereichert werden. In einem starken Magnetfeld
richten sich Kernspins aus und rotieren mit einer
bestimmten Frequenz. Fr NMR Experimente wird
38
ein ueres elektromagnetisches Feld im gleichen

Frequenzbereich benutzt, um die Ausrichtung der
Kernspins zu stren. Nach Abschalten des strenden
elektromagnetischen Feldes kehren die Kerne in den
Grundzustand zurck und geben dabei Strahlung
im Radiofrequenzbereich ab. Die Frequenz der abgegebenen Strahlung hngt von der Nachbarschaft
des Atoms ab. Es ist damit mglich, die Signale von
Kernen in verschiedener Umgebung voneinander
zu unterscheiden und zu identifizieren (Resonanzzuordnung). In weiteren NMR-Experimenten lassen
sich aus den NMR-Signalen des Proteins Abstnde
zwischen Atomen bestimmen, die bis zu 6 voneinander entfernt sind, z.B. zwischen Wasserstoffkernen
der Amidgruppen der Hauptkette der Proteine. Dieses Resultat wird mit der Kenntnis der Aminosuresequenz des Proteins kombiniert und zur Ableitung
einer Reihe wahrscheinlicher rumlicher Konformationen verwendet (.Abb.38.3). Die NMR-Struktur
eines Proteins ist demnach ein Ensemble von Strukturen, welches die Flexibilitt und Motilitt des
Proteins in Lsung wiedergibt. In Datenbanken ist
hufig nur eine gemittelte NMR-Struktur deponiert.
Computer-gesttzte molekulare Modellierung ergnzt die empirische Bestimmung der
3D-Struktur Molekldynamik (Molecular dynamics)-Programme erlauben die konformationelle
Dynamik eines Proteins rechnerisch zu simulieren

und abzuschtzen, in welcher Weise diese durch
Temperatur, pH, Modifikationen des Proteins oder
Binden von Liganden beeinflusst wird. Beim Design
von Wirkstoffen in der Entwicklung von Arzneimitteln oder Pflanzenschutzstoffen ist das rechnerische
Modellieren der Bindung von Ligandvarianten an
das Zielprotein ein unentbehrliches Hilfsmittel
(Molekulares Andocken, Molecular docking).
38.4 Elektronenmikroskopie
Die maximale Auflsung klassischer Lichtmikroskopie ist durch die Wellenlngen des sichtbaren Lichts
auf etwa 200nm limitiert. Die in der Elektronenmikroskopie (EM) verwendeten beschleunigten Elektronen haben eine deutlich krzere Wellenlnge (im
einstelligen pm-Bereich) als sichtbares Licht (400
760nm). Bei der EM wird die maximal erreichbare
Auflsung nicht durch die Wellenlnge, sondern ei-
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.. Abb.38.3 Vergleich zweier Raumstrukturen eines Proteins, die mittels Rntgenkristallanalyse und NMR erhalten wurden.
Metallothionein, ein cysteinreiches Protein von 10kDa, ist an der Kontrolle der Konzentration des metabolisch aktiven Zinks,
sowie an Entgiftungen und Redoxprozessen beteiligt. Das Protein konnte zur Kristallisation gebracht und seine 3D-Struktur
rntgenkristallografisch bestimmt werden. Metallothionein war auch eines der ersten Proteine, deren Struktur in Lsung mittels
NMR bestimmt werden konnte. Die beiden Strukturen sind in der Projektion berlagert: Dicker blauer Strich, Verlauf der Kette
der C-Atome gem der Rntgenkristallanalyse; dnne graue Striche, NMR-Strukturen. Die NMR-Struktur ist im Gegensatz zur
kristallografisch ermittelten Struktur nicht eindeutig. Deshalb ist in diesem Fall ein Ensemble der wahrscheinlichsten Strukturen
dargestellt. Die beiden Strukturen gleichen sich stark mit Ausnahme einzelner Bereiche, in denen Proteinmolekle in Lsung
vermutlich mehr Bewegungsfreiheit besitzen als Proteinmolekle, welche im Kristallgitter fixiert sind
nerseits durch die Aberrationen des Linsensystems

und andererseits durch die Strahlenempfindlichkeit
und den geringen Eigenkontrast biologischer Proben begrenzt. Mit EM lassen sich je nach Methode
Auflsungen im Bereich von 50,5nm erreichen.
Bei der Transmissions-Elektronenmikroskopie
TEM wird ein beschleunigter Elektronenstrahl im
Vakuum durch elektronenoptische Kondensorlinsen gebndelt und parallel ausgerichtet, worauf er
eine dnne Probe durchstrahlt. Ein Groteil der
Elektronen geht durch die Probe hindurch, und je
nach lokaler Elektronentransparenz werden mehr
oder weniger Elektronen gestreut. Nach Fokussierung der nicht abgelenkten Strahlen durch weitere
elektronenoptische Linsensysteme entsteht auf einem Sensor oder fluoreszierenden Bildschirm ein
vergrertes Abbild der Probe.
Vor der Messung werden biologische Proben

nach Bedarf fixiert (chemische Vernetzung oder
Kryofixierung) und zur Erhhung des Kontrasts
behandelt. Da biologisches Material Elektronen
nur schwach streut, kann die Probe durch Negativkontrastierung (Negative staining) mit Schwermetallsalzen, z.B. Uranylacetat, welche Elektronen
stark streuen, behandelt werden. Allerdings wird
dabei die maximal erreichbare Auflsung durch die
Gre der Metallsalz-Partikel limitiert. Spezifische
Proteine werden mittels Goldpartikel-markierter
Antikrper dargestellt. Diese einfacheren EM-Methoden liefern Informationen ber Zellstruktur
sowie zur Homogenitt, Gre und Form aufgereinigter Proteine.
Bei der Gefriertzungs (Freeze-fracture)-Technik wird die Probe sehr schnell gefroren, um die Bildung von Eiskristallen zu vermeiden. Danach wird
499
38.6 Untersuchung von Protein-Ligand-Wechselwirkungen
sie im Vakuum mit einem Keil aufgespalten. Dabei

brechen die Zellen an den schwchsten Stellen, so
dass Strukturdetails freigelegt werden. Die resultierende unebene Oberflche kann sichtbar gemacht
werden, indem diese mit einer Platin-Kohlenstoff-Mischung schrg bedampft wird (Shadowing).
Auf den der Bedampfungsquelle zugewandten Flchen sammelt sich eine dickere Metallschicht als auf
den abgewandten Flchen, so dass eine Art Schattenlandschaft der Oberflche entsteht, welche nach
Entfernung (Wegtzung) des biologischen Materials
durch TEM sichtbar wird.
Aufwndigere EM-Methoden knnen auch
die 3D-Struktur von Proteinen ermitteln Fr die
Einzelpartikelanalyse werden viele Mikrographien
einzelner Proteinmolekle oder Proteinkomplexe

in amorphem Eis aufgenommen. Der gefrorene
Zustand minimiert Strahlenschden und weitere
Vernderungen. Mit Hilfe von Computerprogrammen werden mglichst viele (5000106) Einzelpartikel-Aufnahmen analysiert. Die Bilder von Partikeln
mit identischen Projektionen werden gemittelt, und
aus den verschiedenen gemittelten Projektionen
wird die 3D-Struktur berechnet (Backprojection).
Diese Methode erreicht eine Auflsung, welche Sekundrstrukturen (-Helices und -Faltbltter) erkennen lsst. Oft werden EM-Daten dieser Art mit
rntgenkristallographischen Daten kombiniert, um
zum Beispiel die Struktur eines Multiproteinkomplexes (EM-Daten) aus den Strukturen der einzelnen beteiligten Proteine (Rntgenkristallographie)
aufzubauen .
Mit der Elektronentomographie lsst sich die
Struktur von Makromoleklen sogar innerhalb einer Zelle ermitteln. Auch die Struktur ganzer Zellen
kann dreidimensional rekonstruiert werden: Kippen der Kryo-TEM-Probe zwischen mehreren Messungen liefert Daten fr verschiedene Projektionen,
die erlauben, die 3D-Struktur bis zu einer Auflsung
von 30 zu berechnen.
Eine weitere Methode, die Elektronenkristallographie , ermittelt 3D-Proteinstrukturen aufgrund
der Beugungsdaten von 2D-Kristallen (einschichtig
und periodisch angeordnete Proteinmolekle). In
diesem Fall werden nicht Bilder, sondern Diffrak
tionsmuster aufgenommen und zur Berechnung der
3D-Struktur verwendet. Unter Umstnden erreicht
diese Methode fast atomare Auflsung.
38
38.5 Untersuchung
posttranslationaler
Modifikationen von Proteinen
Proteinmodifikationen (Phosphorylierung, Glykosylierung, Methylierung, Ubiquitinierung)

werden mit physikalischen und biochemischen
Methoden analysiert Die Vielfalt der posttrans-
lationalen Modifikationen von Proteinen bedingt

eine entsprechend spezifische Analytik. Weil mit
jeder Phosphorylierung eine zustzliche negative
Ladung auftritt, eignen sich elektrophoretische
Verfahren wie die isoelektrische Fokussierung zum
Nachweis dieser Modifikation. Auerdem werden
Massenspektrometrie und immunologische Techniken zum Nachweis der Phosphorylierung bekannter
phosphorylierbarer Stellen eines Peptids oder Proteins verwendet; Antikrper gegen Phospho-Epitope wichtiger Signalbermittlungsproteine sind
kommerziell erhltlich. Mit hnlichen Methoden
wird die Glykosylierung von Proteinen analysiert.
Da jedoch die an Proteine gekoppelten Oligosaccharide strukturell oft heterogen sind, wird eine
aufwndige detaillierte Analyse nur selten durchgefhrt. Einfach durchzufhren ist die gelelektrophoretische Bestimmung der durch die Glykosylierung
erhhten Moleklmasse. Methylierungen (z.B. Arg
oder Lys in Histonen) knnen verschiedene und
variable Positionen in einem Protein betreffen und
sind daher schwierig zu erfassen. Chromatographische Auftrennung von Proteinmoleklen oder Peptidfragmenten verbunden mit Massenspektrometrie
ist die Analysenmethode der Wahl. Ubiquitinierungen von Proteinen (Abschn.18.1) werden meist
mittels Anti-Ubiquitin-Antikrper erfasst; sie sind
auch aufgrund der vernderten Moleklmasse mittels Gelelektrophorese nachweisbar.
38.6
Untersuchung von ProteinLigand-Wechselwirkungen
Die Bildung von Proteinkomplexen kann mit Ultrazentrifugation nachgewiesen werden Die Bestimmung der Sedimentationsgeschwindigkeit
von Makromoleklen durch Ultrazentrifugation

(Abschn.37.1) eignet sich auch zur Bestimmung
der Wechselwirkung zwischen Bindungspartnern:
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In gewissen Fllen sind sowohl die freien Komponenten eines Komplexes wie auch der Komplex
selbst als verschieden schnell sedimentierende Partikel quantitativ nachweisbar. Oft stellt sich jedoch
das Bindungsgleichgewicht so schnell ein, dass sich
eine klare Trennung der Bindungspartner in freiem
und gebundenem Zustand nicht erreichen lsst.
Die Sedimentations-Gleichgewichtszentrifugation in der analytischen Ultrazentrifuge eignet sich
ebenfalls zur Ermittlung von Wechselwirkungen
zwischen Proteinen, wobei die obigen Einschrnkungen auch fr diese Methode gelten.
Wechselwirkungen zwischen Proteinuntereinheiten und zwischen Proteinen und niedermolekularen
Liganden lassen sich auch durch Gelfiltration (Hummel-Dreyer-Methode ) oder Elektrophorese unter
nichtdenaturierenden Bedingungen nachweisen.
Bei der Gleichgewichtsdialyse trennt eine semipermeable Membran ein Kompartiment mit Protein von einem Kompartiment ohne Protein Fr
den niedermolekularen Liganden ist die Membran

durchgngig. Nach Erreichen des Bindungs- und
Diffusionsgleichgewichts ist die Konzentration des
freien Liganden in beiden Kompartimenten dieselbe,
und die Konzentration des Protein-Ligand-Komplexes ist gleich der Gesamtkonzentration des Liganden
im proteinhaltigen Kompartiment minus die Konzentration des freien Liganden. Im einfachsten Fall
einer Wechselwirkung zwischen einem Liganden und
einem Protein mit nur einer Bindungsstelle lsst sich
mit diesen Daten und der allgemeinen Gleichung fr
reversible Komplexbildung die Dissoziationsgleichgewichtskonstante berechnen (Abschn.1.5).
Bei manchen Proteinen verndert die Bindung
eines Liganden die optischen Eigenschaften (Absorption, Fluoreszenz, Zirkulardichroismus) des
einen oder anderen Bindungspartners In diesen
Fllen kann das Binden und die Freisetzung des Liganden optisch verfolgt werden. Durch Titration mit
dem Liganden lsst sich die Dissoziations-Gleichgewichtskonstante Kd bestimmen. Der Einbau kovalent
gebundener Reportergruppen, deren Absorption
oder Fluoreszenz von der Mikroumgebung abhngig
ist, weitet den experimentellen Anwendungsbereich
optischer Methoden betrchtlich aus.
Die Messung des strahlungslosen Energietransfers zwischen zwei eng benachbarten Fluorophoren
mit berlappenden Emissions- und Absorptions-
spektren (Fluorescence resonance energy transfer,

FRET) dient zur Abschtzung der Distanz (110nm)
zwischen Donor- und Akzeptorfluorophor (z.B. bei
Komplexbildung oder Konformationsnderung);
mit besonderen Versuchsanordnungen knnen sogar einzelne Proteinmolekle vermessen werden.
Die Biacore-Methode beruht auf der Vernderung der Surface(Oberflchen) plasmon resonance
SPR
Die Wechselwirkung zwischen den unter-
suchten Proteinen findet an einer metallischen Oberflche statt, auf die polarisiertes Licht eingestrahlt
wird. Der Goldfilm auf einem Reflektorplttchen wird
mit dem einen Bindungspartner (z.B. einem Antigen)
beschichtet. Danach wird mit einem Durchflusssystem der gelste Partner (der entsprechende Antikrper) ber das Plttchen geschickt. Der Brechungswinkel des vom Plttchen reflektierten Lichts verndert
sich mit der nderung der Massenkonzentration auf
dem Plttchen, d.h. mit dem Binden des darberstrmenden Liganden. Der gebundene Ligand kann
durch Waschen mit Puffer wieder abgelst werden.
Deshalb kann mit dieser Methode die Kinetik der
Bildung und der Dissoziation des Komplexes und
indirekt auch die Strke der Bindung erfasst werden:
Kd=k1/k1, wobei k1 und k1 die Geschwindigkeitskonstanten der Bindung, bzw. der Dissoziation sind.
Die Technik ist sehr empfindlich, etwa 1pg gebundenes Protein pro mm2 kann erfasst werden.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517257-0
38.1 Bestimmung
der Aminosurezusammensetzung
und Sequenzanalyse von Proteinen
38.2 Analyse der 3D-Struktur von Makromoleklen
durch Rntgenkristallographie
38.3 Analyse der 3D-Struktur von Makromoleklen
durch magnetische Kernresonanz (NMR)
38.4 Elektronenmikroskopie
38.5 Untersuchung posttranslationaler Modifika
tionen von Proteinen
38.6 Untersuchung von Protein-Ligand-Wechsel
wirkungen
501
Gentechnik
39.1
Werkzeuge der Gentechnik: Restriktionsenzyme

und andere Nucleasen; Ligasen, DNA-Polymerasen
und Rekombinationsenzyme502
39.2
Plasmide als Vektoren (Genfhren) 504
39.3
Viren als Vektoren; Gentherapieversuche 504
39.4
Knstliche Chromosomen als Vektoren 505
39.5
Polymerase chain reaction PCR505
39.6
Genbanken: cDNA und genomische DNA 508
39.7
Bestimmung der Nucleotidsequenz von DNA 510
39.8
Southern, Northern und Western blotting511
39.9
Expression rekombinanter Proteine und RNAs 512
39.10
Gezielte und zufllige Mutagenese 514
39.11
Prsentation von Genprodukten auf Bakteriophagen

(Phage display) oder Ribosomen (Ribosome display);
gerichtete molekulare Evolution 515
39.12
Klonierung von Zellen und Organismen;

transgene Organismen516

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20
Kapitel 39Gentechnik
Die kommerzielle Verfgbarkeit von Enzymen,

welche DNA und RNA kopieren bzw. modifizieren,
sowie von chemisch synthetisierten Genstcken (bis
etwa 200Nucleotide) erlaubt, genetisches Material
nahezu beliebig zu manipulieren. Experimentelle
Transfektion bringt DNA oder RNA ins Zellinnere:
Bei der Elektroporation macht ein Elektroschock
die Membran der Empfngerzelle kurzzeitig permeabel; bei der chemischen Transfektion (bei Bakterien oft als Transformation bezeichnet) bringen
zelleigene Transportsysteme die Nucleinsuren in
die Zellen.
Fremde DNA oder RNA, welche in eine Zelle
gelangt, wird im Rahmen der Abwehr gegen fremdes genetisches Material meist rasch abgebaut.
Falls jedoch besondere Erkennungssequenzen auf
den Nucleinsuren vorliegen, wird die DNA als
extrachromosomales Element beibehalten und
auch repliziert, z.B. als Plasmid oder als artifizielles
Chromosom. Unter Umstnden bauen Rekombinationsenzyme die DNA in ein bestehendes Chromosom ein. Chemisch synthetisierte Gene haben
sich nach Transfer in eine Zelle oder auch in einen
tierischen Organismus als genetisch aktiv erwiesen.
Krzlich wurde sogar ein komplettes synthetisches
mikrobielles Genom in eine Bakterienzelle eingebracht, deren Phnotyp nach Zerstrung des eigenen Genoms vom neuen Genom bestimmt wurde.
Bei transgenen Pflanzen und Tieren (Genetisch
modifizierte Organismen, GMO) sind einzelne
Gene verndert oder deletiert (Knock-out Organismen).
39.1
Werkzeuge der Gentechnik:

Restriktionsenzyme und andere
Nucleasen; Ligasen, DNAPolymerasen
und Rekombinationsenzyme
Fremde DNA wird in Bakterien von Restriktionsendonucleasen gespalten Zur Elimination
fremder, z.B. viraler DNA, produzieren Bakterien

Restriktionsendonucleasen , die bestimmte kurze
Sequenzen erkennen und die DNA dort entzweischneiden, worauf die zerschnittene DNA rasch
abgebaut wird. Zum Eigenschutz verfgen die Bakterien ber DNA-Methylasen, welche die zelleigene
DNA an den Erkennungsstellen der Restriktionsenzyme methylieren. Ein typisches Restriktionsenzym spaltet DNA nur an nichtmethylieren Erkennungsstellen. Die in der Gentechnik gebruchlichen
Restriktionsendonucleasen erkennen Sequenzen
von 48Nucleotiden, seltener auch etwas lngere
DNA-Regionen. Die Mehrzahl der Restriktionsstellen besitzen eine zweizhlige Symmetrieachse, sie
sind Palindrome (Abschn.11.1).
Restriktionsenzyme sind wichtige Werkzeuge

zur Herstellung rekombinanter DNA Zur Herstel-
lung rekombinanter DNA werden DNA-Fragmente

neu zusammengesetzt. Die an spezifischen Stellen
spaltenden Restriktionsenzyme liefern hierzu definierte DNA-Fragmente. Liegen die Schnittstellen
in den beiden DNA-Strngen an derselben Position, entstehen vollstndig doppelstrngige Enden,
glatte Enden oder Blunt ends. Liegen die Schnittstellen versetzt zueinander, entstehen einzelstrngige 5- oder 3-berhnge an beiden Strngen (je
nach Lage der Schnittstellen; .Tab.39.1). Beide
einzelstrngigen Enden sind komplementr zu den
entsprechenden einzelstrngigen Enden von anderen mit der gleichen Restriktionsendonuclease
geschnittenen Restriktionsfragmenten. Die einzelstrngigen Enden hybridisieren miteinander und
werden deshalb als Sticky ends (klebrige Enden)
bezeichnet. Sticky ends binden nur an passende Sticky ends; Blunt ends sind dagegen beliebig untereinander rekombinierbar. ber 3000 verschiedene Restriktionsenzyme sind heute bekannt, rund 600 sind
kommerziell erhltlich. Mit dieser Auswahl knnen
aus einer DNA sehr viele verschiedene Fragmente
erhalten werden.
Unspezifische Endo- und Exonucleasen dienen
zur Entfernung unerwnschter DNA oder RNA
Heute steht eine groe Palette kommerziell erhltlicher Nucleasen zur Verfgung. In vielen Fllen
wird nach der Biosynthese eines rekombinanten
Proteins durch ein Bakterium der Rohextrakt aus
den Zellen mit unspezifischen Nucleasen verdaut,
welche sowohl DNase- als auch RNase-Aktivitt besitzen. DNA und RNA lassen sich so leicht entfernen. Pankreatische RNase wird verwendet, um bei
der Isolierung von Plasmid-DNA kontaminierende
RNA zu verdauen; RNase-freie DNasen entfernen
DNA aus RNA-Prparationen.
503
39.1 Werkzeuge der Gentechnik: Restriktionsenzyme und andere Nucleasen
39
.. Tab.39.1Restriktionsenzymea
Restriktionsenzym
Bam HI
Quelle und Stamm
Erkennungs- und
Schnittstellen
Enden
Bacillus amyloliquefaciens HI
5 G GATCC
5 sticky
3 CC TAG G
Eco RI
Escherichia coli RI
MluCI
Micrococcus luteus CI
Kpn I
Klebsiella pneumoniae I
Eco RV
Escherichia coli RV
5 G AATTC
5 sticky
3 CTTAA G
5
AATT
TTAA
5 GGTAC C
5 sticky
3 sticky
3 C CATGG
5 GAT ATC
blunt
3 CTA TAG
a
Beispiele typischer Restriktionsenzyme und ihre Schnittstellen sind aufgefhrt
DNA-Ligasen verbinden DNA-Stcke DNA-

Fragmente werden mittels enzymatischer Ligation
kovalent miteinander verbunden. Die Auswahl
an labortauglichen Ligasen umfasst thermolabile
und thermostabile Enzyme. Die DNA-Ligase aus
T4-Bakteriophagen, die T4-Ligase, wird am hufigsten verwendet. Das Enzym hydrolysiert bei der
Ligation ATP und stellt die Phosphodiesterbrcken
zwischen Restriktionsfragmenten wieder her, ohne
die zu vereinenden DNA-Stcke auszuwhlen:
A und B bezeichnen Enden, welche bei der Spaltung

mit zwei verschiedenen Restriktionsenzymen entstanden sind. Nur eine kleine Auswahl aller mglichen Rekombinationen ist gezeigt. berhngende
Enden mit komplementren Einzelstrangabschnitten
oder auch glatte Enden rekombinieren effizient.
Transposasen (Rekombinasen) eignen sich gut

zur In-vitro Rekombination von DNA Enzyme
dieser Art sind in vielen natrlichen Plasmiden

und Viren codiert (Plasmide als mobile genetische
Elemente; Abschn.12.1). Sie spalten die DNA bei
einer Erkennungssequenz, welche auf den beiden
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zu rekombinierenden DNA-Stcken hnlich oder

gleich ist, und ligieren die DNA-Molekle ber
Kreuz (.Abb.12.1, 12.2). Einige Enzyme dieses
Typs sind heute als gentechnische Werkzeuge gebruchlich, darunter die Cre-Rekombinase aus
P1Bakteriophagen, welche DNA an den loxP-Stellen (eine 34bp lange Erkennungsstelle mit Inverted
repeats) erkennt und rekombiniert . Das Enzym
ist derart spezifisch, dass es sich auch als Hilfsenzym zum in-vivo Einbau von DNA-Segmenten in
Chromosomenregionen mit loxP-Sequenz eignet.
Ein weiteres gebruchliches Rekombinationsenzym
ist die Integrase des (lambda)-Bakteriophagen, die
beim lysogenen Zyklus das Phagengenom ins Wirtsgenom einbaut.
39.2
Plasmide als Vektoren

(Genfhren)
Plasmide dienen als Vehikel fr den Transfer von

DNA-Segmenten in eine Zelle und ermglichen
deren molekulare Klonierung Das zu klonie-
rende DNA-Segment wird in vitro mittels Restriktionsenzymen und Ligase in Plasmid-DNA eingefgt. Solange dabei der Replikationsursprung der
Plasmid-DNA intakt bleibt, kann ein rekombiniertes Plasmidmolekl in eine Wirtszelle gebracht und
dort vermehrt werden: Die ins Plasmid eingefgte
DNA wird molekular kloniert. Die durch molekulare Klonierung amplifizierte, d.h. vermehrte DNA
kann durch Transfektion in andere Zielzellen eingefhrt und dort zur Expression gebracht werden.
Als Wirtszellen von Plasmiden werden am

hufigsten Bakterien, insbesondere das Darmbakterium Escherichia coli, verwendet Die Ver-
doppelungszeit von Bakterien in typischen Kulturen

betrgt rund 30min; entsprechend effizient amplifizieren Bakterien die DNA. Aus Sicherheitsgrnden
werden als Wirtszellen besondere Zellen eingesetzt, die defizient sind fr die Mehrzahl der Restriktionsenzyme und der dazugehrigen Methylasen. Die Plasmid-DNA wird in diesen Zellen nicht
methyliert und daher, falls sie in Wildtyp-Zellen
gert, durch Restriktionsenzyme gespalten und abgebaut. Zudem werden als Vektoren fast ausschlielich Plasmide ohne Transposase-(Rekombinase-)
Gen verwendet.
39.3
Viren als Vektoren;

Gentherapieversuche
Gewisse Bakteriophagen produzieren ssDNA
Bakteriophagen (Viren mit Bakterien als Wirtszellen; Abschn.12.2) etablierten sich schon in
den Anfngen der Gentechnik als Produzenten
einzelstrngiger DNA beispielsweise fr Sequenzierungen oder Hybridisierungen. Der M13Bakteriophage wchst in E. coli Zellen, ohne sie wesentlich zu schdigen. Die replikative Form von M13
ist eine zirkulre dsDNA, gleicht also einem Plasmid. Die virale Form des Bakteriophagen besteht
hingegen aus einer ssDNA, welche von der Zelle
als infektises Partikel mit einer Proteinhlle sezerniert wird. Defekte Viren, denen gewisse Gene,
z.B. Gene fr Replikationsenzyme, fehlen, knnen
sich mit der Untersttzung eines Hilfsvirus (Helpervirus), welches die fehlenden Gene enthlt, vermehren. Durch den Einsatz eines Helpervirus kann
die ssDNA eines unvollstndigen Bakteriophagen
(Phagemid, Wortkombination aus Bakteriophage
und Plasmid) in transfizierende, aber nichtinfektise virale Partikel verpackt werden, weil die
DNA des Phagemids die Erkennungssignale zur
Verpackung in die Partikel enthlt. Der Wechsel
von einem Plasmid-hnlichen Phagemid zu virushnlichen Partikeln mit ssDNA geschieht durch
Infektion der Wirtszelle mit dem Helpervirus. Die
Gre der in M13Bakteriophagen vermehrbaren
Genome ist recht variabel wegen der schraubenartigen Anordnung der Hllprotein-Untereinheiten, welche erlaubt, die Lnge der Partikel der Genomgre anzupassen. Die obere Grenze wird mit
10kb erreicht.
Vektoren, die aus dem (lambda)-Bakteriophagen entwickelt worden sind, knnen bis zu
14kb Fremd-DNA (Viren) oder 45kb Fremd-DNA
(Cosmide) enthalten. Cosmide (Wortkombination
aus Cohesive ends und Plasmid) sind Viren mit
stark reduziertem eigenem Genom, die sich nicht
selbstndig replizieren knnen. Das -Virus kann
lysogene oder lytische Zyklen durchlaufen. Im lysogenen Zustand wird es ber Generationen von E.
coli stabil in dessen Genom weitergegeben, ohne die
Zellen zu lysieren (Abschn.12.2). Der lytische Zyklus ist induzierbar und kann benutzt werden, um
bestimmte Zielproteine zu exprimieren.
39
505
39.5 Polymerase chain reaction PCR
Viren eukaryontischer Zellen werden in der

Zellbiologie und bei Gentherapieversuchen als
Vektoren verwendet Nach Synthese eukaryonti-
scher Proteine in Bakterien fehlen viele posttranslationale Modifikationen wie Glykosylierungen oder
Phosphorylierungen. Daher werden eukaryontische
Proteine oft auch in eukaryontischen Zellen oder
Insektenzellen mit apathogenen Virusvarianten
als Expressionsvektoren zur Expression gebracht.
Adenoviren eignen sich zur Transfektion von Sugerzellen; Baculoviren werden zur Produktion glykosylierter rekombinanter Proteine in Kulturen von
Insektenzellen (Motten) benutzt.
Die somatische Gentherapie versucht, Patienten mit einem Gendefekt durch Einbringen eines
gesunden Ersatzgens in Krperzellen zu heilen.
Mittels abgeschwchter oder apathogener Viren als
Vektoren oder durch chemisch-physikalische Transfektion (Liposomen, bzw. Mikroinjektion) werden
funktionsfhige Gene in Krperzellen eingebracht.
Gentherapieversuche am Menschen waren bisher
nur in Einzelfllen erfolgreich.
39.4
Knstliche Chromosomen
als Vektoren
Bakterielle artifizielle Chromosomen (BACs) sind

Derivate des Fertilittsfaktors von E. coli - Der
Fertilittsfaktor (F-Faktor) von E. coli spielt bei der

Konjugation zwischen einer F-Faktor tragenden
F+-Zelle und einer F-Faktor-freien F-Zelle und
dem dabei ablaufenden Transfer von genetischem
Material eine zentrale Rolle. Das F-Faktor-Plasmid
enthlt die Gene fr den F-Pilus, ein schlauchartiges Zelloberflchenanhngsel, welches den Kontakt
zu F-Zellen herstellt und den Transfer des F-Faktor-Plasmids erlaubt. Der F-Faktor kann groe
zustzliche DNA-Segmente enthalten und bis zu
einem Viertel eines Bakteriengenoms aufnehmen
(E. coli-Genom: 4,6106bp). Viele genomische
DNA-Banken (Abschn.39.6) sind als BAC (Bacterial artificial chromosomes) hergestellt und zur
Kartierung und Sequenzierung groer Genome wie
das des Menschen benutzt worden. In Hefen knnen ebenfalls artifizielle Chromosomen (YAC, Yeast
artificial chromosomes) mit sehr langen Stcken
fremder DNA eingefhrt werden (.Tab.39.2).
.. Tab.39.2 Vektoren zur Vermehrung von FremdDNA in Bakterien und Hefen

Vektor
Insertgre
Organismus
Plasmide
10kb
E. coli
M13Viren
8kb
E. coli
1225kb
E. coli
45kb
E. coli
BAC
1000kb
E. coli
YAC
1000kb
S. cerevisiae
lambda-Viren
Cosmide
(lambda-Viren)
39.5
Polymerase chain reaction PCR
Die Polymerasekettenreaktion vermehrt DNA in

vitro Das klassische Vorgehen zur Vermehrung
von DNA im Labor benutzt eine Wirtszelle zur

Replikation molekular klonierter DNA. Die Umgehung dieses Schritts mittels der PCR hat der Gentechnik groen Auftrieb verliehen, weil damit innert
Stunden im Reagenzgef einige wenige Molekle
einer DNA (bis 20kb) soweit amplifiziert werden
knnen, dass ihre gentechnische Manipulation
mglich wird (.Abb.39.1). Eine DNA-Polymerase aus einem thermophilen Organismus kopiert
die vorliegende DNA-Matrize ausgehend von zwei
synthetischen Oligonucleotid-Primern. Die Matrizen-DNA wird durch Erhitzen auf 95C in Gegenwart berschssiger Primer in Einzelstrnge dissoziiert. Der eine Primer enthlt eine kurze bekannte
Sequenz am 5-Ende des einen Strangs der ZielDNA; der andere Primer, der stromabwrts liegt,
ist komplementr zum 3 Ende desselben Strangs.
Nach dem Denaturierungsschritt wird das Reaktionsgemisch von 95C auf den Schmelzpunkt der
Primer-Matrizen-Hybride (4070C) abgekhlt, so
dass die Primer mit den zu ihnen komplementren
DNA-Einzelstrangsegmenten hybridisieren. Die
hohe Konzentration der Primer sorgt dafr, dass
nicht die zwei DNA-Einzelstrnge, sondern je ein
Einzelstrang und der zugehrige Primer hybridisieren. Sobald ein Primer einen Doppelstrang mit
seinem Matrizenstrang gebildet hat (Annealing),
wird er von der Polymerase verlngert, wodurch
der Schmelzpunkt des wachsenden Doppelstrangs
laufend ansteigt. Nun wird die Temperatur wie-
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der erhht, bis die optimale Elongationstemperatur (72C bei den gebruchlichen thermostabilen
DNA-Polymerasen) erreicht ist. Mit der vollstndigen Synthese der beiden neuen Strnge ist der
erste Polymerisationszyklus abgeschlossen. Die
folgenden Zyklen bestehen wiederum aus den drei
Teilschritten: Denaturierung, Annealing und Synthese. Schon nach dem dritten Zyklus von Erhitzen
und Abkhlen liegt eine kurze dsDNA vor, welche
von den beiden Primern begrenzt ist und die nun
in weiteren Zyklen vermehrt wird (.Abb.39.1).
Das ausgewhlte Segment der vorliegenden Matrizen-DNA huft sich exponentiell an, seine Konzentration kann in einer PCR bis 109-fach anwachsen.
In der Praxis werden die Matrizen-Molekle so oft
kopiert, bis einige Mikrogramm DNA vorliegen.
Diese DNA-Menge erlaubt, alle gngigen Experimente der Gentechnik durchzufhren. Wichtig: Die
Spezifitt der Reaktion erlaubt es, ein bestimmtes
DNA-Segment im Gemisch der gesamten zellulren
DNA gezielt zu amplifizieren!
Die PCR lsst sich vielfltig einsetzen Am
hufigsten wird die PCR fr die Amplifikation spezifischer DNA-Segmente verwendet. Die Technik
taugt aber auch fr zahlreiche andere Zwecke. Mittels PCR knnen Schnittstellen fr Restriktionsenzyme an den 5-Enden der PCR-Primer eingebaut werden, womit die Restriktionsspaltung des
PCR-Produkts und die nachfolgende Ligation mit
beliebigen passenden Restriktionsfragmenten mglich wird. Durch die PCR knnen DNA-Stcke auch
ohne Restriktion und Ligation zusammengefgt
werden. Immer wenn ein DNA-Stck an seinem
Ende eine Sequenz von wenigstens etwa 20Basen
besitzt, welche identisch mit einem Stck einer
.. Abb.39.1Polymerasekettenreaktion PCR. In einem programmierbaren Heiz- und Khlgert, dem Thermocycler, wird
mit Hilfe einer thermostabilen DNA-Polymerase und zweier
zum Plus- bzw. Minus-Strang passender Primer-Oligonucleotide eine Matrizen-DNA abgelesen und vielfach kopiert. Der
Thermocycler enthlt einen Heiz- und Khlblock zur Temperaturkontrolle. Reaktionsvolumina von 50L in dnnwandigen Plastikgefen garantieren das rasche Aufheizen und
Abkhlen des PCR-Ansatzes. Nach 25Zyklen ist die Zielsequenz 106-fach amplifiziert worden. Die neu synthetisierten
DNA-Stcke erstrecken sich von Primer zu Primer
507
39.5 Polymerase chain reaction PCR
anderen DNA ist, knnen diese beiden DNA-Segmente mittels PCR miteinander gespleit werden.
Eine Insertion, Deletion oder Ersatzsynthese (neues
DNA-Segment ersetzt vorhandenes DNA-Segment)
eines beliebigen DNA-Segments in einen Vektor
(Plasmid) ist auf diese Weise einfach zu erreichen.
PCR-Fragmente mit besonders zu diesem
Zweck hergestellten langen (>9 Basen) komplementren Sticky ends knnen durch in-vitro Annealing rekombiniert werden. Die Hybride sind
gengend stabil, um die Transfektion in E. coli-Zellen unbeschadet zu berstehen und anschlieend
in der Zelle zu intakter dsDNA repariert zu werden.
Mit Techniken, welche gengend lange Sticky ends
ergeben, lsst sich DNA also sehr einfach und an
beliebiger Stelle rekombinieren. Vor kurzem sind zu
diesem Zweck das Ligation-independent cloning LIC
und die Gibson-Reaktion entwickelt worden.
Fr die LIC-Methode wird eine modifizierte
DNA-Polymerase aus dem Bakteriophagen T4
benutzt, welche ausgeglichene Polymerase- und
3-Exonucleaseaktivitten aufweist. Besteht das
ursprnglich doppelstrngige 12bp lange Segment
einer geplanten Sticky-end-Region eines PCR-Fragments nur aus 3 der 4 mglichen Basen, kann einer der beiden Strnge der Sticky-end-Region in
3-5-Richtung selektiv abgebaut werden: Neben
dem PCR-Fragment enthlt die Reaktionslsung
T4-DNA-Polymerase und das eine Nucleotid, welches in den abzubauenden Teilen der Sticky end-Regionen fehlt. Unter diesen Bedingungen wird durch
die 3-Exonucleasenaktivitt der Polymerase der
eine DNA-Strang vom 3-Ende her abgebaut, bis
das Enzym beim ersten Nucleotidrest, welcher dem
freien Nucleotid in der Reaktionslsung entspricht,
stehen bleibt.
Die Gibson-Reaktion
erlaubt die in-vitro
Rekombination von DNA-Stcken an passenden
Sequenzabschnitten. Drei Enzyme besorgen den
Splei- und Reparaturvorgang: Die thermolabile
T5 5-Exonuclease bleibt bei der Reaktionstemperatur von 50C nur kurzfristig aktiv, entfernt die
5-Enden der zu verbindenden DNAs und bildet so
3-Einzelstrangberhnge von etwas ber 100Basen Lnge. Passt die Nucleotidsequenz an einem
Ende einer DNA zu einem Sequenzabschnitt am
Ende eines anderen DNA-Fragments, so hybridi-
39
sieren die beiden 3-berhnge und deren Enden

werden durch eine thermostabile DNA-Polymerase verlngert, so dass wieder ein Doppelstrang
entsteht. Die noch fehlenden Phosphodiesterbrcken werden durch eine thermostabile NAD+-abhngige Ligase geschlossen. Die Gibson-Reaktion
ist sehr robust und hat die korrekte Rekombination von 11 verschiedenen BAC aus synthetischer
DNA zu einem funktionellen bakteriellen Genom
ermglicht.
Mit PCR lsst sich Matrizen-DNA oder -RNA
quantitativ bestimmen Bei der quantitativen
PCR (qPCR) wird dem PCR-Ansatz ein DNA-bin-
dender Fluoreszenzfarbstoff beigemischt, der nach

Bindung an DNA strker fluoresziert. Die fortwhrende Synthese des PCR-Fragments lsst sich
anhand der stetigen Zunahme der Fluoreszenz
in Echtzeit verfolgen. Je frher ein Anstieg der
Fluoreszenz beobachtet wird, desto mehr Matrizen-DNA (oder -RNA) lag zu Beginn der PCR vor;
Kalibrierung mit Anstzen bekannter Konzentration erlauben, die Nucleinsure quantitativ zu bestimmen. Die Technik wird auch als Real-time-PCR
bezeichnet und eignet sich zur Bestimmung sehr
niedriger DNA-Konzentrationen. Zur Bestimmung
von mRNA wird nach reverser Transkription die
entstandene DNA amplifiziert (RT-PCR).
Als letzte Anwendung der PCR sei die rasche
in-vitro Synthese eines Proteins durch gekoppelte
Transkription und Translation (Coupled transcription-translation) erwhnt (in-vitro Translation;
Abschn.39.9). Die PCR-Primer enthalten hierzu
sowohl das Startsignal fr eine RNA-Polymerase
(z.B. den Promotor der RNA-Polymerase aus dem
Bakteriophagen T7) als auch eine Bindungsstelle
fr bakterielle Ribosomen. Auerdem entspricht
die Sequenz des Primers, welcher am 5-Ende des
+Strangs des PCR-Produkts liegt, der Region des
Initiator-Codons fr das gewnschte Protein. Der
Primer am 3-Ende enthlt das Stoppcodon gefolgt
von einem Transkriptionsterminator-Signal. Das
PCR-Produkt (Matrize ist die cDNA, welche das
Protein codiert) wird nach Zugabe eines bakteriellen Zellextrakts, der T7-RNA-Polymerase und
der notwendigen Substrate in mRNA transkribiert.
Die mRNA dient als Matrize zur Synthese des gewnschten Proteins im gleichen Ansatz. Die Me-
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Wirtsgenom
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.. Abb.39.2 Herstellung genomischer DNA-Banken und cDNA-Banken. Die zu rekombinierenden DNA-Fragmente sind entweder genomische Restriktionsfragmente oder cDNAs, die durch reverse Transkription der Gesamt-mRNA von Zellen gewonnen
worden sind. Nach Insertion in ein entsprechend gespaltenes bakterielles Plasmid werden die rekombinanten Molekle in
Bakterien transfiziert und als Passagiere der transformierten Zellen vermehrt
thode ermglicht die Bereitstellung von einigen wenigen Milligramm Protein, d.h. gengend Material
fr funktionelle Untersuchungen.
ist, beliebig vermehrbar als Passagier dieser Zelle

(.Abb.39.2).
39.6
sind durch Introns unterbrochen und lassen sich

deshalb nicht in Bakterien exprimieren. Das Problem wurde gelst durch die Entdeckung der in Retroviren vorkommenden reversen Transkriptasen.
Die reifen, gespleiten mRNAs werden isoliert und
durch reverse Transkription in cDNAs umgesetzt
(.Abb.39.3), wodurch die Produktion der Proteine
in Bakterien mglich wird.
Genbanken: cDNA
und genomische DNA
Eine Sammlung vieler Einzelmolekle, welche in

Zellen kloniert sind, wird als Bibliothek (Library)
oder Bank (Bank) bezeichnet Wird ein Gemisch
von Fremd-DNA-Fragmenten mit einem bestimmten Typ von Vektormolekl in Bakterienzellen

eingebracht, so etabliert sich pro Zelle nur je ein
DNA-Molekl. Solche Zellen knnen als Gemisch
(Genbank) vermehrt werden. Jedes Fremd-DNAFragment ist bei nachfolgender Aussonderung
(Klonierung) der Einzelzelle, in der es enthalten
Die Verwendung von cDNA erleichtert die

Analyse und Expression eukaryontischer Genprodukte Die meisten Gene eukaryontischer Zellen
cDNA-Banken enthalten revers transkribierte

Kopien eines ganzen Ensembles von mRNAs
Die meisten mRNAs hherer Zellen zeichnen sich

durch einen Poly(A)-Schwanz am 3-Ende aus und
hybridisieren mit synthetischen (dT)-Oligonucleo-
509
39.6 Genbanken: cDNA und genomische DNA
39
.. Abb.39.3 Synthese doppelstrngiger

cDNA durch reverse Transkription von mRNA.
Poly(A)-haltige mRNA wird meist mit synthetischen Oligo(dT)-Oligonucleotiden von 812Basen Lnge hybridisiert und danach als Matrize fr
die reverse Transkriptase zur Synthese des ersten
Strangs der cDNA verwendet. In einem zweiten
DNA-Synthese- und DNA-Reparaturschritt wird
die mRNA im DNA-RNA-Hybridstrang verdaut
und durch DNA ersetzt. Nach der Transfektion
in ein Wirtsbakterium werden verbliebene Ribonucleotide durch Desoxyribonucleotide ersetzt
tiden von 812 Basen Lnge. Die angelagerten

(dT)-Oligonucleotide werden von der viralen reversen Transkriptase an ihrem 3-Ende verlngert.
Die mRNA wird somit in einen komplementren
cDNA-Strang revers transkribiert (.Abb.39.3).
Der mRNA-Strang im RNA-DNA-Hybrid wird anschlieend durch DNA ersetzt: RNase H baut den
RNA-Strang in RNA-DNA-Hybriden zu kurzen
Stcken ab. Das Zusammenwirken dieses Enzyms
mit DNA-Polymerase und NAD+-abhngiger Ligase
setzt die RNA in DNA um. Die restlichen RNA-Primer werden durch das Korrekturlesen (3-Exonuclease) der DNA-Polymerase eliminiert und durch
DNA ersetzt.
In der Regel wird als Matrize zur cDNA-Synthese ein Gemisch von mRNAs eingesetzt, das aus
bestimmten eukaryontischen Zellen isoliert worden
ist. Das Produkt der Synthese ist in diesem Fall ein
Gemisch verschiedener cDNAs und ergibt nach
Ligation mit einem geeigneten Vektor und Transfektion in Bakterien eine cDNA-Bank, welche die
Gesamtheit der in den Zellen gebildeten polyadenylierten mRNAs reprsentiert.
Zur Herstellung einer genomischen Bank, welche das gesamte Genom einer Spezies enthlt,
wird das Zielgenom fragmentiert und in Bakterienklone eingebaut Die genomische DNA eines
Organismus wird durch ein Restriktionsenzym in

Fragmente geeigneter Gre gespalten, in einen
Vektor ligiert und zur Transformation von Bakterien verwendet. Zur Abdeckung eines menschlichen Genoms (3106kb) mit einer Genbank, in
der ein bestimmtes Gen mit 99%iger Wahrscheinlichkeit vorhanden ist, werden rund 800000Klone
von durchschnittlich 17kb Lnge bentigt (total
14106kb).
Die gesuchte DNA kann mittels Hybridisierung mit einer DNA- oder RNA-Sonde aus einer
Bank isoliert werden Das Hauptproblem der
DNA-Klonierung besteht in der Suche nach der

Stecknadel im Heuhaufen: Es gilt, den Klon mit
dem gesuchten DNA-Abschnitt in einer DNA-Bank
mit etwa einer Million Klone zu finden. Die Zellen
mit den verschiedenen Plasmiden oder Viren einer
DNA-Bank werden in verdnnter Suspension auf
der Oberflche eines Agargels aufgetragen, so dass
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sich aus den vereinzelten Zellen nach wiederholten Teilungen Kolonien bilden, welche einem Klon
entsprechen. Mit einer DNA-bindenden Folie wird
auf der Oberflche der Agarplatte ein Abklatsch der
Klone hergestellt. Die an der Folie haftenden Zellen
werden in situ lysiert, worauf ihre DNA an die Folie bindet. Die hohe Spezifitt der DNA-DNA- und
RNA-DNA-Hybridisierung erlaubt mit einem etwa
20Basen langen z.B. radioaktiv markierten Oligonucleotid als Sonde die gesuchten Klone auf der
Folie zu identifizieren. Die radioaktive Oligonucleotidsonde reichert sich nur an denjenigen Stellen der
Folie an, wo sich zu ihr komplementre DNA befindet (Koloniehybridisierung, Colony hybridization) Nach dem Wegwaschen der berschssigen
radioaktiven Sondenlsung werden die radioaktiven Stellen mit Rntgenfilm oder Radioaktivittsdetektoren lokalisiert. Die Position der markierten
Kolonien in der Ursprungskultur ist damit bekannt,
und die Zellklone knnen weiter vermehrt werden.
Genbanken, deren DNA-Segmente alle fr
die Expression der klonierten cDNAs notwendigen Signale enthalten (Promotor, Ribosomenbindungsstelle, Start- und Stoppcodon, Transkriptionsterminator), ermglichen die Expression der
Genprodukte in entsprechenden Wirtszellen
Nach der Expression einer cDNA-Bank kann ein

bestimmtes Genprodukt, beispielsweise ein Enzym,
unter den vielen exprimierten Proteinen aufgrund
seiner Aktivitt identifiziert werden. Die Verwendung mutierter Zellen, welche das entsprechende
zelleigene Enzym nicht exprimieren, erleichtert die
Suche nach dem DNA-Segment mit dem Gen des
gesuchten Enzyms. Zellen mit einem Stoffwechseldefekt wachsen zwar auf reichen Medien, welche
das Produkt der Enzymreaktion enthalten, knnen
aber auf einem Minimalmedium ohne das Produkt
oft nicht wachsen. Nur wenn in die defizienten Zellen die cDNA oder das Gen, welche(s) das fehlende
Enzym codiert, aus der Genbank wieder eingefhrt
worden ist, knnen sie sich auf dem Minimalmedium vermehren. Die gewnschten Zellen lassen
sich natrlich auch durch direkten Nachweis der
enzymatischen Aktivitt oder die Bindung von Antikrpern identifizieren.
Bei teilweise bekannter Nucleotidsequenz

des gesuchten Klons kann die PCR zum Nachweis des Klons herangezogen werden Oft
werden DNA-Banken in Mikrotiterplatten gelagert. Von solchen Platten knnen Replikate hergestellt werden. Einige wenige Zellen aus einer
Vertiefung einer solchen Platte gengen als Substrat fr eine PCR, welche ein Genstck nur dann
amplifiziert, wenn die zu spezifischen Primern
passende Matrize vorhanden ist. Es sind also nur
zwei spezifische synthetische Primer, welche das
offene Leseraster (Open reading frame ORF) des
gesuchten Proteins einschlieen, herzustellen und
durch PCR mit diesen Primern diejenigen Klone
zu suchen, welche in einer Kontrolle mit Agarose-Gelelektrophorese das PCR-Produkt mit der
erwarteten Lnge ergeben.
39.7 Bestimmung
der Nucleotidsequenz von DNA
Die Aminosuresequenz eines Proteins wird am

einfachsten ber die Sequenzierung der cDNA
ermittelt Wegen mglicher posttranslationaler
Modifikationen verlangt die Aufklrung von Struktur-Funktionsbeziehungen eines Proteins oft die
Kenntnis der chemisch bestimmten Aminosuresequenz. Fr andere Zwecke, wie die Suche nach
Homologien (Abschn.2.5), gengen die aus den
rasch bestimmbaren (und in vielen Fllen bereits
in Datenbanken vorliegenden) Nucleotidsequenz
abgeleiteten Aminosuresequenzen.
Die leistungsfhigsten DNA-Sequenzierautomaten haben eine Kapazitt von etwa 109Basen
pro Tag (menschliches Genom 3109bp). Es gibt
eine Reihe von Mglichkeiten, die Nucleotidsequenz von DNA zu bestimmen . Wir beschrnken uns hier auf die Methode nach Sanger, die
hufig fr die gezielte Bestimmung kurzer Sequenzabschnitte verwendet wird. Ein synthetischer Primer wird an die Ziel-DNA hybridisiert
und mittels einer DNA-Polymerase verlngert. Bei
dieser Reaktion ist den 4Desoxyribonucleotidtriphosphaten ein Ribonucleotidtriphosphat in niedriger Konzentration beigemischt, welchem nicht
nur in 2-Stellung sondern auch in der 3-Position
des Riboserings die Hydroxylgruppe fehlt. Falls
dieses 2,3-Didesoxyribonucleotid durch die Polymerase in eine DNA-Kette eingebaut wird, kann
diese nicht durch eine 3-5-Phosphodiesterbrcke
511
39.8 Southern, Northern und Western blotting
39
.. Abb.39.4 Bestimmung der Nucleotidsequenz von DNA. Die 4 verschiedenen Fluorophore, welche die in der Kapillare des
Sequenziergerts elektrophoretisch aufgetrennten DNA-Fragmente markieren, werden durch Laserlicht angeregt. Die Fluoreszenzintensitt wird bei den entsprechenden Wellenlngen als Funktion der Elutionszeit registriert. Aus der zeitlichen Abfolge
der nucleotidspezifischen Signale ergibt sich die Nucleotidsequenz. Eine DNA wird meist erst dann als korrekt sequenziert
betrachtet, wenn wenigstens die Sequenzen beider Strnge der DNA unabhngig voneinander bestimmt worden sind. Um die
Fehlerhufigkeit in der Sequenz zu minimieren, werden genomische Sequenzen heutzutage mittels Hochdurchsatz-Sequenzierung 30-fach und mehr bestimmt (Deep sequencing)
mit dem nchsten Nucleotid verbunden werden,

es erfolgt daher ein Kettenabbruch. Bei jedem
Verlngerungsschritt wird jedoch nur ein geringer Teil der DNA-Ketten nicht weiter verlngert;
in den meisten Ketten wird das in hherer Konzentration vorliegende normale 2-Desoxyribonucleotid eingebaut. Werden alle vier Didesoxyribonucleotide (ddATP, ddCTP, ddGTP, ddTTP)
eingesetzt, ergeben sich bei jedem Verlngerungsschritt Kettenabbrche bei einem Teil der
wachsenden DNA-Ketten. Fr die automatisierte
DNA-Sequenzierung nach Sanger werden die vier
Didesoxyribonucleotide mit vier verschiedenen
Fluoreszenzfarbstoffen markiert. Das sich ergebende Gemisch modifizierter DNA-Stcke wird
nun mittels Elektrophorese in Polyacrylamidgel
enthaltenden Kapillarschluchen nach Gre aufgetrennt. DNA-Fragmente bis etwa 1000Nucleotide Lnge knnen mit einer Auflsung von einem
einzigen Nucleotid voneinander getrennt werden.
Am Ende der Kapillare werden die Fluorophore
mit einem Laser angeregt und deren Emission laufend bestimmt. Immer wenn ein DNA-Fragment
einer bestimmten Lnge den Laserstrahl passiert,
emittiert es dasjenige Licht, welches dem Fluorophor des Kettenabbruch-Nucleotids entspricht.
Die Abfolge der Emissionspeaks (Spitzenwerte
der Emission) der vier verschiedenen Markierungen ergibt die Nucleotidsequenz der untersuchten
DNA (.Abb.39.4).
39.8
Southern, Northern
und Western blotting
Die auf Gelplatten aufgetrennten Proben werden

zum Nachweis durch Blotting auf Trgerfolien
bertragen Nach Elektrophorese liegen DNA-,
RNA- oder Proteingemische aufgetrennt in den

Gelen vor. Die ins Gel eingebetteten Trennprodukte lassen sich nicht leicht direkt analysieren, was
Anlass gab zur Entwicklung von Blottingverfahren
(engl. to blot, einen Abklatsch, z.B. mit Lschpapier, Blotting paper, herstellen): Southern blots fr
DNA, Northern blots fr RNA und Western blots
(Immunoblots) fr Proteine (.Abb.39.5). Das
Southern blotting war das zuerst entwickelte Verfahren und ist nach seinem Erfinder E.M. Southern benannt, die Bezeichnungen der zwei anderen, spter
entwickelten Verfahren sind Wortspiele.
Vor dem Blotting werden die Makromolekle
auf Agarose-Gelplatten (DNA und RNA) oder Polyacrylamidgelen (Proteine) aufgetrennt. Danach
wird das Bandenmuster senkrecht zur Gelflche
mittels Kapillarsaugkraft (DNA, RNA) oder Elektrophorese (Proteine) auf Nitrocellulose- oder Kunststoff-Folien (z.B. Nylon) bertragen. Die aufgetrennten Molekle binden an die Folie und werden
anschlieend spezifisch nachgewiesen durch Hybridisierung mit markierten Sonden (DNA, RNA)
bzw. mit Massenspektrometrie oder Antikrpern
(Proteine).
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Autoradiographie, Immunfrbung
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.. Abb.39.5 Blotting-Verfahren zur bertragung von RNA, DNA oder Proteinen von Gelen auf Trgermembranen. Neben den
gezeigten typischen Verfahren werden zahlreiche Varianten verwendet mit anderen Geltypen, anderen Frbungen wie dem
Nachweis der Glykosylierung oder RNA-Sonden anstelle von DNA-Sonden. Die bertragung der Banden aus dem Gel auf die
Trgermembran erfolgt meist mittels Flssigkeits-Saugverfahren oder durch Elektrophorese
39.9
Expression rekombinanter
Proteine und RNAs
Rekombinante Proteine sind wichtige Produkte

der Gentechnik Proteine haben wichtige kataly-
tische, regulatorische und strukturelle Funktionen

und finden daher breite medizinische und technische Verwendung. Dank der Gentechnik kann der
hufig sehr aufwndige Weg der Isolierung eines
Proteins aus Organen vermieden werden, indem das
Protein in leicht erhltlichen, billig kultivierbaren
Organismen, z.B. Bakterien- oder Hefezellen anstelle von Sugetieren, hergestellt wird. Humaninsu-
lin gehrt zu den ersten Produkten, welche auf diese

Weise hergestellt worden sind. Der heutige Bedarf
an Insulin knnte mit Schlachttieren gar nicht mehr
gedeckt werden. Eine Auswahl in der Medizin verwendeter gentechnisch hergestellter Proteine und
Peptide gibt .Tab.39.3.
Mit Hilfe von Viren lsst sich eine sehr hohe
Expression von Zielgenen erreichen Viren sind
darauf spezialisiert, in Wirtszellen Regie zu fhren;

ihre Gene werden in manchen Fllen stark berexprimiert. Die entsprechenden Steuersignale und
Produktionsenzyme, welche durch die virale DNA
codiert sind, lassen sich denn auch mit Vorteil zu
513
39.9 Expression rekombinanter Proteine und RNAs
39
.. Tab.39.3 Beispiele gentechnisch hergestellter und als Arzneimittel zugelassener Proteine und Peptide
Arzneimittel
Indikation
Humaninsulin
Diabetes mellitus Typ1
Menschliches Wachstumshormon
Substitution bei Mangel des Hormons
Impfstoff gegen Hepatitis A
Prophylaxe
Impfstoff gegen Hepatitis B
Prophylaxe
Interferon 2a
Haarzellenleukmie, Kaposi-Sarkom
Interferon 2b
Haarzellenleukmie, Kaposi-Sarkom
Gewebe-Plasminogenaktivator (tPA)
Akuter Myokard- oder Hirninfarkt, Lungenembolie
Erythropoietin
Anmie bei Niereninsuffizienz oder zytostatischer Therapie
Glucocerebrosidase
Morbus Gaucher (Lipidspeicherkrankheit)
Humaner Granulozyten/Makrophagen-Koloniestimulierender Faktor (hGM-CSF)
Autologe Knochenmarkstransplantation
Trastuzumab (humanisierter monoklonaler Antikrper,

rekombinantes Fc-Fragment)a
Mammakarzinom mit berexpression eines EGF-Rezeptors

(Rezeptor-Tyrosinkinase)
BlutgerinnungsfaktorVIII
Hmophilie A
BlutgerinnungsfaktorIX
Hmophilie B
Produziert in Kulturen von immortalisierten Chinese hamster ovary (CHO)-Zellen, einer hufig verwendeten Zelllinie
zur Synthese rekombinanter humanisierter Proteine.
gentechnischen Zwecken einspannen, z.B. produziert die RNA-Polymerase des Bakteriophagen T7

groe Mengen von RNA. Der hierfr verantwortliche T7-Promotor lsst sich vor jedes beliebige
Gen setzen, worauf das Gen derart stark exprimiert
wird, dass das entsprechende Protein ein Drittel des Gesamtproteins der Wirtszelle ausmachen
kann. Diese extreme berexpression schdigt die
Wirtszelle, daher wird in der Wachstumsphase der
Zellen das Expressionssystem durch einen starken
Repressor gehemmt. Erst wenn die Zellpopulation
eine hohe Dichte erreicht hat, wird ein Induktor fr
die Expression zugesetzt. Primr hngt die Strke
der Expression des Zielgens vom Expressionssystem
ab. Wirtszellen mit vorteilhaften Mutationen (z.B.
mehrfachem Proteasemangel, um den Abbau der
Zielproteine zu verhindern) verbessern die Expression zustzlich.
In-vitro Translation liefert rekombinante Proteine ohne Zellen Zur Herstellung von Zellext-
rakten, welche die zur Translation exogener mRNA

notwendige Maschinerie enthalten, wird die endo-
gene mRNA mit einer Ca2+-abhngigen Nuclease

aus Bakterien verdaut. Nach Inaktivierung der Nuclease durch einen Ca2+-Ionen bindenden Chelatbildner kann exogene mRNA zur Translation zugegeben werden. Extrakte von Bakterien wie auch von
Sugerzellen knnen auf diese Weise zur in-vitro
Translation verwendet werden.
Gene lassen sich durch gezielte Expression
von Antisense-RNA oder dsRNA spezifisch hemmen Zur Translation durch Ribosomen muss die
mRNA in einzelstrngiger Form vorliegen. Durch

genetische Manipulation kann eine Zielzelle dazu
gebracht werden, Antisense-RNA zu produzieren,
d.h. RNA, welche komplementr zu einer bestimmten mRNA ist. Die Antisense-RNA bildet mit
dem passenden endogenen mRNA-Segment ein
dsRNA-Hybrid. Dieses dsRNA-Hybrid kann nicht
translatiert werden und stoppt die Synthese des entsprechenden Proteins.
Ein zweites, wegen seiner hohen Zuverlssigkeit
oft verwendetes Mittel zur Unterdrckung der Gen
expression, bietet die RNA-Interferenz (RNAi): Das
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Gen-Silencing wird durch die Transfektion einer dsRNA mit Teilen der mRNA-Sequenz des Zielgens
ausgelst. Das zelleigene RNA-Interferenz-Abwehrsystem gegen viralen Befall erkennt die dsRNA und
baut die mRNA ab (Abschn.11.3).
39.10 Gezielte
und zufllige
Mutagenese
Gezielte Mutagenese (Site-directed mutagenesis) verndert die DNA an einer vorbestimmten

Stelle auf vorbestimmte Weise Die Kenntnis der
Raumstruktur sowie der biologischen und biochemischen Eigenschaften eines Proteins erlauben, Hypothesen ber dessen molekularen Wirkungsmechanismus aufzustellen. Die postulierte Funktion
eines Aminosurerests lsst sich mittels gezielter
Mutagenese berprfen; in einem iterativen Zyklus
von Hypothese und experimenteller berprfung
mittels Punktmutationen lassen sich Struktur-Funktions-Beziehungen klren.
Die gezielte Mutation eines Plasmids ist recht
einfach zu erreichen. Meist wird ein die geplante
Mutation enthaltendes Primer-Oligonucleotid
synthetisiert und die Mutation mittels PCR in die
Ziel-DNA eingebaut. Die amplifizierte DNA lsst
sich mit verschiedenen Methoden in ein Plasmid
einfgen (Restriktion-Ligation, LIC-Methode, Gibson-Reaktion, Rekombination, u.a.m.). Techniken
dieser Art werden seit vielen Jahren angewandt, um
Proteine mit bestimmten Mutationen in Bakterien
herzustellen.
Die gezielte Mutation eines zellulren Genoms
ist ein wesentlich schwierigeres Unterfangen. Erst in
den letzten Jahren ist mit dem CRISPR-Cas9-System
eine Mglichkeit gefunden worden, welche erlaubt,
die DNA einer Zelle an einer genau bestimmten
Stelle zu zerschneiden, worauf sich das mutierte
DNA-Segment an diesem Ort mit Hilfe zelleigener
Rekombinationsmechanismen einfgen lsst. Sowohl das mutierte DNA-Segment als auch das Gen
fr eine Endonuclease (Cas9), ein mit Hilfe einer
synthetischen Leit-RNA (small guide RNA sgRNA)
an die Zielsequenz hybridisierendes Ribonucleoprotein, werden durch Transfektion/Mikroinjektion in
die Zielzelle gebracht. Das Cas9-sgRNA-Ribonucleoprotein kann nicht nur zum przisen Schneiden von
DNA oder RNA sondern auch, mit enzymatisch inaktiver Endonuclease, zur Frderung bzw. Hemmung
der Expression eines bestimmten Gens eingesetzt
werden. Die Ortsspezifitt wird ber denjenigen Teil
der synthetischen sgRNA vorgegeben, welcher als
Einzelstrang vorliegt, whrend ein weiterer Teil der
sgRNA als Palindrom ebenfalls ans Cas9-Protein bindet. Das Ribonucleoprotein Cas9-sgRNA ist aus einem in Bakterien und Archaea vorkommenden System zur Abwehr fremder Nucleinsuren entwickelt
worden. Die Information aus frheren Kontakten mit
fremden Nucleinsuren wird im Genom als Clustered regularly interspaced palindromic repeats CRISPR
gespeichert und bei einem spteren Kontakt zur Erkennung und Abwehr eingesetzt; das CRISPR-associated protein 9 Cas9 und daran gebundene von den
CRISPR-Sequenzen transkribierte guide-RNA bauen
die fremden Nucleinsuren ab.
Zufallsmutagenese kombiniert mit Selektion
imitiert die molekulare Evolution Als Alternative
zur gezielten Mutagenese knnen Zufallsmutationen (Random mutations) eingefhrt werden. Ge-
mische zufllig mutierter Plasmide werden in Zellen transfiziert und in Banken gehalten. Klone mit
bestimmten Effekten einzelner Mutationen knnen
durch geeignete Selektionsverfahren aus der Bank
angereichert werden. Hierzu eignen sich die in
Abschn.39.11 aufgefhrten Display-Verfahren.
Reverse Genetics: mit Zufallsmutagenese vom

Phnotyp zum Genotyp Verschiedene Wege fh-
ren von einem vernderten Phnotyp zum verursachenden Gen; im Folgenden wird ein typisches
Beispiel des Vorgehens geschildert.
Gesucht sei das Gen eines bestimmten Stoffwechselenzyms. Eine Kultur von Bakterienzellen
wird mit dem hyperaktiven Transposon T5 (Abschn.8.4) transformiert. Da das Transposon an beliebigen Stellen der zellulren Genome eingebaut
wird, entstehen Zellen mit verschiedenen mutierten
Genomen. Gewisse Klone werden infolge Insertion
im gesuchten Gen das entsprechende Stoffwechseldefizit aufweisen und daher nur auf einem Medium
wachsen, welches das Produkt der vom Enzym katalysierten Reaktion enthlt, nicht jedoch auf einem
Medium ohne diese Komponente. Der Ort der Insertion und damit das gesuchte Gen knnen durch
vom Transposon ausgehende Sequenzierung dieser
Klone identifiziert werden.
39
515
39.11Phage and ribosome display
.. Abb.39.6 Phage display von Proteinen.

Die gesuchten Display-Bakteriophagen
werden durch wiederholtes Durchlaufen
des hier dargestellten Panning-Zyklus
angereichert. Nach 3 bis 5Panning-Zyklen
werden einzelne Phagen kloniert und weiter untersucht. Vielfach wird auf dieser Stufe die Nucleotidsequenz der Fremd-DNA in
den angereicherten Phagen bestimmt
Erneute
Selektionsrunde
Gemisch von
Phagen, z. B.
cDNA-Bank
Binden,
Waschen:
Spezifische
Adsorption
passender
Phagen
Vermehrung der
angereicherten
Phagen
Infektion von
Wirtsbakterien
39.11
Prsentation von Genprodukten

auf Bakteriophagen
(Phage display) oder Ribosomen
(Ribosome display); gerichtete
molekulare Evolution
Expression eines Genprodukts als Fusionsprotein mit einem Hllprotein eines Bakteriophagen
koppelt Phnotyp an Genotyp Die Technik des
Phage display erlaubt, ein Gen, welches ein Protein
mit bestimmten Eigenschaften codiert, rasch zu

isolieren. Dazu stellt man Genbanken in Bakteriophagen (z.B. M13) her, in welchen das Leseraster
der interessierenden Proteine mit dem Leseraster
eines der Hllproteine (Coat proteins) fusioniert ist,
so dass die Transkription die mRNA des entsprechenden Fusionsproteins ergibt. Das Fusionsprotein
erscheint auf der Hlle des fertigen Bakteriophagen,
whrend sein Gen im Innern des Viruspartikels verpackt ist. Weil unter den gewhlten Bedingungen
jeweils nur ein einziger Bakteriophage eine Zelle befllt, bleibt diese Koppelung zwischen dem Gen und
dem Phn (Protein) auch whrend der Vermehrung
Elution der
angereicherten
Phagen
der Viren bestehen. Dank der Koppelung von Phn

und Gen lassen sich z.B. die Gene von Antikrpern
isolieren, welche an ein bestimmtes Antigen binden.
Zuerst wird eine Phage-display-Genbank mit vielen
verschiedenen Antikrpervarianten hergestellt. Die
Phagen dieser Bank, welche an ein bestimmtes Antigen binden, werden angereichert (z.B. durch Affinittschromatographie) und danach durch erneute
Infektion in Bakterien vermehrt (.Abb.39.6). Das
Anreichern der Antigen bindenden Phagen wird als
Panning (engl. to pan, Gold auswaschen) bezeichnet.
Die Affinitt der Antikrper lsst sich mittels
gerichteter molekularer Evolution verbessern: Die
Antikrpergene werden einer Zufallsmutagenese
unterworfen und danach wiederum mittels Panning
angereichert. Wiederholte Zyklen von Zufallsmutagenese-Panning-Amplifikation ergeben Antikrper
mit hoher Affinitt.
Ribosome-Display eines Genprodukts koppelt
ebenfalls Phnotyp mit Genotyp cDNA-Banken
werden in vitro zu mRNA-Gemischen transkribiert, die anschlieend durch gereinigte Riboso-
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Promotor
1
RT-PCR
DNA
In-vitro
Transkription
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4
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RNA-Isolierung
In-vitro
Translation
Waschen
Translation
beendet
5
5
Protein mit
Bindungsstelle
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mRNA
Oberflchengebundener
Ligand
.. Abb.39.7 Ribosome display von Proteinen
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men translatiert werden (.Abb.39.7). Wegen des

fehlenden Stoppcodons wird das Protein vom Ribosom nicht freigesetzt und bleibt mit dem Ribosom-mRNA-Komplex verbunden. Somit erlaubt
auch diese Technik die rasche Anreicherung einer
Nucleinsure (mRNA in diesem Fall) aufgrund einer bestimmten Eigenschaft des codierten Proteins.
Durch Panning wird die gesuchte mRNA isoliert
und durch RT (Reverse transcription)-PCR amplifiziert. Auch Ribosome-Display eignet sich fr gerichtete molekulare Evolution.
39.12 Klonierung
von Zellen
und Organismen; transgene
Organismen
Die Klonierung von Zellen erlaubt die Vermehrung genetisch einheitlicher Populationen und
erleichtert damit die Analyse von Zellmaterial
Die molekulare Klonierung von DNA ist in Abschn.39.6 behandelt; hier geht es um die Klonierung
von Zellen und Organismen. Die Isolierung von
Kolonien aus Einzelzellen nach dem Aufwachsen
stark verdnnter Zellsuspensionen auf Agargelen in
Kulturschalen ist eine der gebruchlichsten Techniken zur Klonierung von Mikroorganismen. Ganz
hnlich werden auch hhere Zellen nach starker
Verdnnung in geeigneten Kulturgefen zu Klonen herangezchtet.
Zur Klonierung hherer Organismen wird ein
somatischer Zellkern in eine entkernte Eizelle eingebracht Oozyten lassen sich schonend entkernen
und mit einem fremden Kern besetzen: Zellen werden auf einem Sieb aus Kunststoffgewebe mit einer
Porenweite, welche das Passieren eines Kerns, nicht
aber einer Zelle erlaubt, zentrifugiert und verlieren
dadurch ihren Kern. Sie bleiben aber sonst intakt.
Mittels Mikroinjektion kann danach ein Kern aus
einer beliebigen Zelle in die entkernte Eizelle eingefhrt werden. Falls der injizierte Kern aus einer
somatischen Zelle stammt, muss sein Genom epigenetisch auf das Embryonalstadium umprogrammiert
werden, z.B. sind viele Methylierungen der DNA
rckgngig zu machen. Dieser Prozess luft kurz
nach der Injektion ab und ist anfllig fr Fehler. Nur
ein kleiner Teil transplantierter Kerne (15%) fhrt
zur Entwicklung scheinbar gesunder Organismen. In
etlichen Tierspezies wie Schaf (Dolly 1996), Maus,
Huhn sowie weiteren Nutz- und Haustieren sind solche Klone hergestellt worden. Die Klonierung dieser
Organismen ist keine Klonierung im strikten Sinne,
weil die Nachfolgerzellen Genomteile aus zwei Organismen enthalten: das Kerngenom aus einer somatischen Zelle des zu klonierenden Organismus und
die mitochondriale DNA aus der Oozyte. Weil die
mitochondriale DNA sehr viel kleiner als die KernDNA ist, trgt sie allerdings wenig bei zum Phnotyp
des klonierten Organismus. Die Klonierungstechnik
knnte zur gezielten Verbesserung bestimmter Eigenschaften bei Nutztieren eingesetzt werden. Offenkundige Nachteile sind bei der epigenetischen Umprogrammierung entstehende genetische Schden
und das allgemeine Risiko genetisch einheitlicher
Populationen, deren Schwchen wie die Anflligkeit
auf gewisse Krankheitserreger unter Umstnden erst
nach Expansion der Population zutage treten.
Pflanzen lassen sich ber Meristemzellen aus
Wachstumsgeweben der Wurzel- oder Spross-Spitzen klonieren Pflanzen knnen durch asexuelle
Vermehrung kloniert werden, d.h. aus Stcken einer Pflanze knnen viele Nachfolgepflanzen gezogen
werden. Kleine Zellansammlungen aus unstruktu-
517
39.12 Klonierung von Zellen und Organismen; transgene Organismen
riert wachsenden Schttelkulturen von Meristemzellen (pflanzliche Stammzellen) knnen sich zu

intakten Pflanzen entwickeln, wenn sie auf einer
Oberflche ruhend kultiviert werden. Die genetische Manipulation der kultivierten Meristemzellen
mittels der nachfolgend beschriebenen Techniken
fhrt zu transgenen Pflanzen.
Transgene Organismen: Pflanzen oder Tiere
mit einzelnen experimentell vernderten Genen
oder mit Gendeletionen Durch Mikroinjektion
kann DNA direkt in den Kern z.B. einer Mauszelle

injiziert werden. Nach Injektion von etwa 5000Moleklen DNA pro Kern werden in den meisten Fllen eine oder mehrere Kopien der fremden DNA ins
nuclere Genom eingebaut. Ist die Empfngerzelle
eine befruchtete Oozyte, kann diese in den Uterus
einer Trgermutter implantiert werden und sich
dort zum Tier entwickeln. Auch Zellen aus frhen
Embryonalstadien eignen sich zu diesem Zweck.
Die Zellen knnen mit mutierten Genen, Genen mit
anderen Promotoren (Unter- oder berexpression,
vernderte Gewebespezifitt der Expression) oder
Genen aus anderen Spezies transfiziert werden. Vor
der Implantation lassen sich die Zellen, welche die
gewnschte genetische Vernderung besitzen, isolieren und vermehren.
In der ersten Generation solcher Tiere, z.B.
Muse, finden sich Tiere mit der Mutation in einem
der beiden Allele des diploiden Organismus. Nach
einer Rckkreuzung, d.h. einer Kreuzung unter
Geschwistern der mutierten Muse, erhlt man auf
beiden Allelen mutierte Muse. Tiere, welche ein
bestimmtes Protein nicht mehr synthetisieren, werden oft als Null- oder k.o. Muse (knock-out Muse)
bezeichnet. Die k.o. Muse knnen Hinweise auf die
biologische Funktion eines inaktivierten Gens liefern. In vielen Fllen hat die Deletion eines Gens
bemerkenswerterweise keine oder nur geringe manifeste Auswirkungen. Manche Gene sind daher zumindest unter Laborbedingungen als ersetzbar zu
betrachten; redundante Mechanismen und Gene
knnen die Funktion eines ausgefallenen Gens mindestens teilweise bernehmen.
39
Links auf
Springer Website:
027-6-1517258-0
39.1 Werkzeuge der Gentechnik: Restriktionsenzyme und andere Nucleasen, Ligasen,
DNA-Polymerasen und Rekombinationsenzyme
39.2 Plasmide als Vektoren (Genfhren)
39.3 Viren als Vektoren; Gentherapieversuche
39.4 Knstliche Chromosomen als Vektoren
39.5 PCR (Polymerase chain reaction)
39.6 Genbanken: cDNA und genomische DNA
39.7 Bestimmung der Nucleotidsequenz von
DNA
39.8 Southern, Northern und Western blotting
39.9 Expression rekombinanter Proteine und
RNAs
39.10 Gezielte und zufllige Mutagenese
39.11 Prsentation von Genprodukten auf
Bakteriophagen (Phage display) oder
Ribosomen (Ribosome display); gerichtete molekulare Evolution
39.12 Klonierung von Zellen und Organismen;
transgene Organismen
519
Genomik, Proteomik,
Bioinformatik, Datenbanken
40.1
Genomanalyse und Gendiagnostik 520
40.2
Modulare DNA-Rekombination521
40.3
Mikrochips zur Quantifizierung von

mRNA und Proteinen 522
40.4
Proteomik: 2D-Gelelektrophorese,
Massenspektrometrie und Mikrochips 522
40.5
Kartierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen

mit der Two-hybrid-Technik; Interaktom 522
40.6
Datenbanken und Computerprogramme 524

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Kapitel 40 Genomik, Proteomik, Bioinformatik, Datenbanken
Die Hochdurchsatzverfahren zur Analyse von DNA

und Proteinen sind aus der biochemischen/zellbiologischen Forschung und der medizinischen Labordiagnostik nicht mehr wegzudenken. Sie erlauben,
neuartige biologische und medizinische Fragestellungen experimentell anzugehen (Systembiologie;
Gendiagnostik, personalisierte Therapie).
Datenbanken mit Einzelnucleotidpolymorphismen oder Single nucleotide polymorphisms
(SNP) reprsentieren die Diversitt der Sequenz
des menschlichen Genoms in verschiedenen Individuen. Bestimmte Muster von SNP, welche mit
Krankheiten assoziiert sind, dienen als prdiktive
Biomarker.
Viele cDNA-Banken und Genbanken sowie alle
Arten von Blots, Mikroarrays und histologischen
Gewebeschnitten sind heute kommerziell erhltlich und knnen mit geeigneten Sonden (z.B. DNAoder RNA-Sonden zur in-vitro Hybridisierung oder
Antikrpern zur Identifizierung von Proteinen)
analysiert werden. Die Mikrochiptechnik erlaubt,
die mRNAs, d.h. den Expressionsgrad aller Gene in
einer Zelle oder einem Gewebe, zu erfassen. Mit vielen auf einem Mikrochip fixierten Antikrpern lsst
sich das Vorkommen bestimmter Proteine ebenfalls
quantitativ bestimmen. Durch modulare DNA-Rekombination kann das optimale Expressionssystem
zur Synthese eines rekombinanten Proteins identifiziert werden.
Die Gesamtheit des genetischen Materials einer
Zelle oder eines Organismus (Gene und nichtcodierende DNA mit regulatorischer und unbekannter
Funktion) wird als Genom, dessen Erforschung als
Genomik bezeichnet. Analog wird die Gesamtheit
der exprimierten Proteine als Proteom bezeichnet,
und die Proteomik identifiziert, quantifiziert und
charakterisiert die Proteine. Die verwendeten Methoden schlieen ein: 2D-Gelelektrophorese, Massenspektrometrie, automatisierte Proteinkristallisierung und Strukturanalyse sowie die Erfassung von
Protein-Protein-Wechselwirkungen.
ber das Internet sind zahlreiche Genom- und
Proteom-Datenbanken genauso wie Literaturdatenbanken frei zugnglich. Die Beschaffung von
Information ist einfach geworden; das Werten und
Verstehen der Information hingegen bleibt wie eh
und je Aufgabe und Privileg des forschenden Menschen.
40.1 Genomanalyse
und Gendiagnostik
Die Nucleotidsequenzen der Genome von ber

1000Spezies sind bekannt Die Sequenzen sind
im Internet zugnglich und umfassen ein breites

Spektrum von Spezies aller drei Domnen: Eukaryonten, Bakterien und Archaea; einige wichtige
sequenzierte Genome sind in .Tab.40.1 aufgefhrt.
Ein bestimmtes Segment eines Gens, das von Interesse ist, kann durch PCR aus der Gesamt-DNA des
Organismus amplifiziert werden. Molekulare Klone
von Genen knnen heute in vielen Fllen auch kommerziell beschafft werden.
Die Nucleotidsequenzen menschlicher Individuen unterscheiden sich an bestimmten Positionen, den Single nucleotide polymorphisms (SNP)
Im Falle des menschlichen Genoms stehen Teilsequenzen und Gesamtsequenzen vieler Individuen
zur Verfgung. Ein paarweiser Vergleich dieser Genome zeigt eine Differenz bei 0.1% (1/1000) der
Positionen (selbst eineiige Zwillinge sind genetisch
nicht vllig identisch). Um Fehlidentifizierungen
von SNP zu vermeiden, werden die Sequenzen der
einzelnen Genome vielfach bestimmt (Deep sequencing: 30-fache Abdeckung der Sequenz).
Im menschlichen Genom sind 107SNP bekannt,
d.h. ein SNP auf 300bp. Die SNP sind zumeist

phnotypisch bedeutungslose allelische Varianten,
seltener sind sie mit gewissen Krankheiten assoziiert. Das Verteilungsmuster der SNP im Genom
ist je nach menschlicher Population verschieden.
Die SNP-Kartierung des Genoms zusammen mit
dem Vergleich gesunder und kranker Individuen
kann Hinweise auf eine genetische Ursache oder
Prdisposition fr bestimmte Krankheiten geben.
Die Mikrochiptechnologie (s. unten) erlaubt das
rasche Erfassen krankheitsrelevanter SNP in Proben menschlicher DNA. Die individuelle Gendiagnostik wirft ethische Fragen auf, z.B. bei Feten, im
Fall von Krankenversicherungen oder Abschlssen
beruflicher Anstellungsvertrge. In der Forensik
werden Regionen individueller Genome mit hu-
40
521
40.2Modulare DNA-Rekombination
.. Tab.40.1 Charakteristika einiger sequenzierter Genome

Organismus
Beschreibung
Haemophilus influenzae
Pathogenes Bakterium
Saccharomyces cerevisiae
Bckerhefe
Escherichia coli
Darmbakterium
Caenorhabditis elegans
Fadenwurm
Arabidopsis thaliana
Gre des
Genoms (Mb)
Publikationsjahr
Geschtzte Anzahl
Gene
1,8
1995
1800
12,1
1996
5400
4,6
1997
4300
97
1998
13000
Pflanze, Ackerschmalwand
100
2000
27000
Drosophila melanogaster
Fruchtfliege
180
2000
16000
Homo sapiens
Mensch
2900
2001
20000
Mus musculus
Maus
2500
2002
20000
figen SNP durch PCR amplifiziert und sequenziert.

Vergleiche dieser genetischen Fingerabdrcke
erlauben den Nachweis einer spezifischen Identitt,
z.B. bei der Ermittlung der Tterschaft, und werden
auch zum Elternschaftsnachweis eingesetzt.
Expressed sequence tags (EST) dienen als Marker fr exprimierte Gene EST sind kurze Sequen-
zen (30 bis mehrere hundert Basen) aus cDNA-Banken (Kopien der mRNA; Abschn.39.6); sie
ermglichen, die aktiven Gene eines Genoms zu
identifizieren und deren Exon-Intron-Struktur
grob zu definieren. EST-Datenbanken zahlreicher
Genome sind frei zugnglich. In der Regel gengt
es, eine Teilsequenz oder die Bezeichnung eines
Gens zu kennen, um sich mit Hilfe des Internets
ber die Struktur und die Funktion des Gens zu
informieren.
40.2
Modulare DNA-Rekombination
Serielle Rekombination bestimmter DNA-Segmente (Module) ermglicht einfache Erprobung

von Expressionssystemen Je nach Fragestellung
steht bei der Wahl des Expressionssystems eher der

quantitative Aspekt, z.B. viel Protein fr kristallographische Strukturanalyse, oder der qualitative
Aspekt, z.B. korrekte posttranslationale Modifikation des Proteins fr funktionelle Analyse, im Vordergrund: Expression der cDNA in Bakterien oder
Hefen ist oft quantitativ vorteilhaft, ergibt jedoch
keine sugertypischen Proteinmodifikationen; Sugerzellen sind wiederum wesentlich weniger produktiv. Insektenzellen und gewisse Protozoen sind
produktiver als Sugerzellen und ergeben oft die
erwnschten Proteinmodifikationen. Nur Experimente zeigen, welches Expressionssystem am besten
geeignet ist.
An den Enden von cDNAs knnen durch
PCR-Amplifizierung die Erkennungssequenzen fr
bestimmte Rekombinasen angesetzt werden. Diese
PCR-Fragmente werden danach von der Rekombinase fehlerfrei in einen Vektor eingefgt, falls dieser ebenfalls die passenden Rekombinationssignale
enthlt. Die cDNA-Molekle aus einer cDNA-Bank
knnen somit rasch in verschiedene Expressionsvektoren eingebaut werden.
Die Rekombinationsklonierung erlaubt, ganze
cDNA-Banken in verschiedene Expressionsvektoren umzuklonieren. Zu diesem Zweck geeignet ist
die (lambda)-Rekombinase, welche beim lysogenen Vermehrungszyklus die przise Integration
des Bakteriophagengenoms ins bakterielle Genom
bewerkstelligt und beim lytischen Zyklus die Phagen-DNA freisetzt (Abschn.12.2). Die einzige
Bedingung fr die Rekombination ist das Vorhandensein der Rekombinase-Erkennungsstellen. Die
-Rekombinase sowie weitere Rekombinasen samt
zugehriger Vektorplasmide sind kommerziell erhltlich.
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40.3
Mikrochips zur Quantifizierung

von mRNA und Proteinen
Mikrochips zur globalen Analyse der Expression

und Funktion von Genen Jede Zelle stellt ein
komplexes Netzwerk interagierender Biomolekle

dar, das sich laufend den Verhltnissen der Umgebung anpasst. Zum Verstndnis der zugrunde liegenden Regulationsvorgnge sind Informationen
ber den Aktivierungszustand der Gene in der
Zelle bzw. im Gewebe notwendig. Auch Menge und
Modifikationszustand wie Phosphorylierung oder
Glykosylierung der Proteine sind in verschiedenen
zellulren Entwicklungsstadien oder Funktionszustnden zu ermitteln.
Die Chiptechnik ermglicht eine derartige
globale Analyse. Ausgehend von der Sequenz des
menschlichen Genoms knnen Mikrochips (Mikroarrays; .Abb.40.1) hergestellt werden. Auf diesen Mikrochips (z.B. Glasplttchen von 11cm)
sind Sonden wie verschiedene Oligonucleotide
oder Antikrper, welche einzelne Zellkomponenten oder deren Modifikationszustand spezifisch
erkennen, an bestimmten Stellen kovalent fixiert.
Die Art und Position jedes winzigen Sondenflecks
wird in einer Datei festgehalten. Wird nun der
Mikrochip mit einem Zellextrakt, z.B. einer fluoreszenzmarkierten mRNA-Prparation inkubiert,
binden die markierten Zielmolekle an die ihnen
entsprechenden Sondenflecken. Danach wird der
Mikrochip gewaschen und die an die Flecken
gebundene markierte RNA durch Abrastern mit
einem Laserstrahl angeregt und fluorimetrisch
bestimmt (.Abb.40.1). Ein Mikrochip kann bis
zu hunderttausenden von Flecken zur quantitativen Messung enthalten; die mRNAs smtlicher
menschlicher Gene knnen mit einem einzigen
Chip erfasst werden. Mikrochips dienen auch zum
Nachweis von SNP.
40.4 Proteomik:
2D-Gelelektrophorese,
Massenspektrometrie
und Mikrochips
Auf einem zweidimensionalen Gel sind rund

2000 Proteinflecken analysierbar Die Kom-
bination von isoelektrischer Fokussierung und

senkrecht dazu laufender SDS-Gelelektrophorese
ergibt ein hochauflsendes Trennverfahren. Die
Proteinflecken in solchen Gelen werden auf eine
Membran bertragen und mit Antikrpern analysiert (Western blotting). Viele Proteine lassen sich
anhand ihrer Lokalisation auf dem 2D-Gel provisorisch identifizieren. Zur prziseren Bestimmung
dienen Sequenzanalyse und Massenspektrometrie.
Datenbanken mit Massenspektren vieler Proteine
und ihrer proteolytischen Fragmente, welche aus
Sequenzdaten berechnet worden sind, stehen heute
zur Identifizierung von Proteinen zur Verfgung.
Die rechnergesttzte densitometrische Auswertung
der 2D-Gelfrbemuster erlaubt, ganze Expressionsmuster von Zellen oder Geweben quantitativ zu erfassen.
Proteine knnen auch wie DNA oder RNA mittels Mikrochipverfahren (Antikrper-Mikroarrays)
auf einen Schlag in groer Zahl quantitativ erfasst
werden. Die Aufklrung der 3D-Strukturen der
Proteine eines Organismus und ihres modularen
Aufbaus wird ebenfalls der Proteomik zugezhlt
(Abschn.38.2).
40.5
Kartierung von Protein-ProteinWechselwirkungen mit der

Two-hybrid-Technik; Interaktom
Die Anzahl der Gene einer Spezies nimmt nicht

entsprechend der Komplexitt des Organismus
zu. Auch wenn bestimmte Gene wegen den Mglichkeiten des alternativen Spleiens und Editierens der mRNA fr ganze Reihen verschiedener
Proteine codieren knnen, wird die Komplexitt
offenbar zu einem wesentlichen Teil durch die Anzahl der makromolekularen Wechselwirkungen bestimmt. Die meisten zellulren Proteine sind nicht
Monomere oder Oligomere sondern Teil grerer
Komplexe wie Multienzymkomplexe, Filamente,
523
40.5 Kartierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen mit der Two-hybrid-Technik
40
.. Abb.40.1 DNA-Mikrochip zur Bestimmung der Expression menschlicher Gene. Jeder Sondenfleck enthlt ein bestimmtes
Oligonucleotid, welches eindeutig einem bestimmten proteincodierenden Gen entspricht. Von den Sondenflecken auf diesem
Chip sind hier nur diejenigen sichtbar, welche mit einer mRNA hybridisiert haben und daher nach der Fluoreszenzfrbung
aufleuchten. Hierzu wird die mRNA in einem mehrstufigen Verfahren in Anwesenheit von biotinylierten Ribonucleotiden
amplifiziert. Die biotinhaltige RNA hybridisiert mit den spezifischen Sondenflecken und bindet sehr stark an das nachfolgend
zur Frbung zugegebene fluoreszenzmarkierte Avidin (Abschn.35.3). Mikrochips knnen, falls durch Fragestellung erfordert,
bis gegen eine halbe Million Sondenflecken enthalten
Komplexe der inneren Mitochondrienmembran,

Kernporen, Ribosomen, Signaltransduktionskomplexe oder des kontraktilen Apparats der Myofibrillen. Die Proteinwechselwirkungen im Komplex
knnen stabil oder auch nur kurzlebig sein, Letzteres trifft insbesondere auf regulatorisch wirksame
Proteine zu.
Protein-Protein-Wechselwirkung
Die Anzahl mglicher Wechselwirkungen n
zwischen Proteinen nimmt mit zunehmender
Anzahl der Proteine N exponentiell zu; fr binre Wechselwirkungen ist n=N(N1)/2. Mit
dieser Formel lsst sich auch die Anzahl von
Glser-Klingklang beim allseitigen Anstoen
einer Tischrunde berechnen.
Die Wechselwirkungen zwischen Genprodukten

knnen mit der Two-hybrid-Technik, die einen
Transkriptionsfaktor (TF) als Indikator verwendet, erfasst werden. Einfache TF bestehen aus einer DNA-Bindungsdomne, die an den Enhancer
bindet, einer Aktivierungsdomne, welche die
RNA-Polymerase II aktiviert, und einem Verbindungsstck. Bei der Two-hybrid-Technik werden
die Bindungs- und die Aktivierungsdomne ohne
Verbindungsstck einzeln als Fusionsproteine mit
je einem anderen zustzlichen Protein exprimiert.
In diesem Fall ist der TF nur aktiv, wenn die zwei
zustzlichen Proteine aneinander binden. Eine
Wechselwirkung zwischen den zwei zustzlichen
Proteinen lsst sich folglich anhand der Aktivitt des TF, d.h. dem Ausma der Synthese eines
Genprodukts, erfassen (.Abb.40.2). Mit dieser
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40.6 Datenbanken
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und Computerprogramme
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Histidin-Stoffwechselgen
.. Abb.40.2 Two-hybrid-Technik zum Auffinden aneinander
bindender Proteine. In Hefezellen, welche wegen Fehlens
des spezifischen Transkriptionsfaktors (TF) ein Enzym des
Histidinstoffwechsels nicht exprimieren und daher auf histidinfreiem Medium nicht wachsen, wird die DNA-Bindungsdomne des fehlenden TF als Fusionsprotein mit ProteinX
exprimiert. Diese Zellen werden mit einer cDNA-Expressionsbank der folgenden Art transformiert: Die Aktivierungsdomne des TF wird als Fusionsprotein mit allen Proteinen,
welche durch die cDNA-Bank codiert werden (Y-Proteine),
exprimiert. Bindet eines der Y-Proteine an das X-Protein, wird
der TF aktiv, das Histidin-Stoffwechselgen wird exprimiert
und die Hefezelle wchst nun auf dem Minimalmedium
ohne Histidin und zeigt damit an, dassX und Y miteinander
in Wechselwirkung stehen. DB, DNA-Bindungsdomne; X,
erstes Protein (Bait, engl. Kder); Y, zweites Protein; (Prey,
engl. Beute); AD, Aktivierungsdomne
Technik knnen mgliche Wechselwirkungspartner fr ein gegebenes Zielprotein gefunden und

kartiert werden. Mittels Hefepaarung (Mating)
lassen sich auch zwei cDNA-Banken, welche in
zwei miteinander paarungsfhige Hefestmme
eingebracht worden sind, ber Kreuz auf Protein-Protein-Wechselwirkungen untersuchen und
damit das Interaktom, das gesamte Netzwerk der
Protein-Protein-Wechselwirkungen in einer Zelle
bestimmen (.Abb.40.3).
Es empfiehlt sich, vor allem mit von offiziellen

Stellen unterhaltenen Datenbanken zu arbeiten. In
.Tab.40.2 sind fr die Biochemie/Molekularbiologie wichtige, qualitativ hoch stehende Informationsplattformen angegeben. Oft werden Datenbanken
zusammen mit entsprechenden Analyseprogrammen angeboten. Ein typisches Beispiel hierfr ist die
Programmfamilie Blast zur Suche nach homologen Nucleotid- und Aminosuresequenzen, die vom
amerikanischen National Center for Biotechnology
Information NCBI angeboten und dauernd verbessert wird. Diese Programme finden Sequenzen in
der Datenbank, welche zur Suchsequenz homolog
sind.
525
40.5 Kartierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen mit der Two-hybrid-Technik
40
.. Abb.40.3 Karte der mit dem Two-hybrid-System festgestellten Wechselwirkungen zwischen smtlichen Hefeproteinen. Alle
Proteine, welche eine gegenseitige Wechselwirkung zeigen, sind miteinander verbunden. Der vergrerte Ausschnitt mit den
hellgrauen Feldern zeigt eine Region mit Proteinen der Regulation des Galactosestoffwechsels; der zweite Ausschnitt mit den
dunkelgrauen Feldern zeigt die Region, in welcher Proteine der Zellstruktur wie Actin oder Tubulin als Gruppe auftreten. Ein
positiver Befund mit dem Two-hybrid-System zeigt an, dass die zwei Partnerproteine in der Hefezelle aneinander binden, er
bedeutet jedoch nicht, dass eine festgestellte Wechselwirkung funktionell wichtig ist. In der Praxis erweist sich etwa die Hlfte
der positiven Befunde als irrelevant
526
40
2
.. Tab.40.2 Beispiele wichtiger Internetadressen fr biochemische Anfragen. Es darf angenommen werden, dass die
hier erwhnten Adressen aufgrund ihrer hohen Besucherzahlen lngerfristig zur Verfgung stehen werden
Institution
Datenbank/Server
Typ der Information
Internetadressea
NCBI, USA
Entrez
PubMed
Literatur, Datenbanken und

Programme
http://www.ncbi.nlm.
nih.gov
Swiss Institute of Bioinformatics
Expasy
Datenbanken und Programme
http://www.expasy.org
European Molecular Biology Laboratory
SRS
Datenbanken und Programme
http://www.ebi.ac.uk/
services
Research Collaboratory for

Structural Bioinformatics
PDB Browser
Alle 3D-Strukturen
http://www.rcsb.org/pdb
University of California at
San Diego, USA
Transport classification
database
Alle Transmembranproteine
http://www.tcdb.org
New England Biolabs, USA
Rebase
Smtliche Restriktionsenzyme
http://rebase.neb.com
The Jackson Laboratory,

Bar Harbor, USA
MGI
Maus-Genom-Informatik
http://www.informatics.
jax.org
Atomic Energy Research

Institute Korea
Nuklid-Karte
Smtliche Isotope
http://www.nndc.bnl.gov/
chart
3
4
5
6
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Anklickbare Links und Standardwerke siehe Webseite zu Abschn.40.6 und Literaturliste.
Links auf
Springer Website:
027-6-1517259-0
40.1 Genomanalyse und Gendiagnostik
40.2 Modulare DNA-Rekombination
40.3 Mikrochips zur Quantifizierung von mRNA
und Proteinen
40.4 Proteomik: 2D-Gelelektrophorese,
Massenspektrometrie und Mikrochips
40.5 Kartierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen mit der Two-hybrid-Technik;
Interaktom
40.6 Datenbanken und Computerprogramme
527
Serviceteil
Serviceteil 527
Verzeichnis der Themen mit spezifisch medizinischem Bezug 528

Sachverzeichnis531

DOI 10.1007/978-3-662-46430-4, Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2016
528
Verzeichnis der Themen mit spezifisch

medizinischem Bezug
(Wirkstoffe wie Hormone, Alkaloide,
Antibiotika, Bakteriostatika, Cytostatika
etc. sind im allgemeinen Sachverzeichnis einzeln aufgefhrt)
A
ACE(Angiotensin-converting
enzyme)-Hemmer 51, 354
Acetylcholinesterasehemmer
(Nervengifte) 51, 53
Acetylsalicylsure, Aspirin 360
Acidose/Alkalose427
Addison-Krankheit426
Adenosin-Desaminase-Mangel 255
Adipositas, Fettsucht 447
Aids, Acquired immundeficiency
syndrome 411
Akute-Phase-Reaktion433
Alkaloide (Morphin, Codein, Colchicin,
Curare, Nicotin u.a.m.) 274276
Alkaptonurie237
Allergische Reaktionen 358, 407409
Alterungsvorgnge471472
Alzheimer-Krankheit 3839, 300, 471
Amyloid3839
Anabolika 355, 449
Anmien 27, 114, 207, 450, 456,
460, 462,
Angiogenese 311, 338
Antibiotika 51, 68, 140141
Antikoagulanzien 66, 391, 455456
Antikrper399411
Apoptose, kontrollierter
Zelltod312314
Arteriosklerose 224, 438, 442443
Arzneimittelinteraktionen393
Asthma bronchiale 358
Autoimmunkrankheiten 366, 410411
B
Bakteriostatika 51, 242, 248, 253254
Bilirubin 394395, 423434
Biomarker473
Biotransformation, Entgiftungsreak
tionen 393394, 433
Blutdruckregulierung360361
Blutgerinnung388393
Blutgruppen AB0 67, 297

Blut-Hirn-Schranke435
Body Mass Index BMI 447
Botulinumtoxin278
Brennwerte der Nhrstoffe 447
BSE, Bovine spongiform encephalo
pathy 150
C
Chemotherapie 102, 253, 403, 435
Chiptechnologie522
Choleratoxin278
Cholesterol, Hemmstoffe der Synthese,
Statine 73, 220224, 438443
COX(Cyclooxygenase)-Hemmer360
Creutzfeld-Jakob-Krankheit 39, 150
Cystische Fibrose 26, 38
Cytoskelett (Arzneistoffe, welche auf
Cytoskelett wirken: Colchicin, Taxol,
Vinblastin und Vincristin) 276, 277,
275
D
Datenbanken, Verzeichnis 526
Diabetes insipidus 426
Diabetes mellitus (Typ 1, Typ 2) 436438
Dialyse 19, 500
Diphtherietoxin126
DNA-Reparatur103105
DNA-Schden102103
E
Elektrolythaushalt424426
ELISA, Enzyme-linked immunosorbent
assay 410, 490
Energiereserven des menschlichen
Organismus434
Enterotoxine279
Epstein-Barr-Virus149
Ernhrung des Menschen 446465
Essenzielle Aminosuren und Fett
suren448451
Ethanolabbau451
F
Fehlernhrung446
Fettgewebe 210, 218219, 434
Fibrinolyse392393
Fluoridprophylaxe386
Flssigkeitskompartimente
des Krpers 414, 425
Folsuremangel, Spina bifida 460
Fructoseintoleranz206
G
Galactosmie205206
Gallenfarbstoffe 423, 424
Gallensteine418
Gammastrahlung491
Gasbrand278
Gaucher-Krankheit (lysosomale
Lipidspeicherkrankheit)513
Gelbsucht, Ikterus 424
Genbanken508
Gendiagnostik52521
Genetischer Fingerabdruck
(in Forensik) 521
Genomanalyse520521
Genomik474475
Gentherapieversuche504505
Gerinnungshemmer391
Gerinnungsstrungen, Hmo
philien456
Gewebehormone 348, 358360
Gicht 248, 255257
Glucose-6-phosphat-Dehydrogenasemangel (hmolytische Anmie, erhhte Resistenz gegen Malaria) 206
GMO, gentechnisch modifizierte
Organismen502
Grundumsatz 356357, 446447
H
Hmochromatose463
Hmodialyse19
Hmoglobin 20, 26, 134, 244, 396,
419421
Harnsteine448
Hepatitis 146, 149, 424, 513
529
Verzeichnis der Themen mit spezifisch medizinischem Bezug
Herzinfarkt, Troponin als Biomarker 379

HIV, Human immunodeficiency
virus 144, 147
Hochdurchsatzverfahren, Omik-
Techniken320525
Hhenadaptation 420421, 337,
353354
Hormone, Hormondrsen 59, 196,
347361
Hormonrezeptoren 231234
Hungersignale (Hormone) 130, 210,
219, 361, 447
Hungerzustand 131, 217219, 226, 228,
427, 435436
Huntington-Krankheit471472
Hypercholesterolmie 224, 443
Hyperglykmie 433, 437
Hyperlipidmie442
Hyperurikmie 255, 257
Hypoglykmie 163, 202, 205, 206, 213,
352, 435, 438
I
Ikterus, Gelbsucht 424
Immunglobuline402411
Immunschwche (angeborene; Aids,
HIV) 144, 147, 257, 411
Immunsuppression 37, 353, 411
Immunsystem, angeborene und
adaptive Immunitt; B-Zellen und
T-Zellen399411
Immuntoleranz410411
Insulin, s. Stichwortverzeichnis
Interferone IFN 337, 361, 401
Iodidmangel, Kretinismus, Struma 356
357, 463
Iodidprophylaxe463
Ionisierende Strahlung 102, 234, 395,
491
Isotopenmarkierung489490
K
Kanzerogenese310312
Karies, Fluoridprophylaxe 386
Karzinogene102
Karzinom311
Ketoacidose437
Kindstod, pltzlicher 213
Kollagendefekte26
Komplementsystem400
Kontrazeption, hormonale 356
Koronararterienverschluss442
Krebs 102, 104, 147149, 253, 309312
Kretinismus 357, 463
AS
Kwashiorkor, Protein-Energie-Mangelsyndrom451
omega-Fettsuren449
Onkogene, Onkoproteine 147149
Osteomalazie454455
Oxidationswasser 183, 425
Lactoseintoleranz204205
Laktation 352, 449
Lesch-Nyhan-Syndrom257
Lipidspeicherkrankheiten220
Lipoproteine: Chylomikronen, VLDL,
LDL, HDL 438443
Lipoproteinlipase 219, 434435
LSD, Lysergsure-Diethylamid 275
M
Mangelernhrung 449, 451
Marfan-Syndrom38
Mediatoren, Gewebehormone 358361
Menstruationszyklus355356
Metabolische Acidose 427
Metabolisches Syndrom 448
Metabolomik 155, 473, 475
Metastasen 311
Methmoglobin 395, 419
Mikrobiom des Menschen 475
Milch 19, 36, 204205, 407, 450451,
463464
Mineralstoffe461463
Monoklonale Antikrper 403, 410, 490
Morphin274275
Muskelstoffwechsel, aerob,
anaerob382383
Myasthenia gravis 366
N
Nhrstoffe448452
Nahrungsbestandteile, essenzielle 446,
448
Nahrungsmittel463465
Nahrungsmittelvergiftung279
Nebennierenrinden-Insuffizienz
(M. Addison) 426
Nervengifte, Organophosphate 51, 366
Neurodegenerative Krankheiten 3839,
427
Neurotransmitter364369
NF-B-Transkriptionsfaktoren 340341,
400
Nieren- und Blasensteine 423
NSAR, nichtsteroidale Antirheumatika,
s. COX-Hemmer
P
Papillomavirus, Warzenvirus, Zervixkar
zinom, Impfung 148149
Parkinson-Krankheit 39, 367, 471472
Pellagra 456457
Penicillin 51, 68, 140141
Pernizise Anmie 458, 460
Personalisierte Therapie 468, 473
Pfeiffer-Drsenfieber, EpsteinBarr-Virus 149
Phenylketonurie237238
Porphyrie, erythropoetische und hepatische245
Prionkrankheiten 3839, 150
Progerie 471, 472
Proteinfehlfaltungskrankheiten3839
Proteomik474475
R
Rachitis 452, 454455
Radikalfnger395397
Reaktive Sauerstoffderivate, Reactive
oxygen species ROS 395396
Rekombinante Proteine (z.B. rekombinantes Humaninsulin) 507, 512513
Redundanz biologischer Systeme 122,
306
Regeneration von Organen und Extremitten470
Resistenzfaktoren, bakterielle 140141
Retroviren (z.B. HIV)145146
Rheumatoide Polyarthritis 38, 411
Rinderwahnsinn, BSE 39
S
Sarkom 147149, 312
Sttigungssignale, Hormone 447
Sauerstofftransport im Blut 419421
Sure-Basen-Haushalt426430
Sehvorgang369371
Serumalbumin 226, 290, 353, 424,
436, 439
Sichelzellanmie 27
SNP 475, 520521
530
Verzeichnis der Themen mit spezifisch medizinischem Bezug
Skorbut459460
Speicherkrankheiten, lysosomale (Glykogenosen,
Lipidosen) 38, 202, 220, 463, 513
Spurenelemente 5, 6, 461463
Stammzellen 306, 322, 402, 468471
Statine, Hemmstoffe der Cholesterolsynthese 222, 224
Stickstoffgleichgewicht 355, 449
Stress-Syndrom (akute-Phase-Reaktion) 433
Sulfonamide 51, 141, 248, 254
Synthetische Biologie 474
Systembiologie472474
T
Thalassmie 27, 114
Totenstarre379
trans-Fettsuren, ungesttigte 449
Transgene Organismen 517
Transplantation von Zellen 411, 469471
Tumorsuppressorgene310
Tumorchemotherapie, Resistenzbildung 311312
Tumorviren147148
U
berernhrung 438, 446, 448
Unterernhrung 446, 448, 451
V
Verstrahlung450
Vitamine, Vitaminmangelkrankheiten 452460
W
Wachstumskontrolle und Tumorbildung 308313
Wasserhaushalt422426
Z
Zliakie, Glutenunvertrglichkeit 464
Zusatzstoffe zu Nahrungsmitteln 394, 465
Zytostatika 100, 248, 253, 254, 275, 277, 311312
531
Sachverzeichnis
A
A-Banden379
ABC-Transporter394
Abschirmung (Strahlung) 491
Abschreckstoffe274
Abscisinsure277
Absorption487488
Extinktionskoeffizienten487
NAD/NADH487
Nucleinsuren83
Proteine83
Absorption, s. Spektrometrie 486
Abwasserreinigung279
Abwehrmechanismen
enzymatische388
Immunsystem400403
Pflanzen274
Sauerstoffderivate 388, 396
ACE(Angiotensin-converting
enzyme)-Hemmer354
Acetoacetat, Acetessigsure 217218,
232235
Acetoacetyl-CoA217218
Acetaldehyd 168, 394
Disulfiram452
Aceton36, 217
Acetylcholin334
Antagonisten 276, 278
cholinerge Synapsen 364
motorische Endplatte 365
Acetylcholinrezeptoren
nicotinische (Ionenkanle) 367
muscarinische (GPCR)367
Acetylcholinesterase
Hemmstoffe (Organophosphate,
Nervengifte)51, 53
Mechanismus365366
Acetyl-CoA70, 135, 157
Citratzyklus162175
Fettsurestoffwechsel210224
G0 fr Hydrolyse 166
Regulation der Pyruvatcarboxylase
und Pyruvatdehydrogenase 169
171, 190
N-Acetylgalactosamin 65, 73, 292
N-Acetylglucosamin 65, 67, 73, 293
N-Acetylneuraminsure7374
Acetylgruppenbertragungspoten
zial 166, 169
Acetylsalicylsure, Aspirin 360
Acetyltransacylase214
Acetyltransferase169
Acidose 218, 426
metabolische426427
respiratorische Kompensation 428
430
Aconitase, Aconit-Hydratase 172
Aconitat171172
ACP, Acyl-carrier-protein 214215
Acquired immunodeficiency syndrome,
AIDS 144, 147, 411
ACTH, Corticotropin 348, 351
Actin 298, 318, 376377
Bndel298299
F-Actin, G-Actin 377
Filamente377
Actincortex298
Muskel377
Actinfilamente 298
fokale Adhsionen 316317
Actinin318
Acyl-AMP211
Acylcarnitin211
Acyl-carrier-protein ACP 214
Acyl-CoA166
Acyl-CoA-Dehydrogenase179180
Hemmung der Citratsynthase 190
Acyl-CoA-Synthetase211
Fettsureabbau210213
Acyl-CoA-Cholesterol-Acyltransferase
ACAT441442
Acylierung von Serinresten 366
Adaptorproteine 303, 342
Addison-Krankheit426
Adenin85
in DNA 8788
Desaminierung102
Biosynthese248250
Adenin-Phosphoribosyltransferase249
Adenohypophyse 349
Adenohypophysenhormone349352
Adenosin A 15, 8485
mono-, di-, triphosphat, AMP, ADP,
ATP 84
Adenosin-Desaminase255256
Adenosin-5-phosphosulfat APS 272
S-Adenosylmethionin SAM 102, 137,
237, 239242
S-Adenosylhomocystein SAH 241
Adenoviren 148, 505
Adenylatcyclase 196, 201, 203, 278,
335, 372
Adenylatkinase383
ADH (Antidiuretisches Hormon),
Vasopressin, 350351
Adhsionsprotein 114, 311, 318319,
384, 410
Adherens junction, Adhrenz-Kon
takte 316
Adipozyten383
Adipositas, Fettsucht 438, 447
Adjuvans 402
ADP, Adenosindiphosphat 12, 1415,
85, 158, 167168, 171, 178192
ADP-Glucose273
ADP-Ribose278
ADP-Ribosylierung
Choleratoxin278
Adrenalin, Epinephrin
Abbau367
Fetttsureabbau210
Biosynthese367368
hormonsensitive Lipase 210, 219
Hungerzustand219
Nebenniere201, 352
Neurotransmitter369
Postresorptionsphase432
Regulation Glykogenstoff
wechsel201203
Stress353
Adrenerge Rezeptoren 367
ACTH, Adrenocorticotropes Hormon,
Corticotropin348, 351
Advanced glycation end products
AGE438
Aerobe Glykolyse, ATP-Bilanz 167168
Aerobier 278
Aerobe Muskelarbeit 189
Aerober Stoffwechsel in Bakterien 278
Affinittschromatographie483
Affinittsreagenzien51
Afibrinogenmie390
Agar, Agarose 66
Agarose-Gelelektrophorese485486
Aggregate
amyloide Plaques 149
denaturierte Proteine 36
Thrombozyten 51, 360, 388
Aids, Acquired immunodeficiency
syndrome AIDS 411
Aknebehandlung mit Retinoaten 453
Aktionspotenzial
Muskelfaser379
Neuronen364369
532
Sachverzeichnis
Aktivatoren
Enzymkinetik50, 5559
Genexpression136
Stoffwechselwege158
Zellzyklus148
Aktivierte Essigsure, s. Acetyl-CoA
Aktivierungsdomne, Two-Hybrid-
Technik522525
Aktivierungsenergie4546, 49
Aktivierungskaskade, Protein
kinasen308, 332333, 343
Aktivierungskaskade, proteolytische
Apoptose (programmierter
Zelltod)313314
Blutgerinnung389
Verdauungsenzyme415416
Aktivitt
Einheit der Enymaktivitt 46
spezifische Aktivitt 46
molekulare Aktivitt 46
Regulation Enzymaktivitt 5051
Regulation Genaktivitt 128137
Akute-Phase-Reaktion433
Akzeptorkontrolle der Zellatmung 189
Alanin 21, 23, 118
D-Alanin in Bakterienzellwand 67
Aminotransferase229
Albinismus235
Albumin
Lactalbumin463
Ovalbumin110
Serumalbumin 210, 226, 290, 353,
424, 439, 451
Aldehyddehydrogenase452
Aldimin-Zwischenverbindung 229
Aldoladdition171172
Aldolase163
Aldose, Ketose 164
Aldosteron222, 353
Na+/K+-ATPase353
Niere426
Renin-Angiotensin-System353354
Aleuronschicht464
Alkaloide 274276
Alkalose 426
Alkaptonurie235, 237
Alkohol, s. Ethanol
Alkoholische Grung 167168
Alkoholdehydrogenase168
Retinal/Retinol371
Alkylphosphate53
Alkyltransferasen103
Allantoin255256
Allele 313, 517, 520
Allergische Reaktionen
Histamin, Antihistaminika 358
IgE407409
Allolactose 129
Allopurinol 257
Allosterische Regulation 5559, 131,
158159, 171, 173, 190, 201, 251, 432
Alterungsvorgnge 226, 388, 471472
Alzheimer-Krankheit 3839, 300, 471
Amanita phalloides Knollenbltterpilz,
-Amanitin109
Amadori-Umlagerung 438
Ameisensure 239, 372, 465
Ames-Test 103
Aminierung, reduktive 238
Aminoacyl-tRNA 15, 83, 89, 120123
Aminoacyl-tRNA-Synthetase8283,
120123
Korrekturmechanismus 122
p-Aminobenzoesure254
-Aminobutyrat, s. GABA
5-Aminolvulinat243244
5-Aminolvulinat-Synthase, Regula
tion244
Aminopeptidasen 226, 273, 415
Aminopterin 254
Aminosuren
Abbau (Weg des Stickstoffs) 228
232
Abbau (Weg des Kohlenstoffs) 232
238
D-Aminosuren 67, 394
essenzielle448, 450
glucogene196, 232
Ionisationszustnde2224
ketogene232233
konservative Substitution 26
L-Aminosuren2022
proteinogene2021
Razemisierung456
Stoffwechseldefekte237238
Synthese238239
UV-Absorption 22
Aminosurenpool226
Aminosurezusammensetzung
Bestimmung494
Aminosuresequenz
Ableitung aus DNA 510511
Bestimmung494
Vergleich Hmoglobine/Myo
globine 26
Aminotransferasen228232
Aminozucker 65, 230
Ammoniak NH3 230, 232
in Bakterien und Pflanzen 270272
Transportform (Glutamin) 271
Ammoniumion NH4+270272
Ausscheidung430
Ammoniumsulfat497
AMP 8285
Amphibien230
Amphiphile Lipide 76, 78
Ampholyte 22
Ampicillin, Penicilline 141
Amplifikation116
Amplifikationskaskaden332333
Gentechnik505508
-Amylase277, 416
Amyloid, Amyloide Plaques 3839
Amylopektin6263
Amyloplasten273
Amylose6263
Anabolika 355, 358, 449
Anabolismus 156
Anaerobier278
Anaerobe Glykolyse im Muskel 383
Anmien
Eisenmangel462
hmolytische27, 207
pernizise, megalocytre 460
Sichelzellanmie2627
Thalassmie114
Anaplerotische Reaktionen 173174
Anchoring junctions316
Androgene Hormone 351, 354355
Angiogenese 311, 338
Angiotensin354
Angiotensin-converting enzyme ACE51,
Hemmer 51, 354
Angiotensinogen354
Ankerproteine316, 318319
Annealing von Nucleinsuren 89,
505507
Anorganische Bestandteile des Krpers 462
Anorganisches Phosphat Pi 165, 425
Anoxie183
ANP, s. atriales natriuretisches Peptid
Antabus (Disulfiram) 452
Antennen-Chlorophyllmolekle 262
Anthocyane276
Antibiotika 51, 68, 140141
Resistenz106, 141
Anticodon118119
Anticodonschleife122123
Antidiabetika438
Antidiuretisches Hormon ADH,
Vasopressin350351
Aquaporin 418, 425426
Antigen 402
Blutgruppenantigene67
Antigenbindungsstelle 408
Antigene Determinante 405
Antigenprsentierende Zellen 401404
Antikoagulanzien 66, 391, 455456
Antikoagulationsmechanismen392
533
Sachverzeichnis
Antikrper 400
Affinitt und Aviditt 404, 407, 410
Blutgruppen67, 292
Diversitt405
Genrekombination 406
Isotypen407
katalytische52
monoklonale 403
polyklonale 403
Struktur 408
Antikrperketten 409
Antikrperklassen409
Antikrper-Repertoire404405
Antilipolytische Wirkung
von Insulin 434
Antimycin A 183
Antioxidanzien 396, 465
Antiport-Systeme
Aspartat/Glutamat 187
ATP/ADP188189
Citrat/Malat216
Malat/-Ketoglutarat 187
Na+/H+ und Cl/HCO 415, 426
Antisense-RNA513
Antiserum409
Antithrombin III 391392
-Antitrypsin, Trypsininhibitor 416
Apatit461
AP-Endonuclease103
pfelsure171, 216
Apoenzym 55
Apo-Lipoproteine418, 440441
Apoptose148, 313314
antikrperprsentierender
Zellen411
BAX, BCL2 314
B- und T-Zellen 411
Caspasen314
Checkpoints312
cytotoxische T-Zellen 401, 410
extrazellulre Matrix 316
Hemmung durch Viren 148
IGF1311
infizierter Zellen 403, 410
maligne Tumoren 311
Mitochondrien314
mitochondriale Porine (Permeabilitt
der Mitochondrien) 314
Nf-B400
Organogenese313314
p53 313
Aquaporin
Darm418
Sammelrohre der Niere 326, 350
Arabidopsis thaliana, Ackerschmalwand521
Arachidonsure 71, 73
Archaea 68, 277, 285, 514, 520
ARF, ADP-Ribosylation factor289
Arginase 231
Arginin
Harnstoffzyklus231
NO Stickstoffmonoxid 341
Argininosuccinat 231
Argininphosphat243
Aromastoffe274
Maillardreaktion438
Arrhenius-Gleichung 49
Arteriosklerose220, 224, 438, 442443
Arthritis411
Arzneimittelinteraktion393
Ascorbat, Ascorbinsure 452, 459
Konzentration in Zellen 396397
Radikalfnger396397, 460
Skorbut459460
Synthese204
Zusatzstoff465
Asparagin 2122
Aspartam372373
Aspartat 21, 25
Harnstoffzyklus 231
Aspartat-Aminotransferase
AspAT45, 228
Aspartat-Carbamoyl-Transferase 251
Aspartat-Malat-Shuttle, MalatAspartat-Weg 187
Aspirin360
Assimilation
CO2266268
Schwefel272273
Stickstoff270272
Assoziat, geschlossenes, offenes 3435
Assoziationsgeschwindigkeits
konstante11
Assoziationskonstante11
A-Stelle des Ribosoms 124125
Asthma358
Aszites451
Atemluft-Analyse473
Atmungskette173, 178183
bersicht178179
ATP-Bilanz185
Entkoppelung 185
Inhibitoren183
Quellen der Reduktionsqui
valente179180
Redoxkomponenten179180
Redoxpotenziale180
Regulation189
Sauerstoffverbrauch183
Wrmeproduktion durch braunes
Fettgewebe186
AB
ATP, Adenosintriphosphat 84
Produktion und Verwendung 120,
189, 435
Konzentration im Muskel 382
G0 der Hydrolyse 15
ATP-ADP-Translokator189
ATP-Citratlyase216
ATP-Synthase178, 184186
Fo-/F1-Teil186
Katalytischer Zyklus 186
ATP-Synthese in Mitochondrien
Atmungskette, s. dort
Chemiosmotischer Mechanismus der
oxidativen Phosphorylierung 183
184
Regulation188192
ATP-Synthese in Thylakoid
membran262265
Atriales natriuretisches Peptid ANP 373,
426
Atropin276
Auffllreaktionen des Citratzyklus 174
Autoimmunkrankheiten366, 410411
Autokrine Signalbermittlung 334
Autoradiographie 135
Autoxidation395
Auxine276
Avidin460
Aviditt405, 410
Avitaminose453
Axonaler Transport 303, 349350
Axonem304
B
Bacitracin141
Baculovirus505
Bakterielle artifizielle Chromosomen
BAC505
Bakterien
obligate/aerotolerante Anaerobier278
Besonderheiten des Stoff
wechsels278279
Biofilme362
Chemotaxis 373, 339340
Flagellen 303304, 339340, 400
gramnegative und grampositive 68
Hllen 67, 285, 496
kompartimenthnliche
Strukturen285
Kultur (Agar) 509510
obligate/fakultative Aerobier 278
Peptidoglykan62
praktische Verwendung 65, 103,
105, 279
534
Sachverzeichnis
Quorum sensing362
Stoffwechsel155, 277279
Toxine278
Wachstumsgeschwindigkeit504
Bakteriophagen 98, 105, 144145
als Vektoren 504
lambda 144145
M13504
T-Phagen (T4, T5) 98, 503, 507
Bakteriorhodopsin285
Bakteriostatika 51, 242, 248, 253254
Ballaststoffe464
Basalkperchen304
Basallamina 316
Kollagen IV 320
Basalmembran385
Basenpaarung, Fehler 84, 102
Basic fibroblast growth factor bFGF320
Basische Aminosuren 2021
Basophile Granulozyten 358, 409
Baumwolle63
BAX314
BCL2314
B-DNA88
Becquerel491
Beer-Lambert-Gesetz 487
Belegzellen361
Benzoesure465
Benzpyren393
Beriberi456
Bernsteinsure171
Bewegungsapparat376385
bFGF Basic fibroblast growth factor320
BH4, Tetrahydrobiopterin 234
Biacore-Methode500
Bicarbonat, s. Hydrogencarbonat 252,
361, 414415, 421, 427429
Bilirubin 394 438
Radikalfnger395
Bilirubindiglucuronid 424
Biliverdin397
Bindegewebe383386
Komponenten384
Typen385
Bindung
Gleichgewichtskonstante 11
Dissoziationsgleichgewichts
konstante500
Bindungsenergie 68, 11, 52
Bindungskonstante11
Bindungslnge 8, 52
Bindungstypen68
Biofilm362
Biogene Amine 367, 409
Biomarker473
Biomolekle
Wechselwirkungen68
molekulare Erkennung 1012
Fluss von Materie und Energie 1216
energetische Koppelung
von Reaktionen 14, 163, 165166
Biosynthesen
ATP-Verbrauch120
Biotechnologische Verfahren
Abwasserreinigung279
alkoholische Grung 44, 167168
bakterielle Grungen 213, 278, 418
Bakterienstoffwechsel277279
Biotin 459460
Biotransformation (Entgiftungs
reaktionen) 393394, 433
Evolution394
Giftung von Verbindungen 393
Glucuronidierung394
Phase 1 393
Phase 2 394
Bisphosphoglycerat BPG 420
Bitterrezeptoren372
Blasensteine423
Blattfall277
Blaualgen, Cyanobakterien 270,
277278
Blausure183
Bleiabschirmung491
Blottingverfahren 511512
Blhhormon Florigen 276
Blunt ends der DNA 502
Blutdruckregulierung360361
Bltenfarbstoffe276
Blutgefwachstum311
Blutgerinnung388393
Antikoagulationsmechanismen
Gerinnungsfaktoren390
Gerinnungskaskade389
Geschwindigkeit 390, 391, 392
inaktive Proteasevorstufen 390
in vitro391
Blutglucose435, 438
Blutgruppen, AB0 67, 292
Blut-Hirn-Schranke435
Bluthochdruck51, 354
Blutkreislauf
Lipidtransport438443
Transport der Energietrger 432436
Blutplttchen, Thrombozyten 51, 76,
360, 388389
Blutplasma 55, 67, 72, 224,
Elektrolyte 425
niedermolekulare organische
Bestandteile 438
Farbe (Bilirubin) 423
Blutserum 391
Blutstillung388
Blutvolumen 361, 426
Blutzucker435, 438
B-Lymphozyten, B-Zellen 353, 402404
BNP, natriuretisches Peptid 360361
Bodenbakterien270271
Body building
Anabolika 354355, 449
Stickstoffbilanz449
Body-Mass-Index BMI447
Bohr-Effekt 421422
Boltzmann-Konstante49
Bombykol 362
Botulinumtoxin278
Bovine spongiform encephalopathy
BSE 3839, 150
BPG, s. Bisphosphoglycerat 420421
Branching enzyme200
Brassinolide277
Braunes Fettgewebe 186
Brunungsreaktion, Maillard
reaktion438
Brechnuss, Strychnin 276
Brennwerte der Nhrstoffe 434,
446447, 451
Breitspektrum-Antibiotika279
Brennnessel358
Brenztraubensure162
Bronchialasthma358
Brustkrebs473
Budding, Knospung 288
Brstensaummembran326, 417
B-Zellen353, 402404
Antikrper404410
Klonale Selektion 403404
C
C1-Stoffwechsel239242
Oxidationsstufe der C-Einheiten 239
C3-Pflanzen, C4-Pflanzen266
Ca2+-bindende Proteine
Calmodulin336, 379
Troponin379
Ca2+-Ionen
Blutgerinnung389
Konzentration intra-/extra
zellulr425
Pumpen327, 379
Regulation der Muskelkontrak
tion379
sarkoplasmatisches Retikulum 379
Second messenger379
CAAT-Box109
535
Sachverzeichnis
Cadaverin 237
Cadherine311, 316319
Caenorhabditis elegan, s. Fadenwurm
Apoptose313314
Genom521
CAG repeats 472
Calciol, Cholecalciferol, Vitamin D3 453
455
Calcitonin356357
Calcitriol, 1,25-Dihydroxychole
calciferol356357
Calcium, s. Ca2+
Calciumapatit 385
Calciumcarbonat64
Calciumkanle 364, 379
Calciumoxalat 423
Calciumpumpen379
Calcium- und Phosphathaushalt
Calcitriol454455
Parathyrin356357
Calmodulin 336, 379
Calsequestrin379
Calvin-Zyklus266268
CAM, s. Zelladhsionsproteine
cAMP196, 203, 278, 335336, 339
Hungersignal 130, 361, 447
cAMP-Phosphodiesterase335
cAMP-responsive element binding protein
CREB335
CAP, Catabolite gene Activator Protein130
Capsidproteine (Hllproteine) von
Viren140, 144, 504, 515
Cap-Struktur der mRNA 112
Carbamoylphosphat 231
Carbamoylphosphat-Synthase I 231
Carbamoylphosphat-Synthase II 231
Carboanhydrase 414415, 429
Bohr-Effekt421
CO2-Transport im Blut 422, 427
Erythrozyten422
HCl-Sekretion 415
N-Carboxybiotin459
-Carboxyglutamat389
Carboxylasen, Cofaktor Biotin 459
Carboxypeptidasen226, 415, 494
Carboxypeptidasen A und B 415
Carnitin 211
-Carotin 73, 75, 262, 454, 465
Carotinoide277
Photosynthese453
Radikalfnger397
Carrier, s. Membrantransport
Casein463464
Caspasen314
Catabolite gene activator protein
CAP130
Catecholamine, Catechol 234, 238, 352,

367368
Neurotransmitter369
Catechol-O-Methyltransferase367
Catenine, -, -, - 318
Cathepsine226
CD45-Protein339
cDNA 145, 495, 509
cDNA-Bank, cDNA-Bibliothek 508
CDP-Cholin220
CDR, Complementarity-determining
region408409
CD (Zirkulardichroismus)-Spektros
kopie487488
Cell adhesion molecules CAM, s. Zell
adhsionsproteine114, 318319
Cellulose
pflanzliche Zellwand 321
Centriolen299
Centromer299
Centrosom299
Cerealien 450, 457, 459, 464
Cerebroside73
c-FOS 149
cGMP339, 341
Sehvorgang371
cGMP-Phosphodiesterase336
Inhibitor341
Sehvorgang371
Chaperone, s. molekulare Chaperone
Chaperonine38
Checkpoint312313
Chelatbindung52
Chelatoren391
Chemiosmotischer Mechanismus
Oxidative Phosphorylierung 183
186
Photosynthese262268
Chemoautotrophe Organismen 278
Chemokine337, 361
Chemotaxis 339340, 373
Chemotaxis-Rezeptoren339
Chemotherapie102, 253, 403, 435
Chemotrophe Organismen 1213, 154,
156, 260
Chinin 275276, 372
Chinolone141
Chiptechnik522
Chitin6264
Chloramphenicol 126, 141
Chloridkanle 276, 367
Chloridverschiebung421
Chlorophyll 262, 487
P680, PS II 262
P700, PS I 263265
Chlorophyllvorlufer243
BC
Chloroplasten 8283, 92, 260

Import von Proteinen 292293
Stickstoff-Assimilation270272
Schwefel-Assimilation272273
Cholat 417
Cholecalciferol, Calciol, Vitamin
D 453455
Cholecystokinin361
Choleratoxin278
Cholesterol 73, 220
Ausscheidung223
Cholesterol-Fettsure-Ester438443
Hemmstoffe der Synthese
(Statine) 222, 224
Homostase223224
Hypercholesterolmie224
in Galle 223
in Membranen 7678
Transport im Blut
Synthese220224
Cholesterolesterase418
Cholin 75, 220221
Cholinerge Synapse 364
Chondroblasten 319, 383
Chondroitinsulfat6566
Choriongonadotropin, Human chorionic
gonadotropin HCG352
Chromatid299, 307
Chromatin24, 9091, 471, 473
Dekondensation135
Puffing 135
Chromatographie482483
Chromosomen
Chromosomensegregation 310
chromosomale Proteine 89
knstliche Chromosomen
(Vektoren)505
Kondensation307
Mitose, Meiose 307308
Nucleosomen9091
Polytne Riesenchromosomen 135
Struktur 91
synthetische Chromosomen 474
X-, Y-Chromosom 307
Chylomikronen 418, 434, 439441
Chymotrypsin
aktive Stelle 366
Reaktionsmechanismus 54
Spezifitt 416
Chymotrypsinogen415
Chymus415
Cilien303304
Circular dichroism CD 488489
cis-Prolin 33
Citrat 172
Antikoagulans391
Citratsynthase172
536
Sachverzeichnis
Citratzyklus171175
Auffllreaktionen, anaplerotische
R.173174
Bilanzgleichung173
Reaktionen 172
Regulation 190, 192
Citrullin 231
Clathrin-coated pits/vesicles 289
Clostridium botulinum278
CO, Kohlenmonoxid 183, 341, 424
CO2, Kohlendioxid
Hauptquelle Citratzyklus 171175
Photosynthese266268
Calvin-Zyklus 267268
Transport im Blut 421422
Coatomer-coated pits/vesicles 289
Cobalamin456, 458
Methioninsynthase241
Methylfalle bei Mangel 242
Cocain 275
Codein 275
Codon118120
Codon-Anticodon-Bindung 122, 125
Coenzym A CoA 169
Coenzyme44
Coenzym Q, s. Ubichinon
Coiled coil130131,
Colchicin276
Complementarity-determining region
CDR 408409
Computerprogramme524526
Concanavalin A 65, 276
Coniferyl-Alkohole322
Coniin276
Connexon-Poren 317
Consensus-Sequenz109
Coomassie Brilliant Blue 486
Cori-Zyklus 167, 196, 427
Corpus luteum, Gelbkrper 354356
Corticoliberin350351
Corticosteron 353
Corticotropin, ACTH 348, 351
Cortisol351, 353
Osteoporose353
Corynebacterium diphtheriae126
Cosmide504
Cotranslationale Insertion von
Membranproteinen284, 287
Coulomb-Gesetz 6, 484
COX (Cyclooxygenase)-Hemmer 360
CpG-Inseln137
C-reaktives Protein, Akutphase
protein 433
CREB, cAMP-responsive element binding
protein 335
Cre-Rekombinase504
Creutzfeld-Jakob-Krankheit 39, 150
Crossing-over105106
Cross-talk bei Signaltansduktion 342
Cryptochrome344
CsCl-Gradient481
c-SRC-Gen148149
Cumarine276
Cumarolderivate
Antikoagulanzien391
Curare276
Cyanid CN 179, 183
Cyclamat372373
Cyclic AMP, s. cAMP
Cyclin-dependent kinases, CDK 308309
Cycline308309
Cycloheximid126
Cyclooxygenase COX 359, 360
Hemmer360
Cyclophilin37
Cyclosporin37
Cystathionin241
Cysteamin 169
Cystein2022
Cystin 22
Cystische Fibrose 26, 38
Cytidin 8485
Cytochrom 179, 182
Cytochrom a und a3182183
Cytochrom bf-Komplex 261, 263
Cytochrom b und c1182
Cytochrom c
Sequenzvergleiche 2627
Cytochrom c-Oxidase 182183
Cytochrom P450-Reduktase 393
Cytochrom P450-Monooxygenasen388
Induktion393
Cytokine 337, 361, 403, 409
Cytokinese307
Cytokinine, Cytokininrezeptoren 277
Cytoplasma 284
Cytosin 83, 85
Cytoskelett 298
Reissfestigkeit der Filamente 301
303
Cytosol 284
Cytotoxische T-Zellen 410
D
Dmmerungssehen 370, 453
Darmbakterien
Synthese von Vitamin K 418, 454
Darmflora
Diversitt, Mikrobiom 419
Darmepithelzellen 414, 469
Datenbanken, Verzeichnis 526
Dauerleistung, Muskel 383
Dauerwellen39
Debranching enzyme 198, 202
Decarboxylierung
Aminosuren234
-Ketoglutarat456
Pyruvat456
Dedifferenzierung des Genoms 469
Defensine 401
Dehydratisierung179
Dehydrierung179
Dehydroascorbinsure 460
7-Dehydrocholesterol453
Dehydrogenasen44, 179
Deletionen (DNA-Mutation) 26, 102,
104, 113, 118, 471, 517
Demenz 39, 472
Denaturierung
von Proteinen 3637
physiologische Bedeutung 276, 414
Dendritische Zellen 400403
Denitrifizierung im globalen Stickstoffkreislauf272
Dentin385
Desamidierung
von Glutaminresten 230, 232
von Proteinen 226
Desaminierung
oxidative232
Desensibilisierung
Signaltransduktion338
Desmin302
Desmocollin318
Desmoglein318
Desmoplakin318
Desmosin41
Desmosom 316
Desmotubulus 317
Desoxyhmocyanin419
Desoxyhmoglobin420
Desoxyribonuclease (DNase im
Darm)418
Desoxyribonucleinsure DNA 8289
Desoxyribonucleotide
dNMP, dNDP, dNTP 85
Reduktion von Ribo-dNDP zu
dNDP251252
Synthese251254
Synthese von dTMP 252254
Desoxyribose 84
Desoxythymidin dT 85
Detergenzien
Proteindenaturierung36
SDS, Sodium dodecyl sulfate484
Determinante, antigene 405
Deuterium, schwerer Wasserstoff 446
Dextran 62, 386, 481
Diabetes insipidus 426
537
Sachverzeichnis
Diabetes mellitus218
Behandlung438
Diabetes Typ 1 411, 436438
Diabetes Typ 2 438
Sptfolgen von Diabetes Typ 1 437
Diacylglycerol
Second messenger220
Dialyse 19, 500
Dicer-RNase133134
Dichtegleichgewichtszentrifuga
tion481
Dichtegradient482
Dickdarm (Colon)
Darmbakterien, Vitaminproduk
tion418419
Fulnisprodukte418
Dictyosomen285
Dicumarole
Antikoagulanzien455456
Didesoxyribonucleotide511
Dielektrizittskonstante 6, 89
Differenzielle Zentrifugation 155
Diffusion
erleichterte326
intrazellulre10
in der Membran 78
Diffusionskoeffizient481
Digitalisglykoside277
Dihydrobiopterin 234
Dihydrobiopterin-Reduktase234
Dihydrofolat FH2252
Dihydrofolat-Reduktase 141, 248,
252254
Dihydrolipoamid-Dehydrogenase169
Dihydrotestosteron 354
Dihydrouridin-Schleife in tRNA 123
Dihydroxyaceton, Hautbrunungs
mittel279
Dihydroxyacetonphosphat163164
1,25-Dihydroxycholecalciferol,
Calcitriol354
Dihydroxyphenylalanin Dopa 368
Diisopropylfluorophosphat53
Dimethylguanosin in tRNA 123
2,4-Dinitrophenol179
Diphosphatase, Pyrophosphatase 97
2,3-Diphosphoglycerat, s. 2,3-Bisphosphoglycerat
Diphtherietoxin126
Diploidie307
Disaccharidasen416
Disaccharide
Synthese und Abbau 204206
Strukturen 204
Display-Bakteriophagen515
Dissoziationsgeschwindigkeits
konstante11
Dissoziationsgleichgewichts
konstante11
Dissoziationskonstante
Disulfidbrcke 22
Disulfiram, Antabus 452
DNA
Amplifizierung (PCR) 505508
Annealing, Renaturierung 89, 505
Basenpaarung8788
Basenzusammensetzung8788
B-DNA, Z-DNA; A-DNA (s. Web
site)88
Bestimmung der Nucleotid
sequenz510511
Chloroplasten83
Codons, Tripletts 118
codierender Strang 108, 110
DNA-DNA-Hybride89
DNA-RNA-Hybride89
DNA-Superhelix 91
Doppelhelixstruktur8788
Entdeckungsgeschichte89
Genomgrssen 83, 521
Gibson-Reaktion507
grosse und kleine Furche 88
Matrizenstrang 108, 110, 505
Mitochondrien83
modulare Rekombination 521
negatives Supercoiling 91, 99
nichtcodierende (noncoding)
DNA 113, 115, 135, 520,
Packung mit Histonen 91
Rekombination 30, 105106
Rekombination mit PCR 507
Renaturierung (Annealing) 89, 505
Reparatursysteme102106
Replikation bei Eukaryonten 100
102
Replikation bei Prokaryonten 96
100
Schden102105
Schmelzpunkt89
semikonservative Replikation 89
Sequenzierung510511
Spleissen mit PCR507
Supercoiling, Verdrillung 91
Strangbruch 102103, 105, 312, 395
Terminologie der zwei Strnge 108
Thymin statt Uracil 103
DNA-Banken505, 508
DNA-bindende Proteine 130131
DNA-Bindungsdomne von Transkrip
tionsfaktoren 131
DNA-Biosynthese, s. DNA-Replikation
DNA-DNA-Hybride89
DNA-Doppelhelix8788
DNA-Doppelstrangbruch 102, 312
CD
DNA-Fluoreszenzfarbstoff486
DNA-Glykosylasen103
DNA-Gyrase141
DNA-Helicase 99, 104
DNA-Klonierung504
DNA-Ligasen502504
DNA-Methylierung135
DNA-Matrizenstrang 108
DNA-Mikrochip522523
DNA-Photolyase103
DNA-Polymerase
I und II 97, 100
III97, 99100
bei Eukaryonten 101
Exonuclease-Aktivitt9798
Prozessivitt 100
thermostabile 505, 507
DNA-Primase 99, 101
DNA-Rekombination105106
DNA-Reparatur102105
DNA-Replikation
DNA-Polymerase9697
Eukaryonten 83, 521
Eukaryontische DNA-Polyme
rasen99100
Fehlerfrequenz96
Geschwindigkeit96
Klammer (-Untereinheiten;
PCNA-Clamp) 100, 101
Korrekturlese-Mechanismus 98
Leitstrang und Folgestrang 97
Negatives Supercoiling 91
Okazaki-Fragmente97
Origin of replication ORI 98, 142
Prokaryonten96
Replikationsgabel97
Replikationsblase99
RNA-Primer99
Telomere 101
DNA-RNA-Heteroduplex 89, 97, 111,
509
DNA-Schden
Checkpoints312313
Hufigkeit102
Mismatch-Reparatur102, 104
p16, p21 (Zellzyklus-Inhibitoren) 308
Reparatursysteme102106
SOS-Reaktion105
Ursachen102
DNase 144, 314, 418, 502
DNA-Sequenzanalyse510511
DNA-Sonden512
DNA-Struktur 8688
DNA-Superhelix 91
DNA-Synthese 97100, 505
DNA-Topoisomerase II 91
DNA-Viren144
538
Sachverzeichnis
Dolichol 277, 292293

Dolicholphosphat293
Dolly516
Dopa 352
Dopachinon 236
Dopamin 352
Neurotransmitter367
Parkinson-Krankheit367
Synthese 368
Doping353354
Doppelhelixstruktur8788
Dotterbildungshormon bei
Insekten362
Down-regulation von Rezeptoren 339
Downstream96
D-Ribose 84
Drosophilafliegen 83, 133, 135, 472,
474, 521
dsRNA 87, 134, 140, 146, 401
Duftklassen, Duftstoffe 372
Dngung270
Dunkelreaktionen der Photosyn
these260261
Dnndarm
Aminopeptidasen415
Disaccharidasen416
lsliche Enzyme 415416
pH415
Dnnschichtchromatographie483484
Duodenum 352, 361, 415416
Dyneine303
Dynorphine369
E
E1A-Protein, Adenovirus 148
E7-Protein, Papilloma-Virus 148
E-Cadherin311, 318
Ecdyson361362
ECM, Extracellular matrix319322
Edman-Abbau494
EDTA, Ethylendiamintetraacetat,
Antikoagulans391
Effektor-B/T-Zellen403
EF-G124
EF-Ts124125
EF-Tu124125
EGF, Epidermal growth factor 149, 333,
337, 513
Eikosanoide353, 359, 373
Einzelnucleotidpolymorphismen,
s. SNP520
Einzelstrang-Bindungsprotein SSB99
Eisen
Eigenschaften462463
Konzentration in Krperflssig
keiten462
Nitrogenase270
Resorption aus Darm 462463
Stoffwechsel462463
Eisenmangelanmie462
Eisen-Schwefel-Zentrum181
Eisenspeicherproteine463
Eisenberladung462463
Eisprung356
Eiweie, s. Proteine
Eizelle 306307, 313314, 352, 373,
468469, 516
Elastase415
Spezifitt 416
Elastin41
Extrazellulre Matrix 319
Elektrische Synapsen 364
Elektrochemisches Potenzial 184
Innere Mitochondrienmembran 184
Membranpotenzial325
Elektrolyte
in Flssigkeitskompartimenten 462
in Nahrung 461462
Elektrolythaushalt 425
Elektronendichtekarte495496
Elektronenmikroskopie497499
Elektronentomographie499
Elektrophorese484486
Elektroporation502
Elektrospray-Ionisiation489
Elemente
lebensnotwendige5, 461
ELISA, Enzyme-linked immunosorbent
assay410, 490
Elliptizitt488
Elongationsfaktoren, Translation 124
Elternschaftsnachweis521
Elutionsprofil, Elutionsvolumen 484
Embryonalentwicklung 318, 357
Empfngnisverhtung
hormonale356
postkoitale356
Emulgatoren als Lebensmittel
zusatz465
Emulgierung der Triacylglycerole 418
Enantiomere22
Encephalopathien, spongiforme 3839
Endergonische Reaktion 13
Endocytose289290
Endokrine Drsen 348349, 361
Endonucleasen502
Endopeptidasen 415
Endoplasmatisches Retikulum ER 285
286
glattes/raues ER 284
Proteinimport287289
Proteinmodifikation290292
Endorphine 369
Funktion und Wirkung 350351, 369
Endosomen 286, 290291

Endosymbionten284, 286
Endothel320
Endplatte, motorische 365, 379
Energiebilanz
Abbau Palmitinsure 212
Calvin-Zyklus266
Glykolyse167168
Gluconeogenese 196
oxidativer Glucoseabbau 188189
Energiereiche Verbindungen 15
ATP 15
G0 fr Hydrolyse 15
Energiereserven des menschlichen
Organismus379, 434
Energietrger
Lipidtransport im Blut 438443
Transport im Blut 437, 439
Verteilung im Krper 433
Energieverbrauch des Krpers 435, 447
Enhancer 110
Enkephaline350351
Enolase 167, 386
Enolform von Cytosin 8384
Enoyl-CoA 212
Enoylhydratase 212
Enoyl-Reduktase 215
Entactin320
Enterohepatischer Zyklus 418
Enteropeptidase 416
Enterotoxine279
Entgiftungsreaktionen, s. Biotrans
formationen
Enthalpie13
Entkoppelung
Atmungskette und oxidative
Phosphorylierung185
Dinitrophenol179
Entropie 1213, 154
Entzndung 255, 306, 340341, 358,
360, 402, 433, 471
ENV-Gen147148
Enzyme
Affinitt fr Substrat 4849
Affinittsreagenzien51
Aktivatoren50
Aktive Stelle 4445
Aktivierungsenergie4546
allgemeine Eigenschaften 4445
allosterische Regulation 5559
Einheit der Aktivitt 46
Enzym-Substrat-Komplex45
Inhibitoren5051
Katalyse und Aktivierungsenergie 46
kcat-Inhibitoren51
Kinetik4651
Klassen44
Km4649
539
Sachverzeichnis
Kooperativitt 55, 57
konstitutive und induzierbare 109,
160
kovalente Modifikation 44
Mechanismen5355
Michaelis-Menten-Konstante4649
Molekulare Aktivitt (Wechselzahl)46
Nomenklatur44
pH-Optimum51
Phosphorylierung59
praktische Verwendung
proteolytische Aktivierung 59
Reaktionsspezifitt44
Regulation der Aktivitt 5051, 59,
128137
sigmoide Kinetik 5559
spezifische Aktivitt 46
Substratspezifitt45
Temperaturabhngigkeit 50
bergangszustand4546
bergangszustandanaloge52
Ephrine338
Ephrinrezeptor338
Epigenetik135137
DNA-Methylierung136137
epigenetische Regulation
der Transkription 135, 137
epigenetische Vererbung 135
Histonacetylierung135136
RNA-Interferenz, RNAi 137
Epimerase205
Epinephrin, s. Adrenalin
Epiphyse352
Epithelzellen 38, 302303, 320, 371,
401, 414
Epitop 405
Epo, s. Erythropoietin
Epoxide393
Epstein-Barr-Virus149
ER, s. endoplasmatisches Retikulum
Erbkrankheiten 26
Erektion341
Ergotalkaloide274275
Ernhrung des Menschen 446465
Erregungsbertragung365
ER-Vesikel 287, 482
Erythroblasten245
Erythrozyten
Bildung245, 353
Carboanhydrase421422
Chloridverschiebung421
Glutathion396
Grsse45
Lebensdauer27
Met-Hmoglobin395, 419
Sichelzellen2627
Erythromycin126
Erythropoietin337, 353354
Escherichia coli
Chromosom83
Verdoppelungszeit154
Essenzielle Nahrungsbestandteile
Essenzielle Fettsuren 217, 448449
Essenzielle Aminosuren 450
EST-Datenbanken521
Esterasen44
Estrogene, s. strogene
Ethanol
Abbau452
Alkoholismus452
Kaloriengehalt451
Konzentration im Blut 451
Ethidiumbromid486
Ethylen 277, 344
Ethylendiamin-Tetraacetat, EDTA,
Antikoagulans391
Eukaryonten 5
Evolution
der Proteine 2527
gerichtete (forcierte) moleku
lare515516
Exergonische Reaktion 13
Expression rekombinanter Proteine
und RNA 512514
Expressionsvektoren 488, 505
Exocytose289
Exon-Intron-Struktur der Gene 113115
Exon shuffling113
Exonucleaseaktivitt der DNA-Polymerase9798
Exonucleasen100
Exopeptidasen226, 415
Exophthalmus357
Expressed sequence tags EST521
Extinktionskoeffizient487
Extrazellulre Matrix ECM 319322
Bestandteile319322
Blutgerinnung388
Fibronectin113
Exzisionsreparatur der DNA 102
F
Fab-Fragment408
F-Actin377
FAD, Flavin-Adenin-Dinucleotid 173, 181
FADH173, 181
Faeces, Bestandteile und Geruch 418
-Faltblatt30
parallel/antiparallel 33
Faltung von Proteinen 3036
Fehlfaltung 30, 3839
Faraday-Konstante180
DF
Farbensehen 370
Farbstoffe 234, 235, 245, 260, 262,
276277, 370, 418
Farnesyldiphosphat 223
Faserproteine 20, 24, 40
Fas-Liganden/Fas-Protein410
Fulnis418
Favismus396
Fc-Fragment 408
Fc-Rezeptoren409
Ig-Superfamilie410
Federn39
Feedback inhibition 59
Fehlernhrung446
Fehlfaltung von Proteinen 30, 3839
Fehlpaarungs(Mismatch)-Reparatur104105
Fehler bei Replikation, Transkription,
Translation
Hufigkeit122
Konsequenzen122
Fenton-Reaktion395
Ferment44
Ferredoxin
Photosynthese261264
Stickstofffixierung270
Ferredoxin-NADP+-Reduktase263264
Ferri-Hydroxid-Phosphat463
Ferri- und Ferro-Protoporphyrin 182
Ferritin462
Ferrochelalase244
Fertilittsfaktor F von E. coli505
Festwinkelrotoren481
FeS-Zentren181
Fetales Hmoglobin HbF 421
Bisphosphoglycerat BPG 421
Fettgewebe
Stoffwechselfunktion210
Lipase210
Zellen 210, 219, 432, 434
Fettreserve
Fettsurezusammensetzung219
Fettresorption453
Fettsureabbau
ATP-Bilanz212
Bilanzgleichung212
in Glyoxysomen 273
-Oxidation210213
ungeradzahlige Fettsuren 213
ungesttigte Fettsuren 213
Fettsuren
essenzielle 217, 448
freie Fettsuren im Blut 438
gesttigte und ungesttigte 219
mehrfach ungesttigte, Vorstufe von
Eikosanoiden359
omega-3-Fettsuren448449
-Oxidation210217
540
Sachverzeichnis
Schmelzpunkt71
Synthese213217
trans-Fettsuren449
Transport in Mitochondrien 210211
Fettsuresynthase214216
Fettsuresynthese
Bilanz216
Doppelbindungen215216
Kettenverlngerung (<C16)216
Quelle von NADPH 216, 223
Regulation223
Fettsucht447
F-Faktor, Fertilittsfaktor von E. coli505
FGF, Fibroblast growth factor 320
Fibrillin31, 41
Fibrin
Fibrin s, Fibrin i 390, 392
Polymerisierung 391, 392
Fibrinogen391
Fibrinolyse392393
Fibrinopeptide391392
Fibroblasten 133, 313, 319320,
384, 401
Fibronectin
RGD-Segment321
Ficoll481
Flagellen303304
Flavin-Adenin-Dinucleotid FAD 181
Flavinmononucleotid FMN 181
Flavodoxin34
Flavonoide276
Flavoproteine 178, 344
Fliegenpilz367
Fliegleichgewicht47
Flippasen, Floppasen 76
Florigen276
Fluorescence resonance energy transfer
FRET500
Fluoreszenzmikroskopie 303, 488,
Fluoreszenzspektrometrie486488
Fluoridprophylaxe386
Fluorouracil248
Flssigkeitskompartimente
des Krpers 414
Volumina und ihre Bestimmung 425
Zusammensetzung425
Flssigmosaik-Struktur biologischer
Membranen7677
fMet-tRNAf124
FMN, Flavin-Mononucleotid 181
Fokale Adhsionen 318
Folgestrangsynthese der DNA 101
Follikelhormone354
Follitropin, Follikelstimulierendes
Hormon FSH 355356
Folsure, Folat 239
Folsureantagonisten 51, 248, 254
Folsuremangel, Spina bifida460

Formyl-Methionin125
N-Formyl-Met-tRNAf124
Fourier-Transformation495
F-Pili141, 505
FPLC, Fast protein liquid chromato
grapy483
Free electron laser 495
Freeze-fracture EM-Technik 498
Freie Energie (G)
und Gleichgewicht 13
nderung (G) 13
der Hydrolyse von Verbindungen 15
Freigrenze fr radioaktive Subs
tanzen491
FRET, s. Fluorescence resonance energy
transfer 500
Fruchtreifung277
Fructokinase206
Fructose
Sstoff279
Fructose-1,6-bisphosphat163
Fructose-1,6-bisphosphat-Aldolase 163
Fructose-1,6-bisphosphatase 158
Fructose-2,6-bisphosphat
Fructose-1-phosphat206
Fructose-1-phosphat-Aldolase206
Fructoseintoleranz, hereditre 206
FSH, s. Follitropin
Fumarase 172
Fumarat 172
Fungizid 184, 277, 400
Fusionsprotein 488, 515, 523524
Futile cycle, Leerlaufzyklus 158, 196
G
GABA, -Aminobutyrat 367
Rezeptoren367
Synthese 368
G-Actin377
GAG-Genprodukt in Viruskapsel
(Capsid)147148
Galactokinase205
Galactosmie205206
Galactose 205
Galactose-1-phosphat 205
in Keratansulfat, in Agar 66
Stoffwechsel204205
Galactose-Permease128
Galactosid-Acetyltransferase128
-Galactosidase, Lactase 416
Induktion128129
Galactosurie205
Galacturonat202
Galle
Bestandteile 223, 388, 394, 417418,
423
pH415
Gallenfarbstoffe423
Gallengangverschluss418
Gallensuren418
Synthese417
enterohepatischer Zyklus 418
Gallensteine418
Gammastrahlung491
Ganglioside73
Gap junction, Nexus 317
Permeabilitt317
elektrische Synapsen 317
Grung
alkoholische Grung 162, 167168
bei Bakterien 278
Milchsuregrung162
Gasbrand278
Gaschromatographie483
Gaskonstante49
Gastrin361
Gastrointestinale Hormone 415
Gated channel 327
Gated transport 294295
Gaucher-Krankheit, Morbus
Gaucher513
GC-Box109
GDP/GTP-Austauschfaktor334335
Gebrmutterhalskrebs, Prophy
laxe148149
Gedchtniszellen im Immun
system403404
Gefriertzung498
Gehirn
Entwicklungsstrung463
Glucoseverbrauch194
Stoffwechsel162163
Geieln, Flagellen 339340
Gelatine 20, 465
Gelbkrper, Corpus luteum355356
Gelbsucht, Ikterus 424
Gelelektrophorese484486
2D-Gelelektrophorese522
Gelenkschmiere65
Gelfiltration, Size exclusion chromato
grapy482484
Gemischt-funktionelle Oxidase 216
Genregulation128137
Genbanken508
cDNA 508
DNA-Identifizierung509510
Expressionsbanken510
genomische Banken 508
Gendiagnostik520521
Genduplikation25
541
Sachverzeichnis
Gene, Anzahl in Organismen 521

Gene silencing133134, 514
Genetischer Code 102, 118120
degeneriert118
Genetischer Fingerabdruck in
(Forensik)521
Genetische Rekombination 105106
Genexpression
Expressed sequence tags EST521
Mastergen133
Mikrochip-Analyse522523
Programmierung135137
Regulation, epigenetisch 135137
Regulation, posttranskriptional
Regulation, transkriptional 133137
spezifische Unterdrckung 133134,
514
Genfhren, s. Vektoren
Genom
Analyse520521
Bakterien83, 89, 521
Eukaryonten 83, 521
Viren 83, 89, 144147
Zellorganellen 8283, 8990
Genomik474475
Genom-Sequenzen520521
Genregulatorproteine110111
Genrekombination
Immunsystem406407
Gentechnik502517
wichtige Enzyme 502504
Produkte512514
Gentherapieversuche, somatische
Gentherapie504505
Genzahlen in verschiedenen
Organismen521
Geraniol372
Gerinnungsfaktoren389393
Gerinnungshemmer391
Gerinnungskaskade389
Gerinnungsproteasen389
Gerinnungsschema389
Gerinnungsstrungen456
Geruchsqualitten372
Geruchsrezeptoren372
Gerstproteine, Scaffold proteins341
342
Geschlechtszyklen, Mensch/Tiere 355
Geschmacksqualitten364, 372, 465
Geschmacksrezeptoren372
GPCR372
Ionenkanle372
Geschmacksverstrker373
Gesetz des Minimums 448
Gestagene Hormone 351, 355356
Kontrazeption356
Getreideproteine464
Gewebefaktor, Tissue factor389390
Gewebehormone, Mediatoren 358361

Gewebe-Plasminogenaktivator
(tPA)392393
Gewebeschnittmethode155
Gewebethromboplastin, Tissue
factor389393
Gewebetypen 316
GFAP, Glial fibrillary acidic protein302
GFP, Green fluorescent protein488
Ghrelin361
Gibberelline277
Gibson-Reaktion507
Gicht248, 255257
Giftung, s. Biotransformation
Glandotrope Hormone 350
Glaskrper des Auges 65, 384385
Glatte Muskulatur 376377
Glattendige DNA 502
Gleichgewichtsdialyse500
Glial fibrillary acidic protein GFAP302
Globin20
Globulre Proteine 20
Glomeruli
Filtrationsrate6263
Ultrafiltration422
GLP-1, Glucagon-like peptide 1361
Glucagon358359
Glykogenstoffwechsel196197
Glykolyse und Gluconeogenese 196
hormonregulierte Lipase 210, 219,
436
Hungerzustand 210, 219, 435
Postresorptionsphase432
Regulation der Sekretion 201, 358
wechsel201, 203
Glucocorticoide
Tag-Nacht-Rhythmus353
Glucocorticoid-Rezeptor 132, 353
Glucocorticoid response elements
GRE 132, 353
Glucogene Verbindungen
glucogene Aminosuren 232
Propionat213
Glucokinase433
Gluconeogenese
Bilanz196
Hungerzustand
Reaktionen195
Regulation197
Gluconolactonase206
Glucoplastische Verbindungen,
s. Glucogene Verbindungen
Glucose 156
Aufnahme in Zellen 162163,
432433, 436
Hypoglykmie 206, 213, 435
Insulin 358359, 435
FG
Kontrolle der Konzentration im

Blut358
Resorption durch Darmepithel 328
Resorption in Nierentubuli 422423
Stoffwechsel 162175, 194197
Glucose-1-phosphat 198
Glucose-6-phosphat 15, 199, 206, 433
Dehydrogenase 27, 45, 206207
Isomerase157
Phosphatase195
Glucose-6-phosphat-DehydrogenaseMangel207
Glucosetransporter162163
Glucosurie437
Glucosylceramidase38
Glucosyltransferase198
Glucuronat65, 202
Glutamat
Geschmacksverstrker373
Neurotransmitter367
Umami-Geschmack372
Glutamat-Dehydrogenase
Glutamat-Oxalacetat-Transaminase
GOT, AspAT 45, 228229
Glutamat-Synthase271
Glutamin
Speicher- und Transportform von
Ammoniak230
Glutaminase230
Glutaminsynthetase230
Glutathion 397
Oxidation, Reduktion 272, 396
Radikalfnger395
Glutathionreduktase396
Glutathionperoxidase396
Selenocystein396
Glutenempfindlichkeit, Zliakie 464
Glutenin464
Glycation, nichtenzymatische Glykierung437
Glycerin, s. Glycerol
Glycerinaldehydphosphat 165
Glycerinaldehydphosphat-Dehydrogenase165
Reaktionsmechanismus166
Glycerol, Glycerin 71, 72, 218
Glycerol-3-phosphat218
Glycerol-3-phosphat-Dehydro
genase218
Glycerolkinase218
Glycerolmonostearat465
Glycerolphosphatide 72
Glycerol-3-phosphat-Zyklus188
Glycin2021
Neurotransmitter367
Glykane6268
542
Sachverzeichnis
Glykierung von Proteinen 437

Glykocholat 417
Glykogen
Abbau und Synthese 197201
Regulation von Abbau und Syn
these201203
Struktur63
Vorkommen197
Glykogengranula197
Glykogenin198
Glykogenolyse201
Glykogenphosphorylase199
Glykogenreserve199, 434435
Glykogenspeicherkrankheiten202
Glykogensynthase199
Glykokalix66, 291
Glykolipide6667, 7276
Glykolyse162168
ATP-Bilanz167, 168
Regulation163
Schrittmacherenzym164
Zwischenprodukte163
Glykoproteine 6465, 291, 322,
361, 384
Glykosaminoglykane65
Glykosidasen293
Glykosidische Bindung 62, 67, 291
Glykosylierung von Proteinen
analytische Untersuchung 499
N-Glykosylierung292
O-Glykosylierung292
Glyoxylatzyklus175
Glyoxysomen273
GMO, Genetisch modifizierte
Organismen502
GMP, Guanosinmonophosphat 8485
Golgi-Apparat
cis-/mediale/trans-Golgi-
Zisternen290
Proteintransport290
Proteinmodifikation291292
Gonadoliberin 351352, 356
Gonadotrope Hormone 352
GPCR G-Protein-gekoppelte
Rezeptoren333336
Adenylatzyklase 196, 372
Aktivierungszyklus334336
Geruchsrezeptoren 334, 364,
372373
Geschmacksrezeptoren364,
372373
Rhodopsin364
7TM-Struktur370
GPI-Anker79
G-Proteine 149, 196, 334336
Choleratoxin278
Diphtherietoxin278
Membranfusion289,
muscarinische Acetylcholinrezep
toren367
Sehvorgang 370371
G-Protein-gekoppelte Rezeptoren,
s. GPCR
Gramfrbung68
Granulozyten 358, 361, 373, 396,
400401, 409, 513
Respiratory burst396
ROS395396
Granzyme410
GRE, Glucocorticoid response element 132
Green fluorescent protein GFP 488
GRH, Growth hormone releasing
hormone, Somatoliberin 350352
Grsse biologischer Strukturen 4
Grundumsatz446447
Kontrolle durch Schilddrsen
hormone356357
Gruppenbertragungspotenzial14
Phosphatverbindungen15
Thioester166
GSH, reduziertes Glutathion 396
GSH-Peroxidase396
GSSG, oxidiertes Glutathion 396
GTP, Guanosintriphosphat 8485
Guanidiniumsalze36
Guanin 82, 85
Guanine-nucleotide-exchange factor
GEF 289
Guanine-nucleotide-releasing protein
GNRP289
Guanosin 8485
Guanylatcyclase, Rezeptor-Guanylat
cyclase337, 339, 341
Gyrase, Topoisomerase II 91
g-Zahl bei Zentrifugation 480
H
H2S, Schwefelwasserstoff 272
Haare24, 39, 302
Haarnadelschleifen in RNA, hairpin
loops89
Hageman-Faktor, Faktor XII 390
Halbwertszeit
Lipide (Umwlzung) 286
Proteine120
RNA 115, 133
Zellbestandteile159
Halluzinogen275
Halobakterien277
Hm 423
Abbau423424
Synthese243244
Vorkommen182, 243
Hmatin243
Hmochromatose463
Hmocyanin419
Hmodialyse19
Hmoglobin 20, 25, 27, 134
F/A (Ontogenese) 421
2,3-Bisphosphoglycerat BPG 421
Bohr-Effekt421
Globinketten ,,, 25
Glykierung437438
Hmtasche419
HbA1 421
Homologie mit Myoglobin 26
Konformationsnderungen420
Kooperativitt 5758, 420
O2-Bindung419421
O2-Bindungsstelle420
O2-Transport im Blut 419421
Regulation der Synthese 243244
Struktur 244
Hmolyse 220, 396
Hmophilie 390 513
Hmosiderin462463
Hmoxygenase 341, 463
Hmproteine243
Hmsynthese243245
ha-RAS (Harvey-RAS)-Onkogen149
Harnkonkremente248
Harnsure255256
Bildung255256
pKa255
Lslichkeit255
Harnsteine248
Harnstoff 231
Proteindenaturierung36
Harnstoffzyklus 231
Haut
Ausscheidung von NH4+ bei wasser
lebenden Vertebraten 230
Bildung von Calciol 453
Ersatz 470471
Krebs 104, 411
Hutungshormon der Insekten,
Ecdyson361362
Hb, s. Hmoglobin
H-Bindung67
HCG, Human chorionic
gonadotropin352
HCl (Salzsure) im Magen 414415
HDL, High density lipoproteins439441
HDL-Rezeptoren442443
Hefegrung167168
Hefepaarung, Mating524
Helicase 99, 104, 133134
-Helix3032
543
Sachverzeichnis
Helix-turn-helix-Motiv131
Helpervirus504
Hemicellulosen322
Hemidesmosomen316
Henderson-Hasselbalch-Puffer
gleichung427
HCO3/H2CO3428
Heparansulfat 66
Heparin 66
Antikoagulans391
Hepatitis-Viren 146, 513
Heptad repeat301
Herbizide, Entgiftung 394
Herceptin473
Herzglykoside277
Herzinfarkt
Troponin als Biomarker 379
Herzmuskel, Myocard 376
Heteroglykane6468
Hexokinase164
HGPRT, Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase249
Hibernation, knstliche 49
HIF, Hypoxia-inducible factor 353
Hilfsvirus, Helper virus504
Hill-Koeffizient57
Hirnanhangsdrsen349
Hirnblutung456
Histamin 358
allergische Reaktionen 358
Gewebehormon358
Neurotransmitter367
Histidin2021
Histidinkinasen
an Rezeptor gebundene 337, 339
Histidin-Tag483
Histone9091
Histonacetylierung135136
Histon-Code 136
Modifizierung136
Oktamer9091
Hitzedenaturierung von Proteinen 36,
276
Hitzeschockproteine, s. Hsp 37
HIV, Human immunodeficiency
virus 144, 147
HLA, Human leucocyte antigen 401
HMG-CoA, Hydroxy-methylglutaryl-CoA 222
HMG-CoA-Reduktase222
HMG-CoA-Lyase217
hnRNA, heterogene nuclere RNA,
pr-mRNA112
Hochdurchsatzverfahren, Omik-Tech
niken520525
Hoden 351352, 354355
Hhenadaptation
2,3-Bisphosphoglycerat BPG 420
421
Erythropoietin337, 353354
Holliday-junction 105106
Holoenzym52
Holz 63, 273, 321
Homocystein 241
Homogentisat 235
Homogentisat-Dioxygenase 235
Alkaptonurie235, 237
Homoglykane6264
Homologe Proteine 2526
Homologie2526
Homobox-Gene, Homodomne 133
Hormone348362
bei Pflanzen 276277
direkte Wirkung oder Signaltrans
duktion341
fetttlsliche348
Hierarchie der Hormondrsen 348
349
Hypothalamus-Hypophysen
system349
Inaktivierung349
Invertebraten361362
Kontrazeption356
Konzentrationen im Blut 349
Regelkreise349
Releasing factors349
Rezeptoren 348, 351, 353, 354, 356,
358
wasserlsliche348
Hrner24
Hornhaut 384, 385, 453
HPLC, High performance/pressure liquid
chromatography483
Hsp60, Hsp70, Hsp90, Hsp100
(Hitzeschockproteine)3738
Hufe39
Hhnereiwei, Ovalbumin 18, 110,
450451, 460
Hllproteine (Capsidproteine)
von Viren 140, 144, 504, 515
Human immunodeficiency virus HIV 144,
147
Hummel-Dreyer-Methode500
Hungersignal 130, 210, 219, 361, 447
Hungerzustand 131, 217219, 226, 228,
427, 435436
Anpassung des Organstoff
wechsels435436
Ketonkrper217218
Konzentration der Energietrger
im Blut 437
Huntington-Krankheit471472
GH
Hutchinson-Gilford-Progerie
syndrom472
Hyaluronsure 6567
Hydratmantel9
Hydrazin 270
Hydridion456
Hydrogencarbonat, HCO, Bicarbonat 6
CO2-Transport im Blut 421422
Hydrogencarbonat-Kohlensure-
Puffer426429
Hydrophober Effekt
Stabilisierung der Proteinstruktur810
Hydroxyacyl-CoA 212
-Hydroxyacyl-CoA-Dehydroge
nase212
-Hydroxybutyrat 217
Hydroxylapatit385
Hydroxylase183, 234, 237239
Hydroxylradikal 394395
Hydroxylysin 24, 385
3-Hydroxy-3-methylglutaryl-CoA
HMG-CoA 222
HMG-CoA-Lyase217
HMG-CoA-Reduktase59, 222224
Inhibitoren222
Regulation223
HMG-CoA-Synthase222
p-Hydroxyphenylpyruvat 235
Hydroxyprolin
Ascorbinsure460
Hydroxylierung von Pro und Lys 24
Kollagen 24, 384
pflanzliche Zellwand 322
5-Hydroxytryptamin, Serotonin 358,
367368, 388, 447
Hydroxypurine und Hydroxypyrimidine:
Keto-Enol-Tautomerie 83
Hypercholesterolmie 224, 443
Hyperglykmie437
Hyperkalimie426
Hyperlipidmie442
Hypermutation, somatische 405, 407
Hyperpolarisierung der postsynap
tischen Membran 367
Hyperthermie 49, 186
Hyperurikmie 255, 257
Hyperventilation428
Hypervitaminosen 453, 455
Hypocalcmie, Tetanie 357
Hypoglykmie 163, 202, 205206, 213,
352, 435, 438
Hyponatrimie426
Hypoparathyreoidismus357
Hypophyse 349
544
Sachverzeichnis
Hypophysenhinterlappen, Neurohypophyse 349

Hypophysenvorderlappen, Adenohypophyse 349
Hypothalamus348352
Hypothalamushormone 350
Hypovitaminose, Avitaminose 453
Hypoxanthin249, 257
Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyl-Transferase HGPRT 249
Hypoxia-inducible factor HIF353
I
I-Banden 378379
I-CAM, interzellulres Adhsions
molekl319
IgA, IgD, IgE, IgG, IgM 407
Ig-Domne 333, 410
IGF1, IGF2, Insulin-like growth factors 311, 333
Ig-Superfamilie410
Ikterus, Gelbsucht 424
IMAC, Immobilized metal ion affinity
chromatography 483
Immunglobuline
CDR, Complementarity determining
region, hypervariable Region 408
409
Domnen410
Fab- und Fc-Fragment 408
Glykosylierung407
H-Ketten406409
Klassen (IgA,D,E,G,M) 409
Klassenwechsel407
Konstante und variable Region 408
L-Ketten408409
Struktur 408
Immunprzipitat409
Immunschwche
Aids, HIV 144, 147, 411
kongenitale257
Immunsuppression
Cyclosporin37
Glucocorticoide353, 411
Immunsystem
adaptive Immunantwort 402403
angeborene Immunitt 400402
Antikrperdiversitt404409
B-Lymphozyten und T-Lympho
zyten402403
Effektor- und Gedchtniszellen 403
404
Genrekombination403405
humorale und zellulre Immunantwort400
Immunglobulin-Gene406
Immunglobulin-Klassen409
Immunglobulin-Struktur408
klonale Selektion 403404
MHC-Proteine, Major histocompatibility complex401
primre und sekundre Immunantwort 405
Immuntoleranz410411
Importrezeptoren der Mitochon
drien292294
Indol418
Indol-3-acetat277
Infrarotspektroskopie487
Inhalationsansthetika80
Initiationsfaktoren der Translation 123
124
Initiator-Methionin124
Initiator-Met-tRNA124
Initiatorprotein, DNA-Replikation 99
Inosin (I) 118
Inosin-5-phosphat, Inosinmonophosphat IMP 249
Inositolphospholipide
als Second messengers220
PI-3-Kinase339
Inositol-1,4,5-trisphosphat InsP
Second messenger336
Insektenhormone361362
Insektizide 183, 366, 474
Insertionen (DNA-Mutation) 102, 104,
118, 507
Insertionssequenz 105, 140
Insulin
A- und B-Kette, C-Peptid 359
Diabetes Typ 1 und 2 436
Glykogenstoffwechsel 358
Glykolyse und Gluconeogenese 196
Halbwertszeit358
Hormonregulierte Lipase 436
Hungerzustand436
Proinsulin 359
wechsel 163, 197, 201
rekombinantes513
Resorptionsphase432
Speicherung, Sekretion 163
Synthese359
Wirkung auf Stoffwechsel 163
Insulin-like growth factor IGF311, 333,
337, 339, 352
Insulinunabhngiger Diabetes
Typ2436437
-Integrase105
Integrine316
Blutplttchen321
Signalbermittlung321
Interaktom474475
Interferone 337, 361, 401
Interleukine IL-1, IL-2 333, 337, 340, 361
Intermedirfilamente301303
Desmosomen316
Durchmesser317
Typen317
Hemidesmosomen316
Kernlamina301
Intermembranalraum 184, 261, 286,
293294
Interphase 307
Intrinsic factor460
Intrinsically disordered proteins 35
Intron-Exon-Struktur der Gene 113
In-vitro Translation 513
Inulin6263
Inverted repeats133, 140, 142
Iod
Iodidgehalt der Nahrung 463
Iodidmangel, Iodidprophylaxe 463
Iodprobe auf Strke 63
Iodthyronine 351352, 356357
Ionenaustauschchromatographie483
484
Ionenkanle327328
ligandgesteuerte328
mechanisch gesteuerte 328
spannungsgesteuerte327
temperaturregulierte Kanle 328
Ionenpaarbindungen 8
Ionenpumpe327
Ion-gated channel328
Ionisationszustnde von Aminosuren
und Proteinen 23
Ionisierende Strahlung 102, 234, 395, 491
Ionophore327
IPTG, Isopropyl--D-thiogalactosid 129
Isocitrat171172
Isocitratdehydrogenase 172
Isoelektrische Fokussierung 484485
Isoelektrischer Punkt pI 23
Isoenzyme45
Isoleucin2021
Isolierung von Zellorganellen 155
Isomaltase416
Isopentenyldiphosphat75, 222223
Isopeptidbindung 391392, 397
Isopropyl--D-thiogalactosid IPTG 129
Isotopeneffekt490
Isotopenmarkierung489490
hufig verwendete Isotope 446, 491
Halbwertszeiten491
stabile und labile Isotope 446, 491
Isotypen von Antikrpern 407
545
Sachverzeichnis
J
J-Gensegmente der Immun
globuline 406
Jod, s. Iod
Junk food452
Juvenilhormon der Insekten 362
K
K+-Ionen 325326, 365
Kfigstruktur, Klathrat 9
Klterezeptoren328
Kanalproteine327328
Kanzerogenese310312
Kapillarelektrophorese484
Kaposi-Sarkom149, 411, 513
Karies
Fluoridprophylaxe 386
Kartoffeln als Nahrungsmittel 62, 210,
448
Karzinom 311
Karzinogene 102
Kaskadenmechanismus zur Signal
verstrkung201202
Katabolismus156
Katabolit-Repression130
Katalase396
Katalyse
Aktivierungsenergie4546
Enzym-Mechanismen5155
katalytische Aktivitt 46
Kationenkanle 367, 373
Kautschuk 222, 277
kcat-Inhibitoren51
kcat, molekulare Aktivitt 46
Keimbahn 102, 147, 306, 313
Keimzellen306
Keratansulfat66
Keratine
-Keratin39
-Keratin39
Kernhlle 294295
Kernlamina301, 302
Zerfall bei Zellteilung 301
Kernlokalisationssignale295
Kernporen294295
Kernspinresonanzspektroskopie
NMR487, 497
Kernteilung 284, 307
Ketimin-Zwischenverbindung229
Ketoacidose437
Ketoacyl-CoA 212
Ketoacyl-Reduktase 215
Ketoacyl-Synthase, Condensing
enzyme214215
Keto-Enol-Tautomerie 83
-Ketoglutarat
Citratzyklus 172
oxidative Decarboxylierung 171
oxidative Desaminierung
von Glutamat 181, 230
reduktive Aminierung 238
Transaminierung238
-Ketoglutarat-Dehydrogenase171
Cofaktoren171
Ketonkrper
Diabetes mellitus 217
Hungerzustand217
metabolische Acidose 218
Synthese217
Killerzellen401
Kindstod, pltzlicher 213
Kinesine 303
Kinetochor 299, 309310
Km, Michaelis-Menten-Konstante 4748
Knallgasreaktion 178, 395
Klathrat9
Kleinwuchs bei Iodmangel 463
Klon140
Klonale Selektion im Immun
system403404
Klonierung
DNA508
Zellen und Organismen 140,
516517
Knochen 383
Calcitriol357
Chondroitinsulfat6566
Mineralisierung, Demineralisierung 453, 455
Glucocorticoide353
Osteoblasten 351, 383, 385
Zielgewebe der Somatomedine 351
Knock-out-Organismen 122, 134, 149,
502
Knllchenbakterien270271
Knorpel66, 319320, 383385
Kochsalz
Iodid-Zufuhr463
Kohlenhydrate
Brennwert434, 447
Diabetes mellitus 436438
Disaccharide6566, 204, 448
Gluconeogenese194197
Glucose im Blut 437
Glykogen6263, 159, 194, 197204,
439
Glykolipide 77, 79, 291
Glykoproteine, Proteoglykane 19,
62, 64, 65, 276, 291, 322, 350
HK
Glykolyse162163
Heteroglykane6468
Nhrstoff 414, 416, 433, 448,
Pentosephosphatweg206207
Strke6263
Stoffwechsel194207
Zellmembran291
Zell-Zell-Erkennung62, 6567
Kohlenmonoxid CO 183, 341
Kohlensure414415, 424429
Kohlenstoffassimilation bei Bakte
rien278
Kollagen 20, 41, 120, 316
Defekte26,
Fasern 20, 24
Hydroxylysinreste 24, 385
Synthese384385
Typen 385
Koloniehybridisierung510
Kompartimenthnliche Strukturen
bei Bakterien 285
Kompartimentierung eukaryontischer
Zellen285286
Kompetitive Inhibitoren 50
Komplementsystem400
Komplex I, III, IV der Atmungskette 180
Komplex II der Atmungskette 179, 181
Komplexitt von Organismen 82, 522
Konformationsnderung
von Proteinen 5, 10
Konjugation von Bakterien 141
Konservative Substitution von Aminosuren26
Konservierungsmittel465
Kontaktinhibition309310
Kontraktionszyklus des Muskels 377,
382
Regulation379
Kontrazeption, hormonale, s. Empfngnisverhtung
Kontrollpunkte (Checkpoints)312
negative Rckkoppelung 312
Kooperativitt
bei Enzymen 5557
bei Hmoglobin 5859, 414,
419421
Krperwasser425
Koronararterien, Verengung 442
Korrekturmechanismen
DNA-Replikation102106
Aminoacyl-tRNA-Synthetase122
Kovalente Modifikation
Regulation der Enzymaktivitt 44, 59
546
Sachverzeichnis
Kozak-Sequenz124
Kreatin
Synthese 243
Kreatinin 243
Ausscheidung im Urin 423
Kreatinkinase 243
Kreatinphosphat
Konzentration in Muskelfasern 243
Krebs, Krebszellen 102, 104, 147149,
253, 309312
Krebsgen, s. Onkogen
Krebszyklus, s. Citratzyklus
Kretinismus357, 463
Kristallisation von Proteinen 495497
Kropfbildung bei Iodidmangel 463
Kuhmilch451
Kuhpocken146
Knstliche Chromosomen 505
Knstliche Sstoffe 372373
Kupfer
Plastocyanin261
Kwashiorkor (Protein-Energie-Mangelsyndrom)451
L
lac-Operon128130
Lactalbumin463464
-Lactamring, -Lactamase 68, 141
Lactase, s. -Galactosidase
Lactat162163, 167
Lactatdehydrogenase 4445, 167, 179
Lactoferrin400
Lactose 129
Abbau416
Milch464
Synthese 204205
Lactose-Operon128130
Lactosesynthase204
Lactotransferrin400
lac-Gene128130
Lagging strand, Folgestrang bei
DNA-Replikation9697
Laktation 352, 449
lambda-Phagen144145
Lamellipodien299
Lamine301302
Laminin 319320, 388, 453
Lngenwachstum der Pflanzen 276
Langerhans-Inseln im Pankreas 358
Langkettige Fettsuren 71, 394, 439
Langlebigkeit472
Laser-Scanning-Fluoreszenzmikros
kopie488
Lasso(lariat)-Struktur beim
RNA-Spleien113114
Lateralsklerose, amyotrophe 39, 472

LDL, Low-density lipoproteins438443
LDL-Rezeptoren 440, 442
Mangel an 443
Leading strand, Leitstrang 9697
Leber
Nhrstoffverteilungszentrum433
Stoffwechselfunktionen433434
Lecithin441
Lectine 65, 276
Leder20
Leerlaufzyklus 158, 194, 201, 271
Leghmoglobin271
Leguminosen als Nahrungsmittel 448
Leistungsumsatz447
Leitisotope490
Leitstrang9697
Leptin361, 447
Leseraster118, 120, 123, 125
Leucin2021, 24, 232233, 238, 295
Leucine zipper Leucin-Reiverschluss 40, 130131
Leukotriene 359360, 449
LexA-Repressorprotein105
Lichtabsorption278, 487
Lichtreaktionen der Photo
synthese 260261, 265
Lichtsammelkomplexe262
Ligand-gated channels, liganden
gesteuerte Kanle 328
Ligase-independent cloning LIC507
Ligasen 44, 99, 295, 503504
Ligation
blunt end502503
Lignin273, 322, 464
Lineweaver-Burk-Gleichung4849
Linolensure, Linolsure 71, 217,
448449
Lipase
hormonregulierte210, 434, 436
Glucagon, Adrenalin, Insulin 210,
219
Pankreaslipase 416, 418, 434
Lipoproteinlipase219, 434435
Lipid-Anker335
Lipiddoppelschicht70, 7679, 327, 455
Lipide
Lipidspeicherkrankheiten220
Lipidstoffwechsel210224
Lipidtransport438443
Lipidvesikel7778
Lipolyse219
Liponsure171
Lipopolysaccharide als Antigene 402
Lipoproteine
Transportfunktionen438443
Typen 440
Vorkommen der Apoproteine 440
Lipoproteinlipase219, 434435,
440443
Liposomen 78, 505
-Lipotropin350
Literaturdatenbanken526
Lockstoffe 274, 277, 332, 339340, 348
Long terminal repeats LTR147
Low-density lipoprotein, s. LDL
loxP-Stellen504
LRR-Proteine (LRR-Rezeptoren)343
LSD, Lysergsure-Diethylamid 275
Lupus erythematodes 101, 114
Lutropin, Luteinisierendes Hormon
LH 350352, 354357
Lyasen44
Lymphozyten
B-Zellen402403
Zellmenge des Immunsystems 403
Ig-Superfamilie410
Klonale Selektion 403404
T-Zellen402403
Lymphokine361
Lymphorgane, primre und sekun
dre402
Lysergsurederivate274275
Lysergsure-Diethylamid LSD 275
Lysin2021
Lysinoxidase385
Lysogene Vermehrung von Viren 144
145
Lysophosphatidylcholin
(Lysolecithin) 220, 441
Lysosomen
Herkunft der Proteine 290291
Mannose-6-phosphat-Rezeptor290
Proteinabbau 226, 285, 291
Protonenpumpe291
Freisetzung von T3 und T4 aus Thyreoglobulin357
Lysosomale Speicherkrankheiten 220
Lysozym 68, 400, 469, 496
M
Macromolecular crowding 4
Magen-Darmtrakt
als endokrine Drse 361
Cholecystokinin361
Sekretin361
Verdauung391, 414419
Mageninhalt, Chymus 415
Magensaft414
pH, HCl 414
Pepsinogen, Pepsin 415
547
Sachverzeichnis
Magnesium 96, 123

Bedarf
Chlorophyll243, 262
Wasserspaltungszentrum Photo
system II 262
Magnetische Kernresonanz NMR383,
487, 497499
Maillard-Reaktion438
Makrolid-Antibiotika141
Makrophagen 300, 340341, 400403
Malaria2627
Malat 172
Malat-Aspartat-Weg, Malat-Aspartat-Shuttle 187188
Malatdehydrogenase 194195, 216
Malatenzym (Malic enzyme)216
MALDI (Matrix-assisted laser desorption)-
und MALDI-TOF (Time of flight)-
Massenspektrometer489
Maleat216
Maleylacetoacetat235
Malonat 51, 216
Malonyl-ACP214
Malonyl-CoA 214, 216
Malonyltransacylase214
Maltase416
Maltose416
Mandeln (Tonsillen, lymphatischer
Rachenring)402
Manganzentrum263
Mangelernhrung 449, 451
Mannan322
Mannose 290293, 322
Mannose-6-phosphat-Rezeptor290
MAO, Monoaminoxidase 367
MAP, s. Mikrotubuli-assoziierte Proteine
MAPK, Mitogen-activated protein
kinase342
MAPKinasen-Module341342
Dephosphorylierung341
MAPKinasen-Kaskaden342
MAPKK, MAPK-Kinase342
MAPKKK, MAPKK-Kinase342
Marfan-Syndrom38
Massenspektrometrie MS 489
Anwendungen 473, 489, 494, 499,
511
Elektrospray-Ionisation ESI 489
MALDI(Matrix-assisted laser
desorption)-TOF(Time of flight)489
Proteomik522
Massenwirkungsgesetz23
Mastergen133
Matrix-Metalloproteasen MMP 321
M-CSF, Macrophage colony stimulating
factor 333
Matrizenstrang der DNA 96, 99, 108
Mediatoren, Gewebehormone 358361
Medikamenten-Interaktionen393
Medium-chain acyl-CoA dehydrogenase
MCAD 213
Megakaryozyten389
Megalocytre Anmie 460
Mehl, Getreidemehl 451, 464
Meiose
DNA-Rekombination307
Melanine234235
Synthese 236
Melanocortin348, 447
Melanozyten, Melanosomen 234
Melanozyten-stimulierendes Hormon
MSH, Melanotropin 350
Melatonin352
Membranen
Durchlssigkeit7980
Einlagerung von Cholesterol 76
Flssigmosaikstruktur77
Kohlenhydrate 76, 79
Proteine79
Selbstorganisation78
Transmembranproteine und peri
phere Proteine 79
Zusammensetzung77
Membranfluiditt, Cholesterol
effekt7678
Membranfusion
ADP-ribosylation factor ARF289
Vesikeltransport289
Membranporen 7980, 279,
Membranproteine79
Membranpotenzial
chemisches184
elektrisches184
Membrantransport
aktiver324
co- und posttranslationaler 287
durch Vesikel 287
Endo- und Exocytose 145
freie Energie 324
Grundstzliches324325
Kinetik324
lichtgetrieben325
passiver324
Poren326327
Symport und Antiport 325
Trgerprotein (Carrier), Kanal
proteine, Poren 324
transzellulr328329
Menstruationszyklus, hormonale
Steuerung355356
Menthol277
MEOS, Microsomal ethanol-oxidizing
system394
Meristemzellen516517
Messenger-RNA mRNA 111112
KM
Metabolische Acidose 427

Metabolismus 154
Metabolisches Syndrom 448
Metabolit134, 155
Metabolomik (Metabolomics) 155, 473,
475
Metagenomik475
Metallo-Matrix-Proteasen MMP
Abbau von Bindegewebe 385
Inhibitoren385
Metallothionein 498
Metallenzyme19
Metaphase 90, 312
Metarhodopsin II 370371
Metastasen311
Metastasierung von Tumoren 311
Methmoglobin395, 419
Methmoglobin-Reduktase419
Methionin2021, 24
Methioninsynthase241242
Methionyl-tRNA, Initiator-tRNA,
Met-tRNA 123
Methotrexat 254
Methylasen, prokaryontische 502
5-Methylcytosin 137
Methylen-FH4, Methylen-Tetrahydro
folat 103, 239, 252
Methylfalle fr Folat 242
Methyl-FH4-Zyklus242
O6-Methylguanin-DNA-Methyltransferase103
Methylguanosin123
Methylierung
Analyse von Protein 499
DNA 137, 471
Methylindol, Skatol 418
Methylinosin123
Methylmalonyl-CoA-Isomerase 213
Methylmorphin, Codein 274
Methylzyklus242
Mevalonat222
MHC(Major histocompatibility
complex)-Proteine
Klasse I 401
Klasse II 410
Michaelis-Menten-Kinetik, Km4748
Micro-RNA, miRNA 83, 8990, 108109,
133134
Microfluidics484
Mifepriston, Mifegyne 356
Mikroarray (Mikrochip)-Analyse 522
523
Mikrobiom475
Mikrotubuli
Cilien und Flagellen 303304,
339340
Durchmesser299
Dynamische Instabilitt 299300
548
Sachverzeichnis
Gestalt der Pflanze

MAP und tau-Proteine 300
Motorproteine303304
Spindelapparat299, 310
Milch 19, 36, 204205, 407, 450451,
463464
Milchsure 167
Milchsuregrung162
Bedeutung im Stoffwechsel 162
im Muskel 382, 427, 433
Milchzucker, Lactose 129
Milieu intrieur414
Mineralocorticoide353
Mineralstoffe461463
Mischfunktionelle Oxygenasen 216,
233234
Cytochrom-P450-Systeme 234, 393
Phenylalanin-Hydroxylase234
Mismatch-Reparatur 102, 104
Mitochondrien
Apoptose313314
Aufnahme von Fettsuren 211
Aufnahme von Acetyl-CoA 168
DNA, Genom 83, 92, 101102
Import von Proteinen 292294
Mutationen395
oxidative Phosphorylierung 178
179
Transportsysteme186188
Mitogen339
Mitose307308
Mittelmeeranmie 27, 114
Mizelle
mizellenartige Struktur der
Proteine3334
MMP Matrix-Metalloproteasen 321, 385
Mo-Fe-Protein 271
Molecular crowding 4
Molekulare Chaperone
Proteinimport in Mitochondrien und
Chloroplasten292294
Qualittskontrolle Proteine 295
Molekulare Aktivitt (Enzyme) 46
Molekulare Erkennung 1012
Molekulare Klonierung 504
Molekularsieb62
Molekldynamik 35, 497
Moleklschwingungen487
Molten globules 37
Molybdn in Nitrogenase 270
2-Monoacylglycerol434
Monatsblutung356
Monoaminoxidase MAO 367
Monocistronische mRNA 124
Monoklonale Antikrper 403, 410, 490
Mononucleotide
Absorptionsmaximum83
Basen 82
Keto-Enol-Tautomerie83
Pentosen84
Terminologie und Abkrzungen 85
Monooxygenase183, 234
Morphin274275
Morphium369
Morphogenese 300, 306, 320, 348
Motorische Endplatte
Aktionspotenzial 364367, 376, 379
Motorproteine
Spindelapparat303
M-Phase306307
mRNA, messenger RNA
Cap 112
Codon118120
Halbwertszeiten115
Poly(A)-Schwanz 112, 115
Reifung, Processing 108, 111116
Spleien113115
MTOC, Microtubule organizing
center 299
Mucine414
Mucopolysaccharide, saure 65
Mucoviscidose26
Multidrug-Resistenz-Transporter394
Multienzymkomplexe 162, 170171,
182, 270, 298, 522
Murein 51, 62, 6768
Muscarin367
Muskel
Aufbau377379
Bereitstellung von ATP 382383
Ca+ als Second messenger379
Erschlaffung377
Kontraktionszyklus377, 382
Muskeltraining383
Regulation der Kontraktion 379
Rigor mortis, Totenstarre377, 382
Stoffwechsel382383
Strukturelemente377381
Typen376377
Muskelfasern
Aktionspotenzial379
rote/weisse383
Muskelschwund 226, 411
Mutagene Agenzien
Ames-Test103
Mutagenese
CRISPR-Cas9-System514
gezielte514
zufllige, random mutagenesis514
Mutagenese-Panning-Amplifikationszyklen515
Mutation 12, 26, 96, 98, 102103, 118,

122, 141, 238
Mutationsfrequenz98
Mut-Proteine, MutH, MutL und
MutS104
Mutterkorn, Claviceps purpurea274
275
Myasthenia gravis 366
MYC Onkogen/MYC Onkoprotein 149,
469
Myocard, Herzmuskel 376
Myocardspezifische Form
von Troponin 379
MYOD-Gen133
MYOD, Transkriptionsfaktor 133
Myofibrillen376
Myoglobin26, 419421, 462
Myome310
Myosin
ATPase-Aktivitt377
Kontraktionszyklus377, 382
Regulation379
Troponin und Tropomyosin 376
379, 381
Myosin-ATPase-Zyklen377, 382
Myosinfilamente379380
N
Nabelschnurgallerte65
Nachtblindheit453
Na+-Ionen 461
NAD+ 165
NADH 165
Absorptionsmaximum165
Reduktionspotenzial180
NADH-Q-Reduktase, Komplex I 181
NADP+ 165
NADPH
aus Pentosephosphatweg 206
in Fettsuresynthese 214
NADPH-Oxidase396
Ngel24
Nhrstoffe
Ethanol446, 451452
Fette, le 448,
Kohlenhydrate448
Physiologischer Brennwert 447
Proteine449451
Nahrungsaufnahme
hormonale Steuerung 415
Hungersignale (Ghrelin,
Neuropeptid Y) 447
Sttigungssignale (Cholecystokinin,
Leptin, Melanocortin, Serotonin) 447
549
Sachverzeichnis
Nahrungsbestandteile, essenzielle 446,

448
Nahrungskarenz434437
Nahrungsmittel
biologische Wertigkeit 450451
Gehalt an essenziellen Amino
suren450
gemischte Kost 448
Hitzebehandlung464
Milch463464
Zusatzstoffe465
Nahrungsmittelvergiftungen279
Narkosegase, s. Inhalationsansthetika
Na+-Glucose-Symporter326
Na+/K+-ATPase 325326
Na+/K+-Kanal364365
Na+/K+-Pumpe 325326
Natriumlaurylsulfat, Sodium dodecyl
sulfate SDS484
Natriuretische Peptide 339, 426
Natrliche Killerzellen (NK cells)401
N-Bilanz, Stickstoffbilanz 449450
Nebennierenmark 203, 219, 353
Nebennierenrinde 196, 220, 348, 350,
353
Nebennierenrinden-Insuffizienz426
Nebenschilddrsen Glandulae
parathyreoideae 357, 423
Nebulin377
Nekrose306
Nerve growth factor NGF 333, 337
Nerv-Muskel-Verbindung, motorische
Endplatte 365
Nervengifte366
Netzhaut369370
Neugeborenen-Screening
Galactosmie206
MCAD-Mangel213
Neuralrohrverschluss, unvollstndiger
(Spina bifida)460
Neurodegenerative Krankheiten 30,
3839, 472
Neurofilamentproteine302
Neurohypophyse349
Neurohypophysenhormone350
Neuropeptide367
Acetylcholin367
Catecholamine (Dopamin,
Noradrenalin, Adrenalin) 367
exzitatorische und inhibitorische 366
Freisetzung aus synaptischen
Vesikeln 365
GABA, -Aminobutyrat 367
Glutamat367
Glycin367
Inaktivierung365
Histamin367
Neuropeptide367369
Serotonin367
Neutralfette7071
Nexus (Gap junction)317
NF-B(NF-kappaB)-Transkriptionsfaktor
Abbau des Inhibitors 341
Aktivierung durch Toll-like
receptors400
Apoptose400
Entzndungsreaktion340341
NGF Nerve growth factor 333, 337
Niacin (Vitamin) 456457
Nichtcodierende Sequenzen 108, 113,
115, 134, 475, 520
Nichthm-Eisen216
Nichthistonproteine91
Nichtverseifbare Lipide 7376
Nickel-Chelat-Chromatographie, s. IMAC
Nicks, Strangbrche in DNA 97
Nicotin 275
Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid
NAD+ 165
Nicotinische Rezeptoren 364
Nicotinsure und Nicotinamid, s. Niacin
Niere
Ausscheidung von Ammonium
ionen430
Ausscheidung von Protonen 429
Hormonproduktion353354
Kontrolle durch Hormone 422423
Parathyrin, Parathormon 423
Rckresorption von HCO3 429
Rckresorption von Na+423, 426
Rckresorption von Phosphat 423
Ultrafiltration, Resorption, Sekre
tion422
Wasserhaushalt 339, 422, 425
Nierenfunktionstest mit Inulin 6263
Nierensteine und Blasensteine 423
Nitratreduktase 271, 277
Nitrifizierung272
Nitritreduktase271
Nitrocellulose fr Blots511512
Nitrogenase270
NMR Nuclear magnetic resonance487,
497
Noradrenalin, Norepinephrin 352353
Northern blot511512
NO Stickstoffmonoxid
Guanylatcyclase als Rezeptor 341
Halbwertszeit341
in Pflanzen und Tieren 341
NO-Synthase341
Radikal341
Wirkung341
MO
Notch-Rezeptor340
NSAR, NSAID, s. COX-Hemmer 360
Nucleasen 85, 502504
Nucleinsuren
Abbau, s. Exo- und Endonucleasen
Prinzipien der Struktur und Funk
tion8589
Frbung mit Ethidiumbromid 486
Grsse von Genomen 83, 521
Nucleoid285
Nucleolus 109, 115116
Nucleosiddiphosphat-Kinasen171
Nucleoside 84
Nucleosidmonophosphat-Kinasen 248
Nucleosiddiphosphat-Reduktase253
Nucleosid-Phosphorylase256
Nucleosom 9091
Nucleotide 8485
Nucleotidexzisions-Reparatur103
Nucleotidsequenzanalyse510511
Nucleotidstoffwechsel248257
Nuclide489490
Nyktalopie, Nachtblindheit 453
Nylonfolie511512
O
O-Acetylserin273
Oberflchenspannung8
Oberflchen(Surface)-Plasmon-
Resonanz500
ob-Muse448
Ocytocin, Oxytocin 349351
deme451
Odontoblasten383
Offenes Leseraster, s. Open reading frame
Okazaki-Fragmente9697
Oktamer-Box109110
Oleosomen273
Oleyl-CoA217
Oligo-dT-Chromatographie112
Oligo-Mannose-Strukturen291
Oligomycin184
Oligonucleotidsonde510
O-Linked glycosylation 292
lsure 71, 219
omega-Fettsuren449
O-Methylnoradrenalin393
Omik-Gebiete der Molekularbio
logie 520, 522
Onkogene, Onkoproteine 147149
Ontogenese 140, 306, 313, 468470
Open reading frame ORF 120, 510
Operator 129
Operon129130
Opiatrezeptoren351
550
Sachverzeichnis
Opsin370
Opsonisierung400
Optischer Test fr Enzymaktivitt 487
O2-Radikale 245, 262, 395
Organellen 5, 70, 83, 155, 285295
Organogenese und Apoptose 313314
Organophosphate 51, 53, 366
Organstoffwechsel432443
Organtransplantation411
Orgasmus350
Origin of replication ORI 98, 142
Ornithin 231
Ornithin-Decarboxylase, Halbwertszeit159
Ornithinzyklus, s. Harnstoffzyklus
Orotat 252
Orphan receptors, Waisen-Rezep
toren339
Orthologe Proteine 475
Osmotischer Druck 322
Osteoblasten 319, 351, 383, 385
Osteoklasten385
Osteomalazie454455
strogene Hormone 351, 355
Ausscheidung355
stradiol 355
stron 355
O2-Verbrauch435
Oxalacetat 172, 171175
Oxalat
Antikoagulans391
Nieren- und Blasensteine 423
-Oxidation von Fettsuren, s. Fett
sureabbau
Oxidative Phosphorylierung
ATP-Synthase184186
chemiosmotischer Mechanismus178
elektrochemisches Potenzial 180,
184
Entkoppelung185
Protonenpumpen184185
Regulation188192
Oxido-Reduktasen44
2-Oxogulonolacton, s. Ascorbinsure
2-Oxoglutarat, s. -Ketoglutarat
Oxygenasen 183, 388, 393
Oxy-Hmoglobin 58, 414, 420421
Oxytocin, s. Ocytocin
P
p53 Tumorsuppressorprotein 148,
308, 313
P680-Chlorophyll262264
P700-Chlorophyll263264
Palindrom129130, 142, 502, 514

Palmitinsure 71, 212216, 219
Paneth-Zellen469
Panning515516
Pankreashormone 201, 219, 358
Pankreaslipase416, 418, 434
Pankreasproteasen366, 416
Pankreassekret
Enzyme415417
pH415
Pansen213
Pantethein213214
Pantothensure 169, 460
Papain-Spaltung von Antikrpern 408
Papier321322
Papierchromatographie484
Papillomavirus148
PAPS, Phosphoadenosin-Phospho
sulfat394
para-Aminobenzoesure 254
Parakrine Signalbermittlung 333
334
Parasiten144, 278, 409
Parathyrin, Parathormon PTH 356357
Parenchym, Definition 316
Parkinson-Krankheit39, 367, 471472
Partielles spezifisches Volumen 481
pBR322 Plasmid 83
P-Cadherin319
PCAT, Phosphatidylcholin-Cholesterol-Acetyltransferase441442
PCNA, Proliferating cell nuclear
antigen 101, 114
PCR, Polymerase chain reaction 505
Identifizierung von Klon 510
Mutagenese514
Prinzip505506
qPCR, quantitative PCR 507
RT-PCR, Reverse transcription-PCR507
Verwendung507
PDB, Protein data bank 526
PDGF, Platelet-derived growth factor 149, 333
PDH-Kinase und -Phosphatase 171
Pektine 322, 465
Pellagra456457
Pellet, Sediment bei Zentrifugation 480
Penicillin51, 68, 140141
Penicillinase141
Pentosen aus Pentosephosphatweg 194, 206207
Pentosephosphatweg
oxidativer Teil 206
nichtoxidativer Teil 207
PEP-Carboxykinase194196
PEP-Carboxylase267
Pepsinogen, Pepsin 415
Peptidasen226
Peptidbindung1819, 3031
Peptide, Nomenklatur 25
Peptidhormone 276, 348, 350, 415
Peptidoglykane 62, 65
Peptidyl-Prolyl-Isomerase37
P(Peptidyl)-Stelle des Ribosoms 124
125
Peptidyltransferase 125126, 141
Peptidyl-tRNA124126
Perforin410
Peripherin302
Periplasmatischer Raum 285, 394
Permanente Zelllinien 101
Permeasen394
Pernizise Anmie 458, 460
Peroxidase 243, 356, 394396, 462
Peroxisomen285
Funktion294
Proteinimport 287, 293
Peroxyradikale ungesttigter Fett
suren 455
Personalisierte Therapie 468, 473
Peyer-Plaques402
Pfeiffer-Drsenfieber149
Pflanzen
Besonderheiten des Stoff
wechsels270276
Energiereserven273274
Feinde274
Inhaltsstoffe 270, 396
LRR (Leucine-rich repeat)-Rezep
toren343
Phytohormone276277
Schutzstoffe274
Serin/Threoninkinase-Rezep
toren343
Transportund Speicherformen
chemischer Energie 273274
Tyrosinkinasen343
Zellwand 5, 63, 273274, 303, 321
322, 400, 418
Pflanzenhormone276277
Pfrtner-kontrollierter Transport, Gated
transport294295
Phage display 515
Phagemids als Vektoren 504505
Phagocytose von Pathogenen 400, 407
Phagosom226, 396
Phomelanin235
Phophytin des Photosystems II 262
Phenobarbital393
Phenole als Pflanzeninhaltsstoffe 276
Phenylalanin2021, 24
Phenylalaninhydroxylase234
551
Sachverzeichnis
Phenylpyruvat238
Pheromone362
pH-Optimum
Enzyme5051
lysosomale Enzyme 226
Pepsin415
Phosphatasen 97, 112, 158, 171, 194,
196197, 301, 308, 334337, 339, 436
Phosphathaushalt357
Phosphatidylcholin, Lecithin 72
Phosphatidylcholin (Lecithin)-Cholesterol-Acyltransferase PCAT
(LCAT)441442
Phosphatidylethanolamin72
Phosphatidylinositol72
Phosphatidylserin72
Phosphatrckresorption357,
Phosphoadenosin-Phosphosulfat PAPS,
Biotransformation394
Phosphoenolpyruvat PEP 15, 167
Phosphoenolpyruvat-Carboxy
kinase194195
Phospho-Epitope405, 499
Phosphofructokinase59, 158, 164, 190,
196197
Phosphoglucomutase199
Phosphoglucose-Isomerase164
Phosphogluconat-Dehydrogenase206
6-Phosphogluconat 206
6-Phosphogluconolacton 206
2-Phosphoglycerat 167
3-Phosphoglycerat 167168, 266,
421
Phosphoglyceratkinase 163
Phosphoglyceratmutase 163
3-Phosphoglyceroylphosphat15,
165168
3-Phosphohydroxypyruvat 238, 242
Phospholipasen220
bei Verdauung 220
Phospholipase A2 220
Phospholipase C 220
membranstndige336
Phospholipide
Stoffwechsel220
Phosphopantethein213214
5-Phosphoribosyl-1-diphosphat248
249
Phosphorylase, s. Glykogen-Phosphorylase
Phosphorylase-Kinase 203
Phosphorylcholin, Cholinphosphat 221
Phosphorylierung
Analytische Untersuchung 499
Regulation der Pyruvatdehydroge
nase169
Phosphorylierungskaskade 201, 348
Phosphoserin 238, 242

Photoautotrophe Organismen 270, 278
Photolyase103
Photometrie486
Photonen 262, 264, 496
Photophosphorylierung262265
Photoproteine 343
Photorespiration266
Photorezeptoren des Auges 369371
Photosynthese260268
ATP-Synthese262265
bei Bakterien 285
Bilanz260
Calvin-Zyklus266267
Carotinoide262
Chlorophyll 262
Chloroplasten 260261
CO2-Fixierung266268
Licht- und Dunkelreaktionen 260
Photosystem II und I 261,
Produktion von NADPH 262264
Redoxpotenziale263
Photosynthesepigmente, zustz
liche262
Photosystem II und I 262263
Phototrophe Organismen 260
pH-Puffer
physiologische Puffersysteme 422,
426430
pH-Wert
extrazellulr426
intrazellulr426
Sure-Basenhaushalt426430
Phyllochinon454456
Phylogenetischer Stammbaum 2526
Physiologische Kochsalzlsung 425
Physiologischer Brennwert von Nhrstoffen434, 446447, 451
Phytochrome343344
Phytohormone
MAPKinasen-Modul344
Phytosteroide277
Phytol277
Phytosteroide277
Phytylgruppe262
PI-3-Kinase339
Pineal gland, Epiphyse 352
Pixeldetektor496
pKa-Wert 23, 25
Planck-Konstante49
Plaque, Zahnbelag 386
Plaques, amyloide 3839, 472
Plasma, Blutplasma 55, 67, 72, 224,
226, 391, 421422, 424426, 433,
437438
Plasmabrcken, Plasmodesmen 317
318
Plasma-Lipoproteine 441
OP
Plasmazellen 403404, 407

Plasmid-DNA83
Plasmide140143
als Vektoren 504
Grsse505
Integration ins Genom 140142
Plasmin, Fibrinolysin 55
Fibrinolyse55, 392
Plasminogen392
Plasminogen-Aktivator tPA 392393
Plasmodesmen 317
Plasmodien, Malariaerreger 396
Plastiden 273
Plastochinol und Plastochinon 261263
Plastocyanin 261, 263264
Platelet-derived growth factor PDGF149,
333
Platin-Kohlenstoff-Bedampfung
EM499
PLC, Phospholipase C 220
Pleckstrin-Homologie-Domne339
Plectin318
Ploidie 307
PLP, Pyridoxalphosphat 56, 5557
Pluripotente Zellen 468
Plus-Strang der DNA 108
Podagra, Zipperlein 255
Polare Lipide 72, 77, 79
Polyacrylamidgel 485, 511
Polyadenylierung der mRNA,
Poly(A)-Schwanz 112, 115, 508
Polyamine: Cadaverin, Putrescin, Spermidin, Spermin 226, 228, 237, 394
Polycistronische (polygenische)
mRNA128129
Polyethylenglykol497
Polyglutamin-Repeats (Huntington-Krankheit)39
Poly-3-hydroxybutyrat (Kunststoff ) 279
Polymerase-Kettenreaktion, s. PCR
Polynucleotid-Kinase, s. DNA-Kinase
Polyribosom 121, 286
Polysaccharide
Glykosidische Bindung 62
Heteroglykane62
Strukturhomoglykane6364
Verzweigungen6263
Vielfalt der Struktur 6566
Zellwand der Bakterien 6768
Polysom, s. Polyribosom
Polytne Chromosomen 135
Polyterpene277
POMC-Gen, Pro-Opio-Melano-
Cortin 350351, 369
Porenkomplex des Zellkerns 295
Porine 80, 326
552
Sachverzeichnis
Porphobilinogen 244
Porphyrie, erythropoietische und
hepatische245
Porphyrine
Strungen der Porphyrinsyn
these244245
Synthese243244
Postmenopause355
Postprandiale Thermogenese 446
Postresorptionsphase 432433, 446
Posttranskriptionale Regulation der
Genexpression133135
Posttranslationale Modifikationen
Neuropeptide367
Prdispositionsanalyse520
Prlamin472
Pr-mRNA, hn-RNA 112113
Prproprotein358
Prsequenz284
pRB, Tumorsuppressorprotein 311, 313
Primrharn 422423, 425426, 429
Primrstruktur der Proteine 18, 25
Primer-Oligonucleotide506
Prionen149150
Prionkrankheiten 3839, 150
Prionprotein3839
Procaspasen410
Proconvertin390
Proenzyme, Zymogene 59, 414, 416
Progerie471472
Progesteron 355
Blockierung des Rezeptors 356
Programmierter Zelltod, s. Apoptose
Proinsulin 359
Prokaryonten45
Prokollagen 384, 460
Prolactin350352
Prolin2021
als Helixbrecher 32
cis-trans-Isomerisierung 33
Hydroxylierung460
Peptidyl-Prolyl-Isomerase, Cyclo
philin37
Proopiomelanocortin POMC 350351,
369
Promotionsphase eines Tumors 310
Promotor108109
Proofreading-Exonucleaseaktivitt98
Proopiomelanocortin POMC 350351,
369
Propeptid 226, 320, 384, 415
Propionsuregrung213
Propionyl-CoA 213
Propionyl-CoA-Carboxylase 213
Proplastide273
Prostaglandine359360
Prostaglandin E 2 360
Prosthetische Gruppe 1819
Protamine92
Proteaseinhibitoren
Hemmer der Blutgerinnung 391,
bei Pflanzen 464
Proteasen
Endo- und Exopeptidasen 226
Waschmittel 44, 55
Proteasomen226228
Proteinaggregate 38, 298, 300
Proteinassoziate 298
Proteinbedarf450451
Proteinbilanz449
Proteinbiosynthese118126
Protein C, Antikoagulationsfaktor 392
Proteindenaturierung 3637
Protein-Disulfidisomerase37
Proteine
Abbau226228
Aggregat 38, 298, 300
Aminosurezusammensetzung450
451, 464, 494
Aminosuresequenz 494
Assoziat 298
Bestimmung der Raumstruktur 494
497
biologische Wertigkeit als Nahrungsmittel450
Denaturierung3637
Domnen3031, 34
3D-Struktur 20, 3041
Dynamik, molekulare 35
Evolution2526
Faltung3041
Faserproteine3941
Frbung486
Fehlfaltung3839
Funktionen18
globulre Proteine 20
Grsse18
Halbwertszeiten 120, 159, 244, 299
Ionisationszustnde2224
Konformationsnderung 5, 10, 35
Koppelung mit Gen 515
Kristallisation495496
Mangel in Nahrung 449, 451
Mikrochip-Analyse 484, 522523
Minimalbedarf449
Nhrstoff 448, 451
native Struktur 18, 36
obligatorischer Abbau 449450
Oligomere 3436, 4445, 5758,
419, 522
posttranslationale Modifikationen 22, 24, 134, 136, 284, 499
Prinzipien der Struktur 1819

Primrstruktur18
prosthetische Gruppen 1819
Qualittskontrolle295
Quartrstruktur3435
Raumstruktur 3041, 494499
rekombinante512513
Sekundrstruktur 3133
Speicherproteine in Pflanzen 270, 273
Stabilisierung3031
Stabilitt 5, 11, 34
Synthese118126
Tertirstruktur 3235, 39
Umsatz 159, 226228
Untereinheiten 18
Untersuchung von Protein-LigandKomplexen500
Protein-Energie-Mangelsyndrom,
Kwashiorkor451
Proteinexpression, experimentelle
in Bakterien 512
in eukaryontischen Zellen 512514
Proteinfaltung, Qualittskontrolle 295
Proteinfehlfaltungskrankheiten 3839,
149150, 298, 472
Proteinglykosylierung
Bedeutung291
ER und Golgi-Apparat 290293
N-Glykosylierung291
O-Glykosylierung292
Proteinkinase A PK-A 203, 219, 224, 335
Proteinkinasen
in Sugerzelle 332, 335, 337, 339,
343
Zellzyklus308313
Startkinasen309
Proteinkristallographie495497
Proteinogene Aminosuren 2021
Proteinphosphatasen 334, 338339,
342
Protein-Protein-Wechselwirkungen
Kartierung475
Two-Hybrid-Technik522525
Proteinporen 285, 317, 324
Proteinsekretion 286, 289293
Proteinsortierung 290
Proteinspeicher210, 273
Proteinstrukturanalyse494499
Proteinsynthese118126
Proteintranslokation, s. Proteintransport
Proteintransport
cotranslational284, 287
durch Vesikel 287289
Golgi-Apparat290
in Mitochondrien, Chloroplasten und
Peroxisomen292294
553
Sachverzeichnis
ins ER 287290
intrazellulre Routen 287
Pfrtner-kontrollierter Transport
durch Kernhlle 294295
posttranslational284
Protein-Tyrosinphosphatasen337, 339
Proteinuhr (Evolution) 26
Proteinumsatz des Organismus, Bestimmung449
Proteinurie449
Proteoglykane 6268
Proteohormone 290, 348349
Proteolyse
proteolytisch regulierte Rezep
toren340
Notch-Rezeptor 340
Proteolytische Aktivierung
Blutgerinnung388390
Caspasen (Apoptose) 314, 410
Rezeptoren340
Verdauungsproteasen416
Proteomik474475
Prothrombin389390
Protonengradient 168, 184185, 190,
261, 264
Protonenpumpe
Atmungskette184185
Lysosomen291
Magen415
Niere429
Photosynthese263264
Zelle426
Proto-Onkogene 148
Protoporphyrin 244
Vorkommen 182, 245
Protoporphyrin IX 182, 244
Provirus145
Provitamine453
PrP, Prionprotein 3839, 149150
Pseudogene372
Pseudopeptidoglykan der Archaea 68
P(Peptidyl)-Stelle des Ribosoms 124
125
Pterine234
Puffergleichung (Henderson-Hasselbalch)427
Puffersysteme
im Blut 426
intrazellulr426
offenes und geschlossenes
System428
Pufferkapazitt der Flssigkeits
kompartimente428
Punktmutation96, 102103, 122, 514
bei Phenylketonurie 237238
Purin 82
Purinnucleotide
Abbau255257
Strungen im Abbau 255257
Synthese248249
Synthese der Desoxyribonucleotide251253
Synthese von AMP und GMP 250
Synthese von IMP 249
Wiederverwertung der Purin
basen248250
Wiederverwertung der Pyrimidinnucleoside250251
Puromycin126
Putrescin 237
Pyridoxal-5-phosphat PLP 56
Pyridoxamin-5-phosphat PMP 56
Pyridoxalphosphat-abhngige Enzyme
Evolution456
Reaktions- und Substratspezi
fitt 5657, 229, 240, 456
Pyridoxol, Pyridoxin 456457
Pyrimidin 82
Pyrimidinnucleotide
Abbau255257
Synthese250251
Wiederverwertung der Pyrimidinnucleoside250251
Pyroglutamat367
Pyrophosphatase, Diphosphatase 97,
211
Pyrrolring 182, 244
Pyruvat
Aufnahme in Mitochondrien 168,
190
Pyruvatcarboxylase
Bilanzgleichung174
Citratzyklus174175
Gluconeognese194195
Regulation190
Pyruvatdehydrogenase PDH 168
Cofaktoren 170
Mechanismus170
Komponenten170
PDH-Kinase, PDH-Phosphatase 169,
171
Reaktion 169
Regulation169, 171
Pyruvatkinase 167
Pyruvat-Pi-Dikinase267
Q
Q, s. Ubichinon
QH2-Cytochrom c-Reduktase, Komplex
III182, 264
PR
Qualittskontrolle von Proteinen

Lokalisierung in Zelle 295
Proteasomen226228
Proteinfaltung295
Quergestreifte Muskulatur 376378
Quervernetzungsreagens Bisacrylamid485
Quorum sensing 362
R
Rachitis 452, 454455
Radikale ungesttigter Fettsuren 455
Radikalfnger395397
Ascorbat396397
Glutathion395
Tocopherol395
Radikalkettenreaktion mit Membran
lipiden 388, 396
Radioaktive Isotope 491
Halbwertszeiten491
Radioautographie135
RAS-Onkogenprodukt148149
Rattengift391
Raumstruktur der Proteine 3040
RB (Retinoblastom)-Protein 148
Reaktionsgeschwindigkeit
Reaktionsgeschwindigkeits
konstante 47, 49
RGT-Regel, Reaktionsgeschwindigkeit-Temperatur-Regel49
Temperaturabhngigkeit49
Reaktive Sauerstoffderivate, Reactive
oxygen species ROS395
Granulozyten396
Produktion395
schdigende Wirkung 395396
Schutz gegen ROS395397
Real-time-PCR507
RecA-Protein105
Redoxpotenzial
Atmungskette179181
Photosynthese260264
Redoxhomostase206
Reduktionsquivalente 162, 173,
186188
Reduktionsteilung 307
Redundanz biologischer Systeme 122,
306
Regeneration von Organen und Extremitten470
Regulation
Genexpression128137
Stoffwechsel 159
Zellzyklus308313
554
Sachverzeichnis
Regulation der Enzymaktivitt

allosterisch5559
limitierte Proteolyse 340, 392,
415416
Phosphorylierung59
Rekombinante Proteine
in-vitro Translation507
Produktion in Bakterien 512513
Rekombination von DNA
Gibson-Reaktion 507, 514
Holliday-Junction105106
homologe105
Insertionssequenzen IS 105, 140, 147
-Integrase105
ortsspezifische105
Rekombinationsklonierung521
Transposase 105, 142143, 503504
Transposon 105106, 514
Remnants von Chylomikronen 434
Renin-Angiotensin II-Aldosteron-
System354
Reparatur der DNA 102106
Repellents, Abschreckstoffe 339340
Replikationsblase9899
Replikationsgabel9899
Reportergruppe500
Repressor105, 129130, 313, 340, 513
Reservefett 71, 159, 175, 210, 219
Reservekohlenhydrat 190, 194, 197,
201, 267
Reserveproteine273
Resistenzfaktoren, bakterielle 140141
Resorption aus Darm
Aminosuren, Peptide 416
Calcium357
fettlsliche Substanzen 418
Monosaccharide416
Wasser418
Resorptionsphase 432, 446
Respiratorischer Quotient 213
Respiratory burst in Granulozyten 396
Restriktionsenzyme, Restriktionsendonucleasen502504
Restriktionsstellen503
Retina369370
Retinal
cis-trans-Isomerisierung370371
Photosynthese bei Bakterien 325
Isomerohydrolase371
Retinoat453
Retinoblastoma-Protein pRB 311, 313
Retinoid-Rezeptoren341
Retinol 38, 370371, 453454
Retrotranskription145
Retroviren, Retrotransposition 145146
Reverse genetics514
Reversed-phase HPLC, RP-HPLC 483
Reverse Transkriptase 101, 106,

508509
Rezeptoren
G-Protein-gekoppelte201, 334336,
343, 365, 367, 370, 372373, 436
im Zellinnern 341
Internalisierung im lysosomalen
Zyklus290, 338339
mit enzymatisch aktiver cytosolischer
Domne 336340
proteolytisch regulierte 340341
Typen 333
Rezeptor-Guanylatcyclasen337, 339
natriuretische Peptide 339
NO-Rezeptor341
Rezeptor-Serin/Threoninkinasen337,
339
Rezeptor-Tyrosinkinasen337339
Autophosphorylierung337
Dephosphorylierung338
Ephrine338
RGD-Segment des Fibronectins 321
RGT-Regel (Reaktionsgeschwindigkeit-Temperatur-Regel)49
Rheumatoide Polyarthritis 38, 411
Rhizobien271
Rhodopsin, Sehpurpur 370
Absorptionsmaxima371
Extinktionskoeffizient370,
GPCR (TM-Rezeptor) 370
Photosynthese bei Bakterien 277,
285,
Regenerierung371
Riboflavin456457
Ribonuclease133134, 418
Ribonucleinsure RNA 8587, 89
Ribonucleoproteine 101, 113, 116, 514
Ribonucleotide 8385
Ribonucleotid-Reduktase252253
Ribose 84
Ribose-5-phosphat 249, 248252
Ribosome display 410, 515516
Ribosomen
A-Stelle/P-Stelle124126
rRNA 83, 90, 102, 115
Sedimentationskoeffizient 121
Struktur 121, 124
Riboswitch134135
Ribothymidin in tRNA 123
Ribozym114
Ribulose-1,5-bisphosphat-Carboxylase/
Oxygenase, Rubisco 266268
Ribulose-1,5-bisphosphat 266267
Ricin276
Riesenchromosomen135
Rigor mortis, Totenstarre 379
Rinderwahnsinn 39, 150
RISC, RNA-induced silencing

complex133134, 149
RNA
Biosynthese 108116
Haarnadelschleifen 89, 111
hnRNA 112113, 115
mRNA, tRNA, rRNA 108109, 113,
115116
miRNA, siRNA 83, 8990, 108109,
133134
non-coding RNA 128, 135
sg-RNA, small guide RNA 514
Zusammensetzung 8486, 89
RNA-DNA-Hybridisierung 89, 509510
RNA-Haarnadelschleife als Termina
tionssignal111
RNA-Interferenz, RNAi 133134
RNA-Polymerase 97, 110
Eukaryonten 108111, 115
Inhibitoren 109, 141
Prokaryonten 109
sigma-Untereinheit109
RNA-Primer97
RNase Dicer133134
RNA-Viren144
Rntgenkristallographie494497
Hochdurchsatzverfahren473
ROS, s. Reaktive Sauerstoffderivate
Rotenon183
Rotortypen fr Zentrifugationen 481
Rous sarcoma virus RSV147149
rRNA, ribosomale RNA
Gene109, 115116
Reifung, Processing108, 111115
Vorlufer112
Zahl der Gene 115
RT-PCR, Reverse transcription-PCR507,
516
Rubisco, s. Ribulose-1,5-bisphosphat-Carboxylase/Oxygenase
Rckkoppelungshemmung 59
S
Saccharase (-Fructosidase) 416
Saccharin 372, 465
Saccharose, Rbenzucker, Rohr
zucker 204, 416
Abbau 206, 416
Ssskraft279
Synthese273
Transport von Zucker
in Pflanzen 270, 273
Saccharose-6-phosphat273
Salvage pathway248
Salzbindung 30, 36, 45
555
Sachverzeichnis
Salzrezeptoren373
Salzsure im Magen 414415
SAM, S-Adenosylmethionin 102, 137,
237, 239, 241, 243
Saponine277
Saprophyten278
Sarkolemm 365, 367
Sarkom147149, 312
Sarkomer376, 377378
Kontraktion381382
Sarkoplasma376
Sarkoplasmatisches Retikulum 336,
376, 379
Sarkosin495
Sttigungssignale (Hormone) 447
Sauerstoffradikale, s. reaktive Sauerstoffderivate
Sauerstofftransport im Blut 419421
Sauerstoffverbrauch der Organe 435
Sulenchromatographie482448
Sureamidgruppe 18, 22, 31
Puffersysteme428429
Sure-Geschmacksrezeptoren373
Scaffold proteins341
Schdlingsbekmpfungsmittel275
277
Schadstoffe in Lebensmitteln 465
Schiff-Base 57, 229,
Schilddrse356357
Schilddrsenkarzinom463
Schilddrsenhormone T3, T4 38, 341,
349, 356357
Grundumsatz357
Kretinismus357
Rezeptoren 149, 341
Synthese356357
Schlafmohn Papaver somniferum274
Schlaf-Wach-Rhythmus 344, 352, 358,
-Schleife31, 33
Schleim400, 414
Schmerzmittel274, 275, 369
Schmerzrezeptoren373
Schrittmacherenzym 59, 159, 201
Schttellhmung, s. Parkinson-Krankheit
Schutzmechanismen, enzymatische388397
Schutzstoffe der Pflanzen 274276
Schwangerschaftstest352
Schwangerschaftshormone,
Gestagene351, 355356
Schwefel-Assimilation272
Schwefelwasserstoff H2S 272, 341
Schwei 372, 449
Scrapie 38, 149150
SDS-PAGE, Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis485

Second messengers 59, 220, 332, 335
336, 338, 348, 379
Sedimentationsgeschwindigkeit480
Sedimentationsgleichgewichtszentrifugation481
Sedimentationskoeffizient480
biologischer Partikel 482
Sehpurpur, s. Rhodopsin
Sehvorgang369371
Phototransduktionskaskade371
Stbchen/Zapfen in Retina 370
371
Seide, Seidenfibroin 20, 39
Seife71
Seifenmizelle10
Sekretin358, 361
Sekretion von Proteinen
Regulierte Sekretion 290
Standardweg (Default pathway)290
Sekundrstoffwechsel der Pflanzen 274276, 394
Sekundrstruktur der Proteine 3031,
37, 39, 488
Sekundrstruktur der RNA, s. Haarnadelschleifen
Selbstorganisation 6, 30, 34, 144
Selbstverdauungs-Schutz 226, 414
Selen, Selenocystein 393, 461462,
Semikonservative Replikation der
DNA89
Semipermeable Membran 19, 500
Seneszenz der Zelle 96, 226, 471472
Sequenzhomologie25
Sequenzieren
DNA510511
Protein494
Sequenzvergleiche2526
Serin 21, 53, 72, 136
Lieferant von C1-Einheiten239240,
242
Serinenzyme5354, 366, 415
Serin-Hydroxymethyl-Transferase239
240
Serinproteasen5354
Serin/Threoninkinasen 335, 337, 339,
343
Serin/Threoninphosphatasen339
Serotonin 358, 367368, 369, 447
Synthese 368
Thrombozyten388
Serum (Blutserum) 391
Serumalbumin
Abbau226
Transport von Aldosteron 353
RS
Transport von Bilirubin 424

Transport von Fettsuren 436, 439
Serumproteine, Sekretion 290
Sesquiterpene277
Sexualhormone, Sexualsteroide 110,
354356
Sexuallockstoffe 348, 362
SH2 (Src-homology 2)-Domnen338
Shine-Dalgarno-Sequenz124
Sichelzellanmie27
Signalkaskaden 332, 336, 341, 389
Signalpeptid 284, 285, 290, 292293
Signalpeptidase284
Signal recognition particle SRP287
288
Rezeptor287288
Signalsequenzen
Proteintranslokation 284, 290, 348,
Spleien113114
Signaltransduktion
Abstellen des Signals 338 Evolution 332, 342343
in Pflanzen 343344
MAPKinasen-Module334, 341342,
344
Rezeptoren334341
Vernetzung durch Scaffold proteins341
Signalbermittlungsproteine337338
Silberfrbung von Proteinen 486
Sildenafil, Viagra 341
Silencer 110111, 128, 130, 131133
Sinapyl-Alkohole322
SNP475, 520521
Kartierung520
Single-strand binding protein SSB99,
104
siRNA, small interfering RNA 83, 8990,
133134
epigenetischer Effekt 137
Effekt von Viroiden 149
Sirtuin472
Size-exclusion chromatography SEC 62,
482
Skatol418
Skelettmuskel376
Skorbut459460
SNARE s. t-SNARE v-SNARE
SNP, s. Single nucleotide polymorphisms
sn-RNA 90, 108109, 113114
snRNP, small nuclear ribonucleoproteins,
Snurps113114
Somatische Gentherapie 506
556
Sachverzeichnis
Somatische Zellen 101, 135, 306, 307,

468
Somatoliberin350352
Somatomedine, s. IGF1, IGF2
Somatostatin350352
aus Pankreas 358
Somatotropin, Wachstumshormon 349,
351352
Sorbitol 437438
Sorbitoldehydrogenase437438
Sortierungssignal, Zielerkennungs
sequenz284
SOS-Reaktion105
Southern blot511
Spannungsgesteuerte Ca+-Kanle 364,
379
Spectinomycin141
Speichelamylase416
Speicherkrankheiten 38, 202, 220, 463,
513
Speicherproteine der Pflanzen 270, 273
Aminosurezusammensetzung450
451
Spektroskopie486489
Absorption487
Fluoreszenz487 Wellenlngenbereiche487488
Zirkulardichroismus CD 488489
Spermidin237
Spermin237
Spezifitt von Wechselwirkungen 11
12, 30, 122
Komplexbildung11
strukturelle Komplementaritt 11,
34
Sphingolipide7273, 75
Sphingolipidosen220
Sphingomyelin 73
Sphingosin 73
Sphingosinphosphatide7273, 75
Spina bifida460
Spindelapparat 300, 303, 309310, 312
Spindelfasern 275, 299, 310
Spleien (RNA) 113114
alternatives 114115, 405
Consensus-Sequenzen114
katalytisch aktive RNA 114
Lasso-Mechanismus113114
Strungen 22, 114
Spleiosomen, Spliceosomes90, 113
Spontanmutationen12, 102103,
388, 468
SPR Surface plasmon resonance
(Biacore) 500
Spurenelemente 5, 6, 461463
Squalen223
SRC-Gen147149
Src homology 2 domains

SH2-Domnen338
SRC(Sarcoma)-promoting Onko
protein 147149, 338
SRC-Tyrosinkinase147149
SRE, Sterol-regulatory element 223
SRP, s. Signal recognition particle
SRP-Rezeptor287
SSB, s. Single-strand binding Protein
Stabilitt von Verbindungen, thermodynamische/kinetische1314
Stammzellen 306, 322, 402, 468471
Standardbedingungen, biochemische 14
Staphylococcus aureus279
Strke
Energiespeicher6263, 210
in Nahrung 448, 464
Iodprobe38
Struktur63
Synthese266268, 273
Verdauung 416, 418
Startcodon118, 119, 120, 124
Statine, Hemmstoffe der Cholesterolsynthese 222, 224
Stearinsure 71, 219
Steran 73
Steroidhormone 73, 348, 349, 352356,
393394
Rezeptoren110, 132, 333
Synthese220, 222223
Sterolsensor-Proteine 223
Stickstoff
Assimilation270272
globaler Kreislauf 272
Transportformen bei Pflanzen 272
Stickstoffbilanz/ -gleichgewicht 355,
449
Stickstoffdnger272
Stickstoffmonoxid NO 226, 341
Sticky ends der DNA 105, 502
Stoffwechsel
Besonderheiten bei Bakterien 277
279
Besonderheiten bei Pflanzen 270
276
exergonische und endergonische
Reaktionen 1314, 156, 165166
u.a.m.
experimentelle Untersuchung 154
156
Fliegleichgewicht 47, 55, 154155,
159, 183, 449
Gehirn159, 162164, 194, 205, 210,
218
katabole und anabole Reaktionen 156, 158
Krankheiten, s. Stoffwechseldefekte
Produktion und Verwendung
von ATP 156158, 162, 179192,
262265
Regulation159160
bersicht156158
Stoffwechseldefekte 2627, 114, 202,
204207, 220, 237, 443, 510
Stoffwechselendprodukte, Ausscheidung 230232, 255, 422430
Stoppcodon118119
Stop-transfer-Sequenz287
Strahlenarten491
Strahlenschutz491
Strangaustausch bei DNA 105106
Streptomycin126
Stressantwort, Stresshormone 340,
348, 351353
Stress-Syndrom (akute-Phase-Reak
tion)433
Stroma der Chloroplasten 286
Strophantin277
Struma, s. Kropfbildung
Strychnin276
Submersgel 485
Substratanaloge, kcat-Inhibitoren 51, 68
Substratkettenphosphorylierung167
Subtilisin5355,
Succinat 51, 171, 181, 218, 274
Succinat-Q-Reduktase(Succinatdehydrogenase)-Komplex II 171, 179,
181, 183
Succinatsemialdehyd367
Succinyl-CoA 171, 190, 218, 232,
243244
Succinyl-CoA-Synthetase 172
Sucrose, s. Saccharose
Sulfonamide 51, 141, 248, 254
Sulfonylharnstoffe438
Supercoiling von DNA 90
negativ und positiv 90, 99
und Replikation 90
Topoisomerase I 91
Topoisomerase II, Gyrase 91
Superoxidanion, Superoxidradikal 183
Superoxiddismutase183
Sstoffe372373
Srezeptoren372
Svedberg-Einheiten S 121
Symbiose 63, 284, 286
Symport/Antiport326
Synapsen364
Ca2+-Konzentration379
chemische364
cholinerge364
elektrische364
spannungsgesteuerte
Ca2+-Kanle364
557
Sachverzeichnis
synaptische Vesikel 365

v-SNARE und t-SNARE 289, 364
Synapsin364
Synaptische Vesikel 365
Synchrotron495
-Synuclein39
Synthase/Synthetase 214
Synthetische Biologie 474
Systembiologie472474
Systemin276
T
T4-Bakteriophagen 98, 144, 146, 507
T4-Ligase503
T-loop der Kinasen 308309
T-Lymphozyten, T-Zellen 313, 339, 361,
401405, 410
Tag-Nacht-Rhythmus (zirkadianer
Rhythmus) 344, 352
Talin318
Target-SNARE 289, 364
TATA-Box110
TATA-Faktor, TATA-Protein 110
Taurin 417, 423
Taurocholat423
Taxol277
Teichoplanin141
Telomerase 101, 311, 313, 471
Seneszenz der Zelle 311, 313, 471,
472
Telomere 101, 313, 471
Temperente (abgeschwchte) Viren 144
Terminationsfaktor125
Terpene73, 75
Terpenoide 276, 277
Tetanie357
Tetanus 278, 279
Testosteron333, 354355
Tetracycline 141, 279
Tetrahydrobiopterin 234, 238
atypische Phenylketonurie 238
Tetrahydrofolat FH4 15, 56, 103, 239
242, 458, 460
als C1-bertrger56, 239242
als Reduktionsmittel 252
Hemmstoffe der Synthese 51, 248,
254, 460
Oxidationsstufen der C1-Einheiten239
Tetrapyrrol182, 244, 262, 343, 424, 456
TGF, Transforming growth factor337,
339
Thalassmie 27, 114
T-Helfer-Zellen401, 403, 411
Thermocycler506
Thermodynamische Grundlagen 1216
Thermogenese 357, 446

braunes Fettgewebe 186
postprandial446
Thermogenin, Uncoupling protein186
Thiamin, Thiamindiphosphat 170171,
456457
Thioesterbindung 15, 165166, 169,
171, 211, 215
Thiolase222
Thiolyse durch CoA 211212, 218
Thioredoxin 252, 272, 397
Thioredoxin-Reduktase253
Threonin 21, 203, 238, 450
Threoninkinasen und -phosphatasen 337, 339, 343
Thrombin 55, 366, 389392, 454455
Thrombozyten 51, 76, 360, 388389,
392
Thrombomodulin392
Thromboseprophylaxe 51, 360, 391
Thromboxane 51, 73, 350360, 388,
449
Thrombozyten 360, 388
Thromboxan A2388
Thrombus 388, 442
Thylakoid 260261, 263, 264
Grana260
Membran261265
Thymidin 8485, 252
Thymidinkinase251
Thymidylat-Synthase 252253
Hemmstoff254
Thymin 82
Thymin-Dimere103
Thymol277
Thyreoglobulin 356, 461
Thyroliberin 350351, 357
Thyronin348, 351352, 356357
Thyrotropin350352, 357
Thyroxin T4, Tetraiodthyronin 356357,
463
Thyroxinrezeptor 149, 357
Tierische Nahrung 454
Tight junction, Zonula occludens317
318, 373
TIM, Translocator of inner membrane294
Tissue factor TF, Gewebethromboplastin,
FIII390
Tissue factor pathway inhibitor392
Tissue plasminogen activator tPA392
Titin377378
T-Loop der Zellzykluskinasen 308309
T-Lymphozyten, s. T-Zellen
7TM-Proteine, GPCR 334336, 367
Tocopherole 276, 397, 454455
Radikalfnger 397, 455
Tocopherol-Radikal455
ST
Tollkirsche, Atropa belladonna276

Toll-like receptors TLR400
TOM, Translocator of outer
membrane294
Topoisomerase I 91, 111
Topoisomerase II, Gyrase 91, 99100,
141
Totenstarre379
Totipotente Zellen 468
Toxine, bakterielle 126, 274276,
278279
Trgerprotein, Carrier protein 80, 211,
324325, 417
Trnenflssigkeit 68, 400, 462
Transaldolase207
Transamidierung 239, 250
Transaminasen, Aminotransferasen,
Mechanismus57, 229
Transaminierung 45, 5556, 228, 230,
232, 238, 456
Transducin370371
Transfektionstechniken 502, 505
Transferrin 400, 462
Transfer-RNA, s. tRNA
trans-Fettsuren, ungesttigte 449
Transformation von Zellen 147148,
311
frdernde Faktoren 148, 311
Transforming growth factor TGF 309,
336, 337, 339
Transgene Organismen 517
Transglutaminase, Faktor XIII 390392
Transketolase 207, 266
Calvin-Zyklus207
Coenzym TDP 170, 456
Transkription108116
Elongation111
gekoppelt mit Translation 507
Genaktivierung als statistisches
Ereignis133
Geschwindigkeit133
Inhibitoren, s. RNA-Polymerase
Initiation, Initiationskomplex 108
111
Processing der hnRNA (Pr-mRNA)111114
Promotor 108111, 128130
Regulation bei Eukaryonten:
s. Transkriptionsfaktoren
Regulation bei Prokaryonten:
Operon115, 128130
Spleien der Pr-mRNA 113115
Termination111
Transkriptionsblase111
Transkriptionskomplex130133
Transkriptionsfaktoren TF 35, 110, 136,
149, 309
558
Sachverzeichnis
allgemeine TF 110
Enhancer/Silencer 110, 128, 130,
132133, 148, 340
genspezifische TF, Genregulator
proteine110, 130133
MYOD133
NF-B 340341, 353
TFIID/TFIIB, TFIIIA 110
Transkriptionsstart, Frequenz 111, 128,
132133
Transkriptomik473475
Translation118126
Ablauf 120
Aminoacyl-tRNA120123
ATP-Verbrauch126
Elongationsfaktoren EF 124125
genetischer Code 118119
Geschwindigkeit126
Hemmstoffe126
Initiationsfaktoren IF, eIF 123124
Regulation 134
Terminationsfaktoren (Release factors
RF)125
bersicht120
Transmembranhelices 79, 80, 334335,
365, 367
Transmembranproteine 79, 318,
332333
Transmissions-Elektronenmikroskopie
TEM498
Transplantation von Zellen 411,
469471
Transport im Blut
Serumalbumin als Vehikel fr unlsliche Verbindungen 353, 424, 432, 439
CO2421422
H+426429
Lipide432, 438443
Nhrstoffe438439
O2419421
Transport, intrazellulr 168, 186188,
190, 211, 216, 284295, 303, 328
Transposasen 104, 142143, 148,
503504
Transposon 105106, 140142, 145,
514
Transversaltubuli, T-Tubuli 379
Transzellulrer Transport 328
Trastuzumab513
TRH, Thyrotropin releasing hormone
350351, 357
Triacylglycerole7071
Abbau219
in Pflanzen 210, 270, 273
Nhrstoff446449
Reserve 433, 435436
Synthese218219

vorkommende Fettsuren 71, 219
Verdauung 416418, 434
Triacylglycerol-Synthase-Komplex
Tricarbonsurezyklus, s. Citratzyklus
Trichochrom235
Triglyceride, s. Triacylglycerole
Triiodthyronin T3356357, 463
Trimethoprim141
Triosekinase206
Triosephosphate 164
Triosephosphat-Isomerase164
Tripelhelix von Kollagen 20, 31, 384
Tritium 3H489
tRNA, transfer RNA 83, 8990
Anticodon 118, 120, 123124
Synthese 109, 111, 115116
tRNA-Gene116
tRNA-Nucleotidyltransferase115
Tropomyosin 300, 377, 379, 381382
Troponin 377, 379, 382
Ca+-Bindung 379, 381, 382
Herzinfarkt379
Trypsin 415
Reaktionsmechanismus5355
Spezifitt416
Trypsininhibitor416
Trypsinogen415416
Tryptophan 21, 24, 83, 233, 396, 450,
487
Derivate 274, 277, 352, 358, 368,
372, 418, 456457
Absorption/Fluoreszenz488
t-SNARE (target-SNARE) 289
Tubocurarin366
Tubulin276, 299300
Tumorchemotherapie, Resistenz
bildung311312
Tumoren135, 312, 471, 473
benigne und maligne 310311
Gefssversorgung (Blut,
Lymphe) 311, 321
Merkmale maligner Tumoren 311
312, 385
Therapieresistenz311
Tumorigenese310311
Tumor necrosis factor TNF-
Tumorsuppressorgene310
Tumorsuppressorprotein
p53148, 313
pRB 148, 311, 313
Tumorviren147148
Tumorvirus-Onkoproteine148149
Turgor der Pflanzenzelle 322
-Turn 31, 33
Two-hybrid-Technik523524
Tyrosin 21, 233

Abbau234235
Tyrosinase234236
Tyrosin-3-Monooxygenase, Tyrosin
hydroxylase234
Tyrosinkinasen 148149, 337, 333
rezeptorgebundene 335, 337338,
342
Tyrosinphosphatasen337, 339,
rezeptorhnliche339
T-Zellen361, 402404, 411
Aktivierung410
cytotoxische T-Zellen 403, 410
klonale Selektion 403404
T-Helferzellen 401, 403, 411
T-Zell-Leukmie147
T-Zell-Rezeptoren401, 410
U
berernhrung 438, 446, 448
berexpression von Proteinen in Bakterien513
bergangszustand 4546, 52
bergangszustandsanaloge52
Ubichinon, Coenzym Q,
Ubiquinone179182, 261
Ubiquitin 226228, 295, 309, 341, 499
Ubiquitinligasen295
UDP, Uridindiphosphat 8485
UDP-Galactose 205
UDP-Galactose-4-Epimerase205
UDP-Glucose UDPG 200, 204205
G015
Glykogensynthese199200
Synthese200
Vorstufe von Lactose 204
Vorstufe von UDP-Glucuronat 202
UDP-Glucose-Pyrophosphorylase202
UDP-Glucuronat 202, 204, 394
UDP-Glucuronosyl-Transferase394
Ultrafiltration, Niere 422423
Ultraazentrifugation, s. Zentrifugation
Ultraviolettstrahlung UV 102104, 234,
395, 454455, 487
Umami-Geschmack 279, 372, 465
Umami-Rezeptoren364, 373
Umflippen von Lipiden in Membranen 76, 291, 293
Umgehungsreaktionen in Gluconeo
genese194195
Uncoating von Vesikeln 289
Uncoupling protein, Thermogenin 186
Ungeradzahlige Fettsuren 213, 456
559
Sachverzeichnis
Ungesttigte Fettsuren 7071, 73, 78,

213, 219, 223, 393, 396, 448, 449, 455
Unipotente Zellen 468
Unterernhrung 446, 448, 451
Upstream/downstream 108
Upstream transcription factors 110
Uracil 82
Uranylacetat498
Urat, Anion der Harnsure 255256257
Uratoxidase, Uricase 255256
Urease46, 231, 237
Uridin U 84
Uridin-Cytidin-Kinase251
Uridindiphosphat-Glucose, s. UDP-
Glucose
Uridyltransferase204205
Urin 422423
Farbstoffe, s. Urochrome
Volumen bei Diabetes insipidus426
Zusammensetzung423
Urobilinogen, Urobilin 424
Urochrome423
Uroporphyrinogen III 244
UTP 8485
UV-Absorption der aromatischen
Aminosuren22
UV-Schden 102, 344, 395
UV-Schutzpigmente 234, 276
UV-VIS Spektrometrie 487
V
Vaccinia- und Variola-Virus 146
Vagabundierende Gene 144
Valin 21, 238, 450
Valinomycin327
Van-der-Waals-Krfte 78, 30, 45, 88
Vascular endothelial growth factor
VEGF 114, 311, 320, 333
Vasopressin, antidiuretisches Hormon 350, 422, 425426
V-CAM, vaskulres CAM319
Veitstanz (Chorea), s. Huntington-Krankheit
Vektoren
Bakteriophagen 105, 504505, 515,
521
Insertgrsse505
Liposomen505
Phagemids504
Plasmide 140, 504
Viren505
Verdauung 414419
Aktivierungskaskade der Proteasen414416
Dickdarm418419
Magen414415
Proteine414416
Resorption der Verdauungs
produkte416418
Schutz vor Selbstverdauung 414
Strke416
Triacylglycerole416417
Verdauungsenzyme414418
Verdauungssekrete
Dnndarm416
Galle416418
Magensaft414415
Pankreassekret415417
Verdrillung von DNA, Supercoiling90
Verholzung273
Verseifbare Lipide 71
Verstrahlung450
Very low densitiy lipoproteins VLDL 434,
439442
Vesikel
clathrin-coated vesicles289
coatomer-coated vesicles289
Membranfusion278, 289, 290, 364
Proteintransport278291
Vesikeltransport284, 287291
Vesikulo-vakuolre Organelle 328
Viagra, Sildenafil 341
Vimentin302
Vinblastin, Vincristin 275
Vinculin318
Viren144147
Gestalt144
Klassifizierung (vereinfacht) 146
lytische und lysogene 145
Retroviren144147
Tumorviren147149
Vektoren505
Zusammensetzung144
Viroide149
Virushlle144
Virus-Onkogen147149
Vitamin A 73, 222, 277, 453454
Sehvorgang370371
Vitamin B1 456457
Vitamin B2 456457
Vitamin B6 5556, 226, 229, 456457
Vitamin B12 241242, 456, 458, 460
Vitamin C 204, 396, 459460, 465
Vitamin D 222, 341, 354, 357, 453455,
461
Synthese453, 455
Vitamin D3, Calciol, Cholecalciferol453455
Vitamin E 454455
Vitamin K 73, 389390, 418, 454456
Antagonisten 390391, 455456
TW
Vitamine452460
empfohlene Tagesdosis WHO452453
fettlsliche453456
Hypervitaminose453
Hypovitaminose, Avitaminose 453
Mangelkrankheiten452460
bersicht (Tabellen) 454, 457459
wasserlsliche456460
VLDL, Very-low density lipoproteins 219,
434435, 439442
Vogelfedern 39, 71
Von Willebrand-Faktor 388
Vorluferproteine 39, 350, 358359
v-SNARE, Vesicular synaptosome-
associated protein receptor278, 289,
290, 364
W
Wachse71
Wachstumsfaktoren309, 336339,
34839
Konzentrationen115
Rezeptoren336339
Wachstumshormon, Somatotropin 349,
350352
Wachstumskontrolle (Zellzyklus) 308
309
Wachstumskontrolle (Tumor
bildung)310313
Waisen-Rezeptoren, Orphan
receptors339
Wrmeproduktion 12, 154, 178, 186,
446
Warzenvirus (Papillomavirus) 148
Waschmittel, bioaktive 44
Wasser 4, 7, 14
Aquaporin 80, 324, 326, 350, 418,
426
Dipoleigenschaften8
Eigenschaften 8
Hydrophober Effekt 810
Passage durch Membranen 7980
Wasserhaushalt422426
Wasserlslichkeit von Verbindungen 9,
393394
Wasserresorption
Darm418
Niere 422, 425426
Wasserspaltungszentrum der Photo
synthese262264
Wasserstoff
H-Bindung69
Wasserstoffionenkonzentration, s. pH
Isotope 155, 159, 489490
560
Sachverzeichnis
Isotopeneffekt490
Peroxid H2O2183, 394396
Watson-Crick-Doppelhelix der
DNA8589
Wechselwirkungen zwischen Biomoleklen612
Protein-Ligand-Wechsel
wirkungen500
Protein-Protein-Wechsel
wirkungen522524
Weizenkeim-Agglutinin 65, 276
Wellenlngen-Bereiche in Spektros
kopie478
Western blot 511, 522
Wiederholungs-Sequenzen,
Repeats142143
Wiederkuermagen, Cellulose
verwertung213
Winterschlaf, knstliche Hiberna
tion 49, 186
Wirkungsdomne von Genregulatorproteinen130131
Wirkungsgrad
ATP-Bilanz des oxidativen Glucose
abbaus188
ATP-Synthese in Mitochondrien 178
ATP-Bilanz der Fettsureoxidation 212
ATP-Bilanz der Glykolyse 168
Wolle63
Wurzelknllchen der Legumi
nosen270271
X
Xanthin 256
Xanthinoxidase 256257, 395, 462
Xanthophyll277
X-Chromosom 135136, 207, 307, 396
Xenobiotica388, 393, 433
Xeroderma pigmentosum 104, 471
Xerophthalmie 453, 454
Xylan, Xylose 322
Y
YAC, Yeast artificial chromosome 505
Y-Chromosom 307, 355
Z
Zahnbein, Dentin 385
Zahnbelag386
Zhne383386
Zahnschmelz385
Zahnzement385
Zahnausfall bei Vitamin C-Mangel 460

Zahnzerfall, Karies 386
Zapfen in der Retina 369371
Z-DNA88
Zelladhsion318319
Zelladhsionsproteine, Cell adhesion
molecules CAM 114, 322, 384
I-CAM, N-CAM, V-CAM 318320
Ig-Superfamilie410
Zellatmung, s. Atmungskette
Zellcortex 298, 322
Zellen
Differenzierung 135137, 468470
Gesamtzahl Lymphozyten
Mensch403
Gesamtzahl Mensch 306
Gesamtzahl Nervenzellen
Mensch364
Kompartimentierung284286
Permanente Zell-Linien 101, 313,
512513
Prokaryonten/Eukaryonten5
Seneszenz, s. Alterungsvorgnge
Zellkern 113, 115116, 285286
Kernhlle294295
Kernlokalisierungssignal 333, 341
Kernporen294295
Zellklon 140, 490
Zellkultur 155, 309, 313, 470
Zellmantel, s. Zellcortex
Zell-Matrix-Verbindungen316
stabile316318
kurzlebige318319
Zelloberflche5
Adhsionsproteine 65, 316321
Oligosaccharide 62, 6468
Rezeptoren334341
Zellorganellen 56, 284286
Dynamik 285286, 303
Evolution 6, 292295
Isolierung480482
Zellproliferation313
Zellteilung306309
Cytoskelett309310
Geschwindigkeit 307, 504
Pflanzen342343
Plasmide 141, 504
Spindelapparat 300, 309310
Telomere101
Zelltod, s. Apoptose und Nekrose
Zellulre Immunantwort 400
MHC II- und T-Zellen 401403
Zellwand
Bakterien6768
Pflanzen321322
Hemmung der bakteriellen Zellwandsynthese 68, 141
Zell-Zell-Erkennung
Heteroglykane67
im Immunsystem 402403
Zell-Zell-Kontaktstellen 301, 316318
Zell-Zell-Verbindungen
in Pflanzen 317318
kurzlebige318319
stabile316318
Zellzyklus306309
Inhibitoren, p16, p21 308
Kontrolle309312
Kontrollpunkte, Checkpoints312
313
Konzept306307
Phasen306307
Proteinkinasen308309
Stammzellen468
Zentrifugation480482
differenzielle480
Dichtegleichgewichtszentrifuga
tion481
Rotortypen481
Sedimentationsgeschwindigkeit481482
Sedimentationsgleichgewichts
zentrifugation500
Ultrazentrifugation 480481, 500
Zonenzentrifugation480
Zinkenzyme 52, 462
Zinkfinger 131, 341, 462
Zirbeldrse, Pineal gland, s. Epiphyse
Zirkadianer Rhythmus, s. Melatonin
Zirkulardichroismus(CD)-Spektros
kopie488489
Z-Membran376380
Zliakie, Glutenunvertrglichkeit 464
Zonula occludens, Tight junction317
318, 373, 435
Zuckerkrankheit, s. Diabetes mellitus
Zufallsmutagenese zur gerichteten
Proteinevolution514
Zusatzstoffe zu Nahrungsmitteln 394,
465
Zweikomponenten-Signalbermittlung343
Zwischenphase im Zellzyklus, Gap
phase306307
Zyankali als Hemmer der Atmungs
kette183
Zykline, s. Cycline
Zyklin-abhngige Kinasen, s. CDK
Zymogen414416
Zytostatika 100, 248, 253, 254, 275, 277,
311312
personalisierte Therapie 468, 473
Gren und Einheiten

SI-Basisgre
SI-Einheit
Symbol
Bemerkungen
1 = 10-10 m = 0,1 nm
Lnge
Meter
Masse
Kilometer
kg
Zeit
Sekunde
Stromstrke
Ampre
Temperatur
Kelvin
Lichtstrke
Candela
cd
Mol
mol
Temp. in C = Temp. in K 273,2
Abgeleitete Gre
Einheit
Symbol
Ableitung
Frequenz
Hertz
Hz
Volumen
Liter
10-3 m3
Kraft
Newton
Druck
Pascal
Pa
Energie, Arbeit,
Wrmemenge
Joule
Leistung
Watt
Elektrische Ladung
Coulomb
Spannung
Volt
Konzentration
Molaritt
Molekulare Masse
Dalton
Da
Mollmasse
-2
1 Kalorie (cal) = 4,1868 J

1 Elektronvolt (eV)
= 1,602 1019 J
1
1
1
24
Relative Moleklmasse
Mr
Katalytische Aktivitt
Einheit
Sedimentations-
Svedberg
10
Radioaktivitt
Becquerel
Bq
s1
Symbol
1015
Peta-
1012
Tera-
109
Giga-
106
Mega-
103
Kilo-
103
Milli-
106
Mikro-
109
Nano-
1012
Pico-
1015
Femto-
1018
Atto-
1021
Zepto-
1 Bar = 105 Pa
= 750 mm Hg
1 mm Hg = 133,3 Pa
Reaktionsgeschwindigkeit
Dezimale
Vielfache und Teile
Bemerkungen
-1
dimensionslos
1
1
13
s
1 Curie (Ci) = 3,7 1010 Bq
Wichtige Gleichungen
Griechisches Alphabet
Michaelis-Menten-Gleichung
v = Vmax[S]/(Km + [S])
Alpha
Ny
Beta
Xi
pH = pKa + log [A]/[HA]

nderung der freien Energie unter
Nichtstandardbedingungen
G' = G' + RT ln[C][D]/[A][B]
nderung der freien Energie
und Standard-Redoxpotential
G' = nFE'
Gamma
Omikron
Delta
Pi
Rho
Epsilon
Zeta
Sigma
Eta
Tau
Ypsilon
Theta
Iota
Phi
Kappa
Chi
Lambda
Psi
My
Omega
Bindungslngen
Elektrochemisches Gesamtpotential
(Proton motive force)
p = Em 2,3 RT/F pH
Bindung
CH
Lnge ()
R2CH2
1,07
1,10
RCH3
CC
pKa-Werte
Aromatisch
Sure
pKa (bei 25 C)
Pyrophosphorsure
pK1
0,85
pK2
1,5
pK3
5,8
Phosphorsure
Citronensure
pfelsure (Anion: Malat)
pK4
8,2
pK1
2,1
pK2
7,2
pK3
12,7
pK1
3,1
pK2
4,8
pK3
6,4
pK1
3,4
pK2
5,1
Acetessigsure
1,40
C=C
Ethylen
1,33
CC
Acetylen
1,20
CN
RNH2
1,47
CO
Alkohol
1,43
C=O
CS
Ester
1,36
Aldehyd
1,22
Amid
1,24
R 2S
1,82
NH
Amid
0,99
OH
Alkohol
0,97
OO
O2
1,21
PO
Ester
1,56
SH
Thiol
1,33
SS
2,05
3,6
Milchsure
Bernsteinsure (Salz: Succinat)
1,54
3,9
pK1
4,2
pK2
5,6
Essigsure
4,8
Tris(hydroxylmethyl)aminomethan
8,1
Ammoniumion
9,3
Trimethylammoniumion
9,8
Wasser ([H+] [OH] = 1014)
15,7
Werte physikalischer Konstanten

Avogadro-Zahl N
6,022 1023 mol1
Boltzmann-Konstante k
1,381 1023 J K1
Faraday-Konstante F
9,649 104 C mol1

= 96,49 kJ mol1 V1
Gaskonstante R
8,315 J mol1 K1
Lichtgeschwindigkeit
im Vakuum c
2,998 1010 cm s1
Planck-Konstante h
6,626 1034 J s

Philipp Christen, Rolf Jaussi, Roger Benoit Auth. Biochemie Und Molekularbiologie Eine Einführung in 40 Lerneinheiten PDF

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Biochemie und Molekularbiologie

Rolf Jaussi, Roger Benoit

Abfassen der Unterkapitel zur magnetischen Kernresonanz, Rntgenkristallographie und

Bacterial artificial chromosome

Yeast artificial chromosome

Lffler, G. und Petrides, P.E. (2003) Biochemie & Pathobiochemie, 7.Auflage,

ibd. S.74, Abb.3.22

ibd. S.199, Abb.6.27b

ibd. S.1033, Abb.33.1

ibd. S.1037, Abb.33.5

Creighton, T.E. (1993) Proteins, 2nded., Freeman, New York,

Hgele, K. and Kalisch, W.-E. (1980) Chromosoma79, 7583, Springer-Verlag,

Die Molekle des Lebens

Kovalente Struktur der Proteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Raumstruktur der Proteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Polysaccharide und Oligosaccharide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Lipide und biologische Membranen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Replikation, Reparatur und Rekombination der DNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 95

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Transkription: Biosynthese der RNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Translation: bersetzung des Gens ins Phn. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 117

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Initiation, Elongation, Termination . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 123

Regulation der Genexpression . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 127

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Plasmide, Viren, Viroide und Prionen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 139

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Grundstzliches zum Stoffwechsel. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 153

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Glykolyse und Citratzyklus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 161

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

ATP-Synthese in Mitochondrien. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 177

Gluconeogenese, Glykogen, Disaccharide und Pentosephosphatweg . . . . . . . . 193

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Stoffwechsel der Fettsuren und Lipide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 209

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Stoffwechsel der Proteine und Aminosuren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 225

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Stoffwechsel der Purin- und Pyrimidinnucleotide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 247

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Besonderheiten des Stoffwechsels von Pflanzen und Bakterien . . . . . . . . . . . . . . . 269

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Zellkompartimente und Proteinsortierung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 283

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Cytoskelett und molekulare Motoren. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 297

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Zellzyklus; Kontrolle von Zellwachstum und Zelltod. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 305

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Zelladhsion, Zellkontakte und extrazellulre Matrix . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 315

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Stoffaustausch durch Membranen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 323

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Symport- und Antiport-Systeme. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 326

Rezeptoren und Signaltransduktion. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 331

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit

Hormone und Mediatoren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 347

Ph. Christen, R. Jaussi, R. Benoit