EL AGUA, pH Y SOLUCIONES AMORTIGUADORAS.

JESUS ROMO R. M.Sc

Estructura del agua.
El agua es el compuesto ms abundante en la biosfera y en los seres vivos, por ello su estudio es muy
importante en Bioqumica. El agua est entre - 60-90% de la materia viva. Su abundancia depende de
la especie, la edad (menor proporcin en individuos ms viejos) y la actividad fisiolgica del tejido
(mayor porcentaje los que tiene mayor actividad como tejido nervioso o muscular). Aparece en el
interior de las clulas, en el lquido tisular y en los lquidos circulantes.
Para ser un compuesto de peso molecular bajo, sus propiedades fisicoqumicas constituyen un conjunto
nico. El agua es una molcula dipolar: los electrones que comparten el O y el H estn desplazados
hacia el O por su mayor electronegatividad por lo que esa zona de la molcula tiene una ligera carga
negativa y la de los H es ligeramente positiva. Cuando dos molculas de agua se aproximan, la zona
positiva de una molcula y la negativa de otra se atraen. Estas interacciones intermoleculares se
conocen como puentes de hidrgeno. La polaridad de las molculas de agua, provoca la asociacin
entre ellas. La asociacin entre molculas de agua explica muchas de sus propiedades.

Debido a la formacin de puentes de hidrgeno, el agua presenta elevados valores de calor de

vaporizacin (40.7 a 273 K) y de capacidad calorfica (1000 kcal/m C), de calor especfico ( 1
kcal/kg.C), elevada conductividad trmica en comparacin con otros lquidos (5,67 mW/ cm.C),
mxima densidad a 4C (1g/L), elevada tensin superficial (2,26 x 10-2 N/m a 25C), bajo grado de
disociacin (1 x 10-14 M), alta constante dielctrica (1,6 nm a una atmosfera).

Los puentes de hidrogeno son ms dbiles que los enlaces covalentes. Los puentes de hidrogeno en el
agua lquida tienen una energa de enlace (la energa requerida para romper un enlace) de solo unos 20
KJ/mol en comparacin con los 460 KJ/mol del enlace covalente O H. A pesar de su fuerza de enlace
dbil, los puentes de hidrgeno se constituyen en las ms importantes interacciones no covalentes para
hacer que las propiedades fisicoqumicas del agua sean tan especiales.
En cualquier momento en el agua lquida a temperatura ambiente, cada molcula de agua puede formar
puentes de hidrogeno con otras 3,4 molculas de agua. Las molculas de agua estn en movimiento en
el estado lquido por lo que los puentes de hidrogeno se rompen y forman de manera constante y
rpida. En el hielo, cada molcula de agua esta fija en el espacio y forma puentes de hidrogeno con
otras 4 molculas de agua configurando una estructura reticular regular.

Sin embargo, estudios recientes parecen apuntar a que el nmero medio de puentes de hidrgeno es
algo menor; un 80% de las molculas estaran unidas por slo dos puentes de hidrgeno fuertes,
mientras que el 20% restante estaran unidas hasta por 4 puentes de hidrgeno fuertes en disposicin
tetradrica. El aumento de la densidad del hielo al fundirse se debe a que los enlaces de hidrgeno
tienden a separar ligeramente a las molculas de agua respecto a su distancia de Van del Waals. En

otras palabras, las molculas de agua estn ms separadas, en promedio, cuando estn unidas por cuatro
puentes de hidrgeno que cuando el nmero de puentes de hidrgeno por molcula es menor.

Por ser una sustancia polar, las molculas del agua pueden formar puentes de hidrgeno tambin con
las molculas orgnicas presentes en la clula viva. De hecho se constituye en una interaccin de suma
importancia para mantener la estructura de estas molculas. De igual forma, las molculas orgnicas
forman puentes de hidrgeno entre ellas, constituyndose esto en la base del funcionamiento de muchas
biomolculas, por ejemplo el apareamiento entre bases nitrogenadas en el ADN, base del cdigo de la
vida.

El Agua como solvente:

El agua es el solvente de la materia viva. Las propiedades del agua como solvente se basan en su
capacidad para interactuar con muchos tipos de sustancias. El agua, debido a su elevada constante
dielctrica, es el mejor disolvente para todas aquellas molculas polares. Sin embargo, molculas
apolares no se disuelven en el agua. Esta propiedad, tal vez la ms importante para la vida, se debe
tambin, a su capacidad para formar puentes de hidrgeno con otras sustancias que pueden presentar
grupos polares o con carga inica (alcoholes, azcares con grupos R-OH , aminocidos y protenas con
grupos que presentan cargas + y - , lo que da lugar a disoluciones moleculares Tambin las molculas
de agua pueden disolver a sustancias salinas que se disocian formando disoluciones inicas.

El agua con sustancia apolares no forma interacciones, pero es la base para que se formen las
interacciones hidrofbicas entre molculas apolares que estn en el medio acuoso De igual forma, las
molculas anfiptica (molculas que tienen una parte polar y otra apolar), forman diversas estructuras
en el medio acuoso, como las micelas, los liposomas y los clusters. Las interacciones hidrofbicas en
las molculas de fosfolpidos (anfipticas), son la base para la formacin de las membranas celulares.

IMPORTANCIA DEL AGUA EN LOS SERES VIVOS.

Las propiedades del agua permiten aprovechar esta molcula para muchas funciones de los seres vivos.
Estas funciones son las siguientes:

 Disolvente polar universal: el agua, debido a su elevada constante dielctrica, es el mejor disolvente
para todas aquellas molculas polares. Sin embargo, molculas apolares no se disuelven en el agua.
Lugar donde se realizan reacciones qumicas: debido a ser un buen disolvente, por su elevada
constante dielctrica, y debido a su bajo grado de ionizacin.
Funcin estructural: por su elevada cohesin molecular, el agua confiere estructura, volumen y
resistencia.
Funcin de transporte: por ser un buen disolvente, debido a su elevada constante dielctrica, y por
poder ascender por las paredes de un capilar, gracias a la elevada cohesin entre sus molculas, los
seres vivos utilizan el agua como medio de transporte por su interior.
Funcin amortiguadora: debido a su elevada cohesin molecular, el agua sirve como lubricante
entre estructuras que friccionan y evita el rozamiento.
Funcin termorreguladora: al tener un alto calor especfico y un alto calor de vaporizacin el agua
es un material idneo para mantener constante la temperatura, absorbiendo el exceso de calor o
cediendo energa si es necesario.
-Funcin termoaislante: El agua por tener una densidad menor cunado forma hielo, flota en el agua
lquida. Esta propiedad hace que en las zonas polares y en las estaciones de invierno forme un
casquete de hielo en las fuentes de agua, haciendo que la temperatura por debajo de este casquete se
mantenga por encima de la temperatura de fusin, conservando su estado lquido y permitiendo de
este modo que la vida contine por debajo del casquete de hielo. Esto es de suma importancia para
mantener la vida en la biosfera.
Como ya se dijo anteriormente los procesos de la vida requieren que una gran variedad de iones y
molculas se muevan en proximidad, es decir, que sean solubles en un medio comn. El agua funciona
como disolvente universal en los medios intracelular y extracelular gracias a su destacada capacidad
como disolvente.
Por lo tanto esta capacidad disolvente es la responsable de dos funciones importantes para los seres
vivos: es el medio en que transcurren las mayoras de las reacciones del metabolismo, y el aporte de
nutrientes y la eliminacin de desechos metablicos se realizan a travs de sistemas de transporte
acuosos. No existe proceso vital alguno que pueda concebirse independientemente de la
participacin directa o indirecta del agua.
PRODUCTO IONICO DEL AGUA Y pH.
El agua aunque no es un compuesto inico, presenta una notable polaridad y por ello se disocia en
iones, aunque en muy pequea proporcin. En agua pura, la presencia de iones H3O+ y OH- que
proceden nicamente de su disociacin inica , que es el equilibrio acido-base ms sencillo.
H2O + H2O
Que resumidamente se expresa como:

H3O+ + OH-

H2O

H+ + OH-

Por la estequiometria de la reaccin de disociacin, se tiene que [H3O+] = [OH-]. Adems, esta
reaccin pone de manifiesto que el agua puede actuar como una base ganando protones para
convertirse en H3O+ y, simultneamente puede actuar como un cido cediendo protones a otra
molcula de agua para convertirse en OH- es decir, el agua, como se ha comentado anteriormente es
una sustancia Anfolita (Es decir acta como cido y como base).
La constante de este equilibrio:

Kc [H2O] = [H+][OH- ] que es el producto inico del agua y se representa por Kw, a 25C

Kw = 1x 10-14
Por tanto en el agua pura

Kw = = [H+][OH- ] = 1x 10-14
Por lo que:

[H+] = [OH- ] = 10-7

Sorensen introdujo en 1909 el concepto de pH con el objeto de simplificar el manejo de
concentraciones de protones. As, defini el pH como el logaritmo negativo de la concentracin de
protones:
pH = -log [H+]
Paralelamente defini el concepto de pOH como el logaritmo negativo de la concentracin de
hidroxilos:
pOH = -log [OH-]
Para calificar las disoluciones atendiendo a esta relacin se emplean los trminos:
a) Neutra: [H+] = [OH-] = 10-7: pH = pOH = 7
b) Acida: [H+]> [OH-]: pH < 7. pOH > 7.
c) Bsica o alcalina: [OH-] > [H+], [H+] < 10-7: pH > 7, pOH < 7.

Si se quiere conocer de forma aproximada el pH de una disolucin, se utiliza el indicador universal,

que es una mezcla en volmenes iguales de rojo de metilo, timolftaleina, fenolftalena, -nalftolftaleina
y azul de bromotinol, que da un color rojo a pH = 4 pasando a violeta para pH = 11.

El pH aproximado de algunas disoluciones de sustancias comunes:

FUERZA RELATIVA DE ACIDOS Y BASES.

Desde un punto de vista cualitativo, la teora electrnica de Arrhenius nos dice que un cido o una base
son fuertes cuando estn muy disociados en disolucin acuosa y, dbiles, cuando estn poco
disociados. Los cidos fuertes, al presentar una disociacin completa, muestran una conductividad
elctrica elevada que, adems, presenta un comportamiento proporcional con la concentracin del
cido. Los cidos dbiles se encuentran poco disociados y por tanto, sus disoluciones presentan
conductividades elctricas bajas.
Segn Brnsted-Lowry, un cido es un compuesto que cede protones (H+) y una base es un compuesto
que acepta protones. Por tanto un cido ser fuerte si tiene elevada tendencia a ceder protones y una
base ser fuerte si tiene elevada tendencia a captar protones. Considerando un par cido cualquiera:
Acido
Base + Protn, si el cido es fuerte, existir elevada tendencia a ceder protones, por lo que su

base conjugada ser dbil porque tendr poca tendencia a captar H+ y transformarse en su cido
conjugado.
Dado que el agua es el medio en que tiene lugar la mayor parte de las reacciones cido-base y es,
adems una sustancia que se comporta como base dbil frente a muchos cidos o como cido dbil
frente a muchas bases, se elige como referencia para expresar la fortaleza relativa de cidos y bases.
As, para un cido genrico AH en disolucin acuosa, le corresponde una constante de equilibrio:
AH + H2O

A- + H3O+

Como la concentracin de agua en disoluciones diluidas es prcticamente constante e igual a la del

agua pura:
[H2O] = 1000/18/1 = 55.55 M

[H3O+] se escribe [H+] por comodidad. Por tanto, la expresin de la constante de acidez,
Ka es:
AH

A- + H+

Cuanto mayor sea Ka, mayor es la [A-] y [H+] por lo que mayor ser la fuerza del cido y menor la de
su base conjugada. Anlogamente, para una base cualquiera B, se verifica que:
B + H2O

BH+ + OH

Cuanto mayor sea Kb ms desplazado estar el equilibrio hacia la derecha y, por tanto, mayor ser la
fuerza de la base o su capacidad para captar protones y convertirse en BH+.
Es importante destacar que existe una relacin inversa entre la constante de acidez de un cido AH (Ka)
y la constante de basicidad (Kb) de su base conjugada, A-:
Kw = Ka x Kb

Ejemplos de:
cidos Fuertes: HClO4, HNO3, HCl, etc.
cidos dbiles: HCN, H3BO3, etc.
Bases fuertes: NaOH, Ca(OH)2, etc.
Bases dbiles: NH3, H2N-NH2
La descripcin del grado de acidez en trminos de pH tiene la enorme ventaja de evitar operaciones con
potencias decimales de exponentes negativos. Dado que las constantes de equilibrio vienen dadas, por
lo general, como potencias de diez, es posible extender la idea recogida en la definicin de pH al caso
de los valores de pK. As, se define el pK, para una reaccin en equilibrio, en la forma:
pK = -logK
Lo que constituye una forma de expresar su valor. En el equilibrio cido-base, la constante de acidez,
por ejemplo, del cido actico a 25C es Ka = 1,8x10-5 y su pKa se calcula, de acuerdo con la definicin,
como pKa = -log (1,8x10-5) = 4,8.
Los cidos capaces de donar ms de un protn en reacciones cido-base se denominan poliprticos.
Dichos cidos presentan tantas etapas de disociacin como protones pueden donar. Presentan la
peculiaridad de que las especies intermedias de la ionizacin so siempre sustancias anfiprticas.
Ejemplos de cidos dipricos son el cido sulfrico (H2SO4), cido sulfhrico (H2S) y el cido
carbnico (H2CO3). Ejemplos de cidos tripricos son el cido fosfrico (H3PO4) y el cido ctrico
(C6H8O7). Para un cido poliprtico inorgnico tpico, K1 es mucho mayor que K2 y que es mucho
mayor que K3, etc., de forma que las constantes de ionizacin sucesivas disminuyen en un factor de,
aproximadamente, 104 a 106. Esto significa que cada paso en la ionizacin de un cido poliprtico
tiene lugar en una extensin mucho menor que el paso previo.

MEDIDA DEL pH

El pH-metro pH-C es un instrumento diseado para medir, controlar y regular el valor de pH. El
instrumental necesario para las medidas potenciomtricas comprende un electrodo de referencia, un
electrodo indicador y un dispositivo de medida de potencial. Desde hace muchos aos, el mtodo ms
adecuado para la medida del pH consiste en medir el potencial que se desarrolla a travs de una
membrana de vidrio que separa dos soluciones con diferente concentracin de ion hidrgeno.
Los electrodos de membrana se clasifican en base a la composicin de dicha membrana. En Electrodos
de membrana cristalina y Electrodos de membrana NO cristalina. Los electrodos de membrana
cristalina, pueden ser: 1. Cristal simple (Ejemplo: LaF3 para determinar de F-) y 2. Cristal
policristalino o mezcla (Ejemplo: Ag2S para determinar S2-o Ag+).
El Electrodo de Vidrio para la Medida del pH
La Figura 1 muestra una celda para la medida del pH. Consiste en un par de electrodos, uno de
plata/cloruro de plata y otro de vidrio sumergidos en la solucin cuyo pH se desea medir. Obsrvese

que la celda contiene dos electrodos de referencia, cada uno con un potencial constante e independiente
del pH; uno de estos electrodos de referencia es el electrodo interno de plata/cloruro de plata, que es un
componente del electrodo de vidrio pero que no es sensible al pH. Es la delgada membrana en el
extremo del electrodo, la que responde a los cambios de pH.

Actualmente se utiliza un solo electrodo que condensa los dos electrodos anteriores y que se denomina
electrodo combinado de vidrio, tal como se indica en la figura 2.

En el caso de los electrodos combinados, se unen fsicamente el electrodo de vidrio y uno de referencia
externo para mayor comodidad en un mismo cuerpo fsico. Por fuera del tubo interno, se encuentra otro
tubo, a modo de camisa, relleno con una disolucin acuosa saturada en KCl, En el tubo exterior se tiene
un sistema correspondiente a un electrodo referencia sensible a los iones Cl- como el de plata/cloruro
de plata, con una concentracin de iones Cl- fija dada por la saturacin de la disolucin de KCl. Por su
lado, el electrodo de referencia usual en el tubo interno viene dado por la concentracin fija de HCl.
Los tubos externo e interno se encuentran fsicamente separados, pero inicamente conectados, por
medio del flujo de iones a travs de una junta de cermica o de epoxi.
El esquema de la celda es el siguiente:

SOLUCINES AMORTIGUADORAS:
Soluciones amortiguadoras son aquellas soluciones cuya concentracin de hidrogeniones vara muy
poco al aadirles cidos o bases fuertes. El objeto de su empleo, tanto en tcnicas de laboratorio como
en la finalidad funcional del plasma, es precisamente impedir o amortiguar las variaciones de pH y, por
eso, suele decirse que sirven para mantener constante el pH. Los ms sencillos estn formados por
mezclas binarias de un cido dbil y una sal del mismo cido con base fuerte, por ejemplo, una mezcla
de cido actico y acetato de sodio; o bien una base dbil y la sal de esta base con un cido fuerte, por
ejemplo, amonaco y cloruro de amonio.
La aplicacin ms importante de esta teora de los amortiguadores es, para los fisilogos, el estudio de
la regulacin del equilibrio cido-base. Para dar una idea de la importancia de los amortiguadores de la
sangre, recordemos que la concentracin de hidrogeniones del agua pura experimenta una elevacin
inmediata cuando se aade una mnima cantidad de un cido cualquiera, y crece paralelamente a la
cantidad de cido aadido. No ocurre as en la sangre, que admite cantidades del mismo cido,
notablemente mayores, sin que la concentracin de hidrogeniones aumente de una manera apreciable.
Las soluciones amortiguadoras son capaces de absorber los H+ o los OH- en exceso, puesto que hacen
variar el equilibrio hacia el lado donde se pueda formar ms cido o base conjugada. Pueden resistir
aumento de cidos o bases en un rango que va entre una unidad por encima o por debajo de su pKa
(pKa 1).

Ecuacin de Henderson-Hasselbach
La Ecuacin de Henderson-Hasselbach permite calcular el pH de una mezcla amortiguadora
conociendo su composicin. En su deduccin, para un amortiguador compuesto de un cido dbil y una
sal de su base conjugada, se considera que la concentracin de cido libre es aproximadamente igual a
la del cido total, y la concentracin del in base conjugada coincide con la concentracin de la sal.
Con ello, La Ecuacin de Henderson-Hasselbach expresa que el pH de una solucin amortiguadora se
calcula sumando al pK del cido, el logaritmo de la relacin concentracin de sal /concentracin de
cido, es decir:
HA (aq) + H2O (l)

pH = pK a + log

[A ]eq
[HA]eq

H3O+ (aq) + A- (aq)

pH = pK a + log

[base]eq
[cido]eq

De acuerdo con todo lo anterior, el pKa de un cido dbil se puede definir como el pH del sistema
amortiguador que resultara al aadirle una cantidad equimolar (o sea igual cantidad de moles de cido
y de base) de una sal fuerte del mismo cido, o bien el pH alcanzado despus de neutralizar con base
fuerte, exactamente, la mitad de cido. Para el cido actico, una solucin uno molar de cido puro
tiene un pH de 2.38, mientras que un sistema amortiguador con cantidades equimolares de cido y sal
tiene un pH igual al pK del cido actico, es decir, 4.76.

Los amortiguadores fisiolgicos rara vez tienen un valor de pK que coincide con el pH que van a
amortiguar. Normalmente sus pK estn unas dcimas ms abajo del pH fisiolgico. Esto se traduce en

una mayor eficacia de los sistemas para amortiguar cidos que para amortiguar bases. De todo lo
expuesto anteriormente, se deduce que puesto que el pH celular es prximo a siete, la eficacia
amortiguadora mxima corresponde a los sistemas cuyo valor de pK est comprendido entre seis y
ocho.
En los organismos vivos existen varios sistemas de amortiguamiento como las protenas, la
hemoglobina, el par cido carbnico/bicarbonato, el sistema fosfato, los cuales regulan el pH de los
fluidos, haciendo que la estructura de las biomolculas se mantengan estables para su bioactividad.
BIBLIOGRAFIA:
NELSON, D Y COX M. Lehninger. PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY. Fourth Edition. W H
Freeman & Co, Editors. 2004.
VOET. D. Fundamentos de bioqumica. 2 edicin. Ed. Panamericana. Buenos Aires. 2008.