UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NAYARIT

UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICO BIOLOGICAS Y FARMACEUTICAS

Reporte de laboratorio
Laboratorio de Hematologa
Nombre de la prctica: Determinacin de Hemoglobina
Docente: Aurora Jaime Estrada
Alumno: Anthony Alejandro Castro Pacheco
Equipo 1
7 A

OBJETIVOS

Analizar una muestra sangunea y determinar las cifras de hemoglobina

presentes en ella.
Aprender el manejo adecuado del material, reactivo e instrumentos
utilizados en esta prctica.
Fundamento

La hemoglobina es una protena conjugada que sirve para el transporte de

oxgeno y dixido de carbono. La masa total de eritrocitos de un adulto contiene
unos 600gr. De hemoglobina capaces de transportar 800ml de oxgeno
La prueba consiste en hacer reaccionar la sangre con un reactivo que contiene cianuro y
ferrocianuro potsico (reactivo de Drabkins), que oxida la hemoglobina a metahemoglobina la cual
a su vez pasa a cianometahemoglobina. La intensidad de color de este compuesto se mide
fotocolorimtricamente. Los resultados se llevan a una curva estndar realizada con soluciones de
cianometahemoglobina comercial, de donde se extrapolan las concentraciones de hemoglobina de
las muestras problema.

TECNICA DE LABORATORIO (DIAGRAMA DE FLUJO)

RESULTADOS

Despus de haber extrado sangre, mezclado esa sangre con la solucin de

Drabkin y reposar 10 minutos, se realizo la lectura en el espectrofotmetro a 540
nm de longitud de onda, donde cada quien lleno su celda con la solucin propia
correspondiente. En esta prctica la profesora realizo el proceso de colocar la
solucin blanco y las lecturas de cada uno para evitar la desconfiguracin del
aparato o el mal uso de este.
El factor fue brindado por la profesora, ya que en prcticas pasadas su valor haba
sido obtenido, esto para evitar errores y de esa manera homogenizar ese
resultado, el cual fue de 35.
El resultado para mi muestra sangunea fue de 0.368, lo cual al multiplicarla por el
factor, en este caso 35, me dio una concentracin de 12.88 mg/dL. Lo cual indica
que para los parmetro de referencia usados en el manual, mi concentracin es
baja; pero recordemos que este valor de referencia cambia para cada zona
geogrfica, para Tepic el rango esta de 12 16 mg/dL, lo que indica que mis
valores de hemoglobina son normales.

Hacer dibujo

CONCLUSIONES
Sera interesante saber cmo es que determinan el valor de referencia de
hemoglobina para cada regin o sector de estudio, ya que los valores de Tepic
sern distintos que para habitantes de Toluca, porque la edad, sexo y regin
geogrfica influyen.
Como en la practica pasada, lo mas complicado fue la toma de muestra, porque el
manejo de la pipeta de Sahli no fue difcil, solo era el temor de quebrarla lo que
hace que sea ms lento el proceso y medir la absorbancia es algo que desde
laboratorios pasados hemos estado haciendo.
Un anlisis hemoglobina puede realizarse como parte de un examen de rutina o durante una
enfermedad, y suele formar parte del recuento hemtico completo. Se utiliza principalmente
para detectar varios tipos de anemia, una enfermedad comn que aparece cuando la cantidad de
glbulos rojos de una persona es demasiado baja.

DISCUSION
Una molcula de hemoglobina consta de 2 pares de cadenas polipepticas (unin
de aminocidos) (globina) y 4 grupos proteicos HEM que contienen cada uno un
tomo de fe en estado ferroso. Cada punto HEM se localiza en una zona
determinada de una de las cadenas de polipepticos. Localizando cerca la
superficie de la molcula, el HEM se combina de forma reversible con una
molcula de oxigeno y dixido de carbono. Este grupo HEM es el responsable del
del color rojo de la hemoglobina (hb) 1

Despus de haber consultado varias bibliografas para comparar resultados, la

metodologa de Cegarra2 nos menciona que adems de la tcnica utilizada en nuestra
practica, existen ms tcnicas para determinar la hemoglobina, como la Co-oximetra, en
la cual la hemoglobina y sus fracciones presentan picos de absorbancia a longitudes de
onda especficos, y siguen la ley de Lambert Beer (fig. 1). Cegarra2 no menciona los
reactivos utilizados, como en nuestra tecnica que se utilizan reactivos como la solucin de
drabkin; para la lectura, el mtodo de Cegarra2 utiliza un co-oximetro, en donde la Hb es
liberada del interior de los hemates por agentes fsicos o qumicos integrados en el
aparato, la abosrbancia de esa Hb a distintas longitudes de onda, y a partir de calcular los
resultados obtenidos por medio de un software, se obtiene el valor de la concentracin de
cada una de las fracciones de la Hb.
Dentro de las ventajas que ofrece la co-oximetra estn la rapidez, fcil manejo,
precisar un pequeo volume de muestra, permitir el estudio de los
gases en sangre, y no se verse afectada por la presencia de
leucocitosis o hiperbilirrubinemia. Comparado con la cianometahemoglobina
que
ofrece una buena exactitud ya que utiliza una solucin
estndar
internacional que est validada por el ICSH y a excepcin de la
sulfohemoglobina, el resto de las fracciones de la hemoglobina pueden
ser determinadas. Por lo cual se concluye que por cuestiones financieras y
capacitacin del personal para el manejo de un co-oximetro, la prueba de
cianometahemoglobina es ms viable para cuestiones de aprendizaje y
monetarias.
Cabe destacar que en la solucin de Drabkin se utiliza cianuro de potasio, el cual es
toxico, por lo que Cegarra2 utiliza como forma alternativa a este la azida sdica
y el lauril
sulfato sdico
que convierten la hemoglobina en azidahemoglobina y en sulfato de
hemoglobina respectivamente, los cuales son menos txicos.

Bibliografas:
1.http://www.csicsif.es/andalucia/modules/mod_ense/revista/pdf/Numero_3/Valo
racion%20de%20la%20hemoglobina_rosarioalorscorrederas.pdf
2.- Cegarra V. (2012) Comparacin de 3 metodos de medicin de hemoglobina
en ciruga cardiaca. Barcelona, Espaa: Independiente.

3.- http://www.linear.es/ficheros/archivos/46_1134015C.pdf